PT91323B

PT91323B - Processo para a preparacao de glicosidos antraciclinicos, de antraciclinonas 4-substituidas intermedias e de composicoes farmaceuticas que os contem

Info

Publication number: PT91323B
Application number: PT91323A
Authority: PT
Inventors: Walter Cabri; Silvia De Bernardinis; Franco Francalanci; Sergio Penco
Original assignee: Erba Farmitalia
Priority date: 1988-07-29
Filing date: 1989-07-31
Publication date: 1995-03-01
Also published as: WO1990001490A1; DK14691D0; CA1337985C; AU3983689A; FI91762C; FI910412A0; HUT56847A; ES2045282T3; FI91762B; GR3003511T3; HU208106B; EP0354995B1; DK14691A; AU619331B2; HU894607D0; IL91100A0; JPH04500956A; EP0354995A1; IL91100A; US5218130A

Description

FARMITALIA CARIO ERBA S.R.L.

PROCESSO PARA A PREPARAÇAO DE GLICOSIDOS ANTRACICLÍNICOS, DE ANTRACICLINONAS 4-SUBSTITUIDAS INTERMÉDIAS E

DE COMPOSIÇÕES FARMACÊUTICAS QUE OS CONTÊM

A presente invenção refere-se a antraciclinonas intermédias e a glicósidos antraciclínicos obtidos a partir destas.

De acordo com a presente invenção, proporcionaram-se antraciclinonas 4-substituídas de fórmula geral

OH

COOR (I) na qual

R representa um átomo de hidrogénio ou um grupo alquilo, alcenilo ou alcinilo de cadeia linear ou ramificada com até 10 átomos de carbono, de preferência até 4 átomos de carbono.

Os compostos preferidos são;

4-desmetoxi-4-metoxicarbonil-daunomicinona e

Os compostos de fórmula geral (I) são compos2 tos intermédios chave para a preparação de glicósidos antitumorais. Deste modo a presente invenção proporciona ainda glicósidos antraciclínicos de fórmula geral

• na qual

R tem o significado definido antes e representa um átomo de hidrogénio ou um grupo hidroxi, e os seus sais aceitáveis sob o ponto de vista farmacêutico. Os sais de adição de ácido preferidos são os cloridratos.

Os compostos preferidos são:

4-desmetoxi-4-metoxicarbonil-daunomicina e os seus cloridra tos.

A presente invenção também proporciona um processo para a preparação de antraciclinonas 4-3ubstituídas de fórmula geral (I) citada antes, o qual consiste na carbonilação da 4-desmetil-4-sulfonil-13-dioxolanil-daunomicit nona de fórmula geral

na qual

R* representa um grupo alquilo com 1 a 10 átomos de carbono comportando, eventuaimente, como sub_s tituinteís) um ou mais átomos de halogéneo ou grupos arilo facultativamente substituídos por 1 átomo de halogéneo, um grupo alquilo, alcoxi ou nitro, com monóxido de carbono na presença de um composto nucleófi lo de fórmula geral R-OH, na qual R tem o significado definido antes, uma base orgânica ou inorgânica e um catalisador de fórmula geral

ML L' n m (III) na qual

M representa um átomo de um metal de transição,

L e L¹ , iguais ou diferentes, representam, cada um, um amião ou uma molécula neutra e n e m representam, cada um, zero ou um número inteiro de 1 a 4,

- 4 ^7 para se obter um composto de fórmula geral

u νζ

COOR tt na qual

R tem o significado definido antes, e remover-se o grupo protector de 13-oxo por meio de hidrólise ácida.

A presente invenção também proporciona um processo para a preparação de um glicósido antraciclínico de fórmula geral IX ou um seu sal aceitável sob o ponto de vista farmacêutico, o qual consiste:

(i) em se fazer reagir uma antraciclinona 4-substituída de fórmula geral (I) com um açúcar halogenado de fórmula geral

(X) na qual

Hal representa um átomo de halogéneo e em que os grupos 3”-amino e 4-hidroxi estão eventualmen te protegidos, e remover-se do produto obtido os grupos protectores even-

tualmente presentes para se obter, deste modo, um glicósido antraciclínico de fórmula geral (IX) na qual R^ representa um átomo de hidrogénio;

(ii) se apropriado, converter-se o referido glicósido de fórmula geral (IX) assim obtido em um seu sal aceitável sob o ponto de vista farmacêutico;

(iii) e bromar-se, eventualmente um glicósido de fórmula geral (IX) ou um seu sal aceitável sob o ponto de vi£ ta farmacêutico e hidrolisar-se o derivado 14-bromado resultante para se obter o glicósido correspondente de fórmula geral (IX) na qual R-^ representa um grupo hidroxi; e (iv) converter-se, eventualmente, o referido glicósido de fórmula geral (IX), na qual R^ representa um grupo hidroxi, em um seu sal aceitável sob o ponto de vista farmacêutico.

Os compostos de fórmula geral (I) obtêm-se a partir de 4-sulfonilantraciclinonas de fórmula geral

na qual R* representa um grupo alquilo com 1 a 10 átomos de carbono; um átomo de halogéneo ou poli-halogenado tal como um grupo alquilo, por exemplo um grupo perfluoroalquilo; ou (II)

- 6 um grupo arilo tal como um grupo fenilo comportando, eventualmente, pelo menos um substituinte, por exemplo 1 a 3 átomos de halogéneo ou grupos alquilo, alcoxi ou nitro. 0 átomo de halogéneo pode ser um átomo de cloro ou de flúor.

Os grupos alquilo e alcoxi podem ter 1 a 10 átomos de carbono, por exemplo 1 a 4 átomos de carbono. Grupos preferidos por R sao os grupos trifluorometano-sulfonilo, 4-fluorofenilo e 4-tolilo.

Os compostos de fórmula geral (II) podem preparar-se a partir da daunomicinona de ocorrência natural de fórmula IV, como descrito nos pedidos de patente de invenção europeia If°s 89301282.3 e 89303418.1.

(IV)

Mais especificamente, um composto de fórmula geral (II) pode preparar-se a partir de daunomicinona (+) de fórmula (IV) (Esquema 1 seguinte). Esta, pode preparar-se por uma hidrólise apropriada de daurorubicina, por sua vez obtida por fermentação como descrito no pedido de patente de invenção norte-americana N2 4012284. A daunomicinona é desmetilada mediante tratamento com tricloreto de alumínio no seio de um dissolvente orgânico inerte, tal como nitrobenzeno, à temperatura de refluxo, para se obter 4-desmetildaunomicinona, que é designada também como carminomicinona

- 7 (VI)o Este processo está descrito no pedido de patente de invenção norte-americana Ns 4188377.

grupo 13-ceto de 4-desmetildaunomicinona é protegido mediante tratamento com etilenoglicol, na presença de ácido jo-tolueno-suliónico, à temperatura de refluxo. 0 composto resultante de fórmula geral VII ê sulfonado na posição C4-0H para dar um composto de fórmula geral II, sem qualquer protecção dos grupos OH restantes. 0 agente de sulfonação é um cloreto de sulfonilo de fórmula geral

R* -so₂ci (VIII) na qual

R¹ tem o significado como definido antes.

De preferência, a reacção realiza-se no seio de piridina. Deve sublinhar-se que esta sulfonilação selectiva não afecta qualquer dos grupos fenólicos em posição C6-OH e Cll-OH ou benzilico C7-OH somente sob condições especificas, designadamente por reacção do derivado de 4-desmetildaunomicinona (VI) com o cloreto de sulfonilo na presença de Ν,Ν-diisopropiletilamina e uma quantidade catalítica de 4-dimetilamino-piridina.

processo desta invenção permite a formação de ligação carbono-carbono na posição C-4, sob condições moderadas para formar compostos de fórmula geral (I) que, de outro modo, só se obteriam por síntese química total.

Além disso, deve notar-se que nenhum dos grupos funcionais restantes é afectado pela reacção e que a estereoquímica nas posições C-7 e C-9 é completamente preservada.

Mais particularmente, os compostos de fórmula geral (I) preparam-se mediante reacção dos compostos de fór mula geral (II) com monóxido de carbono, no seio de um dissolvente que contem um composto nucleófilo apropriado de fórmula geral ROH, na qual R tem o significado definido antes, na presença de um composto de fórmula geral (III) (como catalisador) (III) na qual M representa um átomo de um metal de transição, L e L* , iguais ou diferentes, representam cada um, um anião tal como Cl“ ou CH^COO* ou uma molécula neutra, tal como uma molécula de um dissolvente, uma mono- ou di-fosfina, um fosfito ou uma diamina; nem representam zero ou um número inteiro de 1 a 4. Habitualmente, m+n é pelo menos igual a 1, por exemplo 1,2,3 ou 4. Os metais de transição preferidos representados por M são o paládio ou o níquel. Grupos preferidos representados por L e/ou L* podem ser difosfinas de quelação tais como 1,3-difenilfosfinopropano ou 1,1-bis(difenilfosfino)-ferroceno. 0 composto de fórmula geral (II) é, portanto, carbonilado com um complexo de um metal de tran sição, de preferência um átomo de um metal de transição escolhido entre, por exemplo, paládio e niquel, e um ligando de quelação tal como referido anteriormente. A relação molar átomo metálico de transição/ligando de quelação está compreendida entre 1:1 e 1:4.

Os compostos de fórmula geral (II) são dissolvidos habitualmente num dissolvente polar apropriado e adi- 9 cionados, sob atmosfera de monóxido de carbono, a uma solução do catalisador, quer preformada quer formada in situ a partir de precursores apropriados, na presença de um nucleó. filo de fórmula geral ROH e de uma base. Bases apropriadas são as trialquilaminas e carbonatos e hidróxidos de metais alcalinos ou de metais alcalinos-terrosos. A temperatura da reacção está usualmente compreendida entre 0° e 150¾ de preferência entre 30° e 100°C e o catalisador é geralmente utilizado numa relação molar para (II) compreendida entre

1:1 e 1:10000 de preferência entre 1:20 e 1:1000. A pressão 2 do monóxido de carbono pode variar entre 101 e 101 x 10 KPa (1 a 100 atmosferas), de preferência entre 101 e 101 x 10 KPa (1 a 10 atmosferas).

Os compostos assim obtidos, de fórmula geral

na qual R tem -o singifiçado definido antes, transformam-se facilmente nos produtos finais (I) por hidrólise ácida do grupo protector no grupo carbonilo C-13. Os compostos (I) são recuperados.

Numa variante preferida, faz-se reagir uma

4-desmetil-4-sulfonil-13-dioxolanil-daunomicinona de fórmula geral (II), dissolvida em dioxano ou dimetilformamida, a uma temperatura compreendida entre 0° e 150°C, na presença de um nucleófilo de fórmula geral R-OH, na qual R tem o significado definido antes, de uma base orgânica ou inorgânica e de um catalisador de fórmula geral (III) na qual M representa um átomo de paládio ou níquel, Lei? representam, cada um, independentemente, um anião Cl^- ou CH^COO” , uma molécula de dissolvente, uma mono- ou difosfina, um fo£ fito ou uma diamina e m/n representa 1,2,3 ou 4, para se obter um composto de fórmula geral (V), o qual após tratamento, à temperatura de 0¾ durante 15 minutos, com ácido trifluoroacético, dá a 4-alcoxicarbonil-antraciclinona de fórmula geral (I) que, subsequentemente, é purificada por cromatografia em coluna de gel de sílica utilizando-se um sistema eluente de clorofórmio/acetona (95:5 em V/V).

Esquema 1

(IV)

cdcr (V) (I) /

f

A carbonilação de sulfonatos de arilo já foi descrita para moléculas simples /Tetrahedron Lett. 27, (1986) 3931; J. Chem. Soc.com. (1987), 904; J. Am. Chem. Soc. 110 (1988), 15577,mas numca foi referida na quimica da antraciclina, provavelmente devido à presença de outros grupos fun cionais interferentes_o Os problemas decorrentes da presença dos referidos grupos, nomeadamente a aromatização do núcleo A, formação de derivados 7-desoxi, hidrólise do derivado

4-sulfonilo e/ou modificações do radical quinona podem suprimir-se sob as condições da presente invenção. Além disso, compostos ésteres de fórmula geral (I) podem transformar-se facilmente noutros derivados mediante técnicas convencionais, por exemplo nas amidas correspondentes que se podem preparar por tratamento com uma amina apropriada.

Um glicósido antraciclínico de fórmula geral (IX), na qual representa um átomo de hidrogénio, prepara-se por reacção de uma antraciclinona de fórmula geral (I) com um halogeno-açúcar de fórmula geral (X). Na fórmula geral (X), Hal representa tipicamente um átomo de cloro. Se o grupo 3”-amino estiver protegido, o grupo protector pode ser um grupo trifluoroacetilo. Se o grupo 4-hidroxi estiver protegido, o grupo protector pode também ser um grupo trifluoroacetilo. A condensação da antraciclinona de fórmula geral (I) e do halogeno-açúcar de fórmula geral (X) geralmente realiza-se na presença de trifluorometano-sulfonato de prata (triftato).

Pode dissolver-se a antraciclinona num dissol vente orgânico inerte tal como o dicloreto de metileno, tendo a reacção lugar sob atmosfera inerte tal como uma atmos- 13 ( ’ fera de árgon, a uma temperatura compreendida entre 5° e

30°C, tipicamente à temperatura ambiente. Podem remover-se quaisquer grupos protectores mediante hidrólise alcalina moderada, por exemplo mediante tratamento com hidróxido de sódio aquoso O,1N. De preferência, o glicósido antraciclínico isola-se sob a forma do cloridrato correspondente, por tratamento da base livre com ácido clorídrico metanólico.

glicósido antraciclínico de fórmula geral IX, na qual R^ representa um átomo de hidrogénio, ou um dos seus sais, pode converter-se no derivado de doxorubicina correspondente, no qual R^ representa um grupo hidroxi, por bromação na posição 14 θ por hidrólise do derivado 14-bromado com formato de sódio aquoso. As condições de bromação e hidrólise são habitualmente as descritas no pedido de patente de invenção norte-americana N2 4122076 e no pedido de patente de invenção britânica N2 1217133.

Mais especificamente, o glicósido de fórmula geral (IX), na qual R-^ representa um átomo de hidrogénio, ou um dos seus sais, pode fazer-se reagir com bromo no seio de clorofórmio para se obter um derivado 14-bromado a partir do qual, após hidrólise à temperatura ambiente e durante 48 horas sob atmosfera de azoto com uma solução aquosa de formato de sódio, se obtém um composto de fórmula geral (IX), na qual R-^ representa um grupo hidroxi, sob a forma de base livre e, por tratamento com ácido clorídrico metanólico anidro, se isola sob a forma do seu cloridrato.

A presente invenção proporciona composições farmacêuticas que contêm um glicósido antraciclínico de fór mula geral IX ou um seu sal aceitável sob o ponto de vista

- 14 farmacêutico, conjuntamente com um diluente ou veículo acei. tável em farmácia. Podem-se utilizar veículos e diluentes convencionais. A composição pode ser preparada e administra da de um modo convencional.

Os compostos da presente invenção são úteis em métodos de tratamento de animais ou de seres humanos.

São utilizáveis como agentes anti-tumorais, administrando-se ao doente uma quantidade eficaz sob o ponto de vista terapêutico. Pode administrar-se uma quantidade suficiente para inibir o crescimento do tumor. 0 tumor pode ser um adenocarcinoma do cólon ou um tumor de leucemia de Gross.

Os exemplos que seguem, de 3 a 8, ilustram a presente invenção.

EXEMPLO 1

4-desmetil-13-dioxolanll-daunomicinona (VII)

Adicionou-se a uma solução de 15,04 g (37,8 mmoles) de daunomicinona (IV) em 1,4 litro de cloreto de metileno, sob agitação e atmosfera de azoto, 52,8 g (396,4 mmoles) de tricloreto de alumínio anidro, por porções, durante um período de uma hora e meia. Submeteu-se a mistura reaccional a refluxo durante uma hora e, em seguida, eliminou-se o dissolvente por destilação. Adicionou-se cuidadosamente ao residuo uma solução de 22,8 g (25,4 mmoles) de ácido oxálico em 200 ml de água arrefecida à temperatura de 0° C e agitou-se a mistura durante duas horas à temperatura ambiente. Recolheu-se o produto sólido por filtração, lavou -se com água e suspendeu-se em 400 ml de benzeno. Adicionaram-se em seguida 30 ml de etilenoglicol e 0,3 g de ácido ( ’ p-tolueno-sulfónico e submeteu-se a mistura reaccional a refluxo com a eliminação azeotrópica de ãgua durante cerca de 6 horas. Após arrefecimento até à temperatura ambiente, recolheu-se o sólido por filtração, lavou-se com água e eta nol para se obterem, após secagem, 11,3 g de (VII). Por análise de HPLC o produto apresentou uma pureza de 98%.

Análise de HPLC:

Coluna: MERCK RP 18/7 /im (250 x 4,2 mm).

Pase móvel:

A-heptano-sulfonato de sódio Ο,ΟΙΜ/ácido fosfórico

0,02 M 6 acetonitrilo 4

B-metanol 7 acetonitrilo 3

Gradiente: de 20% de B até 70% de B em 25 minutos,

Caudal: 1,5 ml/minuto

Detector: UV a 254 nm.

RMH¹H 300 MHz (em CDCl^:=1,42 (3H,s), 1,94 (lH,dd), 2,42 (lH,dt), 2,75 (lH,d), 3,18 (lH,dd), 4,04 (4H,s), 5,20 (lH,dd), 7,25 (lH,d), 7,65 (lH,t), 7,84 (lH,d), 12,18 (lH,s), 12,92 (lH,s), 13,52 (lH,s).

E.M.: m/z = 428 (M⁺ pico-base).

TLC sobre placa de Kieselgel P 254 (MERCK) utilizando-se clorofóimio/acetona (a 8:2 em volume) Rf = 0,52.

EXEMPLO 2

4-desmetil-4-trifluorometasulfonil-13-dioxolanil-daunomicinona (II; R¹ = CE-,)

A uma solução de 11 g (25,7 mmoles) de (VII), ml (128,5 mmoles) de diisopropiletilamina e 3,8 g (25,7 mmoles) de 4-dimetilaminopiridina em 1,1 litro de piridina, arrefecida à temperatura de 0°C, adicionaram-se 12,7 ml (75,5 mmoles) de anidrido trifluorometano-sulfonilo e agitou-se esta mistura reaccional durante uma hora à temperatura ambiente, em seguida arrefeceu-se a mistura reaccional a 0°C e adicionaram-se 5 litros de cloreto de metileno e 3 litros de ãcido clorídrico a 10%. Após separação da. fase orgânica lavou-se com água, secou-se sobre sulfato de sódio e evaporou-se o dissolvente sob pressão reduzida para se obterem 13,75 g de um produto sólido que, submetido a refluxo durante 15 minutos em 350 ml de etanol e filtrado, deu 8,25 g de (II; R* = CP^), (HPLC: 91%, condições descritas no Exemplo 1).

RmA 300 MHz (em CDCl-j): / -1,47 (3H,s), 1,98 (1H, dd) , 2,45 (1H, d), 2,79 (1H, d), 3,21 (2H, m), 3,82 (1H, bs) , 4,09 (4H,s), 5,27 (1H, bs), 7,63 (1H, d), 7,88 (1H, t), 8,48 (1H, d), 13,26 (1H, s), 13,48 (1H, s).

E.M. : m/z = 560 (M⁺, pico-base).

TLC sobre placa de Kieselgel P 254 (MERCK), utilizando-se clorofórmio/acetona, (a 8:2 em volume) Rf = 0,56.

EXEMPLO 3

4-desmetoxi-4-metoxicarbonil-daunomicinona (I; R = CH^) .

A uma solução de 1 g de 4-desmetil-4-trifluoro metano-sulfonil-13-dioxolanil-daunomicinona (II; R'= CF^), (1,78 mmoles) em 50 ml de dioxano sob atmosfera de rnonóxido de carbono, adicionaram-se sucessivamente 0,85 ml de trin-butilamina, 3 ml de metanol, 37 mg de 1,3-difenilfosfinopropano (0,089 mmole) e 20 mg de acetato de paládio (0,089 mmole). Agitou-se a mistura reaccional à temperatura de 60°C até cessar a obsorção de rnonóxido de carbono e, em seguida, arrefeceu-se a 0°C, acidificou-se com ácido clorídrico a 10% e extraíu-se com cloreto de metileno. Evaporou-se a fase orgânica até à secura, obtendo-se 0,82 g de 4-desmetoxi-4-metoxicarbonil-13-dioxolanil-daunomicinona impura.

(V; R = CH₃), (HPLC 95%).

RMN¹H 300 MHz (emCDCl₃):r = 1,98 (IH, dd, J=14,5: 4,7 Hz), 2,47 (lH,d, J=14,5 Hz), 2,79 (IH, d, J=19 Hz), 3,1-3,32 (2H, m>, 3,87 (IH, bs), 4,02 (3H, s), 4,1 (4H, s), 5,26 (lH,bs), 7,72 (IH, dd, J=7,7: 1,2 Hz), 7,85 (IH, t, J=7,7; 1,2 Hz), 13,18 (lH,s), 13,26 (lH,s).

U.V. (em EtOH): A = 523, 490, 462, 286, 254, 206 nm:Λ max= = 254 nm.

I.V. (KBr pastilha): 0 = 3510, 3390, 1736, 1623, 1575 cm¹. /”°</pO(c = 0,1 em dioxano) = + 133°

E.M. m/z = 470 (M⁺, pico-base)

TLC sobre placa de Kieselgel F 254 (MERCK) utilizando-se clorofórmio/acetona (a 9:1 em volume) Rf = 0,28.

Agitou-se a 4-desmetoxi-4-metoxicarbonil-13-dioxolanildaunomicinona impura à temperatura de 0°C em 15 ml de ácido trifluoroacético e 0,25 ml de água durante 15 minutos. Diluiu-se a mistura reaccional com 150 ml de água e extraíu-se com cloreto de metileno. Lavou-se a fase orgânica com solução saturada de hidrogeno carbonato de sódio e com água até à neutralidade, secou-se com sulfato de sódio e evaporou-se atê à secura. Cromatografou-se o resíduo em gel de sílica, (clorofórmio/acetona, a 95:5 em volume, como eluente) obtendo-se 0,542 g (rendimento de 71,5% a par tir de II; R*= CF^) de 4-desmetoxi-4-metoxicarbonil-daunomicinona (I; R = CH^), (HPLC 98%).

RmA 300 MHz (em CD01₃): y = 2,04 (1H, dd, J = 14,5; 4,7

Hz), 2,32 (1H, d, J=14,5 Hz), 2,45 (3H,s), 2,87 (LH, d, J= = 19 Hz), 3,08 (1H, dd, J=19; 1,8 Hz), 4,02 (3H,s), 4,21 (LH, bs), 4,76 (1H, s), 5,21 (1H, bs), 7,71 (1H, dd, J=7,7;l,2

Hz), 7,87 (1H, t, J=7,7 Hz), 8,38 (1H, dd, J=7,7; 1,2 Hz),

12,88 (1H, s), 12,98 (1H, s).

U.V. (em EtOH): = 522, 489, 461, 253, 206 nm; max= 253 nm.

I.V. (KBr, pastilha) : Ϊ = 3440, 1735, 1713, 1622, 1576 cm¹.

/ο</ρθ(ο = 0,1 em dioxano) = + 145°

E.M. m/z 426 (M⁺, pico-base)

TLC sobre placa de Kieselgel F 254 (MERCK) utilizando-se clorofórmio/acetona (a 9:1 em volume) Rf = 0,40.

- ί

EXEMPLO 4 (I, R = CHJ

Realizou-se a reacção tal como descrito no Exemplo 3, excepto na utilização de dimetilformamida (50 ml) como dissolvente e 1,1*-bis(difenilfosfino)-ferroceno (49 mg, 0,89 mmole) como ligando para o paládio, obtendo-se 0,456 g de 4-desmetoxi-4-metoxicarbonil-daunomicinona (I, R = CH^), (HPLC 97,6%). Rendimento a partir de (II) : 60%.

EXEMPLO 5 (I, R = CHJ

Realizou-se a reacção tal como descrito no Exemplo 3, com excepção da utilização de 50 ml de dimetilformamida como dissolvente e 1,2-bis/N-(1-feniletil),N-(difenilfosfino)-amino/-etano (57 mg, 0,089 mmole) como ligando para o paládio, obtendo-se 0,500 g de 4-desmetoxi-4-metoxicarbonil-daunomicinona (I, R = CH^), (HPLC 98,2%). Rendimento a partir de (II) : 66%.

EXEMPLO 6 (I, R = CH₂ - CH₂ - CH = CH₂)

A uma solução de 1 g de 4-desmetil-4-trif luoro. metano-sulfonil-13-dioxolanil-rdaunomicinona (II, R'= CP^) , (1,78 mmole) em 50 ml de dioxano, sob atmosfera de monóxido de carbono, adicionaram-se sucessivamente 0,5 ml de trietilamina, 3 ml de 3-buten-l-ol, 37 mg de 1,3-difenilfosfinopro20

pano (0,089 mmole) e 20 mg de acetato de paládio (0,089 nrnio le) o

Agitou-se a mistura reaccional à temperatura de 60°C até cessar a absorção de monóxido de carbono. Em seguida, arrefeceu-se a 0°C, acidificou-se com ácido clorídrico a 10% e extraíu-se com cloreto de metileno. Evaporou-se a fase orgânica até à secura e cromatografou-se o resíduo em gel de sílica (clorofòrmio/acetona a 95:5 em volume como eluente) obtendo-se 0,568 g, (rendimento de 62,3%) de

4-desmetoxi-4-( 3' -buten-1* -oxi)-carbonil-13-dioxolanil-daunomicinona. (HPLC 98%)·

RmA 300 MHz (em CDC1₃) : 1 1,97 (1H, dd, J=4,9; 14,6 Hz), 2,46 (1H, dt, J=14,6; 1,8 Hz), 2,55 (2H, q, J=6,8 Hz), 2,78 (1H, d, J=19 Hz), 3,2 (1H, s), 3,24 (1H, dd, J=19; 1,8 Hz), 3,86 (1H, bs), 4,1 (4H, s), 4,5 (2H, t, J=6,8 Hz), 5,1 (1H, d, J=10,2), 5,17 (1H, d, J=17,3 Hz), 5,25 (1H, bs), 5,77-5,93 (1H, m), 7,70 (1H, dd, J=l,7; 1,3), 7,85 (1H, t, J=7,7 Hz), 8,42 (1H, dd, J=7,7; 1,3), 13,18 (1H, s), 13,26 (1H, s).

U.V. (em EtOH):/ = 523, 489, 462, 288, 254, 205 nm; λ max = = 254 nm

I.V. (KBr, pastilha):7 = 3440, 1723, 1624, 1576 cm^-1.

E.M. : m/z = 510 (M⁺, pico-base)

TLC sobre placa de Kieselgel P 254 (MERCK) utilizando-se clorofòrmio/acetona (a 9:1 em volume) Rf = 0,45.

Tratou-se o produto obtido anteriormente (V, R = -CHg-C^-CH = C^), com ácido trifluoroacético tal como descrito no Exemplo 3 para se obter 0,467 g de 4-desmetoxi-4-( 3* -buten-1* -oxi) -carbonil-daunomicinona (I, R = -CH₂-CH₂-CH = CH₂), (HPLC 96%), (56,1% a partir de III, R*= CP₃) .

ΉΚΙΝ^Ή 300 MHz (em CDCl^): Z = 2,10 (1H, dd, J=4,8; 14,7),

TLC sobre placa de Kieselgel P 254 (MERCK) utilizando-se clorofórmio/acetona ( a 9:1 em volume) Rf = 0,50.

EXEMPLO 7

Preparação de cloridrato de 4-(metoxicarbonil)-4-(desmetoxi)-daunomicina

A uma soluçSo agitada de 0,549 g (1,28 mmole) de 4-( desmetoxicarbonil)-4-(desmetoxi)-daunomicinona em 80 ml de cloreto de metileno, à temperatura ambiente, sob atmos_ fera de ârgon, adicionou-se uma solução de 0,599 g (1,67 mmole)de clorodaunosamina em 10 ml de cloreto de metileno e uma solução de 0,431 g (1,67 mmole) de AgCE^SO^ em éter dietílico (14 moles), simultaneamente, durante um período

I ζ· { de 10 minutos. Após 30 minutos, adicionou-se 0,135 ml de piridina e filtrou-se a mistura reaccional por dicalite.

Lavou-se a solução com ácido clorídrico a 1% e em seguida com água, secou-se com sulfato de sódio e evaporou-se sob vazio.

Retomou-se o resíduo com 10 ml de acetona, arrefeceu-se a 0°C e tratou-se com hidróxido de sódio 0,75 M (10 ml). Após uma hora, adicionou-se cloreto de metileno e água e ajustou-se o pH para 4 com ácido clorídrico a 3%. Separou-se a fase aquosa, depois do que se tratou com hidró. xido de amónio a 1% até pH 8 e se extraiu com (3 x 100 ml) de cloreto de metileno. Recolheram-se as fases orgânicas, secaram-se com sulfato de sódio e evaporaram-se sob vazio. Purificou-se o produto por cromatografia em coluna de gel de sílica (CH₂Cl₂/MeOH/CH₃COOH/H₂O; 180/25/2/3). Diluiram-se com água fracções recolhidas e ajustou-se o pH para 8 com hidróxido de amónio a 1%. Separou-se a fase orgânica, que se secou e se evaporou sob vazio para se obter 0,302 g da base livre.

A uma solução da base livre numa quantidade mínima de clorofórmio, adicionou-se 0,255 ml de HC.l/MeOH

2,1 M, arrefecendo-se até cerca de 10°C. Filtrou-se o precipitado, lavou-se com éter dietilico e secou-se, obtendo-se 0,237 g do composto em título. (HPLC = 96,95%)·

RMN^H 200 MHz (DMS0-d6): £ (ppm) = 1,16 (3H, d; J=6,9 Hz),

1,71 (IH, m), 1,91 (IH, m), 2,12 (2H, m), 2,28 (3H, s), 2,97 (2H, bs), 3,37 (IH, m), 3,57 (IH, bs), 3,93 (3H, s), 4,21 (IH, q; J=6,9Hz), 4,94 (IH, bs), 5,30 (IH, bs), 5,49 (IH, d; J=6,l Hz), 5,59 (1H, s), 7,90 (2H, m), 7,93 (1H, bd;

J=7,7 Hz), 8,02 (1H, t; J=7,6 Hz), 8,40 (1H, dd, J=7,7 Hz , J=l,3 Hz), 13,1 (2H, bs).

U.V. (EtOH) : X = 487,6, 252,4, 205,2 nm \ max = 252,4 nm.

TLC sobre placa de Kieselgel P 254 (MERCK) utilizando-se cloreto de metileno/metanol/ácido acético/água (8:2:0,7:0,3 em volume) Rf = 0,73

EXEMPLO 6

Preparação de cloridrato de 4-(metoxicarbonil)-4-(desmetoxi)-doxorubicina

Preparou-se o composto em título a partir do cloridrato de 4-(metoxicarbonil)-4-(desmetoxi)-daunomicina de acordo com o processo descrito no pedido de patente de invenção norte-americana N2 4122076. Dissolveu-se 0,2 g de cloridrato de 4-(metoxicarbonil)-4-(desmetoxi)-daunomicina numa mistura de metanol anidro e dioxano. Adicionou-se uma solução de 1 g de bromo em 10 ml de cloreto de metiieno como descrito no pedido de patente de invenção norte-americana N2 4122076 para se obter 0 derivado 14-bromado. Hidrolisou-se este derivado à temperatura ambiente durante 48 horas, sob atmosfera de azoto, com uma solução aquosa de formato de sódio. Deste modo, obteve-se 4-(metoxicarbonil)-4-(desmetoxi) -doxorubicina que, por tratamento com ácido clorídrico metanólico anidro, foi isolado sob a forma do seu cloridrato.

Claims

REIVINDICAÇÕES

1.- Processo para a preparaçao de compostos de fórmula geral na qual

R representa um átomo de hidrogénio ou um grupo alquilo, alcenilo ou alcinilo de cadeia linear ou ramificada com até 10 átomos de carbono e

R^ representa um átomo de hidrogénio ou um grupo hidroxi e dos seus sais aceitáveis sob o ponto de vista farmacêutico, caracterizado pelo facto (i) de se fazer reagir uma antraciclona 4-substituída de fórmula geral na qual

R tem o significado definido antes, com um açúcar halogenado de fórmula geral na qual

Hal representa um átomo de halogéneo e os grupos 3-amino e 4-hidroxi estão eventualmente protegidos, e de se eliminarem os grupos protectores eventualmente presentes do produto resultante para se obter um composto de fórmula geral IX na qual R^ representa um átomo de hidrogénio;

(ii) de se converter, eventualmente, o composto de fórmula geral IX resultante num seu sal aceitável sob o ponto de vista farmacêutico;

(iii) de se bromar, eventualmente, um composto de fórmula geral

IX, citado antes, ou os seus sais aceitáveis sob o ponto de vista farmacêutico e de se hidrolisar o derivado 14-bromado resultante para se obter o glicosido correspondente de fórmula geral IX na qual representa um grupo hidroxi;

-26(iv) de se converter, eventualmente, o glicosido de fórmula geral IX, citado antes, na qual R^ representa um grupo hidroxi em um seu sal aceitável sob o ponto de vista farmacêutico.
2.- Processo para a preparação de compostos intermédios de fórmula geral na qual

R tem o significado definido antes na reivindicação 1, caracterizado pelo facto de se carbonilar uma 4-desmetil-4-sulfonil-13-dioxolanil-daunomicinona de fórmula geral

II na qual

R' representa um grupo alquilo ^comP°^rtanbo, eventualmente, como substituinte(s) um ou mais átomos de halogéneo ou um grupo arilo eventualmente substituído por átomos de halogéneo ou grupos alquilo, alcoxi ou nitro, com monóxido de carbono na presença de um nucleõfilo de fórmula geral R-OH, na qual R tem o significado definido antes, de uma base orgânica ou inorgânica e de um composto de fórmula geral

III na qual

M representa um átomo de um metal de transição,

L e L', iguais ou diferentes, representam, cada um, um anião ou uma molécula neutra e n e m representam zero ou um número inteiro de 1 a 4, como catalisador, para se obter um composto de fórmula geral

COOR

OH na qual

R tem o significado definido antes, e de se eliminar o grupo protector do radical 13-oxo por hidrólise ãcida.
3.- Processo de acordo com a reivindicação 2, para a preparação de compostos de fórmula geral I na qual R representa um ãtomo de hidrogénio ou um grupo alquilo, alcenilo ou alcinilo de cadeia linear ou ramificada com até 4 átomos de carbono, caracterizado pelo facto de se utilizar compostos iniciais correspondentemente substituídos.
4.- Processo de acordo com a reivindicação 2, para a preparação da 4-desmetoxi-4-metoxicarbonil-daunomicinona ou da 4-desmetoxi-4-(but-3'-en-1'-oxi)-carbonil-daunomicinona, caracterizado pelo facto de se utilizar compostos iniciais correspondentemente substituídos.
5.- Processo de acordo com a reivindicação 2, caracterizado pelo facto de se fazer reagir a 4-desmetil-4-sulfonil-13-dioxolanil-daunomicinona de fórmula geral II citada antes, dissolvida em dioxano ou em dimetilformamida, a uma temperatura compreendida entre 0° e 150°C na presença de um nucleófilo de fórmula geral R-OH na qual R tem o significado definido na reivindicação 2, de uma base orgânica ou inorgânica e de um composto de fórmula geral III, citada antes, na qual M representa paládio ou níquel,

L e L’ representam, cada um, independentemente, um anião Cl , um grupo CH^COO , uma molécula de dissolvente, uma mono- ou difosfina, um fosfito ou uma diamina, como catalisador, e m+n representa um numero inteiro de 1 a 4, para se obter um composto de fórmula geral V que, após tratamento ã temperatura de 0°C e durante 15 minutos com ácido trifluoroacético, fornece uma antraciclinona 4-substituída de fórmula geral I que depois se purifica por cromatografia em coluna contendo gel de sílica e utilizando como agente de eluição uma mistura de clorofórmio-acetona a 95:5 em volume.
6. - Processo de acordo com a reivindicação 2, caracterizado pelo facto de se utilizar o monóxido de carbono na reacção

- - 2 de carbonilaçao a uma pressão compreendida entre 101 e 101x10 KPa (1 a 100 atmosferas).
7. - Processo de acordo com a reivindicação 2, caracterizado pelo facto de se utilizar na reacção de carbonilação, como base, a trialquilamina ou um carbonato ou hidróxido de um metal alcalino ou alcalino-terroso e o catalisador em uma proporção molar compreendida entre 1:1 e 1:10.000 relativamente ao composto inicial de fórmula geral II, citado antes.
8.- Processo para a preparação de composições farmacêuticas com acção antitumoral, caracterizado pelo facto de se misturar uma quantidade eficaz de um composto de fórmula geral IX,como ingrediente activo, preparado pelo processo de acordo com a reivindicação 1, ou de um seu sal aceitável sob o ponto de vista farmacêutico, com um veículo ou diluente aceitável em farmácia,