RO111370B1 - Peptida cu activitate de stimulare a producerii hormonului cresterii - Google Patents
Peptida cu activitate de stimulare a producerii hormonului cresterii Download PDFInfo
- Publication number
- RO111370B1 RO111370B1 RO93-00065A RO9300065A RO111370B1 RO 111370 B1 RO111370 B1 RO 111370B1 RO 9300065 A RO9300065 A RO 9300065A RO 111370 B1 RO111370 B1 RO 111370B1
- Authority
- RO
- Romania
- Prior art keywords
- ala
- lys
- growth hormone
- dphe
- peptide
- Prior art date
Links
- 108090000765 processed proteins & peptides Proteins 0.000 title claims abstract description 87
- 230000000694 effects Effects 0.000 title claims description 6
- 239000005556 hormone Substances 0.000 title description 5
- 229940088597 hormone Drugs 0.000 title description 5
- 230000000638 stimulation Effects 0.000 title 1
- 102000018997 Growth Hormone Human genes 0.000 claims abstract description 87
- 108010051696 Growth Hormone Proteins 0.000 claims abstract description 87
- 239000000122 growth hormone Substances 0.000 claims abstract description 87
- 102000004196 processed proteins & peptides Human genes 0.000 claims abstract description 37
- 241001465754 Metazoa Species 0.000 claims abstract description 17
- 150000001875 compounds Chemical class 0.000 claims description 57
- 150000001413 amino acids Chemical class 0.000 claims description 40
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 claims description 25
- 125000004432 carbon atom Chemical group C* 0.000 claims description 19
- 239000000203 mixture Substances 0.000 claims description 18
- 150000003839 salts Chemical class 0.000 claims description 18
- -1 Ala Chemical compound 0.000 claims description 17
- WTDRDQBEARUVNC-UHFFFAOYSA-N L-Dopa Natural products OC(=O)C(N)CC1=CC=C(O)C(O)=C1 WTDRDQBEARUVNC-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 12
- 210000004369 blood Anatomy 0.000 claims description 11
- 239000008280 blood Substances 0.000 claims description 11
- MHUWZNTUIIFHAS-CLFAGFIQSA-N dioleoyl phosphatidic acid Chemical compound CCCCCCCC\C=C/CCCCCCCC(=O)OCC(COP(O)(O)=O)OC(=O)CCCCCCC\C=C/CCCCCCCC MHUWZNTUIIFHAS-CLFAGFIQSA-N 0.000 claims description 9
- BTCSSZJGUNDROE-UHFFFAOYSA-N gamma-aminobutyric acid Chemical compound NCCCC(O)=O BTCSSZJGUNDROE-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 9
- 229960004502 levodopa Drugs 0.000 claims description 9
- 108010016626 Dipeptides Proteins 0.000 claims description 7
- QWCKQJZIFLGMSD-UHFFFAOYSA-N alpha-aminobutyric acid Chemical compound CCC(N)C(O)=O QWCKQJZIFLGMSD-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 7
- AHLPHDHHMVZTML-BYPYZUCNSA-N L-Ornithine Chemical compound NCCC[C@H](N)C(O)=O AHLPHDHHMVZTML-BYPYZUCNSA-N 0.000 claims description 6
- 125000000217 alkyl group Chemical group 0.000 claims description 6
- 239000005557 antagonist Substances 0.000 claims description 6
- FRJIAZKQGSCKPQ-FSPLSTOPSA-N His-Ala Chemical compound OC(=O)[C@H](C)NC(=O)[C@@H](N)CC1=CN=CN1 FRJIAZKQGSCKPQ-FSPLSTOPSA-N 0.000 claims description 5
- 125000003118 aryl group Chemical group 0.000 claims description 5
- 108010040030 histidinoalanine Proteins 0.000 claims description 5
- 239000008194 pharmaceutical composition Substances 0.000 claims description 5
- 102100020948 Growth hormone receptor Human genes 0.000 claims description 4
- 108010068542 Somatotropin Receptors Proteins 0.000 claims description 4
- 125000003342 alkenyl group Chemical group 0.000 claims description 4
- 210000004899 c-terminal region Anatomy 0.000 claims description 4
- 125000000753 cycloalkyl group Chemical group 0.000 claims description 4
- AHLPHDHHMVZTML-UHFFFAOYSA-N Orn-delta-NH2 Natural products NCCCC(N)C(O)=O AHLPHDHHMVZTML-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 3
- 239000003085 diluting agent Substances 0.000 claims description 3
- 229960003692 gamma aminobutyric acid Drugs 0.000 claims description 3
- 229960003104 ornithine Drugs 0.000 claims description 3
- FJVAQLJNTSUQPY-CIUDSAMLSA-N Ala-Ala-Lys Chemical compound C[C@H](N)C(=O)N[C@@H](C)C(=O)N[C@H](C(O)=O)CCCCN FJVAQLJNTSUQPY-CIUDSAMLSA-N 0.000 claims description 2
- NIZKGBJVCMRDKO-KWQFWETISA-N Ala-Gly-Tyr Chemical compound C[C@H](N)C(=O)NCC(=O)N[C@H](C(O)=O)CC1=CC=C(O)C=C1 NIZKGBJVCMRDKO-KWQFWETISA-N 0.000 claims description 2
- WTDRDQBEARUVNC-LURJTMIESA-N L-DOPA Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CC1=CC=C(O)C(O)=C1 WTDRDQBEARUVNC-LURJTMIESA-N 0.000 claims description 2
- QEFRNWWLZKMPFJ-ZXPFJRLXSA-N L-methionine (R)-S-oxide Chemical compound C[S@@](=O)CC[C@H]([NH3+])C([O-])=O QEFRNWWLZKMPFJ-ZXPFJRLXSA-N 0.000 claims description 2
- QEFRNWWLZKMPFJ-UHFFFAOYSA-N L-methionine sulphoxide Natural products CS(=O)CCC(N)C(O)=O QEFRNWWLZKMPFJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 2
- 229940124277 aminobutyric acid Drugs 0.000 claims description 2
- 239000003814 drug Substances 0.000 claims description 2
- 125000002496 methyl group Chemical group [H]C([H])([H])* 0.000 claims description 2
- 230000004936 stimulating effect Effects 0.000 claims description 2
- 239000011885 synergistic combination Substances 0.000 claims description 2
- RVLOMLVNNBWRSR-KNIFDHDWSA-N (2s)-2-aminopropanoic acid;(2s)-2,6-diaminohexanoic acid Chemical compound C[C@H](N)C(O)=O.NCCCC[C@H](N)C(O)=O RVLOMLVNNBWRSR-KNIFDHDWSA-N 0.000 claims 1
- 229920001184 polypeptide Polymers 0.000 abstract description 5
- 239000000243 solution Substances 0.000 description 68
- XEKOWRVHYACXOJ-UHFFFAOYSA-N Ethyl acetate Chemical compound CCOC(C)=O XEKOWRVHYACXOJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 59
- YMWUJEATGCHHMB-UHFFFAOYSA-N Dichloromethane Chemical compound ClCCl YMWUJEATGCHHMB-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 57
- OKKJLVBELUTLKV-UHFFFAOYSA-N Methanol Chemical compound OC OKKJLVBELUTLKV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 48
- ZMXDDKWLCZADIW-UHFFFAOYSA-N N,N-Dimethylformamide Chemical compound CN(C)C=O ZMXDDKWLCZADIW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 34
- 229940024606 amino acid Drugs 0.000 description 31
- 235000001014 amino acid Nutrition 0.000 description 30
- 238000006243 chemical reaction Methods 0.000 description 27
- 229920005989 resin Polymers 0.000 description 26
- 239000011347 resin Substances 0.000 description 26
- 235000019439 ethyl acetate Nutrition 0.000 description 22
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Substances O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 21
- WYURNTSHIVDZCO-UHFFFAOYSA-N Tetrahydrofuran Chemical compound C1CCOC1 WYURNTSHIVDZCO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 20
- 239000000047 product Substances 0.000 description 19
- 239000011541 reaction mixture Substances 0.000 description 19
- XKRFYHLGVUSROY-UHFFFAOYSA-N Argon Chemical compound [Ar] XKRFYHLGVUSROY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 18
- HEMHJVSKTPXQMS-UHFFFAOYSA-M Sodium hydroxide Chemical compound [OH-].[Na+] HEMHJVSKTPXQMS-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 18
- 239000007787 solid Substances 0.000 description 18
- 238000000034 method Methods 0.000 description 15
- VEXZGXHMUGYJMC-UHFFFAOYSA-N Hydrochloric acid Chemical compound Cl VEXZGXHMUGYJMC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 14
- KDXKERNSBIXSRK-YFKPBYRVSA-N L-lysine Chemical compound NCCCC[C@H](N)C(O)=O KDXKERNSBIXSRK-YFKPBYRVSA-N 0.000 description 14
- 241000700159 Rattus Species 0.000 description 13
- 238000007792 addition Methods 0.000 description 13
- 238000004128 high performance liquid chromatography Methods 0.000 description 13
- QOSSAOTZNIDXMA-UHFFFAOYSA-N Dicylcohexylcarbodiimide Chemical compound C1CCCCC1N=C=NC1CCCCC1 QOSSAOTZNIDXMA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 12
- KDXKERNSBIXSRK-UHFFFAOYSA-N Lysine Natural products NCCCCC(N)C(O)=O KDXKERNSBIXSRK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 12
- DTQVDTLACAAQTR-UHFFFAOYSA-N Trifluoroacetic acid Chemical compound OC(=O)C(F)(F)F DTQVDTLACAAQTR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 12
- 230000037396 body weight Effects 0.000 description 11
- 239000010410 layer Substances 0.000 description 11
- 210000002966 serum Anatomy 0.000 description 11
- 230000002195 synergetic effect Effects 0.000 description 11
- COLNVLDHVKWLRT-MRVPVSSYSA-N D-phenylalanine Chemical compound OC(=O)[C@H](N)CC1=CC=CC=C1 COLNVLDHVKWLRT-MRVPVSSYSA-N 0.000 description 10
- OUYCCCASQSFEME-QMMMGPOBSA-N L-tyrosine Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CC1=CC=C(O)C=C1 OUYCCCASQSFEME-QMMMGPOBSA-N 0.000 description 10
- 102100022831 Somatoliberin Human genes 0.000 description 10
- 101710142969 Somatoliberin Proteins 0.000 description 10
- 229910052799 carbon Inorganic materials 0.000 description 10
- 239000000706 filtrate Substances 0.000 description 10
- 239000001257 hydrogen Substances 0.000 description 10
- 229910052739 hydrogen Inorganic materials 0.000 description 10
- WEXRUCMBJFQVBZ-UHFFFAOYSA-N pentobarbital Chemical compound CCCC(C)C1(CC)C(=O)NC(=O)NC1=O WEXRUCMBJFQVBZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 10
- YLQBMQCUIZJEEH-UHFFFAOYSA-N tetrahydrofuran Natural products C=1C=COC=1 YLQBMQCUIZJEEH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 10
- UFHFLCQGNIYNRP-UHFFFAOYSA-N Hydrogen Chemical compound [H][H] UFHFLCQGNIYNRP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 9
- CDBYLPFSWZWCQE-UHFFFAOYSA-L Sodium Carbonate Chemical class [Na+].[Na+].[O-]C([O-])=O CDBYLPFSWZWCQE-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 9
- 229910052786 argon Inorganic materials 0.000 description 9
- 238000005859 coupling reaction Methods 0.000 description 9
- DHMQDGOQFOQNFH-UHFFFAOYSA-N Glycine Chemical compound NCC(O)=O DHMQDGOQFOQNFH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 8
- 239000008346 aqueous phase Substances 0.000 description 8
- 238000003756 stirring Methods 0.000 description 8
- 150000008575 L-amino acids Chemical class 0.000 description 7
- COLNVLDHVKWLRT-QMMMGPOBSA-N L-phenylalanine Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CC1=CC=CC=C1 COLNVLDHVKWLRT-QMMMGPOBSA-N 0.000 description 7
- 239000012298 atmosphere Substances 0.000 description 7
- 239000003153 chemical reaction reagent Substances 0.000 description 7
- 230000008878 coupling Effects 0.000 description 7
- 238000010168 coupling process Methods 0.000 description 7
- 239000007789 gas Substances 0.000 description 7
- 239000007924 injection Substances 0.000 description 7
- 238000002347 injection Methods 0.000 description 7
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 description 7
- 229920006395 saturated elastomer Polymers 0.000 description 7
- 239000011734 sodium Substances 0.000 description 7
- XUJNEKJLAYXESH-REOHCLBHSA-N L-Cysteine Chemical compound SC[C@H](N)C(O)=O XUJNEKJLAYXESH-REOHCLBHSA-N 0.000 description 6
- 241000124008 Mammalia Species 0.000 description 6
- JGFZNNIVVJXRND-UHFFFAOYSA-N N,N-Diisopropylethylamine (DIPEA) Chemical compound CCN(C(C)C)C(C)C JGFZNNIVVJXRND-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- 102000007079 Peptide Fragments Human genes 0.000 description 6
- 108010033276 Peptide Fragments Proteins 0.000 description 6
- 239000002253 acid Substances 0.000 description 6
- 239000007864 aqueous solution Substances 0.000 description 6
- 230000012010 growth Effects 0.000 description 6
- 230000001965 increasing effect Effects 0.000 description 6
- 239000000463 material Substances 0.000 description 6
- KDLHZDBZIXYQEI-UHFFFAOYSA-N palladium Substances [Pd] KDLHZDBZIXYQEI-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- 239000000725 suspension Substances 0.000 description 6
- 238000003828 vacuum filtration Methods 0.000 description 6
- ADFXKUOMJKEIND-UHFFFAOYSA-N 1,3-dicyclohexylurea Chemical compound C1CCCCC1NC(=O)NC1CCCCC1 ADFXKUOMJKEIND-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 5
- OKTJSMMVPCPJKN-UHFFFAOYSA-N Carbon Chemical compound [C] OKTJSMMVPCPJKN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 5
- KRHYYFGTRYWZRS-UHFFFAOYSA-N Fluorane Chemical compound F KRHYYFGTRYWZRS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 5
- 241000282412 Homo Species 0.000 description 5
- ODKSFYDXXFIFQN-BYPYZUCNSA-N L-arginine Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CCCN=C(N)N ODKSFYDXXFIFQN-BYPYZUCNSA-N 0.000 description 5
- WHUUTDBJXJRKMK-VKHMYHEASA-N L-glutamic acid Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CCC(O)=O WHUUTDBJXJRKMK-VKHMYHEASA-N 0.000 description 5
- 125000000393 L-methionino group Chemical group [H]OC(=O)[C@@]([H])(N([H])[*])C([H])([H])C(SC([H])([H])[H])([H])[H] 0.000 description 5
- 239000004472 Lysine Substances 0.000 description 5
- 125000000539 amino acid group Chemical group 0.000 description 5
- 239000012300 argon atmosphere Substances 0.000 description 5
- 230000015572 biosynthetic process Effects 0.000 description 5
- MGHPNCMVUAKAIE-UHFFFAOYSA-N diphenylmethanamine Chemical compound C=1C=CC=CC=1C(N)C1=CC=CC=C1 MGHPNCMVUAKAIE-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 5
- 238000001914 filtration Methods 0.000 description 5
- 238000010438 heat treatment Methods 0.000 description 5
- 238000001727 in vivo Methods 0.000 description 5
- 229960001412 pentobarbital Drugs 0.000 description 5
- 238000001556 precipitation Methods 0.000 description 5
- 125000006239 protecting group Chemical group 0.000 description 5
- 239000002904 solvent Substances 0.000 description 5
- WHUUTDBJXJRKMK-UHFFFAOYSA-N Glutamic acid Natural products OC(=O)C(N)CCC(O)=O WHUUTDBJXJRKMK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- HKXLAGBDJVHRQG-YFKPBYRVSA-N L-lysinamide Chemical compound NCCCC[C@H](N)C(N)=O HKXLAGBDJVHRQG-YFKPBYRVSA-N 0.000 description 4
- VYPSYNLAJGMNEJ-UHFFFAOYSA-N Silicium dioxide Chemical compound O=[Si]=O VYPSYNLAJGMNEJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 150000008064 anhydrides Chemical class 0.000 description 4
- RDOXTESZEPMUJZ-UHFFFAOYSA-N anisole Chemical compound COC1=CC=CC=C1 RDOXTESZEPMUJZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 150000001721 carbon Chemical group 0.000 description 4
- PFKFTWBEEFSNDU-UHFFFAOYSA-N carbonyldiimidazole Chemical compound C1=CN=CN1C(=O)N1C=CN=C1 PFKFTWBEEFSNDU-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 239000011521 glass Substances 0.000 description 4
- 238000010647 peptide synthesis reaction Methods 0.000 description 4
- 229910000029 sodium carbonate Inorganic materials 0.000 description 4
- 239000007790 solid phase Substances 0.000 description 4
- 238000012360 testing method Methods 0.000 description 4
- VZCYOOQTPOCHFL-UHFFFAOYSA-N trans-butenedioic acid Natural products OC(=O)C=CC(O)=O VZCYOOQTPOCHFL-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- QTBSBXVTEAMEQO-UHFFFAOYSA-M Acetate Chemical compound CC([O-])=O QTBSBXVTEAMEQO-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 3
- QTBSBXVTEAMEQO-UHFFFAOYSA-N Acetic acid Chemical compound CC(O)=O QTBSBXVTEAMEQO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- QGZKDVFQNNGYKY-UHFFFAOYSA-N Ammonia Chemical compound N QGZKDVFQNNGYKY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 241000283690 Bos taurus Species 0.000 description 3
- DCXYFEDJOCDNAF-REOHCLBHSA-N L-asparagine Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CC(N)=O DCXYFEDJOCDNAF-REOHCLBHSA-N 0.000 description 3
- DNIAPMSPPWPWGF-UHFFFAOYSA-N Propylene glycol Chemical compound CC(O)CO DNIAPMSPPWPWGF-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M Sodium chloride Chemical compound [Na+].[Cl-] FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 3
- 102000005157 Somatostatin Human genes 0.000 description 3
- 108010056088 Somatostatin Proteins 0.000 description 3
- 125000004429 atom Chemical group 0.000 description 3
- 125000000051 benzyloxy group Chemical group [H]C1=C([H])C([H])=C(C([H])=C1[H])C([H])([H])O* 0.000 description 3
- 125000003178 carboxy group Chemical group [H]OC(*)=O 0.000 description 3
- 239000003054 catalyst Substances 0.000 description 3
- 239000003795 chemical substances by application Substances 0.000 description 3
- 238000006482 condensation reaction Methods 0.000 description 3
- 239000012634 fragment Substances 0.000 description 3
- 239000003701 inert diluent Substances 0.000 description 3
- 235000018977 lysine Nutrition 0.000 description 3
- QPJSUIGXIBEQAC-UHFFFAOYSA-N n-(2,4-dichloro-5-propan-2-yloxyphenyl)acetamide Chemical compound CC(C)OC1=CC(NC(C)=O)=C(Cl)C=C1Cl QPJSUIGXIBEQAC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 230000007935 neutral effect Effects 0.000 description 3
- 229910052757 nitrogen Inorganic materials 0.000 description 3
- 239000003921 oil Substances 0.000 description 3
- 235000019198 oils Nutrition 0.000 description 3
- 229910052763 palladium Inorganic materials 0.000 description 3
- 239000006187 pill Substances 0.000 description 3
- 239000002244 precipitate Substances 0.000 description 3
- NHXLMOGPVYXJNR-ATOGVRKGSA-N somatostatin Chemical compound C([C@H]1C(=O)N[C@H](C(N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H](CSSC[C@@H](C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(=O)N[C@@H](CC(N)=O)C(=O)N[C@@H](CC=2C=CC=CC=2)C(=O)N[C@@H](CC=2C=CC=CC=2)C(=O)N[C@@H](CC=2C3=CC=CC=C3NC=2)C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(=O)N[C@H](C(=O)N1)[C@@H](C)O)NC(=O)CNC(=O)[C@H](C)N)C(O)=O)=O)[C@H](O)C)C1=CC=CC=C1 NHXLMOGPVYXJNR-ATOGVRKGSA-N 0.000 description 3
- 229960000553 somatostatin Drugs 0.000 description 3
- 239000000126 substance Substances 0.000 description 3
- 238000003786 synthesis reaction Methods 0.000 description 3
- 239000003826 tablet Substances 0.000 description 3
- BDNKZNFMNDZQMI-UHFFFAOYSA-N 1,3-diisopropylcarbodiimide Chemical compound CC(C)N=C=NC(C)C BDNKZNFMNDZQMI-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- QXRNAOYBCYVZCD-BQBZGAKWSA-N Ala-Lys Chemical compound C[C@H](N)C(=O)N[C@H](C(O)=O)CCCCN QXRNAOYBCYVZCD-BQBZGAKWSA-N 0.000 description 2
- IJGRMHOSHXDMSA-UHFFFAOYSA-N Atomic nitrogen Chemical compound N#N IJGRMHOSHXDMSA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- KRKNYBCHXYNGOX-UHFFFAOYSA-K Citrate Chemical compound [O-]C(=O)CC(O)(CC([O-])=O)C([O-])=O KRKNYBCHXYNGOX-UHFFFAOYSA-K 0.000 description 2
- 125000002237 D-aspartyl group Chemical group [H]OC(=O)[C@]([H])(N([H])[H])C([H])([H])C(*)=O 0.000 description 2
- 125000000028 D-cysteine group Chemical group [H]N([H])[C@@]([H])(C(=O)[*])C(S[H])([H])[H] 0.000 description 2
- QIVBCDIJIAJPQS-SECBINFHSA-N D-tryptophane Chemical compound C1=CC=C2C(C[C@@H](N)C(O)=O)=CNC2=C1 QIVBCDIJIAJPQS-SECBINFHSA-N 0.000 description 2
- FEWJPZIEWOKRBE-JCYAYHJZSA-N Dextrotartaric acid Chemical compound OC(=O)[C@H](O)[C@@H](O)C(O)=O FEWJPZIEWOKRBE-JCYAYHJZSA-N 0.000 description 2
- IAZDPXIOMUYVGZ-UHFFFAOYSA-N Dimethylsulphoxide Chemical compound CS(C)=O IAZDPXIOMUYVGZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 208000033962 Fontaine progeroid syndrome Diseases 0.000 description 2
- VZCYOOQTPOCHFL-OWOJBTEDSA-N Fumaric acid Chemical compound OC(=O)\C=C\C(O)=O VZCYOOQTPOCHFL-OWOJBTEDSA-N 0.000 description 2
- 108010010803 Gelatin Proteins 0.000 description 2
- 239000004471 Glycine Substances 0.000 description 2
- XEEYBQQBJWHFJM-UHFFFAOYSA-N Iron Chemical compound [Fe] XEEYBQQBJWHFJM-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- KFZMGEQAYNKOFK-UHFFFAOYSA-N Isopropanol Chemical compound CC(C)O KFZMGEQAYNKOFK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- QIVBCDIJIAJPQS-VIFPVBQESA-N L-Tryptophan Natural products C1=CC=C2C(C[C@H](N)C(O)=O)=CNC2=C1 QIVBCDIJIAJPQS-VIFPVBQESA-N 0.000 description 2
- DEFJQIDDEAULHB-IMJSIDKUSA-N L-alanyl-L-alanine Chemical compound C[C@H](N)C(=O)N[C@@H](C)C(O)=O DEFJQIDDEAULHB-IMJSIDKUSA-N 0.000 description 2
- CKLJMWTZIZZHCS-REOHCLBHSA-N L-aspartic acid Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CC(O)=O CKLJMWTZIZZHCS-REOHCLBHSA-N 0.000 description 2
- 125000002707 L-tryptophyl group Chemical group [H]C1=C([H])C([H])=C2C(C([C@](N([H])[H])(C(=O)[*])[H])([H])[H])=C([H])N([H])C2=C1[H] 0.000 description 2
- KZSNJWFQEVHDMF-BYPYZUCNSA-N L-valine Chemical compound CC(C)[C@H](N)C(O)=O KZSNJWFQEVHDMF-BYPYZUCNSA-N 0.000 description 2
- JVTAAEKCZFNVCJ-UHFFFAOYSA-M Lactate Chemical compound CC(O)C([O-])=O JVTAAEKCZFNVCJ-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 2
- NQTADLQHYWFPDB-UHFFFAOYSA-N N-Hydroxysuccinimide Chemical compound ON1C(=O)CCC1=O NQTADLQHYWFPDB-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- MUBZPKHOEPUJKR-UHFFFAOYSA-N Oxalic acid Chemical compound OC(=O)C(O)=O MUBZPKHOEPUJKR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 229910019142 PO4 Inorganic materials 0.000 description 2
- 102000007327 Protamines Human genes 0.000 description 2
- 108010007568 Protamines Proteins 0.000 description 2
- 101000633010 Rattus norvegicus Somatostatin Proteins 0.000 description 2
- QAOWNCQODCNURD-UHFFFAOYSA-L Sulfate Chemical compound [O-]S([O-])(=O)=O QAOWNCQODCNURD-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 2
- 241000473945 Theria <moth genus> Species 0.000 description 2
- 239000012445 acidic reagent Substances 0.000 description 2
- 239000002671 adjuvant Substances 0.000 description 2
- 238000013019 agitation Methods 0.000 description 2
- 229960003767 alanine Drugs 0.000 description 2
- 150000001408 amides Chemical class 0.000 description 2
- 238000004458 analytical method Methods 0.000 description 2
- WPYMKLBDIGXBTP-UHFFFAOYSA-N benzoic acid Chemical compound OC(=O)C1=CC=CC=C1 WPYMKLBDIGXBTP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 239000002775 capsule Substances 0.000 description 2
- 238000009833 condensation Methods 0.000 description 2
- 230000005494 condensation Effects 0.000 description 2
- BGRWYRAHAFMIBJ-UHFFFAOYSA-N diisopropylcarbodiimide Natural products CC(C)NC(=O)NC(C)C BGRWYRAHAFMIBJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- POULHZVOKOAJMA-UHFFFAOYSA-M dodecanoate Chemical compound CCCCCCCCCCCC([O-])=O POULHZVOKOAJMA-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 2
- 238000010828 elution Methods 0.000 description 2
- 239000003995 emulsifying agent Substances 0.000 description 2
- 230000001804 emulsifying effect Effects 0.000 description 2
- 239000000839 emulsion Substances 0.000 description 2
- 238000010265 fast atom bombardment Methods 0.000 description 2
- 239000012458 free base Substances 0.000 description 2
- 238000002290 gas chromatography-mass spectrometry Methods 0.000 description 2
- 239000008273 gelatin Substances 0.000 description 2
- 229920000159 gelatin Polymers 0.000 description 2
- 235000019322 gelatine Nutrition 0.000 description 2
- 235000011852 gelatine desserts Nutrition 0.000 description 2
- 229960002989 glutamic acid Drugs 0.000 description 2
- 229960002885 histidine Drugs 0.000 description 2
- 239000012456 homogeneous solution Substances 0.000 description 2
- 125000004029 hydroxymethyl group Chemical group [H]OC([H])([H])* 0.000 description 2
- 239000003112 inhibitor Substances 0.000 description 2
- 238000002955 isolation Methods 0.000 description 2
- 229940070765 laurate Drugs 0.000 description 2
- HQKMJHAJHXVSDF-UHFFFAOYSA-L magnesium stearate Chemical compound [Mg+2].CCCCCCCCCCCCCCCCCC([O-])=O.CCCCCCCCCCCCCCCCCC([O-])=O HQKMJHAJHXVSDF-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 2
- VZCYOOQTPOCHFL-UPHRSURJSA-N maleic acid Chemical compound OC(=O)\C=C/C(O)=O VZCYOOQTPOCHFL-UPHRSURJSA-N 0.000 description 2
- 238000002844 melting Methods 0.000 description 2
- 230000008018 melting Effects 0.000 description 2
- 235000013336 milk Nutrition 0.000 description 2
- 239000008267 milk Substances 0.000 description 2
- 210000004080 milk Anatomy 0.000 description 2
- 125000005487 naphthalate group Chemical group 0.000 description 2
- 231100000252 nontoxic Toxicity 0.000 description 2
- 230000003000 nontoxic effect Effects 0.000 description 2
- 229940049964 oleate Drugs 0.000 description 2
- ZQPPMHVWECSIRJ-KTKRTIGZSA-N oleic acid Chemical compound CCCCCCCC\C=C/CCCCCCCC(O)=O ZQPPMHVWECSIRJ-KTKRTIGZSA-N 0.000 description 2
- 239000012044 organic layer Substances 0.000 description 2
- 239000012074 organic phase Substances 0.000 description 2
- 229940039748 oxalate Drugs 0.000 description 2
- 239000012071 phase Substances 0.000 description 2
- NBIIXXVUZAFLBC-UHFFFAOYSA-K phosphate Chemical compound [O-]P([O-])([O-])=O NBIIXXVUZAFLBC-UHFFFAOYSA-K 0.000 description 2
- 239000010452 phosphate Substances 0.000 description 2
- 229940048914 protamine Drugs 0.000 description 2
- 238000000746 purification Methods 0.000 description 2
- 230000002285 radioactive effect Effects 0.000 description 2
- FSYKKLYZXJSNPZ-UHFFFAOYSA-N sarcosine Chemical group C[NH2+]CC([O-])=O FSYKKLYZXJSNPZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 239000007909 solid dosage form Substances 0.000 description 2
- NHXLMOGPVYXJNR-UHFFFAOYSA-N srif Chemical compound N1C(=O)C(C(C)O)NC(=O)C(CCCCN)NC(=O)C(CC=2C3=CC=CC=C3NC=2)NC(=O)C(CC=2C=CC=CC=2)NC(=O)C(CC=2C=CC=CC=2)NC(=O)C(CC(N)=O)NC(=O)C(CCCCN)NC(=O)C(NC(=O)CNC(=O)C(C)N)CSSCC(C(O)=O)NC(=O)C(CO)NC(=O)C(C(O)C)NC(=O)C1CC1=CC=CC=C1 NHXLMOGPVYXJNR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 239000007858 starting material Substances 0.000 description 2
- 238000006467 substitution reaction Methods 0.000 description 2
- KDYFGRWQOYBRFD-UHFFFAOYSA-L succinate(2-) Chemical compound [O-]C(=O)CCC([O-])=O KDYFGRWQOYBRFD-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 2
- 229940095064 tartrate Drugs 0.000 description 2
- JOXIMZWYDAKGHI-UHFFFAOYSA-N toluene-4-sulfonic acid Chemical compound CC1=CC=C(S(O)(=O)=O)C=C1 JOXIMZWYDAKGHI-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 229960004799 tryptophan Drugs 0.000 description 2
- 229960004441 tyrosine Drugs 0.000 description 2
- 229940070710 valerate Drugs 0.000 description 2
- NQPDZGIKBAWPEJ-UHFFFAOYSA-N valeric acid Chemical compound CCCCC(O)=O NQPDZGIKBAWPEJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 239000000080 wetting agent Substances 0.000 description 2
- WWTBZEKOSBFBEM-SPWPXUSOSA-N (2s)-2-[[2-benzyl-3-[hydroxy-[(1r)-2-phenyl-1-(phenylmethoxycarbonylamino)ethyl]phosphoryl]propanoyl]amino]-3-(1h-indol-3-yl)propanoic acid Chemical compound N([C@@H](CC=1C2=CC=CC=C2NC=1)C(=O)O)C(=O)C(CP(O)(=O)[C@H](CC=1C=CC=CC=1)NC(=O)OCC=1C=CC=CC=1)CC1=CC=CC=C1 WWTBZEKOSBFBEM-SPWPXUSOSA-N 0.000 description 1
- OSSKQFKMMSXRTA-LBPRGKRZSA-N (2s)-2-amino-3-(1-phenylmethoxycarbonylimidazol-4-yl)propanoic acid Chemical compound C1=NC(C[C@H](N)C(O)=O)=CN1C(=O)OCC1=CC=CC=C1 OSSKQFKMMSXRTA-LBPRGKRZSA-N 0.000 description 1
- WZHKXNSOCOQYQX-FUAFALNISA-N (2s)-6-amino-2-[[(2r)-2-[[(2s)-2-[[(2s)-2-[[(2r)-2-[[(2s)-2-amino-3-(1h-imidazol-5-yl)propanoyl]amino]-3-(1h-indol-3-yl)propanoyl]amino]propanoyl]amino]-3-(1h-indol-3-yl)propanoyl]amino]-3-phenylpropanoyl]amino]hexanamide Chemical compound C([C@H](N)C(=O)N[C@H](CC=1C2=CC=CC=C2NC=1)C(=O)N[C@@H](C)C(=O)N[C@@H](CC=1C2=CC=CC=C2NC=1)C(=O)N[C@H](CC=1C=CC=CC=1)C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(N)=O)C1=CN=CN1 WZHKXNSOCOQYQX-FUAFALNISA-N 0.000 description 1
- ONOURAAVVKGJNM-SCZZXKLOSA-N (2s,3r)-2-azaniumyl-3-phenylmethoxybutanoate Chemical compound [O-]C(=O)[C@@H]([NH3+])[C@@H](C)OCC1=CC=CC=C1 ONOURAAVVKGJNM-SCZZXKLOSA-N 0.000 description 1
- UHPQFNXOFFPHJW-UHFFFAOYSA-N (4-methylphenyl)-phenylmethanamine Chemical compound C1=CC(C)=CC=C1C(N)C1=CC=CC=C1 UHPQFNXOFFPHJW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- NHTZSJKMWBONMD-UHFFFAOYSA-N (4-methylphenyl)-phenylmethanamine;hydrochloride Chemical compound Cl.C1=CC(C)=CC=C1C(N)C1=CC=CC=C1 NHTZSJKMWBONMD-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- WZZBNLYBHUDSHF-DHLKQENFSA-N 1-[(3s,4s)-4-[8-(2-chloro-4-pyrimidin-2-yloxyphenyl)-7-fluoro-2-methylimidazo[4,5-c]quinolin-1-yl]-3-fluoropiperidin-1-yl]-2-hydroxyethanone Chemical compound CC1=NC2=CN=C3C=C(F)C(C=4C(=CC(OC=5N=CC=CN=5)=CC=4)Cl)=CC3=C2N1[C@H]1CCN(C(=O)CO)C[C@@H]1F WZZBNLYBHUDSHF-DHLKQENFSA-N 0.000 description 1
- QVHJQCGUWFKTSE-UHFFFAOYSA-N 2-[(2-methylpropan-2-yl)oxycarbonylamino]propanoic acid Chemical compound OC(=O)C(C)NC(=O)OC(C)(C)C QVHJQCGUWFKTSE-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- QBWKPGNFQQJGFY-QLFBSQMISA-N 3-[(1r)-1-[(2r,6s)-2,6-dimethylmorpholin-4-yl]ethyl]-n-[6-methyl-3-(1h-pyrazol-4-yl)imidazo[1,2-a]pyrazin-8-yl]-1,2-thiazol-5-amine Chemical compound N1([C@H](C)C2=NSC(NC=3C4=NC=C(N4C=C(C)N=3)C3=CNN=C3)=C2)C[C@H](C)O[C@H](C)C1 QBWKPGNFQQJGFY-QLFBSQMISA-N 0.000 description 1
- 241000251468 Actinopterygii Species 0.000 description 1
- QHASENCZLDHBGX-ONGXEEELSA-N Ala-Gly-Phe Chemical compound C[C@H](N)C(=O)NCC(=O)N[C@H](C(O)=O)CC1=CC=CC=C1 QHASENCZLDHBGX-ONGXEEELSA-N 0.000 description 1
- RDIKFPRVLJLMER-BQBZGAKWSA-N Ala-Leu Chemical compound CC(C)C[C@@H](C(O)=O)NC(=O)[C@H](C)N RDIKFPRVLJLMER-BQBZGAKWSA-N 0.000 description 1
- GUBGYTABKSRVRQ-XLOQQCSPSA-N Alpha-Lactose Chemical compound O[C@@H]1[C@@H](O)[C@@H](O)[C@@H](CO)O[C@H]1O[C@@H]1[C@@H](CO)O[C@H](O)[C@H](O)[C@H]1O GUBGYTABKSRVRQ-XLOQQCSPSA-N 0.000 description 1
- QGZKDVFQNNGYKY-UHFFFAOYSA-O Ammonium Chemical class [NH4+] QGZKDVFQNNGYKY-UHFFFAOYSA-O 0.000 description 1
- NLXLAEXVIDQMFP-UHFFFAOYSA-N Ammonium chloride Substances [NH4+].[Cl-] NLXLAEXVIDQMFP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- VHUUQVKOLVNVRT-UHFFFAOYSA-N Ammonium hydroxide Chemical compound [NH4+].[OH-] VHUUQVKOLVNVRT-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000004475 Arginine Substances 0.000 description 1
- 241000894006 Bacteria Species 0.000 description 1
- BTBUEUYNUDRHOZ-UHFFFAOYSA-N Borate Chemical compound [O-]B([O-])[O-] BTBUEUYNUDRHOZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 101800001415 Bri23 peptide Proteins 0.000 description 1
- CPELXLSAUQHCOX-UHFFFAOYSA-M Bromide Chemical compound [Br-] CPELXLSAUQHCOX-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- KFZIIDIRRPHLAP-RIZDZYNXSA-N C(C(C([2H])[2H])([2H])[2H])(=O)O.[Si](C)(C)(C)[Na] Chemical compound C(C(C([2H])[2H])([2H])[2H])(=O)O.[Si](C)(C)(C)[Na] KFZIIDIRRPHLAP-RIZDZYNXSA-N 0.000 description 1
- 102400000107 C-terminal peptide Human genes 0.000 description 1
- 101800000655 C-terminal peptide Proteins 0.000 description 1
- OYPRJOBELJOOCE-UHFFFAOYSA-N Calcium Chemical class [Ca] OYPRJOBELJOOCE-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 241000283707 Capra Species 0.000 description 1
- VEXZGXHMUGYJMC-UHFFFAOYSA-M Chloride anion Chemical compound [Cl-] VEXZGXHMUGYJMC-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- 241000238424 Crustacea Species 0.000 description 1
- QNAYBMKLOCPYGJ-UHFFFAOYSA-N D-alpha-Ala Natural products CC([NH3+])C([O-])=O QNAYBMKLOCPYGJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 125000002437 D-histidyl group Chemical group N[C@@H](C(=O)*)CC=1N=CNC1 0.000 description 1
- 125000000180 D-prolyl group Chemical group N1[C@@H](C(=O)*)CCC1 0.000 description 1
- RTZKZFJDLAIYFH-UHFFFAOYSA-N Diethyl ether Chemical compound CCOCC RTZKZFJDLAIYFH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- LVGKNOAMLMIIKO-UHFFFAOYSA-N Elaidinsaeure-aethylester Natural products CCCCCCCCC=CCCCCCCCC(=O)OCC LVGKNOAMLMIIKO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N EtOH Substances CCO LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- LYCAIKOWRPUZTN-UHFFFAOYSA-N Ethylene glycol Chemical compound OCCO LYCAIKOWRPUZTN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- CPELXLSAUQHCOX-UHFFFAOYSA-N Hydrogen bromide Chemical compound Br CPELXLSAUQHCOX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 206010062767 Hypophysitis Diseases 0.000 description 1
- DGAQECJNVWCQMB-PUAWFVPOSA-M Ilexoside XXIX Chemical class C[C@@H]1CC[C@@]2(CC[C@@]3(C(=CC[C@H]4[C@]3(CC[C@@H]5[C@@]4(CC[C@@H](C5(C)C)OS(=O)(=O)[O-])C)C)[C@@H]2[C@]1(C)O)C)C(=O)O[C@H]6[C@@H]([C@H]([C@@H]([C@H](O6)CO)O)O)O.[Na+] DGAQECJNVWCQMB-PUAWFVPOSA-M 0.000 description 1
- 239000005909 Kieselgur Substances 0.000 description 1
- QNAYBMKLOCPYGJ-UWTATZPHSA-N L-Alanine Natural products C[C@@H](N)C(O)=O QNAYBMKLOCPYGJ-UWTATZPHSA-N 0.000 description 1
- HNDVDQJCIGZPNO-YFKPBYRVSA-N L-Histidine Natural products OC(=O)[C@@H](N)CC1=CN=CN1 HNDVDQJCIGZPNO-YFKPBYRVSA-N 0.000 description 1
- ROHFNLRQFUQHCH-YFKPBYRVSA-N L-Leucine Natural products CC(C)C[C@H](N)C(O)=O ROHFNLRQFUQHCH-YFKPBYRVSA-N 0.000 description 1
- 235000019766 L-Lysine Nutrition 0.000 description 1
- FFEARJCKVFRZRR-UHFFFAOYSA-N L-Methionine Natural products CSCCC(N)C(O)=O FFEARJCKVFRZRR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- ONIBWKKTOPOVIA-BYPYZUCNSA-N L-Proline Chemical compound OC(=O)[C@@H]1CCCN1 ONIBWKKTOPOVIA-BYPYZUCNSA-N 0.000 description 1
- MTCFGRXMJLQNBG-REOHCLBHSA-N L-Serine Natural products OC[C@H](N)C(O)=O MTCFGRXMJLQNBG-REOHCLBHSA-N 0.000 description 1
- QNAYBMKLOCPYGJ-REOHCLBHSA-N L-alanine Chemical compound C[C@H](N)C(O)=O QNAYBMKLOCPYGJ-REOHCLBHSA-N 0.000 description 1
- 229930064664 L-arginine Natural products 0.000 description 1
- 235000014852 L-arginine Nutrition 0.000 description 1
- 239000004201 L-cysteine Substances 0.000 description 1
- 235000013878 L-cysteine Nutrition 0.000 description 1
- ZDXPYRJPNDTMRX-VKHMYHEASA-N L-glutamine Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CCC(N)=O ZDXPYRJPNDTMRX-VKHMYHEASA-N 0.000 description 1
- 229930182816 L-glutamine Natural products 0.000 description 1
- 125000003338 L-glutaminyl group Chemical group O=C([*])[C@](N([H])[H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C(=O)N([H])[H] 0.000 description 1
- 239000004395 L-leucine Substances 0.000 description 1
- 235000019454 L-leucine Nutrition 0.000 description 1
- 229930195722 L-methionine Natural products 0.000 description 1
- QEFRNWWLZKMPFJ-MFXDVPHUSA-N L-methionine (S)-S-oxide Chemical compound C[S@](=O)CC[C@H]([NH3+])C([O-])=O QEFRNWWLZKMPFJ-MFXDVPHUSA-N 0.000 description 1
- 125000002435 L-phenylalanyl group Chemical group O=C([*])[C@](N([H])[H])([H])C([H])([H])C1=C([H])C([H])=C([H])C([H])=C1[H] 0.000 description 1
- 229930182821 L-proline Natural products 0.000 description 1
- 125000002842 L-seryl group Chemical group O=C([*])[C@](N([H])[H])([H])C([H])([H])O[H] 0.000 description 1
- AYFVYJQAPQTCCC-GBXIJSLDSA-N L-threonine Natural products C[C@@H](O)[C@H](N)C(O)=O AYFVYJQAPQTCCC-GBXIJSLDSA-N 0.000 description 1
- 125000000769 L-threonyl group Chemical group [H]N([H])[C@]([H])(C(=O)[*])[C@](O[H])(C([H])([H])[H])[H] 0.000 description 1
- 125000003798 L-tyrosyl group Chemical group [H]N([H])[C@]([H])(C(=O)[*])C([H])([H])C1=C([H])C([H])=C(O[H])C([H])=C1[H] 0.000 description 1
- GUBGYTABKSRVRQ-QKKXKWKRSA-N Lactose Natural products OC[C@H]1O[C@@H](O[C@H]2[C@H](O)[C@@H](O)C(O)O[C@@H]2CO)[C@H](O)[C@@H](O)[C@H]1O GUBGYTABKSRVRQ-QKKXKWKRSA-N 0.000 description 1
- WHXSMMKQMYFTQS-UHFFFAOYSA-N Lithium Chemical class [Li] WHXSMMKQMYFTQS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- FYYHWMGAXLPEAU-UHFFFAOYSA-N Magnesium Chemical class [Mg] FYYHWMGAXLPEAU-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- PMIXKZYRCOUPII-INIZCTEOSA-N N[C@@H](Cc1cn(C(=O)OCc2ccccc2)c2ccccc12)C(O)=O Chemical compound N[C@@H](Cc1cn(C(=O)OCc2ccccc2)c2ccccc12)C(O)=O PMIXKZYRCOUPII-INIZCTEOSA-N 0.000 description 1
- 241000283973 Oryctolagus cuniculus Species 0.000 description 1
- 241001494479 Pecora Species 0.000 description 1
- 239000002202 Polyethylene glycol Substances 0.000 description 1
- ZLMJMSJWJFRBEC-UHFFFAOYSA-N Potassium Chemical class [K] ZLMJMSJWJFRBEC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 108010077895 Sarcosine Proteins 0.000 description 1
- 229920002472 Starch Polymers 0.000 description 1
- 229930006000 Sucrose Natural products 0.000 description 1
- CZMRCDWAGMRECN-UGDNZRGBSA-N Sucrose Chemical compound O[C@H]1[C@H](O)[C@@H](CO)O[C@@]1(CO)O[C@@H]1[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O1 CZMRCDWAGMRECN-UGDNZRGBSA-N 0.000 description 1
- 241000282887 Suidae Species 0.000 description 1
- 239000004473 Threonine Substances 0.000 description 1
- DTQVDTLACAAQTR-UHFFFAOYSA-M Trifluoroacetate Chemical compound [O-]C(=O)C(F)(F)F DTQVDTLACAAQTR-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- QIVBCDIJIAJPQS-UHFFFAOYSA-N Tryptophan Natural products C1=CC=C2C(CC(N)C(O)=O)=CNC2=C1 QIVBCDIJIAJPQS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- KZSNJWFQEVHDMF-UHFFFAOYSA-N Valine Chemical compound CC(C)C(N)C(O)=O KZSNJWFQEVHDMF-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 241000251539 Vertebrata <Metazoa> Species 0.000 description 1
- HCHKCACWOHOZIP-UHFFFAOYSA-N Zinc Chemical compound [Zn] HCHKCACWOHOZIP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229940022663 acetate Drugs 0.000 description 1
- 230000002378 acidificating effect Effects 0.000 description 1
- 150000007513 acids Chemical class 0.000 description 1
- 230000003213 activating effect Effects 0.000 description 1
- 239000012190 activator Substances 0.000 description 1
- 239000004480 active ingredient Substances 0.000 description 1
- 108010056243 alanylalanine Proteins 0.000 description 1
- 239000003513 alkali Substances 0.000 description 1
- 229910052783 alkali metal Inorganic materials 0.000 description 1
- 229910052784 alkaline earth metal Inorganic materials 0.000 description 1
- 150000001412 amines Chemical class 0.000 description 1
- 125000003277 amino group Chemical group 0.000 description 1
- 229910021529 ammonia Inorganic materials 0.000 description 1
- 235000011114 ammonium hydroxide Nutrition 0.000 description 1
- 150000003863 ammonium salts Chemical class 0.000 description 1
- 239000000427 antigen Substances 0.000 description 1
- 108091007433 antigens Proteins 0.000 description 1
- 102000036639 antigens Human genes 0.000 description 1
- 239000012736 aqueous medium Substances 0.000 description 1
- 239000003125 aqueous solvent Substances 0.000 description 1
- 239000008135 aqueous vehicle Substances 0.000 description 1
- ODKSFYDXXFIFQN-UHFFFAOYSA-N arginine Natural products OC(=O)C(N)CCCNC(N)=N ODKSFYDXXFIFQN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 235000009697 arginine Nutrition 0.000 description 1
- 210000001367 artery Anatomy 0.000 description 1
- 125000003710 aryl alkyl group Chemical group 0.000 description 1
- 229960001230 asparagine Drugs 0.000 description 1
- 235000003704 aspartic acid Nutrition 0.000 description 1
- 238000003556 assay Methods 0.000 description 1
- 229910052788 barium Inorganic materials 0.000 description 1
- DSAJWYNOEDNPEQ-UHFFFAOYSA-N barium atom Chemical class [Ba] DSAJWYNOEDNPEQ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229940050390 benzoate Drugs 0.000 description 1
- OQFSQFPPLPISGP-UHFFFAOYSA-N beta-carboxyaspartic acid Natural products OC(=O)C(N)C(C(O)=O)C(O)=O OQFSQFPPLPISGP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000036765 blood level Effects 0.000 description 1
- 230000005587 bubbling Effects 0.000 description 1
- 239000000872 buffer Substances 0.000 description 1
- 239000006172 buffering agent Substances 0.000 description 1
- 229910052791 calcium Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000011575 calcium Chemical class 0.000 description 1
- 239000012876 carrier material Substances 0.000 description 1
- 125000004218 chloromethyl group Chemical group [H]C([H])(Cl)* 0.000 description 1
- 238000004587 chromatography analysis Methods 0.000 description 1
- 238000005352 clarification Methods 0.000 description 1
- 238000003776 cleavage reaction Methods 0.000 description 1
- 230000015271 coagulation Effects 0.000 description 1
- 238000005345 coagulation Methods 0.000 description 1
- 229940126208 compound 22 Drugs 0.000 description 1
- 229940125846 compound 25 Drugs 0.000 description 1
- 230000001143 conditioned effect Effects 0.000 description 1
- 239000000470 constituent Substances 0.000 description 1
- 238000007796 conventional method Methods 0.000 description 1
- 238000001816 cooling Methods 0.000 description 1
- 239000002285 corn oil Substances 0.000 description 1
- 235000005687 corn oil Nutrition 0.000 description 1
- 238000002425 crystallisation Methods 0.000 description 1
- 230000008025 crystallization Effects 0.000 description 1
- 235000018417 cysteine Nutrition 0.000 description 1
- XUJNEKJLAYXESH-UHFFFAOYSA-N cysteine Natural products SCC(N)C(O)=O XUJNEKJLAYXESH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 238000010908 decantation Methods 0.000 description 1
- 230000001419 dependent effect Effects 0.000 description 1
- 238000003795 desorption Methods 0.000 description 1
- 206010012601 diabetes mellitus Diseases 0.000 description 1
- 208000010643 digestive system disease Diseases 0.000 description 1
- 238000010252 digital analysis Methods 0.000 description 1
- 238000010790 dilution Methods 0.000 description 1
- 239000012895 dilution Substances 0.000 description 1
- 230000008034 disappearance Effects 0.000 description 1
- 239000002270 dispersing agent Substances 0.000 description 1
- 239000002552 dosage form Substances 0.000 description 1
- 229940079593 drug Drugs 0.000 description 1
- 239000012156 elution solvent Substances 0.000 description 1
- 230000002708 enhancing effect Effects 0.000 description 1
- 239000012055 enteric layer Substances 0.000 description 1
- LVGKNOAMLMIIKO-QXMHVHEDSA-N ethyl oleate Chemical compound CCCCCCCC\C=C/CCCCCCCC(=O)OCC LVGKNOAMLMIIKO-QXMHVHEDSA-N 0.000 description 1
- 229940093471 ethyl oleate Drugs 0.000 description 1
- 239000000945 filler Substances 0.000 description 1
- 238000013100 final test Methods 0.000 description 1
- 239000000796 flavoring agent Substances 0.000 description 1
- 238000011010 flushing procedure Methods 0.000 description 1
- 235000013305 food Nutrition 0.000 description 1
- 125000000524 functional group Chemical group 0.000 description 1
- 108010074605 gamma-Globulins Proteins 0.000 description 1
- 235000013922 glutamic acid Nutrition 0.000 description 1
- 239000004220 glutamic acid Substances 0.000 description 1
- 125000003630 glycyl group Chemical group [H]N([H])C([H])([H])C(*)=O 0.000 description 1
- 239000008187 granular material Substances 0.000 description 1
- 230000005484 gravity Effects 0.000 description 1
- 239000001307 helium Substances 0.000 description 1
- 229910052734 helium Inorganic materials 0.000 description 1
- SWQJXJOGLNCZEY-UHFFFAOYSA-N helium atom Chemical compound [He] SWQJXJOGLNCZEY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- HNDVDQJCIGZPNO-UHFFFAOYSA-N histidine Natural products OC(=O)C(N)CC1=CN=CN1 HNDVDQJCIGZPNO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 108091008039 hormone receptors Proteins 0.000 description 1
- 125000004435 hydrogen atom Chemical group [H]* 0.000 description 1
- QAOWNCQODCNURD-UHFFFAOYSA-M hydrogensulfate Chemical compound OS([O-])(=O)=O QAOWNCQODCNURD-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- 230000007062 hydrolysis Effects 0.000 description 1
- 238000006460 hydrolysis reaction Methods 0.000 description 1
- 125000002883 imidazolyl group Chemical group 0.000 description 1
- 238000010348 incorporation Methods 0.000 description 1
- 230000010354 integration Effects 0.000 description 1
- 238000001990 intravenous administration Methods 0.000 description 1
- 150000002500 ions Chemical class 0.000 description 1
- 229910052742 iron Inorganic materials 0.000 description 1
- 230000001678 irradiating effect Effects 0.000 description 1
- 230000001788 irregular Effects 0.000 description 1
- 229960004592 isopropanol Drugs 0.000 description 1
- 210000004731 jugular vein Anatomy 0.000 description 1
- 210000003734 kidney Anatomy 0.000 description 1
- DWKPPFQULDPWHX-VKHMYHEASA-N l-alanyl ester Chemical compound COC(=O)[C@H](C)N DWKPPFQULDPWHX-VKHMYHEASA-N 0.000 description 1
- 229940001447 lactate Drugs 0.000 description 1
- 239000008101 lactose Substances 0.000 description 1
- 229960003136 leucine Drugs 0.000 description 1
- 239000007788 liquid Substances 0.000 description 1
- 239000008297 liquid dosage form Substances 0.000 description 1
- 229910052744 lithium Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000000314 lubricant Substances 0.000 description 1
- 229910052749 magnesium Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000011777 magnesium Chemical class 0.000 description 1
- 235000019359 magnesium stearate Nutrition 0.000 description 1
- 238000001819 mass spectrum Methods 0.000 description 1
- 239000011159 matrix material Substances 0.000 description 1
- 239000002609 medium Substances 0.000 description 1
- 229910052751 metal Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000002184 metal Substances 0.000 description 1
- 229960004452 methionine Drugs 0.000 description 1
- UZKWTJUDCOPSNM-UHFFFAOYSA-N methoxybenzene Substances CCCCOC=C UZKWTJUDCOPSNM-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- SWVMLNPDTIFDDY-SBSPUUFOSA-N methyl (2r)-2-amino-3-phenylpropanoate;hydrochloride Chemical compound Cl.COC(=O)[C@H](N)CC1=CC=CC=C1 SWVMLNPDTIFDDY-SBSPUUFOSA-N 0.000 description 1
- 150000004702 methyl esters Chemical class 0.000 description 1
- 150000007522 mineralic acids Chemical class 0.000 description 1
- 230000021332 multicellular organism growth Effects 0.000 description 1
- 238000006386 neutralization reaction Methods 0.000 description 1
- FEMOMIGRRWSMCU-UHFFFAOYSA-N ninhydrin Chemical compound C1=CC=C2C(=O)C(O)(O)C(=O)C2=C1 FEMOMIGRRWSMCU-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- QJGQUHMNIGDVPM-UHFFFAOYSA-N nitrogen group Chemical group [N] QJGQUHMNIGDVPM-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000012457 nonaqueous media Substances 0.000 description 1
- 239000012038 nucleophile Substances 0.000 description 1
- 239000004006 olive oil Substances 0.000 description 1
- 235000008390 olive oil Nutrition 0.000 description 1
- 230000003287 optical effect Effects 0.000 description 1
- 150000007524 organic acids Chemical class 0.000 description 1
- 150000002895 organic esters Chemical class 0.000 description 1
- 239000003960 organic solvent Substances 0.000 description 1
- 238000007911 parenteral administration Methods 0.000 description 1
- 239000008188 pellet Substances 0.000 description 1
- 239000002304 perfume Substances 0.000 description 1
- 229960005190 phenylalanine Drugs 0.000 description 1
- 230000001817 pituitary effect Effects 0.000 description 1
- 210000003635 pituitary gland Anatomy 0.000 description 1
- 229920001223 polyethylene glycol Polymers 0.000 description 1
- 239000002952 polymeric resin Substances 0.000 description 1
- 229910052700 potassium Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000011591 potassium Chemical class 0.000 description 1
- 244000144977 poultry Species 0.000 description 1
- 239000000843 powder Substances 0.000 description 1
- 239000003755 preservative agent Substances 0.000 description 1
- 150000003141 primary amines Chemical class 0.000 description 1
- 125000002924 primary amino group Chemical group [H]N([H])* 0.000 description 1
- 229960002429 proline Drugs 0.000 description 1
- 235000018102 proteins Nutrition 0.000 description 1
- 102000004169 proteins and genes Human genes 0.000 description 1
- 108090000623 proteins and genes Proteins 0.000 description 1
- 238000000425 proton nuclear magnetic resonance spectrum Methods 0.000 description 1
- 108020003175 receptors Proteins 0.000 description 1
- 238000001953 recrystallisation Methods 0.000 description 1
- 238000005057 refrigeration Methods 0.000 description 1
- 238000011160 research Methods 0.000 description 1
- 229940043230 sarcosine Drugs 0.000 description 1
- 239000012047 saturated solution Substances 0.000 description 1
- 230000007017 scission Effects 0.000 description 1
- 150000003335 secondary amines Chemical class 0.000 description 1
- 229960001153 serine Drugs 0.000 description 1
- 229910052708 sodium Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000011780 sodium chloride Substances 0.000 description 1
- 238000010532 solid phase synthesis reaction Methods 0.000 description 1
- 239000006104 solid solution Substances 0.000 description 1
- 238000001228 spectrum Methods 0.000 description 1
- 238000012453 sprague-dawley rat model Methods 0.000 description 1
- 239000008107 starch Substances 0.000 description 1
- 235000019698 starch Nutrition 0.000 description 1
- 238000007619 statistical method Methods 0.000 description 1
- 239000003206 sterilizing agent Substances 0.000 description 1
- 239000005720 sucrose Substances 0.000 description 1
- 229910021653 sulphate ion Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000000375 suspending agent Substances 0.000 description 1
- 239000003765 sweetening agent Substances 0.000 description 1
- 229920003002 synthetic resin Polymers 0.000 description 1
- 239000006188 syrup Substances 0.000 description 1
- 235000020357 syrup Nutrition 0.000 description 1
- 125000005931 tert-butyloxycarbonyl group Chemical group [H]C([H])([H])C(OC(*)=O)(C([H])([H])[H])C([H])([H])[H] 0.000 description 1
- WROMPOXWARCANT-UHFFFAOYSA-N tfa trifluoroacetic acid Chemical compound OC(=O)C(F)(F)F.OC(=O)C(F)(F)F WROMPOXWARCANT-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000001225 therapeutic effect Effects 0.000 description 1
- 229960002898 threonine Drugs 0.000 description 1
- 230000005945 translocation Effects 0.000 description 1
- OUYCCCASQSFEME-UHFFFAOYSA-N tyrosine Natural products OC(=O)C(N)CC1=CC=C(O)C=C1 OUYCCCASQSFEME-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229960004295 valine Drugs 0.000 description 1
- 235000015112 vegetable and seed oil Nutrition 0.000 description 1
- 239000008158 vegetable oil Substances 0.000 description 1
- 238000005303 weighing Methods 0.000 description 1
- 238000009736 wetting Methods 0.000 description 1
- 210000002268 wool Anatomy 0.000 description 1
- 229910052725 zinc Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000011701 zinc Substances 0.000 description 1
Classifications
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K14/00—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof
- C07K14/435—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from animals; from humans
- C07K14/575—Hormones
- C07K14/60—Growth hormone-releasing factor [GH-RF], i.e. somatoliberin
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P5/00—Drugs for disorders of the endocrine system
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K38/00—Medicinal preparations containing peptides
Landscapes
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Endocrinology (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Biochemistry (AREA)
- Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
- Gastroenterology & Hepatology (AREA)
- Genetics & Genomics (AREA)
- Zoology (AREA)
- Molecular Biology (AREA)
- Proteomics, Peptides & Aminoacids (AREA)
- Toxicology (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
- Diabetes (AREA)
- Biophysics (AREA)
- General Chemical & Material Sciences (AREA)
- Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
- Pharmacology & Pharmacy (AREA)
- Animal Behavior & Ethology (AREA)
- Public Health (AREA)
- Veterinary Medicine (AREA)
- Medicines That Contain Protein Lipid Enzymes And Other Medicines (AREA)
- Peptides Or Proteins (AREA)
- Slide Fasteners, Snap Fasteners, And Hook Fasteners (AREA)
- Stringed Musical Instruments (AREA)
- Sampling And Sample Adjustment (AREA)
Description
Prezenta invenție se referă la o nouă peptidă, care stimulează producerea hormonului de creștere.
Se știe că mărirea cantităților hormonului de creștere (GH) la mamifere, prin administrarea compușilor care produc GH poate conduce la o sporire a greutății corpului și la o sporire a producției de lapte dacă, prin administrare se realizează cantități de GH suficient de ridicate. în plus, este cunoscut că mărirea cantităților hormonului de creștere la mamifere poate fi realizată prin-aplicarea de agenți cunoscuți de producere a hormonului creșterii, cum sunt hormonii care produc hormonul creșterii pe cale naturală. Mărirea cantităților hormonului creșterii la mamifere poate fi, de asemenea, realizată prin aplicarea peptidelor care produc hormonul creșterii, din care unele au fost descrise anterior, de exemplu, în Brevetele US 4223019, US 4223020, US 4223021, US 4224316, US 4226857, US 4228155, US 4228156, US 4228157, US 4228158, US 4410512, US 4410513, US 4411890 și US 4839344.
Ca anticorpi pentru inhibitorul de producere a hormonului creșterii, endogenic, somatostatina (SRIF) a fost, de asemenea, folosită pentru a produce cantități de GH ridicate. în acest ultim exemplu, cantitățile hormonului de creștere sunt mărite prin îndepărtarea inhibitorului de producere a GH, endogenic [SRIF], înainte ca să atingă glanda pituitară, când acesta inhibă producerea de GH.
Fiecare din aceste metode pentru mărirea cantității hormonului de creștere implică materiale care necesită costuri ridicate pentru sintetizare și/sau izolare, cu o puritate suficientă pentru administrare la un animal de probă. Sunt de dorit peptide relativ simple, cu catenă scurtă, care au însușirea de a stimula producerea hormonului creșterii, deoarece acestea trebuie să fie preparate ieftin și ușor, să fie ușor de modificat chimic și/sau fizic și tot atât de ușor de purificat și formulat și să poată fi ușor transportate.
Problema pe care o rezolvă invenția este găsirea unor noi peptide cu catenă scurtă, care să stimuleze producerea și mărirea cantităților de hormon de creștere în sângele animalelor. De asemenea, posibilitatea de a folosi astfel de peptide pentru a promova producerea și mărirea cantităților de hormon de creștere în sângele animalelor.
Peptida, conform invenției, înlătură dezavanatajele menționate prin aceea că are formula:
A1-A2-A3-T rp-A5-A6-Z în care:
At este His, 3(NMe)His, His-AI,. Ala, Tyr, Aq-Hîs sau Ao-SfNMeJHis, unde Ao este un L-aminoacid obținut pe cale naturală, Met(D), DOPA, Abu, sau peptide cu formula L-Aq în care L este H, DOPA, Lys, Phe, Tyr, Cys, Tyr-DALa-Phe-Gly, Tyr□ALa-Gly-Phe, Tyr-Ala-Gly-Thr sau TyrDALa-Phe-Sar;
A2 este DpNal;
A3 este Ala, Gly sau Ser;
A5 este DPhe, D/L (Me)Phe sau (NMe)DPhe;
Αθ este B-G sau G în care B este un Laminoacid obținut pe cale naturală, dipeptide ale oricăror aminoacizi sunt obținuți pe cale naturală sau H2N(CH2)nC02H în care n = 2-12 și G este Arg, iLys, Lys sau Orn;
Z este gruparea de la C terminal al peptidei sau aminoacidului(zii) de la C terminal plus o grupare terminală și Z este -C0NR1R2, -CH^R1, -Gly-Z', -Met-Z', -Lys-Z', -Cys-Z' -Gly-Tyr-Z' sau -Ala-Tyr-Z', în care Z' este -C0NR1R2, -COOR1 sau CH20R1 sau -CH2OR1 în care R1 este H, o grupare alchil având 1 până la 6 atomi de carbon, o grupare cicloalchil având 3 până la 8 atomi de carbon, o grupare alchenil având 2 până la 8 atomi de carbon sau o grupare arii având 6 până la 12 atomi de carbon; R2 este definit ca R1 și poate fi același sau diferit; în care abrevierile restului de aminoacid sunt în concordanță cu cele recomandate de Comisia IUPAC-IUS de nomenclatură biochimică sau cele convențional folosite în domeniu, când nu se specifică altfel, aminoacidul este de forma L, când cele
RO 111370 Bl trei litere ale abrevierii aminoacidului sunt precedate de D/L, aminoacidul este în configurații D și L;
D0PA=3,4-dihidroxifenilalanină, Met(D)= metioninsulfoxid, Abu=-acid aminobutiric, iLys=Ne-izopropil-L-lizină, 4-Abu=acid 4 aminobutiric, Orn=L-ornitină, DpNal=pnaftil-D-alanină, Sar=sarcozină, (Me)=metil, (NMe)=N-metil și sărurile acestora organice sau anorganice acceptabile farmaceutic.
Peptidă, conform invenției, se utilizează sub formă de compoziție farmaceutică împreună cu un purtător sau un diluant, pentru stimularea eliberării hormonului de creștere și creșterea nivelului acestuia la un animal mamifer și sub formă de combinație sinergetică împreună cu un compus care acționează ca un antagonist față de receptorul hormonului care eliberează hormonul creșterii sau inhibă eliberarea somatostatinei.
De asemeni, ea poate fi utilizată sub formă de compoziție farmaceutică împreună cu un al doilea compus care acționează ca un antagonist față de receptorul hormonului care eliberează hormonul creșterii sau inhibă eliberarea stomatostatinei sau la producerea unui medicament pentru stimularea eliberării hormonului creșterii în sânge și ridicarea nivelului acestuia.
Conform invenției, s-au descoperit peptide noi care stimulează producerea hormonului creșterii la animale. Aceste peptide au formula A^A^Ag-Trp-Ag-Ag-Zîn care: N este His, 3(NMe) His, Aq-Hîs, Ao-3(NMe)His, Ala, Tyr sau His-Ala, în care Aq este un L-aminoacid obținut pe cale naturală, Met(O), DOPA, Abu sau peptide cu formula L-Aq, în care L este H, DOPA, Lys, Phe, Tyr, Cys, Tyr-DAIa-Phe, Gly, Tyr-DAIa-Gly-Phe, Tyr-Ala-Gly-Thr sau Tyr-DAIa-Phe-Sar, preferabil Aq este un aminoacid obținut pe care naturală și în special, Aq este Ala, Lys sau Glu; A2 este DpNal sau DPhe; A3 este Ala, Gly sau Ser; A5 este DPhe, D/Lp(Me)Phe sau (NMe)DPhe; Ag este B-G sau G, în care B este oricare aminoacid obținut pe cale naturală, dipeptide ale oricăror aminoacizi obținuți pe cale naturală sau
H2N-(CH2]n-C02H (în care n = 2-12] și G este Arg, iLys sau Orn; Z este o grupare terminală a atomului de carbon; CONR1R2, -COOR1 sau -CH2OR1 (în care R1 este H, o grupare alchil având 1 până la 6 atomi de carbon, o grupare cicloalchil având 3 până la 8 atomi de carbon, o grupare alchenil având 2 până la 8 atomi de carbon sau o grupare arii având 6 până la 12 atomi de carbon și R2 este definit ca R1 și poate fi același sau diferit), Gly-Z', -Met-Z', -Lys-Z', -Cys-Z', -Gly-Tyr-Z' sau -Ala-Tyr-Z', în care Z' este -CONR1R2, COOR1 sau -CH20R1 (în care R1 și R2 sunt definiți mai sus) și sărurile acestora, organice sau anorganice, acceptabile farmaceutic.
Preferabil, peptidă are formula: His-A2-Ala-T rp-DPhe-Lys-NH2, AQ-His-A2-Ala-Trp-DPhe-Lys-NH2(de exemplu,
Ala-H is-A2-Ala-T rp-DPh e-Lys-NH2) sau
Ala-A2-Ala-Trp-DPhe-Lys-NH2. încă mult mai preferabil A2 este DpNal. Astfel de peptide pot fi folosite pentru stimularea producerii și măririi cantităților de hormon de creștere la animale, preferabil la oameni, prin administrarea unei cantități eficiente de peptidă.
Prezenta invenție se bazează pe descoperirea unor peptide cu catenă scurtă care stimulează producerea și mărirea cantităților de hormon de creștere în sângele animalelor. Peptidele, conform prezentei invenții, sunt definite prin urmăroarea formulă generală:
A-j-Ag-Ag-Trp-Ag-Ag-Z, în care A1f A2, A3, A5, Ab și Z sunt definite mai jos. Αή este His, 3(NMe)His (Tn care ciclul de imidazol este metilatîn poziția 3), His-Ala, Aq-Hîs, Ala, Tyr sau Ao-3(NMe)His 1 ;
Aq este oricare L-aminoacid obținui. r cale naturală, Met(O), DOPA, Abu sau peptide cu formula L-Aq, în care L este H, DOPA, Lys, Phe, Tyr, Cys, Tyr-DAIa-PheGly, Tyr-DAIa-Gly-Phe, Tyr-Ala-Gly-Thr sau Thr-DAIa-Phe-Sar. Preferabil, A., este His, Ala, His-Ala, Aq-Hîs sau Ala. Cel mai preferabil, A, este His sau Aq-Hîs. Aq este preferabil oricare L-aminoacid obținut pe cale naturală, mult mai
RO 111370 Bl preferabil Aq este Ala, Lys sau Glu. însă cel mai preferabil Aq este Ala.
A2 este DpNal sau DPhe. A2 este preferabil DpNal.
A3 este Ala, Gly sau Ser. A3 este preferabil Ala.
A5 este DPhe D/Lp (Me)Phe sau (NMe)DPhe. Preferabil, A5 e$fe DPhe.
A6 este B-G, în care B este oricare L-aminoacid obținut pe cale naturală, dipeptide ai oricăror Laminoacizi, obținuți pe cale naturală (astfel cum sunt Ala-Lys, Ala-Ala, Ala-Leu) sau H2N(CH2)C02H, în care n=2-1 2 și G este Arg, iLys, Lys sau Orn. B este preferabil oricare L-aminoacid obținut pe cale naturală sau H2N(CH2)nCO2H, în care /7=4-8. însă cel mai preferabil A6 este G, Ala-Lys sau Ala-Ala-Lys. Chiar cel mai preferabil, A6 este G. Mult mai preferabil, Αθ este Lys.
Z reprezintă gruparea terminală a ultimului atom de carbon al polipeptidei sau gruparea de aminoacid (-acizi) terminală de la ultimul atom de carbon, în care Z este -C0NR1R2, -COOR1 sau CH20R1, în care R1 este H, o grupare alchil având 1 până la 6 atomi de carbon o grupare cicloalchil având 3 până la 8 atomi de carbon, o grupare alchenil având 2 până la 8 atomi de carbon, sau o grupare arii având 6 până la 12 atomi de carbon. R2 este definit ca R1 și poate fi același sau diferit. Preferabil, R1 etse H sau o grupare alchil având 1 până la 6 atomi de carbon. Z poate fi, de asemenea, -Gly-Z', -Met-Z', -Lys-Z', -CysZ', -Gly-Tyr-Z' sau -Ala-Tyr-Z' este CONR1R2, -COOR1 sau -CH20R1 în care R1 și R2 sunt definiți mai sus. Preferabil, Z este -C0NR1R2, 42OOR1 sau -CHaOR1.
Și sărurile de adiție, organice sau anorganice, acceptabile farmaceutic ale peptidei menționate, fac obiectul ivenției.
Abrevierile radicalilor de aminoacizi folosite, sunt în concordanță cu nomenclatura standard a peptidelor:
Gly = Glicină
Tyr = L-Tirozină lle = L-lzoleucină Glu = Acid L-glutamic Thr = L-Treonină The = L-Fenilalanină
Ala = L-Alanină
Lys = L-Lizină
Asp = Acid L-aspartic
Cys = L-Cisteină
Arg = L-Arginină
Gin = L-Glutamină
Pro = L-Prolină Leu = L-Leucină Met = L-Metionină Ser = L-Serină Asn = L-Asparagină His = L-Histidină Trp = L-Triptofan Val = L-Valină D0PA=3,4-Dihidroxifenilalanină Met(O)=Sulfoxid de metionină Abu = Acid a-aminobutiric iLys = Ne-izopropil-L-lizină 4-Abu = Acid 4-aminobutiric Orn = L-Ornitină DpNal = β-Naftil-D-alanină Sar = Sarcozină Abrevierile celor trei litere de aminoacid precedate de D indică configurația D a restului de aminoacid și abrevierile precedente de D/L indică un amestec de configurații D- și L- ale aminoacidului desemnat. în scopul dezvăluirii invenției, glicina este considerată inclusă în termenul L-aminoacizi obținuți de cale naturală.
Compușii preferați care produc hormonul creșterii folosiți în prezenta invenție sunt:
A^Ag-Ala-Trp-DPhe-Ag-Z, ca de pildă;
Ag-His-A^AIa-T rp-DPhe-A6-Z, His-Ala-A2-Ala-T rp-DPhe-A6-Z, Ala-A2-Ala-Trp-DPhe-A6-Z și His-A2-Ala-Trp-DPhe-A6-Z și Sărurile acestora de adiție, organice sau anorganice. A2 este de preferință DpNal. încă mai preferabili sunt:
Ao-His-DPNal-Ala-Trp-DPhe-Lys-NHg, în special,
Ala-His-DpNal-Ala-Trp-DPhe-LysNH2) și
His-DpNaLAIa-Trp-DPhe-Lys-NH2 ș<
sărurile de adiție, organice și anorganice ale oricăreia din polipeptidele de mai sus.
peptidele cu formula:
His-DpNal-Ala-Trp-DPhe-Lys-NH2 si
Ao-His-DpNaLAIa-Trp-FPhe-Lys-NH2,
RO 111370 Bl cum este:
Ala-His-DpNal-Ala-DPhe-Lys-NH2), peptide ca Ao-His-DPhe-Ala-Trp-Dphe-LysNH2 cum este;
Ala-His-DPhe-Ala-Trp-DPhe-Lys-NH2 și sărurile acestora de adiție, organice sau anorganice sunt cele mai preferate.
Acești compuși prezintă un nivel înalt de putere de a stimula creșterea, in serum, a cantităților de hormon de creștere.
Compușii, conform invenției, pot fi folosiți pentru a spori cantitățile GH din sânge, la animale; pentru a spori producția de lapte la vaci; pentru a spori greutatea corpului la mamifere (de exemplu, oameni, ovine, bovine și porcine) ca și la pește, păsări de curte, alte vertebrate și crustacee și pentru a crește producția de lână și/sau blană la mamifere. Creșterea corpului, în greutate, este dependentă de sexul și vârsta speciilor de animale, cantitatea și identitatea compusului ce produce hormonul creșterii, care este administrat, calea de administrare și altele.
Compușii noi peptidici, conform prezentei invenții, pot fi sintetizați prin metode uzuale ale chimiei peptidelor în fază solidă sau în soluție sau prin metode clasice, cunoscute în domeniu. Sinteza în fază solidă este începută de la atomul de carbon terminal. Un compus inițial corespunzător poate fi preparat, de exemplu, prin atașarea a/fa-aminoacidului protejat, necesar, la o rășină clorometilată, o hidroximetil-rășină, o benzhidrilamină (BHA)-rășină sau o rășină p-metilbenzhidrilamină (p-Me-BHA). O astfel de rășină clorometilată este comercializată sub denumirea de BIOBEADS SX1 de către Bio Rad Laboratories, Richmond, California. Prepararea rășinei hidroximetil este descrisă de Bodansky ș.a., Chem. Ind. (London) 38, 1597 (1966). Rășina BHA a fost descrisă de Pietta și Marshall, Chem. Comm., 650 (1970) și este comercializată de Peninsula Laboratories, Inc., Belmont, California.
După atașarea inițială, grupa alfaamino protejată poate fi îndepărtată cu reactivi acizi, la alegere, incluzând acidul trifluoroacetic (TFA) sau acidul clorhidric (HCI), sub formă de soluții în solvenți organici, la temperatura camerei. După îndepărtarea grupelor a/fa-amino protectoare, aminoacizii protejați care rămân pot fi cuplați, în etape, în ordinea dorită. Fiecare aminoacid protejat poate fi, în general, reactivat până la 3 ori, folosind un activator de grupare carboxil corespunzător cum este diciclohexilcarbodiimida (DCC) sau diizopropilcarbodiimida (DIC) în soluție, de exemplu, în clorură de metilen (CH2CI2) sau dimetilformamidă (DMF) și amestecurile acestora.
După ce secvența de aminoin'-id dorită s-a completat, peptida dorita poate fi separată (clivată) de suportul de rășină prin tratarea cu un reactiv cum este acidul fluorhidric (HF), care nu numai că separă peptida de rășină, dar, de asemenea, clivează grupările protectoare de la marginea catenei, cel mai comun folosite. Când se folosește o clorometilrășină sau o hidroximetilrășină, tratarea cu HF duce la formarea unei peptide-acile liberă. Când se folosește o rășină BHA sau p-Me-BHA, tratarea cu HF duce direct la obținerea de peptide-amidice libere.
Procedeul în fază solidă, prezentat mai sus, este bine cunoscut în domeniu și a fost descris de Stewart și Young, Solid Phase Peptide Synthesis, Second Edn. (Pierce Chemical Co., Rockford, IL, 1984).
Unele metode în soluție can u folosite pentru sinteza părților de din prezenta invenție sunt cunoscute din Bodansky și Peptide Synthesis, 2nd Edition, john Wiley & Sons, New York, N.Y. 1976.
Este cunoscut că peptidele se pot sintetiza, de preferință, printr-o metodă în fază de soluție care implică reacția de condensare a cel puțin două fragmente de peptidă.
Această metodă cuprinde condensarea unui fragment de peptidă XArY cu un fragment de peptidă U-V-W, în care toate părțile laterale de. aminoacid ale catenei, cu excepția lui A1t sum neutre sau protejate și în care X este
RO 111370 Bl
Prot. sau Prot-Αο, Prot. fiind o grupare de protecție a atomului de N terminal; Y este A2-Q, Ala-A2-Q, A2-A3-Q, Ala-A2-A3-Q, A2-A3-A4-Q, Ala-A2-A3-A4-Q, Ala-Q sau -Q, în care atunci când Y este Q, U este JA2-A3-A4 sau J-Ala-A2-A3-A4. Când Y este Ala-Q, U este J-A2-A3-A4. Când Y este A2Q sau Ala-A2-Q, U este J-A3-A4. Când Y este A2-A3-Q sau Ala-A2-A3-Q, U este J-A4. Când Y este A2-A3-A4-Q sau Ala-A2-A3-A4Q, U este J. V este A5 sau Z. Când V este A5, W este A6-Z sau Z. Când V este Z, W nu este prezent. Av A5, A6 și Z au fost definiți mai sus. în situația prezentă A2 este DpNal și A4 este Trp.
Q este gruparea carboxi terminală a unui fragment de peptidă și este OR3 sau -M, în care M este o porțiune capabilă a fi deplasată de un nucleofil care conține azot și R3 este H, o grupare alchil conținând 1 până la 10 atomi de carbon, o grupare arii având 6 până la 12 atomi de carbon sau o grupare arilalchil având 7 până la 12 atomi de carbon; J reprezintă partea terminală a grupării amino a fragmentului indicat și este H sau o grupare protectoare, care nu împiedică reacția de cuplare, de exemplu, benzii.
Apoi, se îndepărtează grupările de protecție. Alternativ, se poate folosi peptidă protejată, astfel formată în condensări u Iterioare pentru a prepara o peptidă cu lanț mai lung.
Compușii din această invenție pot fi administrați pe cale orală, parenterală (intramusculară (i.m.J, intraperitoneală (i.p.), intravenoasă (i.v.) sau subcutanată (s.c.) sub formă de injecții, nazală, vaginală, rectală, sau sublinguală și pot fi condiționați sub formă de doze corespunzătoare fiecărei căi de administrare. Este preferată administrarea parenterală.
Formele de doze solide pentru administrarea orală includ capsule, tablete, pilule, pulberi și granule. în asemenea forme de doze solide compusul activ este amestecat cu un material de suport inert cum este sucroză, lactoză sau amidon. Asemenea forme pot, de asemenea, cuprinde, cum este normal în practică, substanțe adiționale altele decât diluanți inerți, de exemplu agenți, de lubrifiere cum este stearatul de magneziu. în cazul capsulelor, tabletelor și pilulelor, formele de doză pot de asemenea cuprinde agenți de tamponare. Tabletele și pilulele pot fi în plus preparate cu straturi enterice.
Formele de doze lichide pentru administrarea orală includ emulsii, soluții, suspensii, siropuri, elixiruri care conțin diluanți inerți, utilizabili în domeniu, cum este apa. Pe lângă asemenea diluanți inerți compozițiile pot, de asemenea, include adjuvanți cum sunt agenții de umezire, agenții de emulsifiere și de suspendare și agenții de îndulcire, aromatizare și parfumare.
Compozițiile, conform acestei invenții, pentru administrare parentală includ soluții sterile apoase sau neapoase, suspensii sau emulsii. Ca exemple de solvenți sau vehiculi neapoși sunt propilenglicolul, polietilenglicolul, uleiuri vegetale cum sunt uleiul de măsline și uleiul de porumb, gelatina și esteri organici injectabili cum este oleatul de etil. Astfel de doze pot, de asemenea, conține adjuvanți cum sunt agenții de conservare, umezire, emulsifiere și dispersare. Aceștia trebuie să fie sterilizați, de exemplu, prin filtrare printrun filtru ce reține bacteriile, prin încorporarea agenților sterilizând în compoziții, prin iradierea compozițiilor sau prin încălzirea compozițiilor . Acestea pot fi, de asemenea, produse într-un mediu apos steril sau într-un alt mediu injectabil steril, imediat înainte de folosire.
Peptidele, conform prezentei invenții, sunt, de asemenea, utilizabile când se administrează în combinație cu hormon care produce hormonul creșterii (de exemplu, hormon care produce hormonul creșterii pe cale naturală, analogi și echivalenți funcționali ai acestora) la fel și în combinație cu alți compuși care stimulează producerea hormonului creșterii, de exemplu, peptide care produc hormonul creșterii (conform Brevet US 4880778). Astfel de combinații reprezintă un mijloc special, preferat de administrare a peptidelor
RO 111370 Bl care produc hormonul creșterii, din prezenta invenție, deoarece combinația stimulează producerea unei mai mari cantități de hormon de creștere decât este obținută prin însumarea reacțiilor individuale ale fiecărui component al combinației, adică combinația prezintă un efect sinergie raportat la componentul individual. în calitate de compuși sinergetici sunt preferați compușii care acționează ca antagoniști față de hormonul receptor, care produce ho rmonul creșterii sau inhibă efectul somatostatinei. Sinergismul poate fi binar, adică compusul prezent și unul din compușii sinergici sau include mai mulți compuși sinergici.
Cantitatea de peptide sau de combinații de polipeptide, conform prezentei invenții, care se administrează, variază, în funcție de numeroși factori, de exemplu, animalul specific tratat, vârsta și sexul lui, efectul terapeutic dorit, calea de administrare și natura peptidei sau combinațiile ei sunt folosite. în toate cazurile, este folosită, totuși, o doză efectivă pentru a stimula producerea și mărirea cantității de hormon de creștere în sângele animalului receptor. Uzual, această doză este între 0,1 pg și 10 pg de peptidă totală per kg de greutate corporală. Cantitatea preferată poate fi ușor determinată empiric de o persoană calificată, bazându-se pe prezenta descriere.
De exemplu, la oameni, când modul de administrare este i.v. cantitatea de doză preferată este cuprinsă în intervalul de la 0,1 pg la 10 pg de peptidă totală per kg de greutate corporală, de preferință, în jur de 0,5 pg până la 5 pg de peptidă totală per kg de greutate corporală și încă mai de preferat, în jur de 0,7 pg până la 3,0 pg per kg de grutate corporală. Când se folosesc combinații de peptide care produc hormonul creșterii, se aplică cantități mai mici din peptidă descrisă. De exemplu, combinând peptidă descrisă aici cu, de exemplu, un compus sinergetic din grupa I din Brevetul US 4880778 cum este GHRH, un interval preferat este în jur de 0,1 pg la circa 5 pg din compusul descris aici (de exemplu, Ala-His-DpNal-Ala-Trp-DPhe-A6-Z, Ala-HisDPhe-Ala-Trp-DPhe-Ae-Z sau His-DpNalAla-Trp-DPhe-A6-Z) per kg greutate corporală și în jur de 0,5 pg până la aproape 15,0 pg de compus sinergetic (de exemplu, GHRH) și mai preferabil, între circa 0,1 pg și circa 3 pg de compus sinergetic per kg greutate corporală.
Când modul de administrare este oral, sunt necesare cantități mai mari. De exemplu, pentru administrare orală la oameni, nivelul dozei caracteristice este în jur de 30 pg până la aproape 600 pg de peptidă pe kg greutate corporală preferabil, în jur de 100 pg până la 350 pg de pepti dă totală per kg de greutate corporală, și chiar mai preferabil în jur de 200 pg până la 300 pg de peptidă totală per kg greutate corporală. La vaci este necesară cam aceeași cantitate de doză ca la oameni, în timp ce la șobolani sunt necesare doze mai mari. Cantitatea exactă poate fi determinată empiric pe baza prezentei descrieri.
în general, așa cum s-a amintit mai sus, administrarea combinațiilor' de peptide care produc hormonul creșterii va permite să fie folosite pentru doze mai mici de compuși individuali, care produc hormonul creșterii în raport cu cantitățile de doză necesare pentru compușii individuali, care produc hormonul creșterii, cu scopul de a obținf răspuns similar, datorat efectului LjI l LLjI getic al combinației.
Sunt, de asemenea, incluse în prezenta invenție peptidele sub formă de compoziție farmaceutică împreună cu un al doilea compus care acționează ca un antagonist față de receptorul hormonului care eliberează hormonul creșterii sau inhibă eliberarea stomatostatinei. Compozițiile cuprind, ca ingredient activ, sărurile organice sau anorganice ale peptidelor descrise mai sus și combinațiile acestora; eventual, în asociere cu un suport, diluant, un strat sau o matrice de eliberare lentă.
Sărurile de adiție, organice sau anorganice ale compușilor care emit hormonul creșterii și combinațiile
RO 111370 Bl acestora cuprinse în prezenta invenție includ săruri ale unor astfel de elemente organice ca acetat, trifluoroacetat, oxalat, valerat, oleat, laurat, benzoat, lactat, tosilat, citrat, maleat, fumarat, succinat, tartrat, naftalat și altele asmenea; și săruri ale unor elemente anorganice ca Grupa I (de exemplu, săruri de metale alcaline), Grupa II (adică săruri de metale alcalino-pământoase) săruri de protamină și de amoniu, zinc, fier și alții cu ioni negativi ca clorură, bromură, sulfat, fosfat și alții la fel ca și sărurile organice citate mai sus.
Sunt preferate sărurile acceptabile farmaceutic când se intenționează administrarea la subiecți umani. Astfel de săruri includ săruri netoxice de metale alcaline, alcalino-pământoase sau de amoniu, folosite în industria farmaceutică, incluzând săruri de sodiu, potasiu, litiu, calciu, magneziu, bariu, amoniu și protamină care se prepară prin metode cunoscute în domeniu. Sunt incluse, de asemenea, sărurile de adiție, acide, netoxice care se prepară, în general, prin reacționarea compușilor din această invenție cu un acid organic sau anorganic corespunzător. Săruri reprezentative includ clorhidrat, bromhidrat, sulfat, bisulfat, acetat, oxalat, valerat, oleat, laurat, borat, benzoat, lactat, fosfat, tosilat, citrat, maleat, fumarat, succinat,tartrat, naftilat și altele asemănătoare.
Peptida, conform prezentei invenții, prezintă următoarele avantaje:
Este ușor de sintetizat, are eficacitate în stimularea măririi in serum a cantității de hormon de creștere și este de dorit pentru producție și utilizare pe scară comercială. în plus ea este avantajoasă având proprietăți fizicochimice care sunt necesare pentru transportul eficient al unor astfel de peptide la o varietate largă de specii de animale, datorită flexibilității pe care o prezintă, datorită diferitelor substituiri la numeroase poziții, prin selectarea naturii polare, neutre sau nepolare a atomilor Nterminal și C-terminal și a porțiunilor centrale astfel, încât să fie compatibilă cu metoda dorită de transport.
Astfel resturile de aminoacid bazice, neutre sau acide care pot fi folosite pentru aminoacizii Av A2, A5 și A6 prezintă, oricare dintre ele un grad înalt de control asupra proprietăților fizicochimice ale peptidei dorite.
Această peptidă prezintă, de asemeni, un nivel mai înalt de putere de stimulare a creșterii, in serum, a cantităților de hormon de creștere decât cele mai multe peptide echivalente cu un rest diferit de aminoacid în poziția A2. Peptidele DpNal sunt preferate pentru înaltul lor nivel de potență.
în continuare, se dau, câteva exemple de realizare și aplicare a peptidei, conform invenției.
Exemplul 1. Sinteza peptidelor care produc hormonul creșterii
Se introduce rășină de clorhidrat de p-metilbenzhidrilamină (pMe-BHA.HCI) într-un vas de reacție pe un sintetizator de peptide, automat, comercial. Rășina este substituită cu amină liberă până la o sarcină de circa 5 mmoli per gram. Compușii sunt preparați prin cuplarea aminoacizilor individuali plecând de la gruparea carboxi terminală a secveței de peptidă, utilizând un agent de activare corespunzător, cum este N,N'diciclohexilcarbodiimida (DCC). Grupările a/fa-amino ale aminoacizilor individuali sunt protejate, de exemplu, ca derivați de t-butiloxicarbonil (t-Boc) și grupările laterale ale catenei, funcționale, reactive sunt protejate așa cum se arată în tabelul 1.
RO 111370 Bl
Tabelul 1
Substanțe | Grupe protectoare pentru catenele laterale utilizabile în sinteza peptidelor în fază solidă |
Arginină | N9-Tosil |
Acid aspartic | O-Benzil |
Cisteină | S-para-Metilbenzil |
Acid glutamic | O-Benzil |
Histidină | Nim-Tesil |
Lizină | NE-2,4-Diclorobenziloxicarbonil |
Metionină | S-Sulfoxid |
Serună | O-Benzil |
Treonină | O-Benzil |
Triptofan | N'n-Formil |
Tirozină | 0-2,6-Diclorobenzil |
Anterior încorporării aminoacidului 15 inițial, rășina este agitată de trei ori (circa 1 min fiecare perioadă] cu diclormetan (CHaCI e circa 10 ml/gm de rășină), neutralizată cu trei agitări (fiecare de circa 2 min) de N,N- 20 diizopropiletilamină (DIEA) în diclormetan (10:90; circa 10 ml/gm de rășină) și agitată de trei ori (circa 1 mi fiecare) cu diclormetan (circa 10 ml/mg rășină). Aminoacizii ulteriori, inițial și fiecare din 25 ei, se cuplează la rășină utilizând o anhidridă preformată, simetrică și folosind de circa 3 ori capacitatea totală a rășinii de a fixa un aminoacid protejat corespunzător și de circa 1,5 ori 30 capacitatea totală de fixare a rășinii de DCC, într-o cantitate corespunzătoare de diclormetan. Pentru aminoacizii cu o solubilitate scăzută în diclormetan, se adaugă Ν,Ν-dimetilformamidă pentru a 35 se obține o soluție omogenă. în general, anhidrida simetrică este preparată cu până la 30 min înainte de introducerea în vasul de reacție, la temperatura camerei sau mai jos. Diciclohexilureea care se formează după prepararea anhidridei simetrice este îndepărtată prin filtrare prin gravitație, din soluție, în vasul de reacție. Evoluarea cuplării aminoacidului la rășină este observată obișnuit printr-un test color folosind un reactiv cum este ninhidrina (care reacționează cu aminele primare și secundare). După cuplarea completă a aminoacidului prot rășină (>99%), grupa protectoai amino este îndepărtată prin tratarea cu reactiv(i) acid. Un reactiv obișnui.
constă dintr-o soluție trifluoracetic (TFA) și diclormetan (45:2:53).
de uGkd anizol în
Procedeul complet de încorporare a fiecărui reziduu de aminoacid individual în rășină cstn arătat în tabelul 2.
Tabelul 2
Procedeul de Încorporare a aminoacizilor individuali în rășină
Nr. crt. | Reactiv | Agitări | Timp/Agitare |
1. | Diclormetan | 3 | 1 min |
2. | TFA, Anisol, Diclormetan (45:2:53) | 1 | 2 min |
RO 111370 Bl
Tabelul 2 (continuare)
3. | TFA, Anisol, Diclormetan (45:2:53) | 1 | 20 min |
4. | Diclormetan | 3 | 1 min |
5. | DIEA, Diclormetan (10:90) | 3 | 2 min |
6. | Diclormetan | 3 | 1 min |
7. | Anhidridă simetrică preformantă | 1 | 15-120 min* |
8. | Diclormetan | 3 | 1 min |
9. | izo-propanol | 3 | 1 min |
10. | Diclormetan | 3 | 1 min |
11. | Agent de înregistrare a progresului reacțiilor de cuplare* * | - | - |
12 | Repetarea fazelor 1-12 pentru fiecare aminoacid individual | - | - |
★ Timpul de cuplare depinde de aminoacidul individual * * Gradul de cuplare poate fi în general observat printr-un test color. Dacă cuplarea este incompletă, același aminoacid poate fi recuplat repetând fazele 7-11. Dacă cuplarea este completă, poate fi cuplat următorul aminoacid.
Folosind această metodă pentru sinteza peptidelor s-au obținut noi peptide atașate de rășină ca:
A1-DpNal-A3-Trp-A5-A6-R și A1OPhe-A3-Trp-A5-A6-R (în care A,, A3, A5 și Αθ sunt definiți mai sus și R este o rășină polimerică și grupările funcționale ale aminoacizilor constituenți sunt protejate cu grupări de protecție corespunzătoare așa cum este necesar). Secvențe specifice (sub formă protejată adecvată) care au fost preparate includ:
His-DpNal-Ala-Trp-DPhe-Lys-R, Ala-His-DpNal-Ala-Trp-DPhe-Lys-R, Ala-His-DT rp-Ala-T rp-DPhe-Lys-R, His-Ala-DT rp-Ala-T rp-DPhe-Lys-R, His-DaNal-Ala-T rp-DPhe-Lys-R, His-DAsp-Ala-T rp-DPhe-Lys-R, His-DCys(SMe)-Ala-T rp-DPhe-Lys-R, HisOTrp-Ala-Trp-DPhe-Ala-Lys-R, His-DpNal-Ala-Trp-DPhe-Ala-Lys-R, Ala-His-DpNaFAIa-Trp-DPhe-Ala-LysR.
Try-DArg-Phe-Gly-R, Ala-His-DPhe-Ala-T rp-DPhe-Lys-R, Ala-His-DHis-Ala-Trp-DPhe-Lys-R și Ala-His-DPro-Ala-T rp-DPhe-Lys-R Exemplul 2, (de aplicare a produselor conform invenției)
Producerea de GH in vivo la șobolani
S-au obținut șobolani SpragueDawley, femele imature de la Laboratoarele Charles River (Wilmington, MA). După sosire s-au introdus la 25°C, la un ciclu de lumină, întuneric de 14:10 h. Șobolanii au dispus de apă și hrană ad libitum. Puii au fost lăsați cu mamele lor până la vârsta de 21 zile.
Șobolanii de 26 zile, 6 șobolani per grupă de tratament, s-au anesteziat intraperitoneal cu 50 mg/kg pentobarbital, cu 20 min înaintea tratamentului i.v. cu peptidă. Pentru injectările intravenoase (i.v.) cu peptide sa folosit soluția normală salină cu 0,1% gelatină. Șobolanii anesteziați, cântărind 55-56 g, au fost injectați i.v. cu cantitatea de compuși ce produc hormonul creșterii, indicată în tabelele 3, 4 și 5 . Injectările au fost făcute cu o soluție de 0,2 ml în vena jugulară.
Toate animalele au fost sacrificate, prin ghilotinare, la 10 min după injecția test finală (vezi tabelele 3 și 4). După decapitare s-a colectat sângele din artera principală, pentru determinarea cantităților de GH din sânge. După ce sângele s-a lăsat să se coaguleze, s-a centrifugat și ș-a separat serul de coagul. Serul s-a congelat până în ziua când s-au luat probe pentru
RO 111370 Bl determinarea radioimunologică (RIA) a cantităților de hormon de creștere, conform cu următorul procedeu, așa cum este expus de către Institutul Național de artrite, diabet și boli digestive 5 și de rinichi (NIADDK).
Reactivii sunt, în general, adăugați în tuburile de analiză RIA de o singură folosire, la temperatura de refrigerare (circa 4°C) în următoarea ordine: 10 (a) tampon, (b) rece (adică neradioactiv) standard sau probă de ser necunoscută, pentru a fi analizată, (c) antigen de hormon de creștere 15 radio-iodat și (d) antiser de hormon de creștere. Adăugarea de reactiv este, în general, efectuată astfel, încât să se ajungă la o diluție finală în tub RIA de 20 circa 1:30.000 (antiser la volumul total de lichid; vokvol).
Reactivii amestecați sunt apoi tipic incubați la temperatura camerei (circa 25°C) aproape 24 h înaintea adăugării 25 unui anticorp secundar (de exemplu ser de gammaglobulină de capră sau iepure) anti-maimuță care se leagă și determină precipitarea antiserului de hormon de creștere complexat.
Conținuturile precipitate din tuburile RIA sunt apoi analizate pentru a determina numărul de impulsuri într-o perioadă specifică de timp, într-un numărător de scintilații gamma. Se definește o curbă standard prin reprezentarea grafică a impulsurilor radioactive în funcție de cantitatea de hormon de creștere (GH).
Cantitățile de GH necunoscute sunt apoi determinate prin referire la curba standard.
Serul GH a fost analizat prin RIA cu reactivi furnizați de către Programul Național de Hormoni și Pituitare.
Cantitățile de ser din tabelele 3,4, 5 și 6 sunt înregistrate în ng/ml în termeni de GH standard de 0,61 unități internaționale/mg (lU/mg). Datele sunt înregistrate cu erori standard medii +/ale aparatului (SEM). Analiza statistică sa efectuat cu testul Student. NS înseamnă că diferența nu a fost statistic semnificativă. în tabelele 3, 4, 5 și 6 rezultatele sunt calculate ca medii de analize cu 6 șobolani.
Tabelul 3
Producerea de GH in vivo (ng/ml) promovată de compușii care produc hormonul creșterii la șobolani anesteziați cu pentobarbital (Animale sacrificate la 10 min după injectarea finală)
Coloana A Compuși care produc GH | Total doză pg | Control GH ng/ml | GH produs de compus în coloana A ng/ml +SEM | Valoarea p |
His-DT rp-Ala-T rp-DPhe-Lys-NH2 | 0,1 | 151±16 | 246± 39 | - |
0,3 | 151+16 | 670± 75 | - | |
1,0 | 151±16 | 1OOO±276 | - | |
3,0 | 151±16 | 2106±216 | - | |
His-DpNal-Ala-Trp-0Phe-Lys-NH2 | 0,1 | 151±16 | 938±255 | <0,02 |
0,3 | 151±16 | 1716±258 | <0,02 J | |
1.0 | 151+16 | 3728±691 | <0,01 | |
3,0 | 151±16 | 3238±273 | <0,01 | |
His-DT rp-Ala-T rp-DPhe-Lys-NH2 | 0,1 | 138±12 | 226± 31 | - |
0.3 | 138±12 | 613± 73 | - |
RO 111370 Bl
22
Tabelul 3 (continuare)
Coloana A Compuși care produc GH | Total doză pg | Control GH ng/ml | GH produs de compus în coloana A ng/ml +SEM | Valoarea p |
1.0 | 138±12 | 1581±228 | - | |
3,0 | 138±12 | 2875+393 | - | |
Ala-His-DTrp-Ala-Trp-DPhe-Lys-NHg | 0,1 | 138+12 | 254± 78 | NS - |
0,3 | 138±12 | 809± 59 | NS - | |
1.0 | 138±12 | 1516±215 | NS - | |
3,0 | 138±12 | 3095+473 | N | |
Ala-His-DpNal-Ala-Trp-DPhe-Lys-NH2 | 0,1 | 138+12 | 1128±309 | <0,02<0,02 |
0,3 | 138±12 | 2479±389 | <0,001 <0,001 | |
1,0 | 138+12 | 3899±514 | <0,001<0,0Q1 | |
3,0 | 138±12 | 4202±369 | <0,05 NS | |
Ala-His-DTrp-Ala-Trp-DPhe-Lys-NH2 | 0,1 | 111±25 | 360± 35 | - |
0,3 | 111+25 | 903±217 | - | |
1.0 | 111+25 | 2957±427 | - | |
3.0 | 111+25 | 3956±483 | - | |
Ala-His-DpNal-Ala-Trp-DPhe-Lys-NH2 | 0,1 | 111±25 | 970± 169 | <0,01 |
0,3 | 111±25 | 2898± 247 | <0,001 | |
1.0 | 111+25 | 3908± 327 | NS |
Tabelul 4 Producerea de GH in vivo (ng/ml) promovată de compușii care produc hormonul creșterii la șobolani anesteziați cu pentobarbital (Animale sacrificate la 10 min după injectarea finală)
Coloana A Compuși care produc GH | Control GH ng/ml | Doză totală pg | GH produs de compus în coloana A ng/ml |
AlaHisDTrpAlaTrpDPheLyaNH2 | 111±25 | 0,3 | 901±21 |
AlaHisDPheAlaTrpDPheLysNH2 | 181±69 | 0.3 | 616±74 |
AlaHisDHisAlaTrpDPheLysNH2 | 117±19 | 0,3 | 268±54 |
AlăHisDPheAlaTrpDPheLysNHp | 117+19 | 0,3 | 262±51 |
RO 111370 Bl
Tabelul 5
Peptidă | Doză totală H9 | Control GH ng/ml | GH produs ng/ml |
His-DAsp-Ala-Trp-DPhe-Lys-NHa | 1,0 | 15O±2O | 154± 63 |
3,0 | 150±20 | 155± 34 | |
10,0 | 15O±2O | 163± 44 | |
30,0 | 150±20 | 224± 62 | |
100,0 | 150+20 | 178± 83 | |
His-DCysfSMeJ-Ala-Trp-DPhe-Lys-NHg | 0,3 | 181±69 | 178± 28 |
1,0 | 181±69 | 193± 28 | |
3,0 | 181±69 | 180± 34 | |
His-DpNal-Ala-Trp-DPhe-Lys-NH2 | 0,1 | 151±16 | 280± 70 |
0,3 | 151±16 | 439±122 | |
1,0 | 151±16 | 1130±179 | |
3,0 | 151±16 | 2319±139 | |
His-DT rp-Ala-T rp-DPhe-Lys-NH2 | 0.1 | 181±69 | 512± 43 |
0,3 | 181±69 | 566±114 | |
1.0 | 181±69 | 1531±303 | |
3,0 | 181±69 | 2349±267 | |
His-DTrp-Ala-Trp-DPhe-Ala-Lys-NH2 | 0.1 | 220±29 | 420±105 |
0,3 | 220+29 | 900+163 | |
1.0 | 220±29 | 1965±366 | |
3.0 | 220±29 | 4553±670 | |
His-DpNal-Ala-Trp-DPhe-Ala-Lys-NH2 | 0.1 | 111±25 | 484± 89 |
0.3 | 1O7±16 | 917±241 | |
1.0 | 107±16 | 1593±359 | |
3.0 | 1O7±16 | 3337±583 | |
His-Ala-DT rp-Ala-T rp-DPhe-Lys-NHa | 0,1 | 111±25 | - |
0,3 | 151±16 | 261+ 32 | |
1.0 | 151±16 | 83O±1O3 | |
3,0 | 151±16 | 2588±4314 |
invenții manifestă activitate în timp ce compușii echivalenți cu o substituție în poziția A2 (de exemplu, cu DAsp,
DCys(SMe), DHis și DPro) nu prezintă o asemenea activitate. Aceste tabele arată de asemenea că His-DpNal-Ala-Trp-DPheTabelele 3, 4, 5 și 6 denotă că, compușii prezentei invenții stimulează producerea și mărirea cantităților de hormon de creștere în sângele șobolanilor la care sunt administrați acești compuși. Peptidele prezentei
RO 111370 Bl
Lys-NHa este mai activ decât compușii având DTrp, DpNal, DAsp și DCys(SMe)în poziția A2. Similar, Ala-His-DpNal-Ala-TrpDPhe-Lys-NH2 este mai activ decât compusul echivalent DTrp. 5
Exemplul 3. (de aplicare a produselor conform invenției)
Administrarea unei combinații de compuși ce produc GH
Procedeul din exemplul 2 s-a repetat, cu excepția că șobolanii nu au fost anesteziați și nu au fost pretratați cu pentobarbital și li s-a administrat o combinație de peptide. Compușii administrați, cantitatea de doză și rezultatele sunt date mai departe în tabelul 6.
Tabelul 6 Producerea de GH in vivo promovată de compușii care produc hormonul creșterii la șobolani anesteziați cu pentobarbital (Animale sacrificate la 10 minute dipă injectarea ginală)
Coloană A Peptidă care produce GH | Doză totală P9 | Ser de control GH ng/ml ±SEM (N=G) | Ser GH care produce GH ng/ml ±SEM (N=G) |
Ala-His-DpNal-Ala-Trp-DPhe-Lys-NHa | □,1 | 337±51 | 610+ 90 |
0,3 | 337±51 | 1140+187 | |
1,0 | 337+51 | 2909±257 | |
3,0 | 337±51 | 3685±436 | |
Ala-DpNal-Ala-Trp-DPhe-Lys-NH2 | 0,3 | 167+46 | 363+ 73 |
1.0 | 167+46 | 1450+294 | |
3,0 | 167+46 | 2072±208 | |
10,0 | 167+46 | 2698+369 | |
Ala-His-DpNal-Ala-Trp-DPhe-Lys-NH2 | 0,3 | 160±51 | 1418±302 |
1.0 | 160+51 | 2201±269 | |
Ala-His-OpNal-Ala-Trp-DPhe-Lys-NHa | 0,3 | 228+23 | 1746±318 |
1,0 | 228+23 | 2610±176 | |
Ala-His-DpNal-Ala-Trp-DPhe-Lys-NH2 | 0,1 | 160+36 | 822±243 |
0,3 | 160+36 | 1549±292 | |
1.0 | 160+36 | 2180±284 |
Tabelul 7 Efectele sinergetice in vivo ale compușilor, conform invenției, cu compuși din Grupa I și/sau Grupa 3 asupra șobolanilor neanestiziați
Compus administrat | Doză (pg) | GH produs (ng/ml) ±SEM |
Control | - | 12+ 3 |
175-18 | 1 | 58± 13 |
175-1 | 3 | 240+ 32 |
Cb | 10 | 204± 50 |
RO 111370 Bl
Tabelul 7 (continuare)
GHRHC | - | - | 3 | 131 ± 50 | ||
—I TJ Q. | - | - | 10 | 79± 29 | ||
175-1 | GHRH | - | 1 + 3 | 2014±224 | ||
175-1 | TP | - | 1 + 10 | 987±204 | ||
175-1 | GHRH | TP | 1+3+10 | 4150±555 | ||
175-1 | GHRH | - | 3 + 3 | 1994±249 | ||
175-1 | TP | - | 3 + 10 | 2149±451 | ||
175-1 | GHRH | TP | 3 + 3+10 | 2922±384 | ||
C | GHRH | - | 10 + 3 | 2525±453 | ||
C | TP | - | 10 + 10 | 1597±387 | ||
C | GHRH | TP | 10 + 3 + 10 | 4344+374 |
Grupele 1 și 3 de compuși sunt 10 descrise amănunțit în Brevetul US 4880778.
a - 175-1 = His-DpNal-Ala-Trp-DPhe-LysNH2 (Compus prezentat în invenție) b - C = His-DTrp-Ala-Trp-DPhe-Lys-NH2 15 (Compus de comparație) c - GHRH = Tyr-Ala-Asp-Ala-lle-PheThr-Asn-Ser-Tyr-Arg-LysVal-Leu-Gly-GIn-Leu-SerAla-Arg-Lys-Leu-Leu-Glu- 20 As p-l le-N lo-Ser-Arg-N H 2 (Compus Grupa 1) d - TP = Tyr-DArg-Phe-Gly-NH2 (Compus Grupa 3)
Tabelul 7 arată că, compusul 25 invenției manifestă o reacție sinergetică atunci când este administrat împreună cu compuși caracteristici din Grupa 1 și/sau Grupa 3. Rezultatele din tabelul 7 prezentate, arată pe de altă parte că, 30 compusul din inveție are o reacție sinergetică mai mică decât aceea obținută cu un compus de comparație (C), care prezenta anterior o reacție sinergetică. .35
Exemplul 4. Reacția de condensare a fragmentelor de peptidă pentru a forma peptidă
Procedee generale
Punctele de topire pot fi 40 determinate folosind un aparat capilar pentru punct de topire Thomas Hoover.
Spectrele infraroșii (IR) pot fi înregistrate pe un spectrofotometru Perkin-Elmer
Model 137 sau Nicolet Model 5DX și 45 raportate în numere de undă (cm1). Spectrele de masă pot fi obținute (MS) folosind un spectrometru de masă VC Analytical Ltd. Model ZAB-IF sub formă de El (impact de electroni), FD (desorbție de suprafață) sau FAB (bombardament cu atomi rapizi). GCMS poate fi obținut folosind un GCMS Finnigan 4023 echipat cu o coloană capilară 30 m DB5 (J&W Scientific) folosind helium ca gaz de transport. Relațiile optice pot fi măsurate folosind un polarimetru Autopol III fabricat la Rudolph Research.
Spectrele 1H RMN pot fi obținute pe un aparat JEOL GX-4OO RMN care lucrează la 400 MHz sau pe un aparat JEOL GX-270 care lucrează la 270 MHz. Aceste aparate sunt capabile de o analiză digitală de rutină de mai puțin de 0,7 Hz. Deplasările chimice sunt exprimate în părți per milion în raport cu 3(trimetilsilil)-tetradeuteropropionat de sodiu intern (TSP).
Cromatografia lichidă de înaltă performanță (HPLC) poate fi efectuată folosind un sistem Hitachi constând dintrun controller cu gradient L-5OOO și o pompă 655A atașată la o coloană semipreparativă Vydae 201TP1010 sau 218TP1010. Ca solvent de eluare pot fi folosite combinații de apă cu 0,2% acid trifluoracetic și metanol. în mod specific, compușii interesați vor fi eluați la o viteză de curgere de 6 ml per minut cu un gradient de creștere a componentului organic la o viteză de aproximativ 1 -2%
RO 111370 Bl per minut. Compușii sunt apoi detectați la lungimi de undă corespunzătoare folosind un detector U.V. LKB 2140 diodic.
Integrările pot fi apoi realizate folosind un program Nelson Analytical software (versiunea 3.6.).
Reacțiile vor fi efectuate într-o atmosferă inertă de azot sau argon atunci când nu se specifică altfel. Tetrahidrofuranul anhidru (THF, calitate U.V.) și dimetilformamida (DMF) pot fi achiziționate de la Jackson și Burdick și folosite direct din sticlă.
A. Prepararea fragmentului de tripeptidă -gHN-Trp-Dphe-LysfBocj-NHg N“benziloxicarbonil-(Net-butoxicarbonil) lizinamidă, 4
La o soluție de 88,24 g (0,544 mol) carbonildiimidazol (CDI,2) și 1500 ml tetrahidrofuran uscat (THF), la 10°C, se adaugă lent 180 g (0,474 mol) N“benziloxicarbonil-(N£-t-butoxicarbonil)lizină (1). în timpul acestei adăugări se observă evoluția de gaz. în timp ce se formează intermediarul Na-benziloxicarbonil-(N£-tbutoxicarboniljlizin-imidazolidă (3) se prepară o soluție de 2000 ml amoniac și THF (NH3 gaz anhidru este trecut prin THF la 5-10°C). După ce s-a considerat că formarea intermediarului 3 este completă (când a încetat evoluția de gaz, aproximativ 2 h), jumătate din soluția care-l conține pe 3 în THF se adaugă la soluția de amoniac. Restul de soluție > I care-l conține pe 3 se adaugă după 30 min. în tot timpul adăugărilor este menținut un curent continuu de amoniac gazos, care continuă încă 45 min. După adăugarea celor două soluții cu conținut de 3, se formează un precipitat alb. Amestecul de reacție se încălzește la temperatura camerei și se agită timp de 15 h.
Solventul este îndepărtat din suspensie in vacuo. Reziduul este suspendat în apă și solidul rezultat se colectează prin filtrare sub vid.
Af-t-butox/carbon/A/Zz/nam/da, 5
O soluție de 181,48 g (0,479 mol) lizinamidă 4 în 1000 ml metanol (MeOH) se adaugă la o suspensie de catalizator de 5 g Pd/C 5% în 250 ml metanol, sub atmosferă de argon. Se barbotează hidrogen prin amestecul de reacție (circa 1 5 min) și amestecul de reacție este apoi agitat sub atmosferă de hidrogen până când analiza HPLC indică că reacția este completă (36 h). Atmosfera de hidrogen este apoi înlocuită cu argon. Soluția de reacție este limpezită prin trecerea printr-un strat de Celite® și solventul este îndepărtat in vacuum, obținându-se un solid.
IV-benziloxicarbonil-D-fenilalanil-fNt-butoxicarbonil)lizinamidâ, 8
Se adaugă lent 1 26,39 g (0,423 mol) Na-benziloxicarbonil-D-fenilalanină, 6, la o soluție de 66,03 g (0,409 mol) CDI, 2, în 500 ml THF, la 10°C. în timpul adăugării se observă evoluția de gaz. Când încetează evoluția gazului, se adaugă 110,76 g (0,452 mol) lizinamidă 5 ca soluție în 500 ml THF. După aproximativ 48 h amestecul este filtrat pentru îndepărtarea solidelor. Filtratul este concentrat în vacuum.
Reziduul rezultat se reia în 500 ml acetat de etil (EtOAc) și apoi se spală în pâlnia de separare cu următoarele:
1. Soluție apoasă de HCI 1N (3 x 500 ml), pH-ul spălării 1 - circa 8; pH-ul spălării următoare este 1;
2. Apă (500 ml);
3. Soluție apoasă, 1/2 saturată de NaaC03 (2 x 500 ml), se filtrează pentru a colecta solidele cristaline formate (8);
4. Apă (3 x 500 ml);
Stratul organic este uscat pe MgSO4. După limpezire, solventul este îndepărtat sub vid. Reziduul rezultat poate fi recristalizat din EtOAc fierbinte pentru a se obține o a doua probă de 8.
D-fenilalanil-[Ne-t-butoxicarboniljlizinamidă, 9
1500 ml soluție metanolică de 120,53 g (0,229 mol) amidă 8 se adaugă la o suspensie de catalizator de 50 g Pd/C 5% în 200 ml metanol. Atmosfera de argon este înlocuită cu hidrogen. Când analiza HPLC indică completarea reacției (circa 4 h), atmosfera de hidrogen este înlocuită cu argon. Soluția de reacție este apoi limpezită prin trecere printr-un strat de
RO 111370 Bl
Celite® și filtratul este adus la reziduu în vid. Acest produs de dipeptidă poate fi folosit direct în prepararea triopeptidei
12.
l\T-benziloxicarbonil-triptofil-D-fenilalanil(IM-t-butoxicarbonil]-lizinamidă, 12 □ soluție de 67,60 g (0,200 mol] N“benziloxicarbonil-triptofan 10 în 500 ml THF și 33,05 g (0,204 mol) CDI 2 se agită la 10°C, până când încetează evoluția de gaz. La amestecul de reacție se adaugă o soluție de 40,8 g (0,103 mol) 9 în circa 200 ml TNF. Soluția rezultată se lasă să reacționeze timp de 15 h, cu încălzire la temperatura camerei. Solidul care se formează este apoi colectat prin filtrare sub vid. Filtratul se aduce la reziduu prin concentrare în vacuum. Solidul și reziduul rezultate sunt recombinate și reluate în EtOAc (4000 ml) cu încălzire ușoară. După răcirea soluției la temperatura camerei, se formează un solid. Solidul este colectat prin fitrare în vacuum. Acest solid este recristalizat din MeOH fierbinte, obținându-se tripeptida purificată 12. Filtratul din EtOAc (de la prima cristalizare) este spălat în pâlnia de separare cu următoarele:
1. Soluție apoasă de HCI 1N (2 x 500 ml);
2. Apă (1 x 500 ml);
3. Soluție apoasă, 1/2 saturată de NaaC03 (2 x 500 ml);
4. Soluție apoasă de NaCl (1 x 500 ml).
Stratul organic este uscat pe MgSC4 și apoi limpezit prin filtrare în vacuum. Solventul filtratului este îndepărtat în vacuum. Reziduul rezultat este reluat apoi în EtOAc obținându-se un solid uscat. Solidul poate fi supus la o recristalizare din MeOH fierbinte pentru a se obține o a doua parte de 12 ca un solid alb.
Triptofil-D-fenilalanil-if-t-butiloxicarbonil)lizinamidâ, 13
1500 ml de soluție metanolică de
64,59 g (0,09 mol) tripeptidă 12 este adăugată la o suspensie de catalizator de g Pd/C 5% și 250 ml MeOH, sub atmosferă de argon. Este adăugat apoi un volum adițional de 2250 ml MeOH.
Atmosfera de argon este înlocuită cu hidrogen pentru a permite desfășurarea reacției (circa 24 h). După completarea reacției, atmosfera de hidrogen este înlocuită cu argon. Soluția este limpezită prin trecere printr-un strat de Celite ® și filtratul este concentrat in vacuum pentru a se obține tripeptida 13 ca un soîid alb.
B. Prepararea fragmentului de tripeptidă -K-His-LfNal-Ala-OMe
Ester metilic de N“benziloxicarbonil-histidil-D-beta-naftilalanină 25.
O soluție de 400 ml EtOAc și 0,62 mol clorhidrat de ester metilic de D-betanaftilalanină 22 s-a spălat cu .400 ml soluție saturată de carbonat de sodiu și cu circa 500 ml soluție apoasă de hidroxid de sodiu 0,8 N. Faza apoasă rezultată este îndepărtată (pH=8,5) și faza organică este în continuare spălată cu 150 ml soluție apoasă 1 /2 saturată de Na2C03 și apoi cu 50 ml apă. Forma de bază liberă a 22 este izolată după concentrarea stratului de acetat de etil în vacuum.
Circa 95 g (0,46 diciclohexilcarbodiimidă DCC se adaugă la o soluție de 143,5 g (0,50 mol) N“benziloxicarbonilhistidină, 19, 0,62 mol N-hidroxisuccinimidă, HONSu, 23, și circa 0,52 mol forma de bază liberă, proaspăt preparată a 22 în circa 3 I DMF, la -5°C (baie gheață-etanol). Soluția de reacție rezultată se lasă sub agitare timp de 24 h, cu încălzire la temperatura camerei. Pentru a observa dacă reacția este completă, trebuie folosită analiza HPLC. Dacă nu este terminată, soluția de reacție se mai răcește la circa -5°C și se mai adaugă o porțiune de circa 0,17 mol diciclohexilcarbodiimidă. Amestecul de reacție este apoi lăsat sub agitare încă alte 24 h, cu încălzire la temperatura camerei. Amestecul este apoi filtrat pentru a îndepărta diciclohexilureea (DCU). Se adaugă la filtrat 1 I apă și soluția rezultată este concentrată in vacuum. Reziduul rezultat se reia în soluție apoasă de HCI 1N (circa 1 I până când faza apoasă ajunge la un ρ τ/ Faza apoasă este apoi extrasă cu două porțiuni a 1 I fiecare de acetat de etil. Straturile de acetat de etil sunt
RO 111370 Bl înlăturate. Apoi, pH-ul fazei apoase este reglat prin adăugare de 5OO ml soluție de hidroxid de sodiu 2N, rece și pelete de hidroxid de sodiu. în timpul neutralizării, soluția este menținută rece prin adăugarea unui litru de acetat de etil. Când pH-ul fazei apoase atinge aproximativ 7, rezultă o precipitare în cantitate mare a unui solid alb sau ulei. Acest precipitat este colectat prin filtrare în vacuum sau decantare și se spală în continuare, succesiv cu soluție 1/2 saturată de carbonat de sodiu (2x1500 ml], apă (6 x 1500 ml) și acetat de etil (3 x 1500 ml). Materialul rezultat este uscat sub vid înaintat până la greutate constantă. Acest material poate fi hidrolizat direct fără o altă purificare.
Peptidă DPhe poate fi preparată folosind clorhidratul de ester metilic al Dfenilalaninei drept compus 22 în loc de clorhidratul esterului metilic al D-betanaftilalninei.
A^-benz/7ox/carbon/Ab/st/b/77-^naft/7D-alanina, 26
192 ml soluție apoasă de hidroxid de sodiu (0,08 g/ml, 0,38 mol) se adaugă la o soluție de circa 0,38 mol dipeptidă 25, 360 ml apă și circa 6 I MeOH. Soluția este amestecată cu agitare, la temperatura camerei până când hidroliză este completă (circa 24 h). Dispariția peptidei inițiale este stabilită prin analiză HPLC. Soluția este concentrată în vacuum la un reziduu care se dizolvă în circa 1 I apă. Stratul apos (pH la circa 10) este apoi extras cu EtOAc (2 x 500 ml) într-o pâlnie de separare. Straturile de acetat de etil sunt îndepărtate. Faza apoasă rezultată este ajustată la un pH de aproximativ 5 cu HCI concentrat, la care punct rezultă o precipitare de solid alb sau ulei. Produsul este colectat și uscat in vacuo.
Ester metilic de l\f-benziloxicarbonil-histidil-D-beta-naftil-alanilalanină, 20
Dipeptidă Ne-benziloxicarbonilhistidil-D-beta-naftilalanină, 26, în cantitate de 0,253 mol este adăugată la o soluție de 0,505 mol HONSu, 23, în
800 ml DMF, sub atmosferă de argon.
La această soluție se adaugă un amestec de 0,303 mol clorhidrat de ester metilic de alanină, 15, 0,303 mol Nmetilmorfolină, 16, și 200 ml DMF. Soluția rezultată se răcește la 10°C și la acest moment se adaugă 0,265 mol diciclohexilcarbodiimidă, 24, în 273 ml clorură de metilen. Reacția este controlată prin HPLC, în timp ce temperatura de reacție este menținută la 10°C, până când reacția este completă. După alte câteva zile (circa 4), dacă reacția nu a progresat la completare, se adaugă la amestecul de reacție o șarjă adițională de 0,080 mol 24 și se lasă sub agitare încă o zi, la 10°C. Reacția este din nou controlată prin analiză HPLC până când este completă (specific circa 5 zile). Solidele care se formează în timpul reacției se colectează prin filtrare în vacuum. Filtratul este apoi concentrat la un reziduu in vacuum. Reziduul rezultat se reia în acetat de etil și se extrage cu soluție 1/2 saturată de Na2C03 (2 x 500 ml). Faza de acetat de etil este uscată pe MgS04. Soluția rezultată este limpezită și apoi concentrată la reziduu in vacuo.
C. Prepararea fragmentului de tetrapeptidă Ala-His-CYNal-Ala-OH
Esterul metilic de Histidil-D-betanaftil-alanil-alaninâ, 30 g de Pd/C 5% se adaugă cu grijă la o soluție de 71 mmol N“benziloxicarboniFhistidil-D-beta-Naftilalanilalanină ester metilic 20 în 500 ml metanol sub o atmosferă de argon. Argonul este barbotat prin amestecul de reacție timp de 15 min și apoi se adaugă 15 ml (0,26 mol) acid acetic. Se barbotează hidrogen prin amestecul rezultat timp de 15 min și apoi amestecul de reacție este lăsat sub
I agitare, la temperatura camerei, sub un balast de hidrogen (1 at). Se folosește apoi analiza HPLC pentru a controla cât de mult și dacă a mai rămas material inițial. Dacă a mai rămas, se barbotează cu grijă argon prin amestecul de reacție (sub suprafață pentru 30 min) și se mai adaugă o nouă porțiune de .2,5 g de paladiu pe carbon 5%. Se reintroduce apoi hidrogen. Se barbotează din nou
RO 111370 Bl argon prin amestecul de reacție și soluția rezultată se limpezește prin filtrare printr-un strat de pământ de diatomic. Pentru a se obține produsul soluția rezultată este concentrată in vacuo. □ porțiune din acest produs este dizolvată sau suspendată în 5OO ml apă. La materialul rezultat s-au adăugat acetat de etil și soluție apoasă saturată de carbonat de sodiu. Izolarea stratului de acetat de etil sau a solidelor care rezultă, duce la obținerea unui material (30) care nu conține acetat.
Ester de Boc-alanină-N-hidroxisuccinimidă, 31
Se adaugă 43 mmol diclohexilcarbodiimidă la o soluție de 43 mmol Boc-alanină și 48 mmol N-hidroxisuccinimidă în 25Q ml clorură de metilen, la temperatura camerei. Soluția rezultată este lăsată sub agitare peste noapte. Amestecul de reacție este apoi filtrat pentru a îndepărta diciclohexilureea și filtratul limpezit este concentrat in vacuo, obținându-se un produs, care este depozitat la -2D°C, sub atmosferă de argon, disponibil folosirii.
Boc-Ala-His-EfNal-Ala-OMe, 32
Esterul de alamină de mai sus în cantitate de 23,9 mmol este adăugat la o soluție de 20,1 mmol His-DpNal-Ala□Me (30) în 200 ml dimetilformamidă anhidră (DMF). Soluția omogenă rezultată este lâsată sub agitare peste weekend, la temperatura camerei și controlată. Când analiza HPLC indică efectiv că nu a mai rămas tripeptidă în amestecul de reacție (adică în jur de 3 zile) se adaugă 50 ml apă și amestecul rezultat este lăsat sub agitare încă o zi. Această soluție este apoi concentrată in vacuo. Reziduul rezultat este dizolvat în acetat de etil și apoi extras cu soluție 1/2 saturată, apoasă, de carbonat de sodiu, (2 x 300 ml). Faza organică este uscată pe MgS04 și Na2S04 și se concentrează in vacuo pentru a se obține tetrapeptida. Acest material este folosit fără altă purificare pentru prepararea Boc-Ala-His-DpNal-AlaOH.
Boc-Ala-His-EfNal-Ala-OH, 33
Se adaugă 7,5 ml (15 mmol) soluție apoasă de hidroxid de sodiu 2N la
500 ml metanol și 200 ml soluție apoasă de Boc-Ala-His-DpNal-Ala-OMe (13,7 mmol). După ce amestecul de reacție este lăsat sub agitare peste noapte, la temperatura camerei, analiza HPLC indică cantitatea de material inițial remanent. Când reacția este efectiv completă (circa peste noapte), soluția rezultată este concentrată in vacuo la un volum de aproximativ 200 ml. Se adaugă 100 ml apă și se aduce pH-ul ia aproximativ 12 prin adăugare de 1 ni soluție de hidroxid de sodiu 2N. Soluția rezultată este extrasă cu acetat de etil (2 x 500 ml). Straturile de acetat de etil sunt înlăturate. pH-ul fazei apoase este ajustat la aproximativ 5 prin adăugare de soluție apoasă de NCI care, uzual, rezultă la precipitarea produsului. Este important să se diminueze volumul fazei apoase pentru a accelera această precipitare. Faza apoasă se decantează de produs și produsul se clătește cu apă (2 x 50 ml). Produsul izolat este uscat până la greutate constantă in vacuo.
D. Reacția de condensare a fragmentelor de peptidă pentru a produce heptapeptida Boc-Ala-His-EfNalAla- Trp-D-Phe-Lys(Boc)-NHs, 34
Cele două peptide: 2,6 mmol BocAla-His-DpNal-Ala-OH, 33, și 2,8 mmol Trp-D-Phe-Lys(Boc)-NH2, 13, sunt dizolvate în DMF anhidră și soluția rezultată este concentrată in vacuo. Această concentrare preliminară este efectuată ca o încercare de a îndepărta orice urme de metanol care pot fi prezente. Amestecul de peptide rezultat este redizolvat în DMF și apoi se adaugă 5,1 mmol 1N-hidroxisuccinimidă. Soluția rezultată este apoi răcită la -2°C și s-au adăugat apoi 3,4 mmol diciclohexilcarbodiimidă ca o soluție în 3,5 ml clorură de metilen. Amestecul de reacție rezultat este lăsat sub agitare, la ’2°C temperatura soluției, o perioadă de trei zile. Se folosește analiza HPLC pentru a determina dacă reacția este efectiv completă. După această perioadă de timp, dacă nu este,, se poate adăuga o cantitate adițională de diciclohexilcarbodiimidă și amestecul de reacție rezultat este lăsat sub agitare îhcă o zi,
RO 111370 Bl la -2°C. Dacă, în următoarea zi (pentru un total de patru zile] analiza HPLC indică din nou reacție incomplet răcirea amestecului de reacție trebuie încetată. Temperatura soluției poate fi lăsată să se ridice lent la temperatura camerei (25°C), pe o perioadă de ore (circa 8). Amestecul de reacție rezultat este lăsat sub agitare peste noapte, la temperatura camerei. Procedeul este raportat până când reacția este completă. Apoi, se adaugă 50 ml apă și amestec rezultat este lăsat sub agitare încă o zi. Soluția de reacție se filtrează apoi pentru a îndepărta diciclohexilureea și filtratul rezultat este concentrat in vacuo la un ulei vâscos. La reziduul rezultat se adaugă acetat de etil și soluție apoasă, 1 /2 saturată de carbonat de sodiu (200 ml). Amestecul celor două faze este rotit viguros pe un evaporator rotativ pentru aproximativ o oră. Solidele formate sunt colectate și se obține produsul prin filtrare pe o pâlnie de sticlă securizată. Faza organică se spală cu apă și apoi se usucă la greutate constantă obținându-se produsul.
A la-His. D0 Na l-A la- Trp-D-Ph e-LysΝΗΞ1 35
Heptapeptida Boc-Ala-His-DpNalAla-Trp-D-Phe-Lys-(Boc)-NH2, 34, în cantitate de 1,02 mmol, este adăugată la o soluție, la temperatura camerei, de 30 ml acid trifluoracetic, 14 ml dimetilsulfoxid, 7 ,l 1,2-etanditiol și 2,2 ml anisol în 15 ml clorură de metilen. Amestecul de reacție omogen este menținut în agitare 15 min. După această perioadă de timp, este adăugat 450 ml eter anhidru pentru a determina precipitarea produsului de peptidă biologic activă, brută, 35. Acest produs este izolat prin filtrare pe o pâlnie de sticlă securizată sau prin decantare. Produsul rezultat este dizolvat în apă și liofilizat. Produstil liofilizat poate fi mai departe purificat prin cromatografie la presiunea mediului pe o coloană de sticlă de 26 x 460 mm conținând material de umplutură de coloană Lichreprep RP-18 (C-18. 25-40 mm, plasă neregulată). După injectarea peptidei ca o soluție în apă, coloana este eluată la o viteză de curgere de 9 ml per minut cu un gradient superficial de O la 25% metanol pentru 5-20 h și apoi cu un gradient de 25 la 55% metanol peste circa 48 ore. Concentrația de metanol a gradientului este apoi mărită la o viteză de 2% per oră. în timpul eluării, restul de compoziție de solvent este integrat apă conținând 0,2% acid trifluoracetic. Produsul (35) este indenti ficat prin HPLC și este izolat prin concentrarea volumelor de eluție corespunzătoare.
Claims (10)
- Revendicări1. Peptidă cu activitate de stimulare a producerii hormonului creșterii cu formula:Aq -A2-A3-Trp-A5-A6-Z, caracterizată prin aceea că ΑΊ este His, 3(NMe)His, His-Ala, Ala, Tyr, Aq-H'is sau AQ-3(NMe]His, unde Ao este un Laminoacid obținut pe cale naturală, Met(0), DOPA, Abu sau peptide cu formula L-Aq în care L este H, DOPA, Lys, Phe, Tyr, Cys, Tyr-DAIa-Phe-Gly, TyrDAIa-Gly-Phe, Tyr-Ala-Gly-Thr sau Tyr-DAIaPhe-SarA2 este DpNal ;a 3 este Ala, Gly sau Ser ;A5 este Dphe, D/Lp(Me) Phe sau (NMe)D Phe ;A6 este B-G sau G în care B este un Laminoacid obținut pe cale naturală, dipeptide ale căror aminoacizi sunt obținuți pe cale naturală sau H2N(CH2)n C02H în care n=2-12 și G este Arg, iLys sau Orn; Z este gruparea de la C terminal a peptidei sau aminoacidul(zii) de la C terminal plus o grupare terminală și Z este -CONR1R2, ,CH20R1, Gly-Z' , -MetZ', -Lys-Z1, -Cys-Z', -Gly-Tyr-Z' sau -Ala-TyrZ', în care Z' este -C0NR1R2, -COOR1, sau -CH2OR1 în care R1 este H, o grupare alchil având 1 până la 6 atomi de carbon, o grupare cicloalchil având 3 până la 8 atomi de carbon, o grupare alchenil având 2 până la 8 atomi de carbon sau o grupare arii având 6 până la 12 atomi de carbon; R2 este definit ca R1 și poate fi același sau diferit; în care abrevierile de aminoacid sunt în concordanță cu cele recomandate de Comisia IUPAC-IUB de *RO 111370 Bl nomenclatură biochimică sau sunt cele convențional folosite în domeniu, când nu se specifică altfel aminoacidul este de forma L, când cele trei litere ale abrevierii aminoacidului sunt precedate 5 de D, aminoacidul este de forma D, iar când este precedat de D/L, aminoacidul este un amestec de configurații D și L; DOPA= 3.4-dihidroxifenilalanină, Met(0]=metioninsulfoxid, Abu=acis a- 10 aminobutiric, iLys=NE-izopropil-L-lizină, 4Abu=acid 4-aminobutiric, □rn=L-ornitină, DpNal=p-naftil-D-alanină, Sar=sarcozină, (Me)=metil, [NME)=N-metil;și sărurile acestora organice sau 15 anorganice acceptabile farmaceutic.
- 2. Peptidă, conform revendicării1, caracterizata prin aceea că A7 este His, Ala, His-Ala sau Ao-His, unde Ag este Ala, Lys, sau Glu; A3 este Ala; A6 este 20 Lys, iLys, Ala-Lys, Ala-Ala-Lys sau H2N(CH2)n, CO-Lys, unde n este 4-8.
- 3. Peptidă, conform revendicării1, caracterizată prin aceea că Z este -CONH2. 25
- 4. Peptidă, conform revendicării1, caracterizată prin aceea că are formula His-DpNal-Ala-Trp-DPhe-Lys-NH2.
- 5. Peptidă, conform revendicării1, caracterizată prin aceea că are 30 formula His-Ala-DpNal-Ala-Trp-DPhe-LysNH2.
- 6. Peptidă, conform revendicării 1, caracterizată prin aceea că are form ula Ala-DpNa l-Ala-Trp-DPhe-Lys-N H 2.
- 7. Peptidă, conform revendicării 1, caracterizată prin aceea că se utilizează sub formă de compoziție farmaceutică împreună cu purtător sau diluant pentru stimularea eliberării hormonului de creștere și creșterea nivelului acestuia la un animal mamifer.
- 8. Peptidă, conform revendicării 1, caracterizată prin aceea că se utilizează sub formă de combinație sinergetică împreună cu un compus care acționează ca un antagonist față de receptorul hormonului care eliberează hormonul creșterii sau inhibă eliberarea stomatostatinei.
- 9. Peptidă, conform revendicării 1, caracterizată prin aceea că se utilizează sub formă de compoziție farmaceutică împreună cu un al doilea compus care acționează ca un antagonist față de receptorul hormonului care eliberează hormonul creșterii sau inhibă eliberarea stomatostatinei.
- 10. Peptidă, conform revendicării 1, caracterizată prin aceea că este folosită la producerea unui medicament pentru stimularea eliberării hormonului creșterii în sânge și ridicarea nivelului acestuia.
Applications Claiming Priority (3)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
US55812090A | 1990-07-24 | 1990-07-24 | |
US55722690A | 1990-07-24 | 1990-07-24 | |
PCT/US1991/005208 WO1992001711A1 (en) | 1990-07-24 | 1991-07-23 | Polypeptide compounds having growth hormone releasing activity |
Publications (1)
Publication Number | Publication Date |
---|---|
RO111370B1 true RO111370B1 (ro) | 1996-09-30 |
Family
ID=27071367
Family Applications (1)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
RO93-00065A RO111370B1 (ro) | 1990-07-24 | 1991-07-23 | Peptida cu activitate de stimulare a producerii hormonului cresterii |
Country Status (26)
Country | Link |
---|---|
EP (1) | EP0540676B1 (ro) |
JP (1) | JPH05509105A (ro) |
KR (1) | KR927002373A (ro) |
CN (1) | CN1061606A (ro) |
AT (1) | ATE114157T1 (ro) |
AU (1) | AU667186B2 (ro) |
BG (1) | BG97334A (ro) |
BR (1) | BR9106676A (ro) |
CA (1) | CA2086928A1 (ro) |
CZ (1) | CZ401392A3 (ro) |
DE (1) | DE69105207T2 (ro) |
DK (1) | DK0540676T3 (ro) |
ES (1) | ES2067244T3 (ro) |
FI (1) | FI930261A (ro) |
GR (1) | GR3014916T3 (ro) |
HU (2) | HUT62605A (ro) |
IE (1) | IE912585A1 (ro) |
IL (1) | IL98910A0 (ro) |
MX (1) | MX9100341A (ro) |
NO (1) | NO930203L (ro) |
NZ (1) | NZ239079A (ro) |
PL (1) | PL167804B1 (ro) |
PT (1) | PT98439A (ro) |
RO (1) | RO111370B1 (ro) |
SK (1) | SK2793A3 (ro) |
WO (1) | WO1992001711A1 (ro) |
Families Citing this family (14)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
US5663146A (en) * | 1991-08-22 | 1997-09-02 | Administrators Of The Tulane Educational Fund | Polypeptide analogues having growth hormone releasing activity |
JPH08502250A (ja) * | 1992-09-25 | 1996-03-12 | スミスクライン・ビーチャム・コーポレイション | 成長ホルモン放出ペプチド |
HU221092B1 (en) * | 1993-12-23 | 2002-08-28 | Novo Nordisk As | Compounds with growth hormone releasing properties |
HU224345B1 (hu) * | 1993-12-23 | 2005-08-29 | Novo Nordisk A/S. | Növekedési hormont felszabadító tulajdonságú peptidek, ezeket hatóanyagként tartalmazó gyógyszerkészítmények és alkalmazásuk |
US20020111461A1 (en) | 1999-05-21 | 2002-08-15 | Todd C. Somers | Low molecular weight peptidomimetic growth hormone secretagogues |
US5798337A (en) * | 1994-11-16 | 1998-08-25 | Genentech, Inc. | Low molecular weight peptidomimetic growth hormone secretagogues |
ATE231131T1 (de) * | 1996-04-24 | 2003-02-15 | Novo Nordisk As | Verbindungen mit wachtumshormon freisetzenden eigenschaften |
EP1005484A1 (en) | 1997-06-20 | 2000-06-07 | Novo Nordisk A/S | Compounds with growth hormone releasing properties |
AU766305B2 (en) | 1998-01-16 | 2003-10-16 | Novo Nordisk A/S | Compounds with growth hormone releasing properties |
WO1999039730A1 (fr) * | 1998-02-09 | 1999-08-12 | Kaken Pharmaceutical Co., Ltd. | Preparation a administration orale contenant des peptides favorisant la secretion d'hormone de croissance |
US6919315B1 (en) | 1998-06-30 | 2005-07-19 | Novo Nordisk A/S | Compounds with growth hormone releasing properties |
UA73530C2 (uk) | 1999-11-10 | 2005-08-15 | Ново Нордіск А/С | Сполука з властивостями вивільнювати гормон росту |
US9119832B2 (en) | 2014-02-05 | 2015-09-01 | The Regents Of The University Of California | Methods of treating mild brain injury |
US20170121385A1 (en) | 2015-10-28 | 2017-05-04 | Oxeia Biopharmaceuticals, Inc. | Methods of treating neurodegenerative conditions |
Family Cites Families (6)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
CA1175810A (en) * | 1979-03-30 | 1984-10-09 | Frank A. Momany | Synthetic peptides having pituitary growth hormone releasing activity |
US4880778A (en) * | 1986-05-12 | 1989-11-14 | Eastman Kodak Company | Combinations having synergistic growth hormone releasing activity and methods for use thereof |
US4839344A (en) * | 1987-06-12 | 1989-06-13 | Eastman Kodak Company | Polypeptide compounds having growth hormone releasing activity |
ATE113607T1 (de) * | 1988-01-28 | 1994-11-15 | Polygen Holding Corp | Polypeptidverbindungen mit wachstumshormonfreisetzender aktivität. |
JPH03502329A (ja) * | 1988-01-28 | 1991-05-30 | ポリゲン ホールディング コーポレイション | 成長ホルモン放出活性を有するポリペプチド化合物類 |
WO1989010933A1 (en) * | 1988-05-11 | 1989-11-16 | Eastman Kodak Company | Polypeptide compounds having growth hormone releasing activity |
-
1991
- 1991-07-22 IL IL98910A patent/IL98910A0/xx unknown
- 1991-07-23 JP JP3514270A patent/JPH05509105A/ja active Pending
- 1991-07-23 CA CA002086928A patent/CA2086928A1/en not_active Abandoned
- 1991-07-23 PL PL91297850A patent/PL167804B1/pl unknown
- 1991-07-23 EP EP91915321A patent/EP0540676B1/en not_active Expired - Lifetime
- 1991-07-23 SK SK2793A patent/SK2793A3/sk unknown
- 1991-07-23 NZ NZ239079A patent/NZ239079A/en unknown
- 1991-07-23 WO PCT/US1991/005208 patent/WO1992001711A1/en not_active Application Discontinuation
- 1991-07-23 MX MX9100341A patent/MX9100341A/es not_active IP Right Cessation
- 1991-07-23 DE DE69105207T patent/DE69105207T2/de not_active Expired - Fee Related
- 1991-07-23 ES ES91915321T patent/ES2067244T3/es not_active Expired - Lifetime
- 1991-07-23 DK DK91915321.3T patent/DK0540676T3/da active
- 1991-07-23 AT AT91915321T patent/ATE114157T1/de not_active IP Right Cessation
- 1991-07-23 KR KR1019920700664A patent/KR927002373A/ko not_active Application Discontinuation
- 1991-07-23 CZ CS924013A patent/CZ401392A3/cs unknown
- 1991-07-23 BR BR919106676A patent/BR9106676A/pt not_active Application Discontinuation
- 1991-07-23 IE IE258591A patent/IE912585A1/en unknown
- 1991-07-23 AU AU84259/91A patent/AU667186B2/en not_active Expired - Fee Related
- 1991-07-23 HU HU9300192A patent/HUT62605A/hu unknown
- 1991-07-23 RO RO93-00065A patent/RO111370B1/ro unknown
- 1991-07-24 PT PT98439A patent/PT98439A/pt not_active Application Discontinuation
- 1991-07-24 CN CN91105938A patent/CN1061606A/zh active Pending
-
1993
- 1993-01-21 NO NO93930203A patent/NO930203L/no unknown
- 1993-01-22 BG BG97334A patent/BG97334A/xx unknown
- 1993-01-22 FI FI930261A patent/FI930261A/fi not_active Application Discontinuation
-
1995
- 1995-02-01 GR GR950400180T patent/GR3014916T3/el unknown
- 1995-03-21 HU HU95P/P00091P patent/HU210611A9/hu unknown
Also Published As
Publication number | Publication date |
---|---|
HU210611A9 (en) | 1995-05-29 |
WO1992001711A1 (en) | 1992-02-06 |
FI930261A0 (fi) | 1993-01-22 |
AU8425991A (en) | 1992-02-18 |
PL297850A1 (en) | 1993-09-20 |
NZ239079A (en) | 1994-01-26 |
IL98910A0 (en) | 1992-07-15 |
ATE114157T1 (de) | 1994-12-15 |
GR3014916T3 (en) | 1995-05-31 |
KR927002373A (ko) | 1992-09-03 |
IE912585A1 (en) | 1992-01-29 |
EP0540676A1 (en) | 1993-05-12 |
CZ401392A3 (en) | 1994-02-16 |
PT98439A (pt) | 1992-05-29 |
DE69105207T2 (de) | 1995-05-11 |
AU667186B2 (en) | 1996-03-14 |
HUT62605A (en) | 1993-05-28 |
BG97334A (en) | 1994-03-24 |
DK0540676T3 (da) | 1995-05-01 |
NO930203D0 (no) | 1993-01-21 |
FI930261A (fi) | 1993-01-22 |
SK2793A3 (en) | 1993-09-09 |
PL167804B1 (pl) | 1995-11-30 |
ES2067244T3 (es) | 1995-03-16 |
MX9100341A (es) | 1992-08-10 |
HU9300192D0 (en) | 1993-04-28 |
BR9106676A (pt) | 1993-06-22 |
DE69105207D1 (de) | 1994-12-22 |
CA2086928A1 (en) | 1992-01-25 |
JPH05509105A (ja) | 1993-12-16 |
CN1061606A (zh) | 1992-06-03 |
NO930203L (no) | 1993-01-21 |
EP0540676B1 (en) | 1994-11-17 |
Similar Documents
Publication | Publication Date | Title |
---|---|---|
RU2126014C1 (ru) | Пептид или его органические или неорганические соли, способ получения, фармацевтическая композиция, способы стимулирования высвобождения гормона роста и увеличения его содержания в крови | |
US5534494A (en) | Polypeptide compounds having growth hormone releasing activity | |
EP0398961B1 (en) | Polypeptide compounds having growth hormone releasing activity | |
US5486505A (en) | Polypeptide compounds having growth hormone releasing activity | |
RO111370B1 (ro) | Peptida cu activitate de stimulare a producerii hormonului cresterii | |
EP0417165B1 (en) | Polypeptide compounds having growth hormone releasing activity | |
US7250399B2 (en) | Compounds having growth hormone releasing activity |