RU1830063C

RU1830063C - Способ получени замещенных 1-(1Н-имидазол-4-ил)-алкилбензамидов или их солей присоединени с кислотами нетоксичными и фармацевтически приемлемыми

Info

Publication number: RU1830063C
Application number: SU894613927A
Authority: RU
Inventors: Коссман Эрик; Жерт Жан-Пьер; Гобер Жан; Мишель ФИЛИПП; Вульферт Эрнст
Original assignee: Юцб С.А.,
Priority date: 1988-04-28
Filing date: 1989-04-27
Publication date: 1993-07-23
Also published as: AU610796B2; PT90368B; KR890016017A; LV10437B; JPH01313467A; RU1836353C; NO891760L; NO173331C; ATE82571T1; BR1100064A; IE63698B1; PH25461A; CY1758A; IE891360L; ES2052969T3; ZA893140B; IL90087A0; LV10437A; DE68903531T2; DK205589D0

Abstract

Использование: в качестве препаратов, обладающих антиишемическими сойствами и свойствами агонистов О2-адренергиче- ских рецепторов. Сущность изобретени ; продукт общей формулы нм 3 Rt Изобретение относитс к способу получени новых замещенных 1-(1Н-имидазол- 4-ил)-алкилбензамидов, а также их солей присоединени с кислотами, которые могут найти применение в терапии. Цель изобретени - синтез новых соединений в р ду 1Н-имидазолов, обладающих не только характерными дл данного р да свойствами, но и свойствами агонистов од-адренергических рецепторов с помощью известного способа получени амидов. где RI и R2, одинаковые или различные, - водород или алкил Ci-4; Рз водород, алкил d-4, гидроксиалкил, содержащий 1-4 атома углерода, аминогруппу или гидроксильную группу; R4 - водород или алкил Ci-4; Rs - водород, гидроксильна группа, алкоксиг- руппа, содержаща 1-4 атома углерода; Re - водород, гидроксильна группа или алкил, содержащий 1-4 атома углерода, причем по меньшей мере один из RS и Re имеет значение , отличное от водорода. Реагент I: продукт общей формулы где RI, R2, Rs и Re имеют указанные значени ; R алкил, содержащий 1-4 атома углерода . Реагент 2: продукт формулы HN -R3 R4 СП С где Ra и R4 имеют указанные значени . Возможно выделение в виде соли. 3 пр., 9 табл. Поставленна цель достигаетс предлагаемым способом получени соединений общей формулы R. R 0) 00 со о о о со со в которой RI и R2 одинаковые или различные , водород или алкильный радикал, содержащий 1-4 атомов углерода;

Description

Нз - водород, алкильный радикал, содержащий 1-4 атомов углерода, гидрокси- алкильный радикал, содержащий 1-4 атомов углерода, аминогруппа или гидроксильна группа;

R4 - водород или алкильный радикал, содержащий 1-4 атомов углерода;

Rg- водород, гидроксильна группа или алкоксирадикал, содержащий 1-4 атомов углерода;

Re- водород, гидроксильна группа или алкильный радикал, содержащий 1-4 атомов углерода, причем по меньшей мере один из RS и Re имеет значение, отличное от водорода.

а также их солей присоединени с кислотами , вл ющимис нетоксичными и фармацевтически приемлемыми, заключающимс в том, что провод т реакцию 1-(1Н-имида- зол-4-ил)-алкилбензоата алкила формулы

JL5 I l N R70

6 1

н

-о

(II)

N

И

в которой Ri, R2, Rs и Re имеют указанные значение;

R - алкильный радикал, содержащий 1-4 атомов углерода, с азотсодержащим соединением формулы

HN

-R- РЧ.

(Ill)

в которой R3 и R4 имеют указанные значени ,

и полученные 1-(1Н-имидазол-4-ил)-алкил- бензамиды выдел ют в свободном виде или в виде их солей присоединени с кислотами , вл ющимис нетоксичными и фармацевтически приемлемыми.

Пример 1. Получение исходных 1-(1 Н-имидазол-4-ил)-алкилбензоатов алкила с формулой II.

А. Путем этерификации соответствующих кислот.

1. Хлоргидрат 2-гидрокси-5-(1 Н-имида- зол-4-ил)-метил -бензоата этила.

Насыщают при 0°С потоком газообразной хлороводородной кислоты суспензию, содержащую 3,1 г (12,2 ммоль) хлоргидрата 2-гидрокси-5-(1Н-имидазол-4-ил)-метил - бензойной кислоты (полученной, как описано ниже, по примеру 2.В.) в 150 мл абсолютного этанола. Затем медленно нагревают до температуры образовани флегмы, которую поддерживают в течение 10 ч. Испар ют растворитель до осаждени сложного эфира . Последний фильтруетс , промываетс диэтиловым эфиром, затем сушитс . По

лучают 2,3 г хлоргидрата 2-гидрокси-5-(1 Н- имидазол-4-ил)-метил -бензоата этила.

Выход 68%. Температура плавлени (ТПл)195-198°С.

5ЯМР-спектр(ДМСО): дельта 1,34 (ЗН, т),

4,03 (2Н, с), 4,37 (2Н, к), 6,95(1 Н, д), 7,40 (1 Н, с), 7,49 (1 Н, дд), 8,70 (1 Н, д), 9,12 (1 Н, с), 10,6 (1Н,с).

2.2Тидрокси-3- 1-(1 Н-имидазол-4-ил)- 10 н зоат этила.

Это соединение получено по примеру 1, но исход из 2-гидрокси-3- 1-(1Н-имидазол- 4-ил)-этил -бензойной кислоты (полученной, как описано ниже, по примеру 2.А.2). По

15 окончании реакции нейтрализуют реакционную среду прибавлением концентрированногорастворааммиака , отфильтровывают неорганические соли и выпаривают фильтрат при пониженном дав20 лении. Полученный остаток очищают методом хроматографии на кремнеземе(элюент: смесь дихлорметан-метанол 8:2 об./об.). Получают 2-гидрокси-3- 1-(1Н-имидазол 4- ил)-этил -бензоат этила с выходом 35%. Со25 ответствующий хлоргидрат плавитс при 168°С (этанол-эфир).

Элементный анализ дл С14Н1б№Озх xHCI,%:

Рассчитано, %; С 56,66; Н 5,40; N 9,44

30 Найдено, %; С 56,58; Н 5,50; N 9,21.

3.2-Гидрокси-3- 1-(1 Н-имидазол-4-ил) пентил -бензоат этила.

Нагревают при орошении флегмой в течение 9 ч 1,18 г (3,8 ммоль) хлоргидрата

35 2-гидрокси-3- 1-(1 Н-имидазол-4-ил)-пен- тил -бензойной кислоты (полученной, как описано ниже, по примеру 2.А.З.), растворенных в 15 мл триэтилортоформиата, е присутствии 1,2 г безводного монтморило40 нита К10, Затем фильтруют и выпаривают при пониженном давлении, Полученный остаток очищаетс методом хроматографии НЕ 150 г кремнезема (элюент: смесь дихлорме- тан-метанол-аммиак 95:5:0,5 по объему).

45Получают 0,213 г 2-гидрокси-3- 1-(1Нимидазол-4-ил )-пентил -бензоата этила.

ЯМР-спектр (ДМСО): дельта 0,81 (ЗН, т). 1,0-1,29 (2Н,м), 1,34(ЗН,т), 1,77-2,0 (2Н, м). 4,31-4,41 (ЗН, т+к), 6,77 (1Н, с), 6,86 (1Н, т).

50 7,46-7,50 (2Н, д+с), 7,63 (1 Н, д).

Полученный таким образом продукт примен лс в таком виде без дополнительной очистки дл получени соответствующего бензамида (пример 3.13).

55 4, 2Тидрокси-3-(1 Н-имидазол-4-ил)-ме- тил -бензоат метила.

Это соединение получено по п. .2, но исход из хлоргидрата 2-гидрокси-3-(1Н- имидазол-4-ил)-метил -бензойной кислоты

(полученного, как описано ниже, по примеру 2.А.1) и метанола.

Тпл. 153-154°С.

ЯМР-спектр(ДМСО): дельта3,87(2Н, м), 3,91 (ЗН, с), 6,77 (1Н, с), 6,87 (1Н, т), 7,45 (1Н, дд), 7,58 (1 Н, с), 7,69 (1 Н, дд). 10 (1 Н. с).

В. По реакции Клайзена:

1. 3-(1 Н-Имидазол-4-ил)-метил -2-ме- токсибензоат метила.

1а. 2- 2-Хлор-2-пропенилокси -бензоат метила,

Нагревают при орошении флегмой в течение 10 ч суспензию, содержащую 304 г (2 моль) 2-гидроксибензоата метила, 25 г иодида кали , 69 г (0,5 моль) карбоната кали и 69 г (0,625 моль) 2,3-дихлорпропрена в 3 л сухого ацетона. Через 2,5 ч, 5 ч и 7,5 ч протекани реакции каждый раз добавл ют 69 г карбоната кали и 69 г 2,3-дихлорпрена, Затем фильтруют суспензию и выпаривают фильтрат при пониженном давлении. Остаток извлекаетс этилацетатом, и раствор последовательно промываетс насыщенным водным раствором тиосульфата натри , водой и в конце насыщенным водным раствором хлорида натри . Органическую фазу сушат на сульфате натри и дистиллируют ее при пониженном давлении, Таким образом получают 394 г 2-(2-хлор-2-пропенилок- си)-бензоата метила.

Выход 87%. Температура кипени (ТКип) 119°С/1,Змбар.

1Ь. 3-(2-Хлор-2-пропенил)-2-гидрокси- бензоат метила.

Провод т тщательную дегазацию аргоном 274,1 г (1,21 моль) 2-(2-хлор-2-пропени- локси)-бензоата метила, помещенного в колбу объемом 2 л. Затем как можно быстрее нагревают до 260°С. При этой температуре бурно начинаетс экзотермическа реакци : температура самосто тельно поднимаетс до 293°С, образуетс флегма и происходит почернение реакционной среды . После охлаждени до комнатной температуры перегон ют продукт при пониженном давлении. Получают 241,1 г 3- (2-хлор-2-пропенил)-2-гидроксибензоата метила.

Выход 88%.ТКип. 109-110°С/1,Змбар.

ЯМР-спектр (СООз): дельта 3,71 (2Н, с), 3,95(ЗН, с), 5,17(1 Н,м), 5,28(1 Н,м), 6,90(1 Н, т), 7,48 (1 Н, дд), 7,85 (1 Н, дд), 11,22 (1 Н, с).

1 с. 3-(2-Хлор-2-пропенил)-2-метокси- бензоат метила.

Не превыша температуру 10°С, прибавл ют порци ми 8,81 г (306 ммоль) гидра- да натри к раствору, содержащему 57,7 г (255 ммоль ) 3-(2-хлор-2-пропенил)-2-гидро- ксибензоата метила в 500 мл безводного диметилформамида. Нагревают смесь при

40°С в течение 15 мин. Затем прибавл ют 43,45 г(306 ммоль) метилиодида, растворенного в 50 мл толуола, далее поддерживают температуру смеси при 40°С в течение 3 ч.

Приливают осторожно реакционную смесь к 5 л воды и экстрагируют несколько раз этилацетатом. Органическую фазу концентрируют до объема 500 мл, затем ее промы- вают последовательно водой и

насыщенным водным раствором хлорида натри . Сушат раствор на сульфате натри и выпаривают растворитель при пониженном давлении. Остаток очищаетс методом хроматографии на силикагеле

(элюент:дихлорметан-гексан 50/50 об./об.). Таким образом получают 49,2 г 3-(2-хлор-2- пропенил)-2-метоксибензоата метила.

Выход 60%. Ткип. 107-110°С/0,5 мбар (масл ниста жидкость).

ЯМР-спектр (): дельта 3,73 (2Н, с), 3,82 (ЗН, с), 3,92 (ЗН, с), 5,14 (1 Н, м), 5,32 (1 Н, м), 7,15 (1Н, т), 7,47 (1Н, дд), 7,81 (1Н, дд).

1d. 3-(1 Н-Имидазол-4-ил)-метил -2-ме- токсибензоат метила.

Нагревают при орошении флегмой в течение 150 мин 45,5 г (189 ммоль) 3-(2-хлор-2- пропенил)-2-метоксибензоата метила и 81,5 г (378 ммоль) м-хлорпербензойной кислоты, растворенных в 300 мл безводного хлороформа . Охлаждают до 0°С и удал ют фильт- рованием образовавшийс осадок. Промывают фильтрат последовательно насыщенным водным раствором тиосульфата натри и насыщенным водным раствором

бикарбоната натри . Сушат раствор на сульфате натри и выпаривают растворитель при пониженном давлении, не превыша температуру 30°С,

Полученный остаток переводитс в суспензию прибавлением 300 мл безводного метанола и смешиваетс с 111,3 г(1,32 моль) тонкоизмельченного бикарбоната натри . Нагревают смесь до образовани флегмы. Прибавл ют к ней порци ми час за часом

137,6 г (1,32 моль) ацетата формамидина, После нагревани в течение 5,5 ч при орошении флегмой, удал ют метанол при пониженном давлении. Извлекают остаток посредством 500 мл воды и провод т

экстракцию этилацетатом. Органическую фазу сушат на сульфате натри и выпаривают ее под вакуумом. Остаток очищаетс методом хроматографии на силикагеле (элюент: смесь дихлорметан-этанол-аммиак

92,3:7:0,7 об./об,/об.). Получают 13,8 г 3- (1 Н-имидазол-4-ил)-метил -2-метоксибенз - оата метила.

Вы ход 30%.

ЯМР-спектр (DMCO): дельта 3,73 (ЗН, с), 3,83 (ЗН, с), 3,89 (2Н. с), 6,78 (1Н. с), 7,11 (1Н, т), 7,24-7,73 (ЗН, м).

Полученный указанным образом продукт примен лс в таком виде без дополни- тельной очистки дл приготовлени соответствующего бензамида (пример 3.16).

Следующие соединени получены при помощи метода, описанного в пункте В.1.

2.2-Гидрокси-3-(1 Н-имидазол-4-ил)-ме- тил -бензоат метила.

Это соединение получено исход из 3- (2-хлор-2-пропенил)-2-гидроксибензоата метила, с выходом 35,4%, опуска , разумеетс , мети ирование метилиодидом, описанное в пункте 1с. Т.пл. 153-154°С.

Полученный продукт идентичен продукту , приготовленному в примере 1.А.4.

3.3-(1 Н-Имидазол-4-ил)-метил -2-н- пропоксибензоат метила.

Выход 20% (масл ниста жидкость).

Продукт, полученный в сыром виде, примен лс в таком виде дл получени соответствующего бензамида (пример 3.17).

С. По реакции Фридел -Крафтса.

1.Хлоргидрат 5-трет-бутил-2-гидрокси- 3-(1 Н-имидазол-4-ил)-метил -бензоата метила .

Провод т реакцию 50 г хлоргидрата 1Н- имидазол-4-метанола с 60 г 5-трет-бутил-2- гидроксибензоата метила в 150 мл концентрированной серной кислоты при 20°С в течение 21 ч, Осторожно разлагают реакционную смесь на льду. Полученный твердый продукт фильтруетс и очищаетс методом хроматографии, затем превращаетс в свой хлоргидрат.

Получают указанным образом 1,1 г хлоргидрата 5-трет-бутил-2-гидрокси-3- (1 Н-имидазол-4-ил)-метил -бензоата метила .

Выход 2,8%. Т.пл. 185-18б°С.

ЯМР-спектр (DMCO): дельта 1,3 (9Н, с), 3,45 (ЗН, с), 4,1 (2Н, с), 7,3 (1Н, с), 7,75 (2Н, м), 9,0(1 Н, с), 10,5-13,0 (ЗН).

2.2,6-Дигидрокси-3-(1 Н-имидазол-4- ил)-метил -бензоат метила.

Смешивают 95,84 г (0,57 моль) 2,6-ди- гидроксибензоата метила, 190 мл муравьиной кислоты и 51,14 г (0,38 моль) хлоргидрата 1Н-имидазол-4-метанола. Нагревают смесь до образовани флегмы и в течение 15 мин перегон ют азеотроп муравьина кислота-вода. Затем поддерживают нагревание при орошении флегмой в течение 17 ч. Реакционна смесь приливаетс к воде. Провод т экстракцию избытка 2,6-дигидроксибензоата метила толуолом, затем нейтрализуют водную фазу до рН 7-8 путем прибавлени насыщенного водного

раствора гидроксида натри . Экстрагируют дихлорметаном, сушат органические фазы на сульфате натри и выпаривают растворитель при пониженном давлении. Остаток

5 очищаетс методом хроматографии на сили- кагеле (элюент: смесь дихлорметан-мета- нол-аммиак 94:6:0,6 по объему). Получают 14,8 г2,6-дигидрокси-3-(1Н-имидазол-4-ил)- метил -бензоата метила, загр зненного сле0 дами остаточных растворителей. Выход 13%.

ЯМР-спектр (DMCO): дельта 3,72 (2Н, с), 3,81 (ЗН, с), 6,33 (1 Н, д), 6,86 (1 Н, с), 7,06 (1 Н, д), 7,73(1 Н, с), 9,5-10,2 (ЗН).

5 По причине своей нестабильности полученный указанным образом продукт примен лс в таком виде без дополнительной очистки дл приготовлени соответствующего бензамида (пример 3, 8).

0 Следующие соединени получены при помощи метода, описанного в пункте С.2.

3. 2,6-Дигидрокси-3- 1-{1 Н-имидазол-4- ил)-этил -бензоат метила.

Это соединение было получено исход

5 из хлоргидрата альфа-метил-1Н-имидазол- 4-метанола. Нагревание поддерживают в течение 19 ч при орошении флегмой. Полученный в конце остаток очищаетс методом хроматографии на силикагеле (элюент:

0 смесь дихлорметан-метанол-аммиак 95:5:0,5 об./об./об.). Выход 43%.

ЯМР-спектр (CDCI.3): дельта 1,52 (ЗН, д), 4,0 (ЗН, с), 4,48 (1 Н, к), 6,40 (1 Н, д), 6,79 (1 Н,

5 с), 7,14(1 Н,д), 7,47(1 Н, с), 10,0 (ЗН).

Полученный продукт примен лс в таком виде без дополнительной очистки дл приготовлени соответствующего бензамида (пример 3.9).

0 4. 6Тидрокси-3-(1 Н-имидазол-4-ил)-ме- тил -2-метилб.ензоат этила и 2-гидрокси-З- (1Н-имидазол-4-ил)-метил -6-метилбензоат этила.

Эти два соединени получены одновре5 менно, исход из смеси, содержащей 80,8 г (0,448 моль) 2-гидрокси-6-метилбензоата этила, 225 мл муравьиной кислоты и 51,5 г (0,382 моль) хлоргидрата 1 Н-имидазол-4-ме- танола, выдерживаемой при орошении

0 флегмой в течение 53 ч. Полученные продукты раздел ют и очищают методом хроматографии на силикагеле (элюент: смесь дихлорметан-метанол-аммиак 94:6:0,5 об/об/об).

5 Получают указанным образом 7,2 г 6- гидрокси-3-(1 Н-имидазол-4-ил)-метил -2- метилбензоата этила.

Выход 7,2%. Тпл. 42-45°С. ЯМР-спектр (): дельта 1,36 (ЗН, т),

2,34 (ЗН, с), 3,83 (2Н, с), 4,37 (2Н, к), 6,52 (1 Н,

с), 6,70 (1Н, д), 7,08(1 Н, д), 7,45(1 Н, с), 10,0 (2Н).

Одновременно получают 2,8 г 2-гидро- кси-3-(1Н-имидазол-4-ил)-метил -6-метил- бензоата этила.

Выход 2,8%. Тпл. 101-103°С.

ЯМР-спектр (CDCIs): дельта 1,40 (ЗН, т), 2,47 (ЗН, с), 3,88 (2Н, с), 4,39 (2Н, к), 6,62 (1 Н, д), 6,76 (1Н, с), 7,12(1 Н, д), 7,43(1 Н, с), 10,0 (2Н).

5. Бромгидрат 2-гидрокси-3-(1 Н-имида- зол-4-ил)-метил -4-метилбензоата метила.

5а. 5-Бром-2-гидрокси-3-(1 Н-имидазол- 4-ил)-метил -4-метилбензоат метила.

При комнатной температуре прибавл ют порци ми 95,6 г (0,71 моль) хлоргидрата 1 Н-имидазрл-4-метанола к раствору, содержащему 87 г (0,355 моль)5-бром-2-гидрокси- 4-метилбензоата метила в 900 мл концентрированной серной кислоты. Перемешивают в течение 234 ч. Затем реакционную смесь осторожно выливают на лед и довод т рН до 8 прибавлением насыщенного водного раствора гидроксида натри . Провод т экстракцию этилацетатом. Органическа фаза выпариваетс при пониженном давлении, и остаток очищаетс методом хроматографии на1,4 кг кремнезема (элю- ент:дихлорметан-метанол 9:1 об./об.). Полученный указанным образом продукт хроматографируетс второй раз на 400 г кремнезема (элюент: смесь дихлорметан- метанол-аммиак95:5:0,5 об./об./об.).

Получают 2,4 г 5-бром-2-гидрокси-3-(1Н- имидазол-4-ил)-метил -4-метилбензоата метила , достаточно чистого дл использовани в таком виде на следующей стадии.

ЯМР-спектр (DMCO): дельта 2,43 (ЗН, с),

3.90(ЗН, с), 3,96 (2Н, с), 6,62 (1 Н, с), 7,51 (1 Н, с), 7,87(1 Н, с).

5Ь. Бромгидрат 2-гидрокси-3-(1 Н-ими- дазол-4-ил)-метил -4-метилбензоата метила .

Подвергают гидрогенолизу 2,38 г (7,2 ммоль) 5-бром-2-гидрокси-3-(1 Н-имидазол- 4-ил)-метил -4-метилбензоата метила, растворенного в 70 мл метанола, под давлением водорода 4,2 бар, при комнатной температуре и в присутствии 0,7 г угл с 10%-ным содержанием паллади . Отфильтровывают катализатор и выпаривают растворитель при пониженном давлении. Получают 1,83 г бромгидрата 2-гидрокси-З- (1 Н-имидазол-4-ил)-метил -4-метилбензоа - та метила.

Выход 76%.

ЯМР-спектр (DMCO): дельта 2,34 (ЗН, с),

3.91(ЗН, с), 4,02 (2Н, с), 6,87 (1Н, с), 7,13 (1Н, с), 7,68(1 Н, д), 8,86(1 Н, с).

Полученный указанным способом продукт примен лс в таком виде без дополни- тельной очистки дл приготовлени соответствующего бензамида (пример 3.12).

Приме р 2. Получение исходных 1-(1 Н-имидазол-4-ил)-алкилбензойных кислот .

А. Путем окислени 1-(1Н-имидазол-4- 0 ил)-алкилбензолметанолов соответствующего строени .

1.2-Гидрокси-3-(1 Н-имидазол-4-ил)-ме- тил -бензойна кислота (хлоргидрат).

Нагревают при 180°С в течение 2,5 ч при

5 хорошем перемешивании 1 г 2-гидрокси-З- (1 Н-имидазол-4-ил)-метил -бензолметано - ла (полученного в соответствии с методом, описанным в примере 5.1 за вки на патент СССР № 4613197/23-04 на им фирмы-за 0 вител в присутствии 7,5 г гидроксида кали . Затем охлаждают реакционную среду и раствор ют ее в 10 мл воды. Подкисл ют водный раствор до рН от3 до 4 прибавлением концентрированной хлороводородной

5 кислоты. Отфильтровывают осадок, который при этом образуетс , сушат его и экстрагируют его изопропиловым спиртом при кипении . Затем изопропиловый спирт удал етс при пониженном давлении, а полученный

0 кристаллический осадок перекристаллизо- вывают в 5 мл 1 н.водного раствора хлороводородной кислоты. Получают 0,74 г хлоргидрата 2-гидрокси-3-(1 Н-имидазол-4- ил)-метил -бензойной кислоты,

5 Выход 58%. Т.пл. 257°С (разлагаетс ).

ЯМР-спектр (DMCO): дельта 4,08 (2Н, с), 6,09 (1Н, т), 7,37 (1Н, д), 7,52 (1Н, дд), 7,79 (1Н,дд),9,05(1Н,д).

Рассчитано, %: С 51,87 Н 4,32 N 11,0

0 Элементный анализ дл СцНю№Озх хНС

Найдено, %: С 51,68; Н 4,03; N 10,61. Это соединение примен етс в качестве исходного реагента в примере 1.А.4.

5 Аналогичным образом получили следующее соединение:

2.2Тидрокси-3- 1-(1Н-имидазол-4-ил)- этил -бензойна кислота.

Это соединение, используемое в каче- 0 стве исходного реагента в примере 1.А.2, получено исход из 2-гидрокси-3- 1-(1Н- имидазол-4-ил)-этил -бензолметанола, с выходом 50%.

Свободна кислота получаетс путем 5 нейтрализации хлоргидрата и перекристаллизации в воде. Тпл. 278-280°С.

Рассчитано, %: С 62,06; Н 5,17; N 12,07 Элементный анализ дл Ci2Hi2N203 Найдено, %: С 62,05; Н 5,37; N 11,72

Используемый в качестве исходного реагента 2-гидрокси-3- 1-(1 Н-имидазол-4-ил)- этил -бензолметанол получен в соответствии с методом, описанным в примере 5.5 за вки на патент СССР № 4613197/23-04 на им фирмы-за вител .

3. 2Тидрокси-3- 1-(1 Н-имидазол-4-ил)- пентил -бензойна кислота (хлоргидрат).

Нагревают при 170°С в течение 5 ч 3,86 г (14,8 ммоль) 2-гидрокси-3- 1-(1 Н-имидазол- 4-ил)-пентил -бензолметанола (полученного в соответствии с известным методом) в присутствии 22 г гидроксида кали . Затем охлаждают реакционную среду и раствор ют ее в 100 мг воды. Отфильтровывают нерастворимую часть и подкисл ют фильтрат до рН 10 путем прибавлени концентрированной хлороводородной кислоты, Удал ют соли , которые образуютс при этом, путем фильтровани и подкисл ют в конце фильтрат до рН 1. Осаждаетс хлоргидрат 2-гид- рокси-3- 1 -(1 Н-имидазол-4-ил)-пентил -бен- зойной кислоты. Перекристаллизовывают его в 100 мл изопропилового спирта. Получают 1,44 г продукта.

Тпл. 239-251°С.

ЯМР-спектр (DMСО): дельта 0,83 (ЗН, т), 1,17-1,32 (4Н,м), 1,94-2,07 (2Н, м), 4,43(1 Н, т), 6,79 (1Н, т), 7,33(1 Н, д), 7,47(1 Н, с), 7,69 (1Н,д), 8,84(1 Н, с).

Это соединение используетс в качестве исходного реагента в примере 1.А.З.

В. Путем гидролиза соответствующих сложных эфиров, полученных по реакции Фридел -Крафтса.

2-Гид рокси-3-(1Н-имидазол-4-ил)-мет- ил -бензойна кислота и 2-гидрокси-5-(1 Н- имидазол-4-ил)-метил -бензойна кислота (хлоргидрат).

Прибавл ют порци ми 181 г (1,35 моль) хлоргидрата 1 Н-имидазол-4-метанола к смеси, содержащей 156 мл (1,2 моль) 2-гид- роксибензоата метила и 675 г полифосфорной кислоты, нагретой до 80°С.

Выдерживают реакционную среду при хорошем перемешивании при этой температуре в течение 288 ч. Затем разлагают смесь на льду и экстрагируют 2 раза толуолом.

Водна фаза подщелачиваетс до рН 9,5 путем прибавлени 790 мл насыщенного водного раствора гидроксида натри . Неорганические соли, которые выпадают в осадок , удал ютс фильтрованием и промываютс метанолом. Этот метаноль- ный раствор после промывани объедин етс с водной фазой и смесь концентрируетс путем частичного удалени метанола. Затем подщелачивают раствор до рН 10,3 путем прибавлени 10 н.водного раствора гидроксида натри и нагревают при 100°С в тече

ние 1,5 ч дл омылени сложных эфиров. Водный раствор нейтрализуют до рН 7,5 путем прибавлени 10 н.хлористоводородной кислоты, фильтруют на норите и выпаривают фильтрат при пониженном давлении. Остаток извлекаетс три раза подр д смесью толуол-этанол и сушитс путем азеотропной перегонки. Затем он частично раствор етс в гор чем метаноле и

0 освобождаетс от нерастворимых неорганических солей путем фильтровани . Выпа- ривают фильтрат при пониженном давлении, снова раствор ют остаток в минимальном объеме воды и очищают пропуска5 нием через колонку с амберлитом 1R93 (высота колонки 60 см; диаметр 8 см; эквивалент: 2,64 моль). Избыток 1 Н-имидазол-4- метанола, а также его полимеры удал ютс водой (рН элюата варьируетс от 11,2 до

0 7,3). Затем элюирование продолжаетс посредством 4% водного раствора хлороводородной кислоты. Довод т кислотный элюат (9 л) до рН 7,7 путем прибавлени насыщенного водного раствора гидроксида натри ,

5 затем выпаривают его при пониженном давлении. Снова сушат полученный остаток путем азеотропной перегонки со смесью толуол-этанол и извлекают его посредством 1,6 л цетонитрила. Потом фильтруют. Оста0 ток на фильтре (129 г) хроматографируетс на кремнеземе (800 г, 15 мкм) после предварительного .нанесени на 300 г кремнезема 0,2-0,5 мм) (элюент: смесь этилацетат-эта- нол 75:25 об./об.).

5 Получают указанным образом 5,99 г 2- гидрокси-3-(1Н-имидазол-4-ил)-метил -бен- зойной кислоты.

Тпл. 245-252°С (вода).

Рассчитано, %: С 60,56; Н 4,59; N 12,04

0 Элементный анализ дл СцНю№Оз Найдено, %: С 60,32; Н 4,69; N 12,41 Одновременно получают 31 г 2-гидро- кси-5-(1Н-имидазол-4-ил)-метил -бензойн ой кислоты. Ее хлоргидрат, используемый в

5 качестве исходного реагента в примере 1 .А. 1, плавитс при 254-258°С(метанол-этиловый эфир).

Рассчитано, %: С 51,87; Н 4,32; N 11,0 СГ 13,40

0 Элементный анализ дл СцНю№Озх хНС

Найдено, %: С 51,65; Н 4,24; N 10,45; СГ 13,73

Пример 3. Получение 1-(1Н-имида5 зол-4-ил)-алкилбензамидов с формулой I по реакции сложных эфиров с формулой II с азотсодержащими соединени ми с формулой III.

1. Хлоргидрат 2-гидрокси-3-(1Н-имида- зол-4-ил)-метил -бензамида.

Пропускают поток газообразного аммиака , высушенного на гидроксиде кали , в раствор, содержащий 18,1 г (78 ммоль) 2- гидрокси-3-(1Н-имидазол-4-ил)-метил1-бен- зоата метила (полученного в примере 1.В.2 и в примере 1.А.4) в 400 мл безводного метанола , в течение ночи. Затем нагревают при орошении флегмой в течение 2 ч. Выпаривают реакционную смесь при пониженном давлении и очищают остаток методом хроматографии на силикагеле (элюент: смесь дихлорметан-метанол-аммиак

89,5:10:0,5 об./об./об.).

Получают 16,6 г 2-гидрокси-3-(1 Н-ими- дазол-4-ил)-метил -бензамида.

Выход 98%. Т.пл. 197,6°С. Рассчитано, %: С 60,83; Н 5,07; N 19,35 Элементный анализ дл СцНцМз02 Найдено, %: С 60,91; Н 5,06; N 19,32 Амид, обработанный в этаноле 1,2 экви- валентами хлороводородной кислоты, образует хлоргидрат с выходом 73%. Тпл. 287,8°С.

Рассчитано, %: С 52,07; Н 4,73; N 16,57; СГ 14,00

Элементный анализ дл СпНпМзОа- HCI Найдено, %; С 52,04; Н 4,76; N 16,54; СГ 13,94

2.2Тидрокси-5-(1 Н-имидазол-4-ил)-ме- тил -бензамид.

Это соединение получено, как указано выше в пункте 1, исход из хлоргидрата 2- гидрокси-5-(1Н-имидазол-4-ил)-метил -бен- зоата этила (полученного в примере 1.А.1). Реакционна смесь перемешиваетс в тече- ние 3 дней при комнатной температуре. Продукт реакции очищаетс методом хроматографии на силикагеле (элюент: дихлорметан-метанол 85:15 об./об.).

Тпл. 180-185°С (изопропиловый спирт). Рассчитано, %: С 60,83; Н 5,07; N 19,35 Элементный анализ дл СцНц№02 Найдено, %: С 60,71; Н 5,25; N 19,01

3.Хлоргидрат 2-гидрокси-3-(1 Н-имида- зол-4-ил)-метил -М-метилбензамида.

Нагревают в автоклаве при 75°С в течение 3 ч 6,96 г (30 ммоль) 2-гидрокси-3-(1 Н- имидазол-4-ил)-метил -бензоата метила (полученного в примере 1.В.2) и 60 мл метиламина , растворенного в 350 мл этанола; выпаривают смесь при пониженном давлении . Извлекают остаток водой и экстрагируют 3 раза этилацетатом.

Сушат органическую фазу на сульфате натри и выпаривают растворитель при по- ниженном давлении. Остаток очищаетс методом хроматографии на кремнеземе (элюент: смесь дихлорметан-метанол-амми- ак 91,5:8,0:0,5 об./об./об.).

После выпаривани растворителей полученный продукт кристаллизуетс в этила- цетате.Получают4,95г

2-гидрокси-3-(1Н-имидазол-4-ил)-метил -Ы -метилбензамида.

Выход 71%.

Амид, обработанный в смеси этанол- эфир 1,2 эквивалентами хлороводородной кислоты, образует 4,7 г хлоргидрата.

Выход 59%. Тпл. 233,9°С.

Рассчитано, %: С 53,83; Н 5,23; N 15,70

Элементный анализ дл С НчзМзОах хНС

Найдено, %: С 53,74; Н 5,17; N 15,55

4.2-Гидрокси-3-(1 Н-имидазол-4-ил)-ме- тил -бензогидразид.

Нагревают при орошении флегмой в течение 13 ч смесь, содержащую 10 г (43,1 ммоль) 2-гидрокси-3-(1 Н-имидазол-4-ил)- метил -бензоата метила (полученного в примере 1.В.2) и 4,31 г (86,2 ммоль) гидрата гидразина, растворенного в 100 мл метанола . Снова прибавл ют еще 2,15 г (43,1 ммоль) гидрата гидразина и поддерживают нагревание при орошении флегмой еще в течение 24 ч. Затем выпаривают смесь при пониженном давлении. Извлекают остаток посредством 100 мл воды (рН 8). Насыщают раствор хлоридом натри и провод т экстракцию этилацетатом. Сушат органическую фазу на сульфате натри и выпаривают растворитель при пониженном давлении, Остаток кристаллизуетс в этаноле. Получают 6,1 г 2-гидрокси-3-(1 Н-имидазол-4-ил)-метил -бензоги дразида, перекристаллизуемого в метаноле. Выход 61%. Тпл. 189,7°С. Рассчитано, %: С 56,88; Н 5,21; N24,13 Элементный анализ дл Найдено, %: С 56,91; Н 5,24; N 24,00

5.Хлоргидрат 2-гидрокси-3- 1-(1Н-ими- дазол-4-ил)-этил -бензамида.

Перемешивают в течение 90 ч при комнатной температуре и в присутствии каталитического количества 20 мг метилата натри раствор, содержащий 2 г 2-гидрокси-3- 1- (1 Н-имидазол-4-ил)-этил -бензоата этила (полученного в примере 1.А.2) в 50 мл метанола , в который пропускают поток газообразного аммиака. Затем выпаривают метанол и остаток очищают методом хроматографии на силикагеле (элюент: дихлорме- тан-метанол-аммиак 8,5:1:0,5 об./об./об.). Полученный продукт трансформируетс в хлоргидрат в этанольном растворе хлороводородной кислоты в присутствии диэтилово- го эфира. Получают 1,2 г хлоргидрата 2-гидрокси-3- 1 -(1 Н-имидазол-4-ил)-этил бензамида.

Выход 68%. Тпл. 240-243°С.

Рассчитано, %: С 53,83; Н 4,86; N 15,70; СГ 13,27

Элементный анализ дл С12Н1з№02Х xHCI

Найдено, %: С 54,0; Н 4,88; N 15,73; СГ 13,17

Амид, полученный после очистки методом хроматографии на силикагеле, раздел етс на два своих энантиомера путем хроматографировани на хиральной фазе альфа-гликопротеина (элюент: изопропило- вый спирт-фосфатный буферный раствор с концентрацией 0,02 М и рН 7; 1:99 об./об.). Затем превращают каждый из энантиоме- ров амида в соответствующий хлоргидрат по указанному выше способу. Получают таким образом в почти равных количествах:

а) хлс гидрат (+)-2-гидрокси-3- 1-(1Н- имидазол-4-ил)-этил -бензамида (гидрати- рованного).

Т™. 107.8°С(вода).

82,04° (с 1, метанол).

ЯМР-спектр (DMCO): дельта 1,57 (ЗН, д), 3,30 (5Н, м), 4,56 (1 Н, к), 6.83 (1 Н, т), 7,23 (1 Н, дд), 7,40(1 Н, с), 7,82 (1 Н, дд), 7,92 (1 Н, м), 8,51 (1 Н, м), 8,98 (1Н, д), 13,5-14,5 (2Н, м).

в) хлоргидрат (-)-2-гидрокси-3- 1-(1Н- имидазол-4-ил)-этил -бензамида (гидрати- рованного).

Тл . 107,4°С (вода)

-79,13° (с 1, метанол).

ЯМР-спектр: идентичен предыдущему.

6.2Тидрокси-5-(1 Н-имидазол-4-ил)-ме- тил -М-метилбензамид.

Это соединение получено в соответствии с методом, описанным в п. 3, исход из хлоргидрата 2-гидрокси-5-(1 Н-имидазол-4- ил)-метил -бензоата этила (полученного в примере 1.А.1) и метиламина. Предварительно высвобождают основание, исход из хлоргидрата, при помощи небольшого избытка (1,2 эквивалента) метилата натри . Продукт, полученный после выпаривани растворител , очищаетс методом хроматографии на силикагеле (элюент: смесь дих- лорметан-этанол-аммиак 97,5:12:0,5 V/V/V).

Выход 67% (после перекристаллизации в этаноле).

Тпл. 219,5°С

Рассчитано, %: С 62,32; Н 5,67; N 18,17 Элементный анализ дл С ЖзМзОа Найдено, %: 62,23; Н 5,65; N 18,06 ЯМР-спектр (DMCO): дельта 2,80 (ЗН,д), 3,27 (1 Н, с), 3,76 (2Н, с), 6,67 (1 Н, с), 6,80 (1 Н, д), 7,23 (1 Н, дд), 7,49 (1 Н, с), 7,87 (1 Н, д), 8,80 (1Н,с), 11,8(1Н, с).

7.5-Трет-бутил-2-гидрокси-3(1 Н-ими- дазол-4-ил)-метил -бензамид.

Это соединение получено, как указано выше в п. 2, исход из хлоргидрата 5-трет- бутил-2-гидрокси-3-(1Н-имидазол-4-ил)-метил -бензоата метила (полученного в примере 1.С.1).

Выход 22,7%. Т.пл. 209-211°С (тетра- гидрофуран). Вычислено, %: С 65,91; Н 7,00; N 15,37

Элементный анализ дл CisHigNsOa

Найдено, %: С 65,42; Н 7,06; N 15,14

8. Хлоргидрат 2,6-дигидрокси-3-(1Н- имидазол-4-ил)-метил -бензамида. Это соединение получено, как указано выше в п. 1, исход из 2,6-дигидрокси-З- (1 Н-имидазол-4-ил)-метил -бензоата метила (полученного в примере 1.С.2), Пропускают поток газообразного аммиака в 5 течение 3 ч в раствор, выдерживаемый при комнатной температуре, затем выпаривают Остаток перекристаллизовываетс в диок- сане.

Выход 81%.

0 Амид, обработанный в этаноле 1,2 эквивалентами хлороводородной кислоты, образует хлоргидрат с выходом 73%.

Тпл. 290,3°С (разлагаетс ).

Вычислено, %: С 48,99; Н 4,49; N 15,58; 5 СГ 13,15

Элеме нтный анализ дл СцНцМз02Х xHCI

Найдено, %: С 48,79; Н4,43; N 15,44; СГ 13,16

0 9. Хлоргидрат 2,6-дигидрокси-3- 1-(1Н- имидазол-4-ил)-этил -бензамида.

Это соединение получено, как указано в

п. 8, исход из 2,6-дигидрокси-3- 1-(1Н-имидазол-4-ил )-этил -бензоата метила (получен5 ного в примере 1.С.З). Остаток

перекристаллизовываетс в толуоле.

Выход 85%.

Амид, обработанный в смеси этанол- эфир 1,1 эквивалентами хлороводородной 0 кислоты, образует хлоргидрат.

Выход 77% (после перекристаллизации Е воде)

Т.пл. 288,8°С (разлагаетс ).

Вычислено, %: С 50,80; Н 4,97; N 14,81; 5 СГ 12,50

Элементный анализ дл C HisNsOsx HCi

Найдено, %: С 50,68; Н 4,92; N 14,67; CI 12,09

10. Хлоргидрат 2-гидрокси-3-(1 Н-ими- 0 дазол-4-ил)-метил -6-метилбензамида.

Нагревают в автоклаве при 60°С в течение 24 ч смесь, содержащую 2,0 г (7,68 ммоль) 2-гидрокси-3-(1 Н-имидазол-4-ил)- метил -6-метилбензоата этила (полученного 5 в примере 1.С.4) и 12 мл жидкого аммиака. Затем выпаривают смесь при пониженном давлении, Сырой амид обрабатываетс без предварительной очистки, 1,1 эквивалентами хлороводородной кислоты в смеси эта- нол-диэтиловый эфир. Хлоргидрат

перекристаллизовываетс в тетрагидрофу- ране.

Выход 49%.

ТПл. 164,8°С (смесь аморфного и кристаллического продуктов).

Вычислено, %: С 53,84; Н 5,27; N 15,70; СГ 13,24

Элементный анализ дл С12Н1зМз02х xHCI

Найдено, %: С 52,55; Н 5,30; N 15,65; СГ 13,92

11; Хлоргидрат-моногидрат М,2-дигид- рокси-3-(1Н-имидазол-4-ил)-метил -бенза мида.

К смеси, содержащей 4,1 г (25 ммоль) сульфата гидроксиамина и 25 г колотого льда, прибавл ют по капле раствор, состо щий из 5 г (125 ммоль) гидроксида натри в 15 мл воды. Когда температура возвращаетс к 0°С, прибавл ют 0,5 г твердого сульфита натри , затем 6,15 г (25 ммоль) 2-гидрокси- 3-(1 Н-имидазол-4-ил)-метил -бензоата эти- ла. После полного растворени нейтрализуют реакционную среду посредством 20,8 мл 6 н.водного раствора хлорово- дородной кислоты. Отфильтровывают полученный осадок белого цвета, промывают его водой и очищают методом хроматографии на силикагеле (элюент: смесь дихлорметан-метанол-уксусна кислота-во- да 76:20:2:2 об./об./об.). Полученный после выпаривани растворителей ацетат извлекаетс посредством 30 мл воды, к которой прибавл ют 5 мл концентрированной хлороводородной кислоты. Хлоргидрат М,2-ди- гидрокси-3-(1Н-имидазол-4-ил)-метил -бен замида осаждаетс в виде моногидрата. Получают 4,8 г чистого продукта.

Выход 55%. Т™. 240°С (разлагаетс ).

Вычислено, %: С 45,92; Н 4,90; N 14,61; СГ 12,32

Элементный анализ дл СцНц№Озх xHCI

Найдено, %: С 46,33; Н 4,63; N 14,69; СГ 12,57

Используемый в качестве исходного реагента 2-гидрокси-3-(1 Н-имидазол-4-ил)- метил -бензоат этила получен способом, описанным в примере 1в за вки на патент США Ns 4613108/23-04 на им фирмы-за ви- тел .

12. 2-Гидрокси-3-(1 Н-имидазол-4-ил)- метил -4-метилбензамид.

Это соединение получено, как указано выше в п. 2, исход из бромгидрата 2-гидро- кси-3-(1Н-имидазол-4-ил)-метил -4-метилб- ензоата метила (полученного в примере 1.С.5). Продукт реакции очищаетс методом хроматографии на силикагеле (элюент:

смесь дихлорметан-метанол-аммиак

95:5:0,5 об./об./об.). Выход 44%.

Тпл. 1 72-178°С (диэтиловый эфир). Вычислено, %: С 62,33; Н 5,62; N 18,18 Элементный анализ дл С12НчзМз02 Найдено, %: 62,42; Н 5,61; N 18,08

13.Хлоргидрат 2-гидрокси-3- 1-{1 Н-ими- дазол-4-ил)-пентил -бензамида.

Это соединение получено, как указано выше в п. 5, исход из 2-гидрокси-3- 1-{1Н- имидазол-4-ил)-пентил -бензоата этила (полученного в примере 1.А.З). Полученный после выпаривани растворител остаток раствор етс в 2.5 н.растворе хлороводородной кислоты в этаноле, и при добавлении диэтилового эфира выпадает в осадок хлоргидрат 2-гидрокси-3- 1 -(1 Н-имидазол-4- ил)-пентил -бензамида.

Выход 50%.

ЯМР-спектр (DMCO): дельта 0,83 (ЗН, т), 1,08-1,34 (4Н, м), 3,3-3,5 (2Н,м), 4,44(1 Н, т), 6,82 (1Н, т), 7,37-7,40 (2Н, С+д), 7,82 (1Н, д), 8,97 (1Н, с).

Следующие соединени были получены аналогичным способом.

14.2-Гидрокси-3-(1 Н-имидазол-4-ил)- метил -1 1,М-диметилбензамид.

Это соединение получено, как указано выше в п. 3, исход из 2-гидрокси-3-(1Н- имидазол-4-ил)-метил -бензоата метила (полученного в примере 1.В.2) и диметила- мина.

Тпл. 208°С.

Найдено, %: С 63,58; Н 6,06; N 17,09 Элементный анализ дл С1зНтбМз02 Вычислено, %: С 63,67; Н 6,12; N 17,14

15.Хлоргидрат 2-гидрокси-М- 2-гидро- ксиэтил /-3-/(1 Н-имидазол-4-ил)-метил -бе- нзамида.

Это соединение получено, как указано выше в п. 3, исход из 2-гидрокси-3-(1Н- имидазол-4-ил)-метил -бензоата метила (полученного в примере 1.В.2) и 2-гидрокси- этиламина.

Тпл. 200,6°С.

Вычислено, %: С 52,44; Н 5,38; N 14,12

Элементный анализ дл CisHisNsOsx xHCI

Найдено, %: С 52,49; Н 5,36; N 13,98

16.Хлоргидрат 3-(1 Н-имидазол-4-ил)- метил -2-метоксибензамида.

Это соединение получено, как указано выше в п. 10, исход из 3-(1 Н-имидазол-4- ил)-метил -2-метоксибензоата метила (полученного в примере 1.В.1),

Сырой амид очищаетс методом хроматографии на силикагеле (элюент: смесь дихлорметан-метанол-аммиак 89:10:1 по объему).

Амид, обработанный 1,2 эквивалентами хлороводородной кислоты в этаноле, образует хлоргидрат.

Тпл. 160,5°С (изопропиловый спирт).

Вычислено, %: С 53,84; Н 5,27; N 15,73

Элементный анализ дл С-|2Н1з№02 xHCI

Найдено, %: С 53,94; Н 5,30; N 15,81

17, 3-(1 Н-Имидазол-3-ил)-метил -2-н- пропоксибензамид.

Это соединение получено, как указано выше в п. 10, исход из 3-(1 Н-имидазол-4- ил)-метил -2-н-пропоксибензоата метила (полученного в примере 1.В.З).

Тпл. 161°С.

Вычислено, %: С 64,86; Н 6,56; N 16,22 Элементный анализ дл , Ci4Hi N302 Найдено, %: С 64,93; Н 6,60; N 16,14 1. Антиишемическа активность дл

сердца.

а) Модель острой коронарной недостаточности у возбужденной собаки.

У подключенной к прибору (пневматическа манжета вокруг нисход щей нижней коронарной артерии и внутрисердечные электроды) возбужденной собаки закупоривание коронарной артерии продолжительностью 6 мин осуществл етс посредством пневматической манжеты. По причине уменьшени подачи кислорода, что обусловлено вышеизложенным, это закупоривание вызывает ишемию миокарда, котора выражаетс на электрокардиограмме воспроизводимым и количественно оцениваемым увеличением сегмента ST. Анти- ишемическое действие соединени выражаетс уменьшением роста сегмента ST/P.R.

Дл продуктов, подвергнутых испытанию , табл. 1 показывает дозу (ДЕ20, мкмоль/кг), котора , будучи введенной внутривенным путем группе из 10 животных , вызывает среднее уменьшение по меньшей мере на 20% роста сегмента ST дл совокупности животных. В качестве ве- щества сравнени используют 1-(изопропи- ламино)-3-(1-нафтилокси)-2-пропанол (или пропанолол).

Из табл. 1 следует, что соединени , полученные в соответствии с изобретением, про вл ют замечательную антиишемиче- скую активность.

в) Испытание нагрузкой на бегущей дорожке .

В этом испытании используют группу, по меньшей мере из 4 собак, подключенных к прибору (внутрисердечные электроды), которые на уровне коронарной артерии имеют стеноз органического происхождени . Последний вызывает дисбаланс между потреб5

Ю

5

0

5 0 5

0 5

0

5

ностью и подачей кислорода, когда животных заставл ют произвести усилие. Этот дисбаланс выражаетс на электрокардиограмме ростом сегмента ST.

В испытании собака бежит со скоростью 12 км/ч по движущейс дорожке, имеющей наклон в 15°. Это максимальное усилие требуетс в течение 1 мин. В ходе испытани регистрируют увеличение сегмента ST и естественное увеличение частоты ударов сердца. Эксперимент повтор етс по меньшей мере 4 раза, и средн величина из полученных значений беретс в качестве величины сравнени (100%) дл группы животных. Затем животному предоставл етс отдых в течение как минимум 24 ч перед тем, как подвергнуть новому испытанию на усилие при действии изучаемого соединени .

Изучаемое соединение медленно ввод т (за 1 мин) внутривенным путем за 5 мин до нового испытани нагрузкой. В ходе последнего регистрируют изменени тех же самых параметров.

В табл. 2 дл указанной дозы (мкмоль/кг) приводитс среднее уменьшение , наблюдаемое дл сегмента ST и дл частоты ударов сердца (удары/мин), по отношению к значени м дл сравнени , полученным в первоначальном испытании.

Из табл. 2 следует, что соединени , полученные в соответствии с изобретением, про вл ют хорошую антиишемичегкую активность , подтвержденную значительным уменьшением сегмента ST, что также установлено и дл пропанола, но только при намного большей дозе. Более того, в противоположность пропанололу, который вызывает за то же самое врем значительное уменьшение сердечного ритма в ходе испытани , что вл етс нежелательным и вредным при сохранении нагрузки, соединени , полученные в соответствии с изобретением, не противодействуют естественному увеличению частоты ударов сердца в ходе испытани . Следовательно, они позвол ют корректно адаптироватьс сердечному ритму к нагрузке, полностью противодейству ишемии.

2. Антиишемическа активность дл мозга.

а) Глобальна и непрерывна ишеми мозга у крыс.

Крысы-самцы Wistar (200-250 г) анестезируютс путем ингал ции галотана (1-5%), содержащегос в смеси N20-02 (70:30). Две общие сонные артерии одновременно перев зываютс поблизости от места соединени внутренней сонной артерии и внешней

сонной артерии в соответствии с известной методикой.

Испытываемый продукт вводитс внут- рибрюшинным путем в первый раз за 30 мин до перев зывани , а затем спуст 30 мин и 270 мин после перев зывани .

На следующий день или через день оценивают неврологическую недостаточность у выживших животных по известному методу.

Двигательно-чувственные функции, рассматриваемые в ходе этой оценки, следующие: спонтанна подвижность, хватательный рефлекс, визуальные реакции на перемещение и на потерю опоры, рефлекс сгибани лап, рефлекс распр млени и испытание на подвешивание за хвост. Максимально возможное число очков дл животного, не подвергнутого ишемии, составл ет 17.

В табл. 3 дл соединени А, введенного внутрибрюшинным путем с дозой 0,76 мкг/кг (3,2 нмоль), приводитс среднее значение числа неврологических очков, опреде- ленных дл совокупности животных, выживших в группе свидетелей и в обработанной группе, зарегистрированных 2 дн спуст после перев зывани . Статический фактор (Р) различи , наблюдаемого между этими средними значени ми, оцениваетс по тесту Mann-Whitney.

Из табл. 3 следует, что соединение А при очень малой дозе значительно ослабл ет неврологическую недостаточность, вызванную ишемией, у обработанных животных.

в) Односторонн многофокальна ишеми мозга у крыс.

У возбужденных крыс-самцов Sprague- Dawley SPF в возрасте 8-9 недель вызывают одностороннюю непрерывную ишемию мозга (или эмболию) путем введени в поток крови правой сонной артерии 2000 микросфер после посто нной перев зки артерии правой небной мышцы.

Изучаемое соединение вводитс в первый раз за 30 мин до эмболизации, а во второй - 30 мин спуст после эмболизации, в то врем как животные-свидетели получают только физиологический раствор,

Затем животным дают отдохнуть. После 6-дневного восстановлени у выживших животных измер ют:

1) остаточную неврологическую недостаточность при помощи теста на положение тела и на походку животных (тест А, максимальное число очков 4). Этот тест оценивает:

а) ненормальное положение задних лап;

b)боковой наклон тела в ходе движени ;

c)продольное сгибание тела с одной стороны;

d)ненормальную походку.

2) Двигательно-чувственные функции

(спонтанную подвижность, хватательный рефлекс, визуальные реакции на перемещение и на потерю опоры (тест В, максимальное число очков 10).

3) Двигательно-чувственный ответ стороны тела, обладающей функциональным превосходством (противоположной стороны ) (тест С, максимальное число очков 3). Он оцениваетс при комбинировании визуального рефлекса перемещени , рефлекса ориентации головы в направлении бокового чувственного раздражител и рефлекса подошвенной кожи.

4) Потер ос зани левой стороной (тест

Д, максимальное число очков 300). В отличие от других указанных выше тестов, дл которых недостаточность тем меньше, чем больше число очков, в данном случае недостаточность тем более вна , чем ближе число очков к 300.

На 7-й день восстановлени измер ют также отек, присутствующий в различных боковых структурах мозга.

В табл. 4 дл соединени А, введенного

внутрибрюшинно дозой 0,76 мкг/кг (3,2 нмоль/кг), привод тс результаты, полученные в тестах А-Д, т.е. среднее значение числа неврологических очков, определенных дл совокупности выживших животных

из группы свидетелей и из обработанной группы, после 6-дневного восстановлени . Там также приводитс среднее отклонение (г) от веса тела, измеренное на 7-й день восстановлени .

Статистический фактор (Р) различи между средними значени ми, рассчитанными дл животных-свидетелей и обработанных животных, оцениваетс по тесту Mann-Whitney,

Табл. 4 показывает, что соединение А значительно уменьшает неврологическую недостаточность и отклонени в поведении, вызванные ишемией, и улучшает весовое развитие обработанных животных.

В табл. 5 указываетс количество воды (среднее процентное содержание), удерживаемое в различных боковых структурах мозга у животных-свидетелей и у обработанных животных, выживших на 7-й день

после эмболизации.

Полученные результаты показывают, что обработка соединением А значительно уменьшает боковую опухоль в различных изученных структурах мозга.

3, Агонистическое ог-адренергическое свойство.

а) Конкурентное св зывание с радиоактивным лигандом.

Эксперименты по конкурентному св зыванию имеют целью измерить сродство полученных в соответствии с изобретением соединений по отношению к оа-адренерги- ческим рецепторам. Эти классические эксперименты основаны на конкурентном св зывании «2-адренергическими рецепторами , с одной стороны, изучаемого соединени , а с другой стороны - радиоактивного лиганда, который в этом частном случае дл 22-адренергических рецепторов вл етс (3Н)-клонидином, известным в качестве селективного (22-адренергического агониста.

Кривые смещени св зывани ( Н)-кло- нидина определены дл дев ти концентраций соединени А, заключенных между значени ми и моль/л, и дл трех различных пленочных препаратов мозга крыс. Образцы инкубировались в течение 30 мин, затем фильтровались под вакуумом на фильтре Whatman GF/B. Фильтры промываютс три раза 5 мл буферного раствора Tris- HCI (рН 7,5 при 0°С), затем сушатс в течение 1 мин. Уровень радиоактивности измер етс в среде Econofluor (фирма NEN Corp.). Используемый (3Н)-клонидин (25,5 ci/ммоль) поставл етс фирмой Amersham, Сродство соединени А по отношению к а.т адренергическим рецепторам рассчитано исход из кривых замещени (3Н)-клониди- на. Оно выражаетс концентрацией (ICso в моль/л) соединени А, необходимой дл получени 50%-ного ингибировани св зывани радиоактивного лиганда рецепторами . Полученные результаты показывают, что соединение А имеет большое сродство по отношению к оа-адренергическим рецепторам:

ICso 8,90 ± 0,72 х моль/л.

в) Стимулирование изолированного предсерди морской свинки.

Выделение норадреналина на уровне нервных окончаний регулируетс механизмом обратного захвата пре-синаптическими ог2-адренергическими рецепторами. Этот механизм подтвержден на предсердии морских свинок.

Электростимулирование изолированного предсерди морской свинки вызывает выделение норадреналина, что выражаетс в увеличении частоты ударов сердца (тахикарди ). Эта тахикарди замедл етс аг- агонистом, например клонидином, в пропорции, котора зависит от дозы используемого агониста. Действие «2-агониста может быть ограничено присутствием 02-специфического антагониста, такого как альфа-иогимбин.

Активность in vitro соединений, полученных в соответствии с изобретением, по отношению к пре-синаптическим «2-адре- нергическим рецепторам изучено на изолированном предсердии морских свинок, электростимулированном в соответствии с

известным методом.

Изучаемое соединение испытываетс при возрастающих концентраци х, заключенных между значени ми и моль/л. Определ ют концентрацию (Сзо в

моль/л), котора вызывает 30%-ное уменьшение максимальной тахикардии, полученной первоначально в ходе Злектростимулировани предсерди в отсутствие испытываемого соединени .

Табл. 6 показывает концентрации Сзо (моль/л), полученные дл соединений, приготовленных в соответствии с изобретением , а также дл клонидина.

Из табл. 6 следует, что соединени , полученные в соответствии с изобретением, противодействуют тахикардии, вызванной электростимулированием, при очень малых концентраци х.

Вместе с тем, в присутствии альфаиогимбина с концентрацией 10е моль/л концентраци соединени А, необходима дл получени 30%-ного уменьшени тахикардии , превышает моль/л. Эти результаты хорошо показывают, что соединени ,

полученные в соответствии с изобретением,

действуют по специфическому механизму

посредством «2-агонистического действи .

с) Стимулирование подвздошной кишки

морской свинки.

Фрагменты продольных мускулов, соединенные с указателем изометрической силы , погружены в раствор Tyrode и раст гиваютс с силой в 1 г.

Электростимулирование парасимпатических нервов, соответствующих фрагментам подвздошной кишки, вызывает сокращение мышцы. Это сокращение уменьшаетс в присутствии пре-синаптиче- ского сф-агониста, и уменьшение зависит от

примен емой концентрации агониста. Этот эффект вл етс антагонистичным по отношению к одновременному присутствию ац- антагонистического соединени , такого как альфа-иогимбин.

Изучаемые соединени испытываютс при возрастающих концентраци х, заключенных между значени ми и моль/л.

Определ ют концентрацию (ICso в моль/л), котора уменьшает на 50% интенсивность сокращени мышцы.

В табл. 7 привод тс концентрации ICso (в моль/л), полученные дл соединений, приготовленных в соответствии с изобретением . Эти результаты показывают, что соединени про вл ют хорошую активность при очень малых концентраци х.

В присутствии альфа-иогимбина с концентрацией 10 моль/л концентраци соединений А или В, например, котора необходима дл уменьшени на 50% интенсивности сокращени мышцы, вл етс более высокой и становитс больше моль/л, что дает дополнительное подтверждение тому, что соединени , полученные в соответствии с изобретением, хорошо действуют на уровне пресинаптических ренергетических рецепторов.

4.Диуретическа активность. Диуретическа активность соединений,

полученных в соответствии с изобретением, определ лась у собак Blagle (6 самок и 6 самцов) посредством изучени пермутаци - ми, случайным образом пересекающимис шестью способами.

Изучаемое соединение вводитс внутривенно с возрастающими дозами 2, 6,5,20, 65 и 200 мкг/кг. В течение 3 первых часов, которые следуют за введением, измер ют объем выдел емой мочи.

Табл. 8 дл соединени А дает среднее относительное увеличение (в %) объема выдел емой мочи по отношению к группе животных , которые не получили продукт.

Результаты показывают, что минимальна активна доза, котора вызывает статистически значимое увеличение (Р 0,05) выделени мочи, составл ет 6,5 мкг/кг дл самцов, тогда как дл самок эта доза составл ет 2 мкг/кг.

5.Токсичность.

Токсичность соединений, полученных в соответствии с изобретением, определ ли у мышей-самцов NMRI при помощи теста Ирвина .

Прогрессирующие дозы изучаемого продукта ввод тс внутрибрюшинно группам из трех мышей до достижени смертельной дозы (дозы, вызывающей смерть двух животных из трех через 48 ч).

В табл. 9 приводитс смертельна доза, наблюдаема дл соединений, полученных в соответствии с изобретением. Из табл. 9 следует, что соединени , полученные в соответствии с изобретением, вл ютс очень малотоксичными.

Claims

Формула изобретени Способ получени замещенных 1-(1Нимидазол-4-ил )-алкилбензамидов общей

формулы

R -°syRi

R

где RI и Ra, которые могут быть идентичными или различными, представл ют собой (каждый) атом водорода или алкильный радикал , содержащий 1-4 атомов углерода;

Rs-атом водорода, алкильный радикал, содержащий 1-4 атомов углерода, гидро- ксиалкильный радикал, содержащий 1-4 атомов углерода, аминогруппу или гидроксильную группу;

Рд-атом водорода или алкильный радикал , содержащий 1-4 атомов углерода;

RS - атом водорода, гидроксильна группа или алкоксирадикал, содержащий 14 атомов углерода;

Re - атом водорода, гидроксильна группа или алкильный радикал, содержащий 1-4 атомов углерода, причем по меньшей мере один из символов RS и Re имеет

значение отличное от водорода,

или их солей присоединени с кислотами нетоксичными и фармацевтически приемлемыми , отличающийс тем, что провод т реакцию 1-(1Н-имидазол-4-ил)-алкилбензоата алкила формулы

Я Ј г N

7° стО-I-if 6 , н

н

где RI, R2, RS и Re имеют указанные значени ,

a RI - алкильный радикал, содержащий 1-4 атомов углерода,

с азотсодержащим соединением формулы

HN

R- RI

где Ra и R4 имеют указанные значени , и выдел ют полученные таким образом 1- (1Н-имидазол-4-ил)-алкилбензамиды в свободном виде или в виде их солей присоединени с кислотами, нетоксичными и фармацевтически приемлемыми.

27

1830063

28 Таблица 1

Примечание: Продукт:

А - хлоргидрат 2-гидрокси-3-(1Н-имидазол-4-ил)-метил -бенза- мида;

В - хлоргидрат 2-гидрокси-3- 1-(1 Н-имидазол-4-ил)-этил -бенза- мида;

С - хлоргидрат 2-гидрокси-3-(1 Н-имидазол-4-ил)-метил -М-ме- тилбензамида;

D - 2-гидрокси-3-(1 Н-имидазол-4-ил)-метил -бензогидразид;

Е - хлоргидрат 2-гидрокси-1 1-(2-гидроксиэтил)-3-(1 Н-имидазол- 4-ил)-бензамида;

F - хлоргидрата 3-(1Н-имидазол-4-ил)-метил -2-метоксибенза- мида;

G - 2-гидрокси-5-(1 Н-имидазол-4-ил)-метил -бензамид;

N - хлоргидрат 2,6-дигидрокси-3-(1Н-имидазол-4-ил)-метил - бензамида;

I - 5-трет-бутил-2-гидрокси-3-(1 Н-имидазол-4-ил)-метил -бенза- мид;

J - хлоргидрат 2-гидрокси-3-(1Н-имидазол-4-ил)-метил -6-ме- тилбензамида;

К - 2-гидрокси-3-(1 Н-имидазол-4-ил)-метил -4-метилбензамид;

L - хлоргидрат Ы,2-дигидрокси-3-(1Н-имидазол-4-ил)-метил - бензамида;

М - хлоргидрат (+)-2-гидрокси-3- 1-(1Н-имидазол-4-ил)-этил - бензамида.

Таблица 2 Максимальна нагрузка при 12 км/ч в течение 1 мин

29

n - число выживших животных.

Среднее число неврологических очков 6 дней спуст после эмболизации

п указывает число выживших животных в каждой группе.

Таблица 5

О

Количество воды в различных боковых структурах мозга (среднее %-ное содержание)

п указывает число выживших животных в каждой группе.

Уменьшение тахикардии

п n - число опытов.

1830063

30 Таблица 3

Таблица 4

Таблицаб

Таблица

Замедление сокращени подвздошной кишки морской

свинки

п - число опытов.

Таблицаб Среднее относительное увеличение выделени мочи, %

Анализ отклонений: - Р 0,05

-Р 0,01 п число животных.

Таблица 9

Токсичность