FI96605C - Menetelmä farmaseuttisesti käyttökelpoisten 4'-epi-4'-aminoantrasykliinien valmistamiseksi sekä menetelmässä käytettävät välituotteet - Google Patents

Description

96605

Menetelmä farmaseuttisesti käyttökelpoisten 4·-epi-4'-aminoantrasykliinien valmistamiseksi sekä menetelmässä käytettävät välituotteet

Keksintö koskee menetelmiä uusien antrasykliiniglykosi-dien, joilla on kasvaimia estävä aktiivisuus, valmistamiseksi. Keksintö koskee myös tiettyjen, uusien välituotteiden valmistamista.

Keksinnössä valmistetaan antrasykliiniglykosideja, joilla on yleiset kaavat 1 ja 2 ΧδΧ 6 X ö X 6

HjN—W

1 2 joissa R, on vety, fluori, hydroksi tai amino; Rj ja R3 tarkoittavat molemmat hydroksia tai toinen tähteistä R2 ja • R] on vety, nitro tai amino ja toinen tähteistä Rj ja R3 on hydroksi, sillä edellytyksellä, että kun R2 ja R3 ovat molemmat hydroksi, R, on fluori, hydroksi tai amino, ja näiden farmaseuttisesti hyväksyttäviä suoloja. Edullisia suoloja ovat hydrokloridisuolat.

: Yleisten kaavojen 1 ja 2 mukaisia antrasykliiniglykoside ja ovat: 4-demetyyli-3'-deamino-4'-deoksi-4’-epi-amino-daunorubisiini (la: R1=R2=R3=OH), 4-demetyyli-3'-deamino-4'-deoksi-4'-epi-amino-doksorubisiini (2a: R1=R2=R3=OH), 96605 2 4-demetoksi-4-amino-3'-deamino-4'-deoksi-4'-epi-amino-daunorubisiini (lb: R1=NH2, R2=R3=OH), 4-demetoksi-4-amino-3'-deamino-4'-deoksi-4'-epi-amino-doksorubisiini (2b; R1=NH2, R2=R3=OH), 4-demetoksi-4-fluori-3'-deamino-4'-deoksi-4'-epi-amino-daunorubisiini (lc: R^F, R2=R3=OH), 4-demetoksi-4-fluori-3'-deamino-4'-deoksi-4'-epi-amino-doksorubisiini (2c: Rj^F, R2=R3=OH), 4-demetyyli-6-deoksi-3'-deamino-4'-deoksi-4'-epi-amino-daunorubisiini (Id: R1=R3=OH, R2=H), 4-demetyyli-6-deoksi-3'-deamino-4'-deoksi-4'-epi-amino-doksorubisiini (2d: R1=R3=OH/ R2=H)/ 4-demetoksi-ll-deoksi-ll-nitro-3'-deamino-4'-deoksi-4'-epi-amino-daunorubisiini (le: R^H, R2=OH, R3=N02), 4-demetoksi-ll-deoksi-ll-nitro-3'-deamino-4'-deoksi-4'-epi-amino-doksorubisiini (2e: R1=H, R2=OH, R3=N02), 4-demetoksi-6-deoksi-6-nitro-3'-deamino-4'-deoksi-4'-epi-amino-daunorubisiini (If: R^=H, R2=N02, R3=OH)/ 4-demetoksi-6-deoksi-6-nitro-3'-deamino-4'-deoksi-4'-epi-amino-doksorubisiini ( 2f: Rj^H, R2=N02, R3=OH) , 4-demetoksi-ll-deoksi-ll-amino-3'-deamino-4'-deoksi-4'-epi-amino-daunorubisiini (lg: R^H, R3=NH2, R2=OH), 4-demetoksi-ll-deoksi-ll-amino-31-deamino-4'-deoksi-4'-epi-amino-doksorubisiini (2g: R1=H/ R3=NH2, R2=OH), 4-demetoksi-6-deoksi-6-amino-3'-deamino-4'-deoksi-4'-epi-amino-daunorubisiini (lh: R1=H, R2=NH2, R3=OH), 4-demetoksi-6-deoksi-6-amino-3'-deamino-4 1-deoksi-4'-epi-amino-doksorubisiini (2h: Rj^H, R2=NH2, R3=OH).

Keksinnön mukaiset, uudet antrasykliiniglykosidiantibioo-tit, t.s. kaavan 1 ja 2 mukaiset yhdisteet, ovat konden-saatiotuotteita, jotka (a) yleisen kaavan 2 tai 6 mukaiset aglykonit

9660E

Ο ΐι 5η δ Rl 5μ 3 6 joissa Rj_# R2 ja R3 tarkoittavat samaa kuin edellä sillä edellytyksellä, että R2 ja R3 eivät ole aminoryhmä, ja (b) suojattu halosokeri, jonka kaava 4 on

X

a‘Z^y CF3COHN— 4 jossa X on halogeeni, mieluimmin kloori, muodostavat.

Edellä mainittujen antrasykliinien synteettisiä valmistusmenetelmiä on kaksi: Menetelmä A on esitetty kaaviossa I ja siinä käytetään kaavan 2 mukaista aglykonia, ja menetelmä B, joka on esitetty kaaviossa II, jossa käytetään kaavan £ mukaista aglykonia. Kaavan 2 mukaisten C-6- tai C-ll-aminoyhdisteiden valmistus on kuvattu kaaviossa III.

Kaavio I

4 96605 *1 O fet <bn CF,C0HN—^ ' CH2ci2/Et2o 4 3a-f

Ri O Ri ^ 0. IN NaOHi R., O R2 ^ CHj-T—O-/ CF3C0HN-^ HjM / 5a-f l.a-f 1) Br^/dioksaani-metanoli^ 2) HCOONa "1 O R2 ^ CW3 7^-0^7 2a-f

< IK 1 I mi i 1 »I

Kaavio II

96605 5 X o X öh ΧοΤί, -a'f 6a-f oo$o^°c 5 ° ίι ό X 6 X ^ ch3-^—-o -y CH^C^l2v

CF^C OH N / CF3C OHN

7a-f Ba-f l' 6 "· 6 " W, — i-' cf3cohn-^ 9a-f i: Br2/dioksaani7 CH,COOK; ii: _4, CF^SC^Ag, CH2C12; iii: K2C02/ CH^OH, 0°C; iv: HC(OC2H^)2, pTSA-pyridiini

v: 0,1N NaOH, CH3COOH

96601 6

Kaavio III

[yOyOv ^ ® Of Ό», —o*y c^com-^ / ie,f 1) 10%Pd/C syklohekseeni-metanoli keitetään palautusjäähdyttäen 10 min

2) 0,2N NaOH ,r 3) CH3COOH

R, T x ^ ch3^--- —/ 2g,h

9660U

7

Menetelmä A

Tämä keksintö koskee menetelmää edellä esitetyn kaavan _l tai 2 mukaisen antrasykliiniglykosidin valmistamiseksi, sillä edellytyksellä, että kun 1*2 ja ovat molemmat hyd-roksi, on fluori, hydroksi tai amino, tai sen farmaseuttisesti hyväksyttävän happoadditiosuolan valmistamiseksi, jossa menetelmässä (i) aglykoni, jonka kaava 3 on

^ K ÖH

jossa R2 ja R3 tarkoittavat samaa kuin edellä paitsi, että R2 ja R3 eivät ole aminoryhmä, kondensoidaan 1-halo-2,3,4,6-tetradeoksi-4-(N-trifluoriasetamido)-L-erytro-heksopyranosidin kanssa, jonka kaava 4 on

X

CF-.COHN_

• J

4 jossa X on halogeeni; "" (ii) näin saadusta kaavan 5 mukaisesta yhdisteestä « 96605 8 X & x ^ s OV?—-cry CFjCOHN-^ jossa R^, R2 ja Rj tarkoittavat samaa kuin vaiheessa (i), poistetaan N-trifluoriasetyyliryhmä mainitun, kaavan 1 mukaisen antrasykliiniglykosidin saamiseksi, jossa R2 ja r3 eivät tarkoita aminoryhmää; (iii) vaiheessa (ii) saatu kaavan l mukainen glykosidi muutetaan haluttaessa sen farmaseuttisesti hyväksyttäväksi happoadditiosuolaksi; (iv) vaiheessa (ii) saatu kaavan 1^ mukainen glykosidi, jossa toinen tähteistä R2 ja R3 on nitro, tai sen vaiheessa (iii) saatu suola pelkistetään kaavan 1 mukaisen glyko-sidin saamiseksi, jossa toinen tähteistä R2 ja R3 on ami-noryhmä, ja mainittu kaavan 1 mukainen glykosidi, jossa toinen tähteistä R2 ja R3 on aminoryhmä, muutetaan haluttaessa sen farmaseuttisesti hyväksyttäväksi happoadditiosuolaksi; (v) vaiheessa (ii) saatu kaavan 1^ mukainen glykosidi tai sen vaiheessa (iii) saatu, farmaseuttisesti hyväksyttävä happoadditiosuola bromataan haluttaessa ja näin saatu 14-bromijohdannainen hydrolysoidaan vastaavan, edellä määritellyn kaavan 2 mukaisen antrasykliiniglykosidin saamiseksi; ja (vi) mainittu kaavan 2 mukainen glykosidi muutetaan haluttaessa sen farmaseuttisesti hyväksyttäväksi happoadditiosuolaksi.

41 Ut-t MH II i t» 96601 9 Tällä menetelmällä voidaan valmistaa antrasykliiniglykosi-dit vastaavista kaavan 2 mukaisista aglykoneista ja suojatusta kaavan 4 mukaisesta halosokerista. Menetelmä on samanlainen kuin mitä kuvataan julkaisussa US-A-4,107,423. Kytkentätuote hydrolysoidaan kaavan 1 mukaiseksi daunoru-bisiiniksi ja se voidaan muuttaa vastaavaksi kaavan 2 mukaiseksi doksorubisiiniksi menetelmällä, joka on kuvattu julkaisussa US-A-3,803,124.

Kaavion I reaktioissa käytetyt lähtöaineet ovat hyvin tunnetut 4-demetyyli-daunomysinoni (3a: Ri=R2=R3=OH), agly-koni 4-demetoksi-4-amino-daunomysinoni (3b: R1=NH2, R2= R3=OH) (EP-A-0288268), 4-demetoksi-4-fluori-daunomysinoni (3c: R1=F, R2=R3=OH) [G.W.Morrow ja J.Swenton, J.Org.Chem.; 52, 713, 1987] ja 4-demetyyli-6-deoksi-daunomysinoni (3d: r1=r3=OH, R2=H) [US-A-4,600,537]. C-ll- ja C-6-nitro-agly-konit, t.s. 4-demetoksi-ll-deoksi-ll-nitro-daunomysinoni (3e: R1=H, R2=0H, R3=N02) ja 4-demetoksi-6-deoksi-6-nitro-daunomysinoni (3f: R1=H, R2=N02, R3=OH) kuvataan molemmat julkaisussa US-A-4,749,693.

Kaavan 2 mukainen aglykoni saatetaan tavallisesti reagoimaan huoneen lämpötilassa vaiheessa (i) kaavan 4 mukaisen yhdisteen kanssa molekyyliseulan ja hopeatrifluorimetaani-sulfonaatin läsnäollessa kaavojen 5a-f mukaisten N-tri-fluoriasetyyliglykosidien muodostamiseksi. Kaavojen la-f mukaiset yhdisteet saadaan poistamalla aminosuojaryhmä lievällä alkalihydrolyysillä.

Mieluimmin vaiheessa (ii) kaavan 5 mukainen yhdiste liuotetaan asetoniin ja suoritetaan lievä alkalinen hydrolyysi 0 eC:n lämpötilassa tunnin ajan käyttäen 0,2 N vesipitoista natriumhydroksidia, jolloin saadaan kaavan 2 mukainen glykosidi. Käsittelemällä metanolisella kloorivedyllä saadaan hydrokloridi.

9660l; 10

Vaiheessa (iv) reaktio suoritetaan tyypillisesti käsittelemällä Pd/C-katalyytiliä, esimerkiksi 10%:isella Pd/C: llä. Tällöin kaavan 1^ mukaista nitroglykosidia tai sen suolaa voidaan keittää palautusjäähdyttäen metanolin ja syklohekseenin seoksessa käyttäen mukana 10%:ista Pd/C-ka-talyyttiä 10 minuutin ajan. Muodostunut, kaavan 1^ mukainen aminoglykosidi voidaan eristää hydrokloridinaan edellä esitetyllä tavalla.

Mieluimmin mainittu, kaavan 1 mukainen glykosidi liuotetaan vedettömän metanolin ja dioksaanin seokseen ja käsitellään vaiheessa (v) bromin kloroformiliuoksella vastaavan 14-bromijohdannaisen saamiseksi, jota hydrolysoidaan kaksi päivää huoneen lämpötilassa natriumformiaatin vesi-liuoksella kaavan 2 mukaisen glykosidin saamiseksi vapaana emäksenä ja vaiheessa (vi) mainittu, kaavan 2 mukainen glykosidi eristetään hydrokloridinaan. Kaavan 2 mukaisen glykosidin eristäminen hydrokloridina tapahtuu tavallisesti käsittelemällä glykosidi metanolisella kloorivedyllä.

Tämän menetelmän erään suoritusmuodon mukaisesti 4-deme-tyylidaunomysinoni (3a) liuotetaan kuivaan metyleeniklori-diin ja saatetaan reagoimaan huoneen lämpötilassa tunnin ajan l-kloori-2,3,4,6-tetradeoksi-4-(N-trifluoriasetami-do)-L-erytro-heksopyranosidin (4) kanssa molekyyliseulan ja hopeatrifluorimetaanisulfonaatin läsnäollessa kaavan 5a mukaisen N-suojatun glykosidin saamiseksi, joka liuotetaan asetoniin, jonka jälkeen suoritetaan lievä alkalinen hyd-rolyysi 0 °C:n lämpötilassa 1 tunnin ajan käyttäen 0,2 N vesipitoista natriumhydroksidia, saadaan kaavan la mukainen yhdiste vapaana emäksenä, joka eristetään hydroklori-' dinaan käsittelemällä vedettömällä, metanolisella kloori- vedyllä .

Kaavan la mukainen yhdiste saatetaan reagoimaan haluttaessa bromin kanssa metyleenikloridissa sen 14-bromi-johdan- ;* *«..i uit m ' · 9660b 11 naisen saamiseksi, josta sen jälkeen, kun on hydrolysoitu huoneen lämpötilassa typpiatmosfäärissä 48 tunnin ajan natriumformiaatin vesiliuoksella, saadaan kaavan 2a mukainen yhdiste vapaana emäksenä, joka eristetään hydroklori-dinaan käsittelemällä vedettömällä, metanolisella kloori-vedyllä.

Menetelmä B

Keksintö koskee menetelmää edellä määritellyn kaavan 2 mukaisen antrasykliiniglykosidin valmistamiseksi sillä edellytyksellä että R2 ja R3 eivät tarkoita aminoryhmää, tai sen farmaseuttisesti hyväksyttävän happoadditiosuolan valmistamiseksi, jossa menetelmässä: (i') 14-suojattu aglykoni, jonka kaava 6 on

Ri ö Rz £H

6 jossa Rlf R2 ja r3 tarkoittavat samaa kuin edellä paitsi, että R2 ja r3 eivät tarkoita aminoryhmää, kondensoidaan l-halo-2,3,4,6-tetradeoksi-4-(N-trifluoriasetamido)-L-erytro-heksopyranosldin kanssa, jonka kaava 4 on edellä määritelty; (ii) muodostuneesta, kaavan T_ mukaisesta N-suojatusta gly-kosidista 96601' 12 (ϋΙΤΟΓΤ^^ 1 1 6 2 ---0^7 CFjCOHN-^ ^ jossa R^, R2 ja r3 tarkoittavat samaa kuin edellä, poistetaan 14-suojaryhmä kaavan ]3 mukaisen yhdisteen saamiseksi ^ * o i CF3COHN ^ jossa R1# R2 ja R3 tarkoittavat samaa kuin edellä; (lii1) kaavan iJ mukainen yhdiste muutetaan 9,14-ortoformi-aattijohdannaiseksi, jonka kaava 9 on 9 CCtH,

Ci^=Sy : CJ^C OHN—^ jossa Rlr R2 ja R3 tarkoittavat samaa kuin edellä; (iv’) N-trifluoriasetyyliryhmä ja ortoformiaattisuojaryhmä poistetaan kaavan 2 mukaisen glykosidin saamiseksi; ja

;i ' »tt:i lilli I i » M

96601 13 (V) kaavan 2 mukainen glykosidi muutetaan haluttaessa sen farmaseuttisesti hyväksyttäväski happoadditiosuolaksi.

Tällä menetelmällä voidaan valmistaa yleisen kaavan 2 mukaisia antrasykliiniglykosideja kytkemällä (a) vastaava 14-hydroksyloitu ja suojattu aglykoni ja (b) suojattu, kaavan 4^ mukainen halosokeri. Menetelmä on samanlainen, kuin mitä on kuvattu julkaisussa US-A-4,107,423. Kaaviossa II on kuvattu reaktiosarja kaavan 2a-f mukaisille doksoru-bisiinijohdannaisille. Lähtöaineet ovat kaavojen 3a-f mukaisia aglykoneja, jotka on sopivasti funktionalisoidut ja suojatut sivuketjussa, kuten 14-asetoksijohdannaiset.

Tavallisesti vaiheessa (i') kaavan 6 mukainen aglykoni saatetaan huoneen lämpötilassa reagoimaan 1-kloori-heksa-pyranosidin kanssa, jolla on kaava 4, molekyyliseulan ja hopeatrifluorimetaanisulfonaatin läsnäollessa. Vaiheessa (ii') kaavan 7 mukainen yhdiste käsitellään mieluimmin 0 °C:ssa 4 tunnin ajan typpiatmosfäärissä kaliumkarbonaatilla.

Vaiheessa (iii *) kaavan 8 mukainen yhdiste käsitellään tavallisesti huoneen lämpötilassa tunnin ajan trietyyliorto-formiaatilla, esimerkiksi metyleenikloridissa, ja mukana käytetään pyridinium-p-tolueenisulfonaattia.

Vaiheessa (iv') kaavan £ mukaiselle yhdisteelle suoritetaan mieluimmin lievä alkalinen hydrolyysi vesiliuoksessa N-trifluoriasetyyliryhmän poistamiseksi ja yhdiste käsitellään etikkahapolla ortoformiaattisuojaryhmän poistamiseksi, jolloin saadaan kaavan 2 mukainen glykosidi vapaana emäksenä, joka vaiheessa (ν') käsitellään vedettömällä, metanolisella kloorivedyllä glykosidin eristämiseksi hyd-rokloridisuolanaan.

Aivan erityisesti eräässä suoritusmuodossa 4-demetoksi-ll-deoksi-ll-nitro-daunomysinoni (3d: R1=H, R2=OH, R3=N02) 96601, 14 liuotetaan kuivaan dioksaaniin ja käsitellään liuoksella jossa on bromi metyleenikloridissa, kahden tunnin ajan huoneen lämpötilassa, jonka jälkeen yhdiste saostetaan heksaanilla. Jäännös liuotetaan asetoniin, lisätään kali-umasetaattia ja sekoitetaan tunnin ajan, jolloin saadaan kaavan 6d mukainen asetoksijohdannainen. Tämä yhdiste liuotetaan kuivaan metyleenikloridiin ja saatetaan reagoimaan l-kloori-2,3,4,6-tetradeoksi-4-(N-trifluoriasetamido)-L-erytro-heksopyranosidin (4) kanssa edellä esitetyllä tavalla kaavan 7d mukaisen, suojatun 14-asetoksi-N-trifluo-riasetyyliglykosidin saamiseksi.

Suojaryhmien poistamiseksi kaavan 7d mukainen yhdiste liuotetaan ensin metanoliin ja käsitellään kaliumkarbonaatilla 4 tunnin ajan 0 eC:ssa typpiatmosfäärissä kaavan 8d mukaisen yhdisteen saamiseksi, jota sen jälkeen käsitellään tunnin ajan huoneen lämpötilassa trietyyliortoformiaatilla metyleenikloridissa käyttäen mukana pyridinium-p-tolueeni-sulfonaattia, saadaan kaavan 9e mukainen 9,14-ortoformi-aattijohdannainen. Tälle yhdisteelle suoritetaan lievä al-kalinen hydrolyysi vedessä N-suojaryhmän poistamiseksi ja lopuksi se käsitellään etikkahapolla ortoformiaattisuoja-ryhmän poistamiseksi ja saadaan kaavan le mukainen yhdiste vapaana emäksenä, joka eristetään hydrokloridinaan käsittelemällä vedettömällä, metanolisella kloorivedyllä.

Tämä keksintö koskee myös menetelmää edellä esitetyn kaavan 2 mukaisen antrasykliiniglykosidin valmistamiseksi, jossa R1 tarkoittaa samaa kuin edellä ja toinen tähteistä R2 ja R3 on hydroksi ja toinen tähteistä R2 ja R3 on ami-noryhmä, tai sen farmaseuttisesti hyväksyttävän happoaddi-: tiosuolan valmistamiseksi, jossa menetelmässä: (i") edellä esitetyn kaavan £ mukaisen 9,14-ortoformiaat-tijohdannaisen, jossa toinen tähteistä R2 ja R3 on hydroksi ja toinen tähteistä R2 ja R3 on nitroryhmä, C-6- tai C-ll-nitroryhmä pelkistetään; !l lit i Mil i 1 t Ä» i 9660b 15 (ii") näin muodostuneesta C-6- tai C-ll-aminoryhmän sisältävästä yhdisteestä poistetaan N-trifluoriasetyyliryhmä ja ortoformiaattisuojaryhmä mainitun, kaavan 2 mukaisen gly-kosidin saamiseksi; ja (iii") mainittu, kaavan 2 mukainen glykosidi muutetaan haluttaessa sen farmaseuttisesti hyväksyttäväksi happoaddi-tiosuolaksi.

Kaaviossa III on esitetty reaktiosarja kaavan 2 mukaisten C-6- ja C-ll-aminoantrasykliinien valmistamiseksi lähtemällä vastaavista C-6-ja C-ll-suojatuista nitroglykosi-deista. Kaavan 9e tai 9f mukaiset 9,14-ortoformiaattinit-roj ohdannaiset voidaan muuttaa vastaavasti kaavan 2c[ tai 2h mukaisiksi aminoglykosideiksi keittämällä nitroyhdis-teitä palautusjäähdyttäen metanolin ja syklohekseenin seoksessa 10%:isen Pd/C-katalyytin läsnäollessa 10 minuutin ajan ja poistamalla N-trifluoriasetyyliryhmä emäksisessä liuoksessa, esimerkiksi kuten edellä kuvattiin menetelmässä A tai menetelmässä B, ja ortoformiaattisuojaryhmä poistetaan etikkahapolla. Kaavojen 2cj ja 2h mukaiset yhdisteet voidaan muuttaa vastaaviksi hydrokloridisuoloikseen käsittelemällä vedettömällä, metanolisella kloorivedyllä.

: Kuten edellä esitetystä ilmenee, keksinnön menetelmiin si sältyy useiden uusien välituotteiden valmistus ja käyttö.

Myös nämä kuuluvat tämän keksinnön piiriin, erityisesti kaavojen 5^ ja 7-9 mukaiset yhdisteet.

Keksinnön mukaisesti valmistetuista yhdisteistä voidaan valmistaa farmaseuttisia koostumuksia, jotka sisältävät kaavan tai _2 mukaisen antrasykliiniglykosidin tai sen farmaseuttisesti hyväksyttävän happoadditiosuolan yhdessä farmaseuttisesti hyväksyttävän kantoaineen tai laimennusaineen kanssa. Voidaan käyttää tavanomaisia kantoaineita tai laimennusainei-ta. Koostumukset voidaan valmistaa ja annostaa tavanomaiseen ' tapaan.

9660b 16

Keksinnön mukaiset yhdisteet ovat käyttökelpoisia ihmisen tai eläimen terapeuttisissa hoitomenetelmissä. Ne ovat käyttökelpoisia kasvaimia estävinä aineina. Potilaalle annostetaan terapeuttisesti tehokas määrä. Voidaan antaa määrä, joka on riittävä estämään kasvaimen kasvua. Kasvain voi olla paksunsuolen rauhassyöpä (Colon adenocarcinoma) tai Gross-leukemia.

Keksinnön mukaisten yhdisteiden biologinen aktiivisuus testattiin in vitro LoVo- (ihmisen paksunsuolen rauhassyöpä) ja LoVo/DX-soluja vastaan, vertailuyhdisteinä olivat doksorubisiini ja 4-demetoksidaunorubisiini (4dem-DNR). Tulokset on esitetty taulukossa 1.

Taulukko 1 - in vitro-aktiivisuus

Yhdisteet Sytotoksisuus 4 tunnin kuluttua käsittelystä (1¾1 = n9/ml>

LoVo LoVo/DX R.l.2 doksorubisiini 60 2180 36 4-dem-DNR 20 125 6 la 1,1 2,7 2,4 le 1,2 6,0 5,0 lh 4,0 8,6 2,2 2d 1,2 3,8 3,2 2e 48,4 205 4,2 2f 116 2256 19,4 2g 18,8 109 5,8 : 2h 6,2 90 14,2 *) IC50 = konsentraatio, joka estää 50%:isesti pesäkkeen kasvun 2) R.l. = resistenssi-indeksi = (IC50 LoVo/DX)/(IC50 LoVo) 8 Ift i 8lt> l ' i 96601 17

Seuraavat esimerkit kuvaavat keksintöä.

ESIMERKKI 1 4-demetyyli-3'-deamino-4'-deoksi-4'epi-amlno-daunorublsiinln hydrokloridin (la) valmistaminen 0,76 g (2 mmoolia) 4-demetyylidaunomysinonia (3a) liuotettiin 300 ml:11a vedetöntä metyleenikloridia mukana käytettiin molekyyliseulaa (4Ä). Seos jäähdytettiin 10 eC:seen, siihen johdettiin typpeä ja lisättiin tipoittain samalla sekoittaen 0,86 g (3,2 mmoolia) l-kloori-2,3,4,6-tetrade-oksi-4-(N-trifluoriasetamido)-L-ervtro-heksopyranosidia (4) liuotettuna 40 ml:aan vedetöntä metyleenikloridia ja 0,78 g (3,0 mmoolia) hopeatrifluorimetaanisulfonaattia liuotettuna 40 ml:aan dietyylieetteriä. 20 minuutin kuluttua reaktioseos käsiteltiin 30 ml:11a vesipitoista, kyllästettyä natriumvetykarbonaattia ja suodatettiin. Orgaaninen kerros pestiin vedellä, kuivattiin vedettömällä nat-riumsulfaatilla ja liuotin poistettiin tyhjössä. Jäännös kromatografoitiin piihappogeelipylväässä käyttäen eluoin-tiin metyleenikloridin ja asetonin 98:2-seosta (tilavuuksia), saatiin 0,8 g 4-demetyyli-3'-deamino-4'-deoksi-4'-epi-N-trifluoriasetyylidaunorubisiinia (5a). Trifluoriase-tyylisuojaryhmä poistettiin liuottamalla yhdiste 5a aseto- « .1 niin ja käsittelemällä vesipitoisella 0,2 N natriumhydrok- sidilla 0 eC:ssa. Tunnin kuluttua liuoksen pH säädettiin arvoon 8,1 ja liuos uutettiin toistuvasti metyleeniklori-dilla. Yhdistetyt, orgaaniset uutteet kuivattiin, jonka jälkeen liuos konsentroitiin pieneen tilavuuteen ja hapo-tettiin pH-arvoon 3,5 vedettömällä, metanolisella kloori-:’ . vedyllä. Lisättiin dietyylieetteriä, jonka jälkeen saatiin 0,64 g (saanto 54 %) otsikossa mainittua yhdistettä la hydrokloridisuolana; sul.p. 168-169 °C (haj.).

TLC piihappogeelilevyillä (Merck F254), liuotinsysteeminä metyleenikloridi/metanoli/etikkahappo/vesi (80:20:7:3, ti- « lavuuksia): Rf = 0,73.

9660b 18 MS-FD: [M]+ 497 1H-NMR (200 MHZ, DMSO-dg) 6: 1.21 (d, J = 6,2 Hz, 3H, 5'-CH3) I, 6-1,8 (m, 4H, 2'-CH2, 3’-CH2) 2,1-2,3 (m, 2H, 8-CH2) 2,27 (s, 3H, COCH3) 2,85 (m, 1H, 41-H) 2,95 (m, 2H, 10-CH2) 4,11 (dq, J = 6,2, 9,9 Hz, 1H, 5’-H) 4,98 (m, 1H, 7-H) 5.22 (s, 1H, 9-OH) 7.40 (dd, J = 2,0, 7,5 Hz, 1H, 3-H) 7,82 (m, 2H, 1-H, 2-H) 8,10 (leveä s, 3H, 4'-NH3+) II, 96 (S, 1H, 11-OH) 12,87 (s, 1H, 6-OH) 13.40 (S, 1H, 4-OH).

ESIMERKKI 2 4-demetoksl-4-amlno-31-deamlno-4'-deoksi-4'-epi-amino-daunorublsllnln hydroklorldin (lb) valmistaminen 0,38 g (1 mmooli) 4-demetoksi-4-aminodaunomysinonia (3b) kytkettiin 0,37 g:n (1,5 iranoolia) kanssa l-kloori-2,3,4,6-tetradeoksi-4-(N-trifluoriasetamido)-L-er^tro-heksopyrano-sidia (4), noudattaen esimerkissä 1 kuvattua menetelmää, saatiin 0,35 g (saanto 60 %) otsikossa mainittua yhdistettä ib hydrokloridisuolana.

* TLC piihappogeelilevyillä (Merck F2g4) liuotinsysteeminä metyleenikloridi/metanoli/etikkahappo/vesi (80:20:7:3, tilavuuksia): Rf = 0,45.

: Ktt:f II4A ; ) 9660b 19 ^H-NHR (200 MHz, DMSO-dg) δ (muun muassa): 2,27 (s, 3H, COCH3)

2,85 (m, 1H, 4'-hJ

4,98 (m, 1H, 7-H) 6,80 (leveä d, 2H, 4-NH2) 6,93 (d, J = 8,0 Hz, Ϊη7 3-H) 7,46 (t, J = 8,0 Hz, 1H, 2-H) 7,64 (d, J = 8,0 Hz, 1H, 1-H) 8,10 (leveä s, 3H, 4'-NH3+) 13,52 (S, 1H, 11-OH) 14,00 (S, 6-OH).

ESIMERKKI 3 4-demetoksl-4-fluorl-31-deamlno-4'-deoksl-41-epl-amlno-daunorublsllnln hydroklorldln (le) valmistaminen 0,38 g (1 mmooli) 4-demetoksi-4-fluoridaunomysinonia (3c) kytkettiin 0,37 g:n (1,5 mmoolia) kanssa l-kloori-2,3,4,6-tetradeoksi-4-(N-trifluoriasetamido)-L-erytro-heksopyrano-sidia (4), noudattaen esimerkissä 1 kuvattua menetelmää, saatiin 0,48 g N-trifluoriasetyylijohdannaista 5c.

Poistettiin N-suojaryhmä, käyttäen standardimenetelmää, jonka jälkeen saatiin 0,40 g (saanto 74 %) otsikossa mainittua yhdistettä le.

TLC piihappogeelilevyillä (Merck F254) liuotinsysteeminä metyleenikloridi/metanoli/etikkahappo/vesi (80:20:7:3, tilavuuksia): Rf = 0,68; sul.p. 158-159 eC (haj.).

96601· 20 ESIMERKKI 4 4-demetyyll-31-deamino-41-deoksl-41-epl-amlno-doksorubisllnin hydroklorldln (2a) valmistaminen 0/3 g (0/6 mmoolia) 4-demetyyli-3'-deamino-4'-deoksi-4'-epi-aminodaunorubisiinia (la) liuotettiin vedettömään me-tanolin ja dioksaanin seokseen ja lisättiin 1,2 ml liuosta, joka sisälsi 9 g bromia 100 mlrssa metyleenikloridia, julkaisussa US-A-3,803,124 kuvatun menetelmän mukaisesti, saatiin 14-bromijohdannainen, joka liuotettiin 20 ml:aan asetonia ja käsiteltiin 0,4 g:11a natriumformiaattia, joka oli liuotettu 2 ml:aan vettä. Reaktioseosta sekoitettiin huoneen lämpötilassa kaksi päivää, sen jälkeen siihen lisättiin vettä ja se uutettiin metyleenikloridilla. Tavalliseen tapaan työskentelemällä saatiin punainen liuos, joka konsentroitiin pieneen tilavuuteen tyhjössä, pH säädettiin vedettömällä, metanolisella kloorivedyllä arvoon 3,5, jonka jälkeen lisättiin ylimäärin dietyylieetteriä, saatiin 0,2 g (saanto 75 %) otsikossa mainittua yhdistettä 2a hydrokloridina.

TLC piihappogeelilevyillä (Merck F254) liuotinsysteeminä metyleenikloridi/metanoli/etikkahappo/vesi (80:20:7:3, tilavuuksia): Rf = 0,60.

ESIMERKKI 5 4-demetyyli-6-deoksi-14-asetyyli-adriamysinonin (6d) valmistaminen

Liuokseen, jossa oli 0,85 g (2,3 mmoolia) 4-demetyyli-6-deoksi-daunomysinonia (3d) liuotettuna 150 ml:aan vedetöntä dioksaania, lisättiin 4,6 ml liuosta, joka sisälsi 9 g bromia 100 ml:ssa metyleenikloridia. Seos jätettiin huoneen lämpötilaan kahden tunnin ajaksi, jonka jälkeen bro-

:j . aan l.iu I 1 j M

9660ϋ 21 mljohdannainen seostettiin lisäämällä n-heksaania ja kerättiin. Jäännös liuotettiin 300 ml:11a asetonia ja lisättiin samalla sekoittaen 2,7 g kaliumasetaattia. Tunnin kuluttua reaktioseos laimennettiin metyleenikloridilla ja pestiin vedellä. Orgaaninen kerros kuivattiin vedettömällä natriumsulfaatilla, suodatettiin ja liuotin poistettiin alennetussa paineessa. Jäännös kromatografoitiin piihappo-geelipylväässä, saatiin 0,75 g (saanto 76 %) otsikossa mainittua yhdistettä 6d.

TLC piihappogeelilevyillä (Merck F254) liuotinsysteeminä metyleenikloridi/asetoni (95:5, tilavuuksia): Rf = 0,13.

EI-MS: [M]+ 426 1H-NMR (200 MHz, DMSO-dg) 6: 1.88 (dd, J = 9,3, 13,1 Hz, 1H, 8ax-H) 2,06 (S, 3H, COCH3) 2,41 (dd, J = 5,7, 13,1 Hz, 1H, 8e-H) 2,76-3,04 (kaksi d:tä, J = 18,6, 2H, 10-CH2) 4,57 (m, 1H, 7-H) 5,09-5,23 (kaksi d:tä, J = 17,8 Hz, 2H, CO-CH2OCO) 5.89 (d, J = 6,6 Hz, 1H, 7-OH) 6,10 (s, 1H, 9-OH) 7,39 (dd, J = 1,5, 7,9 Hz, 1H, 3-H) 7,7-7,9 (m, 2H, 1-H, 2-H) 7.90 (S, 1H, 6-H) 12,60, 12,90 (kaksi leveätä s:ää, 2H, 4-OH, 11-OH).

ESIMERKKI 6 4-demetyyli-6-deoksi-31-deamino-41-deoksi-41-epl-N-trifluoriasetyyli-doksorubisiinin (8d) valmistaminen 0,61 g (1,43 mmoolia) 4-demetyyli-6-deoksi-14-asetyyli-adriamysinonia (6d) liuotettiin 250 ml:11a vedetöntä mety- 22

9 6 6 O U

leenikloridia ja 150 ml:11a vedetöntä tetrahydrofuraania. Seos jäähdytettiin 10 °C:seen, siihen johdettiin typpeä ja lisättiin tipoittain samalla sekoittaen l g (4 mmoolia) 1-kloori-2,3,4,6-tetradeoksi-4-(N-trifluoriasetamido)-L erytro-heksopyranosidia (4) liuotettuna 50 ml:aan vedetöntä metyleenikloridia ja 1 g (4 mmoolia) hopeatrifluorime-taanisulfonaattia liuotettuna 50 ml:aan dietyylieetteriä.

20 minuutin kuluttua reaktioseos käsiteltiin 20 ml:11a vesipitoista, kyllästettyä natriumvetykarbonaattia ja suodatettiin. Orgaaninen kerros pestiin vedellä, kuivattiin vedettömällä natriumsulfaatilla ja liuotin poistettiin tyhjössä. Jäännös kromatografoitiin piihappogeelipylväässä, saatiin 0,4 g (saanto 44 %) 4-demetyyli-6-deoksi-14-ase-tyyli-3'-deamino-4'-deoksi-4'-epi-N-trifluoriasetyylidok-sorubisiinia (7d).

TLC piihappogeelilevyillä (Merck *254) liuotinsysteeminä metyleenikloridi/asetoni (95:5, tilavuuksia): Rf = 0,45.

FD-MS: [M]+ 636 ^H-NMR (200 MHz, DMSO-dg) δ (muun muassa): 1,06 (d, J = 6,0 Hz, 3H, 5'-CH3) 1,6-2,0 (m, 5H, 8ax-H, 2'-CHji-3'-CH2) 2,05 (S, 3H, COCH3) 3,56 (m, 1H, 41-h7 3,93 (m, 1H, 5'-H) 5,14 (m, 2H, CO-CH2OCO) 5,17 (m, 1H, 11-H) 9,37 (leveä d, J = 8,6 Hz, 1H, NHCOCF3) 12,45, 12,91 (kaksi s:ää, 2H, 4-OH, 11-OH).

Yhdiste 7d liuotettiin 200 ml:11a metanolia, käsiteltiin 0 °C:ssa 2 ml:11a kaliumkarbonaatin 10%:ista vesiliuosta ja jätettiin neljän tunnin ajaksi seisomaan 0 eC:seen typ-piatmosfäärissä. Liuos neutraloitiin etikkahapolla, lai- )| · »a·» mu t > t : 9660b 23 mennettiin vedellä ja tuote uutettiin metyleenikloridilla. Suodatettiin piihappogeelillä, jonka jälkeen 0,25 g (saanto 89 %) otsikossa mainittua yhdistettä 8d otettiin talteen.

TLC piihappogeelilevyillä (Merck F254) liuotinsysteeminä metyleenikloridi/asetoni (9:1, tilavuuksia): Rf = 0,26.

FD-MS: [M]+ 593.

ESIMERKKI 7 4-demetyyli-6-deoksl-3'-deamino-41-deoksi-41-epi-amlno-doksorublsiinin hydroklorldin (2d) valmistaminen 0,2 g (0,33 mmoolia) kaavan 8d mukaista yhdistettä, joka valmistettiin esimerkissä 6 esitetyllä tavalla, liuotettiin 60 ml:11a kuivaa metyleenikloridia ja lisättiin 15 ml trietyyliortoformiaattia ja 0,1 g pyridinium-p-tolueeni-sulfonaattia. Yhden tunnin kuluttua liuos pestiin vedellä, kuivattiin vedettömällä natriumsulfaatilla ja haihdutettiin pieneen tilavuuteen alennetussa paineessa. Liuos kaadettiin n-heksaaniin ja 9,14-ortoformiaattijohdannaisen 9d sakka kerättiin talteen suodattamalla.

TLC piihappogeelilevyillä (Merck F254) liuotinsysteeminä metyleenikloridi/asetoni (95:5, tilavuuksia): Rf = 0,7.

Jäännös liuotettiin 200 ml:11a 0,2 N vesipitoista natrium-hydroksidia ja liuos jätettiin 10 tunnin ajaksi 8 eC:seen typpiatmosfääriin. Sen jälkeen etikkahapolla säädettiin liuoksen pH arvoon 8,5 ja liuos uutettiin metyleenikloridilla. Tavanomaisen työskentelyn jälkeen muodostui vapaa emäs, jota käsiteltiin etikkahapon vesipitoisella liuoksella kahden tunnin ajan huoneen lämpötilassa. Seoksen pH säädettiin arvoon 8,5 vesipitoisella natriumvetykarbonaa- 9660L· 24 tiliä ja liuos uutettiin metyleenikloridilla. Liuotin poistettiin tyhjössä ja jäännös kromatografoitiin piihap-pogeelipylväässä, saatiin 0,12 g (saanto 66 %) otsikossa mainittua yhdistettä vapaana emäksenä, joka muutettiin hydrokloridisuolaksi 2d käsittelemällä vedettömällä, meta-nolisella kloorivedyllä.

TLC piihappogeelilevyillä (Merck F254) liuotinsysteeminä metyleenikloridi/metanoli/etikkahappo/vesi (80:20:7:3, tilavuuksia): Rf = 0,52, sul.p. 155 eC (haj.).

PD-MS: [M] + 438 1H-NMR (200 MHZ, DMSO-dg) 6: 1,21 (d, J = 6,2 Hz, 3H, 5'-CH3) 1.7- 2,0 (m, 5H, 8ax-H, 2'-CH2, 3'-CH2) 2,4-2,5 (m, 1H, 8e-H) 2,77, 3,08 (kaksi d:tä, J = 17,7 Hz, 1H, 10-CH2) 2,88 (m, 1H, 4'-H) 3,95 (dq, J = 6,2, 9,8 Hz, 1H, 5'-H) 4,55 (d, J = 5,5 HZ, 2H, CH2OH) 4,76 (m, 1H, 7-H) 4,84 (t, J = 5,5 HZ, 1H, CH2QH) 5,20 (m, 1H, 11-H) 5,93 (s, 1H, 9-OH) 7,40 (dd, J = 1,6, 7,7 Hz, 1H, 3-H) 7.7- 7,9 (m, 2H, 2-H, 1-H) 7,74 (s, 1H, 6-H).

ESIMERKKI 8 « * 4-demetoksl-ll-deoksi-ll-nitro-14-asetyyliadriamyslnonin (6e) valmistaminen 2,3 g (5,7 mmoolia) 4-demetoksi-ll-deoksi-ll-nitro-dauno-mysinonia (2§) muutettiin 1,8 g:ksi (saanto 70 %) otsikos- « < ·

Il i ill! I f i II

9660l; 25 sa mainittua yhdistettä 6e noudattaen esimerkissä 5 esitettyä menetelmää.

TLC piihappogeelilevyillä (Merck F254) liuotinsysteeminä metyleenikloridi/asetoni, (95:5, tilavuuksia): Rf = 0,2.

FD-MS: [M] + 455 1H-NMR (200 MHz, CDCI3) δ: 2,11 (ddd, J = 1,8, 5,0, 15,0 Hz, 1H, 8ax-H) 2.18 (S, 3H, COCH3) 2,56 (ddd, J = 2T2, 2,2, 15,0 Hz, 1H, 8e-H) 2.88 (dd, J = 2,2, 18,2 Hz, 1H, lOe-H) 3.18 (d, J = 18,2 Hz, 1H, lOax-H) 3.42 (dd, J = 1,8, 3,3 HZ, 1H, 7-OH) 4,68 (S, 1H, 9-OH) 5,04, 5,34 (kaksi d:tä, J = 18,2 Hz, 2H, CO-CH2OCO) 5.42 (m, 1H, 7-H) 7.88 (m, 2H, 2-H, 3-H) 8,29 (m, 2H, 1-H, 4-H) 13,71 (S, 1H, 6-OH).

ESIMERKKI 9 4-demetoksi-ll-deoksl-ll-nltro-9,14-ortoformiaattl-31 deamlno-4'-deoksi-41-epl-N-trifluoriasetyyll-doksoru-bislln (9e) valmistaminen 1,76 g (3,8 mmoolia) tuotetta 6e kondensoitiin 1,3 g:n (5,2 mmoolia) kanssa kloori-sokeria 4 hopeatrifluorimetaa-nisulfonaatin läsnäollessa noudattaen esimerkin 1 menetel-*· mää, saatiin 1,13 g (saanto 44 %) 14-asetyyli-N-trifluori- asetyylijohdannaista 7e.

TLC piihappogeelilevyillä (Merck F254) liuotinsysteeminä metyleenikloridi/asetoni (95:5, tilavuuksia): Rf = 0,37.

«

9660U

26 FD-MS: [M]+ 665 1H-NMR (200 MHz, CDCl3) δ: 1,28 (d, J = 5,8 Hz, 3H, 5’-CH3) 1,8-1,9 (m, 4H, 2 ' -CH2, 3'-θζ7 2,10 (dd, J = 3,8, ΙδΤο Ηζ,~~ΪΗ, 8ax-H) 2.18 (S, 3H, COCH3) 2,56 (ddd, J = 176, 1,6, 15,0 Hz, 1H, 8e-H) 2.94 (dd, J = 1,6, 18,3 Hz, 1H, lOe-H) 3.19 (d, J = 18,3 HZ, 1H, lOax-H) 3,7-4,1 (m, 2H, 4'-H, 5'-H) 4.94 , 5,32 (kaksi d:tä, J = 17,8 Hz, 2H, COCH2OCO) 5,40 (m, 2H, 7-H, l'-H) 6,55 (leveä d, J = 8,6 Hz, 1H, NHC=CF3) 7,87 (m, 2H, 2-H, 3-H), 8,2-8,4 (m, 2H, 1-H, 4-H) 13,70 (s, 1H, 6-OH).

Tuote 7e liuotettiin 1000 ml:11a metanolia ja jäähdytettiin 0 °C:seen, jonka jälkeen lisättiin typpiatmosfäärissä samalla sekoittaen natriumkarbonaatin 10%:ista vesiliuosta. Kolmen tunnin kuluttua seoksen pH säädettiin arvoon 7 etikkahapolla, laimennettiin vedellä ja tuote uutettiin metyleenikloridilla noudatten vakiomenetelmää. Raakatuote kiteytettiin dietyylieetteristä, saatiin 0,9 g (saanto 87 %) yhdistettä 4-demetoksi-ll-deoksi-ll-nitro-3'-deamino-4'-deoksi-4'-epi-N-trifluoriasetyyli-doksorubisiinia (8e).

TLC piihappogeelilevyillä (Merck F254) liuotinsysteeminä metyleenikloridi/asetoni (95:5, tilavuuksia): Rf = 0,17.

. Tuote iBe käsiteltiin trietyyliortoformiaatilla pyridinium- p-tolueenisulfonaatin läsnäollessa esimerkissä 7 kuvatulla tavalla, saatiin 0,78 g (saanto 76 %) otsikossa mainittua yhdistettä 9e.

TLC piihappogeelilevyillä (Merck F2^4) liuotinsysteeminä . metyleenikloridi/asetoni (95:5, tilavuuksia): Rf = 0,48.

il ! li i liiti I ( M ' ' 9660ϋ ESIMERKKI 10 27 4-demetolcsl-ll-deoksl-ll-nltro-3 1 -deamlno-41 -deoksl-41 -epi-amino-doksorubisiinin (2e) valmistaminen

Noudattaen esimerkissä 7 kuvattua menetelmää 0,32 g (0,43 mmoolia) yhdistettä 9e hydrolysoitiin ensin emäksisessä liuoksessa N-suojaryhmän poistamiseksi, jonka jälkeen etikkahapolla ortoformiaattisuojaryhmän poistamiseksi. Käsittelemällä vedettömällä, metanolisella kloorivedyllä, saatiin 0,16 g (saanto 61 %) otsikossa mainittua yhdistettä 2e hydrokloridina.

TLC piihappogeelilevyillä (Merck F254) liuotinsysteeminä metyleenikloridi/metanoli/etikkahappo (80:20:1, tilavuuksia): Rf = 0,30; sul.p. 159 *C (haj.).

MS-FD: [M]+ 527 ^H-NMR (200 MHz, DMSO-dg, 50 eC) 6: 1.23 (d, J = 6,2 HZ, 3H, 5 *-CH3) 1,7-1,9 (m, 4H, 2'-CH2, 3'-CH2) 2,26 (m, 2H, 8-CH2) 2,82 (m, 2H, 10^CH2) 2,84 (m, 1H, 4'-H) 4,16 (dq, J = 6,2, 9,5 Hz, 1H, 5'-H) 4,4-4,7 (m, 3H, COCH2OH, COCH2OH) 5,08 (m, 1H, 7-H) 5.24 (m, 1H, 1'-H) 5,53 (s, 1H, 9-OH) 7,98 (m, 2H, 2-H, 3-H) 8,1-8,3 (m, 2H, 1-H, 4-H.

9660l; ESIMERKKI 11 28 4-demetoksi-ll-deoksl-ll-amlno-31-deamlno-41-deoksl-4 * -epl-amlno-doksorublsilnln hydrokloridln (2q) valmistaminen 0,32 g (0,43 mmoolia) 4-demetoksi-ll-deoksi-ll-nitro-9,14-etyyli-ortoformiaatti-3'-deamino-4'-deoksi-4-'-epi-N-tri-fluoriasetyylidoksorubislinia (9e), joka valmistettiin esimerkissä 9 kuvatulla tavalla, liuotettiin 200 ml:aan metanolia ja siihen lisättiin samalla sekoittaen 20 ml syklohekseeniä ja 0,2 g 10%:ista Pd/C-katalyyttiä. Seosta keitettiin palautusjäähdyttäen 10 minuuttia, sen jälkeen se jäähdytettiin huoneen lämpötilaan ja katalyytti suodatettiin pois ja liuotin poistettiin tyhjössä. Jäännös otettiin talteen vesipitoisella 0,2 N natriumhydroksidilla ja pidettiin 8 tuntia 10 eC:ssa typpiatmosfäärissä. Sen jälkeen liuoksen pH säädettiin arvoon 5 etikkahapolla ja liuos jätettiin seisomaan 2 tunnin ajaksi huoneen lämpötilaan. Seos neutraloitiin vesipitoisella natriumvetykarbo-naatilla ja uutettiin metyleenikloridilla, saatiin, vakio-työskentelyn jälkeen, 11-aminojohdannainen vapaana emäksenä. Käsittelemällä yhdiste metanolisella kloorivedyllä, saatiin 0,15 g (saanto 55 %) otsikossa mainittua yhdistettä 2g.

TLC piihappogeelilevyillä (Merck F254) liuotinsysteeminä metyleenikloridi/metanoli/etikkahappo (80:20:1, tilavuuksia): Rf = 0,23; sul.p. 162-164 eC (haj.).

FD-MS: [M]+ 497 1H-NMR (200 MHz, DMSO-dg, 50 eC) 6: 1,23 (d, J = 6,2 Hz, 3 H, 5'-CH3) 1,7-1,9 (m, 2'-CH2, 3'-CH2) 2,21 (m, 2H, 8-θζ-) 2,80 (m, 2H, 41 -Hj" 2,88 (m, 2H, 10-CH2) * Λ· IUHHUHI ' 9660b 29 4,18 (dq, J = 6,2, 9,5 Hz, 1H, 5'-H) 4,67 (m, 3H, COCH2OH, COCH2OH) 5,05 (m, 1H, 7-H) 5,28 (m, 1H, l'-H) 5,31 (S, 1H, 9-QH) 7.88 (m, 2H, 2-H, 3-H) 8,27 (m, 2H, 1-H, 4-H) 8,18, 8,80 (kaksi leveää m:ää, 4H, 11-NH2, 4'-NH2). ESIMERKKI 12 4-demetoksi-6-deoksl-6-nltro-14-asetyyll-adriamyslnonin (6 f) valmistaminen 2 g (5-mmoolia) 4-demetoksi-6-deoksi-6-nitro-daunomysino-nia (3f) muutettiin 1,7 g:ksi (saanto 75.6 %) 14-asetyyli-johdannaista 6f_ noudattaen esimerkissä 5 kuvattua menetelmää.

TLC piihappogeelilevyillä (Merck F254) liuotinsysteeminä metyleenikloridi/asetoni (95:5, tilavuuksia): Rf = 0,32.

FD-MS [M]+ 455 1H-NMR (200 MHZ, CDCl3) 6: : 2,12 (dd, J = 14,9, 4,8 Hz, 8ax-H) 2,20 (s, 3H, OCOCH3) 2,53 (ddd, J = 2,0, 2,4, 14,9 Hz, 1H, 8e-H) 3,15 (d, J = 19,3 Hz, 1H, 10ax-H) 3,38 (dd, J = 2,0 19,3 Hz, 1H, lOe-H) 3,43 (m, 1H, 7-OH) 5,00 (m, 1H, 7-H) 5,15, 5,31 (kaksi d:tä, J = 17,9 Hz, 2H, COCH2OCO) 7.89 (m, 2H, 2-H, 3-H) 8,30 (m, 2H, 1-H, 4-H) 14,46 (s, 1H, 11-OH).

96601 ESIMERKKI 13 30 4-demetoksl-6-deoksi-6-nitro-9,14-ortoformiaatti-31-de-amino-41-deoksi-41-epi-N-trifluoriasetyyli-doksorubisii-nin (9f) valmistaminen 1,7 g (3,7 mmoolia) 4-demetoksi-6-deoksi-6-nitro-14-ase-tyyli-adriamysinonia (6f) kytkettiin 1,6 g:n (6 mmoolia) kanssa l-kloori-2,3,4,6-tetradeoksi-4-(N-trifluoriasetami-do)-L-erytro-heksopyranosidia (4) hopeatrifluorimetaani-sulfonaatin läsnäollessa, kuten esimerkissä 1 on kuvattu, saatiin 1 g (saanto (41 %) N-trifluoriasetyylijohdannaista 7f.

TLC piihappogeelilevyillä (Merck F254) liuotinsysteeminä metyleenikloridi/asetoni (95:5, tilavuuksia): Rf = 0,50.

FD-MS: [M]+ 665 0,5 g (0,75 mmoolia) yhdistettä 7f käsiteltiin trietyyli-ortoformiaatilla pyridinium-p-tolueenisulfonaatin läsnäollessa, kuten esimerkissä 9 kuvataan, saatiin kromatografisen erottamisen jälkeen 0,3 g (saanto 60 %) otsikossa mainittua yhdistettä 9f kahden diastereoisomeerin seoksena moolisuhteessa 80/20.

« TLC piihappogeelilevyillä (Merck F254) liuotinsysteeminä metyleenikloridi/asetoni (95:5, tilavuuksia): Rf = 0,65.

1H-NMR (200 MHZ, CDCl3) 6: 1,1-1,3 (m, 6H, 5'-CH3, OCH2CH3) 1.6- 2,0 (m, 4H, 2'-CH^, 31-θζΤ

2,3-2,7 (m, 2H, 8-ChJY

3,33 (S, 2H, 10-CH2) 3.6- 3,7 (m, 2H, ÖCH2CH3) 3,75 (m, 1H, 4' -h") . · «

Il : - ·«>» MM I H *· I

9660b 31 3,90 (dq, J = 6,2, 9,5 Hz, 1H, 5'-H) 4,32, 4,45 (kaksi d:tä, J = 17,4 Hz, C0CH20, isomeeri, jota enemmän) 4,20, 4,35 (kaksi d:tä, J = 16,8 Hz, C0CH20, isomeeri, j ota vähemmän) 4,87 (m, 1H, 1'-H) 5,01, 5,14 (dd, J = 5,3, 5,3 Hz, 1H, 7-H enemmän, 7-H vähemmän) 5,70, 5,72 (s, 1H, CH-OCHgCHg enemmän, CH-OCH2CH3 vähemmän) 6,04 (leveä d, J = 9,0 Hz, 1H, NHCOCF3) 7,85 (rn, 2H, 2-H, 3-H) 8,27 (m, 2H, 1-H, 4-H) 13,52, 13,55 (s, 1H, 11-OH enemmän, 11-OH vähemmän). ESIMERKKI 14 4-demetoksl-6-deoksl-6-nltro-31-deamino-41-deoksl-4'-epl-amino-doksorubislinin hydrokloridin (2f) valmistaminen 0,3 g (0,44 mmoolia) yhdistettä 9f, joka valmistettiin edellä esitetyllä tavalla, liuotettiin 200 ml:aan 0,2 N vesipitoista natriumhydroksidia ja pidettiin 10 tunnin ajan 0 eC:ssa typpiatmosfäärissä. Liuoksen pH säädettiin arvoon 8,5 etikkahapolla ja liuos uutettiin metyleeniklo- • ridilla. Vesipitoisen liuoksen pH säädettiin arvoon 8,1 ja se uutettiin toistuvasti metyleenikloridilla. Yhdistetyt, orgaaniset uutteet kuivattiin, jonka jälkeen konsentroitiin pieneen tilavuuteen ja hapotettiin pH-arvoon 3,5 vedettömällä, metanolisella kloorivedyllä. Lisättiin dietyy-lieetteriä, jonka jälkeen saatiin 0,062 g (saanto 25 %) otsikossa mainittua yhdistettä 2f hydrokloridisuolana.

TLC piihappogeelilevyillä (Merck F254) liuotinsysteeminä metyleenikloridi/metanoli/etikkahappo/vesi (30:4:1:0,5, tilavuuksia): Rf = 0,30; sul.p. 155-157 eC (hajaantuen).

* · ♦ 96601 32 MS-FD: [M]+ 527 1H-NMR (200 MHZ, DMSO-dg) 6: 1,18 (d, J = 6,3 HZ, 3H, 5'-CH3)

1,6-1,9 (m, 4H, 2'-CH2, 3'-ChJT

2,1-2,5 (m, 2H, θ-ΟΪζΤ 2,84 (m, 1H, 41-H) 3,01 (m, 2H, 10-CH2) 4.06 (dq, J = 6 ,Ύ~, 9,3 Hz, 1H, 5-H) 4,53 (m, 2H, CH2OH) 5.07 (m, 1H, 7¾) 5,26 (m, 1H, l'-H) 5,50 (m, 1H, CH2OH) 7,88 (m, 2H, 2-H, 3-H) 8,14 (leveä s, 3H, 4'-NH3+) 8,24 (m, 2H, 1-H, 4-H)~ ESIMERKKI 15 4-demetoksi-6-deoksi-6-amino-31-deamlno-41-deoksi-4'-epl-amlno-doksorublsllnln hydroklorldin (2h) valmistaminen 0,15 g (0,22 mmoolia) 9,14-ortoformiaattijohdannaista 9f, joka valmistettiin esimerkissä 13 kuvatulla tavalla, liuotettiin 150 ml:aan metanolia ja 15 ml:aan syklohekseeniä • ja käsiteltiin 0,15 g:lla 10%:ista Pd/C-katalyyttiä kuten esimerkissä 11 kuvataan, saatiin vedettömän, metanolisen kloorivetylisäyksen jälkeen 0,02 g (saanto 18,5 %) 6-ami-nojohdannaista 2h.

TLC piihappogeelilevyillä (Merck F254) liuotinsysteeminä *. metyleenikloridi/metanoli/etikkahappo/vesi (30:4:1.0,5, tilavuuksia): Rf = 0,22.

MS-FD: [M]+ 497 il ! Uii lii H 1:1 -f - 33

9 6 6 O

1H-NMR (200 MHz, DMSO-dg, 50 eC) 6: 1,18 (d, J = 6,3 Hz, 3H, 5'-CH3) 1,6-1,9 (m, 4H, 2'-CH2, 3'-ΟΪζΤ 2,1-2,5 (m, 2H, 8-CH2) 2,84 (m, 1H, 4'-H) 3,01 (m, 2H, 10-CH2) 4.06 (leveä q, J~^~6,3, 9,3 Hz, 1H, 5-H) 4,53 (m, 2H, CH20H) 5.07 (m, 1H, 7¾ 5.26 (1H, 1'-H) 5,50 (m, 1H, CH20H) 7,88 (m, 2H, 2-H, 3-H) 8,14 (leveä s, 3H, 4'-NH3+) 8,24 (m, 2H, 1-H, 4-H)~ ESIMERKKI 16 4-deraetoksl-6-deoksl-6-nltro-3 *-dearalno-41-deoksl-41-epl-amlno-daunorublsllnln hydroklorldln (lf) valmistaminen 0,78 g (1,76 mmoolia) 4-demetoksi-6-deoksi-6-nitro-dauno-mysinonia (3£) kytkettiin l-kloori-2,3,4,6-tetradeoksi-4-(N-trifluorlasetamido)-L-erytro-heksopyranosidln (£) kanssa noudattaen esimerkissä 1 kuvattua menetelmää, saatiin 0,26 g (saanto 62 %) otsikossa mainittua yhdistettä l_f ·' hydrokloridisuolana.

TLC piihappogeelilevyillä (Merck F254) liuotinsysteeminä metyleenikloridi/metanoli/etikkahappo/vesi (80:20:7:3 tilavuuksia): Rf = 0,42.

FD-MS: [M]+ 511 1H-NMR (200 MHz, DMSO-dg) 6 (muun muassa): 2,34 (s, 3H, COCH3) 3,10 (d, J = 18ΤΓΗΖ, 1H, 10ax-H) 3.27 (dd, J = 1,8, 18,7 Hz, 1H, lOeq-H) 96601- 34 5,11 (dd, J = 2,3, 4,3 Hz, 1H, 7-H) 7.8- 7,9 (m, 2H, 2-H, 3-H) 8.10 (leveä s, 3H, 4'-NH3+) 8,2-8,4 (m, 2H, 1-H, 4^h7 13,55 (S, 1H, 11-OH).

ESIMERKKI 17 4-demetoksl-6-deoksi-6-amino-31-deamlno-41-deoksl-41-epl-amlno-daunorublsllnln hydrokloridln (lh) valmistaminen 0,3 g (0,5 mmoolia) yhdistettä If liuotettiin 200 ml:aan metanolia ja 20 ml:aan syklohekseeniä ja käsiteltiin 0,2 g:11a 10%:ista Pd/C-katalyyttiä. Keitettiin 10 minuuttia palautusjäähdyttäen, jonka jälkeen katalyytti suodatettiin pois ja liuotin poistettiin tyhjössä. Kiteytettiin metano-li/etyylieetteristä, saatiin 0,2 g (saanto 76 %) otsikossa mainittua yhdistettä lh hydrokloridisuolana.

TLC piihappogeelilevyillä (Merck F254) liuotinsysteeminä metyleenikloridi/metanoli/etikkahappo/vesi (80:20:7:3, tilavuuksia): Rf = 0,39.

MS-PD: [M]+ 431 XH-NMR (200 MHz, DMSO-d6) δ (muun muassa): 1,18 (d, J = 6,3 Hz, 3H, 5'-CH3) 1,6-1,9 (m, 4H, 2 ' -CH2 , 3 '-θζΤ

2.1- 2,5 (m, 2H, 8-CH^Y

2,84 (m, 1H, 4'-H) 3,01 (m, 2H, 10-CH2) 4.06 (leveä q, J~^~6,3, 9,3 Hz, 1H, 5-H) 5.7 (m, 1H, 7-H) 5,26 (m, 1H, 1'-H) 7.8- 7,9 (m, 2H, 2-H, 3-H) 8.10 (leveä S, 3H, 4'-NH3+) 8.2- 8,4 (m, 2H, 1-H, 4^H)\ il , ta λ mu 11 -j «* .

96601' 35 ESIMERKKI 18 4-demetoksl-ll-deoksl-ll-nitro-3 1-deamino-4'-deoksl-4 1-epi-amino-daunorublsiinln hydroklorldln (le) valmistaminen 0,58 g (1,46 mmoolia) 4-demetoksi-ll-deoksi-ll-nitro-dau-nomysinonia (3e) kytkettiin sokeriin (4) noudattaen esimerkissä 1 kuvattua menetelmää, saatiin tavanomaisen työskentelyn jälkeen 0,5 g (saanto 61 %) otsikossa mainittua yhdistettä le hydrokloridisuolana.

TLC piihappogeelilevyillä (Merck F254) liuotinsysteeminä metyleenikloridi/metanoli/etikkahappo/vesi (80:20:7:3, tilavuuksia): Rf = 0,44.

MS-FD: [M]+ 511 1H-NMR (200 MHz, DMSO-dg) δ (muun muassa): 1,18 (d, J = 6,3 Hz, 3H, 5'-CH3) 1,6-1,8 (m, 4H, 2'-CH2, 3'-σζΤ 2.1- 2,5 (m, 2H, 8-CH^T 2,37 (s, 3H, C0CH31 3.07 (m, 2H, 10^CH2) 4,06 (leveä q, J = 6,3, 9,3 Hz, 1H, 5’-H) 5,03 (m, 1H, 7-H) ·; 5,32 (m, 1H, 1' -H) 7,8-7,9 (m, 2H, 2-H, 3-H) 8,10 (leveä s, 3H, 4-NH3+) 8.2- 8,4 (m, 2H, 1-H, 4^H) 13.7 (s, 1H, 6-OH).

ESIMERKKI 19 9660b 36 4-demetoksl-ll-deoksi-li-amlno-31-deamino-41-deoksi-41-epi-amlnodaunorubisiinin hydroklorldin (lq) valmistaminen 0,2 g (0,36 mmoolia) yhdistettä le muutettiin sen pelkistetyksi aminojohdannaiseksi lc[ noudattaen esimerkissä 17 kuvattua menetelmää. Saanto oli 80 %.

TLC piihappogeelilevyillä (Merck F254) liuotinsysteeminä metyleenikloridi/metanoli/etikkahappo/vesi (80:20:7:3, tilavuuksia): Rf = 0,41.

MS-FD: [M] + 481.

<1 I 14.t Milli I I 4 4» . . i

Claims (8)

96605 Patentt i vaat imukset

1. Menetelmä farmaseuttisesti käyttökelpoisen antrasyk-liiniglykosidin valmistamiseksi, jonka kaava on 1 tai 2 6 1 ö ö OV7--o-V c Μ,-7—-o-/ HjN —^ ^ 7 “ 1 joissa I*! on vety, fluori, hydroksi tai amino; R2 ja R3 tarkoittavat molemmat hydroksia tai toinen tähteistä R2 ja R3 on vety, nitro tai amino ja toinen tähteistä R2 ja R3 on hydroksi, sillä edellytyksellä, että kun R2 ja R3 ovat molemmat hydroksi, Rj on fluori, hydroksi tai amino, tai sen farmaseuttisesti hyväksyttävän happoadditiosuolan valmistamiseksi, tunnettu siitä, että (i) aglykoni, jonka kaava 3 on jossa R,, R2 ja R3 tarkoittavat samaa kuin edellä paitsi että R2 ja R3 eivät ole aminoryhmä, kondensoidaan 1-halo- 2,3,4,6-tetradeoksi-4-(N-trifluoriasetamido)-L-ervtro-heksopyranosidin kanssa, jonka kaava 4. on X 9660b CH3/^2y 1 CF-jCOHN_ jossa X on halogeeni; (ii) näin saadusta kaavan 5 mukaisesta yhdisteestä s cv?—~^yw Cf-COKV jossa Rlf R2 ja R3 tarkoittavat samaa kuin vaiheessa (i), poistetaan N-trifluoriasetyyliryhmä mainitun kaavan 1 mukaisen antrasykliiniglykosidin saamiseksi, jossa R2 ja R3 eivät tarkoita aminoryhmää; (iii) vaiheessa (ii) saatu kaavan i mukainen glykosidi muutetaan haluttaessa sen farmaseuttisesti hyväksyttäväksi happoadditiosuolaksi; (iv) vaiheessa (ii) saatu kaavan 1 mukainen glykosidi, jossa toinen tähteistä R2 ja R3 on nitro, tai sen vaiheessa (iii) saatu suola pelkistetään haluttaessa kaavan 1 mukaisen glykosidin saamiseksi, jossa toinen tähteistä R2 : ja R3 on aminoryhmä, ja mainittu kaavan 1 mukainen glyko sidi, jossa toinen tähteistä Rj ja R3 on aminoryhmä, muutetaan haluttaessa sen farmaseuttisesti hyväksyttäväksi happoadditiosuolaksi, (v) vaiheessa (ii) saatu kaavan 1 mukainen glykosidi tai :g : 18:1 9111 I 1 1 il 9660t: sen vaiheessa (iii) saatu farmaseuttisesti hyväksyttävä happoadditiosuola broroataan haluttaessa ja näin saatu 14-bromijohdannainen hydrolysoidaan vastaavan, edellä määritellyn kaavan 2 mukaisen antrasykliiniglykosidin saamiseksi; ja (vi) mainittu kaavan 2 mukainen glykosidi muutetaan haluttaessa sen farmaseuttisesti hyväksyttäväksi happoad-ditiosuolaksi.

2. Menetelmä farmaseuttisesti käyttökelpoisen antrasykliiniglykosidin valmistamiseksi, jolla on kaava 2, ,22=27 7 , jossa R, on vety, fluori, hydroksi tai amino; R2 ja R3 tar- t koittavat molemmat hydroksia tai toinen tähteistä R2 ja R3 on vety tai nitro ja toinen tähteistä R2 ja r3 on hydroksi, sillä edellytyksellä, että kun R2 ja R3 ovat molemmat hydroksi, R, on fluori, hydroksi tai amino, tai sen farmaseuttisesti hyväksyttävän happoadditiosuolan valmistamiseksi, tunnettu siitä, että (i *) 14-suojattu aglykoni, jonka kaava 6 on 6ijpC^^0CH3 1 Rl O k* (j}H 9660b jossa R,, Rj ja Rj tarkoittavat samaa kuin edellä, konden-soidaan l-halo-2,3,4,6-tetradeoksi-4-(N-trifluoriasetami-do) -L-ervtro-heksopyranosidin kanssa, jolla on kaava 4. X CF3COHN— jossa X on halogeeni; (ii') muodostuneesta kaavan 2 mukaisesta N-suojatusta glykosidistä K, C Rx , _ O - —o-y jossa Rj, R2 ja R3 tarkoittavat samaa kuin edellä, poistetaan 14-suojaryhmä kaavan 8 mukaisen yhdisteen saamiseksi CPjC OHH '—' il iu »liiti 1 1 i «e 0 9660b jossa Rj, R2 ja R3 tarkoittavat samaa kuin edellä; (iii1) kaavan 8 mukainen yhdiste muutetaan 9,14-ortofor-miaattijohdannaiseksi, jonka kaava 9 on C^COHN—^ jossa Rt, R2 ja R3 tarkoittavat samaa kuin edellä; (iv') N-trifluoriasetyyliryhmä ja ortoformiaattisuojaryh-mä poistetaan kaavan 2 mukaisen glykosidin saamiseksi; ja (ν') kaavan 2 mukainen glykosidi muutetaan haluttaessa sen farmaseuttisesti hyväksyttäväksi happoadditiosuolak-si.

3. Menetelmä farmaseuttisesti käyttökelpoisen antrasyk-liiniglykosidin valmistamiseksi, jolla on kaava 2 « 2 jossa R, on vety, fluori, hydroksi tai amino ja toinen 9660: tähteistä 1¾ ja R3 on hydroksi ja toinen tähteistä R2 ja R3 on aminoryhmä, tai sen farmaseuttisesti hyväksyttävän happoadditiosuolan valmistamiseksi, tunnettu siitä, että (i") kaavan £ mukaisen 9,14-ortoformiaattijohdannaisen CIJCOHN—^ jossa toinen tähteistä R2 ja R3 on hydroksi ja toinen tähteistä R2 ja R3 on nitroryhmä, C-6- tai C-ll-nitroryhmä pelkistetään; (ii") näin muodostuneesta, C-6- tai C-ll-aminoryhmän sisältävästä yhdisteestä poistetaan N-trifluoriasetyyli-ryhmä ja ortoformiaattisuojaryhmä mainitun, kaavan 2 mukaisen glykosidin saamiseksi; ja (iii") mainittu, kaavan 2 mukainen glykosidi muutetaan haluttaessa sen farmaseuttisesti hyväksyttäväksi happoad-ditiosuolaksi.

4. Patenttivaatimuksen 1 tai 2 mukainen menetelmä, tunnettu siitä, että valmistetaan yhdiste, joka on 4-demetyyli-3'-deamino-4'-deoksi-4'-epi-amino-daunorubi-siini tai sen hydrokloridi; 4-demetoksi-4-amino-3'-deamino-4'-deoksi-4'-epi-amino-daunorubisiini tai sen hydrokloridi; tai 4-demetoksi-4-fluori-3'-deamino-4'-deoksi-4'-epi-amino-daunorubisiini tai sen hydrokloridi. il itt ( nil I 1 t ai 9660:

5. Patenttivaatimuksen 1 tai 2 mukainen menetelmä, tunnettu siitä, että valmistetaan yhdiste, joka on 4-demetyyli-3'-deamino-4'-deoksi-41-epi-amino-doksorubi-siini tai sen hydrokloridi; 4-demetyyli-6-deoksi-3'-deamino-41-deoksi-4'-epi-amino-doksorubisiini tai sen hydrokloridi; 4-demetoksi-ll-deoksi-ll-nitro-3'-deamino-4'-deoksi-4'-epi-amino-doksorubisiini tai sen hydrokloridi; tai 4-demetoksi-6-deoksi-6-nitro-3'-deamino-4·-deoksi-4'-epi-amino-doksorubisiini tai sen hydrokloridi.

6. Patenttivaatimuksen 3 mukainen menetelmä, tunnettu siitä, että valmistetaan yhdiste, joka on 4-demetoksi-ll-deoksi-ll-amino-3'-deamino-4'-deoksi-41-epi-amino-doksorubisiini tai sen hydrokloridi; tai 4-demetoksi-6-deoksi-6-amino-3'-deamino-4'-deoksi-4'-epi-amino-doksorubisiini tai sen hydrokloridi.

7. Kaavan 5 mukainen yhdiste ’ ° A Ϊ ^7—Oy CFj C OHN —^ ^ jossa R, on vety, fluori, hydroksi tai amino; Rj ja R3 tarkoittavat molemmat hydroksia tai toinen tähteistä R2 ja R3 on vety tai nitro ja toinen tähteistä R2 ja R3 on hydroksi, sillä edellytyksellä, että kun R2 ja R3 ovat molemmat hydroksi, R, on fluori, hydroksi tai amino.

8. Kaavan 7, 8., tai £ mukainen yhdiste 9660!' 1 ό - —-O-y CFjCOHN-^ ^ ό CMj7^-o-y S CFjC OWN ------' CFjCOWN-^ joissa R! on vety, fluori, hydroksi tai amino; Rj ja R} tarkoittavat molemmat hydroksia tai toinen tähteistä R2 ja R3 on vety tai nitro ja toinen tähteistä R2 ja R3 on hydroksi, sillä edellytyksellä, että kun R2 ja R3 ovat molemmat hydroksi, R! on fluori, hydroksi tai amino. ;l ma liiti n ι «· : 9660B