RU2004102689A - Способ модифицирования фермента и вариант оксидоредуктазы - Google Patents

Способ модифицирования фермента и вариант оксидоредуктазы Download PDF

Info

Publication number
RU2004102689A
RU2004102689A RU2004102689/13A RU2004102689A RU2004102689A RU 2004102689 A RU2004102689 A RU 2004102689A RU 2004102689/13 A RU2004102689/13 A RU 2004102689/13A RU 2004102689 A RU2004102689 A RU 2004102689A RU 2004102689 A RU2004102689 A RU 2004102689A
Authority
RU
Russia
Prior art keywords
enzyme
mutant
coenzyme
coli
residue
Prior art date
Application number
RU2004102689/13A
Other languages
English (en)
Inventor
Такахиса НАКАИ (JP)
Такахиса НАКАИ
Соуити МОРИКАВА (JP)
Соуити МОРИКАВА
Нориюки КИЗАКИ (JP)
Нориюки КИЗАКИ
Ёсихико ЯСОХАРА (JP)
Ёсихико ЯСОХАРА
Original Assignee
Канека Корпорейшн (Jp)
Канека Корпорейшн
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Канека Корпорейшн (Jp), Канека Корпорейшн filed Critical Канека Корпорейшн (Jp)
Publication of RU2004102689A publication Critical patent/RU2004102689A/ru

Links

Classifications

    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N9/00—Enzymes; Proenzymes; Compositions thereof; Processes for preparing, activating, inhibiting, separating or purifying enzymes
    • C12N9/0004—Oxidoreductases (1.)
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N9/00—Enzymes; Proenzymes; Compositions thereof; Processes for preparing, activating, inhibiting, separating or purifying enzymes
    • C12N9/0004—Oxidoreductases (1.)
    • C12N9/0006—Oxidoreductases (1.) acting on CH-OH groups as donors (1.1)
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12P—FERMENTATION OR ENZYME-USING PROCESSES TO SYNTHESISE A DESIRED CHEMICAL COMPOUND OR COMPOSITION OR TO SEPARATE OPTICAL ISOMERS FROM A RACEMIC MIXTURE
    • C12P7/00—Preparation of oxygen-containing organic compounds
    • C12P7/62—Carboxylic acid esters

Landscapes

  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Zoology (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Wood Science & Technology (AREA)
  • Genetics & Genomics (AREA)
  • Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
  • Microbiology (AREA)
  • Biotechnology (AREA)
  • Biochemistry (AREA)
  • General Engineering & Computer Science (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Biomedical Technology (AREA)
  • Molecular Biology (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
  • General Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Enzymes And Modification Thereof (AREA)
  • Micro-Organisms Or Cultivation Processes Thereof (AREA)
  • Preparation Of Compounds By Using Micro-Organisms (AREA)

Claims (43)

1. Способ модифицирования фермента для конверсии коферментной зависимости оксидоредуктазы, характеризующийся регулированием величины энергии связывания молекулы кофермента с помощью замены, инсерции, делеции или их комбинации одного или множества произвольных аминокислотных остатков в предварительно выбранном сайте указанной оксидоредуктазы.
2. Способ по п.1, где способ включает в себя стадию установления активного сайта оксидоредуктазы, стадию определения аминокислотного остатка, взаимодействующего с молекулой кофермента, вблизи указанного активного сайта и стадию получения мутации указанного определенного остатка таким образом, чтобы регулировать величину энергии связывания молекулы кофермента.
3. Способ по п.2, где указанная стадия установления активного сайта включает в себя предсказание трехмерной структуры способом молекулярного моделирования, скрининг части в виде кармана, имеющей объем, способный вместить молекулу кофермента, и, кроме того, сравнение аминокислотной последовательности с аналогичными ферментными белками, и выделение аминокислотного остатка, предположительно важного для связывания фермента и кофермента, из аминокислотных остатков, составляющих указанную часть в виде кармана.
4. Способ по п.2, где стадия определения аминокислотного остатка, взаимодействующего с указанной молекулой кофермента, включает в себя отбор аминокислотных остатков, присутствующих в пределах расстояния 12 Е от молекулы кофермента.
5. Способ по п.3, где указанная оксидоредуктаза в качестве молекулы кофермента использует кофермент, являющийся пиридиновым нуклеотидом.
6. Способ по п.5, где указанная оксидоредуктаза содержит (Gly или Ala)-(Хаа)3-(Gly, Ala или Thr)-(Ile или Leu)-(Gly, Ala или Ser) - (Xaa)10- (Gly или Asn) в качестве общей аминокислотной последовательности, необходимой для связывания с молекулой кофермента.
7. Способ по п.6, где стадия определения аминокислотных остатков, взаимодействующих с молекулой кофермента, кроме того, включает в себя отбор аминокислотных остатков из области, состоящей из указанной общей аминокислотной последовательности и 15 остатков на каждом из концов фермента - N-конце и С-конце, и предпочтительно из области, состоящей из указанной общей аминокислотной последовательности и 15 остатков на его С-конце.
8. Мутант оксидоредуктазы, который получен согласно способу по пп.1-7.
9. Способ по пп.1-7, где оксидоредуктазой является карбонилредуктаза, полученная из Candida magnoliae IFO 0705.
10. Способ по п.9, характеризующийся аминокислотной заменой, инсерцией, делецией или их комбинацией в положениях остатков аминокислот указанного фермента 40-69, 87-92 и 225-228.
11. Способ по п.9, характеризующийся аминокислотной заменой, инсерцией делецией или их комбинацией в положениях остатков аминокислот указанного фермента 41-43, 47, 63-66 и 69.
12. Мутант карбонилредуктазы, где осуществлена конверсия его коферментной зависимости с использованием способа по п.9.
13. Мутант карбонилредуктазы, где осуществлена конверсия его коферментной зависимости с использованием способа по п.10.
14. Мутант карбонилредуктазы, где осуществлена конверсия его коферментной зависимости с использованием способа по п.11.
15. Мутант карбонилредуктазы, который получен из карбонилредуктазы дикого типа заменой, инсерцией, делецией или их комбинацией аминокислотных остатков и обладает следующими физико-химическими свойствами:
(1) действие: действует на этил-4-хлорацетоацетат с образованием этил-(S)-4-хлор-3-гидроксибутирата с использованием в качестве кофермента β-никотинамидадениндинуклеотида восстановленного типа;
(2) субстратная специфичность: проявляет высокую активность по отношению к этил-4-хлорацетоацетату, но по существу не проявляет активность по отношению к этилацетоацетату, и проявляет высокую активность по отношению к сложному эфиру 4-хлорацетоуксусной кислоты, но по существу не проявляет дегидрогеназную активность по отношению к сложному эфиру 4-галоген-3-гидроксимасляной кислоты;
(3) зависимость от кофермента: проявляет высокую активность в случае, когда в качестве кофермента служит β-никотинамидадениндинуклеотид восстановленного типа, но по существу не проявляет активность в случае, когда в качестве кофермента служит β-никотинамидадениндинуклеотидфосфат восстановленного типа.
16. Мутант карбонилредуктазы по п.15, где указанной карбонилредуктазой дикого типа является карбонилредуктаза, полученная из Candida magnoliae IFO 0705.
17. Мутант карбонилредуктазы по п.16, который, кроме того, обладает следующими физико-химическими свойствами (4)-(7):
(4) оптимальное значение рН 4,0-7,0;
(5) термостабильность: стабилен вплоть до 45°С в случае обработки при рН 7,0 в течение 30 мин;
(6) устойчивость к органическим растворителям: обладает ферментативной активностью, составляющей, по меньшей мере, 85% в случае обработки этиловым эфиром уксусной кислоты, бутиловым эфиром уксусной кислоты или диизопропиловым эфиром при рН 7,0 при 25°С в течение 30 мин; и
(7) молекулярная масса: примерно 32000 при электрофорезе в полиакриламидном геле с додецилсульфатом натрия.
18. Мутант фермента по п.17, отличающийся тем, что указанный мутант получен из карбонилредуктазы дикого типа путем замены, инсерции, делеции или их комбинации аминокислотных остатков и содержит остаток аланина (А), остаток глицина (G) или остаток серина (S) в положении 41; остаток аланина (А), остаток глицина (G), остатков серина (S), остаток треонина (Т), остаток аргинина (R) или остаток лизина (К) в положении 42; остаток аланина (А), остаток глицина (G), остаток серина (S), остаток треонина (Т), остаток глутамина (Q), остаток аргинина (R) или остаток лизина (К) в положении 43; и остаток аспарагиновой кислоты (D) в положении 64, и указанный мутант может необязательно иметь одно или более из следующего:
(1) аланин (А), серин (S), треонин (Т), тирозин (Y), лейцин (L), глутамин (Q), глутаминовую кислоту (Е), аргинин (R) или лизин (К) в положении 47;
(2) аланин (А), серин (S), лейцин (L), изолейцин (I), валин (V), метионин (М), фенилаланин (F), триптофан (W), цистеин (С), треонин (Т), серин (S), аспарагин (N) или глицин (G) в положении 63;
(3) лейцин (L), изолейцин (I), валин (V), метионин (М), фенилаланин (F), триптофан (W), аланин (А), цистеин (С), серин (S) или треонин (Т) в положении 65;
(4) лейцин (L), изолейцин (I), валин (V), аланин (А), цистеин (С), серин (S), треонин (Т), аспарагин (N), глутамин (Q), аргинин (R) или лизин (К) в положении 66; и
(5)) аланин (А), глутаминовую кислоту (Е), аспарагиновую кислоту (D) или серин (S) в положении 69.
19. Мутант фермента по п.18, в который введены следующие мутации: S41A, S42A, S43Q, W63I, Y64D, N65I и S66N.
20. Мутант фермента по п.18, в который введены следующие мутации: S41A, S42A, S43Q, W63I, Y64D, N65V и S66L.
21. Мутант фермента по п.18, в который введены следующие мутации:: S41A, S42A, S43G, W63I, Y64D, N65I и S66L.
22. Мутант фермента по п.18, в который введены следующие мутации: S41A, S42A, S43R, W63I, Y64D, N65I и S66N.
23. Мутант фермента по п.18, в который введены следующие мутации: S41A, S42A, S43Q, Y47R, W63I, Y64D, N65I и S66N.
24. Мутант фермента по п.18, в который введены следующие мутации: S41A, S42A, S43R, Y47R, W63I, Y64D, N65I и S66N.
25. Мутант фермента по п.18, в который введены следующие мутации: S41A, S42R, W63I, Y64D, N65I и S66N.
26. Мутант фермента по п.18, в который введены следующие мутации: S41A, S42R, Y47R, W63I, Y64D, N65I и S66N.
27. Мутант фермента по п.18, в который введены следующие мутации: S41A, S42A, Y43Q, W63I, Y64D, N65I, S66N и А69Е.
28. ДНК, кодирующая мутант фермента по любому из пп.18-27.
29. Плазмида, несущая ДНК по п.28.
30. Плазмида по п.29, где указанной плазмидой является pNTS1M1, pNTS1M2, pNTS1M3, pNTS1M4, pNTS1M5, pNTS1M6, pNTS1M7, pNTS1M8 или pNTS1M9.
31. Трансформант, полученный трансформацией указанной плазмидой по п.30.
32. Трансформант по п.31, где указанный трансформант является Escherichia coli.
33. Трансформант по п.32, где указанный трансформант является E.coli HB101 (pNTS1M1), E.coli HB101 (pNTS1M2), E.coli HB101 (pNTS1M3), E.coli HB101 (pNTS1M4), E.coli HB101 (pNTS1M5), E.coli HB101 (pNTS1M6), E.coli HB101 (pNTS1M7), E.coli HB101 (pNTS1M8) или E.coli HB101 (pNTS1M9).
34. Способ производства мутанта карбонилредуктазы, который включает в себя стадию трансформации плазмидой, выбранной из pNTS1M1, pNTS1M2, pNTS1M3, pNTS1M4, pNTS1M5, pNTS1M6, pNTS1M7, pNTS1M8 или pNTS1M9.
35. Способ получения сложного эфира (S)-4-галоген-3-гидроксимасляной кислоты, представленного следующей общей формулой:
Figure 00000001
где R1 является атомом галогена, R2 является водородом и R3 является замещенной или незамещенной алкильной группой или арильной группой; и
где указанный способ включает в себя стадию взаимодействия сложного эфира 4-галогенацетоуксусной кислоты, представленного следующей общей формулой:
Figure 00000002
где R1 является атомом галогена, R2 является водородом и R3 является замещенной или незамещенной алкильной группой или арильной группой;
с использованием мутанта фермента по п.15 или культуры микроорганизма, обладающего способностью продуцировать указанный мутант фермента, или продукт обработки культуры.
36. Способ получения сложного эфира (S)-4-галоген-3-гидроксимасляной кислоты, представленного следующей общей формулой:
Figure 00000003
где R1 является атомом галогена, R2 является водородом и R3 является замещенной или незамещенной алкильной группой или арильной группой; и
где указанный способ включает в себя стадию взаимодействия сложного эфира 4-галогенацетоуксусной кислоты, представленного следующей общей формулой:
Figure 00000004
где R1 является атомом галогена, R2 является водородом и R3 является замещенной или незамещенной алкильной группой или арильной группой;
с использованием мутанта фермента по п.17 или культуры микроорганизма, обладающего способностью продуцировать указанный мутант фермента, или продукт обработки культуры.
37. Способ по п.35, где указанный атом галогена является атомом хлора или брома и указанный R3 является алкильной группой, содержащей от 1 до 4 атомов углерода.
38. Способ по п.37, где указанный сложный эфир 4-галогенацетоуксусной кислоты является метил-4-хлорацетоацетатом, этил-4-хлорацетоацетатом, метил-4-бромацетоацетатом или этил-4-бромацетоацетатом.
39. Способ по любому из пп.35-38, где указанный микроорганизм является E.coli HB101 (pNTS1M1), E.coli HB101 (pNTS1M2), E.coli HB101 (pNTS1M3), E.coli HB101 (pNTS1M4), E.coli HB101 (pNTS1M5), E.coli HB101 (pNTS1M6), E.coli HB101 (pNTS1M7), E.coli HB101 (pNTS1M8) или E.coli HB101 (pNTS1M9).
40. Способ производства оптически активного спирта, который включает в себя стадию взаимодействия мутанта фермента по п.15 или 17, фермента и/или его мутанта, обладающего способностью регенерировать кофермент, от которого зависит указанный мутант фермента, и карбонильного соединения, и стадию сбора полученного оптически активного спирта.
41. Способ по п.40, где указанным ферментом, обладающим способностью регенерировать указанный кофермент, является глюкозодегидрогеназа и ее мутант.
42. Способ по п.40, где указанным ферментом, обладающим способностью регенерировать указанный кофермент, является дегидрогеназа муравьиной кислоты и ее мутант.
43. Способ, который включает в себя стадии взаимодействия трансформанта, полученного трансформацией плазмидой, несущей ДНК, кодирующую мутант фермента по п.15 или 17, и ДНК, кодирующую фермент, обладающий способностью регенерировать кофермент, от которого зависит указанный мутант фермента, с карбонильным соединением и стадию сбора полученного оптически активного спирта.
RU2004102689/13A 2001-07-02 2002-07-02 Способ модифицирования фермента и вариант оксидоредуктазы RU2004102689A (ru)

Applications Claiming Priority (4)

Application Number Priority Date Filing Date Title
JP2001200417 2001-07-02
JP2001-200417 2001-07-02
JP2002006303 2002-01-15
JP2002-6303 2002-01-15

Publications (1)

Publication Number Publication Date
RU2004102689A true RU2004102689A (ru) 2005-05-10

Family

ID=26617964

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
RU2004102689/13A RU2004102689A (ru) 2001-07-02 2002-07-02 Способ модифицирования фермента и вариант оксидоредуктазы

Country Status (9)

Country Link
US (1) US20040248250A1 (ru)
EP (1) EP1416050A4 (ru)
JP (1) JP4493333B2 (ru)
KR (1) KR20040014655A (ru)
CA (1) CA2450867A1 (ru)
IL (1) IL159368A0 (ru)
MX (1) MXPA03011813A (ru)
RU (1) RU2004102689A (ru)
WO (1) WO2003004653A1 (ru)

Families Citing this family (23)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
DE60336324D1 (de) 2002-08-09 2011-04-21 Codexis Inc Enzymatische verfahren zur herstellung 4-substituierter 3-hydroxybuttersäure-derivate
CA2533838A1 (en) 2003-08-11 2005-02-24 Codexis, Inc. Improved ketoreductase polypeptides and related polynucleotides
KR20060071397A (ko) 2003-08-11 2006-06-26 코덱시스, 인코포레이티드 4-치환된 3-히드록시부티르산 유도체 및 이웃자리 시아노,히드록시 치환된 카르복실산 에스테르의 효소적 제조 방법
JPWO2006043555A1 (ja) * 2004-10-19 2008-05-22 株式会社カネカ 生体高分子生成のための還元酵素変異体
JP5090910B2 (ja) * 2005-07-20 2012-12-05 株式会社カネカ 光学活性２−（ｎ−置換アミノメチル）−３−ヒドロキシ酪酸エステル類の製造方法
US8945899B2 (en) 2007-12-20 2015-02-03 Butamax Advanced Biofuels Llc Ketol-acid reductoisomerase using NADH
US8273558B2 (en) 2005-10-26 2012-09-25 Butamax(Tm) Advanced Biofuels Llc Fermentive production of four carbon alcohols
US20080293086A1 (en) * 2006-09-18 2008-11-27 Cobalt Technologies, Inc. A Delaware Corporation Real time monitoring of microbial enzymatic pathways
WO2008042876A2 (en) 2006-10-02 2008-04-10 Codexis, Inc. Compositions and methods for producing stereoisomerically pure statins and synthetic intermediates therefor
EP2543721A1 (en) 2007-04-18 2013-01-09 Butamax (TM) Advanced Biofuels LLC Fermentive production of isobutanol using highly active ketol-acid reductoisomerase enzymes
US20090081715A1 (en) * 2007-09-07 2009-03-26 Cobalt Technologies, Inc., A Delaware Corporation Engineered Light-Emitting Reporter Genes
EP2222841B1 (en) 2007-12-20 2015-08-26 Butamax (TM) Advanced Biofuels LLC Ketol-acid reductoisomerase using nadh
WO2009120806A2 (en) * 2008-03-25 2009-10-01 Cobalt Technologies, Inc. Expression of oxidoreductases to increase volumetric productivity
GB2459756B (en) 2008-04-09 2012-04-04 Cobalt Technologies Inc Enhanced ABE fermentation with high yielding butanol tolerant Clostridium strains
RU2011153546A (ru) 2009-06-26 2013-08-10 Кобальт Текнолоджиз, Инк. Способ и комплексная система для получения биопродукта
US9315782B2 (en) 2010-01-20 2016-04-19 Kaneka Corporation Isolated DNA encoding protein having improved stability
HUE045191T2 (hu) 2011-03-24 2019-12-30 Butamax Tm Advanced Biofuels Host sejtek és eljárások izobutanol elõállítására
WO2013002277A1 (ja) 2011-06-28 2013-01-03 株式会社カネカ 酵素機能改変方法及びその変異体
MX370134B (es) 2012-05-11 2019-12-03 Butamax Advanced Biofuels Llc Enzimas de cetol-acido reductoisomerasa y metodo de uso.
EP3444339A1 (en) 2012-09-26 2019-02-20 Butamax(TM) Advanced Biofuels LLC Polypeptides with ketol-acid reductoisomerase activity
KR101446551B1 (ko) * 2013-02-26 2014-10-06 주식회사 아미노로직스 (2rs)-아미노-(3s)-히드록시-부티르산 또는 이의 유도체의 제조방법
CN109852592B (zh) * 2019-01-14 2022-05-31 中国科学院成都生物研究所 耐热性提高的羰基还原酶突变体
CN109852593B (zh) * 2019-03-28 2020-10-20 洛阳华荣生物技术有限公司 一种重组酮还原酶及在制备r-3-羟基丁酸及其盐中的应用

Family Cites Families (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CZ298236B6 (cs) * 1997-02-07 2007-08-01 Kaneka Corporation Nová karbonylová reduktasa, gen, který ji kóduje a zpusob pro pouzití této reduktasy a genu
DE19812004A1 (de) * 1998-03-19 1999-09-30 Forschungszentrum Juelich Gmbh Dehydrogenasen mit verbesserter NAD-Abhängigkeit, deren Herstellung und Verwendung

Also Published As

Publication number Publication date
JPWO2003004653A1 (ja) 2004-10-28
CA2450867A1 (en) 2003-01-16
KR20040014655A (ko) 2004-02-14
IL159368A0 (en) 2004-06-01
MXPA03011813A (es) 2004-07-01
EP1416050A1 (en) 2004-05-06
JP4493333B2 (ja) 2010-06-30
US20040248250A1 (en) 2004-12-09
EP1416050A4 (en) 2004-12-22
WO2003004653A1 (fr) 2003-01-16

Similar Documents

Publication Publication Date Title
RU2004102689A (ru) Способ модифицирования фермента и вариант оксидоредуктазы
JP4510351B2 (ja) 新規カルボニル還元酵素、その遺伝子、およびその利用法
JP4012257B2 (ja) 新規カルボニル還元酵素、およびこれをコードする遺伝子、ならびにこれらの利用方法
DE69937272D1 (de) Verfahren zur herstellung eines peptids mittels eines hilfspeptids
CN104053771A (zh) 用于制备羟基取代的氨基甲酸酯的生物催化剂
EP2684953B1 (en) Modified aminotransferase, gene thereof, and method for producing optically active amino compound using same
JP6988000B6 (ja) ケトレダクターゼ変異体及びその応用
JP2021528956A (ja) アミノ酸デヒドロゲナーゼ突然変異体及びその応用
CN114555795A (zh) 酮还原酶多肽及多核苷酸
US20240052391A1 (en) Enzymatic Synthesis of Polynucleotide Probes
JPH11187869A (ja) 新規な４−ハロアセト酢酸エステル還元酵素、該酵素の製造方法、及び該酵素を利用したアルコールの製造方法
WO2018084165A1 (ja) 改変型酵素およびその利用
JP2001514899A (ja) ジモモナス属からのピルビン酸デカルボキシラーゼの存在下でアセトアルデヒドとベンズアルデヒドとからエナンチオマー純粋なフェニルアセチルカルビノールを製造する方法
JP4880859B2 (ja) 新規カルボニル還元酵素、その遺伝子、およびその利用法
CN115175997A (zh) 用于化学化合物的羟基化的生物催化剂和方法
JP5324083B2 (ja) 高反応性耐熱性ｄｎａリガーゼ
JP6425483B2 (ja) 細胞内の酸化還元状態をモニターするための蛍光タンパク質、ｄｎａ、ベクター、形質転換体、及び方法
CN111836899A (zh) 制备用于通过酶还原合成光学活性β-氨基醇的中间体的方法以及新型合成中间体
US11999976B2 (en) Engineered ketoreductase polypeptides and uses thereof
JPWO2006043555A1 (ja) 生体高分子生成のための還元酵素変異体
JP7170040B2 (ja) ノルボルネン部分を担う新規アミノ酸
US20210371829A1 (en) Engineered ketoreductase polypeptides and uses thereof
CN116334153A (zh) 还原胺化酶及其制法和应用
AU2021347452A1 (en) Stabilized n-terminally truncated terminal deoxynucleotidyl transferase variants and uses thereof
WO2023173058A2 (en) Engineered monoamine oxidases for the preparation of stereomerically pure fused bicyclic proline compounds

Legal Events

Date Code Title Description
FA92 Acknowledgement of application withdrawn (lack of supplementary materials submitted)

Effective date: 20060718