RS54833B1 - Novi hiralni n-acil-5,6,7, (8-supstituisan)-tetrahidro-[1,2,4]triazolo [4,3-a]pirazini kao selektivni antagonisti nk-3 receptora, farmaceutsko jedinjenje, i postupci za upotrebu u nk-3 receptorom posredovanim poremećajima - Google Patents

Abstract

Jedinjenje prema Formuli I:i njegovi farmaceutski prihvatljivi solvati, pri čemuAr1 je nesupstituisani tiofen-2-il, nesupstituisani fenii, iii 4-fluorofenil; R1 je H ili metil;r2 ima opštu Formulu (i), (ii) ili (iii):pri čemuR2 je linearni ili razgranati C1-C4 alkii, C1-C2 haloaikil, linearni ili razgranati C2-C3 aikenii, C3-C4cikloaikil ili di(C1-C2 alkil)amino;X1 je N ili C-R5 pri čemu R6 je H, fluor ili C1-C2 alkil;X2 je O ili S;X3 je N, ili X3 je CH pod uslovom da X1 jeste N i X2 jeste N-R7 pri čemu R7 je linearan ili razgranat C1- C3 alkil ili ciklopropil;R3 je linearni ili razgranat C1-C4 alkil ili C3-C4 cikloalkil;X4 je N ili C-R8 pri čemu R3 je H ili C1-C2 alkil:X5 je O ili 8;X6 je N, ili X6 je CH pod uslovom da X4 jeste N i X5 jeste N-R9 pri čemu R9 je linearan ili razgranatC1- C3 alkil ili ciklopropil;R4 je halo, cijano, metil, ili hidroksil;R5 je H ili halo;sa uslovom da kada Ar2 je prema Formuli (iii), onda R1 jeste metil; i jedinjenje prema Formuli I nije (3-(2-izobutiltiazol-4-il)-5,6-dihidro-[1,2,4]triazolo[4,2-a]pirazin-7(8H)-il)(4-(tiofen-2-il)fenil)metanon;[1,1'-bifenil]-4-il(8-metil-3-(6-metilpiridin-2-il)-5,6-dihidro-[1,2,4]triazolo[4,3-a]pirazin-7(8H)-il)metanon;(8-metil-3-(6-metilpiridin-2-il)-5,6-dihidro-[1,2,4]triazolo[4,3-a]pirazin-7(8H)-il)(4-(tiofen-2-il)fenil)metanon.Prijava sadrži još 37 patentnih zahteva.

Description

Oblast pronalaska

[0001]Ovaj se pronalazak odnosi na nove W-aci!-5,6,7,(8-siipstituisane)-tetrahidro-[1>2,4]triazo!ot4,3-ajpirazine uključujući njihove farmaceutski prihvatljive soli i solvate koji su selektivni antagonisti za neurokinin-3 receptor (NK-3) i korisni su kao terapijska jedinjenja, posebno za lećenje i/ili sprečavanje širokog niza centralnog nervnog sistema (CNS) i bolesti ili poremećaja perifernog nervnog sistema.

[0002]Ovaj se pronalazak takode odnosi na nove hiralne sinteze 5,6,7\{8-supstitL!isanih}-teti'ahidro-f1,2?4]triazolo- [4.3-a]-pirazin intermeđijare za upotrebu za sintezu farmaceutski aktivnih sastojaka, kao što su selektivni antagonisti za neurokinin 3 receptor (NK-3), posebno A/-aci!-5,6,7,(8-supstituisane)-te1rahidro-[1,2.43triazolo[4.3-a]pirazine prema ovom pronalasku. Ovaj pronalazak se takođe odnosi na nove steseoizomerno ciste intermeđijare 5,6,7,(8-supstituisane)-tetfahidro-[1,2,4jtriazolo{4,3-a]pirazina dobijene hirainom sintezom prema ovom pronalasku kao i na nove intermeđijare dobijene iz ove sinteze.

PRETHODNO STANJE TEHNIKE

[0003]Receptori tahikinina su mete familije strukturno povezanih peptida koji obuhvataju supstancu P (SP), neurokinin A (NKA) i neurokinin B (NKB), kolektivno nazvani "tahikinini". Tahikinini se sintetišu u centralnom nervnom sistemu (CNS) i perifernim tkivima, gde oni ispoljavaju razne biološke aktivnosti.Tri receptora tahinina su poznata i njihovi nazivi su neurokinin-1 (NK-1). neurakinin-2 (NK-2) i neurokinin-3 (NK-3) receptor. Receptori tahikinina pripadaju rodopsinu sličnim sedmorici membranskih G protein spregnutim receptortma. SP ima najviši afinitet i veruje se da je endogeni ligand NK-1. NKA za NK-2 receptor i NKB for NK-3 receptor, iako unakrsna reaktivriost među ovim iiganđirna zaista postoji. NK-1, NK-2 i NK-3 receptori su identifikovani kod različitih vrsta. NK-1 i NK-2 receptori su ispoljeni kod velikog broja raznovrsnih perifernih tkiva i NK-1 receptor su takođe ispoljeni u CNS; pri čemu su NK-3 receptori prvenstveno ispoljeni u CNS-u.

[0004]Receptori neurokinina posreduju raznovrsne tahiktninom-stimulisane biološke efekte koji obuhvataju prenos pobuđenih neuronskih signala u CNS i periferiji (npr. bol), modulacija kontraktilne aktivosti glatkog mišića, modulacija imunih i zapaijensih odgovra, uvođenje hipotensivmh dejstava preko dilatacije perifernih vaskulaiornih i stimulacija izlučivanja endkrine i egzokrine ziezđe.

[0005]U CNS, NK-3 receptor se ispoijava u regionima koji obuhvataju srednji prefrontalni kortes, hipokarnpus, talamus i amigdala. Pored toga, NK-3 receptori se ispoljavaju na dopaminergijskitn neuronima. Pokazalo se da aktivacija NK- 3 receptora moduliše oslobađanje dopamina, acetilholina i serotonina što nagoveštava terapijsku korisnost za modulatore NK-3 receptora za lećenje velikog broja poremećaja uključujući psihotične poremećaje, anksioznost, depresiju, šizofreniju kao i gojaznost, bol iliZ3paljenske procese (Exp. Opinion Ther. Patents (2000), 10(6). 939-960; Current Opinion in investigational Drugs. 2001, 2(7), 950-956 and Current Pharmaceuiieal Design, 2010, 16, 344-357).

[0006]Šizofrenija se klasifikuje u podgrupe. Paranoidni tip karakterišu iluzije (zablude) i halucinacije i odsustvo ili poremećaj mišljenja, neorganizovano ponašavanje, i afektivna ravnodušnost. Kod đisorganizovanog tipa, koji se takođe naziva 'hebefrenična šizofrenija' u Međunarodnoj klasifikaciji bolesti (ICD), poremećaj mišljenja i afektivna ravnodušnost, su prisutni zajedno. Kod katatoničnog tipa, izraženi psihomotroni poremećaji su očigledni, i simptomi mogu da obuhvate katatonični stupor (odsutnost) i voskastu fleksibilnost. Kod nediferenciranog tipa, psihoiični simptomi su prisutni ali kriterijumi za paranoidni, neorganizovani, ili katatonski tip nisu ispunjeni. Simptomi šizofrenije se normalno uobičajeno manifestuju u tri široke kategorije, t.j. pozitivne, negativne i kognitivne simptome. Pozitivni simptomi su oni, koji predstavljaju "višak" normalnog iskustva, kao što su halucinacije i iluzije (zablude). Negativni simptomi su oni gde pacijent boluje od nedostatka normaing iskustva, kao što je anhedonija ili nedostatak socijalne interakcije. Kognitivni simptomi se odnose na kognitivno oštećenje kod šizofreničnih bolesnika kao što je nedostatak održive pažnje i nedostaci u donošenju odluka. Trenutni antipsirtotični lekovi (APD) su prilično uspešni u lećenju pozitivnih simptoma ali daleko lošiji za negativne i kognitivne simptome. Nasuprot tome, NK3 antagonisti su pokazali u kliničkim ispitivanjima da poboljšavaju i pozitivne i negativne simptome kod šizofreničnih osoba (Meltzer et al, Am. J. Psychiatry, 161, 975-984, 2004) i poboljšavaju kognitivno ponašanje šizofreničnih osoba (Curr. Opion. Invest. Drug, 6, 717-721. 2005).

[0007]Kod pacova, morfološke studije daju dokaz za pretpostavljene interakcije između NKB neurona i hipotalamske reproduktivne ose (Krajevvski et al, J. Comp. Neurol., 489(3), 372-386, 2005). Kod neurona sa zakrivljenim nukleusom, NKB ispoljavanje se lokaiizuje zajedno sa receptororn estrogena a i dinotfina, što je implicirano za povratnu reakciju progesterona na izlučivanje hormona koji ispušta gonadotropin (GnRH) (Burke et al., J. Comp, Neurol,, 493(5). 712-726, 2006; Goodman et al., Endocrinoiogv, 145. 2959-2967, 2004). Pored toga, NK-3 receptor je visoko ispoijen u hiptotalamusnom iskrivljenom nukleusu u neuronima koji su uključeni u regulaciju oslobađanja GnRH.

[0008]VVO 00/43008 otkriva postupak suzbijanja proizvodnje gonadotropina i/iii androgena sa specifičnim antagonistima NK-3 receptora. Preciznije, VVO 00/43008 prijava se odnosi na spuštanje nivoa iutetnizujućeg hormona (LH) u krvi primanom antagonista NK-3 receptora. Istovremeno ili alternativno sa potiskivanjem gonadotropina, WO 00/43008 takođe se odnosi na potiskivanje androgene proizvodnje sa antagonistima NK-3 receptora. Nedavno je pretpostavljeno da NKB deluje autosinaptički na neurone kispeptina u iskrivljenom nukleusu da se sinhronizuje i oblikuje pufsativno izlučivanje kispeptina i podstakne ispuštanje GnRH Iz viakana u ispupčenom deiu donjeg regiona hiptotalamusa međtan eminence (Navarno et al., J. of Neurosaence. 23, 2009 - pp11859-11866). Sva ova zapažanja nagoveštavaju da terapijska korisnost za rnodulatore NK-3 receptora za bolesti usiovijene polnim hormonom.

[0009]Nepeptidnt ligandi su razvijeni za svaki cei receptora tahikinina. Neki od njih su opisani kao dual ni modulatori koji mogu da moduliraju i NK-2 i NK-3 receptora (VVO 06/120478). Međutim, poznati nepepiidni antagonisti NK-3 receptora pate od jednog broja nedostataka, najvažniji je slab sigurnosni profil i ograničena CNS mogućnost prodora što može da ograniči uspeh ovih jedinjenja u kliničkom razvoju.

[0010]Na osnovu ovoga, novi jaki i selektivni antagonisti NK-3 receptora mogu da budu terapijski vredni za pripremu lekova korisnih za iečenje i/ili sprečavanje CNS-a i perifernih boiesti ili poremećaja kod kojih su uključeni NKB i NK-3 receptori.

Antagonisti za neurokinin-3 receptor $NK-3)

[0011]Ovaj pronalazak dakle obuhvata jedinjenja prema opštoj Formuli I, njihove farmaceutski prihvatljive soli i solvate kao i postupke upotrebe takvih jedinjenja ili jedinjenja koja sadrže takva jedinjenja kao antagoniste za NK-3 receptor. Jedinjenja prema Formuli ! su /V-acil-5;6t7,(8-supstituisani}-tetrahidi'o-[1,2,4]triazolo[4,3- a]pirazini. Jedinjenja prema ovom pronalasku su generalno objašnjena u međunarodnoj prijavi patenta PCT7EP2011/055218 ali nijedno nije specifično ovde prikaznao prime rom.

[0012]U opštem varijantnom rešenju, ovaj pronalazak daje jedinjenja koja imaju opatu Formulu I:

i njihove farmaceutski prihvatljive solvate, pri čemu

Ar1 jeste nesupstituisani tiofen-2-il, nesupstiiuisani fenil, ili 4-fluorofenii;

R1 je H ili metil;

Ar<2>ima opštu Formulu (i), (ii) ili (iii);

pri čemu

R2 jelinearni iii razgranati C1-C4 aikil, C1-C2 haioalkil, linearni iii razgranati C2-C3 alkenil, C3-C4 cikloalkil ili di(C1-C2 alki!)amino:X1 je N ili C-R6pri čemu R§ je H, fluor ili C1-C2 alkii;

X2 jeO ili S;

X3 je N, ili X3 je CH pod uslovorn da X"! jeste N i X2 jeste N--R7 pri čemu R7 je linearan ili razgranat C1-C3 aikil ili cikfopropil;

R3 je linearni ili razgranat C1-C4 alkil ili C3-C4 cikioaikil;

X4 je N ili C- R8 pri čemu R8 jeste H ili C1-C2 alkil;

X5JG O ili S;

X6 je N, ili X6 je CH pod uslovorn da X4 jeste N i X5 jeste N-R9 pri čemu R9 je linearan ili razgranat C1-C3 aikil ili ciklopropii.

R4je halo, cijano, metil, ili hidroksii;

R5 je H iii halo;

sa uslovorn da kada Ar2 je prema Formuli (iii), onda R11 jeste metil; i jedinjenje prema Formuli I nije {3-(2-izobutiltiazol-4-if)-5,6-dihiđro-[l^

[1,r-bifeni!]-4-il(8-met!l-3-{6-metilpiridin-2-il)-5.6-dih!dro-[1,2,4]triazoio[4.3-ajpirazin-7(8H)-il)metanon;

(8-rnetil--3-(6-rnetilpirtciin-2-il)-5,8-dihidro-[1,2,4]triazolol4,3-a]pirazin-7(8H)-il)(4'-(t!ofen-2-il)fenil)metanon.

[0013JU drugom varijantnorn rešenju, ovaj pronalazak obezbeđuje farmaceutsko jedinjenje koje obuhvata barem jedno jedinjenje prema pronalasku ili njegove farmaceutski prihvatljive soii ili solvate.

[0014JPronalazak se takode odnosi na upotrebu gore navedenih jedinjenja iii njihovih farmaceutski prihvatljivih soli i solvata kao modulatora NK-3 receptora, preporučljivo kao antagonista NK-3 receptora.

[00151Takode su opisani postupci za lećenje i/ili sprečavanje bolesti kao što je depresija, uznemirenost, psihoza, šizofrenija, psihotični poremećaji, bipobarni poremećaji, kognitivni poremećaji, Parkinsonova bolest, Alchajmerova bolest, poremećaj hiperaktivnosti i deficita pažnje (ADHD), bol, konvulzija, gojaznost, zapaljenske bolesti uključujući sindrom nervoznih creva i poremećaje zapaljenskih procesa creva. erneza, preeklampsija, bolesti povezane s disajnim putevima uključujući hroničnu opstruktivnu bolest pluća, astmu, pojačana reaktivnost bronhšja, bronhokonsirtkcija i kašalj, poremećaji reproduktivnih organa, kontracepcija i bolesti uslovljene potnim hormonom uključujući ali bez ograničavanja na benignu hiperplaziju prostate (SPH), hiperplaziju prostate, metastazirani karcinom prostate, rak testisa, rak dojke, rak jajnika, anđrogenom uslovljene akne, muški tip ćelavosti, endometrioza, abnormalan pubertet, fibroza materice, fiboirni tumor materice, kanceri zavisni od hormona, hiperanđrogenizam, hirsutizam, viriiizacija, sindrom policističnih jajnika (PCOS), bolest predmenstrualne disforije (PMDD), HAIR- AN sindrom (hiperanđrogenizam, otpornost na insulin i akantoza), hipertekoza jajnika (HAIR-AN sindrom sa hiperplazijom luteinizovanih teka ćelija u unutarnjem tkivu (stromi) jajnika), druge manifestacije visokih koncentracija androgena u jajnicima (npr. zatajenje sazrevanja folikula atrezija anovuiacija, dismenoreja, disfunkcionalno krvarenje materice, neplodnost), tumor koji proizvodi androgen (virilizujući tumor jajnika ili adrenalni tumor) menoragija i adenomioza. gde je obuhvaćena prirnena terapijski delotvorne količine jedinjenja ili farmaceutski prihvatljivih soli ili solvata prema Formuli I, pacijentu kom su potrebna. Preporučljivo pacijent je toplokrvna životinja, još preporućijivije čovek.

[0016]Takođe su opisani postupci iečenja za ginekološke poremećaje i neplodnost. Preciznije, ovaj pronalazak obezbeđuje postupke potiskivanja naglog skoka luteinizirajućeg hormona (LM) u asistiranoj reprodukciji koja obuhvata primenu teraijski deiotvorne količine jedinjenja ili farmaceutski prihvatljivih soli ili solvata prema Formuli I, pacijentu kome je potrebna. Preporučljivo pacijent je toplokrvna životinja, još preporučljivije žena. [001 7]Takođe su opisani postupci za uticanje na proizvodnju andragena da bi se prouzrokovala muška kastracija i da bi se sprečio seksualni nagon kod mušakraca seksualnih prestupnika koja obuhvata primenu terapijski deiotvorne količine jedinjenja ili farmaceutski prihvatljivih soli ili solvata prema Formuli I, na pacijenta kom su potrebni. Preporučljivo pacijent je toplokrvna životinja, još preporučijivije muškarac.

[0018] Takođe je opisana upotreba jedinjenja prema Formuli I ili njegovih farmaceutski prihvatljivih sofi ili solvata kao leka. Preporučljiivo, lek se koristi za tečenje i/ili sprečavanje bolesti kao što je depresija, uznemirenost, psihoza, šizofrenija, psihotični poremećaji, bipoloami poremećaji, kognitivni poremećaji, Parkinsonova bolest, Alchajmerova bolest, poremećaj hiperaktivnosti i deficita pažnje (ADHD), bol, konvulzija, gojaznost, zapaljenske bolesti uključujući sindrom nervoznih creva i poremećaje zapaljenskih procesa creva. emeza, preektampsija. bolesti povezane s disajnirn putevima uključujući i bolesti kao poremećaje zapaljenskih procesa creva. emeza, preeklampsija. bolesti povezane s disajnirn putevima uključujući hroničnu opstruktivnu bolest pluća, astmu, pojačana reaktivnost bronhija, bronhokonstrikcija i kašalj, poremećaji reproduktivnih organa, kontracepcija i bolesti uslovljene polnim hormonom uključujući ali bez ograničavanja na benignu hiperplaziju prostate (BPH), hiperplaziju prostate, metastazi rani karcinom prostate, rak testisa, rak dojke, rak jajnika, androgenorn uslovljene akne, muški tip ćeiavosti, endometrioza, abnormalan pubertet, fibroza materice, fiboirns tumor materice, kancen zavisni od hormona, hiperanđrogenizam, hirsutizam, virilizacija, sindrom pohcističnih jajnika(PCOS), bolest pred menstrualne disforije (PMDD), HAIR- AN sindrom (hiperanđrogenizam, otpornost na insulin i akantoza), hipertekoza jajnika (HAIR-AN sindrom sa hiperpiazijorn luteinizovanih teka ćelija u unutarnjem tkivu (stromi) jajnika), druge manifestacije visokih koncentracija androgena u jajnicima (ripr. zatajenje sazrevanja folikula atrezija anovuiacija, dismenoreja, disfunkcionaino krvarenje materice, neplodnost), tumor koji proizvodi androgen (virilizujući tumor jajnika ili adrenalni turnor) rnenoragija i adenomioza. Lek takođe može da se koristi za tečenje ginekoloških poremećaja, neplodnosti i za uticaj na proizvodnju androgena da bi se prouzrokovala muška kastracija.

Hiralna sinteza 5,6,7, {S-supstituisaniJ-tetrahidro-Il.l.^triazolo^^-ajpirazin jedinjenja

[0019] W-aci)-5,6,7.(8-supstituisan)-tetrahidro-[1,2,4jtriazoio[4,3-ajpirazine opšte Formule I prema ovom pronalasku može da se pripremi na različite načine sa reakcijama poznatim stručnjaku u ovoj oblasti.

[0020] Prijaviiac još predlaže novu hiralnu sintezu za jedinjenja prema ovom pronalasku i posebno za (R}-a-supstituisane-5,6.7,8-tetrahtciro-[1,2,4jtriazoio[4,3-ajpirazin intermeđijare koji mogu da se pretvore u jedinjenja prema Formuli! putem N-acilaeije,

[0021] Različiti sintetički pristupi koji su od opšteg značaja za sintezu (R)-8 metil-5,6,7,8-tetrahii:lro-[1,2:4jtri3zolo[4,3-ajpirazina su poznati u literaturi Primert u nastavku i eksperimentalni usiovi relevantnih pristupa su dati samo kao ilustracija. U Postupku A(i) (videti Šemu A),

[1,2,4]iriazolopirazinsko jezgro tlia(i) je formirano acetilacijom 2-hidrazidopirazna (korak 1} posle kog sledi reakcija ciklodehidractje (korak 2);kortšćenjem postupaka poznatih stučnjacima u ovoj oblasti. Ovu metodologiju su prvobitno razvili Nelson and Potts (J. Org. Chem. 1962, 27, 3243-3248). Naknadna redukcija ptrazinskog prstena sa H2/Pd daje kao rezultat [1,2,4]iriazolo[4;3-ajpiperazinski (korak 3). Ovaj postupak je dobro opisan u literaturi i korišćen, na primer, u Merck, sintezi Sitagliptin (Hansen, K. B. et al. Org. Process Res. Dev. 2005, 9, 634-639 i navedenim referencama). Međutim; i) proučavanje postojeće literature označava da se ovaj postupak generalno koristi za supstrate pri čemu R? = H (t.j. nehiraini analozi, cf. Scheme A), i ii) da je primena ovog postupka da se pripremihiralna varijanta[1,2,4jtriazQio[4,3-a]piperazina opšte Formule IVa(i) (u Postupku Afi}) nije otrkivena. Nedostatak primera supstrata pirazina pri čemu R1>■■■H u ovom postupku može da bude usleđ teškoća u koraku redukcije pirazina; vredna napomene u ovom pogledu je činjenica da u oplimizovanom postupku razmere koji su prikazali Hansenet a!.,pirazin (R<1>- H) redukcija (kora 3, Šema A) je izvedena u samo 51% prinosa. Pored toga za pitanje hemijskog prinosa, pristup hiralnim supstratima kroz redukciju [1 .Č^jtriazoiopirazinskih supstrata pri čemu R^?H će zahtevati dodatni izazov efikasnih uslova astmetrijske hidrogenizacije (u ustavima i prinosa i hiraine čistoće): ovo trenutno nije poznato postupku za najbolju primenu prema uverenju prijavioca ove prijave. Tako je prijava Postupka A(i) zaNralnusintezu struktura [1,2,4]triazoio[4.3 -ajptperazina do saća nije poznata.

(G022JPostupak A(ii) (cf. Šema B) je varijacija na Postupku A(i) pri čemu je zaobiđeno smanjenje R<1>* H supstituisanih supstrata [1,2,4]triazolopirazina. Ovaj postupak je prijavljen od strane Merck grupe u njihovim studijama koje se odnose na Sitagliptin (videti. na primer, Kowaichick, J. E. et al.Bioorg. Med. Chem. Lett. 2007, 17, 5934-5939), pri čemu Boe-zaštićeni mtermeđijari prikazani putem opšte Formule lVa(ii) su đeprotonirani sa jakom bazom, kao što je n-butiiliiijurn, u prisustvu teirarnetiletilendiarnina (TMEDA). posle čega je usfedila terapija tako generisanog anjona sa elekirofilom kao što je alki! halid (korak 4, Šema B). Htraina varijanta ove metodologije nije prijavljena u literaturi.

[0023]Inspirisani ranijim radom od strane Makino and Kato (JP016128261(A), 1994), a još jedan alternativni pristup za sintezu [1,2,4]iri3zoio[4,3-a3piperazini je razvijen koriščenjem hlorometiloksađiazola kao Što je ključni reagens (Balselis, J. et ai. Org. Lett. 2005, 7, 1039-1042). Ova metodologija (Postupak B) se prikazuje u Šemi C dole. Prema izveštaju koji su dali Balseilset ai.,međutim, ovaj pristup nastavlja da daje visok prinos uglavnom kada je jako odvlačenje elektrona R2= CF3grupa je prisutna u hlorometiloksadiazolnom reagensu Pored toga, mehanizam koji su predložili pomenutt autori će dati primenu ove strategije neverovatnom, ako nije nemoguće, za hirainu sintezu IVb intermedijara (cf. Šema C). Svakako, u trenutnoj literaturi samo racemski iii ahiralni proizvodi su opisani koriščenjem takvog pristupa. Dakle, primena Postupka B prema pripremi hiralnih struktura [1,2,4]triazoio[4,3-a]piperazina nikada nije otkriven.

[0024]Još jedan dobro poznat postupak za pripremu [1,2,4]triazolof4,3-ajpiperazina koji sadrži strukture u poznatom u Šemu D ispod (Postupak C). Pored acetiihidrazida na piperazinoimidat (korak 1) sledi ciklođehidracijom da se formira spojeni triazolo prsten (korak 2). Ovaj postupak se dobro dokumentuje u literaturi iako se primer daje samo kroz racemske ili ahiralne strukture, npr.: McCort. G. A.; Pascal, J. C. Teirahedron Lett.. 1992, 33, 4443-4446; Brockunier. L. L. et at. VVO 03/082817 A2; Chu-Mover, M. Y. ei a!. US 6,414,149 B1; Banka, A. et ai. VVO2009/0S9462 A1. Prema najboljem znanju, ovaj prijavilac nije svestan bilo kakvih objavljenih izveštaja o pnrneni ovog postupka za dobijanje htralnh proizvoda pokretanjem iz hiralnih piperazinona (!d na Šemi D).

Simbol * označava dobro deftnisanu konfiguraciju rui centru ugljenika pored kog ji? odmah postavljen pomenuti simbol, t.j. atorn ugljenika na koji se spaja grupa Rlna ovoj Š(?mi.

Scheme P: Methođ C

[0025]Sinteza jedinjenja (/?}-8-metil-5,6,7,8-tetrahidro-[1,2,4jtriazo!o[4,3-ajpirazina putem opšteg Postupka C je prethodno opisana u međunarodnoj prijavi patenta PCT7EP2011/055218 koja je na ime ovog prijavioca. Ovde opiS3n preparat je prijavljen u Šemi E.

NB: Koraci2.i 3 su posebno skioni racemizaciji uprkos grafičkom prikazu hiranlnih proizvoda za svaki od ovih koraka u gornjoj Šemi. Tako, dobijanje intermedijara/proizvoa visoke hiralne čistoće (>80% ee) je izvodljiv ali ne na način koji je moguće reprodukovati.

Šema E: Sinteza intermedi jara ( R)- 8- mefil- S, 6. 7, 8- tetrahidro- f1, 2, 4| tnazoio [ 4. 3- aioirazina u

skladu sa PCT/ EP2011/ 055218.

[0026]Boc-zaštićeni ketopiperazinlleje pripremljen i zatim pretvoren u iminoeiarfilekoriščenjem Meerwein reagensa (npr. Et30BF4). Reakcija ciklodehidracije između acil hiđraziđaIVei gore pomenuti iminoetar je izveden bilo pod prinudnim termalnim usiovima refiuksa, ili primenom prekomerne iradijacije mikrotalasa u zaptivenoj cevi tipično za prilično dugo vreme reakcije (često danima). Kada se koristi iradijacija mikrotalasima. N-Boc došlo je do uklanjanja zaštite tokom pomenutog koraka ciklodehidracije; zato, korak uklanjanja zaštite je bio najčešće bespotrebno izvoditi (t j.,Ifie +IVe~- rVleinŠema E). Međutim, kada se primene usiovi toplotne ciklodehidracije, korak Boo-uklanjanja zaštite je neophodno (t.j., Me +iVe ->Ve-" Vle).

[0027]Kao što je napomenuto u Šemi E iznad, koraci 2 i 3 imaju nedostatke koji značajno ogrnaičavaju primenu pomenutog postupka za upotrebe pri čemu su generisanje hiraine intermeđijare ih proizvode potrebni na način koji se može reprodukovati, kao u slučaj, pripreme farmaceutski aktivnog sastojka, na primer. Korak 1 je formiranje piperazinoimidata (t.j.,lie-> lile) i korak 2 je korak ciklodehidracije između pomenutog imidata i acetilhidraziđa (t.j., I Me +IVe —> Ve).

[0028]Važan nedostatak Šema E postupak je raeemizacija stereogenskog centra ugljenika koji se javio često u koracima 2-3. Shodno tome, pomenuti postupak je završio finalne proizvode koji su bilisamo neretkoprihvatljive hiraine čistoće; zapravo, još češće, Šema £ postupka koji je proizvela finalne proizvode koji su predstavljeni opštom FormulomVfle,koja odgovara jedinjenjima Formule I prema ovom pronalasku, u onorne što se smatra u suštini racemskih onima koji su stručni u ovoj oblasti. Kao takav, pomenuti postupak ne može da se koristi u praksi da se pripremi farmaceutski aktivni sastojak jer ovaj postupak ne isporučuje pouzdano hiraine intermeđijare(lile,Ve. Vle; Šema E) i time ne može pouzdano da se koristi za dobijanje hirainih proizvoda predstavljenih opštom Formulom Vile, koja odgovara jedinjenjima prema Formuli I prema ovom pronalasku.

[0029]Još jedan nedostatak prema postupku prema Šemi E je prekomerno dugo vreme reakcije potrebno za korak ciklodehidracije (Šema E, lile -(■ IVe -> Ve). I do nekoliko dana (u prinudnim usiovima reakcije - videti dole) je uvek bilo potrebno za supstrate predstavljene opštom Formulom Mđ

(Šema D) pri čemu su R v= H, t.j. sterijski zgusnutiji analozi, za razliku od ahirainih supstrata koji su predstavljeni opštom Formulom lid (Šema pri čemu R = H. Tako značajno produženo vreme reakcije (nekoliko dana) nije praktično za takve slučajeve kao što je sinteza cikličnog guanozinmonofosfata (cGMP) u razmeri je potrebna da pripremi farmaceutski aktivni sastojak za kliničke studije.

[0030]Kao sažeti prikaz u gornjem odeljku, u postupku u Šemi E, korak ciklodehidracije je zahtevao izuzetno prinudne usiove. Zato, upotreba viših temperatura pri refluksu (za produženo vreme trajenja), iii dodatno s primenom suštinski maksimalno izvodljvie (unutar margine eksperimentalne bezbednosti) iradijaciju mikrotaiasom (zaptivena posuđa) je često potrebno.

[0031]Prijavilac je pobegao u racernsku sintezu iz racemskog 5,6,7,(8-metil)-tetrahidro-(1,2,4]triazolo|4,3-a]pirazina posle čega je usleđio dodatni hiralni pripremni HPLC korak prečišćavanja posle formiranja finalnog proizoda od interesa prikazanog opštorn Formulom Vile u Šerni E. Pri čemu je bilo izvodljivo u manjoj razmeri za fazu početnog istraživanja I razvoja, takav pristup redstavlja probleme skalabilnosti u smislu vremena, troška i opšte primenljivosti za takve potrebe kao što je cikličnog guanozinmonofosfata (cGMP) u razmeri farmaceutski aktivnih sastojaka, na primer.

[0032]Zbog toga, postoji potreba da se poboljša sintetički postupak za pripremu stereoizometrijski čistih intermedijara 5,6,7,(8 -supstituisanog)-tetrahidro-[1,2,4]triazo!o[4,3-a]pirazina za sintezu jedinjenja

prema ovom pronalasku kojaImaju opšfu Formulu !.

[0033]Ovaj pronalazak se zato takođe odnosi na postupak pripreme jedinjenja intermedijara 5,6,7,(8-supstituisanih)-tetrahidro-[1,2,4jtriazoio[4,3- ajpirazina prema Formuli II

ili njegova so iii solvat, pri čemu

RT je linearan ili razgranat C1-C4 aikil iii C3-C4 cikloalkil, svaka od pomenutih alkil ili cikloalkii grupa, grupe su opciono supstltuisane jednom ili više grupa izabranom iz halo ili estara: iAr2'je 5- do S-čiana aril iii heteroaril grupa, svaka od grupa arila, iii heieroarila je opciono supstituisana jednom ili više grupa izabranih iz halo, aikil. haloatkii, cikloalkil, heteroalkil, heterocikiil, aril, heteroaril, htdroksil, alkoksi. alkilamino, karbamoil, alkilkarbamoil, karbamoiialkil, karbamoilamino. alkilkarbamoilamino, alkiisulfonii, haloalkilsulfonil, arilsulfoniialkil, suifamoii, alkilsulfamoil, alkilsulfoniiamino, haloalkilsuifoniSamino, fuzionisan na ari! ili heteroaril grupu može da bude jedan iii više cikloakiil, aril, heterocikiil iii heteroaril delova, svaki od pomenutih supstituenata se opciono supstituiše jednim ili više dodatnih supstituenata odabranih iz halo, alkil, haloaikii, alkoksi, haioalkoksi;

pomenuti postupak obuhvata sledeće korake:

a) reagovanje jedinjenja prema Formuli A

pri čemu

R<1>' je kao što je gore definisano;

sa reagensom koji daje kao rezultat N-sp3 zaštitnu grupu (PG) na jedinjenja azot-amina prema Formuli A, da se dobije jedinjenje prema Formuli C

b) pretvaranje jedinjenja prema Formuli C s tri(C1-C2 alkil) oksonijum soli lako da se dobije jedinjenje prema Formuli D pri čemu R^' i PG jesu kao stoje gore definisano, i je C1-C2 alkil, u prisustvu baze; c) reakcija jedinjenja Formufe D sa jedinjenjem FormuleE

ili so ili njenog solvata, pri čemu

Ar<2>' je kao što je gore definisano u smislu Formule II;

tako da se dobije jedinjenje prema Formuli F

pri čemu R"<*>', PG, i Ar<2>' jesu kao što je definisano iznad; i

d) uklanjanje zaštite jedinjenja prema Formuli F s pogodnim reagensom uklanjanja zaštite da se dobije jedinjenje prema Formuli II ili njegova so ili soivat.

[0034]Postupak prema ovom pronalasku daje jedinjenja prema Formuli II ili so ili njen sotvat imaju dobar enantiomerni višak od najviše 38% i po mogućstvu više na način koji se može reprodukovati.

[0035]Postupak prema ovom pronalasku nastavlja sa zadržavanjem siereohemtje u pogledu početnog materijala hiralnog (3- supstituisanog>-piperazin-2-ona osim u meri da dolazi do racemizacije kao manje prateće reakcije; zato se konfiguracija na poziciji 3 ovog prstena definiše konfiguracijom gore pomenutog hiralnog početnog materijala.

[0036]Prema izvođenju koje je preporučeno, kroz upotrebu hiralnog 3-supstituisanog-piperazin-2-or» početnog materijala, postupak prema ovom pronalasku obezbeđuje pristup jedinjenjima 5,6,7,{{R)-8-supstituisanih}-tetrahidro-[1,2,4jtriazolo[4,3-ajpiraziria tako što će sva interventna racemizacija tokom procesa svesti na minimum.

[0037]U drugom varijantnom rešenju, ovaj pronalazak daje jedinjenja prema Formuli D

pri Čemu seR-*'definiše kao gore u smislu Formule II;

PGje zaštitna grupa pri čemu azot arnin ustaje kao tercijarni amin (t.j. sp<3>hibriđizovani azot), u daljem tekstu se pominje kao N--sp<3>zaštitna grupa: i

R"10je C1-C2 aikil, preporučljivo etil.

[0038]U drugom varijantnom rešenju, ovaj pronalazak daje jedinjenja prema Formuli Ili

ili njegovu so ili solvat, pri čemu

pri čemu seR"1'iAr2"đefinišu kao gore u smislu Formule li; i

R"'''je H ili N-sp<3>zaštitna grupa,

pod uslovorn da jedinjenje Formule II! nije

(R)-4~(8-metil-5,SJ,84etrahic1ro^1,2,4]triazoot[4,3-a]pirazin-34i)-2-fenikiazol hidrohlorid, (Rj-B-metil-S-^pirdin^-ilJ-S.SJ^-telrahidro-il 2,4]triazolo[4,3-a]p!razin dihiđrohloriđna so.

(R)-2-(4-hlorafenii)-4-(8-metii-5,6.7^

hidrohlorid na so,

(R)-2-(4-mjorofenil)-4-(8-metil-5;6,7,8^

hidrohlorid na so,

(S)-8-metil-3-{piridin-2-il)-5:6,7,8-tetrahidro-[1,2.4]triazoioE4.3-a]pirazin, (S)-2-(4-nuoropheny!)-4-{8-metil-5,6Jp8^

(S)-4-(4-(8-metil-5.6,7,8-tetrahidro-[1.2.4]triazolol4,3-ajpirazin-3Hl)tia2ol-2-!l)morfolln.

DETALJ AN OPIS

JEDINJENJA

[0039]Kako je gore navedeno, ovaj se pronalazak odnosi na jedinjenja u Formuli I, kao i na njihove farmaceutski prihvatljive soli ili solvate.

[0040]Prema jednom izvođenju, ovaj pronalazak obezbeđuje jedinjenja prema opštoj Formuli i':

i njegovi farmaceutski prihvatljivi sotvati, pri čemu

Ar<1>jeste nesupstituisani tiofen-2-ii, nesupstituisani fenil, ili 4-fluorofenN;

R1 je H ili metil;

R2 je linearni ili razgranati C1-C4 aikil, C1-C2 haioalkil, linearni ili razgranati C2-C3 alkenii. C3-C4 cikloalkil Mi di[C1-C2 alkil)amino;

X% N ili C-R<e>pri čemu R? je H, fluor ili C1-C2 alkil:

X<2>je O iii S:

X<3>je N, ili x<3>je CH pod uslovorn da X<->' jeste IM i X<2>jeste N-R<7>pri čemu R<7>je linearan iii razgranat C1-C3 alkil ili ciklopropil; pod uslovorn da jedinjenje prema Formuli i' nije (3-(2-izobutiltiazol-4-ii)-5I6-dihidro-t1,2,4]triazolof4,3-a]pirazin-7(8H)-il)(4-{tiofen-2-ii)fenii)metanon.{0041]Preporučena jedinjenja prema Formuli I' i njihovi farmaceutski prihvatljivi snivati su ona kod kojih: Ar^ je nesupstituisani ticfen-2-il iii nesupstituisani fenil. preporučljivo Ar"<*>je nesupstituisani tiofen-2-il; i/ili

R? je H iii metil, preporučljivo R<1>je metil; t/ili

R<2>je linearni ili razgranati C1-C3 aikil. C1-C2 haloalkil, linearni ili razgranati C2-C3 alkenil, ciklopropil ili đi(C1 -C2 aikil) amino, preporučljivo R<2>je metil, etil, vlnil,/zo-propil,/'zo-hutil, C1 fluoroaikil, ciklopropil ili dimetiiamirio, još preporučljivije R<2>je metil, etil,/zo-propii, trifluorometil ili ciklopropil, i još preporučljivije R<2>je metil, etil iii /zo-propil; još preporučljivije R<2>je metil i/tti x1 je C-R^ pri čemu jeste H ili metil, preporučljivo X"<*>je CH; i/ili

X<2>je O ili S:preporučljivo X<2>je S; i/ili

X3 je N,

[0042]Kod jednog izvođenja, preporučena jedinjenja prema Formuli I' su ona u Formuli I' 1

i njegovi farmaceutski prihvatljivi solvati, pri čemu Ar<1>, R<1>, R<2>, x<1>i X2 jesu kako je definisano iznad u Formuli i'.

[0043]Preporučena jedinjenja prema Formuli !' 1 i njihovi farmaceutski prihvatljivi solvati su ona kod kojih

Ar"<1>je nesupstituisani tiofen-2-il ili nesupstituisani fenil. preporučljivo Ar<1>je nesupstituisani tiofen-2-il: i/ili

R? je H ili metil, preporučljivo R<l>je metil: i/ili

R2 jelinearni ili razgranati C1-C3 alkil, C1-C2 haloalkil. linearni ili razgranati C2-C3 alkenil. ciklopropil ili di(C1-C2 alkiljammo, preporučljivoR2 jemetil, etil, vmil. /zo-propil. /zo-butil,C1 fluoroalkil, ciklopropil ili dimetilamino, još preporučljivijeR<2>je metil, etil /zo-propil. trifluorometii ili ciklopropil, i još preporučljivijeR<2>je metil, etil ili/zo-propil; još preporučljivijeR<2>je metil i/iliX^je C-R<6>pri čemu R6 jeste H ili metil, preporučljivo X"1 je CH i/ili

X<2>je O ili S. preporučljivoX<2>je S

[0044]Kod jednog izvođenja, preporučena jedinjenja prema Formuli I" 1 su ona u Formuli l'a i I' b:

i njegovi farmaceutski prihvatljivi solvati. pri čemu

Ar'', R<2>, X<1>i X<2>su kao što je definisano gore u Formuli I'

[0045]Preporučena jedinjenja prema Formuli I' i l'b su ona kod kojih

Ar^ je nesupstituisani tiofen-2-il ili nesupstituisani fenil preporučljivo Ar^ je nesupstituisani tiofen-2-il; i/ili

R2 je linearni ili razgranati C1-C3 alkil. C1-C2 haloalkil. linearni ili razgranati C2 C3 alkenil. ciklopropil ordi(C1-C2 alkil)amino, preporučljivo R<2>je metil, etil. vmil. /zo-propil,/zo-butil.C1 fluoroalkil. ciklopropil ili dimetilamino. još preporučljivije R<2>je metil, etil. /zo-propil. trifluorometii ili ciklopropil, a i još preporučljivije R<2>je metil, etil ili/zopropil: i dodatno se preporučuje R<2>je metil i/ili

X<1>je C-R<6>pri čemu R<6>jeste H ili metil, preporučljivo X<1>je CH; i/ili

X<2>je O ili S. preporučljivo X<2>je S

[0046] Kod jednog izvođenja, preporučena jedinjenja prema Formuli I" 1 su ona u Formuli l'c i I' d

i njihovi farmaceutski prihvatljivi solvati. pri čemu

R<1>, R<2>, X^ i X<1>su kao što je definisano gore u Formuli I

[0047] Preporučena jedinjenja prema Formuli l'c i l'd su ona kod kojih

R<1>je H ili metil, preporučljivo R^ je metil: i/ili

R<2>je linearni ili razgranati C1-C3 alkil, C1-C2 haloalkil. linearni ili razgranati C2-C3 alkenil. ciklopropil ili di(C1-C2 alkiljamino, preporučljivo R<2>je metil, etil, vmil./zo-propil./zo-butii.C1 fluoroalkil. ciklopropil ili dimetilamino, još preporučljivije

R<2>je metil. etil./zo-propil, trifluorometii ili ciklopropil, i još preporučljivije R<2>je metil, etil ili izo-propil, još preporučljivije R<2>je metil i/ili

X1 je C-R<6>pri čemu R<*>>jeste Fi ih metil, preporučljivo X^ je CH, i/ili

X<2>je O ili S, preporučljivo X<2>je S

[0048] Kod jednog izvođenja, preporučena jedinjenja prema Formuli I' 1 su ona u Formuli l'e i l'f:

i njegovi farmaceutski prihvatljivi solvati, pri čemu

Ar^, R<1>, R<2>ir<6>su kao stoje definisano gore u Formuli I'.

[0049]Preporučena jedinjenja prema Formuli l'e i l'f su ona kod kojih

Ar<1>je nesupstituisani tiofen-2-il ili nesupstituisani fenil. preporučljivoAr<1>je nesupstituisani tiofen-2-il; i/ili

R<1>je H ili metil, preporučljivo R<1>je metil; i/ili

R<2>je linearni ili razgranati C1-C3 alkil, C1-C2 haloalkil, linearni ili razgranati C2-C3 alkenil. ciklopropil ili di(C1-C2 alkiljamino, preporučljivo R2 je metil, etil, vmil. /zo-propil,/zo-butil.C1 fluoroalkil, ciklopropil ili dimetilamino. još preporučljivijeR<2>je metil. etil. /zo-propil. trifluorometii ili ciklopropil, a i još preporučljivijeR<2>je metil, etil Mi/zopropil, a i još preporučljivije R<2>je metil i/ili

R^je H ili metil, preporučljivoR^je H

[0050]Među jedinjenjima prema Formuli l'e i l'f. ona prema Formuli l'f se preporučuju

[0051]Druga preporučena jedinjenja prema Formulama l'e i l'f su ona prema Formulama l'e-1. l'f-1, l'e-2i l'f-2

i njegovi farmaceutski prihvatljivi solvati, pri čemu

pri čemu se R? , R<2>i R<6>definišu kao gore u Formuli I"

[0052]Preporučena jedinjenja prema Formulama l'e-1 i l'f-1 l'e-2 i l'f-2 su ona kod kojih

R<1>je H ili metil, preporučljivoR<l>je metil: i/ili

R<2>je linearni ili razgranati C1-C3 alkil. C1-C2 haloalkil, linearni ili razgranati C2-C3 alkenil. ciklopropil ili di(Cl-C2 alkiljamino, preporučljivoR?je metil, etil. vmil. /zo-propil. /zo-butil C1 fluoroalkil ciklopropil ili dimetilamino, još preporučljivijeR<2>je metil. etil. rzo-prapil. trifluorometii ili ciklopropil. a i još preporučljivijeR<2>je metil, etil ili /zopropil. je preporučljivije da jeR<2>metil i/ili

R® jeH ih metil, preporučljivoR<6>je H

[0053]Među jedinjenjima u Formulama \ e-1, l'f-1. l'e-2 i l'f-2. ona prema Formulama l'f-1 i l'f-2 se preporučuju, ona prema Formulama l'f-2 se još više preporučuju

[0054]Preporučena jedinjenja u Formuli l'e-2 su ona u Formuli I' e-3

i njegovi farmaceutski prihvatljivi solvati, pri čemu

R<2>je kako je definisano gore u Formuli l'e-2. preporučljivo R<2>je metil. etil./zo-propil. /zo-butil, vmil. ciklopropil, trifluorometii ili dimetilamino, još preporučljivije R<2>je metil, etil/zo-propil ili ciklopropil, još preporučljivije R2 je metil, etil ili/zo-propil, i još preporučljivije R<2>je etil ili/zo-propil. i još preporučljivije R<2>je /zo-propil.

[0055] Preporučena jedinjenja u Formuli l'f-2 su ona u Formuli l'f-3

i njegovi farmaceutski prihvatljivi solvati, pri čemu

R<2>je kako je definisano gore u Formuli l'e-2, preporučljivo R<2>je metil etil, jzo-propil,/zo-butil. vmil. ciklopropil. trifluorometii ili dimetilamino, još preporučljivije R<2>je metil. etil./zo-propil, vinil. ciklopropil ili dimetilamino još preporučljivije R<2>je metil, etil, /zo-propil. vmil ih dimetilamino, i još preporučljivije R<2>je metil ili etil, a i još preporučljivije R<2>je metil

[0056] Kod jednog izvođenja, jedinjenja prema Formuli I<1>1 su ona u Formuli l'g l'h i l'i

i njihovi farmaceutski prihvatljivi solvati, pri čemu

Ar<1>, R^, R<2>i R<7>su kao što je definisano gore u Formuli I'

[0057] Prema jednom izvođenju, ovaj pronalazak obezbeđuje jedinjenja prema opšto; Formuli I"

i njegovi farmaceutski prihvatljivi solvati, pri čemu

Ar?jeste nesupstituisani tiofen-2-il. nesupstituisani fenil. li 4-fluorofenil,

R<1>je H ili metil.

R<3>je linearni ili razgranat C1-C4 alkil ili C3-C4 cikloalkil

R<4>je N ili C-R<8>pri čemu R<8>je H ili C 1-C2 alkil.

X5 je O ili S.

X8 je N, ili X<8>je CH pod uslovorn da X<4>jeste N i X<5>jeste N-R<9>pri čemu R<9>je linearan ili razgranat C1-C3 alkil ili ciklopropil.

[0058] Preporučena jedinjenja prema Formuli I' i njihovi farmaceutski prihvatljivi solvati su ona kod kojih

Ar<1>je nesupstituisani tiofen-2-il ili nesupstituisani fenil, preporučljivo Ar^ je nesupstituisan ttofen-2-il; i/ili

R^ je H ili metil, preporučljivo R<1>je metil; i/tli

R<3>je metil ili /zo-propil, i/ili

X<4>je N ili C-R<8>pri čemu je R<8>H ili metil, X<5>je O ili S i X<6>je N. preporučljivo X<4>je N ili C-R<8>pri čemu R<8>je H ili metil, X<5>je S i X<6>je N. i/ili

X<4>je N, X<5>je N-R<9>pri čemu R<9>jeste metil i X<6>jeste CH

[0059]Kod jednog izvođenja, preporučena jedinjenja prema Formuli I" su ona u Formuli I "a i l"b

i njegovi farmaceutski prihvatljivi solvati. pri čemu

Ar<1>,R3,X<4>, X<5>iX8su kao što je definisano gore u Formuli I"

[0060]Među jeđinjenjima prema Formulama l"e i l''b. preproučuju se ona prema Formuli l"b.

[0061] Koci jednoa .zvorlenis Drepomčen« '^i^i^mci čir--? "V--U.1! ; u r-'^.^r^<v>::?'.;:

i njegovi farmaceutski prihvatljivi solvati, pri čemu

R^, R3, X4, X$ i X*> su kao što je definisano gore u Formuli I".

[0062] Preporučena jedinjenja prema Formulama l"c i !"d su ona kod kojih R? je H iii metil, preporučljivo R<1>je meti!; i/ili

R<3>je metii ili /zo-propil; i/ili

X4 je N ili C-R<8>pri čemu je R<8>H ili metil, X^ je O ili S i X^ je N, preporučljivo X4 je N ili C-R<8>pri čemu R<8>je H ili metii,

X5 je S i X6je N; i/ili

X4 je N, X<5>je N-R<9>pri čemu R<9>jeste metil i X<6>jeste CH.

[0063] Kod jednog izvođenja, preporučena jedinjenja prema Formuli I" su ona u Formulama i"e, l"f, I" g, l"h i l"i:

i njegovi farmaceutski prihvatljivi solvati, pri ćernu

Ar'', R^, R3, r<8>j r<9>su kao što je definisano gore u Formuli I".

[0084] Preporučena jedinjenja prema Formulama I"e, l"f, l"g, i"h i l"i su ona kod kojih Ar<1>je nesupstituisani tiofen-2-il ili nesupstituisani fenil, preporučljivo Ar^ je nesupstituisani tiofen-2-il; i/ili

R<1>je H ili metil, preporučljivo R<1>je metil; i/ili

R3 je metii ili /zo-propil; i/ili

R<8>je H ili metil, preporučljivo H: i/ili

R9 je metii;

[0065] Među jedinjenjima prema Formulama l"e, l"f, l"g, l"h i !"i. ona u Formulama l"e, l"f, l"g i l"h se preporučuju, posebno ona u Formulama l"f i l"h se dodatno preporučuju.

[0066]Druga preporučena jedinjenja prema Formulama l"e, l"f, i"g, i"h. i l"i su ona u Formulama l"e-1. !"f-1, l"g-1, l"h-1. I"i-1, re-2, H-2, l"g-2, l"h-2 i !"i-2

i njegovi farmaceutski prihvatljivi solvati, pri čemu

R1, R3 iR9 jesukako je definisano u Formuli !".

{0067] Preporučena jedinjenja Formule l"e-1, !"f-1. i"g-1, l"h-1, |"i-1. i"e-2, H-2, l"g-2, l"h-2 i !"i-2 su ona kod kojih

R? je H iii inetil: preporučljivoR"<*>je metil; i/li i

R? je metii ili /zo-propil; i/tii

R<8>je H ili metil, preporučljivo H: t/ili

R<S>je metil;

[0068] Među jedinjenjima u Formulama l"e-1, l"f-1, !"g-l, l"h-1, l"i-1, l"e-2, i"f-2, i"g-2, i"h-2 i l"i-2, preporučuju se ona u Formulama Fe-1, l"M, i"g-i, i"h-l, l"e-2, l"f-2, i"g-2 i l"h-2, posebno ona u Formulama f'f-1, l"h-1, i"f- 2 i l"h-2 se dodoatno preporučuju.

[0069] U opštern varijantnom rešenju, ovaj pronalazak daje jedinjenja koja imaju opštu Formulu I":

i njihove farmaceutski prihvatljive soli i solvate, pri čemu

Ar''je nesupstituisani fenil, nesupstituisani tiofen-2-i! ili 4-fluorofenil;

R4 je halo, cijano, metil, ili hidroksil;

R5 Je H iii halo;

pod uslovorn da jedinjenje Formula !" nije

(1.1-bifenil]-4-i!(8-metil-3-{6^^

(8-metii--3-(6Tnetilpiridin-2-i!)-5,6-đibtđro--n^ il)fenil)metanon.

[0070]Preporučena jedinjenja prema Formuli i'" i njihove farmaceutski prihvatljive soli i solvati su oni kod kojih

Ar<1>je nesupstituisani fenil. iii nesupstituisani tiofen-2-i! još preporučljivije Ar1 je nesupstituisani fenil; i/ili

R4 jecijano, meti! iii hidrokst, preporučljivoR4 jecijano ili metil, još preporučljivijeR<4>jemetil, iR5 jeH; i/ili

R<4>je metii i R<5>je hloro.

[0071]Kod jednog izvođenja, preporučena jedinjenja prema Formuli I"' su ona u Formulama l"'a i i"'b:

i njihove farmaceutski prihvatljive soli i solvati, pri čemu R<4>i R<5>su kako je definisano iznad u Formuii

[0072] Preporuče na jedinjenja u Formulama \"" s i l'"b su ona kod kojih

R4 jecijano, metii ili hidroksi, preporučljivoR4 jecijano ili metil, još preporučljivijeR<4>jemetii, i je H; i/ih

R<4>je metil iR*>je hioro.

[0073]Posebno preporučena jedinjenja u Formuli I prema ovom pronalasku su ona koja su navedena u Tabeli 3 u nastavku:

[0074]U Tabeli 1, pojam "Jdnj" znači jedinjenje.

[0075] Jedinjenja prema Tabeii 1 su nazvana koriščenjem ChemDraw<®>Ultra version 12.0 {CambriđgeSoft. Cambriđge, MA, USA).

[0076] Jedinjenja prema Formuli I mogu da se priprema na različite načine sa reakcijama poznatim stručnjaku u ovoj oblasti. Šeme reakcije kako su opisane u odeljku sa primerima su samo ilustrativne i ne treba ih ni u kom pogledu tumačiti kao ograničenja pronalaska. Prema jednom izvođenju, jedinjenja u Formuli I mogu biti pripremljena koriščenjem hiraine sinteze pronalaska detaljno prikazan u nastavku.

[0077]Ovaj pronalazak je još usmeren na upotrebu jedinjenja prema ovom pronalasku iii njegovih farmaceutski prihvatljivih soli ili solvata kao antagonista za NK-3 receptor.

[0078] Sa tim u skladu, u posebno preporučenom izvođenju, ovaj pronalazak se odnosi na upotrebu jedinjenja prema Formuli l i pođformulama preciznije onima u tabeli I iznad, ili njihovim farmaceutski prihvatljivim solima ili solvatima, kao antagonista NK- 3 receptora.

HIBALNA._S1NILEZA

[0079J Kao što je gore navedeno, ovaj pronalazak se odnosi na novi poslu pak za pripremu jedinjenja prema Formuii I! koja obuhvata gore opisane korake a) do d).

[0080]U jednom izvođenju, postupak prema ovom pronalasku je usmeren na pripremu jedinjenja 5,6,7,{8-supstituisanihHetrahidro-t1,2,4jtriazolo[4,3-a]pirazina u Formuli i! kako je definisano iznad iii njihovih soli ili solvata. pri čemu R^' i Ar<2>' jesu kako je definisano gore; i koraci a) do d) su kao u nastavku:

a) reagovanje jedinjenja prema Formuli A

pri čemu je R1' je kao što je gore definisano; sa rsagensom koji daje kao rezultat N-sp3 zaštitnu grupu na jeđinjeniu azot amina prema Formuii A Formule B1, ili Formule B2

pri čemu,

Ri2, R12!,R13(R13" jR14 su H, ili r14 je metoksi iR12,R^2', R*3 iR13' suh, ili r12 i r14sumetoksi i R"*2',R^3 iR^3' su Fl, ili R^2, R12' ; R14su metoksi iR13 iR13'su hi Xje Cl, Br, I, OMs, OTs, OTf,

bilo kroz direktnu aikifaciju azota amina kada se koristi jedinjenje prema Formuli B2, iii u prisustvu redukujućeg agensa kada se koristi jedinjenje prema Formuli B1 koristi se da se na kraju dobije jedinjenje prema Formuli C-1

pri četnu R1, R12R^2', R^3,R^3iR"*4 su kao što je definisano gore; b; pretvaranje jedinjenja prema Formuli C-1 s tri(C1-C2 alkil) oksonijum soli (reagensi tipa Meervvein). ili (C1-C2}alkilsuifat, ili (C1-C2) hloroformat, ili upotreba PCi5/POCl3/(C1-C2) htdroksiaikil tako da se dobije jedinjenje prema Formuli D-1

pri čemu Rr,R12, R12\R13,R13' »R1<4>su kako je definisano iznad iR10 je C1-C2 aikil, u prisustvu baze;

c) reakcija jedinjenja Formule D-1 sa jedinjenjern Formule E

ili njegove soii ili solvata, pri čemu

Ar2' je kako je definisano u Formuli II;

tako da se dobije jedinjenje prema Formuli F--1

pri čemu R<1>, R<->*2,R12',R13,R13'iR14 i Ar<2>" su kao sto je definisano gore; i

d) uklanjanje zaštite jedinjenja prema Formuli F-'l s pogodnim reagensom uklanjanja zaštite kako je ovde definisano da se dobije jedinjenje prema Formuli ii ili njegova so solvat.

[0081]Preporučena jedinjenja prema Formuli II i njihovi soli sli solvati su ona kod kojih R<1>' je linearan ili razgranat C1-C4 alki: ili C3-C4 cikloalkil, svaka od pomenutih alkil iii cikloalkil grupa, grupe se opciono supstituišu jednom estar grupom; preporučljivo R^' je linearni ih razgranati C1-C4 alkil ili C3-C4 cikloalkil; ili

R<1>' je C1-C2 alkil, opciono supstituisan jednom estar grupom: preporučljivo R<1*>je metil opciono supstituisan jednom estar grupom, još preporučljivije R"*' je metil; i/ili

Ar<2>' je 5- do 6-člana aril ili heteroaril grupa, svaka od aril, ili heteroaril grupa je opciono supstituisana jednom ili više grupa izabranih iz halo, aikil, haloalkil, cikloalkil, aril. heteroaril, hidroksil, alkoksi, alkilamino, karbamoil, alkilkarbamoil, karbamoilalkil, karbamoilamino, alkilkarbamotlamino. ili spojen na arii ili heteroaril grupu može da bude jedan ili više cikloalkil, aril, heterocikloaikil, aril, heterocikiil ili heteroaril deo, svaki od pomenutih supstituenata je opciono supstituisan jednim ili više supstituenata izabranih iz halo, alkti, haloalkil, alkoksi, haloalkoksi; preporučljivo Ar<2>' je 5- do 6-čfana aril ili heteroaril grupa, svaka od tiharil ili heteroaril grupa je opciono supstituisana jednom Ili više grupa izabranim iz halo, alkil. haloalkil, cikioalkil, aril, heteroaril, hidroksil, alkoksi, aSkitamino, karbamoil, alkilkarbamoil, karbamoilalkil, karbamoilamino, alkilkarbamoilamino,; još preporučljivije Ar<2>' je 5- do 6-člana ari! iii heteroaril grupa, svaka od arii, ili heteroaril grupa se opciono zamenjuje jednom ili više grupa izabranim iz halo, alkil, haloalkil, cikloalkil, aril, heteroaril, hidroksil, alkilamino.; i još preporučljivije Ar<2>' je 5- do 6-člana arii iii heteroaril grupa, svaka od aril, ili heteroaril grupa se opciono supstituiše jednom ili više grupa izabranim iz fluoro. razgranantog ili linearnog C1-C4 alkila, C3-C4 cikioalkila ha!o(C1)alki!a, ciklopropila, arila, hidroksila, alkiamina i još preporučljivije Ar<2>' je 5- do 6-člona heteroaril grupa izabrana iz grupe koja se sastoji od prstenova (i), (ii)i (iii)

pri čemu

X"<!>je N ili C-R<8>pri černu R<6>je H, fluoro ili metii: preporučljivo X<1>je C-R<6>pri čemu R<6>je H ili metii, još preporučljivije

X1 je CH; i/ili

X<2>je 0 ili S; preporučljivo X<2>je S; i/ili

X<3>je N, ili X<3>je CH pod uslovorn da X"<!>jeste N i X<2>jeste N-R<7>pri čemu R? je linearan iii razgranat C1-C3 alkil iii ciklopropil; preporučljivo X<3>je N; i/ili

R<2>' je linearni ili razgranati C1-C4 alkil, C1-C2 haloalkil, linearni ili razgranati C2-C3 alkenil, C3-C4 cikloalkil, di(C1-C2 atkiljamino; fenil, 4-fluorofenil, 2,4-difluorofenii iii N-morfolinil; preporučljivo R<2>' je metil, etil, izopropil C1 fluoroalkil, ciklopropil, dimetilamino, fenil, 4-fluorofenil. 2,4-đsfluorofenil ili N-morfolinil; još preporučljivije R<2*>je metil, etil, /zo-propil, trifluorometii iii ciklopropil, i još preporučljivije R<2>' je metii, etil ili /zo-propil; još preporučljivije R<2<>je metil i/ili

X4 je N ili C-R<8>pri čemu R<8>je h iii C1-C2 alkil, X<$>je O ili S, X<6>je N iii X<6>je CH pod usiovom da X4 je N i X<5>je N-R<9>pri čemu R? je C1-C2 alkil ili C3 alkii ili C3 cikloalkil, iii X<4>je N, X<§>je N-R<9>pri čemu R<9>je metii i X*> je CH; preporučljivo X4 je N iii C-R<8>pri čemu je R<8>H iii metil, X^ je O ili S i X<8>je N, još preporučljivije X<4>je N ili C-R<8>pri černu R<8>je H ili metil, X<5>je S i X<6>je N; i/i!i

R<3>' je linearni iii razgranati C1-C4 alkil, C1-C2 haloalkil. linearni ili razgranati C2-C3 alkenil, C3-C4 cikloalkil, di{C1-C2 alkil)amino: fenil, 4-fluorofenil. 2,4-diftuorofenil ili N-morfolinil; preporučljivo R<3>'je linearni ili razgranati C1-C4 aikil ili C3 cikloalkil: još preporučljivije R<3>'je metil ili izopropil: i/ili R<4>' je cijano, C1-C2 alkil ili hidroksil, preporučljivo R<4>' je cijano, metil ili hidroksil, preporučljivo R<4>' je metil ili hidroksil, još preporučljivije R4' je metil.

{0082] Posebno preporučena jedinjenja u Formuli II su ona koja su navedena u tabeli 2 u nastavku:

[0083] Jedinjenja prema Tabeli 2 su nazvana koriošćenjem CbemDravv Ulira 12<®>kupljena od CambridgeSoft (Cambridge, MA, USA).

[0064] U daljem tekstu, opis postupka prema ovom pronalasku primenjuje se na postupak prema ovom pronalasku kako je defmisan gore, uključujući sva opisana izvođenja.

[0085] Korak a) ovog postupka kako je definisano iznad je priprema jedinjenja prema Formuli C kroz reakciju grupe amina jedinjenja prema Formuli A sa reagensom koji daje kao rezultat N-sp<3>zaštitinu grupu, kako je ovde definisano. na amin-azotu jedinjenja prema Formuli A koriščenjem standardnih usiova reduktivne aminacije.

[0066] Jedinjenja prema Formuli A se pogodno biraju iz onih gde je R<1>' C1-C4 alkil, svaka od pomenutih alkil grupa se opciono supstttuiše jednom ili više grupa izabranih iz halo ili estara, preporučljivo R1' je metil.

[0087] Ova reakcija daje kao rezultat zaštitu azota amina za piperazinone u Formuli A sa gore definisanom N-sp<3>zaštitnom grupom (jedinjenje prema Formuf; C), posebno sa benzilnom zaštitnom grupom kada se jedinjenje prema Formuli Đ1 Mi B2 koristi (jedinjenje prema Formuli C-1).

[0088] Ovaj reagen daje kao rezultat N-sp<3>zaštitnu grupu (PG), kako je ovde definisano, na jedirtjenju azot-amtna prema Formuli A je kao prednost jedinjenje prema formuli Formuli B1 ili B2 kako je definisano gore Jedinjenje prema Formuli S1 ili B2 se bira kao povoljncst između onih gde je R"<*4>metoksi i R"*2,R^2', r13 jR<13>' su H, iliR12 i r14su metoksi i R<1>2',R13 iR^3' suH, ili R^<2>R<12;>|R14 su metoksi i R*3 j r13' su H, preciznije jedinjenje prema Formuli B je jedno gde R^<2>i R^<4>su metoksi i R"12',R13 iR13' SLt H; i/ili

[0089] Pojam "benzilne zaštitne grupe" prema ovom pronalasku se definiše kao benzii (Bn).. 4-metoksibenzil (PMB), 2,4-dirnetoksibenzil (DMB) i 2,4,6-trimetoksibenzil (TMB), među kojima su DMB ? TMB, preciznije DMB, preporučene.

[0090]Ove benzitne zaštitne grupe su se pokazale kao povoljne jer je njihova upotreba kao rezutlat dala značajno smanjenje racemizacije tokom koraka b), c) i d) u poređenju sa drugim zaštitnim grupama kao što je Boe (ferć-butiloksikar- bonil) i Cbz (karbobenziloksi) kada su korišćene da se izvedu koraci b), c) i d).

[0091]Bez isključivog ograničavanja na bilo koju teoriju, ovaj prijavialc razmatra dve pretpostavke kao potencijalno relevantne za značajna poboljšanja u poboljašnom postupku hiraine sinteze opisanom u ovom pronalasku. Prvo, da N-sp<3>zaštitne grupe, kako su ovde definisane. npr. Bn. PMB. ĐMB, TMB, kao suprotnost "N-sp<2>zaštitnih grupa", t.j. karbamati kao što je Boe, Cbz. Alloc (aliloksikarbonil), može da se smatra da odvlači manje elektrona tako se daje vodonik na centru stereogenskog ugljenika manje pogodan i, samim tim, manje sklon racemizaciji. Druge, veća efikasnost reakcije u smislu vremena reakcije i generalno blažim usiovima reakcije (npr. uklanjanje potrebe za većim viškom Meerwein reagensa) primećenim i u trenutnom formiranju (korak b) i koraci ciklodehidracije (korak c) sa N-sp<3>zaštitnom grupom kao šio je Bn, PMB, DMB verovatno doprinosi zadržavanju hiraine čistoće koja nastaje od početnog materijala, npr. ruralni oblik 3-metiipiperazin-2-ona, i, shodno tome dostavljanje njihovih intermedijara i finalnih proizvoda prema ovom pronalasku u visokoj enantiomemoj čistoći kako je ovde definisano.

[0092]Kako se ovde već iznosi, korak a) se izvodi u prisustvu redukujućeg agensa. Pojam "redukujućeg agensa" kako se ovde koristi znači sve reagensekoji mogu da smanje imin na amin, kao što su pogodni hidrogenolitni uslovi, uključujući ali ne ograničavajući se na korišćenje NaBH,* i povezane derivate, tri(C1-C2.alkyi)siiai, borane, i hidrid-transfer

reagenasa.

[0093]Redukujuči agens je povoljan za upotrebu aikalni katjon borohiđriđni reagens, koji se preporučljivo bira iz grupe koja se sastoji od natrijum borobidrida, natrijum cijanoborobiđrida, natrijum triacetoksiborohidrida, natrijum trifluroracetoksiborohidrida, još preporučljivije redukujuči agens je natrijum triacetoksiborohidrid.

[0094]Korak a) se izvodi u skladu sa standardnim postupcima dobro poznatim stućnjacima u oboj oblasti (Videti na primer Wuts, P. G. M.; Grešne, T. VV. In "Greene's Protective Groups in Organic Synthesis", Wiley-!nterscience: New York, 4th Eđition, Chap. 7, pp. 696-926, and (b) Kocien'ski. P. J. In "Proiectirig Groups", Georo Thieme Verlag: Stuttgart, New York; 3rd Edition, Chap. 8. pp. 487-643).

[0095]Intermedijari prema Formuli A mogu da budu opciono prečišćeni hromatografijom na svettečoj koloni nad silicijumskim gelom, i/ili taloženje, i/ili trituracija, i/ili filtracija, i/ih rekristalizacija.

[0096]Drugi korak prema postupku, korak b). je konverzija jedinjenja ketopiperazina prema Formuli C na jedinjenja iminoetra prema Formuli D. preciznije jedinjenja ketopiperazina Formula C-1 na jedinjenja iminoetara prema Formuli D-1.

[0097] Za razliku od slučaja sa !M-sp2 zaštitnim grupama, kao što je Boe, sa N-sp<3>zaštitnim grupama, korak b) nastavlja bez značajnog gubitka hiralnosti koji daje kao rezultat odgovarajuće proizvode dobre enantiomerne čistoće kako je ovde definisano.

[0098]Posupak obuhvata tri(C1-C2 alkiijoksonijum so (reagensi tipa Meervvein), ili (C1-C2)aikilsulfat, ili (C1-C2)hioroformat, ili upotrebu PCIs/POCl3/(C1-C2)hklroksialkil. preporučljivo tri(C1-C2 alki!)oksonijum so (reagensi tipa Meervvein), iii (C1-C2)a!kilsulfat, još preporučljivije tri(C 1-C2 alkyl)oksonijum so, i još preporučljivije tri(C2 alkiljoksnijum so;kao što je Et30BF4.

[0099]Kako je izneto gore u tekstu, korak b) se izvodoi u prisustvu baze,

[0100]Upotreba najmanje 2 ekvivalenta tri(C1-C2 alkil)oksonijum soli (t) u vezi sa 3-supstituisanim-piperazin-2- onom je bila obavezna da se pomogne potpuno pretvaranje kada je korak b) izveden bez blagog dodatka baze, kao što je Na2CC>3, kao što je ovde još razmatrano.

[0101]Bez ograničavanja na bilo koju teoriju, prijavilac veruje da formiranje kiseline kao što je HBF4koja može da bude nus-proizvod s upotrebom na vlagu osetljive iri(C1-C2 alkyl)oksonijum soli (reagensi tipa Meerv/ein) mogu dodatno da doprinesu gore pomenutoj raznovrsnosti kvaliteta proizvoda, interesantno je da postoje dve reference u liteteraturi (Videti (a) Sanchez, J. D. et al. J. Org. Chern. 2001, 66, 5731-5735; (b) Kende, A. S.; et ai. Org. Lett 2003, 5, 3205-3208) koje citiraju upotrebu blagih baza kao što je Na2CO^u vezi sa upotrebom reagensa Meervvein iako ne nude eksplicltno razjašnjenje ili detaljne eksperimentalne uslove. Posle opsežnih eksperimenata optimizacije reakcije, prijavilac je utvrdio da dodavanje baze, posebno N32C03, u vezi sa Meervvein reagensom je pomogio da se racemizacija svede na minimum. Prijavilac je još primetio da upotreba blagog dodatka baze, posebno Na2C03. izgleda da takođe pomaže da se ubrza reakcija prema završetku koji zauzvrat može da doprinese svođenju racemizacije na minimum u takvim reakcijama.

[0102]Baza se kao pogodnost bira iz grupe koja obuhvata natrijum karbonat, natrijum bikarbonat, kaiijum karbonat, cezijum karbonat, preporučljivo baza je natrijum karbonat.

[0103]U preporučenom izvođenju, koristi se između 1 i 5, preporučljivo oko 1,8 ekvivalenata mola u vezi sa tri(C1-C2 alkiijoksonijum soli baze.

[0104]Tri(C1-C2 alkvljoksonijum so se kao prednost bira iz grupe koja obuhvata trimetiloksonijum tetrafluoroborat, triettloksonijum tetrafluoroborat, preporučljivo tri(C1-C2 aikil) cksonijum so je trietiloksonijum tetrafluoroborat. U preporučenom izvođenju, koristi se između 1 i2.preporučljivo oko 1,4 ekvivalenata mola u vezi so tri(C1-C2 alkiijoksonijum solju baze.

[0105]Sinteza iminoetra u Koraku b) se izvodi kao prednost u organskom preporučljivo anhidrovanom, rastvaranu, preporučljivo dihlorometanu.

[0106]Reakcija se pogodno izvodi na temperaturi jednakoj ili ispod tačke ključanja organskog rastvarača, preporučljivo reakcija se izvodi na sobnoj temperaturi.

[0107]Pojam "sobna temperatura" kako se ovde koristi znači temperaturu koja obuhvata između 10 X i 30 " C, preporučljivo oko 20±5<=>C.

[0108]U jednom izvođenju, posebno u slučaju pretvaranja jedinjenja ketopiperazina prema Formuli C-1 do jedinjenja iminoetra prema Formuli D-1, korak b) se izvode u DCM, na sobnoj temperaturi sa 1,8 ekvivalenata u vezi sa tri(C1-C2 a!kil)oksoniium soli natrijum karbonata.

[0109]Intermedijari prema Formuli D mogu opciono da se prečiste svetlećom hormatogroafijom iii hromatografijom u koloni na silika gelu.

[0110]Treći korak ovog postupka, korak c), je priprema jedinjenja triazofopiperazina prema Formuli F pomoću kondenzacija između iminoetra prema Formuli D i acilhiđraziđa prema Formuli E Ili njegove soli ili solv3ta. posebno priprema jedinjenja triazolopiperazina jedinjenja prema Formuli F-1 pomoću kondenzacije između iminoetra prema Formule D-1 i acilhiđrazida prema Formuli £ ili njegove soli ili solvata.

[0111]Bez vezivanja za bilo kakvu teoriju, prijavilac veruje da kada se koriste N-sp<2>zaštitne grupe, kao što je Boe, induktivni efekat karbamata čini proton na C8 poziciji mnogo kiselijim, što bi dakie moglo objasniti racemizaciju (đeprotonacija može da nastane u prisustvu hidrazida).

[0112]Korak c) se generalno izvodi na temperaturi koja obuhvata između 5CTC i 135"C, preporučljivo između 70°Ct135°C.

[0113]Nasuprot tome, kondenzacije sa Boc-zašttćenim metiIketopiperazinom su obično sprovedene pod veoma prislinim usiovima, kao što je 135 "C, uredna podloga reakcije, dugo vreme reakcije (>24 h) iii prekomernu primenu mikrotalasa tokom nekoliko nedelja. Takvi uslovi nisu lako podložni za određivanje razmere, i pored toga, nereproduktivna hiraina čistoća je takođe problem u tako oštrim i produženim uslovirna reakcije.

[0114]Intermedijari prema Formuli F mogu opciono da se prečiste svetiećom hromatografijom ili hfomatogfafijom u koloni na siiika gelu.

[0115]Četvrti korak postupka, t.j. korak d), povlači uklanjanje zaštite jedinjenja prema Formuli F posebno jedinjenja prema Formuli F-1 sa pogodnim agensom za uklanjanje zaštite.

[0116]Pojam "pogodan reagens uklanjanja zaštite" prema ovom pronalasku se definiše kao bilo koji reagens(i) koji omogućavaju uklanjanje N-sp<3>zaštitne grupe kako je definisano ovde, preciznije benzilnih zaštitnih grupa kako je ovde definisano. Primeri takvih reagenasa su izvedeni u (a) VVuts, P. G. M.; Greene, T. VV. In "Greene"s Protective Groups in Organic Svnthesis", Wiley-lnterscience: New York, 4th Edition. Chap. 7, pp. 696-928, and (b) Kocien'ski, P. J. In "Protecting Groups", Georg Thieme Verlag: Stuttgart, New York; 3rd Edition, Chap 8, pp. 487-643); pogodni reagensi za uklanjanje zaštite obuhvataju ali se ne ograničavaju na hidrogenolitske uslove (npr. H?.. Pd/C) ili uslove razlaganja molekula pod đejstvom kiseline (acidolizne uslove) (npr HCl, TFA).

[0117]Preporučeni reagensi uklanjanja zaštite se biraju iz grupe koja obuhvata TFA, HCl, preporučjivo HCl.

[0118]Kiselinski pogodnije varijante benzilnih zaštitnih grupa kako je ovde definisano, kao što je PMB, DMB i TMB, su se pokazale kao povoljne zbog toga što zahtevaju blaže uslove uklanjanja zaštite, čime se doprinosi smanjenju na minimum racemizacije moguće na ovom koraku.

[0119]Korak d) se povoljno izvodi u organskom raslvaraču izabranom iz 1.4-dioksana, đihlorometana, /zo-pro panola.

[0120]Kada se koriste aciđolitni uslovi zaštite kao što je upotreba TFA ili HCl, jedinjenja prema Formuli i I se dakle dobijaju u za njih odgovarajućim oblicima soli.

[0121JUjednom izvođenju, iza koraka d) može opciono da sledi pretvaranje u oblik slobodne baze.

[0122]U jednom izvođenju, jedinjenja prema Formuli li, bilo u obliku soli ili slobodne baze, se pretvaraju koriščenjem stereoizomernih agenasa koji formiraju soli, kao što su hiraine kiseline, da se dobiju stereoizornerne soli prerna Formuli II da bi se povećala hemijska čistoća i/ili sfereoizomerna čistoća krajnjeg intermedijara.

[0123]Gore

pomenuti stereoizomemi agensi koji formiraju so obuhvataju alt se ne ograničavaju na mandelinsku kiselinu, tartamu kiselinu, dibenzoi! i ditoluil-tartarnu kiselinu, fenilpropionsku kiselinu, derivate tartanilinske kiseline u svim relevantnim stereoizemernim oblicima, iii još preporučljivije mandelinsku kiselinu, vinsku kiselinu, dibenzoi! i ditoluil-vinsku kiselinu, fenilpropionsku kiselinu u svim relevantnim

stereoizomernim oblicima.

[0124]U jednom izvođenju, iza koraka d) sledi dodatno spajanje amida u koraku e) u korn jedinjenje prema Formuli II ili njegova so ili solvat reaguje sa jedinjenjem prema Formuli G

iii njegova so ili solvat, pri čemu

Ar"' je fenil, tiofen-2il ili 4-fluorofenil. preporučljivo fenil ili tlofen-2-il:

Y je hidroksil, halo, preporučljivo F iii Cl, još preporučljivije hidroksil i Cl, i još preporučijivije Cl; da se dobije jedinjenje prema Formuli H

ili njegova so ili solvat pri čemu je Ar<2>' kako je definisano gore u vezi sa Formulom il i Ar"' je kako je definisano gore u vezi sa Formuiom G.

[0125]Korak e) se kao prednost izvodi u organskom, preporučljivo anhidrovanom, rastvaraču, izabranom iz dihlorometana, acetonitrila, preporučljivo u dihlorometanu.

[0126]Reakcija se pogodno izvodi na temperaturi jednakoj Hi ispod tačke ključanja organskog rastvarača, preporučljivo na sobnoj temperaturi.

[0127]U slučaju jedinjenja prema Formuli G gde je Y halo grupa, reakcija se izvodi u prisustvu baze izabrane iz grupe koja se sastoji od di-/zo-propiletilamina, N-metilmorfolina, trietilamina, preporučljivo N-metilmorfolina, i u slučaju jedinjenja prema Formuli G gde je Y hidroksil, aktivirani anhidrid, estar, derivat acil-uree ovih poslednje pomenutih jedinjenja - formirana putem konvencionalnih reagenasa za formiranje amiđne veze obuhvata upotrebu takozvanih aktivi raj ući h grupa, kao što je izobutilhloroformat, DIC, DCC, HOBt, HATU, HBTU, ĐF.P8T u usiovima reakcije poznatim stručnjacima u ovoj oblasti, i još preporučljivije sa jedinjenjirna prema Formuli G pri čemu je V halo, reakcija izvedena u prisustvu baze izabrane iz grupe koja obuhvata di-/zo-propiletilamin, N-metilmorfoiin, trietilamin.

preporučljivo N-meiilrnorfolin;

[0128]Vrednosii enantiomemog viška jedinjenja prema Formuli II iii njegove soli nisu određene jer je separaciju na hiralnoj HPLC bilo teško postići. Međutim, hiraina čistoća i enantiomerni višak jedinjenja prema Formuli G bi mogli biti određeni. Prijavilac je primetio identične ee vrednosti za jedinjenja prema Formuli D i amide prema Formuli H koje su potvrdile da se oba koraka d) i e) odvijaju bez bilo kakve racemizacije koju je moguće detektovati (hiraina LC).

[0129]U drugom varijantnom rešenju, pronalazak daje intermeđijare za sintezu jedinjenja prema Formuli i!, preciznije prema postupku prema ovorn pronalasku. Ovi intermedijari su jedinjenja prema Formuli D kako je gore definisano.

[0130]U jednom izvođenju, jedinjenja prema Formuli D su ona prema Formuli D-1

pri čemu

pri čemu se R? i R10 đefinišu kao gore u Formuli D; i

R12R12',R13?R13' j r1<4>su H<Mj R14 je mstoksi iR12,R12',R13 jR13' suH, ili r12 jR14 su metoksi R"*2',R13\r13' su h, ihR12,r12<*>jR14su metoksi iRi3 iR13' su H.

[0131]Preporučena jedinjenja prema Formuli D-1 su ona kod kojih: R<14>je metoksi iR12, R12\R13 i R<13>" su h, iii R"12 iR14su metoksi i R12';R13 iR13'suH, iliR12,R12' iR1<4>su metoksi iR13iR13' su H. preporučljivoR12iR14 su metoksi!?12' ?13 ,R13' su H, ili R^2.R12' iR1<4>su metoksi iR13 i R''3' su H, još preporučljivijeR12jR14su metoksi i R^2',R13iR"*3' su H; i/ili

R10 je etil.

[0132] Preporučeno jedinjenje prema Formuli D-1 je fR)-1-(2,4-dtmetokstbenzti)-5-etoksi-6-metil-1,2,3,6-tetrahidro- pirazin.

[0133]Kao što je izneto gore u tekstu, ovaj pronalazak takođe obezbeđuje jedinjenja prema Formuli IH kako je definisano gore. U jednom izvođenju, jedinjenja prema Formuli Ili i njihove soli ili solvati su ona kod kojih

R1"1 jeH ili

pri čemu

R12,R12'.R13, ir14 su h, iii r<14>je metoksi iR12,R12',R13iR13' su H, iliR12iR14 su metoksi i R12',R13 iR13' su H, iliR12R12' iR<14>su metoksi i R<1>3 iR13'su H; preporučljivo R14 je metoksi iR12,R12',R1<3>i R1<3>' su H, iliR12 iR^4 su metoksi i r12? R13 s r13'SLi H, iliR12,R12' iR1<4>su metoksi iR13 iR13'su H, preporučljivo R12 iR14su metoksi i R12',R13 i R13' su H, iliR12,R12' iR14 su metoksi iR13 i r13' su h, još preporučljivije R12 i R14 su metoksiiR12',R13 iR13' su H; i

R"3' i Ar<2>' su kako je definisano u Formuii II.

[0134] Posebno preporučena jedinjenja u Formuii III su ona koja su navedena u tabeli 3 u nastavku:

[0135JJedinjenja prema Formuli D, posebno D-1, i Formuli Mi, preciznije (R}-1-(2,4-dimetoksibenzil)-5-stoksi- 6-metil-1,2,3,6-tetrahidropirazin i jedinjenja u tabeli 3 gore, ili njihove soli i solvati su posebno interesantna za sintezu hiralnih 5,6,7,(8-supst!luisanih)-tetrahidro-[1,2,4jtriazolo[4,3-ajpirazina, koja su korisni intermedijari za sintezu farmaceutski aktivnih sastojaka, kao što su selektivni antagonisti NK-3 receptora.

[0136JStim u skladu, u još jednom varijantnom rešenju, ovaj pronalazak se odnosi na jedinjenja ili soli iii njihove solvate za sintezu farmaceutski aktivnih sastojaka, kao što sli selektivni antagonisti NK-3 receptora.

PRIMENE

[0137]Jedinjenja prema ovom pronalasku su dakle korisna kao iekovi, preciznije za sprečavanje i/ili lečenje bolesti kao stoje depresija, uznemirenost, psihoza, šizofrenija, psihotični poremećaji, bipoloami poremećaji, kognitivni poremećaji, Parkinsonova bolest, Aichajmerova bolest, poremećaj hiperaktivnosti i deficita pažnje (ADHD), bol. konvulzija, gojaznost zapaljenske bolesti uključujući sindrom nervoznih creva i poremećaje zapaljenskih procesa creva. emeza, preeklampsija, bolesti povezane s disajnim putevima uključujući hroničnu opstruktivnu bolest pluća, astmu, pojačana reaktivnost bronhija, bronhokonstrikcija i kašalj, poremećaji reproduktivnih organa, kontracepcija i bolesti uslovljene polnim hormonom uključujući aii bez ograničavanja na benignu hiperplaziju prostate (BPH), hiperplaziju prostate, metastazirani karcinom prostate, rak testisa, rak dojke, rak jajnika, androgenom uslovljene akne, muški tip ćelavosti, endometrioza, abnormalan pubertet, fibroza materice, iibroiđni tumor materice, kanceri zavisni od hormona, hiperanđrogenizam, hirsutizam, virilizacija, sindrom policističnih jajnika (PCOS), bolest predmenstrualne disforije (PMDD), HAIR- AN sindrom (hiperanđrogenizam, otpornost na insulin i akantoza nigrikans). hipertekoza jajnika (HAIR-AN sindrom sa hiperplazijom luteinizovanih teka ćelija u unutarnjem tkivu (stremi) jajnika), druge manifestacije visokih koncentracija androgena u jajnicima (npr. za tajenje sazrevanja fojikuia atrezija anovulacija, dismenoreja, disfunkcionaino krvarenje materice, neplodnost), tumor koji proizvodi androgen (virilizujući tumor jajnika iii adrenalni tumor), menoragija i adenomioza.

[0138]Takođe je opisan postupak da se kod pacijenta odloži pojava depresije, uznemirenost, psihoza, šizofrenija, psthotičrti poremećaji, bipoloarni poremećaji, kognitivni poremećaji, Parkinsonova bolest, Alchajmerova bolest, poremećaj hiperaktivnosti i deficita pažnje (ADHD), boi, konvulzija, gojaznost, zapaljenske bolesti uključujući sindrom nervoznih creva i poremećaje zapaljenskih procesa creva. emeza, preeklampsija, bolesti povezane s disajnim putevima uključujući hroničnu opstruktivnu bolest pluća astmu, pojačana reaktivnost bronhija, bronhokonstrikcija i kašalj, poremećaji reproduktivnih organa, kontracepcija i bolesti uslovljene polnim hormonom uključujući ali bez ograničavanja na benignu hiperplaziju prostate (BPH), hiperplaziju prostate, metastazirani karcinom prostate, rak testisa, rak dojke, rak jajnika, androgenom uslovljene akne, muški tip ćelavosti, endometrioza, abnormalan pubertet, fibroza materice, fiboidni tumor materice, kanceri zavisni od hormona, hiperanđrogenizam, hirsutizam, virilizacija, sindrom policističnih jajnika (PCOS), bolest predmenstrualne disforije (PMDD), HAIR- AN sindrom (hiperanđrogenizam, otpornost na insulin i akantoza), hipertekoza jajnika (HAIR-AN sindrom sa hiperplazijom luteinizovanih teka ćelija u unutarnjem tkivu (stromi) jajnika), druge manifestacije visokih koncentracija androgena u jajnicima (npr. zatajenje sazrevanja folikula atrezija anovulacija, dismenoreja, disfunkcionalno krvarenje materice, neplodnost), tumor koji proizvodi androgen (virilizujući tumor jajnika ili adrenalni tumor) menoragija i adenomioza, gde je obuhvaćena primena farmaceutski deiotvorne količine jedinjenja prema Formuli l ili njegove farmaceutski prihvatljive soli ili solvata pacijentu kom je potrebno. Preporučljivo, pacijent je toplokrvna životinja, još preporučljivije ćovek.

[0139]Jedinjenja prema ovom pronalasku su takođe korisna za ieoenje ginekoloških poremećaja i neplodnosti. Preciznije, ovaj pronalazak obezbeđuje postupke za suzbijanje naglog skoka lufeinizujućeg hormona (LFI) u asistiranoj reprodukciji,

[0140]Jedinjenja prema ovom pronalasku su takođe korisna da prouzrokuju kastraciju muškaraca i da inhibiraju seksualni nagon kod muškaraca. Ovo je posebno interesantno za lećenje muških seksualnih prestupnika.

[0141]Ovaj pronalazak još daje upotrebu jedinjenja prema Formuli I ili njegovih farmaceutski prihvatljivih soli iii soivata za proizvodnju leka za lećenje i/ili sprečavanje bolesti kao što je depresija, uznemirenost, psihoza, šizofrenija, psihoticni poremećaji, bipoloarni poremećaji, kognitivni poremećaji. Parkinsonova bolest, Alchajmerova bolest, poremećaj hiperaktivnosti i deficita pažnje (ADHD), bol, konvulzija, gojaznost, zapaljenske bolesti obuhvata sindrom nervoznih creva I poremećaje zapaljenskih procesa creva, emeza, preeklampsija, bolesti povezane s disajnim putevima uključujući hroničnu opstruktivnu bolest pluća, astmu, pojačana reaktivnost bronhija. bronhokonstrikcija i kašalj, poremećaji reproduktivnih organa, kontracepcija i bolesti uslovljene polnim hormonom uključujući ali bez ograničavanja na benignu hiperplaziju prostate (BPH), hiperplaziju prostate, metastazirani karcinom prostate, rak testisa, rak dojke, rak jajnika, androgenom uslovljene akne, muški tip ćelavosti, endometrioza, abnormalan pubertet, fibroza materice, fiboirni tumor materice, kanceri zavisni od hormona, hiperanđrogenizam, hirsutizam, virilizacija, sindrom policističnih jajnika (PCOS), bolest predmenstrualne disforije (PMDD), HAIR- AN sindrom (hiperanđrogenizam, otpornost na insuiin i akantoza), htpertekozu jajnika (HAIR-AN sindrom sa hiperplazijom luteinizovanih teka ćelija u unutarnjem tkivu (stromi) jajnika), druge manifestacije visokih koncentracija androgena u jajnicima (npr. zatajenje sazrevanja folikula atrezija anovulacija. dismenoreja, disfunkcionalno krvarenje materice, neplodnost), tumor koji proizvodi

androgen (viriiizujući tumor jajnika iii adrenafni tumor) menoragija i ađenomioza, kod pacijenta.

[0142]Preporučljivo, pacijent je toplokrvna životinja, još preporučljivije čovek.

[0143]Pronalazak još obuhvata upotrebu jedinjenja prema Formuli I ili njegovih farmaceutski prihvatljivih soli ili solvata za prozivođnju leka za suzbijanje nagiog skoka luteinizujućeg hormona (LH) u asistiranoj reprodukciji kod pacijenta. Preporučljivo pacijent je toplokrvna životinja, još preporučljivije žena.

[0144]Pronalazak još obuhvata upotrebu jedinjenja prema Formuli I ili njegovih farmaceutski prihvatljivih soli ili solvata za prozivođnju leka koji će prouzrokovati kastraciju muškarca i suzbiti seksualni nagon kod muškaraca. Ovo je posebno interesantnozalečenje muških seksualnih prestupnika.

[0145]Takođe je opisan postupak za moduliranje aktivnosti NK-3 receptora, kod pacijenta, preporučljivo toplokrvne životinje, i još preporučljivije čoveka, kom je potrebna takva terapija, koji obuhvata primenu leka pomenutom pacijentu kao deiotvorne količine jedinjenja prema ovom pronalasku, ili njegove farmaceutski prihvatljive soli iii solvata.

[0146]Prema jednom izvođenju, jedinjenja prema ovom pronalasku, njihove farmaceutski prihvatljive soli ili solvati mogu da se primene kao deo kombinovane terapije. Zbog toga, ova jedinjenja su obuhvaćena obimom ovde opisanih izvođenja pronalaska koja obuhvataju zajedničku primenu, i jedinjenja i lekova koja sadrže, pored jedinjenja prema ovom pronalasku, njegove farmaceutski prihvatljive soli iii solvate kao aktivni sastojak, dodatne terapijske agense i/ili aktivne sastojke. Takvi režimi višestrukih lekova, često se pominju kao "kombinovarta terapija", mogu biti korišteni za lečenje i/ili sprečavanje bilo kakvih bolesti ili stanja posredovanih ili povezanih sa modulacijom NK-3 receptora. Upotreba takvih kombinacija terapijskih agenasa je posebno primenljiva za lečenje gore pomenutih poremećaja kod kacijenta kom je potrebna terapija ili ima jedan od rizika da postane takav pacijent. Pored zahieva za terapijskom efikasnošću, koja može da pođstakne upotrebu aktivnih sastojaka pored jedinjenja modulatora NK-3 receptora prema Formuli l ili njihovih farmaceutskih soli ili solvata, mogu biti dodatni razlozi koji iziskuju ili visoko preporučuju upotrebu kombinacija lekova koji obuhvataju aktivne sastojke koji predstavljaju ađuvansnu terapiju, t.j., koja nadopunjava t dopunjava funkciju izvedenu jedinjenjima modulatora NK-3 receptora prema ovom pronalasku. Pogodni dopunski terapijski agensi korišćerti za potrebe pomoćne terapije obuhvataju lekove koji, urnesto direktnog lečenja iii sprečavanja boiesti ili stanja posredovanih ili povezanih sa modulacijom NK-3 receptora. leće bolesti ili stanja koja direktno nastaju iz ili indirektno prate osnovno ili preovtađujuće NK-3 receptorom posredovanu bolest ili stanje.

[0147]Prema još jednoj karakteristici ovog pronalaska, jedinjenje prema Formuli !, njegove farmaceutski prihvatljive soli ili solvati mogu da se koriste u kombinovanoj terapiji sa antipsihotičnim lekovima tAPD), da se poboljša efikasnost i da se svedu na minimum sekundarni efekti povezani sa APD koji obuhvataju ali se ne ograničavaju na antagoniste Dopamin 2/3 i 5-HT2 receptora. Preciznije jedinjenje prema Formuli I, njegove farmaceutski prihvatljive soli iii solvati mogu da se koriste kao ađuvansna terapija u kombinaciji sa atipičnim antipsihotičnim iekom, uključujući ali ne ograničavajući se na risperidon, klozapin, olanzapin, pri čemu modulator NK-3 receptora može da služi za ograničavanje doze za atipični antipsihotik i samim tim da poštedi pacijenta nekih nus pojava tih atipičnih antipsihotičnih lekova.

[0148]Dakle, postupci terapije i farmaceutska jedinjenja prema ovom opisu mogu da koriste jedinjenja prema Formuii I ili njihove farmaceutski prihvatljive solvate u obliku monoterapije, ali pomenuti postupci i jedinjenja mogu takođe da budu korišćeni u obliku višestruke terapije u kojoj jedno ili više jedinjenja prema Formuii I iii njihove farmaceutski prihvatljive soli iii solv3tt bivaju zajedno primenjeni u kombinaciji sa jednim ili više drugih terapijskih agenasa..

[0149]U gore opisanim kombinacijama izvođenja ovog pronalaska, jedinjenje prema Formuli I, njegove farmaceutski prihvatljive soli ili solvat ili drugi terapijski aktivni sastojci mogu da se primene u smislu oblika doze bilo odvojeno ili jedan uz drugi, i u smislu vremena njihove primene, bilo serijski ili istovremeno. Dakle, primena jednokomponentnog agensa može da bude pre, zajedno sa, ili posle prmene drugog agen(a)sa komponente

[0150]Ovaj pronalazak takođe obezbeđuje farmaceutska jedinjenja koja obuhvataju jedinjenje prema Formuli I ili njihove farmaceutski prihvatljive soli ili soivate i najmanje jedan farmaceutski prihvatljiv nosač, razblaživač, ekscipijent i/ili ađuvans. Kako je gore navedeno, ovaj pronalazak obuhvata farmaceutska jedinjenja koja obuhvataju, pored jedinjenja prema ovom pronalasku, njihove farmaceutski prihvatljive soli ili solvate kao aktivan sastojak, dodatne terapijske agense i/ili aktivne sastojke.

[0151]Još jedan predmet ovog pronalaska je tek koji obuhvata najmanje jedno jedinjenje prema ovom pronalasku ili njegove farmaceutski prihvatljive soli ili soivate, kao aktivni sastojak,

[0152] Prema još jednoj karakteristici ovog pronalaska data je upotreba jedinjenja prema Formuii I ili njihovih farmaceutski prihvatljivih soli ili solvatazaproizvodnju leka za modulisanje aktivnosti NK-3 receptora kod pacijenta, kom je potrebna takva terapija, koja obuhvata primenu pomenutom pacijentu deiotvorne količine jedinjenja prema ovom pronalasku, iii njegovih farmaceutski prihvatljivih soli iii solvata.

[0153]Preporučljivo, pacijent je toplokrvna životinja, još preporučljivije ćovek.

[0154] Prema jednom izvođenju, jedinjenja prema ovom pronalasku, njihove farmaceutski prihvatljive soli ili solvati mogu da se primene u morioterapiji ili kombinovano; terapiji. Dakle, prema jednom izvođenju, ovaj pronalazak obezbeđuje upotrebu jedinjenja prema ovom pronalasku za proizvodnju ieka za najmaje jednu od gore opisanih svrha, pri čemu se pomenuti lek prirnenjuje pacijentu kom je potreban, preporučljivo toplokrvnoj životinji, i još preporućljiviije ćoveku, u kombinaciji sa barem jednim dodatnim terapijskim agensom i/tti aktivnim sastojkom. Prednosti i povoijnosti takvog režima od više lekova, mogući režimi primene kao i pogodni dodatni terapijski sastojci i/ili aktivni sastojci su oni koji su gore opisani.

[0155]Generalno, za farmaceutsku upotrebu, jedinjenja prema ovom pronalasku mogu da budu formuiisana kao farmaceutski preparat koji obuhvata najmanje jedno jedinjenje prema ovom pronalasku i najmanje jedan farmaceutski prihvatljiv nosač, razblaživač, ekscipijeent i/ifi aduvans. i opciono jedno iii više dodatnih farmaceutski aktivnih jedinjenja.

[0156] Putem neograničavajućih primera, takva formulacija može da bude u obliku pogodnom za orainu primenu, za parenieralnu primenu leka (kao Što je iniravensko, intramuskularno ili potkožno ubrizgavanje infuzije), za topikalnu primenu (uključujući okulanu), za primenu inhalacijom, putem flastera za kožu, putem impianta, putem supozitorija, itd Takvi pogodni oblici primene ■■ koji može biti čvrst, polučvrst ili tečan, zavisno od načina primene - kao i postupci i nosači, razblaživači i ekscepijenti za upotrebu u njegovoj pripremi, biće jasno stručnjaku u ovoj oblasti, sa referencom na poslednje izdanje Remingtonovog priručnika za farmaciju (Remington s Pharmaceutical Sciences).

[0157]Neki preporučeni, ali neograničavajući prime-ri takvih preparata obuhvataju tablete, pilule, prahovi, lozenge. vrećice, farmaceutske kapsule, eliksiri, suspenzije, emulzije, rastvori, sirupi, aerosoii, masti, kreme, losioni, meke i tvrde kapsule želatina, supozitorije, kapi. sterilni rastvori i sterilni upakovani prahovi (koji se obično rekonstituišu pre upotrebe) za primenu kao bolusna i/ili za kontinualnu primenu, koja može da se formuliše sa nosačima, ekscipijentima, i razblaživačima koji su pogodni kao takvi za takve formulacije, kao što je iaktoza, dekstroza, sukroza, sorbitol, rnanitol, škrobovi, akacija guma, kalcijum fosfat, alginati, tragaknant, žeiatin. kalcijum silikat, mikrokristalna celuloza, polivinilpirolidon, poiietilen glikol, celuloza, (sterilna) voda, meiilcekiloza, metil- i propilhidroksibenzoati, talk, magnesijum stearat. jestiva ulja, biljna ulja i mineralna ulja iii njihove pogodne mešavine Ove formulacije mogu opciono da sadrže druge supstance koje se obično koriste u farmaceutskim formulacijama, kao što su agensi za podmazivanje, agensi za ovlažavanje. agensi za emulzifikaciju i suspendovanje, agensi za raspršivanje, agensi za dezintegraciju, agensi za pravljenje mase, punioci, agensi za konzervisanje, agensi za zaslađivanje. agensi za aromu, regulatori za protok, agensi za otpuštanje, itd. Jedinjenja mogu takođe da se formulišu tako da obezbede brzo, zadržano ili odloženo otpuštanje aktivnih jedinjenja sadržanih u njima.

[0158]Farmaceutski preparati prema ovom pronalasku su preporučljivo u jediničnom obliku doze, I mogu da budu pogodno spakovani, na primer u kutiju, blister pakovanje, bočicu, bocu, kesicu, ampufu iii u neki drugi pogodni jediničnodozni ili višedozni držač ili posudu (koja može biti propisno označena nalepnicom); opciono sa jednim ili više letaka koji sadrže informacije o proizvodu i/ili uputstva za upotrebu. Generalno, takve jedinične doze će sadržati između 0.05 i 1.000mg,i obično između 1 i 500 mg, najmanje jednog od jedinjenja prema ovom pronalasku, npr. oko 10, 25, 50, 100, 200, 300 ili 400 mg per jedinične doze.

[0159]Obično, zavisno od stanja koje treba sprečiti ililečiti i rute primene leka, aktivno jedinjenje prema ovom pronalasku će obično biti primenjeno između 0,01 do 100 mg po kilogramu, češće između 0,1 i 50 rng, tako da je između 1 i 25 mg, na primer oko 0,5, 1, 5, 10, 15, 20 iii 25 mg, po kilogramu telesne težine pacijenta na dan, što može da se pnmeni kao jedna dnevna doza, podeijena na jednu ili više dnevnih doza, ili u suštini kontinuairio, npr. korišćenjern drip infuzije.25<:>UTR

[0160]Definicije i objašnjenja ispod su za pojmove kako se koriste u ceioj prijavi patenta, uključujući i specifikaciju i patentne zahteve.

[0181]Kada se opisuju jedinjenja prema ovom pronalasku, korišćeni pojmovi treba da se konstruišu u skladu sa siedećim definicijama, osim ako nije drugačije navedeno.

[0162]Pojam "halo" ili "halogen" znači fluoro, hloro, bromo. ili jodo. Preporučene halo grupe su fluoro i hloro. Najpreporučljivija halo grupa je fluoro kod ovog pronalaska osim ako nije drugačije navedeno ovde.

[0163]Pojam "alkil" sam po sebi ili kao deo drugog supstituenfa se odnosi na radikal hidrokarbila prema formuli CnH2n+1P'''čemu je n je broj veći od ili jednak sa 1. Generalno, alkil grupe prema ovom pronalasku obuvhataju od 1 do 4 atoma ugljenika, preporučeno od 1 do 3 atoma ugljenika. Alkil grupe mogu da budu linearne ili razgranate.

[0164]Pogodne alkil grupe obuhvataju metii, etil, n-propil,i propil,n-butil, /-butil, s-butil i f-butil.

[0165]Pojam "haloalkil" sam iii u kombinaciji, se odnosi na radikal aškila koji ima značenje kako je definisano iznad pri čemu jedan ili više vođonika se zameni haiogenom kako je definisano iznad. Neograničavajući primeri kao radikali haloalkila obuhvataju hlorometil, 1-brcmoetil, fluorornetii, difiuorornetii, trifluorometii, 1,1,1-trifiuoroetil i slično. Cx--y -haloalkil i Cx-Cy-alkii se odnose na alkil grupe koje obuhvataju od atome ugljenika x do y. Preporučene haloalki! grupe su difiuorornetii, trifluorometii.

[0166]Pojam "alkenil" kako se ovde koristi se odnosi na nezasićenu hidrokarbonii grupu koja može da bude linearna ili razganata, koja obuhvata jednu iii vise dvostrukih veza ugljenik-ugljenik. Pogodne alkenil grupe obuhvataju između 2 i 3 atoma ugljenika. Primeri alkenil grupa su eteni! (vinii), 2-propenil (alil). Preporučena alkenil grupa ovde jeste vini! grupa.

[0167]Pojam "tiofen-2-il" kako se ovde koristi znači grupa prema formuli

gde streiica definiše tačku spoja.

[0168]Pojam "cikloalkil" kako se ovde koristi je ciklična alkil grupa, to znači, monovalentna, zasićena, ili nezasićena hidrokarbonii grupa koja ima 1 ili 2 cikične strukture

[0169]Cikloalkii obuhvata samo monocikiične hidroksikarbil grupe. Cikloalkil grupe mogu da obuhvate 3 ili više atoma ugljenika u prstenu i generalno, prema ovom pronalasku obuhvataju od 3 do 4, još preporučljivije 3 atoma ugljenika. Primeri cikloalkilnih grupa obuhvataju ciklopropil i ciklobutil, sa ciklopropilom kao posebno preporučenim.

[0170]Pojam "estar" ili "estri" kako se ovde koristi označava grupu izabranu iz grupe koja obuhvata nesupstituisani C1-C4 alkiloksikarbonil, nesupstituisani feniloksikarbonil ili nesupstituisani fenii(C1-C2 alkiljoksikarbonil.

[0171]Pogodne grupe estra obuhvataju rnetiloksikarbonil, etiloksikarbonil, n-prcpiioksikarboml,i-propiloksikarbonil, r?-buti!oksikarbonil, /-butiioksikarbonil. a-butiloksikarbonil, f-butiloksikarbonil, feniloksikarbonil, benziioksikarbonil i fenetiloksikarboriii, među kojima metitoksikarbonil, etiloksikarbonil, propitoksikarbonil, /-propiloksikarbonii, feniloksikarbonil, i benziioksikarbonil se posebno preporučuju.

[0172]Atomi prstena 5,6,7,(8-supstituisanih)-[1,2,4jtriazoloj4,3-a]pira2iria prema ovom pronalasku se numerišu na osnovu dole prikazane šerne.

[0173]Veze od asimetričnog ugljenika u jedinjenjlma su generalno prikazane koriščenjem pune linije {-), cik-cak linije (>w ) tpunog klina { —), iii klina sa tačkicama . Upotreba punog klina ili klina sa tačkicama da prikaže veze od asimetričnog atoma ugijenika je namenjena da označi da je samo prikazani stereoizomer predviđen da bude obuhvaćen.

[0174]U jedinjenjima prema ovom pronalasku, klin sa.tačkicama koji nosi metii na C8 poziciji se koristi da prikaže {R)-enantiorner. Puni kiin ( —H>t mogao da se koristi da prikaže (S)-enantiomer.

[0175]Jedinjenja prema Formuli li i njenim podformuiama obuhvataju stereogenski centar ugljenika na poziciji 8 i zato mogu da postoje kao( R)~i (S)-enantiomeri. Upotreba pune linije da prikaže vezu između pozicije 8 tog prstena i R<1>' sa zvezdicom odmah do pozicije 8 označava da se misli na pojedinačne enantiornere, čime se isključuju njihove racemske mešavine.

[0176]Puni klin ( ~") za vezu između pozicije 8 prstena i R<1>' se koristi da prikaže (S)--enantiorner

i klin sa tačkicama (; i za vezu između pozicije 8 ovog prstena i R<1>' se koristi da prikaže (R)-enantiomer.

[0177]Na primer, (R)-8-rnettl-3-(6-metiipiridin-2-ii)-5,6J,8-tetrahidro-[1 ,2,4jiriazolo[4,3-ajpirazin se prikaže kao...

[0178]Prototropni tautomerni ravnotežni oblik može da postoji koci nekih jedinjenja Formule I'" čime se u opasnost dovodi postojanje bilo jednog ili oba t3utomera; primer je prikazan dole.

[0179]Svi tautomerni oblici jedinjenja prema ovom pronalasku spadaju, gde god da je prirnenljivo, u obim ovog pronalaska bez obzira na to koji je specifični lautomer ispisan ili imenovan.

[0180]Jedinjenja prema ovom pronalasku mogu da budu u obliku farmaceutski prihvatiivih soli. Farmaceulski prihvatljive soli jedinjenja prema Formulama i. II i III obuhvata njihove kisele adtcione soli. Pogodne kisele adicione soli se formiraju iz kiselina koje formiraju netoksične soli. Primeri obuhvataju acetat, adipat, aspariat, benzoat, besilat, bikarbonat/karhonat, bisulfat/suifat, borat, kamsilat, citrat, ciklamat, edisilat, esilat. format, fumarat, gluceptat, giukonat, giukuronal, heksailuorofosfat, hibenzat, hidrohlorid/hlorid, hidrebromtd/bromid. hidrojođiđ/jodid, isetionat, iaktat, malat, maleat, malonat. mezilat, meiilsulfat, naftilat, 2-napsilat. nikotina!, nitrat, orotat, oksalat, palmitat, pamoat, fosfat/hidrogen fosfafdihidrogen fosfat, pirogluiarnat, saharai, stearat, sukcinate, tanat. tartrat, tosiiat, trifluoroacetat i ksinofoat so.

[0181]Jedinjenja prema Formulama i, II ili Ml prema ovom pronalasku mogu da se pripreme u obliku soli kro2 upotrebu formirača soli. Pogodne kiseline su preporučljive ali se ne ograničavaju na one koje se smatraju da formiraju farmaceutski prihvatljive soli (videti na primer; VVermuth, C. G.; Stahl, P. H. In "Handbook of Pharmaceutical Salts". Wiley-VCH: New York, 2002). Takve soli mogu da se formiraju da poboljšaju hemijsku čistoću i/ili pojačaju vreme skladištenja pratećeg intermedijara soli. Primeri relevantnih formirača soli kako je gore pomenuto obuhvataju na negraničavajući način sledeće kiseline; kroz svaki i sve stereoizomerne oblike gde je primenljivo: HCl, sumpornu kiselinu, fosfornu kisielnu, sirćetnu kiselinu, etanesulfonsku kiselinu, limunsku kiselinu, mlečnu kiselinu, maleinsku, sukcinsku kiselinu, fenilpropionsku kiselinu, p-toluenesu!fonsku kiselinu. Preporučeni formiraći soli obuhvatgaju HCl.

[0182]Farmaceutski prihvatljive soli jedinjenja prema Formulama I, li i III mogu da se pripreme upotrebom jedne ili više od ovih metoda: (i) reakcijom jedinjenja prema formufama I, II, ili III sa željenom kiselinom; (ii) uklanjanjem zaštitne grupe pogodne za kiselinu sa pogodnog prekursora jedinjenja prema Formulama I, II iii III; ili (iii) pretvaranjem jedne soli jedinjenja prema formulama I, II ili III u drugo pulem reakcije sa odgovarajućom kiselinom ili putem odgovarajuće kolone za razmenu jona.

[0183] Pojam "solvat" se koristi ovde da opiše jedinjenje u ovom pronalasku koje obuhvata stoihiotneme ili pod- stoihiomeme količine jednog iii više farmaceutski prihvatljivog molekula rastvarača kao stoje etanol. Pojam "hidrat" se koristi kada je pomenuti rastvarao voda.

[0184]Sve reference na jedinjenja prema Formulama I, II ili III obuhvataju reference na soli, solvate, multikomponentne komplekse i njihove tečne kristale.

[0185]Jedinjenja prema ovom pronalasku obuhvataju jedinjenja prema Formulama I, II ili III kako je ovde već definisano, obuhvata sve polimorfe i njihove kristalne habituse, prrolekove, proiekove i njihove-tautomere i izotopikaino označena jedinjenja prema Formulama I, II ;li ili.

[0186]Pored toga, iako generalno, u vezi sa solima jedinjenja prema ovom pronalasku, prednost se daje farmaceutski prihvatljivim solima, treba napomenuti da je ovaj pronalazak u najširem smislu obuhvatio i nefarmaceutski prihvatljive soli. koje mogu na primer da se koriste u izolaciji i/iii prečišćavanju jedinjenja prema ovom pronalasku. Na primer, soli formirane sa optički aktivnim kiselinama ili bazama mogu da se koriste da formiraju diastereoizomerne soli koje mogu da olakšaju odvajanje optički aktivnih izomera jedinjenja prema Formulama !, II ili III iznad.

[0187] Ovaj pronalazak takođe generalno obuhvata sve farmaceutski prihvatljive prethodne lekove i proiekove jedinjenja prema Formulama I, II ili III.

[0188]Pojam "profek" kako se ovde koristi znači farmaceutski prihvatljive derivate jedinjenja prema Formulama !, II ili III, kao što su na primer estri, čiji proizvodin vivobiotransformacije generiše biološki aktivan lek. Proiekove generalno karakteriše povećana biodostupnost i lako se metaboiišu u biološki aktivna jedinjenjain vivo.

[0189] Pojam "prethodni lek". kako se ovde koristi, znači biio koje jedinjenje koje će biti modifikovano da formira vrstu leka. pri čemu modifikacija može da se odvija bilo unutar ili izvan teia. i bilo ispred iii

pošto prethodni lek dostigne područje teia za koji je indikovana primena tog leka.

[0190] Pojarn "pacijent" se odnosi na toplokrvnu životinju, još preporučljivije čoveka, koji/koja Čeka recept, ili prima medicinsku negu ili je/biće predmet medicinskog postupka.

[0191]Pojam "čovek" se odnosi na subjekta oba pola i u bilo kojoj fazi razvoj3 (npr., neonat, novorođenče, maioietničkoj, ađolescenskoj, odrasloj).

[0192]Pojmovi "lečiti", ''tečenje" i "terapija kako se ovde koriste, podrazumevaju ublažavanje, smanjenje ili opozivanja stanja iii bolesti i/ili njihovih pratećih simptoma.

[0193]Pojmovi "sprečiti", "sprečavanje" i "prevencija", kako se ovde koriste, odnose se na postupak odlaganja ili sprečavanja pojave stanja \ n\\ bolesti njihovih pratećih simptoma, isključivanje pacijenta od dobijanja stanja ili bolesti, ili smanjenje rizika pacijenta da dobije stanje iii bolest.

[0194]Pojam "terapijski đelotvorna količina" (iii jednostavnije "delotvoma količina") kako se ovde koristi označava količinu aktivnog agensa ili aktivnog sastojka (npr. NK-3 antagonist) koji je dovoljan da se postigne željeno terapijsko ili profiiaktičko dejstvo kod pacijenta kom se primenjuje lek.

[0195]Pojam "primena", ili njegova varijanta {npr.,"primenjivanje"). označava davanje aktivnog agensa iii aktivnog sastojka (npr. NK-3 antagonista), samog iii kao deo farmaceutski prihvatljive supstance, pacijentu kod kog stanje, simptom, ili bolest treba lečiti ili sprečiti,

[0196]Putem "farmaceutski prihvatljivo" podrazumeva se da sastojci farmaceutske supstance jesu kompatibilni jedan sa drugim i nisu štetnizapacijenta.

[0197] Pojam "antagonist" kako se ovde koristi znaći jedinjenje koje se konkurentno ili nekonkurentno vezuje na receptor na istom mestu kao i agonist (na primer, endogeni iigand) i ne aktivira intraćeiijsi odgovor putem aktivnog oblika receptora. Antagonist za specifični receptor, samim tim, inhibira intraćelijski odgovor koji je izazvao agonist na tom specifičnom receptom.

[0198]Pojam "bolest uslovljena polnim hormonom" kako se ovde koristi znači bolest koja biva izazvana putem, ili prouzrokovana putem, prekomerne, neodgovarajuće ili neregulisane proizvodnje polnog hormona. Primeri takvih bolesti kod mušaraca obuhvataju ali se ne ograničavaju na benignu hiperplaziju prostate (BPH). hiperplaziju prostate, rnetasiazirari karcinom prostate, kancer testisa, akne uslovljene androgenom, muški tip ćelavosti i prevremeni pubertet kod đečaka. Primeri takvih bolesti kod žena obuhvataju ali se ne ograničavaju na endometriozu, abnormalan pubertet, fibrozu materice, fibroidni tumor materice, kancere uslovljene hormonom (k3ncer jajnika, kancer dojke), tumor koji proizvodi androgen (virilizujući tumor jajnika ili ađrenalne žlezde), hiperanđrogenizam, hirsutizam, virilizacija, sindrom policističnih jajnika (PCOS), bolest predmenstrualne disforije (PIvIDD), HAIR- AN sindrom (hiperanđrogenizam, otpornost na insulin i akantoza), hiperiekoza jajnika (HAIR-AN sindrom sa hiperplazijom luteinizovanih teka ćelija u unutarnjem tkivu (stromi) jajnika), druge manifestacije visokih koncentracija3ndrogenaujajnicima (npr. zatajenje sazrevanja folikula, atreztja, anovulacija, dismenoreja, disfunkcionalno kivarenje materice, neplodnost), menoragija i ađenomioza (nenormalan rast endometrijuma unutar mišića materice).

[0199] Pojam "Psihogtični poremećaji" kako se ovde koristi znaći grupu bolesti koje utiču na um. Ove bolesti menjaju pacijentovu sposobnost da jasno razmišlja, donosi dobre procene, odgovara emocionalno, razume realnost, i ponaša se prikladno. Kada su simptomi ozbiljni, pacijent sa psihotičnim poremećajima ima teškoća da ostane u dodiru sa realnošću i često nije sposoban da ispuni obične zahteve svakodnevnog života Psihotični poremećaji obuhvataju ali se ne ograničavaju na šizofreniju, poremećaj šizofrenog oblika, šizofrenoafektivni poremećaj, kratki psihotični poremećaj, inđukovanš psihotički poremećaj, psihotički poremećaj usled opsteg medicinskog stanja, supstancama izazvan psihotički poremećaj ili psihotički poremećaji koji nisu drugačije precizirani (Diagnostic and Statistica! Manual of Mental Disorders, Ed. 4th, American Psychiatric Association, VVashington, D.C. 1994).

[0200]Pojam "farmaceutsko pomoćno sredstvo" kako se ovde koristi znaći nosač iii inertni medijum koristi se kao rastvarač ili razblaživač kod kog se farmaceutski aktivan sastojak formuliše i/ili prlmenjuje. Neograničavajući primeri farmaceutskih pomoćnih sredstava obuhvataju kreme, gelove, losione, rastvore, i lipozome.

[0201]Izraz "reagens koji daje kao rezultat N-sp3 zaštitnu grupu (PG) na jedinjenju azot-amina prema Formuli A" znači bilo koji takav reagens koji daje kao rezultat supstituciju(e) zaštitne grupe koja se može otcepiti uz zadržavanje zaštićenog atoma azota kao tercijarnog amina, t.j. u N-sp3 hibridizovanom obliku. "N-sp3 zaštitne grupe" benz.il grupa opciono supstituisana jednom ili više grupa koje doniraju elektron, kao što su na primer alkoholne grupe, alkoksi grupe (posebno metoksi), amino grupe, alkil grupe. Primeri takvih reagenasa obuhvataju, ali se ne ograničavaju na, benzaldehid, 4-metoksibenzaldehiđ, 2,4-dimetoksibenzakiehid, i 2,4,6-trimetoksibenzalđehtd. Primeri N~benz?l ih elektronom bogatih supstituisanih N-benzil zaštitnih grupa obuhvataju, ah se ne ograničavaju na N-benzil, N-4-metoksibenzil, N- 3,4-đsmetoksibenzil, N-3-metoksibenzii, N-3,5-dlmetoksibenzil, N-2,4,6-trimetoksibenzii. (See VVuts, P. G. M.; Greene. T. VV. In "Greene's Protective Groups in Organic Synthesis", Wiley-lnterscience: New York, 4th Edition, Chap. 7, pp. 696-926, and Koc-en'ski, P. J. In "Protecting Groups", Georg Thieme Verlag: Stuttgart, Nevv York; 3rd Edition, Chap. 8, pp. 487-643).

[0202]Ovaj pronalazak će biti razumljiviji uz sledeće primere. Ovi primeri su predviđeni da predstavljaju specifična izvođenja ovog pronalaska, i nisu predviđeni da ograniče obim ovog pronalaska.

KRATAK OPIS SLIKA

[0203] Slika1 pokazuje rendgenski kristalnu strukturu jedinjenja far" 1 (eiipsoide toplotnog pomaka izvučene na nivou vrerovatnoće od 50%).

Slika 2prikazuje rendgensku kristalnu strukturu jedinjenja n" 19 (eiipsoide toplotnog pomaka izvučene na nivou vrerovatnoće od 50%).

Slika3 pokazuje dejstva jedne intravenozne doze od 10 mg/kg jedinjenja br"1 nivoe u plazmi lutenizijućeg hormona (LH) kod kastriranih mužjaka, laboratorijskih Sprague--Dawley pacova izmerneih 1 sat posle doziranja. Nivoi luteinizirajućeg hormona (LH) su ispoljeni kao sredstvo±S.E.M. Pomoćno sredstvo je 9% 2-hidroksipropi!-p-ciklodekstrin/H20 (w/w). Pomoćno sredstvo,Af= 10 pacovi; Jedinjenje n°1,/V ;- 9 pacova.

Slika4 pokazuje dejstva jedne intravenozne doze od 10 mg/kg jedinjenja br"19 na nivoe plazme lutenizijućeg hormona ('LH') kod kastriranih mužjaka, laboratorijskih Sprague-Dawley pacova izmerenih 1 sat posle doziranja. Nivoi luteinizirajućeg hormona (LH) su ispoljeni kao sredstvo -i-S.E.M. Pomoćno sredstvo je 9% 2-hidroksipropil"fi-clklodekstrin/H20 (w/w) Pomoćno sredstvo, N ~ 5 pacova; Jedinjenje n"19, n-5 pacova.

Slika5 pokazuje dejstva jedne intravenozne doze od 50 mg/kg jedinjenja br°1 na nivoe plazme testosterona kod mužjaka, laboratorijskih Sprague-Dawley pacova. N-3 pacova po grupi koja je primala terapiju. Nivoi testosterona su izmereni neposredno pre doziranja i u svakom trenutku 1, 5, 15, 90, 150, 210 min posle doziranja da se izvede kriva sa vremenskim periodom odgovora na terapiju. Podaci su Izraženi kao područje testosterona pod krivuljom ('AUC') ± S.E.M. Pomoćno sredstvo je 9% 2--hidroksipropil-B-cikloclekstrirt/H20 (w/w).

PRIMER!

PRIMERI SZ HEMIJE

[0204]Sve prijavljene temperature su ispoljene u stepenima Celzijusa (°C); sve reakcije su izvedene na sobnoj temperaturi (RT) osim ako nije drugačije navedeno.

[0205]Sve reakcije su bile praćene pomoću analize fcankoslojnom hromatografijom (TLC) (TLC ploče, silicijumski gei 60 F254, Merck) korišćene da se nadziru reakcije, uspostave usiovi hromatografije na svetiećoj koloni sa siclijumskim gelom. Svi drugi TLC agensi za razvijanje/tehnike vi2uelizacije, eksperimentalno uspostavljanje iii postupci prečišćavanja koji su korišćeni u ovom pronalasku, nisu opisani u specifičnim detaljima, pretpostavlja se da su poznati stručnjacima u ovoj oblasti i da su opisani u takvim standardnim referentnim priručnicima kao što je: i) Gordon, A. J.; Ford, R. A. "The Chemist's Companion - A Handbook of Practicaf Data, Techniques, and References", Wiley: New York. 1972; ii) Vogel's Textbook of Practica! Organic Chernistry. Pearson Prentice Hali: London, 1989.

[0206]HPLC-MS spektri su obično dobijeni na Agiient LCMS koriščenjem elektrosprej jonizacije (ESI). Agilent instrument obuhvata autosampier 1200, binarnu pumpu 1100, detektor ultraljubičastih višestrukih talasnih dužina 1100 i 6100 jedan četvorougaonl uređaj za rnasenu spektrometriju. Korišćena hrornatografska kolona je bila Sunfire 3,5 pm, C18, 3,0 x 50 mm u dimenzijama.

[0207]Korišćeni eiuent (sredstvo za ispiranje) je bila mešavina rastvora A (0.1% TFA in H2O} i rastvora B (0,1% TFA u MeCN).

[020S]Gradijent je primenjen pri brzini protoka od 1.3 mL u minuti kao što sledi: gradijent A: je držao početne uslove 5% rastvora B za 0,2 min, povećano linearno na 95% rastvor B u 6 min. držao je 95% tokom 1,75 min, vraćeno na početne uslove u 0,25 min i održavano tokom 2,0 min; gradijent B: održao je početne uslove 5% rastvora B tokom 0,2 min, isu povećani linearno na 95% za 2,0 min, zadržano na 95% tokom 1,75 min. vraćeno je na početne uslove u roku od 0,25 min i održavano tokom 2 min.

[0209]Određivanje hiraine čistoće je urađno koriščenjem hiraine HPLC koja je izvedena na Agiient 1100 (binarna pumpa i ultraljubičastom višetalasrtom detektoru) sa ručnim ili automatskim (Autosampier 1100) sposobnostima ubrizgavanja. Sluhovi su korišćeni CHIRALPAK 1A 5 pm, 4,6 x 250 mm ili CHiRALPAK IB 5 pm, 4,6 x 250 mm u izokratskom režimu. Odluka o izboru elnenta je donošena zavisno od specifičnosti svake separacije. Dalji detalji u pogledu hirainih HPLC korišćenih metoda su

dati dole u tekstu.

Metod A: kolona CHiRALPAK IA 5 pm 4,6 x 250 mrn, eluent: EiOAc plus 0,1% DEA, brzina protoka: 1,0 mL po minuti; UV detekcija na 254 nm; stub na RT, eluent je korišćen kao uzorak rastvarača.

Metod A': kolona CHIRALPAK IA 5 pm, 4,6 x 250 mm, eluent: EiOAc plus 0,1% DEA, brzina protoka: 1,5 mL po minuti; UV detekcija na 254 nm; stub na RT, eluent je korišćen kao uzorak rastvarača.

Metod B: kolona CHIRALPAK IA pm 4,6 x 250 mm, eluent; heksan/izopropanol/dihiormetan (3:1:1 v/v) plus 0.1% of DEA, brzina protoka: 1,0 mL po minuti: UV detekcija na 254 nm; stub na RT, eluent je korišćen kao uzorak rastvarača. Metod B': kolona CHIRALPAK IA 5 pm 4,6 x 250 mm, eluent: heksan/izopropanol/dihiormetan (3:1:1 v/v) plus 0,1% DEA, brzina protoka: 1,5 mL po minuti; UV detekcija na 254 nm; stub na RT, eluent je korišćen kao uzorak rastvarača. Metod C: kolona CHIRALPAK IB 5 pm 4,6 x 250 mm, eluent: heksan/etanoi (7:3 v/v) plus 0,1% DEA. brzina protoka: 1,0 mL min-<1>, mL u minuti; UV detekcija na 254 nm, kolona na RT, eluent je korišćen kao uzorak rastvarača.

Metod C: kolona CHIRALPAK IA 5 pm 4,6 x 250 rnrn, eluent: heksan/etanoi (1:1 v/v) plus 0,1% DEA, brzina protoka: 1,0 mL po minuti; UV detekcija na 254 nm: stub na RT, eluent je korišćen kao uzorak rastvarača.

[0210]Pripremna HPLC prečišćavanja češće izvedena na instrumentu Waters FractioriLyrtx. Ovaj se instrument sastoji od kolektora frakcija, 2767 sample manager, regulator pumpe, modul li, 515 HPLC pumpa, pumpa sa binarnim stepenom 2525 binary gradient module, sklopni ventil, detektor niza fotodioda 2996 photodiode array detector i Micromass ZQ uređaj za masenu spektrometriiu Korišćena hromatografska kolona je bila Sunfire 5 pm, C18, 19 x 100 mm ili XBridge 5um, C18. 19 x 100 mm zavisno od tipa korišćenog sistema za eiuiranje, t.j. uslovi niske pH ili visoke pH vrednosti.

[0211]Za visoka-pH HPLC prečišćavanja, eluent se najčešće sastojao od mešavine rastvora A (0,04 M amonijak bikarbonat u H2O plus 0,1 % konc. NH4OH) i rastvor B je bio MeCN. Gradijent je prilagođen zavisno od profila nečistoće u svakom prečišćenom uzorku, čime se omogućava dovoljna separacija između nečistoća i željenog jedinjenja.

[0212]Hiralni pripremna HPLC prečišćavanja su izvedena na Agiient 1200 instrument (pripremna pumpa 1200 i uitraljubičasti đugotalasni detektor 1200) sa ručnim ubrizgavanjem. Hiraine kolone se koriste kao u nastavku: CHIRALPAK IA 5 um, 20 x 250 mm, CHIRALPAK IA 5 pm, 10 x 250 mrn iii CHIRALPAK IB 5 um, 10 x 250 mm. Sve hiraine HPLC metode su korišćene u izokratskom režimu. Mešavina eiuenta je izabrana na osnovu na analitičkom hirainom HPLC eksperimentu (videti iznad) koji je dao najbolju hiralnu separaciju.

[0213]<1>H(300 MHz) i13C NMR (75 MHz) spektri su registrovani na instrumentu Bruker Avance DRX 300. Hernijske promene su izražene u jedinicama delova po milionu, (ppm,0). Konstante spajanja su izražene u hercima hercima (Hz). Skraćenice za mnoštva pnmećena u NMR (nuklearna magnetna rezonanca) spektrima su prema sledećem: s (singlet), d (dublet), t (triplet) q (kvadruplet). m (multiplet), br (široko).

[0214] Rastvarači. reagensi t početni materijali su kupljeni i korišćeni kako je primljeno od komercijalnih prodavača osim ako nije drugačije precizirano.

[0215] Koriste se sledeće skraćenice:

Boe: (erf-butoksikarbonil, Jedinj:: Jedinjenje,

DCM: Dihlorometan, DEA: đietilamin,

DMA: N.N-dimetiiacetamid,

DMB: 2,4-dimetokstbenzil,

DMB-CHO: 2,4-dimetoksibenzaidehid,

DMF: N.N-dimetilformamid,

ee: Enantiomerni višak,

ekv: Ekvivalent(i), Et: Etii,

EtOAc: Etii acetat.

EtOH: Etanol, g: gram(i),

h: Sat(i),

I PA; izopropanol, L: Litar(i),

MeOH: Metanol, pL: Mikrolitar(i), mg: Miligrarn(i). mL: Miiilitar(i). nrtmei: Milimoi(i),

min; Minut(i),

NMM: N-metiimorfolin

P: UV čistoća na 254 nm iii 215 nm određeno pomoću HPLC-MS, PMB: 4-rneioksibenzil,

PMB-CHO: 4-metoksibenzaldehid,

RT: Sobna temperatura,

CBu: ferf-Butil,

TFA: trifluorosirćetna kiselina.

THF: Tetrahidrofuran,

TLC: Tankoslojna hormatografija, TMS: trimetilsilil,

Y: Prinos.

[0216]tntermedijari i jedinjenja opisani u nastavku su nazvani koriščenjem ChemDraw<®>Ultra verzija 12.0 (Cam- bridgeSoft, Cambridge, MA. USA).

L Racemska sinteza

1. 1, Opšta šema sinteze z a ra cemsku sintezu

[0217] Većina jedinjenja prema ovom pronalasku su sintetisani koriščenjem metodologije opisane u Šemi 1, koja predstavlja sintezu racemskog proizvoda. Racemski proizvodi su podvrgnuti hiralnoj HPLC za hirainu separaciju.

ŠemaJ; Opšta šema racemske sinteze za pripremu jedinjenja prema ovom pronalasku.

[0218]Opšta šema sinteze obuhvata sleđeće korake;

Korak 1: Keotpiperazin1.1 je zaštićen i pretvoren u imlnoetar 1 koriščenjem Meervvein reagensa (EtsOBF-'4).

Korak 2:Estar 2,2 je naknadno pretvoren u acii hiđrazid 2„Esiar 2.2 može da se dobije estrifikacijom kiseline 2.1.

Korak 3:Ciklodehidraciia između acii hidrazida 2 i iminoetar 1 dostavljeno zaštićen triazoiopiperazin 3.1. Posle toga, 3.1 je podvrgnut prema uklanjanju acidolitne zaštite da se dobije 3.

Korak 4:Tako dobijen intermedijar triazoiopiperazin 3 je aciiisan kroz reakciju sa odgovarajućom kiselinom hloriđ 4.1 da se dobije racemska krajnja ciljna struktura predstavljena putem opšte Formule 4. Hiraina krajnja jedinjenja su naknadno dobijena prečišćavanjem korišćenja hiraine

HPLC.

i.2. Korak 1: Zaštita i pretvaranje^ na imjnoetar 1

Metod A: Boe zaštita i pretvaranje na iminoetar 1

[0219] Metod A je postupak korišćen za sintezu iminoetra intermedijara 1 sa Boe zaštitom i prikazano je detaljno:

[0220] Postupak A je ilustrovan putem sinteze intermedijara 1a i 1b pri čemu R1 je H i Me respektivno.

Sinteza tert- butil 3- etoksi- 5, 6~ dihidropirazin- 1( 2H)- karboksHata 1a

[0221]

Sema 3: Sinteza tert-butil 3-etoksi-5,6-dihidropirazin-l{2H)-karbokJilata 1b

[0222] Na unapred napravljenom rešenju tnetifoksonijum ietrafluoroboraia (2,3 g, 0,012 mol) u anhiđrovanom DCM (20 mL) je dodato 1.2a (2 g, 0,01 mol) na 0 "C. Pofto je dodavanje završeno, ledena kupka je uklonjena, i reakciona mešavina je omogućena da se ugreje do sobne temperature

(RT) i mesa tokom dodatnih sati (napredak reakcije je nadgledan LCMS). Po završetku reakcije, zasićeni rastvor NaHC03(500 mL) je sporo dodat u reakcionu mešavinu i mešan je tokom 5 minuta. Organski sloj je odvojen i vodeni sioj je dodatno ekstrahovan sa ĐCM (200 mL). Ova kombinovani organski slojevi su naknadno isprani sa slanim rastvorom, osušen iznad, osušen iznad MgS04filtriran i dodatno osušen u vakumu da se dobije intermedijar iz naslova 1a kao viskozno žuto ulje. Prinos: 2,03 g (88 %).1HNMR (CDCis): S: 4.1(q, J = 7,1, 2H),3,85 (s, 2H), 3 5 (m, 1H),3.35 ( t J= 5.1, 2H).1.45 (s, 9H), 1.3 (t, J = 7.1, 3H).

Sinteza tert-butil 3- etoksi- 2- metil- 5. 6~ dihidropirazina~ 1( 2H)- karboksiiat 1b,

[0223]

Korak 1:Sinteza tert-butil 2-metii-3-oksopipearzin-1-karboksi!at 1.2b

[0224]NEt3(20 mL, 145 mmol) je dodat u rastvor 3-metilpiperazin~2-ona 1.1b (15 g, 131 mmol) u anhidrovani DCM (200 mL) pod N2na sobnoj temperaturi (RT). Posle 10 min mešanja, reakciona mešavima je ohlađena na 0<J>C i B0C2O (33 g, 151 mmol). Reakciona mešavina je mešana na sobnoj temperaturi tokom 1 sat i posle toga je oprano sa 0,5 M HC! (150 mL), slani rastvor (150 mL), osušeno iznad MgS04, filtrirane i koncentrovano na konstantnoj težini koja daje 2.2 kao žuto ulje (20,2 g, 72 %).

LCMS: P = 100 %, vreme zadržavanja = 2,0 min, (M-i H-?Bu)+: 159

Korak 2:Sinteza terf-butil 3-etoksi-2-metil-5,6-đihidropirazina-1(2H)-karboksilat1b

[0225] Rastvoru 1.2b (24 g, 87 mol) u anhidrovanom DCM (250 mL) na 0 X pod N2atmosferom je dodat prethodno napravljen rastvor trietiloksonijum tetrafluoroborat (19,92 g, 105 mmol) u anhidrovanom DCM (50 mL). Reakciona mešavina je ostavljena da se zagreje na sobnoj temperaturi (RT) i mešana je tokom 30 min posle čega je dodat zasićeni rastvor NaHC03(400 mL). Ekstrahovan! vodeni sloj je zatim opran sa DCM (200 ml) i kombinovani organski ekstrakti su naknadno opravni slanim rastvorom (300 ml), osušeni iznad MgS04, filtrirani i dodatno osušeniin vacuoda se dobije intermedijar u naslovu 1b kao bezbojno ulje. (20.7 g, 98 %). LCMS: P = 98 %, vreme zadržavanja = 1,8 min, (M+H+H20)<4>: 261;<1>H-NMR (CDCI3): 5 4,30 (br, 1H), 4,11-4.01 (m, 2H), 3,84 (br. 1H), 3,48-3,40 (m, 2H), 2,90 (br, IH), 1,32 (d, J = 6,9, 3H), 1,26 (t,J =7,1, 3H).

.Metoda?.:.Zasl!ia_kor!Sceniem.zastit!i[h__s_rupa_na.baz pretvaranje u iminoetar 1

[0226]Metod 8 je postupak korišćen za sintezu iminoetra intermedijara 1 sa zaštitnom grupom na bazi derivata benziia kao Što je DMB i detaijno je prikazana dote:

[0227]Postupak B je iiustrovan putem sinteze intermedijara 1c i 1d pri čemu R1 je Me i ta zaštitna grupa je DMB i PMB respektivno.

Sinteza i-( 2, 4- dimetoksibenzii)- 5- etaksi- 6~ metil- 1, 2, 3, 6- tetrahidropirazina 1c

[0228]

Korak 1:Sinteza 4-(2,4-dimetoksibenzii)-3-metilpiperazin-2-ona 1.2c

[0229]U laboratorijsku bocu okruglog dna, je naknadno uveden 3-metilpiperazin-2-on {10 g, 88 mmol), 2.4-dimetoksibenzaidehid (16 g, 96 mmol), sirćetna kiselina (6,5 mi, 114 mmoi) i natrijum triacetoksiborohidrid (22,3 g. 105 mmol) u komercijalnom anhidrovanom acetonitriiu (750 ml..), na sobnoj temperaturi (RT), pod N2atmosferom. Ova reakcija je mešana na sobnoj temperaturi tokom noći. Reakciona mešavina je ugašena pažljivo na 0 "C sa zasićenim NaHCOs rastvorom (100 mL) sve dok nije primećeno više mehurića. Vodeni i organski slojevi su odvojeni. Vodeni stoj je ekstrahovan sa EtOAc (3 x 300 mL) i kombinovani organski slojevi su oprani slanim rastvorom, osušeni iznad MgS04, filtrirani, i koncentrovani pod smanjenim pritiskom da se dobije jedinjenje iz naslova kao žuto ulje. Sirovo jedinjenje je zatim prečišćeno na siiika gelu (DCM/MeOH: 98/2 do 95/5) da se dobije željeni proizvod 1.2c kao svetio žuto ulje (20.6 g, 73 rnrnoL 89 %). LCMS: P - 97 %, vreme zadržavanja - 1,6 min, (M+H)+; 265.

[0230]U slučaju PMB i TMB zaštite. 4-nrietoksibenzalđehid iii 2,4.6-trimetoksibenzaldehiđ je korišćen umesto 2,4-dimetoksibenzaldehida da se dobije 4-(4-metoksiberizil)-3-metilpiperaztn-2-on iii 4-(2,4,6-

trimetoksi benztl}-3-rnelilpiperazin-2-on.

Korak 2:l-{2,4-dimeioksibenzil)-5-etoksi-6-m^ 1c

[0231]U pećnici osušen (115"C) natrijum karbonat (18,6 g, 98 mmol. 2,25 ekv.) je postavljen u 500 mL laboratorijsu bocu okruglog dna. Laboratorijska boca okruglog dna je ispunjena Ar i zatim zatvorena kapicom sa gumenim septumom. Rastvor 4-(2,4-dirnetoksi benzil)-3-metilpiperazin-2-ona1.2c{20,6 g, 78 mmol, 1 ekv.) u anhidrovanom DCM (250 mL) je dodat, posle toga je usledio trietiloksonljum tetrafluoroborat (18,6 g. 98 mmol, 1,25 ekv.) u jednom delu. Posle toga, reakciona mešavina je mešana dalje na sobnoj temperaturi (RT) tokom 1 h posie čega je reakciona mešavina razblažena vodom (250 mL). Vodeni sloj je ekstrahovan sa DCM (3 x 150 mL). Organski slojevi su kombinovani, osušeni iznad MgS04, filtrirani i koncentrovani pod redukovanim pritiskom . Sirovo jedinjenje je zatim prečišćeno na silicijumskom gelu (EtOAc) da se dobije željeni proizvod 1c kao naranđžasto ulje. Prinos: 13,2 g, 58 %. LCMS: P = 93 %, vreme zadržavanja = 1,8 min, (M+H+H2O)<4>': 311;<1>H-NMR (CDCI3): 6 7,23 (d,J=8,8 Hz. 1H). 6,48 (d.J=8,8 Hz. 1H). 6.44 (s, 1H), 4.02 (m. 2H), 3,92 (s, 3H), 3.91 (s, 3H), 3,86(d, JaB^-14,0 Hz,1H), 3,46 (d, j^b=14,0 Hz, 1H), 3,44 (ni. 2H). 3,10 (m, 1H), 2,79 (m, 1H), 2,32 {m, 1H), 1,35 (d. J= 6,8 Hz, 3H), 1.24 (t, J= 6,0 Hz, 3H).

[0232]Početni korak 2 od 4"(4-metoksibenzii)-3-metiipipearzin-2-ona je ostavljen da izoluje 1-(4-metoksibenzi!)-5-etoksi-6-metil-1,2.3:6-tetrahidropiraztn 1cl. LCMS: P ~ 95 %, vreme zadržavanja = 1,8 min, (M+H+H20)+: 231.

1.3.Korak 2: Formiranje acii hidrazida 2 Metod C: acii hidraztd 2

[0233]Metod C je postupak korišćen za sintezu acii hidrazida 2 i detaljno je prikazan dole:

Metod C je iiustrovan putem sinteze intermedijara 2a, 2k i 2r.

Sinteza 2' rn& tiitiazoi- 4~ karbohidraziđa 2a

[0234]

[G235JU100 mL laboratorijska boca okruglog dna opremljena kondenzatorom, etil 2-meitltiazoi-4-karboksilatom 2.2a (10 g, 58,4 mmol, 1 ekv.) je rastvoren u anhidrovanom EIOH (25 mL) i tretirano na sobnoj temperaturi (RT) sa hidrazin monohidratom (17,0 ml... 354,4 mmol, 6 ekv.). Dobijeni žuti rastvor je zagrejan na temepraturi refiuksa tokom 14 h. Posle omogućavanja reakctone mešavine da dođe do sobne temperature (RT), rastvor je koncentrovan pod redukovanim pritiskom da se dobije 13,4 g braon ulja. Udružena isparavanja korišćenje 3 x 200 ml. mešavine komercijalnog anhidrovanog DCM:MeOH (1:1) su izvedena da se ukioni preostala voda. Preostali deo je zatim rekristalizovan iz vrućeg EtOH (60 mi.,). Dobijeni kristali su filtriran! i isprani hladnim (0 SC) EtOH (2 x 30 mL). Naranđžasta čvrsta supstanca je osušena pod vakumom tokom 1 h da se dobije 2a. Prinos: 5,85 g,64%. LCMS: P = 100 %, vreme zadržavanja = 0,5 min. (M+H)+; 158; 1H-NMR (CDCI3}; 8 8,32 (br, IH). 7,96 (s, 1H), 4,07 (br, 2H), 2,70 (s. 3H).

[0236]U jednom izvođenju 1,2 do 20 ekvivalenata hidrazin hidrata je korišteno da se izvede ova reakcija koriščenjem opsega temperature od sobne temperature do refiuksa,

[0237]U jednom izvođenju, hidrazid 2 je rekristalizovan i/ili nataložen.

[0238]Sledeći Intermedijari su takođe pripremIjni od adhockarboksilnih kiselina, estara metila ili estra etila koriščenjem Opšte metode C: intermedijar 2b: 2~trifluoromet!lhiazol-4-karbohidrazid, meti! estar prekursor je prethodno sintetisan koriščenjem konvencionalnog postupka esierifikacije (kao što je TMS-C1 u metanolu) iz komercijalno dostupne kiseline;

intermedijar 2c: 2-etiltiazol-44<arbohiđrazid;

intermedijar2d:2-viniltiazo!-44carbohidrazid, terf-butii 2-(4-(hidrazinkarbonil)tiazol-2-ii)ettlkarbamat je korišćen kao prekursor vi ni Inog deia, komercijalno dostupan etil 2-(2-aminoetii)tiazol-4-karbokstlat dihidrohiorid je prethodno dobio Boe zaštitu i zatim esterifikovart koriščenjem koncencionalnih postupaka;

intermedijar 2e: 2-metiloksazol-4-karbohidrazid;

intermedijar 2f: 2-jzopropiloksazol -4-karbohidrazid, etii estar prekursor je prethodno sintetisan iz kondenzacije /zobutiramida i etil 3-bromo-2-oksopropanoala u skladu sa VVO2009/70485 A1;

intermedijarom 2g: 2-ciklopropiloksazot-4--karbohiđra2iđ, etil estar je napravljen kako je gore opisano;

intermedijar 2h: 2.5-dimetiltiazol -4-karbohidrazid. metil estar prekursor je prethodno sintetisan koriščenjem postupka esterifiikacije (kao što je TMS-C1 u metanolu) iz komercijalno dostupne kiseline;

intermedijar 2i: tert-butil {4-(hidrazinkarbonil)tiazol-2-il)karbamai, etil 2-((tert-butQksikarbonil)amina)tiazoi-4-karboksNat prekursor je prethodno dobio Boo zaštitu koriščenjem konvencionalnog postupka,

intermedijar 2j: 2-izopropiitiazol-4-karbohidrazid.

Sinteza 4- metiitiazoi- 2- karbohidrazida 2k

£0239]

[0240]U 100 ml laboratorijskoj boci okruglog dna opremljenoj kondenzatorom, 4-meti!tiazol-2-karboksiiat 2.2k (500 mg. 2,92 mmol, 1 ekv.) je rastvoren u anhidrovanom EtOH (5 mL.) i tretiran na sobnoj temperaturi (RT) sa hidrazin monohidratom (216 ul, 4,46 mmol, 1,5 ekv.). Dobijeni rastvor je zagrejan na temperaturu refluksa tokom 18 sati. Pošto se ostavi da reakciona mešavina dođe na sobnu temperaturu, rastvor je koncentrovan pod smanjenim pritiskom ■ dobijen sirov rastvor je prečišćen na silicijumskoj podlozi (eluent: DCM/MeOH: 100/0 do 97/3) da se dobije 266 mg 2k kao bela čvrsta supstanca (266 mg, 1,69 mmol, 57 %). LCMS: P - 90 %, vreme zadržavanja ■-■ 0.7 min, (M>H)<+>: 158.

[0241]Sledeći intermeđijari su takođe pripremljeni odad hockarbokstlnih kiselina, estara metila ili estra etila koriščenjem Opšteg metoda C: Intermedijar 21: 4,5-dimetiltiazoi-2-karbohidrazid, pripremljen iz estra 5.3. Ovaj drugi je pripremljen u dva koraka iz komercijalnog tiazola 5.1 (postupak prilagođen iz Castells, J, et al., Tetrahedron Lett , 1985, 26, 5457-5458).

Korak 1;Sinteza 4,5-dimetiliiazol-2-karboksilne kiseline 2.11.

[0242]Rastvor2.0I(3,0 g, 25,7 mmol, 1 ekv.) u suvorn THF (50 mL) je degasovan koriščenjem vakumske pumpe i ispunjen sa N2(ponovljeno tri puta). Rastvor je zatirn ohlađen do -7<3£'C /n-butillitijurnu (2,5 M u heksanima. 11,3 itiL,28,3 mmol. 1,1 ekv.) je dodate. Rastvor je mešan tokom 30 min na -78°C i zatim je rastvor postavljen ispod CO2atmosfere (sa mehurićtno u rastvora). Posle 1 sat mešanja na - 78"C, rastvor je ostavljen da se zagreje na sobnoj tremperaturi. HCl 1N (25 mL) i EtOAe (200 mL) su dodati. Posle odvajanja obe faze, vodena faza je ekstrabovana sa DCM (2 x 100 mL). Organske faze su kornbinovane isprane vođom, osušene iznad MgSO.ifiltrirane i koncentrovane pod redukovanim pritiskom da se dobije kiselina2.11(3,0 g, 6,30 mmol) koji je korišćen u sledećem koraku bez daljeg prečišćavanja.

Korak2: Sinteza metil 4,5--dirneliltiazoi-2-karboksiiata2.21

[0243]U rastvor kiseline2.11(3,0 g, 6,30 mmol, 1 ekv.) u komercijalno suv MeOH (12 rnL) je ukapavanjem dodat na sobnoj temperaturi (RT) hlorotrimetilsiian (4,0 mL, 31,5 mrnol, 5 ekv.). Dobijeni rastvor je mešan na 60°C tokom 14 sati. Reakciona mešavina je ohlađena do sobne temperature (RT), razblažena sa DCM (100 mL) i ugašena zasićenim rastvorom NaHCOs (50 mL), Vodeni sloj je ekstrahovan sa DCM (2 x 50 mL). Organske faze su kornbinovane, isprane slanim rastvorom (100 mL), osušene iznad MgS04, filtrirane i koncentrovane pod redukovahnim pritiskom. Sirovi rastvor je prečišćen svetlećom hromaiografijom na silicijumskom gelu (eluent Pet. Etar / EtOAc: 100/0 do 80/20) da se dobije2.21(1.32 g, 7.7 mmol, 55 %). LCMS: P := 33 %, vreme zadržavanja = 2.1 min. {M+H)<+>; 172.

[0244]intermedijar 2m: 3-metil-1,2,4-oksadiazol-5-karbohfdrazid, pripremljen iz estra2.2mkoriščenjem Opšteg metoda C. Ovaj drugi je pripremljen u jednom koraku iz acetimidamida2.0m (prilagođen od Street Leslie J et al, J. Med. Chem.,

[0245]U rastvor [E:)-N'-htdroksiacet!fnidamida 2.0 m (1,0 g, 13,50 mmoi, 1 ekv.) i piriđina (4,35 mL, 54,0 mmol, 4 ekv.) u suvom DCM (40 mL) je na sobnoj temperaturi (RT) dodat etiioksali! hlorid (2,4 g, 18,0 mmol, 1.3 ekv.). Rastvor je mesari na refluksu tokom 14 sati. Reakciona mešavina je ohlađena do sobne temperature i ugašena sa zasić. NH4CI. (30 mL). Vodeni sloj je ekstrahovan sa DCM (2 x 50 mL). Organske faze su kornbinovane, isprane zasićenim NaHCOs (50 mL), osušene iznad MgS04, filtrirana i koncentrovana pod ređukovanim pritiskom da da 2.2 m kao žuto ulje (1,32 g, 8,45 mmol, 63 %) stoje korišćeno u sledećem koraku bez daljeg prečišćavanja. LCMS: P - 92 %, vreme zadržavanja = 2,0 min, (M+H)*; 157.

[0246] Intermedijar 2n: 3-metil-1,2,44iadiazoi-5-karbohiđrazid, pripremljen iz estra 2,2 m koriščenjem Opšteg metoda C. Ovo je kasnije pripremljeno u jednom koraku iz acetarnida 2.0n. reagenasa 2.G1<V>i 2.0n" (prilagođeno iz US5583092A1).

[0247]Rastvor 2.0n (500 mg, 8,46 mmoi, 1 ekv ), i 2.0n' (820 uL, 9,31 mmol, 1,2 ekv ) u suvom toluenu (23 mL) je mešan na refluksu tokom 2 sata. Rastvarao je zatim ispario ispod redukovanog pritiska i ostatak je ponovo rastvoren u toluenu (11,3 mL).. 2.On" (2,0 mL, 25,4 mmol, 3 ekv.) je dcdato rastvoru i đobijena mešavina je mešana na refluksu tokom 4 sata. Rastvarao je ispario i dobijena sirovina je prečišćena svetlećom hromatografijom na silicijumskom gelu (eluent: DCM 100%) da se dobije željeni estar2.2n (150 mg, 0,95 mmoi, 11 %) kao braon ulje LCMS: P~97 %, vreme zadržavanja = 1,8 min, (M+H)"*": 159. [024S]Intermedijar 2o: 4-meliloksazol-2-karbohidrazid. Pripremljen iz estra 2.2o koriščenjem Opšteg metoda C. Ovaj drugi je pripremljen u jednom koraku iz 4-metiloksazola 2.0o.

[0249]U rastvor2.0o(1,0 g, 12,0 mmol, 1 ekv.) u komercijalno suvom THF (50 rnL) je dodalo na -78"C pod Ar atmosveri n-BuLi (2.5M u heksanima, 5,30 mL, 13,24 mmoi, 1,1 ekv.}. Posle 30 minuta mešanja na -78"C. etilhloroformat {1,16 mL, 12,13 mmol, 1,0 ekv.) je dodat ukapavanjem. Posle 30 minuta mešanja, suva ledena kupka je uklonjena i dobijeni rastvor je ostavljen da se zagreje na sobnu temperaturu (RT) i meša tokom 14 sati. HCl 1N (15 mL) i EtOAc (30 mL) su dodati. Posle odvajanja obe faze, vodena faza je ekstrahovana sa DCM (2 x 10 mL). Organske faze su kornbinovane, isprane slanim rastvorom (20 mL), osušene Iznad MgS04, filtrirane i koncentrovane pod ređukovanim pritiskom. Ova dobijena sirovina je prečišćena svetlećorn hromatografijom na silicijumskom gelu (eluent: DCM / MeOH : 100 / 0 do 99,5/0,5) da se dobije estar2.2o(240 mg, 1,55 mmol, 13 %) kao bezbojno ulje. LCMS: P = 96 %, vreme zadržavanja = 2,0 min, (M+H)*; 156.

[0250]Intermedijar2p:3-f'zopropii--1,2,4-tiadiazol-5-karbohidrazid, pripremljen iz estra 2.2p koriščenjem Opšteg metoda C. Ovaj drugi je pripremljen u jednom koraku iz/zobutiramida2.0p,reagenasa2.0p'i 2.0p"kako je prikazano doie.

[0251]Rastvor 2,0p (500 mg, 5,74 mmol, 1 ekv.), i 2.0p' (555 uL, 6,31 mmol, 1,2 ekv.) u suvom toluenu (15 mL) je rnešan na refluksu tokom 2 sata. Rastvarač je zatim ispario ispod redukovanog pritiska i ostatak je ponovo rastvoren u toluenu (7.6 mL). 2.0p" (900 uL, 11,34 mmoi. 2 ekv.) je dodat u ovaj rastvor i dobijena mešavina je mešana na refluksu tokom 4 sata. Rastvarač je ispario i dobijena sirovina 2.2p (587 mg, 3,15 mmoi, 55 %) je korišćena u sledećem koraku bez daljeg prečišćavanja. LCMS: P = 45 %, vreme zadržavanja = 2,3 min, (M+H)+; 187.

[0252] Intermedijar 2q: 1,3-đimetil-1H-pirazol-5-karbohiđraziđ je pripremljen iz komercijalnog etil estra koriščenjem

Opšteg metoda C.

Sinteza 6- metilpikiinohirazida 2r.

[0253]

Korak 1:Siteza metil 6-metilpikolinata 2.2r

[0254] U rastvor 6-rnetiipikolinske kiseline 2.1 r (3 g, 21.88 mmoi} u anhidrovanom MeOH (70 mL) na sobnoj temperaturi (RT) pod N2atmosferom je dodat TMS-CI (13,88 mL, 109 mmol). Reakciona mešavina je ostavljena uz mešanje na 80" Ctokom noći je koncentrovana pod ređukovanim pritiskom da se dobije 5,51 g žutog ušja korišćenog bez daljeg prečišćavanja u sledoćern koraku. LCMS: P - 95 %, vreme zadržavanja - 1;D2 min, (M+H)<+>;152.

Korak2:Sinteza 6-metilpikolinohidraziđa 2r

[0255] U rastvor sirovog metil 8-metlipikolinata 2,2r (5,5'i g. 21,88 mmol) u EtOH (22 mL) na sobnoj temperaturi (RT) je dodat hidrazin monohiđrat (10,61 rnL, 219 mmol). Reakciona mešavina je zagrejana do refluksa tokom 90 minuta. Posle ostavljanja reakcione mešavine da dostigne sobnu temperaturu (RT), rastvor je koncenirovan pod ređukovanim pritiskom i prečišćen putem hromatografije na silicijumskom gelu (eluent: DCM/MeOH: 100/0 do 96/4) da se dobije željeni proizvod 2r kao bela čvrsta supstanca (2,34 g, 15,48 mmol, 71%). LCMS: P - 100 %, vreme zadržavanja == 0,54 min, {M+H)+; 152.

[0256] U jednom izvođenju 2,5 do 20 ekvivalenata hidrazin hidrata je korišćeno da se izvede ova reakcija koriščenjem temperaturnog opsega od sobne temperature (RT) do refluksa.

[0257] U jednom izvođenju, hidraziđ 2 je rekristalizovan i/ili nataložen. Siecieći intermedijari su takođe pripremljni odad hockarboksilnin kiselina ili etil estra karbokstlne kiseline koriščenjem Opšteg metoda

C:

intermedijar 2s: 6-hidraksipikoiinohidrazid,

intermedijar 2t: 6-bromopikolinohiđraziđ.

i-4- Korak 3: Ciklohidratacija koja vodi do triazolopipe razina 3

Metod Di Cikiodehiriracija i acidoiiza- Boe zaštita

[0258]Metod D je postupak korišćen za sintezu triazoiopiperazina 3 i detaljno je prikazan dole:

[0259]Metod D je ilustrovan sintezom intermedijara 3a. 3fi3g pri čemu je zaštitna grupa Boe.

Sinteza 2- metil~ 4'( 5, 6, 7f8' tetrahidro41, 2A] trkuo( o[ 4/ J- a} pirazin- 3it) tiazoi hidrohtorida 3a.

[0260]

Korak 1:Sinteza ferf-butil 8-meti i-3-(2 - meti itiazol-4- i i)-5.6 -d i hici ro-[ 1,2.4]triazoio[4.3--aJpirazin-7<8H>-karboksilata3.1a

[0261]U 100 mL laboratorijsku bocu okruglog dna sa kondenzatorom, imino etrom1fa(1.089 g. 4,77 mmoi, 1 ekv.) je rastvoren u komercijalnom anhidrovanom EtOH (20 mL), u koji je dodat 2-rnetiltiazol-4-karbohidrazid 2a (750 mg, 4,77 mmol, 1 ekv.) u jednom delu. Dobijem rastvor je mesari pod refluksom tokom noći. Reakciona mešavina je ohlađena na sobnoj temperaturi (RT) i rastvarač je uklonjen pod ređukovanim pritiskom. Sirovo jedinjenje je zatim prečišćeno rta silika geiu (DCM/MeOH: 99/1 do 98/2) da se dobije željeni proizvod 3.1a kao bela čvrsta supstanca (1,07 g, 3,33 mmoi, 70%). LCMS: P - 100 %, vreme zadržavanja~2.1 min, (M+H)<+>: 321.

Kora/r2 Sintez 2-metil-4--(8-metN-5,6(7l8-tetrahidro-[1,2,4]triazolo[413-a]pirazin--3- il)tiazolhidrchiorida 3a

[0262]HCl 4M rastvor u 1,4-dioksana (8,32 mL, 33,3 mmol) je dodat u jednom delu u rastvor 3.1a (1,07 g, 3,33 mmoi) u komercijalnomfzo-propanolu (20 mL). Reakciona mešavina je mešana na 60"C. Posle 1,5 sata (potpuno pretvaranje putem LC-MS), reakciona mešavina je ostavljena da se ohladi na sobnoj temperaturi i zatim je još ohlađena na 0 "C ledenom kupkom. Posle toga, 10 ml. Et20 je dodato. Posle 15 min mešanja, talog je filtriran i osušenin vacuoda se dobije 3a kao bela čvrsta supstanca. Prinos: 736 mg (86%). LCMS: P = 97 %. vreme zadržavanja = 0,5 min, (M+H)'; 222.

[0263] Sledeći intermedijar! su takođe pripremljeni izad hocreagenasa i intermedijra koriščenjem Opšteg metoda D: intermedijar 3b: 4-(5,6.7,8-tetrafiidro-[1,2.4]triazolo[4.3-a]pirazin-3-il)-2-(trifiuorametii)tiazoi hidrohlorid, iz intermedijara1ai 2b; intermedijar 3c: 4-(5;6,7,8-tetrahidro-[1,2,4]tria;.rolo{4,3-ajpirazin-3-il)-2-viniitiazol. iz intermedijara 1a i 2d zatim je dobijen Boe aminoetil derivat3.1cje oslobođen zaštiteukiselim usiovima (kao korak 2 iznad koriščenjem samo 2 ekv. HCl u dioksartu) posle čega je usledila eliminacija dimetilamina (koriišćenjem 10 ekv. NaH i Mel na sobnoj temperaturi (RT)), zatim je dobijen vini! derivat 3.1c podvrgnut koraku 2 gore da se dobjie 3c;

intermedijar 3d: 4-{5,6.7,8-tetrahidro-[1,2.4]triazoio[4.3-a]piraziri-3-i!)-2-izoprop!ioksazol hidrohlorid, iz

intermedijara1ai 2f;

intermedijar 3e: 2wzopropil-4-(5.6,7,8-tetrahiđro-[1.2,4jtriazolo[4,3-ajpirazin-3-il)tiazol hidrohlorid, iz intermedijara1ai2j.

Sinteza 4- metil~ 2-( 5, 6, 7, 8- tetrahidro-[ 1, 2, 4] triazoto{ 4, 3- a] pirazm~ 3il) tiazo! a 3f

[0264]

vntniazote j>j

Korak 1:Sinteza teff-butil 3-{4-metiitiazoi»2»!!)-5!6-dihidro-[1,214]tri3Zo!o[4,3-a]pirazin-7(8H)-carboksiiaia 3.1 r

[0265]imino-etar1a(148 mg, 0,649 mmol, 1 ekv.) je rastvoren u anhhiđrovanom EtOH (3 ml) na sobnoj temperaturi (RT), kom je dodat 2-metiltiazol-4-karbohidrazid 2k(102 mg, 0.849 mmol, 1 ekv.). Dobijeni rastvor je mešan pod refluksom tokom noći. Reakciona mešavina je ohlađena na sobnoj temperaturi (RT) i rastvarač je uklonjen pod ređukovanim pritiskom. Sirovo jedinjenje je zatim prečišćeno na siiika gelu (DCfvi/MeOH: 99/1 do 98/2) da se dobije željeni proizvod 3.1 f kao žuta čvrsta supstanca (174 mg. 83 %). LCMS: P = 93%,vreme zadržavanja = 2,2 min, (M+H)<*>;322.

Korak 2Sinteza 2-metil-4-(8-metil-5,6,7.8-tetrahidro-f1.2,4]triazolo[4,3-a|piraz!n-3-il)tiazo!hidrohlorida 3f

[0266]4M HCi u dioksanu (2,71 mL, 10,83 mmol) je dodato u rastvor Boc-triazofopiperazina 3.1f (1,07 g, 3,33 mmol) u /zo-propanolu (3 mL) na sobnoj temperaturi (RT). Reakciona mešavina je mešana na 60"C. Posle 1,5 sata (potpuno pretvaranje pomoću LC-MS), reakciona mešavina je ostavljena da se hladi na sobnoj temperaturi i zatim je još ohlađena na 0"C sa ledenom kupkom. Posle toga, 5 mL Et^O je dodato. Posle 30 min mešanja, talog je filtriran i osušenin vacuoda se dobije 3f kao bela čvrsta supstanca (132 mg, 95 %). LCMS: P = 97 %, vreme zadržavanja = 0,9 min, (M+H)<*>; 222.

Sinteza 8- metii- 3-( 6~ metilpiridin- 2- il)- 5, 6, 7, 8- tetrahidro-[ 1, 2. 4] triazoio [ 4, 3- a] pirazina 3g.

[0267]

Korak 1:Sintezatert- butil 8-metif-3-{6-met!]piridtri-2-il)-5,6-dihidro-[1,2,4]triazoio[4,3-a]pirazin-7(8H}-karboksilai 3.1g

[0268]iminoetar 1b (468 mg, 1,93 mmol, 1 ekv.) je rastvoren u anhidrovanom EtOH (2 mL), u koji je dodat karbohiđiazid2r(270 mg, 1,79 mmoi, 1 ekv ). Dobijena mešavina je mešana na 135 "C u uljnoj kupki tokom 63 h. Reakciona mešavina je ostavljena da reaguje na sobnoj temperaturi (RT) pri Čemu su isparijive supstance ukionjenje pod smanjenim pritiskom. Sirovo jedinjenje je zatim prečišćeno na hromatografiji sa siiicijskim geiom (DCM/MeOH: 99/1 do 98/2) da se dobije željeni proizvod3.1gkao žuto ulje (380 mg, 1,15 mmol, 65 %). LCMS: P = 95 %, vreme zadržavanja = 2,2 min, (M*H)+; 330.

Korak 2;Sinteza 8-metil--3-(6-metiipiridin-2-il)-5,6,7,8-tetrahidro- [1,2,4jtriazolo[4.3"a3pirazina 3g dihidrohloridna so

[0269]4M HCl u đioksanu (5,77 mL, 23,07 mmoi) je dodat u rastvor od 3>1 g (380 mg, 1,15 mmo!) u i'zo-propanoi (10 mL). Reakciona mešavina je mešana na 60 X tokom 1 h. Reakciona mešavina je ostavljena da reaguje na sobnoj temperaturi (RT) t zatim je još ohlađena do 0 X. Talog je na kraju dobijen filtriranjem i osušenin vacuoda se dobije 3 g kao žuta čvrsta supstanca.(367 mg, Kvant ). LCMS: P = 92 %, vreme zadržavanja - 0,2 min, (M+H)<+>; 230.

[0270]Sledeći intermedijar! su takođe pripremljeni izađ hocreagenasa i intermeđijra koriščenjem Opšteg metoda D: intermedijar 3h: 6-(8-metii-5,6,7,8-tetrahiđro-[1 l2>4]triazoio[4,3-a]pirazin-3-il)piridin-2-ol hidrohioridna so, iz intermedijara 1c i 2s; intermedijar 3i: 3-(6--bromopiridin--2-il)-S-meti!-5,6,7,8-tetrahidro-f1,2,4] triazo)o[4,3-a]pirazin dihidrohlorid so, iz intermedijara 1b i 2t.

Metod Ej Cjklod

[0271] Metod E je postupak korišćen za sintezu triazolopiperazina 3 i detaljno je prikazan dole:

[0272] Metod E je ilustrovan sintezom intermedijara 3j i 3q pri černu je zaštitna grupa DMB.

Sinteza 2- etil- 4-( 8~ metil- 5, 6, 7, 8- tetrahidro-[ 1, 2, 4] triazofo[ 4, 3~ alpšrazin- 3- il) tiazota 3j.

[0273]

Korak 1:Sinteza 4-(7-(2,4-dimetoksibenzil)-8-metii-5.6:7,3-tetrahidro-[1,2,4jiriazolo[4,3-a]pirazin-3-il)-2-etil-tiazoia3.1]

[0274] U10 mL laboratorijske boce okruglog dn3 opremljen kondenzatorom, iminoetar 1c (790 mg, 2,70 mmol, 1 ekv.) je rastvoren u anhidrovanom EtOH (2,5 mL). u koji je dodat 2-meti!tiazol-4-karbohidraziđ 2c (462 mg, 2,70 mmoi, 1 ekv.) u jednom delu. Dobijeni rastvor je mešan na 135 "C tokom noći. Posle toga. reakciona mešavina je dovedena na sobnu temepraturu (RT) i isparljive supstance su uklonjene pod ređukovanim pritiskom. Sirovo jedinjenje je zatim prečišćeno na hromatografiji sa silicijumskim gelom (DCM/MeOH: 99/1 do 98/2) da se dobije željeti! proizvod3.1 jkao žuta čvrsta supstanca (837 rng, 2,10 mmoi, 78 %). LCMS: P = 97 %, vreme zadržavanja = 1,9 min, (M+H)": 400.

Korak 2Sinteza 2-eti!-4-(8-rneti!-5,6,7,8-tetrahidro-[1,2,4]triazoio[4,3-ajpirazin-3-!l)iiazola3j

[0275] U laboratorijskoj boci okruglog dna koja sadrži 10 ml DCM je dodat 4-(7-(2,4-dimetoksiben2il) 8-metil-5,6,7,8-tetarhkiro-[1,2,4]triazolol4,3-a3pirazin-3-il)-2-eti«iazol 3.1j (0,837 g, 2,10 mmol). Zatim, TFA (10,48 mL, 141 mmol), je dodat u reakcionu mešavinu na sobnoj temperaturi (RT). Posle 30 min mešanja, mešavina je koncentrovana. Zatim je oko 25 mL DCM dodato u ostatak tako dobijen, I isprano zasićenim NaHC03(15 mL). Vodeni sloj je ekstrahovan dvaput sa 25 mL DCM, organski siojevi su isprani sa 25 mL slanog rastvora, osušeni iznad MgS04, filtrirani i koncentrovani pod ređukovanim pritiskom da se dobije sirovi 3c kao ružičasto ulje (500 mg, 96 %). Sirovi oblik 3j je direktno korišćen u sledećem koraku bez daljeg prečišćavanja.

[0276]U jednom izvođenju, alternativno dijagnostičko ispitivanje je jednako korišćeno je obuhvatilo obradu sušenog ostatka koji je dobijen iznad sa 4 M HCI/dioksanom (20 ekv.) na sobnoj temperaturi (RT) pod mešanjem. Posle 5 min, Et20 je dodat da se pomogne taloženje. Ovaj talog je filtriran pod vakuumom, ispran sa Et?0 i osušen pod visokim vakuumom da se dobije 3j.

[0277] Sledeči intermedijari su takođe pripremljeni izad hocreagenasa i intermedijara i korišćen je Opšti metod E: intermedijar 3ki 4-(8-metil-5,6!7,8-tetrahidro-[1I2.43triazoio[4,3-a]pir3zin-3-il)-2-viniitiazol iz intermedijara 1c i 2d: Boe aminoeiil derivat 3.1k izolovan posle kondenzacije je prvo bio oslobođen Boe zaštite (8 ekv HCI/dioksana). Posle eliminacije dimetilamina (korišćenje 10 ekv NaH i Me! na sobnoj temperaturi (RT)), dobijenom vini! delu je zatim uklonjena DMB zaštita kao u koraku 2 da se dobije 3k;

intermedijar31: 2-metiF4-(8-meti!-5.6,7,8-tetrahiđro-[1,2,4]triazaio[4,3-a]pirazin-3-ii}oksazol, iz intermedijara 1c i 2e;

intermedijar 3m2-iz.opropil-4-(8-mefii-5,6,7l8-tetrahidro-[1,2,4jtriazolo[4,3-ajpirazin-3-il)oksazol, iz intermedijara 1c i 2f;

intermedijar 3n: 2-ciklopropi!-4-(8-meti!-5,6,7,8-tetrahiđro-[1,2,4)triazoloE4,3-a]pirazin-3-il)oksazoi, iz intermedijara 1ci2g;

intermedijar 3o: 2,5-dimetil-4-(8-met!i-56l7,8-tetrahidro-[1,2,4jtriazolo[4,3-ajpirazin-3-tl)tiazol, iz intermedijara 1c i 2h;

intermedijar 3p: 4-(8-metil-5,6,7,8-tetrahidro-[1,2,4]triazolo[4,3-a]pirazin-3-il)tiazol-2-amin, iz intermedijara 1c i 2g.

Sinteza 4, 5- dimetil- 2-( 8- metil- 5, 6, 7, 8- tetrahidro-[ 1, 2, 4] triazoio{ 4, 3- a] pirazin- 3- i!) tiazo!

hidrohlorida 3q.

[0278] Korak 1:Sinteza 2--(7-(2,4-dimeioksibenzi!)--8--meti^ 4,5- dimetiitiazola3.1 q.

[0279]Iminoetar 1d (768 mg, 2,63 mmol, 1 ekv.) je rastvoren u anhidrovanom EtOH (5 mL), u koji je dodat 4,5- dimetiltiazol-2-karbohidrazid 21 (450 mg, 2,63 mmol, 1 ekv.) i dobijena reakciona mešavina je refluksovana tokom 48 sali. Reakciona mešavina je zatim dovedena na sobnu temperaturu (RT) i isparenja su uklonjena pod ređukovanim pritiskom, posle čega je izolovana sirovina prečišćena koriščenjem ftromatografije na silicijumskom gelu (DCM/MeOH: 100/0 do 98/2) da se dobije željeni proizvod3.1q(786 mg, 1,93 mmol, 74 %). LCMS: P = 65 %, vreme zadržavanja = 1,9 min, (M+H)+; 400.

Korak 2: Sinteza 4, 5- dimetil- 2-( 8- metil- 5. 6, 7,& tetrahidrG-[ 1, 2, 4] triazok)[ 4, 3- a} pirazin- 3' il} tiazol 3c.

[0280]U 3.1q (0.786 g, 1.97 mmoi) u anhidrovanom DCM (6,6 mL.) na sobnoj temperaturi (RT) je dodat TFA (9.1 mL, 148 mmol) i mešavina je refluksovana tokom 30 min posle čega su uklonjene isparljive supstance pod vakurnom. 4M HCl u dioksanu (5 mL, 20 mmol) je dodat ukapavanjem na sobnoj temperaturi (RT) uz mešanje. Posle 5 min. Et20 je dodato da se pomogne taloženje proizvoda, posle Čega je filtriran, ispran Et2C i osušen pod vakuumom da se dobije 3q (729 mg. 100 %). LCMS: P

= 100 %, vreme zadržavanja - 1,6 min, (M+H}<+>: 250. U jednom izvođenju 20 ekv. TFA na sobnoj temperaturi (RT) u DCM (1:1 mešavlni DCM/TFAv/v) jekorišćeno da se izvede ova reakcija.

[0281]Sledeći intermedijart su takođe pripremljeni iz adhocreagenasa i intermedijara i korišćen je Opšti metod E: intermedijar3r:3-metil-5-(8-metil-5,6,7,8-tetrahidro-[1,2,4]triazGlo[4,3-a]pirazin-3-il)-1,2,4-oksadiazol hidrohlorid, iz intermedijara 1c i 2m; intermedijar 3s: 3-metil~5--{8~meti!-5!6,7.8~tetrahidro-[1.2.4]tnazoio[4,3--ajpii'a2tn--3-ii)-1,2,4-tiadiazol hidro- hiorid, iz intermedijara 1c i 2n;

intermedijar 3t: 4-metil-2-(8-met!!-5,6,7,8-tetrahidro !1 ,2,4]triazolo[4,3-ajpirazin-3"il)oks3zo!

hidrohlorid, iz intermedijara 1c i2o;

intermedijar3u:.3 -izopropil-5-(3-metil-5,6,7,8-tetrahidro-[1,2,4jtriazo!o[4,3-a3pirazin-3-i!)-1,2,4-tiadiazoi hidrohlorid, iz intermedijara1ci2p.

Metod F:Ciklodehidracija i acidoiiza - PMB zaštita

[0282]Metod F je postupak korišćen za sintezu triazolopiperazina 3 i detaljno je prikazan dole:

[0283]Metod F je ilustrovan sintezom intermedijara 3v pri černu je zaštitna grupa PMB.

Sinteza 4- metii~ 2-( 8~ metH~ S, 6, 7, 3- tetrahidro~[ 1, z, 4] triazolo[ 4, 3- aJpirazin- 3- il) ttazQla 3v

[0284}

Korak 1:Sinteza 2-(7-(4-metoksibenzil)-8-metil-5,6,7,8-tetrahidro-[1,2,4jtriazolo[4,3-a]pirazin-3-il)-4-metiStiazol 3.1v.

[0285] Iminoetar 1d {444 mg, 1,69 mmol, 1 ekv.) je rastvoren u anhidrovanom EtOH {5 mL), u koji je dodat 2-metiitiazol-44^arbohidrazid 2k (266 mg, 1,69 mmoi, 1 ekv.) i rastvor koji nastane kao rezultat je refluksovan tokom 24 h. Reakciona mešavtna je ohlađena do sobne temperature (RT) i rastvarač je uklonjen pod ređukovanim pritiskom. Sirovo jedinjenje je zatim prečišćeno na silika gelu (DCM/MeOH: 99/1 do 98/2) da se dobije željeni proizvod 3.1 v kao svetio žuta čvrsta supstanca (383 mg, 1,07 mmoi, 64 %). LCMS: P = 75 %, vreme zadržavanja 1,9 min, (M+H)+; 356.

Korak 2; Sinteza 4-mettl-2-{8-met(l-5,6.7.8-tetrahidro-{1,2,4]triazolol4,3-a]pirazin-3-il)tiazo!a 3v.

[0286]Anhidrovani DCM (2,5 mL) je dodai na sobnoj temperaturi (RT) u 2-(7-(4-metoksibenzil}-8-metii-S.ej.S-tetrahidro-ll^^jtriazoto^.S-ajpirazin-S-iij^-rnetiltiazoi3.1 v(443 mg. 1.246 mmoi, 1 ekv.). TFA (2,5 mL, 33,5 mmol, 27 ekv.) je zatim dodato i reakciona mešavina je refluksovana tokom 15 h. Reakcija je ugašena dodavanjem NaHC03zasić. rastvora. Ovi slojevi su odvojeni i vodeni sloj je bazifikovan na pH -14 sa NaOH 1M rastvorom i ekstrahovan sa DCM (3 x 70 mL). Kombinovani organski slojevi su oprani slanim rastvorom (-70 mL), osušeni iznad MgS04, filtrirani i koncentrovani pod ređukovanim pritiskom da se dobije3vposle vakuuma tokom 3 h bez varijacija mase. (342 mg, 100%). LCMS: P = 100 %, vreme zadržavanja = 1,2 min, (M+H)<*>; 236.

[0287]Sledeči intermedijar! su takođe pripremljeni izad hocreagenasa i interrnedijra koriščenjem Opšteg metoda F: Intermedijar 3w: 3-(1,3-dimetil-1H-pirazol-5-il)-8-metil-5,6,7,8-tetrahidro-[1,2,4jtriazolo[4,3-ajpirazin, iz intermedijara1di2q.

LS. Korak 4: Aciiacija koja vodi do konačnih proizvoda

Metod G:Aciiaciia i hiralno HPLC prečišćavanje

[0288]Metod G je postupak korišćen za sintezu racemskog proizvoda 4 i i njegovo prečišćavanje da se dobiju finalna jedinjenja n°X opšte Formule I. Metod G je detaljno opisan dole:

[0289]Metod G se ilustruje putem sinteze jedinjenja n°5, 19<29 i 33 opšte Formule I.

Sinteza p-fJ2-ef//ffazoM-f/>8-meff/-$^^

ii} fenil} metanona 4a i ( R)-( 3-( 2- etittiazQ!- 4- it)' 8' metil~ 5, 6~ dihidrQ-[ 1r2,^^^ 7( 8H}-

il){ 4~( tiofen- 2- ii) feni!) metanana jedinjenje br°5.

[0290]

[0291] U rastvor sirovog 3j(250 mg, 1,003 mmol. 1 ekv.) u anhidrovanom DCM {10 ml.) su dodati, na sobnoj temperaturi (RT), 4-(tiofen- 2-il)benzoil hiorid 4,1a (290 mg, 1,303 mmoi, 1,3 ekv.), a posle toga i N-metilmorfolin (0,359 mL, 3,51 mmol, 3,5 ekv.) ukapavanjem tokom 15 sek. Reakciona mešavina je mešana na sobnoj temperaturi (RT) tokom 10 minuta i mlečna suspenzija je sipana u 10 mL 1 M HC Irastvora. Vodeni sloj je ekstrahovan sa DCM (3 x 10 ml.). Organske faze su kornbinovane, isprane sa 1 M NaOH (20 rnL), slanim rastvorom (20 mL), osušene iznad MgS04i isparavane do su voće. Ostatak je rastvoren u DCM (4 ml.) i Et20 je lagano dodat (5 rnL) da se izazove taloženje. Čvrsta supstanca je filtrirana, oprana sa 2 mL Et20 i osušena pod vakuumom da se dobije 4a kao žuti prah (234 mg, 0,537 mmol, 54%). LCMS: P = 97 %, vreme zadržavanja = 2,4 min. (M+H)"<1>"; 436.

[0292] 4a je prečišćen hilarnim pripremljenim HPLC u skladu sa gore pomenutim postupkom da da prinos jedinjenja prema naslovu rt" 5 kao beli prah. LCMS: P = 100 %, vreme zadržavanja = 4,3 min, (M+H)+: 436; hiraina HPLC vreme zadržavanja: 14,0 min; ee > 99 %;<1>H-NMR (CDCI3): 8 8.02 (s, 1H), 7,70(d, J=8,2, 2H), 7,47 (d, J= 8,2, 2H), 7,31 (m, 2H), 7,12 (m, 1H), 5,77 (br. 1H), 4,83 {m, 1H), 4,63 (br, 1H), 4,26 (m, 1H), 3,53 (m. 1H),3,07 (d, J=7, 5, 2H),1,74 (d,J = 6,9.3H).1,43 (t, J= 7,5,3H).

Sinteza ( 8- metil- 3-( 4- met! ftiazol- 2- if)- 5, 6- dihidro-[ 1, 2, 4] triazoio[ 4, 3- a] pirazin- 7( 8H)- it)( 4-( tiofen- 2-

! f) feni!) metanon 4b i { R}-( 8- metil- 3-( 4- metiltiazol- 2- il)~ 5r6- dinidro-[ 1, 274] iriazoio[ 4, 3- a] pirazin-7( 8H)- U)( 4-( tiofen- 2~ ii) fenil) metanona jedinjenje br° 19.

[0293]

[0294]U rastvor 3v (342 mg, 1,25 mmol, 1 ekv.) u komercijalnom anhidrovanom DCM (12 mL) na sobnoj temperaturi (RT) su dodati 4-(tiofen-2-il)benzoil hlorid 4.1a (326 mg. 1,464 mmoi, 1,17 ekv.), posle kog je usiedilo dodavanje N-metilmorfolina (0,128 mL, 1,25 mmol, 1,0 ekv.) ukapavanjem tokom 15 sek. Reakciona mešavina je mešana na sobnoj temperaturi (RT) tokom 15 minuta i zatim razblažena sa DCM (60 rnL). Organski sloj je ispran vodom (40 mL), slan-rn rastvorom (50 mL), osušen iznad MgSOif, filtriran i isparavan pod ređukovanim pritiskom. Ostatak je prečišćen na silicijumskom gelu (DCM/MeOH: 98/2) da se dobije 4b kao žuto ulje sa 88 % čistoće putem LCMS. Dietiletar (10 mL) je dodat na dobijeno ulje i mešavina je obrađena zvukom (sonikacija). Bela čvrsta supstanca je nataložen i filtrirana. Filtrat je koncentrovan pod ređukovanim pritiskom i dietiletar (5 mL) je dodat na ostatak. Posle sonikacije, filtriran je drugi beli precipitat. Oba precipitata su spojena da se dobije 4b kao bela čvrsta supstanca (189 mg, 36 %). LCMS: P ■■= 99 %, vrerne zadržavanja = 4,4 min, (M+H)<+>; 422.

[0295]4b je prečišćen hilarnim pripremljenim HPLC u skladu sa gore pomenutim postupkom da da kao prinos jedinjenje br. 19 kao beli prah LCMS: P - 100 %. vreme zadržavanja - 4,3 min, (M+H)+; 422; hiraina HPLC vreme zadržavanja: 6,6 min, ee = 94 %;<1>H-NMR (CDCI3): & ' 7.70 (d,J =8,2, 2H), 7,48(d. J= 8,2, 2H), 7,40-7,35 (m, 2H), 7,13-7,11 (m;1H), 7,00 (m, 1H), 5,81 (br, 1H), 4,95 (dd,J1- 3,3,J2 =14,0, 1H), 4,60 (br. 1H). 4,27 (td,J-/= 3,9,J' i- 12,7, IH), 3,51 (rn. 1H). 2,50 (3. 3H). 1,75 (d, J = 6,9, 3H).

[0296]Kada je korišćena so hidrohiorida prema 3, 2.2 ekv. N-metiimorfolina je dodato.

Sinteza jedinjenja n° 29: ( R)~[ 1J'~ bifenii3- 4~ if( 8- meti!~ 3-{ 6- metitpiridin- 2- fy^

[ 1, 2, 4] triazalo[ 4, 3- a] pirazin- 7( 8H)- i() metanon.

[0297]

[0298] U rastvor 3g (500 mg, 1,65 mmol, 1 ekv.) u anhidrovani DCM (10 mL) su dodati na sobnoj temperaturi (RT) [1,1'-bifenilj- 4-karbonil hlond 4.1c (430 mg, 1,98 mmol, 1,2 ekv.), posel čega je usledio N-meti!morfolin (507 uL, 4,96 mmol, 3,00 ekv.). Reakciona mešavina je mešana na sobnoj temperaturi (RT) tokom 30 min. posle čega su zasićeni NaHC03rastvor (10 mL) i DCM (5 mL) dodati u reakcionu mešavinu Organska faza je ekstrahovana, osušena iznad MgS04, filtrirana i koncentrovana pod ređukovanim pritiskom Sirovi proizvod je prečišćen koriščenjem hromatografiji sa silicijskom gelu (eluent: DCM/MeOH: 98:2) da se dobije 268 mg od4c.LCMS: P = 98 %, vreme zadržavanja = 4,2 min, (M+H)*; 410.

[0299] 4cje prečišćen hiralnom pripremnljenim HPLC u skladu sa gore pomenutim da se dobije prinos kao u naslovujedinjenja n°29kao belog praha LCMS: P - 100 %, vreme zadržavanja = 4,2 min, (M+H)<*>;410; hiraina HPLC vreme zadržavanja; 4,7 min; ee > 99 %<1>H-NMR (CDCI3) §8,11 (d,J=7,7, 1H), 7,67-7,40 (m, 10H), 7,20 (d,J=6,7, 1H). 5.78 (bs. 1H), 5,00 (dd, J?= 3,3,J2=14,0, 1H), 4,67 (br, 1H), 4,37 (m, 1H), 3,51 (m, 1H), 2,58 (s, 3H), 1,76 (d, J= 6,9, 3H)

[0300]Postupak korišćen za sintezujedinjenjabr° 33 je sledeći:

Korak 1:Sinteza (3-(6-bromopiridm-z-il)-8-metil-b.6-dihidro-[1' IA\triazolo[4.3-a]pirazin-7(8H)-il)(4-(tiofen- 2-il)fenil)metanon4d

[0301] 4dje pripremljen iz3ii4.1au skladu sa Opštim metodom G.

Korak2: Sinteza 6-(8-metil-7-(4-(tiofen-2-il)benzoil)-5.6.7 8-tetrahidro-[1.2 4]triazolo[4.3-a]pirazm-3-il)pikolinonitrila4e

[0302]Mešavina4d(140 mg, 0,291 mmol) i cink cijanid (137 mg, 1,166 mmo!) u DMA (2 mL) na sobnoj temperaturi (RT) su degasovani Zatim je Pd(PPh3)4(67.4 mg. 0 058 mmol) dodat (67.4 mg, 0,058 mmol) Reakciona mešavina je mešana na 115 "C tokom 30 min posle čega je dodat DCM (30 mL) i ekstrakt organskog sloja je opran vodom (2 x 30 mL). osušen iznad MgS04, filtriran i koncentrovan pod ređukovanim pritiskom. Ostatak je prečišćen na koriščenjem silicijumskog gela u hromatografiji (DCM/MeOH: 100/0 do 98/2) da se dobije4dkao bela čvrsta supstanca (8 mg, 6 %). LCMS: P = 90 %. r t = 4,2 min, (M+H)<+>: 427

[0303] 4dje prečišćen hiralnim pripremljenim HPLC u skladu sa gore pomenutim postupkom da se dobije prinos jedinjenja prema naslovujedinjenjebr°33 u vidu belog praha LCMS P - 100 %. vreme zadržavanja = 4,2 min, (M + H)4, 427: hiraina HPLC vreme zadržavanja: 18,8 min: ee = 98 %.

\ v Hiraina sinteza

1 1. 1. Opšta šema sinteze za hirainu sintezu

[0304]Jedinjenja prema ovom pronalasku su sintetisana koriščenjem hiralnog postupka prema ovom pronalasku opisanom u Šemi 30.

[0305] Hiralni ketopiperazin A je zaštićen sa DMB grupom i pretvoren u iminoetar D koriščenjem Meerwein reagensa (Et30BF4)_ Reakcija kondenzacije između acii hidrazida E i iminoetra D je sprovedena u usiovima grejanja u etanolu da se dobije DMB zaštićeni piperazin F kom je naknadno uklonjena zaštita sa HCl u dioksanu da se dobije prinos jedinjenja Formuli II

[0306]U jednom izvođenju, korak uklanjanja DMB zaštite (od F do II) je izveden koriščenjem

TFA u DCM

[0307]U jednom izvođenju, korak uklanjanja DMB grupe zaštite (od F do11}se izvodi koriščenjem TFA u DCM na sobnoj temperaturi (RT), posle čega je usledila bilo TFA izmena soli sa HCl Ni ekstrahovanjem na visokoj pH vrednosti uz oporavljanje slobodnog piperazinaII.

[0308]Acilacija sa odgovarajućim acii hloridom je dala finalni proizvod prema Formuli I najčešće u > 90% enantiomernih višaka (hiraina HPLC)

Opšti metod H

Opšti metod A je postupak korišćen za sintezu (R)-4-(2,4-dimetoksibenzil)-3-metilpiperazin-2-ona ( R)- C

(cf Šema 30)

[0309]U laboratorijskoj boci okruglog dna, su jedan za drugim uvedeni (R)-3-metilpiperazin-2-on (T-f)-A (725 mg, 5,35 mmol, 1 ekv ), 2.4-dimetoksibenzaldehid B (1.16 g. 6,99 mmol. 1,1 ekv ), sirćetna kiselina (545 pml, 9,53 mmol, 1,5 ekv.) i natrijum triacetoksiborohidnd (1.88 g, 8,89 mmol, 1.4 ekv.) u komercijalnom anhidrovanom acetonitrilu (65 mL). na sobnoj temperaturi (RT), pod atmosferom N2-Ova reakcija je mešana na sobnoj temperaturi tokom noći Reakciona mešavina je ugašena pažljivio na 0 °C sa zasićenim NaHC03rastvorom (100 mL) sve dok nije pnmećeno da više nema mehurića. Vodeni i organski slojevi su odvojeni. Vodeni sloj je ekstrahovan sa EtOAc (3 x 100 mL) i kombinovani organski slojevi su isprani slanim rastvorom osušeni iznad MgSO*filtrirani, i koncentrovani pod smanjenim pritiskom da se dobije jedinjenje prema naslovu kao žuto ulje Sirovo jedinjenje je zatim prečišćeno na silika gelu (DCM/MeOH 98/2 do 95/5) da se dobije željeni proizvod (R)-C kao viskozno svetložuto ulje. Prinos: 1,65 g. 98 %. LCMS P = 100 %, vreme zadržavanja = 1,6 min. (M+Hf<:>265; hiraina HPLC vreme zadržavanja = 41,5 min, ee > 99 %,<1>H-NMR(CDCI3): 6 7.23 (d. J= 8.9, 1H), 6.49 (d, J= 8,9. 1H), 6,46 (s, 1H), 6,29 (br, 1H), 3,81 (s, 3H). 3,80 (s. 3H). 3,78 (d,JAB=15,0, 1H), 3,49 (d,Jab=15.0, 1H), 3,27 (m, 2H), 3,19 (m, 1H), 2,95 (m, 1H), 2,48 (m, 1H), 148 (d,J= 6.8,3H).

[0310](S)-4-(2,4-dimetoksibenzil)-3-metilpiperazin-2-on (S)-C je takođe pripremljen koriščenjem Opšteg metoda H počevši od (S)-3-metilpiperazm-2-ona (S)-A. Prinos 300 mg, 99 % LCMS: P = 100 %, vreme zadržavanja = 1,6 mm, (M+H)<+>; 265, hiraina HPLC vreme zadržavanja - 26.6 mm, ee > 99 %

Opšti metod I:

[0311]Opšti metod I je postupak korišćen za sintezu (R)-1-(2,4-dimetoksibenzil)-5-etoksi-6-metil-1,2,3,6-tetrahidropirazin{ R)- D(cf. Šema 30) kako je detaljno navedeno dole.

[0312]U pećnici osušen (115°C) natrijum karbonat (2,48 g. 23,40 mmol, 2,25 ekv.)je postavljen u laboratorijsku bocu okruglog dna. Laboratorijska boca okruglog dna je ispunjena Ar i zatim zatvorena kapicom sa gumenim septumom. Rastvor (R)-4-(2.4-dimetoksi-benzil)-3-metilpiperazin-2-ona( R)- C(2,75 g, 10,40 mmol, 1 eq.) u anhidrovani DCM (35 mL) je dodat posle sveže pripremljenog trietiloksonijum tetrafluoroborata (2.48 g, 13.05 mmol, 1,25 ekv.) u jednom delu Posle toga, reakciona mešavina je mešana dalje na sobnoj temperaturi (RT) tokom 1 h posle čega je reakciona mešavina razblažena zasićenim vodenim NaHCO3(100 mL) Vodeni sloj je ekstrahovan sa DCM (3 x 200 mL). Organski slojevi su kombinovani, osušeni iznad MgSO.i, filtrirani, i koncentrovani pod smanjenim pritiskom da se dobije 3,1 g žutog ulja. Sirovo jedinjenje je zatim prečišćeno na siiicijumskom gelu (EtOAc/MeOH: 99/1) da se dobije željeni proizvod (R)-D kao svetložuto ulje Prinos 1.44 g. 48 % LCMS: P = 95 %, vreme zadržavanja = 1,8 min. (M+H20+H)<4>"311; hiraina HPLC vreme zadržavanja = 12,3 min, ee > 97 %.1H- NMR (CDCI3):<>7,23 (d,J=8.8. 1H). 6,48 (d.J= 8.8,1H). 6,44 (s, 1H). 4,02 (m, 2H), 3.92 (s, 6H), 3,86 (d,JAB=14.0, 1H). 3.46 (d.JAB=14.0, 1H). 3.44 (m. 2H). 3,10 (m. 1H), 2,79 (m, 1H), 2.32 (m. 1H). 1,35 (d,J=6,8, 3H). 1.24 (t J= 6,0. 3H)

[0313](S)-1-(2,4-dimetoksibenzil)-5-etoksi-6-metil-1 2,3.6-tetrahidropirazin (S)-D je takođe pripremljen korišćenjem Opšteg metoda I počevši od (S)-C (46 mg. 0.16 mmol. 59 %) LCMS P = 100 %. vreme zadržavanja = 1,8 min, (M+H20+H)<+>: 311; hiraina HPLC vreme zadržavanja -11,3 mm, ee = 96 %

Opšti metod J:

[0314]Opšti metod J je postupak korišćen za sintezu hidrazida E.a (cf šema 31) kako je detaljno navedeno dole

[0315]U 100 mL laboratorijskoj boci okruglog dna sa kondenzatorom (laboratorijska posuda za uklanjanje toplote iz tečnosti). etil 2-metiltiazol-4-karboksilatE.1a(10 g, 58.4 mmol. 1 ekv.) je rastvoren u anhidrovanom EtOH (25 mL) i tretirano na sobnoj temperaturi (RT) sa hidrazin monohidratom (17.0 mL, 354,4 mmol, 6 ekv.). Dobijeni žuti rastvor je zagrejan na temepraturi refluksa tokom 14 h Posle omogućavanja reakcione mešavine da dođe do sobne temperature (RT), rastvor je koncentrovan pod ređukovanim pritiskom da se dobije 13.4 g braon ulja. Ko-isparavanja korišćenjem 3 x 200 mL mešavine komercijalno anhidrovanog DCM:fvleOH (1:1) su izvedena za uklanjanje preostale vode. Ostatak je zatim rekristalizovan iz vrućeg EtOH (60 mL) posle totalnog rastvaranja. mešavina je zatim ostavljena da se hladi na sobnoj temperaturi (RT) i zatim je stavljena na 0 "C (sa ledenom kupkom) tokom 40 min Dobijeni kristali su filtrirani i oprani ohlađenim (0 :'C) EtOH (2 x 30 mL) Narandžasta čvrsta supstanca je osušena pod vakumom tokom 1 h da se dobijeEa.(5,85 g. 37,2 mmol, 64 %).LCMS P = 100 %, vreme zadržavanja = 0,5 min, (M+H)<*>; 158;<1>H-NMR(CDCI3): 68.32 (br, 1H). 7 96 (s, 1H), 4,07 (br, 2H), 2,70 (s. 3H).

Opšti metod K:

[0316]Opšti metod K je opšta procedura korišćena za sintezu hiralnih triazolopiperazinskih intermedijara F (cf. šema 30) i detaljno je prikazana dole u šemi 32 uz sintezu (R)-4-(7-(2,4-dimetoksibenzil)-8-metil-5,6,7,8-tetrahidro-[1,2,4]tnazolo[4.3-a]pirazin-3-il)-2-metiltiazola(R)-F.a.

[0317]U 50 mL laboratorijskoj posudi okruglog dna opremljenu kondenzatorom, rastvoren je iminoetar( R)- D(4,51 g, 14,96 mmol, 1 ekv ) u anhidrovanom EtOH (15mL), u koji je dodat 2-metiltiazol-4-karbohidrazidE.a(2,35 g, 14,96 mmol, 1 ekv ) u jednom delu Dobijem rastvor je mešan na 70 "C tokom 6 sati. Reakciona mešavina je ohlađena na sobnoj temperaturi (RT) i rastvarač je uklonjen pod ređukovanim pritiskom. Sirovo jedinjenje je zatim prečišćeno na hromatografiji sa silicijumskim gelom (DCM/MeOH: 99/1 do 95/5) da se dobije željeni proizvod(R)-F-akao žuta čvrsta supstanca koja penuša Prinos: 3.78 g, 65 %. LCMS: P = 96 %, vreme zadržavanja - 1,8 min, (M+H)<+>;386; hiraina HPLC vreme zadržavanja = 13.9 min, ee = 95 %;<1>H-NMR(CDCI3): <S 7.85 (s. 1H), 7,19 (s, 1H), 6,41 (m. 2H), 4.38 (m, 1H). 4.16 (m, 1H). 3.96 (m, 1H), 3,86 (d,Jab=15.0. 1H) 3 74 (s. 3H), 3.73 (s. 3H).

3,56 (d,Jab=15,0, 1H). 3.11 (m, 1H), 2,66 (s, 3H). 2,62 (m1H).1.64(d.J=6.6.3H).<13>C-NMR(CDCI3): 6 166,2, 160,2, 158,8, 154,6, 148.1, 143,1. 130,9, 118,8. 118,2, 104,2, 98 5, 77,6, 77,2, 76,8. 70,4, 70,2, 55.4, 55.4. 55,8, 50.2, 45,8, 44.2, 19.2, 17,7, 15,7

[0318]U laboratorijsku bocu okruglog dna opremljenu kondenzatorom, iminoetar (R)-D(890 mg, 3,04 mmol, 1 ekv.) je rastvoren u anhidrovanom EtOH (3 mL) u koji je dodat 2-metiltiazol-4-karbohidrazidE.a(479 mg. 3.04 mmol 1 ekv ) Dobijem rastvor je mešan na 70 C tokom 7 sati. zatim je doveden do sobne temperature (RT) i isparljive supstance su ukonjene pod ređukovanim pritiskom Sirovo jedinjenje je zatim prečišćeno na hromatografiji sa silicijskim gelom (DCM/MeOH: 99/1 do 95/5) da se dobije željeni proizvodF.akao svetložuto ulje. Prinos: 685 mg, 58 % LCMS: P = 96 %, vreme zadržavanja = 1,8 min, (M+H)+: 386; hiralni HPLC vreme zadržavanja: 14,3 min, ee = 95 %:<1>H-NMR (CDCI3): 67,85 (s, 1H), 7.19 (s, 1H), 6,41 (m. 2H). 4.38 (m. 1H). 4.16 (m. 1H). 3.96 (m. 1H), 3,86 (d.JAB=15.0, 1H), 3,74 (s, 3H). 3.73 (s, 3H), 3,56 (d,JAB=15 0, 1H) 3 11 (m. 1H), 2,66 (s. 3H). 2.62 (m. 1H), 1,64 (d. J= 6,6. 3H),

[0319](S)-4-(7-(2,4-dimetoksibenzil)-8-metil-5,6,7.8-tetrahidro-[1.2,4]triazolo[4.3-a]pirazin-3-il)-2-metiltiazol(S)-F.a je takođe pripremljen koriščenjem Opšteg metoda K počevrši od (S)-D(36 mg, 0.09 mmol. 54 %). LCMS: P = 90 %, vreme zadržavanja = 1,8 min, (M+H)<+>386, hiraina HPLC vreme zadržavanja = 21.0 min, ee = 94,0 %.

Opšti metod L:

[0320]Opšti metod E je opšti postupak korišćen za sintezu jedinjenja prema Formuli II soli (cf jedinjenja II na šemi 30) i detaljno je prikazan dole na pemi 33 sa sintezomjedinjenja br°ll-1:(f?)-8-metil-3-(2- metiltiazol-4-ii)-5,6,7,8-tetrahidro-[1,2,4]tnazolo[4,3-a)pirazin-7-ijum hlorid (R)-ll-1

[0321]U 50 mL laboratorijsku bocu okruglog dna sa kondenzatorom, su uvedeni( R)- F. a(262 mg, 0,68 mmol, 1 ekv ) posle čega je usledio rastvor HCl 4 M u dioksanu (3,4 mL. 13.60 mmol, 20 ekv ) u jednom delu. Žuti rastvor dobijen kao rezultat je mešan na 100X Posle 6 sati,/-PrOH (6 mL) je dodato u vruću reakcionu mešavinu Rastvor je zatim ostavljen da dostigne sobnu temeperaturu (RT) uklanjanjem uljne kupke. Et20 (15 mL) je zatim dodato i dobijen je talog filtriran. Ispran sa Et20 (3 mL) i vazduh je osušen tokom noći da se dobije(R)-ll-1(235 mg. 0.86 mmol. 100 %) kao ružičasta čvrsta supstanca koja je korišćena u sledećem koraku bez daljeg prečišćavanja

[0322](S)-2-metil-4-(8-metil-5,6,7,8-tetrahidro-[1,2,4]tnazolo[4,3-a]piraz[n-3-il)tiazol(S)-ll-1 je pripremljen koriščenjem TFA postupka, počevrši od (S)-F.a kao u nastavku: (S)-F.a (36 mg, 0,09 mmol, 1 ekv.) je rastvoren u suvom DCM (500 pL). TFA (467 uL, 6,0 mmol. 65 ekv.) je dodato ukapavanjem na sobnoj temperaturi (RT) Posle 30 minuta, tamnoružičasta reakciona mešavina je ugašena pažljivo sa zasićenim rastvorom NaHC03(10 mL) Vodeni sloj je ekstrahovan sa DCM (3x10 mL). Organske faze su kornbinovane. isprane slanim rastvorom (10 mL), osušene iznad MgS04, filtrirane i koncentrovane pod ređukovanim pritiskom da se dobije slobodan amin(S)-11-1kao bela čvrsta supstanca (43 mg, 0.183 mmol, 100 %) koji je korišćen u sledećem koraku bez daljeg prečišćavanja.

Određivanje enantiomernog viška:

[0323]Kao što je gore pomenuto, s obzirom da se hiralno LC određivanje %ee pokazalo teškm za jedinjenja prema Formuli II, specifično zbog tehničkih hiralnih LC pitanja u rešavanju sa takvim aminima, %ee je određen kroz proizvod formiran tokom narednog koraka pri čemu je amin acilovan da dostavi finalne proizvode koji su dati kao primeri ali ne i kao ograničenja za jedinjenjebr°1 Formule I.

Opšti metod M

[0324]Opšti metod M je opšti postupak korišćen za sitnezu hiralnih jedinjenja triazolopiperazina prema ovom pronalasku i kako je detaljno objašnjeno u nastavku sa sintezom (/?)-(8-metil-3-(2-metiltiazol-4-il)-5,6-dihidro-[1.2,4]triazolo[4,3-a]pirazin-7(8H)-il)(4-(tiofen-2-il)fenil)metanon(f?)-jedinjenjen°1prema FormuliI (ovde u daljem tekstu navedeno 1-1).

[0325]U rastvor sirovog(R)-ll-1(235 mg, 0.67 mmol. 1 ekv ) u anhidrovani DCM (10 mL) su dodati na 0°C 4-(tiofen-2-il)benzoil hlorid4.1a(165 mg, 0.742 mmol 13 ekv). posle čega je usledio N-metilmorfolin (163 pL, 1.48 mmol, 2,2 ekv.) ukapan tokom 15 sek Reakciona mešavina je mešana na sobnoj temperaturi (RT) tokom 10 minuta i, mlečna suspenzija je sipana u 10 mL 1 M HCl. Vodena faza je ekstrahovan sa DCM (3x10 mL). Organske faze su kornbinovane, isprane sa 1 M NaOH (20 mL), slanim rastvorom (20 mL), osušene iznad MgS04j isparavane do suvoće Sirovo jedinjenje je prečišeno hromatografijom na silicijumskom gelu (eluent EtOAc/MeOH 98/2) da se dobije željeni proizvod (/?)-i-1 kao bela pena. Prinos: 158 mg, 55 %, LCMS P = 97 %, vreme zadržavanja = 4,0 min, (M+H)+; 422; Vreme zadržavanja hiraine HPLC = 15 4 min, ee = 95 %;<1>H-NMR(CDCI3): S7.93 (s, 1H), 7,61 (d.J=7,9, 2H). 7.40 (d.J=7.9, 2H), 7,31 (m, 2H). 7,04 (m, 1H), 5.73 (m, 1H). 4,78 (m. 1H), 4,46 (m. 1H), 4.14 (m, 1H), 3.47 (m, 1H), 2.70 (s, 3H). 1,68 (d.J=6,7 3H)

13C-NMR (CDCI3): 5 170,3, 166.5. 151,9. 148,0. 142.4 136,4 128.1 125.8, 124.0. 119,3. 77,4. 77,0, 76,6, 44,8, 30,7, 19,6, 19,1

[0326]Identičan %ee je dobijen za jedinjenja(R)-l-1i (ff)-F.a tako je potvrđeno da nikakva detektibilna racemizacija nije nastala tokom koraka acidolitnog uklanjanja zaštite i N-acilacije.

[0327]Jedinjenje (S)-(8-metil-3-(2-metiltiazol-4-il)-5,6-dihidro-[1,2,4] trrazolo[4.3-a]pirazin-7(8H)-il)(4-(tiofen-2-il)fenil)metanon (S)-l-1 je takođe pripremljen koriščenjem Opšteg metoda F počevši od (S)-ll-1(16 mg, 38,0 pmol, 40%) LCMS P = 90 %, vreme zadržavanja = 4.0 min, (M+H)<*>; 386,1; hiraina HPLC vreme zadržavanja = 11,0 min, ee = 92%

Krista log rafs ka karakterizacija X-zracima jedinjenja (R)-l-1.

[0328]Jedinjenje (R)-l-1 je karakterisano jednom knstalografskom spektroskopijom X-zracima čime je uspostavljena konfiguracija više aktivnih enantiomera kao (R)4<onfiguracija (videti Sliku 1)

[0329] Metod.Svi podaci su zabeleženi na MAR345 ploči sa slikom (MARRESEARCH) koriščenjem MoKa zračenja (/,-0,71073) Rendgenski zraci su genensani na RIGAKU generatoru sa rotirajućom anodom sa postavkama napajanja 50 KV i 70 mA. Zr filter se koristi da se eliminiše MoKo zračenje Pogodni kristal je izabran pod mikroskopom, montiran u najlonom zatvoren prstenasti prostor i poravnat na goniometar pre eksperimenta sa rendgenskim zračenjem Ukupno 174 slike odgovara 2,0" phi rotaciji su prikupljene na sobnoj temperaturi Refleksije na difrakciomm slikama su indeksovane i integrisane koriščenjem Automar suite za obradu podataka (MARRESEARCH) Tokom integracije Friedel parova su držane nepotopljene kako bi se sačuvao anomalni signal potreban za apsolutno određivanje strukture. Xprep (Bruker) je korišćen da odredi prostornu grupu da se generiše refleksija i datoteke za instrukcije za određivanje strukture i naknadno prečišćavanje Strukturisanje rastvora je izvedeno pomoću SHELXS i prečišćavanje je urađeno pomoću SHELXL ("A kratka istorija SHELX" Sheldnck, G.M (2008). Acta Cryst. A64, 112-122). Slobodna rotacija oko C6 - C1 (C1A ili C1B) daje kao rezultat rotacioni izomenzam u odnosu 58/42% kako može da se vidi na Slici 1 dole Kao što je prikazano na Slici dole sa X-zracima hiralnost C22 atoma ugljenika je uspostavljena kaoR(H. D. Flack

(1983) "On Enantiomorph-Polaritv Estimaton" Acta Cryst A39: 876-881 J Appl Cryst (2008). 41.96-103.)

Kristalografska karakterizacija X-zracima jedinjenja (S)-l-1.

[0330]Jedinjenje (S)-l-1 je karakterisano jednom kristalografskom spektroskopijom X-zracima čime je uspostavljena konfiguracija više aktivnih enantiomera kao (R)-konfiguracija (videti Sliku 2)

[0331] Metod.Svi podaci su zabeleženi na MAR345 ploči sa slikom (MARRESEARCH) koriščenjem MoKa zračenja (a.=0,71 073). Rendgenski zraci su generisani na RIGAKU generatoru sa rotirajućom anodom sa postavkama napajanja 50 KV i 70 mA Zr filter se koristi da se eliminiše MoKa zračenje Pogodni kristal je izabran pod mikroskopom, montiran u najlonom zatvoren prstenasti prostor i poravnat na goniometar pre eksperimenta sa rendgenskim zračenjem Ukupno 174 slike odgovara 2,5<U>phi rotaciji su prikupljene na sobnoj temperaturi Refleksije na difrakcionim slikama su indeksovane i integrisane koriščenjem Automar suite-a za obradu podataka (MARRESEARCH) Tokom integracije Friedel parovi su držani nepotopljeni kako bi se sačuvao anomalni signal potreban za apsolutno određivanje strukture Xprep (Bruker) je korišćen da odredi prostornu grupu da se generiše refleksija i datoteke za instrukcije za određivanje strukture i naknadno prečišćavanje. Strukturisanje rastvora je izvedeno pomoću SHELXS i prečišćavanje je urađeno pomoću SHELXL ("A kratka istorija SHELX" Sheldrick, G.M. (2008) Acta Cryst A64, 112-122) Slobodna rotacija oko C6 - C1 (C1A ili C1B) daje kao rezultat rotacioni izomerizam u odnosu 58/42% kako može da se vidi na Slici 1 dole Kao što je prikazano na Slici dole sa X-zracima hiralnost C22 atoma ugljenika je uspostavljena kao R (H D. Flack

(1983) "On Enantiomorph-Polanty Estimation" Acta Cryst A39 876-881. J Appl Cryst. (2008), 41,96-103 )

[0332]Lako se može zaključiti da je srodna jedinjenja prema ovom pronalasku moguće sintetisati izad hocreagenasa koriščenjem opštih metoda i postupaka opisanih ovde

m.Krista log rafska karakterizacija X-zracima

III 1Jedinjenje br. 1

[0333] Jedinjenjebr. 1 je karaktensano jednom kristalografskom spektroskopijom X-zracima čime je uspostavljena konfiguracija više aktivnih enantiomera kao (R}-konfiguracija (videti Sliku 1)

[0334] Metode:Svi podaci su zabeleženi na MAR345 ploči sa slikom (MARRESEARCH) koriščenjem MoKa zračenja (a=0.71073) Rendgenski zraci su genensani na RIGAKU generatoru sa rotirajućom anodom sa postavkama napajanja 50 KV i 70 mA. Zr filter se koristi da se eliminiše MoKa zračenje. Pogodni kristal je izabran pod mikroskopom, montiran u najlonom zatvoren prstenast prostor i poravnat na goniometar pre eksperimenta sa X zracima Ukupno 174 slike odgovara 2,0° phi rotaciji su prikupljene na sobnoj temperaturi Refleksije difrakcionih slika su indeksirane i integrisane koriščenjem Automar suite-a za obradu podataka (MARRESEARCH) Tokom integracije Friedel parovi su držani nepotopljeni kako bi se sačuvao anomalni signal potreban za apsolutno određivanje strukture Xprep (Bruker) je korišćen da odredi prostornu grupu da se generiše refleksija i datoteke za instrukcije za određivanje strukture i naknadno prečišćavanje. Strukturisanje rastvora je izvedeno pomoću SHELXS i prečišćavanje je urađeno pomoću SHELXL ("A kratka istorija SHELX". Sheldrick, G.M (2008) Acta Cryst A64. 112-122) Slobodna rotacija oko C6 - C1 (C1A ili C1B) daje kao rezultat obrtni izomerizam u odnosu 58/42% kao što se vidi na Slici 1 dole Kao što je prikazano na Slici 1 sa X-zracima hiralnost C22 atoma ugljenika je uspostavljena kao R (H.

D. Flack (1983). "On Enantiomorph-Polanty Estimation". Acta Cryst A39: 876-881, J Appl. Cryst

(2008). 41,96-103.)

III. 2.Jedinjenje n°19

[0335] Jedinjenje br 19u ovom pronalasku je karaktensano jednom kristalografskom spektroskopijom X-zracima koja je uspostavila konfiguraciju više aktivnih enantiomera kao (R)-(videti Sliku 2)

[0336] Metodi.Svi podaci su zabeleženi na MAR345 ploči sa slikom (MARRESEARCH) koriščenjem MoKa zračenja (>,=0,71073). Rendgenski zraci su genensani na RIGAKU rotirajući anoda generator sa postavkama napajanja 50 KV i 70 mA. Zr filter se koristi da se eliminiše MoKa zračenje Pogodni kristal je izabran pod mikroskopom, montiran u najlonom zatvoren prstenasti prostor i poravnat na goniometar pre eksperimenta sa rendgenskim zračenjem Ukupno 103 slike odgovara 1,5" phi rotaciji su prikupljene na sobnoj temperaturi Refleksije na difrakcionim slikama su indeksovane i integrisane koriščenjem Automar suite-a za obradu podataka (MARRESEARCH) Tokom integracije Friedel parovi su držani nepotopljeni kako bi se sačuvao anomalni signal potreban za apsolutno određivanje strukture. Xprep (Bruker) je korišćen da odredi prostornu grupu da se generiše refleksija i datoteke za instrukcije za određivanje strukture i naknadno prečišćavanje. Strukturisanje rastvora je izvedeno pomoću SHELXS i prečišćavanje je urađeno pomoću SHELXL ("A kratka istorija SHELX" Sheldrick, G.M (2008). Acta Cryst A64 112-122) Slobodna rotacija oko C6 - C1 (C1A ili C1B) daje kao rezultat rotacioni izomerizam u odnosu 56/44% kako može da se vidi na Slici 2 dole Kao što je prikazano na Slici 2 sa X-zracima hiralnost C22 atoma ugljenika je uspostavljena kao R (H D Flack

(1983). "On Enantiomorph-Polarity Estimation" Acta Cryst A39; 876-881. J. Appl Cryst. (2008).41,96-103.)

IV. Sažetak metodai reagenasa korišćenih za sintezu jedinjenja prema ovom pronalasku

[0337]Jedinjenja prema ovom pronalasku koja imaju opštu Formulu l su sintetisana izad hocreagenasa i intermedijara koriščenjem opštih metoda i postupaka opisanih gore Tabela 4 dole u nastavku rekapitulira intermeđijare i opšte metode korišćene za svako jedinjenje kao i za LCMS analitičke podatke

[0338JU Tabeli 4. pojam "Jđnj" znači jedinjenje.

[0339]U Tabeli 4 konfiguracija svakog pika (maksimalnog dejstva) odvojena je hiralnom LC je uspostaven sa jedinjenjem br°19 direktno, i piimenjert na druge slučajeve putem analogije. Prethodno pomenuto indirektno konfiguraciono zadavnje je uvek potvrđeno putem određivanja biološke aktivnosti koja je bila konkluzivna imajući u vidu akutni stereohemijski SAP.

BjOLQ4Kj.PRMERJ_

Funcionaini ogled

Ogled sa ekvorinom sa ljudskim NK-3 receptorom

[0340]Promene u nivoima kalcijurna unutar ćelija su prepoznati indikator G proteinom spojene aktivnosti receptora. Efikasnost jedinjenja prema ovom pronalasku da inhibiraju NKA-posredovano aktiviranje NK-3 receptora je procenjeno pomoćuin vitroAeouorin funkcionalnog ogleda. Rekombtnantne ćelije jajnika kineskog pacova ispoljavaju ljudski NK3 receptor i konstrukt koji kodira fotoprotein apoekvorin su korišćeni u ovoj probi. U prisustvu kofaktora koelenterazina, apoekvorin emituje merijivu iuminiscenciju koja je proporcionalna količini intraćeiijskog (citopiazmnog) slobodnog kalcijurna.

Testi ranje antagonista

[0341]Aktivnost antagonista jedinjenja prema ovom pronalasku se meri posle prethodne inkubacije (3 minuta) jedinjenja sa ovim ćelijama, posle čega sledi dodavanje referentnog agonista (NKA) pri finalnoj koncentraciji koja odgovara ECgrj (3 nM) i registrovanju emitovane svetlosti (FDSS 6000 Hamamatsu) tokom naknadnog perioda od 90 sekundi, intenzitet emitovanog svetla je integrisan koriščenjem uređaja za čitanje sa softverom. Aktivnost antagonista jedinjenja se meri na osnovu inhibicije odgovora luminiscencije na dodavanje Neurokinina A.

[0342]Krivulje inhibicije se dobijaju za jedinjenja prema ovom pronalasku i koncentracije jedinjenja koja inhibiraju 50% odgovora referentnog agonista (ICso) su određene (videti rezultate u Tabeli 5 dole). IC50vrednosti prikazane u tabeli 5 označavaju da jedinjenja prema ovom pronalasku jesu snažna jedinjenja NK-3 antagonista.

Probe sa konkurentnim vezjvanjeni

[0343]Afinitet jedinjenja prerna ovorn pronalasku za NK-3 receptor čoveka je određena rnerenjem sposobnosti jedinjenja prema ovom pronalasku da konkurentno i nepovratno zamene dobro karakterizovan NK3 raciioligand.

3jiSH2222QJXagJjnd.l^^ receptorom

[0344]Sposobnost jedinjenja prema ovom pronalasku da inhibiraju vezivanje za NK-3 receptor selektivan antagonist ^H- SB222200 je procenjena na osnovu in vitro ogleda vezivanja radioliganda. Membrane su pripremljene iz rekombinantnih ćelija jajnika kineskog pacova koje na stabilan način ispoljavaju ljudski NK3 receptor. Ove membrane su inkubirane sa 5nM ?,H- SB222200{ARC) u HEPES 25mM/' NaCI 0,tM/CaCl21rnM/MgCl25Mnv BSA 0,5%/ Saponin 10 ug/ml pufera na pH 7,4 i različitim koncentracijama jedinjenja prema ovom pronalasku. Količina<3>H-SB222200 vezanog na receptor je određena posle filtracije putem kvantifikacije membrane povezane sa radioaktivnošću koriščenjem TopCount-NXT čitača (Packard). Krivulje konkurentnog prikaza su dobijene za jedinjenja prema ovom pronalasku i koncentracija koja je izmestila 50% vezivanja radioliganda (iC50) je određena analizom linearne regresije i zatim su izračunate očigledne vrednosti konstantne inhibicije (K,) uz pomoć sledeće jednačine: Kj = IC5o/(1+[L]/Kd) gde [L] je koncentracija slobodnih radioliganda i Kdje njegova konstanta dtsocijacije na receptom, izvedenom iz eksperimenata vezivanja saturacije (Cheng and Prusoff, 1973) (videti rezultate u tabeli 6 dole).

[0345]Tabela 6 pokazuje biološke rezultate dobijene koriščenjem<3>H-SE322 2 2 00 probe konkurentnog vezivanja sa jedinjenjima prema ovom pronalasku. Ovi rezultati označavaju da jedinjenja prema ovom pronalasku prikazuju potencijalni afinitet za ljudski NK-3 receptor.

.Qs!s^...^£!iAjy..n.fi5.ti

[0346]Selektivnost jedinjenja prema ovom pronalasku je određena preko drugih ljudskih NK receptora, naime receptora NK-1 i NK2.

Ljudska NK1

[0347]Afinitet jeedinjenja prema ovom pronalasku za NK1 receptor je procenjena u CHO rekombinantnim ćelijama koje ispoljavaju ljudski NK1 receptor. Suspenzije membrane su pripremljene iz ovih ćelija. Sledeća radioligand: ["H] supstanca P (PerkinEIrner Cat#NET111520) je korišćena u ovom ogiedu. Ogledi vezivanja su izvedeni u 50 mM Iris / 5 mM MnCl2 /150 mM NaCI / 0,1% BSA na pH 7,4. Ogledi vezivanja su se sastojali od 25 ul membranske suspenzije (približno 5 ug proteina/pregradi na ploči ođ 96 pregrada), 50 ul jedinjenja ili referentnog liganda (Substance P) pri povećanim koncentracijama (razblaženim u puferskom sredstvu probe) i 2nM [3|H1 supstanci P. Ploča je inkubirana 60 min na 25'C u vodenoj kupki i zatim filtrirana tokom GF/C filtera {Perkin Elmer, 6005174, prethodno natopljena u 0.5% PEI tokom 2h na sobnoj temperaturi) sa fiitracionom jedinicom (Perkin Elmer). Radioaktivnost zadržana na filterima je izmerena koriščenjem TopCount-NXT čitača (Packard). Dobijene su konkurentne krivulje za jedinjenja prema ovom pronalasku i koncentracije jedinjenja koje su izmestile 50% vezanog radioliganda (IC50) su određene i zatim su izračunate očigledne vrednost; konstante inhibicije (Ki) uz pomoć sledeće jeđnačine: Ki = IC5o/(1+[L.j/Kp) gde IL] je koncentracija slobodnog radioliganda i Kp je njegova konstanta disocijacije na receptom, izvedenom iz eksperimenata vezivanja saturacije (Cheng and Prusoff, 1973).

Ljudska NK2

[0348]Afinitet jedinjenja prema ovom pronalasku za NK2 receptor je procenjen u CHO rekombinantnim ćelijama koje ispoljavaju ljudski NK1 receptor. Suspenzije membrane su pripremljene iz ovih ćelija. Sledeći reađioligand [^^l]-Neurokinin A (PerkinEIrner CaWNEX252) je korišćen u ovom ogledu. Ogledi vezivanja su izvedeni u 25 mM HEPES / 1 mM CaCI2 / 5 mM MgCI2/0,5% BSA / 10 pg/ml saponin, na pH 7.4. Ogledi vezivanja su se sastojali ođ 25 pl membranske suspenzije (približno 3,75 ug proteina/pregradi na ploči sa 96 pregrada), 50 ul jedinjenja referentnog liganda (Neurokinin A) pri povećanim koncentracijama (razblažen u puferskom sredstvu probe) i 0,1 nM [<12i>>|]_[sjeurokinin A. Ploča je inkubirana 60 min na 25<*>C u vodenoj kupki i zatim je filtrirana preko GF/C filtara (Perkin Elmer, 6005174, prethodno potopljena u pufersko sredstvo probe bez saponina tokom 2h na sobnoj temperaturi) sa Filtracionom jedinicom (Perkin Elmer). Radioaktivnost zadržana na filterima je izmerena koriščenjem TopCount-NXT čitača (Packard). Konkurentne krivulje su dobijene za jedinjenja prema ovom pronalasku i koncentracije jedinjenja koje su izmestile 50% vezanog radioliganda (ICso) su određene i zatim su izračunate očigledne vrednosti konstantne inhibicije (Ki) pomoću sledeće jednaćine: Kt := IC5o/(1+1L]/Kd) gde je [L] koncentracija slobodnog radioliganda i Kp je njegova konstanta clisocijacije na ovom receptom, izvedena iz eksperimenata vezivanja saturacije (Cheng and Prusoff, 1973).

[0349]Jedinjenja prema ovom pronalsku koja su testirana u gore opisanim NK-1 i NK-2 ogledima, su pokazala slab afinitet na ljudske NK-1 i ljudski NK-2 receptor: više od 200 struka promena Ki u poređenju sa ljudskim NK-3 receptorom (tabela 7). Zato su, jedinjenja prema ovom pronalasku pokazala da su selektivna preko NK1 i NK2 receptora.

hERG ogled inhibicije

[0350]Mutant ljudskog gena, (Ether-a-go-go Related Gene) (hERG), kodira kanal kalijuma sa ispravljanjem usmerivanja napona u srcu (IKr) koji je uključenukardijalnu repolirazaciju. iKr trenutna inhibicija je pokazala produženje potencijalne kardijalne aktivnosti, fenomen povezan sa povećanim rizikom od aritmije. Inhibicija I*- struje nastaje zbog ogromne većine poznatih slučajeva lekom izazvanog produženja QT~a. Jedan broj lekova je povučen iz kasne faze kliničkih ispitivanja ovih kardiotoksičnih efekata, zog toga jesu važna da se utvrde inhibitori rano za otkrivanje leka.

[0351]hERG studija inhibicije ima za cilj kvantifikacijuin vitro efekata jedinjenja prema ovom pronalasku na kalijum selektivneIKrtrenutne generisane u nehcrmonskim usiovima u na stabilan način transfektovane HEK 293 ćelije sa Ibilo ljudskim ili ether-a-go-go povezanim genom (hERG).

[0352]Struje cele ćelije (usvojeno pomoću ručne pritege flastera) izazvane tokom puisa napona koji je registrovan u osnovnim usiovima rada i sledećoj prijavi ispitivanih jedinjenja (5 minuta izlaganja). Koncentracije ispitanih jedinjenja (0,3 pM; 3 pM; 10 pM; 30 pM) odražavaju opseg za koji se veruje da su koncenracije na očekivanim dozama efikasnosti za prekliničke modele.

[0353]Primenjeni protokol impulsa se opisuje kao što sledi: potencijal držanja (svake 3 sekunde) je stepenovan od -80 mV do maksimalne vrednosti od *40 mV, počevši od- 40mV, u osam koraka pomaka (inkremenata) +10mV. za period od 1 sekunđ. Memtaranski potencijal je zatim vraćen na -55 mV, posle svakog od ovih stepena pomaka, tokom 1 sekund i najzad repolarizovanih na -80 mV na 1 sekund.

[0354] Trenutna registrovana gustina je normalizovana u odnosu na uslove osnovnih merenja i korigovana za dejstvo rastvarača i redukciju toka zavisno od vremena koriščenjem eksperimentalog projektovanja u usiovima bez testiranog jedinjenja.

[0355] Određene su krivulje inhibicije dobijene za jedinjenja i koncentracije koje su smanjene 50% gustine toka određenu u usiovima osnovnih merenja (IC50). Sva jedinjenja za koja je ICso vrednost iznad 10 pM se ne smatraju snažnim inhibitorima hERG kanala pri čemu se jedinjenja sa ICgrj vrednostima ispod 1 uM smatraju snažnim inhibitorima hERG kanala.

[0356] Kada su testirana u HERG ogledu inhibicije, za jedinjenja prem3 ovom pronalasku je utvrđeno da imaju IC50vrednosti kako je prikazano u Tabeli 8.

In vivoogledzaprocenu aktivnosti jedinjenja kod pacovs

[0357] Dejstvo jedinjenja prema ovom pronalasku da inhibiraju izlučivanje luteinizujućeg hormona (LH) i da smanje nivoe cirkulišućeg androgena su određeni pomoću sledećih bioloških studija.

Mf^MkasJrira

cirkulisanja l uteinizujućeg hormona (LH).

[0358] Kod ljudi i glodara, kastracija se pokazala kao dobra prednost da se dozvoli povišeno, dosledno GnRH signaliziranje i posle loga podizanje cirkulišućeg LH. Zato je korišćen model kastriranog pacova da se dobije širok indeks za merenje inhibicije LH kao marker za tnhibiciju testiranog jedinjenja za GnRH signalnu putanju,

[0359] Kastrirani odrasli muški Sprague-Dawiey (SD) pacovi {150-175 g.) su kupljeni od Janvier (St Berthevin, France). Sve životinje su smeštene po 3 po kavezu u prostoriji sa kontroiisanom temperaturom { 22 ± 2"C) i 50 ± 5% relativne vlažnost! sa fotoperiođom od 12 sati svetla/12 sati mraka

(svetla isključena u 18.00 h). Životinje su dobile 2 nedeije da se oporave posle operacije pre početka studije. Životinje su kontroiisane na dnevnoj bazi. Standardna dijeta i voda iz vodovoda su datiađ libitum.Papiri i tacne za otpatke u kavezu za životinje su menjani jednom nedeljno. Na dan studije, životinje su akiimatizovane za prostoriju za postupak tokom perioda od jednog sata pre započinjanja eksperimenta

[0360]Jedinjenja prema ovom pronalasku su formulisana kao apirogena vođa sa 90 g/L (2-hidroksipropii}-p-cikloDekstrin.[0361]Posle bazalnog uzorkovanja (TO) jedna doza jedinjenja prema ovom pronalasku ili pomoćnog sredstva je primenjena intravenski pacovlma. Zatim je prikupljena kiv na 60 minuta posle davanja doze. Uzorci krvi su dobijeni preko najveće vene u repu, uvedene u epruvete sa EDTA i odmah centrifugirane. Uzorci plazme su prikupljeni i sačuvani u zamrzivaču na -80"C sve do ogleda. Nivoi LH seruma su određeni koriščenjem pribora za rađioimunotest iz RlAZEN - Rat LH, Zentech (Liege, Belgium). Osnovno merenje je definisano kao inicijalni osnovni uzorak krvi.

[0362]Kada je ispitivano na gore opisanom modelu kastriranih muških pacova kako je opi, jedinjenje br°1 je značajno potisnulo nivoe cirkulišućeg LH (Slika 3).

[0363]Kada je ispitivano na gore opisanom modelu kastriranih muških pacova, jedinjenje br19 je značajno potisnulo nivoe cirkulišućeg LH (Slika 4).

Odrasli mužjaci kojima nisu rađene intervencije na gonadi za procenu dejstva jedinjenja prema

.Qyojm..prpJ3Ma^

[0364]Odrasli mužjaci Sprague-Daw!ey (SD) pacova kojima nisu rađene intervencije na gonadi (225-385 g N=3/grupi su smešteni u prostoriju sa kontrolisanom temperaturama (22 ± 2"C) I 50 ± 5% relativnom vlažnošću sa fotoperiođom od 12 sati svetia/12 sati mraka (svetla su isključena u 18.00 h). Hrana za pacove i voda iz vodovoda su omogućeni pacovima, ad libitum. Posle uzimanja bazalnog uzorka, pacovi koji su se slobodno kretali su dobili intravensku injekciju~0 min sa bilo jednom dozom jedinjenja ili pomoćnim sredstvom. Krv je zatim prikupljena na 1. 5, 15. 90, 150, 210 min u epruvete koje sadrže EDTA kao antikoagulans i centrifugirana bez odlaganja. Uzorci plazme su prikupljeni I sačuvani u zamrzivaču na -80"C sve do ogleda. Nivoi testosterona u plazmi su određen; koriščenjem pribora za radioimunitest (Immunotech).

[0365]Jedinjenje n°l je formulisano u S% 2-hidroksipropii-p-ciklod©kstrinu/'H20 (w/w). Jedna doza od 50 mg/kg jedinjenja br"1 je Intravenski ubrizgana.

[0366]Kada je testirano kod mužjaka pacova kojima nisu rađene intervencije na gonadi, jedinjenje n°1 je značajno potislo nivoe testosterona plazme tokom perioda testiranja od 210 minuta (Slika 5).

Claims (11)

1. Jedinjenje prema Formuli 1: i njegovi farmaceutski prihvatljivi solvati, pri čemu Ar' ie nesupstituisani tiofen-2-il. nesupstituisani fenil, iii 4-fluorofenil; R1 je H ili metil; r<2>ima opštu Formulu {i), (ti) ili (iii): pri čemu R2 je linearni ili razgranati C1-C4 alkil, C1-C2 haloalkil, linearni iii razgranati C2-C3 alkenil, C3-C4 cikloalkil ili đi(C!-C2 alkil)amino; X<1>je N ili C-R<3>pri čemu R<e>je H, fiuor ili C1-C2 aikil: XzjeO ili S: X? je N, iii X,J je CH pod uslovorn da X<1>jeste N iX<2>jeste N-R<7>pri černu R<7>je iirsearan ili razgranat C l- C3 alkil ili ciklopropil; R3 je linearni Hi razgranat C1-C4 alkil ili C3-C4 cikloalkil; X<4>je IM ili C-R<5>pri čemu R<2>je H ili C 1-C2 aikil: X<5>jeOiiiS; X" je N. ili X<e>je CH pod uslovorn da X4 jeste N i X<5>jeste N-R<3>pri čemu R" je linearan ili razgranat C1- C3 alkii ili ciklopropil; Rje halo, cijano, metil, iii hidroksil; Ra je H ili h3io; sa uslovorn da kada Ar<3>je prema Formuli (iii), onda R<!>jeste metil; i jedinjenje prema Formuii! nije (3-(2-tzobuti!tiazol-4-tl}-5,6-dihidro^^ [1,1'-b!fentl]-4-tK8-metii-3-(6-metilpiridin-2-i!)-5:6-dthidro-j1,2,4]triazolo[4,3-a]pirazin-7(8H)-iljmetanon; (8--meti!-3-(6-meti!piridin-2-ii)^ niljmetanon.

2. Jedinjenje prema patentnom zahtevu 1, koje ima Formulu i': i njegovi farmaceutski prihvatljivi solvati, pri čemu Ar<1>jeste nesupstituisani tiofen-2-il, nesupstituisani fenil. ili 4-fluorofenil; R1 je H ili metil; R2 je linearni ili razgranati C1-C4 alkil, C1--C2 haloalkil, linearni ili razgranati C2 -C3 alkenil, C3-C4 cikloalkil ili đi(C1-C2 aikiljamtno; X<1>je Ni ili C- R<15>pri čemu R<e>jeste H, fluoro ili C 1-C2 alkil; X2 je O ili S; X<1>is N. ili X* je CH pod uslovorn da X<J>je N i X:: je N- R-' pri čemu R' je linearan iii razgranat C1-C3 aikil ili ciklopropil.

3. Jedinjenje prema patentnom zahtevu 1 ili patentnom zahtevu 2 koje ima Formulu I': i njegovi farmaceutski prihvatljivi solvati, pri ćemu Ar<1>, R<1>. R", X: i X? jesu kako je definisano iznad u patentnom zahtevu 1.

4. Jedinjenje prema patentnom zahtevu 3, izabrano iz Formule l'a i l'b i njegovi farmaceutski prihvatljivi solvati, pri čemu Ar<1>, R<z>, X1 iX<2>jesu kako je definisano u patentnom zahtevu 1.

5. Jedinjenje prema patentnom zahtevu 3, izabrano iz Formule l'e i i d i njegovi farmaceutski prihvatljivi solvati, pri ćemu R<1>,R*,X<1>i X<2>jesu kako je definisano u patentnom zahtevu 1.

Sjedinjenje prema patentnom zahtevu 3, izabrano iz Formule l'e. l'f i njegovi farmaceutski prihvatljivi solvati, pri ćemu Ar\ R<1>, R<2>i Rs jesu kako je definisano u patentnom zahtevu 1. 7.

Jedinjenje prema patentnom zahtevu 6 je izabrano iz formula l'e-1, l'e-2, IT-1. !'f-2 i njegovi farmaceutski prihvatljivi snivati, pri čemu R<1>,R<2>i R<e>jesu kako je definisano u patentnom zahtevu 1.

Sjedinjenje prema patentnom zahtevu 7, koje ima Formulu t'e-3 i njegovi farmaceutski prihvatljivi soivati, pri čemu R2 jeste kako je definisano u patentnom zahtevu 1

9, Jedinjenje prema patentnom zahtevu 7, koje ima Formulu i'f-3 i njegovi farmaceutski prihvatljivi solvati, pri ćemu R2 jeste kako je definisano u patentnom zahtevu 1.

10. Jedinjenje prema jednom od patentnih zahteva 1 do 3 koje ima formule l'g, Th i Ti i njegovi farmaceutski prihvatljivi solvati, pri ćemuAr1, R<1>, R2 i R7 jesu kako je definisano u patentnom zahtevu 1.

11. Jedinjenje prema patentnom zahtevu 1, koje ima Formulu I": i njegovi farmaceutski prihvatljivi solvati, pri čemu Ar<1>jeste nesupstituisani tiofen-2-il, nesupstituisani fenil, ili 4-fluorofenil; R1 je H ili metil; R<3>je linearni ili razgranat Cl-CM alkil iii C3-C4 cikloalkil; X* je N ili C- R<e>pri ćemu Ra jeste H ili C1-C2 aikil: X<r>'jeOiliS; X<6>je N, ili X<e>je CH pod uslovorn da X<4>jeste N i X" jeste l\f-R9 pri čemu Rs je linearan ili razgranat C1-C3 alkil ili ciklopropil.

12. Jedinjenje prema patentnom zahtevu 11, izabrano iz Formule l"a, i 'b i njegovi farmaceutski prihvatljivi solvati, pri čemu Ar<1>, R<J>, X<4>, X<5>i X<B>jesu kako je definisano iznad u patentnom zahtevu 1.

13. Jedinjenje prema patentnom zahtevu 11. izabrano iz Formule i"c, !"d i njegovi farmaceutski prihvatljivi solvati, pri čemu R', R<3>, X<4>,X" iX<15>jesu kako je definisano u patentnom zahtevu 1. 14. Jedinjenje prema patentnom zahtevu 11 izabrano iz Formula i"e. !"f. i"g. I"h i l"i i njegovi farmaceutski prihvatljivi solvati, pri Čemu Ar<1>, R<1>. R<3>, R<a>i R<9>jesu kako je definisano u patentnom zahtevu 1.

15. Jedinjenje prema patentnom2ahtevu 14 izabrano iz Formula l"e-1, l"M, l"g-1. i"h-1, l"i-1, l"e-2, l"f-2, l"g-2. i"h-2 i l"i-2 i njegovi farmaceutski prihvatljivi soivati, pri čemu R<1>, R<3>, R<3>i R* jesu kako je definisano u patentnom zahtevu 1.

16.Jedinjenje prema patentnom zahtevu 1 izabrano iz Formula i": i njegovi farmaceutski prihvatljivi soivati, pri čemu Ar<1>je nesupstituisani fenil, nesupstituisani tiofen-2-il iii 4-fluorofenil; R4 je halo, cijano, metil, ili hidroksil; R5je H iii halo.

17. Jedinjenje prema patentnom zahtevu 16, izabrano iz Formule l"<:>a i l"'b i njegovi farmaceutski prihvatljivi soivati, pri čemu R<4>i R° jesu kako je definisano u patentnom zahtevu 1.

16. Jedinjenje prema patentnom zahtevu 1, izabrano iz grupe koja se sastoji od: i njegovi farmaceutski prihvatljivi solvati.

19. Farmaceutsko jedinjenje koje obuhvata jedinjenje prema jednom od patentnih zahteva 1 do 18 ili njegov farmaceutski prihvatljiv solvat i najmanje jedan farmaceutski prihvatljiv nosač, razblaživač, ekscipijent i/ili ađuvans.

20. Lek koji obuhvata jedinjenje prema jednom od patentnih zahteva 1 do 18 ili njegov farmaceutski prihvatljiv solvat.

21. Jedinjenje prema jednom od patenntnih zahteva 1 do 18 iii njegov farmaceutski prihvatljiv solvat za upotrebu u lečenju i/ili da se spreči depresija, uznemirenost, psihoza, šizofrenija, psihotični poremećaji, bipoioarni poremećaji, kognitivni poremećaji. Parkinsonova boiesl, Alchajmerova bolest, poremećaj hiperaktivnosti i deficita pažnje (ADHD), bol, konvulzija, gojaznost, zapaljenske bolesti uključujući sindrom nervoznih creva i poremećaje zapaljenskih procesa creva emeza, preeklampsija, bolesti povezane s disajnirn putevima uključujući hroničnu opstruktivnu bolest pluća, astmu, pojačana reaktivnost bronhija. bronhokonstrikcija i kašalj, poremećaji reproduktivnih organa, kontracepcija i bolesti uslovljene polnim hormonom uključujući ali bez ograničavanja na benignu hiperplaziju prostate (BPH), hiperplaziju prostate, metastazirani karcinom prostate, rak testisa, rak dojke, rak jajnika, androgenom uslovljene akne, muški tip ćelavosti, endometrioza, abnormalan pubertet, fibroza materice, fiboirni tumor materice, kanceri zavisni od hormona, hiperanđrogenizam, hirsutizam, virilizacija, sindrom policističnih jajnika(PCOS). bolest predrnenstrualne disforije (PMDO), HAIR- AN sindrom (hiperanđrogenizam, otpornost na insutin i akantoza), hipertekoza jajnika (HAiR-AN sindrom sa hiperplazijom luteinizovanih teka ćelija u unutarnjem tkivu (stromi) jajnika), druge manifestacije visokih koncentracija androgena u jajnicima (npr. zatajenje sazrevanja folikula atrezija anovulacija, dismenoreja. disfunkcionalno krvarenje materice, neplodnost), tumor koji proizvodi androgen (virilizujući tumor jajnika ili adrenalni tumor) menoragija i adenomioza.

22. Jedinjenje prema jednom od patentnih zahteva 1 do 18 ili njegov farmaceutski prihvatljiv solvatzaupotrebu u potiskivanju udara luteinizirajućeg hormona (LH) u asistiranoj koncepciji kod pacijenta.

23. Jedinjenje prema jednom od patentnih zahteva 1 do 18 ili njegov farmaceutski prihvatljiv solvat za upotrebu u prouzrokovanju muške kastracije i inhibiranju seksualnog nagona kod muškaraca.

24. Postupak pripreme jedinjenja 5.6.7,8-tetrahtdro-f1,2,4]triazo!o[4,3-alpirazina prema Formuli il ili soli ili njegovog solvata, pri čemu puna linija sa zvezdicorn označava da se misli na pojedinačne enantiornere su narnenjeni, isključujući njegove racemske mešavine: R<1>je linearan ili razgranat C1-C4 alkil ili C3-C4 cikloalkil. svaka od pomenutih alkii ili cikloalkil grupa je opciono supstituisana jednom ili više grupa izabranom iz halo ili estara; t Ar<2>' je 5- do 6člani arii ili heteroaril grupu, svaka od grupa arila, ili heteroarila je opciono supstituisan jednom ili više grupa izabranih iz halo, alkil, haloalkil, cikloalkil. heteraalkil, heterocikiil, aril, heteroaril, hidroksil, alkoksi, alkilamino, karbamoil, alkilkarbamoil, karbamoilalkil, karbamoilamino, alkilkarbamoilamino, aikilsulfonil. haioalkiisuifonii, arilsuifonilalkil, sulfamoil, alkilsulfamoil, alkilsulfonilamino, haloalkilsuifonilamino, fuzionisari na aril iii heteroaril grupa može da bude jedan ili više cikloaklil, aril, heterocikiil ili heteroaril defova, svaki od pomenutih supstituenata se opciono supstituiše jednim ili više dodatnih supstituenata odabranih iz halo, alkil. haloalkil, alkoksi. haloalkoksi; pomenuti postupak obuhvata sledeće korake: a) reagovanje jedinjenja prema Formuli A pri čemu puna linija sa zvezdicom označava da se misli na individualne enantiornere, isključujući njihove racemijske mešavine; R<1>' je kako je definisano u smislu Formule II: sa reagensom koji daje kao rezultat N-sp'<:>zaštitnu grupu (PG) na amin-azotnom jedinjenju prema Formuli A, u prisustvu redukujućeg agensa da se dobije jedinjenje prema Formuli Cpretvaranje jedinjenja prema Formuli C s tri(C1-C2 alkil) oksonijum soli lako da se dobije jedinjenje prema Formuii D pri čemu puna linija sa zvezdicom označava da se misli na pojedinačne enantiornere, isključujući njihove racemijske mešavine. R1 jeste kako je definisano u vezi sa Formulom II, PG je kao što je definisano u vezi sa Formulom C, i R1G jeste C1- C2 alkil, u prisustvu baze; b) reakcija Jedinjenja Formule D sa jedinjenjern Formule E ili soli ili njegovog solvata, pri čemu Ar<2>,jeste kako je definisano u vezi sa Formulom II; tako da se dobije jedinjenje prema Formuli F pri čemu puna linija sa zvezdicom označava da se misli na pojedinačne enantiornere, isključujući njihove racemijske mešavine, R<:>jeste kako je definisano u vezi sa Formulom 11. PG je kao što je definisano u vezi sa Formulom C, iAF1' je kako je definisano u vezi sa Formulom E; i đ)uk!anjanje zaštite jedinjenja prema Formuli F s pogodnim reagensom uklanjanja zaštite da se dobije jedinjenje prema Formuli 11 ili njegova so ili njegov solvat.

25. Postupak prema patentnom zahtevu 24, pri čemu korak (a) do (d) se izvode a) u reagovanje jedinjenja prema Formuli A pri čemu puna Unija sa zvezdicom označava da se misli na individualne enantiornere, isključujući njihove racemijske mešavine; i R<1>' jeste kao što je definisano u patentnom zahtevu 24; sa reagensom koji daje kao rezultat N-sp<3>zaštitnu grupu na amin-azotnom jedinienju prema Formuli A Formule 81, ili Formule 82 pri čemu, R<12>, R<1?>',R13,R<n>'i R<14>su H, ili R<14>je metoksi iR12,R12',R1<3>i<R13>' su H, ili R<12>i R:4 su metoksi i R<12>', R<13>i R<13>' su H, ili R<1>2,R1<2>' i R<14>su metoksi i R<13>i R,<s>' su H. XjeCI, Br. I, OMs. OTs, OTf, bilo kroz direktnu aikilaciju amin-azota kada se koristi jedinjenje prema Formuli B2, ili u prisustvu redukujućeg agensa kada se koristi jedinjenje prema Formuli B1 da se na kraju dobije jedinjenje prema Formuli C-1 pri čemu puna linija sa zvezdicom označava da se misli na pojedinačne enantiornere, isključujući njihove racemijske mešavine, iR",R",R12'. R<13>Ru' i Ru su kao što je gore definisano; b) pretvaranje jedinjenja prema Formuli C-1 s tri(C1-C2 alkil)oksonijum soli (reakcija tipa Meervvein), ili (C1-C2)alkiisulfat, ili {C1-C2)h!oroformat, ili upotrebu PCi5/POCI3/(C1-C2)hidroksialkil tako da se dobije jedinjenje prema Formuii D-1 pri čemu puna linija sa zvezdicom označava da se misli na pojedinačne enantiornere, isključujući njihove racemijske mešavine, i R<1>', R' 2, R,<2>\R<u>, R13' i R<1>" su kao što je gore definisano i Rie je C1-C2 alkil, u prisustvu baze; c)reakcija jedinjenja Formule D-1 sa jedinjenjem FormuleE ili njegovom soli ili njegovim solvatom, pri čemu Ar<2>'jeste kako je definisano u vezi sa Formulom 11; tako da se dobije jedinjenje prema Formuli F-1 pri ćemu puna linija sa zvezdicom označava da se misli na pojedinačne enantiornere. isključujući njihove racemijske mešavine, i R<1>', R<12>, R<1>2',R1<3>, R,3\ R<14>i Ar' su kao stoje gore definisano; i d)uklanjanje zaštite jedinjenja prema Formuli F-1 s pogodnim reagensom uklanjanja zaštite da se dobije jedinjenje prema Formuli li ili njegova so ili njegov solvat.

26. Postupak prema patentnom zahtevu 25, pri čemu R12 i R<1>" jesu metoksi i Ru\ R<13>i R1"v su H, iliRu,R<12>' i R14 jesu metoksi i R'<3>i R<13>,su H.

27. Postupak prema jednom od patentnih zahteva 24 do 26, pri černu se baza u koraku b) bira iz grupe koja se sastoji od natrijum karbonata, natrijum bikarbonata, kalijum karbonata, cezijum karbonata.

28. Postupak prema bilo kom od patentnih zahteva 24 do 27, prt čemu Ar<2>,jeste 5- do 6-čiana heteroaril grupa izabrana iz grupe koja se sastoji od prs tenova (i), (ii) i (iii) pri čemu X<:>je N iii C-R<t:>pri čemu Rb je H, fiuoro ili metii; X<2>je 0 ili S; X<a>je N, ili X'<1>je CH pod uslovorn da X1 jeste N i X~ jeste N-R'' pri čemu R' je linearan ili razgranat C1-C3 alkil ili ciklopropil, je linearni ili razgranati C1-C4 aikil, C1-C2 haloalkil, linearni iii razgranati C2-C3 alkenil, C3-C4 cikloalkil ili di(Ct-C2 alkiijamino; fenil, 4-fluorofeniL 2,4-difiuorofenii ili N-morfolinil; X" je N ili C- R<8>pri čemu R<e>jeste H iii C1-C2 alkil; X5 je O ili S; X<6>je N ili X<e>je CH pod uslovorn da X'<;>je N i X<5>je N-R<9>pri čemu R9 je C1-C2 alkil ili C3 alkil ili C3 cikloalkil, ili X<4>je N, X<3>je N-R<!!>pri čemu R<*>je metil i X<*>je CH; R<:i>'je linearni ili razgranati C1-C4 alkil, C1-C2 haloalkil, linearni ili razgranati C2-C3 alkenil, C3-C4 cikloalkil ili di(C1-C2 alkiljamino; fenil, 4-fluorofenil, 2,4 -difluorofenii ili N-morfolinil; R<4>'je cijano, C1-C2 alkil ili hidroksil.

29. Postupak prema jednom od patentnih zahteva 24 do 28, pri čemu R1' je C1-C2 alkil opciono supstituisan jednom ester grupom. 30Jedinjenje prema Formuli D ili so ili solvat prema ovoj formuli, pri čemu puna linija sa zvezdicom označava da se misli na pojedinačne enantiornere, isključujući njegove racemske mešavine R<1>je linearan ili razgranat C1-C4 alkil ili C3--C4 cikloalkil, svaka od pomenutih alkil ili cikloalkil grupa je opciono supstituisana jednom ili više grupa izabranom iz halo ili estara; PG je N-sp<3>zaštitna grupa koja je benzil grupa opciono supstituisana grupom koja donira jedan ili više elektrona izabranom iz alkohola, alkoksi, amino, i alkil; i R1Cl je C1-C2 alkil.

31. Jedinjenje prema patentnom zahtevu 30, koje ima Formulu D-1 ili so iii solvat prema ovoj formuli, pri čemu puna linija sa zvezdicom označava da se misli na pojedinačne enantiornere, isključujući njihove racemijske mešavine; R<12>, Rl2\R13, Ru I R<l4>su H, iliR<14>je metoksi i R12.R12',R131 R1"' su H, ili R12iR<14>su metoksi i R<12>', R<1>" i R<13>' su H, ili R<1>2,R'<2>'i R<14>su metoksi iR<3>i R<13>' su H;! R<1>' i R10 su kako je definisano u patentnom zahtevu 30. 32Jedinjenje prerna jednom od patentnih zahteva 30 do 31, pri černu R<!>' je C1-C2 alkil opciono supstituisan jednom ester grupom.

33. Jeđinjenje prema jednom od patentnih zahteva 30 do 31 koje jeste (R)--1-(2,4-đimetoksibenzil)-5-etoksi-6-metil-1,2,3,6-ietraksi- dropirazin iii (S)-1-(2,4-dirnetoksibenzi!)-5-etoksi-6-rneti'-1,2,3,6-tetrahidropi ražin.

34. Jedinjenje prema Formuli III ili njegova so ili soivat, pri čemu puna linija sa zvezdicom označava da se misli na pojedinačne enantiornere, isključujući njegove racemske mešaviner R<1>je linearan ili razgranat C1-C4 alkii ili C3-C4 cikloalkil, svaka od pomenutih alkil ili cikloalkil grupa je opciono supstituisana jednom ili više grupa izabranom iz halo ili estara;^ 2' je5- do 6člani arii iii heteroaril grupu, svaka od grupa ariia, ili heteroarila je opciono supstituisan jednom ili više grupa izabranih iz halo, alkil, haloalkil, cikloalkil, heteroalkil, heterocikiil, aril, heteroaril, hidroksil. alkoksi, alkilamino, karbamoil, alkilkarbamoil, karbamoilalkil, karbamoilamino, alkilkarbamoilamino, alkilsulfonil, haloalkilsulfonil, arilsulfonilalkil, sulfamoii, alkl'suifamoil, alkiisulfoniiamino, haioalkilsulfonilamino. ili fuzionisan na ari! ili heteroaril grupa može da bude jedan ili više cikloaklil, aril, heterocikiil ili heteroaril delova, svaki od pomenutih supstituenata se opciono supstituiše jednim ili više dodatnih supstituenata odabranih iz halo, alkil, haloalkil, alkoksi, haloalkoksi; i R11 je H ili N-sp<3>zaštitna grupa koja je benzil grupa opciono supstituisana jednom ili više grupa koje doniraju elektron izabranom iz alkohola, alkoksija, amino, i alkil; pod uslovorn da jedinjenje Formula III nije .. {R)-4-(8-meti]-5,6,7,S-tetrah!dro-[1,2,4Jtriazo!o{4,3-a]pirazin-3-ii)-2-feniitiazol hidrohlorid, {R)-8-metii-3-(pirdin-2-il)-5,6,7,8-tetrahidro-[l ,2,43triazolof4,3-ajpirazin dihidrohloridna so, ■■ {R)-2-(4-hlorofenil)-4-(8-metil-5.e,7,8-1etrahidro-[1,2,4]triazoloH,3-a]pirazin-3-il)tiazole hidrohlorid na so, - {R)-2-(4-{iuorofenil)-4-(8-metil-5,6,7.8-tetrahidro-[1,2,4]triazolo[4,3-a]pirazin-3-il)tiazol hidrohioriđna so, - {S)-8-metil-3-(piridin-2-f!)-5,6,7.8-tetrahidro-[1.2,4]tuazolo[4,3-alpira2!n, - (S)-2-(44luorofenil)-4-(8-metii^ - {S)-4-(4-{8-metii-5,6,7,8-teirahiđro^

35, Jedinjenje prema patentnom zahtevu 34 ili njegova so ili solvat, pri čemu R11 je H ili pri čemu R\ 2 Rit R« R<13>,j R<-4>su HjNj rm } e me}oksj j R<12>Ra R,<s>j R<13>' su h, ili R<12>iRu sumetoksi iR12',R13i R<13>'su H, iliR12, R!2, i R<1>'<1>su metoksi iR<:>3 i R<13>' su H; i R<1>,i Ar2, su kako je definisano u patentnom zahtevu 34. 36Jeđinjenje prema jednom od patentnih zahteva 34 do 35, pri čemu R<1>' je C1-C2 aikil opciono supstituisan jednom ester grupom.

37. Jedinjenje prema jednom od patentnih zahteva 34 do 36 izabran iz grupe koja se sastoji od

38. Upotreba jedinjenja prema jednom od zahteva 30 do 37, ili farmaceutski prihvatljive soli, ili njenog solvata za sintezu farmaceutski aktivnog sastojka.