PT95691A - Processo para a preparacao de derivados do acido 2-anilinofenilacetico, uteis como inibidores de pla2 e da lipoxigenase - Google Patents

Description

4 0 presente invento refere-se a novos derivados do ácido 2-ani1inofenilacético, os quais possuem actividade .1 nibidora da lipoxigenaae, inibi dor a da fosfolifase A.., e antagonista do

jíL leucotrieno, e são úteis como agentes anti-inflamatôrios, anti-—a1é r g i cos e c i toprotectores. É já actua1mente aceite que o ácido araquidónico <AA1 é metabolizado nos mamíferos por duas vias distintas. 0 metabolismo do ácido araquidónico pelos enzimas da ciclooxigenase resulta na produção de prostaglandinas e de tromboxanos. A actividade fisiológica das prostaglandinas já foi amplamente esclarecida nos últimos anos. Sabe-se agora que as prostaglandinas têm origem nos endoperóxidos P66.», e PSH.~, através da ciclooxigenase por via do metabolismo do ácido araquidónico. Estes endoperóxidos são também percursores dos tromboxanos C Γx)A.-, e B.~,. 0 TxA._, é um vaso constritor que estimula a agragacão das plateletes. Na situação normal, as propriedades vasoconstritora e de agregação das plateletes dos tromboxanos são compensadas por um outro produto, produzido a partir dos endoperóxidos por via da ciclooxigenase, a prostag landi na < P<3 I , que é um vasodi latador com actividade 2 inibidora da agregação das plateletes. No caso da síntese da prostaglandina ser enfraquecida e/ou da activação das plateletes ser implementada, a trombose e a vasoconstrição são favorecidas. 0 papel dos prostanôides na haemostase e na trombose é analisado por R.J. Qryglewski, f:PC Crit. Rev. Biochem. , 7» 291 (1980 e J.E!. Smith, Am. J. Pathol., 743 <19801. Os metabôiitos da ciclooxigenase são conhecidos por participarem directamente na reacção inflamatória íver Higgs et al., Anais da Investigação Clinica, 16, 287-299 <198413. Isto é devido âs suas aetividades vaso-depressoras, ou seja participação na dor e febre, aumento da Permeabilidade vascular por meio do mediador de peptido e propriedades de formação de edema. Finalmente, vários aspectos da 1 I * λ

imunidade mediada pelas células são influenciados pelos produtos da ciclooxigenase. A outra via do metabolismo do AA envolve os enzimas da 1ipooxigenase e resulta na produção de uma série de produtos oxidantes denominados por leucotrienos. Estes últimos são designados pelo sistema de nomenclatura Lf e os produtos mais significativos da via metabólica da Iipooxigenase são os leucotrienos 8., Cr e 0,. A substância denominada por substância de reaccão lenta da anafilaxe <SRS-A> mostrou consistir numa mistura de leucotrienos, com o LfC4 e o LTD4 sob a forma de produtos principais, compreendendo ainda várias quantidades de outros metabólitos de leucotrienos <Ver Bach et al., J.Immun., 215, 1.15-118 <1980> ,' Biochem. 8iopHys . Res. Commun. , 33, 1121-1126 <138013. A importância destes leucotrienos consiste no facto de que se acumularam muitas provas que mostram que os leucotrienos participam em reacçSes inflamatórias, apresentam actividade quimiotática, estimulam a libertação do enzima lisosomal e actuam como factores importantes na reacção hipersensitiva imediata. Foi demonstrado que o LTC^ e o LT04 são broncoconstritores dos brônquios humanos C ver Oahlen et al., Nature, 288, 484-486 <13801 e Piper, Int. Arch. Appl. Immunol., 76, supl. 1, 43 < 13-85)3, os quais estimulam a libertação do mucus das vias aéreas in vitro CMarom et ai., Am. Rev. Resp. Pis., 126, 443 <1982)3, são vasodi-latadores potentes na pele £ver Bisgaard et al., Prost ag1andinas, 23, 797 <1982)3 e produzem uma resposta acentuada e rápida ÍCamp et al., Br.-J. Fhawaacol. , 80, 497 <1383)3. 0 leucotrieno não —... .............,,-rr " ^ peptídico, o LTB4, é um factor quimiotáctico potente para os leucócitos Cver A. W. Ford-Hutchinson, J, Roy. Soc. Ned. , Zâ» 831-833 <1981), que estimula a acumulação celular e afecta o músculo liso vascular Cver Bray, Sr. Hed. Buli., 33, 243 <1983)3. A actividade dos leucotrienos como mediadores da inflamação e da hipersensibi 1 idade é analisada em pormenor1 em Baile/ e Casey, Ann. Reports Med. Chem. 87 (1986}. A f os foi ipase A,-, <PLA._, 5 é o enzima limitador da veloci— dade critica na cascata do ácido araquidónico <AA5, dado que ê responsável pela hidrólise do AA esterificado da posição 02 dos fosfolípidos de membrana. Esta reacção produz dois produtos <15 sem o AA que fica disponível para o metabolismo subsequente por meio dos enzimas de ciclooxigenase ou de 1 ipoxigena.se e ¢25 o 1isofosfolipido. A produção do factor de activação das platele-tes CFAF'5 é iniciado quando o alquil-araquidonoiX~glicerofosfofa~ tidilcolina é activado pelo PLA._,; o FAP é pró-inflamatório Cver Wedmore et al. , £ir. J. Pharmacoí. , 74, 916-917 <198153. A este respeito, note-se que se considera que os esteróides anti-infla-matórios inibem a síntese eicosanâide por indução da síntese de uma proteína inibidora do PLA._, denominada por macrocortina ou lipomodulina Cver Flower et al., Nature, London, 278, 456 <19795 e Hirata et al., Proc . Natn. Acad. Sc i . U. S. A,,, 77, 2533 <19805 3.

Dado que é a etapa inicial que conduz ã conversão subsequente do AA nos vários eicosanòides por via da ciclooxigenase e lipoxigenase, a libertação do AA mediada pelo PLA2 dos fosfolípidos de membrana é um facto crítico no tratamento das variadas manifestações fisiológicas que se baseiam na actividade dos eicosanòides e/ou do FAP. Deste modo, embora se tenha mostrado que o PLA-, é necessário para a agregação das plateletes CPickett et al., Biochem. -J. , 150, 405 <19755 3, para a contracção e excitação cardíacas Efíeisler et al., Pharm... „Res. Commun. , 9, 117 <197753, bem como para a síntese da prostaglandina EVogt, Adv. Prostagl. rhromb. Res.» 3, 89 <19785 3, a inibição do PLA^, é indicada no tratamento terapêutico de doenças fisiológicas quer - - 7 -

-X Ν „ j ·; υ . induzidas pelo FAP, quer mediadas P#r um produto de via da c i c 1ooxigenase e/ou lipooxigenase. É evidente que os produtos das vias da ciclooxigena-se/1ipoxi genase desempenham papéis importantes nas patogéneses de danos da mucosa gástrica provocados por agentes extracelulares (conteúdos gástricos e .intestinai.S; microorganismos, etc) ou intracelulares (isquemia,, viroses, etc), bem como na citoprotec— ção contra estes danos. Assim, por um lado, as prostaglandinas exercem um efeito citoprotector sobre a mucosa gástrica Cver Robert, eastroenterology. 77> 761-767 <1973)3 e esta acção das prostaglandinas, especialmente das séries E, é considerada importante para o tratamento da ulceração gastro-intestinal Cver Isselbacher, Drugs, 33, <supl.), 38-46 <1987)3. Por outro lado, as êxperiências ex vivo mostraram que o tecido da mucosa gástrica de ratazanas pré-tratadas com etanol é capaz de produzir LTC^ e que esta produção de LTC^ está quantítativamente relacionada com a gravidade dos danos provocados pelo etanol Cver Lsnge et al., Naunyn--Schmíedeberg>s Arch. Pharmacol, SuppI . , 330, R27, <1985)3. Foi também demonstrado que o Li"C^ pode induzir á vasoconstrição quer no vaso venoso, quer no vaso arterial da submucosa da ratazana Cver Whittle, IUPHAR Ninth Int. Cong. of Pharm., S30-2,

Londres, Xnglanterra <1984)3. Isto é importante, dado que a formação na mucosa gástrica de uma lesão induzida pelo etanol pode ser muitifactorial com, por exemplo, a estase do fluxo sanguíneo gástrico que contribui significativamente para o desenvolvimento dos aspectos necróticos hemorrágicos do tecido lesado Cver Suth et al . , Gastroenteroloqv. 87, 1083-90 <198493.

Além disso, num gato anestesiado, o LTD^ exogenoso provoca quer o aumento da secreção da pepsina, quer a diminuição do potencial transgôstrico CPendieton et al. , Eur. ,T. Pharmacol.. 125, 297-99 <1986)3. Uma descoberta recente especialmente importante relativamente a este assunto é a de que os inibidores da. 5-lipoxigenase 5 * 4~

e alguns agonistas de leucotrieno- protegem a mucosa gástrica contra aquelas lesões induzidas pela administração oral ou parentérica da maioria dos medicamentos anti-inflamatórios não-esteroidais [ver Rainsford, Agents and Actlons, 21; 316-3IS <1987)3. 0 factor de activaçã© das piateletes CFAP) está também implicado como um mediador dos danos gastrointestinais e foi demonstrado recentemente que os inibidores da 5-lipoxigenase inibem os danos na mucosa gástrica induzidos pelo FftP <6astroenterology. 96. A55, A434, 1989). Deste modo, uma quantidade significativa de provas demonstram o envolvimento de produtos de lipoxinase no desenvolvimento de caracterísiicas patológicas associadas a lesões mucosas gástricas, tais como aquelas induzidas por exposição ao etanol e induzidas pela administração de medicamentos anti-inflamatórios não esteroidais. Deste modo, os compostos que inibem os efeitos biológicos dos leucotrienos e do FAP e/ou que controlam a biosintese destas substâncias, por exemplo por inibição da 5-1 ipoxigens.se, são considerados importan· tes como agentes citoprotectores.

Desta maneira, a actividade biológica dos leucotrienos e SR8, e da 1ipoxigenase como enzima que conduz ao metabolismo do AA nos leucotrienos, indica que uma aproximação racional para a —^ terapia com medicamentos para prevenir, eliminar ou melhorar os sintomas das alergias, anafiiaxias, asma e inflamação, e para citoprotecção gástrica, deve focar não só o bloqueamento da libertação dos mediadores destas doenças, como também antagonizar os seus efeitos. Assim, os compostos que inibem os efeitos biológicos dos leucotrienos e do SRS e/ou que controlam a biosin— tese destas substâncias, por exemplo por inibição da libertação mediada pelo PLA-, do ácido araquidónico dos fosfolípidos de

jL membrana ou por inibição da lipoxigenase, são considerados importantes para o tratamento de doenças tais como a asma brônqui— ca alérgica, a rinite alérgica, bem como de outras reacções de

hipersensibilidade intermédias, © para proporcionarem citoprotec-C&i gástrica,

Descobriu-se agora que determinados novos derivados do ácido 2-anilinofenilacético inibem o PLA.-, e a lipoxigena.se e d. antagonizam os produtos da via da 1ipoxigenase. Deste modo, estes compostos sSo úteis como agentes anti-inflamatórios, anti-alérgicos e citoprotectores. 0 presente invento proporciona novos compostos com a seguinte fórmula;

em que R é hidróxi, alcôxi inferior ou alcoxiamino inferior; i R é hidrogénio ou A<CH..,> J3-; O d h j R*· é hidrogénio ou ACCH._,> 0-, com a condição de um de R e .•j Z Π de R*- ser 0- e o outro ser hidrogénio; d. n n é 1~2; A é fenoxietilo, fenoxifenilo ou um grupo com a fórmula R3, R4 em que

5 . \ 10 R tU R'· -N- ou c c R" R-1 { -c=~c-, <* t e R-

R

B -C==N-, -N~-C-, ~N~, -S- ou -0-; è hidrogénio, alquilo inferior ou fenilo; q a é hidrofénio ou alquilo inferior; ou R‘" e R tomado* em conjunto formam um anel de benzeno facultativa.” mente substituído por halo] em cujo caso o ponto de ligação de A ao resto da molécula pode ser a partir deste anel de benzeno; v5 é hidrogénio ou alquilo .inferior; fc* R é hidrogénio, halo ou alquilo inferior; bem como os seus sais farmaceuticamente aceitáveis.

Os termos "alcôxi inferior", "alcoxiamino inferior" e "alquilo inferior" referem-se ás metades com 1-6 átomos de carbono na cadeia de carbono. O termo "halo" refere-se a flúor, cloro ou bromo. 0 agrupamento A compreende, inter alia, azoto insatura-do de ou 6- membros, heterociclos mono- ou benzofundidos contendo enxofre ou oxigénio, facultativamente substituídos por alquilo inferior ou por fenilo. A definição anterior abrange as seguintes metades heterocíclicas! furilo, pirrolilo, tieniio, oxasolilo, tiazolilo, imidszolilo, piridilo, pirazinilo, pirimidi-nilo, benzofuranilo, benzotieniio, benzotiazolilo, indolilo, benzoxazolilo, quinolinilo, quinazolinilo, benzimidazolilo, quinoxaiinilo, quinazolinilo, etc. Especialmente preferidos são o quinolinilo, benzotiazolilo e benzimidazolilo. i

V

Os compostos do invento podem formar sais farmaceuii-camente aceitáveis a partir de ácidos orgânicos e inorgânicos farmacologicamente aceitáveis tais como ácido clorídrico, foromi-drico, sulfónico, sulfúrico, fosfórico, nítrico, maléico, fumâri-co, benzôico, ascórbico, pamòico, succínico, metanossulfónico, acético, propiónico, tartárico, cítrico, láctico, málico, mandê-lico, cinâmico, palmítico, itacônico e benzenossulfónico. Os compostos que são ácidos carboxílicos são capazes de formar c a rbox i1atos de me tais a1c a1i nos ou c ar box i1a tos alcalino te rro-sos e carboxilatos de catifíes farmacologicamente aceitáveis derivados de amónia ou de uma amina básica. Exemplos destes últimos são, sem lhes estar limitado, catiões tais como de amónio, mono-, di- e trimeti1amónio, mono-, di- e trietilamônio, mono-, di- e tripropilamônio Ciso e normal), etildimetilamônio, benziIdimetilamônio, ciclohexilamônio, benzilamônio, difoenzilamô-nio, piperidínio, morfolínio, pirrolidínio, piperazínio, i-metil-piperidínio, 4-etiImorfolínio, l-isopropilpirrolidínio, 1,4-dime-ti1p i perazínio, 1-n-buii1-pi per idínio, 2-metilpiperidínio, l-etil-2-metilpiperidínio, mono-, di- e trietanolamónio, dietano-1amónio de etilo, n-butilmonoetanolamônio, irisChidroximeti1)meti lamônio, íenilmonoetanolamônio, etc.

Este invento também proporciona processos para a preparação dos compostos de fórmula I e Ia, conforme mostrado e definido anteriormente, compreendendo um dos seguintes: a) esterificação de um composto de fórmula

h i dr oxi, com um em que R" è como anteriormente definido, um de R*"' e R” é sendo o outro hidrogénio, e C00R7 é uma função éster composto de fórmula;

A-CCH.-,) -X z n em que A e n são como anteriormente definidos e X é um grupo separável tal como halogénio, e.g. cloro ou bromo, ou um grupo orgânico de suIfonilô.xi, e.g. um grupo de sulfonilòxi de arilo ou de alquilo tal como tosilo, se necessário i> a hidrólise do produto, ou ii> a ciclização do produto, de modo a obter-se um composto de fórmula Ia ou I em que R é hidroxi ou alcoxi inferior; ou b> a ciclização de um composto de fórmula I como anteriormente definida em que R é OH ou alcoxi inferior de modo a obter-se um composto correspondente de fórmula Ia; ou c) a reacção de um composto de fórmula I em que R é hidroxi com uma alcoxi inferior-amina de modo a obter--se um composto correspondente de fórmula I em que R é alcoxi inferior--amino; ou d> a hidrólise de um composto de fórmula I em que R é alcoxi inferior de modo a. obter-se um composto de fórmula I em que R é hidroxi ou um seu sal farmaceuticamente aceitável; ou e> a conversão de um composto de fórmula I ou Ia num seu sal farmaceuticamente aceitável ou vice versa.

Relativamente ao processo Ca), a esterificação pode ser efectuada convenientemente na presença de uma base, por exemplo de um carbonato de um metal alcalino, com aquecimento se necessâ-r i o. 0 processo Cb) pode ser efectuado por aquecimento ou por meio de uma eiclização catalisada por bases do éster, e.g. por utilização de hidróxido de sódio. 0 ácido pode ser ciclizado na presença de um agente de ciclodesidratação, e.g. uma carbodi-imida. A conversão do ácido de fórmula I no derivado de alcóxi inferior-amída (processo <c>) pode ser efectuada por utilização de um reagente de condensação, e.g. uma carbodiimida, empregando--se processos "Standard".

Os compostos do presente invento podem ser preparados através dos seguintes esquemas de reacção. Quando se pretende preparar os compostos com a fórmula i y

ch2cor a(ch9) o. 2'n

R 6 2,6-di e1o roani1ina > é f eita depois com 4-bromoanisole para x i í sn i1>-2,6-d i c 1 o ro an i 1 i na uma 2,6-dihaIoa.ni 1 ina-t < tal como reagir com cloreto de acetilo e produzir o intermediário í\|-<4-meto

cloreto de etilo

#Pode~se partir também da anilina ou da 2-ha.lo-, 2-alqui 1-6-halo-ou 2,6-di a1qu i1-ani1i na.

ário é feito reagir com eiido a oclusão de anel p r odu£ i r um i n te rmed i â r i o Ο ώ 11- i mo i n te r med i cloroacetilo e depois é subm de -cloreto de alumínio para

1inona sufos t i tu ida I cloreto de na presença de 2-indo- Ν /

Ο último intermediário de 2-indolinona é submetido a abertura de anel, a esterificacáo do ácido carboxílico e depois a reacçáo com o grupo A de haioalquilo apropriado, em que A é como definido anteriormente: 17 -c ν

OH Ó-(CH2)nA

Na sequência anterior, em que Rf~' representa os grupos bromo ou cloro, aquele pode ser removido para produzir compostos mono- ou des-R" por sujeição do intermediário 2-indolinona ou a sua forma de anel aberto a tratamento com Pd/C a 5% em H._, á pressão atmosférica ou a uma pressão mais elevada. 0 intermediário resultante é então tratado como definido anteriormente, i.e. esterificação e reacção com o intermediário, A <CH ._,>€! . 0 éster do produto final pode ser ainda hidrolisado para produzir o ácido

livre, o qual por sua vez pode ser convertido no sal farmacologi camenie aceitável por métodos convencionais.

Quando se pretende preparar os compostos com a fórmula

esquema de reaccáoí pode-se empregar o seguinte

0 material de partida p-nitrofenol, quando é submetido a tratamento com metanol e tolueno saturado em cloreto de hidrogénio, produz o intermediário 2,6-dissubstit.uidO“4-me-toxianilina no qual os 2,S-bisubstituintes são grupos cloro. i

Da mesma forma que para a primeira ζ“» analisada supra. em que R" representa grupos sequência de reaccâo bromo ou cloro, este •4

último pode ser removido parcial ou totalmente por tratamento com Pd/C a 5%. em H.., para produzir os compostos mono- ou des-R"'. Como •Ui referido anteriormente, o produto final na forma de ácido livre pode ser convertido por métodos conhecidos nos sais farmacologi-camente aceitáveis desejados.

Os materiais de partida utilizados nas sequências de reacçã© referidas anteriormente estão disponíveis comercialmente ou então podem ser preparados por métodos conhecidos na especialidade. Deste modo, por exemplo, o composto intermediário 2-foromometi1quino2 ina pode ser preparado através do seguinte ·-—esquema de reacçSo.· .......

Μν-Βγ Ό (ΟβΗ5θΟ)2 02 e

Os compostos do invento,· em virtude da sua capacidade em inibir a actividade do enzima de PLA._,, bem como a do enzima de 1ipoxigenase, e em antagonizar os mediadores produzidos pela via enzimática, são úteis para o tratamento de doenças mediadas por produtos da oxidação do ácido araquidònico. Deste modo, os compostos são indicados para o tratamento de doenças tais como a artrite reumatóide, a doença de inflamação intestinal, a osteoar-trite, tendinit-e, bursite, psoria.se Ce inflamações afins da pele* e doenças similares que envolvem uma inflamação. Além disso, * V,

em virtude da sua capacidade em inibirem a actividade do enzima da lipoxigenas© © ©m antagonizar o efeito do LTC^, do LTD, © do >4 LTE^, os quais são constituintes do SR8-A, eles são úteis na inibiçSo dos sintomas induzidos por estes leucotrienos. Deste modo, os compostos são indicados para a prevenção e tratamento dos estados doentios em que o LTC^, o LTD^ e o LTE^ são factores provocativos, por exemplo a renite alérgica, a asma brônquica alérgica e outras doenças de obstrução das vias aéreas naso-brc-n-quicas mediadas pelo leucotrieno, bem como outras reacções de hipersensibilidade imediata, tais como a conjuntivite alérgica. Os compostos são especialmente importantes para a prevenção e tratamento da asma branquica alérgica.

Os compostos do invento são agentes cit-oprotectores e são considerados especialmente úteis quando são administrados conjuntamente com medicamentos antí-inflamatórios nSo-esteroidais, cujo maior efeito secundário é uma irritação gastrointestinal. 0 efeito citoprotector dos compostos do invento reduzem significativamente o impacto gastroirritante dos medicamentos anti-infla-matôrios convencionais. Este efeito é baseado não só na capacidade dos compostos do presente invento em inibirem os efeitos biológicos dos leucotrienos e/ou em controlarem a biosintese destas substâncias, por exemplo por inibição da lipoxigena.se, mas também num efeito de derivação, pelo que o controlo da via da 1ipoxigenase faz "derivar" a oxidação do ácido araquidônico para a v.ia da ciclooxigenase, dando origem a um aumento na formação das prostaglandinas citoprotectoras. Estes ©feitos biológicos tornam os compostos do presente invento especialmente úteis para o tratamento de doenças tais como a esofagite erosiva, a doença inflamatória intestinal e lesões hemorrágicas ind.uzidas, tais como aquelas induzidas pelo álcool ou pelos mediacamentos anti--inflamatórios não-esteroidais (MftlWEl, isquemia hepática, lesão induzida por um agente tóxico ou necrose hepática, pancreática,

renal ou do tecido do miocárdio; lesão parenquimatosa do fígado causada por agentes hepatotóxicos tais como o tetracloreto de carbono e a D-galactosaminainsuficiência renal isquénúca; lesão hepática induzida por uma doença; lesão pancreática ou gástrica induzida pela bílis; lesão celular induzida ppor trauma ou "stress"; e insuficiência renal induzida pelo glicerol.

Quando se empregam os compostos do invento no tratamento de perturbações das vias aéreas alérgicas, na forma de agentes anti-inflamatórios a/ou de agentes citoprotectores, eles são formulados em formas de dosagem oral tais como comprimidos, cápsulas, etc. Os compostos podem ser administrados isoladamente ou em combinação com veículos convencionais, tais como carbonato de magnésio, eslearato de magnésio, talco, lactose, pectina, dextrina, amido, gelatina, tragacanto, metiIceiulose, carboxime-tilcelulose de sódio, cera de baixo ponto de fusão, manteiga de cacau, etc. Podem-se também empregar diluentes, agentes aromati-zantes, solventes, lubrificantes, agentes de suspensão, ligantes, agentes desintegrantes de comprimidos, etc. Os compostos podem ser encapsulados com ou sem outros veículos. Em todos os casos, a proporção de agente activo presente nas referidas composições, sejam estas sólidas ou líquidas, será tal que se obtenha pelo menos a actividade desejada por administração oral. Os compostos podem também ser injectados parentericamente, em cujo caso eles serão utilizados na forma de uma solução esterilizada contendo outros solutos, por exemplo salina ou glicose, em quantidade suficiente para tornar a solução isotónica. Para administração por inalação ou por insuflação, os compostos podem ser formulados numa solução aquosa ou parcialmente aquosa, que pode então ser utilizada na. forma de um aerosol.

As necessidades de dosagem variam em função da composição especifica empregue, da via de administração, da gravidade ·' - 24 - dos sintomas e do indivíduo a tratar. 0 tratamento será normalmente iniciado com dosagens pequenas, inferiores à dose óptima do composto. A seguir, a dosagem é aumentada até se obter uma acção óptima para aquelas circunstâncias. Em geral, os compostos são de preferência administrados a uma concentração que produza resultados eficazes sem provocar quaisquer efeitos secundários prejudiciais, e podem ser administrados como uma dose unitária individual, ou se desejado, a dosagem pode ser dividida em subunidades adequadas que sejam administradas com intervalos apropriados ao longo do dia.

Os efeitos inibidores do PLA._, e da 1 ipoxigenase e A*. antagonistas do leucotrieno, bem como os efeitos anti-inflamatô-rios e gastroirritantes potenciais dos compostos do presente invento, podem ser demonstrados por procedimentos farmacológicos padrão que serão descritos com maior pormenor nos exemplos apresentados a seguir.

Estes procedimentos, inter alia, determinam a especificidade da acção dos compostos do presente .invento como inibidores do PLA..,, como é medida pela sua capacidade em inibir a síntese do LTB^ e PSE..-, pelos leucócitos polimorfonucieares produzidos pelo giicogénio da ratazana, e como é medida pela sua capacidade em inibir a libertação do ácido araquidónico mediada pela fonte humana e não humana de PLA..,. Os citados procedimentos medem A» ainda a capacidade dos compostos do presente invento em inibirem, ln vivo, a actividade do PLA.., administrado exogenamente. Os ensaios farmacológicos põem ainda em evidência a capacidade dos compostos do presente invento em inibir, in vivo, as vias da 1 ipoxigenase e da ciclooxigenase do metabolismo do ácido araqui-dónicoj a actividade antagonista do leucotrieno in vitro dos compostos do presente invento,’ e também mede a actividade .in vivo dos compostos como agentes anti-inflamatórios no ensaio do edema ' ,· v C ·' da pata da ratazana induzido pela carragenano. Finalmente, o potencial dos compostos para induzirem a gastroirritaçS© nas ratazanas é medido também por meio de um procedimento de ensaio.

Os seguintes exemplos mostram a preparação e ensaiam farmacologicamente os compostos abrangidos pelo presente invento.

Exemplo 1

Etarsodioato do éster BStílico do ácido acético de 2-E<2,6-diclorofenil>amino3-S-<2-quinoliniimet6xí >benzeno € 111> A. 2,6-D.i c loroacetanl ,1 .ida A uma solução agitada mecanicamente de 2,6-dicloroani-lina <76 g, 0,047 mole) em 80 ml dé ácido acético glacial adiciona-se gota a gota cloreto de acetilo <36 ml, 0,5 mole). Depois da adição ter terminado, a mistura de reacção é aquecida a 90 °C durante 20 minutos. A solução é deitada em água gelada <500 ml), obtendo-se a formação de um precipitado branco. Os sólidos são filtrados, lavados com água e secos para se obter o produto <91,8 g, 96%, sólido branco, p.f. 179-partir de ácido acético glacial). "180*C, p.f. 1 i t. 180-181°C a RMN <CDC10, 200 MHz)í Q À; < s, 3H, CH.-.C0), 7,06 <amplo, 1H, NH), 7,14-7,45 <m, 3H, ArH). B. N-< 4-metox i f eni1)-2,S-di c1oroani1i na

Aqueceu-se ao refluxo durante 6 horas, sob uma atmosfera de azoto, uma mistura de 2,6-dicloroacetanilida <3,0 g, 15,6 mmole), carbonato de potássio <1,08 g, 7,8 mmoles), pô de cobre <0,1 g) e 30 ml de 4-bromoanisoie. A mistura de reacçâo ê destilada# por meio de vapor para se remover o excesso de anisole 0 resíduo é dividido entre éter etílico e água <30 ml cada). A fase orgânica é lavada com salmoura <30 ml) e é seca <HgSO^). A remoção do solvente produz 3,9 g do intermediário acetanilida de N-<4-metôxifeni1)-2,6~dicloro sob a forma de um óleo âmbar. 0 intermediário em bruto é submetido a refluxo durante 6 horas em 20 ml de K0H etanólico a 10%. 0 solvente é evaporado e o resíduo é diluído em água <50 ml). Os sólidos são filtrados, lavados com 27 - \ água e secos sob alto vácuo (sobre P.-,0C) " para produzirem o •Im Í? produto do titulo (.2,3 g, 69%, óleo castanho, p.f. lit: 75-77*0 a partir de clorofórmio) RMN (CDC1.-,, 400 MHz) (amplo, 1H, NH), 6,73 (d, J= =9 Hz ArH), 6 ,36 (t, J=8 Hz, 1H, ArH), EM (EI, m/z) : 267 (M ) 154. l 6 3,77 (s, 3H, OCR,), 5,76 , 2H, ArH), 6,81 (d, J=9 Hz, 2H, 7,33 (d, J=8 Hz, 2H, ArH). ; 252 (M—0Ho+, P.e.>J 216, 188, $ Em vez de se empregar a destilação por vapor, o excesso de anisole pode ser removido por evaporação repetida da mistura do produto em bruto até se deixar de detectar anisole no azeotropo. 0· N-(2,β-diclorofeni1)-N-(4-metoxifeni1>cloroacetamida

Sob condiçSes anidras, aquece-se uma mistura de N-(4-me- toxifeni.1 )~2,6-d.icloroani 1 ina (20,2 g, 75,4 mmoles) em 175 ml de cloreto de cloroacetilo ao refluxo durante 1 hora. 0 excesso de cloreto ácido é evaporado in vácuo e o resíduo é dividido entre uma solução de NaHCO.-, saturada e . acetato de etilo (30 ml cada). •3 A fase orgânica é lavada com salmoura (30 ml) e é seca (Na^SO^). A remoção dos solventes produz um óleo âmbar. A cristalização do óleo em bruto a partir de metanol produz o produto do título (16,63 g, 64%, agulhas brancas, p.f. 105-106°C â partir de metanol> sob a forma de uma mistura llí de rotâmeros RMN 1 (COCl^, 400 MHz)í S 3,78 e 3 ,81 (2s, 3H, 3,36 ís, 1H, C0CH.. C1), 4 2 , 16 (s, ÍH, COCH^Cl) , 6,85 (d, 1H, 6,30 (d, 1H, ArH), 7,19- 7,57 (m, SH, ArH). EM (EI, m/z)! 343 (M+> j 308 (M-C1) + ; 252 (p.e.). Aná1i se para! CÍSH12CI3 N0. Calculado.' t* CO ·">© » H, 3,51 ; N, 4,06; Encontrado 0, 51,30; H, 3,76 ; N, 4,03. OCR-, >, ArH), D. 1 - (2,6-d i c 1 o r o f en i 1 ? -5-~h i d r ox i -2- i nd i 1 i nona

Sob uma atmosfera de azoto, uma mistura bem homogeneizada de N-C2,6-diclorofeni2)“N-C4-metox,ifeni .1)cloroacetamida C10 g, 29 romoles) e cloreto de alumínio <10 g) é aquecida a 190°C na altura em que se .inicia a agitado mecânica. A mistura ê aquecida até 2-50°C durante 15 minutos e depois é deixada arrefecer e é mantida a 160°C durante ma.is uma hora. A massa sólida castanha fria é tratada com água <500 ml) e a mistura é extraída com 500 ml de acetato de etilo. A fase orgânica é lavada com salmoura e é seca <MgSO^). A remoção do solvente produz o produto <7,6 g, sólido castanho 2 95% puro por RMNp.f. lit 204—206®C a partir de metanol-benzeno). RMN (C0C13, 400 MHz); 6' 3,74 <s, 2H, CH2C0), 4,70 <amplo, 1H, 0H), 6,26 <d, ÍH, J = 8,3 Hz, ArH), 6,66 <dd, 1H, J = Hz, ArH), 6,88 <s, 1H, ArH), 7,36 <t, 1H, J « 8,3 Hz, ArH), 7,49 (d, 2H, J = 7,9 Hz, ArH). EM <EI, m/z)! 293 <M+)j 258 <M-Cl)+i 232 <p.e.>. E. ácido acético de 2~CC2,5-diclorofenil)amino3-5-hidr6xi· benzeno

Uma solução de l-<2,6-diclorofeni1)-S-hidrôxi-2-indoli-nona <2,0 g 6,8 mmoles) em 25 ml de NaÕH 2,5N á aquecida ao refluxo durante 2 horas. A mistura de reacção é diluída em 20 ml de água e ê lavada com éter etílico. A camada básica é acidificada com HCi concentrado e é extraída com acetato de etilo <2 x 25 ml). A fase orgânica é lavada com salmoura e é seca < Na..,S04). A remoção do solvente produz o produto <2,0 g, 95%) sob a forma de uma espuma branca <de pureza adequada para utilização na etapa seguinte). RMN <CDC13, 300 MHz),1 £ 3,61 Cs, 2H, C-CH-.C00H ), 6,26 Cd, 1H, ArH), 6,48 <dd, 1H, ArH), 6,70 Cd, 1H, ArH), 6,71 Ce, 1H, NH), 7,06 <m, 1H, ArH), 7,435 <d, 2H, ArH), 9,04 <s, 1H, 0H). k

F. Acetato de me t i 1 -2-C < 2, β-di c1oro f en i1)aminoΠ-5-hidr óxi- benzeno

Uma solução do ácido da Etapa £, anterior <2,0 g, 6,4 mmoles) em 20 ml de metanol contendo alguns miligramas de mono-hi-drato de ácido p-toluenossulfónico é aquecida ao refluxo durante 3 horas. 0 solvente é evaporado in vacuo e o resíduo é dissolvido em acetato de etilo. A fase orgânica é lavada com NaHCO- e b samoura e é seca <MgSO^>. A remoção do solvente produz o produto <1,9 g, 30%) sob a forma de uma espuma castanha gue ê utilizada como tal na etapa seguinte. RMN CDMSO-dg, 400 MHz)i S 3,63 <s, 3H, COOCH^), 3,72 <s, 2H, CCH2C00), 6,26 <d, J » θ,5 Hz, 1H, ArH), 6,50 (dá, 1H, ArH), 6,53 <s, 1H, NH), 6,65 <d, J = 2,73 Hz, 1H, ArH), 7,03 <t, J = 8 Hz, 1H, ArH), 7,43 <d, J = 8,04 Hz, 2H, ArH). EM <EI, m/z)! 325 <M>+, 320 <p.e.>. S. Éster metílico do ácido acético de 2~£<2,6-diclorofenil)-amino3-5-<2-guinol .inilmetóxi )benzeno

Sob uma atmosfera de azoto, uma mistura do fenol em bruto da Etapa F anterior <5,0 g, 15,4 mmoles), carbonato de potássio <1,3 g, 3,8 mmoles), 18-coroa-6 <130 mg) e quinolina de 2~clorometilo <4,1 g, 23 mmoles) em 50 ml de acetonitrilo é agitada a 60°C durante'24 horas <CCF, sílica, diclorometano MeOH 19;1). 0 solvente é evaporado e o resíduo ê divido entre acetato cie etilo e água <75 ml cada). 0s insolúveis são filtrados, as camadas são separadas e a fase orgânica é lavada com NaOH IN e salmoura. Após secagem <MgS0^), o solvente é removido in vacuo para produzir 7,0 g de um óleo castanho espesso. 0 produto em bruto é purificado por cromatografia de flash <sílica Merck 60, - 30 ‘'Λ;

diclorometano e diclorometano-acetato de etilo 19:1) para se obter o produto (4,2 g, óleo transparente). 0 óleo é triturado com etanol para produzir um produto cristalino (3,98 g, 55,5'X», P.f. 90-91°C, sólido branco).

J RMN (DMSO-dp, 400 MHz ); $ 3,62 ( s, 3H, C00CH..,), 3,73 2H, C-CH..-C00), 5,27 (s, 2H, OCR-, Ar), 6,3 (d, 1H, ArH), 6,76 1H, NH), 6,82 (dd, 1H, ArH), 7,05 (d, 1H, ArH) , 7,09 (t, 1H, 8,1 Hz, ArH), 7,46 (d, 2H, J = 8,1 Hz, ArH) , 7,60 <t, 1H, , 7, 66 (d, 1H, 8,5 Hz, ArH), 7,76 (t, 1H, ArH) , 7,98 (t, 1H,

ArH), 8,40 (d, 1H, J « 8,47 ArH). EM (FAB, m/z); 467 ÍM+H) í 324, 232, Análise para: Í.V JL· ·«' Calculado: C, 64,25,* H, 4,31] N, 5,33] Encontrado: C, 64,33] H, 4,37] N, 5,33. 143 (p.e.). H. Etanodioato do éster met-ilico do ácido acético de 2-C (2,6--d i c 1 o r o f en i 1) am i no 3 -5- í ( 2-pu i no 1 i 1 -me tóx í 3 benzeno (1:1)

Uma solução do composto do Exemplo 1Θ (2,1 g, 4,5 mmoles) em metanol-acetato de etilo (20 ml, 1:1, v/v) é misturada com uma solução de ácido oxálico (0,405 g,’ 4,5 mmoles) em éter (10 ml). 0 precipitado é filtrado, é lavado com éter e é seco in vácuo para produzir o sal (sólido amarelo, 1,6 g, p.f. 152-1540C dec). 0 sal é recristalizado s partir de acetato de etilo (1,2 g) sem alteração do p.f.. IV (KBr, a»”1)! 1730 ÍC0).

RMN (DMSQ-d-, 400 MHz): $ 3 , 62 ( s, 3H, OCR-,), 3,79 (s, 2H, CCH.-.C00), &* 5,27 (s, 2H, OCR-,Ar ), 6,30 (d, 1H, J = 8,74 Hz, ArH), 6,75 (s, 1H, WH), 6,81 (dd, 1H, ArH), 7,01 (d, 1H, ii 2,S

Hz, ArH), 7,09 (t, J = 8 Hz, 1H, ArH), 7,46 (d, 2H, J = 8 Hz,

ArH), 7,60 (dt, 1H, ArH), 7,66 (d, 1H, J = 8,5 Hz, ArH), 7,77 (dt, 1H, ArH), 7,97-8,01 <m, 2H, ArH), 8,40 (d, 1H, J = 8,5 Hz, ArH). %

EM CCI, m/z):. 471/463/467 <2C1, p.e., M+H) , 326, Análise Parai C._t7H_,._,C 1 .-,Ν.-,Ο-, jLf jLjL aí./ Calculado i C, 58,13: H, 3,38: N, 5,03i Encontrado; C, 57,88: H, 4,10: N, 4,80.

Exemplo 2 Ãcide acético de 2—£C2»&~díclQrofenil>aiaino3-5~ - < 2-gui no I i n i 1 metóxi )benzeno

Uma solução do composto do Exemplo 18 (1,1 g, 2,3 mmoles) em etanol <20 ml) e NaQH IN <10 ml) é agitada à temperatura ambiente durante 15 minutos. 0 etanol é removido (rotovap) e o resíduo é diluído com água e ê lavado com éter etílico-acetato de etilo (í M). A mistura é neutralizada com 10 ml de HCl IN <pH 5), 0 precipitado que se forma é filtrado, é lavado com água e é seco para se obter 0,35 g do produto em bruto. A recristali-zaçSo a partir de metanol <2 ml) produz o produto puro <0,68 g, 65%, sólido amarelo claro, p.f. a 162°C sinteriza, a í630C funde). <s, 2H, 6,83 <s» a 8,0 Hz 7,66 (d, RHN < DMS0“dc, Çr 0CH._,Ar), 6,31 (d 400 MHz): , 1H, J = 8 3,63 <s, 2H, CCHoC00H), 8,74, ArH), 6,81 <dd, 1H, 1H, NH), 7,02 (d, 1H, J = 2,84 Hz, ArH), 7,08 Ct, , ArH), 7,45 <d, 2H, J = 8,1 Hz, ArH), 7,6 Cdt, 1H, 1H, ArH), 7,77 Cdt, 1H, ArH), 7,38 <t, 2H, ArH),

ArH), 1H, J ArH), 8,40

Cd, 1H, J = 8,48 Hz, ArH). EH (FAB, m/z); 453 <H+H)+, 217, 131, 31 (p.e.).

Análise para.: Calculado.’ C H Cl N ° *ώ.*τ 4'J .&».£» ·-.♦ C, 63,58; H, 4,oo: N, 6,18; Encontrado: C, 63,52,* H, 3,78; N, 6,15.

Exemplo 3

Sal de sódio do ácido acético de 2-C{2,6~diclorafenil)amino3-5- -(2-guinoliniImetóxiIbenzeno

Uma solução do composto do Exemplo 16 (0,92 g» 1,97 mmoles) em etanol <20 ml) e NaOH IN <10 ml) é agitada à temperatura ambiente durante 1 hora. A mistura de reaccão é concentrada in vacuo para um volume reduzido. 0 precipitado que se forma é filtrado, é lavado com água e é seco sobre P._,0_ sob alto vácuo para se obter o composto do título C0,63 g, 73,3¾, p.f. <sinteri-za a 129°C) funde a 151°C, sólido quase branco!. RMN <BMSO-d~, 400 MHz); 8 3,32 <s, 2H, CCH.-.CO), 5,25 b £ <«, 2H, 0CH.-,Ar), 6,18 <d, 1H, J = 8,7 Hz, ArH), 6,63 <dd, 1H,

ArH), 6,81 Cd, 1H, J = 2,88 Hz, ArH), 6,37 <t, 1H, J = 8 Hz,

ArH), 7,38 <d, 2H, J = 8 Hz, ArH), 7,57-7,53 <m, 1H, ArH), 7,655 Cd, 1H, J = 8,5 Hz, ArH), 7,74-7,78 Cm, 1H, ArH), 7,96-8,01 Cm, 2H, ArH), 8,385 <d, 1H, J = 8,5 Hz, ArH), 3,30 <s, EM CFfíB, m/z): 475 CM+H>+, 453 <M+H-Na)+ Análise para,’ C24H!7C12 NaN.0., ·&» *«.* Calculado! C, 60,65; H, 3,60; N, 5,89; Encontrado; C, 60,37; H, 3,53; N, 5,81.

Exemplo 4

Sal de 2--amino~2-Çhidroximetil)-1,3-propanodlol do ácido 2-Ε<2,6--(2,6-diclorofenil)amino3-5-C2-quinoiiniImetóxi)benzeno <1:1)

Uma solução do composto do Exemplo 2 <0,80 g, 1,77 mmoles) e tris<hidroximeti1>aminometano <0,214 g, 1,77 mmoles) em 10 ml de acetona-água <!,'!, v/v) é concentrada in vacuo. 0 resíduo cinzento pálido é triturado com éter etílico durante a noite. Os sólidos são filtrados sob uma. atmosfera de azoto

(higroscópica) e são secos sobre P.~,0C para se obter o composto do x. ·-' título <0,72 g, 71%, p.f. 82-85°C <dec), sólido amarelo). RMN ÍDMSQ-d-, 400 MHz)! S 3,39 <s, 6H, CH.-,0H, 3,43 <s, b ^ 2H, CCH.. ,C0), 5,26 <s, 2H , OCH.-j Ar), ! £ O O & ; X.%-* <d, 1H, J = 8, 7 Hz, ArH), 6,69 < do 1, 1H, ArH), 6,88 (d, 1H, J 1 M o o O — j£. * w ; ArH), 7,00 Ct, 1H, J « 8 Hz, Ar H), 7 ,40 <d, 2H, J * 8 Hs t i ArH), 7, 57-7, 61 <m, , 1H, ArH), 7,66 < d, 1H, •J = 8,5 Hz, ArH), 7,74 -7,78 <m i, 1H, ArH), : 7,57-7,61 < m, 1H, ArH ), 7,66 < d, 1H, J * 8,5 Hz, Ar H),· 7 ,74-7, 78 <m, 1H, ArH), 7, 93 (m , 2H, ArH) Q QO J i <d, 1H, J * 8,5 Hz, ArH), 8,88 (amplo, 1H, NH). EM (Cl, m/z)! 8 456, 454, 453 L'(M+H ) , 2C13, , 122 < p.e.> Anãlise para,’ CoeH Cl, X. 'μ.' X· m? X N,0 s.* V Calculado ; c, 58,02; H, 5, 12; N , 7,2 7; Encontrado! C, 57,93; H, 5, 35,’ N , 7,1 2.

Exemplo 5 éster astílic-o do ácido acético de 5— CC7—cloro—2—guinolil)— roetóxi 3-2-E C 2,6-diclorofeni1)amino3benzeno A· 7-C1o rogu i na1di na A uma solução de m-cloroaniiina (25,5 g, 0,2 mole) em 100 ml de HC1 SN mantido ao refluxo adiciona-se gota a gota com agitação crotonaldeído aquoso a 85% <14,7 g, em 2,S s de água). Após mais 45 minutos ao refluxo, a mistura ê arrefecida e é extraída com éter etílico para se remover o alcatrão. Â solução agitada vigorosamente adiciona-se ZnCl.., <27,2 3, 0,20 mole).

Como resultado, forma-se uma bola de goma cor de bronze. A mistura é então submetida ao refluxo durante um total de três horas para se obter uma solução castanha transparente. Apôs arrefecimento, forma—se um sólido gomoso que é filtrado e triturado com 2-propanol e depois com éter etílico e que é seco in ί 34

vacuo para produzir o complexo 7-cloroquinaldina é então isolada 150 ml de água e 50 ml de NH^OH, e produto em bruto (sólido cor de purificação do produto em bruto flash (sílica Merck 60, cloreto 99!2>. A remoção do solvente pr transparente (11,1 g, 31,3%), p.f. 75-77°C>. RMN ( CDC1, 400 MHz ) ! 5

O

J = 8,48 Hz, ArH), 7,44 Cdd, 1H, A

de quinaldina HCl-ZnC 1...,. A por dissoluç ão do c Ai omplexo em (á concentrad ía para produzir o bronze, 15, 77 g, 44,4%). A é obtida por cromai ografia de de metil eno' acetato de st i 1 o oduz um sôl i do c o r de bronze dec. 68 —JCí 0 c ci.it; 42%, P .f. 2,73 (a, 3H, CR,), 7 ,28 (d, 1H, rH), 7,70 (d, 1H, J = 8,66 Hz, (M-Cl>+, +

ArH), 8,00-8,03 Cm, 2H, ArHO. EM (EI, m/z)i 177 (p.e., "l· M> , 14:

162 (M-CH ,í B. 2-B r omome t il-7-c1oroqu i no1i na

Uma suspensão agitada de 7-cloroquinaldina (18,0 g, 0,10 mole), M-bromossuccinimida (18,0 g, 0,10 mole) e perôxido de benzoΠo (1,0 g, 0,004 mole) em CCl^ (400 ml) é iluminada com uma lâmpada eléctrica reflectora dê 300 W durante 6 horas. A mistura de reacção é arrefecida e filtrada através de um tampão de sílica, empregando-se hexano:acetato de etilo (7S3). 0 filtrado amarelo é concentrado para produzir uma mistura em bruto do material de partida que não reagiu conjuntamente com o monobromo e com produtos de dibrcmo menos polares. 0 material em bruto é purificado por crornatografia de flash (pré-afosorvido sobre sílica Merck 60 com cloreto de meti leno e depois é eiuído com hexano.*acetato de etilo 95:5), para produzir o produto do titulo totalmente puro sob a forma de um sólido quase branco (17,31 g, 48,9% de rendimento com toa.se no material de partida recolhido, p.f. 111-112°C). 35 - 1Ηι ArH), 8,07-8,26

Cs, 2Η, ΟΗ,-,Βγ ), <Ιμ ArH), 7,75 Cd, RMN (CDC 1..,, 400 MHz) : S 4,68 7,67 Cd, 1Η, J = 8,55 Ηζ, Cm, 2Η, ArH). EM CEI, m/z); 259/257/255 <Μ+ , relação 8r/Cl 7,511Η,ι: ι)

Cdd, ArH), C. éster meti .1 ico do ácido acético da 5-CC7~cloro-2-quinol.il )-me tóx .i 3 -2- C C 2,6-d iclorofenil? am i no 3 benzeno A uma solução do composto do Exemplo !F C4 g, 12,4 mmoles) em acetonitrilo C40 ml) adicionasse carbonato de potássio (0,945 g, 6,84 mmoles), brometo de tetrabutilamônio (2 g) e 2-bromometi1-7-cloroquinolina <3,5 g, 13,64 mmoles>. A mistura é aquecida a 60°C sob azoto durante 48 horas. 0 solvente é evaporado e o resíduo cor de bronze é dividido entre acetato de etilo e água. A camada orgânica é seca CMa^SO^> e concentrada para produzir um óleo castanho que precipita após repouso <6,75 g>. 0 produto em bruto é purificado por cromatografia de flash <sobre sílica Merck 60, pré—absorvida em cloreto de meti leno e eluída com hexano-acetato de etilo 9 >' 1 ) para produzir o composto do título sob a forma de um sólido cor de bronze <4,43 g, 71,2%). A trituração com metanol Cduas vezes) proporciona um sólido quase branco <4,22 g, 67,8%, p.f. 115~1Í7°C>. IV < KBr, cm""1): 1745 < CO) . RMN CCDC1 i ·£? 400 MHz > I 2 H, CH...C00 ) , 5 •5Q Cs, 2H, OCR ArH) , 6,63 Cs, 1H, NH) , 6, 80 C i 7,31 Cd, 2H, J SS $ 03 Hz, ArH), 7,80 Cd, 1H, J 68 Hz, ArH),

400 MHz); S 3,74 Cs, 3H, COOCH..,), 3,80 Cs, ·), 6,53 Cd, 1H, J » 8,73 Hz, 1H, ArH), 6,95 Cmm, 2H, ArH), r,54 <d, 1H, J = 8,54 Hz, ArH), 19 <s, 1H, ArH), 8,25 Cd, 1H, J 7,69 Hz, ArH). EM CEI, m/z): 504/502/500 <W+, 3 Cl), 324, 292 Cp.e.) 177. Análise para? Calculado ,* C25H19C13N2°3 C, 59,84; H, 3,82; N, 5,58;

— qp, •μ.* ί.'

Encontrado; C, 53,63; Η, 3,87,’ Ν, S,53.

Exemplo .5. Ácido acético da 5-£€7-“cloro““2-qyinoiinil>iaetáxi3--2-Γ(2. β-dic lorofeni 1 >amino3benzeno

Adiciona-se gota a gota Na OH IN ¢31,7 ml) a uma solução do composto do Exemplo 5 C3,7 g, 7,3 mmoles) em etanol (62 ml) e a mistura é agitada durante 3,5 horas sob azoto ÍCCF, sílica, hexano-acetato de etilo 65s35, UV). Uma pequena quantidade de material insolúvel é separada por filtração e o filtrado á diluído com áigua. A remoção do etanol in vacuo (temp. do banho < 30°C) e a trituração do resíduo com água produz um sólido acastanhado. 0 último é recolhido, é lavado comi água e é seco in vacuo (sobre P^Oj.). 0 sal de sódio em bruto (3,45 g) é misturado em éter-diclorometano, á filtrado e lavado com porções de éter frio e hexano. é ainda purificado por recristalização a partir de metanol (contendo uma pequena quantidade de diclorometano e acetato de etilol-éier (sólido amarelo claro, 2,7 g, 72,5¾). 0 ácido correspondente á obtido por neutralização de uma suspensão do sal de sódio com HOAc a 10¾ (para pH 6,5). 0 ácido é extraído com acetato de etilo e os extractos são lavados com água, são secos (MgSO^) e concentrados para um volume pequeno. 0 resíduo é diluído com hexano, o sólido é recolhido, é lavado e seco in vacuo (sólido quase branco, p.f. escurece a Í75°C, funde com dec. a 133-201°C). IV (KBr, cm*1)! 1720 <C0).

RMN (DHSO-dj-, 400 MHz) ! & 3,63 (s, 2H, CH.-.C00), 4·· 5,27 OCH.-,Α r £ Ò ; C* 1 (d, -J = 8 ,7 Hz, 1H, ArH), 6,80 (dd, ÍH, ArH)/ β ,83 (s, 1H, NH), 7,02 (d, ·. I = 2,9 Hz, 1H, ArH), 7,08 (t, J 7,4 (s, 1H, ArH), 8,05 Hz, 1H, ArH), 7,46 (s, 1H, ArH), 7,64 8,04 <m, 2H, ArH), COOH). Cl, M+H>+, 463 CM-

Cdd, 1Η, ArH), 7,70 Cd, J = 8,5 Hz, 1H, ArH) 8,45 Cd, J = 8,5 Hz, 1H, ArH), 12,57 Cs, 1H, EM CCI, m/z): 433/431/483/487 C3 -Η,-,Ο)+, 312, 178, 83, Cp.e.). itlll 1 / c* jí o Calculado; C, 53,05 J H, ο π ί * N, 5,73 Encontrado; C, 58,63,’ H, q cc * N, 5,56 Exemplo 7

Análise para; C._, .H,_CΪ éster Btetílico do ácido acético de 2-£C2»e-diclorofenil)-amino3-5-C(2-naftaleni1)metóxi 3benzeno

Uma mistura do composto do Exemplo 1F Cl,05 g, 3,25 mmoles) carbonato de potássio anidro sob a forma de pò fino C0,450 g, 3,25 mmoles), lS-coroa-6 (0,050 g> e 2-bromometiInafta-leno C0,75 g, 3,35 mmoles) em acetonitrilo seco (50 ml) é aquecida sob azoto a S5°C durante a noite. 0 solvente é evaporado e o resíduo é dividido entre acetato de etilo e água (50 ml cada). A fase orgânica é lavada com salmoura e é seca (Mg^.^). A remoção do solvente produz o produto em bruto (1,6 g, óleo castanho). A trituração com metanol produz o produto puro (sólido branco, 1,24 g, p.f. 32~33°C, dec.). IV (KBr, cm-1); 3378 CNH>, 1767 (C0>. RMN CCDC1.-,, 400 «Hz)! $ 3,74 Cs, 3H, C00CHo>, 3,81 (s, ··»* ·«* 2H, CCH2C00), 5,17 (s, 2H, OCHjAr), 6,55 Cd, 1H, J = 8,7 Hz,

ArH), 6,61 Ce, ÍH, WH), 6,81 (dd, 1H, ArH), 6,30-6,35 Cm, 2H,

ArH), 7,30 Cs, 1H, ArH), 7,32 Cs, 1H, ArH), 7,47-7,54 Cm, 3H,

ArH), 7,82-7,87 Cm, 4H, ArH). EM CCI, m/z): 463/467/465 (2 Cl, M) , 328/326/324 C2C1, p. i

Análise para,’ C.__H.-.X1.JCL· -- jí.6 21 2 3

Calculado,1 C, 66,36,’ H, 4,54,’ N, 3,00,’

Encontrado; C, 67,03; H, 4,47; N, 2,98.

Exemplo 8 Ãcidoacético de 2-£<2»e~diclorofenii)-amino3-5-C(2-naftaleni1)metáxiIbenzeno

Uma solução do composto do Exemplo 7 (3,5 g, 7,5 mmoles) em tetraidrofurano (38 ml) e LiOH IN (10 ml) é agitada durante a noite, á temperatura ambiente e sob azoto. 0 solvente é evaporado e o resíduo é dividido entre HC1 0,IN e acetato de etilo. A fase orgânica é lavada com salmoura e é seca (Mg^). A remoção do solvente in vácuo produz o ácido em bruto sob a forma de um óleo cor de laranja que é redissolvido em etanol (20 ml) e convertido no sal de sódio corei Na OH IN (10 ml). A remoção da maior parte do etanol proporciona um precipitado que ê recolhido e lavado com água. 0 sal em bruto é ainda purificado por cromatografia flash (sobre sílica Merck 60, gradiente de dicloro-metano-metanol, 100:0, 98.’2> para produzir 1,35 g do sal de sódio puro. Uma mistura do sal purificado em etanol é acidificada com HOAc a 10% e o sólido resultante é recolhido, é lavado com água e metanol e é seco. Produção do composto; 0,860 g <79%, sólido branco, p.f. sinterizacão a 148°C, fusão a 158°C). IV <K8r, cm”1?.* 3340 (NH), 1630 e 1715 (C0). RMN <DMS0-d_, 400 MHz)ί S 3,68 (s, 2H, CCHoC00), 5,17 (s, 2H, 0CH.-,Ar), 6,32 (d, 1H, J - 8,7 Hz, ArH), 6,80 (dd, ÍH,

ArH), 6,99 (d, 1H, J = 2,8 Hz, ArH), 7,03 (amplo s, ÍH, NH), 7,07 <t, ÍH, J * 8 Hz, ArH), 7,45-7,57 Cm, 5H, ArH), 7,89-7,36 <m, 4H, ArH). H+H)+, EM (Cl, m/z); 456/454/452 (2 Cl, p.e., CM+H-141)+, 141 CCjjHg)*··

Análise para.' C.7qHiqCl2N0._;

Calculado; C, 66,38,* H, 4,23; N, 3,03J —

Encontrado,1 C, 67,50; H, 4,27; M, 3,02.

Exemplo 9 Ácido acético de 2-CC2«6-díelorofenil?affiino3— HEr-Ç ( 4-fenóxi )butóxi3benzeno A· Éster metálico do ácido acético de 2~C<2,6-dielorofenii )-amino3-5-E (4-fenóxi 3butóxi 3benzeno

Uma mistura do composto do Exemplo 1F (2,1 g, 6,4 mmoles), de carbonato de potássio anidro sob a forma de um pó fino >0,89 g, 6,4 mmoles), de 18—coroa—6 (0,100 g> e de 4—fenoxi— butilbrometo <1,53 g, 6,7 mmoles) em acetonitrilo seco (100 ml) é aquecida a 65°C sob azoto durante 24 horas. 0 solvente é removido e o resíduo é dividido entre acetato de eiilo e água (S0 ml de cada). A fase orgânica é lavada com salmoura, é tratada com carvão vegetal e é filtrada (SolkaFloc) (MgSO^). A remoção do solvente produz o produto do título sob a forma de um óleo cas tanho < *"I< o jíL t O g, que é utilizado sem nova purif icação>. RMN < CDC 3. C;, 200 MHz)í 8 1; ,96 < m, 4H, €01-,0 >, 3,74 <s, 3H, OCH.., >, 3,8 2 < s, 2H , CCH.-.C00), 4. ,02 < m, 4H, oa-L,c >, 6,52 <d, 1H, ArH), 6,60 ! <s, 1H, NH), 6,70 <d, 1H, ArH), 6,80 Cd, 1H, ArH), 6,8 5-6,70 <m, 4H, ArH) , 7,25-7,35 Cm, , 4!~ !, ArH). S. Ácido acético de 2-C(2,6~diclorofeni1)amino3-5-í(4-fenóxi)-butóxiIbenzeno

Uma solução do éster da Etapa A, anterior, <2,0 g, 4,2 mmoles) em tetraidrofura.no <100 ml) e Li OH IN <12,7 ml) é agitada sob azoto durante a noite. 0 solvente é removido e o resíduo é misturado em água. A mistura é acidificada empregando-se HC1 - 40 .. /, \

diluído e ê extraída com acetato de etilo <2 x SOO ml). As fases orgânicas combinadas são lavadas com salmoura © sâo secas CMgSCL). A remoção do solvente produz um óleo castanho que cristaliza a partir de acetonitrilo (sólido branco, 0,620 g, aproximadamente 90% puro por CLAP). Este material é ainda purificado por CLAP CDynamax CÍ8, coluna de 2", tampão de acetonitrilo-acet-ato de amónio 3;2) para produzir o composto do titulo puro <0,2-50 3, sólido branco, p.f. 128-131°C, dec.).

PhO < CH._,) 4 3 ' . Análise parai C24H23Ci2N04 Calculado! C í Sji* 1 &j£ } H ; 5,04,’ N, 3,04,’ Encontrado i C, 67,85,’ H, 4,96,’ N, 3,00. IV < KBr, -1 cm 1) t 'Z· o 10 CNH), 1680 < C0> . RHN < CDC1, 400 MH z): S 1,95 Cm, 4H, CCH.-.C), 3,83 2H, CH.-.C00 >, 4,02 < m, 4H , 0CHoC), 6,43 <s, 1H, NH),^6,55 Cd, 1H, fi 8,6 Hz, ArH), 6,70 <dd, 1H, ArH), 6,81 <d 1, 1H, J = 2,8 1 Ia* / ArH) , 6,88-6, 35 Cm , 4H, ArH) , 7,25-7,31 Cm, 4H, ArH). EM <EI, m/z) ί 46 3/461/459 <2 Cl, M)*, 149 Cp .e. ,

Exemplo 10 Éter metilico do ácido acético de 2-Ε(2,6-όίε1οΓοίοηχ1)amino3--5-E C 1-met i 1-í H—benziaaidazol—2-i 1) me táxi Ibenzeno A uma solução do composto do Exemplo 1F <0,5 g, 1,53 mmoles) em dimetiIformamida <8 ml) adiciona-se carbonato de potássio <0,17 g, 1,23 mmoles), iodeto de tetrabutilamônio <0,347 g) e benzimidazole de 2-bromomstil-N-metilo <0,457 g, 2,53 mmoles). A mistura é aquecida a 60°C sob azoto durante 3 dias. Apôs a adição de água á mistura de reacção arrefecida, obteve-se um precipitado castanho esverdeado que é extraído com acetato de etilo <3 vezes) e é seco CMgSO^). A remoção do solvente produz o produto em bruto sob a forma de um óleo castanho escuro. Este é 41

purificado por cromatografia flash (sobre sílica Merck 60, pré-absorvida em cloreto de meti leno e eluída em tolueno-acetato de eiilo 85116). 0 sólido cor de bronze assim obtido é triturado duas vezes com metanol e o sólido branco resultante é filtrado e é seco (0,36 g, 50%, p.f. 162-163°C dec.>· IV (K8r, cm-1)! 1750, 1730 CCO). RMN (CDC1-, 400 MHz)! 6 3,73 <s, 3H, C00CH.-,), 3,79 (s, 2H, Ar CK-.C00), 3,88 <s, 1H, J = 8,71 Hz, ArH), 6,91 “6 ,98 (mm, 2H, ArH) = 7, •“«1 «&· J· Hz, ArH). EM (Cl, m/z); 8,71 Hz, ArH), 6,63 Cs, 1H, NH), 6,87 Cdd, ÍH, ArH),

r.26-7.37 (mm. 5H, ArH), 7,77 (d, IH, J

Análise para! C..,,H.., 1C1

Ca1c u1ado! C, 61,29 ! H, 4,50 ! N, 8,33,'

Encontrado! C, 60,90,' H, 4,24! N, 8,71.

Exemplo 11 Ácida acética de 2~rC2.S-diclorofenil)aminQ3~ -5-C < 1 -me t i 1 -1 H-benz i m i dazo 1 -2- i 1) me ti 3 bertzeno A uma solucSo do composto do Exemplo 10 (1,5 g, 3,19 mmoles) em etanol (60 ml) adiciona-se NaOH IN (13 ml) e a mistura é agitada durante 3,5 horas sob azoto. 0 etanol é removido in vacuo (temp. do banho 300C> e o resíduo é triturado em água durante a noite para produzir um sólido verde. 0 sal de sódio em bruto <1,15 g) á filtrado, é lavado com água e ê seco (in vacuo). é entSo suspenso em água (baixo solubilidade) e é neutralizado com H0Ac a 10% (para pH = 6,5) para produzir o ácido correspondente. A mistura é agitada com acetato de etilo e o produto insolúvel é filtrado (0,374 g, composto do título). A fase orgânica é evaporada (rotovap) para produzir um produto adicional (0,3 g).

Os sólidos combinados são triturados com éter etílico <2 vezes), sSo recolhidos., são lavados com hexano e sSd secos in vacuo durante a noi te. 0 composto do título puro é obtido sob a forma de um só li do cor de bronze (0,58 6 g, 40,0 p. f. 183-185° C dec. ). IV (K‘Br, cm-1).' 1690 C C0). RMN C DMS0 , 400 MHz)! S 3,69 ís, H, ArCH,-,C00), .rf. O ,84 (s, 3H, ÍMCH.., ), 5,: 31 (s, 2H, ArCH.-,0), S, 32! (d, 1H, J = 8,73 Hz i ArH), 6,88 (dd 1H, ArH), 6,93 (s, 1H, NH), 7, 04 (c 1, 1H, J b 2' } 92 Hz, ArH), 7, 10 • (t , 1H, J = 16,12 Hz, ArH), 7, 21 (t ·, 1H, J = 1 6 ,91 Hz, ArH), 7, oc Λ.*-.1 í (t , 1H, J = 16,26 Hz , ArH) * 7, 47 <m, 2H, ArH > , 7,57 (d, 1H, J = 8 ,03 Hz , ArH), 7,63 <d, !H , J 7, 88’ Hz, ArH) ; 1 o -7--1 Λ Λη f f A* (s amplo i 1H, 0H) . EM (FAB, m/z)! 460/458/456 <2 Cl, M+H)+, 422 CM+H-C1>+, '31, 79 (p.e.).

Análise para: C00H,QC1

Calculado! C, 60,541 H, 4,20; N, 3,21,'

EncontradoC, 60,25,' H, 4,02,' N, 9,21.

Exemplo 12

Aceiamida de 2-L(2.β-dic1orofeni1amino3-M-metéxi--£(2-^uinoli1)metáxiUbenzeno 0 composto do Exemplo 2 (1 g, 2,2 mmoles), sob azoto, é adicionado em porções a uma solução agitada de trietilamina <0,75 ml, 5,4 mmoles), 4-dimetilaminopiridina (0,12 g, 0,9 mmole), cloridrato de metoxiamina (0,225 g, 2,7 mmoles) e cloridrato de í-O-dimetilaminopropi 1 )-3~etilcarbodiimida (0,575 g, 3 mmoles) em diclorometano (50 ml). Depois de se ter agitado durante a noite à temperatura ambiente, a mistura de reacção é diluída com 25 ml de diclorometano e é lavada com água (50 ml) e salmoura. Após secagem (HgSO^), o solvente é removido e o sólido residual (1,1 g) é purificado por cromatografia de flash (sobre sílica Merck 60, diclorometano-acetato de etilo 19!1 9!l para remoção - 43 -

das impurezas] diclorometano-metanol 38:2 para recolha do produto) para produzir o produto desejado (óleo, 0,400 g). Obtêm—se um sólido branco por recristalização do óleo a partir de acetato de etilo-hexano (0,320 g, 30%, p.f. sinteriza a 155°, funde a 160°C). -1 IV <KBr, cm ) ,* 3320 <NH>, 1650 <C0>. RMN (DMSO-dy., 400 MHz): S 3,42 (s, 2H, CCH.-.C0>, 3,56 O £ (s, 3H, N0CHo>, 5,28 <s, 2H, 0CH.-tAr), 6,30 (d, 1H, J = 8,75 Hz,

ArH), 6,80 (dd, 1H, ArH), 6,34 (d, 1H, J = 2,8 Hz, ArH), 7,08 <t, 1H, J = 8 Hz, ArH), 7,46 (d, 2H, J = 8 Hz, ArH), 7,58-7,66 Cm, 2H, ArH), 7,73-7,73 <m, 2H, ArNH+ArH), 7,33 <m, 2H, ArH), 8,4 (d, 1H, J - 8,5 Hz, ArH), 11,46 (s, 1H, NH0C). EH (FAB, m/z); 486/484/482 (2 Cl, M+H> , 232, 143 , 73 C2SH2!C12 N_0 ( o ' •h.' < O C, 62,25] H, Â * N, 8,71] C, 62,42] H, Λ Oj| * N, 8,72. (p. e. ). Análise

Calculado; Encontrado?

Exemplo 13 1-(2,β-Oiclorofenil-5—(2-quinolini1metáxi)-2-indolinona

Sob uma atmosfera de azoto, uma mistura do composto do Exemplo 1F (3,48 g, 10,7 mmoles), carbonato de potássio (1,48 g, 10.7 mmoles), lS-coroa-6 <40 mg) e 2-clorometilquinolina <1,92 g, 10.8 mmoles) em 75 ml de acetonitrilo é aquecida ao refluxo (80°C) durante a noite. Adiciona-se 0,5 g de 2-clorometi1quino-lina e a mistura de reaccão é aquecida ao refluxo durante 24 horas. 0 solvente é removido por evaporação e o resíduo é dividido entre acetato de etilo e água. A fase orgânica é lavada com salmoura e é seca (HgSO^). A remoção do solvente produz 5,0 g de um óleo castanho. 0 produto em bruto é purificado por cromatografia de flash (sílica Merck 60, hexano-acetato de etilo 1:1) para produzir 1,4 g ¢3-5¾) do produto sob a forma de um óleo âmbar, o qual cristaliza a partir de metanol CCH.-,C1.-,) para dl» d*. produzir o produto do titulo puro ¢0,933 g, agulhas coloridas amarelas claras, p.f. 147-147,5°C). IV (KBr, cm"’3,); 1730 CC=0). RMN <C0Clo, 400 MHz)! £ 3,72 Ce, 2H, CCH.-.C0N>, 5,33 Ca, 2H, 0CH..,Ar), 6,28 Cd, ÍH, -J * 9,4 Hz, ArH), 6,84 C dd, 1H, ArH), 7,05 Cd, 1H, J = 1 ,5 Hz, ArH), 7,33 Ct, 1H, ArH), 7,45 C2s, 2H, ArH), 7,53 Ct, ÍH, ArH), 7,55 Cd, ÍH, ArH), 7,67 Ct, 1H, ArH), 7,81 Cd, 1H, J = 8,4 Hz, ArH), 8,05 Cd, ÍH, -I = ρ ·:, u-, wHm J Mt» f «Ma f ArH), 8,18 Cd, 1H, J * 8,4 Hz, ArH). EM CEI, m/z): 434CM)+, 292, 258, 143 Cp.e.). Análise paral C._,4Hi _C 1 ,-,Ν,-,Ο.-,

Calculado; C, 66,22; H, 3,70,‘ N, 6,43;

Encontrado! C, 65,83; H, 3,73; N, 6,32.

Exemplo 14 1-C2»6-Picloro-4— C2-^uinolinilmeiáxi >fenil3— -1 J3-dihidro-2H-indoi~2-ona A. 2,6-0.1 cloro-· 4-metoxi anilina

Uma solução de 4-nitrosof eno 1 IIC6,85 g, 56 mmo 1 es, purificada da. maneira, descrita por Hays et al. J.O.C., 32, 1-53 ¢1967)3 em tolueno C200 ml) é saturada com gás HC1 a 10°C. Adiciona-se então metanol C2 ml) ã mistura e a agitação é mantida durante a noite â temperatura ambiente. 0 precipitado é filtrado e o material em bruto (10,5 g) é purificado por cromatografia flash Csobre sílica Merck-60, hexano-acetato de etilo Sll) para se obter o composto do título puro (sólido branco, 2,6 g, 24%, p.f. 781-73 0 C: 1i t: p.f. 72-730C a part i r de etano1).

Β. 2, β-Di c 1 oro-4-roetoxiacetani 1 ida A uma solução agitada mecanicamente do intermediário anterior <4,94 g, 25,9 mmoles) em ácido acético glacial <2,5 ml) adiciona-se gota a gota cloreto de acetilo <1,92 ml, 27 mmoles). A mistura de reacção ê então aquecida a 90°C durante 20 minutos. A solução á deitada em água gelada <50 mi), o precipitado é recolhido, é lavado com água e é seco. D produto ern bruto <sólido branco, 5,56 g, 92%,· p.f. 184-1850C) é utilizado na etapa seguinte sem purificação adicional.

2,22 <s, 3H, CH.-.C0) , 3,80 <s, O

RMN (CDCI.-W 200 MHz)! S

O 3H, OCH.»,), 6,90 <s, 2H, ArH). C. N-Feni1-<2,6-di cloro-4-metóxi)ani1ina

Sob uma atmosfera de azoto, uma mistura de 2,6-dicloro--4-metoxiacetanilida <5,5 g, 23,6 mmoles), carbonato de potássio anidro em pó <1,63 g, 11,8 mmoles) e pó de cobre <0,16 g) em bromobenzeno <55 ml) é aquecida ao refluxo durante 3 horas. 0 excesso de bromobenzeno é então removido por destilação por vapor. Em vez de destilação por vapor, o excesso de bromobenzeno pode ser removido por destilação azeotrôpica e depois por adição de água â mistura do produto em bruto. Este procedimento é repetido até de se deixar de detect-ar bromobenzeno no azeotropo. 0 resíduo é dividido entre água e éter <30 ml de cada), a fase orgânica é lavada com salmoura <30 ml) e ê seca <MgSO^,>. A remoção do solvente produz o intermediário N-fenii““2,6—dicloro—·4— -metoxiaceianilida <6,7 g). Este último é submetido a refluxo durante 6 horas em K0H etanôlico a 10¾ <50 ml) s°k azoto. 0 solvente é evaporado e o resíduo é diluído com água <50 ml). u V · 46 precipitado é recolhido, é lavado com água e é seco in vacuo (sobre ) para produzir o produto do título <S,4 g, 86%, jL o só1ido c as tanho claro). RMN C CDC1, •u 400 MHz), ! S 3,81 Cs 1H, NH), 6,62 Cd, 2H, J = 7,6 ArH), 6,85 2H, ArH), 7,20 Ct, 2H, J * = 7,6 Hz, ArH). , 3H, OCR-,), 6,47 Cs,

O

Cm, 1H, ArH), 6,96 Cs, EM CEI, m/z)! 271/269/267 C 2 Cl Análise parai R gH^Cl^O Calculado.' c, 58,23,* H, 4,13; N, 5, 22 Encontrado; c, 57,84; H, 4,09; N, 6, 13 p.e. ,M>+, 262 CM-CR-,)* 3 D. Cloroacetamida de N-£ ( 2 6-dic loro-4-metó.xi)feni13~N~fenilo

Sob condições anidras, uma mistura de N-feni1C2,S-diclo-ro-4-metãxi )a.ni 1 ina (5,3 g, 19,3 mmoles) e cloreto de cloroaceti-lo C26 ml), é aquecida ao refluxo durante 1 hora. 0 excesso do cloreto ácido é evaporado in vacuo e o resíduo é dividido entre NaHCO,., saturado e acetato de etilo (30 ml cada). A fase orgânica

O é lavada com salmoura C30 ml) e á seca CNa.-,SO^). A remoção do solvente produz o composto do título sob a forma de uma mistura 1/1 de rotâmeros (6,7 g, sólido castanho claro). Aquele ê utilizado na etapa seguinte sem purificação adicional. RMN CDMS0"dfi, 400 MHz); 5' 3,81 e 3,84 C2s, 8H, 0CHo), 4,09 Cs, 1Η,K C0CR-,C1>, 4,43 Cs, 1H, C0CR?CI), 7,21-7,50 Cm, 7H, ArH). EM CEI, m/z): 3497347/345/343 C3 Cl, M) , 152 Cp.e.), 77. E. l-£ C2,6-Pic loro-4-hidrõxi) f eni 1.1-1,3-dih.tdro~2H-indol"2~ona

Uma mistura homogénea de cloroacetamida de N_£C2,6-d.i~ cloro-4-meiáxi)feni13-N-fenilo C0,5 g, 1,45 mmoles) e cloreto de Λ $ Ο ' alumínio ¢0,.5 g) é aquecida sob azoto a 250°C com agitação mecânica durante 15 minutos. A mistura é então deixada arrefecer até 1S0°C e é mantida a esta temperatura durante mais uma hora. A massa sólida castanha é tratada com agua <50 ml) e é extraída com acetato de etiio <2 x 50 ml). A fase orgânica é lavada com salmoura e é seca (MgSO^). A remoção do solvente produz uma espuma castanha que é triturada com éter para produzir o composto do título sob a forma de um sólido castanho claro <0,37 g, 87%, p.f. sinteriza a 135°C, funde a 200°C) que pode ser recristaliza-do a partir de metanol-isopropanol sem alteração do p.f.. RMN CDMSO-dg, 200 MHz)! 6 3,80 <s, 2H, CH.-.C0), 6,40 <d, ÍH, ArH), 7,06 <m, 3H, ArH), 7,18 <t, IH, ArH), 7,32 <d, 1H, ArH), 10,80 (amplo, 1H, ArH). M)+, 230 < p.e., EM <EI, m/z),’ 237/285/233 <2 Cl, 9CO- •C0> . F. 1 -ΙΓ2, β-Ρ 1 c 1 oro-4- (2-gui no 11 ni 1 metóxi ) f eni 13—1,3-dihidro-2H- ~ i ndo1-2-ona

Uma mistura da indolinona <1,6 g, 5,46 romoles) da etapa E, de K.-,C0o anidro em pó (1,12 g, 8, í mmoles), de 18-coroa-S <50 mg) e d© acetonitrilo <50 ml) ê agitada, â temperatura ambiente durante 30 minutos. Adici.ona—s© então cloridrato de 2—cíorome— tilquinolina <1,17 g, 5,46 mmoles) e a mistura é aquecida durante 4 horas a 90 °C. 0 solvente é removido e o sólido residual é lavado com água e é seco in vácuo. A seguir é recristalizado a partir de diclorometano-metanol para produzir o composto do titulo puro (sólido cinzento claro, 1,55 g, 64%, p.f. sinteriza- ÇãO a 152°C, fusão i a ,158oO . RMN <CDC1, 400 MHz) ! δ 3,74 <s, ."í 2H, CCH.2C0 ), 5,4.1 <s, 2H, ArCH20), 6,41 <d, 1H, J = 7,8 Hz, ArH) , 7,08 <t, 1H, J = -7 ς r i W Hz, ArH), 7,21 <m, 3H, ArH), 7,31 (d, 1H, J = 7,1 Hz, ArH), 7,58 <t, 1H, J = 8 Hz, ArH), 7,63 Cd, 1H, J = 8 ,4 Hz, ArH) , 7,77 <dt,

Análise para.* Calculadoi Encontrado! <d, 1H, J * 7,t > Hz , Ai Ή) , ) 1H, J = 8, 5 Hz, Ar H). FAB , m/z); 435 < Μ+Ή >+ 234, c 24 h16ci2n L0._ 2 2 c, iZim O·") * UV f f H, 3, 70; N, 6,43 c, 65,86; H, 3, ,68; N, 6,37 8,5 Hz,

Exemplo 15 l-renil"5-<2-múnolinilmetiãxi >-l ,3--dihidro-2H-indol-2-ona A. fester metílico do ácido acético de <2~fenilamino-5-hidráxi>~ benzeno

Uma mistura do éster metílieo do ácido acético de 2~C<2,6-diclorofeni1)amino3-5-hidroxibenzeno <3,25 g, 10 mmoles) do Exemplo 2F, trietilamina <3,06 ml, 22 mmoles) e paládio a 5% sobre carvão <50 mg) em metanol <10 ml) é hidrogenada à temperatura ambiente e á pressão atmosférica. Após uma recolha de 430 ml de hidrogénio, a reaccão é filtrada CSolka Floc) e o solvente é evaporado para se obter um sólido amarelo claro <2,5 g, 37% puro por RMN). Uma amostra analítica é preparada por trituração do produto em bruto com hexano-acetato de etilo. 0 material puro funde a 102-103°C e mostra-se sensível ao ar, luz e calor. <s, CLS £'t1, RMN <CDC1.-., 400 MHz)! S 3,60 <s, 2H, CCRgCO), 3,68 3H, OCR.,), 4,67 <s, 1H, NH>, 6,02 <s, 1H, 0H>, 6,72-6,80 <m, ♦JJ»·

ArH), 7,16-7,23 <m, 3H, ArH). EM <EI, m/z): 257 <M)+, 226 <M~0CHo>+, 196 <p.e.). •â*

Análise para; ,-NO.-.,

Calculado; Encontrado; C, 70,02; H, 5,88; N, 5,44,* C, 70,01,* H, 5,74,* M, 5,35. 43 ί © Ο éster metílico do ácido acético de 2-<feni lamino ?--5-<2-gui· nolini1metáxi ?benzeno

Uma mistura do fenoí <1,78 3, 6,9 mmoles? da etapa A, de carbonato de potássio anidro em pó <1,03 g, 7,4 mmoles?, de iodeio de tetrabutilamônio <0,350 3? e de acetonitrinilo seco <50 ml? é agitada á temperatura ambiente sob azoto durante 15 minutos Adiciona-se á mistura 2-clorometilquinoíina <1,6 3, 7,5 mmoles? e esta é aquecida a 65°C durante 72 horas. 0 solvente é removido e o resíduo é dividido entre água e acetato de etilo <50 ml de cada?. A fase orgânica ê lavada com salmoura e.é seca <MsS0^?. 0 solvente é evaporado e o resíduo <3,9 3, óleo castanho espesso? é submetido a cromatografia flash <sobre sílica Merck 60, eluente hexano-acetato de etilo 9!i e 3!i? para produzir o composto do título <sólido branco, 1,02 g, 37%, p.f. 106-107°C>. RMN <DM S0~“d>H , b 400 MHz?: s O v* t 43 <s, 3H, C00CH..,?, 3,61 < s, 2H, CCH.-.C 00 ?, 5,33 <s, 2H, 0CH._, Ar? , 6 co*« t OO- 6,63 < m, 3H, ArH?, 6,96 <m, 1H, ArH? , 7,04 -7,10 ! <m, 4H, Ar H?, *7 O / j £t. 1 <s , 1H , NH>, 7,61 <s, 1H, J = H —r *·* I ArH?, 7,69 <d, 1H, •J —. O — '»* ,49 Hz, ArH? , 7,78 <t, 1H, J - 7 Hz, ArH J t bj 0 <t, 2Η, J » Pt Ç t 0 Hz , Ar H?, 8,42 <d, 1H, J — 0 c u~« — 0|0 Π4 :, ArH ?. EM <EI, m/z? OOO O» .70 <M?+ 256 , z. :24 <P.e 25 6-CH. -j- SM'). Ahâlise para I o_ •mJ Calculado,' c, 75,36 ; h, 5,56 ; n, 7, 03; Encontrado ,* C, 75,23 ; h, 5,31 ; n, 6, 36. d i h i d r o-2H- i ndo 1 -~2~ona C. 1-fenil-5-<2-guinoliniImetoxl?-l

Uma solução do éster <1,2 g 2,46 mmol? do passo B em metanol mL? contendo IMaOH IN <10 mL? é agitada â temperatura ambiente durante a noite. 0 sólido é recolhido, lavado com água e seco em alto vacuo para dar o produto <0,81 g, p.f. 148-149°C,sólido branco). A recristalizaçáo do produto crú a partir de acetto 50

·' _N Ν. ..·' de etilo forneceu o composto em titulo purov‘C0,32 g, 35,5%, p. f . 148'“149°C) . RMN (DMSO-d,-, 400 MHz) í o 2H, OCH^Ar), 6,62 Cd, 1H, J=8,5 7,13 Cd, 1H, J = 2,3 Hz, ArH), 7, Cm,ΞΗ, ArH), 7,60 Ct, 1H, J = 7 Hz, ΑΓΗ), 7,77 Cdt,1H,ArH), 7,39 1H, J = 8,5 Hz, ArH). £3,71 Cs, 2H, CCH.-,C0>, 5,33 Cs, Hz, ArH), 6,30 Cdd, 1H, ArH), 37-7,42 Cm, 3H, ArH), 7,51-7,54 Hz, ArH), 7,66 Cd, 1H, J = 8,5 Ct,2H, J=8,4 Hz, ArH), 8,40 Cd, EM CE1, m/i :)i 366 .. _. 4* CM) , 224 Cp.e.)167 Análise para! C24H18N2° .4» Calculado: C, 78. .67: H, 4.3 51 N, 7,65: Encontrado: C, 78, 52 j H, 4.93: N, 7,77.

Exemplo 16

Acido acético de 2-(feniiamirio)-5-€2-quinolinilmetáxiIbenzeno

Uma solução do éster Cl g, 2,5 mmoles) do Exemplo 15B em metanol C30 ml) contendo NaOH IN C20 ml) é aquecida ao refluxo durante 3 horas sob azoto. 0 sólido obtido apôs arrefecimento é recolhido, é lavado com água e é seco in vácuo. 0 sal de sódio assim obtido (sólido amarelo, 0,34 g) é dissolvido numa mistura de metanol e água <4;1) e ê neutralizado com ácido acético glacial (0,13 ml,

•ti O mmoles). 0 produto é recolhido e seco (0,76 g, 73%, p.f. sinterização a Í05°C, fusão a 126~128°C>. RMN C DMS0~dc, 400 MHz): £ 3,53 Cs, 2H, CCH...C0), 5,32

Cs, 2H, OCHjArí, 6,62 Cm, 3H, ArH), 6,35 Cdd, 1H, ArH), 7,4-7,12 Cm, 4H, ArH), 7,22 Cs, ÍH, NH), 7,61 Ct, 1H, J =7,1 Hz, ArH), 7,69 Cd, 1H, J = 8,5 Hz, ArH), 7,78 Cdt, 1H, ArH), 8,0 Ct, 2H, J = 9,1 Hz, ArH), 8,42 Cd, 1H, J = 8,5 Hz, ArH), 12,21 Cs, 1H, C00H). 31 Cp.e.). EM C+FAB, m/z): 385 CM+H)+,

Análise para! Calculado,' Encontrado

Exemplo 17

Acido acético de 2*~£C2»e—diclorofenil ?aminoI-“-5-"C3—fenoxibenziláxi Ibenzeno

am i noj-5-(3- f enox1benz i1áxi Ibenzeno

Uma mistura de éster metílico do ácido acético de

do Exemplo 2F, carbonato de potássio anidro em pó <0,55 g, 4 mmoles), iode to de tetrabutilamónio (.0,050 g) e acetonitrilo seco (50 ml) é agitada à temperatura ambiente sob azoto durante 30 minutos. Adiciona-se então â mistura 3-fenoxibenzi 1cloreto (2 g, 3,17 mmoles) e aquela ê colocada num banho de óleo que é mantido á temperatura de 65-70°C durante a noite. 0 solvente ê removido e o resíduo é dividido entre água e acetato de etilo <50 ml cada). A fase orgânica é lavada com salmoura e é seca <Mã._,S0^). 0 solvente é evaporado e o resíduo (óleo castanho, 4,2 g) é purificado por cromatografia flash (sobre sílica Merck 60, hexano—acetato de etilo 85íí5) para produzir o produto do título (óleo amarelo, 2,83 g, 73%).

B

propanodiol V V ν .

Uma solução do éster <2,2 3; 4,3 mmoles5 da Etapa A em dioxano <20 ml) contendo NaOH IN <7 ml) é aquecida ao refluxo sob azoto durante 4 horas. 0 solvente é removido e o resíduo é dividido entre HCl diluído e éter <30 mi cada). A fase orgânica é lavada com salmoura, é seca CNa.-.SC^) e é filtrada. 0 filtrado é tratado com trisChidroximetil )aminometa.no <0,48-5 g> em metanol <20 ml). 0 solvente é evaporado para se obter um xarope in vacuo o qual é diluído em acetato de etilo. 0 sólido cristalino é recolhido <sói ido branco, 1,6 g, 60%) e é recristalizado a partir de metanol-água para se obter o composto do título puro <0,88 g, P.f. 137-138°C). RHN <DMS0-d,, 400 HHz): S 3,41 <s, 6H, 0CH...C), 3,43 <s,

D Z L,Ar ), 6 fr-f J \ * 1 J 1H, J : = 8,7 Hz, ArH), 1H, J = 2,3 Hz, Ar H), 6,93 < dd, 1H, , /, 06 <t, 1H, Ar H>, 7,13 <dt, 1H, :, ArH), 7,36-7, 42 <m, 5H, ArH), 8,81 < a mp lo, per mu t ado c om D._,0, 1Η, NH). EH C+FAB/mz/)! 493 CM)*. Análise parai Co1HwCl^lo0_ Calculado; C, 60,49; H, 5,24,* N, 4,55; Encontrado; C, 60,33,* H, 5,24,* N, 4,63. C. Ácido acético de 2~C2J6-diclorofenil)amino1-5-<3-fenoxibenzi loxi>benzeno

Uma suspensão do sal <0,575 g, 0,83 mmoles) da Etapa 8 numa mistura de éter e água CS ml cada) é acidificada com HCl IN Cpara pH 5,5). As camadas são separadas e a fase orgânica é lavada com salmoura. Após secagem CNa^SO^), o filtrado é concentrado para ca. de 2 ml. A critalização é induzida pela adição do hexano. Os cristais são recolhidos e secos para produzirem o composto do título puro Csólido branco com amarelecimento a 112°C).

, 0,33 g, p.f. 116-117°C 53

, . \ ' ^ . £ £ ν RMN CDMSO-d,, 400 Μ Hz? : 5 3,67 C s,' 2Η, CCH.,C0) , 5,01 Π X·

Cs, 2Η, OCH.-,Αγ>, 6,31 (d, 1Η, ArH), 6,73 Cdd, 1Η, ArH), 6,88 (s, ώ, 1Η, ΝΗ), 6,91-7,2 Cm, 8Η, ΑγΗ), 7,35-7,40 (m, 3Η, ArH), 7,46 Cd, 1Η, J = 8 Ηζ, ΑγΗ), 12,69 Cs, 1Η, C00H). EM CEI, m/z): 497/495/493 <2 Cl, Μ) , 475 CM-H20>+f 310, 292, Cp.e., 310“Η20)+.

Aná 1 i se para; C___H._., C1 _N0, -- 27 21 2 4

Calculado,1 Encontrado C, 65,60; H, 4,28; N, 2,83; C, 65,46,’ H, 4,24,’ N, 2,83.

Exemplo 18 l-C2,6-0iclorofenil )-5-r7-cloro-2-C^uÍnolxnil»)gt6xí )3- —1,3—dihidro—2H—indol~2—ona 0 composto do título é preparado por utilização do processo do Exemplo 15C, mas partindo-se do éster metilico do ácido acético de 2~CC2,6-diclorofenil?âmino3~5“C7-cloro~2-quino— 1iniImetóxi)benzeno do Exemplo 5. 0 material em bruto é submetido a eromatografia de flash Csobre sílica Merck 60, pré-absorvida em d i c1o rormeta no, produzir um sólido eluída com hexano-acetato de etilo 8:2) para •quase branco -que é recristalizado a partir de acetato de etilo. Os cristais sáo lavados com hexa.no e são secos, p.f. 175“176°C. RMN < CDG1, 400 MHz) í $ 3,74 Cs, 2H, CH.7C0), 5,32 { 3 t 2H, ArCH._,0), 6,29 Cd, ÍH, J = 8,5 Hz, ArH), 6,84 Cdd, 1H, J = & j 5 Hz, ArH), 7,06 Cs, 1H, ArH), 7 ,33-7,52 Cm, 4H, ArH), 7,67 Cd, 1H, J = 8,5 Hz, ArH), 7,76 Cd, 1H, -J = 8,7 Hz, ArH), 8,06 Cs, 1H, ArH), 8,17 Cd, ÍH, J = 8,5 Hz, ArH). EM CEI, m/z): 474/472/470/468 C3 cloros, MV, 205/203/201 <2 cloros, M-267)+, 294/292 <1 cloro, p.e.).

Análise para: C.-, C1 X.4 i·»* ·»* 4» X. N, 5,96;

Calculado: C, 61,36; H, 3,22; ^ ^ V' ^ ^ V' Encontradt C, 61,16,1 H, 3,15; N, 5,88.

Exemplo 13

Os compostos ácido 5- © 12~hidro.xieicosatetraenôico CS-ΗΕΓΕ e 12-HETE) e LTB^ são os produtos iniciais da oxidação do ácido araquidónico na cascada da lipoxigenase, relativamente aos quais foi demonstrado que medeiam os variados aspectos das reacçQes inflamatórias e alérgicas. Isto é especialmente verdade relativamente ao 5,12-diHETE, que é também referido como LfB^

Cver Ford-Hi tchinson, J. Roy Soe . Hed., Med. , 74, »331 <1981)3.

Os compostos que inibem a libertação mediada pelo PLA., do ácido araquidónico evitam, por isso, eficazmente, a oxidação do ácido araquidónico nos vários produtos de leucotrieno via cascata »da lipoxigenase. Oeste modo, a especificidade da acção dos inibido— res de PLA-, pode ser determinada pela actividade dos compostos de ·£· ensaio neste ensaio, o qual determina a capacidade dos compostos em inibirem a síntese do L 1'B^ produzido pelos leucócitos polimor-f©nucleares <PMN) produzidos pelo glicogênio da ratazana na presença de substrato exógeno.

Este ensaio é realizado da seguinte maneira; leucócitos polimorfonucleares de ratazanas CPMN) são obtidos a partir de ratazanas Wistar fémeas <150—200 g), as quais recebem uma injec— ção de glicogênio a 6% <10 ml i.p.>. As ratazanas são sacrifica das 1.3-24 horas apôs injecção por asfixia com C0.-t e as células produzidas são colhidas por lavagem utilizando-se salina fisiológica (NaCl a 0,9%). 0 exudado é centrifugado a 400*g durante 10 minutos 0 fluido sobrenadante é rejeitado e a pelete celular é ..7 ressuspensa para uma concentração de 2,0 x 10 células/ml em HBSS contendo Ca+' e Mg'+ e 10 /-iM de L-cisteína. ' L « Λ \ «t^ V ^ A 1 ml de aliquoias da suspensão celular, adicionam-se os medicamentos em ensaio ou o veiculo, e depois aqueles são incubados a 37°C durante 10 minutos. Adicionam-se então A23187 (1 ,uM3, C^HJ-AA (3,0 juCi/rol) e AA não referenciado (1 juM) e as amostras são incubadas durante mais 10 minutos. A reacção é concluída por centrifugação e por peletizacão das células. Os sobrenadantes são então analisados por análise de CLAP sobre uma coluna de 15 cm x 4,6 mm de ID supelcosil LC-18 (SupelcoKSM), utilizando-se um sistema de dois solventes a um caudal de 1,4 ml de caudal total, da maneira que se seguei

Solvente A; Solvente BI Gradiente.'

70 5 30 de 17,4 mH de Η.-,Ρ0„! CH.-.CN CH.-CN O « (o sistema é equilibrado com o solvente A).

As variações das percentagens do solvente das de forma 1 são efectua- : f vi»»»» v»

Tempo Percentagem A Per c ente.' 0 100 0 15,0 100 0 20,0 65 35 40,0 65 35 42,0 10 90 50,0 10 90 50,1 100 0

Injecçfíes140jul de cada sobrenadante são injsctados directamente sobre a coluna e os metabólitos do ácido '"Ή araquidònico são controlados por meio de um monitor, através da utilização de um detector de radioact-ividade on-line (Ramona, IN/US, Fairfield, NJ).

EfT

Padrões ί 4 4 10 - Z;0 x 10' dpm de e i cosanôides de interesse são injectados em 90 jul de um "cocktail" de EtOH. A co-cromatograf ia com leucotrieno C "Ή3 E·’^ <LTS^> padrão num meio de PrIN estimulado e exposto ao medicamento é comparada com a encontrada num meio de células estimuladas e não expostas a qualquer medicamento. 0 resultado dâ-nos a percentagem de inibição.

Os resultados são expressos como percentagem de inibição para uma dada dose de um determinado compostos ou como um valor Cl,

Os compostos de ensaio do presente invento proporcionaram neste ensaio os seguintes resultados;

57 -X QUadrO I

Compos to do Exemp1o N£ % de Inifoicêío diclofenac NA (estimula) 1 *“l 96 (a 0,5jjM) O 4 5 56 (a 0 ,· SjjM ) 95 Ca lOjuM) & 80 Ca 0, SjjM> 7 34 Ca lOjuM) f~í 67 Ca 0.,5/jM) 9 16 Ca 0, SjjM) 100 Ca .10,uM) 10 65 Ca 0,SjjM) 11 ~6$ Ca 0,5,uM) 12 70 Ca 05.;jM) 13 39 Ca 0,5,uM) 15 40 Ca 0,5.uí'1) 16 90 Ca 0,Sy.ili> 0,01 O 0‘~' K* J Vi. >0,01/<0,1 ΝΑ — Nsfo ftctivo. c i c1ooxi genase * um valor negativo significa uma potenciação da C s i n tese do F‘GE0>.

Exemplo 20 0 processo do Exemplo 19 tef também empregue na

determinação da. extensão da. inibição da síntese do produto TxB._, da oxidação da ciclooxigenase do ácido araquidònico proporcionada pelos compostos do presente invento.

Neste ensaio, o processo do Exemplo 19 é efectuado como já descrito antericrmente. Contudo, a fim de se determinar a actividade da ciclooxigenase, as amostras são co~cromatografadas

O com a referência autêntica C’"'H3“TxB._,.

Os resultados são calculados da mesma maneira que no segui r ί

Exemplo IS e apresentam-se a

Quadro II

Composto do

Exerop 1 o Nl* % de Inibição CIr^ f i,m~í diclofenac 0,03 í 4 Ca 0, SjjM) 2 ca. io 3 >1 4 5 0 Ca 0,5;uM) 3,7 27 Ca IOjuM) 6 26 Ca 0, SjuM) 7 -26#Ca 0,SjuM) .q 30 Ca 9 38 Ca 0,S/jM) 100 Ca IOjjM) 10 32 Ca 0,5juM> lí -8# Ca 0.·S/jM) 12 -2# Ca 0,SjlíM) 13 10 Ca 0,SjjM) 15 -9# Ca 0,SjLfH) .16 10 Ca 0,5juM) um valor negativo significa uma potenciação da ciclooxigsn-;Se C s i ntese do ΡΘΕ..,).

Exemplo 21

Os compostos do presente invento são ensaiados de acordo com um ensaio A._, da fosfolipase isolada in vitro para se determinar a capacidade dos compostos em inibirem a libertação do ácido araquidónico de um substrato contendo ácido araquidónico 60

por meio da acção do enzima da fosfol ipase A.-, proveniente de fontes humanas e nSo humanas.

Este ensaio ê efectuada da seguinte maneira. A um tubo de polipropileno de 15 ml, adicionam-se as seguintes substâncias!

Agente Volume, ul Cone. Final Subs t rato "'H-A A E. c ο I i * 25 5 nmo1es PL CaC12 (0,lM)k' Fi 5 mM Tris-HCl (0,5M)pH 7,53 20 100 mM 25 Med i c aisen to/ve í c u 1 o “ 1 50 mH PLA., 25 Volume que p roduziu 12% 100 de hidr ôlise em 10 min. ψ pré-incubado à temperatu? '& ambieiite durante 30 minutos a?ites da ad i c So do subs t r a to. ^ Preparado pela adiςSo de 2 ml de água desionizada e “Pi . destilada a 2 ml de “H~araquidonaio designado por E. co 1 i (conta—

O gem inferior), ao qual se adiciona i ml de H—araquidonato designado por E.coli (contagem superior), para se obter um total de substrato 5 m (contendo .1000 mmoles de f osf ol á pi do). A CaCl.-, 0,1 m Stock, necessário para a activida.de do enzima. q Δ

Trisma-Bass 0,5 m Stock.

Trisma-HCl 0,5 m Stock. 0 pH foi ajustado para 7,5 (óptimo para o enzima). ^ Agua desionizada e destilada. 10 mM Stock preparados em sulfóxido de dimetilo. Preparar uma diluição de l!2 com sulfóxido de dimetilo e adicionar 1 kil a um tubo de ensaio de 100 ,ul. b Uti 1 izaram-se dois enzimas PLA.-, humanos! * . . Α Λ ^ '‘"A,,. ^ ^ V *»· , a) Extracto de ácido de plaieletes""humanas semi-purificado Cem 10 mM de tampão de acetato de sódio, pH 4,5). Remover o precipitado de proteína por centrifugação a cerca de 2200 rpm durante 10 minutos. b) Fluído sinovial humano purificado.

Incubar os 100 ttl da mistura de reacção durante 10 minutos a S'7°C num banho de água em agitação. A reacção é concluída pela adição de 2 mi de tetraidrofurano, seguida por agitação em vórtex. Condicionam-se colunas de NH.~, (100 ug/ml Analytichem International) com 0,5 ml de tetraidrofurano seguidos de 0,5 ml de tetraidrofurano/âgua C2 ml .'0,1 ml, v/v). A amostra é introduzida, nas colunas e ê extraída lentamente das mesmas. 0 ácido araguidónico hidrolisado retido nas colunas é aluído das mesmas com 1 ml de teiraidrofurano/ácido acético glacial (2%). 0 ácido araguidónico é transferido para frascos de cintilação e é quantificado por análise de S-contagem.

Prepara-se uma amostra de "contagens totais" por adição com uma *·* pipeta de 25 jul de "Ή-araguidona.to E.coli directamente para um frasco de cintilação, ao gual se adiciona 1 ml de tetraidrofurano. Adicionam-se 10 ml de aguasol (cocktail de cintilação) a todas as amostras. Cálculos! C3H.1AA dpm (amostra) % de hidrólise = ................................... - contagens totais dpm C3H3AA dpm (hidrólise não especifica) -..... ........................... X 100 contagens totais dpm veículo dpm - medicamento dpm % de variação = x 100 veículo dpm

Activida.de dos Medicamentos Padrão,*

Cl,--» íjjM 50

Medicamento PLA-, da PLA._, do Ja» 4«· PIateiete Humana Sinovial Humano Ácido Araquádónico 8,5 3,2 Monoaleio 25,2 0,14

Quando ensaiados neste ensaio, os compostos do presente invento proporcionaram os seguintes resultados.*

Quadro III

Composto do % de Inibição a 10/jM Exemplo N2 •±: HP* ΨΨ HSf diclofenac O ·“« O 0 O 21,7 F. c ·-.« f £· -127® 6 ~8,6 o O o 7 3,6 -6.5,4"* 8 42,5 S •“l »“t 4UH f Au 15,7 11 - O O o í ·«* 12 — -41,5*** 13 1 c Ψ Ψ Ψ -11*·"·" (a 50 SM) 15 - -24*** 16 14,2 4, o 18 •*l ♦“» } JL. 5, 1 .....CIr-,0........<M>........

HP HSF 6,3 $ platelete humana fluído sinov.ia 1 humano os valores negativos significam uma potenciação do HP ou do HSF. 0 composto do Exemplo 2 é ainda ensaiado in vitro neste ensaio contra o PLA._,, o qua 1 é derivado de uma série de fontes. Os resultados são resumidos no Quadro 1M.

Quadro IV

% de Inibição a uma concentração de IOaíM

HP HSF

Condrocito Fluido de Periiode coelho nit-e de Ratazana L i pasePancreática

Veneno de Abelha 12,7 47,6 84.± 63,7 30, OO "7 OO ; /

Os resultados indicam que o composto ensaiado é extremamente eficaz na inibição do enzima de PLA.., que liberta o ácido .t£ araquidõnico a partir de uma série de fontes.

Exemp 1 o 22 A capacidade dos compostos do invento em inibirem o edema da pata induzido pela administração exógena de PLA-, é medida através do ensaio in vivo do edema da pata murina induzido pelo PLA0. Este ensaio é realizado da seguinte maneira.* Ratos CD-I machos, não submetidos a jejum (8 semanas de idade;31-36 gramas), são colocados em caixas de plástico em grupos de seis. 0 volume da pata posterior direita á medido empregando-se para isso pletismografia de mercúrio <tempo zero). Os compostos são administrados oralmente <0,5 ml de Tween-80 a 0,5¾) 1 a 3 horas antes da injeccão de PLA.-,, ou intravenosamente <0,2 ml em dimetil-sulfóxido a 3%/salina) 3 minutos antes da injeccão de PLA.-,. Uma

» sL solução de PLA._, purificado, proveniente da serpente Mdiamond bacfc cotton mouth" <A. piscivorus Piscivorus) é preparada em salina â concentração de Bpg/ml. Cinquenta (50) jul <30 ,ug) desta solução de PLA.-, são injectados subcutaneamente na pata posterior direita •Sm· por meio de uma seringa de plástico de í ml (agulha de 1", 27 gauge). 0 volume da pata injectada é medido ao fim de 10 minutos, , ,·30> 30 minutos e 60 minutos após a injecção de PLA._,. Os animais são mortos com C0.-, no fim do estudo.

Cf edema da pata é calculado por subtracção do volume do tempo zero do volume registado em cada período. 0 edema da pata médio para cada grupo de tratamento é então calculado e á expresso como O-fl ± 8.E). Os efeitos do medicamente são expressos como variação percentual relativamente aos valores de controlo (veículo). A expressão estatística, á determinada por meio de uma análise de uma via de variância com comparação do LSD com o controlo (p<0,05>. Os valores DEcrt são determinados por utilização de análise de regressão. A actividade dos medicamentos padrão neste ensaio foi a seguinte:

Composto C i p r ohep tadi na BW75SC Dexametasona* Naproxen '$.·£ · Acido Aristocólico

Lufarrelolido 50 aos -»10 min 3,1c,0 10 18 Não Activo Não Activo ·%' p.o - 3 horas

Alguma actividade <inibição a 30%) apenas guando eo-injactado com um enzima.

Quando ensaiados neste ensaio, os compostos do invento apresentaram os seguintes resultados: — flFl “

Quadro V

Composto do Dose % de VariacSo do Edema Exemp1ο N2t ojsZJiâ 3 min 10 min 30 min 60 m diclofenac 10 . ,* í. 1 . V . "19 -15 -1 100 (P.O.)** - -15 .1 1 (í.p. rm “10 -31 — 10 C i . p . > "39 "77 -37 - •-I 10 C i . p. > - -45 -37 __ O O 100 ( p . o . ) ~ "52 “48 O ·«·* 10 (i . P . ) - + 12 -10 + 12 fc> 1 < i . p . ) -4 -18 -12 _ 10 < i . p. > - -24 -24 — *2* O 'η'.Ί so < p . o . ) - -IS' -39 -10 7 1 C i . p. ) — -54 -44 — 10 ( i . p . ) - — OO -39 - © IJ 10 C i . p. > - — O.Q .λ.*-* -43 -47 so ( p . o . ) - +35 -37 3 10 ( i . p . ) -41 -54 - so ( p . o . ) -12 -4 — 10 1 ( i . p . ) - "29 -20 - 10 (. i . p . ) ~ -49 -35 12 10 < i . p. > -15 -45 ^2P. .. 57 ί.ΐ -36 50 Cr.ο.) # *** ϊ ntravenoso perorai i π t r ape r itonea1 presente induzido

Os resultados mostram que os compostos do invento são muito eficazes in vivo na inibição do edema pela administração exógena de PLA-, do veneno de serpente

Os compostos do presente invento são avaliados relãti vamente à sua capacidade em inibirem as vias da lipoxigenase e/ou cic 1 ooxigenase do metabolismo do ácido araquidónico no ensaio in vivo da -piritonite zimosan murina.

Este ensaio é efectuado da seguinte forma.' ratos macho CD-I 03 semanas de idade? são colocados em caixas de plástico em grupos de seis. Os animais são injectados com 1 ml i.p. ou de zimosan a 1% em salina a 0,3% livre de pirogénio, ou de salina (controlo não estimulado?. Os compostos são administrados oralmente 1 hora antes da injecção com zimosan. Vinte minutos apôs a injecção com zimosan, procede—se á asfixia dos ratos por meio de inalação com C0.-, e a cavidade peritoneal é lavada com 2 À. ml de uma Solução salina fria equilibrada de Hanks (HBSS? sem CaCl.-,, HgSCP * 7H._,0 e HgC 1* SHo0. 0 fluido da lavagem peritoneal *» ,ώ «â· ·£» de cada rato é retirado por meio de uma seringa e é colocado em tubos de ensaio de plástico de S ml, os quais são colocados por sua vez em gelo, sendo o respectivo volume registado, A preparação das amostras por avaliação por ELISA é a seguinte! As amostras são centrifugadas a 800*g durante 15 minutos,' adiciona--se .1 ml do sobrenadante a 8 ml de metanol gelado e mantém-se a 68

mistura a 70°C durante a noite para se precipitar a. proteína; as amostras são então centrifugadas a 800*g durante 15 minutos e depois segue-se um processo de secagem num concentrador de velocidade Savant. As amostras são reconstituídas com 1 ml de um tampão ELISA gelado e são guardadas a —70°C até serem ensaiadas. 0 ensaio relativamente aos eicosanôides ÍLTC, e A-tetn-PGF, ) é efectuado de acordo com os processos ELISA convencionais

Us compostos a testar oralmente são suspensos em Tween 80 a 0,5%. Os compostos a testar intraperitoneaimente são suspensos em meti 1 celulose a 0,5% em salina a 0,S%. 0 nível de metabálito total no fluido de lavagem/rato é calculado e o seu valor é determinado por meio de uma análise de variância de uma via com comparaçSes de LSD para controlo <p í 0,05). Os efeitos do medicamento são expressos como uma variação em percentagem relativamente aos valores de controlo.

Neste ensaio, a actividade dos medicamentos padrão é a seguinte:

Composto DEL. mg/fcg p.o. LTC . β-f «tO-PÕF α / X ....... 4~ BW755C <10 22,0 Fenidona 24,0 <30,0 Indometacina Não activo 0,126 Ibuprofen Não activo 7,0

Quando testado neste ensaio, um dos composto do presente invento e o composto anti-inflamatôrio diclofenac proporcionou os seguintes resultados:

Quadro IV

Compos to do Dose % de Inibição Exemp1ο N2. mg/kq LTC . 6“ceto“PQF diclofenac ·***.« 1 (. p. o. > 50 ( ρ . o . ) ......... 4 79 47 es -Oc·’'·1·· não activo '0,77

DE -fef-S-gff-

LTC . 6-ceto-PQF -#-- administrado peroralmente. valores negativos indicam potenciação.

Os resultados mostram que, ao contrário do medicamento diclofenac, cuja actividade anti-· inflamatória resulta da sua actividade inibidora sobre a via da ciclooxigena.se, o composto do presente invento exerce um efeito inibidor potente sobre ambas as vias da lipoxigenase e da ciclooxigenase. 70 í

Exemplo 24 A aciivxdade antagonista para com o LTD^ dos compostos do invento é determinada no ensaio da traqueia do porquinho-da--índia isolada in vitro.

Este ensaio é realizado da seguinte forma.* porquinhos--da-índia machos Hartley (350-400 g) são mortos por meio de um golpe na cabeça, o pescoço é aberto e a traqueia é retirada. A traqueia é mantida numa solução salina fisiológica gaseificada, o tecido conjuntivo e a gordura são retirados e são cortados em anais com aproximladamente 2 mm de largura (normalmente cada anel contém dois segmentos cartilaginosos). Passam-se então duas peças de sutura de seda através do lúmen do anel da traqueia e aquelas são atadas em torno da cartilagem, em cada um dos lados do músculo traqueano. 0 anel traqueano é suspenso entre um gancho de vidro e um transdutor de deslocamento de forca num banho de órgãos para medição da tensão isométrica. Os tecidos são mantidos a 37°C numa solução salina fisiológica gaseificada (95% de 00..,/5% de C0._,) com a seguinte composição! NaCl (100 mM), .tá. ,ím ΚΉ,-,ΡΟ. (1,13 mM), KOI (4,74 mM), CaCl.., (2,6 mH), MgSO,«7H...0 (1,13

Am, *+ Am, *F AÍ· mM), MaHCO^ (25 mM), dextros© (11,1 mM) e indometacina (1 juM).

O 0s anéis traqueanos são mantidos a uma tensão residual de 2 g e são equilibrados durante 45 minutos (com lavagem frequente e reajuste da tensão residual). Os anéis traqueanos são contraídos em primeiro lugar por meio da adição de carbacol (3x10 ^> para se determinar a reacção do tecido e estabelecer uma contracção de referência. Depois de obter um nível de contracção estável (aproximadamente 30 minutos), os tecidos são lavados várias vezes até ao restabelecimento da tensão de partida e depois são re-equi-librados durante 30 minutos. 0s tecidos são então incubados durante 45 minutos com um antagonista de ensaio (ou 1x10 “M ou —ς 1x10 ~M) ou com 10ji.il de um solvente de controlo adequado 71 71 * -N , x (contraio, não tratado). Um tecido de cada grupo serve de controlo. Vinte minutos antes da construção da curva concentração cumulativa de LTO,, adiciona-se a L-cisteina (concentração final do banho de 1x20 'Ί'Ο para inibir a foioconversão de LTD^ em LTE.

Constroi-se para cada tecido apenas uma curva de concentra·· ção de LTD.—reação. 4

Todas as reacçSes ao LTD^ para um tecido individual são medidas como percentagem relativamente à contraccão de referência daquele tecido ao carbacol. A actividade antagonista do LTD^ é determinada por comparação das curvas de concentração reacção do LTD^ na presença ou ausência de antagonista. 0 valor do deslocamento relativo para a direita da curva tratada com o antagonista relativamente á do tecido tratado com o solvente (controlo) é calculado como uma taxa de concentração (Eq. A) e é utilizado nos cálculos subsequentes para se obter um valor ρΚ£; do antagonista (Eqs. B e C). No caso da reacção máxima ao LfD^ diminuir, procede-se ao cálculo de CEc,. para aquela curva em particular, indica-se qual o pK0 "aparente" e o composto é E> designado como "não-competitivo". CEr-y do 50 tecido tratado

A) Taxa de Concentração (TC

DE 50 do controlo IIComposto de Ensaio! B)

IC-1 C) log kp — pkp

Se um de fazer baixar composto mostra ser actiyo e/ou mostra ser capas a reacção máxima ao LTD„, então deve-se utilizar 4 i. %

uma gama de múltiplas ta: concenfcraçSes do s de concentração composto de snssio que ρrnHijta que deverSo ser então empregues na realização de uma análise de Schild e na determinação de um valor pA._,, se apropriado. A actividade de referência trieno neste ensaio é a seguinte! dos antagonistas de leuco—

Compos t=: Εϋ &

Ly-17 Wy-48.252 7,44 ± 0,12 6,90 ± 0,23

Quando ensaiado nesta experiência, um composto do presente invento proporcionou os seguintes resultados;

Quadro VII

Composto do Exemplo N£ pR’_. Taxa de Concentração £5 6,26 _c 10

Os resultados anteriores demonstram que o composto ensaiado apresenta uma actividade antagonista significaí-iva, de acordo com os resultados ofciid> traqueia do porquinho-da-índia isolada in vitro. do leucotrieno ís no ensaio da

Exemplo 25

Os compostos do presente invento são submetidos ainda ao ensaio do edema da pata da ratazana induzido pela carra.qena.no 73

para se determinar a sua capacidade em inibirem a reacção infla matória aguda.

Este ensaio foi realizado da seguinte maneira! Ratazanas machos Sprague-Dawley com 140-180 g, em grupos de 6 animais, são injeetados subcutaneamente na pata direita com 0,1 ml de carragena.no a 1% no tempo zero. As leituras pietismográficas com mercúrio (ml) da pata são efectuadas no tempo zero e 3 horas mais tarde. Os compostos de ensaio são suspensos ou dissolvidos em meti 1 celulose a 5% e são administrados peroralmente 1 hora antes da administração da carragena.no. 0 aumento do volume da pata (edema em mi) produzido pela carragenano é então medido. Este é calculado (volume do tempo igual a 3 horas menos o volume do tempo zero), determinando--se então a inibição em percentagem do edema. Para a determinação da significãncis estatística utiliza-se o ensaio-t de Student impar. A activ.ida.de dos medicamentos padrão neste ensaio é a seguinte;

Medicamento ΡΕ.ΓΛ Indometacina Aspirina FeniIbutazona Quando ensaiado nesta presente invento e o medicamento

Ora1.(95% de C.L.) mg/fcg 3,7 (0,6, í 4S,4 (33,1, 645,6) oc o c o o \ A, } ··? f 231,0) exper iênc ia, um composto do anti-inflamatór io di ciofenac deram os seguintes resultados!

Quadro VIIX

Composto do Exemplo N2 Dose (mg/kg) % de Inibição p.n rtics/kg <:peroral DF -h.=^- diclofenac . 0f 5 15 23 2,0 50 8,0 75 o •In· 63 50 58 100 66 * administrado peroralmente Os result ados mostram que o composto ensaiado tem uma actividade siqnific ativa no ensaio do edema da paia da ratazana induzido pela carragenano, evidenciando efeitos na reaccão j. n f 1 ama tó r i a aguda .

Exemplo 26

Os compostos do invento são submetidos ao ensaio da gastro-irritação aguda na ratazana para determinar o seu potencial em provocar irritação gástrica guando administrado em doses gue excedam a dose eficaz. 0 medicamento anti-inflamatório não esteroidal diclofenac ê ensaiado como padrão de um composto do qual se sabe que possui efeitos secundários gastro-irritantes.

Este ensaio é efectuado da seguinte maneira; ratazanas machos Srague Dawley (190-220 g) são submetidas a jejum durante 18 horas antes da administração do medicamento. As ratazanas são divididas em grupos de 8 e são codificadas Ci.e., o observador das iesdes gástricas não tem conhecimento do tratamento com o -/Ρ'

. V ' Ji V ·κ medicamento). Os medicamentos são dissolvidos ou suspensos em Tysen SO a B% e são administrados por intubação (introdução de um tubo) gástrica, a um volume de í mi/3 de peso corporal. As ratazanas de controlo recebem apenas o Tween 80. Quatro horas depois da administração do medicamento, procede-se á observação das ratazanas através do registo da incidência e gravidade da gasfcro-irriiação, empregando-se o seguinte sistema de classificação.’ 0) Nenhuma irritação ou lesão; Ϊ) irritação ívermelhidão) 2) i 5 lesões (úlceras); e 3) > 5 lesões. 0 ensaio de Dunnett <« = 0,05) é empregue para se calcular a média ±8E de cada grupo de ensaio e a significância estatística.

Os resultados deste ensaio são apresentados no Quadro

Quadro IX Composto do Dose % de Ratazanas Exemplo N2 (mg/kg) com lesões 61 (mg/kg) dic iofenac 20 2 400 O1 200 0^ 1 „ . b horas apôs a administração de uma dose individual do composto. Resultado após 3 dias de admini stração do c ompos í 0 ao nível de dosagem i nd ic ado. Os resultados mostram que 0 c omposto do presente invento não possui po ten c i a1 pa ra a gastroir ritação comparativa- mente com o diclofenac.

Claims (3)

1. li - Processo para a preparação de um composto com a fórmula I ou Ia:

   (Ia)

   (I) em que ou R é hidráxi, alcóxi .inferior ou alcóxiamino; J R* é hidrogénio ou A(CH._,> 0-; — !_S i R-!“ é hidrogénio ou A<CH.-,> O-, com a condição de um de R e R" ser A(CH.~,) 0- e o outro ser hidrogénio,’ n é i ou
2. 2; A é fenoxieti lo, fenox.ifeni.lo ou um grupo com a fórmula

   R4 em que

   X é -N- ou X 77 77 N-, -N

   c c R" R- R· Z é -A = A-, -i R“ é hidrogénio, alquilo inferior ou fenilo,' R^ é hidrogénio ou alquilo .inferior; ou Ρ<’~ e tomados em conjunto formam um anel de henzeno substituído facu2tativamente por halo ; em cujo o caso o ponto de ligação de A ao resto da molécula pode pertencer a este anel de benzeno; R‘“‘ é hidrogénio ou alquilo inferior; f-, R" é hidrogénio, halo ou alquilo inferior; e dos seus sais farmacologicamente aceitáveis; caracterizado por compreender um do seguintes processos; a) a eter i f i cação de um composto de fórmula!

   q e R" é hidroxi, éster, com um κ Ρ em que R“' é como ant-eriormente definido, um de R'~‘ 7 sendo o outro hidrogénio, e COOR é uma função composto de fórmula,· a-<:ch.,,> -X 4*M Π em que A e n são como snt-eriormente definidos e X ê um grupo separável, se necessário i) a hidrólise do produto, ou ii> a ciclizaçâo do produto, de modo a obter-se um composto de fórmula Ia ou I em que R é hidroxi ou alcoxi inferior; ou b) a ciclização de um composto de fórmula I como anteriormente definida em que R é OH ou alcoxi inferior de modo a obter-se um composto correspondente de fórmula Ia; ou c) a reacção de um composto de fórmula I em que R é hidroxi com uma alcoxi inferior-amina de modo a obter-se um composto correspondente de fórmula I em que R é alcoxi inferior--amino; ou d? a hidrólise de um composto de fórmula I em que R é alcoxi inferior de modo a obter-se um composto de fórmula I em que R é hidroxi ou um seu sal farmaceuticamente aceitável; ou e? a conversão de um composto de fórmula I ou Ia num seu sal farmaceuticamente aceitável ou vice versa. 2ã - Processo de acordo com a reivindicação í., caracie— pisado por se preparar o etanodioato (í; I) do éster metílico do á c i do 2“ í ( 2,6-d iclorofenil ) am i tio
3. 3 -B-C 2~qu i no 1 i n i 1 mstox i > benzeno--acétáco. 3â - Processo de acordo com a reivindicação í,- caracte-r i zado po r se p r epa r a r o á c i do 2- í C £, S-d iclorofenil) am i no 3-5-( 2--qu i no 1 i n i .1 me tox i ) benze no-a c é t i c o. 4â - Processo de acordo com a reivindicação í, caracte-pisado por se preparar o sal de sódio do ácido 2-£(2,6-dicloro-feni1)amino3-S-(2-quinoliniimetoxi >benzeno-acético. 5à - Processo de acordo com a reivindicação 1, caracte-rizado por se preparar o sal CIM) de 2-amino-2-(hidroximeti 1 )--1;3-propanodiol do ácido 2-t<2»6-diclorofenil)amino3-5-(2-qui-no1i n i1metox i)benzeno-ac ético. ga - processo de acordo com a reivindicação 1, caracie-rizado por se preparar o éster metílico do ácido 5-C(7-cloro-2--qu i no 1 .i n i 1) me tox i 3 -2- C (2,6-d .i c 1 o r o f sn i 1 > am i no 3 benzeno-a cético. 7ã - Processo de acordo com a reivindicação 1, caracte-rizado por se preparar o ácido 5-ΓC7-cloro-2-quinoIini.1 >meioxi 3--2-C(2,6-diclorofeni1)amino3benzeno-acético. S'â - Processo de acordo com a reivindicação .1, caracte-rizado por se preparar o éster metílico do ácido 2-t(2,β-dicloro-fenil)aminoU-5-C(2-nafialenil>metoxi3benzeno-acético. 9i - Processo de acordo com a reivindicação 1, caracte-rizado por se preparar o ácido 2-CC2,6-dic.1 orofsni.1)amino3-5" -í(na f ta1en i1>metox i 3 benzeno-acético. 80 -, ί V'1 ·' 10ã - Processo de acordo com a reivindicação i, carac-ierizado por se preparar o ácido 2-C(2,6-diciorofeni.1 3artuno3-.ç--C (4-f enoxi >òuioxi 3henzeno~acético. llâ ~ Processo de acordo com a reivindicação 1, carácter izado por se preparar o éster metílico do ácido 2-C(2,6-di-cIorofeni 1 3amino3-5-C < l~meti 1 -1 H-benzimidazoI-2-il 3metoxi3ben-seno-acético. .12â - Processo de acordo com a reivindicação 1, carac-terizado por se preparar o ácido 2-il<2,S-dic 1 orofeni 1)amino3-S--f( 1-meti l-lH-benzimidazol-2-i 1 3 meti 3benzeno-acético. 13ã - Processo de acordo com a reivindicação i, carac-terisado por se preparar a 2-£(2,S-diclorofeni23aroino3-N-metoxi-~C C2-quinol ini 3. )metoxi 3benzeno-acetamida. 14i - Pr OC8SSO de acor ’ dn com a reivindicação 1, carac- ter i zado por se ΡΓΘρβ. Γ ar a 1- -< 2, i S“i dicIorofeni13~í >-<2 -qui no- 1 ini 1 me t co- d 3-2 - i nd οϊ inona f . ísâ M> O il I 1 ocesso de acor do c om ci reivindicação 1, carac- ter i sado por prepar •ar a i-í - c, » ; V -d i cloro-4-(2~qui [ no I iniIme- tox i 3f eni1 3-i , 3-di -hidro- •2H- - i ndc »i-; í‘“ ΟΠ a. 16ã _ Ο,η ! < ocesso de acor ‘do com a reivindicação 1, carac- terizado por se preparar a l-fenil-5-C2-quincdinilmetoxi3fenil3-- 3., 3-di -h i dro-2H- i ndo 1 -2-ona. 17â ProCSSSo de acordo com a reivindicação 1, carac- terisado por se preparar o ácido 2-<fenilamino3-5-<2-quinolinil-metoxi) benzeno-a c é i .1 c o, ν > *s. % 1Sê - Processo de acordo com a reivindicação 1, carácter.izado por se preparar o ácido 2“C(2,6-diclorofeni.l)amino3-5-— (3-fenoxihenzi loxi )bsnzer.o—acético. 19à - Processo de acordo com a reivindicação 1, carac-terizado por se preparar a 1-11(2, S-dic lorofeni 1 ?-5~C7-c loro--2- (qu i no l i n i .1 me iox i ) 3 - í , 3-d i -h i d r o-2H— i ndo 1 -2~ona. Lisboa, 25 de Outubro de 1990

   d. PEREIRA DA CRUZ Agente Oficial da Propriedade Industrial RUA VtCTOR CÕRDON, 10-A 3.° 1200 LISBOA