RU2003131177A - Белки, вызывающие измененную иммуногенную реакцию, и способы их получения и использования - Google Patents

Claims (29)

1. Вариант представляющей интерес протеазы, содержащий Т-клеточный эпитоп, где указанный вариант отличается от указанной представляющей интерес протеазы тем, что он имеет измененный Т-клеточный эпитоп, так что указанный вариант и указанная представляющая интерес протеаза вызывают различные иммуногенные реакции у человека; при этом указанный Т-клеточный эпитоп указанной представляющей интерес протеазы включает аминокислотную замену, выбранную из группы, состоящей из остатков, соответствующих положениям 76, 79 и 122 субтилизина Bacillus amyloliquefaciens.

2. Вариант по п.1, отличающийся тем, что указанная иммуногенная реакция, вызываемая указанным вариантом, меньше, чем указанная иммуногенная реакция, вызываемая указанной представляющей интерес протеазой.

3. Вариант по п.2, отличающийся тем, что указанная иммуногенная реакция, вызываемая указанным вариантом, отличается уменьшением аллергенности in vivo.

4. Вариант по п.2, отличающийся тем, что указанная иммуногенная реакция, вызываемая указанным вариантом, отличается уменьшением аллергенности in vitro.

5. Вариант по п.1, отличающийся тем, что указанная иммуногенная реакция, вызываемая указанным вариантом, больше, чем указанная иммуногенная реакция, вызываемая указанной представляющей интерес протеазой.

6. Вариант по п.1, отличающийся тем, что имеет замену в положении 122, в одном или обоих из положений 76 и 79.

7. Вариант по п.6, отличающийся тем, что имеет замену в положении 122, в одном или обоих из положений 76 и 79 и в одном или более из положений 3, 31, 40, 41, 111, 147, 218, 206 и 217.

8. Вариант по п.6, отличающийся тем, что содержит комбинированные наборы замен, выбранные из группы, состоящей из положений, соответствующих Y217L/I79A/I122A, Y217L/N76D/I122A и Y217L/N76D/I79A/I122A.

9. Вариант по п.6, отличающийся тем, что содержит комбинированные наборы замен, выбранные из группы, состоящей из Y217L/N76D/I79A/I122A/N218S; Y217L/N76D/I79A/I122A/Q206L; Y217L/N76D/I79A/I122A/Q206L/N218S; Y217L/I79A/I122A/Q206L; Y217L/I79A/I122A/N218S; Y217L/I79A/I122A/P40Q; Y217L/I79A/I122A/D41A и Y217L/I79A/I122A/H238Y.

10. Вариант по п.6, отличающийся тем, что содержит комбинированные наборы замен, выбранные из группы, состоящей из Y217L/N76D/I122A/N218S; Y217L/N76D/I122A/Q206L; Y217L/N76D/I122A/Q206L/N218S; Y217L/N76D/I122A/P40Q; Y217L/N76D/I122A/D41A и Y217L/N76D/I122A/H238Y.

11. Вариант по п.1, отличающийся тем, что содержит замену в указанной представляющей интерес протеазе в положении, соответствующем I122A Bacillus amyloliquefaciens.

12. Вариант по п.11, отличающийся тем, что имеет, по меньшей мере, одну дополнительную замену в указанной представляющей интерес протеазе в одном или обоих положениях, соответствующих N76D и/или I79A субтилизина Bacillus amyloliquefaciens.

13. Вариант по п.11, отличающийся тем, что дополнительно содержит замену в одном или более положениях в указанной представляющей интерес протеазе, эквивалентных положениям, выбранным из группы, состоящей из положений 216, 181, 101, 215, 216, 217, 247, 46, 154, 128, 182, 104, 107, 250, 254, 258, 50, 47, 48, 182, 183, 185, 248 и 262 Bacillus amyloliquefaciens.

14. Вариант по п.13, отличающийся тем, что указанная дополнительная замена в одном или более положениях выбрана из группы, состоящей из A216H, D181G, S101V, G215A, A216E, Y217S, R247Y, R247S, R247Q, G46S, S101Q, S154G, G128S, S182T, S101R, Y104W, I107V, L250G, T254G, T254A, G258S, M50A, G47S, A48G, S182R, S183R, Q185A, S101R, S248G и Y262F.

15. Вариант по п.11, отличающийся тем, что дополнительно содержит замену в одном или более положениях в указанной представляющей интерес протеазе, эквивалентных положениям, выбранным из группы, состоящей из положений 3, 76, 31, 40, 41, 111, 147, 218, 206 и 217 Bacillus amyloliquefaciens.

16. Вариант по п.15, отличающийся тем, что указанные дополнительные замены выбраны из группы, состоящей из S3T, N76D, I31L, P40Q, D41A, I111V, V147P, N218S, Q206L и Y217M.

17. Нуклеиновая кислота, кодирующая вариант по п.1.

18. Экспрессирующий вектор, содержащий нуклеиновую кислоту по п.17.

19. Клетка-хозяин, трансформированная экспрессирующим вектором по п.18.

20. Очищающая композиция, продукт личной гигиены, шампунь, лосьон для тела, композиция для очистки полости рта или фармацевтическая композиция, содержащие вариант по п.1.

21. Фармацевтическая композиция по п.20, отличающаяся тем, что дополнительно содержит фармацевтически приемлемый носитель.

22. Композиция для ухода за кожей, содержащая вариант представляющей интерес протеазы, содержащей Т-клеточный эпитоп, где указанный вариант отличается от указанной представляющей интерес протеазы тем, что он имеет измененный Т-клеточный эпитоп, так что указанный вариант и указанная представляющая интерес протеаза вызывают различные иммуногенные реакции у человека; при этом указанный Т-клеточный эпитоп указанной представляющей интерес протеазы включает аминокислотную замену, выбранную из группы, состоящей из остатков, соответствующих положениям 76, 79 и 122 субтилизина Bacillus amyloliquefaciens.

23. Композиция для ухода за кожей по п.22, отличающаяся тем, что дополнительно содержит косметически приемлемый носитель.

24. Композиция для ухода за кожей по п.23, отличающаяся тем, что указанный носитель содержит гидрофильный разбавитель, выбранный из группы, состоящей из воды, пропиленгликоля, этанола, пропанола, глицерина, бутиленгликоля, полиэтиленгликоля, имеющего молекулярную массу от приблизительно 200 до приблизительно 600, полипропиленгликоля, имеющего молекулярную массу от приблизительно 425 до приблизительно 2025, и их смесей.

25. Композиция для ухода за кожей по п.22, отличающаяся тем, что дополнительно содержит активный ингредиент для ухода за кожей.

26. Композиция для ухода за кожей по п.25, отличающаяся тем, что указанный активный ингредиент для ухода за кожей выбран из группы, состоящей из компонента витамина В3, пантенола, витамина Е, ацетата витамина Е, ретинола, ретинилпропионата, ретинилпальмитата, ретиноевой кислоты, витамина С, теобромина, альфа-гидроксикислоты, фарнезола, фитрантриола, салициловой кислоты, пальмитилпептапептида-3 и их смесей.

27. Композиция для ухода за кожей по п.26, отличающаяся тем, что указанный компонент витамина В3 является ниацинамидом.

28. Композиция по уходу за кожей по п.22, отличающаяся тем, что дополнительно содержит глицерин.

29. Композиция для ухода за кожей, содержащая

а) от приблизительно 0,00001 до приблизительно 1 мас.% варианта представляющей интерес протеазы, содержащей Т-клеточный эпитоп, где указанный вариант отличается от указанной представляющей интерес протеазы тем, что он имеет измененный Т-клеточный эпитоп, так что указанный вариант и указанная представляющая интерес протеаза вызывают различные иммуногенные реакции у человека, при этом указанный Т-клеточный эпитоп указанной представляющей интерес протеазы включает аминокислотную замену, выбранную из группы, состоящей из остатков, соответствующих положениям 76, 79 и 122 субтилизина Bacillus amyloliquefaciens;

b) от приблизительно 0,01 до приблизительно 20 мас.% увлажняющего агента;

с) от приблизительно 0,1 до приблизительно 20 мас.% активного ингредиента для ухода за кожей;

d) от приблизительно 0,05% до приблизительно 15 мас.% поверхностно-активного вещества; и

е) от приблизительно 0,1% до приблизительно 20 мас.% силикона.