PT95547B - Processo para a preparacao de novos inibidores de alfa-glucosidase e de composicoes farmaceuticas que os contem - Google Patents

Description

MERRELL DOW PHARMACEUTICALS, INC.

PROCESSO PARA A PREPARAÇÃO DE NOVOS INIBIDORES DE Ot-GLUCOSIDASE E DE COMPOSIÇÕES

FARMACÊUTICAS QUE OS CONTÊM

A presente invenção refere-se a novos derivados de

1,4-didesoxi-1,4-imino-D-arabinitol, aos processos para a sua preparação e às suas aplicações finais, particularmente no tratamento de diabetes.

Mais especifioamente, a presente invenção refere-se a novos derivados N-glicosílicos de 1,4-didesoxi-1,4-imino-D-arabinitol, aos processos químicos para a sua preparação, às suas propriedades inibidoras de Qi-glucosidase e à sua utilização final no tratamento de diabetes, obesidade e doenças associadas com retrovírus, particularmente o vírus HIV que se admite ser a causa do síndroma da imunodeficiência adquirida (SIDA).

Ainda mais especifioamente, a presente invenção refere-se a novos derivados de 1,4-didesoxi-1,4-imino-D-arabinitol da fórmula geral (I)

(I)

na qual n representa o numero zero, 1 ou 2 e R representa um grupo glicosilo ou um grupo glicosilo eterificado ou acilado contendo 1 a 3 unidades de hexose ou pentose, comportando o referido grupo glicosilo eterificado ou acilado o radical éter ou acilo no grupo hidroxilo localizado no átomo de carbono anomérico;

aos seus isómeros ópticos e geométricos e aos seus sais de adição de ácido aceitáveis sob o ponto de vista farmacêutico .

Os sais de adição de ácido são os sais formados com ácidos inorgânicos tais como, por exemplo, ácido clorídrico, bromidrico, sulfúrico, fosfórico e semelhantes; com ácidos carboxílicos orgânicos, tais como, por exemplo, ácido acético, propiónico, glicolieo, láctico, pirúvico, malónico, succínico, fumárico, málico, tartárico, cítrico, ascórbico, maleico, hidroximaleico e di-hidroximaleico, benzóico, 2-acetoxibenzóico, mandélico e semelhantes; e com ácidos sulfónicos orgânicos, tais como o ácido metano-sulfónico e o ácido p-tolueno-sulfónico.

Em geral, o radical mono-, di- ou trissacarídeo (isto é, o radical glicosilo representado por ”R”) pode estar directamente ligado, ou através de uma ponte alquileno (CH^)^ ao átomo de azoto do radical 1,4-didesoxi-1,4-imino-D-arabinitol através de um átomo exocíclico ou de im átomo de carbono do anel da pentose ou do anel da hexose formando, consequentemente, vários isómeros de posição para cada radical glicosilo individual. Do mesmo modo, os radicais pentose ou hexose similares /

ou diferentes podem estar ligados uns aos outros através de uma ponte de oxigénio glicosídico em que o átomo de oxigénio da ponte está ligado a um átomo de carbono exocíclico e/ou endocíclico do radical pentose ou hexose do qual faz parte o radical glicosilo; refere-se novamente que os isómeros de posição e as correspondentes formas isoméricas ópticas e geométricas estão todos englobados no âmbito da presente invenção.

Como exemplos de radicais glicosilo representados pelo símbolo R definido para a fórmula geral I, refere-se os monossacarídeos tais como o glucosilo, galactosilo, fucosilo, frutosilo, manosilo, ribosilo arabinosilo, xilosilo, alosilo, altrosilo, gulosilo, idosilo, talosilo e lixosilo, os dissaearídeos, tais como isomaltosilo tre-halosilo,-celobiosilo, maltosilo e trissacarídeos, tais como o maltotriosilo e o celotriosilo. Os radicais glicosílicos preferidos são 6- ou 4-glucosilo, 1- ou 6-frutosilo, 6- ou 4-maltosilo e 6ou 4-isomaltosilo. Os derivados etéreos são os derivados em que o grupo hidroxilo ligado ao átomo de carbono anomérico está eterificado e englobam os derivados alquilo C^-Cg, de preferência metilo e os derivados aromáticos, tais como os derivados fenílicos e benezílicos. Os derivados acilo tais como os que se formam no átomo de carbono anomérico por reacção do radical hidroxilo livre com ácidos alcanóicos ou com ácido benzóico também se encontram englobados pela presente invenção, mesmo nos casos em que esses radicais acilados possam ser facilmente removidos do radical glicosilo. Os radicais acilo pre-

feridos são os que se formam com os ácidos acético ou benzóico.

Os compostos da presente invenção são preparados recorrendo a processos convencionais da especialidade. É preferível condensar um 1,4-didesoxi-1,4-imino-D-arabinitoL (2) adequadamente protegido por um grupo hidroxi, com um triflato ou hologeneto, de preferência o iodeto de glicosilo, adequadamente protegido por um grupo hidroxi. Nos casos em que o composto 1,4-didesoxi-1,4-imino-D-arabinitol é acoplado com um triflato, efectua-se a reacção submetendo a refluxo uma mistura de quantidades equimolares dos reagentes no seio de um dissol vente isento de álcool e de água, de preferência um dissolvente clorado, tal como o clorofórmio, sob atmosfera inerte, de preferência sob atmosfera de azoto ou de árgon, durante cerca de 1 a 3 dias até a reacção ficar completa. Utilizando depois procedimentos normalizados para isolar e purificar os produtos da eacção, faz-se a remoção dos grupos protectores para se obter o composto desejado. A desbenzilação efectua-se facilmente por técnicas normalizadas tais como a hidrogenação catalítica no seio de um dissolvente apropriado por exemplo, o etanol, utilizando um catalisador, tal como o paladio sobre carvão, ou por hidrogenação de transferência utilizando ciclo-hexeno e metanol. Nesses casos em que se utilizam ésteres (parcial ou totalmente) como grupos protectores do grupo hidroxilo, é preferível remover primeiro o grupo éster mediante tratamento com um alcóxido alcalino, por exemplo metôxido de sódio, em metanol para hidrolisar os ésteres e, depois, desproteger os éteres benzílicos

-5pelos procedimentos de hidrogenação anteriormente descritos.

Nos casos em que se faz o acoplamento de um halogeneto de glicosilo com o composto 1,4-didesoxi-1,4-imino-D-ara binitol, efectua-se a reacção aquecendo os reagentes que têm os grupos hidroxilo adequadamente protegidos, no seio de dimetilformamida (DMF) seca ou utilizando outro dissolvente de função equivalente, a uma temperatura compreendida aproximada mente entre 60° e 90°C durante um período compreendido entre 12 e 36 horas, efectuando-se o aquecimento com quantidades em excesso de uma base fraca (K^CO^) ou de um peneiro molecular, de preferência utilizando quantidades molares em excesso do halogeneto (até cerca de três vezes) em relação à amina.

As reacções anteriormente descritas ilustram-se de acordo com os seguintes esquemas reaccionais A e B:

Esquema Rsaccional A:

OH (4) (5) /

-6Esquema Reaccional B:

em que Bn representa o grupo benzilo.

Na sua forma descritiva mais genérica, os esquemas reaccionais que se seguem ilustram os processos para a preparação dos compostos de fórmula geral I.

-7- /

Esquema Reaccional C:

(2) + X(CH₂) _nR (10)

(CH₂)_nR !

(11)

Desprotecção v

I em que X representa um halogeneto ou um triflato e R’ representa um radical glicosilo com um grupo hidroxi protegido, Pg representa um grupo protector do grupo hidroxi, de preferência um grupo benzilo, e n representa o número zero, 1 ou 2.

Os halogenetos (6) e os triflatos (3) de glicosilo com grupos hidroxi protegidos são adequadamente os radicais glicosilo (conforme definido na fórmula geral I) em que os grupos hidroxi foram protegidos com um radical éster ou éter. Os ésteres preferidos são os ésteres acetato ou benzoato, embora se possa utilizar outros ésteres alcanoílicos, particularmente os que contêm até seis átomos de .carbono. 0 éter preferido é o éter benzilico. Esses compostos protegidos podem ser

preparados recorrendo a procedimentos normalizados bem conhecidos na espacialidade; a selecção e preparação de compostos intermédios com grupos hidroxi protegidos processa-se de acordo com a técnica necessária para desprotecção selectiva, sempre que necessário.

Os triflatos de glicosilo (dos quais o composto de fórmula 3 é representativo) são preparados mediante procedimentos normalizados, tais como a reacção de um derivado de glicosilo com um grupo; hidroxi protegido, com anidrido de trifluorometilsulfonato, num dissolvente clorado, durante um período compreendido entre cerca de 1 e 3 horas e a uma temperatura compreendida entre cerca de -78° e -10°C.

Os halogenetos de glicosilo ( dos quais o composto de fórmula 6 é representativo ) podem ser preparados recorrendo a técnicas normalizadas a partir de um glicosilo oom um grupo hidroxi adequadamente protegido, comportando um grupo hidroxi livre. Nestas condições, converte-se o álcool no seu aldeído através de uma oxidação de Swern ( tratamento com cloreto de oxalilo em dimetilosulfóxido e trietilamina ) seguido da conversão in situ do aldeído em olefina por uma reacção de Wittig ( através de ileto preparado a partir de brometo de metiltrifenilfosfónio utilizando um equivalente de n-butil-lítio, um equivalente de t-butóxido de potássio e um equivalente de t-butanol em tetra-hidrofurano, à temperatura ambiente e durante um período compreendido entre cerca de 4 e θ horas). Converte-se o elefina no seu álcool correspondente por hidroboração

V / -g(tratamento com dimetilsulfureto de boro, sob atmosfera de azoto, seguido de oxidação com peróxido de hidrogénio e hidróxido de sódio). 0 álcool é mesilado (tratamento com cloreto de mesilo em CH₂C1₂ em excesso de NEt^ e uma temperatura compreendida entre -15° e 0°C) e depois converte-se o mesilato no seu halogeneto (tratamento em éter à temperatura de 0°C, com halogeneto de magnésio), utilizando-se de preferência o iodeto.

Os exemplos que se seguem ilustram os processos e as técnicas adequadas para a preparação dos compostos de presente invenção.

Exemplo 1

Preparação de METIL-L-XILOFURANÓSIDO

Agitou-se L-xilose (25 g; 0,167 mole em metanol (480 ml) juntamente com drierite (11 g) e com ácido sulfúrico concentrado (3,4 ml), durante 5 horas à temperatura ambiente. Filtrou-se a mistura e tratou-se rapidamente com Amberlyst A21 em metanol até se obter um pH neutro. Procedeu-se à secagem da mistura. A cromatografia rápida sobre gelde sílica e a eluição com uma mistura a 95:5 de acetato de etilo e de metanol deu metil-L-xilofuranosido sob a forma de uma mistura de anómeros, sob a forma de um óleo (17,8 g; 65%).

Exemplo 2

Preparação de METIL-2,3,5-TRI-Q-BENZIL-L-XILQFURANÓSIDQ

A uma suspensão de hidreto de sódio (14,3 gj 0,36 mole concentração a 60% em óleo mineral, que se lavou três vezes com pentano) numa mistura de tetra-hidrofurano (125 ml) e de dime-

tilformamida (250 ml) adicionou-se, gota a gota, com agitação uma mistura de brometo de benzilo (42,6 ml; 0,36 mole), metil-L-xilofuranosido (1896 g; 0,116 mole) e de iodeto de tetran-butilamónio (1,86 g) dissolvidos em tetra-hidrofurano (125 ml) e dimetilformamida (250 ml). Agitou-se a mistura á temperatura ambiente durante uma noite. Adicionou-se uma solução aquosa satuarada de sulfato de amónio. Evaporou-se a mistura sob pressão reduzida até à secura. Retomou-se o resíduo com água e extriu-se três vezes com acetato de etilo. Secou-se a camada orgânica sobre sulfato de sódio, filtrou-se e concentrou-se sob pressão reduzida para se obter um óleo. A cromatografia rápida sobre gel de sílica, fazendo eluição com uma mistura a 8:2 de ciclo-hexano e de acetato de etilo deu metil-2,3,5-tri-0-benzil-L-xilofuranósido sob a forma de uma mistura de anómeros, sob a forma de um óleo (22,7 gj 4555).

Exemplo 3

Preparação de metil-2,3,5-TRI-O-BENZIL-XILOFURANOSE

à temperatura de 0°C dissolveu-se metil-2,3,5-tri-O-benzil-L-xilofuranósido (22,5 g; 56,30 mmoles) numa mistura a 9:1 de ácido trifluoroacético e de água (200 ml) e agltou-se à temperatura de 0°C durante uma noite. Levou-se a mistura até á secura sob pressão reduzida. Dissolveu-se o resíduo oleoso em acetato de etilo e lavou-se três vezes com uma solução saturada com hidrogeno carbonato de sódio. Secou-se a camada orgânica sobre sulfato de sódio, filtrou-se e secou-se sob pressão reduzida para se obter um óleo. A cromatografia rápida sobre gel de sílica, utilizando como eluente uma mistura a 7:3 de ciclo-hexano e de acetato de

etilo, deu metil-2,3,5-tri-O-benzil-L-xilofuranose, sob a forma de um óleo (11,7 gj 53$).

Exemplo 4

Preparação de 2,3,5-TRI-O-BENZIL-L-XILITOL

Dissolveu-se 2,3,5-tri-O-benzil-L-xilofuranose (11,7 g; 27,92 mmoles) em etanol (150 ml) e adicionou-se boro-hidreto de sódio (0,844 g; 30,5 mmoles). Agitou-se a mistura durante 2 horas à temperatura de 0°C. Tratou-se a mistura reaccional, sucessivamente com acetona e com ácido acético. Concentrou-se a mistura sob pressão reduzida. Retomou-se o resíduo com água, extraíu-se três vezes com acetato de etilo. Secou-se a camada orgânica com sulfato de sódio, filtrou-se e concentrou-se sob pressão reduzida, para se obter um óleo. A cromatografia rápida sobre gel de sílica, utilizando como eluente uma mistura a 1:1 de hexano e de acetato de etilo, deu 2,3,5-tri-O-benzil-L-xilitol (10,2g; 86,5$) sob a forma de um óleo.

Exemplo 5

Prepração de 1,4-DI-O-METANO-SULFONIL-2,3,5-TRI-O-BENZIL-L-XILITOL

Dissolveu-se 2,3,5-tri-0-benzil-L-xilitol (10,2-g; 24,17 mmoles) em cloreto de metileno seco (100 ml) contendo trietilamina (10,1 ml; 72,5 mmoles). Arrefeceu-se a mistura até à temepratura de -10°C e adicionou-se, gota a gota, cloreto de metano-sulfonilo (3,93 ml; 50,75 mmoles). Agitou-se a mistura durante 30 minutos à temperatura de -10°C e lavou-se com água. Secou-se a camada orgânica sobre sulfato de

-vz-f // ίί

-A, i

sódio, filtrou-se e secou-se sob pressão reduzida para se obter um óleo. A cromatografia rápida sobre gel de sílica, utilizando oomo eluente uma mistura a 4:6 de acetato de etilo e de ciclo-hexano, deu 1,4-di-0-metano-sulfonil-2,3,5-tri-0-benzil-L-xilitol sob a forma de um óleo (13,9 g; 99%)

Exemplo 6

Preparação de 1-AZIDO-1-DESOXI-4-O-METANO-SULFONIL-2,3,5-TRI-O-BENZIL-L-XILITOL

Preparou-se uma mistura de azida de sódio (1,72 g;26,4 mmoles) e de 1,4-di-0-metano-sulfonil-2,3,5-tri-O-benzil-L-xilitol (13,9 g; 24 mmoles) em dimetilformamida (500 ml ) e aqueceu-se durante uma noite à temperatura de 60°C, sob agitação. Evaporou-se a dimetilformamida sob pressão reduzida. Dissolveu-se o resíduo em acetato de etilo e lavou-se com água. Secou-se a camada orgânica sobre sulfato de sódio, filtrou-se e concentrou-se sob pressão reduzida para se obter um óleo.

A cromatografia rápida sobre gel de sílica, utilizando como eluente uma mistura a 7=3 de oiclo-hexano e de acetato de etilo , deu 1-azido-1-desoxi-4-0-metano-sulfonil-2,3,5-tri-0-benzil-L-xilitol (8,6 g; 63%) com o aspecto de um óleo.

Exemplo 7

Preparação de 2,3,5-TRI-O-BENZIL-1,4-DIDESOXI-1,4-IMINO-D-ARABINITOL

Dissolveu-se 1-azido-1-desoxi-4-0-metano-sulfonil-2,3,5-tri-O-benzil-L-xilitol (4,5g; 7,98 mmoles) numa mistura a 1:1 de etanol e de acetato de etilo (30 ml) e adicionou-se

V negro de paládio (0,234 g). Agitou-se a mistura sob atmosfera de hidrogénio à pressão atmosférica, durante uma noite. Separou-se o catalisador por filtração e evaporou-se os dissolventes sob pressão reduzida. A cromatografia rápida, utilizando como eluente uma mistura a 95:5 de acetato de etilo e de metanol, deu 2,3,5-tri-0-benzil-1,4-didesoxi-1,4-imino-D-ara-binitol (2,76 g; 86$) com o aspecto de um óleo.

Exemplo 8

Preparação de METIL-2,3,4-TRI-O-BENZIL-6-O-TRIFLUOROMETILSULFONIL- -D-GLUCOPIRANOSIDO

A uma solução de piridina seca (0,46 ml) em cloreto de metileno (17,5 ml) arrefecida até à temperatura de -15°C adicionou-se anidrido trifluorometano-sulfónico (0,87 ml). Agitou-se a mistura durante 15 minutos à temperatura de -10°C e depois adicionou-se metil-2-3-4-tri-0-benzil- -D-glucopiranosido (1,2 g; 2,58 mmoles) em cloreto de metileno (5 ml) [P. Kovac, V. Sklenar e C. Glaudemans, Carbohydr. Res; 175, (1988) 201]. Agitou-se a mistura durante 1,5 horas à temperatura de -10°C. Lavou-se a mistura reaccional com água. Secou-se a camada orgânica sobre sulfato de sódio, filtrou-se e concentrou-se sob pressão reduzida para se obter um óleo. A cromatografia rápida sobre gel de sílica, utilizando como eluente uma mistura a 7‘-3 de hexano e de acetato de etilo deu o composto esperado metil-2,3,4-tri-0-benzi1-6-0-trifluorornetilsulfonil-d^-D-glucopiranósido, que se cristalizou em hexano (1,43 g; 93$); p.f. 44°-45°C.

-14Exemplo 9

Preparação de 2,3,5-TRI-O-BENZIL-1,4-[(2,3,4-TRI-O-BENZIL-6-DESOXI-1-O-METIL-6-QÓ-D-GLUCOPIRANOSIL)

-IMINO]-D-ARABINITQL

Durante 48 horas manteve-se sob refluxo, sob atmosfera de azoto, uma solução de metil-2,3,4-tri-O-benzil-6-O-trifluorometil-sulfonil- -glucopiranósido (0,928 g; 1,56 mmole) e 2,3,5-tri-0-benzil-1,4-didesoxi-1,4-imino-D-arabinitol (0,627 g;1,56 mmole) em clorofórmio (55 ml) isento de etanol. Diluiu-se a mistura com cloreto de metileno e lavou-se, sucessi vamente, com uma solução aquosa saturada de hidrogeno carbonato de sódio e oom uma solução saturada de cloreto de sódio. Secou-se a camada orgânica sobre sulfato de sódio, filtrou-se e concentrou-se sob pressão reduzida para se obter um óleo. A cro matografia rápida sobre gel de sílica, utilizando como eluente uma mistura a 6:4 de hexano e de acetato de etilo deu o composto esperado 2,3,5-tri-0-benzil-1,4-didesoxi-1,4-[(2,3,4-tri-O-benzil-6-desoxi-1-0-metil-6-^-D-glucopiranosil)-imino]-D-arabinitol com o aspecto de uma espuma branea (0,941 g; 71$)·

Exemplo 10

Preparação de 1,4-DIDESOXI-1,4-[(6-DESOXI-1-O-METIL-6-Qó-D-GLUCOPIRANOSIL)-IMINO]-D-ARABINITOL

Dissolveu-se 2,3,5-tri-0-benzil-1,4-didesoxi-1,4[(2,

3,4-tri-0-benzil-6-desoxi-1-O-metil-6-Q^-D-glueopiranosil)-imino]-D-arabinitol (0,941 g; 1,11 mmole) numa mistura a 1:1 de metanol e de ácido acético (40 ml) e adicionou-se Pd a 10$ sobre carvão (70 mg). Agitou-se a mistura sob atmosfera de hi-15drogénio à pressão atmosférica durante 4 dias. Separou-se o catalisador por filtração e evaporou-se os dissolventes sob pressão reduzida. Dissolveu-se o resíduo em água e fez-se passar através de uma coluna de Amberlyst A26 na forma OH^-. A liofilização deu 1,4-didesoxi-1,4-[(desoxi-1-0-metil-6-^-D-glucopiranosil)-imino]-D-arabinitol sob a forma de um sólido amorfo (0,250 g; 72%).

Exemplo 11

Preparação de METIL-2,3,4-TRI-O-BENZIL-6,7-DIDESOXI-^-D-GLUCO-HEPT-6-ENOPIRANÓSIDO

A uma solução de cloreto de oxalilo (1,05 ml; 17,22 mmoles) em tetra-hidrofurano seco (40 ml) arrefecida até à temperatura de -78°C adicionou-se, gota a gota, dimetilsulfóxido seco (1,3 ml; 18,04 mmoles) e depois agitou-se durante 35 minutos à temperatura de -35°C. Arrefeceu-se a mistura reaccional novamente até à temperatura de -78°C e adicionou-se-lhe metil-2,3,4-tri-0-benzil-Q/-D-glucopiranósido (6 g; 16,4 mmoles) dissolvido em tetra-hidrofurano (20 ml) e agitou-se a mistura durante 15 minutos à temperatura de -35°C, e a seguir adicionou-se-lhe trietilamina (11,5 ml; 82,65 mmoles) e agitou-se a mistura durante 1 hora à temperatura de -35°C. Utilizou-se este aldeído sem purificação nem isolamento, em uma reacção de Wittig adiante descrita. Preparou-se uma suspenção de brometo de trifenilmetilfosfónio (11,7 g; 32,8 mmoles) em tetra-hidrofurano ( 700 ml) e adicionou-se-lhe, gota a gota, à temperatura de -78°C uma solução 1,42M de n-butil-lítio em hexano (23 ml; 32,66 mmoles) Aqueceu-se a mistura reaccional até à temperatura ambiente e agitou-se durante 1,5 horas. Depois, arrefeceu-se a mistura até à temperatura de 0°C e adicionou-se tert-butilato de potássio f

-163 (3,68 g; 32,8 mmoles) e álcool tert-butílico seco (3 ml; 31,8 mmoles). Agitou-se a mistura novamente à temperatura ambiente durante 30 minutos. Arrefeceu-se a mistura reaccional até à temperatura de -78°C e adicionou-se-lhe, gota a gota, a uma solução em tetra-hidrofurano do aldeído anteriormente preparado. Aqueceu-se a mistura reaccional até à temperatura ambiente e agitou-se durante 2 horas. Evaporou-se sob pressão reduzida uma solução aquosa saturada de cloreto de amónio e dos dissolventes. Dissolveu-se o resíduo em éter e lavou-se com água. Secou-se a camada orgânica sobre sulfato de sódio, filtrou-se e coneentrou-se sob pressão reduzida para se obter um óleo castanho. A cromatografia rápida sobre gel de sílica, utilizando como eluente uma mistura a 4:96 de acetato de etilo e de tolueno deu a olefina esperada metil-2,3,4-tri-O-benzil-6,7-didesoxi-Ç\^-D-gluco-hept-6-enopíranosido (3,26 g; 55%), que cristalizou em hexano; p.f. 46°-47°C.

Exemplo 12

Preparação de METIL-2,3,4-TRI-O-BENZIL-6-DESOXI-QÓ-D-GLUCO-HEPTÓPIRANÓSIDO

A uma solução de metil-2,3,4-tri-O-benzil-6,7-didesox.i 0((-D-gluco-hept-6-enopiranósido (0,878 g; 2,43 mmoles) em tetra-hidrofurano seco (5 ml) adicionou-se uma solução 10 M de borano em sulfureto de metilo (0,24 ml; 2,4 mmoles) à temperatura de 0°C sob atmosfera de azoto. Agitou-se a mistura durante 3 horas à temperatura ambiente. Destruíu-se o excesso de borano com etanol (1 ml). Arrefeceu-se a mistura à temperatura de 0°C e adicionou-se-lhe peróxido de hidrogénio a 30% (0,3 ml). Sub-17meteu-se a mistura a refluxo durante 2 horas. Diluiu-se a mistura reaccional com água e extraiu-se três vezes com éter. Secou-se a fase orgânica sobre sulfato de sódio, filtrou-se e concentrou-se sob pressão reduzida para se obter um óleo. A cromatografia rápida sobre gel de sílica, utilizando como eluente uma mistura a 1:1 de acetato de etilo e de hexano deu o desejado álcool metil-2,3,4-tri-0-benzil-6-dedoxi -D-gluco-heptopiranósido (0,414 g; 45%), que cristalizou em hexano; p.f. 50°-53°C.

Exemplo 13

Preparação de metil-2,3,4-tri-0-benzil-6-desoxi-7-0-metilsulfonil-Qd-D-gluco-heptopiranósido

A uma soiução de metil-2,3,4-tri-0-benzil-6-desoxi-D-gluco-heptopiranósido (0,35 g; 0,92 mmole) em cloreto de metileno seco (10 ml) adicionou-se trietilamina (0,2 ml; 1,43 mmole) Depois, arrefeceu-se a solução até à temperatura de -10°C e adicionou-se-lhe cloreto de mesilo (0,08 ml; 1 mmole). Agitou-se a mistura durante mais de 15 minutos à temperatura de -10°C e depois deixou-se.a mistura reaccional retomar a temperatura ambiente. Lavou-se a mistura três vezes com água. Secou-se a fase orgânica sobre sulfato de sódio, filtrou-se e concentrou-se sob pressão reduzida para se obter um óleo amarelo. A cromatografia rápida sobre gel de sílica, utilizando como eluente uma mistura a 40:60 de acetato de etilo/hexano deu o desejado mesilato de metil-2,3,4-tri-0-benzil-6-desoxi-7-0-metil-sulfonil-^-D-gluco-heptopiranósido, sob a forma de um óleo (0,38 g; 91?)·

Exemplo 14

Preparação de Metil-2,3,4-tri-O-benzil-6,7-didesoxi-7-iodo-b<-D-gluco-heptopiranósido

-18A uma solução de metil-2,3,4-tri-0-benzil-6-desoxi-7-0-metilsulfonil-D-gluco-heptopiranósido (0,38 g; 0,83 mmole) em éter (5 ml ) adicionou-se à temperatura de 0°C uma solução 0,375 M de iodeto de magnésio (6,7 ml). Agitou-se a mistura durante 15 minutos à temperatura de 0°C. Hidrolisou-se com água o excesso de iodeto de magnésio. Lavou-se a mistura reaccional com tiossulfato de sódio e água. Secou-se a camada orgânica sobre sulfato de sódio, filtrou-se e concentrou-se sob pressão reduzida para se obter um óleo. A cromatografia rápida sobre gel de sílica, utilizando como eluente uma mistura a 2:8 de acetato de etilo e de hexano deu o desejado iodeto de metil-2,3,4-tri-O-benzil-6,Y-didesoxi-T-iodo-^-D-gluco-heptopiranósido, que se cristalizou em hexano (0,368 g; 91%)> P-f· 66°-68°C.

Exemplo 15

Preparação de 2,3>5-tri-0-benzil-1,4-didesoxi-1,4-[2,3,4-tri-O-benzil-6,7-didesoxi-1-0-metil-7-^í -D-gluco-heptopiranosil)-imino]-D-arabinitol

Durante uma noite aqueceu-se à temperatura de 80°C uma solução de metil-2,3,4-tri-0-benzil-6,7-didesoxi-7-iodo-<3<-D -gluco-heptopiranósido (0,3 gj 0,51 mmole) e 2,3,5-tri-O-benzil-1,4-didesoxi-1,4-imino-D-arabinitol (0,069 gj 0,17 mmole) em dimetilformamida seca (3 ml) juntamente com carbonato de potássio seco (0,127 g; 0,92 mmole). Evaporou-se a dimetilformamida sob pressão reduzida. Retomou-se o resíduo com acetato de etilo e lavou-se duas vezes com água. Secou-se a camada orgânica sobre sulfato de sódio, filtrou-se e concentrou-se

sob pressão reduzida para se obter um óleo. A cromatografia sobre alumina neutra de actividade III e a eluição com uma mistura a 8:2 de hexano e de acetato de etilo deu a desejada amina 2,3,5-tri-0-benzil-1,4-didesoxi-1,4-[(2,3,4-tri-O-benzil-6,7-didesoxi-1-O-metil-7-^Y-D-gluco-heptopiranosil)-imino ]-D-arabinitol com o aspecto de uma espuma branca (0,105 g; 71%) ·

Exemplo 16

Preparação de 1,4-didesoxi-1,4-[(6,7-didesoxi-1-0-metil-7- -D-gluco-heptopiranosil)-imino]-D-arabinitol

Dissolveu-se 2,3,5-tri-0-benzil-1,4-didesoxi-1 ,'4-[(2,3,4-tri-O-benzil-6,7-didesoxi-1-0-metil-7-^cX.-D-gluco-heptopiranosil)-imino]-D-arabinitol (0,1 g; 0,116 mmole) em ácido acético (15 ml). Adicionou-se paládio a 10% sobre carvão (0,05 g). Hidrogenou-se a mistura à pressão de 3 atmosferas durante dois dias. Removeu-se o catalisador por filtração e evaporou-se os dissolventes sob pressão reduzida. Dissolveu-se o resíduo em água e fez-se passar através de uma coluna de Amberlyts A26 na forma 0H^-. A liofilização deu 1,4-didesoxi-1, 4-[(6,7-didesoxi-1-0-metil-7- <V-D -gluco-heptopiranosil)-iminoJ-D-arabinitol (0,03 gj 80$), com o aspecto de uma espuma.

Exemplo 17

Preparação de 2,3,5-tri-0-benzil-1,4-didesoxi-1,4-[ (1-didesoxi-2,3 : 4,5-di-O-i.sopropilideno- p-D-20

-frutopiranosil)-imino]-L-arabinitol

Durante 60 horas manteve-se sob refluxo, sob atmosfera de azoto, uma solução de 2,3 ^: 4,5-di-O-isopropilideno-1-O-trifluorometilsulfonil- &-D-frutopiranose (1,17 g; 3,0 mmoles) E P.J. Card e W.D.Hitz, J. Amer. Chem. Soc., 106 (1984)

5348] e de 1,4 didesoxi-2,3,5-tri-0-benzil-1,4-imino-D-arabinitol (1,209 g; 3,0 mmoles) em clorofórmio (70 ml) Isento de etanol. Diluiu-se a mistura com cloreto de metileno e lavou-se sucessivamente, com uma solução aquosa saturada de hidrogenocarbonato de sódio e uma solução saturada de cloreto de sódio. Secou-se a camada orgânica sobre sulfato de sódio, filtrou-se e concentrou-se sob pressão reduzida para se obter um óleo que foi submetido a cromatografia rápida sobre gel de sílica, utilizando como eluente uma mistura gradiente de hexano e de acetato de etilo, tendo-se obtido a amina pretendida

2,3,5-tri-0-benzil-1,4-didesoxi-1,4Ε(1-desoxi-2,3: 4,5-di-0-isopropilideno-jB-D-frutopiranosil)-imino]-D-arabinitol, sob a forma de um óleo (1,6 g; 82,5$).

Exemplo 18

Preparação de 2,3,5-tri-0-benzll-1,4-didesoxi-1,4-E(1-desoxi-2-0-metil- -D-frutofuranosil)-imino]-D-arabinitol

Dissolveu-se 2,3,5-tri-0-benzil-1,4-didesoxi-1,4-E(1-desoxi-2,3: 4,5-di-0-isopropilideno- -D-frutopiranosil)-imino]-D-arabinitol (1,4 g; 2,17 mmoles) em metanol (100 ml) contendo 2$ de ácido clorídrico anidro. Submeteu-se a mistura ί

,*a a refluxo durante 48 horas. Neutralizou-se a mistura com Amberlyst A26 na forma OH e depois filtrou-se. Evaporou-se dissolventes sob pressão reduzida. A cromatografia rápida sobre gel de sílica utilizando como eluente uma mistura gradiente de aeetato de etilo e de metanol deu a amina pretendida 2,3,5-tri-0-benzil-1,4-didesoxi-1,4-[(1-desoxi-2-0-metil-D-frutofuranosil)-imino3-D-arabinitol (0,750 g; 60%).

Exemplo 19

Preparação de 1,4-didesoxi-1,4-C(1-desoxi-2-0-metil- ^ó-D-frutofuranosil)-imino]-D-arabinitol

Dissolveu-se a amina 2,3,5-tri-0-benzil-1,4-[(1-desoxi-2-0-metil-^V -D-frutofuranosil)-imino]-D-arabinitol (0,550 g; 0,949 mmole) em ácido acético (25 ml) e adicionou-se paládio a 10% sobre carvão (0,3 g)· Hidrogenou-se a mistura durante 3 dias à pressão de 3 bar. Removeu-se o catalisador por filtração e evaporou-se os dissolventes sob pressão reduzida. Dissolveu-se o resíduo em água e neutralizou-se com Amberlyst A26 na forma OH^- e depois filtrou-se. Levou-se a mistura à secura sob pressão reduzida. A cromatografia rápida sobre gel de sílica, utilizando como eluente uma mistura gradiente de clorofórmio, metanol e água deu a amina desejada 1,4-didesoxi-1,4-[ (1-desoxi-2-0~metil-Q(-D-frutofuranosil)-imino]-D-arabinitol sob a forma de um sólido amorfo (0,23 g; 78%).

Exemplo 20

Preparação de metil-2,3,6-tri-O-benzil-4-O-trifluoro-metilsulfonil-^-D-galactopiranósido

-22A uma solução de piridina seca (0,46 ml) em cloreto de metileno (17,5 ml) arrefecida até à temperatura de -15°C adicionou-se anidrido trifluorometano-sulfónico (0,87 ml). Agitou-se a mistura durante 15 minutos à temperatura de -10°C e depois adicionou-se-lhe uma solução de metil-2,3,6-tri-0-benzil- ^-D -galactopiranósido (1,2 g; 2,58 mmoles) em cloreto de metileno (5 ml) [N.Morishima, S. Koto, M. Oshima, A. Sugimoto e S. Zen, Buli. Chem. Soc. Jpn, 56 (1983) 2849]. Lavou-se a mistura com água. Secou-se a camada orgânica sobre sulfato de sódio, filtrou-se e concentrou-se sob pressão reduzida para se obter um óleo que era o triflato metil-2,3,6-tri-O-benzil-4-0-trifluorometilsulfonil- -D-galactopiranósido esperado (1,43 g; 93$)·

Exemplo 21

Preparação de 2,3,5-tri-0-benzil-1,4-didesoxi-1,4-[(2,3,6-tri-0-benzil-4-desoxi-1-0-metil-4-\,-D-gluoopiranosil)-imino]-D-arablnitol

Durante 3 dias submeteu-se a refluxo, sob atmosfera de azoto, uma solução de metil-2,3,6-tri-O-benzil-4-O-trifluorometilsulfonil -QC-D -galactopiranósido (1,46 g; 2,97 mmoles) e 2,3,5-tri-0-benzil-1,4-didesoxi-1,4-imino-D-arabinitol (1,2 g; 2,97 mmoles) em clorofórmio (70 ml) isento de etanol. Diluiu-se a mistura com cloreto de metileno e lavou-se, sucessivamente, com uma solução aquosa saturada de hidrogeno carbonato de sódio e uma solução saturada de cloreto de sódio. Secou-se a camada orgânica sobre sulfato de sódio, filtrou-se e concentrou-se sob pressão reduzida para se obter um óleo. A cromatografia rápida sobre gel de sílica, utilizando como eluente uma mistura gradiente de hexano e acetato de etilo, deu a amina pretendida 2,3,5-tri-0-benzil-1,4-didesoxi-1,4-[(2,3,6-tri-0-benzil-4-desoxi-1-0-metil-4-^-D-glucopiranosil)-imino]-D-arabinitol sob a forma de um óleo (0,75 g;

30$) .

Exemplo 22

Preparação de 1,4-didesoxi-1,4-[(4-desoxi-1-0-metil-4-e<-D-glucopiranosil)-imino]-D-arabinitol·

Dissolveu-se a amina 2,3,5-tri-0-benzil-1,4-didesoxi- 1 ,4-[(2,3,6-tri-0-benzil-4-desoxi-1-O-metil-^-D-glucopiranosil)-imino]-D-arabinitol (0,7 g; 0,82 mmole) em ácido acético (20 ml). Adicionou-se paládio a 10$ sobre carvão (0,5g). Hidrogenou-se a mistura durante 4 dias à pressão de 3 bar. Filtrou-se o catalisador. Dissolveu-se o resíduo em água e neutralizou-se com Amberlyst A26 na forma 0H~. Filtrou-se a mistura e secou-se a camada aquosa sob pressão reduzida se obter uma espuma. A cromatografia rápida sobre gel de sílica, utilizando como eluente uma mistura a 50:50:4 de metanol, clorofórmio e água, deu a amina pretendida 1,4-didesoxi-1,4-[(4-desoxi-1 -0-metil-4- 0<-D -glucopiranosil)-imino]-D-arabinitol com o aspecto de uma espuma (0,783 g;72$).

Exemplo 23

Preparação de metil-2,3-4-tri-O-benzil-6-O-(2_>3,4-tri-O-benzil-6-trifluorometilsulf onil-^ij-D-glucopiranosil-h<-D-glucopiranósido

-24A uma solução de piridina seca (0,24 ml) em cloreto de metileno (25 ml) arrefecida até à temperatura de -15°C adicionou-se anidrido trifluorometano-sulfónico (0,45 ml). Agitou-se a mistura durante 15 minutos à temperatura de -10°C e depois adicionou-se uma solução de metil-6-O-(2,3,4-tri-O-benzil-b<-D-glucopiranosil)-2,3,4-tri-0-benzil-^-D-glucopiranósido (1,2 g; 1,34 mmole) em cloreto de metileno (5 ml) [R.

Eby e C. Schuerch, Carbohydr. Res., 50 (1976) 203]. Agitou-se a mistura durante 1,5 horas à temperatura de -10°C. Lavou-se a mistura reaccional com água. Secou-se a camada orgânica sobre sulfato de sódio, fiítrou-se e concentrou-se sob pressão reduzida para se obter um óleo (1,35 g; 98$) que era o triflato esperado metil-2,3,4-tri-O-benzil~6-O-(2,3,4-tri-O-benzil- 6-0-trif luor ome til-sul fonil-Qi/-D-glucopir anos il )-^-D-glucopiranósido.

Exemplo 24

Preparação de 2,3,5-tri-0-benzil-1,4-didesoxi-N-{2,3,4-tri-0-benzil~6-desoxi-1-(2,3,4-tri-0-benzil-1-0-met11-6-0-^(-D-glucopiranosil)-0<-D-glucopirano-sil]-1,4-imino-D-arabinitol

Durante 48 horas submeteu-se a refluxo, sob atmosfera de azoto, uma solução de metil-2,3,4-tri-O-benzil-6-O-(2,3,

4-tri-0-benzil-6-0-trifluorometilsulfonil- v -glucopiranosil)-^-D-glucopiranósido (1,3 gj 1,26 mmole) e 2,3,5-tri-O-benzil— 1,4-didesoxi-1,4-imino-D-arabinitol (0,509 g; 1,26 mmole) em clorofórmio (50 ml) isento de etanol. Diluiu-se a mistura com cloreto de metileno e lavou-se, sucessivamente, com uma solução

25rj*»* aquosa saturada de hidrogeno carbonato de sódio e uma solução sa turada de cloreto de sódio Secou-se a camada orgânica sobre sulfato de sódio, filtrou-se e concentrou-se sob pressão reduzida para se obter uma espuma. A cromatografia rápida sobre gel de sílica, utilizando como eluente uma mistura gradiente de hexano e acetato de etilo, deu a amina pretendida 2,3,5-tri-0-benzil-1,4-didesoxi-N-[(2,3,4-tri-0-benzil-6-desoxi-1-(2,3,4-tri-0-benzil-1-O-benzil-1-metil-6-0-^-D-glucopiranosil)-0/-D-glucopiranosil]-1,4-imino-D-arabinitol (1,24 g; 75%) com o aspecto de uma espuma.

Espuma 25

Preparação de 1,4-didesoxi-N-[6-desoxi-1-(1-0-metil-6

-0-^/-D-glucopiranosil)-g<-D-glucopiranosil]-1,4-imino-D-arabinitol

Dissolveu-se a amina 2,3,5-tri-0-benzil-1,4-didesoxi-N-[2,3,4-tri-0-benzil-6-desoxi-1 -(2,3,4-tri-0-benzil-1-0-metil-6-O-^C-D-glucopiranosil)-^-D-glucopiranosil]-1,4-imino-D-arabinitol (1,2 g; 0,937 mmole) em ácido acético (30 ml). Adicionou-se paládio a 20% sobre carvão (0,5 g). Hidro.genou-se a mistura durante 4 dias à pressão de 3 atmosferas. Removeu-se o catalisador por filtração e evaporou-se os dissolventes sob pressão reduzida. A cromatografia rápida sobre gel de sílica, utilizando como eluente uma mistura gradiente de clorofórmio , metanol e água, deu a amina pretendida 1,4-didesoxi-N- [6-desoxi-1-( 1 -O-metil-6-O-^-D-glucopiranosil) -D-glucopiranosil-1,4-imino-D-arabinitol (0,310 g; 70%) com o aspecto de uma espuma.

Ζ -26Exemplo 26

Preparação de metil-6-O-(2,3,4-tri-O-benzil-6,7-didesoxi- Qí-d -gluco-hept-6-enopiranosil)-2,3,4-tri-O-benzil-Cy -D-glucopiranósido

A uma solução de cloreto de oxalilo (0,37 ml; 5,97 mmoles) em tetra-hidrofurano seco (40 ml) arrefecida até à temperatura de -78°C e adicionou-se, gota a gota, dimetilsulfóxido seco (0,45 ml; 6,26 mmoles) e depois agitou-se durante 35 minutos à temperatura de -35°C. Arrefeceu-se a mistura reaccional novamente até -78°C e depois adicionou-se uma solução de metil-6-0-(2,3,4-tri-0-benzil-Q^-D-glucopiranosil)-2,3,4-tri-0-benzil-^<3é-D-glucopiranósido (5,1 g; 5,69 mmoles) em tetra-hidrofurano (20 ml) e agitou-se a mistura durante 15 minutos à temperatura de -35°C e a seguir adicionou-se trietilamina (3,96 ml; 28,48 mmoles) e agitou-se a mistura durante 1 hora à temperatura de -35°C. Utilizou-se este aldeído sem qualquer purificação nem isolamento, numa reacção de Wittig adiante descrita. Ao brometo de trifenilmetilfosfónio seco (4,059 g; 11,38 mmoles) em suspensão em tetra-hidrofurano (100 ml) adicionou-se, gota a gota, à temperatura de -78°C, uma solução 1,55 M de n-butil-lítio em hexano (7,34 ml; 11,38 mmoles). Aqueceu-se a mistura reaccional à temperatura ambiente e agitou-se durante 1,5 horas. Depois arrefeceu-se a mistura até à temperatura de 0°C e adicionou-se-lhe tert-butilato de potássio (1,275 g; 11,38 mmoles) e álcool tert-butílico seco (1,04 ml; 11,38 mmoles). Agitou-se a mistura novamente à tem

-27peratura ambiente durante 30 minutos. Arrefeceu-se a mistura reaccional até á temperatura de -78°C e adicionou-se, gota a gota, uma solução em tetra-hidrofurano do aldeído anteriormente preparado. Aqueceu-se a mistura reaccional à temperatura ambiente e agitou-se durante 2 horas. Sob pressão reduzida evaporou-se uma solução aquosa saturada de cloreto de amónio e os dissolventes. Dissolveu-se o resíduo em acetato de etilo e lavou-se com água. Secou-se a camada orgânica sobre sulfato de sódio, filtrou-se e concentrou-se sob pressão reduzida para se obter um óleo castanho. A cromatografia rápida sobre gel de sílica, utilizando como eluente uma mistura gradiente de tetracloreto de carbono e acetato de etilo, deu a olefina pretendida metil-6-O-(2,3,4-tri-O-benzil-6,7-didesoxi- 'V-D-glucohept-6-enopiranosil)-2,3 >4-tri-0-benzil- Q<-D -glucopiranósido (2,54 g; 50%) sob a forma de um sólido amorfo.

Exemplo 27

Preparação de metil-6-Q-(2,3,4-tri-0-benzil-6-desoxi-^-D-gluco-heptopiranosil)-2,3,4-tri-0-benzil-^tV -D-glucopiranósido

A uma solução de metil-6~0-(2,3,4-tri-0-benzil-6,7-didesoxi-D-glueo-hept-6-enopiranosil) - 2,3,4-tri-0-benzil-⁽\í-D-glucopiranósido (2,54 g; 2,85 mmoles) em tetra-hidrofurano seco (10 ml) adicionou-se uma solução 10 M de borano em sulfureto de metilo (0,28 ml; 2,8 mmoles) à temperatura de 0°C, sob atmosfera de azoto. Agitou-se a mistura à temperatura ambiente durante 3 horas. Arrefeceu-se a mistura até à temperatura de 0°C.

Destruiu-se o excesso de borano com etanol ( 1 ml ). Arrefeceu-se a mistura até à temperatura de 0°C. Adicionou-se peróxido de hidrogénio a 30% (0,3 ml) e uma solução aquosa 3 N de hidróxido de sódio (0,3 ml). Submeteu-se a mistura a refluxo durante 2 horas. Diluiu-se a mistura reaccional com água e extraiu-se três vezes com acetato de etilo. Secou-se a camada orgânica sobre sulfato de sódio, filtrou-se e concentrou-se sob pressão reduzida para se obter uma espuma. A cromatografia rápida sobre gel de sílica, utilizando como eluente uma mistura gradiente de tetracloreto de carbono e acetato de etilo, deu o álcool pretendido metil-6-0-(2,3,4-tri-0-benzil-6-desoxi- <\-D-gluco-heptopiranosil)-2,3,4-tri-0-benzil-Q< -D-glucopiranósido (1,245 g; 48%) com o aspecto de uma espuma.

Exemplo 28

Preparação de metil-6-0-(2,3,4 -tri-0-benzil-6,7-didesoxi-7-iodo-Q<(-D-gluco-heptopiranosil)-2,3,4'-tri-O-benzil-^é-D-glucopiranósido

A uma solução de metil-6-0-(2,3,4-tri-0-benzil-6-desoxi-^-D-gluco-heptopiranosil)-2,3,4-tri-0-benzil-^íV-D-glucopiranósido (1,245 g; 1,37 mmole) em cloreto de metileno seco (15 ml) adicionou-se trietilamina (0,29 ml; 2,05 mmoles). Depois arrefeceu-se a solução até à temperatura de -10°C e adicionou-se, gota a gota, cloreto de mesilo (0,11 ml; 1,42 mmole). Agitou-se a mistura durante mais 15 minutos à temperatura de -10°C e depois lavou-se a mistura reaccional três vezes com água. Secou-se a camada orgânica sobre sulfato de sódio, filtrou-se e concentrou-se sob pressão reduzida para se obter uma espuma que foi utilizada sem mais purificação. Dissolveu-se em éter

-294 (20 ml) ο composto impuro metil-6-0-(2,3,4-tri-O-benzil-6-desoxi-7-0 metilsulfonil- <V-D -gluco-heptopiranosil)-2,3,4-tri-O-benzil -<Y-D -glucopiranósido. A esta mistura adicionou-se, gota a gota, uma solução de 0,35 M de iodeto de magnésio em éter (17,5 ml), à temperatura de 0°C. Hidrolisou-se com água o excesso de iodeto de magnésio. Lavou-se a mistura reaccional com tiossulfato de sódio e água. Secou-se a camada orgânica sobre sulfato de sódio, filtrou-se e concentrou-se sob pressão reduzida para se obter uma espuma. A cromatografia rápida sobre gel de sílica, utilizando como eluente uma mistura gradiente de tetracloreto de carbono e acetato de etilo deu o esperado iodeto metil-6-0-(2,3,4-tri-O-benzil-6,7-didesoxi-7-iodo- Oô-D -gluco-heptopiranosil)2,3,4-tri-0-benzil- -D-glucopiranósido (1,145 g; 82$) com o aspecto de uma espuma.

Exemplo 29

Preparação de 2,3,5-tri-0-benzil-1,4-didesoxi-N-[2,3,4-tri-O-benzil-6,7-dldesoxi-1-(2,3, 4-tri-0-benzil- 1-0-metil-6-0-Q<(-D-glucopiranosil) -D-gluco-heptopiranosil]-1,4-imino-D-arabinitol

Aqueceu-se à temperatura de 80°C, durante uma noite, uma solução de iodeto metil-6-0-(2,3,4-tri-0-benzil-6,7-didesoxi-7-iodo-^í\ -D-gluco-heptopiranosil)-2,3,4-tri-O-benzil-C^-D-glucopiranósido (1,1 g; 1,08 mmole) e da amina 2,3,5-tri-0-benzil-1,4-didesoxi-1,4-imino-D-arabinitol (0,145 g; 0,36 mmoles) em dimetilformamida seca (4 ml) juntamente com carbonato de potássio seco (0,206 g; 1,49 mmole). Evaporou-se a dime-30tilformamida sob pressão reduzida. Extraíu-se o resíduo com acetato de etilo e lavou-se duas vezes com água. Secou-se a camada orgânica sobre sulfato de sódio, filtrou-se e eoneentrou-se sob pressão reduzida para se obter uma espuma. A cromatografia sobre óxido de alumínio neutro de actividade III e a eluição com uma mistura gradiente de tetracloreto de carbono e acetato de etilo deu a amina pretendida 2,3,5-tri-0-benzil-1,4-didesoxi-N-[2,3,4-tri-O-benzil-6,7-didesoxi-1-(2,3,4-tri-0-benzil-1-0-metil-6-0-^-glucopiranosil)-^í-D-gluco-heptopiranosil]-1,4-imino-D-arabinitol (0,326 g; 70%) com o aspecto de uma espuma.

Exemplo 30

Preparação de 1,4-didesoxi-N-[6,7-didesoxi-1-(1-0-metil-6-0-^<-D-glucopiranosil)-^<k-D-gluco-heptopiranosil]-1,4-imino-D-arabinitol

Dissolveu-se em ácido acético (30 ml) a amina 2,3,5-tri-0-benzil-1,4-didesoxi-N-[2,3,4-tri-O-benzil-6,7-didesoxi-1-(2,3,4-tri-0-benzil-1 -0-met11-6-0-^/-D-glucopiranosil)-\.-D-gluco-heptopiranosil]-1,4-imino-D-arabinitol (0,30 g; 0,231 mmole). Adiclonou-se paládio a 10% sobre carvão (0,4 g). Hidrogenou-se a mistura durante 4 dias à pressão de 3 atmosferas. Removeu-se o catalisador por filtração e evaporou-se os dissolventes sob pressão reduzida. Dissolveu-se o resíduo em água e fez-se passar através de uma coluna de Amberlyst A26 0H . Evaporou-se a água sob pressão reduzida. A cromatografia rápida sobre gel de sílica utilizando como eluente uma mistura gradiente de clorofórmio, metanol e água, deu a amina pretendida 1,4-dideso.¾ xi-N- [6,7-didesoxi-1-( 1 -0-metil-6-0-^(_-D-glucopiranosil) -^-D-gluco-heptopiranosil]-1,4-imino-D-arabinitol (0,076 g; 68$) sob a forma de um sólido amorfo.

Exemplo 31

Preparação de metil-2,3_>ó-tri-0-benzil-4-ciano-4-desoxi-^V-D-glucopiranósido

Durante 24 horas submeteu-se a refluxo, sob atmosfera de azoto, uma solução de metil-2,3,6-tri-O-benzil-4-O-trifluorometilsulfonil- <\ú-D -galactopiranósido (3 g; 6,07 mmoles) e cianeto de tetra-n-butilamónio (6,51 g; 24,28 mmoles) em clorofórmio (60 mi) isento de etanol. Diluíu-se a mistura reaccional com cloreto de metileno, e lavou-se duas vezes com água. Secou-se a camada orgânica sobre sulfato de sódio, filtrou-se e concentrou-se sob pressão reduzida para se obter umóleo. A cromatografia rápida sobre gel de sílica, utilizando como eluente uma mistura gradiente de hexano e acetato de etilo, deu o nitrilo pretendido metil-2,3,6-tri-0-benzil-4-ciano-4-desoxi-^-D-glucopiranósido (1,75 g; 61$) sob a forma de um óleo.

Exemplo 32

Preparação de metil-2,3, 6-tri-0-benzil-4-desoxi-4-f ormil- -D-glucopiranósido

A uma solução de metil-2,3,6-tri-0-benzil-4-ciano-4-desoxi-⁽ò<-D-glucopiranósido (1,75 g; 3,7 mmoles) em tetra-hidrofurano seco (19 ml) adicionou-se, gota a gota, à temperatura de -78°C, uma solução de 1,2 M de hidreto de diisobutil/32Η

-alumínio em n-hexano (3,1 ml). Agitou-se a mistura sob atmosfera de árgonàtemperatura de -78°C durante 3 horas. Adicionou-se metanol (2 ml) e aqueceu-se a mistura até à temperatura de 0°C. Depois fez-se a evaporação dos dissolventes sob pressão reduzida. Adicionou-se éter (50 ml) e uma solução aquosa de ácido clorídrico 0,1 N (40 ml) e depois agitou-se a mistura à temperatura de 0°C durante 1 hora. Seguidamente, após a decantação, secou-se a camada orgânica sobre sulfato de sódio, filtrou-se e concentrou-se sob pressão reduzida para se obter o aldeído pretendido metil-2,3,6-tri-0-benzil-4-desoxi-4-formil-^/-D-glucopiranósido, sob a forma de um óleo (1,7 g; 96%), que se utilizou sem purificação.

Exemplo 33

Preparação de metil-2,3,6-tri-0-benzil-4-desoxi-4-hidroximetil-^-D-glucoplranósido

Dissolveu-se em etanol (15 ml) o aldeído metil-2,3,6-tri-0-benzil-4-desoxi-4-formil-'\_>-D-glucopiranósido (1,7 g; 3,57 mmoles). Arrefeceu-se a mistura até à temperatura de 0°C e adicionou-se, por porções boro-hidreto de sódio no estado sólido (0,068 g; 1,8 mmole). Agitou-se a mistura durante 1 hora à temperatura de 0°C. Adicionou-se depois ácido acético (0,4 ml) e evaponou-se os dissolventes sob pressão reduzida. Retomou-se o resíduo com acetato de etilo e lavou-se com uma solução aquosa saturada de hidrogeno carbonato de sódio e depois com uma solução saturada de cloreto de sódio. Secou-se a camada orgânica sobre sulfato de sódio, filtrou-se e concentrou-se sob pressão reduzida para se obter um óleo. A cromatografia rápida

-33sobre gel de sílica, utilizando como eluente uma mistura gradiente de hexano e acetato de etilo, deu o álcool pretendido metil-2,3,6-tri-0-benzil-4-desoxi-4-hidroximetil-\.-D-glucopiranósido, sob a forma de um óleo (1,19 gj 70$).

Exemplo 34

Preparação de metil-2,3,6-tri-0-benzil-4-desoxi-4-trifluorometilsulfoniloximetil-^ó-D-glucopiranósido

A uma solução de piridina seca (0,45 ml) em cloreto de metileno (30 ml) arrefecida até à temperatura de -15°C adicionou-se anidrido trifluorometano-sulfónico (0,84 ml). Agitou-se a mistura durante 15 minutos à’temperatura de -10°C e depois adicionou-se uma solução de metil-2,3,6-tri-0-benzil-4-desoxi-4-hidroximetil-^-D-glucopiranósido (1,19 g; 2,49 mmoles) em cloreto de metileno (5 ml). Agitou-se a mistura durante 1,5 horas à temperatura de -10°C. Lavou-se a mistura reaccional com água. Secou-se a camada orgânica sobre sulfato de sódio, filtrou-se e concentrou-se sob pressão reduzida para se obter um óleo (1,443 g; 95$) que era o triflato pretendido metil-2,3,6-tri-0-benzil-4-desoxi-4-trifluorornetilsulfoniloximetil-D-glucopiranósido.

Exemplo 35

Preparação de 2,3,5-tri-0-benzil-1,4-didesoxi-1,4-C(2,3,ó,tri-0-benzil-4~desoxi-1-0-metil-4-Qá-D-glucopiranosil)-metilimino]-D-arabinitol

Durante 48 horas submeteu-se a refluxo, sob atmosfera de azoto uma solução de metil-2,3,6,tri-0-benzil-4-desoxi-34-4-trifluorornetilsulfoniloximetil-Q/ -D-glucopiranósido (1 g; 1,64 mmole) e 2,3,5-tri-0-benzil-1,4-didesoxi-1,4-imino-D-arabinitol (0,66 g; 1,64 mmole) em clorofórmio (60 ml) isento de etanol. Diluiu-se a mistura com cloreto de metileno e lavou-se, sucessivamente, com uma solução aquosa saturada de hidrogeno carbonato de sódio e com uma solução saturada de cloreto de sódio. Secou-se a camada orgânica sobre sulfato de sódio, filtrou-se e concentrou-se sob pressão reduzida para se obter uma espuma. A cromatografia rápida sobre gel de sílica, utilizando como eluente uma mistura gradiente de hexano e acetato de etilo, deu a amina pretendida

2,3,5-tri-0-benzil-1,4-didesoxi-1,4-[(2,3,6-tri-O-benzil-4-desoxi-1-0-metil-4-^C-D-glucopiranosil)-metilimino]-D-arabinitol (0,979 g; 7055) com o aspecto de uma espuma.

Exemplo 36

Preparação de 1,4-didesoxi-1,4-[(4-desoxi-1-0-metil-4-^/-D-glucopiranosil)-metilimino]-D-arabinitol

Dissolveu-se em ácido acético (20 ml) a amina 2,3,6-tri-0-benzil-1,5-didesoxi-1,5-E(2,3,6-tri-0-benzil-4-desoxi-1-O-metil-4-^í.-D-glucopiranosil)-metiimino ]-D-arabinitol (0,98 g; 1,13 mmole). Adicionou-se paládio a 10% sobre carvão (0,8 g) e hidrogenou-se a mistura durante 3 dias à pressão de 3 bar. Removeu-se o catalisador por filtração e evaporou-se os dissolventes sob pressão reduzida. A cromatografia rápida sobre gel de sílica utilizando como eluente uma mistura gradiente de clorofórmio, metanol e água deu a amina pretendida 1,4-didesoxi-1,4-[(4-desoxi-1-0-metil-4-^X.-D-glucopiranosil)-metilimino]-D-arabinitol (0,262 g; 72%) sob a forma de um sólido amorfo.

/

Exemplo 37

Preparação de 2,3,6-tri-O-benzil-D-galaotopiranose

Dissolveu-se metil-2,3,ó-tri-O-benzil-^-D-galactopiranósido (5 g; 10,775 mmoles) à temperatura de 0°C, numa mistura a 9:1 de ácido trifluoroacético e água (50 ml) [N. Morishima, S. Koto, M. Oshima, A. Sugimoto e S. Zen,

Buli Chem. Soc. Jpn· 56 ( 1983) 2849 ]. Agitou-se a mistura durante uma noite à temperatura de 0°C. Evaporou-se os dissolventes sob pressão reduzida, sem aquecimento. Dissolveu-se o resíduo em acetato de etilo e lavou-se sucessivamente, com uma solução de hidrogeno carbonato de sódio e uma solução concentrada de cloreto de sódio. Secou-se a camada orgânica sobre sulfato de sódio, filtrou-se e concentrou-se sob pressão reduzida para se obter um óleo. A cromatografia rápida sobre gel de sílica, utilizando como eluente uma mistura gradiente de acetato de etilo e hexano, deu 2,3,6-tri-O-benzil-D-galactopiranose (3,927 g; 81%) sob a forma de um óleo.

Exemplo 38

Preparação de 1,4-di-0-acetil-2,3,6-tri-0-benzil-D-galaotopiranose

Dissolveu-se 2,3,6-tri-0-benzil-D-galactopiranose (3,927 g; 8,72 mmoles) em piridina seca (25 ml) e adicionou-se anidrido acético (5 ml). Agitou-se a mistura durante 24 horas à temperatura ambiente. Evaporou-se o dissolvente sob vazio elevado. Dissolveu-se o resíduo em acetato de etilo e lavou-se com água. Secou-se a camada orgânica sobre sulfato

-36de sódio, filtrou-se e concentrou-se sob pressão reduzida para se obter o diacetato pretendido 1,4-di-0-acetil-2,3,6-tri-O-benzil-D-galactopiranose (4,64 g; 99?), sob a forma de um óleo, o qual foi utilizado sem purificação.

Exemplo 39

Preparação de cloreto de 4-0-acetil-2,3,6-tri-0-benzil- -D-galactopiranosilo

Tratou-se uma solução de 1,4-di-0-acetil-2,3,6-tri-O-benzil-D-galactopiranose (4,64 g; 8,67 mmoles) em éter (10 ml) com uma solução etérea de ácido clorídrico (0,2 g/ml; 25 ml). Agitou-se a mistura à temperatura ambiente durante 48 horas. Evaporou-se os dissolventes sob pressão reduzida para se obter um óleo. A cromatografia rápida sobre gel de sílica, utilizando como eleunte uma mistura gradiente de tetracloreto de carbono e acetato de etilo, deu cloreto de 4-0-acetil-2,3,6 -tri-O-benzil- M-D -galactopiranosilo (3, 142 g; 71?) com o aspecto de um óleo.

Exemplo 40

Preparação de metil-4-0-(4-0-acetil-2,3,6-tri-0-benzil-^<-D-galactopiranosil)-2, 3,6-tri-0-benzil-'Nf-P-glucopiranósido

Adicionou-se uma solução etérea de perclorato de prata (0,08 M; 84,5 ml; 6,76 mmoles), com agitação, à temperatura de -30°C, a uma solução de metil-2,3,6-tri-0-benzil-O^-D-glucopiranósido (2,284 g; 4,93 mmoles) [P.J. Garegg,

H. Hultberg e S. Wallin, Carbohydr., Res., 108 (1982) 97],

cloreto de 4-0-acetil-2,3,6-tri-0-benzil-^C-D-galactopiranosilo (3,142 g; 6,154 mmoles) e 2,4,6-trimetilpiridina (0,89 ml; 6,76 mmoles) em éter (20 ml). Agitou-se a mistura durante 15 minutos à temperatura de -30°C e verificou-se a precipitação de cloreto de prata. Filtrou-se a mistura através de uma almofada de celite, lavou-se os componentes sólidos com éter, concentrou-se o filtrado sob pressão reduzida. Dissolveu-se o resíduo em cloreto de metileno e lavou-se a camada orgânica, sucessivamente, com uma solução aquosa de tiossulfáto de sódio e com água. Secou-se a camada orgânica sobre sulfato de sódio, filtrou-se e concentrou-se sob pressão reduzida para se obter uma espuma. A cromatografia rápida sobre gel de sílica, utilizando como eluente uma mistura gradiente de hexano e acetato de etilo deu metil-4-0-( 4-0-acetil-2,3,6-tri-0-benzil-QQ,-D-galactopiranosll) -2,3,6-tri-0-benzil-U<,-D-glucopiranósido (2,543 g; 55$) com o aspecto de uma espuma.

Exemplo 41

Preparação de metil-2,3,6-tri-O-benzil-4-O-(2,3,6-tri-O-benzil-^-D-galactõpiranosil)-fot-D-glucopiranósido

Dissolveu-se metil-4-0-(4-0-acetil-2,3,6-tri-0-benzil-^LD-galactopiranosil-2,3,ó-trl-O-benzil-QZ-D-glucopiranósido (2,543 g; 2,71 mmoles) em tolueno quente (20 ml) e adicionou-se metanol (80 ml), seguido da adição de algumas gotas de uma solução metanólica 1 M de metóxido de sódio. Agitou-se a mistura à temperatura ambiente durante 2 horas. Neutralizou-se a mistura reaccional com resina de Amberlite IR 120 (H⁺), filtrou-se e concentrou-se sob pressão reduzida para se obter metil-2,3,6-

-38-tri-O-benzil-4-0-(2,3,6-tri-O-benzil-^-D-galactopiranosil) -^-D-glucopiranósido (2,42 g; 100%), sob a forma de um sólido amorfo.

Exemplo 42

Preparação de metil-4-0-(2,3,6-tri-O-benzil-4-O-trifluorometilsulfonil-^V-D-galactopiranosil)-2,3,6-tri-0-benzil-^-D-glucopiranósido

A uma solução de piridina seca (0,49 ml) em cloreto de metileno seco (40 ml), arrefecida até à temperatura de -15°C, adicionou-se anidrido trifluorometano-sulfónico (0,91 ml). Agitou-se a mistura durante 15 minutos à temperatura de -10°C e depois adicionou-se uma solução de metil-2,3,6-tri-O-benzil4-0-(2,3,6-tri-0-benzil-^6-D-galaetopiranosil)-'V-D-glueopiranósido (2,428 g; 2,71 mmoles) em cloreto de metileno (10 ml). Agitou-se a mistura durante 1,5 horas à temperatura de -10°C. Lavou-se a mistura reaccional com água. Secou-se a camada orgânica sobre sulfato de sódio, filtrou-se e concentrou-se sob pressão reduzida para se obter um óleo (2,702 gj 97%) que se verificou ser o triflato pretendido metil-4-O-(2,3,6-tri-O-benzil-4-0-trifluorometilsulfonil-¹^-D-glucopiranósido.

Exemplo 43

Preparação de 2,3,5-tri-Q-benzil-1;4-didesoxi-N-[2,3,6-tri-0-benzil-4-desoxi-1-(2,3,6-tri-0-benxil-1-0-metil-4-0-^Q/-D-glucopiranosil)-Qó-D-glucopiranosil]-1,4-imino-D-arabinitol

Durante 48 horas submeteu-se a refluxo, sob atmosfera de azoto, uma solução de metil-4-0-(2,3,6-tri-0-benzil-4-0.y

-39-trifluorometilsulfonil- -galactopiranosil)-2,3 ,6-tri-0-benzil-Çy -D-glucopiranósido (1,30 g; 1,25 mmole) e 2,3,5-tri-0-benzil-1,4-didesoxi-1,4-imino-D-arabinitol (0,5 g; 1,25 mmole) em clorofórmio (50 ml) isento de etanol. Diluíu-se a mistura com cloreto de metileno e lavou-se, sucessivamente, com uma solução aquosa saturada de hidrogeno carbonato de sódio e uma solução saturada de cloreto de sódio. Seeou-se a camada orgânica sobre sulfato de sódio, filtrou-se e concentrou-se sob pressão reduzida para se obter uma espuma. A cromatografia rápida sobre gel de sílica, utilizando como eluente uma mistura gradiente de hexano e acetato de etilo, deu a amina pretendida 2,3,5-tri-0-benzil-1,4-didesoxi-N-[2,3,6-tri-0-benzil-4-desoxi-1-(2,3,6-tri-0-benzil-1-0-metil-4-O-^-D -glucopiranosil) -^-D-glucopiranosll] -1,4-imino-D-arabinltol (1,1 g; 68%), sob a forma de um sólido amorfo.

Exemplo 44

Preparação de 1,4-didesoxi-N-[4-desoxi-1-(1-0-me111-4-0-¾ -D-glucopiranosil)-Q<-D-glucopiranosil]-1,4-imino-D-arabinitol

Dissolveu-se 2,3,5-tri-0-benzil-1,4-didesoxi-N-[2,

3,6-tri-0-benzil-4-desoxi-1-(2,3,6-tri-0-benzil-1-0-metil-4-0-'\-D-glucopiranosil) -^-D-glucopiranosil ]-1 , 4-imino-D-arabinitol (1 g; 0,78 mmole) em ácido acético (30 ml). Adicionou-se paládio a 10$ sobre carvão (0,5 g). Hidrogenou-se a mistura durante 4 dias à pressão de 3 atmosferas. Removeu-se o catalisador por filtração e evaporou-se os dissolventes sob pressão reduzida. Retomou-se o resíduo com água e

-40fez-se passar através de uma coluna de Amberlyst A26 na forma OH^-. Evaporou-se a água sob pressão reduzida e submeteu-se a cromatografia rápida sobre gel de sílica, utilizando como eluente uma mistura gradiente de clorofórmio, metanol e agua, para se obter a amina pretendida 1,4-didesoxi-N-[4-desoxi-1-(1-0-metil-4-O-^<3<-D-glucopiranosil)-^ -D-glucopiranosil ]-1,4-imino-D-arabinitol (0,257 g; 70$) sob a fôrma de uffi sólido amorfo

Exemplo 45;

Preparação de 1-etenil-1,2:3,4-di-0-isopropilideno- P-D-arabinopiranose

A uma solução de cloreto de oxalilo (1,05 ml; 17,22 mmoles) em tetra-hidrofurano seco (40 ml) arrefecido até à temperatura de -78°C adicionou-se, gota a gota, dimetilsulfóxido seco (1,3 ml; 18,04 mmoles) e depois agitou-se durante 35 minutos à temperatura de -35°C. Arrefeceu-se a mistura reaccional novamente até à temperatura de -78°C e adicionou-se uma solução de 2,3:4,5-di-O-isopropilideno-D-frutopiranose (4,26 g; 16,4 mmoles) [R.F. Brady, Carbohydr. Res.,15 (1970) 35] em tetra-hidrofurano (20 ml) e agitou-se a mistura durante 15 minutos à temperatura de -35°C e depois adicionou-se trietilamina (11,5 ml; 82,65 mmoles) e agitou-se a mistura durante 1 hora à temperatura de -35°C. Utilizou-se este aldeído sem purificação e.sem isolamento numa reacção de Wittig, conforme se descreve a seguir. Preparou-se uma suspensão de brometo de triefenilmetilfosfónio seco (11,7 g; 32,8 mmoles) em tetra-hidrofurano (400 ml) e, gota a gota, adicionou-

-se-lhe, à temperatura de -78°C, uma solução 1,55 M de n-butil-lítio em hexano (21 ml; 32,66 mmoles). Aqueceu-se a mistura reaccional até à temperatura ambiente e agitou-se durante 1,5 horas. Depois arrefeceu-se a mistura até à temperatura de 0°C e adicionou-se-lhe tert-butilato de potássio (3,68 g; 32,8 mmoles) e álcool tert-butílico seco (3 ml; 31,8 mmoles). Agitou-se a mistura novamente à temperatura ambiente durante 30 minutos. Arrefeceu-se a mistura reaccional até à temperatura de -78°C e adicionou-se-lhe, gota a gota, uma solução em tetra-hidrofurano do aldeído anteriormente preparado. Aqueceu-se a mistura reaccional até à temperatura ambiente e agitou-se durante 2 horas. Evaporou-se uma solução aquosa saturada de cloreto de amónio e os dissolventes, sob pressão reduzida. Dissolveu-se o resíduo em éter e lavou-se com água. Secou-se a camada orgânica sobre sulfato de sódio, filtrou-se e concentrou-se sob pressão reduzida para se obter um óleo castanho. A cromatografia rápida sobre gel de sílica, utilizando como eluente uma mistura gradiente de hexano e acetato de etilo, deu a olefina pretendida 1-eten±l-1,2:3,4-di-0-isopropilideno-β-D-arabinopiranose (2,77 g; 66$) sob a forma de um oléo,

Exemplo 46

Preparação de 1,2,3,4-di-0-isopropílideno-1-(2-hiX &

. droxietil)- p-D-arabinopiranose

A uma solução de 1-etenil-1,2:3,4-di-0-isopropili-deno-p-D-arablnopiranose (2 g; 7,81 mmoles) em tetra-hidro^2furano seco (15 ml) adicionou-se uma solução 10 M de bonano em sulfureto de metilo (0,78 ml, 7,8 mmoles) à temperatura de 0°C, sob atmosfera de azoto. Agitou-se a mistura durante 3 horas à temperatura ambiente. Destruíu-se o excesso de borano com etanol (3 ml). Arrefeceu-se a mistura até à temperatura de 0°C. Adicionou-se peróxido de hidrogénio a 30# (1 ml) e uma solução aquosa 3 N de hidróxido de sódio (1 ml). Submeteu-se a mistura a refluxo durante 2 horas. Diluíu-se a mistura reaccional com água e extraíu-se 3 vezes com acetato de etilo. Secou-se a camada orgânica sobre sulfato de sódio, filtrou-se e eoncentrou-se sob pressão reduzida para se obter um óleo. A cromatografia rápida sobre gel de sílica, utilizando como eluente uma mistura a 1:1 de acetato de etilo e hexano, deu o álcool pretendido 1,2,3,4-di-0-isopropilideno-1-(2-hidroxietil)- P-D-arabinopiranose (1,717 g; 80#) sob a forma de um óleo.

Exemplo 47

Preparação de 1,2,3,4-di-Q-isopropilideno-1-(2-iodoetil)- p-D-arabinopiranose

A uma solução de 1,2,3,4-di-0-isopropilideno-1-(2-hidroxietil)-j^-D-arabinose (1,7 g; 6,2 mmoles) em cloreto de metileno seco (30 ml) adicionou-se trietilamina (1,3 ml;

9,3 mmoles). Arnefeceu-se a mistura até à temperatura de -10°C e adicionou-se, gota a gota, cloreto de mesilo (0,5 ml; 6,46 mmoles). Agitou-se a mistura durante mais de 15 minutos à temperatura de -10°C e depois deixou-se a mistura reaccional retomar a temperatura ambiente. Lavou-se a mistura três vezes com f

-43água. Secou-se a fase orgânica sobre sulfato de sódio, filtrou-se e concentrou-se sob pressão reduzida para se obter um óleo amarelo que foi utilizado sem purificação. Dissolveu-se em éter (15 ml) o produto impuro 1,2:3,4-di-0-isopropildeno-1-(2-metilsulfoniloxietil)-0<-D-arabinose. A esta mistura adicionou-se uma solução 0,35 M de iodeto de magnésio em éter (53 ml), à temperatura de 0°C. Agitou-se a mistura durante 15 minutos à temperatura de 0°C. Hidrolisou-se com água o excesso de iodeto de magnésio. Lavou-se a mistura reaccional com uma solução aquosa de tiossulfato de sódio e com água. Secou-se a camada orgânica sobre sulfato de sódio, filtrou-se e concentrou-se sob pressão reduzida para se obter um óleo. A cromatografia rápida sobre gel de sílica, utilizando como eluente uma mistura a 9:1 de hexano e de acetato de etilo deu o desejado iodeto 1,2,3,4-di-0-isopropilideno-1-(2-iodoetíl)-jS-D-arabinopiranose (1,9 g; 80%) sob a forma de um óleo ligeiramente amarelado.

Exemplo' 48

Preparação de 2,3,5-tri-0-benzil-1,4-didesoxi-1,4- £ [2-(1,2--3,3-di-O-isopropiiideno-l-^-D-arabinopIranosip-etil]- imino -D-arabinitol

Aqueceu-se à temperatura de 80°C, durante uma noite, uma solução de 1,2,3,4-di-0-isopropilideno-1-(2-iodoetil)-β -D-arabinose (2,0 g; 5,21 mmoles) e 2,3,5-tri-0-benzil-1,4-didesoxi-1,4-imino-D-arabinitol (0,7 gj 1,74 mmole) em dimetilformamida seca (10 ml) juntamente com carbonato de potássio seco (0,91 g; 6,6 mmoles). Evaporou-se a dimetilformamida sob /

W pressão reduzida. Retomou-se o resíduo com acetato de etilo e lavou-se duas vezes com água. Secou-se a camada orgânica sobre sulfato de sódio, filtrou-se e concentrou-se sob pressão reduzida para se obter um óleo. A cromatografia sobre óxido de alumínio neutro de actividade III, utilizando como eluente uma mistura gradiente de hexano e acetato de etilo, deu a amina pretendida 2,3,5-tri-0-benzil-1,4-didesoxi-1,4- [2- (1,2,3 ? 4-di-0-isopropilideno-1- p~D-arabinopiranosil) ]-imino £ -D-arabinitol (0,88 g; 61$) com o aspecto de uma espuma.

Exemplo 49

Preparação de 2,3,5-tri-0-benzll-1,4-didesoxi-1,4-£ [2-(1-0-metil-l- -D-arabinofuranosil)-etil]-imino } -D-arabinitol

Dissolveu-se 2,3,5-tri-0-benzil-1,4-didesoxi-1,4- ) [2-(1,2,3,4-di-0-isopropilideno-1-^3-D-arabinopiranosil) - etil ]-imino J-D-arabinitol (0,70 g; 0,94 iranole) em metanol (60 ml) contendo 5$ de ácido clorídrico seco e submeteu-se a refluxo durante 24 horas. Arrefeceu-se a mistura reaccional até à temperatura ambiente e neutralizou-se com Amberlyst A26 na forma 0H^-. Filtrou-se a mistura e evaporou-se o dissolvente sob pres são reduzida para se obter uma espuma. A cromatografia rápida sobre gel de sílica, utilizando como eluente uma mistura gradiente de acetato de etilo e metanol, deu a amina pretendida

2,3,5-tri-0-benzil-1, 4-didesoxi-1,4-[2-(1-0-metil-1-D-arabinofuranosil)-etil]-imino {--D-arabinitol (0,36 g; 65$) com o aspecto de uma espuma.

5» .%

Exemplo 50

Preparação de 1,4-didesoxi-1,4-{ [2-(1-0-metil-1-^<-D-arabinofuranosil)-etil]-imino } -D-arabinitol

Dissolveu-se a amina 2,3,5-tri-0-benzil-1,4-didesoxi-1,4- £[2-(1-0-metil-1-^t-D-arabinofuranosil)-etil]-imino^-D-arabinitol (0,3 g; 0,51 mmoles) em ácido acético (20 ml). Adicionou-se paládio a 10% sobre carvão (0,2 g) e hidrogenou-se a mistura durante 4 dias à pressão de 3 atmosferas. Removeu-se o catalisador por filtração e fez-se a evaporação dos dissolventes sob pressão reduzida. Dissolveu-se o resíduo em água e fez-se passar através de uma coluna de Amberlyst A26 na forma OH^-. Evaporou-se a água sob pressão reduzida. A cromatografia rápida sobre gel de sílica, utilizando como eluente uma mistura gradiente de clorofórmio, metanol e água, deu a amina desejada 1,4-didesoxi-1,4-£ [2-(1-0-metil-1-D-arabinofuranosil)-etil]-imino J-D-arabinitol (0,115 g;70%) sob a forma de um sólido amorfo.

Exemplo 51

Preparação de metil-ó-O-CU-O-acetil-P,3,6-tri-0-benzil-<X-D-galactopiranosil)-2,3,4-tri-O-benzil-D-glucopiranósido

Adicionou-se uma solução etérea de perclorato de prata (0,08 M; 76,9 ml; 6,15 mmoles) com agitação, à temperatura de -30°C, a uma solução de metil-2,3,4-tri-O-benzil-^V-D-glucopiranósido (2,078 g; 4,48 mmoles), cloreto de 4-06-acetil-2,3,6-tri-0-benzil-<V-D-galactopiranosilo (2,859 gj

5,6 mmoles) e 2,4,6-trimetilpiridina (0,81 ml; 6,15 mmoles) em éter (20 ml). Agitou-se a mistura durante 15 minutos à temperatura de -30°C, observando-se a precipitação de cloreto de prata. Filtrou-se a mistura através de uma almofada de celite, lavaram-se os sólidos com éter e concentrou-se o filtrado sob pressão reduzida. Dissolveu-se o resíduo em cloreto de metileno e lavou-se a camada orgânica, sucessivamente, com uma solução aquosa de tiossulfato de sódio e com água. Secou-se a camada orgânica sobre sulfato de sódio, filtrou-se e concentrou-se sob pressão reduzida para se obter uma espuma. A cromatografia rápida sobre gel de sílica, utilizando como eluente uma mistura gradiente de hexano e acetato de etilo deu metil-6-O-(4-O-acetil-2,3,6-tri-0-benzil-^-D-glucopiranósido (2,314 g; 55$) com o aspecto de uma espuma.

Exemplo 52

Preparação de metil-2,3,4-tri-O-benzil-6-O-(2,3,6-tri-O-benzil-^ -P-galaotopiranosiD-C^D-glucopiranósido

Dissolveu-se metil-6-0-(4-0-acetil-2,3,6-tri-0-benzil-^V -D-galactopiranosil)-2,3,4-tri-0~benzil-Q(-D-glucopiranósido (2,314 g; 2,46 mmoles) em tolueno quente (20 ml) e adicionou-se metanol (80 ml), acrescentando depois algumas gotas de uma solução metanólica de metóxido de sódio 1M. Agitou-se a mistura à temperatura ambiente durante 2 horas. Neutralizou-se a mistura reaccional com resina de tipo Amberlite IR 120 (H⁺), filtrou-se e concentrou-se sob pressão reduzida para se obter metil-2,3,4-tri-O-benzil-6-O-(2,3,6-tri-0-benzil- -D-galactopiranosil)- ^-D -glucopiranósido (2,21 g;

100$) sob a forma de um sólido amorfo.

Exemplo 53

Preparação de metil-6-O-(2,3,6-tri-O-benzil-4-Q-trifluorometilsulfonil - oÇ -D-galactopiranosil)-2,3,4-tri-O-benzil-^V -D-gluoopiranósido

A uma solução de piridina seca (0,45 ml) em cloreto de metileno seco (40 ml) arrefecida até á temperatura de -15°C adicionou-se anidrido trifluorometano-sulfónico (0,83 ml). Agitou-se a mistura durante 15 minutos à temperatura de -10°C e depois adicionou-se uma solução de metil-2,3,4-tri-0-benzil-6-0-(2,3,6-tri-0-benzil-<\.-D-galactopiranosil) -^.-D-glucopiranósido (2,21 g; 2,46 mmoles) em cloreto de metileno (10 ml). Lavou-se a mistura com água. Secou-se a camada orgânica sobre sulfato de sódio, filtrou-se e concentrou-se sob pressão reduzida para se obter um óleo (2,478 g; 98$) que era o triflato pretendido de metil-6-0-( 2,3,6-tri-0-benzil-4-0-trifluorometilsulfonil- CkL-D-galactopiranosil)-2,3,4-tri-0-benzil-^-D-glucopiranósido.

Exemplo 54;

Preparação de 2,3,5-tri-0-benzil-1,4-didesoxi-N-[2,3,6-tri-0-benzil-desoxi-1-(2,3,4-tri-0-benzil— 1—0—me 111-6-0-¾. -P-glucopiranosil)-Q<<-D-glucopiranosil]-1, 4-imino-D-arabinitol

Durante 48 horas submeteu-se a refluxo sob atmosfera de azoto, uma solução de metil-6-O-(2,3,ó-tri-O-benzil-4-0-trifluorometilsulfonil-^L-D-galactopiranosil)-2,3,4-tri-O-benzil-^-D-glucopiranósido (1,2 g; 1,16 mmole) e 2,3,5-tri-0-benzil-1,4-didesoxi-1,4-imino-D-arabinitol (0,468 g; 1,16 mmole) em clorofórmio (50 mi) isento de etanol. Diluíu-se a mistura com cloreto de metileno e lavou-se, sucessivamente, com uma solução aquosa saturada de hidrogeno carbonato de sódio e com uma solução saturada de cloreto de sódio. Secou-se a camada orgânica sobre sulfato de sódio, filtrou-se e concentrou-se sob pressão reduzida para se obter uma espuma.

A cromatografia rápida sobre gel de sílica, utilizando como eluente uma mistura gradiente de hexano e acetato de etilo, deu a amina pretendida 2,3,5-tri-0-benzil-1,4-didesoxi-N-[2,3,6-tri-0-benzil-4-desoxi-1-(2,3,4-tri-0-benzil-1-0-metil-6-O-^X-D -glucopiranosil)-D-glucopiranosil)-1,4-imino-D-arabinitol (0,668 g; 45%) sob a forma de um sólido amorfo.

Exemplo 55

Preparação de 1,4-didesoxi-N-[4-desoxi-1-(1-0-metil-6-0-^-D-glucopiranosil)-D-glucopiranosil1-1,4-imino-D-arabinitol

Dissolveu-se 2,3,5-tri-0-benzil-1,4-didesoxi-N-[2,3,6-tri-0-benzil-4-desoxi-1-(2,3,4-tri-0-benzil-1-0-metil-6-0-^k-D-glucopiranosil) - ^-D-glucopiranosil ]-1, 4-imino-D-arabinitol (0,6 g; 0,468 mmole) em ácido acético (30 ml). Adicionou-se-lhe paládio a 10% sobre carvão (0,6 g) . Hidrogenou-se a mistura durante 4 dias à pressão de 3 atmosferas. Removeu-se o catalisador por filtração e evaporou-se os dissolventes sob pressão reduzida. Dissolveu-se o resíduo em água e fez-se passar através de uma coluna de Amberlyst A2ó na forma . 0H~. Evaporou-se a água sob pressão reduzida e submeteu-se a cromatografia rápida sobre gel de sílica, utilizando como eluente uma mistura gradiente de clorofórmio,

-49k.

metanol e água, para se obter a amina pretendida 1,4-didesoxi-N-[4-desoxi-1-(1-0-metil-6-0- -glucopiranosil)-bó-D-glucopiranosil]-1,4-imino-D-arabinitol (0,154 g; 70$) sob a forma de um sólido amorfo.

Exemplo 56

Preparação de 2,3_;6-tri-0-benzil-4-desoxi-4-hidroximetil-D-glucopiranoso

À temperatura de 0°C dissolveu-se metil-2,3,6-tri-0-benzil-4-desoxi-4-hidroximetil- C<-D -glueopiranósido (4,78 g; 10 mmoles) numa mistura a 9:1 de ácido trifluoroacético e água (50 ml). Agitou-se a mistura durante uma noite à temperatura de 0°C. Evaporou-se os dissolventes sob pressão reduzida sem aquecimento. Dissolveu-se o resíduo em acetato de etilo e lavou-se, sucessivamente, com uma solução de hidrogeno carbonato de sódio e com uma solução saturada de cloreto de sódio. Secou-se a camada orgânica sobre sulfato de sódio, filtrou-se e concentrou-se sob pressão reduzida para se obter um óleo.

A cromatografia rápida sobre gel de sílica, utilizando como eluente uma mistura gradiente de acetato de etilo e hexano, deu 2,3,6-tri-0-benzil-4-desoxi-4-hidroxi-metil-D-glucopiranose (4,4 g; 95$) sob a forma de um óleo.

Exemplo 57

Preparação de acetil-2,3_i6-tri-0-benzil-4-desoxi-4-acetiloxiinetil-D-gl.ucopiranósido

Dissolveu-se 2,3,6-tri-0-benzil-4-desoxi-4-hidroximetil-D-glucopiranose (5,10 g; 9,30 mmoles) em piridina seca (25 ml) e adicionou-se anidrido acético (5 ml). Agitou-se a

-50mistura durante 24 horas à temperatura ambiente. Evaporou-se o dissolvente sob vazio elevado. Dissolveu-se o resíduo em acetato de etilo e lavou-se com água. Secou-se a camada orgânica sobre sulfato de sódio, filtrou-se e concentrou-se sob pressão reduzida para se obter o diacetato pretendido acetil-2,3,6-tri-0-benzil-4-desoxi-4-acetiloximetii-D-glucopiranósido (5,10 g; 98$) sob a forma de um óleo, o qual foi utilizado sem purificação.

Exemplo 58

Preparação de cloreto de 2,3,6-tri-0-benzil-1,4-didesoxi-4-aoetiloximetil-D-gluooplranosilo

Tratou-se uma solução de acetil-2,3,6-tri-0-benzil-4-desoxi-4-acetiloximetil-D-glucopiranósido (5,10 g; 9,30 mmoles) em éter (10 ml) com uma solução etérea de ácido clorídrico (0,2 g/ml; 25 ml). Agitou-se a mistura à temperatura ambiente durante 48 horas. Evaporou-se os dissolventes sob pressão reduzida para se obter um óleo. A cromatografia rápida sobre gel de sílica, utilizando como eluente uma mistura gradiente de tetracloreto de carbono e acetato de etilo,deu o cloreto de 2,3,6-tri-0-benzil-1,4-didesoxi-4-acetiloximetil-D-glucopiranosilo (3,661 g; 75$) sob a forma de um óleo.

Exemplo 59

Preparação de metil-4-0-(2,3,6-tri-0-benzil-4-desoxi-4-acetiloximetil-^ -D-glucopiranosil)-2,3,6-tri-0-benzil- -D-glucopiranósido

Adicionou-se uma solução etérea de perclorato de prata (0,08 M; 9,58 ml; 7,67 mmoles), sob agitação, à tempe-

ratura de -30°C, a uma solução de metil-2,3,6-tri-0-benzil-Qid-D-glucopiranósido (2,592 g; 5,59 mmoles) de cloreto de

2,3,6-tri-0-benzil-1,4-didesoxi-4-acetiloximetil-D-glucopiranosilo (3,661 g; 6,98 mmoles) em éter (20 ml). Agitou-se a mistura durante 15 minutos à temperatura de -30°C, tendo precipitado o cloreto de prata. Filtrou-se a mistura através de uma almofada de celite, lavou-se as substâncias sólidas com éter, filtrou-se e concentrou-se sob pressão reduzida. Dissolveu-se o resíduo em cloreto de metileno e lavou-se a camada orgânica, sucessivamente, com uma solução aquosa de tiossulfato de sódio e água. Secou-se a camada orgânica sobre sulfato de sódio, filtrou-se e concentrou-se sob pressão reduzida para se obter uma espuma. A cromatografia rápida sobre gel de sílica, utilizando como eluente uma mistura gradiente de hexano e acetato de etilo, deu metil-4-0-(2,3,6-tri-0-benzil-4-desoxi-4-acetiloximetil-^<-D-glucopiranosil)-2,3,6-tri-0-benzil- ^.-D -glucopiranósido (3,19 gj 60$) com o aspecto de uma espuma.

Exemplo 60

Preparação de metil-4-0-(2,3,6-tri-0-benzil-4-desoxi-4-hidroximetil-^Ç-D-glucopiranosil)-2,3,6-tri-O-benzil-Q<( -D-glucopiranósido

Dissolveu-se metil-4-0-(2,3,6-tri-0-benzil-4-desoxi-4-hidroximetil-'\-D-glucopiranosil)-2,3,6-tri-0-benzil-\-D-glucopiranósido (3,19 gj 3,35 mmoles) em tolueno quente (20 ml) e adicionou-se metanol (80 ml), acrescentando-se depois algumas gotas de uma solução metanólica de hidróxido de sódio 1 M. Agitou-se a mistura à temperatura ambiente durante

2»

-522 horas. Neutralizou-se a mistura reaccional com resina Amberlite IR 120 (H⁺), filtrou-se e concentrou-se sob pressão reduzida para se obter metil-4-0-(2,3,6-tri-O-benzil-4-desoxi-4-hidroximetil- <\.-D -glucopiranosil)-2,3,6-tri-O-benzil-^-D -glucopiranósido (3,049 g; 100%) sob a forma de um sólido amorfo.

Exemplo 61

Preparação de metil-4-0-(2,3,6-tri-O-benzil-4-desoxi-4-trifluorornetilsulfoniloximetil- -gluoopiranosil)-2,3,6-tri-O-benzil-^-D-glucopiranósido

A uma solução de piridina seca (0,6 ml) em cloreto de metileno seco (50 ml), arrefecida até à temperatura de -15°C, adicionou-se anidrido trif luor.ometano-sulf ónico (1,12 ml). Agitou-se a mistura durante 15 minutos à temperatura de -10°C e depois adicionou-se uma solução de metil-4-0-(2,3,6tni-0-benzil-4-desoxi-^,-^,—hidroximetil-^y-D-glucopiranosil)-2 ,3,6-tri-0-benzil-^-D-glucopiranósido (3,049 g; 3,35 mmoles) em cloreto de metileno (15 ml). Lavou-se a mistura com água. Secou-se a camada orgânica sobre sulfato de sódio, filtrou-se e concentrou-se sob pressão reduzida para se obter um óleo (3,42 g; 98#) que era o triflato pretendido metil-4-0-(2,3,6-tri-0-benzil-4-desoxi-4-trifluorometilsulfoniloximetil-0^-D-glucopiranosil)-2,3,6-tri-0-benzil-^ -D-glucopiranósido .

Exemplo 62

Preparação de 2,3,5-tni-0-benzil-1,4-didesoxi-N- £[2,3,6-tri-0-benzil-4-desoxi-1-(2,3,6-tri-Q-

-benzil-4-0-b< -D-glucopiranosil)-4-^6-D-gluoopiranosil]-metil j-1,4-imino-D-arabinitol

Durante 48 horas submeteu-se a refluxo, sob atmosfera de azoto, uma solução de metil-4-0-(2,3,6-tri-0-benzil-4-desoxi-4-trifluorometilsulfoniloximetil- -D-glucopiranosil) -2 , 3 , 6-tri-0-benzil- M-D -glucopiranósido (1,56 g; 1,50 mmoles) e 2,3,5-tri-0-benzil-1,4-didesoxi-1,4-imino-D-arabinitol (0,605 g; 1,50 mmole) em clorofórmio (50 ml) isento de etanol. Diluíu-se a mistura em cloreto de metileno e lavou-se, sucessivamente, com uma solução saturada de cloreto de sódio. Secou-se a camada orgânica sobre sulafto de sódio, filtrou-se e ooncentrou-se sob pressão reduzida para se obter uma espuma. A cromatografia rápida sobre gel de sílica, utilizando como eluente uma mistura gradiente de hexano e acetato de etilo, deu a amina pretendida 2,3,5-tri-0-benzil-1,4-didesoxi-N-^ [2,3,6-tri-O-benzil-4-desoxi-1-(2,3,6-tri-0-benzil-1-0-metil-4-0-^-D-glucopiranosil)-4-^-D-glucopiranosil]-metil J-1,4-imino-D-arabinitol (0,922 g; 48$) sob a forma de um sólido amorfo.

Exemplo 63

Preparação de 1,4-didesoxi-N-f [4-desoxi-1-(1-0-metil-4-0-^í -D-glucopiranosil)-4-^-D-glucopiranosil]-metil } -1,4-imino-D-arabinitol

Dissolveu-se 2,3,5-tri-0-benzil-1,4-didesoxi-N[2,3,6-tri-0-benzil-4-desoxi-1-(2,3,6-tri-0-benzil-1-0-metil-4-0- ^-D -glucopiranosil)-4-⁽X-D-glucopiranosil]-metil ?-1,4-imino-D-arabinitol (0,90 g; 0,702 mmole) em ácido

-5?4 acético (40 ml). Adicionou-se paládio a 10% sobre carvão (0,6 g). Hidrogenou-se a mistura durante 4 dias à pressão de 3 atmosferas. Removeu-se o catalisador por filtração e evaporou-se os dissolventes sob pressão reduzida. Dissolveu-se o resíduo em água, fez-se passar através de uma coluna de Amberlyst A26 OH . Evaporou-se a água sob pressão reduzida e submeteu-se a cromatografia rápida sobre gel de sílica, utilizando como eluente uma mistura gradiente de clorofórmio, metanol e água, para se obter a amina pretendida 1,4-didesoxi-N--^ [4-desoxi-1-(1-0-metil-4-0-^ -D-glucopiranosil)-4-^c\(-D-gluoopiranosil]-metil J-1,4-imino-D-arabinitol (0,224 g; 74%) sob a forma de um sólido amorfo.

Exemplo 64

Preparação de metil-6-0-(2,3,6-tri-0-benzil-4-desoxi

-4-acetiloximetil-^t\-D-glucopiranosil)-2,3,4-trí-0-benzil- ^-D -glucopiranósido

À temperatura de -30°C e sob agitação adicionou-se uma solução etérea de perclorato de prata (0,08 M; 76,7 ml; 6,13 mmoles) a uma solução de metil-2,3,4-tri-O-benzil-Q/-D-glucopiranósido (2,074 g; 4,472 mmoles), cloreto de 2,3,6-tri-0-benzil-1,4-dldesoxi-4-acetiloximetil-D-glucopiranosilo (6,13 mmoles) e 2,4,6-trimetilpiridina (0,80 ml; 6,13 mmoles) em éter (20 ml). Agitou-se a mistura durante 15 minutos à temperatura de -30°C tendo-se observado a precipitação de cloreto de prata. Filtrou-se a mistura através de uma almofada de celite, lavou-se as substâncias sólidas com éter, filtrou-se e concentrou-se sob pressão reduzida. Dissolveu-se o resíduo

-55.<*·’* if em cloreto de .metileno e lavou-se a camada orgânica, sucessivamente, com uma solução aquosa de tiossulfato de sódio e com água. Secou-se a camada orgânica sobre sulfato de sódio, filtrou-se e eoncentrou-se sob pressão reduzida para se obter uma espuma. A cromatografia rápida sobre gel de sílica, utilizando como eluente uma mistura gradiente de hexano e acetato de etilo deu metil-6-0-(2,3,6-tri-0-benzil-4-desoxi-4-acetiloximetil-CSÓ -D-glucopiranosil)-2,3, U-tri-O-benzil-^ -D-glucopiranósido (2,469 g; 58%) com o aspecto de uma espuma.

Exemplo 65

Preparação de metil-6-0-(2,3,6-tri-0-benzil-4-desosi-4-hidroximetil-Q< -gluoopiranosil)-2,3,4-tri-0-benzil- -glucopiranósido

Dissolveu-se metil-6-0-(2,3,6-tri-0-benzil-4-desoxi-4-acetiloximetil-C\ó-D-glucopiranosil) -2,3,4-tri-0-benzil-Q(-D-glueopiranósido (2,469 g; 2,593 mmoles) em tolueno quente (20 ml) e adicionou-se metanol (80 ml), acrescentando-se depois algumas gotas de uma solução metanólica de metóxido de sódio 1 M. Agitou-se a mistura à temperatura ambiente durante 2 horas. Neutralizou-se a mistura reaccional com resina Amberlite IR 120 (H⁺) , filtrou-se e eoncentrou-se sob pressão para se obter metil-6-0-(2,3,6-tri-0-benzil-4-desoxi-4-hidroximetil-^c<-D-glucopiranosil) - 2,3,4-tri-0-benzil-^ó.-D-glucopiranósido (2,36g; 100%) sob a forma de um sólido amorfo.

Exemplo 66

Preparação de metil-6-0-(2,3,6-tri-0-benzil-4-desoxi-4-trifluorometilsulf oniloximetil-Q^-D-glueopiranosil-96-2,3,4-tri-O-benzil- Qí-p -glucopiranósido

A uma solução de piridina seca (0,46 ml) em cloreto de metileno seco (40 ml), arrefecida até à temperatura de -15°C, adicionou-se anidrido trifluorometano-sulfónico (0,86 ml). Agitou-se a mistura durante 15 minutos à temperatura de- -10°C e depois adicionou-se metil-6-0-(2,3,6-tri-0-benzil-4-desoxi~4-hidroximetil- Gò-D-glucopiranosil)-2,3,4-tri-0-benzil-\-D-glucopiranósido (2,36 g; 2,593 mmoles) em cloreto de metileno (10 ml) Agitou-se a mistura durante 1,5 horas à temperatura de -10°C. Lavou-se a mistura reaccional com água. Secou-se a camada orgânica sobre sulfato de sódio, filtrou-se e concentrou-se sob pressão reduzida para se obter um óleo (2,65 g; 98?), que era o triflato pretendido metil-6-0-(2,3,6-tri-0-benzil-4-desoxi-4-trifluorometilsulfoniloximetil-^-D-glucopiranosil)-2,3,4-tri-O-benzil- -D-glucopiranósido.

Exemplo 67

Preparação de 2,3,5-tri-0-benzil-1,4-didesoxi-N- {-[2,3,6-tri-O-benzil-4-1-(2,3,4-tri-O-benzil-1-O-metil-6-Ό- <k-p -glucopiranosil)-4- X-D -glucopiranosil]-metil } -1,4-imino-D-arabinitol

Durante 48 horas submeteu-se a refluxo, sob atmosfera de azoto, uma solução de metil-6-O-(2,3,6-tri-O-benzil-4-desoxi-4-trifluorometilsulfoniloximetil-Q^ -D-glucopiranósido (1,465 g; 1,40 mmole) e 2,3,5-tri-0-benzil-1,4-didesoxi-1,4-imino-D-arabinitol (0,564 g; 1,40 mmole) em clorofórmio (50 ml) isento de etanol. Diluíu-se a mistura com cloreto de metileno e

-57lavou-se, sucessivamente, com uma solução aquosa saturada de hidrogeno carbonato de sódio e com uma solução saturada de cloreto de sódio. Secou-se a camada orgânica sobre sulfato de sódio, filtrou-se e concentrou-se sob pressão reduzida para se obter uma espuma. A cromatografia rápida sobre gel de sílica, utlizando”como eluente uma mistura gradiente de hexano e acetato de etilo, deu a amina pretendida 2,3,5-tri-0-benzil-1, 4-didesoxi-N- £ [2,3,6-tri-0-benzil-4-desoxi-1-(2,3,4-tri-0-benzil-1-0-metil-6-0-^c\t.-D-glucopiranosil)-4-^ó-D-glucopiranosil]-metil -1 ,4-imino-D-arabinitol (1,2 g; 67$) sob a forma de um sólido amorfo.

Exemplo 68

Preparação de 1,4-didesoxi-N-{ [4-desoxi-1-(1-0-metil-6-0-Q/-D-glucopiranosil) - 4-^<X.-D-glucopiranosil]-metil -1,4-imino-D-arabinitol

Dissolveu-se 2,3,5-tri-0-benzil-1,4-didesoxi-N- £ (2,3,6-tri-0-benzil-4-desoxi-1-(2,3,4-tri-0-benzil-1-0-metil-ó-O-^é-D-glucopiranosil) -4-0/,-D-glucopiranosil ]-metil J-1,4-imino-D-arabinitol (1,1 g; 0,859 mmole) em ácido acético (30 ml). Adicionou-se paládio a 10$ sobre carvão (0,6 g). Hidrogenou-se a mistura durante 4 dias à pressão de 3 atmosferas. Removeu-se o catalisador por filtração e evaporou-se os dissolventes sob pressão reduzida. Dissolveu-se o resíduo em água e fez-se passar através de uma coluna de Amberlyst A26 OH^-. Evaporou-se a água sob pressão reduzida e submeteu-se a cromatografia rápida sobre gel de sílica, utilizando como eluente uma mistura gradiente de clorofórmio, metanol e água, para se obter a amina pretendida 1,4-didesoxi-N-[4-desoxi-1-(1-0-metil-6-0-^( -D-glucopiranosil)-4-^-D-glucopiranosil]-metil J-1,4-imino-D-arabinitol (O,3O3/g; 75$) sob a forma de um sólido amorfo.

Exemplo 69

Preparação de 1,5-didesoxi-1,5-(6-desoxi-6-D-glucopiranosil)-imino-D-arabinitol

Dissolveu-se 1,4-didesoxi-1,4-(6-desoxi-1-0-metil-6-^/-D-glucopiranosil)-imino-D-arabinitol (0,2 g; 0,647 mmole) numa mistura a 1:1 de água e ácido trifluoroacético (10 ml). Agitou-se a mistura durante 24 horas à temperatura de 0°C. Evaporou-se os dissolventes sob pressão reduzida para se obter uma espuma. A cromatografia sobre Amberlyst A26 na forma OH proporcionou a amina pretendida 1,5-didesoxi-1,5-(6-desoxi-6-D-glucopiranosil)-imino-D-arabinitol (0,181 g; 95$).

Exemplo 70

Preparação de metil-2,3,4-tri-0-benzil-6-0-trifluorometilsulfonil- ^-D-glucopiranósido

A uma solução de piridina seca (0,456 ml) em cloreto de metileno (20 ml), arrefecida até à temperatura de -15°C, adicionou-se anidrido trifluorometano-sulfónico (0,864 ml). Agitou-se a mistura durante 15 minutos à temperatura de -10°C e depois adieionou-se uma solução de metil-2,3,4-tri-0-benzil- ^-D-glucopiranósido(1,2 g; 2,58 mmoles) em cloreto de metileno (30 ml) [P. Kovac, J. AlfOldi e M. Kosik, Chem. Zvesti 28 (1974) 820 ]. Agitou-se a mistura durante 1,5 horas à tem-59peratura de -10°C. Lavou-se a mistura reaccional com água. Secou-se a camada orgânica sobre sulfato de sódio, filtrou-se e concentrou-se sob pressão reduzida para se obter um óleo. A cromatografia rápida sobre gel de sílica, utilizando como eluente uma mistura a 7:2 de hexano e acetato de etilo, deu o composto pretendido metil-2,3,4-tri-O-benzil-6-O-trifluorometilsulfonil- p-D-glucopiranósido (1, 408 g; 89$) sob a forma de um óleo, o qual cristalizou sob refrigeração.

Exemplo 71'

Preparação de 2,3,5-tri-0-benzil-1,4-didesoxi-1,4--[(2,3,4-tri-0-benzil-6-desoxi-1-0-metil-6--D-glucopiranosil)-imino]-D-arabinitol

Durante 48 horas submeteu-se a refluxo, sob atmosfera de azoto, uma solução de metil-2,3,4-tri-O-benzil-6-O-trifluorometilsulfonil- P-D-glucopiranósido (0,7 g; 1,17 mmole) e 2,3,5-tri-0-benzil-1,4-didesoxi-1,4-imino-D-arabinitol (0,395 g; 1 mmole) em clorofórmio (20 ml) isento de etanol. Diluíu-se a mistura com cloreto de metileno e lavou-se, sucessivamente, com uma solução aquosa saturada de hidrogeno carbonato de sódio e com uma solução saturada de cloreto de sódio. Secou-se a camada orgânica sobre sulfato de sódio, filtrou-se e concentrou-se sob pressão reduzida para se obter um óleo,

A cromatografia rápida sobre gel de sílica, utilizando como eluente uma mistura a 9:10 de tolueno e acetato de etilo, deu o composto pretendido 2,3,5-tri-0-benzil-1,4-didesoxi-1,4[(2,3,4-tri-0-benzil-6-desoxi-1-0-metil-6--D-glucopiranosil)-imino]-D-arabinitol com o aspecto de uma espuma (0,398 g; 40$) —6 0,7“

Exemplo 72

Preparagão de 1,4-didesoxi-1_; 4-Ç (6-desoxi-1-0-metil-6- ^-D-glucopiranosil)-imino]-D-arabinitol

Dissolveu-se 2,3,5-tri-0-benzil-1,4-didesoxi-1,4-[(2,3,4-tri-0-benzil-6-desoxi-1-0-metil-6- ^-D-glucopiranosil)-imino]-D-arabinitol (0,398 g; 0,469 mmole) numa mistura a 1:1 de metanol e ácido acético (40 ml) e adicionou-se paládio a 10% sobre carvão (70 mg). Agitou-se a mistura sob atmosfera de hidrogénio , à pressão de 3 bar durante 3 dias. Filtrou-se o catalisador e evaporou-se os dissolventes sob pressão reduzida. Dissolveu-se o resíduo em água e fez-se passar através de uma coluna de Amberlyst A26 OH^-. A evaporação da água sob pressão reduzida deu um sólido amorfo. A cromatografia rápida sobre gel de sílica utilizando como eluente uma mistura a 50=50:4 de clorofórmio, metanol e água, deu 1,4-didesoxi-1,4-[(6-desoxi-1-0-metil-6- j^-D-glucopiranosil)-imino]-D-arabinitol sob a forma de um sólido amorfo (0,39 g; 27%)·

As enzimas que catalisam a hidrólise dos hidratos de carbono complexos, por exemplo, as -glicosidades, covertem os hidratos de carbono não absorvíveis em açúcares absorvíveis. A rápida acção destas enzimas, particularmente após a ingestão de níveis elevados de hidratos de carbono, origina níveis elevados agudos de glucose no sangue, a qual, nos casos dos diabéticos, tem efeitos indesejáveis. Deste modo, tem havido um longo trabalho de pesquisa para descobrir compostos que contrariem a hiperglicémia provocada por um regime dietético inadequado.

De modo semelhante, no caso da obesidade, o controlo dos elevados níveis de glucose no sangue, com a sua subsequente conversão em gordura, provovada pela catálise dos hidratos de carbono, tem inspirado a pesquisa de compostos que contrariem os problemas associados com os regimes dietéticos inadequados.

Os compostos da presente invenção de fórmula geral (I) são poderosos e duradouros inibidores da -glucosidase, conforme se verificou utilizando métodos laboratoriais normalizados. Nesses métodos, determina-se os níveis de glucose no soro. Como consequência da sua actividade como inibidores da -glucosidade, esses compostos podem ser utilizados para o tratamento de doenças provocadas pela sub-utilização e/ou sobreprodução de glucose no soro, sem que haja afectação grave da velocidade de transporte através das membranas celulares Sendo assim, os compostos da presente invenção são úteis para o tratamento de diabetes e de obesidade.

De acordo com a prática da presente invenção, considera-se quantidade eficaz de um composto da presnete invenção a quantidade necessária para reduzir a quantidade de glucose do soro (relativamente a um controlo) após a ingestão de hidratos de carbono convertíveis em glucose absorvível. A dosagem específica para o tratamento de qualquer paciente específico que sofra de qualquer daquelas doenças variará de acordo com factores tais como o tamanho, tipo e idade do paciente e

também com a gravidade da doença, sendo todos esses factores normalmente familiares e deixados à responsabilidade 'do especialista que diagnostica e trata o paciente. De um modo geral, esses compostos são administrados oralmente numa dose compreendida entre 0,2 e 20 miligramas por quilograma de peso corporal (MPK) sendo preferida uma dose compreendida entre 0,5 e 5 MPK. De preferência, os compostos devem ser administrados por via oral às refeições, em doses unitárias simples ou múltiplas contendo entre 25 mg e 250 mg. Como é evidente, quando se refere o tratamento da obesidade, esse termo engloba não só o tratamento da doença, mas engloba também as medidas para evitar a obesidade mediante administração contínua de doses adequadas para a manutenção do peso desejado para o paciente.

Descobriu-se também que os compostos da presente invenção de fórmula geral (I) exercem um efeito inibidor sobre as enzimas glicosidase que são essenciais para a elaboração da estrutura final das cadeias secundárias oligossacarídicas das glicoproteínas, particularmente no caso da glicoproteína HIV (gp 120). É possível utilizar técnicas de ensaio adequadas, por exemplo, a formação sincicial, o ensaio da transcriptase inversa, os ensaios de imunofluorescência e a microscopia electiva election” para se avaliar os efeitos do desenvolvimento virai do HIV e para a determinação dos regimes de dosagem. Os efeitos antivirais podem ser confirmados por imunofluorescência com soro no caso de pacientes infectados por vírus. No tratamento de estados de doença relacionados

4'

-63com HIV, tal como sucede com outros estados de doença relacionados com a glicoproteína retroviral, ao contrário do tratamento de diabetes e da obesidade, os compostos da presente invenção podem ser administrados por meios parenterais; nesse caso, as doses específicas são também as do intervalo de tratamento referido para a diabetes e para a obesidade.

Para a aplicação final dos compostos da presente invenção, estes são, de preferência, incorporados em composições farmacêuticas constituídas por um veículo farmacêutico misturado com um composto da presente invenção. A designação veículo farmacêutico refere-se a excipientes farmacêuticos conhecidos utilizáveis para a formulação de compostos com actividade farmacêutica, para administração interna aos animais e que são essencialmente não tóxicos e não sensibilizadores nas condições de utilização. Essas composições podem ser preparadas mediante técnicas conhecidas para a preparação de comprimidos, cápsulas, elixires, xaropes, emulsões, dispersões, pós molháveis e efervescentes e podem conter excipientes adequados conhecidos como sendo úteis para a preparação do tipo particular de composição desejado. As técnicas de formulação e os veículos farmacêuticos adequados são referidos em textos consagrados tais como Remington^ Pharmaceutical Sciences, Easton, Pa, Mack Publishing Company.

Claims (18)

1. REIV. INDICAÇÕES

   1.- Processo para a preparaçao õe'derivados de 1,4-didesoxi-i, 4-ixaino-D-arabinitol de. fórmula geral

   I na qual n representa o número zero, um ou dois e R re presenta um radical glicosilo ou glicosilo eterificado ou acilado contendo entre 1 e 3 unidades de hexose ou pentose, comportando o referido radical glicosilo eterificado ou acilado o radical éter ou'acilo no gru po hidroxilo localizado no ãtomo de carbono anomêrico, dos seus isómeros Õpticos e geométricos e dos seus sais de adição de ãcido aceitáveis sob o ponto de vista farmacêutico, caracterizado pelo facto de se condensar um composto de formula oeral

   com um composto de formula gerai R' CCH~) X na qual X representa um halogeneto ou triflato, n r e— presenta o número zero, um ou dois, R' representa um radical glicosilo hidroxi-protegido ou um radical cli > _

   cosilo eterificado ou acetilado contendo entre 1 e 3 unidades de hexose ou pentose, comportando o referido radical glicosilo eterificado ou acilado o radicai éter ou acilo no grupo hidroxilo localizado no ãtomo de carbono anomêrico, para proporcionar um composto de fórmula geral

   I (CH₂)_nR o qual é desprotegido por técnicas dê desprotecçso padrão, após o que se segue uma conversão opcional em um seu sal farma ceuticamente aceitável.
2. 2.- Processo de acordo com a reivindicação 1, para a preparação de compostos de formula gerai I na qual R representa um radical glucosilo, galactosilo, fucosilo, frutosiio, manosilo, ribosilo, arabinosilo, xilosilo, aloliso, altrosilo, gulosilo, idosilo, talosilo, lixosilo, ísomaltosilo, tre-halosilo silo, caracterizado pelo facto de se utilizarem compostos inicieis correspondentemente substituídos.
3. 3.Processo de acordo com a reivindicacao

   1, oara a pre oaracao de compostos de fórmula geral Z na qual R representa um radical 6-glucosilo, 4-glucosilo utosilo

   6-frutosilo

   6-maitosiio, 4-maitosilo acterizado ceio facto de o-isomaltosiio ou 4-Ísomaltosilo, ca se utilizarem compostos iniciais corS'^r

   -67·* respondentenente substituídos.
4. 4. - Processo de acordo con a reivindicação 1, para a pre paração de 1,4-didesoxi-l, 4-/“ (ô-desoxi-l-O-metil-S-^-D-glucopiranosil)-imino_/-D-arabinitol, caracterizado pelo facto de se utilizarem compostos iniciais correspondentemente· subs tituídos.
5. 5. - Processo de acordo com a reivindicação 1, para a preparação de 1,4-didesoxi-l,4-/7 (6, 7-didesoxi-l-0-metil-7-D-gluco-heptopiranosil)imino_7~D-arabinitol, caracterizado pelo facto de se utilizarem compostos iniciais correspondentemente substituídos.
6. 6. - Processo de acordo com a reivindicação 1, para a preparação de 1,4-didesoxi-l,4-/7 (l-desoxi-2-0-metil--D-frutofuranosil·)-imino_7-D-arabinitoI, caracterizado pelo facto de se utilizarem compostos iniciais correspondentemente substituídos .
7. 7. - Processa de acordo com a reivindicação 1, para a pre paraçao de 1,4-didesoxi-l,4-/7(4-desoxi-l-0-metil-4- 0/-D-çluco piranosil)-iminoJZ-D-arabinitol, caracterizado pelo facto de se utilizarem compostos iniciais corresocndentemente substituídos.
8. 8.- Processo de acordo com a reivindicação 1, para a pre paração de 1,4-didesoxi-N-/^- 6-desoxi-l-(l-0-metil-6-0--D-glu copiranosii) - ^<'-í-D-çlucooiranosil_y-l, 4-imino-D-arabinitol, caraczerizado pelo facto de se utilizarem compostos iniciais cor respondentemente substituídos.
9. 9.- Processo de acordo com a reivindicação 1, para a pre paração de 1,4-didesoxi-N-/? 6,7-didesoxi-l- (l-0-metil-6-0-D-glucooiranosil) -^.-D-gluco-heptopiranosil 4-ímino-D-arabinitol, caracterizado pelo facto de se utilizarem compostos iniciais correspondentemente substituídos.
10. 10,- Processo de acordo com a reivindicação 1, para a pre paração de 1,4-didesoxi-l,4-/Í (4-desoxi-l-0-metil-4-Q^-D-glucopiranosil) -metilimino__7-D-arabinitol, caracterizado pelo facto de se utilizarem compostos iniciais correspondentemente substituídos .
11. 11.- Processo de acordo com a reivindicação 1, para a preparação de 1,4-didesoxi-N-f/4-desoxi-l-(l-O-metil-4-O-^-D-giucopiranosil) -^/-D-glucopiranosil_/-l, 4-imino-D-arabinitol, caracterizado pelo facto de se utilizarem compostos iniciais corresoondentemente substituídos.
12. 12,- Processo de acordo com a reivindicação 1, para a pre /-6 9f paraçao de 1,4-didesoxi-l,4-3 ²“ (1-0-metil-l-^-D-arabinofu7 ranosil) -etil_/-immo j--D-arabinitol, caracterizado pelo facto de se utilizarem compostos iniciais correspondentemente substituídos .
13. 13.- Processo de acordo com a reivindicação 1, para a preparação de 1,4-didesoxi-N~_/’4-desoxi-l-(I-0-metil-6-0-^/.-D-glucopiranosil) - -D-glucopiranosil_7-l, 4-imino-D-arabinitol, caracterizado peio facto de se utilizarem compostos iniciais cor respondentemente substituídos.
14. 14.- Processo de acordo com a reivindicacao 1, cara a preparação de 1,4-didesoxi-N-^ 4-desoxi-l-(l-O-metil-4-O-^-D-glucopiranosil) -4- Q<_ -D-glucopiranosil_y~metil^ -1,4-imino-D-arabinitol, caracterizado pelo facto de se utilizarem compostos iniciais corresnondentemente substituídos.
15. 15.- Processo de acordo com a reivindicação 1, para a preparação de 1,4-didesoxi-N-£ / 4-desoxi-l-(l-0-metil-6-0-^-D-glucopiranosil) -4- -D-glucopiranosiI_7-metil -1,4-imino-D-arabinitol, caracterizado pelo facto de se utilizarem compcs_ tos iniciais correspondentemente substituídos.
16. 16.— Processo de acordo com a reivindicação 1, para a preparação de 1,4-didesoxi-l, 4-(6-dasoxi-S-D-giucopiranosii)-70-imino-D-arabinitol, caracterizado pelo facto de se utilizarem compostos iniciais correspondentemente substituídos.
17. 17.- Processo de acordo com a reivindicação 1, para a preparação de 1,4-didesoxi-l,4-(6-desoxi-l-0-D-metil-6- p>-0-glucopiranosil)-imino-D-arabinitol, caracterizado pelo facto de se utilizarem compostos iniciais correspondentemente substituídos.
18. 18.- Processo para a preparação.de uma composição farmacêutica útil para inibir enzimas de Ç\C-glucosidase, para tratar diabetes e para controlar a obesidade reduzindo a quantidade de glucose sistematicamente absorvível a seguir ã ingestão de subs tâncias alimentares susceptíveis de ser enzimaticamente converti das em glucose, caracterizado- pelo facto de se incorporar como ingrediente activo uma quantidade efectiva de um composto de for mula geral I quando preparado pelo processo de acordo com a reivindicação 1. >

    Lisboa, 9 de Outubro de 1990