RU2003126290A - Бактерия семейства enterobacteriaceae-продуцент l-гистидина и способ получения l-гистидина - Google Patents

Claims (13)

1. Бактерия - продуцент L-гистидина, принадлежащая к семейству Enterobacteriaceae, обладающая повышенной активностью любого из ферментов, участвующих в превращении 5’-фосфорибозил-4-карбоксамид-5-аминоимидазола (AICAR) в инозин-5’-монофосфат (IMP).

2. Бактерия по п.1, отличающаяся тем, что указанная бактерия обладает повышенной активностью AICAR трансформилазы - IMP циклогидролазы.

3. Бактерия по п.2, отличающаяся тем, что указанная бактерия принадлежит к роду Escherichia.

4. Бактерия по п.2, отличающаяся тем, что активность AICAR трансформилазы - IMP циклогидролазы, повышена путем увеличения экспрессии гена, кодирующего AICAR трансформилазу - IMP циклогидролазу.

5. Бактерия по п.4, отличающаяся тем, что активность AICAR трансформилазы - IMP циклогидролазы увеличена путем увеличения количества копий гена, кодирующего AICAR трансформилазу - IMP циклогидролазу, или путем изменения последовательности для регуляции экспрессии указанного гена таким образом, что экспрессия указанного гена повышается.

6. Бактерия по п.5, отличающаяся тем, что количество копий указанного гена увеличено путем трансформации указанная бактерии многокопийным вектором, содержащим ген, кодирующий AICAR трансформилазу - IMP циклогидролазу.

7. Бактерия по п.5, отличающаяся тем, что количество копий указанного гена увеличено путем интеграции дополнительных копий гена, кодирующего AICAR трансформилазу - IMP циклогидролазу, в хромосому указанной бактерии.

8. Бактерия по любому из пп.2-7, отличающаяся тем, что ген, кодирующий AICAR трансформилазу - IMP циклогидролазу, получен из бактерии, принадлежащей роду Escherichia.

9. Бактерия по п.8, отличающаяся тем, что ген, кодирующий AICAR трансформилазу - IMP циклогидролазу, кодирует следующий белок (А) или (Б):

(A) белок, который представлен аминокислотной последовательностью, приведенной в списке последовательностей под номером SEQ ID NO:2;

(B) белок, который представлен аминокислотной последовательностью, включающей делеции, замены, вставки или добавление одной или нескольких аминокислот в аминокислотную последовательность, приведенную в списке последовательностей под номером SEQ ID NО:2, и который обладает активностью AICAR трансформилазы - IMP циклогидролазы.

10. Бактерия по п.8, отличающаяся тем, что ген, кодирующий AICAR трансформилазу - IMP циклогидролазу, представлен следующей последовательностью ДНК (а) или (б):

(а) ДНК, состоящая из последовательности нуклеотидов с 1 по 1590 в списке последовательностей под номером SEQ ID NO:1; или

(б) ДНК, которая гибридизуется с нуклеотидной последовательностью 1-1590 в последовательности SEQ ID NО:1 или пробой, которая может быть приготовлена из указанной нуклеотидной последовательности, в жестких условиях, и кодирует белок, обладающий активностью AICAR трансформилазы - IMP циклогидролазы,

11. Бактерия по п.10, отличающаяся тем, что жесткими условиями являются условия, при которых отмывка производится при 60°С, а концентрация солей соответствует 1×SSC и 0,1% SDS, а время отмывки составляет 15 минут.

12. Способ получения L-гистидина, включающий в себя стадии выращивания бактерии по любому из пп.1-11, в питательной среде с целью продукции и накопления L-гистидина, и выделения L-гистидина из культуральной жидкости.

13. Способ по п.12, отличающийся тем, что у указанной бактерии повышена экспрессия генов биосинтеза L-гистидина.