PT96106A - Processo para a preparacao de derivados de anfotericina b - Google Patents

Description

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MEMÓRIA DESCRITIVA 0 presente invento diz respeita a novos compostos possuindo actividade farmacêutica, à sua preparação e à sua utilização no tratamento de infecções fúngicas em animais» incluindo seres humanos, O macrólidD polieno anfotericina B, produzido por etreptomvces nodosas, é amplamente utilizado no tratamento de infecções fúngicas» A anfotericina B é o único mscrólido polieno complexo cuja estrutura molecular e configuração absoluta foram firmemente estabelecidas por meio de cristalografia de raios—X« A anfotericina B possui a fórmula <A)s

Prepararam-se agora novos derivados de anfotericina B em que o grupo carboxilo na posição ló ê substituído por um grupo metilo ou metilo derivado. Estes compostos revelaram possuir actividade antifúngica e utilidade potencial como agentes anti-fúngicos»

Assim, o presente invento proporciona um composto de fórmula (I) ou um seu sal farmaceuticamente aceitáveis

(I) em queí

Rj é um grupo -CH^-X em que X é hidrogénio, halogénio, -CM,

-0CÍ0)R -SCO) Bsr, -SH, -0Cí0)NHRjr, -NHCONHR,-. ou -NR,R-,., em que é hidrogénio, C^_R alquilo facultativamente substituído, ou arilo, heteroarilDj aril-C^__^ alquilo ou heteroaril-C^^ alquilo, estando em cada um deles a fracção aromática facultativamente substituída, na condido de, quando X for —SCO) R_, R,- não representar hidroqénio, R, e R-, slo, independentemente um do Í3 /

formilo, C^_q alcanoílo, dialcoKifosforilo, aroílo, alcanoílo, heteroaril-Cj_^ alcanoílo. outro, hidrogénio ou C1_^ alquilo, ou um deles é hidrogénio e o outro é heteroaroílo, ari1-C C^_.g alquilsufonilo, arilsulfonilo, heteroarilsulfonilo, aril--Cj_^ alquilsulfonilo ou heteroaril~C,m^ alquilsulfonilo, em que qualquer fracçlo aromática em Fá ou R-, está facultativamente facultativamente substituídos um grupo asuno ou uro seu

J derivado; e cada K» é hidrogénio;

Deve notar-se que, quando X é MH.-, e R2 é hidroxi, pode haver vantagem em formar um sal farmaceuticamente aceitável do composto de fórmula íI) a fira de aumentar a estabilidade. / τ

Salvo indicação em contrário, a fracçâo alquilo de uííí grupo alquilo ou alcoxi é, de preferência, um grupo alquilo., com maior preferência ainda um grupo alquilo, que pode ser de cadeia linear ou ramificada, 0 termo halogènio inclui flúor, cloro, bromo e iodo»

Quando aqui utilizado, o termo arilo inclui fracções carbocíclicas, por exemplo fenilo e naftilo, de preferência fenilo» 0 termo heteroarilo inclui heteroarilo monociclico de ou ó membros e heteroarilo biciclico de 9 ου. 1Θ membros»

Além disso, heteroarilo monociclico de 5 ou 6 membros e biciclico de 9 ou ΙΦ membros contém, de preferência, um ou dois heteroátomos seieccionarfos entre azoto, oxigénio e enxofre que podem ser iguais ou diferentes, no caso de existir mais de um heteroátomo» isio caso de heteroarilo biciclico de 9 ou 10 membros, os dois anéis estão fundidos, de preferência com um anel de 5 ou 6 membros contendo um único heteroátomo»

Um grupo 0^_o alquilo Rg e uma fracçlo arilo ou heteroarilo Re-, R, ou R_ podem estar mono-, di-, ou trissubstituídos u’ o / com grupas que incluem carbaxi, nitro, alcoxicarbonilo, OH, alquilo, alcoxi, halogènio e NR^.R? em que e Rj são tal como foram definidos para a fórmula (I).

Quando aqui usado, o termo derivado da grupo amino inclui derivados de acilo, em particular derivados de acilo com um substituinte básico tais como derivados de N-D-lisilo e N-B-ornitilo, derivados de guanidina e derivados de N-glicosilo» A preparação de derivados de grupos amino adequados é descrita na t

Patente Europeia Publicada Θ & 1Θ 297 (Schering) ' Patente Europeia Publicada @ 031 722 (Dumex) e na patente dos E.U.A. 4,195,172« 0 termo sal farmaceuticamente aceitável abrange solva-tos e hidra tos, Assim, nos casos em que compostos de fórmula. (I) ou os seus sais farmaceuticamente aceitáveis formam solvatos ou hidratos, estes constituem também um aspecto do invento.

Os compostos de fórmula (I) podem formar sais de adição de ácido com ácidos, tais como ácidos farmaceuticamente aceitá-J veie convencionais, por exempla, ácido clorídrico, bromídrico, fosfórico, acético, fumárico, salicílico, cítrico, láctico, mandélico, tartárica, axálico, metanossulfónico, aspártico e ascórbico. 0 invento abrange também sais quaternários.

Valores para X incluem hid iu^ iodo, -CM, ™M^, -OCíOJRcr em que R^. é metilo, -SCO) R,- em qu.e R^ é fenilo e n é Φ

•J ϋ Π ϋ ~-J ou 2, e -MR^R^ em que e R-. são hidrogénio ou um é hidrogénio e o outro é acetilo, g-toluenossulfónico ou -P(O)COEt)^»

Valores para incluem hidroxi e metoxi» R·^ â adequadamente um grupo amino. 0 presente invento proporciona também um processo para a preparação de compostos de fórmula (I) que compreende a reacçSo de um composto de fórmula <11> s

J

em que;

J R ' é um grupo -CH7~L em que L ê um grupo dissociável (ou um precursor de X)s R-,' é C« 0 alcoxi facultativamente substituído e R„' ' é hidrogénio, ou R0'e R0'' em conjunto representam uma ligação; R^' é um grupo amino protegido? e cada um dos R^' é hidrogénio ou um grupo protector de sililof com um reagente qu.e proporcione um grupo X' em que X' é X tal como foi definido na reivindicação í ou um grupo que pode ser nele convertido? e p-or epois, facultativamente ou na medida em que seja necessário e em qualquer ordem considerada conveniente, se converter X' em X, se converter R„* em R_, quando R._,' ' for hidrogénio, ou. por se conver-ter R-.' em e R^' ' em hidrogénio quando R?'e R^'' em conjunta representarem uma ligação, se converter R-*'’ num grupo amino ,w,, juaisqi grupos protectores de sililo R^/, se interconverter R^, se R- farmando um derivada de grupo amino, por se remover quaisquer R, interconverter R-2, e se formar um sal farmaceuticamente aceitável » dissociá-tosiloxi, tal como

Valores adequados para L quando for um grupo vel incluem hidroxi derivada, tal como mesiloxi, trifluorometanossulfoniloxi e derivados de fósforo tri-rv-butilfosfónio—oxi E—op4-(n-Bu> ^3 e halogênio. ,ν. .. \' '

Uffi grupo hidroxi L pode também servir de percursor para X, por exroplo quando X é -0CiO)Rc. ou -0CC0}Hc Neste caso, o u* reagente que proporciona X' é adequadamenta um catiSo acilo, -l· R^CO derivado de, por exemplo, um anidrido de ácido carboxilico.

Quando L è um grupo dissociável, ter-ss-á em consideração que o grupo X' estará geralmente presente para reacção com um composto de fórmula lil) sob a fornia de um reagente em que X' è um anião em combinação com um. contra-ião adequado» Assim, quando X é -N-y, de modo que X' seja N_.~, o contra-ião pode ser, por exemplo, um catião de sódio ou de tetrametlguanidinio»

Quando X' é N_,” derivada de acida de sódio, L é adequa-damente mesiloxi e a reacção pode ser levada a cabo sob condições anidras em benzeno sob refluxo, em presença de um catalisador de transferência de fase tal como brometo de tetra—n—butxlamónia»

Quando X' é -N-. derivado de acida de tetrametilguani-dínio, um grupo hidroxilo L pode ser convertido in situ num grupo dissDciável trifluorometanossulfoniloxi que é deslocado por u.m ião az ida. A reacção é levada a cabo & temperaturas reduzidas sob condições anidras num solvente orgânico tal como diclorometa-no.

Quando X é halogénio, por exemplo iodo, um composto de fórmula (ΙΣ) em que L é um grupo dissociável pode ser feito reagir com um haleto de tetraalquilamónio, por exemplo iodeto de te t ra-n-butilamén io.

Quando X é BH, um composto de fórmula (II> em que L é um grupo dissociável pode ser feito reagir com H.-jS em presença de uma base adequada. r

Analogamente3 quando X é -SCO) Rp. um composto de fórmula <II> pode ser feito reagir com um composto HS(0> R^, em

Ff jJ * que n é ou 2 ou um seu sal farroaceuticamente aceitável. Quando n é Θ, o sulfureto resultante pode ser oxidaria para dar origem ao sulfóKido Cri=i) ou sulfona <n=2) correspondente.

Quando X ê -NHCONHRV, um composto de fórmula CU) em que L ê NH0 pode ser feito reagir com um composto ClC(0)NHRcr em ϋ presença de uma base adequada»

Quando X é —OCCO>NHR,-? um composto de fórmula ÍIl) em que L é OH pode ser feito reagir com um compostos C1CC0)WHRtr em *mj presença de uma base adequada.

Na reacções atrás identificadas, é preferível que os grupos hitiroxilo secundários no núcleo de anfotericina B estejam protegidos. Assim, R^'no composto de fórmula ÍII) é um grupo protector de sílilo» έ possível preparar certos compostos de fórmula Cl) a partir de compostos de fórmula CU) em que os grupos hidroxi secundários não estão protegidos Ci.e. cada R^' é hidrogénio) quando X'deriva de um reagente que pode ser selectivo relativamente a Lj em particular nos casos em que L é um grupo hidroxilo ou um seu derivado. Por exemplo, quando X é —SCO) Rg em que n é Θ e Rg é fenilo, prade-se fazer reagir um composto <R^'=H) “não protegido” de fórmula CII) em que L é hidroxi com dissulfureto de difenilo em presença de tri-n-butilfosfina a temperatura reduzida num solvente inerte tal como tetrahidrofurano.

Quando X' é diferente de X, por exemplo quando X' ê az ido CN^) e X έ amino CNH^), a conversão de X" em X pode ser realizada quer antes, quer depois da remoção dos grupos protecto-

Γ*ε?5 ds sililo R * q convsrs^o d© ^ num φ upo βίϊϊΐπο puf — — ^ o remoção do grupo’ de protecção de amina, A conversão de asido X' íN-,} em amino X CF#^' pode ser levada a cabo por tratamento da asida com um derivado de íosfina, por exemplo trifenilfosfina ou trialquilfosfina tal como trifenilfosfina, em presença de água» AIternativamente, a conversão pode ser levada a cabo sob condições anidras usando propano—i ,o~di'cxol em presença de trietilamina» Um solvente orgânico adequado para a reacção sob condições aquosas é tetrahidrofurano, enquanto que a reacção anidra é adequadamente 1 evada a caoo num solvente slcoolxcdcdíro metanol„ A conversão NHP<0> <OEt) p-, pode ser de fosfito adequado» NHPí0) (OEt),-j pode ser de preferência quando de asido X' CN-^> num X que é um radical levada a cabo por tratamento com o derivado Por exemplo, um composto em que X ê preparado por reacção com trietilfosfito, R ’ é um grupo protector de sililo. A conversão de halogénio X', por exemplo iodo, em hidrogénio X pode ser levada a cabo por redução, usando adequada-mente um reagente de borohidreto tal como trietilborohidreto de lítio. A interconversão de R^ pode ser levada a cabo usando transformações químicas correntes» Por exemplo, um composto em que R„ é 0Η.-,ΝΗο <) pode ser modificado quimicamente por acilação ou por reacção com derivados de sulfonilo. 0 processo de acordo com o invento pode ser levado a cabo usando um composto da fórmula <II> em que R0' é C.j_g alcoxi, de preferência mstoxi, e R2'' é hidrogénio, ou usando um composto t

de fórmula UI) em que ' e R," em conjunto representam uma 1 igação, ou. suas misturas»

Valores adequados para grupos de protecção de amina em incluem 9~í iuoreniImetaxiearboni1° ? a 11 i 1 ο >; i c a r bon i 1 o, « ,2~triclorostoi-íicarbonilo, 2— ífenilsulfooil letoKicarbonilo e 2-trimetilsiiiletoMicarbafiilo» Sla grupai de protecção de amina preferidos 9—fluorenilmetoxicarbonilo e alliloxicarbonilo·

Grupus ρrαteu.tares de silxlo R^ eds£]Uãuu3 inulusífl trimeiilsililo, trietilsililo e t-butildiraetilsililo» R^' é de preferência trieciisililOs

Em compostos de fórmula íllí em que R.-,' é alcoxi e R^'' é hidrogénio5 R^' pode ser convertido num grupo hidroxi sob condições de catálise de ácida após remoção dos grupos protectores de sililo R^'', usando água ou uma mistura de água e tetrahidrofurano como solvente,; de preferência usando uma mistura solvente conspreendendo até 50% de água em tetrahidrofurario.

Analogamente, compostos de fórmula (II) em que R,,' e R^,'' em conjunta formam uma ligação, podem ser hidratados sob condições de catálise de ácido para dar origem a compostso de fórmula (I.) em que R._: é hidroxi»

Uma catalisador ácido para estas reacções é ácido -canforsulfónico ou g.~taluenossulf anato de piridínio»

Os compostos de fórmula (II) em que RV e R^'' em jL si. conjunta formam uma ligação podem ser convertidos directamente em compostos de fórmula (I) em que Rn é C- -a alcoxi pela adição catalisada por ácido do álcool C.j_g alquílico apropriado, ou, alternativamente, indirectamente através da hidratação inicial da

I

ligação dupla, seguida por permuta do grupo hidroKilo R2 assim formado, usando o álcool C . _g alquílico apropriado. Estas conversões são adequadamente levadas a cabo era presença de ácido i©--canforsuIfónico ou p-toluenossulfonato de piridinio. -J A conversão de certos grupos amirto protegidos R-,' em amino R-, pode ser levada a cabo sob condições básicas. Por exemplo, um grupo de protecção de amina, tal como 9-fluorenilme-toxicarbonilo, pode ser removido sob condições básicas num solvente tal como dimetilssulfóxido metanólico. As bases adequa-J das para desprotecção de ansina incluem amónia, dialquilaminas tais como dimetilamina e dietilamina, trialquilaminas tais como trietilamina, aminas cíclicas e especíalmente amirias secundárias cíclicas tais como morfolina, piperasina e mais especialmente piperidina, e aminas diazabicíclicas tais como i,5~diâzahicicio-C4.3.ô3non-5--eno CDEN) e de preferencia 1 ,9-diasabicicloC5.4.03~ u.ndec-7-εηα (DBU). A desprotecção de amina pode ser levada a cabo usando 1—10 equivalentes de base, de preferencia 1-2 equivalentes, a temperaturas reduzidas ou elevadas, por exemplo a uma temperatura entre -3©°C e 5®°C, e de preferência entre ©°C e a temperatura , ambiente, durante um período de tempo que pode ir de 1 minuto a 5 horas, e de preferência de 3© minutos a 2,5 horas.

Um grupo de protecção de amina aliloxicarbonila é estável re1ativamente a bases de amina, sendo por isso particularmente adequado para a preparação de compostos em que R1 tem propriedades básicas. Um grupo aliloxicarbonila pode ser removido através de catálise de paládio, adequadamente em presença de PdCl^íPPh^)^ e tratamento com hidreto tri-n-butílico de estanho.

I J

Os grupos protectores de si 1 ilo ' podeis ser removidos usando métodos de desprotecção conhecidos, por exemplo usando uma solução de fluoreto de hidrogénio-piridina em tetrahidrofurano, a temperatura normal ou reduzida, por exemplo a uma temperatura entre -ie°C e 5Φ*C, de preferência entre Θ°C e a temperatura ambiente, durante um período de tempo que pode ir até 6Θ horas, de preferência entre 4 e 24 horas»

Os compostos intermediários de fórmula (II) podem ser preparados a partir do produto natural anfotericina B, levando a cabo os passos seguintes em qualquer ordem julgada adequada: <a> conversão do grupo carboxi na posição 16 numa forma activada, seguida de conversão e posterior derivatisação, segundo as necessidades, para dar origem a iys (b) permuta selectiva do grupo hidroxilo anomérico na posição 13 para dar origem a um grupo Cj__g alcoxi ou preparação de um composto em que R._,' e R^' ' sm conjunto formam uma ligação? í c) protecção da função amina na posição iv da fracção açúcar para dar origem a um grupo amino protegido R^ (d) conversão dos grupos hidroxilo livres, na medida em que for necessário, em ~GRâ' em que R^' é um grupo protector de sililo. 0 termo derivado de ácido carboxilico activada, quando aqui usado no contexto de (a) deve ser entendido como incluindo um grupo ácida carboxílica modificada par meio de uma reacçlo

X química para dar origem a uma forma activada capas de ser submetida âs transformações escolhidas que proporcionam Rj'» 0 termo derivado de ácido carboxílico activado inclui ésteres e heteroésteres aiquílicos, arílicos e heteroarílicos, haletos de ácido, anidridos ácidos, e amidas tais como W-metil-W--metoxícarbonilo e imidazolilcarbonilo»

Um derivado de ácido carboxílico activada para reacção com um agente de redução a fim de proporcionar ' em que L é hidroxi é adequadamente um tioéster a, de preferência, um hetero- ariltioéster tal como pridi1tioéster, 2-piridiltioéster„ R ' é, favoravelmente. um

Um agente de redução adequado para esta reacção é borohidreto de 1ítio * A reacção pode ser levada a cabo num solvente inerte tal como éter dietílico ou trtrahidrofurano, de preferencia éter dietílico, 0 grupo carboxilo na posição 16 pode ser convertida num 2-piridiltioéster R* 3 usando cloroformato d-e 2—tiopiridil num solvente inerte tal como tetrahidrofurano, éter dietílico ou diclorometano, de prefertncia éter dietílico, a uma temperatura entre reduzida ca eivada, tal como entre -20°C e 50°C, de preferência entre ®°C e s temperatura ambiente. ft conversão de 3 -em que L é hidroxi noutros valores de L tais como hidroxi derivatisado ou halogénio pode ser levada a cabo usando procedimentos aqui descritos. 0 grupo hidroxilo anomérico na posição 13 pode ser permutado selectivamente usando o álcool C^_g alquílico apropriado na presença de um catalisador ácido tal como ácido ΙΦ-canfor- 4

sul fónico ou g-toluenossulfanato de piridínio sob condições anidras» A reacção pode ser levada a cabo num solvente inerte tal como tetrahidrofurano e o álcool pode actuar quer total, quer parcialmente, como solvente, 0 reacção é lavada a cabo com conveniência na presença de um agente de exiracção de l-L.O tal ' como um crivo molecular e sob uma atmosfera inerte,

Brupos de protecção de amina podem ser introduzidos por procedimentos habituais. Por exemplo, um grupo de protecção de amina 9-fluoreniImefcaxicarbonilo pode ser introduzido por adição ' de 9-fluoreniimetilcloroformato a uma solução da amina primária em metanol-dimetilformamida sob condições anidras, na presença de uma base tal como carbonato de potássio.

Alternativamente, um grupo 9-fluorenilmetoxicarbonil pode ser introduzido por adição de N-<9-fluorenilmetoxicarbonilo-xiIsuccinimida a uma pasta da amina primária em metanol-dlmetil™ formamida sob condições anidras, na presença de uma base tal como piridina» Um grupo aliloxicarbonilo pode ser analogamente introduzido por adição d® succinimidilcarbonato de alilo.

Brupos hidroKilo secundários livres podem ser sililados , usando procedimentos habituais. A reacção com agentes de silila-çSo tais como trifluorometanossulfonato de trimetilsililo e trifluorometanossulfonato de trietilsililo pode ser levada a cabo num solvente inerte, por exemplo diclorometano, hexano ou éter dietilico, sob uma atmosfera inerte, a uma temperatura reduzida, por exemplo entre ®°C e 5°C. A reacção é realizada conveniente-menta usando um excesso do agente de sililação na presença de uma base fraca, por exemplo um derivado de piridina tal como 2,6-lu-tidina. Alternativamente, quando a base for um líquido, pode substituir o solvente, D tempo de reacção depende da dimensão do grupo sililo, podendo ir de alguns minutos para um grupo trime™ tilsililo até várias horas para grupos sili lo maioresπ A introdução de grupos protectores de sililo R ' é acompanhada da eliminação ou eliminação parcial do substituinte na posição 13, de forma que em compostos de fórmula CII) as variáveis ft,,' e R^ ' ' podem ser alcoxi e hidrogénio respecti™ vamente ou R^' e * podem em conjunto formar uma ligação. A amplitude da eliminação varia de acordo com o solvente; é significativa quando o solvente é diclorometanD, mas insignificante quando o solvente é hexano ou éter dietílico,

Nos casos sm que a reacção de sililação resulta numa mistura de compostos, estes podem ser separados por técnicas cromatogrâficas» Alternativamente, a preparação de compostos de fórmula ÍI) pode ser realizada usando uma mistura de compostos de fórmula (II).

Caso seja necessário, em compostos de fórmula ¢1) em que Rrj é hidroxi pode ser convertido num composto de fórmula (I) em que é C.j__g alcoxi usando o passo íb> atrás descrito para a preparação de compostos intermediários de fórmula (II).

Os compostos de fórmula ÍI) e os seus sais farmaceutx--· camente aceitáveis são agentes anli-fúngicos potencialmente úteis no combate a infecções fúngicas em animais, incluindo seres humanos·. Por exemplo, são potencial mente úteis no tratamento de infecções fúngicas tópicas em seres humanos provocadas, entre outros organismos, pelas espécies Candida. Trichophvton« Hicros-porum ou EpidermQphvton. ou. de infecções das mucosas causadas por Candida albicans Cpor ex, aftas e candidiase vaginal). Podem também ser usados s no tratamento de infecções fúngicas sistémicas provocadas, por exemplo, por Candida albicans. Crvptocpccus neoformans, ftsoeraillus fumiaatus» Coccidioides, Paracocc idiot~ des, Histoplasma ou Slastoroyces soo, Podem também ser úteis no tratamento de micetoma eumicótico, cramob1 as ioíri i c ose e ficamico-se» 0 inventa proporciona ainda uma composição farmacêutica que compreende um composto de fórmula íí) ou uni seu sal farmaceu-ticamente aceitável em conjunto com um diluente ou suporte farmaceuticaments aceitável= A composição destina-se, de preferência, a utilização por humanos, sob a forma de comprimidos, cápsulas, cremes ou sob forma injectável» 0 invento proporciona também um processo para a prapa-ração de uma composição farmacêutica que compreende a mistura de um composto de fórmula \I> ou um diluente ou suporte farmaceuti-c amen te ac e i tá ve1.

No caso de utilização em seres humanos, os compostos arsfi-fúngicos de fórmula (I) ou as seus sais farmaceuticamente aceitáveis podem ser administrados isoladaments, sendo todavia e de um modo geral administrados numa mistura com um suporte farmacêutico seleccionado tendo em vista a via de administração pretendida e a prática farmacêutica habitual» Por exemplo, podem ser administrados oralments sob a forma de um comprimido contendo excipientes tais como amido ou lactose, ou de uma cápsula ou. óvulo, quer isoladsmente, quer misturados com excipientes, ou sob a forma de um elixir ou supensão contendo um agente aromatizante ou corante» Podem ser injectados parentericamente, por exemplo por via intravenosa, intramuscular ou subcutânea» para efeitos de administração parentérica, são usados idealmente sob a forma de uma solução aquosa esterilizada que pode conter outras substâncias, por exemplo, sais ou glucose em quantidades para tornar a solução isotónica» 4

J

J

Para efeitos de administração oral e parentérica a pacientes humanos, considera-se que o nível de dosagem diária dos compostos an ti fúngicos de fórmula (I) se situará, entre 0,1 e í mg/kg íem doses divididas) quando administrados por via oral ou parentérica. Assim, comprimidos ou cápsulas dos compostos podem conter entre 5 mg e 0,5 g de composto activo para administração única ou de duas ou mais unidades de cada vez, como for julgado apropriado» 0 médico determinará em cada caso a dosagem efectiva mais adequada para um paciente individual, que variará com a idade, o peso e a reacção desse doente» As doses atrás indicadas são exemplificativas de casos médios. Podem existir, evidentemente, casos em que deverão ter sidas em contra gamas de valores de dosagem mais elevadas ou reduzidos, que devem ser consideradas como estando também incluídas no âmbito deste invento»

J

Alternativamente, os compostos anti—fúngicos de fórmula ¢1) podem ser administrados sob a forma de um supositório ou pessário, ou podem ser aplicados topicamente sob a fornia de uma loção, solução, creme, unguento ou pó» Por exemplo, podem ser incorporados num creme consistindo numa emulsão aquosa de glicóis de piloetiieno ou parafina líquidap ou podem ser incorporados, numa concentração entre í e 10%, num unguenta constituído por uma cera branca ou parafina macia branca e os agentes estabilizadores e conservantes que foram julgados necessários. Não foram observados efeitos toxicológícos adversos com os compostos da acordo com o invento no interior dos intervalos de valores de dosagem indicados, que pudessem aconselhar a sua não administração a doentes adequados para o tratamento de infecçSes fúngicas. 19 -

0 presente invento proporciona ainda um composto de fórmula (I) ou um seu sal farmaceuticamente aceitável para ser usado como substância terapêutica activa.

Um composto para ser usado como- substância terapêutica activa destina-se a ser usado no tratamento de afecções em animais, incluindo seres humanos. Tal como atrás se referiu, os compostos da fórmula íI) e os seus sais farmaceuticamente aceitáveis possuem actividade anti-fúngica e são potencialmente úteis no combata a infecçSes fúngicas em animais, incluindo seres humanos.

Consequentemente, o presente invento proporciona ainda um composto de fórmula ÍI) ou um seu sal farmaceuticamente aceitável para utilização no tratamento de infecçSes fúngicas. 0 presente invento proporciona adicionalmente um método de tratamento de infecçSes- fúngicas em animais, incluindo seres humanos, que compreende a administração de uma quantidade anti--fúngica eficaz de um composto de fórmula (I) ou de um seu sal farmaceuticamente aceitável ao animal. 0 presente invento proporciona também a utilização de um composto de fórmula (I) ou de um seu sal farmaceuticamente aceitável na produção de um medicamento para utilização no tratamento de .infecçSes fúngicas em animais, incluindo seres humanos.

Os Exemplos que se seguem ilustram a preparação de novas compostos de acordo com o invento e as Descrições que se seguem ilustram a preparação dos compostos intermediários que lhes dão origem. \ 0 ~

"Frnoc" e "alloc" são usadas para '-f 1 uoren i 1 metoK icar bon i 1 e

As abreviaturas i!TES” , representar grupos trietilsililo, aliloxicarbonil, rsspectivamente» DESCRIÇÃO 1 N- ( 9-F1 uoren i 1 me tox icar bon i I) an f o ter ic ina £ {Dl)

A uma so 1 uçSo de anfotericina B 8€?,50 g , Θ ,54 mmol) e carbonato de potássio anidro <0,17 g, 1 ,2 mmoi) em dimetilsulfó-Kido seco (10 ml) e metanol seco <2 ml> sob uma atmosfera de azoto a 0*C adicionou—se cioroformato de 9-fluorenilmetilo sólido (0,21 g, 0,8i mmol )» Após agitação durante i hora, juntou—se uma porção adicional de cioroformato de 9-fluorenilmetilo <0,04 g, 0,17 mmol), Passadas 0,25 horas, a mistura de reacção foi vertida sobre água destilada (2&Φ ml), 0 precipitado foi recolhido por meio de centrifugação, dissolvida em metanol e evaporado no vácua. O resíduo foi dissolvido no volume mínimo de urna mistura de tetrahidrofurano e metanol (isi) e vertido sobre água destilada <2ΘΘ ml, valor de pH ajustado para 3,2 por adição de ácido acético glacial). D precipitado foi centrifugado, lavado com água e seco no vácuo para dar origem ao composto em epígrafe (Dl), que foi usado sem purificação ulterior. 21

DESCRI C-gQ Q-metilanfotericina B (D2) M- (9~FluorenilfflstoKíc-arbonll >-l i

OH

Método ft M-(9-F1uoreni1meioxicarboni1)anfotericina B CDí) (i,85 g , 1,61 mmol) e ácido d -1O-c ars f orsu 1 f 6n i c o (156 mg, @,67 mmal) foram agitados em tetrahidrofurano seco (1Θ ml>/metanol (&Θ ml> à temperatura ambiente, sob uma atmosfera de acoto * Passados 15 minutos, adicionou-se trietilamina (0,14 ml, 102 mg, 1,01 mmol>, a mistura foi filtrada, concentrada para cerca de 10 ml e vertida sobre éter dietílicD/n-hexano (800 ml ísí). 0 produto precipitado foi recolhido por meio de centrifugação, lavado com éter dieiílico/acetato de etilo (isl) e seco para dar origem ao composto em epígrafe cD2} sob a forma de um pó amarelo,

Método B

Adicionou-se trietil- N-(9-Fluorenilmetoxicarboni1)anfotericina B (4,99 q, 4,35 mmal) e jg— taluenossulfonato de piridínio (5,04 g, 2Θ, 1 mmol) foram agitados em metanol í 45-0 ml) /tetrahidrof urano (150 ml) à temperatura ambiente durante 1,5 horas. amina (2,65 g, 3,65 ml. ? a mistura fui concentrada para ml a adicionada a solução Saturada do bicarbonato ds sódio (21), 0 produto precipitado fQi recolhido par meio de filtração, lavado com água e seco para. dar origem ao composto em epígrafe (D2) sob a forma de um pó amarelo» CLEPt coluna de fase invertida ODS 5μ 25Θ κ 4,6 mm; eluente 86% metanol ~ 26% tampão fosfato pH 3 - 1 ml.min-1; comprimento de onda de detecção 35® nm» tempo de retençSos 7,6 minutos. DESCRICÃQ 5 N-(9-FiuprenilmetoKicarbonil)-í3-0-metil nona-Q-trietilsililanfotericina B (D3) .5-8.9,11„15.35. .4':

N-(9-F1uoreni1metοκicarbon i1)-13-0-meti1an foter ic ina B (D2) (4,97 g, 4,3 mmol) foi suspensa em n-hexano seco (15® ml) a ®*C sob uma atmosfera de azoto e tratada com 2,6-lutidina (8,3 g, 8,9 ml, 77 mmol) e depois com trifluarometanossulfonato de trietilsilílo (15,8 g, 13,6 ml, 6© mmol). Após agitação a ®C‘C durante 2 horas, adicionaram-se outras porções de 2,6-lutidina <4,5 ml) e trifluorometanossulfonata de tri@tilsi.lila <ó,8 ml), em duas doses separadas entre si por 15 minutos. Prosseguiu-se com a agitação durante mais t hora e a mistura foi filtrada e concentrada no vácuo» A purificação por meio de cromatografia sobre gel da silica íeluição cons misturas de acetato de etilo/n— -hesano) proporcionou o composto em epígrafe <D4) sob a forma de uma espuma amarela/laranja. DESCRIçao 4 éster (5-piridiltio) de luorenilmetoxicarbonil )-13-Q--metil~ -5,5.8,9.11.15.55,2',4'-nona-Q-trietilsililanfotericina B (D4)

O produto da Descrição 3 (S23 mg» 0,38 mmol> foi agitado a 0*C em éter dietílico seco <15 ml) e tratado com trietilamina <50 mg, 0,07 ml, 0,49 mmol) e depois com cloroforma-to de 2-tiopiridilo <105 mg, 3 ml de uma solução 35 mg/ml em diclorometano). Após agitação a ®°C durante 30 minutos, a mistura foi diluída com éter dietílico (80 ml), seca sobre sobre sulfato de magnésio anidro, filtrada e evaporada no vácuo. A purificação por meio de cromatografia “flash" sobre gel de sílica com eluição com acetato de etilo a 10% em n-hexano proporcionou o

composta em epígrafe CD4) sob a forma de uma espuma amarela/laranja a m> , 5,97 <1H5 dd, J 5,5, 15 Hz), í 5,30 < 1H, d, 3 9,6 Hz), 4,78 UH, m! 4,5ò~4 ? 42 < 2H, m), 4,38~3 , 96 (6H , série de m) , 3,92 < í H, d, J 3 ’·«* t| \ t| de fl5.), 1 s 23 (3H, s, J 5Hí ), 1, Ití (3H, s, J è Hz) , i,ib—0,86 (87H = m), 0f85-0,45 C54B, série de m) ppm., msx · (“ombro”· a 171©), 1571 1080, 101@, 740 cm

J de eti lo a ieSV : «H5 Γ v-hex ano.. 1H d , J 5 Hz :), 7. *95 í 1H, íz) ~7 5 -* 3 73 c 1H, d, J “7 KZ .* g w Hz), ), 6,7 Θ—6, 08 C 12H, série de i0 (1H, dd, J 9,6, 15 Hz), 4, 65 ( 1H, m) , 4,62 (1H, s), **?* f\-? ·-> ? O / UH, dd. t o U 7 5 3 Hz > 9 '-! π / / Ο κ —r ϋ £ 3H 9 m) , 3 ,: 3,13 (3H, s), 2 3 77 (1H, i 3 J 9 Hz>, 7 q 59 í 2H, d UH, m) , '2,32 í 1H, dd. •7 w 6,4, 14 Hz \ „ *7 ·· £ x- 4 15-1,4Θ .na) s 3459, 296b, 2920, 2888, 1737 1460, 141B, 1382, 1312, 1241, •L X tmí J FAB (mat riz 3 -ΝΟΒΑ/ Na) , HâSBcí observada MNa 2302, valor calculado para C,, _H_0,,_Si_,Na'

I£14 jí lo V π·?Λη |

DESCRICSO 5 M-(9-F1uoreni1metoaicarhoni1)-í fc-dec arhox i-í 6—hidroximet i1-13-0—: mgtii-5,5,8,9.1115,35,2" „4' -nona-Q-trietí Isiiilanfotericxna. B <D5)

Éster (2-piridiltio) de N-(9~flucrenilmetoxicarbonil>~ -13-0-meti1-3,5 , 8 , 9,i1,15,35,2', 4'-nona-0-trietilsi1ilanfoterici-na B CD4) ¢3.,26 g, 1,43 mmol) foi agitada em éter dietilico (&& ml), sob uma atmosfera de azoto a temperatura ambiente e tratado com borohidreto ds litio (0,150 g, 6,89 mmol). Passadas 2 horas, a mistura foi arrefecida para $°C, adicionou-se solução saturada de cloreto de amónio s a mistura foi agitada vigorosamente durante alguns minutos. 0 produto foi extraído pra éter dietilico e os extractos orgânicos combinados foram secos sobre sulfato de magnésio anidro, filtrados e depois concentrados no vácuo. A purificação por meio de cromatografia "flash” sobre gel de sílica íeluição com misturas de éter dietílico/diclorometano) proporcionou o composto em epígrafe sob a forma de um sólido amarelo vítreo.

Rfs θ,44 (sílica), éter dietilico a 2% em diclorometa-no

J

SH 40Φ MHz <2H, d, J 7,4 Hz>, 7, ( (ΟΒ^)„ϋΟ> 43 (2H, d, d 7,4 Hz)

Hz >

Í3H 34-6,10 C12H, série de m), 6,©6 (1H, dd, 3 15,4 » is í , 2,63-2,5Φ (2H, m), 2,48-2,36 <2H, m> (2H , d J 7,5 Hz), 7,69 34 (2H, t, J 7,4 •J 15,4, 6,1 Hz), ',8 Hz), 4,78 (1H, f , o Hz ), 4, *.i>4 (1H, 05-3,76 (6H, m), ;,35 (1H, m), 3,12 2,12 Í1H, dd , 3 , /.u) (oH , UI , li Cy $ í >érie ds m), ® •, 80— C14H, série de m> 12,3, 4,4 Hz), Hz), 1,18 (3H, d, 3 6,® Hz), 1,14-0,85 (87H, -0,53 C54H, séries de ra) ppm» O protão OH nSo foi observado. ,0/-1 IV v_ (película fina); 36@®-33®Θ (fraco, amplo), ma h s · 3450, 2958, 2915, 2879, 1737, 1510, 1461, 1414, 1380, 1309, 1240, 1193, 111®, 107 905, 839, 740, 725, 674 cm

Espectro de massas FA.B (matriz 3-N0BA/iMa) „ Massa observada MN 2195, , + 6195, valor calculado para C ... _Ν0. _3í JMa , 11/ 2j. .;· 18 9 DESCRIÇ%0 6 Éster metíiico de laorenilmetoxicarbonil lanfotericina E* <D6)

N-í9-FluorenilmetoxicarboniI>anfotericina B (Di> em bruta (2,11 g, 1,84 miTsol) fai dissolvido em dimetilsulfáxida e metanol isi (27 ml)„ à temperatura de Θ°C e com agitação, adicionou-se ao longo de 0,3 horas uma solução de diazometano em

éter dietílico (13 mi?» O diazomeia.no foi produzido a partir de P

Diazald" íi,97 q, 9,20 mmol >hidróxido de potássio (0,56 g, 10,00 uima I) 5 égua (1 ml) s 2- ΐ 2~e tox is to x i) e tano 1 <3,3 ml 5» A reacção foi agitada durante mais 0,5 horas e depois interrompida cuidadosamente com -ácido acética glacial» Q produto foi precipitado vertendo-o sobre éter dietílico (4 litros), filtrado, lavado com éter dietílico e seco no vácuo, dando origem ao composto em epígrafe (D6) sob a forma de um sólido amarelo» CLEPs Fase invertida usando: coluna QDS 5μ 250 x 4,6 mm? eluente 80% metanol - 2©% tampão fosfato ρΗ3 — 1 ml/min, t comprimento de onda de detecção 35€? nm? tempo de retenção 18,8 minutos» DESCRIÇÃO 7 éster mstíllco dg N-C9 ricina B (D7) f 1 uoren i icarbonl 1 )~1 Q—meti1anfote—

Método A éster metílico de N—<9—fluorenilmetoxicarbonil>anfote— ricina. B ÍD6) (7,,38 q ? 6,36 x 10 moí) suspenso numa mistura. 4si ds metanol seco/tetrahidrofurano <400 ml) foi tratado com ácido l€í-canforsul fónico < 1 r, 42 g, 5 , 66 x lô mol), a fim ds baixar o pH da mistura de reacção para cerca de 2,5» Passadas i,2 horas, a mistura ds reacção foi neutralizada com tristilamina (7ΘΘ μΐ, 5,®2 x i© iTiol), concentrada e vertida sobre éter dietílico (10 litros). 0 produto amarelo, éster mstilico de N—Í9—fluorenilme— taxicarbonil)-13-0-metilanfotericina B £D7>, foi filtrado, lavado com éter dietílico e seco sob vácuo. Éster metílico de N-<9—fluorenilmetoxicarbonilíanfote- ricina B (D6) (10,25 g, 8,94 mmol) suspenso numa mistura 3sl de / com trietilamina £S,2B ml, metanol seco/tetrahidrofurano (1,Oò 1) foi tratado com p—tolue— nossulfonato da pxrxdínxo í12,42 g, 49,4 mmol). Passadas 2,€s horas a mistura de reacção foi tratada

59,3 mmol), concentrada e vertida sobre solução saturada de hidrogenocarbonato de sódio (5 litros). 0 produto amarelo, éster met.ílico de N—í9~f 1 uoreni 1 metoxicarboni 1)-í3-Q-mstx 1 anfotericina B (D7) foi filtrado5 lavado com água e seco sob vácuo» CLEP: coluna de fase invertida ODS 5μ 25€? x 4,6 mm5 eluente 78% metanol — 22% tampão fosfato pH 3 — i 5 comprimento de onda de detecção 350 nmp tempo de retençãos 12,7 minutos.

Espectro de massa FAB ímatria tioqlicerol) massa observada 1196 - massa calculada para C,-H_^NO,„Na, 1196,6. o·1? 0/ If DESCRIÇÃO 8 N- (9--F1 uo r en i 1 me t o x i c a r bort i 1)" 16-d ec a r bo x i -16- h i d r o x i me t i 1 -13-0— metil anfotericina B (B8)

Éster metilico de N—{9--f luorenilmetoxicarbonil )-13--0- -metilanfotericina B <B7) (6,75 g, 5,75 x 1β~3 mol)s dissolvido numa mistura 3sl de metanol/tetrahidrofurano (185 ml), foi tratado com borohidreto de sódio (5,65 g3 1,50 χ 10~Ί mol) a 0°C, Após a adição do borobidreto de sódio, deixou-se que a temperatura da mistura de reacçSo atingisse o alor ambiente, Passados 30 50 -

minutos, adicionou-se solução saturada de hidrogenocarbonato de sódio (3 ml) à mistura de reacção. A mistura foi concentrada s vertida sobre solução saturada de hidrogenocarbonato de sódio <B litros). 0 produto amarelo, N-(9~fluorenilmetoKicarbonil>-'16-de-carboxi-hidroííimetil-13~0~ffletilanfotericina B foi filtrado, lavado com água e seco sob vácuo. 0 material em bruto foi purificado por meio de croroatografia de coluna sobre gel de sílica de fase normal, com eluição com misturas de diclorometano e metanol, para proporcionar o composto em epígrafe íD8). IV vmax (disco KiJr) 3415, 3010, 2925, 1710, 1510, 1445, 1375, 1320, 1180, 1065, 1ΘΘ5, 900, 845, 760 e 740 cm"1. DESCRIG«P 9 N-~ (9-Fi uoren i 1 metox icarboni I) -1 meti1-15-Q-roeti1-5,5,8,9,11,15, -decarboxi-ié metanossulfpniloxi-ã,2 *,4 * —nona-Q-trietiIsili1anfo— tericina B (D9)

0 álcool arrefecida para Θ°£ da Descrição 5 (0,760 g, 0,35 mmol) foi sob uma atmosfera de asota em diclorometano seco (10 ml) e tratado com trietilamina (¢3,106 g, 0,146 ml. 1,05 mmol) e depois com cloreto de metanossulfoni 1 o (©,080 g, ©,©54 ml, €í,7© nifflol)» Após agitação durante 30 minutos, as mesmas quantidades de trieiilamina e cloreto de metanossulfonilo foram de novo adicionadas e a agitação prosseguiu durante mais 2© minutos a ©°C« A mistura foi diluída com éter distílico, lavada com água, seca sobre sulfato de magnésio anidro, filtrada e concentrada no vácuo» A purificação por meio da cromatografia "flash” sobre gel de sílica íeluiçSo com misturas de éter dietí-lico/diclorometano) proporcionou o composto em epígrafe <D 9>»

Iv vitiax (película finais 3465, 297©, 2925, 2895, 1/45, 1520, 1473 1427, 139©, 1 *7*Tcr •~5 f w *t λ .-¾ .» *“*· X .££>._> , 119: 2, 11 2@ , 10 90 r, 1019 5 985, 918, 846, 752, 685 cm ^ » SH 27 0 MHz <\CD -ς) r-jCD ) s 7,88 C 2H, d 5 *i 7,4 Hz) ç 7,7© (2H, d, *J 7,4 Hz), 7,43 (2H, t, J 7 * 5 *£· Hz >, -j ,34 (2H, t, 3 7,4 Hz), 6,55- i>, ©0 í13H, séri e de m) , 5 , 43 (1H, d d , J 15,1, 9, *7 Hz) , 5,34 UB, d, J 9,9 Hz), 4,82- 4,63 (3H, m. in cluindo s a 4, 75), 4,57- •3 ? 55 Í15H, série de m) , 3,47 t, j 9,1 Hz), 3,4 aZ Í1H, hi 1, o ,15 C uH" } e j£*. ff íZ* / "*í£, £ 35 (3 H, m) 1 © (2H , nu , 2, 10- 1,4© í 14H, sé ri e de m), 1,24 í 3H, d, J 6,1 Hz) , í , 18 (3H, d, *T 6,1 Hz), 1,12- 0,84 (87H, sér ie de m) , @,7 9-©,5© C54H , série de Hl) ppm» Espec tro de ma ssa s FAB (ma 't r i. z ·-!* ΝΟΒΑ /sódio) H-5lS-5-íã observada 22/3, massa calculada para C, ieHol=.N0^fiSi^SNa‘t', 2273, :- 32

descricao 10 N~ (^-Flt^r^nil met^.i.carbon i 1) ϊ 1-1 ά-decar box i~ 1 Sr^QrJBfti

til-3,5,8,?., 11 , 15335.,21.,.1: ,zngn.^p-trieti 1 si l i lanf ptericina___B <D1§>

Método A

Uma mistura do da Descrição 9 (e>319 gf 0,142 ffl/aol), azida de sódio <0,037 gs 67 e brometo de tetra-n--butilamónio <0,005 g, 0,0142 mmol) foi submetida e refluxo em benzeno seco (4 ml) sob uma atm0sfera de a2otQ durante 24 horas. Após arrefecimento, a mistura foi filtrada, diluída com éter dietílico, lavada com água <2x>? ssca sobre sulfato de magnésio anidro, filtrada e concentrada no vácuo» A purificação por meio de cromatografia de coluna sobre gel de sílica (eluição com misturas de n-hexano/acetato de etilo e n-hexano/éter dietílico) proporcionou o composto em epígrafe (Dl©).

Método B

Uma solução do álcool da Descrição 5 <2,93 g, í,35 mmal) e piridina <0,47 g, 0,48 ml, 5,92 mmol) em diclaromstano seco ίάΦ ml) foi arrefecida para -10°C sob uma atmosfera de azoto. A esta mistura adicionou-se uma solução de anidrido trif1uorometanossu1fónico (0,84 g, @,50 ml, 2,96 mmol) em diclo-rometano (10 ml) por meio de uma cânula» Após agitação durante 5 minutos a -10*C, azida de tetrametilguanidínio <ί,4Θ g, 8,85 mmol, previamente seca sob vácuo durante 36 horas sobre F^Og) sm diclorometano (10 ml) foi adicionada por meio de uma cf.nu.la, Passados mais 5 minutos a -10°C? deixou—se que a temperatura da mistura atingisse α valor ambiente, agitando—a durante 30 minutos, Adicionou-se solução saturada de bicarbonato de sódio e o produto foi extraído para n-hexa.no. Os extractos foram lavados com solução saturada de bicarbonato de sódio, secos sobre sulfato de magnésio anidro, filtrados a concentrados no vácu.o, A purificação por meio de cromatografia ,!flash" sobre gel de sílica (eiuição com misturas de acetato de 57 - —‘io/n—hexano) proporcionou o composto em epígrafe <B10> sob a forma de uma espuma amarela estaladiça, 2945, 1187, ^5 287Θ, 2090, 1072, 1000, IV vmax (película fina)i 3422, 1731, 1500, 1454, 1409, 1375, 1303, 1235, 896, 855, 830, 725, 665 cm"-1, A'H 400 RH c ((CD „) o „C0 ) s 7 ,88 (2H, d. 3 75S Hz), (2H, d, J 7,4 Hz) , 7 ,43 (2 H, t. 3 7,4 Hz) , 7, 34 ?3H, t, ϋ Hz>, 6,55 -6,10 <12 H, séri> e de m) ? 6, 05 <1H, dd, u 15 "y ΐ4!·ί5 6? 1 5,51 (ÍH, dd. J 14 , S, 9,5 H z), 5 ,34 (ÍH , d, 3 9 ,8 Hz> * 5 4,74 s), 4,74- 4,63 Í2H, m> , V 48 Í1H, dd 3 J 10,4 , 6 ,5 Hs) 5 4,34 dd, J 10, 4, 6, 5 Hz >, 4,30 -4 (2H, m) , 4,1 6-4 , 06 c-2He m). (ÍH, m), 3,96 (ÍH, d, J 2 ,6 Hz.), 3,88-3 , 80 i 2H, m) * -·- ? 5 3*77 (2H J 2, 6 Hz) , o, / 3-3, 58 <3H, série de iTi) , 3,48 C 1H, t· α 9,0 3,36 . Í1H, dq, J 8, 5, 6,2 H Σ) , 3 ,13 (3H , s>, O 4. ,59 ^ 1H, dd, sistema ABX, 3 17, 5, 6 Hz í , 2,53 Í1H , dd, B de sistema ABX, 7,70 7,4 Hz), <1H, (1H, 4,00 , d, Hz>, A de J 17,

9 ?

7,1 Hz), 2,44 Í1H, m) , 2,27 <1H, m), 2,15 í ÍH, dd, J 12,3, 4,E

Hz), 2,®8“1,45 Í14H, série de m), 1,26 <3H, d, J 8,1 He), 1,1E <3H, d, J 6,0 He), 1,10-0,85 Í87H, série de <n), 0,78-0,53 (54H, série de m) ppm.

J

Espectro de massa; FAB (matriz 3—NuBA/sódio) -l· observada 2220, massa calculada para L'117H^1?N 0 Si9Na

Mass,-:220, DESCRICSO 11 N~ (9-F1 uo r en 11 meto κ i c a r bon i 1) -16-d ec a r bo κ .1 -16— i od orne t i 1—13—U-me t— 11-5,5,8,9,11,15,55,2*.4*—nona—0—trietilsililanfotericina B (Dll) i

J N- C 9-F 1 Lior en i 1 me to κ i c ar bon i 1) — 16-dec a r bo κ i - í 6- h i d r ο- κ i -me t i 1 -13-0-me ti. 1 -3,5, S, 9,11,15,35,2, 4 —n on a -0-1r ie ti 1 s i 1 i 1 anfoiericins B (D5) (524 mg, 0,24 ramol) dissolvida em diclorome— tano <3 ml), foi arrefecida para -1Θ°C e tratada com piridina (98 μΐ, 1,21 mmol}, Esta mistura foi tratada com uma solução de anidrido trifluorometanossulfónico (93 μΐ. 0,56 mmol) em diclora- c Snula. Após ag i taçSa de tetra—n-butilamónia ml) foi adicionada por metano (3 ml) adicionada por meio de uma durante 5 minutos, uma solução de iodeta (579 mg, 1,5*7 mmol) em diclorometano (3

J meio de uma cânula e dsixou-se que a temperatura da mistura atingisse d valor ambiente» Passados 5Θ minutos, a mistura foi lavada com soluçSo saturada, de hidrogenocarboriato de sódio, diluída com n-hexano e lavada com solução saturada de sulfito de sódio» 0 extracto orgânico foi seco sobre sulfato de magnésio anidro, filtrado, concentrado no vácuo e depois purificado por meio por meio de cromatografia "flash5' sobre gel de sílica usando como eluente acetato de etilo a 1Θ% em n-hexano para proporcionar o composto em epígrafe (Dil)*

J

J SH 4 0© MH Z id.~3.CS O tona ) s 7,87 (2H , d, 3 7,5 H \ *- í 5 7,69 <2 H, d, J 7? 4 Hz), 7,43 C1H ? *-* ? 3 7,4 H z) , 7,41 C1H, d, J 7,5 Hz ΐ *7 *Tirr ·* j ·—l*—í Í1H, d. J 7,4 Hz ), 7 , o “?* O* íiH, d, 7,4 Hz) , 6,58 “6 I, 00 (1 3H , série de jtí) , «=: =;·? { 1 u w ς w*iIm t ikiip dd , 3 14,8 e 9, 5 Hz >, sr “C* W «Sm W (IH, o, 3 8 Hz), 4,87 (ÍH, s), 4,80“ 4,65 ( •-5 H, m) , 4, 48 (1H i, dd, J 1Θ , 5 e 4 Hz) , 4,35 (iH, dd, J 10,5 e £. rr π L-f q ·_* Π z>, 4,30 -4,20 <2H, m>, 4, 1? -3,95 (4H, m), 3,84 C1H, dd, u 8,8 e 2,5 Hz), 3,81—3 ,60 í 5H, m) J! 3,55~ “7 C3H, m / JS ·»* fj i. %mí (3H, S > , 2,60 53 (2H m), 2, *5-4 (IH, m) J *“} ·~>*7 y jL. / (1H, m>, 2,18 UH, dd. 3 1 2,3 e 4,6 Hz) , 2,10-1 ,45 (14H, série de tn), 1,26 i3H, d, J 6, Θ H Z ) , 1 ,08 C3H, d, J 6,0 Hz) , 1, 14 “0,82 (87H , complexo), 0 ,82— 0, pj 5 (54H , complex o) ppm B Espe ctro de massa s F hB (matr iz ú HucjA/ S cíd x o \ t 1 massa massa calculada para ^H^j^Q^Si^NINa 4* o bse rvada 23Θ5,5 2305,3

Rf &, 3c (sílica) acetato de etilo a iB7 em n-hexano.

I

ò DESCRIC«0 12 N-t9-FIuoreniiinetpKicarbonil)-16"CÍanometll-í6-dscarbQxi"i5-0-irÍe~

ti 1 -5,5,8.9- 11, í5„55-2'' B4'~nona-~--friefilsilil5nfaterieina__B (D12)

N-<9-F1uoreni1metox icarboni1)-16-decarbox i-1fe-hidroxi-metil-13-Q--ínetil-3,5,8,9, i i , 15,35,2'' r,4'' -nona-Q-trietilsililanfo-tericina B CD5> <469 mg, @,22 mmol} dissolvida em diclorometano íà ml) foi arrefecida para. -i&*C e tratada com piridina <195 μΐ, lj3© mmol)» Esta. mistura foi tratada com uma solução de anidrido trifluorometanossulfónico mmol} em diclarametana <3 ml) adicionada por meio de uma cânula. Após agitação durante 5 minutos, uma solução de cianeto de tetra-n-butilamónio <529 mg, 1,97 mmol) em diclorometano <3 ml) foi adicionada por meio de uma cânula e deixou-se que a temperatura da mistura atingisse o valor ambiente. passados 15 minutos, a mistura foi lavada com solução saturada de hidrogenocarbonato de sódio e diluída com n-hexano. A fase orgânica separada foi seca sobre sulfato de magnésio anidro, filtrada, cromatografia Hfl de etilo a i@% concentrada no vácuo e purificada por meio de ash” sobre gel de sílica com eluição com acetato em n-hsxano para proporcionar o composto em epígrafe <D12) CIO ppm S13C 67,80 HHi

Cd,-acetona); & inclui 118,7® CIO, 16,11

3-WOBA/sódio) massa 13^212^17oX9^2^a J

Especi.ro de massas FAB (matriz observada 2204 - massa calculada para 2204,4«

Rf €í,34 (sílica) - acetato de etilo a 10% em n-hexano. DESCRIçgo 13 N-C9-F1uoreni1metox i ca rbon i1)-16-ac etox i met i1-16-decarbox i“13-Q—

meti 1-3,.5,.8,9,11,15,35,2 ' ,4' -nona-Q-trietilsililanfotericina_B CD13)

0 álcool da Descrição 5 (6,37 g, 0,17 mmol) em dicloro-metano seco <2€* ml) sob uma atmosfera de azoto à temperatura ambiente foi tratado com piridina seca (0?®55 ml, 0,68 mmol) e 4-dimetilaminopiridina (θ,021 g, 0,17 mmol) e depois com anidrido acético (®,®77 ml, 0,,68 mmol). Passada 1 hora, adicionaram-se mais piridina <®,®27 ml) e anidrido acético (0,037 ml). A solução foi agitada de um dia para o outro è temperatura ambiente e depois evaporada no vácuo§ o resíduo foi dissolvido em éter dietílico <25 ml>» A solução etérea foi lavada com ácido clorídrico ©,1N, água, solução diluída de hidrogenocarbonato de sódio, salmoura, e depois seca sobre sulfato de magnésio e filtrada» 0 filtrada foi evaporado- para dar origem a uma goma amarela» 0 produto em bruto foi purificado por meio de cromato-grafia de coluna sobre gel de sílica com eluiçSo com éter dietílico a i“4 em diclorometano para proporcionar o composto em epígrafe <DÍ3) sob a forma da uma espuma amarala (Θ.27 g). *H 270 MHZ (d“-acetona) inclui 7,9 <2H, d), 7,7 C2H, d) , 7 f 4 (4H 5 m) , ^ n & ó , Θ Í14H, complexo), 5,5 UH, dd), 5,4 < 1H, d), 3,2 Í3H, s) e 2,1 <3H, s) ppm» Espectro de massas FAB (matriz 3-NDBA/Na> massa «l» observada MNa 223ó \± i>, calculada para C H MO S 119 215 1? i9SMa, jC. /

DESCRIcao 14 N—(9—FluoreniImetonicarbonil)—16—a z i dorne t i i—i &—decarboκ i~13—O—me-tilanfo tericina B (D14)

Uma mistura do derivado azidometilo da Descrição 10 em epígrafe (2,324 g, 1,06 mmol) e solução de fluoreto de hidrogé-nio-piridina (42 ml de uma solução de 11,4 g de fluoreto de hidrogénio-piridina e 30 ml de piridina com tetrahidrofurano seco para perfazer 200 ml) em metanol (20 ml)/tetrahidrofurano <20 ml) foi agitada numa garrafa de plástico á temperatura ambiente durante 20 horas. A mistura foi adicionada a éter dietílico/n---henano (2 1, 1:1) e o sólido que precipitou foi recolhido palmeio de filtração, lavado com solução aquosa de hidrogenofosfato dissó— dico a 77., água a seco sob sucção. A purificação por meio de cromatagrafia “flash" sobre gel de sílica Celuiçlo com a fase inferior de uma mistura 3si:í de clorofórmiosmetanolssolução de amónia a 0,880) proporcionou o composto em epígrafe (D14) sob a forma de um pó amarelo claro. 7,84 Í2H. á'H 400 MHz <d4-metanol/d5-piridina 1:1)!

J 7,5 Hz), 7,7i C2H, t, J i

Hz), 7,40 Í2H, t, J 7,4 Hz>, ,30

Í2H, t, J T "T t 3 ·-.* H 7 *3 f iu f 3 6,57- 6,2 7 (12H 3 Sí 14,3 ·*? Hz) «1 W* t{ £j< 2 C1H, dd , J 14 *y i 3 ·*- 3 (1H, s), 4,78 (1H, m), 4 ,47 < 1H, ΠΙ) 3 C1H, d, J ~7 Hz) , 4,26 -4, 15 <3H ji m) -3,90 (2H , m) , 3,8 / "Ό q § 0* <3! H, m), O 3 * τ crn ·-* jí Ja. UH, {Tí } ς 3,47 C1H, dd , J 9, 2, 1 -2,4 7 (3H ? ^ ? inc luindc 1H , dd, a 2 (1H, dd, J 16 363 *-? , 3 Hz) J-5 tj .ti. ,35 < 1 H, m m), 1,49 (3H, tí 3 ϋ 6,0 H z) , 1,34 (3H, J 6, 5 Hz) •f 3 * 3 15 <3! H, d, J 7 , 1 Hz) ppffi Hz).. 3,26 (3H, s) 2 5 6Θ- J Í 6 , 6 tí j V HZ ) J 2 , 40 16-1,55 (14H, série de

Espectro de massa? FAb' (matriz 3—NGfcíA/sódio) Massa observada 1193, massa calculada o ara C,r -J-L·, M,0, -,Na , 1193,6. fe-9 sis 4 1/ DESCRIC»Q 15 16-fsniltiometil-13-Q- M-<9—Fluprenilmetoxicarbanil )-i6~dgcarbo;< -metilanfotericina B (D15)

M—(9-F1usreni1metox icarboni1)-16—decarbaxi-16-hidrax i-ffletil-"13“0~msrtilanfotericina B (D8) <0,67 g, 0,58 mmol) dissolvida em tetrahidrpfurano seco <35 ml) foi tratada com dissulfureto de difenilo <1,44 q, 6,61 mmol) s depois com tri—n—butilfosfina (1,65 ml, 6,61 mmol) a 0*C durante 6,25 horas» A mistura foi deixada em repouso a -15°C de um dia para o outro, e depois a ®°C durante mais 5,5 horas. A mistura de reacçlo foi concentrada e vertida sobre éter dietílicoshexano í i s i > (2 litros)» 0 produto amarelo foi filtrado, lavada com éter dietílico e seca sob vácuo» O material em bruto assim obtido foi purificado por meio de cromatagrafia de coluna sobre gel de sílica de fase normal com eiuição com a fase inferior de uma mistura 10sl5l de clorofórmiosmetanol:solução concentrada de amónia» 0 composta em epígrafe CD15) foi obtido sob a forma de um sólido amarelo»

6Ή 27Θ MHz C(CKOvN:COvOD (1:1))3 7,86 (2H, Hz), 7,72 Í2H, m), 7,60-7,10 (9H, complexo), 6,60-6 complexo), 6,13 C1H, dd, 3 14,5 s 7,5 Hz), 5,64 (1H, Í1H, s>, 4,84 (1H, m), 4,48 Í1H, m), 4,41 <2H, d, J d, J,20 m) 7,4 Í12H, 4,02 Hz), 4,58-4,15 (5H, complexo), 4,1® UH, m), 3,9B (1H, m), 3,90-3,35 C7H, complexa), 3,29 (3H, s>, 2,65-2,30 (5H, complexo), 2,15-1,50 (14H, complexo), 1,46 (3H, d, 3 5,8 Hz), 1,34 Í3'ri,d, 3 6,1 Hz), 1,25 <3H, d, J 5,8 Hz), 1,16 (3H, d, J 6,9 Hz) ppm. Um sinal encoberto pelo solvente»

Espectro de massas FAB (matriz 3-NOBA/sódio) massa observada 1260 - massa calculada para 1 NO^_,SNa, 1260,6, CLEPs coluna de fase invertida DBS 5μ 250 x 4,6 mm? eluents 307. metanol - 2€»% tampão fosfato pH 3,5 - Imlmiri”"^ ? comprimento de onda de detecçâo 350 nm? tempo de retenção: 16,:3 minutos DESCRIC«0 16 N- < 9-FI uof en i i mg to;< i c ar bon i i ) -1 é>~d gç a r boκ i - i 6 - f sn i 11 iome t i 1 an f o t- ericina B (Piá)

N"C 9-F1uoreni1metox icarbon iI)-1é-decarfaoK i-í é-fen i11io-metil—13-0—metilanfotericina B <D15) <β,15 g, ô,12 minai) dissolvida em tetrahidrofurarmságua (2§ί) (6 cnl) foi tratada com ácido 1θ-canforsu1fónico (Θ,07 g, €*,28 mmol) a fim de se reduzir o pH da mistura de reacç-Io para cerca de pH 2» Passadas 0,7 horas a mistura de reacçSo foi tratada com trietilamina (0,05 ml, 0,36 mmol), concentrada, e vertida sobre água (70Θ ml). 0 produto amare lo, N- (9-f 1 uoren i 1 me tox icar bon i 1) - i 6~decarbox i -16-f en i 11 ia-metilanfotericina B foi recolhido por meio de centrifugação, lavado com água e seco sob vácuo. O material em bruto assim obtido foi purificado por meio de cromatografia de coluna sobre gel de sílica de fase nornal com eluição com a fase inferior de uma mistura lôsísí de clorofórmiosmetanolssolução concentrada de amónia para proporcionar o composta em epígrafe (B16). DESCRICSQ 17 N- (9-F1 uoren j I me toxicar bon i 1) -1 fe-d ac a r bo κ i - 1 fe- i od omet i I -13-D-me t~ ilanfotericina B (D17)

OH NHfmoc N~ < 9-F1uoreni1meto x i carbon i1Ϊ — 16—decar box i-16—iodome— til-13-0-metil“3,5,8,9,11,15,35,2',4'-nona-O-trietilsililanfote-ricina B ÍBH) <2€*ó mg, ®,®9 mmol), metanol (1 ml), e solução de fluoreto de hidrogénio-piridina C3,éõ ml de uma solução ds 11,4 g de fluoreto de hidrogénio—piridina e 8® ml de piridina com tetrahidrofurano para perfazer 2®® ml) foram agitados de um dia para o outro à temperatura ambiente sob uma atmosfera de azoto numa garrafa de plástico. A mistura foi vertida sobre éter dietilico í®,2 1) e o sólido que precipitou foi filtrado e lavado com éter dietilico. Q material em bruta foi purificado por meio de cromatografia “flash" sobre gel de sílica com eluição com uma mistura Ssi de diclorometanosfnetanol para proporcionar o composto em epígrafe CD17) sob a forma de um sólido amarelo.

'63 Bè 17

CLEPs coluna de fase invertida ODS 5μ 25Θ κ 4,6 mm* eluente 8Θ% metanol - 2®% tampão fosfato pH 3,5 - 1 mlínin-^ i comprimento de onda ds detecçSo 35® nmg tempo de retençãos 9,B minutos.

DESCRIçKO ÍS N- ( 9-Γ1 uoren i Imetosí ic ar bon i 1) -1 6—rfec arboK i- í 6— iodomet i 1 anfoter ic-ina B (D18)

y—/ο-piuoren i1metoK icarbon i1) — 16—decarboKi—1 ó—iodoíne— til—13—0—metilanfotericina B (D17) {66 mg, €*,®5 mmal), dissolvida numa mistura 2;í de tetrahidrofursnoságua (3 ml), foi tratada com |3— toluenossu.lfonato de piridínio (9® mg, Θ,36 mmol) à temperatura ambiente. Passadas 2 horas, adicionou-se trietilamina <7®μ1, ®,5 flimal), e a mistura foi concentrada e vertida sobre água (1&Θ ml). O produto foi lavado com água e purificado por meio de cromato-grafia sobre gel de sílica usando misturas de diclorometano/meta— nol como eluente para proporcionar o composto em epígrafe (Bí8> sob a forma de um sólido amarelo.

Espectro de massa; FAB (matriz 3—NOBA/sódio) massa observada 1264 - massa calculada para C^Hp^O^fsilNa*, 1264.

CLEPs coluna de fase invertida QDS eluente 8®X metanol - 2®% tampão fosfato pH comprimento de onda de detecção 35® nms tempo minutos. 5μ de 25® 4,6 mffi n, . —1 mimin « tençãos 18,8

J DESCRI cm 19 N- (9-F1 uor sn i 1 metox icarbon 11)--1 í-c i anom-et i 1-i 6-der __ -----------Οΐ_οοχ j—i .1-.—Q-me- tilanfotericina B (519)

N-< 9-F1uoren i1metox icarboni1)-í 6-c ianometi1-1ò-decarbo-Ki-13-Q-meti1-3,5,3,9,11,15,35,2',4'-nona-Q-trietiIsi1ilanfateri-cina B (D12) (314 mg, ®,14 mmol), metanol(1,5 ml), e solução de fluoreto de hidrogénio-piridina (5,75 ml de uma solução de 11,4 g de fluoreto de hidrogénio—pzridxna e tí® ml de piridina com tetrahidrofurano para perfazer 2®® ml) foram agitados de um dia para o outro sob uma atmosfera de azoto à temperatura ambiente numa garrafa de plástico. A mistura foi vertida sobre uma mistura 3s2 de éter dietílicosn-hexano (®,45 1). 0 produto que precipitou foi filtrado e seco no vácuo para proporcionar o composto em epígrafe CD19) sob a forma de um sólida amarelo»

Espectro de massas FAB <matriz 3-N08A/sódio> massa observada 1177 - massa calculada para ^N^Na , 1177,6« CLEPs coluna de fase invertida DOS 5μ 25® κ 4,6 mm? — —1 eluente 83% metanol - 17% tampão fosfato pH 3,0 - 1 mlmin ;j comprimento de onda de detecção 35® nm; tempo de retençãos 5,7 minutos.

Rf ®,45 (sílica) - metanol a 11% em diclorometano. DESCRIcao 2® N—(9-FluorenilmetoKicarbaniI )—ife—cianometil— 16—decarboKianf oterj— cina B (Ρ2Θ)

J

N-(9-F1uoreni1metox ic arbon i1>-16-c ianometi1-16-dec ar ho-xi-13—0—metilanfotericina B ÍD19) (1®3 mg? 9 mmol) dissolvida numa mistura Ξϊί de tetrahidrofuranoságua C7 ml; foi tratada com a-toluer.ossulfanato de piridinio (125 mg, &?5® mmol; á temperatura ambiente. Passadas 2 horas, adicionou-se trietilamina <85 μΐ, ®,6® mmol; e a mistura fox vertida sobre água <·ϋ~ ml)« 0 pre*_i— pitado foi isolado por meio de centrifugação e purifxcado por

X' meio de cromatografia de pressão mediana sobra gel da sílica, com a fase inferior de misturas de clorofórmiosmetanolsamánia a 0,880 para proporcionar o composto em epígrafe (D20) sob a forma de um sólido amarelo» DESCRIÇÃO 21 N-< 9-FluoreniImetoxicarboni1)-16-acetoximetil-lé-decarboKÍ-15-Q— metilanfotericina B (D21)

I

0 composto da Descrição 13 (0,.27 g, 0,12 mmol) foi dissolvido em tetrahidrofurano saco <4 ml) numa garrafa de plástico sofa uma; atmosfera ae azoto a 0°C» Adicionou-se metanol seco (1 ml), e depois fluoreto da hidrogénio—piridina (5 ml de uma solução feita a partir de 11,4 g de fluoreto de hidrogénio--piridina em 80 ml de piridina com tetrahidrofurano seco para perfazer 2Θ0 ml). Deixou-se que a temperatura da mistura de reacção atingisse o valor ambiente s agitou—se esta durante 24 horas. A solução foi vertida sobre uma mistura de éter dietílico e n-henano <2ϊ1, 2@€> ml de volume total). Q precipitado sólido foi recolhido por meio de centrifugação, lavado com éter dietíli-cd, dissolvido em metanol e a solução foi evaporada para propor-

J cionar o composto em (0,13 g)» í'H 27õ MHz d), 7,,7 <2H, d), 7,3 dd)5 5,6 UH, dd), (3H, d), 1,3 (3H, d) epígrafe (.021) sob a forma de um pó amarelo 4 3 íd -metanol/d""-pi.ridi.na 1; 1 > inclui 7,8 Í2H, (4H, m), 6,6-ò,2 (13H, compleno), 6, 1 (IH, 4,9 ÍÍH, s), 3,3 <3H, s) , 2,1 <3H, s), 1,5 , 1,2 (3H, d) e 1,1 (3H, d) ppm, observada

Espectro de massas MNa+ 1210, calculada

J FAB (matriz 3-NOBA/Na) ara C , 1210.. . ma- & DESCRICSO 22 N-(9~FluorenilmetoKÍcarhonill-là-acetoKimetil-lò-decarboKianfote-ricinaB (D22)

N“< 9-F1uoreniImeíok icarbon i1-1ô-acetox ime t i1-i 6-decar-baxi-i3-0~metilanfotericina B* (D2Í) (0,17 g, 0,14 mmol) foi dissolvida em tetrahidrofurano (4 ml) e água (1 ml) e tratada com a-toluenossulfonato de piridinio (€5,26 g, 1,0 mmol). Passadas 0,8 horas trietilamina (0,16 ml, 1,2 mmol) foi adicionada e a mistura foi agitada durante 0,1 horas. A mistura de reacção em 49 - bruta fai vertida sobre água (25Θ ml) e o sólido que precipitou foi recolhido por meio de filtração e seco no vácuo» 0 produto foi purificado por meio de cromatografia de coluna sobre gel de sílica com eluição com misturas de 10% metanol/acetato de etilo para proporcionar o composto em epígrafe CD22>« DESCRIcKO 23

Carbonato de alilsuccinimidilo (D23)

I

Uma mistura de N~ h i d r ο κ i suc c i n i m i d a (4,78 g, €),,042 mol) e cloroformato de alilo <5,0 g, 4,04 ml, 0,€)42 mfflol > em tetrahi-drofurano seco (ó0 ml) foi arrefecida, para 0°C sob uma atmosfera de azoto» Uma solução de trietilamina (4,2 g, 5,78 ml, 0,042 mol) em tetrahidrofurano (2® ml) foi adicionada gota a gota ao longo de 20 minutos» Uma vez completada a adição, a mistura foi agitada á temperatura ambiente durante 4 horas e depois filtrada e concentrada. Adicionou-se acetato de etilo (20® ml) e a solução resultante foi lavada sequencia1mente com água (3κ), solução saturada de bicarbonato de sódio e água <3x>« A secagem ÍMqSO.) e a remoção do solvente no vácuo proporcionaram o compos— i to em epígrafe sob a forma de um óleo límpido, incolor. <D23). 5,96 <1H, ddt, d í / 3 5 i 0,4 , 6,1 :,7, 1,4 Hz), 5,38 <ÍH, ddd, J 10,2, J 6,1= 1,4, 1,1 Hz ), 2,84 (4H, s). •5Ή 270 MHz (CDCl^) Hz), 5,45 UH, ddd, ã 17,3, 2,2, 1,1 Hz), 4,79 <2H, ddd.

Espectro da massas FAB (glicerol) massa observada 2€)®, massa calculada para 200¾ Alta resolução a observado 200,0560, calculado 200,0559» DESCRI C-KQ 24 N-ftl 1 i Iqk icarbon i 1-1 ó-gz idoroetiI-lò-decarbox i-iS-Q-metil anf oter i-cina B (D24) OH OMe

A amina do Exemplo 2 <482 mg, θ55Θ8 mmol) , carbonato de allilsuccinimidilo (202 mg, l?{á2 mmol) e piri.di.na (6€ί,ύ mg, 0,062 ml, 0,762 mmol) foram agitados em conjunto em dimetilformamida (5 ml)/metanol <1,5 ml) à temperatura ambiente sob uma atmosfera de asoto» Passadas 2 horas, a mistura foi adicionada a êter/hexano (5: í, 11). 0 produto que precipitou foi recolhido por meio de filtração, lavado com éter dietílico e depois dissolvido a partir do filtra cam metanol» A remoção do metanol no vácuo proporcionou o composto em epigrafe sob a forma de um pó amarelo íD24> *

Espectro de massas FAB (tiodietanol/sódio) massa 51

DESCRIÇÃO 5'-M-ftliloKÍcarbonil-16-aminQfflstil-l&-decarboxi~i5-o-metilanfpte- ricina B CD25)

1706, 164Θ,

6,58—6,27 Í1H, m) par ciai 1,2 Hz) , J 9,3 A azida da Descrição 24 C484 mg, 0,469 m/nol) e trietil-fosfina (289 mg, 0,361 ml, 2,44 mmcl) foram agitadas em tetrahi-drofurano (1® ml> à temperatura ambiente sob uma atmosfera de azoto» Passados 30 minutos, adicionou-se água <0,5 ml) e a mistura foi submetida a refluxo durante 30 minutos» 0 solvente r foi removido e o resíduo foi cromatografado sobre gel de sílica (eluição com a fase inferior de misturas clorofórmio/metanol/amónia a 0,88€s> para proporcionar o composto em epígrafe sob a forma de um pó amarelo <B25)» IV Visax (disco KBr)s 3421 (amplo), 293^ 1517, 1384, 13X3, 1186, ϋ3θ» 1Θ69, 1010 cm"1. £H 4ô0 WHz (d^-metanol/dcj-piridina Isl); (12H, série de m), 6,12 (1H, dd, J 14,3, 7,7 Hz), 5,95 5,58 (1H, dd, J 14,4, 9,7 Hz), 5,52 Í1H, m), 5,31 (1H, mente encoberto pelo solvente), 5,15 C1H, dd, J 10,5, 4,83 (1H, s), 4,73 (1H, m), 4,6Θ (ΞΗ, m>, 4,47 Í1H, tt

I

nT 3,2 Hz), 4,25 ^ 1 ϊ*ι , d d, w 10, / , 4,7 Hz) , 4,21 < 1H, m), 4,18 CÍM, d, J 2,8 Hz), 4,V? IJ f ώ C3H, m), 3,82 C1H, m / 5 3,71 C1H, m), 3,50-3,4© <3H, série de m ) , O g 29 Í1H, dd, J 1 n> o <2* *· 5 ' ? 2,3 Hz), •v «ncr C 3H, s), 2,9© C1H, dd, J n q J, *m κ f q 7,1 Hz) *> =;í, ς .w j» w w Π.Η, ffl), 2,51 C1H, dd, J 16,5, 9, 0 Hz), 2,41 C1H, m) , 2,4© í 1H, dd, J 16,6, 3,3 Hz) , jú. jL. s (1H, m), 2, 14-1,92 C5H, série de m) $ Xo3*-* 1 jw*-j C9H, série de m) ? l 5 4¾ C3H, d, d 6,1 Hz), 1,35 C3H, d. J 634 Hz >? 1,24 í 3H, d, tJ émt ς vJ Hz) , 1,16 C3H, d, J 7,2 Hz) ppm*

Espectro de massas FAB observada 1029, massa calculada para C tiodietanol/sódio) _fNa 1 ©29,5« i /

DESCRIÇÃO N—A1i1QKicarbon11—1& ericina B (D2é>) t am i d orne t il-~l á-dscarbo;·; 1—15—Q-metil anfot—

mmo1) em

Uma solução da amina da Descrição 20 (i®0 dimetilsulfóxido (1 ml)/metanol Í3 gotas) foi mg, ©,1©0 agitada á temperatura ambiente e tratada 15,4 mg, 0,15€> mmol) . Passada metanol Cl ml) e adicionada a cdíTí anidrido acético (©,©14 1 hora, a mistura foi diluída éter C4©0 ml). ml, com 0 produto que

precipitou foi recolhido par sueia de filtração, lavado com éter e depois dissolvido a pa.rtir do filtro com metanol» A remoção do •solvente no vácuo proporcionou o composto em epígrafe <D2ó).

Espectro de massas FAB {tiodietanol/sédio)» Massa observada 1071, massa calculada para C^H^O^gNa* 1Θ71,ó, DESCRICKQ 27

J

Fluorenilmetoxlcarbonil >—16—decarboxi—lò—CriietoxifQsf Drairiiri— o>metil-í5-0-metil-5a5a8il9, li »15.,35.2' .4J-nona-Q~trietilsílilanf~· otericina B <D27)

J OTES oMe

Uma mistura da azida da Descrição 1Θ (3ΘΘ mg, 0,136 minai) a trietilfosfito <226 mg, 0,233 ml, 1,36 mmol) em tetrahi··-drofurano seco (8 ml) foi submetida a refluxo sob uma atmosfera de azoto durante 3 horas. Adicionou—se água <0,1 ml) e a mistura foi submetida a refluxo durante mais i hora, 0 solvente foi removido no vácuo e o produto em bruto foi purificado por meia de cromatografia “flash” sobre gel de sílica Celuição com misturas de acetato de etilo/hexano) para proporcionar o composto em epígrafe sob a forma de uma massa vítrea amarela íD27))»

- ΓΊ.& •5Ή 40© MHz í D., -acetona) s

O i2H, d, J 7,4 Hz), 7,42 Í2H, t, J Hz) , és, 52—6 1=·. CT.1 4 11

J 1H e 3 3 A, *

J 7,87 (2H, d, J 7,5 Hz), 7,69 i, J 7 5 4 Hz) ? * "ΤΛ , <_P*T < 2H, t , J 7,4 íTf ) 3 6,04 (1H, dd , J 1 sr er 4_i 3 3 6 ,0 Hz) , > «=S 5 -3 30 ( 1H , d, J 9,8 H z), 4, 86 (1H, / ÍHP dd. ϋ 10, 4, 6,5 H z). 4,: 34 (1H, 2 2 < 2H, ffi) ? 14- 3,90 i SH, série de Ύ. oer_ 3 QJ 3,54 { 6H, sér ie de m), , 5Φ- 3,42 jL . 39 (3H, m ) ^ ·ϋ» ?V ^ - <1H, m), ,15 { ÍH, ‘ 3 4 Hz ), 2 3 %? 5-1, 42 i 13H, sér ie de m>, dd, J 14 ,8, 9,6 H g &I C2H, m), 4,47 15 £> ,5 Hz ), 4 ,28-4 ÍH? d , ϋ O *7 jí. 3 / Hz), 5 1 1 í 3H, s) 3 “ £,,-¾. jL ^ Qw 1H, dd. 1 10 u 1 jL. 3 ·£· p Í9H , m, iacl uirsdo J 6,Θ Hz), 1,10—0,88 <87H, série de m> m)« 1,31-1,24 Í9H, m, incluindo 3H, d, J 6,8 Hz a 1,29), 1,18 (3H, d, -0,57 C54H, série de

Espectro de massas FAB (NoBA/sódio) massa observada 2330, massa calculada para C„N,Q4C.Na+ 2330,4, 48 /e> 4 15 ? DESCRIÇÃO 28 N— (9-Fluoreni ImetoKicarboni i ) -1 fc--tiecarbsκ 1—16—sTígti I - í5-Q-met iI-3-,5,8,9,11„15,55,2',4'-nona-O-trietilsililanfotericina B CD28)

J OTES oMe

Μ- {9-FI uo r en i 1 me to x i c ar ban i 1) -16-decs r bo x i-16- iodorne-· til-i3-0-metil“3,5,8,9, 11,15,35,2' ,4'-nma-0“trietilsililanfote” ricina B (Bíl) (1,233 g, 0,54 mmol) dissolvida em tetrahidrofura-no (18 ml), foi arrefecida para "10°C e tratada com trietilboro-hidreta de litio <6,5 ml de uma solução de tetrahidrofurana ÍH, 6?5Θ mmol)» Passados 2:0 minutos a mistura foi lavada com solução saturada de cloreto de amónio» 0 extracto orgânico foi seco sobre sulfato de maanésio anidro» filtrado» concentrado no vácuo e depois purificada por meio de cromatagrafia "flash" sabre gel de sílica usando acetato de etilo a 9% em n~-hexs.no como eluents, para proporcionar o composto em epígrafe CD2S). 6Ή 270 MH z (d^-acetona )s 7,88 (2H, d, 3 7,4 H Í2> , 7,70 C2H, d, J 7,4 Hz), 7,45 í1H, rf, J 7,4 Hz), 7,42 (1H, d, J 7,2 Hz), 7,36 <1H, d, J 7,4 Hz), 7, 33 CiH, d, J 7,4 Hz), C íC Cai ^ wW "6,00 U3H , série de m) ·., 5,50 (ÍH, dd. d 15,1 e 9,6 Hz), 5,41 (ÍH, d, 3 9,9 Hz), 4,7® <1H, s), 4,69-4,57 C 2H, m), 4,48 (1H, dd, J 10 »3 e 6,5 Hz), 4,35 (ÍH, dd, J 10,4 e 6,3 Hz), 4,30-4,19 (2H, m), 4,11 (ÍH, m), 4,00 <ÍH, ffl), 3,91 (1H, d, J 2,8 Hz), 3,Só CÍH, ffl) , 3,81 —3,53 í 5H, m), 3,48 (ÍH, t, 3 8,9 Hz), 3,35 Í1H, m), T ! 4 * ã. 1 (3H, s), 2,58 í2H, m), 2,45 (1H, m), 2,30~ i,3Θ (16H, sér ie de m), 1,25 (3H, d, 3 6,1 Hz), 1,18 <3 H, d, J 6,1 Hz), 1,14-0, 82 <90H, complexo) , β,32--©,52 (54H, complexo) ppm»

Rf 0 ,36 (sílica) acetato de etilo a 10% em n-hexano

5ô -

J

J DESí H~ ( 9-FlUPrg^3.iffletDKÍcarbQnil)--í&-dscarboKÍ-16'-metil-Í3-0-ffletilan-fotericina P 0)29)

Uma mistura do derivado ié-metilo em epígrafe da descriçSo 28 (516 mg, €>,239 mmol} e solução fluoreto de hidrogé-nio-piridina \6,5 ml de uma solução de 11 ,4 g de fluoreto de hidrogénio-piridina e 8@ ml de piridina com tetrahidrofurano seco para perfazer 2@θ ml> em metanol (2 ml)/tetrahidrofurano (2 ml) foi agitada numa garrafa de plástico à temperatura ambiente durante 2Θ horas» A mistura foi adicionada a éter dietílico/n-—hexa.no (2 lj 1:1) eo sólido que precipitou foi recolhido por meio de filtração, lavado com éter dietílico e seco» A purificação por meio de cromatografia "flash” sobre gel de sílica <elui-ção com a fase inferior de uma mistura l®slsl de clorofórmiosmetanol ísoluçáo de amónia a @,88Φ) proporcionou o composto em epígrafe sob a forma de um pó amarelo C£29)»

Espectro de massa; KAE' (matriz tiodietanol/sódio) massa observada 1152,5, massa calculada para C,,H-.-.0«-,NNa+. o·-» 8/17 1152,6.

invertida QDS 5μ tampão fosfata pH 35® nmsj tempo de

CLEP eluente 02% de •comprimento de minutos» coluna de fase metanol - 18% de onda de dstecção 25© ;·; 4,6 mm; 3,5 - 1 mlmin 1; retençãos 6,7 i EXEMPLO 1 lò-AzidomefciI~16-decarhoxianfotericin-a B (El)

I

HO OH

A azida em epígrafe da Descrição 14 (€*,424 g, ©,3é2 mmol) e p-toluenossulfonato de piridínio <©,375 g, 1,42© mmol) foram agitadas em tetrahidrafurano <15 ml)/água <5 ml) à temperatura ambiente. Passada 1 hora, adicionou-se trietilamina í©,187 g, ©,257 ml, 1,85© mmal) e a tetrahidrafurano foi removido no vácuo. O resíduo aquoso foi adicionado a água <8©© ml) e o produto que precipitou foi recolhido por meio de filtração, lavado com água e seco para proporcionar um pé amarelo» Este produto foi dissolvida em dimetilsulfóKida <1© ml)/metanol <2 ml) e tratado com piperidina <©,©4© g, ©,©46 ml, ©,465 mmol). Após agitação â temperatura ambiente durante 1 hora, adicionou-se outra porção de piperidina í©,©15 ml) e a prosseguiu-se com a agitação durante mais 30 minutos» A mistura foi diluída com metanol (8 ml) e adicionada a éter dietíiico 81 1>« 0 produto que precipitou foi recolhido por meio de filtração, lavado com éter dietilico e seco» A purificação por meio de cromatDgrafia sobre gel de sílica (eluição com a fase inferior de uma mistura 4slsi de clorofórmidsmetano1ssolução de amónia a 0,880) proporcionou. o composto em epígrafe (Ei) sob a forma de um pó amarelo» IV vmax (dl SC o KSr) s 2< 47® (amplo), 291 0, · 2®’d5 , 17®5, 1445, 1175 , 1055, 100 --J 5 88©, 845 c -1 iTi c 4®0 MHz Cd4-metanol /d5-piridina is 1 > s 6 ,66—6,26 (1 3H, sá ri s de m) , 5, 61 (1H, dq, J 6,3, 2,® Hz), 5 ,49 (1H , dd, J 14 ,6, 1Θ, 1 Hz ) , 4 ,84 { iu 47 *5 »J *2··' 3 ‘ J » 2 (1H, sn), 4,64 -4,! 53 <: 2H, m), 4, 44 (1H, tt, J 9 “7 3 / 5 5 ~T U~?\ ã. 7"?, t 3 1 im. r % t q ϋ,·η< (1H, dt, 3 1€^,7 , 4 ,6 H z), 4,16 (1H, d, 3 3,1 Hz) 5 5 94 (1H, m) , 3 ,88-3,82 (2H, m) 3 ,78 (1H, dd. J 12, 8, 2, 6 Hz) , T SM ς wv •m! ,39 (3H, m> , 3,3ô (1H, dd, 3 9 ,5, 1,8 Hz), ·&. 3 81 UH, dd, 3 9 3 4 3, 1 Hz), 2,60 -2,46 <2H, m), 2 ? 4 / C1H , dd, 3 16 ,9, £3 V * 5 * Hz, A d 0 SÍ ema ABX), 2 r,34 (1H, dd, J 1 6,8 r-\ 7 Hz, B de si stema ABX), 2,30 C1H, dd, 3 12,2, 14,7 Hz), V i ·*— H 09 í 1H, m), o -*-· 3 ®3~ •1,45 (13H, Ξ ária d em), 1,44 (3H, d, J 5,7 Hz >3 1,34 (3H, d, ã 6,4 Hz) , Ι,23 < 3-H, d. ã 6,4 Hz), 1,15 (3H, d, 3 "? n* • 3 «*— Hz) ppm»

Espectro de massas FAB observada 957,5, massa calculada i ííis un z ϋυυ ietanus 1 / Scsd xo / ina^ssa para 957,5» jt

EXEMPLO 16-Azidorneti Ι-16-decarboκ x~i Çp-metilanfotericina B CE2)

O composto em epígrafe da E»escrição 14 ί€>,319 g, €>,334 mmol) e piperidina Cθ,Θ57 g, Θ,66 mi, 0,668 mmol) foram agitados á temperatura ambiente em dimetilsul f óíiido <5 ml) /metanol .(€>55 ml)» Passados 3Θ minutos a mistura foi diluída com metanol (3 ml) e adicionada a éter dietílico (1 1). - 0 produto que precipitou foi recolhido por meio de filtração., lavado com éter dietíli-cq e seco» A purificação por meio de cromatografia de coluna sobre gel de sílica (eluição com a fase inferior de misturas clorofórmios metanolsamónia a 0,880) proporcionou o composto em epígrafe (E2> sob a forma de um pó amarelo. IV vsBãK < d isco KBr) 1450» 137Θ, 1305«, 1135«, 1060, 101Θ, 8S5, 850 cm 3460 (amplo) 3 293®, 2110, 1720, 1 5H 400 MHz <d4-metanol/d5'-piridina lsl)s 6,56-6,26 (12H, série de m), 6,09 <1H, dd, J 14,4, 7,2 Hz), 5,61 (1H, dd, J 14,3, 935 Hz), 5,45 (1H, m>, 4,84 <1H, s), 4,78 (1H, m), 4,44 (1H, m), 4,21-4.,13 (3H, m), 4,05 Í1H, m), 3,96 Í1H, m), 3,94 <1H, dd, >3 12,7, 3,5 Hz), 3,82-3,76 \ 2H, m), 3,52-3,36 C4H, m), 3,25»

V V í 3H, s), 2,80 (1H, m), 2,56-2,4 5 <3H, m, .inclu indo 1H, dd , J 16,6, 8,8 He a 2,5Θ), 2,39 <1H, dd, a 1 £3 , Ο , -J, 4 He), 2,37 < ÍH, m), 2,05-1,35 C14H, série de m) 5 1,44 (3H, d. 3 1--’ S| / He) , 1,33 í3H, d, J 6,4 1 Hz), 1,23 C3H, d. J 6,5 He ), 1,14 <3H, d , ã 7 ,1 Hs) ppm. FAB (matriz tiodietanol/sódio) *Ί~ calculada para hLCL„Na , hcj / ο Η 1 vj

Espectro de massas massa observada. 971,5, massa. 971,5. EXEMPLO 3 16-Amiπorneti1-16~riecarboκi-i3-0-metilanfotericina B CE3)

Método A

Uma mistura do composto asida em epígrafe do Exemplo 2 (0,095 g, €s5S98 mmol)5 trifenilfosfina <0,128 g, 0,49 mmol) e água (0,040 ml) (0,018 g, 0,018 ml, 1,Θ0 mmol) em tetrahidrofura— na <10 ml) fai agitada à temperatura ambiente durante 1 hora.

Adicionou-se mais égua (0,04© ml) e a mistura foi submetida a refluxo durante B horas. A concentração? seguida de purificação por meio de uma combinação de cromatograf ia de coluna e CCF preparatória sobre g©i de sílica (eluição com a fase inferior de uma mistura 2si;i de clorofórmiosmetanolssolução de amónia a 0,880) proporcionaram o composto em epígrafe (E3), IV vraax (diSCO 1440, 1375 1^15 $ ó ·- i- ·>~- j 1060 h 5Ή 40Θ MHz (> (12H, sé ri e de m) > 6,13 14,2, 9,8 Hz), 5 s 51 UH (1H, tt, 3 9,3, 3 »2 Hz), Hz a 4,18) , 4,02- 3,91 ( 3380 (amplo), 292©, 1720, 1580, -me tano1/d5-pi rid ina í;l)s 6,58—6,28 í, dd, J 14,1, 7,6 Hz), 5,59 Í1H, dd, J ri), 4, tio (1H, s), 4,7a (ÍH, m), 4,47 o,2 Hz), 4,33-4,15 (3H, m, incluindo 1H, d, J 2,9 I, m), 3,81 (1H, m), 3,57-3,40 (4H, m, parcialmente encohertoporpicos do solvente), 3,36 (1H, m), 3,25 O ,94 (5H, série de m), J 14,0, 3,3 Hz), 1,44 5 i ,25 (3H, d, 0 6,5 Í3H, s), 2,98 (1H, dd, J 12,9, 7,3 Hz), 2,92 C1H, dd, 3 9,3, 2,8 Hz), 2,56 <1H, m), 2,52 (1H, dd, 3 16,7, 9,1 Hz, A de sistema ABX), 2,46 <1H, dd, J 12,7, 4,6 Hz), 2,4Θ (1H, dd, J 16,6

Hz, B de sistema ABX), 2,32 UH, m), 2,16-1,94 Í5H, série de m) 1,84-1,62 <8H, série de m), 1,59 C1H, d’ (3H, d, 3 5,8 Hz), 1,35 C3H, d, J ó,4 \

Hz), 1,16 (3H, d, J 7,2 Hz) ppm.

Espectro de massas FAB (matriz 3—MOSA/sódio) massa observada 954,4, massa calculada para C,oH_N„0<eNa+, 945,5. 48 /8 2 15 *

Método B

Uma mistura da a^ida em epígrafe do Exemplo 2 (0,101 g, 0,104 mfflol), propano-i ,3-ditiol (0,113 g, 0,104 ml, 1,04 mmal) e trietilamina <0,i©5 g, 0,145 ml, 1,04 mmol) em metanol seco (4 ml) fax agxtada à temperatura ambiente sob uma atmosfera de

horas a mistura foi adicionada azoto. Passadas 53 lico/n-hexano (5ΘΘ mi 3 i s1> s a éter diet.i-0 produto que precipitou foi recolhido por meio de seco. A purificação gel de sílica (eluição de clorofórmiosmetanol centrifugação, lavado com éter dietílico e por meio de cromatografia de coluna sobre com a fase inferior de uma mistura 2:1 si ssolução de amónia a 0,880) proporcionou o composto em epígrafe <E3).

Método C m a £ i q a em epígrafe ao exemplo i», g« mmol) , 0,620 mmol)· foram agitada-temperatura ambiente sob minutos, adicionou—se água a refluxo durante 1 hora

Si uma (0,2 A e trietilfasfina (0,73 g, 0,92 ml tetrahidrofurano seco (12 ml) â atmosfera de azoto* Passados 30 ml) e a mistura foi submetida concentração e purificação composto em epígrafe (E3)» como nu Mêtudo B proporcionai· am o EXEMPLO 4 16- Dec a r bo x i — 16— f sn i 1 ti oas til an fotericina b

J A N— i 9—f 1 uorsn i 1 metox icarbon i 1) -16—decarbox i— i 6—f eni 1 — tiometilanfotericina D <Di6) purificada \6® mg,, ®,®53 mmol) dissolvida em dimetilsulfóxidosmetanol Í3,5sl) (1 ml) foi tratada com piperidina (0,11 ml, ©,líi mmol)» Passada 1 hora e depois de se adicionar metanol (1 ml), a mistura de reacçSo foi vertida sobre éter dietílico <3©θ ml>« 0 produto em epígrafe, lé-deear—

J 6,35 (1H, m), 5,50 (1H, dd, J 14,8 e Ιβ,ϊ Hz) •acolhido por maio teco s*jb V á C U O a •Z?& (2H, m), mm. Μ,», / ? ia) 3 6,39 ÍÍH, m), Si ** *i 85 Í1H , s), 4,79 7 s 2,9 Hz) , 4,4® Hz >, 4,0 (1H, ffl) , 3,87 (1H, m), 3,55-3,35 (6H, complexo, parcialmente encoberto por picos do solvente), 2,70 C1H, dd, 3 14,6 e 5,4 Hz), 2,63 (1H, dd, 3 9,4 e 3,1 Hz), 2,57 ÍÍH, m), 2,49 <ÍH, dd, J 16,8 e 9,7 Hz, A de sistema ABX), 2,34 (1H, dd, 3 11,9 e 4,9 Hz), 2,2®-l,45 C14H, complexo), 1,42 <3H, d, 3 5,9 Hz), 1,36 C3H, d, J 6,4 Hz), 1,25 (3H, d, 3 6,4 Hz), 1,17 (3H, d, 3 7,1 Hz) ppm»

Espectro da massas FAB (matriz 3—NOBA/sódio) massa observada 1®24 - massa calculada para J4 '40^SNa, 1024,5» wO /7 1ϋ ílKfl p 1 CLEPs coluna de fase invertida ODS 5μ 25® x 4,6 eluente 83% metanol - 17% tampão fosfato pH 3,5 - 1 mlmin comprimento de onda de detecção 35® nm, tempo de retenção* 11,5 mxnutos, 64

EXEMPLO 5 16-Decarbo« i-- í6-iodoatet.i 1 anfoier ic ina B (Ea)

0 composta da Descrição 18 (58 mg, θ,©4 mmol), dissolvido numa mistura 3,5sl de dimetilsulfóKido/metanol (1,5 ml), foi tratada com piperidina (1® μΐ, ®,®9 mma1)» passadas 2 horas, a mistura de reacção foi vertida sobre éter dietílico {®,2 De o sólida que precipitou foi filtrado e lavada com éter dietílica» 0 material em bruto foi purificado por meio de cromatografia "flash” sobre gel de silica com eluiçSo com a fase inferior de misturas de clorofórmiosmetânolsaraónia a ®,88® para proporcionar α composto em epiqrafe <E5> sob a forma de um sólido amarelo»

«H 40® MHz (d = —metano d. 1/dr- vJ -pi rid ina) £ 6 , 7®—6 , 2® < 1 3H, série de m), 5,62 C1H, π»; >, 5,51 (1H, dd , 3 14, 8 e 10,1 He) , n ,99 C1H, s), 4,8® » < 1H , ffl ) , 4, j63 C1H, ra), 4, 5o (1H, m >, 4,47 (1H, m), 4,39 (1H , d. J 3 ,1 He - 3 4,10 í 1H, ffl> 5 4 ,08- 3 91 < 2H, m) , y ,88 <1H, ffl) , 3,6® f O 5 *-» 3 (5H , - série de ffl), O -í- J 91 (1H, ffl) , -4- * -2,3® ( 5H, série de m >, O -1,40 {; L4H, comple;< o J , 1 ,47 (3H, d, d 5,5 H z) , 1,36 Í3H , d, ϋ Ô g 4 He >3 4 í~.C - t » i , .i-O \ ..jri, u 3 d 6 ,4 H Ξ > , 1,17 <3H, d. J 7,1 He) ρρπ».

Espectro de massas FAB (matriz 3-ívQBA/sódio) massa — .4* observada I©42 - massa calculada para C^-,H_,ó^OjgNINa , 1042,4. CLEF': coluna de fase invertida GDS 5μ 250 x 4,6 mm; eluente 8©% metanol - 2€?% tampão fosfato pH 3,5 - 1 mlrnin""1 ; comprimento de onda de detecção 350 nm§ tempo de retençãos 12,4 minutas. EXEMPLO 6 16—Cisnoineti 1 —1ó-decarbPxi-i3-0-metilanfotericina B (Eè)

N-(9~F1uqren i1me toxicarbonil)-16-cianometi1-16-decarbo~ xi~13—O-metilanfotericina B (B19) C63 mg, 0,05 mmol) dissolvida numa mistura 3,5sl de dimetilsulfóxida/raetanol <1,5 ml) foi. tratada com piperidina <11 μΐ, 0,11 mmol). Passada 1 hora, a mistura de reacção foi precipitada vertendo-a sobre éter dietili·*· co 03,4 1), e depois filtrada e lavada com éter dietílico» O material em bruto foi purificada par meio de cromatografia “flash" sobre gel d® sílica com eluiçSo com a fase inferior de misturas de clorofórmiosmetano1samónia a 0,880 para proporcionar o composto em epígrafe <E6) sob a forma de um sólido amarelo.

AH 400 MHz (d.-metanoI/d,-- pir idina, i 51> 6,60 w tf .Ρ,ϋ í12H, sér ie de íí! ) ? 6314 (ÍH, m)3 5,66 ( 1H, dd, J 14,3 e 9,5 Hz >, 5,6Θ~530 \ 1H, encoberto por pico do sol vente)3 4,93 (1H, s> 3 4,83 (1H, m) 5 4,47 (IH3 m>, 4 3 26 (1H 3 d h J 3 3 2 Hz), 4,30 -4,10 (3H, série de ffi ) 5 3398 (1H, m)3 3,82 J Λ K 1 Η, ιη) 3 3,60-3,35 (4H 3 série de m), *^T «í-fe··? ·-* n (3H3 s)? 3315 (1H, dd, J 17,5 e 3,9 Hz) , **7 QL·_O Oâ ώ í| 7 U1 A» *f W V (2H, m> 5 2,70—23 35 (5HS série de m), 2,12-1,53 í 14H, complexo) , 1,4 5 (3H 3 d, J 5,6 Hz), 1,3 4 <3H, d3 J 6,3 Hz), 1,25 (3H, d, J a, 5 Hz >, 1,15 (3H, d 3 3 7,1 H z) ppffi» CLEPs coluna de fase invertida. U.OS 5μ 25Θ κ 4,6 nunj “1 eluente 80% metanol - 2&% tampão fosfato pH 3,5 - í mlmin ; comprimento de onda de dstecção 350 nmg tempo de retençãos 7,1 minutos. IV vmax (disco KBr) 340Θ (amplo), 2925., 163! í 4405 1378, 1319, 1134, 1Θ67, 1012, 087, 850 e 795 cm

J

EXEMPLO 16-Cianometil-lé>-decarbpxianfptericina B (E7) observatí

Espectro de massas 955 -· .massa calculada FAB (matriz 3—NQBA/sódio) para C^H^N^O^Na*, 955,5 massa

nh2 OH 0 composta da Descrição 2® (48 mg, ©,©4 mmol), dissolvido numa mistura 3,5si de dimetilsulfóKido/metanol (í,25 ml) foi tratado com piperidina (9 μΐ, ©,®9 mraal)» Passadas 1,25 horas a mistura de reacçSo foi precipitada vertendo~a sobre éter dietili— co (0,4 1), filtrada e lavada com éter dietílico, 0 material em bruto foi purificado por meio de cromatografia “flash" sobre gel de sílica com eluição com a fase inferiorde misturas clorofórmio ;metanolí amónia a ®,88© para proporcionar o composto em epígrafe CE7). 40© MHz Cd^—metanol/dg-piridina, isi) 6,7©—6,25 <13H, série de m), 5,64 <1H, m>, 5,5® (ΪΗ, m), 4,9® <1H, s), 4,74 (1H, íb ), 4,71- 4,59 (2H, ai), 4,47 (ÍH, n), 4,29 <1H, d, J 3,© 1 He), 4,24 (ÍH, dt, J 1© ,7 e4,ó He), 3,96 C1H, roí , 3,86 (1H, m), -*, 55—3,4® (3H, m), 3,37 (ÍH, ro), 3,©7 C1H , dd, 3 17,5 e 4,1 He) , 2,95-2,84 (2H, m), 2,02-2,26 C5H, série de m), 2,23-1,4© (14H, complexo) , 1,4 3 (3H d, 3 5,6 He) , 1,36 í 3H, d, J 6,4 He), 1,25 (3H, d, 3 6,4 He) , 1,17 C3H, d, 3 6,9 He) , ppm.

Espectro de massas FAB (matriz 3—ΝΟΒΑ/sódio) massa observada 941 - massa calculada para C^gH^N^C^^Na , 941,5, CLEPí coluna de fase invertida ODS 5μ 25® x 4,6 mm? eluente 83% metanol - 17% tampão fosfato pH 3,5 - 1 mlmiri “ § comprimento de onda de deiecção 35© nm; tempo de retençãos 8,8 minutos. IV vmax (disco KBr)s 34®© (amplo), 2931, 2247, 1717, 1 © 12, 1129, 11©8, l©áó, 163®, 1448, 1378, 1383, 1323, 12ó9, 1183, 887, 85© e 795 cai-1. EXEMPLO 8 16-ftcetoKiffietil-lò-decarboKianfotericina B (E-S)

HO OH

N- (9—Fluoren i 1 me tox icarbon i 1) - i 6-acetox imeti 1-16-decar-baxianfotericína B <B22) <@,€>7 g, ©,063 mmol) foi dissolvida numa mistura de dimetilsulfóxido e metanol (3,5:1, volume total 3f· ml) e depois tratada com piperidins (0.,012 ml, '3,12 mmol). Passadas 0,6 horas, adicionou-se metanol <©,5 ml) s a solução foi vertida sobre éter dietílico (2Θ© ml). 0 precipitado foi filtrado, dissolvida numa mistura de metanol e teterhidrofurano (isi, 5 ml) e evaporado no vácuo. 0 produto foi purificado por meio de croraatografia ds coluna sobre gel de sílica com eluiçãa com misturas de metanol a 040% em diclorometano para proporcionar o composto em epígrafe <ES>« 270 MHz < 1 s 1 d4-metanol/dw*-piridina) inclui 6,7-6,2 (14H, m), 4,85 ííH, s),, 4,2 Í1H, d), 2,05 (3H, s) ppm.

Espectro de massas FAB (matriz tiodietanol/sódio) massa observada MNa+ 974, calculada para 0^^H^N017Na, 974,

EXEMPLO 9

16-Acetafflidometil-16-decarboκ ianfotericina V C.V )

Uma mistura do composto em epígrafe da. Descrição 26 (98,5 mg, 0,094 mmol) e js-to luenossulf anato de piridinio (1í2 mg, 0,450 mmol) em tetrahidrofurano C3m) /áqu.a <1 ml) foi agitada, à “ 7

J temperatura ambiente durante 40 minutos» Adicionou-se trietil— amina. (62 mg, 0,085 ml, 0,610 mmol) e o tetrahidrofura.no foi removido num evaporador rotativo» 0 resíduo aquoso foi adicionado a água. (1Θ0 ml), e o produto que precipitou foi recolhido por meio de filtração e lavado com água» 0 pó amarelo foi dissolvido a partir do filtro com tetrahidrofurano e o solvente foi removido no evaporador rotativo para proporcionar o derivado N-aliloxicar-bonilo do composto em epígrafe»

Este

PdC 1.-, í PPh-y).-, ( produto foi agitado em dimetilformamida ,6 mg, Θ?eil mirto 1) a ácido acético (15, (4 mi> com mg, 0,15 ml, mmo 1) 0°C sob uma atmosfera de -azoto. longo de 4 minutos hidreto ml, 0,255 mmol). Uma vez agitada a 0°C durante 3Θ

Adicionou-se gota a gota ao de tri~n—butil estanho(74 mg, €5,069 completada a adição, a mistura foi i 0 -

minutos e depois adicionada a éter dietílico C4ΘΘ ml). 0 produto que precipitou foi recolhido por meio de filtração e lavado com éter dietílico* A purificação par meio de cromatografia “flash1* sobre gel de sílica ísluição com a fase inferior de uma mistura 3 s i s 1 de clorofórmias metano 1 ssoluçlo de amónia a 0,880) proporcionou o composto em epígrafe sob a forma de um pé amarelo íE9>« IV víBâx (disco Ktír)s 3.58Ô (amplo), 2930, 1/ i554, 1448, 1377, 1318, 118®, 1069, 1011, 886, 85Θ, 793 cm 1 o-ib = -1 ò'H 400 MHz < IK - m e t a η o 1 / D.-- p i r i d i n a IsDs 6,69-6,62 (2 H, m), ò, 56- 6, 28 (11H * séri© de m) , 5 ,63 í ÍH, m) ^ 3 5,50 í ÍH, dd, J 14 ,8, 10,1 H 2) , 4 0.*? «$ wa. CiH, s), 4, 66— 4. 59 í 2H, ffl) ; , 4 ,52- 4,42 í 2H, m) 4,18 (1H, m) .n ? *-r ,17 UH, d. J 3 ,i Hz >, 3 ,98- C 5 · (2H, m), 3, B4 < 1H, m), 3,51- ·-* 5 3*^ C5H , série de ffl) *1 2,90 (1H 5 dd , ϋ ς x$ 3,1 Hz ), 2,61 -2,47 < 2H, m), 2,49 Í1H, dd, J 16, 8, 9 Hz í 5 2 ,35 í 1H, dd J ló. 7 O / >$ a. ς 8 Hz >, 2 *“s=: / i u 3} li! J dd $ J, 12, 0 η 5 0 Hz >, 2,18- 1 , 4ò (1 7H , sér ie de m 5 incl uindo 3H U s Θ. JL. , 64) , 1, 39 < 3H, d, J 5,8 Hz i, i rr cr i. tj --1 vj <3H, d , J 6,4 Hz), í. 24 <3H d, J 0 5 4 Hz), 1,1 7 (3H , d 3 J 7, 2 Hz) PP®·

Espectro de massas FAB (tiodietanol/sódio) massa observada 973, massa calculada para C„^Na* 973,5.

J

J EXEMPLO 10 1ó-DeearbQK i - í á>--iP~toli{gnossulfooa«itidometil íapt otericina,_B„.JJ^101,

mmol) ? cloreto de p—tolus^nossulf onilo (29 mg, 0? í j2 mmol ,> e carbonato de pjotássia anidro (42 mg, $,·-·β3 mmol) em dimetilfpt· ma— mida seca (4 ml) foi agitada à temperatura ambiente sob uma atmosfera de azoto» porções adicionais de cloreto de β-toluenos-sulfonilo (10,5 mg após 3Θ minutos de reacção) e carbonato de potássio ía ponte de uma espátula após 45 minutos) foram adieχοή ad as para completar a reacção„ Após agitação durante 1 hora na totalidade, a mistura foi adicionada a éter dietílico (400 ml). 0 sólido que precipitou foi recolhido por maio de filtração e lavado com éter dietílico e água. A purificação por meio de cromatografia “flash" sobre gel de sílica ieluição com clorofó» mio:metanol é>s 1) proporcionou um sólido amarelo í/4,2 mg).

Este produto foi agitado à temperatura ambiente em tetrahidrofurano (3 ml)/água (1 ml) com g—to 1 uenossu. 1 fanato de piridinio (80 mg, 0,320 mmol). Passados 40 minutos, adicionou se trietilamina (42 mg, 0,058 ml, 0,4ió mmol) e o tetrahxdrofurano foi removido num svaporador rotativo» 0 resíduo aquoso fox adicionado a água (20® ml) e o produto que precipitou foi recolhido por meio de filtração, lavado com água e depois· dissolvido a partir do filtro com tetrahidrofurano. A remoção do solvente no vácuo proporcionou o derivado N—aliloKicarbonilo do composto em epígrafe C7€»,4 mg).

Este produto foi agitado em dimeti1formamida (4 ml) com PdCl7ÍPPh^)? (5,9 mg, 0,003 íumol) e ácido acético < ii mg, 0,011 ml, 0,183 mmol) a 0°C sob uma atmosfera de azoto» Adicionou-se gota a gota ao longo de 3 minutas hidreto de tri—n—butil estanho (53 mg, ®,049 ml ®,183 mmol)» Após agitação a ®°C durante 30 minutos, adicionou-se mais hidreto de tri-n-butil estanho (53 mg, 0,049 ml, 0,183 irimol > gota a gota. A mistura foi agitada durante mais 15 minutos a ©°C e depois adicionada a éter dietíiico <30© ml). 0 produto que precipitou foi recolhido por meio de filtração, lavado com éter dietíiico e depois dissolvida a partir do filtro com tetrahidrofurano/metanol. A remoção do solvente no vácuo e a purificação por meio de cromatografia "flash" sobre qel de sílica (eluição com a fase inferior de misturas clorofórmio/ /metanol/solução de amónia a 0,88©> proporcionou o composto em epígrafe sob a forma de um pó amarelo (Ei©). IV vinax (disco KBr)s 3426 (amplo), 2925, 1700, 1635, i»T •-‘3 1069 5 1 012, 385, 850, 814 -pi P ridi na i S X > s 7,92 (2H, d. 6, 69-6 , 6® (2H, ffl), 6,57-6,27 51 <1H, dd , J 14 , / , 1 10,2 Hz), 54 (ΞΗ, ffl) , 4,47 UH, i m), 4,34 ·«' 5 { * i \ 1H, m), 3,86 < 1H, m), m), T *-** 3 34 (2H, d » α 3,6 Hz), 1 (1 H, m), 2,57 <1H, ffl), 2,5@ 1528, 1446, 1384, 1322, 1157, cm *« '4 (11H, séria de m), 5,64 (1H, ffl), 5, — 73

J (1H, dd, J 165 8, 9,/ Hz) 5 2,36 <11 H, dd, J 1 / , 0 , O ã Hz), 2,32 Í3H, e 1 O *?A < 1H, dd, J 12,1, 4,6 Hz), 2,13 81H, m) , 2,04-1,47 í 13H , série de m), 1,46 <3H, d, J 5,5 Hz), 1,36 <3H , d, J õ, 4 Hz), 1,25 <3H, d. J 6,3 Hz), 1,17 < 3H, d, J 7,1 Hz ) . : .1 od i e t an o 1 / sód i o) 4- íHô.SSíã

Espectro de massas FAB observada 1086, «nassa calculada para C,__'3Na‘ í©95,Ξ„

Oi Z. i / EXEMPLO 11

J 16—DecarboKi—16~<dietoKifosforamido)flietilanfotericina B <EIi)

J

Uma mistura do composto em epígrafe da Descrição 27 (259 mg, €«,112 mmol) e solução de fluo reto de hidrogènio-piridina <4,5 ml de uma solução de í1,4 g de fluareto de hidragénia-pirx— dina e 8Θ ml de piridina com tetrahidrofurano seco para perfazer 2€«3 ml) em tetrahidrofurano (4 ml) foi agitada de um dia para α outro à temperatura ambiente numa garrafa de plástico. ftdicio-nou-se metanol <1 ml) e prosseguiu-se com a agitação durante mais 6 horas. A mistura foi adicionada a éter dietílico/hexano (4Θ© ml, 1ϊ1) para precipitar o produto. 0 produto foi recolhido por meio de filtração, lavado com éter dietílico e depois dissolvido a partir do filtro com metanol» A remoção do metanol na vácuo proporcionou um pó amarelo.

Este pó foi agitado à temperatura ambiente em tetrahi-drofurano (6 ml)/água (2 ml) com g-toluenossulfanata de piridínio (161 mg, 0,641 mmol>. Passados 40 minutos, adicionou-se trietil-amina (84 mg, 0,116 ml, 0,8333 mmol) ε o tetrahidrofurano foi removido num evaporador rotativo» 0 resíduo aquosofi adicionado a água (500 ml) e o produto que precipitou foi recolhido por meio de filtração e lavado com água» Q produto foi lavado a partir do filtro comtetrahitírofurano e o solvente foi removido num evaporador rotativo. A purificação por meio de cromatografia "flash,s sobre gel de sílica íeluição com misturas de clorofórmio/metanol) proporcionou o derivado luorenilmetoxicarbanilo do composta em epígrafe (95 mg),

Este produto foi agitado em dimetilsulfóxido /3 ml//metanol (0,5 ml) à temperatura ambiente e tratada com piperidina (12,8 mg, 0,015 ml, 0,150 mmol)» Passadas 1,5 horas a mistura foi diluída com metanol <2 ml) e adicionada a éter dietílico (40© ml). 0 produto que precipitou foi recolhido por meio de filtração, lavado com éter dietílico e depois dissolvido a partir do filtro com tetrahidrofurano/metanol» A remoção do solvente no vácuo e cromatograf ia “flash1* sobre gel de sílica (eluição com a fase inferior de uma mistura 5s2s2 de clorofórmio/metanol/solução de amónia a 0,880) proporcionou o composto em epígrafe sob a forma de um sólido amarelo (Eli)» 3405 (amplo), 2977, 2931, 1717, •1 IV vmax (disca KBr) s j.j., 1635, 1446, 1384, 1203, 1061, 1013, 972, 886, 852, 797 cm"* cm

5Ή 400 ΓΙΗϊ (D,“metanol/Dr-“PÍridins. ί s ί); 6,69-6,60 <2Η, m), 6,56-6,27 (iiH, série de m), 5,63 C1H, m), 5,50 CÍH, dd, J 14.,7, 10,2 H2), 4,81 <1H, s), 4,68-4,54 (3H, m), 4,46 <1H, m>, 4,38 Í1H, m), 4,22-4,12 (5H, m), 3,95 Í1H, m>, 3,84 C1H, m), 3,57 IH:, m ) •J* , 3© uh3 ddd , 3 d 3 30 μ 2* >, 2 3&z:“· 2,48 (2H í ó s Q O £. / *5 W Hs) 5 Λ. y · 35 < 1H, i *“ o «£. ? «£- 8 ( 1H, dd, J 1 2,0, 4,6 ’ÍS de m) $ 15 40 ί 3H , d, d ii T d 6,4 Hz ), i ,17 <3H, m; 2,49 ílH, dd, A de sistema ABX, — ,< ' - ' ji T" tí — y ·— - - —· · ji · ;i " ~ y · · * *“* · jj ·” j» ” · · ” · · ji 7,1 Hz). massa

Espectro de massas f-AB (tiodietanol/sódio) observada 1068, massa, calculada oara C,-,., _PNs/ 1067,6,

vJ I ώ· X Q EXEMPLO 12 ló-Decarba>u.~í6-maf ilanfoiericina 8 (E12)

0 composto em epígrafe 16-metilo da Descrição 29 (95 mg, ©,597 < 2 ml) è. mg, 0,084 mmol) e g_—toluenossulfonato de piridínio (150 mmol) foram agitados sm tetrahidrofurano (4 mi)/água temperatura ambiente» Passadas 1,5 horas, adicionou-se trietil-amina <71 mg, 0,100 ml, 0,717 mfnol> e o tetrahidrofurano foi removida no vácuo» 0 resíduo aquoso foi diluída cam água <1ΘΘ ml) e o produto que precipitou foi recolhido por meio de filtração, lavado com água e seco para proporcionar um pó amarelo. Este produto foi dissolvido em dimetilsulfóKido <2,3 ml)/metanol (0,7 ml) e tratado com piperidina <13 mg, 0,015 ml, 0,152 aimol). Passadas 2,5 horas, a mistura foi diluída com metanol <1 ml) e adicionada a éter dietílico (11). 0 produto que precipitou foi recolhido por meio de filtração, lavado com éter dietílico e seco. A purificação por meio de cromatografia "flash" sobre gel de sílica íeluição com a fase inferior de uma mistura 3slsi de clorofórmiojffletanolssolução de amónia a 0,880) proporcionou o composto em epígrafe <E!2> sob a forma de um pé amarelo. 1069, 1012, 2928 5 879, IV vmax (disco KBr> 2880, 1717, 1620, 1456, 1384, 852, 788 cm"1» •5420 (amplo) , 3013, 296' 1269, 1178, AH 40Θ MHs (D,-metanol/D_-piridina hi); 6,70-6,25 4 5 Í13H, série de m>, 5,61 <1H, dq, 3 6,4 e 2,0 Ha), 5,49 <1H, dd, 3 14,6 e 10,1 Hz), 4,80 <1H, s>, 4,73-4,57 <2H, m), 4,44 <1H, tt, J 9,7 e 2,8 Hz>, 4,26, UH, m>, 4,13 (1H, d, J 2,8 Hz), 4,00-3,81 í3H, série de m), 3,54—3,40 <3H, série de m) , -->,36 Í1H, dd, J 9,o e 1,7 Hz), 2,88 <1H, m), 2,56 (ÍH, m), 2,48 tlH, dd, J 16,8 e 9,7 Hz, A de sistema ABX), 2,39 ílH, m), 2,34 <1H, dd, J 16,8 e 2,7 Hz, B de sistema ABX), 2,24 (ÍH, dd, J 12,1 e 4,6 Hz), 2,l€i ÍlH, m), 2,05-1,92 <2H, série de m), 1,90-1,45 (HH* série de m), 1,43 <3H, d, J 5,7 Hz), 1,34 <3H, d, J 6,4 Hz>j 1?23 Í3H* J 6*4 Hs), 1,16 <3H, d, J 7,1 Hz), 1,15 Í3H, d, J Hz} PPm“

Espectro de massas

FAB (matriz tiodietanol/sódio) massa observada 916 - massa calculada para C:47H75015^Ns * 916,o, 4

- 18% tam de detece3o ULEPs coluna de fase eluente S2% metanol comprimento de onda minutos» invertida ODS 5μ 25!3 κ 4„ò mm?

-I iSo fosfato pH 3,5 - 1 mlmirs ? 350 na; tempo de retenção;

J EXEMPLO 13 Íò-Deearboxi—ió—meti 1 —ld.--Q—meti lanfotericlna B íEi3>

0 composto em epígrafe da Descrição 29 <45 mg? 0,04© mmol) e piperidina (7 mg, Θ , ©@8 ml r, ©,©82 irmol) foram agitados à temperatura ambiente em dimetilsulfóxido <1,2 ml)/metanol (©,3 ml)» Passadas 2,5 horas, a mistura foi diluída com metanol í©,5 ml) e adicionada a éter dietílico (©,5 1). 0 produto que precipitou foi recolhido por meio de filtração, lavado com éter dietílico e seco» A purificação por meio ds cromatografia ‘'flash" sobre gel de sílica (eluição com a fase inferior de uma mistura 3;lsl de clorofórmiosmetanolssolução de amónia a ©,88©> proporcionou o composto em epígrafe <E13) sob a forma de um pó amarelo» X - IV víbsx (disco KBr)í 342® (amplo), 3®14? 2968, •70X fS An, i W *<.* H 288® •l "7 *5 "7 i L rr-y 3 1 / 1 / q. J. W*-.**~‘ 5 1456 j 1384, 13 j L2, 1176, 1127 s ; 1®66, 1011, 986, 883 , 852 cm-1» SH 400 MH z (D ene t an o 1 /B-.-piridirv D a 1 s 1 > i 6, ò® —6,25 (1 2H, sér ie d e *te ), 6 ,®9 í 1H, dd, d Í4,8 e 7,7 Hz), ,58 CiH, dd, J 14, cr i5 e 9,7 Hz) , 5, í 1H, m), 4, 79 <1H, s), 4,72 ( 1H, m), 4,47 CiH, tt. J 9, 3 s ”7 ~ *- 5 A· Hz ) , 4, íB (1 H, m), 4,13 (1H, d , ã 3, t3 Hz > , 98 ( ÍH, m) , 3 86-3 ,7® (3H, série uB1 (Ti ? .} -3 <j 5 4 0 (4H , sér is de ffl) T ? *— ? 25 (3H, S ) 3 (ÍH, dd, J 9,2 e 3,® Hz > , 3 ww (1H, m), erv-j ϋ { 1H, dd. J 16,2 e 9,1 H z, A d a sisesmo A BK ) , *“5 A. § 4*0 (íH, dd, u 16 ,5 e *“** ? 3 Hz 3 κ de SI stema hBX } , 2,36 CiH, m), A* ,21 CIH, m), -~7i a. 3 13- -1 ,91 (5H r 3 érie de m), ,85-1, 5*® (9H, sér ie de m ) 3 1,44 (3H, d, J 5 •n Hz) , 1 ,35 Í3H , d, 0 6,4 Hz), 1,24 <3B, d , J i. 0,0 Hz), 1, 17 í 3H, d. ϋ Cj ,3 H — \ í , 1,15 < 3H, d, J 7,1 Hz ) ppm n

Espectro de massas F AB <matriz tiodietanol/sódio) massa observada 93® - massa calculada para C«_H__04=.NN‘a"1', 93®,5. 4b // 1o

J CLEPs coluna de fase invertida ODS 5μ 25® >; 4,6 mm; eluente 82% metanol — 18% tampso fosfato pH 3,5 — 1 mlmin *; comprimento de onda de detecção 35® π mg tempo de retençãos 5,8 minutos»

J

Claims (2)

1. ‘ I i RE IVI ND J. CfiGSES 5

   Processo para a preparação de compostos de fórmula (IS:

   OR. em que s Rj é um grupo -CH^-X em que X é hidrogénio., halogénio, -CN, -0Cí05, -S(0> Rb-, -SH, —OC<0)NHR*-, -NHCONHR^ ou -NR.Ft,, em que *J n »j u ’ o o / Re· é hidrogénio, C1 c alquilo facultativamente substituído, ou arilo, heteroarilo, aril—C.. alquilo ou heteroaril—Calquilo, estando em cada um deles a frseção aromática facultativamente substituída, na condição de, quando X for -S<0> Rp-, Rp_ não outra é -farmila. énio, P '6 8 R7 sã· ou Ct~é alquilo, ou. iJ2-8 a 1 c an o 2. i. o, 1 _ L'í-4 alcanoí1 0, o, aril su1fon i1 0, independentemente um do 3, aroílO; alcanoílo, Ί-8 alcoKi facul- Ί-8 alquilsulfonilo ou heteroarii-Calquilsulfonilo, em que qualquer fraeção aromática em R^ ou H-y está facultativamente substituída, e n ê Θ, i ou 2s R.-, é hidroni ou C. ' > > ' > >

   8β tativamente substituído; é um grupo amino ou um seu derivado; e cada é hidrogénio; caracterizado por compreender a rsacçlo de um composto de fórmula (Ií > s

   em que5 R'' á- um grupo -CH^-L em que L é um grupo dissociável (ou um precursor de X); RR' é C^_p alcoxi facultativamente substituído e R.-j' ' è hidrogénio, ou R.-,"e R.-/em conjunto representam uma jí- jC. «s£» ligação; R^' é um grupo assino protegido; e cada um dos R^' é hidrogénio ou um grupo protector de si11lo; com um reagente que proporcione um grupo X' em que X' é X tal como foi definida na reivindicação 1 ou um grupo que pode ser nele convertido; e por epois, facultativamente ou na medida em que seja necessário e em qualquer ordem considerada conveniente., se converter X' em X, se converter R._,' em R-, quando Ri-/' for hidrogénio, ou por se converter R-,' em R-> e Rv?' ' em hidrogénio quando R-' e Ro' ' em conjunto representarem uma ligação, se converter R^' num grupo amino R-,·, formando um derivado de grupo amino, por se remover quaisquer grupos protectores de sililo R4", se interconverter R1, se inter- ‘ * »

   converter R._t? e se formar um sal farmaceuticamente aceitável» 2â. ~ Processo para a preparaçSo de um composto de acordo com a reivindicação í3 caracterizada por R,_ ser hidroxi au metáxi» i Processo para a preparaçSo de um composto de por Rj ser ? —CH^NHr, 9 -CH0NHSO,~ ·£· M acordo com as reivindicações 1 ou. "Z,; caracterizada seleccionado a partir do grupo constituída por -Cf-ί-,Ν. jL. —CHr, S~ f en i 13 CH,-. ϊ 3 —UH.-jCN 3 —CH.-.OG (U) CH-j 5 —CH^NHlOL-H-^ 3 ·£> aH. aL. -í* -para-tolil s -CH^MHP(0) <GEt)_ e CH^.» 4â = ~ Processo para a preparação de ura composto de acordo com qualquer uma das reivindicações 1 a 3, caracterizado por R-^ ser araino» 5§ Processo de acordo cora qualquer uma das reivindicações i a 4? caracterizada por se preparar? 6-az idometi1-16-decarboxianfoteric ina B 3 16—az idometi 1 — 1-6—decarboxi—13—0—meti laní oteric ina B 3 j. ís arai nome ti 1 — 16 decar ooxx i o—0 rae lí 1 an t o ter í c xna si 3 16-decarboxi-1ó—feni1tiometi1anfoteric ina B 3 6-decarbox i-í 6-iodometi1anfoteric ina B 3 16—cianometi1—16—decarboxi—13—G—metilanfotericina B? 16—ci anometi1-í 6-d ec a r box ian foteric ina B 5 » »

   là-acetoximetil-ló-decarboMianfotericina Β, Íé--acetamidometil-~í6~decarboxianfotericina B, 1ò-decarboxi-i6~ < p~toluenossulfonamidometi1)anfotericina B, ! 16-decarbí i-16-(d ietox i fosíoramido)metiI—anΐ oter i c i na B, Í6~decarbaxi-16--metilanfatericina B, ou 16~decarboxi—ló-metil—13-O—metilanfotericina B» 61 = -· Processa para a preparação de ama composição farmacêutica, caracterizado por se misturar um composto de fórmula (I), tal como foi definido na reivindicação 1, ou um seu sal farmaceuticamente aceitável, com um diluent© ou. suporte farmaceuticamente aceitáveis.
2. 71. - Método para o tratamento de infseções fúngicas em animais, incluindo seres humanos, caracterizado por coíapreen-der a administração de um composto de fórmula (I), tal como foi definido na reivindicação 1, ou um seu sal farmaceuticamente aceitável, sendo a gama de dosagem diária de composto activo de 0,1 a 1 mg por quilograma de pesa corporal. Lisboa, ó de Dezembro de 199®

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