RS61659B1 - Konjugati antitelo lek anti-cmet i metode za njihovu upotrebu - Google Patents

Konjugati antitelo lek anti-cmet i metode za njihovu upotrebu

Info

Publication number
RS61659B1
RS61659B1 RS20210246A RSP20210246A RS61659B1 RS 61659 B1 RS61659 B1 RS 61659B1 RS 20210246 A RS20210246 A RS 20210246A RS P20210246 A RSP20210246 A RS P20210246A RS 61659 B1 RS61659 B1 RS 61659B1
Authority
RS
Serbia
Prior art keywords
cmet
antibody
adc
antibodies
days
Prior art date
Application number
RS20210246A
Other languages
English (en)
Inventor
Edward B Reilly
Louie Naumovski
Christian B Allan
Jieyi Wang
Mark G Anderson
Daniel E Afar
Original Assignee
Abbvie Biotherapeutics Inc
Abbvie Inc
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Abbvie Biotherapeutics Inc, Abbvie Inc filed Critical Abbvie Biotherapeutics Inc
Publication of RS61659B1 publication Critical patent/RS61659B1/sr

Links

Classifications

    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K47/00—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient
    • A61K47/50—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates
    • A61K47/51—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates the non-active ingredient being a modifying agent
    • A61K47/68—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates the non-active ingredient being a modifying agent the modifying agent being an antibody, an immunoglobulin or a fragment thereof, e.g. an Fc-fragment
    • A61K47/6835—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates the non-active ingredient being a modifying agent the modifying agent being an antibody, an immunoglobulin or a fragment thereof, e.g. an Fc-fragment the modifying agent being an antibody or an immunoglobulin bearing at least one antigen-binding site
    • A61K47/6851—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates the non-active ingredient being a modifying agent the modifying agent being an antibody, an immunoglobulin or a fragment thereof, e.g. an Fc-fragment the modifying agent being an antibody or an immunoglobulin bearing at least one antigen-binding site the antibody targeting a determinant of a tumour cell
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K47/00—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient
    • A61K47/50—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates
    • A61K47/51—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates the non-active ingredient being a modifying agent
    • A61K47/68—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates the non-active ingredient being a modifying agent the modifying agent being an antibody, an immunoglobulin or a fragment thereof, e.g. an Fc-fragment
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K47/00—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient
    • A61K47/50—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates
    • A61K47/51—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates the non-active ingredient being a modifying agent
    • A61K47/68—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates the non-active ingredient being a modifying agent the modifying agent being an antibody, an immunoglobulin or a fragment thereof, e.g. an Fc-fragment
    • A61K47/6835—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates the non-active ingredient being a modifying agent the modifying agent being an antibody, an immunoglobulin or a fragment thereof, e.g. an Fc-fragment the modifying agent being an antibody or an immunoglobulin bearing at least one antigen-binding site
    • A61K47/6849—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates the non-active ingredient being a modifying agent the modifying agent being an antibody, an immunoglobulin or a fragment thereof, e.g. an Fc-fragment the modifying agent being an antibody or an immunoglobulin bearing at least one antigen-binding site the antibody targeting a receptor, a cell surface antigen or a cell surface determinant
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K47/00—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient
    • A61K47/50—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates
    • A61K47/51—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates the non-active ingredient being a modifying agent
    • A61K47/68—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates the non-active ingredient being a modifying agent the modifying agent being an antibody, an immunoglobulin or a fragment thereof, e.g. an Fc-fragment
    • A61K47/6835—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates the non-active ingredient being a modifying agent the modifying agent being an antibody, an immunoglobulin or a fragment thereof, e.g. an Fc-fragment the modifying agent being an antibody or an immunoglobulin bearing at least one antigen-binding site
    • A61K47/6871—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates the non-active ingredient being a modifying agent the modifying agent being an antibody, an immunoglobulin or a fragment thereof, e.g. an Fc-fragment the modifying agent being an antibody or an immunoglobulin bearing at least one antigen-binding site the antibody targeting an enzyme
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/33—Heterocyclic compounds
    • A61K31/395—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins
    • A61K31/495—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having six-membered rings with two or more nitrogen atoms as the only ring heteroatoms, e.g. piperazine or tetrazines
    • A61K31/505—Pyrimidines; Hydrogenated pyrimidines, e.g. trimethoprim
    • A61K31/517—Pyrimidines; Hydrogenated pyrimidines, e.g. trimethoprim ortho- or peri-condensed with carbocyclic ring systems, e.g. quinazoline, perimidine
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K45/00—Medicinal preparations containing active ingredients not provided for in groups A61K31/00 - A61K41/00
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K45/00—Medicinal preparations containing active ingredients not provided for in groups A61K31/00 - A61K41/00
    • A61K45/06—Mixtures of active ingredients without chemical characterisation, e.g. antiphlogistics and cardiaca
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K47/00—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient
    • A61K47/50—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates
    • A61K47/51—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates the non-active ingredient being a modifying agent
    • A61K47/68—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates the non-active ingredient being a modifying agent the modifying agent being an antibody, an immunoglobulin or a fragment thereof, e.g. an Fc-fragment
    • A61K47/6801—Drug-antibody or immunoglobulin conjugates defined by the pharmacologically or therapeutically active agent
    • A61K47/6803—Drugs conjugated to an antibody or immunoglobulin, e.g. cisplatin-antibody conjugates
    • A61K47/68031—Drugs conjugated to an antibody or immunoglobulin, e.g. cisplatin-antibody conjugates the drug being an auristatin
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K47/00—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient
    • A61K47/50—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates
    • A61K47/51—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates the non-active ingredient being a modifying agent
    • A61K47/68—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates the non-active ingredient being a modifying agent the modifying agent being an antibody, an immunoglobulin or a fragment thereof, e.g. an Fc-fragment
    • A61K47/6801—Drug-antibody or immunoglobulin conjugates defined by the pharmacologically or therapeutically active agent
    • A61K47/6803—Drugs conjugated to an antibody or immunoglobulin, e.g. cisplatin-antibody conjugates
    • A61K47/68035—Drugs conjugated to an antibody or immunoglobulin, e.g. cisplatin-antibody conjugates the drug being a pyrrolobenzodiazepine
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K47/00—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient
    • A61K47/50—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates
    • A61K47/51—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates the non-active ingredient being a modifying agent
    • A61K47/68—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates the non-active ingredient being a modifying agent the modifying agent being an antibody, an immunoglobulin or a fragment thereof, e.g. an Fc-fragment
    • A61K47/6801—Drug-antibody or immunoglobulin conjugates defined by the pharmacologically or therapeutically active agent
    • A61K47/6803—Drugs conjugated to an antibody or immunoglobulin, e.g. cisplatin-antibody conjugates
    • A61K47/6811—Drugs conjugated to an antibody or immunoglobulin, e.g. cisplatin-antibody conjugates the drug being a protein or peptide, e.g. transferrin or bleomycin
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K47/00—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient
    • A61K47/50—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates
    • A61K47/51—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates the non-active ingredient being a modifying agent
    • A61K47/68—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates the non-active ingredient being a modifying agent the modifying agent being an antibody, an immunoglobulin or a fragment thereof, e.g. an Fc-fragment
    • A61K47/6835—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates the non-active ingredient being a modifying agent the modifying agent being an antibody, an immunoglobulin or a fragment thereof, e.g. an Fc-fragment the modifying agent being an antibody or an immunoglobulin bearing at least one antigen-binding site
    • A61K47/6851—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates the non-active ingredient being a modifying agent the modifying agent being an antibody, an immunoglobulin or a fragment thereof, e.g. an Fc-fragment the modifying agent being an antibody or an immunoglobulin bearing at least one antigen-binding site the antibody targeting a determinant of a tumour cell
    • A61K47/6857—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates the non-active ingredient being a modifying agent the modifying agent being an antibody, an immunoglobulin or a fragment thereof, e.g. an Fc-fragment the modifying agent being an antibody or an immunoglobulin bearing at least one antigen-binding site the antibody targeting a determinant of a tumour cell the tumour determinant being from lung cancer cell
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P35/00—Antineoplastic agents
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K16/00—Immunoglobulins [IG], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies
    • C07K16/18—Immunoglobulins [IG], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from animals or humans
    • C07K16/28—Immunoglobulins [IG], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from animals or humans against receptors, cell surface antigens or cell surface determinants
    • C07K16/2863—Immunoglobulins [IG], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from animals or humans against receptors, cell surface antigens or cell surface determinants against receptors for growth factors, growth regulators
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K2300/00—Mixtures or combinations of active ingredients, wherein at least one active ingredient is fully defined in groups A61K31/00 - A61K41/00

Landscapes

  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • Animal Behavior & Ethology (AREA)
  • Pharmacology & Pharmacy (AREA)
  • Public Health (AREA)
  • Veterinary Medicine (AREA)
  • Epidemiology (AREA)
  • Immunology (AREA)
  • Cell Biology (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Molecular Biology (AREA)
  • General Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
  • Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
  • Biochemistry (AREA)
  • Pulmonology (AREA)
  • Oncology (AREA)
  • Biophysics (AREA)
  • Proteomics, Peptides & Aminoacids (AREA)
  • Genetics & Genomics (AREA)
  • Peptides Or Proteins (AREA)
  • Medicines Containing Antibodies Or Antigens For Use As Internal Diagnostic Agents (AREA)
  • Medicinal Preparation (AREA)
  • Medicines That Contain Protein Lipid Enzymes And Other Medicines (AREA)
  • Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)
  • Oil, Petroleum & Natural Gas (AREA)

Description

Opis
1. OBLAST
[0001] Ova prijava se, između ostalog, odnosi na konjugate antitelo lek anti-cMet ("ADCe"), kompozicije koje uključuju ADCe, metode pravljenja ADCa, metode biranja određenih populacija pacijenta za lečenje karcinoma sa ADCa anti-cMet i metode korišćenja ADCa za lečenje karcinoma.
2. POZADINA PRONALASKA
[0002] Onkogene proteinske kinaze kao što je cMet predstavljaju klasu biološki važnih ciljeva za intervenciju protiv karcinoma. cMet, dobro okarakterisani receptor tirozinske kinaze kodiran sa MET proto-onkogenom, je receptor površine ćelije za faktor rasta hepatocita (HGF; Gherardi E, Birchmeier W, Birchmeier C et al. Ciljanje MET u karcinomu: obrazloženje i napredak. Nat Rev Can.
2012;12:89-103). Prekomerna ekspresija cMet se javlja u otprilike 30% - 50% čvrstih tumora uključujući nemaloćelijski karcinom pluća (NSCLC), kolorektalni karcinom (CRC) i napredni gastroezofagealni karcinom (AGEC) (Spigel DR, Ervin TJ, Ramlau RA, et al. Randomizirano ispitivanje faze II onartuzumaba u kombinaciji sa erlotinibom kod pacijenata sa uznapredovalim nemaloćelijskim karcinomom pluća. J Clin Oncol. 2013;31(32):41054114; Resnick MB, Routhier J, Konkin T et al. Receptor epidermalnog faktor rasta, cMET, B-katenin i p53 ekspresija kao prognostički indikatori u stadijumu II kolorektalnog karcinoma: studija mikromreže tkiva. Clin Can Res. 2004;10:3069-3075; Lee HE, Kim MA, Lee HS, et al. MET u karcinomima želuca: poređenje između ekspresije proteina i broja kopija gena i uticaj na ishod. Br J Can. 2012;107(2):325-333).
[0003] Prekomerna ekspresija cMet-a je povezana sa lošim ishodom pacijenta. Tako, ostaje potreba za terapijom protiv karcinoma koja cilja na karcinome čvrstih tumora okarakterisanih prekomernom ekspresijom cMet.
3. REZIME
[0004] Pronalazak obezbeđuje konjugat antitelo lek anti-cMet ("ADC"), pri čemu je konjugat leka monometil auristatin E ("MMAE"), i ADC ima sledeću strukturu:
pri čemu je Ab antitelo anti-cMet sadržavajući VH lanac koji sadrži tri CDRa, naime VH CDR #1 (SEK ID BR: 112), VH CDR #2 (SEK ID BR: 113) i VH CDR #3 (SEK ID BR: 114); VL lanac koji sadrži tri CDRa, naime VL CDR #1 (SEK ID BR: 115), VL CDR #2 (SEK ID BR: 116) i VL CDR #3 (SEK ID BR: 117); i pri čemu n ima vrednost u rasponu od 2 do 4.
[0005] Ovde opisane terapije ciljaju karcinom čvrstih tumora kod kojih je cMet prekomerno izražen u najmanje 10% populacije pacijenta koji imaju karcinom. cMet (ćelijski mezenhimsko-epitelni tranzicioni faktor) je receptor tirozinske kinaze na površini ćelije koja transdukuje signale iz vanćelijskog matriksa u citoplazmu vezujući se na faktor rasta hepatocita/HGF ligand. Ovaj receptor površine ćelije se eksprimira u epitelnim ćelijama mnogih organa, uključujući jetru, pankreas, prostatu, bubrege, mišiće i koštanu srž, tokom embriogeneze i odraslog doba. cMet reguliše mnoge fiziološke procese, uključujući ćelijsku proliferaciju i preživljavanje, migraciju i rasejanje (odbijanje ćelije-ćelije), morfogenezu tkiva, regeneraciju organa i preoblikovanje tkiva. U karcinomu i drugim patološkim procesima, cMet se često neznatno aktivira mutacijom, pojačavanjem ili prekomernom ekspresijom proteina.
[0006] Čvrsti tumor karcinoma kod kojeg je cMet prekomerno izražen u najmanje 10% populacije pacijenta uključuje karcinom pluća, kolorektalni karcinom, karcinom glave i vrata, karcinom pankreasa, karcinom želuca, glioblastom, jajnika, dojke, prostate, grlića materice i karcinom jednjaka. Ovde predstavljeni podaci prvi put pokazuju da su konjugati antitelo lek ("ADCi") koji posebno ciljaju prekomernu ekspresiju cMet pokazali anti-tumorsku aktivnost kod pacijenata kojima je dijagnostikovan nemaloćelijski karcinom pluća. Podaci koji pokazuju in vivo anti-tumorsku efikasnost ADCa anti-cMet primenjenih kao monoterapija ili kombinacija su dati u Primerima 10-14 i 16, i SLIKAMA 8-12 i 14-18.
[0007] Prekomerna ekspresija cMet-a može biti definisana imunohistohemijskim (IHC) rezultatom većim ili jednakim do 150 ako je merena prema testu iz Primera 17. Ukratko, razvijen je IHC protokol bojenja za prekomernu ekspresiju cMet-a koristeći tzv. "Ventana cMet CONFIRM (SP44)" komplet. Uzorci tkiva su obojeni sa antitelom Ventana i zatim bodovani određivanjem procenta bojenja ćelija ciljanog tkiva na različitim nivoima intenziteta od niskog do visokog. SL. 20 prikazuje reprezentativne H-rezultate korišćenjem testa opisanog u Primeru 17.
[0008] Alternativno, cMet prekomerno eksprimirajući tumorsko tkivo koristeći IHC rezultat od 0 do 3+ kao što je opisano u Primeru 17. SLIKE 19 i 21 prikazuju reprezentativne IHC rezultate korišćenjem testa opisanog u Primeru 17.
[0009] ADCi anti-cMet mogu biti primenjivani kao pojedinačni terapijski agensi (monoterapija) ili kao dodatna pomoć sa ili drugim anti-kancerogenim tretmanima i/ili terapijskim agensima, tipično ali ne nužno onima koji se koriste za lečenje vrste karcinoma koji se leči. Zapravo, ovde predstavljeni podaci ukazuju da tumori koji pokazuju rezistenciju na druge ciljane ili neciljane hemoterapije zadržavaju osetljivost na ADCe anti-cMet (videti, npr., Primer 14 i SLIKE 12A-C). Prema tome, ovde opisani ADCi anti-cMet obezbeđuju značajne prednosti u odnosu na trenutne ciljane i neciljane pristupe prema lečenju čvrstih tumorskih karcinoma koji prekomerno eksprimiraju cMet. Pomoćne terapije i/ili terapijski agensi će obično biti korišćeni u njihovoj odobrenoj dozi, načinu primene i učestalosti primene, ali mogu biti korišćeni u nižim dozama i/ili ređe. Kada se primenjuje kao monoterapija, obično se daje ADC anti-cMet prema rasporedu koji obezbeđuje terapijsku korist. Smatra se da će ADCi anti-cMet primenjivani jednom nedeljno, jednom u svake dve nedelje, jednom u svake tri nedelje, jednom u svake četiri nedelje, jednom u svakih pet nedelja, jednom u svakih šest nedelja, jednom u svakih sedam nedelja ili jednom u svakih osam nedelja, obezbediti terapijsku korist, iako više ili manje česta primena može biti korisna. Kada se daje kao dodatak drugoj terapiji i/ili agensu ili sa njima, ADC anti-cMet može biti primenjen pre, posle ili istovremeno sa drugom terapijom ili agensom.
[0010] ADCi anti-cMet mogu biti primenjeni na različite načine ili režime primene, uključujući, ali ne ograničavajući se na, intravensku infuziju i/ili injekciju i potkožnu injekciju. Primenjena količina će zavisiti od načina primene, rasporeda doziranja, vrste karcinoma koji se leči, stadijuma karcinoma koji se leči i drugih parametara kao što su starost i težina pacijenta, kao što je dobro poznato u tehnici. Konkretni uzorci rasporeda doziranja za koje se očekuje da će pružiti terapijsku korist su dati u detaljnom opisu. Generalno, očekuje se da količina ADC anti-cMet u rasponu od oko 0.005 do 15 mg/kg kada se primenjuje intravenozno nedeljno od jednom nedeljno do, i uključujući jednom na svakih osam nedelja, obezbedi terapijsku korist.
[0011] Prema tome, u jednom aspektu, predmetno otkriće obezbeđuje ADCe koji se specifično vezuju za cMet ("ADCi anticMet"). ADCi anti-cMet sadrže citotoksične i/ili citostatičke agense povezane putem veznika sa za antigen vezujući ostatak-deo koji se specifično vezuje na cMet. Kao što je ovde opisano, deo koji veže antigen je antitelo i/ili fragment koji veže antigen.
[0012] Antitela i/ili fragmenti vezivanja ADCa anti-cMet obično sadrže teški lanac koji sadrži varijabilni region (VH) koji ima tri regiona za određivanje komplementarnosti ("CDRa") ovde navedene (u redosledu N → C) kao VHCDR#1, VHCDR#2, i VHCDR#3, i laki lanac koji sadrži varijabilni region (VL) koja ima tri regiona za određivanje komplementarnosti ovde navedene (u redosledu N → C) kao VLCDR#1, VLCDR#2, i VLCDR#3. Aminokiselinske sekvence primernih CDRa, kao i aminokiselinske sekvence VHi VLregiona teškog i lakog lanca primernih anti-cMet antitela i/ili fragmenata vezivanja koji mogu sastaviti ADCe anti-cMet su ovde date. Specifični ADCi anti-cMet uključuju, ali nisu ograničeni na, ABT-700 i STI-0602.
[0013] Za terapijske svrhe, može biti poželjno koristiti ADCe anti-cMet koji vežu cMet sa afinitetom od najmanje 100 nM. Prema tome, u nekim izvođenjima, ADCi anti-cMet sadrže anti-cMet i/ili anti-cMet vezujući fragment koji vezuje cMet sa afinitetom od najmanje oko 100 nM, ili čak većim, na primer, najmanje oko 90 nM, 80 nM, 70 nM, 60 nM, 50 nM, 40 nM, 30 nM, 25 nM, 20 nM, 15 nM, 10 nM, 7 nM, 6 nM, 5 nM, 4 nM, 3 nM, 2 nM, 1 nM, 0.1 nM, 0.01 nM, li većim. Afinitet anti-cMet antitela i/ili vezujućih fragmenata može biti određen upotrebom tehnika dobro poznatih u tehnici ili opisanih ovde, kao što su na primer ELIZA, izotermalna titraciona kalorimetrija (ITC), površinska plazmonska rezonanca, protočna citometrija ili test fluorescentne polarizacije. U nekim izvođenjima, afinitet se odnosi na prividne vrednosti afiniteta EC50, izmerene prema Primeru 5. U jednom izvođenju, antitelo ima prividnu vrednost afiniteta EC50od nižu nego oko 10 nanomola/L, poželjno od oko 1 pikomol/L do 10 nanomola/L, poželjno oko 0.3 nanomola/L, kao što je određeno prema Primeru 5.
[0014] Antitela mogu biti u obliku antitela pune dužine, bispecifičnih antitela, antitela sa dvostrukim varijabilnom domenom, višelančanih ili jednolančanih antitela, nadomenskih (uključujući konstrukciju surogatnog lakog lanca), antitela sa jednim domenom, kamelizovanih antitela, scFv-Fc antitela islično. Mogu biti od, ili izvedeni iz bilo kojeg izotipa, uključujući, na primer, IgA (npr., IgA1ili IgA2), IgD, IgE, IgG (npr., IgG1, IgG2, IgG3ili IgG4), IgM, ili IgY. U nekim izvođenjima, anti-cMet antitelo je IgG (npr., IgG1, IgG2, IgG3ili IgG4). Antitela mogu biti humanog ili nehumanog porekla. Primeri nehumanog porekla uključuju, ali nisu ograničeni na poreklo sisara (npr. majmuni, glodari , koze i zečevi) ili ptičje poreklo (npr. pilići). U specifičnim izvođenjima, antitela od ADCa anti-cMet su pogodna za primenu na ljudima, kao što su, na primer, humanizovana antitela i/ili potpuno humana antitela.
[0015] Fragmenti koji vezuju antigen od ADCa anti-cMet mogu uključiti bilo koji fragment antitela sposoban da specifično veže cMet. Specifični primeri fragmenata koji vežu antitelo koji mogu biti uključeni u ADCe anti-cMet uključuju, ali nisu ograničeni na, Fab, Fab’, (Fab’)2, Fv i scFv.
[0016] Antitela i/ili fragmenti vezivanja ADCa anti-cMet mogu uključiti modifikacije i/ili mutacije koje menjaju svojstva antitela i/ili fragmenata, kao što su ona koja povećavaju poluvreme raspada, povećavaju ili smanjuju ADCC, itd., kao što je poznato u tehnici.
[0017] Citotoksični i/ili citostatički agensi ADCa anti-cMet mogu biti bilo koji agensi poznati da inhibiraju rast i/ili replikaciju i/ili ubijaju ćelije. U literaturi su poznati brojni agensi koji imaju citotoksična i/ili citostatička svojstva. Neograničavajući primeri klasa citotoksičnih i/ili citostatičkih agenasa uključuju, kao primer, ali ne ograničenje, modulatore ćelijskog ciklusa, regulatore apoptoze, inhibitore kinaze, inhibitore sinteze proteina, alkilirajuće agense, agense umrežavanja DNK, interkalacione agense, inhibitore mitohondrija, inhibitore nuklearnog izvoza, inhibitore topoizomeraze I, inhibitore topoizomeraze II, antimetabolite RNK/DNK i antimitotske agense.
[0018] U specifičnom aspektu, citotoksični i/ili citostatički agens koje sačinjava ADC anti-cMet je antimitotski agens koji prožima ćeliju, kao što je, na primer, auristatin. Specifični primeri auristatina koji prožimaju ćeliju uključuju, ali nisu ograničeni na, dolastatin-10 i monometil auristatin E ("MMAE"). U drugom specifičnom aspektu, citotoksičani i/ili citostatički agens od ADC anticMet je agens za umrežavanje DNK koji prožima ćeliju kao što je agens za umrežavanje DNK koji prožima ćelijski žleb. Specifični primeri agenasa za vezivanje žlebova DNK koja prožima ćeliju, uključuju, ali nisu ograničeni na, pirolobenzodiazepine ("PBD") i PBD dimere.
[0019] Veznici koji povezuju citotoksične i/ili citostatičke agense sa antigen vezujućim delom od ADCa anti-cMet mogu biti dugi, kratki, fleksibilni, kruti, hidrofilni ili hidrofobni u prirodi ili mogu sadržavati segmente koji imaju različite karakteristike, kao što su segmenati fleksibilnosti, segmenti krutosti itd. Veznik može biti hemijski stabilan u vanćelijskom okruženju, na primer, hemijski stabilan u krvotoku ili može uključivati veze koje nisu stabilne i oslobađaju citotoksične i/ili citostatičke agense u vanćelijskom miljeu. U nekim izvođenjima, veznici uključuju veze koje su dizajnirane za oslobađanje citotoksičnih i/ili citostatičkih agenasa nakon internalizacije ADCa anti-cMet unutar ćelije. U nekim specifičnim izvođenjima, veznici uključuju veze dizajnirane da se cepaju i/ili žrtvuju ili na neki drugi način razgrade specifično ili nespecifično unutar ćelija. Širok spektar veznika korisnih za povezivanje lekova sa antigen vezujućim delovima kao antitelima u kontekstu ADCa su poznati u tehnici. Bilo koji od ovih veznika, kao i drugi veznici, mogu biti upotrebljeni za povezivanje citotoksičnih i/ili citostatičkih agenasa sa antigen vezujućim delom ovde opisanih ADCa anti-cMet.
[0020] Broj citotoksičnih i/ili citostatičkih agenasa povezanih sa delom koji veže antigen od ADC anti-cMet može varirati (naziva se "odnos leka prema antitelu " ili "DAR"), i biće ograničen samo brojem dostupih mesta vezivanja na delu koji veže antigen i brojem agenasa povezanih sa jednim veznikom.Tipično, veznik će povezati pojedinačno citotoksični i/ili citostatički agens sa delom koji veže antigen od ADC anti-cMet. Kada ADC anti-cMet uključuje više od jednog citotoksičnog i/ili citostatičkog agensa, svaki agens može biti isti ili različiti. Sve dok ADC anti-cMet ne pokazuje neprihvatljive nivoe agregacije pod uslovima upotrebe i/ili skladištenja, razmatraju se ADCi anti-cMet sa DARi od dvadeset ili čak više. U nekim izvođenjima, ovde opisani ADCi anti-cMet mogu imati DAR u rasponu od oko 1-10, 1-8, 1-6 ili 1-4. U određenim specifičnim izvođenjima, ADCi anti-cMet mogu imati DAR 2, 3 ili 4. U drugim specifičnim izvođenjima, ADCi anti-cMet mogu imati prosečni DAR od 3.1.
4. KRATAK OPIS SLIKA
[0021] Prijavni patent ili prijava sadrži najmanje jedan crtež izveden u boji. Kopije ovog patenta ili publikaciju patentne prijave sa crtežima u boji Zavod će dostaviti na zahtev i uz plaćanje potrebne naknade.
SL. 1A-E pokazuje aminokiselinske sekvence nekoliko cMet antitela.
SL. 2A-B: illustruje ABBV-399 Postupak 1.
SL. 3 A-B illustruje ABBV-399 Postupak 2.
SL. 4 A-B prikazuje citotoksičnost ABBV-399 u ćelijskim linijama eksprimirajući cMet.
SL. 5 pruža rezultate inhibicije proliferacije sa ABBV-399 i ABT-700 PBD.
SL. 6A-B pokazuje in vitro aktivnost ABT-700 PBD u ćelijskim linijama kolorektalnog karcinoma.
SL. 7 pokazuje in vitro aktivnost ABT-700 PBD u ćelijskim linijama karcinoma mozga.
SL. 8 pokazuje aktivnost ABT-700 PBD u SW48 ksenograftovima.
SL. 9 A-C pokazuje aktivnost ABT-700 PBD i ABBV-399 u ksenograftovima pacijenata sa NSCLC.
SL. 10 A-B pokazuje aktivnost ABBV-399 u NSCLC u ksenograftovima pacijenata koristeći
Kaplan-Meier grafikona.
SL. 11 A-B upoređuje aktivnost ABT-700 naspram ABBV-399 u ksenograftovima humanog tumora; Sl, 11C pokazuje aktivnost ABBV-339 samostalno ili u kombinaciji sa FOLFIRI.
SL. 12 A-C pruža aktivnost ABBV-399 u modelima humanog ksenografta otpornog na ABT-700.
SL. 13 pruža šemu eskalacije doze ABBV-399 za ispitivanje faze l monoterapije.
SL. 14 pruža tzv. "waterfall plot" -grafikon slapa koji prikazuje najbolji procenat promene ciljanih lezija.
SL. 15 pruža grafikon slapa koji prikazuje najbolji procenat promene u ciljanim lezijama/cMet sa monoterapijom ABBV-399.
SL. 16 pokazuje broj nedelja pre kliničke progresije kod 16 pacijenata lečenih sa ABBV-399.
SL. 17 je grafikon slapa koji prikazuje najbolji procenat promene ciljanih lezija ABBV-399 u kombinaciji sa erlotinibom.
SL. 18 pokazuje brojne nedelje pre kliničkog napredovanja kod 6 pacijenata lečenih sa ABBV-399 i erlotinibom.
SL. 19 ilustruje Ventanin vodič za bodovanje SP44.
SL. 20 ilustruje izbor pacijenta na osnovu prekomerne ekspresije cMet.
SL. 21 pruža primerne IHC rezultate primenom metode iz Primera 17.
5. DETALJAN OPIS
5.1. Skraćenice
[0022] Ovde opisana antitela, fragmenti vezivanja, ADCa i polinukleotidi su opisani putem njihovih odgovarajućih sekvenci polipeptida ili polinukleotida. Ako nije drugačije naznačeno, polipeptidne sekvence su obezbeđene u orijentaciji N → C; polinukleotidne sekvence u orijentaciji 5 ’→ 3’. Za polipeptidne sekvence mogu se koristiti uobičajene skraćenice od tri ili jednog slova za genetski kodirane aminokiseline, kao što je navedeno u TABELI 1, ispod.
[0023] Određene sekvence su definisane sa strukturnim formulama koje određuju aminokiselinske ostatke koji pripadaju određenim klasama (npr. alifatične, hidrofobne itd.). Različite klase kojima pripadaju genetski kodirane aminokiseline kao što su ovde korišćene zabeležene su u TABELI 2, ispod. Neke aminokiseline mogu pripadati u više klasa. Cistein, koji sadrži sulfhidril grupu, i prolin, koji je konformacijski ograničen, nisu dodeljeni klasama.
5.2. Definicije
[0024] Ako ovde nije drugačije definisano, naučni i tehnički termini korišćeni u vezi sa ovim otkrićem imaće značenja koja obično razumeju prosečni stručnjaci iz tehnike.
5.3. Konjugati antitelo lek koji se vežu za cMet i test prekomerne ekspresije cMet
[0025] Predmetno otkriće se odnosi na konjugate antitelo lek koji se specifično vezuju za humani cMet, kompozicije koje sadrže ADCe, antitela anti-cMet i/ili fragmente vezivanja koji mogu sadržavati ADCe, polinukleotide koji kodiraju anti-cMet antitela i/ili fragmente vezivanja koji sadrže ADCe, ćelije domaćina sposobne za proizvodnju antitela i/ili fragmenate vezivanja, metode i kompozicije korisne za stvaranje antitela, fragmenate vezivanja i ADCe, i razne metode korišćenja ADCa u lečenju karcinoma.
[0026] Ovde dati podaci prvi put pokazuju da konjugati antitelo lek ("ADCi") specifično ciljajući cMet pokazuju snažne antitumorske efekte, kako sami, tako i u kombinaciji sa drugim ciljanim i neciljanim antitumorskim terapijama, protiv čvrstih tumora kod kojih je cMet prekomerno eksprimiran, naročito onih sa IHC-rezultatom od 2+ i 3+ kada su mereni imunohistohemijom sa SP44 antitelom. Podaci koji pokazuju in vivo antitumorsku efikasnost ABBV-399 primenjenog kao monoterapija su dati u primerima.
[0027] U svrhe ove prijave, uključujući i patentne zahteve, određeni test u ovde korišćenoj studiji se naziva "protokolom bojenja cMet ABBV-ADC". Ovaj protokol je detaljno opisan u Primeru 17, i rezultati su izraženi kroz H-rezultat, i mogu takođe biti izraženi i kao IHC rezultat ili drugi sistem bodovanja dobro poznat u tehnici.
[0028] Pristup H-rezultata obezbeđuje optimalnu rezoluciju podataka za određivanje varijacije u intenzitetu i procentu bojenja unutar tumora i među vrstama tumora. Takođe obezbeđuje dobar alat za određivanje pragova za pozitivno bojenje. U ovoj metodi procenat ćelija (0-100) unutar tumora sa intenzitetom bojenja u rasponu od 0-3 je obezbeđen. Ovaj protokol rezultira bojenjem cMet proteina kako u citoplazmi tako i na ćelijskoj površini/membrani. Određuje se intenzitet bojenja za svaku ćeliju u fiksnom polju (obično 100 ćelija) obrađenih biopsijom tumora, i svakoj ćeliji se pripisuje pojedinačna vrednost na sledeći način, u zavisnosti od bojenja površine/membrane:
0 = nema bojenja
1+ = slabo bojenje
2+ = umereno bojenje
3+ = jako bojenje
[0029] Da bi se dobio H-rezultat, procenat tumorskih ćelija se množi sa svakim intenzitetom i sabira. Maksimalni H-rezultat je 300 ako se 100% tumorskih ćelija označi intenzitetom 3+. H-rezultat se izračunava na sedeći način:
H-rezultat =[1 x (% ćelija 1+) 2 x (% ćelija 2+) 3 x (% ćelija 3+)]
[0030] Ovaj protokol rezultira i citoplazmatskim i membranskim cMet bojenjem. Za ovde izračunate H-rezultate je korišćeno membransko bojenje. Konačni rezultat tumorske H- ocene (0-300) daje veću relativnu težinu bojenju membrane većeg intenziteta (3+ ćelija > 2+ćelija > 1+ćelija). SL. 20 prikazuje primere rezultata bojenja za različite tumorske H-rezultate (15, 90, 180 i 290) dobijene kao "protokolom bojenja cMet ABBV-ADC".
[0031] Svaki tumor takođe može dobiti IHC ocenu IHC 0, IHC 1+, IHC 2+ ili IHC 3+. Iako i IHC i H rezultati uključuju vrednosti 0, 1+, 2+ i 3+, njih ne treba mešati. Za H-rezultat vrednosti 0, 1+, 2+ i 3+ se odnose na intenzitet bojenja pojedine ćelije. Za IHC rezultat, vrednosti 0, 1+, 2+ i 3+ se odnose na celokupno bojenje određenog područja uzorka tumora. SL. 21 prikazuje uzorke rezultata bojenja za različite rezultate tumora IHC0/1+/2+/3+ dobijene sa "protokolom bojenja cMet ABBV-ADC".
[0032] Za svrhe ovog otkrića i prateći ovde opisani protokol, ako nijedna ćelija u fiksnom polju nije obojena, vrednost koja se pripisuje tumoru je IHC 0. Ako je ukupn nivo bojanja u fiksnom polju nizak, pripisana vrednost je IHC 1+. Ako većina ćelija u fiksnom polju pokazuje umereno bojenje, pripisana vrednost je IHC 2+. Ako većina ćelija u fiksnom polju pokazuje jako bojenje, pripisana vrednost je IHC 3+.
[0033] Za potrebe ovog otkrića i prateći ovde opisani protokol, ako nijedna ćelija u fiksnom polju nije obojena, vrednost koja se pripisuje tumoru je IHC 0. Ako je ukupan nivo bojanja u fiksnom polju nizak, pripisana vrednost je IHC 1+. Ako najmanje 15% ćelija u fiksnom polju pokazuje umereno bojenje, pripisana vrednost je IHC 2+. Ako najmanje 15% ćelija u fiksnom polju pokazuje jako bojenje, pripisana vrednost je IHC 3+.
[0034] Za potrebe ovog otkrića, H-rezultat između 150 i 224 je jednak IHC oceni 2+, a H-rezultat 225 i više je jednak IHC oceni 3+.
[0035] Shodno tome, u jednom aspektu, predmetno otkriće obezbeđuje ADCe koji se specifično vežu za cMet ("ADCi anti-cMet "). ADCi anti-cMet sadrže citotoksične i/ili citostatičke agense povezana putem veznika sa delom koji veže antigen i koji specifično veže cMet. U slučaju ABBV-399, deo koji veže antigen (ABT-700) veže cMet na IPT domenu 1 humanog cMet. U drugim ADCa anticMet, deo koji veže antigen može biti bilo koji deo koji je sposoban specifičnom vezivanju cMet. U nekim aspektima, deo koji veže antigen je antitelo i/ili fragment koji veže antitelo.
[0036] U specifičnom aspektu, citotoksični i/ili citostatički agens ADC anti-cMet je antimitotski agens koji prožima ćeliju, kao što je, na primer, auristatin. Specifični primeri auristatina koji prožimaju ćeliju uključuju, ali nisu ograničeni na, dolastatin-10 i monometil auristatin E ("MMAE"). U drugom aspektu, citotoksični i/ili citostatički agens ADC anti-cMet je agens za umrežavanje DNK koji prožima ćeliju, kao što je agens za umrežavanje DNK koje veže manji žleb. Specifični primeri agenasa za vezivanje manjih žlebova DNK koji prožimaju ćelije, uključuju, ali nisu ograničena na, pirolobenzodiazepine ("PBD") i PBD dimere.
[0037] Kao što će znati stručnjaci, antitela i/ili vezujući fragmenti su "modularni" u prirodi. Tokom čitavog otkrića opisani su "moduli" antitela i/ili vezujućih fragmenata. Opisani su primerni VHCDRs, VHlanci, VLCDRs i VLlanci. Namenjeno je da svi specifični aspekti mogu biti međusobno kombinovani kao da je svaka specifična kombinacija izričito opisana pojedinačno.
[0038] Ovde otkriveni ADCi su takođe "modularni" u prirodi. Tokom celog otkrića opisani su "moduli" ADCa. Kao neograničavajući primeri opisana su specifična izvođenja antitela, veznika i citotoksičnih i/ili citostatičkih agenasa koja mogu sastaviti ADCe. Namenjeno je da svi opisani specifični aspekti mogu biti međusobno kombinovani kao da je svaka specifična kombinacija izričito opisana pojedinačno.
[0039] Stručnjaci će takođe znati da različiti ovde opisani ADCi mogu biti u obliku soli, kao što su farmaceutski prihvatljive soli. ADCi otkrića koji poseduju dovoljno kiselu, dovoljno baznu ili obe funkcionalne grupe mogu reagovati sa bilo kojom od brojnih neorganskih baza i neorganskih i organskih kiselina da bi formirali so. Alternativno, jedinjenja koja su inherentno naelektrisana, kao što su ona sa kvaternarnim azotom, mogu formirati so sa odgovarajućim kontra jonom, npr. halidom kao što je bromid, hlorid ili fluorid.
[0040] Kiseline koje su obično upotrebljene za formiranje kiselih adicionih soli su neorganske kiseline kao što su hlorovodonična kiselina, bromovodonična kiselina, jodovodonična kiselina, sumporna kiselina, fosforna kiselina i slično, i organske kiseline kao što je p-toluensulfonska kiselina, metansulfonska kiselina, oksalna kiselina, p- bromofenilsulfonska kiselina, ugljena kiselina, sukcinska kiselina, limunska kiselina itd. Bazne adicione soli uključuju one izvedene iz neorganskih baza, kao što su hidroksidi amonijuma i alkalnih ili zemnoalkalnih metala, karbonati, bikarbonati i slično.
5.4. Antitela za cMet
[0041] Ovde opisan deo koji veže antigen je antitelo ili fragment koji veže antigen.
[0042] Kao što se ovde koristi, termin "antitelo" (Ab) se odnosi na molekul imunoglobulina koja se specifično veže, ili je imunološki reaktivn sa određenim antigenom ovde, cMet-om. Antitela sadrže regione koji određuju komplementarnost (CDRa), takođe poznate kao hipervarijabilni regioni, u varijabilnim domenima i lakog i teškog lanca. Više konzerviraniji delovi varijabilnih domena se nazivaju okvirni regioni (FR). Kao što je poznato u tehnici, položaj/granica aminokiseline koja definiše hipervarijabili region antitela može varirati, u zavisnosti od konteksta i raznih definicija poznatih u tehnici. Neki položaji unutar varijabilnog domena se mogu posmatrati kao hibridni hipervarijabilni položaji po tome što se može smatrati da su ovi položaji u okviru hipervarijabilnog regiona prema jednom skupu kriterijuma, dok se pod drugim skupom kriterijuma smatra da su izvan hipervarijabilnog regiona. Jedan ili više ovih položaja se takođe mogu naći u proširenim hipervarijabilnim regionima. Svaki od varijabilnih domena nativnih teških i lakih lanaca se sastoji od četiri FR regiona, uglavnom usvajanjem konfiguracije βravni, povezane sa tri CDRa, koji formiraju petlje koje povezuju, a u nekim slučajevima formiraju deo strukture β ravni. CDRi se u svakom lancu drže zajedno u neposrednoj blizini FR regiona i, zajedno sa CDRa iz drugog lanca, doprinose formiranju mesta vezivanja antigena za antitelo. Videti Kabat et al., Sequences of Proteins of Immunological Interest (National Institute of Health, Bethesda, Md. 1987). Kao što se ovde koristi, numerisanje ostataka aminokiselina imunoglobulina vrši se prema sistemu numerisanja ostataka imunoglobulinskih aminokiselina od Kabat et al. ako nije drugačije naznačeno.
[0043] Antitela i/ili vezujući fragmenti ADCa anti-cMet generalno sadrže teški lanac koji sadrži varijabilni region (VH) koja ima tri regiona za određivanje komplementarnosti ("CDRa"), koji se ovde odnose na (u redosledu N → C) kao VHCDR # 1, VHCDR # 2 i VHCDR # 3, i laki lanac koji sadrži varijabilni region (VL) koji ima tri regiona za određivanje komplementarnosti koji se ovde odnose na (u redosledu N → C) kao VLCDR # 1, VLCDR # 2 i VLCDR # 3. Aminokiselinske sekvence primernih CDRa, kao i aminokiselinske sekvence VHi VLregiona teških i lakih lanca primernih anti-cMet antitela i/ili vezujućih fragmenata koji mogu biti uključeni u delove koji vežu antigen od ADCa anti-cMet su otkrivene ovde. Primeri ADCa anti-cMet uključuju, ali nisu ograničeni na, one koji sadrže antitela i/ili vezujuće fragmente koji uključuju ove primere CDRa i/ili VHi/ili VLsekvence, kao i antitela i/ili vezujuće fragmente koji se takmiče za vezivanje cMet-a sa takvim antitelima i/ili vezujućim fragmentima.
[0044] Antitela mogu biti u obliku antitela pune dužine, bispecifičnih antitela, antitela sa dvostrukim varijabilnim domenom, višelančanih ili jednolančanih antitela, surogat antitela (uključujući konstrukciju surogatnog lakog lanca), antitela sa jednim domenom, kamelizovanih antitela, scFv-Fc antitela i slično. Ona mogu biti, ili izvedena iz, bilo kojeg izotipa, uključujući, na primer, IgA (npr. IgA1ili IgA2), IgD, IgE, IgG (npr. IgG1, IgG2, IgG3ili IgG4), IgM ili IgY. U nekim izvođenjima, anti-cMet antitelo je IgG (npr. IgG1, IgG2, IgG3ili IgG4). Antitela mogu biti humanog ili nehumanog porekla. Primeri ne-humanog porekla uključuju, ali nisu ograničeni na poreklo sisara (npr. majmuni, glodari, koze i zečevi) ili ptičje porekloo (npr. pilići). U specifičnim izvođenjima, antitela od ADCa anti-cMet su pogodna za davanje ljudima, kao što su, na primer, humanizovana antitela i/ili potpuno humana antitela.
[0045] Antitela od ADCa anti-cMet mogu biti poliklonalna, monoklonalna, genetski inženjerirana i/ili na bilo koji drugi način modifikovana prirodno, uključujući, ali ne ograničavajući se na, himerna antitela, humanizovana antitela, humana antitela, primatizovana antitela, jednolančana antitela, bispecifična antitela, antitela dvostrukog varijabilnog domena, itd. U raznim izvođenjima, antitela sadrže celokupni ili deo konstantnog regiona antitela. U nekim izvođenjima, konstantni region je izotip izabran od: IgA (npr. IgA1ili IgA2), IgD, IgE, IgG (npr. IgG1, IgG2, IgG3ili IgG4), IgM i IgY. U specifičnim izvođenjima, antitela od ADC anti-cMet sadrže izotip konstantnog regiona IgG1.
[0046] Termin "monoklonalno antitelo" kao što se ovde koristi nije ograničeno na antitela proizvedena tehnologijom hibridoma. Monoklonalno antitelo je izvedeno iz jednog klona, uključujući bilo koji eukariotski, prokariotski ili klon faga, na bilo koji način dostupan ili poznat u tehnici. Monoklonalna antitela korisna u ovom otkriću mogu biti pripremljena koriščenjem širokog spektra tehnika poznatih u struci, uključujući upotrebu hibridoma, rekombinantnih i tehnologija prikaza faga ili kombinacije od njih. U mnogim se upotrebama predmetnog otkrića, uključujući in vivo upotrebu ADCa, uključujući anti-cMet antitela kod ljudi, mogu pogodno koristiti himerna, primatizovana, humanizovana ili humana antitela.
[0047] Termin "himerno" antitelo kao što se ovde koristi se odnosi na antitelo koje ima varijabilne sekvence izvedene iz nehumanog imunoglobulina, kao što je antitelo pacova ili miša, i konstantne regione humanog imunoglobulina, tipično izabrane iz obrasca humanog imunoglobulina. Metode za proizvodnju himernih antitela su poznate u struci. Videti, npr. Morrison, 1985, Science 229(4719):1202-7; Oi et al., 1986, BioTechniques 4:214-221; Gillies et al., 1985, J. Immunol. Methods 125:191-202; U.S. Pat. Nos. 5,807,715; 4,816,567; and 4,816,397.
[0048] Humanizovani "oblici ne-humanih (npr. mišjih) antitela su himerni imunoglobulini koji sadrže minimalne sekvence izvedene iz ne-humanog imunoglobulina. Generalno, humanizovano antitelo će sadržavati suštinski sve od najmanje, i tipično dve varijabilne domene, u kojima ili suštinski svi CDR regioni odgovaraju onima od ne-humanog imunoglobulina, i svi ili suštinski svi FR regioni su oni od humane imunoglobulinske sekvence. Humanizovano antitelo može takođe sadržavati najmanje deo konstantne regije imunoglobulina (Fc), tipično onaj za konsenzusnu sekvencu humanog imunoglobulina. Metode humanizacije antitela su poznate u tehnici. Videti npr., Riechmann et al., 1988, Nature 332:323-7; U.S. Patent Nos: 5,530,101; 5,585,089; 5,693,761; 5,693,762; i 6,180,370 to Queen et al.; EP239400; PCT publication WO 91/09967; U.S. Patent No. 5,225,539; EP592106; EP519596; Padlan, 1991, Mol. Immunol., 28:489-498; Studnicka et al., 1994, Prot. Eng. 7:805-814; Roguska et al., 1994, Proc. Natl. Acad. Sci.
91:969-973; i U.S. Patent No. 5,565,332.
[0049] "Humana antitela" su antitela koja imaju aminokiselinsku sekvencu humanog imunoglobulina i uključuju antitela izolovana iz biblioteka humanog imunoglobulina ili od transgenih životinja za jedan ili više humanih imunoglobulina i koja ne eksprimiraju endogene imunoglobuline. Humana antitela mogu biti napravljena različitim metodama poznatim u tehnici, uključujući metode prikaza faga, koristeći biblioteke antitela izvedene iz sekvenci humanog imunoglobulina. Videti U.S. Patent Nos. 4,444,887 and 4,716,111; i PCT publications WO 98/46645; WO 98/50433; WO 98/24893; WO 98/16654; WO 96/34096; WO 96/33735; i WO 91/10741. Humana antitela mogu takođe biti proizvedena upotrebom transgenih miševa koji nisu sposobni da eksprimiraju funkcionalne endogene imunoglobuline, ali koji mogu eksprimirati gene humanog imunoglobulina. Videti npr., PCT publications WO 98/24893; WO 92/01047; WO 96/34096; WO 96/33735; U.S. Patent Nos. 5,413,923; 5,625,126; 5,633,425; 5,569,825; 5,661,016; 5,545,806; 5,814,318; 5,885,793; 5,916,771; i 5,939,598. Pored toga, kompanije kao što su Medarex (Princeton, NJ), Astellas Pharma (Deerfield, IL), Amgen (Thousand Oaks, CA) i Regeneron (Tarrytown, NY) mogu biti angažovane da obezbede humana antitela usmerena na izabrani antigen koristeći sličnu tehnologiju onoj opisanoj iznad. Potpuno humana antitela koja prepoznaju izabrani epitop mogu biti generisana korišćenjem tehnike koja se naziva "vođena selekcija". U ovom pristupu, izabrano ne-humano monoklonalno antitelo, npr. mišje antitelo, je korišćeno za vođenje izbora potpuno humanog antitela koje prepoznaje isti epitop (videti, Jespers et al., 1988, Biotechnology 12:899-903).
[0050] "Primatizovana antitela" sadrže varijabilne regione majmuna i humane konstantne regione. Metode za proizvodnju primatizovanih antitela su poznate u tehnici. Videti npr., U.S. Patent Nos. 5,658,570; 5,681,722; and 5,693,780.
[0051] ADCi anti-cMet mogu sadržavati molekule antitela pune dužine (netaknute), kao i fragmente koji vežu antigen i koji su sposobni da specifično vezuju cMet. Primeri fragmenata koji se vezuju za antitela uključuju kao primer, a ne ograničenje, Fab, Fab ’, F (ab’)2, Fv fragmente, Fv fragmente sa jednim lancem i fragmente sa jednim domenom.
[0052] Fab fragment sadrži konstantni domen lakog lanca i prvi konstantni domen (CH2) teškog lanca. Fab ’fragmenti se razlikuju od Fab fragmenata dodatkom nekoliko ostataka na karboksilnom kraju CH2domena teškog lanca, uključujući jedan ili više cisteina iz zglobnog regiona antitela. F (ab’) fragmenti su proizvedeni cepanjem disulfidne veze na zglobnim cisteinima produkta varenja F(ab’)2pepsina. Dodatna hemijska pripajanja fragmenata antitela su poznata prosečnom stručnjaku sa ovog područja tehnike. Fragmentima Fab i F (ab’)2nedostaje Fc fragment netaknutog antitela, brže se uklanjaju iz cirkulacije životinja i mogu imati manje nespecifično vezivanje za tkivo od netaknutog antitela (videti, npr., Wahl et al., 1983, J. Nucl. Med. 24:316).
[0053] "Fv" fragment je najmanji fragment antitela koji sadrži potpuno prepoznavanje cilja za prepoznavanje i vezujuće mesto. Ovaj region se sastoji od dimera varijabilnog domena jednog teškog i jednog lakog lanca u čvrstoj, nekovalentnoj vezi (VH-VLdimer). U ovoj konfiguraciji tri CDRa svakog varijabilnog domena međusobno deluju da bi definisali mesto vezivanja antigena na površini VH-VLdimera. Često, šest CDRa daju antitelu specifičnost vezivanja antigena. Međutim, u nekim slučajevima čak i jedan varijabilni domen (ili polovina Fv koja sadrži samo tri CDRa specifična za cilj) može imati sposobnost da prepozna i veže antigen, iako sa nižim afinitetom od celog mesta vezivanja.
[0054] "Jednolančani Fv" ili "scFv" fragmenti koji se vežu za antitelo sadrže VHi VLdomene antitela, gde su ovi domeni prisutni u jednom polipeptidnom lancu. Generalno, Fv polipeptid dalje sadrži polipeptidni veznik između VHi VLdomena koji omogućava scFv da formira željenu strukturu za vezivanje antigena.
[0055] Antitela i/ili vezujući fragmenti ADCa anti-cMet mogu uključivati modifikacije i/ili mutacije koje menjaju svojstva antitela i/ili fragmenata, kao što su oni koji povećavaju poluvreme raspada, povećavaju ili smanjuju ADCC, itd., kao što je poznato u tehnici.
[0056] "Antitela sa jednim domenom" se sastoje od jednog VHili VLdomena koji pokazuju dovoljan afinitet za cMet. U specifičnom aspektu, antitelo sa jednim domenom je kamelizovano antitelo (Videti, npr. Riechmann, 1999, Journal of Immunological Methods 231: 25-38).
[0057] Antitela ADCa anti-cMet takođe mogu biti bispecifična antitela. Bispecifična antitela su sastavljena od monoklonalnih, često humanih ili humanizovanih antitela koja imaju specifičnosti vezivnja za dva različita epitopa na istim ili različitim antigenima. U predmetnom otkriću, jedna od specifičnosti vezivanja može biti usmerena prema cMet-u, druga može biti za bilo koji drugi antigen, npr. za protein ćelijske površine, receptor, podjedinicu receptora, antigen specifičan za tkivo, protein izveden iz virusa, virusno kodiran protein omotača, protein izveden iz bakterije ili površinski protein bakterije itd.
[0058] Antitela ADCa anti-cMet mogu biti derivatizovana. Derivatizovana antitela su obično modifikovana glikozilacijom, acetilacijom, pegilacijom, fosforilacijom, amidacijom, derivatizacijom poznatim zaštitnim/blokirajućim grupama, proteolitičkim cepanjem, povezivanjem na ćelijski ligand ili drugi protein. Može se izvršiti bilo koja od brojnih hemijskih modifikacija poznatim tehnikama, uključujući, ali ne ograničavajući se na, specifično hemijsko cepanje, acetilaciju, formilaciju, metaboličku sintezu tunikamicina, itd. Dodatno, derivat može sadržavati jednu ili više ne-prirodnih aminokiselina, npr. upotrebom tzv. "ambrx" tehnologije. Videti npr., Wolfson, 2006, Chem. Biol. 13(10):1011-2.
[0059] Antitela ili fragmenti vezivanja ADCa anti-cMet mogu biti antitela ili fragmenti čije su sekvence modifikovane tako da menjaju najmanje jednu biološku efektorsku funkciju posredovanu konstantnimm regionom. Na primer, u nekim izvođenjima, anticMet antitelo može biti modifikovano da smanji najmanje jednu biološku efektorsku funkciju posredovanu konstantnim regionom u odnosu na nemodifikovano antitelo, npr. smanjeno vezanje za Fc receptor (FcyR). Vezivanje FcyR može biti smanjeno mutiranjem segmenta konstantnog regiona imunoglobulina antitela u određenim regionima neophodnim za interakcije FcyR (videti, npr. Canfield and Morrison, 1991, J. Exp. Med. 173:1483-1491; i Lund et al., 1991, J. Immunol. 147:2657-2662). Smanjivanje vezivanja FcyR može takođe smanjiti druge efektorske funkcije koje se oslanjaju na FcyR interakcije, kao što je opsonizacija, fagocitoza i ćelijska citotoksičnost zavisna od antigena ("ADCC").
[0060] Antitela uključena u ADCe anti-cMet mogu imati niske nivoe fukoze ili im nedostaje. Antitela kojima nedostaje fukoza su u uzajamnoj vezi sa pojačanom aktivnošću ADCC, naročito pri malim dozama antitela. Videti Shields et al., 2002, J. Biol. Chem.
277:26733-26740; Shinkawa et al., 2003, J. Biol. Chem. 278:3466-73. Metode pripremanja antitela bez fukoze uključuju rast ćelija YB2/0 mijeloma pacova (ATCC CRL 1662). Ćelije YB2/0 eksprimiraju niske nivoe FUT8 mRNK, koja kodira ɑ-1,6-fukoziltransferazu, enzim neophodan za fukozilaciju polipeptida.
[0061] Antitela ili fragmenti vezivanja ADCa anti-cMet mogu uključivati modifikacije koje povećavaju ili smanjuju njihove afinitete vezivanja za neonatalni Fc receptor, FcRn, na primer, mutiranjem segmenta konstantne regije imunoglobulina u određenim regionima koji su uključeni u FcRn interakcije (videti npr. WO 2005/123780). U određenim izvođenjima, anti-cMet antitelo iz klase IgG je mutirano tako da je najmanje jedan od aminokiselinskih ostataka 250, 314 i 428 konstantnog regiona teškog lanca supstituisan sam, ili u bilo kojoj kombinaciji od njih, kao što je položaj 250 i 428, ili na položajima 250 i 314, ili na položajima 314 i 428, ili na položajima 250, 314 i 428, sa supstitucijom na položajima 250 i 428 koja je specifična kombinacija. Za položaj 250, supstitusanje aminokiselinskih ostataka može biti bilo koji aminokiselinski ostatak osim treonina, uključujući, ali bez ograničenja na, alanin, cistein, asparaginsku kiselinu, glutaminsku kiselinu, fenilalanin, glicin, histidin, izoleucin, lizin, leucin, metionin, asparagin, prolin, glutamin, arginin, serin, valin, triptofan ili tirozin. Za položaj 314, supstitusanje aminokiselinskog ostatka može biti bilo koji aminokiselinski ostatak osim leucina, uključujući, ali bez ograničenja na, alanin, cistein, asparaginsku kiselinu, glutaminsku kiselinu, fenilalanin, glicin, histidin, izolevcin, lizin, metionin, asparagin, prolin, glutamin, arginin, serin, treonin, valin, triptofan ili tirozin. Za položaj 428, supstituisanje aminokiselinskih ostataka može biti bilo koji aminokiselinski ostatak osim metionina, uključujući, ali bez ograničenja na, alanin, cistein, asparaginsku kiselinu, glutaminsku kiselinu, fenilalanin, glicin, histidin, izoleucin, lizin, leucin, asparagin, prolin, glutamin, arginin, serin, treonin, valin, triptofan ili tirozin. Specifične kombinacije pogodnih supstitucija aminokiseline su identifikovane u TABELI 1 U.S. Patent No. 7,217,797. Takve mutacije povećavaju vezivanje za FcRn, što štiti antitelo od razgradnje i povećava njegovo poluvreme-raspada.
[0062] Anti-cMet antitelo i/ili vezujući fragment mogu imati jednu ili više aminokiselina umetnutih u jedno ili više njegovih hipervarijabilnih regiona, na primer kao što je opisano
u Jung & Plückthun, 1997, Protein Engineering 10:9, 959-966; Yazaki et al., 2004, Protein Eng. Des Sel. 17(5):481-9; and U.S. Pat. App. No. 2007/0280931.
[0063] Antitela anti-cMet i/ili vezujući fragmenti sa visokim afinitetom za cMet mogu biti poželjni za terapijsku upotrebu. Prema tome, predmetno otkriće razmatra ADCe koji sadrže anti-cMet antitela i/ili vezujuće fragmente koji imaju visok afinitet vezivanja za cMet. U specifičnim izvođenjima, antitela i/ili vezujući fragmenti vežu cMet sa afinitetom od najmanje oko 100 nM, ali mogu pokazivati i veći afinitet, na primer, najmanje oko 90 nM, 80 nM, 70 nM, 60 nM, 50 nM, 40 nM, 30 nM, 25 nM, 20 nM, 15 nM, 10 nM, 7 nM, 6 nM, 5 nM, 4 nM, 3 nM, 2 nM, 1 nM, 0,1 nM, 0,01 nM ili čak više. U nekim izvođenjima, antitela vežu cMet sa afinitetom u rasponu od oko 1 pM do oko 100 nM ili afinitetom u rasponu između bilo koje od prethodnih vrednosti.
[0064] Afinitet antitela i/ili vezujućih fragmenata za cMet može biti određen upotrebom tehnika dobro poznatih u struci ili opisanih ovde, kao što su, na primer, ali ne ograničavajući se na, ELIZA, izotermnu titracionu kalorimetriju (ITC), površinsku plazmonsku rezonancu, testove protočne citometrije ili fluorescentne polarizacije. U jednom izvođenju, afinitet se odnosi na prividne vrednosti afiniteta EC50izmerene prema Primeru 5.
[0065] U kontekstu ovog otkrića, antitela anti-cMet mogu poslužiti u najmanje dve različite svrhe. Antitela anti-cMet se koriste u dijagnostičke svrhe, pomažući i usmeravajući izbor pacijenta. Na primer, ova antitela anti-cMet mogu biti korišćena za imunohistohemijske testove tumorskih biopsija dobijenih od pacijenata koji će se lečiti ili biti pod tretmanom. Prosečan stručnjak sa ovog područja tehnike je upoznat sa tehnikama biranja određenog antitela u dijagnostičke svrhe radi ispitivanja nivoa ekspresije cMet proteina u biopsijama tumora. Obično, uzorci su boduju pod jednim ili više vodiča za bodovanje, uključujući IHC ocene 0/1+/2+/3+ ili H-ocene. Otkriće detaljno opisuje jedan primer takvog dijagnostičkog testa koji je komercijalno dostupan od Ventane. Antitelo Ventana SP44 i antitela sa sličnim svojstvima mogu biti napravljena ili nabavljena od drugih dobavljača, a protokol prilagođen tako da metod ima jednaku ili bolju dijagnostičku snagu kao Ventana test. Pored toga, antitela anti-cMet osim SP44 mogu biti korišćena za ovu svrhu. Prosečan stručnjak sa ovog područja tehnike bi znao kako pravilno prilagoditi protokol novom antitelu kako bi dobio dijagnostički test za nivoe ekspresije cMet. Prateća dijagnostika postoji za niz drugih lečenja karcinoma koje je odobrila FDA i nalaze se na nivou uobičajene veštine. FDA održava listu pratećih dijagnostičkih testova koje je odobrila FDA, na primer, www.fda.gov/.
[0066] Primeri antitela anti-cMet koja mogu biti korišćena uključuju, na primer, dijagnostička antitela otkrivena u U.S. Patent No.
8,673,302 (224D10 i 221C9) i U.S. Patent No. 9,120,852 (227D3 i 205A5). U jednom aspektu otkrića, antitelo je 227D3.
[0067] 227D3 se izlučuje hibridom deponovan u CNCM 18. Novembra 2009. pod brojem I-4247.
[0068] U drugim aspektima, antitela anti-cMet su primenjena u svrhe lečenja, bilo kao komponente konjugata antiteo lek (ADCa), bilo pre/posle/istovremeno sa primenom ADCa.
5.6.1 ABT-700 i srodna antitela za svrhe lečenja
[0069] Za svrhu antitela iz ovog odeljka, CDRi su identifikovani prema IMGT sistemu numerisanja.
[0070] ABBV-399 je ADC koji se sastoji od cMet ciljanog antitela ABT-700 (PR-1266688, h224G11) konjugovanog sa snažnim citotoksinom MMAE kroz valin citrulin (vc) veznik. ADC se veže na cMet na površini tumorskih ćelija, internalizuje se, i zatim oslobađa MMAE što dovodi do inhibicije funkcije mikrotubula i prekida kritičnih ćelijskih procesa i smrti. ABBV-399 je snažno citotoksičan za ćelije karcinoma sa prekomero izraženim cMetom ili pojačanim MET-om i pokazuje antitumorsko delovanje na ksenograftovima humanog tumora. Takođe je dokazana aktivnost ABBV-399 protiv ABT-700- otpornih tumora (videti npr. Primer 14).
ABT-700
[0071] ABT-700 je humanizovana verzija mišjeg monoklonalnog antitela 224G11, koje je prvi put otkriveno u U.S. Patent br.
8,329,173. ABT-700 je "humanizovani" rekombinantni IgG1 (objavljen kao 224G11 [TH7 Hz3] u U.S. Patent br. 8,741,290) koji cilja jedinstveni epitop cMet smešten unutar domene 1 imunoglobulin-pleksin-transkripcionog faktora homolognog (IPT) domena 1, rezultirajući u blokadi i HGF-zavisnoj i HGF-nezavisnoj cMet signalizaciji. ABT-700 se takmiči za vezivanje za cMet sa antitelima usmerenim protiv SEMA oštrice 5 (i obrnuto), ali ne i sa antitelima usmerenim protiv oštrica 1-3 ili IPT 2-3. Suprotno tome, 5D5 (dvovalentni progenitor jedne ruke onartuzumaba, o kojem se govori u nastavku) veže se na oštricu 5 domena SEMA.
[0072] CMet-ADCi iz ovog otkrića obuhvata bilo koje antitelo koje sadrži teški lanac koji sadrži CDRH1, CDR-H2 i CDR-H3 sadržavajući respektivno aminokiselinsku sekvencu SEK ID BR. 1, 2 i 3; i laki lanac sadržavajući CDR-L1, CDR-L2 i CDR-L3 sadržavajući respektivno aminokiselinsku sekvencu SEK ID BR. 5, 6 i 7, U.S. Patent br. 8,741,290. To su CDRi -originalnog mišjeg antitela 224G11, kao što je definisano na osnovu IMGT sistema numerisanja.
[0073] Kao što je definisano u IMGT nomenklaturi, CDR sekvence ABT-700 sadrže sledeće sekvence:
CDR-H1: GYIFTAYT (SEK ID BR: 72)
CDR-H2: IKPNNGLA (SEK ID BR: 73)
CDR-H3: ARSEITTEFDY (SEK ID BR: 74)
CDR-L1: ESVDSYANSF (SEK ID BR: 75)
CDR-L2: RAS (SEK ID BR: 76)
CDR-L3: QQSKEDPLT (SEK ID BR: 77)
[0074] U jednom izvođenju, varijabilni region teškog lanca 224G11 [TH7 Hz3] sadrži SEK ID BR. 4 U.S. Patent br. 8,741,290: QVQLVQSGAEVKKPGASVKVSCKASGYIFTAYTMHWVRQAPGQGLEWMG WIKPNNGLANYAQKFQGRVTMTRDTSISTAYMELSRLRSDDTAVYYCARSEITTEFDYWGQ GTLVTVSS (SEK ID BR: 78)
i varijabilni region lakog lanca sadrži SEK ID Br. 10 U.S. Patent No. 8,741,290:
DIVMTQSPDSLAVSLGERATINCKSSESVDSYANSFLHWYQQKPGQPPKLLIYRASTRESGVPDRFSG SGSGTDFTLTISSLQAEDVAVYYCQQSKED PLTFGGGTKVEIKR(SEK ID BR: 79)
[0075] U drugom izvođenju, varijabilni region teškog lanca od 224G11 [TH7 Hz3] sadrži:
QVQLVQSGAEVKKPGASVKVSCKASGYIFTAYTMHWVRQAPGQGLEWMG WIKPNNGLANYAQKFQGRVTMTRDTSISTAYMELSRLRSDDTAVYYCAR SEITTEFDYWGQGTLVTVSS (SEK ID BR: 80)
i varijabilni region lakog lanca sadrži:
DIVMTQSPDSLAVSLGERATINCKSSESVDSYANSFLHWYQQKPGQPPK LLIYRASTRESGVPDRFSGSGSGTDFTLTISSLQAEDVAVYYCQQSKED PLTFGGGTKVEIK
(SEK ID BR: 81)
[0076] U drugom izvođenju, antitelo [224G11] [TH7 Hz3] sadrži kompletan teški lanac sadržavajući aminokiselinsku sekvencu SEK ID Br. 37 iz US Patent Br. 8,741,290 i kompletan laki lanac sadržavajući aminokiselinsku sekvencu SEK ID Br. 40 U.S. Patent Br.
8,741,290. Modifikovani zglobni region ima sekvencu SEK ID BR: 170.
[0077] U nekim izvođenjima, antitelo anti-cMet sadrži varijabilni region teškog lanca sadržavajući SEK ID Br. 4 U.S. Patent br.
8,741,290:
(SEK ID BR: 78) povezan sa bilo kojim konstantnim regionom teškog lanca;
i varijabilnim regionom lakog lanca sadržavajući SEK ID br. 10 U.S. Patent br. 8,741,290:
DIVMTQSPDSLAVSLGERATINCKSSESVDSYANSFLHWYQQKPGQPPKLLIYRASTRESGVPDRFSGSGSGTD FTLTISSLQAEDVAVYYCQQSKED PLTFGGGTKVEIKR (SEK ID BR: 79) povezan sa bilo kojim konstantnim regionom lakog lanca. Primeri pogodnih konstantnih regiona teškog i lakog lanca su dati ispod.
[0078] U nekim izvođenjima, antitelo anti- cMet sadrži varijabilni region teškog lanca sadržavajući SEK ID Br. 4 U.S. Patent br.
8,741,290:
(SEK ID BR: 80) povezan sa bilo kojim konstantnim regionom teškog lanca;
i variabilnim re ionom lako lanca sadržavaući:
(SEK ID BR: 81) povezan sa bilo kojim konstantnim regionom lakog lanca.
Primeri pogodnih konstantnih regiona teškog i lakog lanca su dati ispod.
[0079] U nekim izvođenjima, anti-cMet antitelo i/ili vezujući fragment ADC anti-cMet je IgG1.
[0080] U nekim izvođenjima, anti-cMet antitelo od ADC anti-cMet sadrži teški lanac koji ima konstantni region sadržavajući ili se sastojeći od:
(SEK ID BR: 82)
[0081] U nekim izvođenjima, anti-cMet antitelo od ADC anti-cMet sadrži laki lanac koji ima konstantni region sadržavajući ili se sastojeći od:
[0082] U nekim izvođenjima, anti-cMet antitelo od ADC anti-cMet sadrži teški lanac koji ima konstantni region sadržavajući ili se sastojeći od:
(SEK ID BR: 84)
i laki lanac koji ima konstantni region sadržavajući ili se sastojeći od:
[0083] U nekim izvođenjima, teški lanac antitielo anti-cMet antitielo (ABT-700) od ADC anti-cMet sadrži ili se sastoji od (konstantni regioni su podebljani; CDRi su podvučeni (CDR sekvence numerisane -Kabat prikazane kao SEK ID BRS 112- 114, redom prema pojavljivanju)):
(sekvence pune dužine prikazane kao SEK ID BR:86)
i laki lanac sadrži ili se sastoji od (CDR sekvenci prikazanih kao SEK ID BRS 115-117, redom prema pojavljivanju):
(sekvence pune dužine prikazane kao SEK ID BR:87)
[0084] U nekim izvođenjima, teški lanac antitielo anti-cMet od ADC anti-cMet sadrži ili se sastoji od varijabilnog regiona (aminokiselina 1-118 iz SEK ID BR: 88), konstantnog regiona (prikazanog podebljano) i CDRi (podvučeno: CDR sekvence prikazane kao SEK ID BRI 118-120, redom, prema pojavljivanju):
(sekvence pune dužine teškog lanca prikazane kao SEK ID BR:88)
i laki lanac sadrži ili se sastoji od varijabilnog regiona (aminokiseline 1-110 u SEK ID BR: 89), konstantnog regiona (prikazanog podebljano) i CDR sekvenci (podvučene i prikazane kao SEK ID BRI 121-123, redom, prema pojavljivanju):
(sekvence pune dužine lakog lanca prikazane kao SEK ID BR:89)
[0085] U jednom izvođenju, antitelo je ABT-700, i teški lanac je kodiran sledećom nukleotidnom sekvencom (sekvenca punedužine prikazana kao SEK ID BR: 90):
[0086] Sekrecija signalnog peptida u podebljanim VELIKIM slovima.
[0087] Uključuje konačni stop kodon (TGA)
Konstantni region je podebljan
CDRi su podvučeni (CDR sekvence prikazane kao SEK ID BRI 124-126, redom prema pojavljivanju)
[0088] U jednom izvođenju, antitelo je ABT-700, i laki lanac je kodiran sledećom nukleotidnom sekvencom (sekvenca punedužine prikazana kao SEK ID BR: 91):
[0089] Sekrecija signalnog peptida u podebljanim VELIKIM slovima.
[0090] Uključuje konačni stop kodon (tga)
Konstantni region je podebljan
CDRi su podvučeni (CDR sekvence prikazane kao SEK ID BRI 127-129, redom prema pojavljivanju)
[0091] U jednom izvođenju, ovde se odnosi na ABBV399, sekvenca antitela teškog lanca je predstavljena sa SEK ID BR: 88, sekvenca lakog lanca je predstavljena sa SEK ID BR: 89 konjugovana na monometil auristatin E (MMAE) kroz valin citrulin (vc) veznik.
[0092] Sekvenca ABT-700 PBD, sadržavajući sekvencu ABT-700 koja nosi mutaciju S238C (ovde se takođe odnosi na ABT-700 (S238C)-PBD) prema Kabat numerisanju, je kao što sledi (CDRi su podvučeni; sistem numerisanja je Kabat; i mutacija S238C je predstavljena sa C (podebljano, kurziv i podvučeno):
Aminokiselinska sekvenca (10 AA po grupi, 5 grupa po liniji)
[0093] Teški lanac (SEK ID BR: 171) (podvučene CDR sekvence prikazane kao SEK ID BRI: 173-175, redom prema pojavljivanju):
[0094] Laki lanac (SEK ID BR: 172) (podvučene CDR sekvence prikazane kao SEK ID BRI: 176-178, redom prema pojavljivanju):
[0095] Prema tome, antitelo ABT-700 PBD sadrži dva PBD molekula lek-veznik konjugovana na cys inženjeriran mAb ABT-700 (S238C) i ima težak lanac SEK ID BR: 171 i laki lanac SEK ID BR: 172.
[0096] U jednom izvođenju, C-terminalna lizin aminokiselina na teškom lancu 224G11 [TH7 Hz3] je inženjerirana tako da eliminiše heterogenost na C-terminusu zbog nepotpunog cepanja lizina. U ABT-700, teški lanac je post-translaciono modifikovan dodavanjem N-vezanih glikana na asparagin-296. Glavni glikani su fukozilovani biantenarni oligosaharidi koji sadrže nula, jedan ili dva ostatka galaktoze. Pored toga, na N-terminusu teškog lanca je ostatak glutamina, koji može proći spontanu ciklizaciju da bi se formirao ostatak piroglutamata.
[0097] Originalno mišje antitelo 224G11 je dalje himerizovano i humanizovano. Procesi himerizacije i humanizacije su detaljno opisani u U.S. Patent br. 8,741,290. Tokom procesa humanizacije mišjeg antitela 224G11, himerni oblik 224G11 Mab (224G11chim/IgG1), što znači varijabilni domen (VH+VL) iz m224G11 kombinovan sa humanim konstantnim domenom IgG1/kappa, dao je snažnu (17% maksimalnog efekta HGF) agonističku aktivnost povezanu sa smanjenom efikasnošću antagonista (54% inhibicije maksimalnog efekta HGF u poređenju sa m224G11 koji daje 75% inhibicije maksimalnog efekta HGF).
Tri humanizovana oblika 224G11 Mab, [224G11]Hz1/IgG1, [224G11]Hz2/IgG1 i [224G11]Hz3/IgG1, takođe konstruisani na humanoj IgG1/kappa okosnici, dali su takođe smanjenu efikasnost antagonista i značajnu agonističku aktivnost (11 do 24% maksimalnog nivoa HGF) u poređenju sa mišjim 224G11.
[0098] Zglobne regije nekih od humanizovanih oblika antitela 224G11 su modifikovane, kao što je detaljno opisano u U.S. Patent br. 8,741,290. Dobijena antitela, čiji su ADCi takođe unutar obima ovog otkrića, uključuju 224G11 [TH7Hz3].
[0099] Antitelo h224G11/ABT-700 se odnosi na humanizovani oblik 224G11[TH7 Hz3]. Ovo antitelo predstavlja antitelo ABT-700 koje je deo ABBV-399 ovog otkrića. Biološke aktivnosti antitela ABT-700, ili h224G11 su opširno okarakterisane u U.S. Patent br.
8,741,290.
[0100] Primerne verzije drugih himerizovanih i humanizovanih verzija konjugata antitelo lek 224G11 koje spadaju unutar obima ovog otkrića su one koje se odnose na U.S. Patent br. 8,741,290 kao antitela [224G11] [IgG2Hz1], [224G11] [IgG2Hz2];
[224G11] [IgG2Hz3]; [224G11] [TH7Hz1]; [224G11] [TH7z2]; [224G11] [TH7Hz3]; [224G11] [IgG2chim]; [224G11] [TH7chim];
[224G11] [C1]; [224G11] [C2]; [224G11] [C3]; [224G11] [C5]; [224G11] [C6]; [224G11] [C7]; [224G11] [C8]; i [224G11] [C9].
[0101] Drugi primeri uključuju antitela [224G11] [Δ1-3]; [224G11] [C7A6];[224G11] [C6A9];[224G11] [C2A5-7]; [224G11] [C5A2-6];[224G11] [C9A2-7]; [224G11] [ΔS-6-7-8];[224G11] [IgG1/IgG2];[224G11] [IgG2Hz1];[224G11] [IgG2Hz2];[224G11] [IgG2Hz3];[224G11] [TH7Hz1];[224G11][TH7Hz2];[224G11] [TH7Hz3]; [224G11] [TH7chim]; [224G11] [MHchim]; [224G11] [MUP9Hchim]; i [224G11] [MMCHchim].
[0102] U obe ove serije antitela, prva zagrada se odnosi se na naziv antitela koje je modifikovano (tj. 224G11), a druga zagrada identifikuje specifičnu modifikaciju antitela, od kojih većina odgovara promenama u zglobnom regionu, prema IMGT jedinstvenom numerisanju za C-domene. Simbol Δ znači brisanje. Specifični detalji svake modifikacije se mogu naći u U.S. Patent br. 8,741,290.
[0103] Ovde su opisani ADCi anti-cMet, antitelo anti-cMet i/ili vezujući fragment koji sadrži ADC anti-cMet pogodan za primenu na ljudima. U specifičnojm izvođenju, antitelo anti-cMet je humanizovano.
[0104] U nekim izvođenjima, antitela anti-cMet i/ili vezujući fragmenti koji sadrže ADC anti-cMet takmiče se za vezivanje cMet na ćelijama koje eksprimiraju cMet, ili homologiju imunoglobulin-pleksin-transkripcionog faktora (IPT) humanog cMet-a ili na Met-Fc ili inženjerirani rekombinantni cMet u čvrstoj fazi, u in vitro testovima sa referentnim antitelom. Referentno antitelo može biti bilo koje antitelo koje se specifično veže za homologiju imunoglobulin-pleksin-transkripcioni faktor (IPT) humanog cMet-a. U jednom specifičnom izvođenju, referentno antitelo je mišji 224G11. U drugom specifičnom izvođenju, referentno antitelo je ABT-700.
[0105] Testovi za takmičenje uključuju, ali nisu ograničene na, imunološki test označen radioaktivnim materijalom (RIA), enzimski imunološki test (ELIZA), sendvič ELIZA, testove protočne citometrije i testove površinske plazmonske rezonance. Poželjna metoda je ona opisana u Basilico C, Hultberg A, Blanchetot C, de Jonge N, Festjens E, Hanssens V, Osepa SI, De Boeck G, Mira A, Cazzanti M, Morello V, Dreier T, Saunders M, de Haard H, Michieli P. Four individually druggable MET hotspots mediate HGF-driven tumor progression. J Clin Invest. 2014 Jul;124(7):3172-86. doi: 10.1172/JCI72316. Epub 2014 May 27.
[0106] U testu takmičenja antitela između referentnog antitela i testnog antitela (bez ozira na vrste ili izotip), prvo se referenca može označiti sa prepoznatljivom oznakom, kao što je fluorofor, biotin ili enzimske, ili radioaktivne oznake da bi se omogućilo naknadno otkrivanje. U ovom slučaju, ćelije koje eksprimiraju cMet ili vanćelijski domen cMet-a (ili njegov pod-deo), inkubiraju se sa neobeleženim testnim antitelom, dodaje se označeno referentno antitelo i meri intenzitet označene veze. Ako se testno antitelo takmiči sa označenim referentnim antitelom vezujući se na isti, proksimalni ili preklapajući epitop, intenzitet detekcionog signala će biti smanjen u odnosu na kontrolnu reakciju izvedenu bez testnog antitela.
[0107] U jednom testu takmičenja antitela, koncentracija obeleženog referentnog antitela koja daje 80% maksimalnog vezivanja ("konc80%") u uslovima testa (npr., određena gustina ćelija ili određena koncentracija vanćelijskog domena cMet/cMet ili njegovog dela) prvo se odredi, a test kompeticije-takmičenja se izvodi sa 10X koncentracija80%neobeleženog antitela i konc80%obeleženog referentnog antitela.
[0108] U drugom primeru izvođenja testa kompeticijske protočne citometrije, ćelije koje eksprimiraju cMet su inkubirane sa titracionom serijom antitela koja sadrže rastuće koncentracije neobeleženog testnog antitela naspram fluorescentno obileženog anti-cMet referentnog antitela. Obeleženo referentno anti-cMet antitelo se koristi u fiksnoj koncentraciji X (na primer, X = 1 µg/ml), i neobeleženo testno antitelo se koriste u rasponu koncentracija (na primer, od 10<-4>X do 100X). Ćelije ili vanćelijski domen cMet/cMet ili pod-deo od njih je istovremeno inkubiran sa oba neobeležena testna antitela i sa obeleženim referentnim antitelom. Podatak protočne citometrije je normalizovan u odnosu na samo fluorescentno obeleženo referentno antitelo, gde se intenzitetu fluorescencije uzorka izvedenog bez neobeleženog testnog antitela dodeljuje 100% vezivanje. Ako se testno antitelo takmiči za vezivanje cMet-a sa obeleženim referentnim antitelom, test izveden sa jednakom koncentracijom svakog (na primer, 1 µg/ml neobeleženog testnog antitela i 1 µg/ml obeleženog referentnog antitela) daće približno 50% smanjenja intenziteta fluorescencije u poređenju sa 100% kontrolom, što ukazuje na približno 50% vezivanja. Upotreba obeleženog referentnog antitela u koncentraciji X i neobeleženog testnog antitela koje se takmiči za vezivanje cMet-a u koncentraciji od 10X daće približno 90% smanjenja vezivanja u odnosu na 100% kontrolu, što ukazuje na približno 10% vezivanja.
[0109] Inhibicija može biti izražena kao konstanta inhibicije ili Ki, koja se izračunava prema sledećoj formuli:
Ki= IC50/ (1+ [referentna koncentracija Ab]/Kd),
gde je IC50koncentracija testnog antiela koja daje 50% smanjenja u vezivanju referentnog antitela, i Kdje konstanta disocijacije referentnog antitela, mera njegovog afiniteta za cMet. Antitela koja se takmiče sa referentnim cMet antitelima mogu imati Kiod 10 pM do 100 nM pod ovde opisanim uslovima testa.
[0110] U raznim aspektima, smatra se da se testno antitelo takmiči sa referentnim antitelom ako smanjuje vezivanje referentnog antitela za ćelije koje eksprimiraju cMet ili cMet/cMet vanćelijskog domena ili njegov pod-deo za najmanje oko 20% ili više, na primer do najmanje oko 20%, 30%, 40%, 50%, 60%, 70%, 80%, 90%, 95% ili čak i više, ili u procentima u rasponu između bilo koje od prethodnih vrednosti, pri referentnoj koncentraciji antitela koja je 80% maksimalnog vezivanja pod specifičnim uslovima korišćenog testa, i koncentraciji test antitela koja je 10 puta veća od referentne koncentracije antitela.
[0111] U raznim aspektima testa kompeticijske protočne citometrije, smatra se da se testno antitelo takmiči sa referentnim antitelom ako ono smanjuje vezivanje referentnog antitela za ćelije koje eksprimiraju cMet za najmanje oko 20% ili više, na primer za najmanje oko 20%, 30%, 40%, 50%, 60%, 70%, 80%, 90%, 95% ili čak i više, ili procentima raspona između bilo koje od prethodno navedenih vrednosti, pri koncentraciji testnog antitela koja je 10 x veća nego referentnog antitela.
[0112] Otkrivanje ekspresije cMet generalno uključuje kontaktiranje biološkog uzorka (ćelije, tkiva ili telesne tečnosti pojedinca) sa jednim ili više antitela anti-cMet (opciono konjugovanih sa prepoznatljivim delom) i otkrivanje je li uzorak pozitivan ili ne na cMet eksresiju ili je li uzorak promenio (npr. smanjio ili povećao) ekspresiju u poređenju sa kontrolnim uzorkom. Metode za to dobro su poznate prosečnom stručnjaku iz oblasti tehnike, uključujući one opisane u Primerima.
5.6.2. Neka druga primerna cMet antitela
[0113] Drugo anti-cMet antitelo koje može biti korišćeno prema ovom otkriću je nazvano 227H1, sadrži teški lanac koji obuhvata CDR-H1, CDR-H2 i CDR-H3 obuhvatajući redom aminokiselinsku sekvencu SEK ID Br. 4, 5 i 6; i laki lanac koji obuhvata CDR-L1, CDR-L2 i CDR-L3, obuhvatajući redom aminokiselinsku sekvencu SEK ID Br. 13, 11 i 14 U.S. Patent Br. 8,329,173 (SEK ID BRI 4, 5, 6, 13, 11 i 14. ove prijave). Ova antitela su detaljno opisana u U.S. Patent Br. 8,329,173. Lista sekvenci podnesena istovremeno sa ovom prijavom uključuje SEK ID BRI 1-71 iz U.S. Patent Br. 8,329,173 kao SEK ID BRI 1-71.
[0114] Antitelo 227H1 sadrži teški lanac koji obuhvata aminokiselinsku sekvencu SEK ID Br. 19 i laki lanac koji obuhvata aminokiselinsku sekvencu SEK ID Br. 22 od U.S. Patent Br. 8,329,173 (SEK ID BRI 19 i 20, redom iz ove prijave). Ova antitela su detaljno opisana u U.S. Patent Br. 8,329,173.
[0115] Drugo anti-cMet antitelo koje može biti korišćeno prema ovom otkriću je nazvano 223C4, sadrži teški lanac koji obuhvata CDR-H1, CDR-H2 i CDR-H3 obuhvatajući redom aminokiselinsku sekvencu SEK ID Br. 7, 8 i 9; i laki lanac koji sadrži CDR-L1, CDR-L2 i CDR-L3 obuhvatajući aminokiselinu sekvencu SEK ID br. 15, 16 i 17 iz U.S. Patent Br. 8,329,173 (SEK ID BRI 7, 8, 9, 15, 16 i 17 redom, iz ove prijave). Ova antitela su detaljno opisana u U.S. Patent Br. 8,329,173, a njihovi opisi su uključeni ovde u celosti kao referenca.
[0116] Antitelo 223C4 sadrži teški lanac obuhvatajući aminokiselinsku sekvencu SEK ID Br. 20 i laki lanac obuhvatajući aminokiselinsku sekvencu SEK ID Br. iz U.S. Patent Br. 8,329,173 (SEK ID BRI 20, i 23 redom). Ova antitela su detaljno opisana u U.S. Patent Br. 8,329,173.
[0117] Drugo anti-cMet antitelo koje može biti korišćeno prema ovom otkriću je nazvano 11E1, sadrži teški lanac koji obuhvata CDR-H1, CDR-H2 i CDR-H3 obuhvatajući redom aminokiselinsku sekvencu SEK ID Br. 56, 57 i 58; i laki lanac koji obuhvata CDR-L1, CDR-L2 i CDR-L3 obuhvatajući redom aminokiselinsku sekvencu SEK ID Br. 59, 60 i 61 iz U.S. Patenta Br. 8,329,173 (SEK ID BRI 56, 57, 58, 59, 60, i 61 redom). Ova antitela su detaljno opisana u U.S. Patent Br. br. 8,329,173.
[0118] U jednom izvođenju, antitelo 11E1 sadrži teški lanac obuhvatajući aminokiselinsku sekvencu SEK ID Br. 62 i laki lanac obuhvatajući aminokiselinsku sekvencu SEK ID Br. 63 iz U.S. Patent Br. 8,329,173 (SEK ID BRI 62, i 63 redom). Ova antitela su detaljno opisana u U.S. Patent Br. 8,329,173.
[0119] Ova prva iznad otkrivena monoklonalna antitela, ili jedan od njihovih funkcionalnih fragmenata ili derivata, su naznačena time što se navedena antitela izlučuju sa hibridoma deponovanim u the Collection Nationale de Cultures de Microorganismes (CNCM, National Collection of Microorganism Cultures) (Institut Pasteur, Pariz , Francuska) od 14. 03. 2007. pod brojevima CNCM 1-3724 (odgovarajući 11E1), 1-3731 (odgovarajući 224G11), 1-3732 (odgovarajući 227H1) i od 07. 06. 2007. pod brojem 1 -3786 (odgovarajući 223C4). Ovi hibridomi se sastoje od mišjih hibridoma rezultirajući u ćelijskoj fuziji imunizovanih mišjih splenocita sa ćelijskom linijom mijeloma (Sp20 Ag14).
[0120] Ova prva antitela, koja su sva originalno otkrivena u U.S. Patent Br. 8,329,173 i koja su obuhvaćena sa nekoliko patenata, i tako sažeta na sledeći način (SEK ID BRi su isti u patentu ’173 i u ovoj prijavi):
[0121] Antitela 224G11, 227H1 i 223C4 ne vežu SEMA domen od cMet receptora. 11E1 je u mogućnosti da veže SEMA domen.
[0122] Ovde opisano, anti-cMet antitelo sadrži CDRe od antitela STI-D0602 ili STI-0602 (Sorrento Therapeutics). Opisano ovde, anti-cMet antitelo je STI-D0602 ili STI-0602, kao što je opisano u Lingna Li, Cathrine Fells, Julia Guo, Pia Muyot, Edwige Gros, Yanliang Zhang, Yingqing Sun, Hong, Zhang, Yanwen Fu, Tong Zhu, Jian Cao, Gunnar Kaufmann, Gang Chen, Zhenwei Miao, A novel cMet targeting antibody drug conjugate for NSCLC, Abstract No. 3897, AACR Annual Meeting, April 16-20, New Orleans, USA.
[0123] Ovde opisano, anti-cMet antitelo sadrži CDRe od antitela 5D5 (Genentech) ili jednu ruku (monovalentnog) derivata onartuzumaba. Ovde opisano, anti-cMet antitelo je antitelo 5D5 (Genentech) ili jedna ruka (monovalentni) derivat onartuzumaba (SL.1B). Dodatne informacije za onartuzumab su kao što sledi:
Teški lanac (SEK ID BR: 92):
Laki lanac (SEK ID BR: 93):
Zglob-CH2-CH3 (SEK ID BR: 94):
[0124] Ovde opisano, anti-cMet antitelo sadrži CDRe od antitela emibetuzumab/LY2875358. Ovde opisano, anti-cMet antitelo je emibetuzumab/LY2875358 (Eli Lilly and Company, CAS Number 1365287-97-3) (FIG. 1A). Dodatna informacija za emibetuzumab je kao što sledi:
Teški lanac (SEK ID BR: 95):
Laki lanac (SEK ID BR: 96):
[0125] Ovde opisano, anti-cMet antitelo sadrži CDRe od antitela AbF46 ili SAIT301 (Samsung Electronics). Ovde opisano, antitelo je AbF46 (SL.1C). U drugom izvođenju, anti-cMet antitelo je SAIT301 (SL.1E).
[0126] Ovde opisano, anti-cMet antitelo sadrži CDRe od antitela ARGX-111 (36C4) (arGEN-X BV). Ovde opisano, anti-cMet antitelo je ARGX-111 (SL. ID).
[0127] Ovde opisano, anti-cMet antitelo sadrži CDRe jednog od antitela u Sym015 (Hu9006, Hu9338) (Symphogen A/S). Ovde opisano, antitelo anti-cMet je Hu9006. Ovde opisano antitelo anti-cMet je Hu9338. Aminokiselinske sekvence ovih antiteela, uključujući njihove CDRe, su prikazane u WO2016042412.
5.5. Ekspresioni sistemi i metode stvaranja antitela
[0128] Anti-cMet antitela mogu biti pripremljena rekombinantnom ekspresijom gena lakog i teškog lanca imunoglobulina u ćeliji domaćinu metodama dobro poznatim prosečnomstručnjaku sa ovog područja tehnike. Da bi se eksprimiralo rekombinantno antitelo, ćelija domaćina je transfektovana sa jednim ili više rekombinantnih ekspresionih vektora koji nose fragmente DNK kodirajući lake i teške lance imunoglobulina antitela tako da su laki i teški lanci eksprimirani u ćeliji domaćina i, opciono se izlučuju u medijum u kojem su kultivisane ćelije domaćina, iz kojeg medijuma antitela mogu biti oporavljena. Standardne metodologije rekombinantne DNK se koriste za dobijanje gena teškog i lakog lanca antitela, ugrađivanje ovih gena u rekombinantne ekspresione vektore i uvođenje vektora u ćelije domaćina, kao što su oni opisani u Molecular Cloning; A Laboratory Manual, Second Edition (Sambrook, Fritsch and Maniatis (eds), Cold Spring Harbor, N. Y., 1989), Current Protocols in Molecular Biology (Ausubel, F.M. et al., eds., Greene Publishing Associates, 1989) and in U.S. Patent No. 4,816,397.
[0129] Da se generišu nukleinske kiseline koje kodiraju takva anti-cMet antitela, prvo se dobijaju fragmenti DNK koji kodiraju varijabilne regione lakog i teškog lanca. Ove DNK mogu biti dobijene amplifikacijom i modifikacijomm DNK zametne linije ili cDNK kodirajući varijabilne sekvence lakog i teškog lanca, na primer korišćenjem lančane reakcije polimeraze (PCR). Sekvence zametne linije DNK za varijabilni region teškog i lakog lanca humanih gena poznati u tehnici (Videti npr. the "VBASE" human germline sequence database; see also Kabat et al., 1991, Sequences of Proteins of Immunological Interest, Fifth Edition, U.S. Department of Health and Human Services, NIH Publication No. 91-3242; Tomlinson et al., 1992, J. Mol. Biol. 22T:116-198; and Cox et al., 1994, Eur. J. Immunol. 24:827-836. The nucleotides encoding the antibodies 224G11, 227H1, 223C4, and 11E11 have been described in detail in U.S. Patent No. 8,329,173.
[0130] Jednom kada se dobiju fragmenti DNK koji kodiraju VHi VLsegmente povezane sa anti-cMet antitelom, ovim fragmentima DNK se može dalje manipulisati standardnim tehnikama rekombinantne DNK, na primer za pretvaranje gena varijabilnog regiona u gene lanca antitela pune dužine, u gene fragmenta Fab ili u scFv gen. U ovim manipulacijama, fragment DNK koji kodira VL- ili VH-je operativno povezan na drugi fragment DNK koji kodira drugi protein, kao što je konstantni region antitela ili fleksibilni veznik. Termin "operativno povezan", kao što je korišćen u ovom kontekstu, je namenjen da znači da su dva DNK fragmenta spojena tako da aminokiselinske sekvence kodirane sa dva DNK fragmenta ostanu u okviru.
[0131] Izolovana DNK koja kodira VHregion može biti konvertovana u gen teškog lanca pune dužine operativnim povezivanjem DNK koja kodira VHsa drugim molekulom DNK kodirajući konstantne regione teškog lanca (CH1, CH2, CH3i opciono, CH4). Sekvence gena konstantnog regiona teškog lanca čoveka su poznate u tehnici (Videti, npr., Kabat et al., 1991, Sequences of Proteins of Immunological Interest, Fifth Edition, U.S. Department of Health and Human Services, NIH Publication No. 91-3242) i fragmenti DNK obuhvatajući ove regione mogu biti dobijeni standardnom PCR amplifikacijom. Konstantni region teškog lanca može biti IgG1, IgG2, IgG3, IgG4, IgA, IgE, IgM ili IgD konstantni region, ali u određenim izvođenjima je konstantni region IgG1ili IgG4.Za Fab fragment gena teškog lanca, DNK koja kodira VHmože biti operativno povezana na drugi molekul DNK koji kodira samo konstantni region teškog lanca CH1.
[0132] Izolovana DNK koja kodira VLregion može biti konvertovana u gen lakog lanca pune dužine (kao i Fab gen lakog lanca) operativnim povezivanjem DNK koja kodira VLsa drugim molekulom DNK koja kodira konstantni region lakog lanca, CL. Sekvence humanog gena konstantnog regiona lakog lanca su poznate u tehnici (Videti, npr.,Kabat et al., 1991, Sequences of Proteins of Immunological Interest, Fifth Edition, U.S. Department of Health and Human Services, NIH Publication No. 91-3242) i fragmenti DNK koji obuhvataju ove regione mogu biti dobijeni standardnom PCR amplifikacijom. Konstantni region lakog lanca može biti kappa ili lambda konstantni region, ali u određenim izvođenjima je kappa konstantni region. Da bi se stvorio scFv gen, fragmenti DNK koji kodiraju VHi VLsu operativno povezani sa drugim fragmentom kodirajući fleksibilni veznik, Videti, npr., kodirajući aminokiselinsku sekvencu (Gly4∼ Ser)3(SEK ID BR:97), tako da VHi VLsekvence mogu biti eksprimirane kao susedni jednolančani protein, sa VLi VHregionima pridruženim fleksibilnim veznikom (Videti, npr.., Bird et al., 1988, Science 242:423-426; Huston et al., 1988, Proc. Natl. Acad. Sci. USA 85:5879-5883; McCafferty et al., 1990, Nature 348:552-554).
[0133] Da bi se eksprimila anti-cMet antitela, DNKe koje kodiraju lake i teške lance delimične ili pune dužine, dobijene kao što je opisano iznad, su umetnute u ekspresione vektore tako da su geni operativno povezani sa transkripcionim i translacionim kontrolnim sekvencama. U ovom kontekstu, termin "operativno povezan" je namenjen da znači da je gen antitela vezan u vektor tako da transkripcione i translacionee kontrolne sekvence unutar vektora služe svojoj namenjenoj funkciji regulisanja transkripcije i translacije gena antitela. Ekspresioni vektor i ekspresione kontrolne sekvence ekspresije su izabrani da budu kompatibilni sa korišćenom ekspresionom ćelijom domaćina. Gen lakog lanca antitela i gen teškog lanca antitela mogu biti umetnuti u odvojene vektore ili, što je tipičnije, oba gena umetnuta u isti ekspresioni vektor.
[0134] Geni antitela su ubačeni u ekspresioni vektor standardnim metodama (npr. ligacijom komplementarnih restrikcionih mesta na fragmentu gena antitela i vektoru ili ligacijom lepljivog kraja ako restrikciona mesta nisu prisutna). Pre umetanja sekvenci lakog ili teškog lanca povezanih sa anti-cMet antitelom, ekspresioni vektor već može nositi sekvence konstantnog regiona antitela. Na primer, jedan pristup konvertovanju sekvenci VHi VLpovezanih sa anti-cMet monoklonalnim antitelom u gene antitela pune dužine je njihovo umetanje u ekspresione vektore koji već kodiraju konstantne regione teškog lanca i konstante lakog lanca, redom, tako da je VHsegment operativno povezan sa CHsegmentom (a) unutar vektora, i VLsegment je operativno povezan sa segmentom CLunutar vektora. Dodatno ili alternativno, rekombinantni ekspresioni vektor može kodirati signalni peptid koji olakšava sekreciju lanca antitela iz ćelije domaćina. Gen lanca antitela može biti kloniran u vektor tako da je signalni peptid povezan unutar okvira sa amino terminusom gena lanca antitela. Signalni peptid može biti imunoglobulinski signalni peptid ili heterologni signalni peptid ( tj. signalni peptid iz neimunoglobulinskog proteina).
[0135] Pored gena lanca antitela, rekombinantni ekspresioni vektori nose regulatorne sekvence koje kontrolišu ekspresiju gena lanca antitela u ćeliji domaćina.Termin "regulatorna sekvenca" je namenjen da uključii promotere, pojačivače i druge elemente za kontrolu ekspresije (npr. poliadenilacione signale) koji kontrolišu transkripciju ili translaciju gena lanca antitela. Takve regulatorne sekvence su opisane, na primer, u Goeddel, Gene Expression Technology: Methods in Enzymology 185, Academic Press, San Diego, CA, 1990. Stručnjaci u tehnici će ceniti da dizajn ekspresionog vektora, uključujući izbor regulatornih sekvenci, može zavisiti od takvih faktora kao što su izbor ćelije domaćina koja će biti transformisana, nivo ekspresije željenog proteina itd. Pogodne regulatorne sekvence za ekspresiju ćelije domaćina sisara uključuju virusne elemente koji usmeravaju visoke nivoe ekspresije proteina u ćelijama sisara, kao što su promoteri i/ li pojačivači izvedenih iz citomegalovirusa (CMV) (kao što je CMV promoter/pojačivač), Simijan Virus 40 (SV40 ) (kao to je promoter/pojačivač SV40), adenovirus (npr. glavni kasni promoter adenovirusa (AdMLP)) i polioma. Za dalji opis virusnih regulatornih elemenata i sekvenci od njih videti, npr., U.S. Patent No.
5,168,062 by Stinski, U.S. Patent No. 4,510,245 by Bell et al., and U.S. Patent No. 4,968,615 by Schaffner et al.
[0136] Rekombinantni ekspresioni vektori iz otkrića mogu nositi sekvence pored gena lanca antitela i regulatorne sekvence, kao što su sekvence koje regulišu replikaciju vektora u ćelijama domaćina (npr. poreklo replikacije) i selektivni marker geni. Selektivni marker geni olakšavaju izbor ćelija domaćina u koje vektor treba da bude uveden (Videti npr. U.S. Patents Nos. 4,399,216, 4,634,665 and 5,179,017, all by Axel et al.). Na primer, tipično selektivni marker gen daje rezistenciju na lekove, kao što je G418, higromicin ili metotreksat, na ćeliju domaćina u koju je vektor uveden. Pogodni selektivni marker geni uključuju gen za dihidrofolat reduktazu (DHFR) (za upotrebu u DHFR-ćelijama domaćinima sa selekcijom/amplifikacijom metotreksata) i neo gen (za selekciju G418). Za ekspresiju lakih i teškoih lanaca, ekspresioni vektor (i) koji kodira teške i lake lance je transfektovan u ćeliju domaćina standardnim tehnikama. Razni oblici termina "transfekcija" su namenjeni da obuhvate širok spektar tehnika koje se obično koriste za uvođenje egzogene DNK u prokariotsku ili eukariotsku ćeliju domaćina, npr. elektroporacija, lipofekcija, taloženje kalcijumfosfata, transfekcija DEAE-dekstrana i slično.
[0137] Moguće je izraziti anti-cMet antitela od ADCa anti-cMet bilo u prokariotskim ili eukariotskim ćelijama domaćina. Ovde opisana, ekspresija antitela je izvršena u eukariotskim ćelijama, npr. u ćelijama domaćina sisara, optimalne sekrecije pravilno savijenog i imunološki aktivnog antitela. Primeri ćelija sisara domaćina za ekspresiju rekombinantnih antitela iz otkrića uključuju jajnik kineskog hrčka (CHO ćelije) (uključujući DHFR-CHO ćelije, opisane u Urlaub and Chasin, 1980, Proc. Natl. Acad. Sci. USA 77:4216-4220, korišćene sa DHFR selektivnim markerom, npr., kao što je opisano u Kaufman and Sharp, 1982, Mol. Biol. 159:601-621), NS0 ćelije mijeloma, COS stanice i SP2 ćelije. Kada se rekombinantni vektori ekspresije koji kodiraju gene antitela uvode u ćelije domaćina sisara, antitela se proizvode gajenjem ćelija domaćina tokom vremenskog perioda dovoljnim da omogući ekspresiju antitela u ćelijama domaćina ili sekreciju antitela u medijumu kulture u kome se gaje ćelije domaćina. Antitela mogu biti obnovljena iz medijuma kulture korišćenjem standardnih metoda prečišćavanja proteina. Ćelije domaćina mogu takođe biti korišćene da proizvedu delove netaknutih antitela, kao što su fragmenati Fab ili molekuli scFv. Podrazumeva se da su varijacije gornjeg postupka unutar obima predmetnog otkrića. Na primer, može biti poželjno transfekovati ćeliju domaćina sa DNK koja kodira ili laki ili teški lanac (ali ne oba) anti-cMet antitela.
[0138] Tehnologija rekombinantne DNK može biti korišćena i za uklanjanje nekog dela ili cele DNK koja kodira jedan ili oba laki i teški lanac koji nije potreban za vezivanje na cMet. Molekuli eksprimirani iz takvih krnjih molekula DNK su takođe obuhvaćeni antitelima otkrića.
[0139] Za rekombinantnu ekspresiju anti-cMet antitela, ćelija domaćin može biti ko-transfektovana sa dva ekspresina vektora, prvi vektor koji kodira polipeptid izveden iz teškog lanca i drugi vektor koji kodira polipeptid izveden iz lakog lanca. Dva vektora mogu sadržavati identične selektivne markere ili svaki može sadržavati odvojeni selektivni marker. Alternativno, može biti korišćen jedan vektor koji kodira polipeptide i teškog i lakog lanca.
[0140] Jednom kada se dobije nukleinska kiselina koja kodira jedan ili više delova anti-cMet antitela, dalje izmene ili mutacije mogu se uvesti u kodirajuću sekvencu, na primer za generisanje nukleinskih kiselina koje kodiraju antitela sa različitim CDR sekvencama, antitela sa smanjenim afinitetom za Fc receptor ili antitela različitih podklasa.
[0141] Antitela i/ili vezujući fragmenti ADCa anti-cMet takođe mogu biti proizvedeni hemijskom sintezom (npr. metodama opisanim u Solid Phase Peptide Synthesis, 2nd ed., 1984 The Pierce Chemical Co., Rockford, III.). Varijanta antitela takođe može biti generisana korišćenjem bezćelijske platforme, Videti npr., Chu et al., BiochemiaNo. 2, 2001 (Roche Molecular Biologicals) and Murray et al., 2013, Current Opinion in Chemical Biology, 17:420-426.
[0142] Jednom kad se anti-cMet antitelo i/ili vezujući fragment proizvedu rekombinantnom ekspresijom, mogu biti prečišćeni bilo kojom metodom poznatom u tehnici za prečišćavanje molekula imunoglobulina, na primer hromatografijom (npr. jonoizmenjivačkom, afinitetnoj i hromatografijom na koloni isključivanja veličine), centrifugiranjem, diferencijalnom rastvorljivošću ili bilo kojom drugom standardnom tehnikom za prečišćavanje proteina. Dalje, anti-cMet antitela i/ili vezujući fragmenti mogu biti fuzionisani u ovde opisane heterologne polipeptidne sekvence ili na drugi način poznate u tehnici da bi se olakšalo prečišćavanje.
[0143] Jednom izolovano, anti-cMet antitelo i/ili vezujući fragment mogu biti, ako se želi, dalje prečišćeni, npr., hromatografijom na koloni. (videti, npr. Fisher, Laboratory Techniques In Biochemistry And Molecular Biology, Work and Burdon, eds., Elsevier, 1980), ili gel filtracionom hromatografijom na tzv. "Superdex ™ 75" koloni (Pharmacia Biotech AB, Uppsala, Sweden).
5.6. Specifični konjugati leka Anti-cMet Antitelo
[0144] Kao što je pomenuto, ADCi anti-cMet generalno sadrže ostatak koji veže anti-cMet antigen, kao što je anti-cMet antitelo i/ili vezujući fragment, koji ima jedno ili više citotoksičnih i/ili citostatičkih agenasa, koji mogu biti isti ili različiti, povazan sa tim putem jednog ili više vrznika, koji takođe mogu biti isti ili različiti. Više različitih citotoksičnih/citostatičkih agenasa mogu biti pripojeni za svaki Ab da bi bi se napravio ADC. Ovi agensi mogu ciljati dva ili više puta da ubiju ili zaustave rast tumorskih ćelija, ciljaju više čvorova istog puta ili se udvostruče na istom cilju (tj. inhibiraju rast i/ili ubijaju ćelije kroz dva ili više različitih mehanizama).
[0145] ADCi anti-cMet su jedinjenja prema strukturnoj formuli (I):
ili soli od njih, gde svaki "D" predstavlja, nezavisno od ostalih, citotoksični i/ili citostatički agens ("lek"); svaki "L" predstavlja, nezavisno od ostalih, veznik; "Ab" predstavlja ostatak koji veže anti-cMet antigen, kao što je anti-cMet antitelo ili vezujuć fragment; svaki "XY" predstavlja vezu formiranu između funkcionalne grupe R<×>na vezniku i "komplementarne" funkcionalne grupe R<y>na antigen vezujućem ostatku; i n predstavlja broj lekova povezanih na Ab od ADC.
[0146] Specifična izvođenja raznih antitela ili vezujućih fragmenata (Ab) koji mogu sastaviti ADCe prema strukturnoj formuli (I) uključuju razna izvođenja iznd opisanih anti-cMet antitela i/ili vezujućih fragmenata.
[0147] U specifičnim ADCa ili solima strukturne formule (I), svaki D je isti i/ili je svaki L isti.
[0148] Citotoksični i/ili citostatički agensi (D) i linkeri (L) koji mogu sastaviti ADCe anti-cMet, kao i broj citotoksičnih i/ili citostatičkih agenasa povezanih sa ADCa anti-cMet, su detaljnije opisani ispod.
[0149] Ovde opisani, svi ADCi anti-cMet su jedinjenja prema strukturnoj formuli (I) u kojoj je svaki "D" jednak i ili je auristatin koji prožima ćeliju (na primer, dolastatin-10 ili MMAE) ili ćelijski agens za umrežavanje DNK koja prožima ćelije manjeg žleba (na primer, PBD ili PBD dimer); svaki "L" je isti i veznik je koji se cepa lizozomskim enzimom; svaki "XY" je veza formirana između maleimida i sulfidril grupe; "Ab" je antitelo koje sadrži šest CDRa koji odgovaraju šest CDRa od antitela ABT-700 (224G11), ili antitelo koje se takmiči za vezivanje cMet-a sa takvim antitelom; i n je 2, 3 ili 4. U primernim ADCa anti-cMet strukturne formule (I), "Ab" je humanizovano antitelo, na primer, humanizovano antitelo koje sadrži VHi VL lance koji odgovaraju VHi VLlancima antitela 5D5. U drugom primeru ADCi anti-cMet strukturne formule (I), Ab je antitelo STI-D0602 (Sorrento).
[0150] Dato je jedinjenje prema strukturnoj formuli (I) sa strukturom formule (IIa):
[0151] U jednom izvođenju, Ab u jedinjenju formule (IIa) je ABT-700.
[0152] Dato je jedinjenje strukturne formule (I) sa sledećom strukturom:
ili njegova farmaceutski prihvatljiva so, pri čemu n ima prosečnu vrednost u rasponu od 2-4, i Ab je anti-cMet antitielo pune dužine.
[0153] U specifičnom izvođenju, Ab u jedinjenju ove posebne formule je ABT-700.
[0154] U specifičnom izvođenju, n ima prosečnu vrednost u rasponu od 2-4, i Ab je anti-cMet antitelo pune dulžine.
5.6.1. Citotoksični i/ili Citostatički Agensi
[0155] Citotoksični i/ili citostatički agensi mogu biti bilo koji agensi poznati da inhibišu rast i/ili replikaciju i/ili ubijaju ćelje, a naročito ćelije karcinoma i/ili ćelije tumora. U literaturi su poznati brojni agensi koji imaju citotoksična i/ili citostatička svojstva. Neograničavajući primeri klasa citotoksičnih i/ili citostatičkih agenasa uključuju, kao primer, ali bez ograničenja, radionuklide, alkilirajuće agense, agense za DNK umrežavanje, agense za za interkalaciju DNK (npr. agense za vezivanje žleba, kao što su veziva za manje žliebove) modulatore ćelijskog ciklusa, regulatore apoptoze, inhibitore kinaze, inhibitore sinteze proteina, inhibitore mitohondrije, inhibitore nuklearnog izvoza, inhibitore topoizomeraze I, inhibitore topoizomeraze II, antimetabolite RNK/DNK i antimitotske agense.
[0156] Konkretni neograničavajući primeri agenasa unutar neke od ovih različitih klasa su opisani ispod.
Alkilirajući agensi: asalei (L-Leucin, N-[N-acetil-4-[bis-(2-hloroetil)amino]-DL-fenilalanil]-, etilestar); AZQ (1,4-cikloheksadien-1,4-dikarbaminska kiselina, 2, 5-bis(1-aziridinil)-3,6-diokso-, dietil estar); BCNU (N,N’-Bis(2-hloroetil)- N-nitrosourea); busulfan (1,4-butandiol dimetansulfonat); (karboksiftalato)platinum; CBDCA (cis-(1,1- ciklobutandikarboksilato)diamminplatinum(II))); CCNU (N-(2-hloroetil)-N’-cikloheksil-N-nitrosourea); CHIP (iproplatin; NSC 256927); hlorambucil; hlorozotocin (2-[[[(2-hloroetil) nitrozoamino]karbonil]amino]-2-deoksi- D-glukopiranoza); cis-platinum (cisplatin); klomezon; cijanomorfolinodoksorubicin; ciklodizon; dianhidrogalaktitol(5,6-diepoksidulcitol); fluorodopan ((5-[(2-hloroetil)-(2-fluoroetil)amino]-6-metil-uracil); hepsulfam; hikanton; indolinobenzodiazepin dimer DGN462; melfalan; metil CCNU ((1-(2-hloroetil)-3-(trans-4-metilcikloheksan)-1-nitrozoureja); mitomicin C; mitozolamid; azotni iperit((bis(2-hloroetil) metilamin hidrohlorid); PCNU ((1-(2-hloroetil)-3-(2,6-diokso-3-piperidil)-1-nitrozoureja)); piperazin alkilator ((1-(2-hloroetil)- 4-(3-hloropropil)-piperazin dihidrohlorid)); piperazindion; pipobroman (N,N’-bis(3-bromopropionil) piperazin); porfiromicin (N-metilmitomicin C); spirohidantoin mustard; teroksiron (triglicidilizocianurat); tetraplatin; tio-tepa (N,N’,N"-tri-1,2-etandiiltio fosforamid); trietilenmelamin; uracil azotni iperit (desmetildopan); Yoshi-864 ((bis(3-meziloksi propil)amin hidrohlorid).
Agensi slični alkiliranju DNK: Cisplatin; Karboplatin; Nedaplatin; Oksaliplatin; Satraplatin; Triplatin tetranitrat; Prokarbazin; altretamin; dakarbazin; mitozolomid; temozolomid.
Alkilirajući antineoplastični agensi: Karbokvon; Karmustin; Hlornafazin; Hlorozotocin; Duokarmicin; Evofosfamid; Fotemustin; Glufosfamid; Lomustin; Manosulfan; Nimustin; Fenantriplatin; Pipobroman; Ranimustin; Semustin; Streptozotocin; TioTEPA; Treosulfan; Triazikvon; Trietilenmelamin; Triplatin tetranitrat.
Inhibitori replikacije i obnove DNK: Altretamin; Bleomicin; Dakarbazin; Daktinomicin; Mitobronitol; Mitomicin; Pingiangmicin; Plikamicin; Prokarbazin; Temozolomid; ABT-888 (veliparib); olaparib; KU-59436; AZD- 2281; AG-014699; BSI-201; BGP-15; INO-1001; ONO-2231.
Modulatori ćelijskog ciklusa: Paklitaksel; Nab-paklitaksel; Docetaksel; Vinkristin; Vinblastin; ABT-348; AZD-1152; MLN-8054; VX-680; Inhibitori kinaze specifični za Auroru A; Inhibitori kinaze specifične za Aurora B i inhibitori pan-Aurora kinaze; AZD-5438; BMI-1040; BMS-032; BMS-387; CVT-2584; flavopiridol; GPC-286199; MCS-5A; PD0332991; PHA-690509; seliciklib (CYC-202, R-roskovitin); ZK-304709; AZD4877, ARRY-520; GSK923295A.
Regulatori apoptoze: AT-101 ((-)gosipol); G3139 ili oblimersen (Bcl-2-ciljajući antisens oligonukleotid); IPI-194; IPI-565; N-(4-(4-((4’-hloro(1,1’-bifenil)-2-il)metil)piperazin-1-ilbenzoil)-4-(((1R)-3-(dimetilamino)-1-((fenilsulfanil)metil)propil)amino)-3-nitrobenzensulfonamid); N-(4-(4-((2-(4-hlorofenil)-5,5-dimetil-1-cikloheks-1-en-1-il)metil)piperazin-1-il)benzoil)-4-(((1R)-3-(morfolin-4-il)-1-((fenilsulfanil)metil)propil)
amino)-3-((trifluorometil)sulfonil)benzensulfonamid; GX-070 (Obatoklaks®; 1H-Indol, 2-(2-((3,5-dimetil-1H-pirol-2-il)metilen)-3-metoksi-2H-pirol-5-il)-)); HGS1029; GDC-0145; GDC-0152; LCL-161; LBW-242; ventoklaks; agensi koji ciljaju TRAIL ili receptori smrti (npr., DR4 i DR5) kao što su ETR2-ST01, GDC0145, HGS- 1029, LBY-135, PRO-1762; lekovi koji ciljaju kaspaze, regulatori kaspaze, članovi familije BCL-2, proteini domene smrti, članovi familije TNF, članovi familije Toll i/ili proteini NF-kappa-B.
Inhibitori angiogeneze: ABT-869; AEE-788; aksitinib (AG-13736); AZD-2171; CP-547,632; IM-862; pegaptamib; sorafenib; BAY43-9006; pazopanib (GW-786034); vatalanib (PTK-787, ZK-222584); sunitinib; SU-11248; VEGF trap; vandetanib; ABT-165; ZD-6474; DLL4 inhibitori.
Inhibitori Proteazoma: Bortezomib; Karfilzomib; Epoksomicin; Iksazomib; Salinosporamid A.
Inhibitori Kinaze: Afatinib; Aksitinib; Bosutinib; Krizotinib; Dasatinib; Erlotinib; Fostamatinib; Gefitinib; Ibrutinib; Imatinib; Lapatinib; Lenvatinib; Mubritinib; Nilotinib; Pazopanib; Pegaptanib; Sorafenib; Sunitinib; SU6656; Vandetanib; Vemurafenib; CEP-701 (lesaurtinib); XL019; INCB018424 (ruksolitinib); ARRY-142886 (selemetinib); ARRY-438162 (binimetinib); PD-325901; PD-98059; AP-23573; CCI-779; everolimus; RAD-001; rapamicin; temsirolimus; ATP-kompetitivni TORC1/TORC2 inhibitori uključujući PI-103, PP242, PP30, Torin 1; LY294002; XL-147; CAL-120; ONC-21; AEZS-127; ETP-45658; PX-866; GDC-0941; BGT226; BEZ235; XL765.
Inhibitori sinteze proteina: Streptomicin; Dihidrostreptomicin; Neomicin; Framicetin; Paromomicin; Ribostamicin; Kanamicin; Amikacin; Arbekacin; Bekanamicin; Dibekacin; Tobramicin; Spektinomicin; Higromicin B; Paromomicin; Gentamicin; Netilmicin; Sizomicin; Izepamicin; Verdamicin; Astromicin; Tetraciklin; Doksiciklin; Hlortetraciklin; Klomociklin; Demeklociklin; Limeciklin; Meklociklin; Metaciklin; Minoikclin; Oksitetraciklin; Penimepiciklin; Rolitetraciklin; Tetraciklin; Glicilciklini; Tigeciklin; Oksazolidinon; Eperezolid; Linezolid; Posizolid; Radezolid; Ranbezolid; Sutezolid; Tedizolid; Inhibitori Peptidil transferaze; Hloramfenikol; Azidamfenikol; Tiamfenikol; Florfenikol; Pleuromutilins; Retapamulin; Tiamulin; Valnemulin; Azitromicin; Klaritromicin; Diritromicin; Eritromicin; Fluritromicin; Josamicin; Midekamicin; Miokamicin; Oleandomicin; Rokitamicin; Roksitromicin; Spiramicin; Troleandomicin; Tilozin; Ketolidi; Telitromicin; Ketromicin; Solitromicin; Klindamicin; Linkomicin; Pirlimicin; Streptogramins; Pristinamicin; Hinupristin/dalfopristin; Virginiamicin.
Inhibitori histonske deacetilaze: Vorinostat; Romidepsin; Hidamid; Panobinostat; Valproinska kiselina; Belinostat; Mocetinostat; Abeksinostat; Entinostat; SB939 (pracinostat); Resminostat; Givinostat; Kvisinostat; tioureidobutironitril (Kevetrin™); CUDC-10; CHR-2845 (tefinostat); CHR-3996; 4SC-202; CG200745; ACY-1215 (rocilinostat); ME-344; sulforahan.
Inhibitori Topoizomeraze I: kamptotecin; razni derivati kamptotecina i analozi (na primer, NSC 100880, NSC 603071, NSC 107124, NSC 643833, NSC 629971, NSC 295500, NSC 249910, NSC 606985, NSCn74028, NSC 176323, NSC 295501, NSC 606172, NSC 606173, NSC 610458, NSC 618939, NSC 610457, NSC 610459, NSC 606499, NSC 610456, NSC 364830, i NSC 606497); morfolinizoksorubicin; SN-38.
Inhibitori Topoizomeraze II: doksorubicin; amonafid (benzizohinolindion); m-AMSA (4’-(9-akridinilamino)-3’-metoksimetansulfonanilid); derivati antrapirazola ((NSC 355644); etopozid (VP-16); pirazoloakridin((pirazolo[3,4,5-kl]akridin-2(6H)-propanamin, 9-metoksi-N, N-dimethil-5-nitro-, monometansulfonat); bizantren hidrohlorid; daunorubicin; deoksidoksorubicin; mitoksantron; menogaril; N,N-dibenzil daunomicin; oksantrazol; rubidazon; tenipozid.
Sredstva za interkalaciju DNK : antramicin; hikamicin A; tomaimicin; DC-81; sibiromicin; derivat pirolobenzodiazepina; SGD-1882 ((S)-2-(4-aminofenil)-7-metoksi-8-(3-(((S)-7-metoksi-2-(4-metoksifenil)-5-okso-5,11adihidro-1H-benzo[e]pirolo[1,2-a] [1,4]diazepin-8-il)oksi)propoksi)-1H-benzo[e]pirolo[1,2-a][1,4]diazepin-5(11aH)-on); SG2000 (SJG-136; (11aS,11a’S)-8,8’-(propan-1,3-diilbis(oksi))bis(7-metoksi-2-metilen-2,3-dihidro-1H-benzo[e]pirolo[1,2-a][1,4]diazepin-5(11aH)-on)).
Antimetaboliti RNK/DNK: L-alanozin; 5-azaktidin; 5-fluorouracil; acivicin; aminopterin derivat N-[2-hloro-5-[[(2,4-diamino-5-metil-6-hinazolinil)metil]amino]benzoil] L-asparaginska kiselina (NSC 132483); aminopterin derivat N-[4-[[(2, 4-diamino-5-etil-6-hinazolinil)metil]amino]benzoil] L- asparaginska kiselina; aminopterin derivati N-[2-hloro-4-[[(2, 4-diamino-6-pteridinil)metil] amino]benzoil] L- asparaginska kiselina monohidrat; antifolat PT523 ((N<ɑ>-(4-amino-4-deoksipteroil)-N<y>-hemiftaloil-L-ornitin)); Bakerov rastvorljiv antifol (NSC 139105); dihloralil lavson((2-(3, 3-dihloroalil)-3-hidroksi-1,4-naftohinon); brekvinar; ftorafur ((prolek; 5-fluoro-1-(tetrahidro-2-furil)-uracil); 5,6-dihidro-5-azacitidin; metotreksat; metotreksat derivat (N-[[4-[[(2, 4-diamino-6-pteridinil)metil]metilamino]-1-naftalenil]karbonil] L-glutaminska kiselina); PALA ((N-(fosfonoacetil)-L-aspartat); pirazofurin; trimetreksat.
Antimetaboliti DNK: 3-HP; 2’-deoksi-5-fluorouridin; 5-HP; ɑ-TGDR (ɑ-2’-deoksi-6-tioguanozin); afidikolin glicinat; ara C (citozin arabinozid); 5-aza-2’-deoksicitidin; β-TGDR (β-2’-deoksi-6-tioguanozin); ciklocitidin; gvanazol; hidroksiurea; inozin glikodialdehid; makbecin II; pirazoloimidazol; tioguanin; tiopurin.
Inhibitori mitohondrije: pankratistatin; fenpanstatin; rodamin-123; edelfozin; d-alfa-tokoferol sukcinat; jedinjenje 11; aspirin; elipticin; berberin; cerulenin; GX015-070 (Obatoklaks®; 1H-Indol, 2-(2-((3,5-dimetil-1H-pirol-2-il)metilen)-3-metoksi-2H-pirol-5-il)-); celastrol (tripterin); metformin; Brilijantnozeleno; ME-344.
Antimitotički Agensi: alokolhicin; auristatini, kao što je MMAE (monometil auristatin E) i MMAF (monometil auristatin F); halihondrin B; cemadotin; kolhicin; kolhicin derivat (N-benzoil-deacetil benzamid); dolastatin-10; dolastatin-15; maitansin; maitansinoidi, kao što je DM1 (N2’-deacetil-N2’-(3-merkapto-1-oksopropil)-maitansin); rozoksin; paklitaksel; paklitaksel derivat ((2’-N-[3-(dimetilamino)propil]glutaramat paklitaksel); docetaksel; tiokolhicin; tritil cistein; vinblastin sulfat; vinkristin sulfat.
Inhibitori nuklearnog izvoza: kalistatin A; delaktonmicin; KPT-185 (propan-2-il(Z)-3-[3-[3-metoksi-5-(trifluorometil)fenil]-1,2,4-triazol-1-il]prop-2-enoat); kazusamicin A; leptolstatin; leptofuranin A; leptomicin B; ratjadon; Verdineksor ((Z)-3-[3-[3,5-bis(trifluorometil)fenil]-1,2,4-triazol-1-il]-N’-piridin-2-ilprop-2-enhidrazid).
Hormonalne terapije: anastrozol; eksemestan; arzoksifen; bikalutamid; cetroreliks; degareliks; deslorelin; trilostan; deksametazon; flutamid; raloksifen; fadrozol; toremifen; fulvestrant; letrozol; formestan; glukokortikoidi; dokserkalciferol; sevelamer karbonat; lazofoksifen; leuprolid acetat; megesterol; mifepriston; nilutamid; tamoksifen citrat; abareliks; prednizon; finasterid; rilostan; buserelin; regulacija lučenja luteinizirajućeg hormona (LHRH); Histrelin; trilostan ili modrastan; fosrelin; goserelin.
[0157] Bilo koji od ovih agenasa koji uključuju ili koji mogu biti modifikovani tako da uključuju mesto vezivanja za antitelo i/ili vezujući fragment mogu biti uključeni u ADC anti-cMet.
[0158] Kvalifikovani stručnjaci će takođe proceniti da se gornji mehanizmi delovanja međusobno ne isključuju i da u nekim izvođenjima može biti poželjno koristiti ADCe anti-cMet koji su sposobni sprovoditi antitumorsku aktivnost protiv prekomernog eksprimiranja cMet (ovde se odnosi na cMet tumori) ili cMet-prekomernog eksprimiranja tumora putem više od jednog mehanizma delovanja. Kao specifičan primer, takav ADC anti-cMet može uključiti citotoksični i/ili citostatički agens koji prožima ćeliju i koji je citotoksičan i/ili citostatičan i za cMet+/prekomerno eksprimirajuće tumore i cMet-negativne tumorske ćelije povezane sa anti-cMet antitelom putem cepljivog veznika.
[0159] Shodno tome, u nekim izvođenjima, citotoksični i/ili citostatički agensi uključeni u ADC anti-cMet, će nakon cepanja ADC, biti sposobni da pređu ćelijske membrane ("citostatička i/ili citotoksična ćelijska propustljivost"). Specifični citotoksični i/ li citostatički agensi od interesa i/ili produkti cepanja ADCa, uključujući takve agense, mogu bit testirani na sposobnost prelaska ćelijskih membrana korišćenjem rutinskih metoda poznatih stručnjacima sa ovog područja tehnike. Propustljivost (P) molekula kroz membranu može biti izrazažena kao P = KD/Δx gdje je K koeficijent raspodele, D koeficijent difuzije i Δx je debljina ćelijske membrane. Koeficijent difuzije (D) je mera brzine ulaska u citoplazmu, u zavisnosti od molekularne težine ili veličine molekula. K je mera rastvorljivosti supstance u lipidima. Niska vrednost K opisuje molekul kao što je voda koji nije rastvorljiv u lipidima. Grafički se očekuje da će se propustljivost (P) kao funkcija koeficijenta raspodele (K) linearno povećavati kada su D i Δx konstante. (Walter & Gutknecht, 1986, "Permeability of small nonelectrolytes through lipid bilayer membranes," Journal of Membrane Biology 90:207-217; Diamond & Katz, 1974, "Interpretation of nonelectrolyte partition coefficients between dimyristoyl lecithin and water," Journal of Membrane Biology 17:121-154).
[0160] Prema ovom pronalasku, citotoksični i/ili citostatički agens je ćelijski propustljiv antimitotički agens.
[0161] Ovde opisan, citotoksični i/ili citostatički agens je ćelijski propustljiv auristatin, kao što je, na primer, dolastatin-10 ili MMAE.
[0162] Ovde opisan, citotoksični i/ili citostatički agens je ćelijski propustljiv agens za umrežavanje DNK u manjem žlebu, kao što je, na prier, dimer pirolobenzodiazepina ("PBD").
5.6.2. Veznici
[0163] U ovde opisanim ADCa anti-cMet, citotoksični i/ili citostatički agensi su povezani na antigen vezujući ostatak putem veznika. Veznici mogu biti kratki, dugi, hidrofobni, hidrofilni, fleksibilni ili kruti ili mogu biti sastavljeni od segmenata koji svaki nezavisno imaju jedno ili više iznad pomenutih svojstava, tako da veznik može uključiti segmente koji imaju različita svojstva. Veznici mogu biti polivalentni tako da kovalentno povezuju više od jednog agensa sa jednim mestom na antitelu, ili monovalentni, tako da kovalentno povezuju jedan agens sa jednim mestom na antitelu.
[0164] Kao što će proceniti vešti stručnjaci, veznici povezuju citotoksične i/ili citostatičke agense sa antigen vezujućim ostatkom formiranjem kovalentne veze sa citotoksičnim i/ili citostatičkim agensom na jednom mestu i kovalentne veze sa antigen vezujućim ostatkom na drugom. Kovalentne veze su formirane reakcijom između funkcionalnih grupa na vezniku i funkcionalnih grupa na agensima i antigen vezujućem ostatku. Kao što se ovde koristi, izraz "veznik" je namenjen da uključi (i) nekonjugovane oblike veznika koji uključuju funkcionalnu grupu sposobnu za kovalentno povezivanje veznika sa citotoksičnim i/ili citostatičkim agensom i funkcionalnu grupu sposobnu za kovalentno povezivanje veznika na antigen vezujuće mesto kao što je antitelo; (ii) delimično konjugovane oblike veznika koji uključuju funkcionalnu grupu sposobnu za kovalentno povezivanje veznika sa antigen vezujućim ostatkom, kao što je antitelo, i koji je kovalentno vezan za citotoksični i/ili citostatički agens, ili obrnuto; i (iii) potpuno konjugovane oblike veznika koji je kovalentno vezan i za citotoksični i/ili citostatički agens i antigen vezujuće mesto, kao što je antitelo. U nekim ovde opisanim veznicima i ADCa, kao i sintonima koji se koriste za konjugaciju veznik-agenasi sa antitelima, ostaci koji sadrže funkcionalne grupe na vezniku i kovalentne veze formirane između veznika i antitela su posebno prikazane kao R<x>i XY, redom.
[0165] Veznici koji povezuju citotoksične i/ili citostatičke agense sa antigen vezujućim ostatkom od ADC anti-cMet mogu biti dugi, kratki, fleksibilni, kruti, hidrofilne ili hidrofobne prirode ili mogu sadržavati segmente koji imaju različite karakteristike, kao što su segmenati fleksibilnosti, segmenti krutosti itd. Veznik može biti hemijski stabilan na vanćelijska okruženja, na primer, hemijski stabilan u krvotoku, ili može uključivati veze koje nisu stabilne i oslobađaju citotoksične i/ili citostatičke agense u izvanćelijski milje. U nekim izvođenjima, veznici uključuju veze koje su konstruisane da oslobode citotoksične i/ili citostatičke agense nakon internalizacije ADC anti-cMet unutar ćelije. U nekim specifičnim izvođenjima, veznici uključuju veze konstruisane da se cepaju i/ili sagore ili na neki drugi način razgrade specifično ili nespecifično unutar ćelija. Širok spektar veznika korisnih za povezivanje lekova na antigen vezujuće ostatke, kao što su antitela u kontekstu ADCa, su poznati u tehnici. Bilo koji od ovih veznika, kao i drugi veznici, mogu biti korišćeni da vežu citotoksične i/ili citostatičke agense sa antigen vezujućim ostatkom od ADCa anti-cMet opisanih ovde.
[0166] Broj citotoksičnih i/ili citostatičkih agenasa povezanih sa antigen vezujućim ostatkom od ADC anti-cMet može varirati (naziva se "odnos leka-prema antitelu" ili "DAR") i biće ograničen samo brojem dostupih mesta vezivanja na antigen vezujućem ostatatku i brojem agenasa povezanih sa jednim veznikom. Tipično, veznik će povezati pojedinačni citotoksični i/ili citostatički agen sa antigen vezujućim ostatkom od ADC anti-cMet. U izvođenjima ADCa anti-cMet koji uključuju više od jednog citotoksičnog i/ili citostatičkog agensa, svaki agens može biti isti ili različiti. Sve dok ADC anti-cMet ne pokazuje neprihvatljive nivoe agregacije pod uslovima upotrebe i/ili skladištenja, razmatraju se ADCi anti-cMet sa DARa od dvadeset ili čak više. U nekim izvođenjima, ovde opisani ADCi anti-cMet mogu imati DAR u rasponu od oko 1-10, 1-8, 1-6 ili 1-4. U određenim specifičnim izvođenjima, ADCi anticMet mogu imati DAR od 2, 3 ili 4. U određenim izvođenjima ADC anti-cMet ima prosečni DAR od 3.1.
[0167] Veznici su poželjno, ali ne moraju biti, hemijski stabilni na uslove izvan ćelije, i mogu biti konstruisani da se cepaju, sagore i/ili na drugi način specifično razgrade unutar ćelije. Alternativno, mogu biti korišćeni veznici koji nisu konstruisani da se specifično cepaju ili razgrade unutar ćelije. Izbor stabilnog naspram nestabilnog veznika može zavisiti od toksičnosti citotoksičnog i/ili citostatičkog agensa. Širok spektar veznika korisnih za povezivanje lekova sa antitelima u kontekstu ADCa je poznat u tehnici. Bilo koji od ovih veznika, kao i ostali veznici, mogu biti upotrebljeni da povežu citotoksične i/ili citostatičke agense sa antitelom od ADCa opisanih ovde.
[0168] Primeri polivalentnih veznika koji mogu biti korišćeni da vežu mnoge citotoksične i/ili citostatičke agense sa jednim molekulom antitela su opisani, na primer, u WO 2009/073445; WO 2010/068795; WO 2010/138719; WO 2011/120053; WO 2011/171020; WO 2013/096901; WO 2014/008375; WO 2014/093379; WO 2014/093394; WO 2014/093640. Na primer, tehnologija tzv." Fleximer" veznika koju su razvili Mersana i sar. ima potencijal da omogući ADCe sa visokim DAR sa dobrim fizičko-hemijskim svojstvima. Kao što je prikazano ispod, tehnologija Mersana je bazirana na ugrađivanju molekula leka u solubilizirajuću poliacetalnu okosnicu putem sekvence od estarskih veza. Metodologija daje visoko opterećene ADCa (DAR do 20), a zadržava dobra fizičko-hemijska svojstva.
[0169] Dodatni primeri veznika dendritičkog tipa se mogu naći u US 2006/116422; US 2005/271615; de Groot et al (2003) Angew. Chem. Int. Ed. 42:4490-4494; Amir et al (2003) Angew. Chem. Int. Ed. 42:4494-4499; Shamis et al (2004) J. Am. Chem. Soc. 126:1726-1731; Sun et al (2002) Bioorganic & Medicinal Chemistry Letters 12:2213-2215;
Sun et al (2003) Bioorganic & Medicinal Chemistry 11:1761-1768; King et al (2002) Tetrahedron Letters 43:1987-1990.
[0170] Primeri monovalentnih veznika koji mogu biti korišćeni su opisani, na primer, u Nolting, 2013, Antibody-Drug Conjugates, Methods in Molecular Biology 1045:71-100; Kitson et al., 2013, CROs/CMOs - Chemica Oggi – Chemistry Today 31(4):30-38; Ducry et al., 2010, Bioconjugate Chem. 21:5-13; Zhao et al., 2011, J. Med. Chem. 54:3606-3623;
U.S. Patent No. 7,223,837; U.S. Patent No. 8,568,728; U.S. Patent No. 8,535,678; and WO2004010957.
[0171] Kao primer, a ne ograničenje, ispod su opisani neki cepljivi i necepljivii veznici koji mogu biti uključeni u ovde opisane ADCe anti-cMet.
5.6.2.1. Cepljivi veznici
[0172] U određenim izvođenjima, izabrani veznik je cepljiv in vivo. Cepljivi veznici mogu uključiti hemijski ili enzimski nestabilne ili razgradive veze. Cepljivi veznici se uglavnom oslanjaju na procese unutar ćelije za oslobađanje leka, kao što je smanjenje citoplazme, izloženost kiselim uslovima u lizozomu ili cepanje specifičnim proteazama ili drugim enzimima unutar ćelije. Cepljivi veznici generalno sadrže jednu ili više hemijskih veza koje se mogu hemijski ili enzimski cepati, dok se ostatak veznika nije cepljiv. U određenim aspektima, veznik sadrži hemijski labilnu grupu kao što su hidrazonske i/li disulfidne grupe. Veznici koji sadrže hemijski labilne grupe iskorišćavaju različita svojstva između plazme i nekih citoplazmatskih odeljaka. Intraćelijski uslovi koji olakšavaju oslobađanje leka za veznike koji sadrže hidrazon su kiselo okruženje endozoma i lizozoma, dok su veznici koji sadrže disulfid smanjeni u citozolu, koji sadrži visoke koncentracije tiola, npr. glutation. U određenim izvođenjima, stabilnost plazme veznika koji sadrži hemijski labilnu grupu može biti povećana uvođenjem sternog ometanja upotrebom supstituenata u blizini hemijski labilne grupe.
[0173] Kiselo-labilne grupe, kao što je hidrazon, ostaju netaknute tokom sistemske cirkulacije u neutralnom pH okruženju krvi (pH 7.3-7.5) i podvrgavaju se hidrolizi i oslobađanju leka nakon što se ADC internalizuje u blago kisele endozomne (pH 5.0-6.5) i lizozomne (pH 4.5-5.0) odeljke ćelije. Ovaj mehanizam oslobađanja zavisan od pH je povezan sa nespecifičnim oslobađanjem leka. Da bi se povećala stabilnost hidrazonske grupe veznika, veznik se može menjati hemijskom modifikacijom, npr. supstitucijom, omogućujući ugađanje radi postizanja efikasnijeg oslobađanja u lizozomu uz minimalizovan gubitak u cirkulaciji.
[0174] Veznici koji sadrže hidrazon mogu sadržavati dodatna mesta cepanja, kao što su dodatna mesta cepanja labilnom kiselinom i/ili enzimski labilna mesta cepanja. ADCi, uključujući primerne veznike koji sadrže hidrazon, uključuju sledeće strukture:
[0175] pri čemu D i Ab predstavljaju citotoksični i/ili citostatički agens (lek) i antitelo, redom, i n predstavlja broj lek-veznika povezanih na antitelom. U određenim veznicima, kao što je veznik (Ig), veznik sadrži dve cepljive grupe- disulfidni i hidrazonski ostatak. Za takve veznike, efikasno oslobađanje nemodifikovanog slobodnog leka zahteva kiseli pH ili redukciju disulfida i kiseli pH. Pokazalo se da su veznici kao što su (Ih) i (Ii) efikasni sa jednim mestom cepanja hidrazona.
[0176] Druge kiselo-labilne grupe koje mogu biti uključene u veznike uključuju veznike koji sadrže cis-akonitil. cis-Akonitil hemija koristi karboksilnu kiselinu koja je smeštena suprostavljeno na amidnu vezu da bi ubrzala hidrolizu amida pod kiselim usovima.
[0177] Cepljivi veznici mogu takođe uključiti disulfidnu grupu. Disulfidi su termodinamički stabilni na fiziološkoj pH i konstruisani su da oslobađaju lek nakon internalizacije unutar ćelija, pri čemu citosol obezbeđuje znatno više redukujućeg okruženja u porđenju sa vanćelijskim okruženjem. Cepanje disulfidnih veza generalno zahteva prisustvo citoplazmatskog tiol kofaktora, kao što je (redukovani) glutation (GSH), tako da veznici koji sadrže disulfid su razumno stabilni u cirkulaciji, selektivno oslobađajući lek u citozolu. Intrarćelijski enzim proteinska disulfid izomeraza, ili slični enzimi sposobni za cepanje disulfidnih veza, takođe mogu pridoneti preferencijalnom cepanju disulfidnih veza unutar ćelija. Prikazano je da je GSH prisutan u ćelijama u rasponu koncentracije od 0.5-10 mM u poređenju sa značajno nižom koncentracijom GSH ili cisteina, najzastupljenijeg tiola niske molekularne težine, u cirkulaciji od približno 5 µM. Ćelije tumora, gde nepravilan protok krvi dovodi do hipoksičnog stanja, rezultiraju pojačanom aktivnošću reduktivnih enzima, a samim tim i višim koncentracijama glutationa. U određenim aspektima, in vivo stabilnost veznika koji sadrži disulfid se može poboljšati hemijskom modifikacijom veznika, npr. upotrebom sternog ometanja na disulfidnu vezu.
[0178] ADCi, uključujući primerne veznike koji sadrže disulfid, uključuju sledeće strukture:
[0179] pri čemu D i Ab predstavljaju lek i antitelo, n predstavlja broj leka-veznika povezanih sa antitelom, i R je nezavisno izabran u svakom slučaju od vodonika ili alkila, na primer. U određenim aspektima, povećanje sternog ometanja u blizini disulfidne veze povećava stabilnost veze. Strukture kao što su (Ij) i (Il) pokazuju povećanu in vivo stabilnost kada je jedna ili više R grupa izabrano od nižeg alkila kao što je metil.
[0180] Druga vrsta cepljivog veznika koji može biti upotrebljen je veznik koji je posebno cepan enzimom. Takvi veznici su obično bazirani na peptidu ili uključuju peptidne regione koje deluju kao supstrati za enzime. Veznici bazirani na peptidu imaju tendenciju da budu stabilniji u plazmi i vanćelijskom miljeu od hemijski labilnih veza. Peptidne veze uglavnom imaju dobru stabilnost u serumu, jer lizozomski proteolitički enzimi imaju vrlo nisku aktivnost u krvi zbog endogenih inhibitora i nepovoljno visoke pH vrednosti krvi u poređenju sa lizozomima. Oslobađanje leka iz antitela se javlja posebno zbog delovanja lizosomskih proteaza, npr. katepsina i plazmina. Ove proteaze mogu biti prisutne na povišenim nivoima u određenim ćelijama tumora.
[0181] Cepljivi peptidi iz primera su izabrani od tetrapeptida kao što su Gli-Fe-Leu-Gli (SEK ID BR:98), Ala-Leu-Ala-Leu (SEK ID BR:99) ili dipeptida kao što su Val-Cit, Val-Ala, Met-(D)Lys, Asn-(D)Lys, Val-(D)Asp, Fe-Lys, Ile-Val, Asp-Val, His-Val, NorVal-(D)Asp, Ala-(D)Asp, Met-Lys, Asn-Lys, Ile-Pro, Me3Lis-Pro, FenilGli-(D)Lys, Met-(D)Lys, Asn-(D)Lys, Pro-(D)Lys, Met-(D)Lys, Asn-(D)Lys, Met-(D)Lys, Asn-(D)Lys. Dipeptidi su poželjniji u odnosu na duže polipeptide zbog hidrofobnosti dužih peptida.
[0182] Opisani su razni cepljivi veznici bazirani na dipeptidu korisni za vezivanje lekova kao što su doksorubicin, mitomicin, kamptotecin, talisomicin i auristatin/auristatin članovi familije za antitela (videti, Dubowchik et al., 1998, J. Org. Chem. 67:1866-1872; Dubowchik et al., 1998, Bioorg. Med. Chem. Lett. 8(21):3341-3346; Walker et al., 2002, Bioorg. Med. Chem. Lett. 12:217219; Walker et al., 2004, Bioorg. Med. Chem. Lett. 14:4323-4327; i Francisco et al., 2003, Blood 102:1458-1465, Dornina et al., 2008, Bioconjugate Chemistry 19:1960-1963). Svi ovi dipeptidni veznici, ili modifikovane verzije ovih dipeptidnih veznika mogu biti korišćeni u ovde opisanim ADCa. Drugi dipeptidni veznici koji mogu biti korišćeni uključuju one pronađene u ADCa, kao što su Genetics’ Brentuximab Vendotin SGN- 35 (Adcetris™), Seattle Genetics SGN-75 (anti-CD-70, Val-Cit-MMAF), Celldex Therapeutics glembatumumab (CDX- 011) (anti-NMB, Val-Cit-MMAE), i Citogen PSMA-ADC (PSMA-ADC-1301) (anti-PSMA, Val-Cit-MMAE).
[0183] Enzimski cepljivi veznici mogu sadržavati samo-sagorevajući odstojnik da prostorno odvoji lek od mesta enzimskog cepanja. Direktno spajanje leka na peptidni veznik može rezultirati proteolitičkim oslobađanjem aminokiselinskog adukta leka, čime se narušava njegova aktivnost. Upotreba samo-sagorevajućeg odstojnika omogućuje uklanjanje potpuno aktivnog, hemijski nemodifikovanog leka nakon hidrolize amidne veze.
[0184] Jedan samo-sagorevajući odstojnik je bifunkcionalna para-aminobenzil alkoholna grupa, koja je vezana sa peptidom preko amino grupe, formirajući amidnu vezu, dok lekovi koji sadrže amin mogu biti spojeni preko karbamatskih funkcija na benzilnu hidroksilnu grupu veznika (PABC). Dobijeni prolekovi se aktiviraju cepanjem posredovanim proteazom, dovodeći do reakcije eliminacije 1,6, oslobađajući nemodifikovani lek, ugljen dioksid i ostatke grupe veznka. Sledeća šema prikazuje fragmentaciju pamidobenzil etra i oslobađanje leka:
pri čemu X-D predstavlja nemodifikovani lek.
[0185] Opisane su heterociklične varijante ove samo-sagorevajuće grupe. Videti, na primer, US 7,989,434.
[0186] U nekim aspektima, enzimski cepljivi veznik je veznik baziran na β-glukuronskoj kiselini. Lagano oslobađanje leka se može postići cepanjem β-glukuronid glikozidne veze pomoću lizozomskog enzima β-glukuronidaze. Ovaj enzim je obilno prisutan u lizozomima i prekomerno je eksprimiran kod nekih vrsta tumora, dok je aktivnost enzima izvan ćelija niska. Veznici na bazi βglukuronske kiseline mogu biti korišćeni da zaobiđu sklonosti ADC da podleže agregaciji zbog hidrofilne prirode β-glukuronida. U nekim izvođenjima, veznici na bazi β-glukuronske kiseline su poželjni kao veznici za ADCe povezani sa hidrofobnim lekovima. Sledeća šema prikazuje oslobađanje leka iz ADC koji sadrži veznik na bazi β-glukuronske kiseline:
[0187] Opisani su razni cepljivi veznici bazirani na β-glukuronskoj kiselini korisni za vezivanje lekova kao što su auristatini, kamptotecini i analozi doksorubicina, veziva CBI veziva za male žlebove i psimberin sa antitelima (videti, Nolting, Chapter 5 "Linker Technology in Antibody-Drug Conjugates," In: Antibody-Drug Conjugates: Methods in Molecular Biology, vol. 1045, pp. 71-100, Laurent Ducry (Ed.), Springer Science & Business Medica, LLC, 2013; Jeffrey et al., 2006, Bioconjug. Chem. 17:831-840; Jeffrey et al., 2007, Bioorg. Med. Chem. Lett. 17:2278-2280; and Jiang et al., 2005, J. Am. Chem. Soc. 127:11254-11255). Svi ovi veznici bazirani na β-glukuronskoj kiselini mogu biti korišćeni u ovde opisanim ADCa anti-cMet.
[0188] Pored toga, citotoksični i/ili citostatički agensi koji sadrže fenolnu grupu mogu biti kovalentno vezani za veznik putem fenolnog kiseonika. Jedan takav veznik, opisan u WO 2007/089149, se oslanja na metodologiju u kojoj se diaminoetan tzv."SpaceLink" koristi u konjunkciji sa tradicionalnim samo-sagorevajućim grupama baziranim na "PABO" za isporuku fenola. Cepanje veznika je šematski prikazano ispod, gde D predstavlja citotoksičn i/ili citostatički agens koji ima fenolnu hidroksilnu grupu.
[0189] Cepljivi veznici mogu uključiti necepljive delove ili segmente i/ili cepljive segmente ili delove koji mogu biti uključeni u inače necepljivi veznik da bi ga učinili cepljivim. Samo kao primer, polietilen glikol (PEG) i srodni polimeri mogu sadržavati grupe koje se mogu cepati u polimernu okosnicu. Na primer, polietilen glikol ili polimerni veznik može sadržavati jednu ili više cepljivih grupa, kao što je disulfid, hidrazon ili dipeptid.
[0190] Ostale razgradive veze koje mogu biti upotrebljene u veznicima uključuju, ali nisu ograničene na, estarske veze formirane reakcijom PEG karboksilnih kiselina ili aktivisanih PEG karboksilnih kiselina sa alkoholnim grupama na biološki aktivnom agensu, pri čemu takve estarske grupe generalno hidrolziuju u fiziološkim uslovima da se oslobodi biološki aktivni agens. Hidrolitički razgradive veze uključuju, ali nisu ograničene na, karbonatne veze; iminske veze koje nastaju iz reakcije amina i aldehida; veze fosfatnog estra formirane reakcijom alkohola sa fosfatnom grupom; acetalne veze koje su produkt reakcije aldehida i alkohola; ortoestarske veze koje su produkt reakcije formata i alkohola; i oligonukleotidne veze formirane od fosforamiditne grupe, uključujući, ali bez ograničenja, na kraju polimera i 5’-hidroksilnu grupu oligonukleotida.
[0191] U određenim aspektima, veznik obuhvata enzimski cepljiv peptidni deo, na primer, veznik koji sadrži strukturnu formulu (IVa), (IVb), (IVc) ili (IVd):
ili njegovu so., pri čemu:
peptid predstavlja peptid (ilustrovan C→ N, i ne prikazuje karboksi i amino "termine") koji se mogu cepati lizozomskim enzimom; T predstavlja polimer koji sadrži jednu ili više etilen glikolnih jedinica ili alkilenski lanac ili kombinacije od njih;
R<a>je izabran od vodonika, alkila, sulfonata i metil sulfonata;
p je ceo broj u rasponu od 0 do 5;
q je 0 ili 1;
x je 0 ili 1;
y je 0 ili 1;
predstavlja tačku vezivanja veznika za citotoksični i/ili citostatički agens; i
* predstavlja tačku vezivanja za ostatak veznika. ;[0192] U određenim izvođenjima, lizozomski enzim je izabran od Katepsina B i β-glukoronidaze. ;[0193] U određenim aspektima, peptid je izabran od tripeptida ili dipeptida. U određenim izvođenjima, dipeptid je izabran od: Val-Cit; Cit-Val; Ala-Ala; Ala-Cit; Cit-Ala; Asn-Cit; Cit-Asn; Cit-Cit; Val-Glu; Glu-Val; Ser-Cit; Cit-Ser; Lys-Cit; Cit-Lys; Asp-Cit; CitAsp; Ala-Val; Val-Ala; Phe-Lis; Val-Lis; Ala-Lis; Fe-Cit; Leu-Cit; Ile-Cit; Fe-Arg; i Trp-Cit. U određenim aspektima, peptid je izabran od : Val-Cit; Cit-Val; Ala-Ala; Ala-Cit; Cit-Ala; Asn-Cit; Cit-Asn; Cit-Cit; Val-Glu; Glu-Val; Ser-Cit; Cit-Ser; Lis-Cit; Cit-Lis; Asp-Cit; Cit-Asp; Ala-Val; i Val-Ala i soli od njih. ;[0194] Primeri veznika prema strukturnoj formuli (IVa) koji mogu biti uključeni u ovde opisane ADCe uključuju ispod ilustrovane veznike (kao što je ilustrovano, veznici uključuju grupu pogodnu za kovalentno vezivanje veznika sa antitelom): ;;; ; ;; [0195] Primeri veznika prema strukturnoj formuli (IVb) koji mogu biti uključieni u ovde opisane ADCe uključuju veznike ilustrovane ispod (kao što je ilustrovano, veznici uključuju grupu pogodnu za kovalentno vezivanje veznika sa antitelom): ; ; ; ; [0196] Primeri veznika prema strukturnoj formuli (IVc) koji mogu biti uključieni u ovde opisane ADCe uključuju veznike ilustrovane ispod (kao što je ilustrovano, veznici uključuju grupu pogodnu za kovalentno vezivanje veznika sa antitelom): ;; ; [0197] Primeri veznika prema strukturnoj formuli (IVd) koji mogu biti uključieni u ovde opisane ADCe uključuju veznike ilustrovane ispod (kao što je ilustrovano, veznici uključuju grupu pogodnu za kovalentno vezivanje veznika sa antitelom): ; ; ; ;;; [0198] U određenim aspektima, veznik koji sadrži strukturnu formulu (IVa), (IVb), (IVc) ili (IVd) dalje sadrži karbonatni deo cepljiv izlaganjem kiselom medijumu. U određenim aspektima, veznik je spojen preko kiseonika na citotoksični i/ili citostatički agens. ;;5.6.2.2. Ne-cepljivi veznici ;;[0199] Iako cepljivi veznici mogu obezbediti određene prednosti, ovde opisani veznici od ADC ne moraju biti cepljivi. Za necepljive veznike, oslobađanje leka ne zavisi od diferencijalnih svojstvima između plazme i nekih citoplazmatskih odeljaka. Pretpostavlja se da se oslobađanje leka događa nakon internalizacije ADC putem endocitoze posredovane antigenom i isporuke u lizozomski odeljak, gde se antitelo razgrađuje na nivo aminokiselina preko unutarćelijske proteolitičke degradacije. Ovim se postupkom oslobađa derivat leka koji je formiran od leka, veznika i aminokiselinskog ostatka na koji je veznik kovalentno vezan. Metaboliti aminokiselinskog leka iz konjugata sa necepljivim veznicima su više hidrofilni i generalno su manje propustljivi za membranu, što dovodi do manjeg tzv. "efekta posmatrača" i manje nespecifične toksičnosti u poređenju sa konjugatima sa cepljivim veznikom. Generalno, ADCi sa necepljivim veznicima imaju veću stabilnost u cirkulaciji od ADCa sa cepljivim veznicima. Necepljivi veznici mogu biti alkilenski lanci ili mogu biti polimerni prirodno, kao što su, na primer, oni bazirani na polimerima polialkilen glikola, amidnim polimerima, ili mogu uključiti segmente alkilenskih lanaca, polialkilenskih glikola i/ili amidnih polimera. ;[0200] Opisani su razni necepljivi veznici korišćeni da vežu lekove sa antitelima. Videti, Jeffrey et al., 2006, Bioconjug. Chem. ;17;831-840; Jeffrey et al., 2007, Bioorg. Med. Chem. Lett. 17:2278-2280; and Jiang et al., 2005, J. Am. Chem. Soc. 127:11254-11255. Svi ovi veznici mogu biti uključeni u ovde opisane ADCe. ;[0201] U određenim aspektima, veznik je necepljiv in vivo, na primer veznik prema strukturnoj formuli (VIa), (VIb), (VIc) ili (VId) (kao što je ilustrovano, veznici uključuju grupu pogodnu za kovalentno vezivanje veznika sa antitelom: ;;; ;;; ili soli od njih, pri čemu: ;R<a>je izabran od vodonika, alkila, sulfonata i metil sulfonata; ;R<x>je otatak–deo koji uključuje funkcionalnu grupu sposobnu kovalentnom vezivanju veznika sa antitelom; i ;;predstavlja tačku spajanja veznika sa citotoksičnim i/ili citostatičkim agensom. ;[0202] Primeri veznika prema strukturnoj formuli (VIa)-(VId) koji mogu biti uključeni u ovde opisane ADCe uključuju ispod ilustrovane veznike (kao što je ilustrovano, veznici uključuju grupu pogodnu za kovalentno vezivanje veznika sa antitelom, i " " predstavlja mesto spajanja sa citotoksičim i/ili citostatičkim agensom): ; ;;; 5.6.2.3. Grupe korišćene da pričvrste antitela za veznike ;;[0203] Razne grupe mogu biti upotrebljene da pričvrste sitone veznk-lek sa antitelima da bi se dobili ADCi. Grupe spajanja mogu biti elektrofilne po svojoj prirodi i uključuju: maleimidne grupe, aktivirane disulfide, aktivne estre kao što su NHS estri i HOBt estri, haloformate, kiseliske halide, alkil i benzil halide kao što su haloacetamidi. Kao što je razmotreno ispod, postoje takođe nove tehnologije povezane sa "samo-stabilizirajućim" maleimidima i "premošćujućim disulfidima" koji se mogu koristiti u skladu sa otkrićem. Konkretna korišćena grupa će zavisiti, delimično, od mesta spajanja sa antitelom. ;[0204] Jedan primer "samo-stabilizirajuće" maleimidne grupe koja se spontano hidrolizuje pod uslovima konjugacije antitela da se dobiju ADC vrste sa poboljšanom stabilnošću je prikazan u šemi ispod. Videti US20130309256 A1; takođe Lyon et al., Nature Biotech objavljeno na internetu, doi: 10.1038/nbt.2968). ; ;;; [0205] Višeteorijski je otkriven metod za premošćavanje para sulfhidrilnih grupa izvedenih iz redukcije nativne disulfidne zglobne veze. Videti, Badescu et al., 2014, Bioconjugate Chem. 25:1124-1136. Reakcija je prikazana u šemi ispod. Prednost ove metodologije je sposobnost sinteze homogenih DAR4 ADCa potpunom redukcijom IgGs (da bi se dobila 4 para sulfhidrila), praćena reakcijom sa 4 ekvivalenta alkilirajuća agensa. ADCi koji sadrže " disulfidne mostove" su takođe izvedeni da imaju povećanu stabilnost. ;;; ;;; [0206] Slično tome, kao što je prikazano ispod, razvijen je derivat maleimida (1, ispod) koji može premostiti par sulfhidrilnih grupa. Videti WO2013/085925. ; ;;; 5.6.2.4. Razmatranja selekcije veznika ;;[0207] Kao što je poznato veštim stručnjacima, veznik izabran za određeni ADC može biti pod uticajem raznih faktora, uključujući, ali bez ograničenja na, mesto spajanja za antitelo (npr. Lis, Cis ili druge aminokiselinske ostatke), strukturna ograničenja farmakofora leka i lipofilnost leka. Specifični veznik izabran za ADC bi trebao nastojati da uravnoteži ove različite faktore za specifičnu kombinaciju antitelo/lek. Za pregled faktora na koje utiče izbor veznika u ADCa, videti Nolting, Chapter 5 "Linker Technology in Antibody-Drug Conjugates," In: Antibody-Drug Conjugates: Methods in Molecular Biology, vol. 1045, pp. 71-100, Laurent Ducry (Ed.), Springer Science & Business Medica, LLC, 2013. ;[0208] Na primer, ADCi anti-cMet mogu uticati na ubijanje slučajnih cMet-negativnih tumorskih ćelija prisutnih u blizini ćelija karcinoma koje eksprimiraju cMet. Mehanizam ubijanja pomsatračkih ćelija pomoću ADCa je pokazao da metabolički produkti formiranii tokom intraćelijske obrade ADCa mogu igrati ulogu. Ćelijski propustljivi citotoksični i/ili citostatički metaboliti ćelijski generisani metabolizmom ADCa u ćeljama koje eksprimiraju cMet izgleda da igraju ulogu u ubijanju ćelija posmatrača, dok nepropustljivi ćelijski metaboliti, koji nisu sposobni proći ćelijsku membranu i koji difundiraju u medijum, nemaju tzv. "efekat ubijanja posmatrača". U određenim aspektima, veznik je izabran da izvrši, pojača ili poveća "efekat ubijanja posmatrača" ADCa anti-cMet. ;[0209] Svojstva veznika takođe mogu uticati na agregaciju ADC pod uslovima upotrebe i/ili skladištenja. Tipično, ADCi prikazani u literaturi sadrže ne više od 3-4 molekula leka po delu koji veže antigen, na primer po molekulu antitela (videti, npr., Chari, 2008, Acc Chem Res 41:98-107). Pokušaji da se postignu veći odnosi leka i antitela ("DAR") često nisu uspevali, naročito ako su i lek i veznik bili hidrofobni, zbog agregacije ADC. (King et al., 2002, J Med Chem 45:4336-4343; Hollander et al., 2008, Bioconjugate Chem 19:358-361; Burke et al., 2009 Bioconjugate Chem 20:1242-1250). U mnogim slučajevima, DARi veći od 3-4 mogu biti korisni kao sredstva za povećanje jačine. U slučajevima kada je citotoksični i/ili citostatički agens hidrofoban prirodmo, može biti poželjno izabrati veznike koji su relativno hidrofilni kao sredstva za smanjenje agregacije ADC, posebno u slučajevima kada su DARi veći od 3-4 poželjni. Tako, u određenim aspektima, veznik uključuje hemijske delove (ostatke) koji smanjuju agregaciju ADCa tokom skladištenja i/ili upotrebe. Veznik može inkorporisati polarne ili hidrofilne grupe kao što su naelektrisane grupe ili grupe koje se naelektrišu pod fiziološkim pH da bi se smanjila agregacija ADCa. Na primer, veznik može inkorporisati naelektrisane grupe kao što su soli ili grupe koje deprotoniraju, npr. karboksilati, ili protonati, npr. amini, na fiziološkoj pH. ;[0210] Primeri polivalentnih veznika za koje je prikazano da daju DARe do 20 koji mogu biti korišćeni da vežu brojne citotoksične i/ili citostatičke agense sa antitelom, su opisani u ;WO 2009/073445; WO 2010/068795; WO 2010/138719; WO 2011/120053; WO 2011/171020; WO 2013/096901; WO 2014/008375; WO 2014/093379; WO 2014/093394; WO 2014/093640. ;[0211] U određenim aspektima, agregacija ADCa tokom skladištenja ili upotrebe je manja od oko 10%, kao što je određeno hromatografijom isključivanja veličine (SEC).U određenim aspektima, agregacija ADCa tokom skladištenja ili upotrebe je manja od 10%, kao što je manja od oko 5%, manja od oko 4%, manja od oko 3%, manja od oko 2%, manja od oko 1%, manja od oko 0.5%, manja od oko 0.1% ili čak niže, kao što je utvrđeno hromatografijom isključivanja veličine (SEC). ;;5.6.3. ABBV-399 ;;[0212] Kao što je opisano kroz specifikaciju, ABBV-399 je ADC koji se sastoji od cMet ciljanog antitela ABT-700 (PR-1266688, h224G11) konjugovanog sa snažnim citotoksin monometil auristatinom E (MMAE) kroz valin citrulinski (vc) veznik. ABBV-399 je korišćen je u kliničkom ispitivanju Faze 1 (videti Primer 16) sa DAR od 3.1. ;[0213] U alternativnim izvođenjima, ABBV-399 može biti korišćen u odnosu E2/E4 1:1, što odgovara prosečnom DAR od 3.0. Drugim rečima, ABBV-399 je korišćen kao kompozicija koja sadrži odnos 1: 1 prečišćenih frakcija E2 i E4 konjugata antitelo-lek. ;;5.6.4. ABT-700 PBD ;[0214] ABT-700 (S238C)-PBD (Kabat numerisanje) je isto kao ABT-700 (S239C)-PBD (Eu numerisanje), i sastoji se od dva molekula PBD veznik-lek konjugovanih sa cis inženjeriranim mAb ABT-700. Postupak konjugacije se sastoji od kvantitativnog smanjenja inženjeriranih i međulančanih disulfida. Redukciona smeša je zatim prečišćena da bi se uklonio višak reagensa i njegovih nusproizvoda, praćena kvantitativnom oksidacijom međulančanih disulfida, i zatim konjugaciom sa viškom PBD veznik-lek. Nakon gašenja, reakciona smeša je prečišćena i razmenjena u puferu da bi se dobio ABT-700 (S238C) -PBD. Identifickovani su reakcioni parametri koji daju konjugat sa> 80% DAR2 punjenim lekom. ;[0215] Sekvenca ABT-700 PBD, koja nosi mutaciju S238C (Kabat numerisanje) (ekvivalentno mutaciji S239C u Eu numerisanju), je praćena (CDRi su podvučeni; sistem numerisanja je Kabat; i S238C mutacija je predstavljena sa C ( podebljano, podvučeno i kurziv): ;;Sekvenca aminokiselina (10 AA po grupi, 5 grupa po liniji) ;;Teški lanac (SEK ID BR: 171) (podvučene CDR sekvence otkrivene kao SEK ID BR 173-175, redom, prema redosledu pojavljivanja): ;;; ;;; Laki lanac (SEK ID BR: 172) (podvučene CDR sekvence otkrivene kao SEK ID BR 176-178, redom, prema redosledu pojavljivanja): ;;; ;;; 5.7. Metode pravljenja konjugata antitelo lek anti-cMet ;;[0216] Ovde opisani ADCi mogu biti sintetizovani korišćenjem dobro poznatih hemikalija. Izabrane hemikalije, između ostalog, će zavisiti, od identiteta citotoksičnog i/ili citostatičkog agensa (a), veznika i grupa korišćenih za spajanje veznika za antitelo. Generalno, ADCi prema formuli (I) mogu biti pripremljeni prema sledećoj šemi: ;;D-L-R<x>+Ab-R<y>→ (I) [D-L-XY]n-Ab ;;gde su D, L, Ab, XY i n kao što su prethodno definisani, i R<x>i R<y>predstavljaju komplementarne grupe sposobne formiranju kovalentih veza jedne sa drugom, kao što je iznad raspravljeno. ;[0217] Identiteti grupa R<x>i R<y>će zavisiti od hemije korišćene da poveže sinton D-L-R<x>sa antitelom. Generalno, korišćena hemija ne bi trebala menjati integritet antitela, na primer njegovu sposobnost da veže svoj cilj. Poželjno, svojstva vezivanja konjugovanog antitela će blisko ličiti svojstvima nekonjugovanog antitela. Poznate razne hemikalije i tehnike za konjugovanje molekule sa biološkim molekulima, kao što su antitela su poznate u tehnici, a naročito sa antitelima. Videti npr., Amon et al., "Monoclonal Antibodies For Immunotargeting Of Drugs In Cancer Therapy," in: Monoclonal Antibodies And Cancer Therapy, Reisfeld et al. Eds., Alan R. Liss, Inc., 1985; Hellstrom et al., "Antibodies For Drug Delivery," in: Controlled Drug Delivery, Robinson et al.Eds., Marcel Dekker, Inc., 2nd Ed. 1987; Thorpe, "Antibody Carriers Of Cytotoxic Agents In Cancer Therapy: A Review," in: Monoclonal Antibodies ’84: Biological And Clinical Applications, Pinchera et al.,Eds., 1985; "Analysis, Results, and Future Prospective of the Therapeutic Use of Radiolabeled Antibody In Cancer Therapy," in: Monoclonal Antibodies For Cancer Detection And Therapy, Baldwin et al., Eds., Academic Press, 1985; Thorpe et al., 1982, Immunol. Rev. 62:119-58; PCT publication WO 89/12624. Bilo koja od ovih hemikalija može biti korišćena da poveže sintone sa antitelom. ;[0218] Poznate su brojne funkcionalne grupe R<x>i hemijske supstance korisne za vezivanje sintona sa dostupnim ostacima lizina, i uključuju kao primer, ali bez ograničenja, NHS-estre i izotiocijanate. ;[0219] Poznate su brojne funkcionalne grupe R<x>i hemijske supstance korisne za vezivanje sintona sa slobodnim sulfhidrilnim grupama ostataka cisteina, i uključuju kao primer, ali bez ograničenja, haloacetile i maleimide. ;[0220] Međutim, hemijske konjugacije nisu ograničene na dostupne grupe bočnih lanaca. Bočni lanci kao što su amini mogu biti konvertovani u druge korisne grupe, kao što su hidroksili, vezivanjem odgovarajućeg malog molekula sa aminom. Ova strategija može biti korišćena da poveća broj dostupnih mesta vezivanja na antitelu konjugovanjem multifunkcionalnih malih molekula na bočnim lancima dostupnih aminokiselinskih ostataka antitela. Funkcionalne grupe R<x>pogodne za kovalentno vezivanje sintona sa ovim "konvertovanim" funkcionalnim grupama su tada uključene u sintone. ;[0221] Antitelo takođe može biti inženjerirano tako da uključuje aminokiselinske ostatke za konjugaciju. Pristup inženjeriranim antitelima da uključe ne-genetski kodirane aminokiselinske ostatke korisne za konjugaciju lekova u kontekstu ADCa je opisan od Axup et al., 2012, Proc Natl Acad Sci USA. 109(40):16101-16106, kao i hemijske supstance i funkcionalne grupe korisne za vezivanje sintona sa ne-kodiranim aminokiselinama. ;[0222] Tipično, sintoni su povezani sa bočnim lancima aminokiselinskih ostataka antitela, uključujući, na primer, primarnu amino grupu dostupnih lizinskih ostataka ili sulfhidrilnu grupu dostupnih cisteinskih ostataka. Slobodne sulfhidrilne grupe mogu biti dobijene smanjenjem međulančanih disulfidnih veza. ;[0223] Za veze u kojima je R<y>sulfhidrilna grupa (na primer, kada je R<x>maleimid), antitelo je generalno potpuno ili delimično redukovano da bi se prekinuli interlančani disulfidni mostovi između ostataka cisteina. Specifični ostaci cisteina i međulančani disulfidni mostovi koji mogu biti redukovani za spajanje sintona lek-veznik, uključujući grupu pogodnu za konjugaciju na sulfhidrilnoj grupi na primer antititelo ABT-700, uključuju kao primer, ali bez ograničenja, ostatke C221, C223, C225 , i C228 na humanom IgG1teškom lancu, i ostatak C218 na humanom Ig kappa lakom lancu ABT-700 otkrivenom ovde. ;[0224] Ostaci cisteina za spajanje sintona koji ne učestvuju u disulfidnim mostovima mogu biti inženjerirani u antitelo mutacijom jednog ili više kodona. Ovi nespareni cisteini obezbeđuju sulfhidrilnu grupu pogodnu za konjugaciju. Poželjni položaji za inkorporisanje inženjeriranih cisteina uključuju, kao primer, a ne ograničenje, položaje S112C, S113C, A114C, S115C, A176C, S180C, S252C, V286C, V292C, S357C, A359C, S398C, S428C (Kabat numerisanje) na humanom IgG1teškom lancu i položajima V110C, S114C, S121C, S127C, S168C, V205C (Kabat numerisanje)) na humanom Ig kappa lakom lancu (vudeti, enpr., U.S. Patent No. 7,521,541, U.S. Patent No. 7,855,275 i U.S. Patent No. 8,455,622). ;[0225] Kao što će biti procenjeno od strane stručne osobe, broj citotoksičnih i/ili citostatičkih agenasa vezanih sa molekulom antitela može varirati, tako da pripravak ADC može biti heterogene prirode, gde neka antitela u pripravku sadrže jedan vezani agens, neka dva, neka tri itd. (a neka nijedan). Stepen heterogenosti će zavisiti, između ostalih stvari, od hemijskh supstanci korišćenih za vezivanje citotoksičnih i/ili citostatičkih agenasa. ;Na primer, tamo gde su antitela redukovana da bi se dobile sulfidrilne grupe za spajanje, često se proizvode heterogene smeše antitela koja imaju nula, 2, 4, 6 ili 8 vezanih agenasa po molekulu. Dalje, ograničavanjem molarnog odnosa jedinjenja za spajanje, često se proizvode antitela koja imaju nula, 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7 ili 8 vezanih agenasa po molekulu. Tako, razumeće se i da zavisno od konteksta, navedeni odnosi antitelo lek (DARi) mogu biti proseci za zbirku antitela. Na primer, "DAR 4" se odnosi na ADC pripravak koji nije bio podvrgnut prečišćavanju da bi se izolovali specifični DAR pikovi i sadrži heterogenu smešu molekula ADC imajući različit broj citostatičkih i/ili citotoksičnih agenasa spojenih po antitelu (npr. 0, 2 , 4, 6, 8 agenasa po antitelu), ali ima prosečni odnos leka i antitela od 4. Slično tome, "DAR8" se odnosi na heterogeni ADC pripravak u kojem je prosečni odnos leka i antitela 8. ;[0226] Heterogeni ADC pripravci mogu biti obrađeni, na primer, hidrofobnom interakcijskom hromatografijom ("HIC") da bi se dobili pripravci obogaćeni u ADC imajući specificirani DAR od interesa (ili smešu od dva ili više specificiranih DARI). Takvi obogaćeni pripravci ovde su dizajnirani kao "EX", gde "E" označava da je ADC pripravak obrađen i obogaćen u ADC imajući specifični DAR, i "X" predstavlja broj citostatičkih i/ili citotoksičnih agenasa vezanih po molekulu ADC. Pripravci obogaćeni u smeši od ADCa imajući dva specifična DARi su označeni "EX/EY", tri specifična DARi "EX/EY/EZ" itd., gde "E" označava da je ADC pripravak obrađen da se obogate navedeni DARi i " X, "Y" i "Z" predstavlja obogaćene DARe. Kao specifični primeri, "E2" se odnosi na ADC pripravak koji je obogaćen da sadrži prvenstveno ADC imajući dva citostatička i/ili citotoksična agensa povezana po molekulu ADC. "E4" se odnosi na ADC pripravak koji je obogaćen da sadrži prvenstveno ADCe imajući četiri citostatatička i/ili citotoksična agensa povezana po molekulu ADC. "E2/E4" se odnosi na ADC pripravak koji je obogaćen da sadrži prvenstveno dve populacije ADC, od kojih jedna ima dva citostatička i/ili citotoksična agensa povezana po molekulu ADC, a druga imajući četiri citostatička i/ili citotoksična agensa vezana po molekulu ADC. ;[0227] Kako se ovde koriste, obogaćeni pripravci "E" će generalno biti najmanje 80% čisti u navedenim DAR ADCa, iako mogu biti dostupni veći nivoi čistoće, kao što su čistoće od najmanje oko 85%, 90%, 95%, 98% ili čak veće po mogućnosti. Na primer, pripravak "EX" će generalno biti najmanje oko 80% čist u ADCa imajući X citostatičkih i/ili citotoksičnih agenasa povezanih po molekulu ADC. Za pripravke obogaćene "višim redom", kao što su, na primer, pripravci "EX/EY", ukupni zbir ADCa imajući X i Y citostatičke i/ili citotoksične agense vezane po molekulu ADC će generalno sadržavati najmanje oko 80% od ukupnih ADCa u pripremi. Slično tome, u obogaćenom pripravku "EX/EY/EZ", ukupni zbir ADCa imajući X, Y i Z citostatičke i/ili citotoksične agense vezane po molekulu ADC će sadržavati najmanje oko 80% ukupnih ADCa u pripravku. ;[0228] Čistoća može biti procenjena različitim metodama, kao što je poznato u tehnici. Kao specifičan primer, pripravak ADC može biti analiziran preko HPLC ili drugom hromatografijom, i čistoća je procenjena analizom područja ispod kriva dobijenih vrhova. Specifične metode hromatografije koje mogu biti primenjene za procenu čistoće ADC pripravaka su date s u Primeru 6. ;[0229] SL. 2 ilustruje Postupak I, koji je korišćen da se dobiji DAR-i od 3.1. SL. 3 ilustruje postupak II koji je korišćen da se dobije odnos E2/E41:1. ;[0230] Specifične metode za dobijanje heterogenih smeša ADCa koje sadrže humanizovano antitelo huM25 imajući prosečan DAR od 4, kao i visoko prečišćeni pripravci koji sadrže 2 i 4 vezana agensa su dati u odeljku sa Primerima. Ove specifične metode mogu biti modifikovane korišćenjem rutinskih veština da se dobiju heterogeni i/ili homogeni ADCi koji sadrže druga anti-cMet antitiela, veznike i/ili citotoksične i/ili citostatičke agense. ;[0231] Posle konjugacije vcMMAE na ABT-700, korišćen je dodatni korak postupka za smanjenje prosečnog odnosa leka i antitela (DAR) od približno 5 do približno 3, što rezultira homogenijim produktom leka sa manje MMAE molekula konjugovanih sa antitelom. Ova strategija je sprovedena da bi se smanjio broj molekula leka spojenih na ABBV-399, što može poboljšati njegovu podnošljivost, jer molekuli leka visokog reda mogu pridoneti nesrazmernoj toksičnosti. ;;5.8. Kompozicije ;;[0232] Ovde opisani ADCi mogu biti u obliku kompozicija koje sadrže ADC i jedan ili više nosača, ekscipijenasa i/ili razblaživača. Kompozicije mogu biti formulisane za specifične upotrebe, kao što su veterinarska upotreba ili farmaceutska upotreba kod ljudi. Oblik kompozicije (npr. suvi prah, tečna formulacija itd.) i ekscipijensi, razblaživači i/ili nosači koji se koriste će zavisiti od namenjene upotrebe antitela i/ili ADC, i za terapijsku upotrebu, način primene. ;[0233] Za terapijsku upotrebu, kompozicije mogu biti isporučene kao deo sterilne farmaceutske kompozicije koja uključuje farmaceutski prihvatljiv nosač. Ova kompozicija može biti u bilo kojem pogodnom obliku (u zavisnosti od željenog metoda primenjivanja na pacijentu). Farmaceutska kompozicija može biti primenjivana na pacijentu različitim načinima, kao što je oralni, transdermalni, potkožni, intranazalni, intravenski, intramuskularni, intratumorni, intratekalni, topikalni ili lokalni. Najpogodniji način primene u bilo kojem datom slučaju će zavisiti od određeng antitela i/ili ADC, subjekta, i prirode i ozbiljnosti bolesti i fizičkog stanja subjekta. Tipično, farmaceutska kompozicija će biti primenjivana intravenozno ili subkutano. ;[0234] Farmaceutske kompozicije mogu biti prikladno predstavljene u jediničnim oblicima doziranja sadržavajući unapred određenu količinu ovde opisanog antitela i/ili ADC po dozi. Količina antitela i/ili ADC uključena u jediničnu dozu će zavisiti od bolesti koja se leči, kao i od drugih faktora koji su dobro poznati u tehnici. Takve jedinične doze mogu biti u obliku liofilizovanog suvog praha koji sadrži količinu antitela i/ili ADC pogodnu za jednokratnu primenu, ili u obliku tečnosti. Jedinični dozni oblici suvog praha mogu biti pakovani u komplet sa špricom, pogodnom količinom razblaživača i/ili drugih komponenti korisnih za primenu. Jedinične doze u tečnom obliku mogu biti povoljno isporučene u obliku šprica napunjenog prethodno količinom antitela i/ili ADC prikladnih za jednokratnu primenu. ;[0235] Farmaceutske kompozicijei mogu takođe biti isporučene u rasutom obliku koji sadrži količine ADC prikladne za više primena. ;[0236] Farmaceutske kompozicije mogu biti pripremljene za skladištenje u obliku liofilizovanih formulacija ili vodenih rastvora mešanjem antitela i/ili ADC imajući željeni stepen čistoće sa opcionim farmaceutski prihvatljivim nosačima, ekscipijensima ili stabilizatorima koji se obično koriste u tehnici (svi su ovde navedeni kao "nosači"), tj. puferi, stabilizatori, konzervansi, izotonifikatori, ne-jonski deterdženti, antioksidanti i drugi ostali aditivi.Videti., Remington’s Pharmaceutical Sciences, 16th edition (Osol, ed. 1980) and Remington: The Science and Practice of Pharmacy, 22nd Edition (Edited by Allen, Loyd V. Jr., 2012). Takvi aditivi ne bi trebali biti toksični za primatelje u primenjenim dozama i koncentracijama. ;[0237] Puferski agensi pomažu u održavanju pH u rasponu koji stabilizuje protein. Oni mogu biti prisutni u širokom rasponu koncentracija, ali će tipično biti prisutni u koncentracijama u rasponu od oko 2 mM do oko 50 mM. Pogodni puferski agensi za upotrebu sa predmetnim otkrićem uključuju i organske i neorganske kiseline i soli od njih kao što su citratni puferi (npr. smeša mononatrijum citrata-dinatrijum-citrata, smeša limunske kiseline-trinatrijum citrata, smeša limunske kiseline, mononatrijum citrata, itd.), sukcinatni puferi (npr. smeša sukcinske kiseline-mononatrijum sukcinata, smeša sukcinske kiseline-natrijum hidroksida, smeša sukcinske kiseline-dinatrijum sukcinata itd.), tartaratni puferi (npr. smeša vinske kiseline-natrijum tartarata, smeša vinske kiseline i kalijum tartarata, smeša vinske kiseline i natrijum hidroksida itd.), puferi fumarata (npr. smeša fumarne kiseline-mono natrijumfumarata, smeša fumarne kiseline-dinatrijum fumarata, smeša mononatrijum fumarata-dinatrijum fumarata, itd.), puferi glukonata (npr. smeša glukonske kiseline-natrijum glukonata, smeša glukonske kiseline-natrijum hidroksida, smeša glukonske kiseline-kalijum glukonata itd.), oksalatni pufer (npr. smeša oksalne kiseline-natrijum oksalata, smeša oksalne kiseline i natrijumhidroksida, smeša oksalne kiseline-kalijum oksalata itd.), laktatni puferi (npr. smeša mlečne kiseline-natrijum laktata, smeša mlečne kiseline-natrijum hidroksida, smeša mlečne kiseline-kalijum laktata itd.) i acetatni puferi (npr. smeša sirćetne kiselinenatrijum acetata, smeša sirćetne kiseline- natrijum hidroksida itd.). Dodatno, fosfatni puferi, histidinski puferi i trimetilaminske soli kao što je Tris mogu biti korišćeni. ;[0238] Konzervansi mogu dodati da uspore rast mikroba i mogu biti dodati u količinama u rasponu od oko 0.2%-1% (w/v). Pogodni konzervansi za upotrebu u predmetnom otkriću uključuju fenol, benzil alkohol, meta-krezol, metil paraben, propil paraben, oktadecildimetilbenzil amonijum hlorid, benzalkonijum halide (npr. hlorid, bromid i jodid), heksametonijum hlorid i alkil parabene kao što su metil ili propil paraben, katehol, resorcinol, cikloheksanol i 3-pentanol. Izotoničari koji se ponekad nazivaju i "stabilizatori" mogu biti dodati da bi se osigurala izotoničnost tečnih kompozicija iz predmetnog otkrića i uključuju polihidroksilne šećerne alkohole, na primer trihidroksilne ili više šećerne alkohole, kao što je glicerin, eritritol, arabitol, ksilitol, sorbitol i manitol. Stabilizatori se odnose na široku kategoriju ekscipijenasa koji mogu varirati u funkciji od glomaznog agensa do aditiva koji rastvara terapijski agens ili pomaže da spreči denaturaciju ili prianjanje na zidu spremnika. Tipični stabilizatori mogu biti polihidroksilni šećerni alkoholi (nabrojani iznad); aminokiseline kao što su arginin, lizin, glicin, glutamin, asparagin, histidin, alanin, ornitin, L-leucin, 2-fenilalanin, glutaminska kiselina, treonin itd., organski šećeri ili šećerni alkoholi, kao što su laktoza, trehaloza, stahioza, manitol, sorbitol, ksilitol, ribitol, mioinozitol, galakititol, glicerol i slično, uključujući ciklitole kao što je inozitol; polietilen glikol; aminokiselinski polimeri; redukcioni agensi koji sadrže sumpor, kao što je urea, glutation, tioktinska kiselina, natrijum tioglikolat, tioglicerol, ɑ-monotioglicerol i natrijum tiosulfat; polipeptidi niske molekularne težine (npr. peptidi sa 10 ostataka ili manje); proteini kao što su humani serumski albumin, goveđi serumski albumin, želatin ili imunoglobulini; hidrofilni polimeri, kao što su polivinilpirolidon monosaharidi, kao što su ksiloza, manoza, fruktoza, glukoza; disaharidi kao što su laktoza, maltoza, saharoza i trehaloza; i trisaharidi kao što je rafinoza; i polisaharidi kao što je dekstran. Stabilizatori mogu biti prisutni u količinama u rasponu od 0.5 do 10 težinskih % po težini ADC. ;[0239] Nejonski tenzidi ili deterdženti (takođe poznati kao "agensi za vlaženje") mogu biti dodati da bi se smanjila apsorpcija na površinama i pomoglo rastvaranje glikoproteina, kao i zaštita glikoproteina od agregacije izazvane agitacijom, što takođe omogućava izlaganje formulacije površinskom naprezanju bez izazivanja denaturacije proteina. Pogodni ne-jonski tenzidi uključuju polisorbate (20, 80, itd.), poloksamere (184, 188 itd.) i pluronske poliole. Nejonski tenzidi mogu biti prisutni u rasponu od oko 0.05 mg/mL do oko 1.0 mg/mL, na primer oko 0.07 mg/mL do oko 0.2 mg/mL. ;[0240] Dodatni razni ekscipijensi uključuju agense za povećanje zapremine (npr. skrob), helatne agense (npr. EDTA), antioksidanse (npr. askorbinsku kiselinu, metionin, vitamin E) i korastvarače. ;[0241] Primeri vodenih kompozicija pogodnih za primenu putem intravenske infuzije sadrže 20 mg/mL ADC anti c-Met, 10 mM pufera histidina, pH 6.0, 7%(w/v) saharoze, 0.03% (w/v) polisorbata 80. Kopozicija može biti u obliku liofilizovanog praha koji nakon rekonstitucije sa 5.2 mL sterilne vode ili drugog rastvora pogodnog za injekciju ili infuziju (na primer 0.9% fiziološkog rastvora, Ringerovog rastvora, Ringerovog rastvora laktata, itd.) daje iznad vodenu kompoziciju. To ili druga izvođenja kompozicija, mogu takođe biti u obliku šprica ili drugog uređaja pogodnog za injekcije i/ili infuzije prethodno napunjenog količinom kompzicije pogodne za jednokratnu primenu ADC anti-cMet. ;[0242] U jednom aspektu, kompozicija sadrži ABBV-399 u odnosu 1:1 prečišćenih frakcija E1 i E4. Takve frakcije mogu biti dobijene bilo kojim metodom poznatim u tehnici za prečišćavanje ADCa, uključujući metod iz Primera 2 i 3. U jednom aspektu, kompozicija sadrži ABBV-399 sa DAR u rasponu od 0-10. U drugom aspektu, kompozicija sadrži ABBV-399 sa DAR u rasponu od 1-4. U drugom aspektu, kompozicija sadrži ABBV-399 sa DAR u rasponu od 2-4. U drugom aspektu, kompozicija sadrži ABBV-399 sa DAR od oko 3.1. U drugom aspektu, kompozicija sadrži ABBV-399 sa DAR od oko 3.0. ;;5.9. Metode upotrebe ;;[0243] Kao što je prethodno rečeno, za razne čvrste tumore cMet je eksprimiran/prekomerno eksprimiran. Podaci dati ovde pokazuju da ADCi anti-cMet vrše snažnu anti tumorsku aktivnost protiv ovih cMet -eksprimirajući/prekomerno eksprimirajući tumore in vivo. Prema tome, ADCi i/ili farmaceutske kompozicije koji sadrže ADCe mogu biti terapijski korišćeni da leče cMeteksprimirajući (tj. cMet+tumore) i cMet- eksprimirajući prekomerno tumore (tj. cMet /eksprimirajući prekomerno tumore). ;[0244] Generalno, metode uključuju primenjivanje na humanom pacijentu koji ima tumor koji eksprimira cMet ili prekomerno eksprimira cMet količinu od ADC anti-cMet koja je efikasna za pružanje terapijske koristi. Bilo koji metod poznat prosečnom stručnjaku u ovoj oblasti tehnike za procenu prisustva i/ili nivoa ekspresije cMet proteinskog receptora u ćeliji može biti upotrbljen. U jednom izvođenju, nivoi cMet su membranski. U drugom izvođenju nivoi cMet su citoplazmatski. U drugom izvođenju izmerena je ukupna ekspresija cMet. Poželjni metod za određivanje nivoa ekspresije cMet je detaljno opisan u Primeru 17 i ovde se odnosi na "protokol bojenja cMet ABBV-ADC". H-rezultati (0-300) i IHC rezultat (0, 1+, 2+ i 3+) su procenjeni na osnovu metoda koje su poznate prosečnom patologu u struci. U jednom izvođenju, pacijenti sa H-rezultatom <150 i/ili IHC rezultatom 0 i 1+ su izabrani za lečenje. U jednom izvođenju, za lečenje su izabrani pacijenti sa H-rezultatima ≥150 i/ili IHC rezultatom 2+ i 3+. ;[0245] Pacijenti izabrani za ADC tretmane ovog otkrića uključuju one sa cMet ekspresijom i one sa cMet prekomernom ekspresijom tumora, koji uključuju, ali nisu ograničeni na bilo koji čvrsti tumor (uključujući i one koji prekomerno eksprimiraju HGF i/ili imaju abnormalnu aktivaciju HGF/cMet signaliziranja ili ekspresije). Specifičniji primeri uključuju: karcinom pluća; karcinom dojke (npr. invazivni duktalni karcinom); karcinome glave i vrata; karcinome pankreasa; karcinome želuca; kolorektalne karcinome (uključujući plućne metastaze kolorektalnog karcinoma); karcinome jajnika (npr. serozni adenokarcinom); karcinoe želuca; karcinome bubrega (npr. karcinom bubrežne ćelije, papilarni karcinom bubrežne ćelije, karcinome bistre ćelije, nasledni karcinomi papilarne bubrežne ćelije); karcinome nadbubrežne žlezde; gastrointestinalne/ezofagealne karcinome; meduloblastome; gliome; karcinome jetre (npr. hepatocelularne karcinome (uključujući napredni, neopozive HCC)); karcinom prostate (metastatski ili nemetastatski); melanome; karcinome pljuvačnih žlezda; sarkome; karcinome grlića materice; miksoidne liposarkome; adenokarcinome paratireoidne žlezde; karcinome endometrijuma; epitelioidne mezoteliome; karcinome slepog creva; karcinome peharaste ćelije; metastatski difuzni tip želudačanog adenokarcinoma sa karakteristikama prstenastog pečata; anaplastični limfom velike ćelije (ALCL); bilo koji uznapredovali zloćudni tumor, uključujući, ali bez ograničenja na, uznapredovale, recidivne, rezistentne podvrste ovde navedenih karcinoma. ;[0246] Karcinom pluća može biti klasifikovan korišćenjem različitih sistema. U jednom sistemu karcinom pluća uključuje adenokarcinom (mešoviti, acinarni, papilarni, čvrstii, mikropapilarni, lepidni nemucinozni i lepidni mucinozni), karcinom skvamozne ćelije, karcinom velike ćelije (npr. nemaloćelijski karcinom pluća ili NSCLC (npr. uznapredovali ili ne-uznapredovali, LCNEC, LCNEM, NSCLC-nije drugačije naznačeno (NOS)/adenoskvamozni karcinom, sarkomatoidni karcinom, adenoskvamozni karcinom, i neuroendokrini karcinom velikih ćelija); i karcinom malih ćelija pluća (karcinom ili SCLC)). ;[0247] Alternativno, u drugom sistemu, karcinom pluća može biti klasifikovan u preinvazivne lezije, minimalno invazivni adenokarcinom i invazivni adenokarcinom (invazivni mucinozni adenokarcinom, mucinozni BAC, koloidni, fetalni (niskog i visokog stepena) i enterični). ;[0248] Češće karcinom pluća može biti kategorizovan ili kao karcinom malih ćelija pluća ("SCLC") ili kao nemaloćelijski karcinom pluća ("NSCLC"). NSCLCi mogu dalje biti kategorizovani kao skvamozni ili neskvamozni. Primer neskvamoznog NSCLC je adenokarcinom. ;[0249] Karcinom može biti novo dijagnostikovan i naivan za lečenje, ili može biti recidivan, rezistentann, ili recidivan i rezistentan, ili metastaza ili metastatski oblik cMet eksprimiranja ili tumori koji prekomerno eksprimiraju -cMet. Kao što je prikazano u Primeru 14 ovog otkrića, tumori koji prekomerno eksprimiraju cMet pokazuju rezistenciju na druge ciljane ili neciljane hemoterapije, zadržavaju osetljivost na ABBV-399. ;[0250] Štaviše, kao što je prikazano na SL. 12C, tumor sa prekomernom ekspresijom cMet-a koji se na kraju povukao nakon tretmana sa anti-cMet antitelom ABT-700 ostao je osetljiv na ponovno lečenje sa ADC anti-cMet, ABBV-399. Prema tome, ovde opisani ADCi anti-cMet pružaju značajne prednosti u odnosu na trenutne ciljane i neciljane pristupe lečenja tumora koji prekomerno eksprimiraju cMet. ;[0251] ADCi anti-cMet mogu biti primenjivani samostalno (monoterapija) ili kao dodatak drugim terapijama protiv karcinoma ili zajedno sa njima, ili sa ciljanim ili ne-ciljanim agensima protiv karcinoma. Kada se daju kao monoterapija ADCi anti-cMet, mogu se koristiti jedan ili više ADCa anti-cMet. U određenim izvođenjima, ADC anti-cMet se primenjuje u konjunkciji sa anticMet antitelom koje prepoznaje različit epitop na cMetu od onoga koji prepoznaje ADC. Ovo se može učiniti, na primer, kako bi se stimulisala internalizacija cMet receptora. Alternativno, ABT-700 se može dati pre ABBV-399 (ili drugog ADC anti-cMet) da bi se "blokirao" endogeni cMet na normalnim tkivima u nastojanju da se smanji moguća toksičnost povezana sa aktivnošću ABBV-399 na normalnim tkivima. ;[0252] U drugom izvođenju, ADC anti-cMet prepoznaje dva različita epitopa koji se ne preklapaju unutar cMet-a. Takvi ADCi, poznati i kao ADCi koji nose dvovalentno biparatopsko antitelo, mogu imati nekoliko prednosti u odnosu na monovalentna antitela. Na primer, mogu indukovati grupisanje cMet receptora, što bi zauzvrat moglo promovisati snažnu internalizaciju, promet lizozoma i degradaciju, poboljšavajući tako oslobađanje dela leka od ADC u citoplazmu, kao i njegovu dostupnost za negativni efekattzv."efekat posmatrača". ;[0253] Bilo da se daje kao monoterapija ili kao dodatak drugim terapijama ili agensima ili zajedno sa njima, količina ADC anticMet je primenjena tako da ukupni režim lečenja pruža terapijsku korist. Pod terapiskom koristi se podrazumeva da upotreba ADC anticMet za lečenje karcinoma kod pacijenta rezultira bilo kojom dokazanom kliničkom koristi u poređenju bez terapije (kada je to prikladno) ili poznatim standardom nege. Klinička korist se može proceniti bilo kojom metodom poznatom stručnjaku sa ovog područja tehnike. U jednom izvođenju, klinička korist je procenjena na osnovu objektivne stope odgovora (ORR) (utvrđena korišćenjem RECIST verzije 1.1), trajanja odgovora (DOR), preživljavanja bez progresije bolesti (PFS) i/ili celokupnog preživljavanja (OS). U nekim izvođenjima, potpuni odgovor ukazuje na terapijsku korist. U nekim izvođenjima, delimični odgovor ukazuje na terapijsku korist. U nekim izvođenjima stabilna bolest ukazuje na terapijsku korist. U nekim izvođenjima, povećanje ukupnog preživljavanja ukazuje na terapijsku korist. U nekim izvođenjima, terapijska korist može predstavljati poboljšanje vremena do progresije bolesti i/ili poboljšanje simptoma ili kvaliteta života. U drugim izvođenjima,, terapijska korist se možda neće prevesti u produženi period kontrole bolesti, već znatno smanjeno opterećenje simptomima, rezultirajući poboljšanjem kvaliteta života. Kao što će biti očito stručnjacima u ovom području tehnike, terapijska korist se može primetiti korišćenjem samih ADCa anti-cMet (monoterapija) ili kao dodatak drugim terapijama protiv karcinoma, ili sa njima, i/ili ciljanih ili ne-ciljanih anti kancerogenih agenasa. Preferencijalne metode za procenjivanje terapijske koristi su detaljno opisane u Primerima, kao što su korišćeni u Fazi 1 kliničkog ispitivanja sa ABBV-399. ;[0254] Tipično, terapijska korist je procenjena korišćenjem standardnih kliničkih testova namenjenih merenju odgovora na novi način lečenja karcinoma. Za procenu terapijskih koristi ovde opisanih ADCa anti-cMet može biti korišćen jedan ili kombinacija sledećih testova: (1) Kriterijum za ocenu odgovora u čvrstim tumorima (RECIST) verzija 1.1 (za detalje pogledati Primer 16), (2) status izvedbe Istočne kooperativne onkološke grupe (ECOG), (3) kriterijum imunološkog odgovora (irRC), (4) bolest koja se može proceniti procenom tumorskih antigena, (5) validirane skale ishoda prijavljene od pacijenta i/ili (6 ) Kaplan-Meier procene ukupnog preživljavanja i preživljavanja bez progresije bolesti. ;[0255] ECOG skala stanja izvedbe prikazana u TABELI 3 se koristi za opisivanje nivoa funkcionisanja pacijenta u smislu njegove sposobnosti da se brine o sebi, svakodnevnoj aktivnosti i fizičkoj sposobnosti. Skalu je razvila Istočna kooperativna onkološka grupa (ECOG), koja je sada deo Istraživačke grupe za karcinom ECOG-ACRIN, i objavljena je 1982. godine. ;;; ;;; [0256] Procena promene u opterećenju tumora je važna karkteristika kliničke procene terapije lekovima protiv karcinoma. Smanjenje tumora (objektivni odgovor) i vreme za razvoj progresije bolesti su važne krajnje tačke u kliničkim ispitivanjima karcinoma. Standardizovani kriterijumi odgovora, poznati kao RECIST (Response Evaluation Criteria in Solid Tumors- Kriterijumi za procenu odgovora kod čvrstih tumora), objavljeni su 2000. godine. Ažuriranje (RECIST 1.1) je objavljeno 2009. godine. Kriterijumi RECIST se obično koriste u kliničkim ispitivanjima gde je objektivni odgovor primarna krajnja točka studije, kao i u ispitivanjima gde se preduzimaju procene stabilne bolesti, progresije tumora ili vremena do progresije, jer su ove mere ishoda zasnovane na proceni anatomskog opterećenja tumora i njegove promene tokom ispitivanja. TABELA 4 daje definicije kriterijuma odgovora koji se koriste za određivanje objektivnog odgovora tumora na ispitivani lek, kao što su ovde opisani ADCi anti-cMet. ;; ;;; [0257] Sekundarne mere ishoda koje mogu biti korišćene za određivanje terapijske koristi ovde opisanih ADCa anti-cMet uključuju, stopu objektivnog odgovora (ORR), preživljenje bez progresije bolesti (PFS), trajanje ukupnog odgovora (DOR) i dubinu odgovora (DpR) ). ORR se definiše kao proporcija učesnika koji postižu potpuni odgovor (CR) ili delimični odgovor (PR). PFS se definiše kao vreme od datuma prve doze ADCa anti-cMet do progresije bolesti ili smrti, šta god se pre dogodi. DOR se definše kao vreme od početnog CR ili PR učesnika do trenutka napredovanja bolesti. DpR se definiše kao procenat smanjenja tumora primećen na maksimalnoj tački odgovora u poređenju sa početnim opterećenjem tumora. Kliničke krajnje tačke za ORR i PFS mogu biti određene na osnovu iznad opisanog kriterijuma RECIST 1.1. ;[0258] Drugi niz kriterijuma koji mogu biti korišćeni za potpunu karakterizaciju i određivanje odgovora na imunoterapijske agense, kao što su terapije karcinoma zasnovane na antitelima, jeste kriterijum imunološkog odgovora (irRC), koji je razvijen za merenje čvrstih tumora 2009. godine, i ažurirano 2013. godine (Wolchok, et al. Clin. Cancer Res. 2009; 15(23): 7412-7420 and Nishino, et al. Clin. Cancer Res. 2013; 19(14): 3936-3943). Ažurirani irRC kriterijumi se obično koriste za procenu efekta imunoterapijskog agensa (npr. Anti-PD1 antitela) i definišu odgovor prema TABELI 5. ; ;;; [0259] Tumorski antigeni koji mogu biti korišćeni za procenu terapijske koristi ovde opisanih ADCa anti- cMet uključuju ApoE, CD11c, CD40, CD45 (PTPRC), CD49D (ITGA4), CD80, CSF1R, CTSD, GZMB, Ly86, MS4A7, PIK3AP1, PIK3CD, CD74, CCL5, CCR5, CXCL10, IFNG, IL10RA1, IL-6, ACTA2, COL7A1, LOX, LRRC15, MCPT8, MMP10, NOG, SERPINE1, STAT1, TGFBR1, CTSS, PGF, VEGFA, C1QA, C1QB, ANGPTL4, EGLN, ANGPTL4, EGLN3, BNIP3, AIF1, CCL5, CXCL10, CXCL11, IFI6, PLOD2, KISS1R, STC2, DDIT4, PFKFB3, PGK1, PDK1, AKR1C1, AKR1C2, CADM1, CDH11, COL6A3, CTGF, HMOX1, KRT33A, LUM, WNT5A, IGFBP3, MMP14, CDCP1, PDGFRA, TCF4, TGF, TGFB1,TGFB2, CD11b, ADGRE1 (EMR1, F4/80), CD86, CD68, MHC-Klasa II, CD3, HLA-DR, CD4, CD3, CD5, CD19, CD7, CD8, CD16, TCRɑβ, TCRyδ, PD-1, PDL-1, CTLA-4, kisela fosfataza, ACTH, alkalna fosfataza, alfa-fetoprotein CA-125, CA15-3, CA19-9, CA-195, C-212, CA-549, kalcitonin, kateholamini, katepsin -D, CEA, ERBB2 (HER2/neu), hromagranin-A, c-Mic, EGFR, ERA test estrogenskog receptora), feritin, gastrin, 5-HIAA, hCG, alfa-HCG, beta-HCG, HVA, LDH1-5, NSE (neuron specifična enolaza), pankreasni polipeptid, PLAP, PLP, PRA (progesteronski receptor A), proinsulin C-peptid, PSA, SMA, SCC, tiroglobulin, TDT, TPA, i alfa-TSH. Ovi antigeni mogu biti procenjeni na nivou DNK, RNK ili proteina korišćenjem tehnika sekvenciranja DNK, tehnika sekvenciranja RNK, mikročipa genskog čipa, metoda baziranih na PCR, protočne citometrije ili imunohistohemijskih metoda koje su poznate stručnjacima sa ovog područja tehnike. ;[0260] Jedan primer terapijske koristi koja proizlazi iz upotrebe ovde opisanih ADCa anti-cMet za lečenje cMet eksprimirajućih i cMet-prekomerno eksprimirajućih tumora, bilo da se primenjuju kao monoterapija ili kao dodatak drugim terapijama ili agensima, ili sa njima, predstavlja potpuni odgovor. Sledeći primer terapijske koristi koja proizlazi iz upotrebe ovde opisanih ADCa anti-cMet na tumore koji prekomerno eksprimiraju cMet, bilo da se daju kao monoterapija ili kao dodatak drugim terapijama ili agensima ili sa njima, je delimičnan odgovor. ;[0261] Validirane skale ishoda prijavljene od pacijenta mogu takođe biti korišćene za označavanje odgovora svakog pacijenta kroz određeni sistem izveštavanja. Umesto da su usmerene na bolest, takve skale ishoda se bave zadržavanjem funkcije tokom vođenja hroničog stanja. Jedan neograničavajući primer potvrđenog ishoda pacijenta skale je PROMIS® (Informacijski sistem za merenje ishoda koji izveštava pacijent) od Nacionalnog instituta za zdravlje Sjedinjenih Država. Na primer, PROMIS® Instrument za fizičku funkciju za odrasle pacijente sa karcinomom može proceniti prijavljene sposobnosti za funkcionisanje gornjih ekstremiteta (npr. spretnost), donjih ekstremiteta (npr. hodanje ili pokretljivost) i centralnih regiona (npr. vrat, leđa) i takođe uključuje i svakodnevne aktivnosti, poput obavljanja poslova. ;[0262] Kaplan-Meierive krive (Kaplan and Meier, J. Am. Stat. Assoc. 1958; 53(282): 457-481) takođe mogu biti korišćene za procenu ukupnog preživljavanja i preživljavanja bez progresije bolesti kod pacijenata sa karcinomom koji su podvrgnuti anti-cMet antitelima ili ADC terapiji u poređenju sa standardnom negom. ;;5.9.1. Dodatne terapije ;;[0263] ADCi anti-cMet mogu biti korišćeni kao dodatak drugim agensima ili tretmanima koji imaju antikancerogena svojstva ili sa njima. Kada se koriste kao dodatak, anti-cMet i drugi agens(i) mogu biti formulisani zajedno u jednoj farmaceutskoj formulaciji, ili mogu biti formulisani i primenjivani odvojeno, bilo na jednom koordiniranom režimu doziranja ili na različitim režimima doziranja. Agensi primenjivani kao dodatak ADCa anti-cMet obično će imati komplementarne aktivnosti sa ADCa anti-cMet, tako da ADCi i drugi agensi međusobno ne utiču negativno. ;[0264] Agensi koji mogu biti korišćeni zajedno sa ADCa anti-cMet uključuju, ali nisu ograničena na, alkilirajuće agense, inhibitore angiogeneze, antitela, antimetabolite, antimitotike, antiproliferative, antivirusne agense, inhibitore aurora kinaze, inhibitore ALK kinaze (na primer, crizotinib (XALKORI®), ceritinib (ZYKADIA®), i alectinib (ALECENSA®), promotere apoptoze (na primer, Bcl-2 familija inhibitora), aktivatore puta receptora smrti, Bcr-Abl inhibitore kinaze, antitela BiTE (Bi-specifični angažman T-ćelija), konjugate antitelo lek, modifikatore biološkog odgovora, inhibitore kinaze zavisne od ciklina, inhibitore ćelijskog ciklusa, inhibitore ciklooksigenaze-2, DVDe, inhibitore receptora (ErbB2), homolognog onkogenog virusa leukemije, inhibitore faktora rasta, inhibitore proteina toplotnog šoka (HSP)-90, inhibitore histon deacetilaze (HDAC), hormonalne terapije, imunološke lekove, inhibitore inhibitora proteinske apoptoze (IAPi), interkalacione antibiotike, inhibitore kinaze, inhibitore kinezina, inhibitore Jak2, mete sisara inhibitore rapamicina, mikroRNKe, mitogenom aktivirane vanćelijske inhibitore kinaze regulisane signalom, multivalentne vezujuće proteine, ne-steroidne anti-inflamatorne lekove (NSAIDe), inhibitore poli ADP (adenozin difosfat)-riboza polimeraze (PARP), platina hemoterapeutike, inhibitore polo-slične kinaze (Plk), inhibitore fosfoinozitid-3 kinaze (PI3K), inhibitore proteazoma, analoge purina, analoge pirimidina, inhibitore receptora tirozin kinaze, biljne alkaloide retinoide/deltoide, male inhibitorne ribonukleinske kiseline (siRNKa), inhibitore topoizomeraze, inhibitore ubikvitin ligaze i slično, kao i kombinacije jednog ili više ovih agenasa. ;[0265] BiTE antitela su bispecifična antitela koja usmeravaju T-ćelije da napadaju ćelije karcinoma istovremeno vezujući dve ćelije. T-ćelija napada ciljanu ćeliju karcinoma. Primeri BiTE antitela uključuju adekatumumab (Micromet MT201), blinatumomab (BLINCYTO®, Amgen i Onyx Pharmaceuticals) i slično. Bez ograničenja teorijom, jedan od mehanizama pomoću kojih T-ćelje izazivaju apoptozu ciljane ćelje karcinoma je egzocitoza komponenata citolitičkih granula, koje uključuju perforin i granzim B. ;[0266] SiRNKi su molekul koje imaju endogene baze RNK ili hemijski modifikovane nukleotide. Modifikacije ne ukidaju ćeljsku aktivnost, već daju povećanu stabilnost i/ili povećanu ćelijsku snagu. Primeri hemijskih modifikacija uključuju fosforotioat grupe, 2’-deoksinukleotid, 2’-OCH3-sadržavajući ribonukleotide, 2’-F-ribonukleotide, 2’-metoksietil ribonukleotide, kombinacije od njih i slično. SiRNK može imati različite dužine (npr. 10-200 bps) i strukture (npr. strukture ukosnice, jednostruke/dvostruke niti, ispupčenja, ureze, nepodudaranja) i obrađuju se u ćelijama da bi se oobezbedilo aktivno utišavanje gena. Dvolančana siRNK (dsRNK) može imati jednak broj nukleotida na svakom lancu (tupi krajevi) ili asimetričnim krajevima (nadvisi). Previs od 1-2 nukleotida može biti prisutan na osetljivom i/ili neosetljivom lancu, kao i na 5’- i/ili 3’-krajevima datog lanca. ;[0267] Multivalentni vezujući proteini su vezujući proteini koji sadrže dva ili više mesta za vezivanje antigena. Multivalentni vezujući proteini su inženjerirani tako da imaju tri ili više mesta za vezivanje antigena i obično nisu antitiela koja se javljaju u prirodi. Termin "multispecifični vezujući protein" znači vezujući protein sposoban vezivanju dvq ili više srodnih ili nepovezanih ciljeva. Proteini koji se vežu sa dvostrukim varijabilnim domenom (DVD) su četverovalentni ili multivalentni proteini koji se vežu i sadrže dva ili više mesta za vezivanje antigena. Takvi DVDi mogu biti monospecifični (tj. sposobni vezivanju jedog antigena) ili multispecifični (tj. sposobni vezivanju dva ili više antigena). DVD vezujući proteini koji se sastoje od dva DVD polipeptida teškog lanca i dva DVD polipeptida lakog lanca se odnose na DVD Ig’s. Svaka polovina DVD Ig sadrži DVD polipeptid teškog lanca, DVD polipeptid lakog lanca i dva mesta za vezivanje antigena. Svako vezujuće mesto sadrži varijabilni domen teškog lanca i varijabilni domen lakog lanca sa ukupno 6 CDR-a koji su uključeni u vezivanju antigena po mestu vezivanja antigena. ;[0268] Alkilirajući agensi uključuju, ali nisu ograničena na, altretamin, AMD-473, AP-5280, apazikvon, bendamustin, brostalicin, busulfan, karbokvon, karmustin (BCNU), hlorambucil, CLORETAZINE® (laromustin, VNP 40101M), ciklofosfamid, dakarbazin, estramustin, fotemustin, glufosfamid, ifosfamid, KW-2170, lomustin (CCNU), mafosfamid, melfalan, mitobronitol, mitolaktol, nimustin, azotni iperit N-oksid, ranimustin, temozolomid, tioTEPA, TREANDA® (bendamustin), treosulfan, i trofosfamid. ;[0269] Inhibitori angiogeneze uključuju, ali nisu ograničeni na, inhibitore tirozinske kinaze (Tie-2) specifične za endotelni receptor, inhibitore receptora epidermalnog faktora rasta (EGFR), inhibitore receptora faktora rasta insulina (IGFR-2), inhibitore matriksne metaloproteinaze-2 (MMP-2), inhibitore matriksne metaloproteinaze-9 (MMP-9), inhibitore receptora faktora rasta izvedene iz trombocita (PDGFR), analoga trombospondina i inhibitore tirozinske kinaze receptora vaskularnog endotelnog faktora rasta (VEGFR). ;[0270] Antimetaboliti uključuju, ali nisu ograničeni na , ALIMTA® (pemetreksed disodium, LY231514, MTA), 5-azacitidin, XELODA® (kapecitabin), karmofur, LEUSTAT® (kladribin), klofarabin, citarabin, citarabin okfosfat, citozin arabinozid, decitabin, deferoksamin, doksifluridin, eflornitin, EICAR (5-etinil-1-β-D-ribofuranozilimidazol-4-karboksamid), enocitabin, etilcitidin, fludarabin, 5-fluorouracil sam ili u kombinaciji sa leukovorin, GEMZAR® (gemcitabin), hidroksiureu, ALKERAN® (melfalan), merkaptopurin, 6-merkaptopurin ribozid, metotreksat, mikofenolnu kiselinu, nelarabin, nolatreksed, okfosfat, pelitreksol, pentostatin, raltitreksed, Ribavirin, triapin, trimetreksat, S-1, tiazofurin, tegafur, TS-1, vidarabin, i UFT. ;[0271] Antivirusni lekovi uključuju, ali nisu ograničeni na, ritonavir, aciklovir, cidofovir, ganciklovir, foskarnet, zidovudin, ribavirin, i hidroksihlorokin. ;[0272] Inhibitori aurora kinaze uključuju, ali nisu ograničeni na, ABT-348, AZD-1152, MLN-8054, VX-680, inhibitore kinaze specifične za Aurora A, inhibitore kinaze specifične za Aurora B i inhibitore pan-Aurora kinaze. ;[0273] Inhibitori proteina Bcl-2 uključuju, ali nisu ograničeni na, AT-101 ((-)gosipol), GENASENSE® (G3139 ili oblimersen (tzv."antisense" oligonukleotide koji ciljaju Bcl-2)), IPI-194, IPI-565, N-(4-(4-((4’-hloro(1,1’-bifenil)-2-il)metil)piperazin-1-il)benzoil)-4-(((1R)-3-(dimetilamino)-1-((fenilsulfanil)metil)propil)amino)-3-nitrobenzensulfonamid), N-(4-(4-((2-(4-hlorofenil)-5,5-dimetil-1-cikloheks-1-en-1-il)metil)piperazin-1-il)benzoil)-4-(((1R)-3-(morfolin-4-il)-1-((fenilsulfanil)metil)propil)amino)-3-((trifluorometil)sulfonil)benzensulfonamid, venetoklaks i GX-070(obatoklaks). ;[0274] Inhibitori Bcr-Abl kinaze uključuju, ali nisu ograničeni na, DASATINIB® (BMS-354825) i GLEEVEC® (imatinib). ;[0275] CDK inhibitori uključuju, ali nisu ograničeni na, AZD-5438, BMI-1040, BMS-032, BMS-387, CVT-2584, flavopiridol, GPC-286199, MCS-5A, PD0332991, PHA-690509, seliciklib (CYC-202, R-roskovitin), i ZK-304709. ;[0276] COX-2 inhibitori uključuju, ali nisu ograničeni na, ABT-963, ARCOXIA® (etorikoksib), BEXTRA® (valdekoksib), BMS347070, CELEBREX® (celekoksib), COX-189 (lumirakoksib), CT-3, DERAMAXX® (derakoksib), JTE-522, 4-metil-2-(3,4-dimetilfenil)-1-(4-sulfamoilfenil-1H-pirol), MK-663 (etorikoksib), NS-398, parekoksib, RS-57067, SC-58125, SD-8381, SVT-2016, S-2474, T-614, i VIOXX® (rofekoksib). ;[0277] EGFR inhibitori uključuju, ali nisu ograničeni na, afatinib (GILOTRIF®), ABX-EGF, anti-EGFR imunolipozome, EGF-vakcine, EMD-7200, ERBITUX® (cetuksimab), HR3, IgA antitela, IRESSA® (gefitinib), TARCEVA® (erlotinib ili OSI-774), TP-38, EGFR fuzioni protein, PORTRAZZA® (necitumumab), TAGRISSO® (osimertinib), TYKERB® (lapatinib), ;TARCEVA® (erlotinib), i TAGRISSO® (osimertinib). ;[0278] ErbB2 receptor uključuje, ali nije ograničen na, CP-724-714, CI-1033 (canertinib), HERCEPTIN® (trastuzumab), TYKERB® (lapatinib), OMNITARG® (2C4, pertuzumab), TAK-165, GW-572016 (lonafarnib), GW-282974, EKB-569, PI-166, dHER2 (HER2 vakcine), APC-8024 (HER-2 vakcine), anti-HER/2neu bispecifično anttelo, B7.her2IgG3, AS HER2 trifunkcionalna bispecifična antitela, mAB AR-209, i mAB 2B-1. ;[0279] Inhibitori histonske deacetilaze uključuju, ali nisu ograničeni na, depsipeptid, LAQ-824, MS-275, trapoksin, suberoilanilid hidroksaminsku kiselinu (SAHA), TSA i valproinsku kiselinu. ;[0280] HSP-90 inhibitori uključuju, ali nisu ograničeni na 17-AAG-nab, 17-AAG, CNF-101, CNF-1010, CNF-2024, 17-DMAG, geldanamicin, IPI-504, KOS-953, MYCOGRAB® (humano rekombinantno antitelo na HSP-90), NCS-683664, PU24FC1, PU-3, radicikol, SNX-2112, STA-9090, i VER49009. ;[0281] Inhibitori apoptoze proteina uključuju, ali nisu ograničeni na, HGS1029, GDC-0145, GDC-0152, LCL-161, i LBW-242. ;[0282] Put aktivatora smrti receptora uključuje, ali nije ograničen na, TRAIL, antitela ili druge agense koji ciljaju TRAIL ili smrt receptora (npr. DR4 i DR5) kao što su Apomab, konatumumab, ETR2-ST01, GDC0145 (leksatumumab), HGS-1029 , LBY-135, PRO-1762 i trastuzumab. ;[0283] Inhibitori kinezina uključuju, ali nisu ograničeni na, inhibitore Eg5kao što su AZD4877, ARRY-520; i CENPE inhibitori kao što je GSK923295A. ;[0284] JAK-2 inhibitori uključuju, ali nisu ograničeni na, CEP-701 (lesaurtinib), XL019 i INCB018424. ;[0285] MEK inhibitori uključuju, ali nisu ograničeni na, ARRY-142886, ARRY-438162, PD-325901, PD-98059, i trametinib. ;[0286] mTOR inhibitori uključuju, ali nisu ograničeni na, AP-23573, CCI-779, everolimus, RAD-001, rapamicin, temsirolimus, ATP-kompetitivne TORC1/TORC2 inhibitore, uključujući PI-103, PP242, PP30, i Torin 1. ;[0287] Nesteroidni anti-inflamatorni lekovi uključuju, ali nisu ograničeni na, AMIGESIC® (salsalat), DOLOBID® diflunisal), MOTRIN® (ibuprofen), ORUDIS® (ketoprofen), RELAFEN® (nabumeton), FELDENE® (piroksikam), ibuprofen kremu, ALEVE® (naproksen) i NAPROSYN® (naproksen), VOLTAREN® (diklofenak), INDOCIN® (indometacin), CLINORIL® (sulindak), TOLECTIN® (tolmetin), LODINE® (etodolak), TORADOL® (ketorolak), i DAYPRO® (oksaprozin). ;[0288] PDGFR inhibitori uključuju, ali nisu ograničeni na, C-451, CP-673 and CP-868596. ;[0289] Platinasti hemoterapeutici uključuju, ali nisu ograničeni na, cisplatin, ELOXATIN® (oksaliplatin) eptaplatin, lobaplatin, nedaplatin, PARAPLATIN® (karboplatin), satraplatin i pikoplatin. ;[0290] Inhibitori kinaze kao polo uključuju, ali nisu ograničeni na, BI-2536. ;[0291] BRAF inhibitori vemurafenib, dabrafenib, kobimetinib. ;[0292] Inhibitori fosfoinozitid-3 kinaze (PI3K) uključuju, ali nisu ograničeni na, vortmanin, LY294002, XL-147, CAL-120, ONC-21, AEZS-127, ETP-45658, PX-866, GDC-0941, BGT226, BEZ235, i XL765. ;[0293] Analozi trombospondina uključuju, ali nisu ograničeni na, ABT-510, ABT-567, ABT-898 i TSP-1. ;[0294] VEGFR inhibitori uključuju, ali nisu ograničeni na, AVASTIN® (bevacizumab), ABT-869, AEE-788, ANGIOZYME ™ (ribozim koji inhibira angiogenezu (Ribozyme Pharmaceuticals (Boulder, CO)) i Chiron (Emeryville, CA)), aksitinib ( AG-13736), AZD-2171, CP-547,632, IM-862, MACUGEN® (pegaptamib), NEXAVAR® (sorafenib, BAY43-9006), pazopanib (GW-786034), vatalanib (PTK-787, ZK-222584), SUTENT® (sunitinib, SU-11248), VEGF trap -VEGF zamka i ZACTIMA ™ (vandetanib, ZD-6474), kabozantanib (VEGFR2 i cMet inhibitor), ramucirumab (anti-VEGFR2 inhibitorni mAb). ;[0295] Antibiotici uključuju, ali nisu ograničeni na, interkalacione antibiotike aklarubicin, aktinomicin D, amrubicin, anamicin, adriamicin, BLENOXANE® (bleomicin), daunorubicin, CAELYX® ili MYOCET® (lipozomski doksorubicin), elsamitrucin, epirbucin, glarbuicin, ZAVEDOS® (idarubicin), mitomicin C, nemorubicin, neokarzinostatin, peplomicin, pirarubicin, rebekamicin, stimalamer, streptozocin, VALSTAR® (valrubicin) i zinostatin. ;[0296] Inhibitori topoizomeraze uključuju, ali nisu ograničeni na, aklarubicin, 9-aminokamptotecin, amonafid, amsakrin, bekatekarin, belotekan, BN-80915, CAMPTOSAR® (irinotekan hidrohlorid), kamptotecin, CARDIOXANE® (deksrazoksin), diflomotekan, edotekarin, ELLENCE® ili PHARMORUBICIN® (epirubicin), etopozid, eksatekan, 10-hidroksikamptotecin, gimatekan, lurtotekan, mitoksantron, Onivyde ™ (lipozomski irinotekan), oratecin, pirarbucin, piksantron, rubitekan, sobuzoksan, SN-38, taflupozid, i topotekan. ;[0297] Antitela uključuju, ali nisu ograničena na, AVASTIN® (bevacizumab), CD40-specifična antitela, chTNT-1/B, denosumab, ERBITUX® (cetuksimab), HUMAX-CD4® (zanolimumab), IGF1R-specifična antitela, lintuzumab, PANOREX ® (edrecolomab), RENCAREX® (WX G250), RITUXAN® (rituksimab), ticilimumab, trastuzumab, pertuzumab, VECTIBIX ® (panitumumab) i CD20 antitela tipa I i II. ;[0298] Hormonalne terapije uključuju, ali nisu ograničene na, ARIMIDEX® (anastrozol), AROMASIN® (eksemestan), arzoksifen, CASODEX® (bikalutamid), CETROTIDE® (cetroreliks), degareliks, deslorelin, DESOPAN® (trilostan), deksametazon, DROGENIL® (flutamid), EVISTA® (raloksifen), AFEMA ™ (fadrozol), FARESTON® (toremifen), FASLODEX® (fulvestrant), FEMARA® (letrozol), formestan, glukokortikoide, HECTOROL® (dokserkalciferol), RENAGEL® (sevelamer karbonat), lasofoksifen, leuprolid acetat, MEGACE® (megesterol), MIFEPREX® (mifepriston), NILANDRON ™ (nilutamid), NOLVADEX® (tamoksifen citrat), PLENAXIS ™ (abareliks), prednizon, PROPECIA® (finasterid), rilostan, SUPREFACT® (buserelin), TRELSTAR® (luteinizirajući hormon koji oslobađa hormon (LHRH)), VANTAS® (Histrelin implantat), VETORYL® (trilostan ili modrastan), XTANDI® (enzalutamid), ZOLADEX® (fosrelin, goserelin) i ZYTIGA® (abiratenon). ;[0299] Deltoidi i retinoidi uključuju, ali nisu ograničeni na, seokalcitol (EB 1089, CB 1093), leksakalcitrol (KH1060), fenretinid, PANRETIN® (aliretinoin), ATRAGEN® (lipozomski tretinoin), TARGRETIN® (beksaroten) i LGD-1550. ;[0300] Inhibitori PARP uključuju, ali nisu ograničeni na, ABT-888 (veliparib), olaparib, KU-59436, AZD-2281, AG-014699, BSI-201, BGP-15, INO-1001 i ONO-2231. ;[0301] Biljni alkaloidi uključuju, ali nisu ograničeni na, vinkristin, vinblastin, vindesin i vinorelbin. ;[0302] Inhibitori proteazoma uključuju, ali nisu ograničeni na, VELCADE® (bortezomib), KYPROLIS® (karfilzomib), MG132, NPI-0052 i PR-171. ;[0303] Primeri imunoloških lekova uključuju, ali nisu ograničeni na, interferone, inhibitore imunološke kontrolne tačke, kostimulativne agense, i druge agense za jačanje imuniteta. Interferoni uključuju interferon alfa, interferon alfa-2a, interferon alfa-2b, interferon beta, interferon gama-la, ACTIMMUNE® (interferon gama-lb) ili interferon gama-nl, kombinacije od njih i slično. Inhibitori imunološke tačke uključuju antitela koja ciljaju PD-1 (npr. pembrolizumab, nivolumab i pidilizumab), PD-L1 (npr. durvalumab, atezolizumab, avelumab, MEDI4736, MSB0010718C i MPDL3280A), i CTLA4 (citotoksični limfocitni antigen 4; npr. ipilimumab, tremelimumab). Kostimulativni agensi uključuju, ali nisu ograničena na, antitela protiv CD3, CD40, CD40L, CD27, CD28, CSF1R, CD137 (npr. urelumab), B7H1, GITR, ICOS, CD80, CD86, OX40, OX40L, CD70, HLA-DR, LIGHT, LIGHT-R, TIM3, A2AR, NKG2A, TIGIT (T-ćelijski imunoreceptor sa Ig i ITIM domenima), VISTA (Ig supresor V-domena aktivacije T-ćelije), B7-H3, B7-H4, CD47, CD73, CD39, KIR (npr. lirilumab), TGF-β (npr. , fresolimumab) i kombinacije od njih. ;[0304] Ostali agensi uključuju, ali nisu ograničena na, ALFAFERONE® (IFN-ɑ), BAM-002 (oksidisani glutation), BEROMUN® (tasonermin), BEXXAR® (tositumomab), CAMPATH® (alemtuzumab), dakarbazin, denileukin, epratuzumab, GRANOCYTF® (lenograstim), lentinan, leukocit alfa interferon, imikvimod, vakcinu protiv melanoma, mitumomab, molgramostim, MYLOTARG ™ (gemtuzumab ozogamicin), NEUPOGEN® (filgrastim), OncoVAC-CL, OVAREX® (oregovomab), pemtumomab (Y-muHMFG1), PROVENGE® sipuleucel-T), sargaramostim, sizofilan, teceleukin, THERACYS ® (Bacillus Calmette-Guerin), ubenimeks, VIRULIZIN® (imunoterapijski, Lorus Pharmaceuticals), Z-100 (specifična supstanca Maruyame (SSM)), WF-10 (Tetrahlorodekaoksid TCDO)), PROLEUKIN® (aldesleukin), ZADAXIN® (timalfasin), ZINBRYTA® (postupak visokog prinosa daclizumaba) i ZEVALIN® (90Y-Ibritumomab tiuksetan). ;[0305] Modifikatori biološkog odgovora su agensi koji modifikujuaju odbrambene mehanizme živih organizama ili biološke reakcije, kao što su preživljavanje, rast ili diferencijacija ćelija tkiva da bi ih usmerili na antitumorsku aktivnost i uključuju, ali nisu ograničeni na, krestin, lentinan, sizofiran, picibanil PF-3512676 (CpG-8954) i ubenimeks. ;[0306] Analozi pirimidina uključuju, ali nisu ograničeni na, citarabin (ara C ili arabinozid C), citozin arabinozid, doksifluridin, FLUDARA® (fludarabin), 5-FU (5-fluorouracil), floksuridin, GEMZAR® (gemcitabin), TOMUDEX® (ratitreksed), i TROXATYL ™ (triacetiluridin troksacitabin). ;[0307] Analozi purina uključuju, ali nisu ograničeni na, LANVIS® (tioguanin) i PURI-NETHOL® (merkaptopurin). ;[0308] Antimitotski agensi uključuju, ali nisu ograničena na, batabulin, epotilon D (KOS-862), N-(2 ((4-hidroksifenil)amino) piridin-3-il) -4-metoksibenzensulfonamid, iksabepilon (BMS 247550), TAXOL® (paklitaksel), TAXOTERE®(docetaksel), PNU100940 (109881), patupilon, XRP-9881 (larotaksel), vinflunin i ZK-EPO (sintetski epotilon). ;[0309] Inhibitori ubikvitin ligaze uključuju, ali nisu ograničeni na, MDM2 inhibitore, kao što su nutlini, i inhibitore NEDD8 kao što je MLN4924. ;[0310] Inhibitori tirozin kinaze uključuju imatinib (GLEEVEC®), dasatinib (SPRYCE®), nilotinib (TASIGNA®), bosutinib (BOSULIF®), ponatinib (ICLUSIG®), Afatinib (GIOTRIF®), Aksitinib (INLYTA®), Krizotinib (XALKORI ® ), Erlotinib (TARCFVA®), Gefitinib (IRESSA®), Lapatinib (TYVERB®), Nilotinib (TASIGNA®), Pazopanib (VOTRIENT®), Regorafenib (STIVARGA®), Sorafenib (NEXAVAR®), Sunitinib (SUTENT®), toceranib (PALLADIA®), vatalanib i radotinib (SUPECT®). ;[0311] ADCi anti-cMet takođe mogu biti korišćeni za poboljšanje efikasnosti terapije zračenjem. Primeri terapije zračenjem uključuju soljnu terapiju zračenjem, unutrašnju terapiju zračenjem (tj. brahiterapiju) i sistemsku terapiju zračenjem. ;[0312] ADCi anti-cMet mogu biti primenjivani kao dodatak drugim hemoterapijskim agensima ili sa njima, kao što su ABRAXANE ™ (ABI-007), ABT-100 (inhibitor farnezil transferaze), ADVEXIN® (vakcina Ad5CMV-p53), ALTOCOR® ili MEVACOR® (lovastatin) , AMPLIGEN® (poli I: poli C12U, sintetička RNK), APTOSYN® (eksisulind), AREDIA® (pamidroniska kiselina), arglabin, L-asparaginaza, atamestan (1-metil-3,17-dion-androsta-1, 4-dien), AVAGE® (tazaroten), AVE-8062 (derivat kombreastatina) BEC2 (mitumomab), kahektin ili kaheksin (faktor nekroze tumora), canvaksin (vakcina), CEAVAC® (vakcina protiv raka), CELEUK® (celmoleukin), CEPLENE® (histamin dihidrohlorid), CERVARIX® (vakcina protiv humanog papiloma virusa), CHOP® (C: CYTOXAN® (ciklofosfamid); H: ADRIAMYCIN® (hidroksidoksorubicin); O: Vinrkstin (ONCOVIN®); P: prednizon), CYPAT ™ (ciproteron acetat), kombrestatin A4P, DAB(389)EGF (katalitički i translokacijski domeni toksina difterije fuzionisani preko His-Ala veznika sa humanim epidermalnim faktorom rasta) ili TransMID-107R™ (toksini difterije), dakarbazin, daktinomicin, 5,6-dimetilksantenon-4-sirćetna kiselina (DMXAA), eniluracil, EVIZON ™ (skvalamin laktat), DIMERICINE® (lipozomski losion T4N5), diskodermolid, DX-8951f (eksatekan mezilat), enzastaurin, EPO906 (epitilon B), GARDASIL® (četverovalentni humani papiloma virus (Tipovi 6, 11, 16, 18), rekombinantna vakcina), GASTRIMMUNE®, GENASENSE®, GMK (konjugovana vakcina gangliozida), GVAX® (vakcina protiv karcinoma prostate), halofuginon, histrelin, hidroksikarbamid, ibandronska kiselina, IGN-101, IL-13-PE38, IL-13-PE38QQR (cintredekin besudotoks), IL-13-pseudomonas eksotoksin, interferon-a, interferon-y, JUNOVAN™ ili MEPACT™ (mifamurtid), lonafarnib, 5,10-metilentetrahidrofolat, miltefozin (heksadecilfosfoholin), NEOVASTAT® (AE-941), NEUTREXIN® (trimetreksat glukuronat), NIPENT® (pentostatin), ONCONASE® (enzim ribonukleaze), ONCOPHAGE® (lečenje vakcinom protiv melanoma), ONCOVAX® (Vakcina IL-2), ORATHECIN ™ (rubitekan), OSIDEM® (ćelijski lek na bazi antitela) , OVAREX® MAb (mišje monoklonalno antitelo), paklitaksel, PANDIMEX ™ (aglikonski saponini iz ginsenga koji sadrže 20 (S) protopanaksadiol (aPPD) i 20 (S) protopanaksatriol (aPPT)), panitumumab, PANVAC®-VF (ispitivana vakcina protiv karcinoma), pegaspargaza, PEG interferon A, fenoksodiol, prokarbazin, rebimastat REMOVAB® (katumaksomab), REVLIMID® (lenalidomid), RSR13 (efaproksiral), SOMATULINE® LA (lanreotid), SORIATANE® (acitretin), staurosporin (Streptomices staurospores), talabostat (PT100), TARGRETIN® (beksaroten), TAXOPREXIN® DHA-paklitaksel), TELCYTA ® (kanfosfamid, TLK286), temilifen, TEMODAR® (temozolomid), tesmilifen, talidomid, THERATOPE® (STn-KLH), timitak (2-amino-3,4-dihidro-6-metil-4-okso-5-(4-piridiltio)hinazolin dihidrohlorid), TNFERADE™ (adenovektor: nosač DNK koji sadrži gen za faktor-a nekroze tumora), TRACLEER® ili ZAVESCA® (bosentan), tretinoin (Retin-A), tetrandrin, TRISENOX® (arsenik trioksid), VIRULIZIN®, ukrain (derivat alkaloida iz veće biljke celandina), vitaksin (antitelo anti-alfavbeta3), XCYTRIN® (moteksafin gadolinijum), XINLAY ™ (atrasentan), XYOTAX ™ (paklitaksel poliglumeks), YONDELIS® (trabektedin), ZD-6126, ZINECARD® (deksrazoksan), ZOMETA® (zoledronska kiselina) i zorubicin, kao i kombinacije bilo kojeg od ovih agenasa. ;[0313] Pomoćne terapije i/ili terapijski agensi obično će biti korišćeni u njihovoj odobrenoj dozi, načinu primene i učestalosti primene, ali mogu biti korišćeni u nižim dozama i/ili ređe. Kada je primenjen kao monoterapija, ADC anti-cMet obično se daje prema rasporedu koji generiše terapijsku korist. Smatra se da će ADCi anti-cMet koji se daju jednom nedeljno, jednom u dve nedelje, jednom u tri nedelje, jednom u četiri nedelje, jednom u pet nedelja, jednom u šest nedelja, jednom u sedam nedelja ili jednom u osam nedelja, pružiti terapijsku korist, iako više ili manje frekventna primena može biti korisna. Kada se primenjuje kao dodatak ili sa drugom terapijom i/ili agenson, ADC anti-cMet može biti primenjen pre lečenja, posle lečenja ili istovremeno sa lečenjem sa drugom terapijom ili agensom. ;;5.10. Doze i režimi primene ;;[0314] Količina primenjenog ADC anti-cMet će zavisitit od raznih faktora, uključujući, ali ne ograničavajući se na, određenu vrstu cMet+/prekomernog eksprimiranja tumora koji se leče, stadijum cMet+/prekomernog eksprimiranja tumora koji se leče, načina primene, učestalosti primene, željene terapijske koristi, komponente leka u ADC (npr. MMAE naspram PBD) i druge parametre kao što sustarost, težina i druge karakteristike pacijenta itd. Određivanje efikasnih doza da se pruži terapijska korist za određene načine i učestalost primene je u okviru mogućnosti stručnjaka sa ovog područja tehnike. ;[0315] Doze efikasne da se obezbedi terapijska korist mogu biti u početku procenjene na životinjskim modelima in vivo ili klinički. U struci su poznati pogodni životinjski modeli za širok spektar bolesti. ;[0316] ADCi anti-cMet mogu biti primenjeni bilo kojim putem koji odgovara stanju koje se leči. ADCi anti-cMet obično se daju parenteralno, tj. Infuzijom, potkožno, intramuskularno, intravenski (IV), intradermalno, intratekalno, bolusom, intratumorskom injekcijom ili epiduralno ((Shire et al., 2004, J. Pharm. Sciences 93(6):1390-1402)). U jednom izvođenju, ADC anti-cMet je obezbeđen kao liofiliziovani prah u bočici. Bočice mogu sadržavati, na primer, 0.5 mg, 1 mg, 5 mg, 10 mg, 50 mg, 100 mg ili 200 mg ADC anti-cMet. U jednom izvođenju, pre primene, liofilizovani prah je rekonstituisan sa sterilnom vodom za injekcije (SWFI) ili drugim pogodnim medijumom da bi se dobio rastvor koji sadrži 20 mg/mL ADC anti-cMet. Dobijeni rekonstituisani rastvor je dalje razblažen sa fiziološkim rastvorom ili drugim pogodnim medijumom i primenjen IV infuzijom jednom u 7 dana, jednom u 14 dana, jednom u 21 dan ili jednom u 28 dana. U nekim izvođenjima, za prvi ciklus, infuzija se događa tokom 180 minuta, naknadne infuzije preko 90 minuta. U drugim izvođenjima, infuzija se događa tkom 60 minuta. U nekim izvođenjima, sve infuzije za svaki ciklus se događaju tokom 30 minuta. ;[0317] U jednom izvođenju primera, ADC anti-cMet je primenjivan jednom svakih 14 dana sa 0.15 mg/kg, 0.3 mg/kg, 0.6 mg/kg, 0.9 mg/kg, 1.2 mg/kg, 1.5 mg/kg, 1.6 mg/kg, 1.8 mg/kg, 1.9 mg/kg, 2.1 mg/kg, 2.2 mg/kg, 2.4 mg/kg, 2.7 mg/kg, 3.0 mg/kg, 3.3 mg/kg, 3.6 mg/kg, 3.9 mg/kg, 4.2 mg/kg, 4.5 mg/kg, 4.8 mg/kg, 5.1 mg/kg, 5.4 mg/kg, ili 6.0 mg/kg telesne težine subjekta. U jednom izvođenju, ADC anti-cMet daje se jednom u 14 dana sa 1.6 mg/kg. U jednom izvođenju, ADC anti-cMet je primenjivan jednom u 14 dana sa 1.9 mg/kg. U jednom izvođenju, ADC anti-cMet je primenjivan jednom u 14 dana sa 2.2 mg/Kg. U jednom izvođenju, ADC anti-cMet je primenjivan jednom svakih 14 dana sa 2.5 mg/Kg. U jednom izvođenju, primena se nastavlja sve do progresije bolesti ili neprihvatljive toksičnosti. ;[0318] U jednom izvođenju, karcinom je NSCLC adenokarcinom, ADC anti-cMet je ABBV-399, primenjuje se sa 1.6 ili 1.9 mg/kg svakih 14 dana, a pacijent ima H-rezultat od 225 i više ili IHC-ocenu 3+. U drugom izvođenju, karcinom je skvamozni ćelijski karcinom NSCLC, ADC anti-cMet je ABBV-399, primenjuje se sa 1.6 ili 1.9 mg/kg svakih 14 dana, a pacijent ima H-rezultat između 150 i 224 ili IHC ocenu od 2+. ;[0319] U drugom primeru izvođenja, ADC anti-cMet se primenje jednom svakih 7 dana sa 0.15 mg/kg, 0.3 mg/kg, 0.45 mg/kg, 0.6 mg/kg, 0.9 mg/kg, 1.2 mg/kg, 1.5 mg/kg, 1.8 mg/kg, 2.1 mg/kg, 2.4 mg/kg, 2.7 mg/kg, ili 3.0 mg/kg. U jednom izvođenju, primena se nastavlja sve do progresije bolesti ili neprihvatljive toksičnosti. ;[0320] U drugom primeru izvođenja, ADC-anti-cMet se primenje jednom svakih 28 dana sa 0.15 mg/kg, 0.3 mg/kg, 0.6 mg/kg, 0.9 mg/kg, 1.2 mg/kg, 1.5 mg/kg, 1.8 mg/kg, 2.1 mg/kg, 2.4 mg/kg, 2.7 mg/kg, 3.0 mg/kg, 3.3 mg/kg, 3.6 mg/kg, 3.9 mg/kg, 4.2 mg/kg, 4.5 mg/kg, 4.8 mg/kg, 5.1 mg/kg, 5.4 mg/kg, 5.7 mg/kg ili 6.0 mg/kg. U jednom izvođenju, primena se nastavlja sve do progresije bolesti ili neprihvatljive toksičnosti. ;[0321] U drugom primeru izvođenja, ADC-anti-cMet se primenje jednom svakih 28 dana sa 2.7 mg/kg. U jednom izvođenju, primena se nastavlja sve do progresije bolesti ili neprihvatljive toksičnosti. ;[0322] U drugom primeru izvođenja, ADC-anti-cMet se primenje jednom svakog 21 dana sa 0.15 mg/kg, 0.3 mg/kg, 0.6 mg/kg, 0.9 mg/kg, 1.2 mg/kg, 1.5 mg/kg, 1.8 mg/kg, 2.1 mg/kg, 2.4 mg/kg, 2.7 mg/kg, 3.0 mg/kg, 3.3 mg/kg, 3.6 mg/kg, 3.9 mg/kg, 4.2 mg/kg, 4.5 mg/kg, 4.8 mg/kg, 5.1 mg/kg, 5.4 mg/kg, 5.7 mg/kg ili 6.0 mg/kg. U jednom izvođenju, primena se nastavlja sve do progresije bolesti ili neprihvatljive toksičnosti. ;[0323] U drugom primeru izvođenja, ADC-anti-cMet (e.g., ABBV-399) se primenje jednom svakog 21 dana sa 2.7 mg/kg. U jednom izvođenju, primena se nastavlja sve do progresije bolesti ili neprihvatljive toksičnosti. U jednom izvođenju, karcinom je NSCLC adenokarcinom, ADC anti-cMet je ABBV-399, primenjen je sa 2.7 mg/kg svakog 21 dana, i pacijent ima H-rezultat 225 i više ili IHC ocenu 3+. U drugom izvođenju, karcinom je skvamozni ćelijski karcinom NSCLC, ADC anti-cMet je ABBV-399, primenjen sa 2.7 mg/kg svakog 21 dana, i pacijent ima H-rezultat od najmanje 150 ili veći i najmanje IHC ocenu od 2+. ;[0324] U drugom primeru izvođenja, ADC-anti-cMet PBD (npr. ABT-700 PBD) se primenjuje jednom svakih 14 dana, jednom svakog 21 dana ili jednom svakog 28 dana, u dozi između 1.0 µg/kg do 1.0 mg/kg , 1.0 µg/kg do 500.0 µg/kg ili 5.0 µg/kg do 200.0 µg/kg telesne težine subjekta. Kao i za bilo koji drugi ADC, doza zavisi, na primer, od učestalosti primene, stanja pacijenta i odgovora na prethodno lečenje, ako postoji. Koncentracija ADC u tečnoj formulaciji može biti npr. 0.01-10 mg/ml, kao što je 1.0 mg/ml. ;[0325] U jednom izvođenju, ADC anti-cMet PBD (npr., ABT-700 PBD) se primenjuje jednom svakih 14 dana, jednom svakog 21 dana, ili jednom svakog 28 dana sa 10 µg/kg, 50 µg/kg, 75 µg/kg, 100 µg/kg, 110 µg/kg, 120 µg/kg, 130 µg/kg, 140 µg/kg, 150 µg/kg, 160 µg/kg, 170 µg/kg, 180 µg/kg, 190 µg/kg, 200 µg/kg, 250 µg/kg, 300 µg/kg, 350 µg/kg, 400 µg/kg, 450 µg/kg, ili 500 µg/kg. U jednom izvođenju, ADC anti-cMet PBD (npr., ABT-700 PBD) je primenjen sa 100 µ/kg. U jednom izvođenju, ADC anti-cMet PBD (npr., ABT-700 PBD) je primenjen sa 200 µg/kg. U jednom izvođenju, ADC anti-cMet PBD (npr., ABT-700 PBD) je primenjen sa 300 µg/kg. U jednom izvođenju ADC anti-cMet PBD (npr., ABT-700 PBD) je primenjen sa 400 µg/kg. ;[0326] Kada se primenjuju kao dodatak drugim agensima ili sa njima, kao drugi hemoterapijski agensi, ADCi se mogu primenjivati po istom rasporedu kao i drugi agens (i) ili drugačijem rasporedu. Kada se primenjuje po istom rasporedu, ADC se može primeniti pre, posle ili istovremeno sa drugim agensom. U nekim izvođenjima gde se ADC primenjuje kao dodatak standardima nege ili sa njima, ADC se može pokrenuti pre početka standardne terapije, na primer dan, nekoliko dana, nedelju dana, nekoliko nedelja, mesec ili čak nekoliko meseci pre početka standardne terapije nege. ;[0327] U jednom skupu izvođenja primera, dodatni anti-kancerogeni agens je izabran iz grupe koja se sastoji od kabazitaksela, kolkemida, kolhicina, kriptoficina, demokolcina, docetaksela, nokodazola, paklitaksela, takalonolida, taksana i vinblastina. ;[0328] U jednom primeru izvođenja, ADC anti-cMet je korišćen kao dodatak afatinibu (GILOTRIF®) za lečenje NSCLC. ADC anticMet (npr. ABBV-399) se primenjuje putem IV infuzije jednom svakih 14 dana ili svakog 21 dana sa 0.15 mg/kg, 0.3 mg/kg, 0.6 mg/kg, 0.9 mg/kg, 1.2 mg/kg, 1.5 mg/kg, 1.8 mg/kg, 2.1 mg/kg, 2.4 mg/kg, 2.7 mg/kg, 3.0 mg/kg, 3.3 mg/kg, 3.6 mg/kg, 3.9 mg/kg, 4.2 mg/kg, 4.5 mg/kg, 4.8 mg/kg, 5.1 mg/kg, 5.4 mg/kg, 5.7 mg/kg ili 6.0 mg/kg, poželjno jednom svakog 21 dana sa 2.7 mg/kg. GILOTRIF® se primenjuje sa 40 mg oralno jednom dnevno do progresije bolesti ili ga bolesnik više ne podnosi. U jednom izvođenju, pacijenti su izabrani za prvu liniju lečenja metastatskog NSCLC sa GILOTRIF®-om na osnovu prisustva EGFR delecija egzona 19 ili egzona 21 (L858R) supstitucionih mutacija u uzorcima tumora. ;[0329] U još jednom primeru izvođenja, ADC anti-cMet je korišćen kao dodatak na TARCEVA® (erlotinib) za lečenje nemaloćelijskog karcinoma pluća (NSCLC). ADC anti-cMet (npr. ABBV-399) se primenjuje putem IV infuzije jednom svakih 14 dana ili svakog 21 dana sa 0.15 mg/kg, 0.3 mg/kg, 0.6 mg/kg, 0.9 mg/kg, 1.2 mg/kg, 1.5 mg/kg, 1.8 mg/kg, 2.1 mg/kg, 2.4 mg/kg, 2.7 mg/kg, 3.0 mg/kg, 3.3 mg/kg, 3.6 mg/kg, 3.9 mg/kg, 4.2 mg/kg, 4.5 mg/kg, 4.8 mg/kg, 5.1 mg/kg, 5.4 mg/kg, 5.7 mg/kg ili 6.0 mg/kg, poželjno jednom svakog 21 dana sa 2.7 mg/kg. Preporučena doza i raspored za erlotinib je 150 mg oralno, jednom dnevno. Dodatna terapija ADC anti-cMet/erlotinib se nastavlja sve do progresije bolesti ili je pacijent više ne podnosi. ;[0330] U jednom izvođenju, karcinom je NSCLC, ADC anti-cMet je ABBV-399, primenjen sa 2.7 mg/kg svakog 21 dana, i erlotinib je primenjen sa 150 mg oralno, jednom dnevno. Dodatna terapija ADC anti-cMet/erlotinib se nastavlja sve do progresije bolesti ili je pacijent više ne podnosi. U jednom izvođenju, karcinom je adenokarcinom mutiran NSCLC EGFR, ADC anti-cMet je ABBV-399, primenjuje se sa 2.7 mg/kg svakog 21 dana, erlotinib se primenjuje sa 150 mg oralno, jednom dnevno, a pacijent ima H-rezultat od 225 i više ili IHC ocenu 3+. ;[0331] U još jednom primeru izvođenja, ADC anti-cMet je korišćen kao dodatak na IRESSA® (gefitinib) za lečenje nemaloćelijskog karcinoma pluća (NSCLC). ADC anti-cMet (npr., ABBV-399) se primenjuje putem IV infuzije jednom svakih 14 dana ili svakog 21 dana sa 0.15 mg/kg, 0.3 mg/kg, 0.6 mg/kg, 0.9 mg/kg, 1.2 mg/kg, 1.5 mg/kg, 1.8 mg/kg, 2.1 mg/kg, 2.4 mg/kg, 2.7 mg/kg, 3.0 mg/kg, 3.3 mg/kg, 3.6 mg/kg, 3.9 mg/kg, 4.2 mg/kg, 4.5 mg/kg, 4.8 mg/kg, 5.1 mg/kg, 5.4 mg/kg, 5.7 mg/kg ili 6.0 mg/kg, poželjno jednom svakog 21 dana sa 2.7 mg/kg. Preporučena doza i raspored za gefitinib je 250 mg oralno, jednom dnevno. Dodatna terapija ADC anti-cMet/gefitinib se nastavlja sve do progresije bolesti ili je pacijent više ne podnosi. ;[0332] U još jednom primeru izvođenja, ADC anti-cMet je korišćen kao dodatak na afatinib za lečenje nemaloćelijskog karcinoma pluća (NSCLC). ADC anti-cMet (npr., ABBV-399) se primenjuje putem IV infuzije jednom svakih 14 dana ili svakog 21 dana sa 0.15 mg/kg, 0.3 mg/kg, 0.6 mg/kg, 0.9 mg/kg, 1.2 mg/kg, 1.5 mg/kg, 1.8 mg/kg, 2.1 mg/kg, 2.4 mg/kg, 2.7 mg/kg, 3.0 mg/kg, 3.3 mg/kg, 3.6 mg/kg, 3.9 mg/kg, 4.2 mg/kg, 4.5 mg/kg, 4.8 mg/kg, 5.1 mg/kg, 5.4 mg/kg, 5.7 mg/kg ili 6.0 mg/kg, poželjno jednom svakog 21 dana sa 2.7 mg/kg. Preporučena doza i raspored za afatinib je 40 mg oralno, jednom dnevno. Dodatna terapija ADC anti-cMet/afatinib se nastavlja sve do progresije bolesti ili je pacijent više ne podnosi. ;[0333] U još jednom primeru izvođenja, ADC anti-cMet je korišćen kao dodatak na OPDIVO® (nivolumab) za lečenje nemaloćelijskog karcinoma pluća (NSCLC). ADC anti-cMet (npr., ABBV-399) se primenjuje putem IV infuzije jednom svakih 14 dana ili svakog 21 dana sa 0.15 mg/kg, 0.3 mg/kg, 0.6 mg/kg, 0.9 mg/kg, 1.2 mg/kg, 1.5 mg/kg, 1.8 mg/kg, 2.1 mg/kg, 2.4 mg/kg, 2.7 mg/kg, 3.0 mg/kg, 3.3 mg/kg, 3.6 mg/kg, 3.9 mg/kg, 4.2 mg/kg, 4.5 mg/kg, 4.8 mg/kg, 5.1 mg/kg, 5.4 mg/kg, 5.7 mg/kg ili 6.0 mg/kg, poželjno jednom svakog 21 dana sa 2.7 mg/kg. Nivolumab se primenjuje intravenoznom infuzijom sa 3 mg/kg preko 60 minuta svake dve nedelje. Dodatna terapija ADC anti-cMet/nivolumab se nastavlja sve do progresije bolesti ili je pacijent više ne podnosi. ;[0334] U još jednom primeru izvođenja, ADC anti-cMet je korišćen kao dodatak na OPDIVO® (nivolumab) i YERVOY® (ipilimumab) za lečenje nemaloćelijskog karcinoma pluća (NSCLC). ADC anti-cMet (npr., ABBV-399) se primenjuje putem IV infuzije jednom svakih 14 dana ili svakog 21 dana sa 0.15 mg/kg, 0.3 mg/kg, 0.6 mg/kg, 0.9 mg/kg, 1.2 mg/kg, 1.5 mg/kg, 1.8 mg/kg, 2.1 mg/kg, 2.4 mg/kg, 2.7 mg/kg, 3.0 mg/kg, 3.3 mg/kg, 3.6 mg/kg, 3.9 mg/kg, 4.2 mg/kg, 4.5 mg/kg, 4.8 mg/kg, 5.1 mg/kg, 5.4 mg/kg, 5.7 mg/kg or 6.0 mg/kg, poželjno jednom svakog 21 dana sa 2.7 mg/kg, za četiri doze sa ipilimumabom, zatim svakih 14 dana sa 0.15 mg/kg, 0.3 mg/kg, 0.6 mg/kg, 0.9 mg/kg, 1.2 mg/kg, 1.8 mg/kg, 2.1 mg/kg, 2.4 mg/kg, 2.7 mg/kg, 3.0 mg/kg, 3.3 mg/kg, 3.6 mg/kg, 3.9 mg/kg, 4.2 mg/kg, 4.5 mg/kg, 4.8 mg/kg, 5.1 mg/kg, 5.4 mg/kg, 5.7 mg/kg ili 6.0 mg/kg, bez ipilimumaba. Nivolumab se daje u obliku intravenske infuzije sa 3 mg/kg tokom 60 minuta svake dve nedelje. Ipilimumab se primenjuje intravenozno u dozi od 3 mg/kg tokom 90 minuta svake tri nedelje u prve četiri doze. Dodatna terapija ADC anti-cMet/ nivolumab se nastavlja sve do progresije bolesti ili je pacijent više ne podnosi. ;[0335] U još jednom primeru izvođenja, ADC anti-cMet je korišćen kao dodatak na pembrolizumab (KEYTRUDA ®) za lečenje NSCLC. ADC anti-cMet (npr., ABBV-399) se primenjuje putem IV infuzije jednom svakih 14 dana ili svakog 21 dana sa 0.15 mg/kg, 0.3 mg/kg, 0.6 mg/kg, 0.9 mg/kg, 1.2 mg/kg, 1.5 mg/kg, 1.8 mg/kg, 2.1 mg/kg, 2.4 mg/kg, 2.7 mg/kg, 3.0 mg/kg, 3.3 mg/kg, 3.6 mg/kg, 3.9 mg/kg, 4.2 mg/kg, 4.5 mg/kg, 4.8 mg/kg, 5.1 mg/kg, 5.4 mg/kg, 5.7 mg/kg ili 6.0 mg/kg, poželjno jednom svakog 21 dana sa 2.7 mg/kg. Pembrolizumab se primenjuje u obliku intravenske infuzije sa 2 mg/kg tokom 30 minuta svake 3 nedelje. Dodatna terapija ADC anti-cMet/pembrolizumab se nastavlja sve do progresije bolesti ili je pacijent više ne podnosi. ;[0336] U još jednom primeru izvođenja, ADC anti-cMet je korišćen kao dodatak na cisplatin za lečenje NSCLC. ADC anti-cMet (npr., ABBV-399) se primenjuje putem IV infuzije jednom svakih 14 dana ili svakog 21 dana sa 0.15 mg/kg, 0.3 mg/kg, 0.6 mg/kg, 0.9 mg/kg, 1.2 mg/kg, 1.5 mg/kg, 1.8 mg/kg, 2.1 mg/kg, 2.4 mg/kg, 2.7 mg/kg, 3.0 mg/kg, 3.3 mg/kg, 3.6 mg/kg, 3.9 mg/kg, 4.2 mg/kg, 4.5 mg/kg, 4.8 mg/kg, 5.1 mg/kg, 5.4 mg/kg, 5.7 mg/kg ili 6.0 mg/kg, poželjno jednom svakog 21 dana sa 2.7 mg/kg. Cisplatin se primenjuje sa 20 mg/m<2>ili više, jednom svake 3 do 4 nedelje. Dodatna terapija ADC anti-cMet/cisplatin se nastavlja sve do progresije bolesti ili je pacijent više ne podnosi. ;[0337] U još jednom primeru izvođenja, ADC anti-cMet je korišćen kao dodatak na karboplatin za lečenje NSCLC. ADC anti-cMet (npr., ABBV-399) se primenjuje putem IV infuzije jednom svakih 14 dana sa 0.15 mg/kg, 0.3 mg/kg, 0.6 mg/kg, 0.9 mg/kg, 1.2 mg/kg, 1.5 mg/kg, 1.8 mg/kg, 2.1 mg/kg, 2.4 mg/kg, 2.7 mg/kg, 3.0 mg/kg, 3.3 mg/kg, 3.6 mg/kg, 3.9 mg/kg, 4.2 mg/kg, 4.5 mg/kg, 4.8 mg/kg, 5.1 mg/kg, 5.4 mg/kg, 5.7 mg/kg ili 6.0 mg/kg. Karboplatin se primenjuje sa 300 mg/m<2>ili više, jednom svake 4 nedelje. Dodatna terapija ADC anti-cMet/karboplatin se nastavlja sve do progresije bolesti ili je pacijent više ne podnosi. ;[0338] U još jednom primeru izvođenja, ADC anti-cMet je korišćen kao dodatak na veliparib za lečenje NSCLC. ADC anti-cMet (npr., ABBV-399) se primenjuje putem IV infuzije jednom svakih 14 dana ili svakog 21 dana sa 0.15 mg/kg, 0.3 mg/kg, 0.6 mg/kg, 0.9 mg/kg, 1.2 mg/kg, 1.5 mg/kg, 1.8 mg/kg, 2.1 mg/kg, 2.4 mg/kg, 2.7 mg/kg, 3.0 mg/kg, 3.3 mg/kg, 3.6 mg/kg, 3.9 mg/kg, 4.2 mg/kg, 4.5 mg/kg, 4.8 mg/kg, 5.1 mg/kg, 5.4 mg/kg, 5.7 mg/kg ili 6.0 mg/kg, poželjno jednom svakog 21 dana sa 2.7 mg/kg Veliparib se primenjuje oralno, dva puta dnevno. Dodatna terapija ADC anti-cMet/veliparib se nastavlja sve do progresije bolesti ili je pacijent više ne podnosi. ;[0339] U još jednom primeru izvođenja, ADC anti-cMet je korišćen kao dodatak na veliparib i pemetreksed za lečenje NSCLC. ADC anti-cMet (npr., ABBV-399) se primenjuje putem IV infuzije jednom svakih 14 dana ili svakog 21 dana sa 0.15 mg/kg, 0.3 mg/kg, 0.6 mg/kg, 0.9 mg/kg, 1.2 mg/kg, 1.5 mg/kg, 1.8 mg/kg, 2.1 mg/kg, 2.4 mg/kg, 2.7 mg/kg, 3.0 mg/kg, 3.3 mg/kg, 3.6 mg/kg, 3.9 mg/kg, 4.2 mg/kg, 4.5 mg/kg, 4.8 mg/kg, 5.1 mg/kg, 5.4 mg/kg, 5.7 mg/kg ili 6.0 mg/kg, poželjno jednom svakog 21 dana sa 2.7 mg/kg. Veliparib se primenjuje oralno, dva puta dnevno. Pemetreksed se primjenjuje sa 500mg/m2 intravenski svakog 21 dana. Dodatna terapija ADC anti-cMet/veliparib/pemetreksed se nastavlja sve do progresije bolesti ili je pacijent više ne podnosi. ;[0340] U još jednom primeru izvođenja, ADC anti-cMet je korišćen kao dodatak na cetuksimab za lečenje NSCLC. ADC anti-cMet (npr., ABBV-399) se primenjuje putem IV infuzije jednom svakih 14 dana ili svakog 21 dana sa 0.15 mg/kg, 0.3 mg/kg, 0.6 mg/kg, 0.9 mg/kg, 1.2 mg/kg, 1.5 mg/kg, 1.8 mg/kg, 2.1 mg/kg, 2.4 mg/kg, 2.7 mg/kg, 3.0 mg/kg, 3.3 mg/kg, 3.6 mg/kg, 3.9 mg/kg, 4.2 mg/kg, 4.5 mg/kg, 4.8 mg/kg, 5.1 mg/kg, 5.4 mg/kg, 5.7 mg/kg or 6.0 mg/kg, poželjno jednom svakog 21 dana sa 2.7 mg/kg. Cetuksimab se primenjuje u početnoj dozi od 400 mg/m<2>tokom 120-minutne intravenske infuzije praćene sa 250 mg/m<2>nedeljne infuzije tokom 60 minuta. Dodatna terapija ADC anti-cMet/cetuksimab se nastavlja sve do progresije bolesti ili je pacijent više ne podnosi. ;[0341] U još jednom primeru izvođenja, ADC anti-cMet je korišćen kao dodatak na ipilimumab (YERVOY®) za lečenje NSCLC. ADC anti-cMet (npr., ABBV-399) se primenjuje putem IV infuzije jednom svakih 14 dana ili svakog 21 dana sa 0.15 mg/kg, 0.3 mg/kg, 0.6 mg/kg, 0.9 mg/kg, 1.2 mg/kg, 1.5 mg/kg, 1.8 mg/kg, 2.1 mg/kg, 2.4 mg/kg, 2.7 mg/kg, 3.0 mg/kg, 3.3 mg/kg, 3.6 mg/kg, 3.9 mg/kg, 4.2 mg/kg, 4.5 mg/kg, 4.8 mg/kg, 5.1 mg/kg, 5.4 mg/kg, 5.7 mg/kg or 6.0 mg/kg, poželjno jednom svakog 21 dana sa 2.7 mg/kg. Ipilimumab se primenjuje sa 3 mg/kg intravenski tokom 90 minuta svake 3 nedelje tokom 3 meseca. Dodatna terapija ADC anti-cMet se nastavlja sve do progresije bolesti ili je pacijent više ne podnosi. ;[0342] U još jednom primeru izvođenja, ADC anti-cMet je korišćen kao dodatak na zračenje za lečenje NSCLC. ADC anti-cMet (npr., ABBV-399) se primenjuje putem IV infuzije jednom svakih 14 dana ili svakog 21 dana sa 0.15 mg/kg, 0.3 mg/kg, 0.6 mg/kg, 0.9 mg/kg, 1.2 mg/kg, 1.5 mg/kg, 1.8 mg/kg, 2.1 mg/kg, 2.4 mg/kg, 2.7 mg/kg, 3.0 mg/kg, 3.3 mg/kg, 3.6 mg/kg, 3.9 mg/kg, 4.2 mg/kg, 4.5 mg/kg, 4.8 mg/kg, 5.1 mg/kg, 5.4 mg/kg, 5.7 mg/kg ili 6.0 mg/kg, poželjno jednom svakog 21 dana sa 2.7 mg/kg. Obično se spoljna terapija zračenjem primenjuje nekoliko minuta do 5 dana u nedelji tokom 5 do 7 nedelja, ali će ovo varirati u zavisnosti od vrste spoljne terapije zračenjem koja se koristi. Dodatna terapija ADC anti-cMet/terapija zračenjem se nastavlja sve do progresije bolesti ili je pacijent više ne podnosi. ;[0343] U još jednom primeru izvođenja, ADC anti-cMet je korišćen kao dodatak na AVASTIN® (bevacizumab) za lečenje NSCLC. ADC anti-cMet (npr., ABBV-399) se primenjuje putem IV infuzije jednom svakih 14 dana ili svakog 21 dana sa 0.15 mg/kg, 0.3 mg/kg, 0.6 mg/kg, 0.9 mg/kg, 1.2 mg/kg, 1.5 mg/kg, 1.8 mg/kg, 2.1 mg/kg, 2.4 mg/kg, 2.7 mg/kg, 3.0 mg/kg, 3.3 mg/kg, 3.6 mg/kg, 3.9 mg/kg, 4.2 mg/kg, 4.5 mg/kg, 4.8 mg/kg, 5.1 mg/kg, 5.4 mg/kg, 5.7 mg/kg ili 6.0 mg/kg, poželjno jednom svakog 21 dana sa 2.7 mg/kg. Preporučena doza i raspored bevacizumaba je 10 mg/kg svakih 14 dana ili 15 mg/kg svakih 21 dan. Dodatna terapija ADC anti-cMet/bevacizumab se nastavlja sve do progresije bolesti ili je pacijent više ne podnosi. ;[0344] U još jednom primeru izvođenja, ADC anti-cMet je korišćen kao dodatak na gemcitabin (GEMZAR®) za lečenje NSCLC karcinoma. ADC anti-cMet (npr., ABBV-399) se primenjuje putem IV infuzije jednom svakih 14 dana ili svakog 21 dana sa 0.15 mg/kg, 0.3 mg/kg, 0.6 mg/kg, 0.9 mg/kg, 1.2 mg/kg, 1.5 mg/kg, 1.8 mg/kg, 2.1 mg/kg, 2.4 mg/kg, 2.7 mg/kg, 3.0 mg/kg, 3.3 mg/kg, 3.6 mg/kg, 3.9 mg/kg, 4.2 mg/kg, 4.5 mg/kg, 4.8 mg/kg, 5.1 mg/kg, 5.4 mg/kg, 5.7 mg/kg ili 6.0 mg/kg, poželjno jednom svakog 21 dana sa 2.7 mg/kg. Gemcitabin se daje intravenskom infuzijom u dozi od 1000 mg/m<2>tokom 30 minuta na dan 1, 8 i 15 tokom svake 4 nedelje po rasporedu. Primeniti cisplatin intravenozno sa 100 mg/m<2>1. dan nakon infuzije gemcitabina. U drugom izvođenju, gemcitabin je primenjen intravenskom infuzijom u dozi od 1250 mg/m<2>tokom 30 minuta na dan 1. i 8. dana tokom svake 3 nedelje. Primeniti cisplatin intravenski sa 100 mg/m<2>1. dan nakon infuzije gemcitabina. Ako se primeti mijelosupresija, mogu se koristiti modifikacije doze kako je predviđeno u informacijama o propisivanju gemcitabina. Dodatna terapija ADC anti-cMet/bevacizumab se nastavlja sve do progresije bolesti ili je pacijent više ne podnosi. ;[0345] U jednom primeru izvođenja, ADC anti-cMet je korišćen kao dodatak gemcitabinu (GEMZAR®) za lečenje karcinom apankreasa, jajnika, dojke ili NSCLC. ADC anti-cMet (npr., ABBV-399) se primenjuje putem IV infuzije jednom svakih 14 dana ili svakog 21 dana sa 0.15 mg/kg, 0.3 mg/kg, 0.6 mg/kg, 0.9 mg/kg, 1.2 mg/kg, 1.5 mg/kg, 1.8 mg/kg, 2.1 mg/kg, 2.4 mg/kg, 2.7 mg/kg, 3.0 mg/kg, 3.3 mg/kg, 3.6 mg/kg, 3.9 mg/kg, 4.2 mg/kg, 4.5 mg/kg, 4.8 mg/kg, 5.1 mg/kg, 5.4 mg/kg, 5.7 mg/kg ili 6.0 mg/kg, poželjno jednom svakog 21 dana sa 2.7 mg/kg. U lečenju karcinoma pankreasa, gemcitabin se daje intravenskom infuzijom u dozi od 1000 mg/m<2>tokom 30 minuta jednom nedeljno do 7 nedelja, nakon čega sledi nedelja odmora od lečenja. Posle 8.nedelje: nedeljno doziranje 1., 8. i 15. dana od 28-dnevnih ciklusa. U lečenju karcinoma jajnika, gemcitabin se daje intravenoznom infuzijom u dozi od 1000 mg/m<2>tokom 30 minuta 1. i 8. dana svakog 21-dnevnog ciklusa, u kombinaciji sa AUC 4 karboplatinom intravenozno nakon primene Gemzara 1. dana svakog 21.–dnevnog ciklusa. Dodatne informacije potražiti u informacijama o propisivanju karboplatina. U lečenju karcinoma dojke, gemcitabin se daje intravenskom infuzijom u dozi od 1250 mg/m<2>intravenski tokom 30 minuta 1. i 8. dana svakog 21-dnevnog ciklusa koji uključuje paklitaksel. Paklitaksel treba primeniti u količini od 175 mg/m<2>1. dana u obliku trosatne intravenske infuzije pre primene Gemzara. Ako se primeti mijelosupresija, mogu se koristiti modifikacije doze kako je predviđeno u informacijama o propisivanju gemcitabina. Naknadni ciklusi trebali bi se sastojati od infuzija jednom nedeljno tokom 3 uzastopne nedelje od svake 4 nedelje. Dodatna terapija ADC anti-cMet/gemcitabin se nastavlja sve do progresije bolesti ili je pacijent više ne podnosi. ;[0346] U drugom primeru izvođenja, ADC anti-cMet je korišćen kao dodatak formulaciji nanočestica stabilizovanoj sa paklitaksel albuminom (ABRAXANE®) za lečenje karcinoma dojke ili pluća. ADC anti-cMet (npr., ABBV-399) se primenjuje putem IV infuzije jednom svakih 14 dana ili svakog 21 dana sa 0.15 mg/kg, 0.3 mg/kg, 0.6 mg/kg, 0.9 mg/kg, 1.2 mg/kg, 1.5 mg/kg, 1.8 mg/kg, 2.1 mg/kg, 2.4 mg/kg, 2.7 mg/kg, 3.0 mg/kg, 3.3 mg/kg, 3.6 mg/kg, 3.9 mg/kg, 4.2 mg/kg, 4.5 mg/kg, 4.8 mg/kg, 5.1 mg/kg, 5.4 mg/kg, 5.7 mg/kg ili 6.0 mg/kg, poželjno jednom svakog 21 dana sa 2.7 mg/kg. Preporučena doza i raspored formulacije nanočestica stabilizovanih sa paklitaksel albuminom je 125 mg/m<2>primenjena u obliku intravenske infuzije tokom 30-40 minuta 1., 8. i 15. dana svakog 28-dnevnog ciklusa. Dodatna ADC anti-cMet/ABRAXANE® terapija se nastavlja sve do progresije bolesti ili je pacijent više ne podnosi. ;[0347] U drugom primeru izvođenja, ADC anti-cMet je korišćen kao dodatak formulaciji nanočestica stabilizovanoj sa paklitaksel albuminom (ABRAXANE®) i gemcitabinom (GEMZAR®) za lečenje karcinoma pankreasa. ADC anti-cMet (npr., ABBV-399) se primenjuje putem IV infuzije jednom svakih 14 dana ili svakog 21 dana sa 0.15 mg/kg, 0.3 mg/kg, 0.6 mg/kg, 0.9 mg/kg, 1.2 mg/kg, 1.5 mg/kg, 1.8 mg/kg, 2.1 mg/kg, 2.4 mg/kg, 2.7 mg/kg, 3.0 mg/kg, 3.3 mg/kg, 3.6 mg/kg, 3.9 mg/kg, 4.2 mg/kg, 4.5 mg/kg, 4.8 mg/kg, 5.1 mg/kg, 5.4 mg/kg, 5.7 mg/kg ili 6.0 mg/kg, poželjno jednom svakog 21 dana sa 2.7 mg/kg. Preporučena doza i raspored formulacije nanočestica stabilizovanih sa paklitaksel albuminom je 125 mg/m<2>primenjena u obliku intravenske infuzije tokom 30-40 minuta 1., 8. i 15. dana svakog 28-dnevnog ciklusa. Gemcitabin se daje intravenskom infuzijom u dozi od 1000 mg/m2 tokom 30 minuta jednom nedeljno do 7 nedelja (ili do smanjenja toksičnosti ili zadržavanja doze), nakon čega sledi nedelja dana odmora od lečenja. Naknadni ciklusi bi trebali da se sastoje od infuzije jednom nedeljno tokom 3 uzastopne nedelje od svake 4 nedelje. Dodatna terapija ADC anti-cMet/ABRAXANE®/GEMZAR® se nastavlja sve do progresije bolesti ili je pacijent više ne podnosi. ;[0348] U još jednom primeru izvođenja, ADC anti-cMet je korišćen kao dodatak na AVASTIN®-u (bevacizumab) za lečenje kolorektalnog karcinoma ili karcinoma pluća ili jajnika. ADC anti-cMet (npr., ABBV-399) se primenjuje putem IV infuzije jednom svakih 14 dana ili svakog 21 dana sa 0.15 mg/kg, 0.3 mg/kg, 0.6 mg/kg, 0.9 mg/kg, 1.2 mg/kg, 1.5 mg/kg, 1.8 mg/kg, 2.1 mg/kg, 2.4 mg/kg, 2.7 mg/kg, 3.0 mg/kg, 3.3 mg/kg, 3.6 mg/kg, 3.9 mg/kg, 4.2 mg/kg, 4.5 mg/kg, 4.8 mg/kg, 5.1 mg/kg, 5.4 mg/kg, 5.7 mg/kg ili 6.0 mg/kg, poželjno jednom svakog 21 dana sa 2.7 mg/kg. Preporučena doza i raspored za bevacizumaba je 10 mg/kg svakih 14 dana ili 15 mg/kg svakog 21 dana. Dodatna terapija ADC anti-cMet/bevacizumab se nastavlja sve do progresije bolesti ili je pacijent više ne podnosi. ;[0349] U još jednom primeru izvođenja, ADC anti-cMet je korišćen kao dodatak na FOLFIRINOX (ili FOLFIRI ili FOLFOX ili irinotekan ili 5-FU ili kapecitabin) za lečenje kolorektalnog karcinoma. ADC anti-cMet (npr., ABBV-399) se primenjuje putem IV infuzije jednom svakih 14 dana ili svakog 21 dana sa 0.15 mg/kg, 0.3 mg/kg, 0.6 mg/kg, 0.9 mg/kg, 1.2 mg/kg, 1.5 mg/kg, 1.8 mg/kg, 2.1 mg/kg, 2.4 mg/kg, 2.7 mg/kg, 3.0 mg/kg, 3.3 mg/kg, 3.6 mg/kg, 3.9 mg/kg, 4.2 mg/kg, 4.5 mg/kg, 4.8 mg/kg, 5.1 mg/kg, 5.4 mg/kg, 5.7 mg/kg ili 6.0 mg/kg, poželjno jednom svakog 21 dana u dozi od 2.7 mg/kg. FOLFIRINOX je kombinacija četiri hemoterapijska agensa: fluorouracil [5-FU], leukovorin, irinotekan i oksaliplatin. U nekim izvođenjima, FOLFIRINOX se primenjuje na sedeći način: oksaliplatin, 85 mg/m<2>; irinotekan, 180 mg/m<2>; leukovorin, 400 mg/m<2>; i fluorouracil, 400 mg/m<2>dat u bolusu, nakon čega sledi 2400 mg/m<2>dato u obliku 46-satne kontinuirane infuzije, svake 2nedelje. Dodatna anti-cMet ADC/FOLFIRINOX terapija se nastavlja sve do progresije bolesti ili je pacijent više ne podnosi. ;[0350] U još jednom primeru izvođenja, ADC anti-cMet je koriišćen kao dodatak na Onivyde® za lečenje karcinoma pankreasa. ADC anti-cMet (npr., ABBV-399) se primenjuje putem IV infuzije jednom svakih 14 dana ili svakog 21 dana sa 0.15 mg/kg, 0.3 mg/kg, 0.6 mg/kg, 0.9 mg/kg, 1.2 mg/kg, 1.5 mg/kg, 1.8 mg/kg, 2.1 mg/kg, 2.4 mg/kg, 2.7 mg/kg, 3.0 mg/kg, 3.3 mg/kg, 3.6 mg/kg, 3.9 mg/kg, 4.2 mg/kg, 4.5 mg/kg, 4.8 mg/kg, 5.1 mg/kg, 5.4 mg/kg, 5.7 mg/kg ili 6.0 mg/kg, poželjno jednom svakog 21 dana sa 2.7 mg/kg. Onivyde® je lipozomska formulacija irinotekana. U nekim izvođenjima, Onivyde® se primenjuje sa 70 mg/m2 intravenskom infuzijom tokom 90 minuta svake 2 nedelje. Dodatna terapija ADC anti-cMet/Onivyde® se nastavlja sve do progresije bolesti ili je pacijent više ne podnosi. ;[0351] U još jednom primeru izvođenja, ADC anti-cMet je korišćen kao dodatak na Onivyde®, fluorouracil, i leukovorin za lečenje pankreasa. ADC anti-cMet (npr., ABBV-399) se primenjuje putem IV infuzije jednom svakih 14 dana ili svakog 21 dana sa 0.15 mg/kg, 0.3 mg/kg, 0.6 mg/kg, 0.9 mg/kg, 1.2 mg/kg, 1.5 mg/kg, 1.8 mg/kg, 2.1 mg/kg, 2.4 mg/kg, 2.7 mg/kg, 3.0 mg/kg, 3.3 mg/kg, 3.6 mg/kg, 3.9 mg/kg, 4.2 mg/kg, 4.5 mg/kg, 4.8 mg/kg, 5.1 mg/kg, 5.4 mg/kg, 5.7 mg/kg ili 6.0 mg/kg, poželjno jednom svakog 21 dana sa 2.7 mg/kg. Onivyde® je lipozomska formulacija irinotekana. U nekim izvođenjima Onivyde® se daje sa 70 mg/m<2>intravenskom infuzijom tokom 90 minuta svake 2 nedelje, sa leukovorinom 400 mg/m<2>i fluorouracilom 2400 mg/m<2>tokom 46 sati svake 2 nedelje. Dodatna terapija ADC anti-cMet/Onivyde®/leukovorin/fluorouracil se nastavlja sve do progresije bolesti ili je pacijent više ne podnosi. ;[0352] U još jednom primeru izvođenja, ADC anti-cMet je korišćen kao dodatak na nivolumab (OPDIVO®) za lečenje karcinoma pluća i drugih karcinoma gde je korišćen nivolumab. ADC anti-cMet (npr., ABBV-399) se primenjuje putem IV infuzije jednom svakih 14 dana ili svakog 21 dana sa 0.15 mg/kg, 0.3 mg/kg, 0.6 mg/kg, 0.9 mg/kg, 1.2 mg/kg, 1.5 mg/kg, 1.8 mg/kg, 2.1 mg/kg, 2.4 mg/kg, 2.7 mg/kg, 3.0 mg/kg, 3.3 mg/kg, 3.6 mg/kg, 3.9 mg/kg, 4.2 mg/kg, 4.5 mg/kg, 4.8 mg/kg, 5.1 mg/kg, 5.4 mg/kg, 5.7 mg/kg ili 6.0 mg/kg, poželjno jednom svakog 21 dana sa 2.7 mg/kg. Nivolumab je primenjen intravenskom infuzijom sa 3 mg/kg tokom 60 minuta svake 2 nedelje. Dodatna terapija ADC anti-cMet/nivolumab se nastavlja sve do progresije bolesti ili je pacijent više ne podnosi. ;[0353] U još jednom primeru izvođenja, ADC anti-cMet je korišćen kao dodatak na pembrolizumab (KEYTRUDA®) za lečenje kolorektalnog karcinoma. ADC anti-cMet (npr., ABBV-399) se primenjuje putem IV infuzije jednom svakih 14 dana ili svakog 21 dana sa 0.15 mg/kg, 0.3 mg/kg, 0.6 mg/kg, 0.9 mg/kg, 1.2 mg/kg, 1.5 mg/kg, 1.8 mg/kg, 2.1 mg/kg, 2.4 mg/kg, 2.7 mg/kg, 3.0 mg/kg, 3.3 mg/kg, 3.6 mg/kg, 3.9 mg/kg, 4.2 mg/kg, 4.5 mg/kg, 4.8 mg/kg, 5.1 mg/kg, 5.4 mg/kg, 5.7 mg/kg ili 6.0 mg/kg, poželjno jednom svakog 21 dana sa 2.7 mg/kg. Pembrolizumab je primenjen u obliku intravenske infuzije sa 2 mg/kg tokom 30 minuta svake 3 nedelje. Dodatna terapija ADC anti-cMet/pembrolizumab se nastavlja sve do progresije bolesti ili je pacijent više ne podnosi. ;[0354] U jednom izvođenju, karcinom je karcinom pankreasa, ADC anti-cMet je ABBV-399, primjenjuje se sa 2.7 mg/kg svakih 21 dana, i erlotinib se daje se primenjuje sa 150 mg oralno, jednom dnevno. Dodatna terapija ADC anti-cMet/erlotinib se nastavlja sve do progresije bolesti ili je pacijent više ne podnosi. ;[0355] U još jednom primeru izvođenja, ADC anti-cMet je korišćen kao dodatak na doksorubicin za lečenje karcinoma dojke. ADC anti-cMet (npr., ABBV-399) se primenjuje putem IV infuzije jednom svakih 14 dana ili svakog 21 dana sa 0.15 mg/kg, 0.3 mg/kg, 0.6 mg/kg, 0.9 mg/kg, 1.2 mg/kg, 1.5 mg/kg, 1.8 mg/kg, 2.1 mg/kg, 2.4 mg/kg, 2.7 mg/kg, 3.0 mg/kg, 3.3 mg/kg, 3.6 mg/kg, 3.9 mg/kg, 4.2 mg/kg, 4.5 mg/kg, 4.8 mg/kg, 5.1 mg/kg, 5.4 mg/kg, 5.7 mg/kg ili 6.0 mg/kg, poželjno jednom svakog 21 dana sa 2.7 mg/kg. Kada se koristi kao dodatak drugim lekovima, najčešće korišćena doza doksorubicina je 40 do 60 mg/m<2>koja se daje u obliku jedne intravenske injekcije svakih 21 do 28 dana. Dodatna terapija ADC anti-cMet/doksorubicin se nastavlja sve do progresije bolesti ili je pacijent više ne podnosi. ;[0356] U još jednom primeru izvođenja, ADC anti-cMet je korišćen kao dodatak na AVASTIN® (bevacizumab) za lečenje karcinoma dojke. ADC anti-cMet (npr., ABBV-399) se primenjuje putem IV infuzije jednom svakih 14 dana ili svakog 21 dana sa 0.15 mg/kg, 0.3 mg/kg, 0.6 mg/kg, 0.9 mg/kg, 1.2 mg/kg, 1.5 mg/kg, 1.8 mg/kg, 2.1 mg/kg, 2.4 mg/kg, 2.7 mg/kg, 3.0 mg/kg, 3.3 mg/kg, 3.6 mg/kg, 3.9 mg/kg, 4.2 mg/kg, 4.5 mg/kg, 4.8 mg/kg, 5.1 mg/kg, 5.4 mg/kg, 5.7 mg/kg ili 6.0 mg/kg, poželjno jednom svakog 21 dana sa 2.7 mg/kg. Preporučena doza i raspored bevacizumaba je 10 mg/kg svakih 14 dana ili 15 mg/kg svakog 21 dana. Dodatna terapija ADC anti-cMet/bevacizumab se nastavlja sve do progresije bolesti ili je pacijent više ne podnosi. ;[0357] U još jednom primeru izvođenja, ADC anti-cMet je korišćen kao dodatak na gemcitabin za lečenje karcinoma dojke. ADC anti-cMet (npr., ABBV-399) se primenjuje putem IV infuzije jednom svakih 14 dana ili svakog 21 dana sa 0.15 mg/kg, 0.3 mg/kg, 0.6 mg/kg, 0.9 mg/kg, 1.2 mg/kg, 1.5 mg/kg, 1.8 mg/kg, 2.1 mg/kg, 2.4 mg/kg, 2.7 mg/kg, 3.0 mg/kg, 3.3 mg/kg, 3.6 mg/kg, 3.9 mg/kg, 4.2 mg/kg, 4.5 mg/kg, 4.8 mg/kg, 5.1 mg/kg, 5.4 mg/kg, 5.7 mg/kg ili 6.0 mg/kg, poželjno jednom svakog 21 dana sa 2.7 mg/kg. Gemcitabin se primenjuje intravenskom infuzijom u dozi od 1000 mg/m<2>tokom 30 minuta jednom nedeljno do 7 nedelja (ili do smanjenja toksičnosti ili zadržavanja doze), nakon čega sledi nedelja odmora od lečenja. Naknadni ciklusi bi se trebali sastojati od infuzija jednom nedeljno tokom 3 uzastopne nedelje od svake 4 nedelje. Dodatna terapija ADC anticMet/gemcitabin se nastavlja sve do progresije bolesti ili je pacijent više ne podnosi. ;[0358] U još jednom primeru izvođenja, ADC anti-cMet je korišćen kao dodatak na trastuzumab (HERCEPTIN®) za lečenje karcinoma dojke. ADC anti-cMet (npr., ABBV-399) se primenjuje putem IV infuzije jednom svakih 14 dana ili svakog 21 dana sa 0.15 mg/kg, 0.3 mg/kg, 0.6 mg/kg, 0.9 mg/kg, 1.2 mg/kg, 1.5 mg/kg, 1.8 mg/kg, 2.1 mg/kg, 2.4 mg/kg, 2.7 mg/kg, 3.0 mg/kg, 3.3 mg/kg, 3.6 mg/kg, 3.9 mg/kg, 4.2 mg/kg, 4.5 mg/kg, 4.8 mg/kg, 5.1 mg/kg, 5.4 mg/kg, 5.7 mg/kg ili 6.0 mg/kg, poželjno jednom svakog 21 dana sa 2.7 mg/kg. Preporučena početna doza punjenja trastuzumaba je 4 mg/kg primenjena u obliku infuzije od 90 minuta. Preporučena nedeljna doza održavanja trastuzumaba je 2 mg/kg koja se može dati u obliku infuzije od 30 minuta ako se početna doza punjenja dobro podnosi. Dodatna terapija ADC anti-cMet/trastuzumab se nastavlja sve do progresije bolesti ili je pacijent više ne podnosi. ;[0359] U još jednom primeru izvođenja, ADC anti-cMet je korišćen kao dodatak na kapecitabin (XELODA®) za lečenje karcinoma dojke. ADC anti-cMet (npr., ABBV-399) se primenjuje putem IV infuzije jednom svakih 14 dana ili svakog 21 dana sa 0.15 mg/kg, 0.3 mg/kg, 0.6 mg/kg, 0.9 mg/kg, 1.2 mg/kg, 1.5 mg/kg, 1.8 mg/kg, 2.1 mg/kg, 2.4 mg/kg, 2.7 mg/kg, 3.0 mg/kg, 3.3 mg/kg, 3.6 mg/kg, 3.9 mg/kg, 4.2 mg/kg, 4.5 mg/kg, 4.8 mg/kg, 5.1 mg/kg, 5.4 mg/kg, 5.7 mg/kg ili 6.0 mg/kg, poželjno jednom svakog 21 dana sa 2.7 mg/kg. Kapecitabin se može davati 1250 mg/m<2>dva puta dnevno tokom 2 nedelje, nakon čega sledi period odmora od jedne nedelje u ciklusu od 3 nedelle. Dodatna terapija ADC anti-cMet/kapecitabin se nastavlja sve do progresije bolesti ili je pacijent više ne podnosi. ;[0360] U još jednom primeru izvođenja, ADC anti-cMet je korišćen kao dodatak na nivolumab (OPDIVO®) za lečenje karcinoma dojke. ADC anti-cMet (npr., ABBV-399) se primenjuje putem IV infuzije jednom svakih 14 dana ili svakog 21 dana sa 0.15 mg/kg, 0.3 mg/kg, 0.6 mg/kg, 0.9 mg/kg, 1.2 mg/kg, 1.5 mg/kg, 1.8 mg/kg, 2.1 mg/kg, 2.4 mg/kg, 2.7 mg/kg, 3.0 mg/kg, 3.3 mg/kg, 3.6 mg/kg, 3.9 mg/kg, 4.2 mg/kg, 4.5 mg/kg, 4.8 mg/kg, 5.1 mg/kg, 5.4 mg/kg, 5.7 mg/kg or 6.0 mg/kg, poželjno jednom svakog 21 dana sa 2.7 mg/kg. Nivolumab se daje intravenskom infuzijom sa 3 mg/kg tokom 60 minuta svake dve nedelje. Dodatna terapija ADC anti-cMet/nivolumab se nastavlja sve do progresije bolesti ili je pacijent više ne podnosi. ;[0361] U još jednom primeru izvođenja, ADC anti-cMet je korišćen kao dodatak na pembrolizumab (KEYTRUDA®) za lečenje karcinoma dojke. ADC anti-cMet (npr., ABBV-399) se primenjuje putem IV infuzije jednom svakih 14 dana ili svakog 21 dana sa 0.15 mg/kg, 0.3 mg/kg, 0.6 mg/kg, 0.9 mg/kg, 1.2 mg/kg, 1.5 mg/kg, 1.8 mg/kg, 2.1 mg/kg, 2.4 mg/kg, 2.7 mg/kg, 3.0 mg/kg, 3.3 mg/kg, 3.6 mg/kg, 3.9 mg/kg, 4.2 mg/kg, 4.5 mg/kg, 4.8 mg/kg, 5.1 mg/kg, 5.4 mg/kg, 5.7 mg/kg ili 6.0 mg/kg, poželjno jednom svakog 21 dana sa 2.7 mg/kg. Pembrolizumab se daje intravenskom infuzijom sa 2 mg/kg tokom 30 minuta svake 3 nedelje. Dodatna terapija ADC anti-cMet/pembrolizumab se nastavlja sve do progresije bolesti ili je pacijent više ne podnosi. ;[0362] U još jednom primeru izvođenja, ADC anti-cMet je korišćen kao dodatak na TARCEVA® (erlotinib) za lečenje karcinoma glave i vrata. ADC anti-cMet (npr., ABBV-399) se primenjuje putem IV infuzije jednom svakih 14 dana ili svakog 21 dana sa 0.15 mg/kg, 0.3 mg/kg, 0.6 mg/kg, 0.9 mg/kg, 1.2 mg/kg, 1.5 mg/kg, 1.8 mg/kg, 2.1 mg/kg, 2.4 mg/kg, 2.7 mg/kg, 3.0 mg/kg, 3.3 mg/kg, 3.6 mg/kg, 3.9 mg/kg, 4.2 mg/kg, 4.5 mg/kg, 4.8 mg/kg, 5.1 mg/kg, 5.4 mg/kg, 5.7 mg/kg ili 6.0 mg/kg, poželjno jednom svakog 21 dana sa 2.7 mg/kg. Preporučena doza i raspored erlotiniba je 150 mg oralno, jednom dnevno. Dodatna terapija ADC anti-cMet/erlotinib se nastavlja sve do progresije bolesti ili je pacijent više ne podnosi. ;[0363] U jednom izvođenju, karcinom je karcinom glave i vrata, ADC anti-cMet je ABBV-399, primjenjuje se sa 2.7 mg/kg svakog 21 dana, a erlotinib se daje sa 150 mg oralno, jednom dnevno. Dodatna terapija ADC anti-cMet/erlotinib se nastavlja sve sve do progresije bolesti ili je pacijent više ne podnosi. ;[0364] U još jednom primeru izvođenja, ADC anti-cMet je korišćen kao dodatak za zračenje za lečenje karcinoma glave i vrata. ADC anti-cMet (npr., ABBV-399) se primenjuje putem IV infuzije jednom svakih 14 dana ili svakog 21 dana sa 0.15 mg/kg, 0.3 mg/kg, 0.6 mg/kg, 0.9 mg/kg, 1.2 mg/kg, 1.5 mg/kg, 1.8 mg/kg, 2.1 mg/kg, 2.4 mg/kg, 2.7 mg/kg, 3.0 mg/kg, 3.3 mg/kg, 3.6 mg/kg, 3.9 mg/kg, 4.2 mg/kg, 4.5 mg/kg, 4.8 mg/kg, 5.1 mg/kg, 5.4 mg/kg, 5.7 mg/kg ili 6.0 mg/kg, poželjno jednom svakog 21 dana sa 2.7 mg/kg. Obično, terapija zračenjem sa spoljnim snopom se primenjuje nekoliko minuta do 5 dana u nedelji tokom 5 do 7 nedelja, ovo će varirati u zavisnosti od vrste zračenja sa spoljnim snopom koje se koristi. Dodatna terapija ADC anticMet/zračenje se nastavlja sve do progresije bolesti ili je pacijent više ne podnosi. ;[0365] U još jednom primeru izvođenja, ADC anti-cMet je korišćen kao dodatak na AVASTIN® (bevacizumab) za lečenje karcinoma glave i vrata. ADC anti-cMet (npr., ABBV-399) se primenjuje putem IV infuzije jednom svakih 14 dana ili svakog 21 dana sa 0.15 mg/kg, 0.3 mg/kg, 0.6 mg/kg, 0.9 mg/kg, 1.2 mg/kg, 1.5 mg/kg, 1.8 mg/kg, 2.1 mg/kg, 2.4 mg/kg, 2.7 mg/kg, 3.0 mg/kg, 3.3 mg/kg, 3.6 mg/kg, 3.9 mg/kg, 4.2 mg/kg, 4.5 mg/kg, 4.8 mg/kg, 5.1 mg/kg, 5.4 mg/kg, 5.7 mg/kg ili 6.0 mg/kg, poželjno jednom svakog 21 dana sa 2.7 mg/kg. Preporučena doza i raspored bevacizumaba je 10 mg/kg svakih 14 dana ili 15 mg/kg svakog 21 dana. Dodatna terapija ADC anti-cMet/bevacizumab se nastavlja sve do progresije bolesti ili je pacijent više ne podnosi. ;[0366] U još jednom primeru izvođenja, ADC anti-cMet je korišćen kao dodatak na cetuksimab za lečenje karcinoma glave i vrata. ADC anti-cMet (npr., ABBV-399) se primenjuje putem IV infuzije jednom svakih 14 dana ili svakog 21 dana sa 0.15 mg/kg, 0.3 mg/kg, 0.6 mg/kg, 0.9 mg/kg, 1.2 mg/kg, 1.5 mg/kg, 1.8 mg/kg, 2.1 mg/kg, 2.4 mg/kg, 2.7 mg/kg, 3.0 mg/kg, 3.3 mg/kg, 3.6 mg/kg, 3.9 mg/kg, 4.2 mg/kg, 4.5 mg/kg, 4.8 mg/kg, 5.1 mg/kg, 5.4 mg/kg, 5.7 mg/kg ili 6.0 mg/kg, poželjno jednom svakog 21 dana sa 2.7 mg/kg. Cetuksimab se daje u početnoj dozi od 400 mg/m<2>tokom 120-minutna intravenskom infuzijom praćenom nedeljnom infuzijom od 250 mg/m<2>tokom 60 minuta. Dodatna terapija ADC anti-cMet/cetuksimab se nastavlja sve do progresije bolesti ili je pacijent više ne podnosi. ;[0367] U još jednom primeru izvođenja, ADC anti-cMet je korišćen kao dodatak na karboplatin za lečenje karcinoma glave i vrata. ADC anti-cMet (npr., ABBV-399) se primenjuje putem IV infuzije jednom svakih 14 dana ili svakog 21 dana sa 0.15 mg/kg, 0.3 mg/kg, 0.6 mg/kg, 0.9 mg/kg, 1.2 mg/kg, 1.5 mg/kg, 1.8 mg/kg, 2.1 mg/kg, 2.4 mg/kg, 2.7 mg/kg, 3.0 mg/kg, 3.3 mg/kg, 3.6 mg/kg, 3.9 mg/kg, 4.2 mg/kg, 4.5 mg/kg, 4.8 mg/kg, 5.1 mg/kg, 5.4 mg/kg, 5.7 mg/kg ili 6.0 mg/kg, poželjno jednom svakog 21 dana sa 2.7 mg/kg. Karboplatin se daje u dozi od 300 mg/m<2>ili više, jednom svake 4 nedelje. Dodatna terapija ADC anticMet/karboplatin se nastavlja sve do progresije bolesti ili je pacijent više ne podnosi. ;[0368] U još jednom primeru izvođenja, ADC anti-cMet je korišćen kao dodatak na nivolumab (OPDIVO®) za lečenje karcinoma glave i vrata. ADC anti-cMet (npr., ABBV-399) se primenjuje putem IV infuzije jednom svakih 14 dana ili svakog 21 dana sa 0.15 mg/kg, 0.3 mg/kg, 0.6 mg/kg, 0.9 mg/kg, 1.2 mg/kg, 1.5 mg/kg, 1.8 mg/kg, 2.1 mg/kg, 2.4 mg/kg, 2.7 mg/kg, 3.0 mg/kg, 3.3 mg/kg, 3.6 mg/kg, 3.9 mg/kg, 4.2 mg/kg, 4.5 mg/kg, 4.8 mg/kg, 5.1 mg/kg, 5.4 mg/kg, 5.7 mg/kg ili 6.0 mg/kg, poželjno jednom svakog 21 dana sa 2.7 mg/kg. Nivolumab se daje intravenskom infuzijom sa 3 mg/kg tokom 60 minuta svake dve nedelje. Dodatna terapija ADC anti-cMet/nivolumab se nastavlja sve do progresije bolesti ili je pacijent više ne podnosi. ;[0369] U još jednom primeru izvođenja, ADC anti-cMet je korišćen kao dodatak na pembrolizumab (KEYTRUDA®) za lečenje karcinoma glave i vrata. ADC anti-cMet (npr., ABBV-399) se primenjuje putem IV infuzije jednom svakih 14 dana ili svakog 21 dana sa 0.15 mg/kg, 0.3 mg/kg, 0.6 mg/kg, 0.9 mg/kg, 1.2 mg/kg, 1.5 mg/kg, 1.8 mg/kg, 2.1 mg/kg, 2.4 mg/kg, 2.7 mg/kg, 3.0 mg/kg, 3.3 mg/kg, 3.6 mg/kg, 3.9 mg/kg, 4.2 mg/kg, 4.5 mg/kg, 4.8 mg/kg, 5.1 mg/kg, 5.4 mg/kg, 5.7 mg/kg ili 6.0 mg/kg, poželjno jednom svakog 21 dana sa 2.7 mg/kg. Pembrolizumab se primenjuje kao intravenska infuzija sa 2 mg/kg tokom 30 minuta svake 3 nedelje. Dodatna terapija ADC anti-cMet/pembrolizumab se nastavlja sve do progresije bolesti ili je pacijent više ne podnosi. ;[0370] U još jednom primeru izvođenja, ADC anti-cMet je korišćen kao dodatak na cisplatin za lečenje karcinoma glave i vrata. ADC anti-cMet (npr., ABBV-399) se primenjuje putem IV infuzije jednom svakih 14 dana ili svakog 21 dana sa 0.15 mg/kg, 0.3 mg/kg, 0.6 mg/kg, 0.9 mg/kg, 1.2 mg/kg, 1.5 mg/kg, 1.8 mg/kg, 2.1 mg/kg, 2.4 mg/kg, 2.7 mg/kg, 3.0 mg/kg, 3.3 mg/kg, 3.6 mg/kg, 3.9 mg/kg, 4.2 mg/kg, 4.5 mg/kg, 4.8 mg/kg, 5.1 mg/kg, 5.4 mg/kg, 5.7 mg/kg ili 6.0 mg/kg, poželjno jednom svakog 21 dana sa 2.7 mg/kg. Dodatna terapija ADC anti- LRRC15/cisplatin se nastavlja sve do progresije bolesti ili je pacijent više ne podnosi. ;[0371] U još jednom primeru izvođenja, ADC anti-cMet je korišćen kao dodatak na TARCEVA® (erlotinib) za lečenje karcinoma glave i vrata. ADC anti-cMet (npr., ABBV-399) se primenjuje putem IV infuzije jednom svakih 14 dana ili svakog 21 dana sa 0.15 mg/kg, 0.3 mg/kg, 0.6 mg/kg, 0.9 mg/kg, 1.2 mg/kg, 1.5 mg/kg, 1.8 mg/kg, 2.1 mg/kg, 2.4 mg/kg, 2.7 mg/kg, 3.0 mg/kg, 3.3 mg/kg, 3.6 mg/kg, 3.9 mg/kg, 4.2 mg/kg, 4.5 mg/kg, 4.8 mg/kg, 5.1 mg/kg, 5.4 mg/kg, 5.7 mg/kg ili 6.0 mg/kg, poželjno jednom svakog 21 dana sa 2.7 mg/kg. Preporučena doza i raspored erlotiniba je 150 mg oralno, jednom dnevno. Dodatna terapija ADC anti-cMet/erlotinib se nastavlja sve do progresije bolesti ili je pacijent više ne podnosi. ;[0372] U jednom izvođenju, karcinom je karcinom glave i vrata, ADC anti-cMet je ABBV-399, primenjen sa 2.7 mg/kg svakog 21 dana, i erlotinib je primenjen sa 150 mg oralno, jednom dnevno. Dodatna terapija ADC anti-cMet/erlotinib se nastavlja sve do progresije bolesti ili je pacijent više ne podnosi. ;[0373] Kao što će proceniti stručnjaci sa ovog područja tehnike, preporučene doze za razne agense opisane iznad će možda trebati biti prilagođene da bi se optimizovao odgovor pacijenta i povećala terapijska korist. ;[0374] U alternativnim izvođenjima, svi brojevi koji izražavaju količine sastojaka, % čistoće i tako dalje, korišćeni u ovom otkriću, su modifikovani termonom "oko". ;;5.11. Izbor pacijenta ;[0375] Pacijenti izabrani za ADC tretmane u ovom otkriću uključuju one sa tumorima koji eksprimiraju cMet i one sa tumorima koji prekomerno eksprimiraju cMet, koji uključuju, ali nisu ograničeni na bilo koji čvrsti tumor (uključujući takođe one koji prekomerno eksprimiraju HGF i/ili imaju abnormalnu aktivaciju signalizaranja ili ekspresije HGF/cMet). Pacijenti mogu biti izabrati za lečenje sa ADC tretmanima iz ovog otkrića na osnovu njihovog nivoa cMet, koja je klasifickovan u smislu imunohistohemijskog (IHC) H-rezultata. Detalji o tome kako kvantifikovati i kvalifikovati nivo prekomerne ekspresije cMet su predstavljeni u detaljnom opisu (odeljak 5.3.) i u Primeru 17. Prekomerna ekspresija cMet može biti definisana IHC H-rezultatom većim ili jednakim na 150 kada je merena prema testu iz Primera 17 " cMet ABBV-ADC protokolu bojanja." Ukratko, razvijen je IHC protokol bojenja za prekomernu ekspresiju cMet korišćenjem Ventana cMet CONFIRM (SP44) kompleta. Uzorci tkiva su obojeni sa antitelom Ventana, a zatim bodovani određivanjem procenta bojenja ciljanog tkiva na različitim nivoima intenziteta od niskog do visokog. Sl. 20 prikazuje reprezentativne H-rezultate korišćenjem testa opisanog u Primeru 17. Alternativno, cMet koji prekomerno eksprimira tumorsko tkivo korišćenjem rezultata IHC od 0 do 3+ je opisan u Primeru 21. SL.19 prikazuje reprezentativne IHC rezultate korišćenjem testa opisanog u Primeru 21. ;[0376] Za potrebe ovog otkrića, H-rezultat između 150 i 224 je ekvivalentan sa IHC ocenom 2+, i H- rezultat 225 i više je ekvivalentan sa IHC ocenom 3+. U jednom primeru, pacijenti sa karcinomom skvamoznih ćelija NSCLC mogu biti izabrani za lečenje kada njihov karcinom ima H-rezultat najmanje između 150 i 224 ili IHC ocenu 2+. U drugom primeru, pacijenti sa NSCLC adenokarcinomom mogu biti izabrani za lečenje kada njihov karcinom ima H- rezultat od 225 i više ili IHC ocenu 3+. ;[0377] Karcinon može biti novo dijagnostifikovan i naivan-lak za lečenje, ili može biti recidivan, ili recidivan i rezistentan, ili metastaza ili metastatski oblik od cMet-ekspresioniranja (ovde se odnosi na cMet tumori) ili tumor koji prekomerno eksprimira cMet, tj. cMet+/prekomerno eksprimirajući tumori. Kao što je prikazano u Primerima ovog otkrića, cMet+/prekomerno eksprimirajući tumori koji pokazuju rezistenciju na druge ciljane ili neciljane hemoterapije, zadržavaju osetljivost na ABBV-399. ;[0378] ADC anti- cMet imaju bezbroj primena i u jednom izvođenju su terapijski korisni za lečenje tumora koji koji između ostalog prekomerno eksprimiraju cMet kod ljudi, tumora kod kojih je pojačan gen MET; i tumora koji nose mutacije u ili oko Eksona 14 MET gena. U drugom izvođenju, ADCi anti-cMet su terapijski korisni za lečenje tumora koji eksprimiraju cMet kod ljudi, ge cMet nije prekomerno eksprimiran, ali je i dalje eksprimiran. ;[0379] Tumori koji nose EGFR Ekson 19 delecije ili EGFR Ekson 21 mutacije (L858R) su takođe u obimu ovog otkrića. Pojačanje MET gena se smatra jednim od najčešćih uzroka stečene rezistencije u EGFR-mutiranom NSCLC. ;[0380] Odgovor na ABBV-399 i druge ovde otkrivene ADCe -cMet može korelirati sa ekspresijom cMet i na proteinskom i na genomskom nivou (npr. amplifikacija, mutacije Eksona 14). Preferencijalne metode za merenje oba ova biomarkera detaljno su opisane u Primerima. Međutim, prosečan stručnjak u stanju tehnike bi znao kako da iskoristi druge metode za procenu istih i ove metode metode su u okviru ovog otkrića. ;[0381] Ako su različiti rezultati dobijeni sa različitim metodama, tada će rezultati dobijeni sa metodama opisanim u Primerima biti korišćeni u određivanju spada li određeno izvođenje u obim izvođenja. Na primer, za procenu ekspresije cMet proteina koristio bi se "cMet ABBV-ADC protokol bojenja". Ako reagensi Ventana korišćeni u ovom protokolu više nisu dostupni, može biti korišćen drugi protokol odobren od strane FDA za procenu nivoa ekspresije cMet od strane IHC. Za procenu kopije MET gena broj jedan bi koristio "Metodu pojačanja MET/CEP7 cMET." ;[0382] MET je podložan alternativnom splajsovanju. U humanim ćelijskim linijama i tkivima identifikovano je više MET transkripata različite veličine. Opisane su najmanje tri varijante 8-kb za koje se pretpostavlja da su generisane alternativnim splajsovanjem. Opisan je izoformi cMet kome nedostaje 18 aminokiselina u van ćelijskom regionu (ekson 10) i najrasprostranjeniji je oblik u raznim tkivima i ćelijskim linijama. Alternativno splajsovanje eksona 14 generiše drugu varijantu koja ima deleciju u okviru 47 aminokiselina u jukstamembranskom citoplazmatskom domenu receptora. Mogući mehanizam alternativnog splajsovanja mogao bi biti izvor 85-kDa, N-terminalno skraćenog oblika MET koji se nalazi u malignim mišićno-koštanim tumorima, iako ovaj kratki oblik takođe može poticati od alternativnog početka transkripcije ili proteolitičkog cepanja. ;[0383] Pokazano je da MET mutanti koji uključuju deleciju eksona 14 stabilišu cMet receptor, što rezultira pojačanjem funkcije aktivnosti. MET Ekson 14 sadrži Cbl mesto ubikvitin ligaze na ostatku tirozina 1003 (Y1003), gde je ubikvitin inače normalno vezan za ostatku tirozina i dovodi do lizozomske razgradnje cMet proteina. Dakle, pogrešna mutacija ostatka Y1003 ili "preskakanje" proteinskog regiona koji je kodiran sa MET Eksonom 14 rezultira relativnom prekomernom ekspresijom MET proteina, pojačanom aktivacijom cMet i naknadnom onkogenezom. Inhibicija sa inhibitorima MET tirozinske kinaze (TKIa) može rezultirati kliničkim koristima najmanje kod pacijenata sa NSCLC koji sadrže ove promene u Eksonu 14 MET. Pacijenti koji imaju bilo koju od ovih mutacija mogu imati koristi od ovde opisanih tretmana. ;[0384] Prema tome, pacijenti takođe mogu biti izabrani za lečenje ako nose ćelije sa mutacijom u Eksonu 14 gena MET, čiji je rezultat povećani nivo cMet proteina u tim ćelijama karcinoma. Primeri takođe pružaju različite metode za procenu ovog biomarkera. ;[0385] MET amplifikacija je prepoznata kao jedan od potencijalnih molekularnih mehanizama stečene rezistencije u EGFR-mutiranom NSCLC na EGFR-TKIs. Odluka o izboru određenog pacijenta za lečenje sa ovde otkrivenim ADCa može takođe obuhvatiti utvrđivanje da li pacijent sa karcinomom nosi deleciju u Eksonu 19 receptora epidermalnog faktora rasta (EGFR), supstituciju u Eksonu 21 (L858R) , ili oboje. Pacijenti čiji karcinom nosi jednu ili obe ove genomske promene u barem nekim od svojih ćelija, poželjno su izabrani za lečenje sa ABBV-399 ili bilo kojim drugim ovde otkrivenim ADC. Metode za procnu ova dva biomarkera su date u Primerima ispod. ;6. PRIMERI ;;[0386] Sledeći primeri koji ističu određene karakteristike i svojstva izvođenja primera ADCa anti-cMet i metode korišćenja ovih ADC za lečenje pacijenata su dati u svrhu ilustracije, a ne radi ograničenja. ;;Primer 1. Priprema ABT-700 ;;[0387] ABBV-399 (ABT-700-vcMMAE) je konjugat leka za antitelo (ADC) koji se sastoji od antitela ABT-700 konjugovanog sa citotoksičnim inhibitorom mikrotubula monometilauristatinom E(MMAE) preko cepljive veze valin-citrulin (vc). ABT-700 je "humanizovani" rekombinantni imunoglobulin G kappa (IgG1) koji cilja jedinstveni epitop cMet-a rezultirajući u blokadi HGF – zavisnog i HGF-nezavisog cMet signaliziranja. ;[0388] ABT-700 je humanizovano rekombinantno monoklonalno antitelo usmereno protiv cMet. Antitelo se sastoji od 2 identična IgG1teška lanca od 445 aminokiselina uparenih sa 2 identična laka lanca od 218 aminokiselina. Teški lanac je inženjeriran tako da uvede dodatni cistein na položaj 223, kao i deleciju ostatka lizina koji prethodi Cis-223 i deleciju 2 ostatka treonina uz bok His-224. Pored toga, C-terminalni lizin aminokiseline na teškom lancu je inženjeriran tako da eliminiše heterogenost na C terminusu zbog nepotpunog cepanja lizina. Antitelo se glikozilirano na asparagin 296 na svakom teškom lancu. ;[0389] Teški lanac sadrži 12 ostataka cisteina, i laki lanac 5 ostataka cisteina. Svaki teški lanac sadrži 4 disulfidna mosta unutar lanca, i svaki laki lanac sadrži 2 disulfidna mosta unutar lanca. Pored toga, 2 teška lanca su kovalentno vezana sa 3 međulančana disulfidna mosta. Svaki laki lanac učestvuje u 1 disulfidoj vezi sa teškim lancem. ;[0390] ABT-700 za in vitro studije opisane ispod je pripremljen rutinskim tehnikama, u osnovi kao što je opisano u U.S. Patent Br. 8,741,290. Ukratko, ćelije HEK293 EBNA (InVitrogen, SAD) prilagođene suspenziji rutinski su gajane u laboratorijskim bocama od 250 ml u 50 ml medijuma bez seruma Excell 293 (SAFC Biosciences) nadopunjenog sa 6 mM glutamina na orbitalnom šejkeru (brzina rotacije 110 rpm-okretaja u minuti). Privremena transfekcija je izvedena sa 2 x 10<6>ćelija/ml korišćenjem linearnog 25 kDa polietilenimina (PEI) (Polysciences) pripremljenog u vodi u konačnoj koncentraciji od 1 mg/ml pomešane i plazmidne DNK (konačna koncentracija od 1.25 µg/ml za teški prema lakom lancu odnos plazmida 1:1). 4 sata nakon transfekcije, kultura je razblažena sa jednom zapreminom svežeg medijuma za kulturu da se postigne konačna gustina ćelija od 10<6>ćelija/ml. Postupak gajenja je praćen na osnovu održivosti ćelije i produkcije Mab. Obično, kulture su se održavale 4 do 5 dana. ABT-700 je prečišćen korišćenjem konvencionalnog hromatografskog pristupa na smoli proteina A (GE Healthcare, SAD). ;[0391] ABT-700 za ispod opisane kliničke studije je pripremljen u osnovi kao što je dalje opisano. Prvo, konstruisan je plazmid pConPlusy1fΔK/ -hz224G11[TH7] za visoki nivo ekspresije ABT-700 monoklonalnog antitela u CHO ćelijama koristeći tehnologiju Glutaminske Sintetaze GS-CHO. Sekvence teškog i lakog lanca su klonirane u vektore pConPlusy1fΔK/ -hz224G11/TH7VH0 i pConPlus 2-hz224G11/VL4 (4-39-84) redom, stvarajući jednogenske vektore (SGVe). SGVi koji sadrže gene teškog i lakog lanca su kombinovani, zajedno sa genom za izbor Glutaminske-sintetaze (GS), da bi se generisao konačni vektor dvostrukog gena (DGV): pConPlusy1fΔK/ -. ;[0392] hz224G11[TH7]. Glavne komponente od pConPlusy1fΔK/ -hz224G11[TH7] uključuju sledeće gene ili regulatorne elemente sledećim redosledom: hCMV-MIE promoter, 5 'UTR sa intronom, ABT-700 kodirajuća sekvenca lakog lanca [224G11 (HzVL)], SV40 poliadenilaciona sekvenca, hCMV-MIE promoter, 5' UTR sa intronom, ABT-700 kodirajuća sekvenca teškog lanca [224G11 (HzVH)], SV40 poliadenilaciona sekvenca, poreklo replikacije plazmida, beta-laktamaza i cDNA Glutaminska-sintetaza cDNK sa svojim regulatornim sekvencama. ;[0393] Sistem ekspresije korišćen za proizvodnju ABT-700 lekovite supstance je bio zaštićeni sistem za ekspresiju gena Glutaminske Sintetaze (GS) kompanije Lonza Biologics u ćelijama jajnika kineskog hrčka (CHO). Ćelijska linija domaćina je izvedena iz CHO-K1SV banke radnih ćelija domaćina oznake 269-W3 (pripremljene iz glavne banke ćelije domaćina 269-M). ;[0394] Vektor dvostrukog gena pConPlusy1fΔK/ -hz224G11[TH7] transfektovan je u ćelije CHO-K1SV elektroporacijom i zatim raspodeljen u ploče sa 96 jažica. Ćelije koje eksprimiraju GS, a time i one koje sadrže ekspresioni vektor su izabrane rastom u medijumu bez proteina i glutamina. Ploče su inkubirane do transfekcije žarišta ćelija koje su se počele pojavljivati. Napredovale su samo ćelijske linije koje su dolazile iz jažica koje sadrže pojedinačne kolonije (kao što je utvrđeno vizualnom procenom). Supernatanti kulture iz jažica koje sadrže pojedinačne kolonije su pregledani za proizvodnju antitela korišćenjem ELIZA za sastavljena antitela. Utvrđeno je nekoliko klonalnih ćelijskih linija, a ona koja pokazuje najkonzistentnije performanse je izbrana za proizvodnju ABT-700. Ćelije su testirane da bi se potvrdio kvalitet mRNK i vernost kodirajućih transkripata. ;[0395] Jedna zamrznuta bočica ćelije je proširena ili šejkerom ili kessicama za ćelije. Veća zapremina medijuma za kulturu je inokulisana sa proširenim kulturama i dalje proširenim kulturama u bioreaktoru (koji sadrži medijum za rast dopunjen metionin sulfoksimidom) u inkubatoru sa 5% CO2, na 36°C. Kulture su sakupljene i filtrirane radi uklanjanja ćelija i ostataka. ABT-700 je prečišćen kroz protein A kolone, nakon čega sledi anjosko izmenjivačka membranska hromatografija, katjononsko izmjenjivačka hromatografija na koloni, virusna filtracija, ultrafiltracija i završna rasuta filtracija. Svi rastvori su pripremljeni prema cGMP. ;;Primer 2. Priprema heterogenih DAR ABT700-vcMMAE ADCa ;[0396] ABBV-399 je ADC koji se sastoji od ABT-700 (anti-cMet IgG1antitela) konjugovanog na MMAE putem vc veznika. ;[0397] ABBV399 je izveden iz konjugacije vcMMAE sa međulančanim disulfidnim vezama u ABT-700 nakon blagog smanjenja na sulfidrilnim grupama. Nakon dodatnog koraka postupka uklanjanja DAR vrsta višeg reda, prosečni DAR za ABBV-399 je približno 3. ;[0398] Dva različita postupka, Postupak I (SL.2A i 2B) i Postupak II (SL. 3A i 3B) su korišćeni za pravljenje ABBV-399 heterogenih DAR kompozicija. ;[0399] Heterogena kompozicija ABBV399 u DAR je pripremljena hemijskim postupkom u dva koraka: redukcijom disulfida ABT-700, nakon čega sledi alkilacija (konjugacija) sa maleimidokaproil valin-citrulin ("val-cit") para-aminobenzil alkohol ("PABA") monometil auristatinom E (odnosi se na "vcMMAE"), ilustrovana ispod: ;[0400] U prvom koraku, ograničeni broj međulančanih disulfidnih veza ABT700 je redukovan sa tris(2-karboksietil fosfinom ("TCEP") (≥.0,8 ekvivalenta).Delimično redukovani ABT700 je zatim konjugovan sa vcMMAE (≥1.8 ekvivalenta) u DMSO. Preostali nereagovani vcMMAE je ugašen sa N-acetil-L-cisteinom. ;[0401] SLIKE 2A i 3A prikazuju hromatografske rezolucije i rezultirajućih sirovih ADC pripravaka dobijenih iz Postupka I (SL. 2A) ili Postupka II (SL. 3A). Kao što se može videti, dobijeni ADC pripravak je heterogena smeša koja sadrži antitela koja imaju nula spojenih molekula MMAE (pik "E0"), dva molekula MMAE (pik "E2"), šest spojenih molekula MMAE (pik "E6"), osam spojenih molekula MMAE (pik "E8") i deset spojenih molekula MMAE (pik "E10"). Za postupak I, prosečni DAR sirovog proizvoda pripravka je približno 4.3. Za postupak II prosečni DAR sirovog proizvoda pripravka je približno 3.2. ;;Primer 3. Priprema ABT700-vcMMAE ADCa obogaćenih u DAR3.1 i ABBV-399 obogaćenih u odnosu E2/E41:1 ;Priprema ABBV-399 obogaćenog u DAR 3.1 korišćenjem Postupka I ;;[0402] Da bi se dobio prosečni DAR od 3.1, kao što je prikazano na SL. 2B, korišćen je šaržni hromatografski postupak. Rastvor sirovog produkta ABBV-399 (SL. 2A) je razblažen sa puferom kalijum fosfata i tretiran sa HIC smolom da bi se smanjio DAR na približno 3. HIC smola je uklonjena filtracijom, isprana sa fiziološkim rastvorom puferisanim fosfatom i pranje je opciono kombinovano sa rastvorom produkta ABBV-399 DAR 3.1. ;[0403] SL. 2B prikazuje analitički HIC hromatogram konačnog proizvoda iz postupka I posle tretmana sa HIC smolom (Kao što se može videti, dobijeni ADC pripravak je heterogena smeša koja sadrži antitela imajući nula molekula MMAE (pik"E0"), dva MMAE spojena molekula (pik "E2"), četiri MMAE spojena molekula (Pik "E4") i šest MMAE spojenih molekula (pik "E6"), a prosečni DAR od 3.1. ;;Priprema ABBV-399 obogaćenog u odnosu E2/E41:1 ;;[0404] Da bi se dobio odnos E2/E4 od 1:1, kako je prikazano na SL YB, korišćen je hromatografski postupak na koloni. Rastvor sirovog proizvoda ABBV-399 (slika 3A) je razblažen sa rastvorom amonijum sulfata/natrijum fosfat do ciljne koncentracije vezivanja. Ovaj se materijal nanosi na kolonu i veže na HIC smolu. Gradijent stepena elucije korišćenjem pufera amonijum sulfat/natrijum fosfat je korišćen da se obogati konjugat antitelo lek i izoluju ADC vrste sa dva ili četiri vcMMAE spojena molekula. Oni su izdvojeni elucijom iz kolone u jednom piku. ;[0405] Slika 3B prikazuje analitički HIC hromatogram konačnog proizvoda iz Postupka II nakon obogaćivanja korišćenjem HIC kolonske hromatografije. Kao što se može videti, dobijeni i ADC pripravak je heterogena smeša koja sadrži antitela koja imaju nula spojenih molekula MMAE (pik "E0"), dva spojena molekula MMAE (pik "E2") i četiri spojena molekula MMAE (pik "E4"), i ima prosečni DAR od 3.0. ;[0406] Kao što će biti prikazano ispod u Primeru 16, ABBV-399 je pokazao antikancerogene efekte u kliničkom ispitivanju Faze I u dozi od 2.7 mg/kg Q3W. Ovde je takođe predloženo povećanje doze na 3 mg/kg da bi se utvrdila maksimalna tolerisana doza za studije Faze II imajući na umu da su brentuksimab vedotin i DCDT2980S (MMAE ADC ciljajući CD22) tolerisani na 1.8 i 2.4 mg/kg, ali ne i na 2.7 ili 3.2 mg/kg, redom. Na osnovu razmatranja odnosa antitelo lek (DAR; punjenje-dodavanje MMAE po molekulu antitela), ABBV-399 sa DAR 3.1 može biti potencijalno podnošljiviji od brentuksimab vedotina koji ima približno DAR 4. ;;Primer 4. Priprema KONJUGATA ANTITEO LEK ABT700-PBD ;;[0407] ABT-700 (S238C) -PBD se sastoji od dva PBD molekula lek veznik konjugovanih na cis nženjerirani mAb ABT-700. PBD sinton vaPBD je konjugovan sa antitelom ABT-700 (S238C ako se koristi Kabat, S239C ako se koristi EU sistem numerisanja). Postupak konjugacije se sastoji od kvantitativnog smanjenja inženjeriranih i međulančanih disulfida. Ovo se događa kroz smanjenje međulančanih disulfida, kvantitativnom oksidacijom i konjugacijom sa viškom PBD lek veznik. Redukciona smeša je zatim prečišćena da bi se uklonio uvišak reagensa i njegovih nusproizvoda, nakon čega sledi kvantitativna oksidacija međulančanih disulfida, a zatim konjugacija sa viškom PBD lek veznik. Posle gašenja, reakciona smeša je prečišćena i razmenjena u puferu dajući ABT-700 (S238C)-PBD. Identifikovani su reakcioni parametri koji obezbeđuju konjugat sa> 80% DAR2 punjenim lekom. ; ;;; Primer 5. ABBV-399 se veže na rekombinantni i ćelijski cMet in vitro ELIZA vezivanjem, test vezivanja ćelije i analiza sortiranja ćelija aktiviranih fluorescencijom (FACS) ;;[0408] Ploče sa 96 jažica (Costar # 3369) su presvučene preko noći sa 100 µL/jažici mišjeg anti-His antitela (Invitrogen # 37-2900) sa 1 µg/mL u PBS pH 7.4 na 4°C, a zatim blokirane korišćenjem Superbloka (Pierce, # 37535) jedan sat na sobnoj temperaturi. Ploče su isprane 4 puta sa PBST i zatim inkubirane sa 100 µL rekombinantnog humanog cMet-a vanćelijskog domena (rh-cMet ECD-6His) ("6His" otkriven kao SEK ID BR: 100) pri 2 µg/mL u 10% Superbloku u PBST tokom 1 sata na sobnoj temperaturi. Ploče su isprane 4 puta sa PBST i zatim inkubirane sa ABT-700 ili kontrolnim humanim IgG u serijskim razblaženjima u 10% Superbloku u trostrukim jažicama na sobnoj temperaturi tokom 1 sata. Ploče su isprane 4 puta sa PBST i zatim inkubirane sa 100 µL 1:15 000 kozjeg anti-humanog IgG-HRP (Thermo-scientific Pierce, Cat#31412) na sobnoj temperaturi tokom 1 sata. Ploče su isprane 4 puta u PBST i u svaku jažicu je dodato 100 µL TMB (Pierce, # 34028) i inkubirano na sobnoj temperaturi dok se ne razvije boja (približno 10 min). Reakcije su zaustavljene dodatkom 2N sumporne kiseline (Mallinckrodt chemicals, Cat # H381-05) i očitana je optička gustina (OD) na 450 nm. ;[0409] Vezivanje ABBV-399 na površinski cMet na ploči humanih ćelija karcinoma je određeno analizom sortiranja ćelija pomoću fluorescencije (FACS). Za studije ćelijskog vezivanja cMet, ćelije su sakupljene iz laboratorijskih boca kada se približno 80% slije, koristeći pufer za disocijaciju ćelija (Invitrogen # 13151-014 ili # 13150-016). Ćelije su isprane jednom u PBS/1% FBS (FACS pufer), resuspendovane na 1.5-2 x 10<6>ćelija/mL u FACS puferu i prenesene na ploču sa okruglim dnom sa 96 jažica (BD Falcon # 3910) sa 100 µL/ jažici. Deset µL od 10 x koncentracija ABT-700, ABBV-399, ili kontrole su dodate i ploče su inkubirane na 4°C za dva sata. Jažice su isprane dva puta sa FACS puferom i resuspendovane u 50 µL od 1: 500 anti-humanog IgG Ab (AlexaFluor 488, Invitrogen # 11013) razblaženog u FACS puferu. Ploče su inkubirane na 4°C za jedan sat, isprane dva puta sa FACS puferom. Ćelije su resuspendovane u 100 µL PBS/1% formaldehida i analizirane na protočnom citometru tzv. "Becton Dickinson LSRII." ;[0410] ABBV-399 je reaktivan sa rekombinantnim oblikom humanog cMet vanćelijskog domena (ECD, ostaci 25 -932) kao što je određeno enzimski povezanim imunosorbentnim testom (ELIZA), koristeći rutinski metod za očito merenje afiniteta, kao što poznato i dostupno prosečnom stručnjaku u ovoj oblasti tehnike. ABBV -399 veže humani cMet ECD sa prividnim afinitetom (EC50) od 0.30 nM (TABELA 6), slično ABT-700 (EC50od 0.22 nM) (TABELA 6). ;[0411] ABBV-399 je pokazao afinitet vezivanja od 0.2 do 1.5 nM (TABELA 6) za ćelije karcinoma, uključujući NCI-H441, NCI-H292 i NCI-H1650 ćelije karcinoma pluća i Hs746T, IM-95 i SNU-5 ćelijske linije karcinoma želuca. Ovaj test je izveden rutinom za prividno merenje afiniteta, kao što je poznato i dostupno prosečnom stručnjaku sa ovog područja tehnike. ;TABELA 6. Afinitet vezivanja ABBV-399 za rekombinantni i ćelijski cMet ;; ;;; Primer 6. In vitro snaga ABBV-399 protiv ćeliskih linija karcinoma ;;Analiza citotoksičnosti ;;[0412] Ćelije karcinoma su postavljene na 2000-5000 ćelija/jažici u 180 µL medijuma za rast koji sadrži 10% FBS u pločicama sa 96 jažica i gajene na 37°C u vlažnom inkubatoru sa 5% CO2. Sedećeg dana dodate su titracije antitela ili ADCi u 20 µL i ćelije su inkubirane za 6 dana. Stabilnost ćelja je određena korišćenjem testa tzv. "CellTiter-Glo Luminescent Cell Viability Test" (Promega) prema uputstvima proizvođača. Nevezujuća, irelevantnia ADC negativna kontrola ADC konjugovana sa MMAE takođe je bila uključena u sve testove da bi se potvrdilo da ubijanje ćelije zavisi od antigena. ;[0413] ABBV-399 je inhibirao proliferaciju ćelija karcinoma koje prekomerno eksprimiraju cMet, uključujući ćelijske linije Hs746T sa pojačanim MET-om i ćelije karcinoma želuca SNU-5 (SL. 4). Poređenja radi, ABT-700 je inhibirao proliferaciju ćelija sa MET amplifikacijom (SL.4A i SL. 4B), ali ne i ćeljske linije bez MET amplifikacije, tj. NCI-H820 i NCI-H441 (SL.4C i SL. 4D). ;;Određivanje gustine receptora ;;[0414] cMet gustina površinske ćelije (kapacitet vezivanja antigena po ćeliji) je određena indirektnim imunofluorescentnim bojenjem antigena na ćelijskoj površini na kultivisanim ćelijama korišćenjem QIFIKIT (Dako). Ukratko, ćelije su sakupljene sa kulture iz laboratorijske boce kao što je opisano iznad za FACS analizu, dodate na ploču sa 96- jažica sa okruglim dnom sa 100 uL/jažici i inkubirane na 4°C sa 3 g/µL cMet antitelom m224G11. Jažice, tretirane irelevantnim mišjim monoklonalnim antitelom istog izotipa mIgG1sa 3 µg/mL, su uključene kao kontrole. Nakon jednosatne inkubacije sa primarnim antitelom, ćelije su centrifugirane za 3 minuta sa 300 xg, isprane dva puta sa FACS puferom i inkubirane jedan sat na 4°C sa 100 µL konjugovanog antitela razblaženog 1:50 u FACS puferu obezbeđenog QIFIT. Ćelije su centrifugirane tokom 3 minut sa 300 x g, isprane dva puta sa FACS puferom, i fiksirane sa 100 µL/jažici 1% formaldehida u PBS. Za indirektno imunofluorescentno bojenje QIFIKIT perlica, 100 µL resuspendiovanih perlica iz bočice 1 i bočice 2 je dodato u zasebne jažice, centrifugirano 3 minuta na 300 xg, isprano jednom sa FACS puferom i fiksirano sa 100 µL/jažici 1% formaldehid u PBS. Podaci su prikupljeni na protočnom citometru "Becton Dickinson LSRII" i zabeležene su vrednosti Geomean za 5 populacija perlica i korišćene za izračunavanje standardne krive na osnovu specifičnih molekula antitela po perli. Standardna kriva je korišćena za dodelu ABC (Kapacitet vezivanja antitela ili broj receptora) obojenim ćelijskim uzorcima. ;[0415] ABBV-399 je citotoksičan za ćelije karcinoma koje prekomerno eksprimiraju cMet. Da bi se utvrdila korelacija nivoa cMet ekspresije sa osetljivošću na ABBV-399, in vitro analiza je proširena tako da uključuje ploču od 16 ćelijskih linija. Ovo je uključilou 6 linija NSCLC (A549, NCI-H1573, NCI-H820, NCI-H441 i NCI-H1650, 4 linije gastroezofagealnog karcinoma (Hs746T, SNU-5, SNU-620 i IM-95), 2 CRC linije (SW-48 i HT-29), 2 linije karcinoma dojke (MDA-MB-231 i MCF-7), KP4 liniju karcinoma pankreasa i U-87 MG liniju karcinoma glioblastoma. Dodatne ćelijske linije NSCLC (EBC-1 , NCI-H226, SW900, HCC15, SK-MES-1 i NCI-H1702) takođe su testirane i prikazane u Tabeli 7A. ;Tabela 7A ;; ;;; [0416] FACS analiza je pokazala je da ove ćelijske linije poseduju raspon nivoa cMet ekspresije kao što je kvantifikovan kroz kapacitet vezivanja cMet antitela predstavljajući broj molekula cMet na površini ćelije (TABELA 7B). Osetljivost na ABBV-399 u testu proliferacije ćelije je kvantifikovana kao maksimalno ubijanje i IC50(TABELA 7B). Ovi podaci sugerišu da postoji granični nivo cMet ekspresije potreban za značajno ubijanje od strane ABBV-399. Izuzetak od toga su bile ćelijske linije za koje se zna da imaju autokrinu HGF petlju, kao što je IM 95, KP4 i U-87 MG, u kojima su niži nivoi ekspresije cMet bili dovoljni da ABBV-399 pokaže značajnu citotoksičnost. ;TABELA B Ek r i M n m r kim li m in i r i l i n ABB - ;; ;;; Primer 7. ABT 700-PBD ADC inhibira proliferaciju tumorske ćelije na širokom panelu ćelijskih linija ;[0417] Tumorske ćelije su postavljene na 2000-5000 ćelija/ jažici u 180 µL medijuma za rast koji sadrži 10% FBS u pločicama sa 96 jažica i kultivisane na 37°C u vlažnom inkubatoru sa 5% CO2. Sledeći dan, su dodate titracije ADCa u 20 µL i ćelije su inkubirane tokom 6 dana. Održivost ćelija je određena korišćenjem testa održivosti luminiscentne ćelije tzv. "CellTiter-Glo (Promega)" prema uputstvima proizvođača. Nevezujući, irelevantni ADC negativne kontrole konjugovan sa MMAE takođe je bio uključen u sve testove da bi se potvrdilo da je ubijanje ćelije zavisno od antigena. ;[0418] Rezultati su prikazani na SL. 5. Oba ADCa cMet su bila aktivna protiv različitih panela vrsta tumora, sa različitim nivoima ekspresije cMet (visoka/niska) i pojačanja gena (amp). Kolona MMAE/PBD pokazuje koliko je više potrebno MMAE ADC da bi se postigla ista citotoksična aktivnost kao ona postignuta sa PBD ADC. U većini ćelijskih linija PBD ADC je znatno snažniji od MMAE konjugata. ;Primer 8. ABT 700-PBD ADC je aktivan in vitro protiv humanih ćelijskih linija kolorektalnog karcinoma ;[0419] Tumorske ćelije su postavljene na 2000-5000 ćelija/jažici u 180 µL medijuma za rast koji sadrži 10% FBS u pločicama sa 96 jažica i kultivisane na 37°C u vlažnom inkubatoru sa 5% CO2. Sledeći dan, dodate su titracije ADCa i slobodnog leka (PBD i MMAE) u 20 µL i ćelije su inkubirane tokom 6 dana. Održivost ćelija je određena korišćenjem testa održivosti luminiscentne ćelije tzv. "CellTiter-Glo (Promega)" prema uputstvima proizvođača. Nevezujući, irelevantni ADC negativne kontrole konjugovan sa MMAF (Ab095 MMAF) takođe je bio uključen u sve testove da bi se potvrdilo da je ubijanje ćelije zavisno od antigena. AD cetuksimab-MMAE je pozitivna kontrola. Izračunati su nivoi gustine receptora kako je opisano u Primeru 6. ;[0420] Rezultati su prikazani na SL. 6A i 6B. ABT700-PBD je aktivan protiv raznih ćelijskih linija kolorektalnog karcinoma, uključujući one sa niskim nivoima cMet receptora na površini ćelije (npr. SW48, SL. 6B). Ćelijska linija sa pojačanim genom cMet ima u proseku 200-300K receptora po ćeliji. Aktivnost ABBV-399 ADC takođe je prikazana za svrhe poređenja. Tamo gde nisu uneti rezultati, nije primećena nijedna aktivnost. Generalno, ABT700-PBD je aktivniji od ABBV-300 u ćelijskim linijama kolorektalnog karcinoma. ;;Primer 9. ABT 700-PBD ADC je aktivan in vitro protiv ćelijskih linija humanog karcinoma mozga ;;[0421] Tumorske ćelije su postavljene na 2000-5000 ćelija/jažici u 180 µL medijuma za rast koji sadrži 10% FBS u pločicama sa 96 jažica i kultivisane na 37°C u vlažnom inkubatoru sa 5% CO2. Sledeći dan, dodate su titracije ADCa i slobodnog leka (PBD i MMAE) u 20 µL i ćelije su inkubirane tokom 6 dana. Održivost ćelija je određena korišćenjem testa održivosti luminiscentne ćelije tzv. "CellTiter-Glo (Promega)" prema uputstvima proizvođača. Nevezujući, irelevantni ADC negativne kontrole konjugovan sa MMAF (Ab095 MMAF) takođe je bio uključen u sve testove da bi se potvrdilo da je ubijanje ćelije zavisno od antigena. Nivoi gustine receptora su izračunati kao što je opisano u Primeru 6. Ćelijska linija sa pojačanim genom cMet ima u proseku 200-300 K receptora po ćeliji. ;[0422] Rezultati su prikazani na SL. 7. ABT700-PBD je aktivan protiv raznih ćelijskih linija karcinoma mozga, uključujući one sa niskim nivoima cMet receptora na površini ćelije (npr. SW48, SL. 6B). Aktivnost ABBV-399 ADC je takođe prikazana za svrhe poređenja. Tamo gde nisu uneti rezultati, nije primećena nijedna aktivnost. Generalno, ABT700-PBD je aktivniji od ABBV-300 u ćelijskim linijama karcinoma mozga. ;;Primer 10. ABT 700-PBD ADC je aktivan in vitro protiv ksenografta humanog kolorektalnog tumora ;;[0423] In vivo efikasnost ABT-700, ABBV-399 i ABT-700 PBD je procenjena kod miševa presađenih SW-48 sa kolorektalnih ćelija (cMet IHC 1+). Eksperimenti su izvedeni u osnovi kao što je opisano u Primeru 13 ispod. ;[0424] ADCi ili antitela su primenjivana svakih sedam dana u prikazanim dozama (mg/kg). ABT-700 PBD je superiorniji od ABBV-399 u niskom cMet ekspresoru SW-48 ksenografta. Videti SL. 8. ;;Primer 11. ABBV-399 i ABT700-PBD ADCi su aktivni in vivo protiv humanih ksenograftova izvedenih od pacijenta sa NSCLC ;;[0425] Efikasnost ABBV-399 ABT700-PBD ADCa je utvrđena u ksenograftovima izvedenim od pacijenata sa nemaloćelijskim karcinomom pluća i kolorektalnim karcinomom. Fragmenti tumora od 3 do 5 mm<3>na prolazu 3 (P3) su implantirani supkutano u desni zadnji bok NSG miševa (The Jackson Laboratory) sa trokarom. ABBV-399 i ABT-700 PBD su primenjivani svakih sedam dana, ukupno šest doza. Brojevi u zagradama predstavljaju dozu primenjenu u mg/kg. Za sve su grupe zabeležene su količine tumora samo za vreme koje je omogućilo da čitav niz životinja ostane na ispitivanju. Ako su životinje morale biti uklonjene iz studije, kod preostalih životinja praćen je rast tumora dok nisu postigle definisane krajnje tačke. Rezultati kašnjenja rasta tumora (TGD) su prikazani u Tabeli 8. ;; ; ;;; [0426] Prikazani su grafikoni za tri različita ksenografta humanog tumora sa relativno niskim (CTG-0363), srednjim (CTG-0159) i visokim (CTG-0170) nivoima ekspresije cMet mRNK, surogat za nivoe cMet proteina na površini ćelije ( SLIKE 9A, 9B, i 9C redom). Odgovor tumora na svaki ADC zavisi od nivoa cMet. ABT700-PBD ADC je aktivniji od ABBV-399, sa oko 1/10 doze. ;;Primer 12. ABBV-399 su aktivni in vivo protiv humanih ksenograftova izvedenih od NSCLC pacijenta ;;[0427] Za modele ksenografta izvedene od pacijenata LG 0703 i LG1049 (The Jackson Laboratory, Sacramento, CA), efikasnost ABBV-399 je utvrđena u ksenograftovima izvedenim od pacijenata sa bezmaloćelijskim karcinomom pluća. Fragmenti tumora od 3 do 5 mm<3>na prolazu 3 (P3) su ugrađeni supkutano u desni zadnji bok NSG miševa (The Jackson Laboratory) sa trokarom. Za sve grupe, zabeležene su količine tumora samo za vreme koje je omogućilo da čitav niz životinja ostane na ispitivanju. Ako su životinje morale biti uklonjene iz studije, kod preostalih životinja je praćen rast tumora dok nisu dosegle definisane krajnje tačke. Efikasnost je prikazana na Kaplan-Meierovoj ploči za modele (A) LG0703 i (B) LG1049 kao frakcije koje dostižu naznačene količine tumora nakon terapije. U oba modela, ABBV-399 i kontrolni agensi su primenjivani svaka četiri dana u ukupnom iznosu od šest doza. U modelu LG1049, ABT-700 se primenjivao svakih sedam dana, u ukupnom iznosu od šest doza. Brojevi u zagradama predstavljaju dozu primenjenu u mg/kg. ;[0428] ABBV-399 ADC je aktivniji od samog ABT-700. Videti SL. 10. ;;Primer 13. ABBV399, sam i u kombinaciji, inhibira rast tumora kod tumora koji prekomerno eksprimiraju cMet na životinjskim modelima ;;[0429] ABBV-399 je pokazao snažne i ponovljive antitumorske efekte u različitim modelima ksenografta, uključujući karcinom želuca, NSCLC i multiformne modele glioblastoma. Aktivnost u tumorima je delom zasnovana na isporuci citotoksičnog tereta MMAE. Pored toga, ABBV-399 može takođe imati antitumorsko delovanje inhibicijom i HGF-zavisne i nezavisne cMet signalne i efektorske funkcije posredovane antitelima. ;[0430] Efikasnost ABBV-399 in vivo je procenjena kod miševa transplantiranih sa (SL.11A) Hs746T karcinoma želuca, (SL. 11B) NCI-H441 ćelijama karcinoma pluća i (SL.11C) SW-40 ćelijama kolorektalnog karcinoma. Ženski SCID, SCID-bež i goli miševi su dobijeni od Charles River (Wilmington, MA) i smešteni po deset miševa po kavezu. Telesna težina po dolasku je bila 20-22 g. Hrana i voda bili su dostupni ad libitum. Miševi su aklimatizovani u objektima za životinje najmanje jednu nedelju pre početka eksperimenata. Životinje su testirane u svetlosnoj fazi 12-satnog svetlosnog: 12-satnog mračnog rasporeda (svetla se pale u 06:00 sati). Svi eksperimenti su sprovedeni u skladu sa AbbVie’s Institutional Animal Care and Use Committee and the National Institutes of Health Guide for Care and Use of Laboratory Animals Guidelines in a facility accredited by the Association for the Assessment and Accreditation of Laboratory Animal Care. ;[0431] Da bi se generisali ksenografti, suspenzija živih tumorskih ćelija pomešana sa jednakom količinom Matrigela (BD Biosciences) je ubrizgana supkutano u bok miševa starih 6 do 8 nedelja. Zapremina injekcije je bila 0.2 mL, sastavljena od smeše S-MEM i Matrigela (BD Biosciences) u odnosu 1:1. Tumori su odgovarali veličini otprilike 200-250 mm<3>, ako nije drugačije naznačeno. Terapija je započela dan ili 24 sata nakon što se veličina podudara sa tumorima. Miševi su na početku terapije imali približno 25g. Svaka eksperimentalna grupa ukljičivala je 8-10 životinja. Tumori su mereni dva do tri puta nedeljno. Merenja dužine (L) i širine (W) tumora su dobijena elektronskim nonijusom, i zapremina je izračunata prema sledećoj jednačini: V = L x W2/2. Miševi su eutanazirani kada je zapremina tumora dostigla maksimum od 3.000 mm<3>ili nakon pojave kožnih ulceracija ili drugih morbiditeta, šta god se prvo desilo. Hs746T, ABT-700 je primenjen svakih sedam dana, dok je ABBV-399 primenjen svaka četiri dana. Ksenografti NCI-H441, i ABT-700 i ABBV-399 primenjivani su svaka četiri dana, ukupno šest doza. Brojevi u zagradama predstavljaju dozu primenjenu u mg/kg, a strelice pokazuju dane primene. U oba tipa karcinoma, ABBV-399 ADC je aktivniji od samog ABT-700, a efekat zavisi od doze (SL. 11A i 11B). ;[0432] (SL. 11C) Kombinacija efikasnosti ABBV-399 i FOLFIRI je određena korišćenjem ksenografta SW-48 humanog kolorektalnog karcinoma. 5-Fluorouracil (APP Pharmaceuticals, Schaumburg, IL), irinotekan (Hospira, Lake Forest, IL) su dobijeni kao rastvori i razblaženi sa 0.9% natrijum hloridom za injekcije (USP) i leukovorin kalcijum (Fluka Chemical Corp., Milwaukee, WI. ) je dobijen kao so i rekonstituisan sa fiziološkom rastvorom pre doziranja. Standardni agensi za negu 5- fluorouracil (50 mg/kg) i irinotekan (30 mg kg) su primenjeni intravenski, i leukovorin (25 mg/kg) oralno po režimu Q7Dx5 (FOLFIRI). Kontrola IgG, Ig MMAE i ABBV-399 su primenjeni intraperitonealno svakih sedam dana. Brojevi u zagradama predstavljaju dozu primenjenu u mg/kg, i strelice pokazuju dane primene. Kombinacija ABBV-399 FOLFIRI je efikasna u ksenograftovima kolorektalnog karcinoma SW-48. ;Primer 14. Efikasnost ABBV-399 protiv modela ksenografta humanog tumora–rezistentnog na ABT-700 ;[0433] Efikasnost ABBV-399 je procenjena kod miševa ksenotransplantiranih samo roditeljskim Hs746T (SL. 12B) ili prateći recidiv nakon tretmana sa ABT-700 (SLIKE 12A i 12B). SL. 12C procenjuje efikasnost ABBV = 399 prateći recidiv nakon tretmana ABT-700 kod miševa koji su ksenograftski transplantirani sa EBC-1 ksenograftskim tumorima. Brojevi u zagradama predstavljaju dozu primenjenu u mg/kg, a strelice označavaju dane primene. Zapremine tumora su prikazane kao srednje vrednosti 6 S.E.M. ;[0434] Efikasnost ABBV-399 je procenjena na modelu karcinoma želuca (Hs746T) i modelu karcinoma skvamoznih ćelija pluća (EBC-1) koji su rezistentni na ABT-700 ponovljenim izlaganjem antitelima in vivo (Hs746T ABT-700R i EBC i ABT-700 -1 ABT-700R). U početku, tretman ksenograftovima izvedenim iz roditeljskog Hs746T sa ABT-700 je rezultiralo zastojem tumora praćen recidivom (SL. 12A; plava linija). Lečenje ovih recidivnih tumora (crvena linija) sa ABBV-399 dovelo je do regresije (SL. 12A, crvena linija). Suprotno tome, ksenografti Hs746T ABT-700R su bili otporni na tretman ABT-700 sa brzim izrastanjem tumora u terapiji (SL. 12B; plava linija). Kada su ovi rezistentni tumori postigli prosečnu veličinu kohorte od otprilike 1,000 mm<3>, tretman ABBV-399 rezultirao je regresijom tumora (SL.12B; crvena linija) praćen eventualnim izrastanjem. Lečenje Hs746T ABT-700R od približno 300 mm<3>sa ABBV-399 je rezultirao potpunom regresijom tumora (SL.12B). Slični rezultati su primećeni nakon tretmana ABT-700 -rezistentne ćelijske linije EBC-1 sa ABT-700 praćenim ABBV-399. Ovi rezultati sugerišu da je efikasnost ABBV-399 nezavisna od odgovora na ABT-700, najmanje ćelijske linije sa pojačanim cMet. ;;Primer 15. Formulacija ABBV-399 za kliničku upotrebu ;;[0435] ABBV-399 Lek je dostupan u obliku sterilnog liofilizovanog praha za rekonstituciju. Svaka bočica sadrži 100 mg ABBV-399. Nakon rekonstitucije sa 5.0 mL sterilne vode za injekciju, konačna koncentracija ABBV-399 je 20 mg/mL. Pored ABBV-399, formulacija sadrži saharozu, polisorbat 80 i nalazi se u puferu za histidin. Pre primene, ABBV-399 je dalje razblažen u normalnom fiziološkom rastvoru do raspona koncentracije između 1-10 mg/mL, u zavisnosti od težine ispitanika. ;;Primer 16. Faza I otvorene studije, eskalacije doze i ekspanzije ABBV-399, konjugata antitelo lek (ADC) ciljajući cMet, kod pacijenata (pts) sa naprednim čvrstim tumorima ;;16.1. Rezime ;;[0436] Tekuća Faza 1/1b otvorene studije koja je u toku procenjuje bezbednost, farmakokinetiku (PK) i preliminarnu efikasnost ABBV-399 kod subjekata sa uznapredovalim čvrstim tumorima. Studija se sastoji od dve faze: (1) faze eskalacije/ekspanzije doze (monoterapija) i faze kombinovane terapije. Subjekti sa naprednim čvrstim tumorima sa prekomernom ekspresijom cMet, mutacijom MET eksona 14 ili pojačavanjem MET-a uključujući, ali ne ograničavajući se na NSCLC, ezofagealni/želudačni, CRC ili karcinom glave i vrata mogu biti uključeni u faze proširenja doze i kombinovane terapije studije. ;[0437] Faza monoterapije studije je procenila sigurnost i farmakokinetički profil ABBV-399 kada se daje intravenozno kod približno 24 do 42 subjekta prema šemi povećanja doze prikazanoj na SL. 13. ABBV-399 je primenjen u porastu doze, počevši od 0.15 mg/kg u 21-dnevnim ciklusima doziranja. Na osnovu podataka o bezbednosti i PK doziranja svaki 21 dan, ABBV-399 će se takođe primenjivati svakih 14 dana prema rasporedu od 28 dana. U svaku kohortu će biti upisano tri do 6 subjekta koji će se dozirati jednom u 21 (jedna doza u 21-dnevnom ciklusu) ili 14 (2 doze u 28-dnevnom ciklusu) dana do napredovanja bolesti ili neprihvatljive toksičnosti radi određivanja najveće dopuštene doze (MTD) ili maksimalno primenjene doze (MAD). Definicije ograničavanja doze (DLT) će biti korišćene za donošenje odluka o povećanju doze. Na osnovu dostupnih podataka o bezbednosti, PK i farmakodinamici (PDx), do 40 subjekata biće upisano u ekspanzijsku kohortu koja će dalje proceniti ABBV-399 na nivou doze koja je na ili ispod MTD ili MAD. Pri proširenju doze biće upisani subjekti sa naprednim čvrstim tumorima sa prekomernom ekspresijom cMet, mutacijom MET eksona 14 ili pojačanjem MET. ;[0438] U fazi kombinovane terapije, do 18 subjekata biće uneto u svaku ruku kombinovane terapije kao što je opisano u nastavku: ;;• Kombinacija kohorte A: Subjekti koji ispunjavaju uslove da prime ABBV-399 plus erlotinib ;;• Kombinacija kohorte B: Subjekti koji ispunjavaju uslove da prime ABBV-399 plus cetuksimab ;;• Kombinacija kohorte C: Subjekti koji ispunjavaju uslove da prime ABBV-399 plus bevacizumab ;;• Kombinacija kohorte D: Subjekti koji ispunjavaju uslove da prime ABBV-399 plus nivolumab ;;[0439] Svi subjekti će biti ocenjeni zbog bezbednosti i podnošljivosti režima, PK profila ABBV-399 i preliminarnih dokaza efikasnosti. U kombinovane terapije ruke mogu se uključiti subjekti sa naprednim čvrstim tumorima sa prekomernom ekspresijom cMet, mutacijom MET eksona 14 ili pojačanjem MET. Subjekti na kombinovanim rukama A, B ili C će biti raspoređeni na 14-dnevni ili 21-dnevni raspored doziranja ABBV-399, dok će subjekti iz kraka D primiti ABBV-399 po rasporedu od 14 dana da bi se podudarao sa nivolumabom svakih 14 dana doziranja. ;[0440] Za upis u ovu studiju potrebno je arhivsko tumorsko tkivo. Tkivo tumora će biti analizirano na cMet protein, MET broj kopije i druge biomarkere. Ekspresija cMet će se utvrditi imunohistohemijskim testom; amplifikacija MET će se odrediti fluorescentnom hibridizacijom in situ (FISH) ili DNK sekvenciranjem tumorske ili cirkulirajuće tumorske DNK. ;16.2. Izbor pacijenta: Dijagnoza i glavni kriterijum za inkluziju/ekskluziju ;[0441] Neki od kriterijuma za inkluziju za monoterapiju ABBV-399 inkluziju/ekskluziju doze: ;• Subjekt mora biti 18 godina starosti ;• Subjekt sa uznapredovalim čvrstim tumorom, uključujući, ali ne ograničavajući se, na nemaloćelijski karcinom pluća (NSCLC), kolorektalni karcinom, karcinom dojke, karcinom jajnika, gastro/ezofagealni i karcinom glave i vrata. ;• Subjekt mora imati uznapredovali čvrsti tumor koji nije podložan hirurškoj resekciji ili drugim odobrenimm terapijskim opcijama koje su pokazale kliničku korist. ;-Za proširenje doze: Subjekt mora imati tumor sa prekomernom ekspresijom cMet, mutacijom MET eksona 14 ili pojačanje MET. • Subjekt ima status izvedbe Istočne kooperativne onkološke grupe (ECOG) od 0 do 2. ;• Subjekt mora imati merljivu bolest prema RECIST verziji 1.1 ;[0442] Dodatni kriterijum za inkluziju subjekata upisanih u fazu kombinovane terapije ;• Subjekti sa kombinovanom terapijom koja se daje u ruke moraju udovoljavati iznad navedenom kriterijimu uključivanja i biti podobni da prime erlotinib, cetuksimab, bevacizumaba ili nivolumab prema najnovijim informacijama o propisivanju ili prema diskreciji istražitelja. ;Glavni kriterijum za ekskluziju -izuzeće: ;Za sve kohorte: ;;[0443] ;• Subjekt je primio terapiju protiv karcinoma, uključujući hemoterapiju, imunoterapiju, terapiju zračenjem, imunoterapiju biološku ili bilo koju istražnu terapiju u periodu od 21 dana, ili biljnu terapiju u roku od 7 dana pre prve doze ABBV-399. ;• Palijativna terapija zračenjem bolnih metastaza u kostima, koži ili potkožnom tkivu za 10 frakcija ili manje ne podleže periodu ispiranja. ;• Za odobrene ciljane male molekule odgovara period ispiranja od 5 poluvremena raspada (nije potreban period ispiranja za osobe koje su trenutno na erlotinibu). ;• Subjekt ima poznate nekontrolisane metastaze u centralnom nervnom sistemu (CNS). Subjekti sa metastazama u mozgu ispunjavaju uslove nakon definitivne terapije pod uslovom da su bez simptoma od steroida i antikonvulziva najmanje 2 nedelje pre prve doze ABBV-399. ;• Subjekt ima nerešene klinički značajne nuspojave ≥Stepan 2 iz prethodne antikancerogene terapije, osim alopecije ili anemije. • Subjekt je imao veliku operaciju u roku od 21 dana pre prve doze ABBV-399. ;Dodatni kriterijum za izuzeće-ekskluziju za ispitanike upisane u fazu kombinovane terapije ;[0444] ;• Subjekti upisani u fazu kombinovane terapije moraju da zadovolje iznad navedeni kriterijum za izuzeće, a takođe i sledeće: - Subjekti ne smeju primati ABBV-399 u kombinaciji sa erlotinibom, cetuksimabom, bevacizumabom ili nivolumabom ako imaju bilo kakvo zdravstveno stanje koje prema mišljenju istražitelja dovodi ispitanika u neprihvatljivo visok rizik za toksičnost kombinacije. • Subjekti možda neće primiti cetuksimab ako imaju K-ras mutaciju. ;• Subjekti možda neće primati bevacizumab ako imaju skvamozni NSCLC. ;[0445] Takođe je planirano da se u određenim studijama i za buduću kliničku upotrebu ovde otkrivenih ADCa anti-cMet pacijenti odaberu na osnovu nivoa njihove ekspresije cMet (pojačavanje-amplifikacija gena, membranski cMet) i mutacije MET eksona 14. Metode za procenu svakog od ovih markera su date u nastavku. ;16.3. Režim doziranja ;Faza-Eskalacije/Ekspanzije doze: ;[0446] ABBV-399 je primenjen u obliku intravenske infuzije jednom u 21 dan do napredovanja bolesti ili nepodnošljive toksičnosti. Doziranje je započelo sa 0.15 mg/kg i eskaliralo na 0.3, 0.6, 1.2, 1.8, 2.4, 3.0 i 3.3 mg/kg u narednim kohortima kako se tolerisalo. Mogu biti korišćene alternativne doze (srednje ili veće) ili rasporedi doziranja na osnovu kliničkih bezbednosti i podataka o PK. Doza od 2.7 mg/kg je takođe korišćena na osnovu kliničke bezbednosti i podataka o PK. Na osnovu podataka o bezbednosti i PK iz doziranja svakog 21 dana, ABBV-399 se takođe može primenjivati svakih 14 dana prema rasporedu od 28 dana (početna doza od 1.6 mg/kg). ABBV-399 je bio dat tokom 30 ± 10 minuta. Ne primenjuje se kao intravenski potisak ili bolus. Faza kombinovane terapije: ;[0447] ABBV-399 će biti kombinovan sa standardnim dozama erlotiniba, cetuksimaba, bevacizumaba ili nivolumaba, počevši od nivoa doze ABBV-399 ispod MTD ili MAD, a zatim eskaliran ne više od MTD ili MAD utvrđenih u eskalaciji/ekspanziji doze za monoterapiju. Definicije toksičnosti koje ograničavaju dozu će se primenjivati na deo povećanja doze svake kombinacije. ;; ; ;;; 16.4. Procene ;;[0448] Studijske posete i ocene obavljaće se tokom skrininga, a najmanje nedeljno tokom prvog ciklusa i 1. Dana svakog narednog ciklusa. Procene će obuhvatiti ograničeni fizički pregled, hematološke i hemijske testove pre celokupnog doziranja ispitivanog leka i prilikom poslednje posete. EKGi će se sakupljati tokom skrininga, ciklus 1 dan 1, ciklus 2 dan 1, i kod poslednje posete. Neželjeni događaji, laboratorijski podaci i vitalni znakovi će biti procenjivani tokom studije. ;[0449] Početne radiografske procene tumora sa CT (ili MRe) glave, grudnog koša, abdomena i karlice dobiće se najviše 28 dana pre 1. Ciklusa 1. Dana. CT-skeniranje (ili MRe) će zatim biti ponovljeni otprilike svakih 6 nedelja nakon početka terapije za procenu obima opterećenja tumorom. Radiografske procene tumora će se nastaviti do progresije bolesti dokumentovane snimanjem, početka nove terapije protiv karcinoma, smrti ili povlačenja pristanka. Procena odgovora biće zasnovana na RECIST verziji 1.1. Pored toga, istraživač će proceniti ispitanika na osnovu dokaza o progresiji kliničke bolesti pri svakoj poseti. ;;16.4.1. Procene biomarkera ;;[0450] Za upis u ovu studiju potrebno je arhivsko tumorsko tkivo (poželjan je najnoviji uzorak). Ako subjekt ima lokalne ili centralne laboratorijske podatke koji pokazuju prekomernu ekspresiju cMet, mutaciju MET eksona 14 ili pojačanje MET, a nije dostupno arhivsko tumorsko tkivo, pacijent može biti podoban za praćenje sa medicinskim monitorom posle ragovora. Opciona biopsija pre i posle lečenja (bilo kada nakon početka terapije) može se dobiti od osoba koje dobrovoljno pristanu ako je to bezbedno po proceni istražitelja. Treba slediti institucionalne postupke za fiksiranje i ugradnju sveže prikupljenog tkiva u parafin. Tumorsko tkivo biće analizirano na cMet protein, MET broj kopija i druge biomarkere. ;[0451] Ekspresija cMet će biti određena imunohistohemijskim testom (videti Primer 17); amplifikacija MET će biti određena fluorescentnom in situ hibridizacijom (FISH) ili DNK sekvenciranjem tumorske ili cirkulirajuće tumorske DNK (videti Primer 18). Bio uzorci će biti sakupljeni u određenim vremenskim tačkama tokom studije istraživanja sa namerom identifikovanja biomarkera povezanih sa ishodom predmeta ili radi bolje karakterizacije bolesti. ;;16.4.2 Kriterijum za ocenjivanje ;;[0452] ;; ;;; Efikasnost ;[0453] Sve analize efikasnosti su istraživačke prirode. Krajnje tačke istraživačke efikasnosti uključuju objektivnu stopu odgovora (ORR) (utvrđenu pomoću RECIST verzije 1.1) preživljenje bez progresije bolesti (PFS) i trajanje odgovora (DOR). ;Stopa objektivnog odgovora ;[0454] Stopa objektivnog odgovora (ORR) je definisana kao proporcija subjekta sa potvrđenim delimičnim ili potpunim odgovorom na lečenje. ORR za svaku kohortu tretmana će biti procenjena na svim mestima. Dvostrani intervali pouzdanosti od 80% ORR, kao i stope CR i PR, biće date na osnovu tzv. "Clopper-Pearson" (tačnog) metoda. ;Preživljavanje bez progresije ;[0455] Za svakog subjekta, vreme PFS je definisano kao vreme od prve doze ABBV-399 subjekta do progresije ili smrti subjekta, šta god se pre dogodi. U slučaju da se ne dogodi nijedan događaj, vreme PFS biće cenzurisano na datum poslednje procene bolesti. Svi će subjekti biti praćeni napredovanjem bolesti ili do 24 meseca za one koji nastavljaju da proučavaju lek. ;[0456] Kaplan-Meier-ove procene rezimiraće PFS vreme za kohorte lečenja. Izračunaće se srednje i srednje vreme sa dvostranim intervalima pouzdanosti od 80% da bi se opisala raspodela vremena do događaja. ;Trajanje odgovora ;[0457] Trajanje odgovora (DOR) za subjekta je definisano kao vreme od početnog objektivnog odgovora subjekta na proučavanje terapije lekovima do progresije bolesti ili smrti, šta god se pre desi. Ako datumi progresije bolesti ili smrti nisu dostupni, DOR će biti cenzurisan na datum poslednje procene tumora. DOR će biti analiziran u na isti način kao i za PFS. ;Procene tumora ;[0458] Osnovna radiografska procena tumora mora biti izvedena u roku od 28 dana pre 1. ciklusa, i sastojaće se od CT (ili MRe ili CT bez kontrasta kod subjekata koji ne podnose kontrast) glave, grudi, abdomena, i karlice ( i drugog karcinoma uključenih regiona kao što je klinički naznačeno). Generalno, snimanje tokom terapije sa ABBV-399 dogodiće se otprilike svakih 6 nedelja (snimanje se može dogoditi do 7 dana pre sledeće doze leka). Za kombinaciju ABBV-399 sa nivolumabom, prvo planirano snimanje na terapiji dogodiće se otprilike 9 nedelja sa naknadnim snimanjem otprilike svakih 6 nedelja. Snimanje se mora obaviti pre primenjivanja sledeće planirane doze ABBV-399. Subjekti, koji prekinu ispitivani lek iz bilo kojeg razloga koji nije progresivna bolest demonstrirana slikanjem, će biti praćeni se sve dok im progresivna bolest ne bude dokumentovana snimanjem ili započnu novu terapiju protiv karcinoma, smrti ili povuku pristanak. Snimanje će se takođe izvršiti tokom poslednje posete za osobe koje nisu imale dokumentovanu radiografsku progresiju prema kriterijumu RECIST 1.1 ako je to klinički opravdano. Snimanje se može izvoditi i u drugo vreme ako istražitelj sumnja na progresiju tumora. Snimanje mozga za metastatsku bolest će se ponoviti samo ako je klinički indikovano. Istu tehniku snimanja treba koristiti tokom celog ispitivanja, ako je moguće. Procena tumora sprovedena na skriningu će poslužiti kao osnova za kliničku procenu. Promene u merljivim lezijama tokom terapije proceniće se pomoću RECIST verzije 1.1, kao što je opisano u nastavku. ;RECIST (Verzija 1.1) Kriterijum za odgovor tumora ;[0459] Kriterijum odgovora biće procenjen korišćenjem RECIST (verzija 1.1). Promene u merljivim lezijama tokom terapije moraju biti procenjene korišćenjem ispod navedenih kriterijuma. ;a. Podobnost ;[0460] Subjekti sa merljivom bolešću na početnom nivou mogu imati objektivni odgovor na tumor procenjen prema kriterijumu RECIST. Merljiva bolest je definisana prisustvom najmanje jedne merljive lezije. Ako je merljva bolest ograničena na usamljenu leziju, njenu neoplastičnu prirodu treba potvrditi citologijom/histologijom, ako je moguće. ;b. Merljivost ; ;;; [0462] Sva merenja treba izvršiti i zabeležiti u metričkim zapisima, koristeći nonijus ako su klinički procenjena. Sve osnovne procene treba izvršiti što bliže početku lečenja i ne više od 4 nedelje pre početka lečenja. ;[0463] Isti metod procene i ista tehnika trebaju biti korišćene za karakterizaciju svake identifikovane i prijavljene lezije na početnom nivou i tokom praćenja. ;[0464] Kliničke lezije će se smatrati merljivima samo ako su površinske (npr. čvorovi na koži i opipljivi limfni čvorovi) i prečnika ≥10 mm kao što je procenjeno korišćenjem nonijusa. U slučaju lezija kože preporučuje se dokumentacija fotografijom u boji, uključujući lenjir za procenu veličine lezije. ;;c. Metode merenja ;;[0465] Konvencionalni CT treba izvoditi sa rezovima od 5 mm ili manje u debljini susednog režnja. Ovo se odnosi na tumore grudnog koša i abdomena. U sva radiografska merenja treba uvesti vagu. ;[0466] Citologija i histologija u retkim slučajevima mogu biti korišćene za razlikovanje delimičnog odgovora (PR) i potpunog odgovora (CR). ;;d. Dokumentacija početnog stanja o "ciljanim" i "neciljanim" lezijama ;;[0467] Sve merljive lezije do najviše 2 lezije po organu i ukupno 5 lezija, koje predstavljaju sve uključene organe, treba da budu identifikovane kao ciljane lezije i zabeležene i izmereneu početnom stanju. Tumorske lezije smeštene u prethodno ozračenom području ili u području koje je podvrgnuto drugoj loko-regionalnoj terapiji, obično se ne smatraju merljivim, osim ako nije dokazano napredovanje lezije. ;[0468] Limfni čvorovi zaslužuju posebno spominjanje jer su to normalne anatomske strukture koje mogu biti vidljive slikanjem, čak i ako nisu zahvaćene tumorom. Patološki čvorovi koji su definisani kao merljivi i mogu se identifikovati kao ciljane lezije moraju CT pretragom zadovoljiti kriterijum kratke ose ≥15 mm. Samo kratka osa ovih čvorova doprineće osnovnom zbiru. Kratka osa čvora je prečnik koji obično koriste radiolozi za procenu da li je li čvor zahvaćen čvrstim tumorom. Veličina čvora se obično prikazuje kao dve dimenzije u ravni u kojoj se dobija slika (za CT skeniranje ovo je gotovo uvek aksijalna ravan). Manja od ovih mera je kratka osa. Na primer, abdominalni čvor koji je prijavljen kao 20 mm x 30 mm ima kratku osu od 20 mm i kvalifikuje se kao maligni, merljivi čvor. Sve ostale patološke čvorove (one sa kratkom osom ≥10 mm, ali <15 mm) treba smatrati neciljanim lezijama. Čvorovi koji imaju kratku osu <10 mm smatraju se nepatološkim i ne smeju se snimati ili pratiti. ;[0469] Zbir prečnika za sve ciljane lezije će se izračunati i prijaviti kao osnovni zbir prečnika. Ako će limfni čvorovi biti uključeni u zbir, tada je, kao što je gore navedeno, u zbir dodata samo kratka osa. Osnovni zbir prečnika će se koristit kao referenca za karakterizaciju objektivnog odgovora tumora. ;[0470] Sve ostale lezije (ili mesta bolesti), uključujući patološke limfne čvorove, treba identifkovati kao neciljane lezije i takođe ih treba snimiti u početnom stanju. Merenja ovih lezija nisu potrebna, ali prisustvo (stabilno, povećavajuće ili opadajuće) ili odsustvo svake od njih treba zabeležiti tokom praćenja. ;e. Procena ciljnih lezija ;Potpuni odgovor (CR): ;[0471] Nestanak svih ciljnih lezija. Svi patološki limfni čvorovi (bilo ciljani ili neciljani) moraju imati smanjenje kratke ose na <10 mm. ;Delimični odgovor (PR): ;[0472] Najmanje 30% smanjenja zbira prečnika ciljanih lezija, uzimajući za referencu osnovni zbir prečnika. ;Progresivna bolest (PD): ;[0473] Najmanje 20% povećanja zbira prečnika ciljanih lezija, uzimajući kao referencu najmanji zbir prečnika snimanih od početka lečenja (početna vrednost ili posle nje) ili pojave jedne ili više novih lezija. Pored relativnog porasta od 20%, zbrir mora takođe pokazati apsolutni porast od najmanje 5 mm. ;Stabilna bolest (SD): ;[0474] Niti dovoljno skupljanje-smanjenje da bi se kvalifkovalo za PR, niti dovoljno povećanje da bi se kvalifikovalo za PD, uzimajući kao referencu najmanji zbir prečnika od početka lečenja (početna vrednost ili posle nje). ;Procena ciljanih lezija: ;[0475] Limfni čvorovi koji su identifikovani kao ciljane lezije uvek bi trebalo da imaju snimljeno-zabeleženo aktuelno merenje kratke ose (izmereno u istoj anatomskoj ravni kao i osnovni pregled), čak i ako se čvorovi regresiraju na ispod 10 mm tokom studije. Ovo znači da kada su limfni čvorovi uključeni kao ciljane lezije, 'zbir' lezija možda neće biti nula, čak i ako su zadovoljeni kompletni kriterijumi odgovora, jer je normalni limfni čvor definisan ako ima kratku osu <10 mm. Za PR, SD i PD, aktuelno merenje čvorova na kratkoj osi mora biti uključeno u zbir ciljanih lezija. ;[0476] Sve lezije (nodalne i nenodalne) zabeležene-snimljene u počenom stanju trebale bi zabeležiti aktuelna merenja pri svakoj sledećoj proceni, čak i kada su vrlo mala (<5 mm). Međutim, ponekad ciljane lezije ili limfni čvorovi postaju premali za merenje. Ako se veruje da je lezija prisutna, ali premala za merenje, treba dodeliti podrazumevanu vrednost od 5 mm (što je izvedeno iz debljine CT režnja od 5 mm). Merenje ovih lezija potencijalno se ne može ponoviti; zbog toga će pružanje ove podrazumevane vrednosti sprečiti lažne odgovore ili napredovanje zasnovano na grešci merenja. ;f. Procena ne-ciljanih lezija ;Potpuni odgovor (CR): ;[0477] Nestanak svih ne-ciljanih lezija i normalizacija nivoa tumorskih markera. Svi limfni čvorovi moraju biti nepatološke veličine (kratka osa <10 mm). Ne-CR/Non-PD: ;Ne-CR/Ne-PD ;[0478] Perzistentnost jedne ili više neciljane lezije (a) i/ili održavanje nivoa tumorskih markera iznad normalnih granica. ;Progresivna bolest (PD): ;[0479] Nedvosmisleno napredovanje postojećih ne-ciljanih lezija. ;[0480] U ovom okruženju, da bi se postigao 'nedvosmislen napredak' na osnovu ne-ciljane bolesti, mora postojati sveukupni nivo značajnog pogoršanja kod neciljane bolesti takav da se, čak i u prisustvu SD ili PR kod ciljane bolesti, ukupno opterećenje tumora povećalo dovoljno da zaslužuje prekid terapije. Skromno 'povećanje' veličine jedne ili više neciljanih lezija obično nije dovoljno za kvalifikaciju za status nedvosmislene progresije. Označavanje ukupne progresije samo na osnovu promene neciljane bolesti u odnosu na SD ili PR ciljane bolesti biće zbog toga izuzetno retko. ;[0481] Napomena: Ako subjekt prekine lečenje zbog simptomatskog pogoršanja, treba učiniti sve napore da se dokumentuje objektivno napredovanje čak i nakon prekida lečenja. ;;Nove lezije ;;[0482] Pojava novih malignih lezija označava napredovanje bolesti. Iako ne postoji poseban kriterijum za identifikaciju novih radiografskih lezija, nalazi nove lezije treba da budu nedvosmisleni, tj. ne mogu se pripisati razlikama u tehnici skeniranja, vremenu skeniranja, fazi primene kontrasta, promeni modaliteta snimanja ili pronalaženju misli da predstavljaju nešto drugo osim tumora (npr. neke "nove" lezije kostiju mogu biti jednostavno zarastanje ili bljesak već postojećih lezija). Lezija identifikovana u naknadnoj studiji na anatomskom mestu koje nije skenirano na početnom nivou smatra se novom lezijom i ukazaće na napredovanje bolesti. Primer za ovo je pacijent koji ima početnu visceralnu bolest na početnom nivou, i dok je u studiji ima naručen CT ili MRI mozga koji otkriva metastaze. Metastaze u mozgu subjekta se smatraju dokazima progresivne bolesti čak i ako on/ona nije imao snimanje mozga na početnom nivou. ;[0483] Ako je nova lezija dvosmislena (tj. premala za merenje), nastavak terapije i naknadna evaluacija razjasniće da li zaista predstavlja novu bolest. Ako ponovljena skeniranja potvrde da postoji nova lezija, progresiju treba prijaviti prema datumu početnog pregleda. ;;16.5. REZULTATI ;;16.5.1. ABBV-399 Faza eskalacije/ekspanzije doze za monoterapiju (faza 1): ;;[0484] U dizajnu eskalacije doze 3+3, ABBV-399 je primenjen u dozama u rasponu od 0.15 do 3.3 mg/kg jednom svakog 21 dana do pts sa metastatskim čvrstim tumorima (NCT02099058). Kao što je prikazano na SL. 13, ABBV-399 je primenjen u obliku intravenske infuzije jednom svakog 21 dana do progresuje bolesti ili nepodnošljive toksičnosti. Doziranje je započelo sa 0.15 mg/kg i eskaliralo na 0.3, 0.6, 1.2, 1.8, 2.4, 3.0 i 3.3 mg/kg u narednim grupama kako se tolerisalo. Takođe je procenjena doza od 2.7 mg/kg ABBV-399 koja se daje svakog 21 dana, a na osnovu bezbednosti i PK je izabrana kao doza za ekspanzijsku kohortu. Na osnovu podataka o bezbednosti i PK doziranja svakog 21 dana, ABBV-399 će se takođe primenjivati svakih 14 dana prema 28-dnevnom rasporedu (početna doza od 1.6 mg/kg do 2.5 mg/kg u postupnom povećanju od 0.3 mg/kg, tj. 1.6, 1.9, 2.2 i 2.5 mg/kg). Za primenu 14 ili 21 dana, ABBV-399 će se davati tokom 30 ± 10 minuta. Ne primenjuje se kao intravenski potisak ili bolus. ;[0485] Zaključno sa 31. martom 2016. godine, 48 pts je primilo najmanje 1 dozu ABBV-399. Proporcionalno dozi povećanja površine ispod krive za ABBV-399 i ukupna antitela su primećena nakon primene pojedinačne doze. Poluvreme raspada ABBV-399 i ukupnih antitela je bilo je približno 2-4 dana. Toksičnost febrilne neutropenije koja ograničava dozu dogodila se u 1 pt pri 3 mg/kg i 1 pt (uz septički šok) pri 3.3 mg/kg. Najbolja procentna promena ciljanih lezija kod pacijenata sa najmanje 1 procenom tumora početnog nivoa je prikazana na Sl. 14. Kao što je prikazano na Sl. 14 (i iz podataka koji nisu prikazani na slikama), najbolji odgovori na monoterapiju ABBV-399 kod svih lečenih pacijenata su bili: 3/40 (7.5%) delimičnog odgovora, 20/40 (50%) pacijenata sa stabilnom bolešću i 17/40 (42.5%) pacijenata sa progresivnom bolešću. Podaci RECIST nisu bili dostupni za osam pacijenata zbog kliničke progresije (4), nuspojava (2), povlačenja pristanka (1) i smrti zbog upale pluća (1). Tri pacijenta sa delimičnim odgovorom imala su nemaloćelijski karcinom pluća (NSCLC) prekomerno eksprimirajući cMet. ;[0486] Za proširenje doze izabrana je doza od 2.7 mg/kg, prvenstveno na osnovu bezbednosti i podnošljivosti. Kako bi se uključili u ovu fazu studije, subjekti sa NSCLC su pregledani na prekomernu ekspresiju cMet korišćenjem IHC testa korišćenjem CONFIRM anti-total cMet (SP44) kompleta za monoklonalna primarna antitela zeca kupljenog od Ventane (REF # 790-4430). Uzorci tkiva su bodovani određivanjem procenta bojenja ćelija ciljnog tkiva na različitim nivoima intenziteta od niskog do visokog, tj. IHC ocenom 0, 1+, 2+ ili 3+ ili H-rezultatom od 0 do 149, 150-224 ili 225-300. Bodovanje se može izvršiti bilo ručno ili pomoću kompjutera. Detalji IHC testa i bodovanja su opisani u Primeru 17. Sledeća tabela prikazuje broj potencijalno pregledanih pacijenata sa NSCLC i H-rezultat koji se koristi za procenu prekomerne ekspresije cMet: ;; ;;; [0487] Nije bilo smrtnih slučajeva povezanih sa lečenjem. Nuspojave povezane sa lečenjem koje su se javile u ≥10% pacijenata (uključujući sve nivoe doza i sve stepene) bili su umor (22.9%), mučnina (20.8%), neuropatija (14.6%), smanjeni apetit (12.5%), povraćanje (12.5 %) i hipoalbuminemija (10.4%). Među 16 pacijenata sa cMet NSCLC lečenih ABBV-399, rezultati iz 11 su prikazani na SL. 15. Sl. 15 prikazuje tzv."grafikon vodopada" koji prikazuje najbolji procenat promene ciljane lezije kao odgovor na monoterapiju ABBV-399 zasnovanu na radiografskim podacima. Kao što je prikazano na Sl. 15 (i iz podataka koji nisu prikazani na slici) 3/16 lečenih pacijenata sa delimičnim odgovorima (19%), 6/16 lečenih pacijenata sa stabilnom bolešću (37.5%), 2/16 lečenih pacijenata sa radiografski progresivnom bolešću (125% ) i 5 pacijenata koji nisu imali dostupne slike zbog kliničke progresije (3), povlačenja pristanka (1) i smrti zbog upale pluća (1). ;[0488] Sl. 16 pokazuje broj nedelja u kojima je 16 pacijenata bilo na ispitivanju pre kliničke progresije. ;;16.5.2. Faza kombinovane terapije (faza 1b): ;;[0489] Rezultati ispitivanja kombinovane terapije NSCLC korišćenjem ABBV-399 u dozi od 2.7 mg/kg jednom u 21 dan i erlotiniba od 150 mg oralno svaki dan su prikazani na SL.17 i 18. SL.17 je tzv."grafikon vodopada" koji prikazuje najbolji procenat promene ciljanih lezija za 6 pacijenata lečenih ABBV-399 i erlotinibom. Kao što je prikazano na Sl. 17. 2/6 pacijenata je postiglo delimični odgovor, 1/6 sa progresivnom bolešću što dokazuju nove lezije. Sl. 18 prikazuje broj nedelja 6 pacijenata koji su bilu u studiji pre kliničke progresije. ;;16.5.3. Izbor pre lečenja za pacijente koji nose cMet tumore sa IHC2+/3+ ocenama ili H-rezultatima ≥150 mogu znatno poboljšati ishod lečenja ;;[0490] Predklinički rezultati sa ćelijskim linijama i modelima ksenografta sugerišu da će oni sa ocenom cMet IHC2+/IHC3+ biti odzivniji od onih sa IHC 0/1+. Korišćenje popratne dijagnostike kao pomoć u selekciji pre-lečenja pacijenata sa karcinomom cMet IHC2/3 ili H-rezultata ≥150 značajno bi poboljšalo celokupni ishod lečenja i poštedelo pacijente od lečenja za koje se predviđa da neće biti efikasno. Kako što se ovde koristi, termin cMet+ obuhvata sve tumore koji eksprimiraju cMet, bez obzira je li cMet prekomerno ekspresiran ili ne. U nekim izvođenjima cMet+, cMet je prekomerno eksprimiran. U nekim izvođenjima cMet+, cMet nije prekomerno eksprimiran. ;[0491] Slično tome, rezultati ovog tekućeg kliničkog ispitivanja Faze 1 sugerišu da su H-rezultati od 150 i više povezani i mogu predvideti odgovor na lečenje ADC anti-cMet, uključujući ABBV-399. ;[0492] Bez ograničenja bilo koje teorije, preliminarni rezultati sugerišu da heterogenost tumora može biti ograničavajući faktor u efikasnosti ABBV-399. Među onim cMet+ tumorima sa rezultatima IHC2+ i IHC3+, postoje ćelije karcinoma koje ne pokazuju ni jednu do nisku ekspresiju cMet. Od njih bi barem neke od ćelija koje nisu ubijene "efektom slučajnih posmatrača" mogle ponovo naseliti tumor i sprečiti tumorski odgovor. ABBV-399 bi mogao biti kombinovan sa standardnim tretmanima nege koji inhibiraju ili ubijaju tumorske ćelije sa niskim cMetom, ne ograničavajući se na ciljane agense kao što su erlotinib i imunoterapije kao nivolumab, ali i standardnu hemoterapiju u nezi, poželjno sa toksičnošću koja se ne preklapa. ;[0493] Tabela 9 pruža kliničke rezultate tekućeg ispitivanja faze 1 koja korelira ukupni odgovor sa H rezultatom kod pacijenata sa NSCLC lečenih ABBV-399 kao monoterapijom jednom u dve (Q2W) ili tri (Q3W) nedelje ili sa ABBV-399 u kombinaciji sa erlotinibom. IHC rezultat je dobijen pomoću protokola opisanog u Primeru 17. ;;;TABELA 9 ;; ;;; [0494] Kao što je prikazano u Tabeli 9, četvero pacijenata sa adenokarcinomima NSCLC lečenih sa 2.7 mg/kg ABBV-399 jednom svake 3 neelje (Q3W) i erlotinibom imajući IHC rezultate od 225 ili veće postigli su delimični odgovor (PR). Dva pacijenta sa NSCLC adenokarcinomima lečena jednom svake dve nedelje sa ABBV-399 imajući IHC rezultate 225 ili veće postigli su delimični odgovor ili potpuni odgovor. Tri pacijenta sa karcinomima skvamoznih ćelija NSCLC lečeni sa 27 mg/kg ABBV-399 jednom svake 3 nedelje imajući IHC rezultate između 150 i 224 postigla su delimični odgovor. ;;Primer 17. cMet imunohistohemijski test i H-rezultat: "protokol bojenja cMet ABBV-ADC" ;;[0495] U struci su dostupne različite metode za procenu nivoa ekspresije cMet proteina imunohistohemijom (IHC). Prosečan stručnjak u tehnici mogao bi rutinski znati kako da ih koristiti i prilagodi njihovom određenom istraživanju. Nekoliko dobavljača nudi cMet bojenje kao naknadu za uslugu (videti npr.Flagship Biosciences L.L.C., ARUP Laboratories, PathGroup Inc.). U ovoj Fazi I studije, nivoi ekspresije cMet su procenjeni korišćenjem SP44 anti-cMet mAb kompanije Ventana Medical Systems, tačnije Ventaninog CONFIRM® anti-total cMet zečjeg monoklonalnog antitela (Ventana Medical Systems, Inc; cat no. 790-4430), u kombinaciji sa automatizovanim klizačem Ventana® (BenchMark ULTRA®) i Ventana ultraWiew® Univerzalni komplet za otkrivanje DAB (kat. Br. 760-500). Bojenje i rezultate je obrađivao Flagship Biosciences L.L.C. u saradnji sa laboratorijima ARUP. Pozitivna kontrolna tkiva uključuje adenokarcinome debelog creva i adenokarcinom pluća. Negativna kontrolna tkiva uključuje kontrolu ER100 dojke l, kontrolu ER13781 dojke i kontrolu Hodžkinovog limfoma CD15-5. Za potrebe ove prijave, uključujući patentne zahteve, određeni test korišćen u ovoj studiji Faze 1 ovde se odnosi na "protokol bojenja cMet ABBV-ADC". ;[0496] Biopsije tumora pacijenta su fiksirane u formalinu u PBS-u i ugrađene u parafin. Staklene pločice su izrezane na 4 mikrona, ostavljene da se osuše i zatim pečene 60 minuta na 60°C. Staklene pločice su korišćene u roku od 2 nedelje od sečenja. Staklene pločice su prebačene na BenchMark ULTRA® instrument i izabrani su sledeći parametri: ;Postupak: ultraView® DAB ;Naziv: cMet CONFIRM® ;Parafin [izabran] ;Deparafinizacija [izabrana] ;Ćelijsko kondicioniranje [izabrano] ;Kondicioner #1 [izabran] ;[kratko- 8 min kondicioniranje] ;Blagi CC1 [izabran] ;[grubo- 95 min kondicioniranje] ;Ab Inkubacione temperature [izabrane] ;36°C Ab [izabran] ;Antitelo [izabrano] ;PREP KOMPLET # [4430] * 0 H 16 min
Kontrastna boja [izabrana]
HEMATOKSILIN [2021] 4 minuta
Kasnija kontrasna boja [izabrana]
REAGENS ZA PLAVLJENJE [2037] 4 minuta
[0497] Kad je bojenje završeno, staklene pločice su uklonjene sa instrumenta i isprane vodom iz slavine. Staklene pločice su dehidrirane kao što sledi:
Staklene pločice uroniti u 70% -tni etanol, 2 promene, svaka 1-2 minute.
Staklene pločice uroniti u 95% etanol, 1-2 minute.
Staklene pločice uroniti u 99% (ili apsolutni) etanol, 3-5 minuta.
Prečišćeno sa ksilenom, 3 promene, po 3-5 minuta.
[0498]Posle dehidratacije, staklene pločice su presvučene nevodenim sredstvom za pričvršćivanje pomoću staklenih pokrivača.
[0499] Sledeći reagensi su korišćen u ovom automatizovanom sistemu:
Ventana® cMet CONFIRM® kat. br.790-4430 (inkubacija približno 16 minuta na 36°C)
[0500] Jedan dozator CONFIRM® anti-Total cMet od 5 ml sadrži približno 48.75 µg rekombinantnog zečjeg monoklonalnog antitela SP44 (takođe dostupan od drugih komercijalnih dobavljača). Antitelo je razblaženo u 0.05 M Tris-HCl sa 1% nosačem proteina i 0.10% ProClin 300® (konzervansa). Ukupna koncentracija proteinskog reagensa je približno 10 mg/ml. Specifična koncentracija antitela je približno 9.75 µg/ml. U ovom proizvodu nije uočena poznata nespecifična reaktivnost antitela.
Ventana Ultra CC1 pufer kat. br.950-224
[0501] Ćelijsko kondicioniranje u rastvoru Ultra CC1 je izvršeno na 64°C tokom 95 minuta.
Ventana ultraView® Univerzalni komplet za otkrivanje kat. br.760-500
Ventana Hematoksilin II kat. br.760-2021
Ventana reagens za plavljenje kat. Br.760-2037
Određivanje rezultata H- i IHC
[0502] Obrađene staklene pločice je analizirao MD patolog sa medicinskim sartifikatom. Korišćen je vodič za bodovanje, koje je obezbedio proizvođač (videti, npr. SL. 19). Za utvrđivanje rezultata korišćeno je 10-12 reprezentativnih područja svake staklene pločice. Procenjujući cMet bojenje, utvrđeno je da bi H-rezultat bio najbolji pristup za kvantifikaciju
cMet izraza. Pristup H-rezulteta pruža optimalnu rezoluciju podataka za određivanje varijacije u intenzitetu i procentu bojenja unutar tumora i među vrstama tumora. Takođe pruža dobar alat za određivanje pragova za pozitivno bojenje. U ovoj metodi, obezbeđen je procenat ćelija (0-100) unutar tumora sa intenzitetom bojenja u rasponu od 0-3 . Ovaj protokol rezultira bojenjem cMet proteina kako u citoplazmi tako i na ćelijskoj površini/membrani. Određuje se intenzitet bojenja za svaku ćeliju u fiksnom polju obrađene tumorske biopsije, i svakoj se ćeliji pripisuje pojedinačna vrednost na sledeći način, u zaovisnosti od bojanja površine/membrane ćelije.
0 = bez bojenja
1+ = slabo bojenje
2+ = umereno bojenje
3+ = jako bojenje
[0503] Da bi se dobio H-rezultat, procenat tumorskih ćelija se množi se sa svakim intenzitetom i sabira. Maksimalni H-rezultat je 300 ako 100% tumorskih ćelija označi intenzitet 3+. H-rezultat se izračunava se na sledeći način:
H-rezultat=[1x (% ćelija 1+) 2 x (% ćelija 2+) 3 x (% ćelija 3+)]
[0504] Ovaj protokol rezultira i citoplazmatskim i membranskim cMet bojenjem. Za ovde izračunate H-rezultate korišćeno je membransko bojenje. Konačni tumorski H-rezultat (0-300) daje veću relativnu težinu bojenju membrane većeg intenziteta (3+ ćelija> 2+ ćelija> 1+ćelija).
[0505] SL. 20 prikazuje primere rezultata bojenja za različite H-rezultate tumora (15, 90, 180 i 290) dobijene "protokolom bojenja cMet ABBV-ADC".
[0506] Svaki tumor takođe može dobiti IHC ocenu IHC 0, IHC 1+, IHC 2+ ili IHC 3+. Iako obe IHC ocene uključuju vrednosti 0,1+, 2+ i 3+, ne smeju se mešati. Za H-ocene vrednosti 0, 1+, 2+ i 3+ se odnose na intenzitet bojenja određene pojedine ćelije. Za IHC rezultat, vrednosti 0,1+, 2+ i 3+ se odnose se na celokupno bojanje određenog područja uzorka tumora. Sl.21 prikazuje primere rezultata bojenja za različite rezultate tumora IHC0/1+/2+/3+ "protokolom bojenja cMet ABBV-ADC".
[0507] Za potrebe ovog otkrića, i sledeći ovde opisani protokol, ako nijedna od ćelija u fiksnom polju nije obojena, vrednost koja se pripisuje tumoru je IHC 0. Ako je ukupni nivo bojanja u fiksnom polju nizak, pripisana vrednost je IHC 1+. Ako većina ćelija u fiksnom polju pokazuje umereno bojenje, pripisana vrednost je IHC 2+. Ako većina ćelija u fiksnom polju pokazuje jako bojenje, pripisana vrednost je IHC 3+.
[0508] Za potrebe ovog otkrića i sledeći ovde opisani protokol, ako nijedna ćelija u fiksnom polju nije obojena, vrednost koja se pripisuje tumoru je IHC 0. Ako je ukupan nivo bojanja u fiksnom polju nizak, pripisana vrednost je IHC 1+. Ako najmanje 15% ćelija u fiksnom polju pokazuje umereno bojenje, pripisana vrednost je IHC 2+. Ako najmanje 15% ćelija u fiksnom polju pokazuje jako bojenje, pripisana vrednost je IHC 3+.
Primer 18. Merenje pojačanja broja kopija MET gena
[0509] Pojačanje MET gena može poboljšati odgovor pacijenta na inhibitore cMet, uključujući ovde opisane tretmane. U struci su opisane različite metode za merenje pojačanja MET gena. Videti, npr., Cappuzzo F, Marchetti A, Skokan M, Rossi E, Gajapathy S, Felicioni L, i saradnici. Povećani broj kopija MET gena negativno utiče na preživljavanje pacijenata sa maloćelijskim karcinomom pluća. J Clin Oncol 2009;27:1667-74; Koeppen H, Yu W, Zha J, Pandita A, Penuel E, Rangell L, et al. Analize biomarkera iz placebo kontrolisane studije II faze koja je procenjivala erlotinib {+/-} onartuzumab u uznapredovalom bezmaloćelijskom karcinomu pluća: nivoe ekspresije MET predviđaju korist za pacijenta. Clin Cancer Res 2014; 20: 4488-98.
[0510] Poželjna metoda je opisana na sledeći način i odnosi se na "MET/CEP7 metod pojačanja cMET". Ukratko, u formalin fiksiranii blokovi tkiva, ugrađeni u parafin, mogu se podvrgnuti dvobojnim FISH testovima koristeći koktel MET/CEP7 sonde pripremljen sa MET DNK (RP 11-95120 BAC klon) sonde ili korišćenjem sonde 319 kb konstruisane iz 3 klona bakterijskog veštačkog hromozoma (BAC) klona koji obuhvataju ceo gen MET na 7q31.1, označen sa crvenim spektrom i zelenim spektrom CEP7 (Abbott Molecular). FISH testovi mogu biti izvedeni, na primer, prema prethodno opisanom protokolu (Cappuzzo F, Hirsch FR, Rossi E, et al. (2005). Gen receptora za epidermalni faktor rasta i osetljivost na protein i gefitinib u nemaloćelijskom karcinomu pluća. J Natl Cancer Inst 97: 643-655), uključujući prethodnu obradu sa puferom 23 natrijum hlorid-natrijum citrat na 75°C i probavu proteinazom K za 7 do 15 minuta svaki, kodenaturaciju na 85°C tokom 15 minuta, hibridizaciju za približno 36 sata i brza posthibridizacijska ispiranja sa 23 puferom natrijum hlorid-natrijum citrat/0.4-nonil-fenoksil-polietoksietanola. Signali su nabrojani u najmanje 50 tumorskih nukleusa po jezgri, koristeći epifluorescentni mikroskop sa kompletima pojedinačnih interferencijskih filtera za zelenu (FITC), crvenu (teksaška crvena) i plavu (DAPI), kao i dvostruki (crvena/zelena) i trostruki (plavi, crveni, zeleni) propusni filteri. Za svako jezgro, srednja i standardna devijacija broja kopija po ćeliji svake testirane DNK sekvence, procenat ćelija sa ≤2, 3 i ≥4 kopija gena MET i odnos MET/CEP7 (gen smešten u blizini centrozoma istog hromozoma). Kada se među tri testirana jezgra otkriju heterogeni rezultati, za predstavljanje pacijenta u statističkim analizama korišćena je jezgra sa najvećim srednjim brojem kopija. Kao dokumentacija, slike su snimljene pomoću CCD kamere i objedinjene korišćenjem namenskog softvera (CytoVision; Genetix USA, Boston, MA). MET se može smatrati pojačanim kada je odnos signala MET: CEP7 ≥2.0 ili kada je taj odnos <2.0, ali postoji> 20 kopija MET signala u više od 10% prebrojanih nukleusa tumora, prema kriterijumu koje je utvrdio MD Anderson Pathology Department based on prior studies Zeng, ZS, Weiser MR, Kuntz E, Chen CT, Khan SA, Forslund A, i ostali. Pojačanje gena cMet je povezano sa uznapredovalim kolorektalnim karcinomom i metastazama u jetri. Cancer Lett 2008;265:258-69. U nekim studijama zabeleženo je da se broj kopija gena MET u odnosu na CEP7 kreće od 2.05 do 16.14 (medijana 3.48).
[0511] Još jedan test pojačanja cMET je test na bazi krvi. To može učiniti bilo koji od niza komercijalno dostupnih reagensa kao što je, na primer, Biocept Liquid Biopsy MET Amplication Test (Biocept), MET Detect-R ® (Personal Genome Diagnostics), i Guardant360® (Guardant Health®).
Primer 19. Procena prisustva mutacije Eksona 14/preskakakajući MET gen
[0512] MET Ekson 14 sadrži mesto Cbl ubikvitin ligaze na ostatku tirozina 1003 (Y1003), gde je ubikvitin inače normalno vezan za ostatak tirozina i dovodi do lizozomske razgradnje cMet proteina. Zbog toga pogrešna mutacija ostatka Y1003 ili "preskakanje" proteinske regije koja je kodirana sa MET Eksonom 14 rezultira relativnom prekomernom ekspresijom MET proteina, pojačanom aktivacijom cMet i naknadnom onkogenezom. Inhibicija inhibitora MET tirozinske kinaze (TKIa) može rezultirati kliničkim koristima najmanje kod pacijenata sa NSCLC koji sadrže ove promene u Eksonu 14 MET. Pacijenti koji nose bilo koju od ovih mutacija mogu imati koristi od ovde opisanih tretmana.
[0513] Nekoliko metoda je dostupno prosečnom stručnjaku u ovoj oblati tehnike za otkrivanje mutacija u MET genu. Budući da je mutacija prisutna ili nije (tj. to je apsolutna vrednost, a ne stvar stepena), njeno otkrivanje nije zavisno od ispitivanja i bilo koja metoda može se koristiti za njeno otkrivanje u uzorcima tumora. Višestruke mutacije su opisane u Eksonu 14 gena MET, od kojih su mnoge sažete u Impaired cMet Receptor Degradation Mediated by MET Exon 14 Mutations in Non-Small-Cell Lung Cancer, Mark M. Awad JCO Mar 10, 2016:879-881; published online on January 19, 2016; 10.1200/JCO.2015.64.2777. Ove metode mogu biti korišćene za identifikovanje određenih mutacija u uzorcima karcinoma. Takođe, ovo otkriće je usmereno na bilo koju poznatu mutaciju gena Eksona 14 i nije ograničeno na one predstavljene ovde.
[0514] U plućnom adenokarcinomu identifikovano je nekoliko spojenih mutacija Eksona 14. Na primer: MET pojačanje, ekspresija proteina i mutacije plućnog adenokarcinoma. Park S, Koh J, Kim DW, Kim M, Keam B, Kim TM, Jeon YK, Chung DH, Heo DS. Lung Cancer. 2015 Dec;90(3):381-7. doi: 10.1016/j.lungcan. 2015.10.022. Epub 2015 Oct 27. PMID: 26791796. Ove metode mogu biti korišćene za identifikovanje određenih mutacija u uzorcima karcinoma.
[0515] Odgovori na višestruko ciljani inhibitor MET/ALK/ROS1 krizotinib i istovremene mutacije u adenokarcinomima pluća sa pojačanjem MET ili preskakanjem mutacije MET eksona 14. Jorge SE, Schulman S, Freed JA, VanderLaan PA, Rangachari D, Kobayashi SS, Huberman MS, Costa DB. Lung Cancer. 2015 Dec;90(3):369-74. doi: 10.1016/j.lungcan. 2015.10.028. Epub 2015 Okt 31. Ove se metode mogu biti korišćene za identifikovanje ovih određenih mutacija u uzorcima karcinoma.
[0516] Dodatne mutacije Eksona 14 u NSCLC mogu biti otkrivene metodama opisanim u sledećim referencama: Next-Generation Sequencing of Pulmonary Sarcomatoid Carcinoma Reveals High Frequency of Actionable MET Gene Mutations Exon 14 Xuewen Liu, Yuxia Jia, Mark B. Stoopler, Yufeng Shen, Haiying Cheng, Jinli Chen, Mahesh Mansukhani, Sanjay Koul, Balazs Halmos, and Alain C. Borczuk, JCO Mar 10, 2016:794-802; published online on July 27, 2015. Ove metode mogu biti korišćene za identifikovanje određenih mutacija u uzorcima raka.
[0517] MET Ekson 14 Mutacije u Non-Small-Cell Lung Cancer Are Associated With Advanced Age and Stage-Dependent MET Genomic Amplification and cMet Overexpression. Awad MM, Oxnard GR, Jackman DM, Savukoski DO, Hall D, Shivdasani P, Heng JC, Dahlberg SE, Jänne PA, Verma S, Christensen J, Hammerman PS, Sholl LM. J Clin Oncol. 2016 Mar 1;34(7):721-30. doi: 10.1200/JC0.2015.63.4600. Epub 2016 Jan 4. Ove metode mogu biti korišćene za identifikovanje određenih mutacija u uzorcima raka.
[0518] Zabeleženo je još jedno brisanje MET eksona 14 kod gastrointestinalnih malignih bolesti. Oncotarget. 2015 Sep 29;6(29):28211-22. doi: 10.18632/oncotarget.4721. Gastrointestinalni maligni tumori sadrže brisanje MET eksona 14. Lee J, Ou SH3, Lee JM, Kim HC5, Hong M6, Kim SY1, Jang J1, Ahn S6, Kang SY6, Lee S1, Kim ST1, Kim B4, Choi J4, Kim KA4, Lee J, Park C Park SH, Park JO, Lim HY, Kang WK, Park K, Park YS, Kim KM. Ove metode mogu biti korišćene za identifikovanje određenih mutacija u uzorcima raka.
Primer 20. Procena prisustva delecija Eksona 19 i supstitucija Eksona 21 (L858R) u EGFR genu pacijenata sa karcinomom
[0519] Dve najčešće EGFR somatske mutacije, delecija eksona 19 i tzv. "missense" L858R mutacije povezane su sa in vitro i in vivo osetljivošću na lečenje sa EGFR inhibitorima tirozinske kinaze (EGFR-TKI) gefitinibom i erlotinibom. Ove dve različite vrste mutacija su odgovorne za ~ 85% svih EGFR somatskih mutacija identifikovanih kod pacijenata sa NSCLC. Prednosti ovde opisanih tretmana mogu se uočiti kod pacijenata sa delecijom Eksona 19 delecijom i supstitucijom Eksona 21 L858R.
[0520] U tehnici je opisano nekoliko metoda za otkrivanje delecija Eksona 19 u uzorcima karcinoma. Primeri takvih metoda, koji su dostupni prosečnom stručnjaku u ovoj oblasti tehnike, dati su u nastavku. Budući da je mutacija prisutna ili nije (tj. to je apsolutna vrednost, a ne stvar stepena), njezino otkrivanje ne zavisi o ispitivanja i bilo koja metoda može biti korišćena za njezino otkrivanje u uzorcima tumora.
[0521] Nedavni pregled literature koja izveštava o efektu ovih mutacija na pacijente sa karcinomom je da je u lečenju inhibitorima EGFRTKIEGFR-tirozinske kinaze kod pacijenta sa uznapredovalim nemaloćelijskim karcinomom pluća i istovremenim mutacijama eksona 19 i 21 EGFR: Prikaz slučaja i pregled literature Yang Y, Zhang B, Li R, Liu B, Wang L. Oncol Lett. 2016 May;11(5):3546-3550. Epub 2016 Apr 5.
[0522] Prikazano je da pacijenti sa NSCLC i EGFR delecijom eksona 19 imaju duže preživljenje nakon lečenja gefitinibom ili erlotinibom u poređenju sa onima sa mutacijom L858R. Jackman DM, Yeap BY, Sequist LV, et al. (2006) Mutacije delecije eksona 19 receptora za epidermalni faktor rasta su povezane sa produženim preživljavanjem kod pacijenata sa bezmaloćeljskim karcinomom pluća lečenih gefitinibom ili erlotinibom. Clin Cancer Res 12: 908-3914. Ova referenca pruža dve različite metode za otkrivanje EGFR delecije Eksona 19 i L858R mutacije.

Claims (8)

  1. Patentni zahtevi 1. Konjugat antitelo lek anti-cMet ("ADC"), pri čemu je konjugat leka monometil auristatin E ("MMAE"), i ADC ima sledeću strukturu:
    pri čemu Ab je anti-cMet antitelo koje sadrži VH lanac koji sadrži tri CDRa, naime VH CDR #1 (SEK ID BR:112), VH CDR #2 (SEK ID BR:113) i VH CDR #3 (SEK ID BR: 114); i VL lanac sadržavajući tri CDRa, naime VL CDR #1 (SEK ID BR: 115), VL CDR #2 (SEK ID BR: 116) i VL CDR #3 (SEK ID BR: 117); i pri čemu n ima vrednost u rasponu od 2 do 4.
  2. 2. ADC prema patentnom zahtevu 1, sadržavajući VH lanac SEK ID BR: 78 i VL lanac SEK ID BR: 79.
  3. 3. ADC prema patentnom zahtevu 1, sadržavajući teški lanac SEK ID BR: 86 i laki lanac SEK ID BR: 87.
  4. 4. ADC prema bilo kojem od patentnih zahteva od 1 do 3, pri čemu n je 2 ili 4.
  5. 5. Farmaceutska kompozicija, sadržavajući ADC prema bilo kojem od patentnih zahteva 1 do 4.
  6. 6. Farmaceutska kompozicija prema patentnom zahtevu 5, pri čemu n je 2 i 4.
  7. 7. Farmaceutska kompozicija prema patentnom zahtevu 5 ili 6, imajući odnos antitelo lek ("DAR") od oko 3.1.
  8. 8. Farmaceutska kompozicija prema bilo kojem od patentnih zahteva od 5 do 7, pri čemu je ADC obogaćen sa najmanje 95% čistoće E2/E4.
RS20210246A 2016-05-17 2017-05-17 Konjugati antitelo lek anti-cmet i metode za njihovu upotrebu RS61659B1 (sr)

Applications Claiming Priority (2)

Application Number Priority Date Filing Date Title
US201662337796P 2016-05-17 2016-05-17
EP19197371.8A EP3626273B1 (en) 2016-05-17 2017-05-17 Anti-cmet antibody drug conjugates and methods for their use

Publications (1)

Publication Number Publication Date
RS61659B1 true RS61659B1 (sr) 2021-04-29

Family

ID=59014737

Family Applications (2)

Application Number Title Priority Date Filing Date
RS20200927A RS60663B1 (sr) 2016-05-17 2017-05-17 Konjugati anti-cmet antitelo-lek i metodi za njihovu primenu
RS20210246A RS61659B1 (sr) 2016-05-17 2017-05-17 Konjugati antitelo lek anti-cmet i metode za njihovu upotrebu

Family Applications Before (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
RS20200927A RS60663B1 (sr) 2016-05-17 2017-05-17 Konjugati anti-cmet antitelo-lek i metodi za njihovu primenu

Country Status (26)

Country Link
US (5) US20170348429A1 (sr)
EP (4) EP3458102B1 (sr)
JP (4) JP2019521087A (sr)
KR (3) KR102449294B1 (sr)
CN (3) CN114177308B (sr)
AU (1) AU2017268342B2 (sr)
BR (1) BR112018073574A2 (sr)
CA (1) CA3024386C (sr)
CY (2) CY1123256T1 (sr)
DK (2) DK3626273T3 (sr)
ES (2) ES2811351T3 (sr)
HR (2) HRP20201186T1 (sr)
HU (2) HUE050398T2 (sr)
IL (3) IL294146B2 (sr)
LT (2) LT3458102T (sr)
MX (1) MX2018014175A (sr)
NZ (1) NZ748314A (sr)
PL (2) PL3626273T3 (sr)
PT (2) PT3626273T (sr)
RS (2) RS60663B1 (sr)
RU (1) RU2740996C2 (sr)
SG (2) SG11201810034XA (sr)
SI (2) SI3626273T1 (sr)
SM (2) SMT202100122T1 (sr)
WO (1) WO2017201204A1 (sr)
ZA (1) ZA201808386B (sr)

Families Citing this family (40)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN114177308B (zh) 2016-05-17 2024-07-09 艾伯维生物制药股份有限公司 抗cMet抗体药物偶联物及其使用方法
TWI782930B (zh) 2016-11-16 2022-11-11 美商再生元醫藥公司 抗ｍｅｔ抗體，結合ｍｅｔ之雙特異性抗原結合分子及其使用方法
PL3544634T3 (pl) * 2016-11-23 2021-09-27 Eli Lilly And Company Koniugaty przeciwciało MET-lek
CN110144325A (zh) * 2018-02-12 2019-08-20 深圳宾德生物技术有限公司 一种靶向性t淋巴细胞及其制备方法和应用
IL277049B2 (en) 2018-03-13 2024-02-01 Zymeworks Bc Inc Conjugates of biparatopic anti-HER2 antibody and drug and methods of use
WO2019183633A1 (en) 2018-03-23 2019-09-26 Case Western Reserve Univeristy Psma targeted conjugate compounds and uses thereof
MX2020010110A (es) 2018-03-28 2020-11-06 Mitsubishi Tanabe Pharma Corp Conjugados de farmacos de agentes de union monoclonales de cmet, y usos de los mismos.
JP7408646B2 (ja) * 2018-09-30 2024-01-05 ジエンス ハンソー ファーマスーティカル グループ カンパニー リミテッド 抗－ｂ７ｈ３抗体－エキサテカンアナログコンジュゲート及びその医薬用途
US12331320B2 (en) 2018-10-10 2025-06-17 The Research Foundation For The State University Of New York Genome edited cancer cell vaccines
KR102353568B1 (ko) * 2018-11-14 2022-01-20 주식회사 헬릭스미스 안정성이 향상된 항 c-Met 항체 또는 그의 항원 결합 단편
EP4003534A1 (en) * 2019-07-30 2022-06-01 Mythic Therapeutics, Inc. Antigen-binding protein constructs and uses thereof
CN114340684B (zh) 2019-09-16 2025-09-12 瑞泽恩制药公司 用于免疫pet成像的放射性标记的met结合蛋白
CN112604004B (zh) * 2019-09-19 2022-05-10 中国医学科学院医药生物技术研究所 一类抗人egfr抗体药物偶联物及其制备方法与应用
CN110893236A (zh) * 2019-10-09 2020-03-20 中山大学 溶酶体靶向的抗体药物偶联物及其应用
WO2021226444A2 (en) 2020-05-08 2021-11-11 Regeneron Pharmaceuticals, Inc. Vegf traps and mini-traps and methods for treating ocular disorders and cancer
KR20230018454A (ko) * 2020-09-01 2023-02-07 레메젠 코, 리미티드 항-c-Met 항체-약물 접합체 및 이의 용도
EP4211663B1 (en) * 2020-09-12 2026-02-18 MedImmune Limited A scoring method for an anti-b7h4 antibody-drug conjugate therapy
CN116472064A (zh) * 2020-10-12 2023-07-21 昆山新蕴达生物科技有限公司 抗体-药物偶联物及其应用
CN114533891B (zh) * 2020-11-24 2023-04-18 深圳先进技术研究院 一种靶向无痕释放药物缀合物及其制备方法与应用
AU2022218165B2 (en) * 2021-02-03 2024-02-29 Mythic Therapeutics, Inc. Anti-met antibodies and uses thereof
KR20230158005A (ko) 2021-03-18 2023-11-17 씨젠 인크. 생물학적 활성 화합물의 내재화된 접합체로부터의 선택적 약물 방출
JP2024514506A (ja) * 2021-04-06 2024-04-02 アッヴィ・バイオセラピューティクス・インコーポレイテッド テリソツズマブベドチンを使用した非小細胞肺がんの治療方法
WO2022216653A1 (en) 2021-04-07 2022-10-13 Mythic Therapeutics, Inc. Antigen-binding protein constructs and antibodies and uses thereof
EP4320152A1 (en) 2021-04-08 2024-02-14 Byondis B.V. Anti-c-met antibodies and antibody-drug conjugates
AR125473A1 (es) * 2021-04-29 2023-07-19 Abbvie Inc Conjugados de anticuerpo anti-c-met y fármaco
AU2022388735A1 (en) 2021-11-09 2024-05-30 Case Western Reserve University Psma targeted conjugate compounds and uses thereof
CN114369162B (zh) * 2021-12-28 2023-05-30 合肥天港免疫药物有限公司 抗体及其应用
WO2023173109A1 (en) 2022-03-11 2023-09-14 Abbvie Biotherapeutics Inc. Methods of treatment of non-small-cell lung carcinoma using telisotuzumab vedotin and osimertinib
WO2024065056A1 (en) * 2022-09-28 2024-04-04 Zymeworks Bc Inc. Antibody drug conjugates targeting c-met and methods of use
WO2024081729A2 (en) 2022-10-12 2024-04-18 Mythic Therapeutics, Inc. Lrrc-15-binding protein constructs and uses thereof
WO2024129585A1 (en) * 2022-12-11 2024-06-20 Mythic Therapeutics, Inc. ANTI-cMET ANTIBODY DRUG CONJUGATES AND THERAPEUTIC USES THEREOF
FI131754B1 (en) * 2023-03-13 2025-11-11 Glykos Finland Oy Antibody-exatecan conjugates
EP4713360A1 (en) 2023-05-19 2026-03-25 Les Laboratoires Servier Anti-met antibodies, antibody-drug conjugates, compositions and uses thereof
CN121487754A (zh) * 2023-07-25 2026-02-06 江苏恒瑞医药股份有限公司 靶向c-Met的抗体-药物偶联物及其医药用途
WO2025027529A1 (en) 2023-07-31 2025-02-06 Advesya Anti-il-1rap antibody drug conjugates and methods of use thereof
WO2025078841A2 (en) 2023-10-11 2025-04-17 Antikor Biopharma Limited Antibodies, conjugates, and uses thereof
WO2025084851A1 (ko) * 2023-10-19 2025-04-24 (주)셀트리온 캄프토테신 유도체를 포함하는 항-c-met 항체-약물 접합체
WO2025126157A1 (en) 2023-12-15 2025-06-19 Advesya Anti-il-1rap binding domains and antibody-drug conjugates thereof
WO2025166213A1 (en) * 2024-02-01 2025-08-07 Fulgent Pharma Llc Treatment of head and neck cancer with pharmaceutical composition comprising nanoparticles containing taxane
WO2025245128A1 (en) * 2024-05-20 2025-11-27 Mythic Therapeutics, Inc. Antibody drug conjugates and therapeutic uses thereof

Family Cites Families (84)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US4444887A (en) 1979-12-10 1984-04-24 Sloan-Kettering Institute Process for making human antibody producing B-lymphocytes
US4634665A (en) 1980-02-25 1987-01-06 The Trustees Of Columbia University In The City Of New York Processes for inserting DNA into eucaryotic cells and for producing proteinaceous materials
US5179017A (en) 1980-02-25 1993-01-12 The Trustees Of Columbia University In The City Of New York Processes for inserting DNA into eucaryotic cells and for producing proteinaceous materials
US4399216A (en) 1980-02-25 1983-08-16 The Trustees Of Columbia University Processes for inserting DNA into eucaryotic cells and for producing proteinaceous materials
US4716111A (en) 1982-08-11 1987-12-29 Trustees Of Boston University Process for producing human antibodies
US4510245A (en) 1982-11-18 1985-04-09 Chiron Corporation Adenovirus promoter system
GB8308235D0 (en) 1983-03-25 1983-05-05 Celltech Ltd Polypeptides
US4816567A (en) 1983-04-08 1989-03-28 Genentech, Inc. Recombinant immunoglobin preparations
US5807715A (en) 1984-08-27 1998-09-15 The Board Of Trustees Of The Leland Stanford Junior University Methods and transformed mammalian lymphocyte cells for producing functional antigen-binding protein including chimeric immunoglobulin
US5168062A (en) 1985-01-30 1992-12-01 University Of Iowa Research Foundation Transfer vectors and microorganisms containing human cytomegalovirus immediate-early promoter-regulatory DNA sequence
US4968615A (en) 1985-12-18 1990-11-06 Ciba-Geigy Corporation Deoxyribonucleic acid segment from a virus
GB8607679D0 (en) 1986-03-27 1986-04-30 Winter G P Recombinant dna product
US5225539A (en) 1986-03-27 1993-07-06 Medical Research Council Recombinant altered antibodies and methods of making altered antibodies
EP0428534B1 (en) 1988-06-14 1995-03-29 Cetus Oncology Corporation Coupling agents and sterically hindered disulfide linked conjugates prepared therefrom
US5530101A (en) 1988-12-28 1996-06-25 Protein Design Labs, Inc. Humanized immunoglobulins
US5413923A (en) 1989-07-25 1995-05-09 Cell Genesys, Inc. Homologous recombination for universal donor cells and chimeric mammalian hosts
GB8928874D0 (en) 1989-12-21 1990-02-28 Celltech Ltd Humanised antibodies
ES2087997T3 (es) 1990-01-12 1996-08-01 Cell Genesys Inc Generacion de anticuerpos xenogenicos.
GB9015198D0 (en) 1990-07-10 1990-08-29 Brien Caroline J O Binding substance
US5625126A (en) 1990-08-29 1997-04-29 Genpharm International, Inc. Transgenic non-human animals for producing heterologous antibodies
ES2108048T3 (es) 1990-08-29 1997-12-16 Genpharm Int Produccion y utilizacion de animales inferiores transgenicos capaces de producir anticuerpos heterologos.
US5814318A (en) 1990-08-29 1998-09-29 Genpharm International Inc. Transgenic non-human animals for producing heterologous antibodies
US5661016A (en) 1990-08-29 1997-08-26 Genpharm International Inc. Transgenic non-human animals capable of producing heterologous antibodies of various isotypes
US5545806A (en) 1990-08-29 1996-08-13 Genpharm International, Inc. Ransgenic non-human animals for producing heterologous antibodies
US5633425A (en) 1990-08-29 1997-05-27 Genpharm International, Inc. Transgenic non-human animals capable of producing heterologous antibodies
DE69233482T2 (de) 1991-05-17 2006-01-12 Merck & Co., Inc. Verfahren zur Verminderung der Immunogenität der variablen Antikörperdomänen
MX9204374A (es) 1991-07-25 1993-03-01 Idec Pharma Corp Anticuerpo recombinante y metodo para su produccion.
ES2136092T3 (es) 1991-09-23 1999-11-16 Medical Res Council Procedimientos para la produccion de anticuerpos humanizados.
ATE463573T1 (de) 1991-12-02 2010-04-15 Medimmune Ltd Herstellung von autoantikörpern auf phagenoberflächen ausgehend von antikörpersegmentbibliotheken
US5639641A (en) 1992-09-09 1997-06-17 Immunogen Inc. Resurfacing of rodent antibodies
EP0822830B1 (en) 1995-04-27 2008-04-02 Amgen Fremont Inc. Human anti-IL-8 antibodies, derived from immunized xenomice
CA2219486A1 (en) 1995-04-28 1996-10-31 Abgenix, Inc. Human antibodies derived from immunized xenomice
US5916771A (en) 1996-10-11 1999-06-29 Abgenix, Inc. Production of a multimeric protein by cell fusion method
EP2305027B1 (en) 1996-12-03 2014-07-02 Amgen Fremont Inc. Transgenic mammals having human Ig loci including plural VH and Vkappa regions and antibodies produced therefrom
SI0970126T1 (en) 1997-04-14 2001-08-31 Micromet Ag Novel method for the production of antihuman antigen receptors and uses thereof
US6235883B1 (en) 1997-05-05 2001-05-22 Abgenix, Inc. Human monoclonal antibodies to epidermal growth factor receptor
EP1135498B1 (en) 1998-11-18 2008-01-23 Genentech, Inc. Antibody variants with higher binding affinity compared to parent antibodies
EP1243276A1 (en) 2001-03-23 2002-09-25 Franciscus Marinus Hendrikus De Groot Elongated and multiple spacers containing activatible prodrugs
DK1545613T3 (da) 2002-07-31 2011-11-14 Seattle Genetics Inc Auristatinkonjugater og deres anvendelse til behandling af cancer, en autoimmun sygdom eller en infektiøs sygdom
WO2004019993A1 (en) 2002-08-30 2004-03-11 Ramot At Tel Aviv University Ltd. Self-immolative dendrimers releasing many active moieties upon a single activating event
US7217797B2 (en) 2002-10-15 2007-05-15 Pdl Biopharma, Inc. Alteration of FcRn binding affinities or serum half-lives of antibodies by mutagenesis
WO2004043493A1 (en) 2002-11-14 2004-05-27 Syntarga B.V. Prodrugs built as multiple self-elimination-release spacers
ATE472338T1 (de) 2003-02-20 2010-07-15 Seattle Genetics Inc Anti-cd70 antikörper-arzneimittelkonjugate und ihre verwendung zur behandlung von krebs
CA2530172A1 (en) * 2003-06-27 2005-02-10 Abgenix, Inc. Antibodies directed to the deletion mutants of epidermal growth factor receptor and uses thereof
CN107213469A (zh) * 2003-11-06 2017-09-29 西雅图基因公司 能够与配体偶联的单甲基缬氨酸化合物
EP1718667B1 (en) 2004-02-23 2013-01-09 Genentech, Inc. Heterocyclic self-immolative linkers and conjugates
JP4942643B2 (ja) * 2004-03-02 2012-05-30 シアトル ジェネティックス， インコーポレイテッド 部分的に付加された抗体およびそれらの結合体化方法
WO2005123780A2 (en) 2004-04-09 2005-12-29 Protein Design Labs, Inc. Alteration of fcrn binding affinities or serum half-lives of antibodies by mutagenesis
KR101270829B1 (ko) 2004-09-23 2013-06-07 제넨테크, 인크. 시스테인 유전자조작 항체 및 접합체
DK1912671T3 (da) 2005-07-18 2017-11-27 Seattle Genetics Inc Beta-glucuronid-linker-lægemiddelkonjugater
CN101415679A (zh) 2006-02-02 2009-04-22 辛塔佳有限公司 水溶性cc-1065类似物及其缀合物
DK2099823T4 (da) 2006-12-01 2022-05-09 Seagen Inc Målbindingsmiddelvarianter og anvendelser deraf
EP2014681A1 (en) 2007-07-12 2009-01-14 Pierre Fabre Medicament Novel antibodies inhibiting c-met dimerization, and uses thereof
US8399512B2 (en) 2007-11-28 2013-03-19 Mersana Therapeutics, Inc. Biocompatible biodegradable fumagillin analog conjugates
US9469691B2 (en) 2008-12-02 2016-10-18 Pierre Fabre Medicament Anti-cMET antibody
US20140112911A9 (en) 2008-12-02 2014-04-24 Liliane Goetsch Novel anti-cmet antibody
WO2010064089A1 (en) 2008-12-02 2010-06-10 Pierre Fabre Medicament Novel anti-cmet antibody
US8545839B2 (en) 2008-12-02 2013-10-01 Pierre Fabre Medicament Anti-c-Met antibody
AR074439A1 (es) 2008-12-02 2011-01-19 Pf Medicament Anticuerpo anti-cmet (receptor c-met)
US20100152725A1 (en) 2008-12-12 2010-06-17 Angiodynamics, Inc. Method and system for tissue treatment utilizing irreversible electroporation and thermal track coagulation
KR20120057588A (ko) 2009-05-28 2012-06-05 메르사나 테라퓨틱스, 인코포레이티드 가변 속도 방출 링커를 포함하는 폴리알 약물 접합체
EP2287197A1 (en) 2009-08-21 2011-02-23 Pierre Fabre Medicament Anti-cMET antibody and its use for the detection and the diagnosis of cancer
EP2511718B1 (en) 2009-12-07 2017-07-05 Ntt Docomo, Inc. Propagation path estimation method, program, and device
WO2011111020A1 (en) 2010-03-10 2011-09-15 Novartis Ag Streptococcus thermophilus bacterium
WO2011120053A1 (en) 2010-03-26 2011-09-29 Mersana Therapeutics, Inc. Modified polymers for delivery of polynucleotides, method of manufacture, and methods of use thereof
DE102010012915A1 (de) 2010-03-26 2011-09-29 Schaeffler Technologies Gmbh & Co. Kg Vorrichtung und Verfahren zur Ermittlung eines Schädigungszustands eines Radlagers
EP2402370A1 (en) 2010-06-29 2012-01-04 Pierre Fabre Médicament Novel antibody for the diagnosis and/or prognosis of cancer
SMT201900500T1 (it) * 2011-05-08 2019-11-13 Legochem Biosciences Inc Coniugati di agente protettivo-proteina e metodo per preparare i medesimi
EP3228325A1 (en) 2011-06-10 2017-10-11 Mersana Therapeutics, Inc. Protein-polymer-drug conjugates
KR101463098B1 (ko) * 2011-11-28 2014-11-27 한국생명공학연구원 ｃ-Ｍｅｔ에 대한 인간항체에 약물이 접합된 약물 복합체 및 이의 용도
MX2014006739A (es) 2011-12-05 2015-06-05 Igenica Biotherapeutics Inc Conjugados de anticuerpo-farmaco y compuestos relacionados, composiciones , y metodos.
WO2013096901A1 (en) 2011-12-23 2013-06-27 Mersana Therapeutics, Inc. Pharmaceutical formulations for fumagillin derivative-phf conjugates
BR112014020697B1 (pt) * 2012-02-24 2024-01-09 Alteogen Inc Anticorpo modificado compreendendo um motivo contendo cisteína na terminação do anticorpo, conjugado anticorpo-droga modificado compreendendo uma droga ligada ao anticorpo modificado e método de produção do mesmo
US9504756B2 (en) 2012-05-15 2016-11-29 Seattle Genetics, Inc. Self-stabilizing linker conjugates
US20140017265A1 (en) 2012-07-05 2014-01-16 Mersana Therapeutics, Inc. Terminally Modified Polymers and Conjugates Thereof
AU2013359506B2 (en) 2012-12-10 2018-05-24 Mersana Therapeutics, Inc. Protein-polymer-drug conjugates
WO2014093379A1 (en) 2012-12-10 2014-06-19 Mersana Therapeutics, Inc. Auristatin compounds and conjugates thereof
EP2931316B1 (en) 2012-12-12 2019-02-20 Mersana Therapeutics, Inc. Hydroxyl-polymer-drug-protein conjugates
KR102305226B1 (ko) * 2013-03-15 2021-09-29 아비에 도이치란트 게엠베하 운트 콤파니 카게 항-egfr 항체 약물 접합체 제형
KR102150616B1 (ko) * 2013-09-12 2020-09-03 삼성전자주식회사 c-Met 표적 화합물-생체활성 물질 접합체 및 그 용도
CN107001471B (zh) 2014-09-16 2022-01-18 西福根有限公司 抗met抗体和组合物
WO2016165580A1 (zh) * 2015-04-17 2016-10-20 江苏恒瑞医药股份有限公司 抗c-Met抗体和抗c-Met抗体-细胞毒性药物偶联物及其医药用途
CN106188293A (zh) * 2015-04-17 2016-12-07 江苏恒瑞医药股份有限公司 抗c-Met抗体和抗c-Met抗体-细胞毒性药物偶联物及其医药用途
CN114177308B (zh) 2016-05-17 2024-07-09 艾伯维生物制药股份有限公司 抗cMet抗体药物偶联物及其使用方法

Also Published As

Publication number Publication date
KR20190008339A (ko) 2019-01-23
AU2017268342B2 (en) 2023-08-17
LT3458102T (lt) 2020-08-25
JP7150087B2 (ja) 2022-10-07
CN109562189B (zh) 2021-12-31
JP2022185003A (ja) 2022-12-13
PL3458102T3 (pl) 2020-12-14
HRP20201186T1 (hr) 2020-11-13
US20230321271A1 (en) 2023-10-12
IL304717A (en) 2023-09-01
DK3458102T3 (da) 2020-07-27
SG11201810034XA (en) 2018-12-28
PT3458102T (pt) 2020-08-17
ZA201808386B (en) 2022-07-27
ES2811351T3 (es) 2021-03-11
CN114246953A (zh) 2022-03-29
CN114177308B (zh) 2024-07-09
KR102512597B1 (ko) 2023-03-23
SI3626273T1 (sl) 2021-04-30
US20190314518A1 (en) 2019-10-17
CA3024386A1 (en) 2017-11-23
HUE050398T2 (hu) 2020-12-28
IL262869B (en) 2022-07-01
CA3024386C (en) 2024-01-02
BR112018073574A2 (pt) 2019-03-19
PL3626273T3 (pl) 2021-06-14
KR102449294B1 (ko) 2022-09-30
JP2021107424A (ja) 2021-07-29
EP4233909A3 (en) 2023-09-20
MX2018014175A (es) 2020-02-07
US10603389B2 (en) 2020-03-31
AU2017268342A1 (en) 2018-11-29
KR20230028574A (ko) 2023-02-28
RU2018144315A (ru) 2020-06-17
US10383948B2 (en) 2019-08-20
SMT202000467T1 (it) 2020-11-10
DK3626273T3 (da) 2021-02-08
EP3626273A1 (en) 2020-03-25
JP6870161B1 (ja) 2021-05-12
CN114246953B (zh) 2024-07-09
ES2864150T3 (es) 2021-10-13
HUE053332T2 (hu) 2021-06-28
NZ748314A (en) 2023-07-28
SG10201914095SA (en) 2020-03-30
CY1123858T1 (el) 2022-05-27
WO2017201204A1 (en) 2017-11-23
US20170348429A1 (en) 2017-12-07
EP4233909A2 (en) 2023-08-30
EP3458102A1 (en) 2019-03-27
EP3804765A1 (en) 2021-04-14
RU2018144315A3 (sr) 2020-07-22
EP3626273B1 (en) 2020-12-30
CN109562189A (zh) 2019-04-02
CY1123256T1 (el) 2021-10-29
EP3458102B1 (en) 2020-06-17
US20200215200A1 (en) 2020-07-09
US20180250418A1 (en) 2018-09-06
IL294146A (en) 2022-08-01
SMT202100122T1 (it) 2021-05-07
CN114177308A (zh) 2022-03-15
LT3626273T (lt) 2021-03-10
IL294146B1 (en) 2023-09-01
IL294146B2 (en) 2024-01-01
SI3458102T1 (sl) 2020-09-30
KR20220137158A (ko) 2022-10-11
PT3626273T (pt) 2021-03-09
HRP20210326T1 (hr) 2021-04-02
RU2740996C2 (ru) 2021-01-22
JP2021073247A (ja) 2021-05-13
IL262869A (en) 2018-12-31
JP2019521087A (ja) 2019-07-25
RS60663B1 (sr) 2020-09-30

Similar Documents

Publication Publication Date Title
JP7150087B2 (ja) 抗ｃＭｅｔ抗体薬物複合体及びその使用方法
EP3383909B1 (en) Anti-human lrrc15 antibody drug conjugates and methods for their use
JP2019501124A (ja) 抗ｈｕＬＲＲＣ１５抗体薬物コンジュゲート及びその使用方法
HK40051595A (en) Anti-cmet antibody drug conjugates and methods for their use
HK40017522B (en) Anti-cmet antibody drug conjugates and methods for their use
HK40017522A (en) Anti-cmet antibody drug conjugates and methods for their use
HK40006548A (en) Anti-cmet antibody drug conjugates and methods for their use
HK40006548B (en) Anti-cmet antibody drug conjugates and methods for their use