PT93071B

PT93071B - Processo para a preparacao de novas 4`-epi-4`-amino-antraciclinas e de composicoes farmaceuticas que as contem

Info

Publication number: PT93071B
Application number: PT93071A
Authority: PT
Inventors: Daniela Faiardi; Alberto Bargiotti; Francesco Angelucci; Antonino Suarato; Stefania Stefanelli
Original assignee: Erba Farmitalia
Priority date: 1989-02-07
Filing date: 1990-02-06
Publication date: 1996-01-31
Also published as: AU4951090A; DK0381989T3; JPH04503210A; EP0381989B1; IE62307B1; CA2046645A1; ZA90835B; JP3000562B2; KR920701227A; ES2041050T3; HU206700B; MY105541A; HUT58065A; PT93071A; FI913699A0; IL93258A; IE900403L; RU2073681C1; AU628478B2; GR3003873T3

Description

DESCRIÇÃO

DA

PATENTE DE INVENÇÃO

N.° 93.071

REQUERENTE: FARMITALIA CARLO ERBA S.R.L., italiana, com sede em Via Cario Imbonati, 24 - 20159 Milão, Itália,

EPÍGRAFE: Processo para a preparação de novas 4'-epi-4'-amino-antraciclinas e de composições farmacêuticas que as contêm

INVENTORES: Francesco Angelucci,

Alberto Bargiotti,

Daniela Faiardi,

Stefania Stefanelli,

Antonino Suarato,

Reivindicação do direiro de prioridade ao abrigo do amigo 4° da Convenção de Paris de 20 de Março de 1883.

Grã-Bretanha, em 07 de Fevereiro de 1989, sob o NQ 8902709.8

INPí MCO

RF 15722

FARMITADlA cardo ersa S.R.:

PROCESSO PARA a PREPARAÇÃO de MOVAS 4’-ΞΡΙ-4·-amino-ANTRACICLINAS E DE COMPOSIÇÕES FARMACÊUTICAS QUE AS CONTEM

A presente invenção refere-se a uma nova classe de glicosidos antraciclínicos com aetividade antitumoral, aos métodos para a sua preparação# às composições farmacêuticas que as contêm e à sua aplicação no tratamento de certos tumores de mamíferos. A presente invenção também se refere à preparação de certos novos intermédios.

A presente invenção proporciona glicosidos de antraciclina de fórmulas gerais 1_ e 2:

/

em que

R representa um átomo de hidrogénio ou de flúor ou um grupo hidroxi ou amino; e

R₂ e R₃ representam, arabos, um grupo hidroxi ou um dos símbolos 3.^ e R^ representa um átomo de hidrogénio ou um grupo nitro ou amino e o outro um grupo hidroxi, com a condição de num glicosido de fórmula geral 2 nem R nem R₇ representarem um grupo amino, e dos seus sais aceitáveis do ponto de vista farmacêutico. Os sais preferidos são os cloridratos.

Os glicosidos de e 2 incluem:

antraciclina de órmula geral

4-desmetil-3'-de samino-4'-desoxi-4’-epi-araino-daunorubicina (la: R₁=R₂=K₃=OH)

4-desmetil-3·-desamino-4'-desoxi-4’-epi-amino-doxorubicina (2a: R₁=R₂=R₃=CH)

4-desmetoxi-4-amino-3'-desamino-4’ desoxi-4·-epi-amino-d aunorubicina (lb: R₁=Md₂, R₂=R₃=OH)

4-desmetoxi-4-amino-3'-desamino-4'-desoxi-4'-epi-nmino-d o?: orub i c i na (2b: R^hl·^, R =R₃=OH)

-de ξ met oxi -4 -£ luoro-3' -de o amino-4 ’ -de 3 oxi -4 ¹ -e pi-ami no-d aunorubicina (lc: R₁₌F, R_?=R₃=OH)

4-de smetoxi-4-fluoro-3‘-de s amino-4‘-deooxi-4'-epi-amino-d ox or ub i c i n a (2c: R₁=F_/ R₂=R₃=OR)

4-de smetil-ó-desoxi-3'-de samino-4‘-de soxi-4‘-epi-amino-d a un or ub i c i n a (ld: R =R₃=OK, R₂=H)

4-de smetil-6-desoxi-3¹-des amino-4¹-de soxi-4' -epi-amino-doxorubicina (2d: R₁₌R₃=OH, R₂=H)

4-desmetoxi-11-desoxi-ll-nitro-3'-desamino-4'-desoxi-4* -epi-amino-daunorubicina (le: R₁₌H, R₂=CH, R₃=NO₂)

4-desmetoxi-11-dosoxi-ll-nitro-3' -desamino-4'-desoxi-4¹ -epi-ami no-doxorubicina (2e: R-^H, R₂=OH_z R₃=NO )

-de smetoxi-6-desoxi-6-nitro-3 ' -desamino-4 ' -desoxi-4' -epi-amino-daunorubicina (lf: R^H, R_? = MO₂, R₃=OH)

-44-desmetoxi-6-desoxi-6-nitro-3'-dcsamino-4'-desoxi-4'-epi-amino-doxorubicina (2f: R₂=NC₂/ R₃=OH)

-desmetoxi-ll-desoxi-ll-amino-3 ' -desamino-4 ‘ -desoxi-4*-epi-amino-daunorubicina (lg: R₁=H, *₃=ΝΗ₂, R₂=OH)

-desmetoxi-ll-desoxi-ll-aKiino-3 ’ -de s ami no -4 * -de soxi-4 ’ -epi-amino-doxorubicina (2g: R₁₌H, R₃ R₂=CH)

4-desmetoxi-6-desoxi-6-amino-3 ¹ -de s amino-4’-desoxi-4'-epi-amino-daunorubicina (lh: R-l=H, R₂ = NH , R₃=OH)

4-desmetoxi-6-desoxi-6-amino-3 ' -desa:nino-4 ’ -desoxi-4 ‘ -epi-gmino-doxorubicina (2h: R₁₌K, R =MH_2Z R₃=OH)

Os novos glicosidos de antraciclina, antibióticos da presente invenção, isto é os compostos de fórmula gerais 1 e 2. ³ão produtos de condensação de (a) aglíconas de fórmula geral 3 ou 6:

/

em que

R^, R₂ e R-j têm os significados definidos antes com a condição de nem R₂ nem R^ representarem um grupo amino, e (b) um halogenoaçúcar protegido de fórmula geral 4:

CF_yCOHN

-6na qual

X representa um átomo de halogéneo, de preferência cloro.

Os métodos de síntese para a preparação das antraciclinas mencionadas anteriormente seguem dois dos métodos: Método a está representado no Esquema I e envol ve a utilização da aglicona de fórmula 3_ e o Método 3 que está representado no Esquema II e envolve a utilização da aglicona de fórmula 6_. A preparação dos compostos amino em C-6 ou C-ll de fórmula geral 2. está representada no Esquema III.

-7Esquema I

2a-f

-3 —

Esguema II

3a-f 6a-f

i: Br₂/dioxano, CK₃COOK;	ii :	4, CF₃3O_?Aç, CH₂C1₂;
iii: K₂CO₃, CK₃OH, 0°C;	iv:	KC(OC)₃, pTSA-piridina
v: 0/1K NaOH, CH₃COOK

/

Esquema III

1) 10%Pd/C ciclohexeno-metanol refluxo 10 min.

2) 0.2N NaOH

3) CH^CCOK ú

Σσ,'η

Método A

A presente invenção proporciona um processo para a preparação de glicosidos de antracicling de fórmula ge ral 1 ou 2, como referido anteriormente, com a condição de, Para um glicosido de fórmula 2, nem R? nem R^ representarem um grupo amino, ou para um seu sal de adição de ácido aceitável do ponto de vista farmacêutico, orocesso este que consiste:

(i) na condensação de um aglicona de fórmula geral :

na qual ‘^2 ^e ^3 têm os significados definidos antes com excepção de R? e não representarem um grupo amino, com um 1-ha1ogeno-2,3,4,6-tetradesoxi-4-(P-trifluoroacetamido)-L-eritro-hexopiranôsido de fórmula geral 4:

/

na qual

X representa um átomo de halogéneo;

(ii) remoção do grupo M-trifluoroacetilo do composto de fórmula geral 5 obtendo-se portanto:

na qual

f ase

Z

R^ têm os significados definidos na íi), de modo a obter-se um glicosido de antraciclina referido de fórmula geral 1 com a condição de R e R₃ nao representarem cada um, um grupo amino;

(iii) se apropriado, converter-se o referido gli. cosido de fórmula geral 1 obtido na fase (ii) num seu sal de adição de ácido aceitável do ponto de vista farmacêutico;

(iv) se apropriado, reduzir-se o referido glicosido de fórmula geral 1 na cual um de R₂ e R-₃ representa um grumo nitro obtido na fase (ii) ou um seu sal referido obtido na fase (iii) de modo a obter-se o glicosido referido de fórmula geral 1 na qual um de R^ ou R₃representa um grupo amino e, se apropriado, converter-se o glicosido referido de fórmula geral 1 em que R? e R₃ representam cada um, um grupo amino no seu sal de adição de ácido aceitável do ponto de vista farmacêutico;

(v) eventualmente, bromar-se o glicosido resultante de fórmula geral 1 preparado na fase (ii) ou um seu sal de adição de ácido aceitá vel do ponto de vista farmacêutico preparado na fase (iii) e hidrolisar-se o derivado re/ι\sultante que comporta um átomo de bromo na posição 14, para se obter o glicosido antra ciclínico corresoondente de fórmula geral

7 θ (vi) converter-se eventualmente, um glicosido de fórmula geral 2 num seu sal de adição de ácido aceitável do ponto de vista farmacêutico.

Este processo permite a preparação de glicosidos antraciclinicos a partir das aglíconas 3_ correspondentes e de um halogenoaçúcar 4_, protegido. 0 processo é idênti co ao descrito na patente de invenção norte americana US—A—4.107.423. O produto de ligação hiarolisa-se oara se obter um derivado de daunorubicina 1. e oode converter-se no derivado de doxorubicina 2. correspondente de acordo com o método descrito na patente de invenção norte américa n_a US-A—3.803.124.

Os compostos iniciais para as sequências reaccionais do Esquema I são os derivados 4-desmetildaunomicinona bem conhecidos (?a: R₁=R₂=R₃=°H), ^a aglicona 4-desmetoxi-4-aminodaunomicinona (3byR^ = NH , R_?=R₃=0H) (patente de invenção europeia EP-A-O2S3.263), 4-desmetoxi-4-fluorodauno micinona (3c:R₁₌F. R₂=R₃=OH) < G.W. Morrov: e J.S^enton,

J. Org. Chem.; 5 2, 713 , 1987 _/ e 4-desmetil-6-desoxidaunomicinona (3d: R-^=R₃=0H, R₂=H) £ patente de invenção norte americana U3-A-4.600.537 J. as nitro agliconas em C-ll e

•7

C_6_# 4-desmetoxi-ll-desoxi-ll-nitrodaunomicinona (3e:R^= =H, R_?=OH, R₃=MO ) e 4 -desmetoxi-6-ds soxi-6-nitrodaunorni cinona (3_f_:R^=H, R^NO?, R-^=OH) descreven-se ambas na pa tente de invenção norte americana US-a-4.749.693.

Faz-se reagir de um modo geral uma aglícona de fórmula 3 à temperatura ambiente na fase (i) com um composto de fórmula geral 4_ na presença de um peneiro molecular e trifluorometano-sulfonato de prata Para se formar um dos N-trifluoroacetilo glicosidos de 5a-f. Os compostos de fórmula geral 1a-f obtêm-se por remoção do grupo de protecção amino mediante hidrólise alcalina moderada. De preferência/ na fase (ii) o composto de fórmula geral

5, dissolvido numa acetona, submete-se a uma temperatura o de 0 C e durante uma hora a uma hidrólise alcalina com hidróxido de sódio aquoso 0,2N para fornecer o glicosido referido de fórmula geral 1« O tratamento com cloreto de hidrogénio metanólico fornece o cloridrato.

Na fase (iv), a redução habitual efectua-se por tratamento com paládio/carvão, por exemplo paládio/carvão a 10%. 0 nitro glicosido de fórmula geral 1 ou um seu sal pode portanto submeter-se a refluxo numa mistura de metanol e ciclohexeno na presença de paládio/carvão a 10% durante dez minutos. O amino glicosido resultante de fórmula geral 1 pode isolar-se sob a form_a do seu cloridrato, referido anteriormente.

De preferência/ o glicosido referido de fórmula geral 1, dissolvido numa mistura de metanol anidro e dioxano, submete-se a tratamento na fase (v) com uma solução

f ce clorofórmio e bromo para se obter o derivado 14 broma do correspondente que se hidrolisa durante dois dias à temperatura ambiente com uma solução aquosa de formato de sódio para se obter o glicosido referido de fórmula geral 2, sob a forma de base livre e, na fase (vi), o re ferido glicosido de fórmula geral 2 isola-se sob a forma do cloridrato correspondente. O isolamento do glicos^i co de fórmula geral 2 sob a forma de cloridrato obtém-se habitualmente mediante tratamento do glicosido com clore to de hidrogénio metanólico.

De acordo com um aspecto deste processo, a 4-desmetildaunomicinona (3a) , dissolvida em cloreto de metileno anidro, fez-se reagir à temperatura ambiente durante uma hora com 1-cloro-2,3,4,6-tetradesoxi-4-(N-trifluoroacetamido)-L-eritro-hexopiranosido (£) na oresença de pe neiros moleculares e trifluorornetano-sulfonato ce prata Para se obter o glicosido N-protegido de fórmula geral 5a gue dissolvido em acetona, se submete à temperatura de 0°2 θ durante uma hora, a uma hidrólise alcalina moderada com solução de hidróxido de sódio acuoso 0,2N, para se obter o composto de fórmula geral la sob a forma de base livre o qual mediante tratamento com cloreto de hidrogénio metanólico anidro se pode isolar sob a forma do cloridrato cor re spondente.

Eventualmente faz-se reagir la com bromo em cloreto de metileno p_ara se obter o derivado 14 bromado a partir do qual após hidrólise à temperatura ambiente durante 43 noras sob atmosfera de azoto com uma solução aquosa de for /

mato de sódio, se obtêm o composto de fórmula geral 2a, sob a forma de base livre e, mediante tratamento com cloreto de hidrogénio metabólico anidro, isola-se o cio ridrato correspondente.

Método B

A presente invenção proporciona um processo para a preparação de glicosidos de antraciclina de fórmula ge Cal 2, como referido anteriormente, com a condição de nem R^ bem X3 representarem um grupo amino ou um seu sal de adição de ácido aceitável sob o ponto de vista farmacêutico, processo este que consiste:

Ci · condensar uma aglicona 14-orotegida de fórmula geral 6:

ζ na qual

R-j_, R? e R^ têm os significados definidos antes, excepto que Rj θ não representam um grupo amino, com um l-halogeno-2,3,4,6-tetradesoxi-4-(K-trifluoroacetamido)-L-eritro-hexipiranosido de fórmula geral 4 como definido antes;

(ii¹) eliminar o grupo de protecção 14 do glicosido N-protegido resultante de fórmula geral 7:

na qual

1'

R.

e R-.

têm os significados definidos antes

K..

para se obter um composto de fórmula geral 8

na gual ^Rl' ^R2 ^{e R}3 ^os significados definidos antes;

(iii‘) converter o composto de fórmula geral 8 num derivado 9,14-ortoform_ato de fórmula geral 9:

/

cia» na fase (ii*), o composto cie fórmula geral 7 trgta-se à temperatura de O°C durante 4 horas e sob atmosfera de azoto com carbonato ds potássio. Geralmente na fase (iii¹) o composto de fórmula geral 8 é tratado com orto formato ce trietilo, por exemplo em cloreto de metileno e na presença de p-tolueno-sulfonato de piricinio durante uma hora à temperatura ambiente.

De preferência na fase (iv’) o composto de fórmu la geral 9 é submetido a uma hidrólise acuosa alcalina mo derada Pata eliminar o grupo N-trifluoroacetilo e tratado depois com ácido acético para se eliminar o grupo de protecção ortoformato para se obter o referido glicosido de fórmula geral 2 sob a forma de base livre, na fase (v‘), é tratado com cloreto de hidrogénio metanólico anidro para se isolar o glicosido sob a forma do cloridrato corres ponde nte,

Mais particularmente, numa forma de realização a 4-desme toxi-ll-desoxi-ll-nitrodaunomicinona ( 3d: R^=H, r₂=OH, R3 = NO₂) dissolve-se em dioxano anidro, trata-se com uma solução de bromo em cloreto de metileno durante duas horas a temperatura ambiente e precipita-se em seguida com hexano. 0 residuo, dissolvido em acetona, é adicionado a acetato de potássio e agitado durante uma hora Para se obter o derivado de acetoxi 6d. O composto é dissolvido em cloreto de metileno anidro e faz-se reagir com 1-cloro-2,3,4,õ-tetrade soxi-4-(M-trifluoroacetamido)-L-eritro-hexopiranósido (4.) como descrito anteriormente, tara se obter o 14-acetoxi-N-trifluoroacetilo de glicosido protegi.

do 7d (

X., na qual r ^R2 ^e °^{s si<}3ⁿi^f irados definido ante s;

(iv') remover o grupo N-trifluoroacetilo e o grupo de protecção ortofornato para se obter o glicosido referido de fórmula geral

2; e (ν') eventualmente, converter o glicosido referi do de fórmula geral 2 num seu sal de adição de ácido aceitável do ponto de vista farmacêutico.

Este processo permite a preparação de glicosidos de antraciclina de fórmula geral _2 mediante ligação de (a) agliconas 14-hidroxiladas e protegidas correspondentes e (b) e, um halogonoaçúcar protegido de fórmula ceral 4_.

O processo é idêntico ao descrito na patente de invenção norte americana U3-A-4.107.423. No Esquema II representa-se a via cara os derivados de doxorrubicina de 2a-f. Os materiais iniciais são as agliconas 3 a - f apropriadas funcionalicadas e protegidas na cadeia lateral nos derivados 14-acetoxi.

Habitualmente, na fase (i'), a aglícona de fórmula geral 6 ras-se reagir à temperatura ambiente com um 1-clorohexapiranósido de fórmula geral 4 na presença de um peneiro molecular e de trisluorometano de prata. 3e preferên

Afim de eliminar os grupos de protecção, o composto de 7d é dissolvido primeiramente em metanol e tra. tado com carbonato de ootássio durante 4 horas à temperatura de 0°C sob atmosfera de asoto para se obter 8d que em seguida se tratou com ortoformato de trietilo em cloreto de metileno e na presença de ρ-tolueno-sulfonato de piridínio durante uma hora à temperatura ambiente, Para se obter o derivado de 9,14-ortoformato 9e. Este submeteu-se a uma hidrólise aquosa alcalina moderada pa ra se eliminar o grupo de protecção N e finalmente tratou-se com ácido acético para eliminar o grupo de protecção ortoformato e se obter o composto le sob a forma de base livre, por tratamento com cloreto de hidrogénio metanólico anidro, isolado com o cloridrato correspondeu te.

A presente invenção proporciona ainda um Para a preparação de glicosidos de antraciclina la geral 2 citados anteriormente, na qual Rj tem ficado definido antes e um de R e R^ representa hidroxi, quando o outro de R₂ e R^ representa um amino, ou o seu sal ce adição de ácido aceitável de vista farmacêutico, processo que consiste:

processo de f órmuo signium grupo grupo do ponto (i¹’) em se reduzir um gruoo nitro em C-6 ou C-ll de um derivado de 9-14 ortoformato de fórmu la geral 9 como definida anteriormente, na qual um de R^ e R^ representa um grupo hidro xi e o outro de R„ e R^ representa o grupo nitro;

(ii) em se eliminar o grupo N-trifluorogcetilo e o grupo de protecção ortoformato do com posto contendo o grupo amino em C-6 ou

C-11 formado deste modo para se obter o glicosido referido de fórmula geral 2; e (iii) eventualmente, em converter-se o referido glicosido de fórmula geral 2 num seu sal de adição de ácido aceitável do ponto de vista farmacêutico.

Esquema III representa a via Para as amino antraciclinas C-6 e C-ll de fórmula geral 2 se iniciarem a Partir dos nitro glicosidos protegidos em C-6 e C-ll correspondentes. Podem converter-se os derivados nitro de 9,14-ortoformato 9e ou 9f respectivamente em amino glico sidos 2q ou 2h por refluxo dos compostos nitro numa mistura de metanol e ciclohexeno na presença de paládio/car vão a 10% durante dez minutos e eliminando-se o grupo K-trifluorogcetilo em meio básico, por exemplo como descri to anteriormente para o Método A ou Método 3 e o grupo de protecção ortoformato com ácido acético. Os compostos 2& e 2h podem converter-se nos seus cloricratos resoectivos mediante tratamento com cloreto de hidrogénio metanólico anidro.

Como é evidente da descrição anterior, os processos da presente invenção relacionam-se com a preparação e /

/

-23»>

utilização de vários novos compostos intermédios. Estes também estão abrangidos pelo âmbito da presente invenção, mais especialmente os compostos de fórmula geral 5 e de a 9.

Esta invenção também proporciona composições far macêuticas contendo um glicosido antraciclínico de fórmu la geral 1 ou 2 ou um seu sal de adição de ácido aceitável do ponto de vista farmacêutico, conjuntamente com um veiculo ou diluente aceitável em farmácia. Pode utilizar-se veículos e diluentes convencionais. A composição pode formular-se e administrar-se de modo convencional.

Os compostos da presente invenção são aplicáveis em métodos de tratamento em seres humanos ou animais como agentes terapêuticos. São úteis como agentes antitumorais. Ê administrada a um doente uma quantidade terapeuticamente eficaz. Pode administrar-se uma quantidade suficiente para inibir o desenvolvimento do tumor. O tumor pode ser um ade_ nocarcinoma do colon ou um tumor de leucemia de células grandes.

Ensaio biológico

A actividade biológica dos compostos de acordo com a presente invenção foi testada in vitro contra células LoVo (adenocarcinoma de colon humano) e LoVo/DX em comparação com a doxorrubicina e 4-desmetoxidaunorrubicina (4-dem-DNR).

-24’ί

Quadro 1 - actividade in vitro

C omposto	C itotoxicidade	após 4b	de tratamento
	(0I50¹	= ng/ml)
	LoVo	LoVo/BX	R.I. ²
Boxorubicina	60	2180	36
4 -dem-BNR	20	125	6
la	1.1	2.7	2.4
lc	1.2	6.0	5.0
lh	4.0	8.6	2.2
2d	1.2	3.8	3.2
2e	48.4	205	4.2
2f	116	2256	19.4
2g	18.8	109	5.8
2h	6.2	90	14.5

1) CI5O = concentração que inibe em 50Ç' o crescimento das colónias

2) I.R. = índice de Resistência = (CI50 LoVo/DX)/(CI50 LoVc

Exemplo 1

Preparação do cloridrato de 4-desmetil-3’-desamino-4*-desoxi-4¹-epi-amino-daunorrubicina (la)

Dissolveram-se 0,76 g (2 mmoles) de 4-desmetildaunomicinona (3a) com 300 ml de cloreto de metileno ani. dro na presença de peneiros moleculares (4 X) . Arrefeceu-se a mistura até à temperatura de 10°C, fez-se borbulhar azoto e adicionou-se gota a gota, sob agitação, com 0,86 g (3,2 mmoles) de 1—cloro-2,3,4,6-tetradesoxi-4—(N-trifluoro acetamido)-L-eritro-hexopiranósido (£) dissolvidos em 40 ml de cloreto de metileno anidro e 0,78 g (3,0 mmoles) de trifluorometano-sulfonato de prata dissolvido em 40 ml de éter dietílico. Após vinte minutos tratou-se a mistura reaccional com 30 ml de solução saturada de carbonato de hidrogénio e sódio aquosa e filtrou-se. Lavou-se a fase orgâ. nica com água, secou-se com sulfato de sódio anidro e eliminou-se o dissolvente sob vácuo. Cromatografou-se o resíduo numa coluna de gel de sílica utilizando-se uma mistura de cloreto de metileno, acetona (a 98:2 em volume) para se obterem 0,8 g de 4-desmetil-3’-desamino-4'-desoxi-4'-epi — -N-trifluoroacetildaunorrubicina (5a) . Eliminou-se o grupo de protecção trifluoroacetilo mediante dissolução do composto 5a em acetona e tratamento com hidróxido de sódio aquoso a 0,2N à temperatura de O°C. Após uma hora ajustou-se o pH da solução para 8,1 e extraiu-se repetidamente com cloreto de metileno. Os extractos orgânicos reunidos, após secagem e concentração até um pequeno volume acidificaram-

6-se para pH 3,5 com cloreto de hidrogénio metanôlico anidro. Após adição de éter dietílico obtiveram-se 0,64 g (rendimento 54%) do composto em título sob a forma de um cloridrato la com um p.f, de 163°-169°C (com decomoosição). CCF em placa de Kieselgel (Merck sistema de dissolventes: cloreto de metileno/metanol/ácido acético/água (80:20:7:3, em volume) Rf:O,73, MS-FD: / M _/+ 497.

¹HroiR (.200 MHz, DMSO-d_ó) 8 ·

1,21 (d, J=6,2Hz, 3H, 5*-CH ), 1,6-1,8 (m, 4H, 2'-CH₂,

3‘ -CH₂). 2,1-2,3 (m, 2H, 8-CH_?) , 2,27 (s, 3H, CCCH₃ ) , 2,85

(m,	1H, 4 ‘ —H)	. 3,95	(m,	2H, 10-CHn)	. 4,11	(dg, J=6,2, 9,9Hz
1H,	5*-H), 4,	98 (m,	1H,	7-H), 5,22	(s, 1H,	9-OH), 7,40 (dd,
J=2	,0, 7,5Hz,	1H, 3·	-H) ,	7,82 (m, 2H	, 1-K,	2-H), 8,10 (bs,
3H,	4 ’ -NH₃ 4-) ,	11,96	(s,	1H, 11-OH),	12,87	(s, 1H, 6-OH),
13,	40 (s, 1H,	4 -OH)

Exemplo 2

Preparação do cloridrato 4-desmetoxi-4-amino-3*-desamino—4 *-desoxi-4‘-epi-amino-daunorrubicina (lb)

Ligaram-se 0,38 g (1 mmole) de 4-desmetoxi-4-_amino-daunomicinona (3b) com 0,37 g (1,5 mmole) de l-cloro-2,3, >5-te tradesoxi —4 —(N—trifluoroa cetamido)—L —e r i t r o —h ex ooi — ranósido (£) seguindo o processo descrito no exemplo 1 p_ara se

/ obter 0,35 g (rendimento 60%) do composto em título lb sob a forma de cloridrato.

CCF em placa de Kieselgel (Merck ^F254^ ' de-dissolventes: cloreto de metileno/metanol/ácido acético/água (80:20:7:3, em volume) Rf:0,45 ¹HNMR (200 MHz, DMSO-dg) & (inter alia):

2,27 (s, 3H, COÇH₃), 2,85 (m, 1H, 4¹-H), 4,98 (m, 1H, 7-H), 6,80 (bd, 2H, 4-NH₂), 6,93 (d, J=8,0Hz, 1H, 3-H), 7,46 (t, J=8,0Hz, 1H, 2-H), 7,64 (d, J=8,0Hz, 1H, 1-H), 8,10 (bs,

3H, 4‘-NH₃+), 13,52 (s, 1H, 11-OH). 14,00 (s, 6-OH)

Exemplo 3

Preparação de cloridrato de 4-desmetoxi-4-fluoro-3 ¹-desamino-4¹-desoxi-4¹-epi-amino-daunorrubicina (lc)

Ligaram-se 0,38 g (1 mmole) de 4-desmetoxi-4-fluoro-daunomicinona (3c) com 0,37 g (1,5 mmole) de 1-cloro-2,3,4,6-tetr_adesoxi-4-(N-trifluoro_acetamido)-L-eritro-hexopiranósido (4) seguindo o processo descrito no exemplo 1 para se obter 0,48 g do derivado N-trifluoro acetilo 5c. Após eliminação do grupo de protecção N, seguindo-se um processo convencional, obtiveram-se 0,40 g (rendimento 74%) do composto em título lc.

CCF em placa de Kieselgel (Merck F₂₅₄) sistema de dissolventes: cloreto de metileno/metanol/ácido acético/água

•a

-28(80:20:7:3, em volume) Rf:O,68, p.f, decomposição)

158°-159°C (com

Exemplo 4

Preparação do cloridrato de 4-de smetil-3 *-de saniino-4 * -de soxi-4*-epi-amino-doxorrubicina (2a)

Dissolveram-se 0,3 g (0,6 mmole) de 4-desmetil-3’-desamino-4’-desoxi-4 *-epi-aminodaunorrubicina (la) numa mistura de metanol anidro e dioxano e adicionararam-se 1,2 ml de uma solução contendo 9 g de bromo em 100 ml de cloreto de metileno de acordo com o método descrito na patente de invenção norte americana US-A-3.803.124, para se obter o derivado 14-bromado gue se dissolveu em 20 ml de acetona e tratou com 0,4 g de formato de sódio dissolvido em 2 ml de água. Agitou-se a mistura reaccional à temperatura ambiente durante dois dias, em seguida adicionou-se água e extraiu-se com cloreto de metileno. Após uma transformação por um método padrão, resultou uma solução vermelha oue se concentrou para um oenueno volume sob vácuo, ajustou-se o pH para 3,5 com cloreto de hidrogénio metanólico anidro e em seguida adicionou-se um excesso de éter dietílico para se obter 0,2 g, (rendimento 75%) do composto em título 2a sob a forma de cloridrato.

CCF em placa Xieselgel (Merck F^^^) sistema de dissolventes: cloreto de metileno/metanol/ácido acético/água (80:20:7:3, em volume) Rf:0,60 /

Preparação de 4-fesmetil-6-desoxi-14-acctll-adrimicinona

Ε χ emolo 5 (6d)

A uma solução de 0,35 g (2,3 mmoles) de 4-desmetil —6-desoxi-caunoraicinona (3 d), dissolvida em 150 ml de dioxano anidro adicionaram-se 4,6 ml de uma solução contendo 9 g de bromo em ICO ml de cloreto de metileno. Dej^ ou-se a mistura à temperatura ambiente durante duas horas, após o que se precipitou o derivado de bromo median te adição de n-hexano o qual se recolheu. Dissolveu-se o resíduo com 300 ml de acetona e adicionou-se sob agitação com 2,7 g de acetato de potássio. Após uma hora a mistura reaccional diluiu-se com cloreto de metileno e lavou-se com água. 5ecou-.se a fase orgânica com sulfato de sódio anidro, filtrou-se e eliminou-se o dissolvente soo pressão reduzida. 0romatoçrafou-se o resíduo numa coluna de gel da sílica Para se obter 0,75 g (rendimento 76%) do composto em título ód.

CCF em placas de Hiaselgel (Merck F ) sistema de dissol/ D ventes: cloreto de metileno/acetona (95:5, em volume)

Rf:0,13

E r —MS : ΪΊ j 4- 4 2 6

2,41 (dd, J=5,7, 13,1 Hz, 1H, Se-H), 2,76-3 (two d ^;'-3Ό7=13,6 Hz, 2Η, 1C-ÇH,,), 4,57 (m, 1H, (two d, 7=17,8 Hz, 2H, COCH OCO), 5,

1H, 7-OH), 6,10 (s, 1H, 9-ÇH), 7,39

1H, 3-H), 7,7-7,9 (m, 2H, 1-H, 2-H), / -H), 5,09-5,23 (d, 7=6,6 Hz, (dd, 7=1,5, 7,9Hz,

7,90 ( s , 1H, 6-H),

12,60-12,90 (two bs, 2H, 4-OH, 11-CH).

Exemplo 6

Preparação de 4-d.e smetil-6-de soxi-3 ¹ -de samino-4 ' -de soxi-= ‘ -epi-?I-trif luoroacetil-doxorrubicina ( Sd)

Dissolveram-se 0,61 g (1,43 mmole) de 4-desmetil-6-desoxi-14-acetil-adriamicinona (ód) com 250 ml de cloreto de metileno anidro e 150 ml de tetra-hidrofurano ani dro. Recolheu-se a mistura à temperatura de 10^0, fez-se borbulhar anoto e adicionaram-se gota a gota sob agitação, g (4 mmoles) de l-cloro-2,3,4,6-tetrgdesoxi-4-(N-trifluoroacctamido)-L-eritro-hexociranósido (£) dissolvido em 50 ml de cloreto de metileno anidro e 1 g (4 mmoles) de tri fluorometanossulfonato de prata dissolvido em 50 ml de éter dietílico. Após 20 minutos tratou-se a mistura reaccional com 20 ml de solução arruosa saturada de carbonato de hidro. génio e sódio e filtrou-se. Lavou-se a fase orgânica com égua, secou-se com sulfato de sódio anidro e eliminou-se o dissolvente sob vácuo. Cromatogradou-se o resíduo sob uma coluna de gel de sílica para se obter 0,4 g (rendimento 44%) de 4-desmetil-6-desoxi-14-acetil-3'-desamino-4'-desoxi -4 *-eoi-N-trifluoroacetildoxorrubicina (7d).

CCF em placa de Kieselgel (Merck 2 , cisterna ce dissolventes: cloreto de metileno/acetona (9:1 em volume), Rf:C,4:

FD-i-ÍS: 63 6 ^-HNMR (200 MHz, DMSO dg) è , (inter alia):

1,06 (d, J=6,0 Hz, 3H, 5 ’ -CH ₃ ) , 1,6-2,0 (m, 5H, S_a:<-H, 2’-ÇH₂' ^{2/05 (s}' ^3H' ^C0CH3 ^{) 3}'^{56 (ra}' ^1H/ ⁴ ' “Η) z

3,93 (m, 1H, 5‘-H) 5,14 (m, 2H, COCH OCO) , 5,17 (m, 1H,

1' -H ) , 9,37 (bd, J=3,6Hz, 1H, HHCOCí\ ), 12,45, 12,91 (tvo s, 2H, 4-OH, 11-OH).

Dissolveu-se o composto 7d em 200 ml de metanol, tratou-se com 2 ml de solução aquosa de carbonato de potássio a 10% à temperatura de 0°C e deixou-se repousar du rante quatro horas a essa temperatura sob atmosfera de azoto. Meutralizou-se a solução com ácido acético, diluiu-se com áçua e extraiu-se o produto com cloreto de metileno. Após filtração em gel de silica recuperaram-se 0,25 g do composto cm titulo 3d (rendimento 39?'').

CCF em placa kieselgel (Merck F_?c.^) sistema de dissolventes cloreto de metileno/acetona (9:1 em volume) Rf:0,26 FD-í-iS: Ζ M _/+ 5 93.

/

Exemplo 7

Preparação do cloridrato de 4-desmeti1-6-desoxi-3¹-desamino-4¹-desoxi-4*-epi-amino-doxorrubicina (2d)

Dissolveram-se 0,2 g (0,33 mmole) do produto 3d, preparado de acordo cora o método descrito no exemplo 6, com 60 ml de cloreto de metileno anidro e adicionaram-se 15 ml de ortoformato de trietilo e 0,1 g de p-toluenossulfonato de piridinio. Após uma hora lavou-se a solução com água, secou-se com sulfato de sódio anidro e reduziu-se até um pequeno volume sob pressão reduzida. Verteu-se a solução em n-hexano e recolheu-se por filtração o precipitado do derivado 9,14-ortoformato

9d.

CCE em placa de Kieselçel (Merck sistema de dissol /04 — ventos: cloreto de raetileno/acetong (95:5, em volume)

Rf:O,7.

Dissolveu-se o resíduo com 200 ml de hidróxido de sódio aquoso 0,2 D e deixou-se a solução durante dez horas à temperatura de S°C sob atmosfera de azoto. Em segui da ajustou-se o ph da solução para 3,5 com ácido acético e extraiu-se com cloreto de metileno. Após transformação, a base livre resultante tratou-se com solução aquosa de ácido acético durante duas horas à temperatura ambiente. Levou-se a mistura até um pH de 3,5 com carbonato de hidro génio de sódio aquoso e extraíu-se com cloreto de metileno. Eliminou-se o dissolvente sob o vácuo e cromatografou-se o

resíduo em coluna de gel de sílica Para se obter 0,12 g (rendimento 66?/ do composto cm título sob a forma de base livre, o gual se transformou no cloridrato 2d por tratamento com cloreto de hidrogénio metanólico anidro. CCF em placa de Kieselgel (I-Íerck *954) sistema de dissol ventes: cloreto de metileno/metanol/ácido acético/áçua (80:20:7:3, em volume) Rf:C,52. p.f, 155°C (com decomposição)

FD-M3: Z M _/+ 4 38 ¹H^ÍR (200 MHz, DM3O d, ) 6 _:

D

1,21 (d, J=6,2Hz, 3H, 5'-CH,), 1,7-2,0

2 ' —CH 3 ' -CH ) —2' — 2 '	2,4-2,5 (m, 1H, 8e-H),
(two d, J=17,7Hz,	2H, 10-ÇH_?), 2,83 (m,
3,95 (dg, J=6,2,	9,3Hz, 1H, 5' -Η), 4,55
2H, ÇH_?OH), 4,76	(m, 1H, 7-H), 4,84 (t,
CH₂0H), 5,20 (m,	1H, l'-H), 5,93 (_s, 1H
(dd, J=l,6, 7,7Hz	, 1H, 3-H), 7,7-7,9 (m

7,74 (s, 1H, 6-H) (m, 5H, 8 a?: —H,

2,77, 3,03

1H, 4'—Η), (d , J-5,5Hz,

J=5,5Hn, 1H, , 9-OH), 7,40 , 2H, 2-H, 1-H

Sxemplo 3

Preparação de 4-desmetoxi-ll-de..-:oxi-ll-nitro-14-acetiladriamicinona (6e}

Transformaram-se 2,3 g (5,7 mmoles) de 4-desmetoxi-11-de soxi-ll-nitro-daunomicinona (3 e) em 1,3 g do composto em título óe (rendimento 70%), seguindo-se o processo descrito no exemplo 5.

CC? em placa Kieselacl (Merck ?„,-,) sistema de dissolventes cloreto de metileno/acetona (95:5, em volume) Rf:0,2.

FD-M3: / M /+ 4 55.

¹HNMR (200 MHz, CDC1₃) & ·.
2,11 (ddd, J=l,8,	5,0, 15,0Hz,
COCH₃), 2,56 (ddd,	J=2,2,	2,2,
(dd, J=2,2, 13,2Hz	, 1H, 10	e —H)
10 ax-H), 3,42 (dc,	J=l,3,	s 3H·
9—OH), 5,04, 5,34	( tv O C,	J = 18
(m, 1H, 7-H), 7,33	(m, 2H,	2-H
4-H), 13,71 (s, 1H	, 6-CH).

1H, Sax-n), 2,13 (s, 3H,

15,0Hz, 1H, 3e-H), 2,33

3,13 (d, J=13,2Hr, 1H, , 1H, 7—OH), 4,68 (s, 1H,

2Hz , 2H, COCH OCO), 5,42

3-H), 3,29 (m, 2H, 1-H, s3 5

Exemplo 9

Preparação de 4-desmetoxi-ll-desoxi-ll-nitro-9,14 -ortoformgto-3^{* 1} -de s amino-4'-de s oxi -4 ¹-epi-N-trifluoroscetil-c (9e )

Condensaram-se 1,75 g (3,8 mmoles) do produto 6e com 1,3 g (5,2 mmoles) de o cloro-açúcar 4_ na presença de trifluorometanossulfonato de prata seguindo-se o processo descrito no exemplo 1, para se obter 1,13 g (rendimento 4451) do derivado 14-acetil-N-trifluoroacetil 7e.

CCF em placa de Kieselgel (Merck 7^^^) sistema ce dissol ventes: cloreto de metileno/acetona (95:5, em volume)

Rf:0,37.

PP —143 : / M 7+ 65 5.

¹HNMR (200 MHz, CDC1₃) 6 :

1,28 (d, J=5,8Hz, 3H, 5 *-ÇH₃ ) , 1,8-1,9 (m, 4H, 2 ¹-ÇH

Ι’-ΡΗ,ρ, 2,10 (dd, J=3,8, 15,0Hz, 1K, S_ax-H), 2,18 (s, 3H, C0ÇH₃), 2,56 (ddd, J=l,6, 1,6, 15,CHz, 1H, 8e-H) 2,94 (dd, J=1,Ó, 13,3Hz, 1H, lOe-H), 3,19 (d, J=18,3Hz, 1H, lOax-H), 3,7-4,1 (m, 2H, 4'-Η, 5'-H), 4,94, 5,32 (two d, J=17,8Hz, 2H, COCH₂OCO), 5,40 (m, 2H„ 7-H,. 1 ’-Η) ,

6,55 (bd, J = 8’,6Hz, .1H, NHÇ=CF₃),, 7,8 7 , (m, > 2H, ‘ 2-H, 3-H), 8,2-8,4 (m, 2H, 1-H, 4-H), 13,70 (s, 1H, 6-OH)

Pissolveu-se o produto 7e com 1000 ml de metaQ nol e, após arrefecimento até à temperatura de O C _adi. cionou-se uma solução aquosa a 10% cie carbonato de sódio, sob agitação e atmosfera de azoto. Após três horas, corrigiu-se o pH da mistura para 7 com ácido acético, diluiu-se com água e extraiu-se o produto com cloreto de metileno mediante aplicação de um processo convencio nal. 0 material impuro cristalizou-se com éter dietílico Para se obterem 0,9 g (rendimento 87%) do composto 4-des. metoxi-11-desoxi-11-nitro-3¹-de s ami no-4' -de soxi-4¹ -ep i-N-trifluoroacetil-doxorrubicina (Se) ,

CCF em placa be Kieselgel (Merck F„-., ) sistema de dissol2 o 4 ventes: cloreto de metileno/acctona (95:5, em volume),

Rf:0,17.

Tratou-se o produto Se com ortoformato de trietilo na presença fe p-toluenossulfcnato de piridínio de acordo com o método descrito no exemplo 7 para se obter 0,78 g (rendimento 76%) do composto em título 9e.

CCF em placa Kieselgel (Merck F_?54) sistema de dissolventes: cloreto de metileno/acetona (95:5, em volume) Rf:0,4S

Exemplo 10

Preoaração de 4-desmetoxi-ll-desoxi-ll-nitro-3

-4'-de soxi-4¹-epi-gmino-doxorrubicina (2e) —de s amino-

✓

Seguindo o processo descrito no exemplo 7, hidrolisou-se primeiro o composto 9e, 0,32 g (0,43 mmole), em meio básico para se eliminar o grupo de protecção M e em seguida com ácido acético para eliminar o grupo de protecção ortoformato. O tratamento com cloreto de hidro génio metanólico anidro forneceu 0,16 g (rendimento 61%) do composto em título 2e sob a forma de cloridrato.

CCF em placa de Kieselgel (Merck F ) sistema de dissol ventes: cloreto de metileno/metanol/ácido acético (80:20:1 em volume) Rf:0,3C p.f. 159°C (.com decomposição)

MS-FD: f M >+ 5 27.

¹HNMR (200 fflz, DM50 dg, 50°C ) & :

1,23 (d, J=6,2Hs, 3H, 5¹-CF/ ), 1,7-1,9 (m, 4K, 2' -OH , ³ ' -^CH2⁾ ' ^{2,26 2K}' ^e~^C?:2 ^{2,32 (m}' ^2K' ¹⁰~^CH;È' ' 2,34 (m, In, 4¹-H), 4,16 (dg, J=6,2, 9,5Hz, 1H, 5*-H), 4,4-4,7 (m, 3H, CCCM₂OH, CCCH₂0H), 5,03 (m, 1H, 7-H), 5,24 (m, 1H, l’-H), 5,53 (s, 1H, 9-OH), 7,98 (m, 2H, 2-H, 3-H), 8,1-8,3

Cm, 2H, 1-H, 4-H),

Exemplo 11

Preparação do cloridrato de 4-desmctoxi-ll-desoxi-ll-amino —3'-desamino-4 *-desoxi-4¹-epi-amino-doxorrubicin_a (2g)

V

Dissolveram-se 0,32 ç (0,43 mmole) de 4-desmetoxi-ll-desoxi-ll-nitro-9,14 —etil-ortoformato-3'-de saci i no-4¹-desoxi-4'-cpi-N-trifluoroacet ildoxorrubi cina (9e) , preparada de acordo com o método descrito no exem pio 9, em 200 ml de metanol e adicionaram-se 20 ml de ciclo-hexeno e 0,2 g de paládio/carvão a 10%, sob agita ção. Submeteu-se a mistura a refluxo durante des minutos e em seguida arrefeceu-se até à temperatura ambiente e eliminou-se o catalisador por filtracção e o dissolvente sob vácuo. Retomou-se o resíduo com hidróxido de sódio aguoso 0,2 N e mantcve-se durante oito horas à temperatu ra de 10°C sob atmosfera de acoto. Após o que se corrigiu o pH da solução para 5 com ácido acético e se deixou em repouso durante duas horas à temperatura ambiente. Neutra lixou-se a mistura com carbonato de hidrogénio e sódio aquoso e extraiu-se com cloreto de metileno, para se obter após transformação, o derivado ll-_amino sob a forma de base livre, O tratamento com cloreto de hidrogénio matanólico forneceu 0,15 ç (rendimento 55%) do composto em título

2£.

F em placa de Ki ventss: cloreto de em volume) Rf :0,23 selgel (Merck ? ^) sistema de dissolmetileno/metanol/ácido acético (30:20:1, — 1 « Ο η , O.-, f -1 . \

p.-. io2 -10¾ e (com oecomposiçao), /+ 4 97

^xhsir	(200 MHz, DM30 d₆, 5O°O) ξ> :
1,23 (	d,	•7 = 6,2Hz, 3H., ο*—ΟΗβ), 1,7-1,9	(m,	4H, 2'-Çn_?,
-¹ 0	),	2,21 (m, 2H, 8-ÇH ) , 2,80 (m,	2H,	4 ¹-H) , 2,83

/ ( _3 9· ( m, 2Η, 1C —C Η ) , , 13 (δα» J-6,2, 9,5 He, ln, 5 —η) ,

4,67 (m, 3H, CQCl-χθΗ, COCH₂CH) , 5,C5 (m, IH, 7-H) ,

5,28 (m, IH, 1*-H), 5,31 (s, 111, 9-OH), 7,38 (m,

2%, 2-H_, 3 —H) , 3,2 7 (m, 2H, 1”H, 4—H), 8,13, 3,4 0 (tvo bm, 4H, 11-HH , 4 '-HH₂) .

Exemolo 12

Preparação de 4-desmetoxi-ó-desoxi-ó-nitro-14-acetiladriaaiicinona ( 6f )

Transformaram-se 2 g (5 mmoles) de 4-desmetoxi-6-desoxi-6-nitro-daunomicinona ( 3 f) p_ara se obter 1,7 g (rendimento 75,6%) do derivado 14—acetil 6f de acordo com o método descrito no exemplo 5,

CCF em placa de Xieselgel (Merck ^F254 ^ cisterna de dissolventes: cloreto de metileno/acetona (95:5, em volume)

Rf:0,32.

FD—M3: / M j + 455 l-HMMR (200 Mns, COCE-,) 6 :

2,12 (dd, J=14,9, 1 , SHc, IH , 8_ax-H), 2,20 (s, 3K, CCOCH-, ) , 2,53 (ddd, J=2,0, 2,4, 14,9Hz, IH, 8e-H), 3,15 (d, J=19,3 Hc, IH, 10aX-H), 3,38 (dd, J=2,0, 19,3Hz, 1Π, lOe-H),

3,43 (m, IH, 7-OH), 5,00 (m, IH, 7-H), 5,15, 5,31 (two d, J=17,9Hz, 2H, C0ÇH_?CC0), 7,89 (m, 2H, 2-K, 3—Η), 8,30 (m, 2H, 1-H, 4 —H), ,46 (

II11-OH)

40Exemplo 13

Preparação de 4-desmetoxi-ó-desoxi-6-nitro-9,14-ortoformato-3*-de s amino-4 ¹ -de soxi-4 *-epi-K-trifluoroacetildoxorrubicina (9f)

Condensaram-se 1,7 g (3,7 mmoles) de 4-desmetoxi-6-desoxi-6-nitro-14-acetil-adriamicinona (6f) com 1,6 g (6 mmoles) de l-cloro—2,3,4,6-tetradesoxi—4—(N—trifluoroacetamido) -L-eritro-hexopiranósido (4_) em presença de tri_ fluorometanossulfonato de prata de acordo com o método descrito no exemplo 1, para se obter 1 g (rendimento 41%) do derivado M-trifluoroaceti 1o 7f.

CCF em plgca de Kieselgel (Merck ) sistema de dissolventes: cloreto de metileno/acetona (95:5, em volume)

Rf:0,50.

ED—MS: /«7+ 6 65

Trataram-se 0,5 g (0,75 mmole) do composto 7f com ortoformato de trietilo em presença de p-toluenossulfonato de piridínio de acordo com o método descrito no exemplo 9 para se obter, após separação cromatografica, 0,3 ç (rendimento 60%) do composto em título 9f sob a forma da mistura de dois diastereoisómeros com uma relação molecular de 80/20.

^.1^

CCF em ol_aca de Kieselgel (Merck 1^54^ sistema de dissol^ ventes: cloreto de metileno/acetona (95:5, em volume)

Rf:0,65.

SlNMR (220 MHz, CDC1₃) £

1,1-1,3	(m, 6H, 5* -CH-,,	ock₂çh₃),	1,6-2,0 (m,	4H, 2' -CH/,
3’-ÇH₂),	2,3-2,7 (m, 2H,	8-ÇH₂j' ³	,3 j (s, 2H,	10—ÇK₂),
3,6-3,7	(m, 2H, OCH₂CH₃)	, 3,75 (m.	1H, 4'-H),	3,90 (dg,
J=6,2, 9	,5Hz, 1H, 5'-H),	4,32, 4,4	5 (tv; o d , J:	= 17,4 Hz ,

0OCH^O major isomer), 4,20 minor isomer), 4,87 (m, 1H

5,3Hz, 1H, 7-H major, 7-H CH-OCH₂CH₃ major, CH-OCFHC 1H, NHCOCF₃), 7,85 (m, 2H, , 4,35 (two d, J=16,8Hz, COCH₂ , l’-H), 5,01, 5,14 (dd, J=5,3 minor), 5,70, 5,72 (s, 1H,

Ηβ minor), 6,04 (hd, J=9,0Hz,

2-H, 3-H), 3,27 (m, 2K, 1-H,

4-H), 13,52, 13,55 (s

1H, 11-OH major, 11-OH minor)

Exemplo 14

Preparação do cloridrato de 4-desmetoxi-6-desoxi-6-nitro—3¹ -desamino-4'-de soxi-4'-epi—aminod oxorrubicina (2f)

Dissolveram-se 0,3 g (0,44 mmole) do composto 9f, preparado de acordo com o método descrito anteriormente, em 200 ml de hidróxido de sódio aquoso 0,2 N e manteve-se durante dez horas à temperatura de 0°C sob atmosfera de azoto, Corrigiu-se o pH da solução para 8,5 com ácido acé.

/ tico e extraíu-se con cloreto da metileno. Ajustou-se o PH da solução aquosa Para Q/l e extraiu-se repetidamente com cloreto de metileno. Os extractos orgânicos reunidos, após secagem e concentração até um pecueno volume, foram acidificados para pH 3,5 com cloreto de hidrogénio nietanólico anidro.

Após adição de éter dietílico obtiveram-se 0,062 g (rendimento 25%) do composto em titulo 2f sob a forma de cloridrato.

CCF em placa de Kieselgel (Merck F 5 ) sistema de dissolventes: cloreto de metileno/metanol/ácido acático/água (30:4:1:0,5 em volume) Rf:0,30. o.f. 155°-157°C (com deconroosição).

MG-FD: /H y+ 5 27 ¹KfJMR (200 MHz, DM30 dg) £ :

1,18	(d,	J=S,3Hz, 3H,	5’-ÇH₃), 1,6-1,9 (m, 4H, 2'-OH₂,
3 ’ -OH	2) '	2,1-2,5 (m,	2H, 8-ÇH₂), 2,84 (m, 1H, 4 '-H) ,
3,01	(m,	2H, 10-0K_?),	4,06 (dg, J=6,3, 9,2Hz, 1H, 5-H)
4,53	(m,	2H, OH₂CH),	5,07 (m, 1H, 7-H), 5,26 (m, 1H,
1' -H)	, 5/	50 (m, 1H, OH₂ÇH), 7,8o (m, 2H, 2-H, 3-H),
8,14	(bs,	3 Η, 4 ' - MH ₃ +	), 8,24 (m, 2H, l-H), 4-H)

ί

'.—4 3

Sxemplo 15

PreograçgQ de cloridrato de 4-desmetoxi-6-desoxi-6-amino-3 ' -ce s a mi π o-4 ' -desoxi-4 ' -eoi-arnino-doxorrubicing ( 2h)

Dissolveram-se 0,15 g (0,22 irmole) do derivado 9,14 -ortof ornato 9f, preparado ce acordo com o método descrito no exemplo 13, em 150 ml de metanol e 15 ml de ciclo-hexeno e trataram-se com 0,15 g de paládio/carvão a 10/ de acordo com o método descrito no exemplo 11, pa ra se obterem, após adição de cloreto de hidrogénio meta nólico anidro, 0,02 g do derivado ó-amino 2h, (rendimento 18,5%).

CCF em placa de Kieselgel (Merck 7 5^ ) sistema de dissol ventes: cloreto de metileno/metanol/ácido acético/áçua (30:4:1:0,5, em volume) Rf:C,22.

ΜΞ-FD: Zm7+ 4 97.

1_T.

HNMR (200 MHz , DM3C dg, 50°C) è _:

1,13 (d	, J=6,	3 Hz ,	3H,	5' -CH	₃), 1,6-1,	9 (m,
²	,1-2,5	(m,	2H,	8-ÇH₂	), 2,84 km	, 1H,
2H, 10-	ÇH.₂ ) ,	4,06	(bcj	, J=6,	3, ?,3Hz,	1H, 5
£h₂op),	(D _z 0 í	(m,	1H,	7-H) ,	5,26 (1H,	1¹ -H)
ck₂çh),	7,8S	(m,	2H,	λ - r —1 2 -η, J	-Η) , 8,14	(b s,

, 4-H)

8,24 (m, 2H, 1-H /

44Exemplo 16

Preparação do cloridrato de 4-fesmetoxi-6-desoxi-6-nitro-3¹-desamino-4¹-desoxi-4¹-epi-anino-daunornibicina (lf)

Condensaram-se 0,73 g (1,76 mmole) de 4-cesmetoxi-6-desoxi-6-nitro-daunomicinona ( 3 f ) com l-cloro-2,3,4,6-tetrade soxi-4 -(E-trifluoroacetamido)-L-eritro-hexopiranó sido (4_) , seguindo-se o processo descrito no exemplo 1 pa ra se obter 0,26 g do composto em título lf sob a forma de cloridrato (rendimento 62/).

CCP em placa de Kieselgel (Merck Fsistema de dissolventes: cloreto de metileno/metanol/ácido acético/água (30:20:7:3, em volume) Rf = 0,42.

511

4-H); 13,55 (s, 1H, 11-0H).

Ε >: e mo lo 17

Preparação do cloridrato de 4-desmetoxi-6-desoxi-6-amino-3¹-desamino-4'-de soxi-4¹-epi-arainodaunorrubicina (lh)

Dissolveram-se 0,3 g (0,5 mmole) do comnosto lf em 200 ml de metanol e 20 ml de ciclo-hexeno e trataram-se com 0,2 g de paládio/carvão a 10%. Após refluxo durante dez minutos eliminou-se o catalisador por filtração e o dissolvente sob vácuo. Após cristalização com metanol/éter dietílico, obtiveram-se 0,2 g do composto em título lh sob a forma de cloridrato (rendimento 76%).

CCF em placa de Kieselçel (Merck F„_c,) sistema de dissolventes: cloreto de metileno/metanol/ácido acético/água (80:20:7:3, em volume) .Rf = 0,39.

MS-FD: f K/+ 431

1.

H NMR (2CC MHz, DM30-d, inter alia S :

1/18 (d,	J-6,3
3 ’ -<?H_? ) ;	2/1-2
(m, 2H,	1C-ÇH_?
lH, 7-H)	; 5,26

8,10 (bs

Hz, 3H, 5‘-ÇH₃);

(m, 2H, 8-ÇH_?); ; 4,06 (bg, J=6,3 (m, 1H, 1' —H) ; 7,

-t.n + 0,2-0,¾

1,6-1,9 (m, 4H, 2' -CH_?,

2,84 (m, 1H, 4’-K); 3,01 , 9,3Hz, 1H, 5-H); 5,7 (m,

3-7,9 (m, 2H, 2-H, 3-H);

( m, 2 Η ,

-Η, 4 -H) .

Εχ3mplo IS

Preparação do cloridrato de 4—èesmetoxi-ll-desoxi-11-nitro—3 ' -dc-samino-4 ¹ -desoxi-ê ¹ -eoi-amino-dgunorrubicina (le)

Condensarara-r.e 0,58 g (1,46 mmole) de 4-desmetoxi-11-desoxi-ll-nitro-daunomicinona (3e) com o açúcar (4_) seguindo-se o processo descrito no exemplo 1 para se obterem, após a transformação habitual, 0,5 g do composto em título le sob a forma de cloridrato (rendimento 61%)

CCF em placas de Kieselgel Merck ₂5í sistema de dissolventes: cloreto de metileno/metanol/ácido acético/água, (30:20:7:3, em volume) Rí = 0,44.

MS-FD flí_y ⁷+ 511.

NMR (200 MHc, DM30-d₆) inter alia zÇ :

1,18		J=6,3H, 3H, 5’-OH.);	1,6-1,3	(m,	2 ’ -ÇH ₂ ,
3 ’ -CH	2^ '	2,1-2,5 (m, 2H, 8 -CH₂)	; 2,37 (	s,	3M, CCÇK₃ ) ;
3,07	(m,	2H, 10-ÇH_?); 4,06 (bg,	U - O Z -7 /	q 3	Hz, 1H, 5'-H);
5,03	(m,	1H, 7-H); 5,22 (m, 1H,		~ r> ' f '	-7,9 (m, 2H ,
2-H,	3-H)	; 3,10, bs, 3H, 4-KH_₃-h	\ * o / z Z - ~ ''	λ t	(τη, 2H, 1H,

4H) , 13,7 (s, 1ΙΪ, 6-CH)

Exemplo 19

Preparação co cloridrato de 4-desmetoxi-ll-desoxi-ll-aT,ino-3' -d-csaaino-4 ' -desoxi-4¹ -epianir.odaunorrubicinA (ia)

Transformaram-se 0,2 ç (0,3b mmole) do composto le no seu derivado amino reduzido (lg) seguindo-se o processo descrito no exemplo 17. Rendimento 30%.

CCF em pi_acas Kieselgel (Merck F.^, ) sistema de dissolventes: cloreto de metileno/metanol/ácido acótico/água, (30:20:7:3, em volume) Rf = 0,41.

MS-FD: /M/+ 431

Claims

REIVINDICAÇÕES

1.- Processo para a preparação de compostos de fórmula geral (1) ou (2) em que

R^ representa um átomo de hidrogénio ou de flúor ou um grupo hidroxi ou amino; e

R^ e R^ representam, ambos, um grupo hidroxi ou um dos símbolos ^e ^3 representa um átomo de hidrogénio ou um grupo nitro ou amino e o outro um grupo hidroxi, com a condição de em um glicosido de fórmula geral
2 nem Fb, nem R^ representarem um grupo amino, e dos seus sais de adição de ãcido aceitáveis sob o ponto de vista farmacêutico, caracterizado pelo facto (i) de se condensar uma aglícona de fórmula geral na qual

R^, R₂ e R^ têm os significados definidos antes excepto que nem o símbolo R₂ nem o símbolo R^ representam um grupo amino, com um l-halogeno-2,3,4,6-tetradesoxi-4-(N-trifluoroacetamido)-L-eritro-hexopiranosido de fórmula geral· na qual

X representa um átomo de halogéneo;

(ii) de se eliminar o grupo N-trifluoroacetilo do composto resultante de fórmula geral na qual ^R1' ^R2 ^{e R}3 tê™ ^os significados definidos antes, para se obter um glicosido antraciclínico de fórmula geral 1 na qual e R^ não representam um grupo amino;

(iii) de se converter, eventualmente, o glicosido resultante de fórmula geral 1 preparado na fase (ii) em um seu sal de adição de ãcido aceitável sob o ponto de vista farmacêutico;

(iv) de se reduzir, eventualmente, o glicosido resultante, de fórmula geral 1, preparado na fase (ii), na qual um dos símbolos R₂ e R^ representa um grupo nitro ou um seu sal preparado na fase (iv) , para se obter um glicosido de fórmula geral 1 na qual um dos símbolos R^ e R^ representa um grupo amino e de se converter, eventualmente, o glicosido resultante de fórmula geral 1, na qual um dos símbolos R^ e R^ representa um grupo amino, em um seu sal de adição de ãcido aceitável sob o ponto de vista farmacêutico;

(v) de se bromar, eventualmente, o glicosido resultante de fórmula geral 1 preparado na fase (ii) ou um seu sal de adição de ãcido ί *3 aceitável sob o ponto de vista farmacêutico preparado na fase (iii) e de se hidrolisar o derivado resultante que comporta um áto mo de bromo em posição 14 para se obter o glicosido antraciclínico correspondente de fórmula geral 2,- e (vi) de se converter, eventualmente, um glicosido de fórmula geral 2 em um seu sal de adição de ãcido aceitável sob o ponto de vista farmacêutico.

2. - Processo de acordo com a reivindicação 1, para a preparação da 4-desmetil-3'-desamino-4¹-desoxi-4¹-epi-amino-daunorubicina, um glicosido antraciclínico de fórmula geral 1, ou do seu cloridrato, caracterizado pelo facto de se utilizar compostos iniciais correspondentemente substituídos.
3. - Processo de acordo com a reivindicação 1, para a preparação da 4-desmetoxi-4-amino-3'-desamino-4'-desoxi-4'-epi-aminodaunorubicina, um glicosido antraciclínico de fórmula geral 1, ou do seu cloridrato, caracterizado pelo facto de se utilizar compostos iniciais correspondentemente substituídos.
4. - Processo de acordo com a reivindicação 1, para a preparação da 4-desmetoxi-4-fluoro-3 ' -desamino-4'-desoxi-4'-epi-amino-daunorubicina, um glicosido antraciclínico de fórmula geral 1, ou do seu cloridrato, caracterizado pelo facto de se utilizar compostos iniciais correspondentemente substituídos.

/

-525.- Processo de acordo com a reivindicação 1, para a preparação da 4-desmetil-3'-desamino-4'-desoxi-4'-epi-amino-doxorubicina, um glicosido antraciclínico de fórmula geral 2, ou do seu cloridrato, caracterizado pelo facto de se utilizar compostos iniciais correspondentemente substituídos.
6. - Processo de acordo com a reivindicação 1, para a preparação da 4-desmetil-6-desoxi-3'-desamino-4'-desoxi-4'-epi-amino-doxorubicina, um glicosido antraciclínico de fórmula geral 2, ou do seu cloridrato, caracterizado pelo facto de se utilizar compostos iniciais correspondentemente substituídos.
7. - Processo de acordo com a reivindicação 1, para a preparação da 4-desmetoxi-ll-desoxi-ll-nitro-3'-desamino-4'-desoxi-4 ' -epi-amino-doxorubicina , um glicosido antraciclínico de fórmula geral 2, ou do seu cloridrato, caracterizado pelo facto de se utilizar compostos iniciais correspondentemente substituídos
8. - Processo de acordo com a reivindicação 1, para a preparação da 4-desmetoxi-ll-desoxi-ll-amino-3¹-desamino-4'-desoxi-4 ¹ -epi-amino-doxorubicina , um glicosido antraciclínico de fórmula geral 2, ou do seu cloridrato, caracterizado pelo facto de se utilizar compostos iniciais correspondentemente substituídos.
9.- Processo de acordo com a reivindicação 1, para a : --53preparaçao da 4-desmetoxi-6-desoxi-6-nitro-3’-desamino-4¹-desoxi-4¹-epi-amino-doxorubicina, um glicosido antraciclínico de fórmula geral 2,ou do seu cloridrato, caracterizado pelo facto de se utili zar compostos iniciais correspondentemente substituídos.
10. - Processo de acordo com a reivindicação 1, para a preparação da 4-desmetoxi-6-desoxi-6-amino-3'-desamino-4'-desoxi-4'-epi-amino-doxorubicina, um glicosido antraciclínico de fórmula geral 2, ou do seu cloridrato, caracterizado pelo facto de se utili.

zar compostos iniciais correspondentemente substituídos.
11. - Processo de acordo com a reivindicação 1, caracterizado pelo facto de se fazer reagir, na fase (i) , a aglícona de fórmula geral 3 ã temperatura ambiente com um 1-cloro-hexopiranosido de fórmula geral 4 na presença de um peneiro molecular e de trifluorometano-sulfonato de prata.
12.- Processo de acordo com as reivindicações 1 ou 11, caracterizado pelo facto de se submeter na fase (ii) o composto de fórmula geral 5, dissolvido em acetona, ã temperatura de 0°C e durante 1 hora, a uma hidrólise alcalina suave com uma solução aquosa de hidróxido de sódio 0,2N para se obter um glicosido de fórmula geral 1.
13.- Processo de acordo com uma qualquer das reivindica-54- ções 1, 12 ou 13, caracterizado pelo facto de se tratar na fase (v) o glicosido de fórmula geral 1 resultante, dissolvido em uma mistura de metanol anidro e dioxano, com uma solução clorofõrmica de bromo para se obter o derivado correspondente com um átomo de bromo em posição 14 e de se hidrolisar este último, durante dois dias, ã temperatura ambiente, com uma solução aquosa de formato de sódio para se obter um glicosido de fórmula geral 2 sob a forma de base livre e de se isolar, na fase (vi), esse glicosido sob a forma do seu cloridrato.
14.- Processo de acordo com a reivindicação 1, para a preparação de compostos de fórmula geral 2, na qual R₂ ^e não representam um grupo amino, ou dos seus sais de adição de ácido aceitáveis sob o ponto de vista farmacêutico, caracterizado pelo facto:

(i') de se condensar uma aglícona protegida em posição 14 de fórmula geral

OCOCH

OH na qual

R^, R₂ ^e Κβ têm os significados definidos antes, excepto que R₂ e R^ não representam um grupo amino, com um l-halogeno-2,3,4,6-tetradesoxi-4-(N-trifluoroacetamido)-Leritro-hexapiranosido de fórmula geral 4;

(ii*) de se eliminar do glicosido N-protegido resultante de fórmula geral ococh₃ na qual ^R1' ^R2 ^{e R}3 ^os i^cad°^s definidos antes, o grupo protector colocado em posição 14, para se obter um composto de fórmula geral na qual

R , R^ e R^ têm os significados definidos antes;

(iii') de se converter o composto de fórmula geral 8 em um 9,14-ortoformato de fórmula geral na qual ^R1' ^R2 ^{θ R}3 ^os significados definidos antes;

(iv¹) de se eliminar o grupo N-trifluoroacetilo e o grupo protector do radical ortoformato para se obter um glicosido de fórmula geral 2;

e (ν') de se converter, eventualmente, esse glicosido de fórmula geral 2 em um seu sal de adição de ãcido aceitável sob o ponto de vista farmacêutico.
15.- Processo de acordo com a reivindicação 14, caracterizado pelo facto de se fazer reagir, na fase (i¹), uma aglícona de fórmula geral 6, ã temperatura ambiente, com um 1-cloro-hexapiranosido de fórmula geral 4 na presença de um peneiro molecular e de trifluorometano-sulfonato de prata.

,/-57*»
16. - Processo de acordo com as reivindicações 14 ou 15, caracterizado pelo facto de se tratar, na fase (ii¹), um composto de fórmula geral 7, ã temperatura de 0°C, durante 4 horas e sob atmosfera de azoto, com carbonato de potássio.
17. - Processo de acordo com uma qualquer das reivindicações 14 a 16, caracterizado pelo facto de se tratar, na fase (iii'), um composto de fórmula geral 8, citada antes, com ortoformato de trietilo.
18. - Processo de acordo com a reivindicação 17, caracterizado pelo facto de se tratar um composto de fórmula geral 8 com ortoformato de trietilo no seio de cloreto de metileno e na presença de p-tolueno-sulfonato de piridínio, durante 1 hora, ã temperatura ambiente.
19.- Processo de acordo com uma qualquer das reivindicações 14 a 13, caracterizado pelo facto de, na fase (iv'), se submeter um composto de fórmula geral 9 a uma hidrólise alcalina suave, em meio aquoso, para eliminar o grupo N-trifluoroacetilo e de se tratar com ãcido acético para eliminar o grupo protector do radical ortoformato para se obter um glicosido de fórmula geral 2 sob a forma de base livre e de se tratar esta última, na fase (ν'), com ãcido clorídrico em solução metanõlica anidra para isolar o glicosido sob a forma de cloridrato.

•5820. - Processo de acordo com a reivindicação 1, para a preparação de compostos de fórmula geral 2 na qual R^ tem o significado definido antes e um dos símbolos R₂ e R^ representa um grupo hidroxi e o outro um grupo amino, ou de um seu sal de adição de ãcido aceitável sob o ponto de vista farmacêutico, caracterizado pelo facto (i) de se reduzir o grupo nitro em posição 6 ou 11 de um 9,14-ortoformato de fórmula geral 9 na qual um dos símbolos R₂ e R^ representa um grupo hidroxi e o outro um grupo nitro;

(ii*') de se eliminar o grupo N-trifluoroacetilo e o grupo protector do radical ortoformato do composto resultante que comporta um grupo amino em posição 6 ou 11 para se obter um glicosido de fórmula geral 2;

e (iii) de se converter, eventualmente, o glicosido resultante de fórmula geral 2 em um seu sal de adição de ãcido aceitável sob o ponto de vista farmacêutico.
21. - Processo de acordo com a reivindicação 20, caracterizado pelo facto de se realizar a fase (i) mediante aquecimento a refluxo de um 9,14-ortoformato de fórmula geral 9 no seio de uma mistura de metanol e ciclohexeno na presença de paládio a 10% sobre carvão, durante 10 minutos.
22. - Processo de acordo com as reivindicações 20 ou 21, ca-59- racterizado pelo facto de se eliminar, na fase (ii), o grupo N-trifluoroacetilo em meio alcalino e de se eliminar o grupo protector do radical ortoformato com ãcido acético para se obter um glicosido de fórmula geral 2 e de se converter este último, na fase (iii), mediante tratamento com ãcido clorídrico em solução metanõlica anidra, no seu cloridrato.
23.- Processo para a preparação de composições farmacêuticas apropriadas para o tratamento de tumores, caracterizado pelo facto de se misturar uma quantidade efectiva de um composto de fórmula geral 1 ou 2, quando preparado pelo processo de acordo com a reivindicação 1, como ingrediente activo, com um veículo ou diluente aceitável em farmácia,

Lisboa, 6 de Fevereiro de 1990 O A~3 ite Cfiba! da Prcp: td-do (ndusfric!

60RESUMO

PROCESSO PARA A PREPARAÇÃO DE NOVAS 4'-EPI-4’-AMINO-ANTRACICLINAS E DE COMPOSIÇÕES FARMACÊUTICAS QUE AS CONTÊM

Descreve-se um processo para a preparação de compostos de fórmula geral e dos seus sais de adição de ácido aceitáveis sob o ponto de vista farmacêutico, que consiste:

(i) em condensar uma aglícona de fórmula geral com um l-halogeno-2,3,4,6-tetradesoxi-4-(N-trifluoroacetamido)-L-eritro-hexopiranosido de fórmula geral

-6 2(ii) em eliminar o grupo N-trifluoroacetilo do composto resultante de fórmula geral para se obter um glicosido antraciclínico de fórmula geral 1 na qual R₂ e R^ nao representam um grupo amino;

(iii) em converter, eventualmente, o glicosido resultante de fórmula geral 1 preparado na fase (ii) em um seu sal de adição de ácido aceitável sob o ponto de vista farmacêutico;

(iv) em reduzir, eventualmente, o glicosido resultante, de fórmula geral 1, preparado na fase (ii) , na qual um dos símbolos

R₂ e R^ representa um grupo nitro, ou um seu sal preparado na fase (iii), para se obter um glicosido de fórmula geral 1, na qual um dos símbolos R₂ e R^ representa um grupo amino, e em converter, eventualmente, o glicosido resultante de fórmula geral 1, na qual um dos símbolos R₂ e R^ representa um grupo amino, em um seu sal de adição de ácido aceitável sob o ponto de vista farmacêutico;

(v) em bromar, eventualmente, o glicosido resultante de fórmula geral 1 preparado na fase (ii) ou um seu sal de adição de ácido aceitável sob o ponto de vista farmacêutico preparado na fase (iii) e em hidrolisar o derivado resultante que comporta um átomo de bromo em posição 14 para se obter o glicosido antraciclínico correspondente de fórmula geral 2; e (vi) em converter, eventualmente, um glicosido de fórmula geral 2 em um seu sal de adição de ácido aceitável sob o ponto de vista farmacêutico.

Estes compostos utilizam-se como agentes antitumorais.

Lisboa