NO174203B - Analogifremgangsm}te for fremstilling av terapeutisk aktive alfa-glucosidaseinhibitorer - Google Patents

Description

Foreliggende oppfinnelse angår fremstilling av nye 1,4-dideoxy-l,4-imino-D-arabinitolderivater for anvendelse ved behandling av diabetes.

Nærmere bestemt angår oppfinnelsen fremstilling av N-glycosylderivater av 1,4-dideoxy-l,4-imino-D-arabinitol, med a-glucosidaseinhiberende egenskaper for anvendelse ved behandling av diabetes, fedme og bisykommer som er forbundet med retrovirus, i særdeleshet HIV-virus, som er rapportert å for-årsake ervervet immunmangelsyndrom (AIDS).

Oppfinnelsen angår således en analogifremgangsmåte for fremstilling av terapeutisk aktive forbindelser av formelen

optiske og geometriske isomerer derav og farmasøytisk akseptable salter derav, hvori n er 0, 1 eller 2, R er et glycosyl-eller forethret med en lavere alkylgruppe eller acylert med en

lavere alkanoylgruppe glycosylradikal inneholdende fra 1 til 3 hexose- eller pentoseenheter, hvilket forethret eller acylert glycosylradikal bærer ether- eller acylradikalet ved hydroxyl-delen lokalisert på det anomere carbonatom.

Særlig foretrukne forbindelser er 1,4-dideoxy-l,4-[(6-deoxy-l-0-methyl-6-a-D-glucopyranosyl)imino]-D-arabinitol, 1,4-dideoxy-l,4-[(6,7-dideoxy-l-0-methyl-7-a-D-glucoheptopyranosyl)imino]-D-arabinitol, 1,4-dideoxy-l,4-(6-deoxy-l-O-D-methyl-6-p-0-glucopyranosyl)imino-D-arabinitol, 1,4-dideoxy-1,4-[(6,7-dideoxy-l-0-methyl-7-a-D-glucoheptopyranosyl)imino]-D-arabinitol, 1,4-dideoxy-l,5-(6-deoxy-6-D-glucopyranosyl)-imino-D-arabinitol.

Syreaddisjonssalter er de saltformer med slike uorgan-iske syrer som f.eks. saltsyre, hydrobromsyre, svovelsyre, fosforsyre og lignende syrer; med organiske carboxylsyrer slik som f.eks. eddiksyre, propionsyre, glycolsyre, melkesyre, pyruvsyre, malonsyre, ravsyre, fumarsyre, eplesyre, vinsyre, sitronsyre, ascorbinsyre, maleinsyre, hydroxymaleinsyre og dihydroxymaleinsyre, benzosyre, 2-acetoxybenzosyre, mandelsyre og lignende syrer; og med organiske sulfonsyrer slik som methansulfonsyre og p-toluensulfonsyre.

Generelt kan mono-, di- eller trisakkariddelen (dvs. glycolsyldelen definert ved "R") være bundet direkte eller gjennom en (CH2)-alkylenbro til nitrogenatomet av 1,4-dideoxy-1,4-imino-D-arabinitoldelen gjennom enten et exocyklisk eller ringcarbonatom av pentose- eller hexoseringen, og derved danne et utall stillingsisomerer for hver individuell glycosyldel.

Også like eller ulike pentose- eller hexosedeler kan være

kjedet til hverandre gjennom en glycosidisk oxygenbro hvori brooxygenatomet er bundet til et exocyklisk og/eller endo-cyklisk carbonatom av pentose- eller hexosedelen av hvilke glycosylradikalet er omfattet, og igjen stillingsisomerer, og de optiske og geometriske isomere former derav, hvor alle tas i betraktning som tilhørende oppfinnelsesrammen.

Eksempler på glycosylradikaler som tas i betraktning

ved "R"-betegnelsen i formel I, er slike monosakkarider som glucosyl, galactosyl, fucosyl, fructosyl, mannosyl, ribosyl, arabinosyl, xylosyl, allosyl, altrosyl, gulosyl, idosyl, talosyl og lyxo-syl, slike disakkarider som isomaltosyl, trehalosyl, ot- og (3-cellobiosyl, maltosyl, og slike trisakkarider som maltotrio-

syl og cellotriosyl. Foretrukne glycosylradikaler er 6- eller 4-glucosyl, 1- eller 6-fructosyl, 6- eller 4-maltosyl og 6-eller 4-isomaltosyl. Etherderivater er de derivater hvori hydroxylgruppen bundet til det anomere carbonatom er forethret, og innbefatter C^.g-alkylderivatene, fortrinnsvis methyl, og aromatiske derivater slik som fenyl og benzyl. Acylderivater slik som de som dannes ved det anomere carbonatom ved omsetning av det frie hydroxylradikal med en alkan-syre eller benzosyre, tas også i betraktning selv om slike acylerte deler lett kan fjernes fra glycosylradikalet. Foretrukne acylradikaler er de som dannes med eddiksyre eller benzosyre.

Analogifremgangsmåten ifølge oppfinnelsen er kjenne-tegnet ved at en forbindelse av formelen

kondenseres med en forbindelse av formelen hvori X er et halogenid eller triflat, n er 0, 1 eller 2, R' er et hydroxybeskyttet glycosyl- eller forethret eller acetylert glycosylradikal inneholdende fra 1 til 3 hexose-eller pentoseenheter, hvilket forethret eller acetylert glycosylradikal bærer ether- eller acylradikalet ved hydroxyl-delen lokalisert på det anomere carbonatom, under dannelse av en forbindelse av formelen

hvilken forbindelse avbeskyttes ved standard avbeskyttelses-teknikker, etterfulgt, om ønsket, av omdannelse til et farma-søytisk akseptabelt salt derav.

Forbindelsene fremstilles ved metoder analogt kjent innen faget. Det foretrekkes å kondensere en egnet hydroxybeskyttet 1,4-dideoxy-l,4-imino-D-arabinitol (2) med et egnet hydroxybeskyttet glycosyltriflat eller halogenid, fortrinnsvis jodidet. I de tilfeller hvori 1,4-dideoxy-l,4-imino-D-arabinitol kobles med et triflat, bevirkes reaksjonen ved tilbake-løpskoking av en blanding av ekvimolare mengder av reaktantene i et alkohol- og vannfritt løsningsmiddel, fortrinnsvis et klorert løsningsmiddel slik som kloroform, eller en inert atmosfære, fortrinnsivs under nitrogen eller argon, i fra 1 til 3 dager inntil reaksjonen er fullført. Ved å følge standardprosedyrer for isolering og rensing av reaksjons-produktene fjernes de beskyttende grupper under dannelse av det ønskede produkt. Debenzylering bevirkes lett med standardteknikker slik som katalytisk hydrogenering i et egnet løs-ningsmiddel, f.eks. ethanol, under anvendelse av en katalysa-tor slik som palladium eller carbon, eller ved overførings-hydrogenering under anvendelse av cyklohexen og methanol. I de tilfeller hvori estere anvendes (partielle eller fullstend-ige) som de hydroxybeskyttende grupper, foretrekkes det først å fjerne estergruppen ved behandling med et alkalialkoxyd, f.eks. natriummethoxyd i methanol for å hydrolysere esterne og deretter avbeskytte benzyletherne under anvendelse av de foregående hydrogeneringsprosedyrer.

I de tilfeller hvori et glycosylhalogenid er koblet med 1,4-dideoxy-l,4-imino-D-arabinitol, utføres reaksjonen ved oppvarming av de egnede hydroxybeskyttede reaktanter i tørt dimethylformamid (DMF) eller annet ekvivalent virkende løs-ningsmiddel, ved 60-90°C i fra 12 til 36 timer, hvilken oppvarming finner sted under anvendelse av overskuddsmengder av en svak base (K2CO3) eller en molekylsyre, fortrinnsvis under

anvendelse av overskytende molare mengder av halogenidet (opp til tre ganger) i forhold til aminet.

De foregående reaksjoner er illustrert ved følgende reaksjonsskjemaer A og B.

I dets mer generiske avbildning illustrerer følgende reaksjonsskjema fremgangsmåtene ved hvilke forbindelsene av formel I fremstilles:

hvori X er et halogenid eller et triflat og R' er en hydroxybeskyttet glycosyldel, Pg er en hydroxybeskyttende gruppe, fortrinnsvis benzyl, og n er 0, 1 eller 2.

Egnede hydroxybeskyttede glycosylhalogenider (6) og triflater (3) er de glycosylradikaler (som definert i formel I) hvori hydroxygruppene er blitt beskyttet med en ester-eller etherdel. Foretrukne estere er acetat- eller benzoatestrene selv om andre alkanoylestere, i særdeleshet de inneholdende opp til 6 carbonatomer, kan anvendes. Den foretrukne ether er benzyletheren. Slike beskyttede forbindelser kan fremstilles ved standardprosedyrer vel kjent og forstått innen faget; det valg og fremstilling av de hydroxybeskyttede mellomprodukter foretas i betraktning av nødvendigheten for selektiv avbe-skyttelse om nødvendig.

Glycosyltriflåtene (av hvilke forbindelse 3 er repres-entativ) fremstilles ved standardprosedyrer slik som ved omsetning av et hydroxybeskyttet glycosyl med trifluormethyl-sulfonatanhydrid i et klorert løsningsmiddel i fra 1 til 3 timer ved -78°C til -10°C.

Glycosidhalogenidene (fra hvilke forbindelse 6 er re-presentativ) kan fremstilles ved standardteknikker ved å starte med et egnet hydroxybeskyttet glycosid som bærer en fri hydroxygruppe. I disse tilfeller omdannes alkoholen til dets aldehyd ved en Swern-oxydasjon (behandling med oxalylklorid i dimethylsulfoxyd og triethylamin), etterfulgt av en in situ-omdannelse av aldehydet til et olefin ved en Wittig-reaksjon (som går gjennom et "ylid" fremstilt fra methyltrifenylfos-foniumbromid under anvendelse av en ekvivalent hver av n-butyllitium, kalium-t-butoxyd og t-butanol i tetrahydrofuran ved romtemperatur i fra 4 til 8 timer). Olefinet omdannes til en tilsvarende alkohol ved hydroborering (behandling med bor-dimethylsulfid under nitrogen, etterfulgt av oxydasjon med hydrogenperoxyd og natriumhydroxyd). Alkoholen mesyleres (behandling med mesylklorid i CH2C12 i overskudd av NEt3 ved -15°C til 0°C), og mesylatet omdannes til dets halogenid (ved behandling i ether ved 0°C med magnesiumhalogenid), fortrinnsvis under anvendelse av jodid.

De etterfølgende eksempler illustrerer fremgangsmåtene og teknikkene som er egnet for fremstilling av forbindelsene ifølge oppfinnelsen.

Eksempel 1

Fremstilling av methyl- L- xylofuranosid

25 g (0,167 mol) L-xylose ble omrørt i 480 ml methanol sammen med 11 g drieritt og 3,4 ml konsentrert svovelsyre i løpet av 5 timer ved romtemperatur. Blandingen ble filtrert fra og raskt behandlet med "Amberlyst A21" i methanol inntil nøytral pH. Blandingen ble brakt til tørrhet. Flashkromatografi på silicagel og eluering med en 95:5-blanding av ethylacetat og methanol ga methyl-L-xylofuranosid i en blanding av anomerer som en olje (17,8 g, 65%).

Eksempel 2

Fremstilling av methyl- 2, 3, 5- tri- O- benzyl- L- xylofuranosid

Til en suspensjon av natriumhydrid (14,3 g, 0,36 mol, 60% i mineralolje vasket tre ganger med pentan) i en blanding av 125 ml tetrahydrofuran og 250 ml dimethylformamid ble dråpevis tilsatt lander omrøring en blanding av 42,6 ml (0,36 mol) benzylbromid, 18,96 g (0,116 mol) methyl-L-xylof uranosid og 1,86 g tetra-n-butylammoniumjodid oppløst i 125 ml tetrahydrofuran og 250 ml dimethylformamid. Blandingen ble omrørt over natten ved romtemperatur. Mettet, vandig ammoniumsulfat ble tilsatt. Blandingen ble brakt til tørrhet under redusert trykk. Residuet ble tatt opp med vann og ekstrahert tre ganger med ethylacetat. Det organiske lag ble tørket over natriumsulfat, filtrert og konsentrert under redusert trykk under dannelse av en olje. Flashkromatografi på silicagel og eluering med en 8:2 blanding av cyclohexan og ethylacetat ga methyl-2,3,5-tri-O-benzyl-L-xylof uranosid i en blanding av anomerer som en olje (22,7 g, 45%).

Eksempel 3

Fremstilling av methyl- 2, 3, 5- tri- O- benzyl- L- xylofuranose

22,7 g (56,30 mmol) methyl-2,3,5-tri-0-benzyl-L-xylofuranosid ble oppløst ved 0°C i en 9:1 blanding av trifluoreddiksyre og vann (200 ml) og ble omrørt ved 0°C over natten. Blandingen ble brakt til tørrhet under redusert trykk. Det oljeaktige residuum ble oppløst i ethylacetat og vasket tre ganger med en mettet løsning av natriumbicarbonat. Det organiske lag ble tørket over natriumsulfat, filtrert og brakt til tørrhet under redusert trykk under dannelse av en olje. Flash-kromatograf i på silicagel og eluering med en 7:3 blanding av cyclohexan og ethylacetat ga methyl-2,3,5-tri-0-benzyl-L-xylofuranose som en olje (11,7 g, 53%).

Eksempel 4

Fremstilling av 2, 3, 5- tri- 0- benzyl- L- xylitol

11,7 g (27,92 mmol) methyl-2,3,5-tri-0-benzyl-L-xylofuranose ble oppløst i 150 ml ethanol, og 0,844 g (30,5 mmol)

natriumborhydrid ble tilsatt. Blandingen ble omrørt i 2 timer ved 0°C. Reaksjonsblandingen ble behandlet suksessivt med aceton og eddiksyre. Blandingen ble konsentrert under redusert trykk. Residuet ble tatt opp med vann, ekstrahert tre ganger med ethylacetat. Det organiske lag ble tørket over natriumsulfat, filtrert og konsentrert under redusert trykk under dannelse av en olje. Flashkromatografi på silicagel og eluering med en 1:1 blanding av hexan og ethylacetat ga 2,3,5-tri-O-benzyl-L-xylitol (10,2 g, 86,5%) som en olje.

Eksempel 5

Fremstilling av 1, 4- di- 0- methansulf onyl- 2 , 3 , 5- tr. i- Q- benzyl- L-xylitol

10,2 g (24,17 mmol) 2,3,5-tri-O-benzyl-L-xylitol ble oppløst i 100 ml methylenklorid inneholdende 10,1 ml (72,5 mmol) triethylamin. Blandingen ble avkjølt til -10°C, og 3,93 ml (50,75 mmol) methansulfonylklorid ble tilsatt dråpevis. Blandingen ble omrørt i 30 minutter ved -10°C og ble vasket med vann. Det organiske lag ble tørket over natriumsulfat, ble filtrert og brakt til tørrhet under redusert trykk under dannelse av en olje. Flashkromatografi på silicagel og eluering med en 4:6 blanding av ethylacetat og cyclohexan ga l,4-di-0-methansulfonyl-2,3,5-tri-O-benzyl-L-xylitol som en olje (13,9 g, 99%).

Eksempel 6

Fremstilling av l- azido- l- deoxy- 4- 0- methansulfonyl- 2, 3, 5- tri-O- benzyl- L- xylitol

En blanding av 1,72 g (26,4 mmol) natriumazid og 13,9 g (24 mmol) 1,4-di-0-methansulfonyl-2,3,5-tri-O-benzyl-L-xylitol i 500 ml dimethylformamid ble oppvarmet over natten til 60°C under omrøring. Dimethylformamid ble fordampet under redusert trykk. Residuet ble oppløst i ethylacetat og vasket med vann. Det organiske lag ble tørket over natriumsulfat, filtrert og konsentrert under redusert trykk under dannelse av en olje. Flashkromatografi på silicagel og eluering med en 7:3 blanding av cyclohexan og ethylacetat ga 1-azido-l-deoxy-4-0-methansulfonyl-2,3,5-tri-O-benzyl-L-xylitol (8,6 g, 63%) som en olje.

Eksempel 7

Fremstilling av 2, 3, 5- tri- 0- benzyl- l, 4- dideoxy- l, 4- imino- D-arabinitol

4,5 g (7,98 mmol) l-azido-l-deoxy-4-0-methansulfonyl-2,3,5-tri-O-benzyl-L-xylitol ble oppløst i en 1:1 blanding av ethanol og ethylacetat (30 ml), og 0,234 g palladium-sort ble tilsatt. Blandingen ble omrørt under hydrogen ved atmosfæretrykk over natten. Katalysatoren ble filtrert fra og løsnings-midlene fordampet under redusert trykk. Flashkromatografi på silicagel og eluering med en 95:5 blanding av ethylacetat og methanol ga 2,3,5-tri-0-benzyl-l,4-dideoxy-l,4-imino-D-arabinitol (2,76 g, 86%) som en olje.

Eksempel 8

Fremstilling av methyl- 2, 3, 4- tri- 0- benzyl- 6- 0- trifluormethyl-sulfonyl- g- D- glucopyranosid

Til en løsning av 0,46 ml tørt pyridin i 17,5 ml methylenklorid avkjølt til -15°C, ble det tilsatt 0,87 ml trifluormethansulfonsyreanhydrid. Blandingen ble omrørt i 15 minutter ved -10°C, hvorpå 1,2 g (2,58 mmol) methyl-2,3,4-tri-0-benzyl-a-D-glucopyranosid i 5 ml methylenklorid ble tilsatt (P. Kovac, V. Sklenar og C. Glaudemans, Carbohydr. Res. 175, 201 (1988)). Blandingen ble omrørt i 1,5 time ved -10°C. Reaksjonsblandingen ble vasket med vann. Det organiske lag ble tørket over natriumsulfat, filtrert og konsentrert under redusert trykk under dannelse av en olje. Flashkromatografi på silicagel og eluering med en 7:3 blanding av hexan og ethylacetat ga den forventede forbindelse, methy 1-2,3,4-tri-O-benzy 1-6-0-trifluormethylsulfonyl-a-D-glucopyranosid, som ble krystallisert fra hexan (1,43 g, 93%), sm.p. 44-45°C.

Eksempel 9

Fremstilling av 2 , 3, 5- tri- O- benzyl- l, 4- dideoxy- l, 4-[ ( 2 , 3 , 4-tri- 0- benzyl- 6- deoxy- l- 0- methyl- 6- g- D- glucopyranosyl) imino]-D- arabinitol

En løsning av 0,928 g (1,56 mmol) methyl-2,3,4-tri-0-benzyl-6-0-trifluormethylsulfonyl-a-D-glucopyranosid og 0,627 g (1,56 mmol) 2,3,5-tri-O-benzyl-l,4-dideoxy-l,4-imino-D-arabinitol i 55 ml ethanolfri kloroform ble kokt under til-bakeløpskjøling under nitrogen i løpet av 48 timer. Blandingen ble fortynnet i methylenklorid og vasket suksessivt med en mettet, vandig løsning av natriumbicarbonat og mettet saltvann. Det organiske lag ble tørket over natriumsulfat, filtrert og konsentrert under redusert trykk under dannelse av en olje. Flashkromatografi på silicagel og eluering med en 6:4 blanding av hexan og ethylacetat ga den forventede forbindelse, 2 , 3,5-tri-O-benzyl-l,4-dideoxy-l,4-[(2,3,4-tri-0-benzyl-6-deoxy-l-0-methyl-6-a-D-glucopyranosyl)imino]-D-arabinitol, som et hvitt skum (0,941 g, 71%).

Eksempel 10

Fremstilling av 1, 4- dideoxy- l, 4-[( 6- deoxy- l- 0- methyl- 6- a-D- glucopyranosyl) imino1- D- arabinitol

0,941 g (1,11 mmol) 2,3,5-tri-O-benzyl-l,4-dideoxy-l,4-[(2,3, 4-tri-0-benzyl-6-deoxy-l-0-methyl-6-oc-D-glucopyranosyl) - imino]-D-arabinitol ble oppløst i en 1:1 blanding av methanol og eddiksyre (40 ml), og 70 mg Pd 10% på carbon ble tilsatt. Blandingen ble omrørt under hydrogen ved atmosfæretrykk i 4 dager. Katalysatoren ble filtrert fra, og løsningsmidlene ble fordampet under reduseret trykk. Residuet ble oppløst i vann og ført gjennom en kolonne av "Amberlyst A26" OB©- form. Lyo-filisering ga 1,4-dideoxy-l,4-[(6-deoxy-l-0-methyl-6-a-D-glucopyranosyl)imino ]-D-arabinitol som et amorft, fast materiale (0,250 g, 72%).

Eksempel 11

Fremstilling av methyl- 2, 3, 4- tri- O- benzyl- 6, 7- dideoxy- q- D-glucohept- 6- enopyranosid

Til en løsning av 1,05 ml (17,22 mmol) oxalylklorid i 40 ml tørt tetrahydrofuran avkjølt til -78°C, ble dråpevis tilsatt 1,3 ml (18,04 mmol) tørt dimethylsulfoxyd hvorpå blandingen ble omrørt i 35 minutter ved -35°C. Reaksjonsblandingen ble avkjølt igjen til -78°C, og 6 g (16,4 mmol) methyl-2,3,4-tri-O-benzyl-a-D-glucopyranosid oppløst i 20 ml tetrahydrofuran, ble tilsatt, og blandingen ble omrørt i 15 minutter ved -35°C, hvorpå 11,5 ml (82,65 mmol) triethylamin ble tilsatt, og blandingen ble omrørt i 1 time ved -35°C. Dette aldehyd ble anvendt uten rensing og isolering i en Wittig-reaksjon beskrevet som følger. Til 11,7 g (32,8 mmol) trifenylmethylfosfoniumbromid suspendert i 700 ml tetrahydrofuran, ble det dråpevis tilsatt ved -78°C en 1,42 M løsning av n-butyllithium i hexan (23 ml, 32,66 mmol). Reaksjonsblandingen ble oppvarmet til romtemperatur og omrørt i 1,5 time. Blandingen ble deretter avkjølt til 0°C, og 3,68 g (32,8 mmol) kalium-tert.-butylat og 3 ml (31,8 mmol) tert.-butylalkohol ble tilsatt. Blandingen ble igjen omrørt ved romtemperatur i 30 minutter. Reaksjonsblandingen ble avkjølt til -78°C, og tetrahydrofuranløsningen av aldehydet fremstilt ovenfor, ble dråpevis tilsatt. Reaksjonsblandingen ble oppvarmet til romtemperatur og ble omrørt i 2 timer. En mettet, vandig løsning av ammoniumklorid ble tilsatt, og løsningsmidlene ble fordampet under redusert trykk. Residuet ble oppløst i ether og vasket med vann. Det organiske lag ble tørket over natriumsulfat, filtrert og konsentrert under redusert trykk under dannelse av en brun olje. Flashkromatografi på silicagel og eluering med en 4:96 blanding av ethylacetat og toluen ga det forventede olefin, methyl-2,3,4-tri-0-benzyl-6,7-dideoxy-a-D-glucohept-6-enopyranosid (3,26 g, 55%) som krystalliserte fra hexan; sm.p. 46-47°C.

Eksempel 12

Fremstilling av methyl- 2, 3 , 4- tri- 0- benzyl- 6- deoxy- ot- D- gluco-heptapyranosid

Til en løsning av 0,878 g (2,43 mmol) 2,3,4-tri-O-benzyl-6,7-dideoxy-oc-D-glucohept-6-enopyranosid i 5 ml tørt tetrahydrofuran ble tilsatt 0,24 ml (2,4 mmol) av en 10 M løs-ning av boran i methylsulfid ved 0°C under nitrogen. Blandingen ble omrørt i 3 timer ved romtemperatur. Overskudd av boran ble ødelagt med 1 ml ethanol. Blandingen ble avkjølt til 0°C. 0,3 ml 30% hydrogenperoxyd ble tilsatt. Blandingen ble kokt under tilbakeløpskjøling i 2 timer. Reaksjonsblandingen ble fortynnet med vann og ekstrahert tre ganger med ether.

Det organiske lag ble tørket over natriumsulfat, filtrert og konsentrert under redusert trykk under dannelse av en olje. Flashkromatografi på silicagel og eluering med en 1:1 blanding av ethylacetat og hexan ga den forventede alkohol, methyl-2,3,4-tri-0-benzyl-6-deoxy-a-D-glucoheptopyranosid (0,414 g, 45%), som krystalliserte fra hexan; sm.p. 50-53°C.

Eksempel 13

Fremstilling av methyl- 2, 3, 4- tri- 0- benzyl- 6- deoxy- 7- 0-methylsulfonyl- g- D- glucoheptopyranosid

Til en løsning av 0,35 g (0,92 mmol) methyl-2,3,4-tri-O-benzy 1-6-deoxy-ot-D-glucoheptopyranosid i 10 ml tørt methylenklorid ble det tilsatt 0,2 ml (1,43 mmol) triethylamin. Løsningen ble deretter avkjølt til -10°C, og 0,08 ml

(1 mmol) mesylklorid ble tilsatt. Blandingen ble omrørt i ytterligere 15 minutter ved -10°C, hvorpå reaksjonsblandingen fikk oppvarmes til romtemperatur. Blandingen ble vasket tre ganger med vann. Den organiske fase ble tørket over natr-iumsulf at, filtrert og konsentrert under redusert trykk under dannelse av en gul olje. Flashkromatografi på silicagel og eluering med en 40:60 blanding av ethylacetat og hexan ga det forventede mesylat, methyl-2,3,4-tri-0-benzyl-6-deoxy-7-O-methylsulfonyl-a-D-glucoheptopyranosid som en olje (0,38 g, 91%).

Eksempel 14

Fremstilling av methyl- 2, 3, 4- tri- 0- benzyl- 6, 7- dideoxy- 7-j od- g- D- glucoheptopyranosid

Til en løsning av 0,38 g (0,83 mmol) methyl-2,3,4-tri-0-benzyl-6-deoxy-7-0-methylsulfonyl-D-glucoheptopyranosid i 5 ml ether ble tilsatt ved 0°C 6,7 ml av en 0,375 M løs-ning av magnesiumjodid. Blandingen ble omrørt i 15 minutter ved 0°C. Overskudd av magnesiumjodid ble hydrolysert med vann. Reaksjonsblandingen ble vasket med natrium, thiosulfat og vann. Det organiske lag ble tørket over natriumsulfat, filtrert og konsentrert under redusert trykk under dannelse av en olje. Flashkromatografi på silicagelog eluering med en 2:8 blanding av ethylacetat og hexan ga det forventede jodid, methyl-2,3,4-tri-0-benzyl-6,7-dideoxy-7-jod-a-D-glucohepto-pyranosid, som ble krystallisert fra hexan (0,368 g, 91%); sm.p. 66-68°C.

Eksempel 15

Fremstilling av 2, 3, 5- tri- O- benzyl- l, 4- dideoxy- l, 4-[ ( 2 , 3 , 4-tri- 0- benzyl- 6, 7- dideoxy- l- 0- methyl- 7- a- D- glucoheptopyranosyl) imino]- D- arabinitol

En løsning av 0,3 g (0,51 mmol) methyl-2,3,4-tri-0-benzyl-6,7-dideoxy-7-jod-a-D-glucoheptopyranosid og 0,069 g (0,17 mmol) 2,3,5-tri-O-benzyl-l,4-dideoxy-l,4-imino-D-arabinitol i 3 ml tørt dimethylformamid ble oppvarmet til 80°C over natten sammen med 0,127 g (0,92 mmol) tørt kaliumcarbonat. Dimethylformamidet ble fordampet under redusert trykk. Residuet ble tatt opp med ethylacetat og vasket to ganger med vann. Det organiske lag ble tørket over natrium-sulf at, filtrert og konsentrert under redusert trykk under dannelse av en olje. Kromatografi på nøytral alumina med aktivitet III og eluering med en 8:2 blanding av hexan og ethylacetat ga det forventede amin, 2,3,5-tri-O-benzyl-l,4-dideoxy-1,4-[(2,3,4-tri-0-benzyl-6,7-dideoxy-l-0-methy1-7-a-D-glucoheptopyranosyl) imino]-D-arabinitol, som et hvitt skum (0,105 g, 71%).

Eksempel 16

Fremstilling av 1, 4- dideoxy- l, 4-[( 6, 7- dideoxy- l- 0- methyl- 7- a-D- glucoheptopyranosyl) imino]- D- arabinitol

0,1 g (0,116 mmol) 2,3,5-tri-O-benzyl-l,4-dideoxy-1,4-[(2,3,4-tri-0-benzyl-6,7-dideoxy-l-0-methyl-7-a-D-glucoheptopyranosyl)imino]-D-arabinitol ble oppløst i 15 ml eddiksyre. 0,05 g palladium 10% på carbon ble tilsatt. Blandingen ble hydrogenert ved 3 atmosfærer i løpet av to dager. Katalysatoren ble fjernet ved filtrering, og løsningsmidlene ble

fordampet under redusert trykk. Residuet ble oppløst i vann og ført gjennom en kolonne av "Amberlyst A26" 0H<®->form. Lyo-filisering ga 1,4-dideoxy-l,4-[(6,7-dideoxy-l-0-methyl-7-a-D-glucoheptopyranosyl)imino]-D-arabinitol (0,03 g, 80% som skum).

Eksempel 17

Fremstilling av 2, 3, 5- tri- O- benzyl- l, 4- dideoxy- l, 4-[( 1-deoxy- 2 , 3 : 4 , 5- di- 0- isopropyliden-| 3- D- f ructopyranosyl) imino]-L- arabinitol

En løsning av 1,17 g (3,0 mmol) 2,3:4,5-di-0-isopro-py liden-1-0-trif luormethylsulf onyl-(3-D-f ructopyranose (P.J. Card og W.D. Hitz, J. Amer. Chem. Soc., 106, 5348

(1984)) og 1,209 g (3,0 mmol) 1,4-dideoxy-2,3,5-tri-0-benzyl-1,4-imino-D-arabinitol i 70 ml ethanolfri kloroform ble kokt under tilbakeløpskjøling under nitrogen i 60 timer. Blandingen ble fortynnet med methylenklorid og vasket suksessivt med en mettet, vandig løsning av bicarbonat og mettet saltvann. Det organiske lag ble tørket over natriumsulfat, filtrert og konsentrert under redusert trykk under dannelse av en olje som ble flashkromatografert på silicagel og eluert med en gradert blanding av hexan og ethylacetat under dannelse av det forventede amin, 2,3,5-tri-O-benzyl-l,4-dideoxy-1, 4- [ (l-deoxy-2,3:4,5-di-0-isopropyliden-|3-D-f ructopyranosyl) - imino]-D-arabinitol som en olje (1,6 g, 82,5%).

Eksempel 18

Fremstilling av 2, 3, 5- tri- O- benzyl- l, 4- dideoxy- l, 4-[( 1-deoxy- 2- 0- methyl- cx- D- fructofuranosyl) imino]- D- arabinitol

1,4 g (2,17 mmol) 2,3,5-tri-O-benzyl-l,4-dideoxy-1,4- [ (l-deoxy-2 ,3:4,5-di-0-isopropyliden-|3-D-f ructopyrano-syl) imino]-D-arabinitol ble oppløst i 100 methanol inneholdende 2% tørr saltsyre. Blandingen ble kokt under til-bakeløpskjøling i 48 timer. Blandingen ble nøytralisert med "Amberlyst A26" 0*P -form og filtrert. Løsningsmidlene ble fordampet under redusert trykk. Flashkromatografi på silicagel og eluering med en gradert blanding av ethylacetat og methanol ga det forventede amin, 2,3,5-tri-O-benzyl-l,4-dideoxy-1,4-[(l-deoxy-2-0-methyl-a-D-fructofuranosyl)-imino]-D-arabinitol (0,750 g, 60%).

Eksempel 19

Fremstilling av 1, 4- dideoxy- l, 4-[( l- deoxy- 2- O- methyl- a- D-fructofuranosyl) imino]- D- arabinitol

0,550 g (0,949 mmol) av aminet, 2,3,5-tri-0-benzyl-1,4-dideoxy-l,4-[(1-deoxy-2-O-methyl-a-D-fructofuranosyl)-imino]-D-arabinitol, ble oppløst i 25 ml eddiksyre, og 0,3 g palladium 10% på carbon ble tilsatt. Blandingen ble hydrogenert i 3 dager ved 3 bar. Katalysatoren ble fjernet ved filtrering, og løsningsmidlene ble fordampet under redusert trykk. Residuet ble oppløst i vann og nøytralisert med "Amberlyst A26" 0H<®->form og filtrert. Blandingen ble brakt til tørrhet under redusert trykk. Flashkromatografi på silicagel og eluering med en gradert blanding av kloroform, methanol og vann ga det forventede amin, 1,4-dideoxy-l,4-[ (deoxy-2-0-methyl-cc-D-fructofuranosyl) imino]-D-arabinitol som et amorft, fast materiale (0,23 g, 78%).

Eksempel 20

Fremstilling av methyl- 2, 3, 6- tri- 0- benzyl- 4- 0- trifluor-methylsulfonyl- oc- D- galactopyranosid

Til en løsning av 0,46 ml tørt pyridin i 17,5 ml methylenklorid avkjølt til -15°C, ble tilsatt 0,87 ml trifluormethansulfonsyreanhydrid. Blandingen ble omrørt i 15 minutter ved -10°C, hvorpå 1,2 g (2,58 mmol) methyl-2,3,6-tri-O-benzyl-a-D-galactopyranosid i 5 ml methylenklorid ble tilsatt (N. Morishima, S. Koto, M. Oshima,

A. Sugimoto og S. Zen, Bull. Chem. Soc. Jpn, 5_6, 2849

(1983)). Blandingen ble vasket med vann. Det organiske lag ble tørket over natriumsulfat, filtrert og konsentrert under redusert trykk under dannelse av en olje som var det forventede triflat, methyl-2,3,6-tri-0-benzyl-4-0-trifluor-methyl-sulfonyl-a-D-galactopyranosid (1,43 g, 93%).

Eksempel 21

Fremstilling av 2, 3, 5- tri- O- benzyl- l, 4- dideoxy- l, 4-[( 2, 3, 6-tri- 0- benzyl- 4- deoxy- l- 0- methyl- 4- a- D- glucopyranosyl)-imino]- D- arabinitol

En løsning av 1,46 g (2,97 mmol) 2,3,6-tri-O-benzyl-4-0-trifluormethylsulf onyl-cc-D-galactopyranosid og 1,2 g (2,97 mmol) 2,3,5-tri-O-benzyl-l,4-dideoxy-l,4-imino-D-arabinitol i 70 ml ethanol-fri kloroform ble kokt under tilbakeløpskjøling under nitrogen i 3 dager. Blandingen ble fortynnet med methylenklorid og vasket suksessivt med en mettet, vandig løsning av natriumbicarbonat og mettet saltvann. Det organiske lag ble tørket over natriumsulfat, filtrert og konsentrert urider redusert trykk under dannelse av en olje. Flashkromatografi på silicagel og eluering med en gradert blanding av hexan og ethylacetat ga det forventede amin, 2,3,5-tri-O-benzyl-l,4-dideoxy-l,4-[(2,3,6-tri-0-benzyl-4-deoxy-l-0-methyl-4-cc-D-glucopyranosyl) - imino]-D-arabinitol som en olje (0,75 g, 30%).

Eksempel 22

Fremstilling av 1, 4- dideoxy- l, 4-[ ( 4- deoxy- l- 0- irtethyl- 4- oc-D- glucopyranosyl) imino]- D- arabinitol

0,7 g (0,82 mmol) av aminet, 2,3,5-tri-0-benzyl-1, 4-dideoxy-l, 4- [ (2,3, 6-tri-0-benzyl-4-deoxy-l-0-methyl-ct-D-glucopyranosyl)imino]-D-arabinitol ble oppløst i 20 ml eddiksyre. 0,5 g palladium 10% på carbon ble tilsatt. Blandingen ble hydrogenert i 3 dager ved 3 bar. Katalysatoren ble filtrert. Løsningsmidlene ble fordampet under redusert trykk. Residuet ble oppløst i vann og nøytralisert med "Amberlyst A26" form. Blandingen ble filtrert, og det vandige lag ble brakt til tørrhet under redusert trykk under dannelse av et skum. Flashkromatografi på silicagel og eluering med en 50:50:4 blanding av methanol, kloroform og vann ga det forventede amin, 1,4-dideoxy-l,4-[(4-deoxy-l-0-methyl-4-a-D-glucopyranosyl)imino]-D-arabinitol som et skum (0,783 g, 72%).

Eksempel 23

Fremstilling av methyl- 2, 3, 4- tri- 0- benzyl- 6- 0-( 2, 3, 4- tri-Q- benzy1- 6- 0- trifluormethylsulfony1- g- D- glucopyranosy1- g-D- glucopyranosid

Til en løsning av 0,24 ml tørt pyridin i 25 ml methylenklorid avkjølt til -15°C ble det tilsatt 0,45 ml trifluormethansulfonsyreanhydrid. Blandingen ble omrørt i

15 minutter ved -10°C, hvorpå 1,2 g (1,34 mmol) methyl-6-0-(2,3,4-tri-O-benzyl-a-D-glucopyranosyl)-2,3,4-tri-0-benzyl-a-D-glucopyranosid i 5 ml methylenklorid ble tilsatt

(R. Eby og C. Schuerch, Carbohydr. Res., 50, 203 (1976)).

Blandingen ble omrørt i 1,5 time ved -10°C. Reaksjonsbland-

ingen ble vasket med vann. Det organiske lag ble tørket

over natriumsulfat, filtrert og konsentrert under redusert trykk under dannelse av 1,35 g (98%) av en olje som var det forventede triflat, methyl-2,3,4-tri-0-benzyl-6-0-(2,3,4-tri-0-benzy1-6-0-trifluormethylsulfony1-a-D-glucopyranosyl)-a-D-glucopyranosid.

Eksempel 24

Fremstilling av 2, 3, 5- tri- 0- benzyl- l, 4- dideoxy- N-[ 2, 3, 4-tri- 0- benzyl- 6- deoxy- l-( 2, 3, 4- tri- 0- benzyl- l- 0- methy1- 6-0- q- D- glucopyranosyl)- a- D- glucopyranosyl]- l, 4- imino- D-

arabinitol

En løsning av 1,3 g (1,26 mmol) methyl-2,3,4-tri-0- benzyl-6-0-(2,3,4-tri-0-benzyl-6-0-trifluormethylsulfonyl-a-D-glucopyranosyl)-a-D-glucopyranosid og 0,509 g (1,26 mmol) 2,3,5-tri-O-benzyl-l,4-dideoxy-l,4-imino-D-arabinitol i 50 ml ethanolfri kloroform ble kokt under tilbakeløpskjøling under nitrogen i 48 timer. Blandingen ble fortynnet med methylen-

klorid og ble vasket suksessivt med en mettet, vandig løsning av natriumbicarbonat og mettet saltvann. Det organiske lag ble tørket over natriumsulfat, filtrert og konsentrert under redusert trykk under dannelse av et skum. Flashkromatografi på silicagel og eluering med en gradert blanding av hexan og ethylacetat ga det forventede amin, 2,3,5-tri-O-benzyl-l,4-dideoxy-N-[2,3,4-tri-0-benzyl-6-deoxy-l-(2,3,4-tri-0-benzyl-1- 0-benzyl-l-0-methyl-6-0-a-D-glucopyranosyl)-a-D-glucopyranosyl ]-l, 4-imino-D-arabinitol (1,24 g, 75%), som et skum.

Eksempel 25

Fremstilling av 1, 4- dideoxy- N-[ 6- deoxy- l-( l- O- methyl- 6- O- a-D- glucopyranosyl)- a- D- glucopyranosyl]- 1, 4- imino- D- arabinitol

1,2 g (0,937 mmol) av aminet, 2,3,5-tri-O-benzyl-l,4-dideoxy-N-[2,3,4-tri-0-benzyl-6-deoxy-l-(2,3,4-tri-0-benzyl-l-0-methyl-6-0-a-D-glucopyranosyl)-a-D-glucopyranosyl]-1,4-imino-D-arabinitol ble oppløst i 30 ml eddiksyre. 0,5 g palladium 20% på carbon ble tilsatt. Blandingen ble hydrogenert i 4 dager ved 3 atmosfærer. Katalysatoren ble fjernet ved filtrering, og løsningsmidlet ble fordampet under redusert trykk. Flashkromatografi på silicagel og eluering med en gradert blanding av kloroform, methanol og vann ga det forventede amin, 1,4-dideoxy-N-[6-deoxy-l-(l-0-methyl-6-0-a-D-glucopyranosyl)-a-D-glucopyranosyl]-l,4-imino-D-arabinitol (Q,310 g, 70%) som et skum.

Eksempel 26

Fremstilling av methyl- 6- 0-( 2, 3, 4- tri- 0- benzyl- 6, 7- dideoxy-g- D- glucohept- 6- enopyranosyl)- 2, 3, 4- tri- O- benzyl- a- D- glucopyranosid

Til en løsning av 0,37 ml (5,97 mmol) oxalylklorid i 40 ml tørt tetrahydrofuran avkjølt til -78°C, ble det dråpevis tilsatt 0,45 ml (6,26 mmol) tørt dimethylsulfoxyd, og blandingen ble omrørt i 35 minutter ved -35°C. Reaksjonsblandingen ble igjen avkjølt til -78°C, og 5,1 g (5,69 mmol) methyl-6-0-(2,3,4-tri-O-benzyl-a-D-glucopyranosyl)-2,3,4-tri-0-benzyl-a-D-glucopyranosid oppløst i 20 ml tetrahydrofuran, ble tilsatt, og blandingen ble omrørt i 15 minutter ved -3 5°C, hvorpå 3,96 ml (28,45 mmol) triethylamin ble tilsatt, og blandingen ble omrørt i 1 time ved -35°C. Dette aldehyd ble anvendt uten rensing og isolering i en Wittig-reaksjon beskrevet som følger. Til 4,059 g (11,38 mmol) tørket trifenylmethylfosfoniumbromid suspendert i 100 ml tetrahydrofuran ble dråpevis tilsatt ved -78°C 7,34 ml, (11,38 mmol) av en 1,55 M løsning av n-butyllithium i hexan. Reaksjonsblandingen ble oppvarmet til romtemperatur og omrørt i 1,5 time. Blandingen ble deretter avkjølt til 0°C, og 1,275 g (11,38 mmol) kalium-tert.-butylat og 1,04 ml (11,38 mmol) tørr tert.-butylalkohol ble tilsatt. Blandingen ble omrørt igjen ved romtemperatur i 30 minutter. Reaksjonsblandingen ble avkjølt til -78°C, og tetrahydrofuranløsningen av aldehydet fremstilt ovenfor, ble dråpevis tilsatt. Reaksjonsblandingen ble oppvarmet til romtemperatur og ble omrørt i 2 timer. En mettet, vandig løsning av ammoniumklorid ble tilsatt, og løsningsmidlene ble fordampet under redusert trykk. Residuet ble oppløst i ethylacetat og ble vasket med vann. Det organiske lag ble tørket over natriumsulfat, filtrert og konsentrert under redusert trykk under dannelse av en brun olje. Flashkromatografi på silicagel og eluering med en gradert blanding av carbontetraklorid og ethylacetat ga det forventede olefin, methyl-6-0-(2,3,4-tri-0-benzyl-6,7-dideoxy-a-D-glucohept-6-enopyranosyl)-2 , 3 , 4-tri-O-benzyl-a-D-glucopyranosid (2,54 g, 50%), som et amorft, fast materiale.

Eksempel 27

Fremstilling av methyl- 6- 0-( 2, 3, 4- tri- 0- benzyl- 6- deoxy- g- D-glucoheptopyranosyl) - 2 , 3 , 4- tri- O- benzyl- ct- D- glucopyranosid

Til en løsning av 2,54 g (2,85 mmol) methyl-6-0-(2,3,4-tri-0-benzyl-6,7-dideoxy-a-D-glucohept-6-enopyranosyl)-2,3,4-tri-O-benzyl-a-D-glucopyranosid i 10 ml tørt tetrahydrofuran ble det tilsatt 0,28 ml (2,8 mmol) av en 10 M løsning av boran i methylsulfid ved 0°C under nitrogen. Blandingen ble omrørt i 3 timer ved romtemperatur. Blandingen ble deretter avkjølt til 0°C. Overskudd av boran ble ødelagt med 1 ml ethanol. Blandingen ble avkjølt til 0°C. 0,3 ml 30% hydrogenperoxyd og 0,3 ml 3 N vandig løsning av natriumhydroxyd ble tilsatt. Blandingen ble kokt under tilbakeløpskjøling i 2 timer. Reak-sj onsblandingen ble fortynnet med vann og ekstrahert 3 ganger med ethylacetat. Det organiske lag ble tørket over natriumsulfat, filtrert og konsentrert under redusert trykk under dannelse av et skum. Flashkromatografi på silicagel og eluering med en gradert blanding av carbontetraklorid og ethylacetat ga den forventede alkohol, methyl-6-0-(2,3,4-tri-0-benzyl-6-deoxy- a-D-glucoheptopyranosyl)-2,3,4-tri-0-benzyl-cc-D-glucopyranosid (1,245 g, 48%), som et skum.

Eksempel 28

Fremstilling av methyl- 6- Q-( 2, 3, 4- tri- O- benzyl- 6, 7- dideoxy-7- jod- a- D- glucoheptopyranosyl)- 2, 3, 4- tri- O- benzyl- a- D-glucopyranosid

Til en løsning av 1,245 g (1,37 mmol) 6-0-(2,3,4-tri-0-benzyl-6-deoxy-a-D-glucoheptopyranosyl)-2,3,4-tri-0-benzyl-a-D-glucopyranosid i 15 ml tørt methylenklorid ble det tilsatt 0,29 ml (2,05 mmol) triethylamin. Løsningen ble deretter avkjølt til -10°C, og 0,11 ml (1,42 mmol) mesylklorid ble dråpevis tilsatt. Blandingen ble omrørt i ytterligere 15 minutter ved -10°C, hvorpå reaksjonsblandingen ble vasket 3 ganger med vann. Det organiske lag ble tørket over natrium-sulf at, filtrert og konsentrert under redusert trykk under dannelse av et skum som ble anvendt uten ytterligere rensing. Det urene methyl-6-0-(2,3,4-tri-0-benzyl-6-deoxy-7-0-methyl-sulfonyl- a-D-glucoheptopyranosyl)-2,3,4-tri-O-benzyl-a-D-glucopyranosid ble oppløst i 20 ml ether. Til denne blanding ble det dråpevis tilsatt 17,5 ml av en 0,35 M løsning av magnesiumjodid i ether ved 0°C. Overskudd av magnesiumjodid ble hydrolysert med vann. Reaksjonsblandingen ble vasket med natriumthiosulfat og vann. Det organiske lag ble tørket over natriumsulfat, filtrert og konsentrert under redusert trykk under dannelse av et skum. Flashkromatografi på silicagel og eluering med en gradert blanding av carbontetraklorid og ethylacetat ga det forventede jodid, methyl-6-0-(2,3,4-tri-0-benzyl-6,7-dideoxy-7-jod-a-D-glucoheptopyranosyl)-2,3,4-tri-O-benzyl-a-D-glucopyranosid (1,145 g, 82%) som et skum.

Eksempel 29

Fremstilling av 2, 3, 5- tri- O- benzyl- l, 4- dideoxy- N-[ 2, 3, 4- tri-0- benzyl- 6, 7- dideoxy- l-( 2, 3, 4- tri- 0- benzyl- l- 0- methyl- 6- 0-g- D- glucopyranosyl)- a- D- glucoheptopyranosyl]- 1, 4- imino- D-arabinitol

En løsning av 1,1 g (1,08 mmol) av jodidet, methyl-6-0-(2,3,4-tri-0-benzyl-6,7-dideoxy-7-j od-a-D-glucoheptopyranosyl)-2,3,4-tri-0-benzyl-a-D-glucopyranosid og 0,145 g (0,36 mmol) av aminet, 2,3,5-tri-O-benzyl-l,4-dideoxy-l,4-imino-D-arabinitol i 4 ml tørt dimethylformamid ble oppvarmet til 80°C over natten sammen med 0,206 g (1,49 mmol) kaliumcarbonat. Dimethylformamidet ble fordampet under redusert trykk. Residuet ble tatt opp med ethylacetat og ble vasket to ganger med vann. Det organiske lag ble tørket over natriumsulfat, filtrert og konsentrert under redusert trykk under dannelse av et skum. Kromatografi på nøytralt aluminiumoxyd med aktivitet III og eluering med en gradert blanding av carbontetraklorid og ethylacetat ga det forventede amin, 2,3,5-tri-O-benzyl-l,4-dideoxy-N-[2,3,4-tri-0-benzyl-6,7-dideoxy-l-(2,3,4-tri-0-benzyl-l-0-methyl-6-0-a-D-glucopyranosyl)-a-D-glucoheptopyranosyl ] -1 , 4-imino-D-arabinitol (0,326 g, 70%) som et skum.

Eksempel 30

Fremstilling av 1, 4- dideoxy- M- [ 6, 7- dideoxy- l-( l- 0- methyl- 6- 0-g- D- glucopyranosyl)- a- D- glucoheptopyranosyl]- 1, 4- imino- D-arabinitol

0,30 g (0,231 mmol) av aminet, 2,3,5-tri-O-benzyl-l,4-dideoxy-N-[2,3,4-tri-0-benzyl-6,7-dideoxy-l-(2,3,4-tri-0-benzyl-l-0-methyl-6-0-a-D-glucopyranosyl)-a-D-glucoheptopyranosyl ]-l , 4-imino-D-arabinitol ble oppløst i 30 ml eddiksyre. 0,4 g palladium 10% på carbon ble tilsatt. Blandingen ble hydrogenert i 4 dager ved 3 atmosfærer. Katalysatoren ble fjernet ved filtrering, og løsningsmidlene ble fordampet under redusert trykk. Residuet ble oppløst i vann og ført gjennom en kolonne av "Amberlyst A26" OH©. Vann ble fordampet under redusert trykk. Flashkromatografi på silicagel og eluering med en gradert blanding av kloroform, methanol og vann ga det forventede amin, 1,4-dideoxy-N-[6,7-dideoxy-l-(l-0-methyl-6-0-a-D-glucopyranosyl)- a-D-glucoheptopyranosyl]-1,4-imino-D-arabinitol (0,076 g, 68%) som et amorft, fast materiale.

Eksempel 31

Fremstilling av methyl- 2, 3, 6- tri- 0- benzyl- 4- cyano- 4- deoxy- a-D- glucopyranosid

En løsning av 3 g (6,07 mmol) methyl-2,3,6-tri-0-benzyl-4-0-trifluormethylsulfonyl-d-D-galactopyranosid og 6,51 g (24,28 mmol) tetra-n-butylammoniumcyanid i 60 ml ethanolfri kloroform ble kokt under tilbakeløpskjøling under nitrogen i 24 timer. Reaksjonsblandingen ble fortynnet med methylenklorid og ble vasket to ganger med vann. Det organiske lag ble tørket over natriumsulfat, filtrert og konsentrert under redusert trykk under dannelse av en olje. Flashkromatografi på silicagel og eluering med en gradert blanding av hexan og ethylacetat ga det forventede nitril, methyl-2,3,6-tri-0-benzyl-4-cyano-4-deoxy-a-D-glucopyranosid (1,75 g, 61%) som en olj e.

Eksempel 32

Fremstilling av methyl- 2, 3, 6- tri- 0- benzyl- 4- deoxy- 4- formyl-g- D- glucopyranosid

Til en løsning av 1,75 g (3,7 mmol) methyl-2,3,6-tri-0-benzyl-4-cyano-4-deoxy-a-D-glucopyranosid i 10 ml tørt tetrahydrofuran ble dråpevis tilsatt ved -78°C 3,1 ml av en 1,2 M løsning av diisobutylaluminiumhydrid i n-hexan. Blandingen ble omrørt under argon ved -78°C i 3 timer. 2 ml methanol ble tilsatt, og blandingen ble oppvarmet til 0°C. Løsningsmidlene ble deretter fordampet under redusert trykk. 50 ml ether og 40 ml 0,1 N vandig saltsyre ble tilsatt, blandingen ble omrørt ved 0°C i 1 time. Etter dekantering ble det organiske lag tørket over natriumsulfat, filtrert og kon sentrert under redusert trykk under dannelse av det forventede aldehyd, methyl-2,3,6-tri-0-benzyl-4-deoxy-4-formyl-a-D-glucopyranosid som en olje (1,7 g, 96%) som ble anvendt uten rensing.

Eksempel 33

Fremstilling av methyl- 2, 3, 6- tri- 0- benzyl- 4- deoxy- 4- hydroxymethyl- a- D- glucopyranosid

1/7 g (3,57 mmol) av aldehydet, methyl-2,3,6-tri-0-benzyl-4-deoxy-4-formyl-a-D-glucopyranosid, ble oppløst i 15 ml ethanol. Blandingen ble avkjølt til 0°C, og 0,068 g (1,8 mmol) fast natriumborhydrid ble porsjonsvis tilsatt. Blandingen ble omrørt i 1 time ved 0°C. 0,4 ml eddiksyre ble deretter tilsatt, og løsningsmidlene ble fordampet under redusert trykk. Residuet ble tatt opp med ethylacetat og vasket med mettet, vandig natriumbicarbonat og mettet saltvann. Det organiske lag ble tørket over natriumsulfat, filtrert og konsentrert under redusert trykk under dannelse av en olje. Flashkromatografi på silicagel og eluering med en gradert blanding av hexan og

ethylacetat ga den forventede alkohol, methyl-2,3,6-tri-0-benzyl-4-deoxy-4-hydroxymethyl-a-D-glucopyranosid som en olje (1,19 g, 70%).

Eksempel 34

Fremstilling av methyl- 2, 3, 6- tri- 0- benzyl- 4- deoxy- 4- trifluor-methylsulf ony loxymethyl- a- D- glucopyranosid

Til en løsning av 0,45 ml tørt pyridin i 30 ml methylenklorid avkjølt til -15°C ble det tilsatt 0,84 ml trifluormethansulfonsyreanhydrid. Blandingen ble omrørt i 15 minutter ved -10°C, hvorpå 1,19 g (2,49 mmol) methyl-2,3,6-tri-0-benzyl-4-deoxy-4-hydroxymethyl-a-D-glucopyranosid i 5 ml methylenklorid ble tilsatt. Blandingen ble omrørt i 1,5 time ved -10°C. Reaksjonsblandingen ble vasket med vann. Det organiske lag ble tørket over natriumsulfat, filtrert og konsentrert under redusert trykk under dannelse av 1,443 g (95%) av en olje som var det forventede triflat, methyl-2,3,6-tri-0-benzyl-4-deoxy-4-trifluormethylsulfonyloxymethyl-a-D-glucopyranosid .

Eksempel 35

Fremstilling av 2, 3, 5- tri- O- benzyl- l, 4- dideoxy- l, 4-[( 2, 3, 6-tri- 0- benzyl- 4- deoxy- l- 0- methyl- 4- g- D- glucopyranosyl)-methyliminol- D- arabinitol

En løsning av 1 g (1,64 mmol) methyl-2,3,6-tri-0-benzyl-4-deoxy-4-trifluormethylsulfonyloxymethyl-a-D-glucopyranosid og 0,66 g (1,64 mmol) 2,3,5-tri-O-benzyl-l,4-dideoxy-l , 4-imino-D-arabinitol i 60 ml ethanolfri kloroform ble kokt under tilbakeløpskjøling under nitrogen i 48 timer. Blandingen ble fortynnet med methylenklorid og ble vasket suksessivt med en mettet, vandig løsning av natriumbicarbonat og mettet saltvann. Det organiske lag ble tørket over natrium-sulf at, filtrert og konsentrert under redusert trykk under dannelse av et skum. Flashkromatografi på silicagel og eluering med en gradert blanding av hexan og ethylacetat ga det forventede amin, 2,3,5-tri-O-benzyl-l,4-dideoxy-l,4-[(2,3,6-tri-0-benzyl-4-deoxy-l-0-methyl-4-a-D-glucopyranosyl)-methylimino ]-D-arabinitol (0,979 g, 70%) som et skum.

Eksempel 36

Fremstilling av 1, 4- dideoxy- l, 4-[( 4- deoxy- l- 0- methyl- 4- g- D-glucopyranosyl)- methylimino]- D- arabinitol

0,98 g (1,13 mmol) av aminet, 2,3,6-tri-0-benzyl-l,5-dideoxy-1, 5 - [ ( 2, 3 , 6-tri-0-benzyl-4-deoxy-l-0-methyl-4-cc-D-glucopyranosyl)methyl-imino]-D-arabinitol, ble oppløst i 20 ml eddiksyre. 0,8 g 10% palladium-på-carbon ble tilsatt og blandingen ble hydrogenert i 3 dager ved 3 bar. Katalysatoren ble fjernet ved filtrering og løsningsmidlene ble fordampet under redusert trykk. Flashkromatografi på silicagel og eluering med en gradert blanding av kloroform, methanol og vann ga det forventede amin, 1,4-dideoxy-l,4-[(4-deoxy-l-0-methyl-4-a-D-glucopyranosyl)methylimino]-D-arabinitol (0,262 g, 72%) som et amorft, fast materiale.

Eksempel 37

Fremstilling av 2, 3, 6- tri- O- benzyl- D- galactopyranose

5 g (10,775 mmol) methyl-2,3,6-tri-O-benzyl-a-D-galactopyra nosid ble oppløst ved 0°C i 50 ml av en 9:1 blanding av trifluoreddiksyre og vann (N. Morishima, S. Koto, M. Oshima, A. Sugimoto og S. Zen, Bull Chem. Soc. Jpn 56, 2849 (1983)). Blandingen ble omrørt over natten ved 0°C. Løsningsmidlene ble fordampet under redusert trykk uten oppvarming. Residuet ble oppløst i ethylacetat og ble vasket suksessivt med natriumbicarbonat og saltvann. Det organiske lag ble tørket over natriumsulfat, ble filtrert og konsentrert under redusert trykk under dannelse av en olje. Flashkromatografi på silicagel og eluering med en gradert blanding av ethylacetat og hexan ga 2,3,6-tri-O-benzyl-D-galactopyranose (3,927 g, 81%) som en olje.

Eksempel 38

Fremstilling av 1, 4- di- 0- acetyl- 2, 3, 6- tri- O- benzyl- D- galactopyranose

3,927 g (8,72 mmol) ble oppløst i 25 ml tørt pyridin, og 5 ml eddiksyreanhydrid ble tilsatt. Blandingen ble omrørt i 24 timer ved romtemperatur. Løsningsmidlet ble fordampet under høyvakuum. Residuet ble oppløst i ethylacetat og ble vasket med vann. Det organiske lag ble tørket over natriumsulfat, ble

filtrert og konsentrert under redusert trykk under dannelse av det forventede diacetat, 1,4-di-0-acetyl-2,3,6-tri-0-benzyl-D-galactopyranose (4,64 g, 99%) som en olje som ble anvendt uten rensing.

Eksempel 3 9

Fremstilling av 4- 0- acetyl- 2, 3, 6- tri- Q- benzyl- a- D- galacto-pyranosylklorid

En løsning av 4,64 g (8,67 mmol) 1,4-di-0-acetyl-2,3,6-tri-O-benzyl-D-galactopyranose i 10 ml ether ble behandlet med 25 ml (0,2 g/ml) etherisk hydrogenklorid. Blandingen ble omrørt ved romtemperatur i 48 timer. Løsningsmidlene ble fordampet under redusert trykk under dannelse av en olje. Flashkromatografi på silicagel og eluering med en gradert blanding av carbontetraklorid og ethylacetat ga 4-0-acetyl-2,3,6-tri-O-benzyl-a-D-galactopyranosylklorid (3,142 g, 71%) som en olj e.

Eksempel 40

Fremstilling av methyl- 4- O-( 4- O- acety 1- 2, 3, 6- tri- O- benzyl- arp- galacto-pyranosyl)- 2, 3, 6- tri- O- benzyl- g- D- glucopyranosid

84,5 ml (6,76 mmol) 0,08 M etherisk sølvperklorat ble tilsatt under omrøring ved -30°C til en løsning av 2,284 g (4,93 mmol) methyl-2,3,6-tri-O-benzyl-a-D-glucopyranosid (P.J. Garegg, H. Rultberg og S. Wallin, Carbohydr. Res., 108, 97 (1982)), 3,142 g (6,154 mmol) 4-0-acetyl-2,3,6-tri-O-benzyl-a-D-galactopyranosylklorid og 0,89 ml (6,76 mmol) 2,4,6-trimethylpyridin i 20 ml ether. Blandingen ble omrørt i 15 minutter ved -30°C, og sølvklorid utfeltes. Blandingen ble filtrert gjennom en celittpute, det faste materiale ble vasket med ether, filtratet ble konsentrert under redusert trykk. Residuet ble oppløst i methylenklorid, og det organiske lag ble vasket suksessivt med vandig natriumthiosulfat og vann. Det organiske lag ble tørket over natriumsulfat, ble filtrert og konsentrert under redusert trykk under dannelse av et skum. Flashkromatografi på silicagel og eluering med en gradert blanding av hexan og ethylacetat ga 4-0-(4-0-acetyl-2,3,6-tri-O-benzyl-a-D-galactopyranosyl)-2,3,6-tri-O-benzyl-a-D-glucopyranosid (2,543 g, 55%) som et skum.

Eksempel 41

Fremstilling av methyl- 2, 3, 6- tri- 0- benzyl- 4- 0-( 2, 3, 6- tri- O-benzyl— g- D- galactopyranosyl)- a- D- glucopyranosid

2,543 g (2,71 mmol) methyl-4-0-(4-0-acetyl-2,3,6-tri-O-benzyl-a-D-galactopyranosyl)-2,3,6-tri-O-benzyl-a-D-glucopyranosid ble oppløst i 20 ml varmt toluen, og 80 ml methanol ble tilsatt, etterfulgt av noen få dråper av 1 M. methanolisk natriummethoxyd. Blandingen ble omrørt ved romtemperatur i 2 timer. Reaksjonsblandingen ble gjort nøytral med "Amberlite IR 120" (H+)-harpiks, ble filtrert og konsentrert under redusert trykk under dannelse av 2,3,6-tri-0-benzyl-4-0-(2,3,6-tri-O-benzyl-a-D-galactopyranosyl)-a— D— glucopyranosid (2,42 g, 100%) som et amorft, fast materiale.

Eksempel 42

Fremstilling av methyl- 4- O-( 2, 3, 6- tri- 0- benzyl- 4- 0- trifluor-methylsulf onyl- g- D- galactopyranosyl)- 2, 3, 6- tri- O- benzyl- a- D-glucopyranosid

Til en løsning av 0,49 ml tørt pyridin i 40 ml tørt methylenklorid avkjølt til -15°C ble tilsatt 0,91 ml trifluormethansulfonsyreanhydrid. Blandingen ble omrørt i 15 minutter ved -10°C hvorpå 2,428 g (2,71 mmol) methyl-2,3,6-tri-O-benzyl-4-O-(2,3,6-tri-O-benzyl-a-D-galactopyranosyl)-a-D-glucopyranosid i 10 ml methylenklorid ble tilsatt. Blandingen ble omrørt i 1,5 time ved -10°C. Reaksjonsblandingen ble vasket med vann. Det organiske lag ble tørket over natri-umsulf at, ble filtrert og konsentrert under redusert trykk under dannelse av 2,702 g (97%) av en olje som var det forventede triflat, methyl-4-0-(2,3,6-tri-0-benzyl-4-0-tri-fluormethylsulfony1- a-D-galactopyranosyl)-2,3,6-tri-O-benzy1-a-D-glucop-yranosid.

Eksempel 43

Fremstilling av 2, 3, 5- tri- O- benzyl- l, 4- dideoxy- N-[ 2, 3, 6- tri-O- benzy 1- 4- deoxy- l- ( 2, 3, 6- tri- O- benzy1- 1- O- methyl- 4- O- a- D-glucopyranosyl)- a- D- glucopyranosyl]- 1- 4- imino- D- arabinitol

En løsning av 1,30 g (1,25 mmol) methyl-4-0-(2,3,6-tri-O-benzyl-4-O-trifluormethylsulfony1-a-D-galactopyranosyl)-2,3,6-tri-0-benzyl-a-D-glucopyranosid og 0,5 g (1,25 mmol) 2,3,5-tri-O-benzyl-l,4-dideoxy-l,4-imino-D-arabinitol i 50 ml ethanolfri kloroform ble kokt under tilbakeløpskjøling under nitrogen i 48 timer. Blandingen ble fortynnet i methylenklorid og vasket suksessivt med en mettet, vandig løsning av natriumbicarbonat og mettet saltvann. Det organiske lag ble tørket over natriumsulfat, filtrert og konsentrert under redusert trykk under dannelse av et skum. Flashkromatografi på silicagel og eluering med en gradert blanding av hexan og ethylacetat ga det forventede amin, 2,3,5-tri-O-benzyl-l,4-dideoxy-N-[2,3,6-tri-0-benzyl-4-deoxy-l-(2,3,6-tri-0-benzyl-l-0-methyl-4-0-a-D-glucopyranosyl)-a-D-glucopyranosyl]-1,4-imino-D-arabinitol (1,1 g, 68%) som et amorft, fast materiale.

Eksempel 44

Fremstilling av 1, 4- dideoxy- N-\ 4- deoxy- l-( l- Q- methyl- 4- 0- a- D-glucopyranosyl)- a- D- glucopyranosyl3- 1, 4- imino- D- arabinitol 1 g (0,78 mmol) 2,3,5-tri-O-benzyl-l,4-dideoxy-N-[2,3,6-tri-O-benzyl-4-deoxy-l-(2,3,6-tri-O-benzy1-1-0-methyl-4-0-a-D-glucopyranosyl)- a-D-glucopyranosyl]-1,4-imino-D-arabinitol ble oppløst i 30 ml eddiksyre. 0,5 g 10% palladium-på-carbon ble tilsatt. Blandingen ble hydrogenert i 4 dager ved 3 atmosfærer. Katalysatoren ble fjernet ved filtrering, og løsningsmidlet ble fordampet under redusert trykk. Residuet ble tatt opp med vann og ført gjennom en kolonne av "Amberlyst A26" 0H<©->form. Vann ble fordampet under redusert trykk, og flashkromatografi på silicagel og eluering med en gradert blanding av kloroform, methanol og vann ga det forventede amin, 1,4-dideoxy-N-[4-deoxy-l-(l-0-methyl-4-0-a-D-glucopyranosyl)-a-D-glucopyranosyl ]-l, 4-imino-D-arabinitol (0,257 g, 70%) som et amorft, fast materiale.

Eksempel 45

Fremstilling av 1- ethenyl- l, 2:3, 4- di- 0- isopropyliden- P- D-arabinopyranose

Til en løsning av 1,05 ml (17,22 mmol) oxalylklorid i 40 ml tørt tetrahydrofuran avkjølt til -78°C ble dråpevis tilsatt 1,3 ml (18,04 mmol) tørt dimethylsulfoxyd, og blandingen ble omrørt i 35 minutter ved -35°C. Reaksjonsblandingen ble igjen avkjølt til -78°C, og 4,26 g (16,4 mmol) 2,3:4,5-di-O-isopropyliden-D-fructopyranose (R.F. Brady, Carbohydr. Res., 15, 35. (1970)) oppløst i 20 ml tetrahydrofuran ble tilsatt, og blandingen ble omrørt i 15 minutter ved -35°C, hvorpå 11,5 ml (82,65 mmol) triethylamin ble tilsatt, og blandingen ble omrørt i 1 time ved -35°C. Dette aldehyd ble anvendt uten rensing og isolering i en Wittig-reaksjon beskrevet som følger. Til 11,7 g (32,8 mmol) tørket trifenyl-methylfosfon-iumbromid suspendert i 400 ml tetrahydrofuran, ble dråpevis tilsatt ved -78°C 21 ml (32,66 mmol) av en 1,55 M løsning av n-butyllithium i hexan. Reaksjonsblandingen ble oppvarmet til romtemperatur og ble omrørt i 1,5 time. Blandingen ble deretter avkjølt til 0°C, og 3,68 g (32,8 mmol) kalium-tert.-butylat og 3 ml (31,8 mmol) tert.-butylalkohol ble tilsatt. Blandingen ble igjen omrørt ved romtemperatur i 30 minutter. Reaksjonsblandingen ble avkjølt til -78°C, og tetrahydro-furanløsningen av aldehydet fremstilt som ovenfor beskrevet, ble dråpevis tilsatt. Reaksjonsblandingen ble oppvarmet til romtemperatur og ble omrørt i 2 timer. En mettet, vandig løsning av ammoniumklorid ble tilsatt, og løsningsmidlene ble fordampet under redusert trykk. Residuet ble oppløst i ether og vasket med vann. Det organiske lag ble tørket over natrium-sulf at, filtrert og konsentrert under redusert trykk under dannelse av en brun olje. Flashkromatografi på silicagel og eluering med en gradert blanding av hexan og ethylacetat ga det forventede olefin, 1-ethenyl-l,2:3,4-di-0-isopropyliden-[3-D-arabinopyranose (2,77 g, 66%) som en olje.

Eksempel 46

Fremstilling av 1, 2, 3, 4- di- 0- isopropyliden- l-( 2- hydroxyethyl)-( 3- D- arabinopyranose

Til en løsning av 2 g (7,81 mmol) 1-ethenyl-l,2:3,4-di-0-isopropyliden-J3-D-arabinopyranose i 15 ml tørt tetrahydrofuran ble tilsatt 0,78 ml (7,8 mmol) av en 10 M løsning av boran i methylsulfid ved 0°C under nitrogen. Blandingen ble omrørt i 3 timer ved romtemperatur. Overskudd av boran ble ødelagt med 3 ml ethanol. Blandingen ble avkjølt ved 0°C. 1 ml 30% hydrogenperoxyd og 1 ml 3 N vandig løsning av natriumhydroxyd ble tilsatt. Blandingen ble kokt under tilbakeløps-kjøling i 2 timer. Reaksjonsblandingen ble fortynnet med vann og ekstrahert tre ganger med ethylacetat. Det organiske lag ble tørket over natriumsulfat, filtrert og konsentrert under redusert trykk under dannelse av en olje. Flashkromatografi på silicagel og eluering med en 1:1 blanding av ethylacetat og hexan ga den forventede alkohol, 1,2,3,4-di-0-isopropyliden-1-( 2-hydroxyethyl) -(3-D-arabinopyranose (1,717 g, 80%) som en olje.

Eksempel 47

Fremstilling av 1, 2 , 3 , 4- di- 0- isopropyliden- l-( 2- j odethyl)-| 3-D- arabinopyranose

Til en løsning av 1,7 g (6,2 mmol) 1,2,3,4-di-0-isopropyliden-1-( 2-hydroxyethyl)-|3-D-arabinose i 30 ml tørt methylenklorid ble tilsatt 1,3 ml (9,3 mmol) triethylamin. Blandingen ble deretter avkjølt til -10°C, og 0,5 ml (6,46 mmol) mesylklorid ble dråpevis tilsatt. Blandingen ble omrørt i ytterligere 15 minutter ved -10°C, hvorpå reaksjonsblandingen fikk oppvarmes til romtemperatur. Blandingen ble vasket tre ganger med vann. Den organiske fase ble tørket over natr-iumsulf at, filtrert og konsentrert under redusert trykk under dannelse av en gul olje som ble anvendt uten rensing. Det urene 1,2:3,4-di-0-isopropyliden-l-(2-methylsulfonyloxyethyl)-a-D-arabinose ble oppløst i 15 ml ether. Til denne blanding ble det tilsatt 53 ml av en 0,35 M løsning av magnesiumjodid i ether ved 0°C. Blandingen ble omrørt i 15 minutter ved 0°C. Overskudd av magnesiumjodid ble hydrolysert med vann; Reak-sj onsblandingen ble vasket med vandig natriumthiosulfat og vann. Det organiske lag ble tørket over natriumsulfat, filtrert og konsentrert under redusert trykk under dannelse av en olje. Flashkromatografi på silicagel og eluering med en 9:1 blanding av ethylacetat ga det forventede jodid, 1,2,3,4-di-O-isopropyliden—1-( 2-j odethyl)-|3-D-arabinopyranose (1,9 g, 80%) som en svakt gul olje.

Eksempel 48

Fremstilling av 2, 3, 5- tri- O- benzyl- l, 4- dideoxy- l, 4-{[ 2-( 1, 2:3, 3- di- 0- isopropyliden- l-( 3- D- arabinopyranosyl) - ethyll imino,} - D- arabinitol

En løsning av 2,0 g (5,21 mmol) 1,2,3,4-di-0-isopropyliden-l-( 2-j odethyl )-f3-D-arabinose og 0,7 g (1,74 mmol) 2,3,5-tri-O-benzyl-1,4-dideoxy-l,4-imino-D-arabinitol i 10 ml tørt dimethylformamid ble oppvarmet til 80°C over natten sammen med 0,91 g (6,6 mmol) kaliumcarbonat. Dimethylformamidet ble fordampet under redusert trykk. Residuet ble tatt opp med ethylacetat og vasket to ganger med vann. Det organiske lag ble tørket over natriumsulfat, filtrert og konsentrert under redusert trykk under dannelse av en olje. Kromatografi på nøy-tralt aluminiumoxyd med aktivitet III og eluering med en gradert blanding av hexan og ethylacetat ga det forventede amin, 2,3,5-tri-O-benzyl-l,4-dideoxy-l,4-{[2-(1,2,3,4-di-0-isopropyliden-1- [3-D-arabinopyranosyl) ] imino} -D-arabinitol (0,88 g, 61%) som et skum.

Eksempel 49

Fremstilling av 2, 3, 5- tri- O- benzyl- l, 4- dideoxy- l, 4-{[ 2-( 1-O- methyl- l- a- D- arabinofuranosyl) ethyl] imino)- D- arabinitol

0,70 g (0,94 mmol) 2,3,5-tri-O-benzyl-l,4-dideoxy-1,4- {[2 - (1, 2 , 3 , 4-di-O-isopropyl iden-1-(3-D-arabinopyranosyl) - ethyl ]imino}-D-arabinitol ble oppløst i 60 ml methanol inneholdende 5% tørr saltsyre og ble kokt under tilbakeløpskjøl-ing i 24 timer. Reaksjonsblandingen ble avkjølt til romtemperatur og nøytralisert med "Amberlyst A26" 0H~-form. Blandingen ble filtrert, og løsningsmidlet ble fordampet under redusert trykk under dannelse av et skum. Flashkromatografi på silicagel og eluering med en gradert blanding av ethylacetat og methanol ga det forventede amin, 2,3,5-tri-0-benzyl-1, 4-dideoxy-l, 4 - {[ 2 - (1-0-methyl-l-cc-D-arabinof urano-syl )ethyl]imino}-D-arabinitol (0,36 g, 65%) som et skum.

Eksempel 50

Fremstilling av 1, 4- dideoxy- l, 4- f [ 2-( 1- 0- methyl- l- oc- D- ara-binofuranosyl) ethyl] imino)- D- arabinitol

0,3 g (0,51 mmol) av aminet, 2,3,5-tri-O-benzyl-l,4-dideoxy-1,4-{[ 2-(1-O-methyl-l-a-D-arabinofuranosyl)ethyl]-imino}-D-arabinitol ble oppløst i 20 ml eddiksyre. 0,2 g 10% palladium-på-carbon ble tilsatt, og blandingen ble hydrogenert i 4 dager ved 3 atmosfærer. Katalysatoren ble fjernet ved filtrering, og løsningsmidlene ble fordampet under redusert trykk. Residuet ble oppløst i vann og ført gjennom en kolonne av "Amberlyst A26" OE©- form. Vann ble fordampet under redusert trykk. Flashkromatografi på silicagel og eluering med en gradert blanding av kloroform, methanol og vann ga det forventede amin, 1, 4-dideoxy-l, 4-[[ 2-(1-0-methyl-l-a-D-ara.bino-furanosyl)ethyl]imino}-D-arabinitol (0,115 g, 70%) som et amorft, fast materiale.

Eksempel 51

Fremstilling av methyl- 6- 0-( 4- 0- acetyl- 2, 3, 6- tri- Q- benzyl- g-D- galactopyranosyl)- 2, 3, 4- tri- 0- benzyl- a- D- glucopyranosid

76,9 ml (6,15 mmol) 0,08 M etherisk sølvperklorat ble tilsatt under omrøring ved -30°C til en løsning av 2,078 g (4,48 mmol) methyl-2,3,4-tri-O-benzyl-a-D-glucopyranosid, 2,859 g (5,6. mmol) 4-0-acetyl-2,3,6-tri-O-benzyl-a-D-galacto-pyranosylklorid og 0,81 ml (6,15 mmol) 2,4,6-trimethylpyridin i 20 ml ether. Blandingen ble omrørt i 15 minutter ved -30°C, og sølvklorid utfeltes. Blandingen ble filtrert gjennom en celittpute, de faste materialer ble vasket med ether, filtratet ble konsentrert under redusert trykk. Residuet ble opp-løst i methylenklorid, og det organiske lag ble vasket suksessivt med vandig natriumthiosulfat og vann. Det organiske lag ble tørket over natriumsulfat, filtrert og konsentrert under redusert trykk under dannelse av et skum. Flashkromato-graf i på silicagel og eluering med en gradert blanding av hexan og ethylacetat ga methyl-6-0-(4-0-acetyl-2,3,6-tri-0-benzyl-a-D-galactopyranosyl)-2,3,4-tri-Q-benzyl-a-D-glucopyranosid (2,314 g, 55%) som et skum.

Eksempel 52

Fremstilling av 2 , 3, 4- tri- 0- benzyl- 6- 0-( 2, 3, 6- tri- O- benzyl-g- D- galactopyranosyl)- a- D- glucopyranosid

2,314 g (2,46 mmol) methyl-6-0-(4-0-acetyl-2,3,6-tri-O-benzyl-a-D-galactopyranosyl)-2 > 3,4-tri-O-benzyl-a-D-glucopyranosid ble oppløst i 20 ml varm toluen, og 80 ml methanol ble tilsatt, etterfulgt av noen få dråper 1 M methanolisk natriummethoxyd. Blandingen ble omrørt ved romtemperatur i 2 timer. Reaksjonsblandingen ble gjort nøytral med "Amberlite IR 120"(H<+>)-harpiks, filtrert og konsentrert under redusert trykk under dannelse av methyl-2,3,4-tri-0-benzyl-6-0-(2 , 3 , 6-tri-O-benzyl-a-D-galactopyranosyl)-a-D-glucopyranosid (2,21 g, 100%) som et amorft, fast stoff.

Eksempel 53

Fremstilling av methyl- 6- 0-( 2, 3, 6- tri- 0- benzyl- 4- 0- trifluor-methylsulf onyl- g- D- galactopyranosyl)- 2, 3, 4- tri- O- benzyl- g- D-glucopyranosid

Til en løsning av 0,45 ml tørt pyridin i 40 ml tørt methylenklorid avkjølt til -15°C, ble det tilsatt 0,83 ml trifluormethansulfonsyreanhydrid. Blandingen ble omrørt i 15 minutter ved -10°C, hvorpå 2,21 g (2,46 mmol) methyl-2,3,4-tri-0-benzyl-6-0-(2,3,6-tri-O-benzyl-a-D-galactopyranosyl)-a-D-glucopyranosid i 10 ml methylenklorid ble tilsatt. Blandingen ble vasket med vann. Det organiske lag ble tørket over natr-iumsulf at, filtrert og konsentrert under redusert trykk under dannelse av 2,478 g (98%) av en olje som var det forventede triflat, methyl-6-0-(2,3,6-tri-0-benzyl-4-0-trifluormethyl-sulf onyl-a-D-galactopyranosyl)-2,3,4-tri-O-benzyl-a-D-glucopyranosid.

Eksempel 54

Fremstilling av 2, 3, 5- tri- O- benzyl- l, 4- dideoxy- N-[ 2, 3, 6- tri-0- benzyl- deoxy- 1-( 2, 3, 4- tri- 0- benzyl- l- 0- methyl- 6- 0- a- D-glucopyranosyl)- a- D- glucopyranosyl]- 1, 4- imino- D- arabinitol

En løsning av 1,2 g (1,16 mmol) methyl-6-0-(2,3,6-tri-O-benzyl-4-O-trifluormethylsulfonyl-a-D-galactopyranosyl)-2.3.4- tri-O-benzyl-a-D-glucopyranosid og 0,468 g (1,16 mmol) 2.3.5- tri-O-benzyl-l,4-dideoxy-l,4-imino-D-arabinitol i 50 ml ethanolfri kloroform ble kokt under tilbakeløpskjøling under nitrogen i 48 timer. Blandingen ble fortynnet i methylenklorid og vasket suksessivt med en mettet, vandig løsning av natriumbicarbonat og mettet saltvann. Det organiske lag ble tørket over natriumsulfat, filtrert og konsentrert under redusert trykk under dannelse av et skum. Flashkromatografi på silicagel og eluering med en gradert blanding av hexan og ethylacetat ga det forventede amin, 2,3,5-tri-O-benzyl-l,4-dideoxy-N-[2,3,6-tri-0-benzyl-4-deoxy-l-(2,3,4-tri-0-benzyl-1- 0-methyl-6-0-a-D-glucopyranosyl)-a-D-glucopyranosyl]-1,4-imino-D-arabinitol (0,668 g, 45%) som et amorft, fast materiale.

Eksempel 55

Fremstilling av 1, 4- dideoxy- N-[ 4- deoxy- l-( l- O- methyl- 6- Q- g- D-glucopyranosyl)— a- D- glucopyranosyl]- l, 4- imino- D- arabinitol 0,6 g (0,468 mmol) 2,3,5-tri-O-benzyl-l,4-dideoxy-N-[2,3,6-tri-O-benzyl-4-deoxy-1-(2,3,4-tri-0-benzyl-l-0-methyl-6-0- a-D-glucopyranosyl)- a-D-glucopyranosyl]-1,4-imino-D-arabinitol ble oppløst i 30 ml eddiksyre. 0,6 g 10% palladium-på-carbon ble tilsatt. Blandingen ble hydrogenert i 4 dager ved 3 atmosfærer. Katalysatoren ble fjernet ved filtrering, og løsningsmidlene ble fordampet under redusert trykk. Residuet ble oppløst i vann og ført gjennom en kolonne av "Amberlyst A26" OH©- form. Vann ble fordampet under redusert trykk, og flashkromatografi på silicagel og eluering med en gradert blanding av kloroform, methanol og vann ga det forventede amin, 1,4-dideoxy-N-[4-deoxy-l-(l-0-methyl-6-0-a-D-glucopyranosyl ) —a-D-glucopyranosyl]-1,4-imino-D-arabinitol

(0,154 g, 70%) som et amorft, fast materiale.

Eksempel 56

Fremstilling av 2, 3, 6- tri- 0- benzyl- 4- deoxy- 4- hydroxymethyl- D-glucopyranose

4,78 g (10 mmol) methyl-2,3,6-tri-0-benzyl-4-deoxy-4-hydroxymethyl-ct-D-glucopyranosid ble oppløst ved 0°C i 50 ml av en 9:1 blanding av trifluoreddiksyre og vann. Blandingen ble omrørt over natten ved 0°C. Løsningsmidlene ble fordampet under redusert trykk uten oppvarming. Residuet ble oppløst i ethylacetat og vasket suksessivt med natriumbicarbonat og saltvann. Det organiske lag ble tørket over natriumsulfat, filtrert og konsentrert under redusert trykk under dannelse av en olje. Flashkromatografi på silicagel og eluering med en gradert blanding av ethylacetat og hexan ga 2,3,6-tri-0-benzyl-4-deoxy-4-hydroxy-methyl-D-glucopyranose (4,4 g, 95%) som en olje.

Eksempel 57

Fremstilling av acetyl- 2, 3, 6- tri- 0- benzyl- 4- deoxy- 4- acetyloxy-methyl- D- glucopyranosid

5,10 g (9,30 mmol) 2,3,6-tri-0-benzyl-4-deoxy-4-hydroxymethyl-D-glucopyranose ble oppløst i 25 ml tørt pyridin, og 5 ml eddiksyreanhydrid ble tilsatt. Blandingen ble omrørt i 24 timer ved romtemperatur. Løsningsmidlet ble fordampet under høyvakuum. Residuet ble oppløst i ethylacetat og ble vasket med vann. Det organiske lag ble tørket over natriumsulfat, filtrert og konsentrert under redusert trykk under dannelse av det forventede diacetat, acetyl-2,3,6-tri-0-benzyl-4-deoxy-4-acetyloxymethyl-D-glucopyranosid (5,10 g, 98%) som en olje som ble anvendt uten rensing.

Eksempel 58

Fremstilling av 2, 3, 6- tri- 0- benzyl- l, 4- dideoxy- 4- acetyloxy-methyl- D- glucopyranosylklorid

5,10 g (9,30 mmol) acetyl-2,3,6-tri-0-benzyl-4-deoxy-4-acetyloxymethyl-D-glucopyranosid i 10 ml ether ble behandlet

med 25 ml (0,2 g/ml) etherisk hydrogenklorid. Blandingen ble omrørt ved romtemperatur i 48 timer. Løsningsmidlene ble fordampet under redusert trykk under dannelse av en olje. Flashkromatografi på silicagel og eluering med en gradert blanding av carbontetraklorid og ethylacetat ga 2,3,6-tri-0-benzyl-l,4-dideoxy-4-acetyloxymethyl-D-glucopyranosylklorid (3,661 g, 75%) som en olje.

Eksempel 59

Fremstilling av methyl- 4- 0-( 2, 3, 6- tri- 0- benzyl- 4- deoxy- 4-acetyloxymethyl- g- D- glucopyranosyl)- 2, 3, 6- tri- Q- benzyl- g- D-glucopyranosid

9,58 ml (7,67 mmol) 0,08 M etherisk sølvperklorat ble tilsatt under omrøring ved -30°C til en løsning av 2,592 g (5,59 mmol) methyl-2,3,6-tri-O-benzyl-a-D-glucopyranosid, 3,661 g (6,98 mmol) 2,3,6-tri-0-benzyl-l,4-dideoxy-4-acetyl-oxymethyl-D-glucopyranosylklorid i 20 ml ether. Blandingen ble filtrert gjennom en celittpute, de faste materialer ble vasket med ether, filtratet ble konsentrert under redusert trykk. Residuet ble oppløst i methylenklorid, og det organiske lag ble vasket suksessivt med vandig natriumthiosulfat og vann. Det organiske lag ble tørket over natriumsulfat, filtrert og konsentrert under redusert trykk under dannelse av et skum. Flashkromatografi på silicagel og eluering med en gradert blanding' av hexan og ethylacetat ga methyl-4-0-(2,3,6-tri-0-benzyl-4-deoxy-4-acetyloxymethyl-g<->D-glucopyranosyl)-2,3,6-tri-0-benzyl-a-D-glucopyranosid (3,19 g, 60%)

som et skum.

Eksempel 60

Fremstilling av

methyl- 4- 0-( 2, 3, 6- tri- 0- benzyl- 4- deoxy- 4- hydroxymethyl- a- D-glucopyranosyl)- 2, 3, 6- tri- O- benzyl- g- D- glucopyranosid

3,19 g (3,35 mmol) methyl-4-0-(2,3,6-tri-0-benzyl-4-deoxy-4-acetyloxy-methyl-g<->D-glucopyranosyl)-2,3,6-tri-0-benzyl-a-D-glucopyranosid ble oppløst i 20 ml varm toluen, og 80 ml methanol ble tilsatt etterfulgt av noen få dråper 1 m

methanolisk natriummethoxyd. Blandingen ble omrørt ved romtemperatur i 2 timer. Reaksjonsblandingen ble gjort nøytral med "Amberlite IR 120" (H<+>)-harpiks, filtrert og konsentrert under redusert trykk under dannelse av methyl-4-0-(2,3,6-tri-0-benzyl-4-deoxy-4-hydroxymethyl-a-D-glucopyranosyl)-2,3,6-tri-O-benzyl-a-D-glucopyranosid (3,049 g, 100%) som et amorft, fast materiale.

Eksempel 61

Fremstilling av methyl- 4- 0-( 2, 3, 6- tri- 0- benzyl- 4- deoxy- 4- tri-fluormethylsulfonyloxymethyl- a- D- glucopyranosyl)- 2, 3, 6- tri- O-benzy 1- a- D- glucopyranosid

Til en løsning av 0,6 ml tørt pyridin i 50 ml tørt methylenklorid avkjølt til -15°C, ble det tilsatt 1,12 ml trifluormethansulfonsyreanhydrid. Blandingen ble omrørt i 15 minutter ved -10°C, hvorpå 3,049 g (3,35 mmol) methyl-4-0-(2,3,6-tri-0-benzyl-4-deoxy-4-hydroxymethyl-a-D-glucopyranosyl)-2,3,6-tri-O-benzyl-a-D-glucopyranosid i 15 ml methylenklorid ble tilsatt. Blandingen ble vasket med vann. Det organiske lag ble tørket over natriumsulfat, filtrert og konsentrert under redusert trykk under dannelse av 3,42 g (98%) av en olje som var det forventede triflat, methyl-4-0-(2,3,6-tri-O-benzyl-4-deoxy-4-trifluormethylsulfonyloxymethyl-a-D-glucopyranosyl )-2,3,6-tri-O-benzyl-a-D-glucopyranosid.

Eksempel 62

Fremstilling av 2, 3, 5- tri- Q- benzyl- l, 4- dideoxy- N-{[ 2, 3, 6- tri-0- benzyl- 4- deoxy- l-( 2, 3, 6- tri- 0- benzyl- 4- 0- a- D- glucopyranosyl)- 4- a- D- glucopyranosyl] methyl} 1, 4- imino- D- arabinitol

En løsning av 1,56 g (1,50 mmol) methyl-4-0-(2,3,6-tri-O-benzyl-4-deoxy-4-trifluormethylsulfonyloxymethyl-a-D-glucopyranosyl )-2,3,6-tri-O-benzyl-a-D-glucopyranosid og 0,605 g (1,50 mmol) 2,3,5-tri-0-benzyl-l,4-dideoxy-l,4-imino-D-arabinitol i 50 ml ethanolfri kloroform ble kokt under til-bakeløpskjøling under nitrogen i 48 timer. Blandingen ble fortynnet i methylenklorid og vasket suksessivt med mettet saltvann. Det organiske lag ble tørket over natriumsulfat, filtrert og konsentrert under redusert trykk under dannelse av et skum. Flashkromatografi på silicagel og eluering med en gradert blanding av hexan og ethylacetat ga det forventede amin, 2,3, 5-tri-O-benzyl-l, 4-dideoxy-N- (_[ 2 , 3 , 6-tri-O-benzyl-4-deoxy-l- (2,3,6-tri-0-benzyl-l-0-methyl-4-0-a-D-glucopyranosyl)-4-a-D-glucopyranosyl]methyl}1,4-imino-D-arabinitol (0,922 g, 48%) som et amorft, fast materiale.

Eksempel 63

Fremstilling av 1, 4- dideoxy- N-{[ 4- deoxy- l-( l- O- methyl- 4- O- g-D- glucopyranosyl) - 4- a- D- glucopyranosyl] methyl'}' 1, 4- imino- D-arabinitol

0,90 g (0,702 mmol) 2,3,5-tri-O-benzyl-l,4-dideoxy-N-{[2,3,6-tri-0-benzyl-4-deoxy-l-(2,3, 6-tri-0-benzyl-l-0-methyl-4-0-a-D-glucopyranosyl )-4-a-D-glucopyranosyl]methyl} 1,4-imino-D-arabinitol ble oppløst i 40 ml eddiksyre. 0,6 g 10% palladium-på-carbon ble tilsatt. Blandingen ble hydrogenert i 4 dager ved 3 atmosfærer. Katalysatoren ble fjernet ved filtrering og løsningsmidlene fordampet under redusert trykk. Residuet ble oppløst i vann og ført gjennom en kolonne av "Amberlyst A26" oiA Vann ble fordampet under redusert trykk, og flashkromatografi på silicagel og eluering med en gradert blanding av kloroform, methanol og vann ga det forventede amin, 1,4-dideoxy-N- {[4-deoxy-l-(l-0-methyl-4-0-a-D-glucopyranosyl)-4-a-D-glucopyranosyl ]methyl} 1 , 4-imino-D-arabinitol (0,244 g, 74%) som et amorft, fast materiale.

Eksempel 6 4

Fremstilling av methyl- 6- 0-( 2, 3, 6- tri- 0- benzyl- 4- deoxy- 4-acetyloxymethyl- g- D- glucopyranosyl)- 2, 3, 4- tri- 0- benzyl- g- D-glucopyranosid

76,7 ml (6,13 mmol) 0,08 M etherisk sølvperklorat ble tilsatt under omrøring ved -30°C til en løsning av 2,074 g (4,472 mmol) methyl-2,3,4-tri-O-benzyl-g<->D-glucopyranosid,

6,13 mmol 2,3,6-tri-0-benzyl-l,4-dideoxy-4-acetyloxymethyl-D-glucopyranosylklorid og 0,80 ml (6,13 mmol) 2,4,6-trimethylpyridin i 20 ml ether. Blandingen ble omrørt i 15 minutter ved

-30°C, og sølvklorid utfeltes. Blandingen ble filtrert gjennom

en celittpute, de faste materialer ble vasket med ether, filtratet ble konsentrert under redusert trykk. Residuet ble oppløst i methylenklorid, og det organiske lag ble suksessivt vasket med vandig natriumthiosulfat og vann. Det organiske lag ble tørket over natriumsulfat, filtrert og konsentrert under redusert trykk under dannnelse av et skum. Flashkromatografi på silicagel og eluering med en gradert blanding av hexan og ethylacetat ga methyl-6-0-(2,3,6-tri-0-benzyl-4-deoxy-4-acetyloxymethyl-a-D-glucopyranosyl)-2,3,4-tri-O-benzyl-a-D-glucopyranosid (2,469 g, 58%) som et skum.

Eksempel 65

Fremstilling av methyl- 6- 0-( 2, 3, 6- tri- 0- benzyl- 4- deoxy- 4-hydroxymethyl- a- glucopyranosyl) 2, 3, 4- tri- 0- benzyl- a- D- glucopyranosid

2,469 g (2,593 mmol) methyl-6-0-(2,3,6-tri-0-benzyl-4-deoxy-4-acetyloxy-methyl-a-D-glucopyranosyl)-2,3,4-tri-0-benzyl-a-D-glucopyranosid ble oppløst i 20 ml varm toluen, og 80 ml methanol ble tilsatt, etterfulgt av noen få dråper 1 M methanolisk natriummethoxyd. Blandingen ble omrørt ved romtemperatur i 2 timer. Reaksjonsblandingen ble gjort nøytral med "Amberlite IR 120" (H<+>)-harpiks, filtrert og konsentrert under redusert trykk under dannelse av methyl-6-0-(2,3,6-tri-0-benzyl-4-deoxy-4-hydroxymethyl-a-D-glucopyranosyl)-2,3, 4-tri-O-benzyl-a-D-glucopyranosid (2,36 g, 100%) som et amort, fast materiale.

Eksempel 66

Fremstilling av methyl- 6- 0-( 2, 3, 6- tri- 0- benzyl- 4- deoxy- 4- tri-fluormethylsulfonyloxymethyl- a- D- glucopyranosyl)- 2, 3, 4- tri-0- benzyl- a- D- glucopyranosid

Til en løsning av 0,46 ml tørt pyridin i 40 ml tørt methylenklorid avkjølt til -15°C ble det tilsatt 0,86 ml trifluormethansulfonsyreanhydrid. Blandingen ble omrørt i 15 minutter ved -10°C, hvorpå 2,36 g (2,593 mmol) methyl-6-0-(2,3,6-tri-0-benzyl-4-deoxy-4-hydroxymethyl-a-D-glucopyranosyl)-2,3,4-tri-O-benzyl-a-D-glucopyranosid i 10 ml methylenklorid ble tilsatt. Blandingen ble omrørt i 1,5 time ved -10°C. Reak-sj onsblandingen ble vasket med vann. Det organiske lag ble tørket over natriumsulfat, filtrert og konsentrert under redusert trykk under dannelse av 2,65 g (98%) av en olje som var det forventede triflat, methyl-6-0-(2,3,6-tri-0-benzyl-4-deoxy-4-trifluormethylsulfonyloxymethyl-a-D-glucopyranosyl)-2,3, 4-tri-O-benzyl-a-D-glucopyranosid.

Eksempel 67

Fremstilling av 2, 3, 5- tri- O- benzyl- l, 4- dideoxy- N-[[ 2 , 3, 6- tri-O- benzy 1- 4- deoxy- l-( 2, 3, 4- tri- O- benzy1- 1- O- methy1- 6- 0- a- D-glucopyranosyl )- 4- a- D- glucopyranosyl] methyl} 1, 4- imino- D-arabinitol

En løsning av 1,465 g (1,40 mmol) methyl-6-0-(2,3,6-tri-O-benzy1-4-deoxy-4-trifluormethylsulfonyloxymethyl -a -D-glucopyranosyl)-2,3,4-tri-O-benzyl-a-D-glucopyranosid og 0,564 g (1,40 mmol) 2,3,5-tri-O-benzyl-l,4-dideoxy-l,4-imino-D-arabinitol i 50 ml ethanolfri kloroform ble kokt under til-bakeløpskjøling under nitrogen i 48 timer. Blandingen ble fortynnet i methylenklorid og ble suksessivt vasket med en mettet, vandig løsning av natriumbicarbonat og mettet saltvann. Det organiske lag ble tørket over natriumsulfat, filtrert og konsentrert under redusert trykk under dannelse av et skum. Flashkromatografi på silicagel og eluering med en gradert blanding av hexan og ethylacetat ga det forventede amin, 2,3,5-tri-O-benzyl-l,4-dideoxy-N- {[2,3,6-tri-0-benzyl-4-deoxy-l-(2,3,4-tri-O-benzy1-1-0-methyl-6-0-a-D-glucopyranosyl)-4-a-D-glucopyranosyl]methyl}1,4-imino-D-arabinitol (1,2 g, 67%) som et amorft, fast materiale.

Eksempel 68

Fremstilling av 1, 4- dideoxy- N-{[ 4- deoxy- l-( l- Q- methyl- 6-O- g- D- glucopyranosyl)- 4- a- D- glucopyranosyl] methyl) 1, 4- imino-D- arabinitol

1,1 g (0,859 mmol) 2,3,5-tri-O-benzyl-l,4-dideoxy-N-([2,3,6-tri-0-benzyl-4-deoxy-l-(2,3,4-tri-O-benzy1-1-0-methyl-6-0-a-D-glucopyranosyl)-4-a-D-glucopyranosyl]methyl}-

1,4-imino-D-arabinitol ble oppløst i 30 ml eddiksyre. 0,6 g 10% palladium-på-carbon ble tilsatt. Blandingen ble hydrogenert i 4 dager ved 3 atmosfærer. Katalysatoren ble fjernet ved filtrering og løsningsmidlene fordampet under redusert trykk. Residuet ble oppløst i vann -og ført gjennom en kolonne av "Amberlyst A26" OH©. Vann ble fordampet under redusert trykk, og flashkromatografi på silicagel og eluering med en gradert blanding av kloroform, methanol og vann ga det forventede amin, 1,4-dideoxy-N-{[4-deoxy-l-(l-0-methyl-6-0-a-D-glucopyranosyl)-4-a-D-glucopyranosyl]methyl}1,4-imino-D-arabinitol (0,303 g, 75%) som et amorft, fast materiale.

Eksempel 6 9

Fremstilling av 1, 4- dideoxy- l, 5-( 6- deoxy- 6- D- glucopyranosyl)-imino- D- arabinitol

0,2 g (0,647 mmol) 1,4-dideoxy-l,4-(6-deoxy-l-0-methyl-6-a-D-glucopyranosyl)-imino-D-arabinitol ble oppløst i 10 ml av en 1:1 blanding av vann og trifluoreddiksyre. Blandingen ble omrørt i 24 timer ved 0°C. Løsningsmidlene ble fordampet under redusert trykk under dannelse av et skum. Kromatografi på "Amberlyst A26" 0H<©->form ga det forventede amin, 1,5-dideoxy-1,5-(6-deoxy-6-D-glucopyranosyl)imino-D-arabinitol (0,181 g, 95%).

Eksempel 70

Fremstilling av methyl- 2, 3, 4- tri- 0- benzyl- 6- 0- trifluormethyl-sulf onyl- 3- D- glucopyranosid

Til en løsning av 0,456 ml tørt pyridin i 20 ml methylenklorid avkjølt til -15°C ble tilsatt 0,864 ml trifluormethansulfonsyreanhydrid. Blandingen ble omrørt i 15 min-

utter ved -10°C, hvorpå 1,2 g (2,58 mmol) methyl-2,3,4-tri-0-benzyl-|3-D-glucopyranosid i 30 ml methylenklorid ble tilsatt (P. Kovac, J. AlfSldi og M. Kosik, Chem. Zvesti 28, 820,

(1974)). Blandingen ble omrørt i 1,5 time ved -10°C. Reak-sj onsblandingen ble vasket med vann. Det organiske lag ble tørket over natriumsulfat, filtrert og konsentrert under red-

usert trykk under dannelse av en olje. Flashkromatografi på silicagel og eluering med en 7:2 blanding av hexan og ethyl-

acetat ga den forventede forbindelse, methyl-2,3,4-tri-0-benzyl-6-0-trifluormethylsulfonyl-(3-D-glucopyranosid (1,408 g,

89%) som en olje som krystalliserte i kulden.

Eksempel 71

Fremstilling av 2, 3, 5- tri- O- benzyl- l, 4- dideoxy- l, 4-[( 2, 3, 4-tri- 0- benzyl- 6- deoxy- l- 0- methyl- 6- 3- D- glucopyranosyl) imino]- D-arabinitol

En løsning av 0,7 g (1,17 mmol) 2,3,4-tri-0-benzyl-6-0-trifluormethylsulfonyl-(3-D-glucopyranosid og 0,395 g (1 mmol) 2,3,5-tri-O-benzyl-l,4-dideoxy-l,4-imino-D-arabini-

tol i 20 ml ethanolfri kloroform ble kokt under tilbakeløps-kjøling under nitrogen i 48 timer. Blandingen ble fortynnet i methylenklorid og vasket suksessivt med en mettet, vandig løs-

ning av natriumbicarbonat og mettet saltvann. Det organiske

lag ble tørket over natriumsulfat, filtrert og konsentrert

under redusert trykk under dannelse av en olje. Flashkromato-

graf i på silicagel og eluering med en 9:10 blanding av toluen og ethylacetat ga den forventede forbindelse, 2,3,5-tri-O-benzyl-l, 4-dideoxy-l , 4-[(2,3,4-tri-O-benzyl-6-deoxy-l-0-methyl-6-(3-D-glucopyranosyl) imino]-D-arabinitol, som et hvitt skum (0,398 g, 40%).

Eksempel 72

Fremstilling av 1, 4- dideoxy- l, 4-[ ( 6- deoxy- l- Q- methyl- 6- p- D-glucopyranosyl)- imino]- D- arabinitol

0,398 g (0,469 mmol) 2,3,5-tri-O-benzyl-1,4-dideoxy-l,4-[ (2,3,4-tri-0-benzyl-6-deoxy-l-0-methyl-6- p-D-glucopyranosy])imino] -D-arabinitol ble oppløst i 40 ml av en 1:1 blanding av methanol og eddiksyre, og 70 mg 10% Pd på carbon ble tilsatt. Blandingen ble omrørt under hydrogen ved 3 bar i løpet av 3 dager. Katalysatoren ble filtrert fra, og løsningsmidlene ble fordampet under redusert trykk. Residuet ble oppløst i vann og ført gjennom en kolonne av "Amberlyst A26" OFlP-form. Fordampning av vann under redusert trykk ga en amorft, fast materiale. Flash-kromatograf i på silicagel og eluering med en 50:50:4 blanding av kloroform, methanol og vann ga 1,4-dideoxy-l,4-[(6-deoxy-l-O-methyl-6-p-D-glucopyranosyl)imino]-D-arabinitol som et amorft, fast materiale (0,39 g, 27%).

Enzymer som katalyserer hydrolysen av komplekse carbohydrater, f.eks. a-glycosidaser, omdanner ikke-absorberbare carbohydrater til absorberbare sukkere. Den hurtige virkning av disse enzymer, i særdeleshet etter inntak av høye nivåer av carbohydrater, fører til akutte, høye nivåer i blodglucose som når det gjelder diabetikere, fører til ugunstige manifes-tasjoner, således har det vært et lenge etterlengtet mål å finne forbindelser som vil hindre hyperglycemi forårsaket av feilaktig diett. Når det gjelder fedme, har på lignende måte kontroll av høye nivåer av blodglucose med dens etterfølgende omdannelse til fett, forårsaket av katalyse av carbohydrater, etterstrebet forbindelser som vil lindre disse problemer forbundet med feilaktig diett.

Forbindelsene fremstilt ifølge oppfinnelsen (I) er kraftige og langvarige inhibitorer av a-glucosidase som etablert ved anvendelse av standard laboratoriemetoder.I disse metoder bestemmes serumglucosenivåer. Som et resultat av deres aktivitet som a-glucosidaseinhibitorer kan forbindelsene anvendes for behandling av sykdomstilstander forårsaket av underutnyttelse og/eller overproduksjon av serumglucose uten ugunstig å påvirke transportgraden over cellemembranene. Forbindelsene er således anvendbare ved behandling av diabetes og fedme.

Det er også blitt funnet at forbindelsene (I) vil utvise en inhiberende effekt på glucosidaseenzymer som er essensielle for utvikling av den sluttelige struktur av oligo-saccharid-sidekjedene av glycoproteiner, i særdeleshet HIV (gp 120)-glycoproteinet. Egnede bestemmelsesteknikker, f.eks. syncytialdannelse, omvendt transkriptasebestemmelse, immun-fluorescenstester og elektronmikroskopi, kan anvendes for å vurdere effekten på HIV viral vekst og for bestemmelse av doseregimer. Antiviral effekt kan bekreftes ved immunfluor-escens med serum for viralt infiserte pasienter. Ved behandling av HIV-relaterte sykdomstilstander, såvel som andre retrovirale glycoprotein-relaterte sykdomstilstander, kan forbindelsene - i motsetning til behandling av diabetes og fedme - administreres ved parenteral administrering, og de spesifikke doser er innenfor det ovenfor angitte doseområde for behandling av diabetes og fedme.

Evaluering av potensielle inhibitorer av intestinale g- qlucosidaser ( sucrase, isomaltase) in vitro

Forbindelseskrav: 1 mg til 20 mg.

Isolering og rensing av sucrase- isomaltasekompleks: Sucrase-isomaltasekomplekset ble isolert fra tynntarmer fra voksne Sprague-Dawley hannrotter (eller kaniner) og ble renset som beskrevet av Cogoli et al. (1972). De spesifikke aktivi-teter av det rensede kompleks var 16 og 12 enheter/mg protein for rottesucrase og -isomaltase, og 15 og 9 enheter/mg protein for kaninsucrase og -isomaltase.

Isolering og rensing av rottelever- lvsosomal a-glucosidase: Rottelever-lysosomal a-glycosidase ble isolert og renset som beskrevet av Ellmers et al. (1987). Den spesifikke aktivitet av den lysosomale a-glucosidase varierte fra 20 til 40 M enheter/mg protein.

Isolering og rensing av løselig rottenyre- B- glucosidase: Løselig rottenyre-3-glucosidase ble isolert og renset som beskrevet av Patel og Tappel (1969). Den spesifikke aktivitet av den løselige rottenyre-B-glucosidase var 0,4 M enhet/mg protein.

Definisjon av én enhet enzym: Én enhet enzym er den mengde som er nødvendig for å hydrolysere 1 umol substrat pr. minutt. Protein ble bestemt ved metoden ifølge Bradford

(1976).

Utprøvning av enzymene: Sucrase- og isomaltase-aktiviteter ble målt ved 37 °C, pH 6,9, i henhold til metoden ifølge Dahlqvist (1964), under anvendelse av sucrose og isomaltase som substrater. Lysosomal a-glucosidaseaktivitet ble målt ved 37 °C, pH 4,2, med p-nitrofenyl-a-D-glucopyranosid som substrat, i henhold til Ellmers et al. (1987). Løselig rottenyre-B-glucosidaseaktivitet ble målt ved 37 °C, pH 6,4, med p-nitrofenyl-B-D-glucopyranosid som substrat i henhold til Patel og Tappel (1969).

Utprøvning av klassisk konkurrerende inhibering av enzymer: Kj-verdier ble bestemt under anvendelse av en Dixon-kurve og et dataprogram utviklet for lineær regresjonsanalyse.

Utprøvning av tidsavhengig inhibering av enzymer: For et typisk forsøk ble 160 pl enzympreparat blandet ved tid 0 med 40 ul av en løsning av inhibitor i 0,2 M natriumfosfat-buffer, pH 6,9 (sucrase og isomaltase) eller i 0,1 M natrium-acetatbuffer, pH 4,2, i nærvær av 25 mM KC1 (lysosomal a-glucosidase) ved 37 °C i et riste-vannbad. Ved forskjellige tidspunkter ble 25 pl aliquoter overført i 975 pl prøvemedium. Reaksjonene fikk forløpe i 30 minutter ved 37 °C som beskrevet ovenfor (se Utprøvning av enzymer). Verdier for kon (andre ordenshastighetskonstanter for assosiasjonsreaksjonen mellom inhibitor og enzym) kan bestemmes som beskrevet av Danzin og Ehrhard (1987). For tettbindende inhibitorer ble verdier for koff (dissosiasjonshastighetskonstanter) bestemt ved fortynning av enzym-inhibitorkomplekset (Danzin og Ehrhard, 1987). I visse tilfeller ble Kz og t 1/2 bestemt ved metoden ifølge Kitz og Wilson (1962).

Utprøvning av langsomtbindende inhibering av enzymer: Kinetiske konstanter for langsomtbindende inhibitorer (kon, koff og Kj. = koff/kon) ble bestemt fra utviklingskurvene for produkt-dannelse mot tid som beskrevet av Williams og Morrison (1979). Utprøvningene ble startet ved tilsetning av enzym.

I praksis er en effektiv mengde av en forbindelse ifølge oppfinnelsen den mengde som er nødvendig for å redusere mengden av serumglucose (i forhold til en kontroll) etter inntak av carbohydrater som er omdannbare til absorberbar glucose. Den spesifikke dose for behandling av enhver spesi-fikk pasient som lider av enten den ene eller andre sykdoms-tilstand, vil avhenge av slike faktorer som størrelse, type og pasientens alder, såvel som strengheten av sykdomstil-standen, hvor alle faktorer er velkjente av fagmannen. Generelt skal forbindelsene administreres oralt i en dose på 0,2 til 20 mg pr. kg kroppsvekt (MPK) hvor en dose på 0,5 til 5 MPK er foretrukket. Forbindelsene skal fortrinnsvis administreres oralt ved måltider i enkle eller multiple enhetsdoser inneholdende 25 mg til 250 mg. Ved behandling av fedme innbefatter uttrykket ikke bare behandling av sykdommen, men innbefatter også forhindring av fedme ved kontinuerlig administrering av doseregimer egnet for opprettholdelse av den ønskede vekt for pasienten.

Ved utøvelse av den sluttelige anvendelse av forbindelsene ifølge oppfinnelsen inkorporeres forbindelsene fortrinnsvis i en farmasøytisk formulering omfattende en farma-søytisk bærer i blanding med en forbindelse ifølge oppfinnelsen. Uttrykket "farmasøytisk bærer" angir kjente, farma-søytiske eksipienser anvendbare ved formulering av farmasøyt-isk aktive forbindelser for internal administrering til dyr, og som er hovedsakelig ikke-toksiske og ikke-sensibiliser-ende under bruksbetingelser. Preparatene kan fremstilles ved kjente teknikker for fremstilling av tabletter, kapsler, eliksirer, siruper, emulsjoner, dispersjoner og fuktbare og brusende pulvere, og kan inneholde egnede eksipienser kjent for å være anvendbare ved fremstilling av den ønskede,

bestemte preparattype. Egnede, farmasøytiske bærere og for-muleringsteknikker finnes i standardbøker slik som Reming-ton's Pharmaceutical Sciences, Mack Publishing Company, Easton, Pa.

Claims (2)

1. Analogifremgangsmåte for fremstilling av terapeutisk aktive forbindelser av formelen optiske og geometriske isomerer derav og farmasøytisk akseptable salter derav, hvori n er 0, 1 eller 2, R er et glycosyl-eller forethret med en lavere alkylgruppe eller acylert med en lavere alkanoylgruppe glycosylradikal inneholdende fra 1 til 3 hexose- eller pentoseenheter, hvilket forethret eller acylert glycosylradikal bærer ether- eller acylradikalet ved hydroxyl-delen lokalisert på det anomere carbonatom, karakterisert ved at en forbindelse av formelen kondenseres med en forbindelse av formelen hvori X er et halogenid eller triflat, n er 0, 1 eller 2, R' er et hydroxybeskyttet glycosyl- eller forethret eller acetylert glycosylradikal inneholdende fra 1 til 3 hexose-eller pentoseenheter, hvilket forethret eller acetylert glycosylradikal bærer ether- eller acylradikalet ved hydroxyl-delen lokalisert på det anomere carbonatom, under dannelse av en forbindelse av formelen hvilken forbindelse avbeskyttes ved standard avbeskyttelses-teknikker, etterfulgt, om ønsket, av omdannelse til et farma-søytisk akseptabelt salt derav.

2. Fremgangsmåte ifølge krav 1 for fremstilling av 1,4-dideoxy-1,4-[(6-deoxy-l-0-methyl-6-a-D-glucopyranosyl)imino]-D-arabinitol, 1,4-dideoxy-l,4-[(6,7-dideoxy-l-O-methyl-7-a-D-glucoheptopyranosyl)imino]-D-arabinitol, 1,4-dideoxy-l,4-(6-deoxy-l-0-D-methyl-6-B-0-glucopyranosyl)imino-D-arabinitol, 1,4-dideoxy-l,4-[(6,7-dideoxy-l-0-methyl-7-a-D-glucoheptopyranosyl)imino]-D-arabinitol, 1,4-dideoxy-l,5-(6-deoxy-6-D-glucopyranosyl) imino-D-arabinitol, karakterisert ved at tilsvarende utgangs-materialer anvendes.