PT93049A - Processo para a preparacao de compostos de aril-hidroxi-ureia possuindo actividade anti-inflamatoria e de composicoes farmaceuticas que os contem - Google Patents

Description

Descrição referente a patente de invenção de: THE WELLOOIE EOUDATION LIMITED, britanica, industrial é õõmércial, com sede em 183-193 Euston Road, Lon-don 'Ml 2BP, Inglaterra, (inventores : William Paul Jaòkson e Jolin Anthony Salmon, residente na Inglaterra), para "PROCESSO PARA A PREPARAglO DE COMPOSTOS DE ARIL-HIDROXI-UREIA POSSUINDO ACTIVIDADE αντί-in- elama tO rí a e·de~composições FARMACÊUTICAS 'QUE OS CONTEM".

Descrição A presente invenção refere-se a novos compostos de aril-hidroxi-ureia que possuem actividade anti -inflamatória, aos processos para a sua preparação, às for-mulaçóes farmacêuticas que os contêm e que opcionalmente podem conter um ou vários ingredientes activos. farmacológicos diferentes e ainda & utilização desses compostos em medicina.

Na patente Europeia nS 0055418 encontra--se descrita uma classe de compostos que são inibidores duais das enzimas 5-lipoxigenase e cielo-oxigenase de pre-curso metabólico do ácido araquidónico dos mamíferos, tendo-se verificado que possuem actividade anti-inflamatória e actividades afins. Existem outros compostos que foram descritos como inibidores de 5-lipoxigenase e/ou ciclo-oxige-nase, incluindo alguns derivados de naftiloxi, por exemplo . conforme descrito na patente Norte Americana n^ 3740437 ou \ em "Proc. Ann. Symp. Inst. Basic Med. Sei., Royal College - 1 - of Surgeons of ingland, Qctober 1982, pp. 263-274”. Os componentes, digo, compostos descritos na última obrã referida engloba o composto conhecido por nafazatrom. A patente Europeia n2 0196184 descreve uma classe de derivados de ácido hi-droxâmico os quais são inibidores da enzima 5-1ipoxigenase. A patente Europeia nfi 0299761 descreve uma sub-classe de ácidos n-alcanoil-hidro-xâmicos (X-alquilados que se podem considerar englobados no âmbito da classe dos derivados de ácido hidroxâmico descritos na patente Europeia n2 0196184 possuindo os compostos dessa sub-classe propriedades farmacológicas particularmente desejáveis no pedido feito à sua capacidade para inibirem a enzima 5-lipoxigenase. Descobriu-se agora, no âmbito da classe de compostos descritos na patente Europeia n2 0196184, outra sub-classe de compostos caracterizados como n-hidroxi-ureias (X-metiladas, que possuem propriedades físicas e farmacológicas particularmente vantajosas, por exemplo, no que diz respeito ás suas propriedades inibido-ras de 5-lipoxigenase e anti-oxidante e no que diz respeito também à longa duração de acção demonstrada pelos seus dois enantiómeros.

Em consequência, de acordo com a presente invenção, proporciona-se um composto de fórmula (I).

Em que·' (I)

Ar representa 4-halo-fenilo;

Ar’ representa l,3y- ou 1,4-fenileno; Y representa (E)-GH=Ctíj e 1 2 R e R são seleccionàdos independentemente entre hidrogénio e alquiloj e seus sais de base e seus derivados fisiológicamente funcionais.

Eaz-se observar que os compostos de fórmula (I) e os seus sais de base podem existir nas formas enantiõmerieas (R) ou (S)· Em consequência, a presente in— 2

venção abrange no seu âmbito qualquer dos enantiómeros individuais (.R) e (S) dos compostos de fórmula (1) e os seus sais de base substancialmente livres, isto é, associados com menos do que 55¾ do outro enantiómero e misturas desses enantiómeros em quaisquer proporçóes, incluindo as misturas racémicas contendo quantidade substancialmente iguais dos do is enant iómeros.

Os compostos preferenciais da presente invenção englobam aqueles em que

Ar representa 4-fluoro-fenilo; e/ou

Ar* representa 1,3-fenileno; e/ou 1 2 R ‘e R representam ambos hidrogénio; e seus sais de base e seus derivados fisiológicamente funcionais.

Um composto particularmente preferido de fórmula (I) e que possui propriedades anti-oxidantes e ini- bidoras de 5-lipoxigenase excepcionalmente vantajosas, particularmente no que diz respeito à sua duração de acção, é IE)-H- |l-metil-3- 3-(.4-fluoro-fenoxi)fenil prop-2-en-l--il j -3J-hidroxi-ureia, de preferência na forma de uma mistura racémica dos dois enantiómeros.

Os sais de base dos compostos de fórmula (I) que são adequados para utilização em medicina são aqueles era que o catião é fisiológicamente aceitável. Contudo, considera-se englobados no âmbito da presente invenção os sais de base que possuem catióes não fisiológicamente aceitáveis, quer para utilização em aplicaçóes não medicinais quer para a aplicação como intermediários para a preparação de compostos de fórmula (,!) e seus sais fisiológicamente aceitáveis e seus derivados fisiológicamente funcionais.

Os sais de acordo com a presente invenção englobam os sais de amónio, os sais de metais alcalinos taiá como os de sódio e de potássio, os sais de metais alcalino-terrosos tais como os de cálcio e de magnésio, os sais com bases orgânicas tais como a diciclo-hexil-amina e [ a ií-metil-D-glucamina, e os sais com aminoácidos tais como a - 3 -

arginina e a lisina.

Os compostos anteriores de fórmula (I) e os seus sais de base fisiológicamente aceitáveis e seus dericados fisiológicamente funcionais serão designados daqui em diante como ”compostos da invenção” em relação aos aspectos terapêuticos e farmacêuticos da presente invenção adiante discutidos.

De acordo com aspectos adicionais da presente invenção proporciona-se também: (a) compostos da invenção para utilização em terapia; (b) formulações farmacêuticas contendo um composto da invenção, pelo menos um veiculo ou excipi-ente farmacêutico e, opcionalmente, um ou vários ingredientes terapêuticos diferentes. (c) a utilização de um composto da invenção para a preparação de um medicamento para a profilaxia ou para o tratamento de um estado clinico para o qual seja prescrito um inibidor de 5-lipoxigenase ou um anti--oxidantej (d) a utilização de um composto da invenção para a preparação de um medicamento para a profilaxia ou para o tratamento de (I) um estado espamogénico, (II) um estado alérgico, (III) formação de um tumor, (IV) um estado que implique a aglomeração das plaquetas sanguíneas, (V) um estado inflamatório, ou (VI) aterosclerose; (e) um método para a profilaxia ou.para o tratamento de um estado clínico num mamífero, por exemplo nos seres humanos, para o qual seja indicado um inibidor de 5-lipoxigenase ounum anti-oxidante, consistindo esse método na administração ao paciente de uma quantidade tera-. peuticamente eficaz de um composto da invenção; e . (f) um método para a profilaxia ou para - 4 - τχηι tratamento de um estado clínico num mamífero, incluindo seres humanos, sendo esse estado um dos seguintes (I) um estado espamogénico, (II) um estado alérgico, (III) a informação de tumor, (IV) um estado que implique a aglomeração das plaquetas sanguíneas, (V) um estado inflamatório, ou (VI) aterosclerose, 0 qual consiste em administrar ao referido paciente uma quantidade terapeuticamente eficaz de um composto da invençãoj (g) prosessos para a preparação dos compostos da invenção.

Devido ás suas propriedades inibidoras de 5-lipoxigenase, õs compostos da presente invenção encontram aplicação na profilaxia ou no tratamento de estados clinicos para os quais seda prescrito um inibidor da lipoxigenase associada ao persurso metabólico do ácido a-raquidónico, especialmente (I) estados espasmogénicos, (II) estados alérgicos, (III) formação de tumores, (IV) estados que impliquem a aglomeração das plaquetas sanguíneas, e (V) estados inflamatórios jástes pontos serão discutidos caso a ca so. s (i) são exemplos de estados espamogénico cos os que envolvam o tecido muscular liso, especialmente a constrição do musculo liso das vias respiratórias, taás como a asma intrínseca (incluindo a asma bronquica idiopá-tica e a asma cardíaca), a constrição do musculo liso arterial e bronquico tais como o espasmo coronário (incluindo o espasmo associado ao infatre miocárdio, o qual pode provocar ou não o colapso ventricular esquerdo originando asma cardíaca) e o 'colapso' ou espasmo carebral. Outros - 5 - f /

exemplos englobam as doenças intestinais provocadas por contracção muscular anormal do cólen tais como os estados conhecidos por 'síndroma dos intestinos irritáveis', ' có-len espático' e‘'colite mucosa'. (ii) Os exemplos de estados alérgicos sãô a asma intrínseca, as doenças alérgicas da pele cuja origem seja total ou parcialmente alérgica tais como o eczema, as doenças intestinais alérgicas (incluindo a doença coeliaca), os estados alérgicos dos olhos tais como a febre dos fenós, (as quais podem adicionalmente ou em alternativa afectar o tracto respiratório superior) e a conjuntivite alérgica. (iii) Os exemplos de tumores são os neoplasmas da pele, o mastOcitoma e outras formas de proliferação celular, tanto benignas como malignas. i'az-se observar que a eficácia dos compostos: da presente invenção na profilaxia e no tratamento de tumores pode advir de outras propriedades para além da inibição de 5-lipoxigenase, que inibam também a proliferação celular. (iv) Os exemplos de estados que implicam a aglomeração de plaquetas sanguíneas são os: resultantes de trombose, incluindo 'colapsos* cuja origem seja total ou parcialmente trombética, a trombose coronária, a flebite e a flebo trombose (estas duas últimas situaçbes podem estar associadas eventualmente com inflamaçSes). (v) Os exemplos de estados inflamatórios são os (a) pulmóes tbj articulaçbes, (c; olhos, (d) intestinos, (e) pele e (f) coração, particularmente os associados à infiltração de leucócitos nos tecidos inflamados. São exemplos destes estados inflamatórios os seguintes: (a) Estados inflamatórios pulmonares incluindo a asma, a bronquite e a fibrose cistica (podendo adicional ou altemativamente envolver os tecidos intestinais ou outros). (bj Os estados inflamatórios das articu-laçOes incluindo a artrite reumatóide, a espondilite reu-. matóide, a osteoartrite, a artrite de tipo gutoso e outros . estados artríticos. - 6 - (c) Istados inflamatórios dos olhos incluindo a uveíte (abrangendo também a irite) e a conjunti-vite. (d) Os estados inflamatórios dos intestinos incluindo a doença de Cronh, a colite ulcerativa e a proctite distai. (e) As doenças inflamatórias da pele incluindo as que estão associadas com a proliferação celular tais como a psoriase, eczema e dermatite (quer sejam de origem alérgica ou não). (f) Os estados inflamatórios do coração incluindo os danos provocados por infarte das coronárias.

Existem outros estados inflamatórios que incleum a necrose tecidual. em inflamações crónicas e a rejeição tecidual posterior ás transplantações cirúrgicas. Devido ás suas propriedades anti-oxidantes, os compostos da presente invenção encontram também aplicação na profilaxia e no tratamento de estados, clínicos para os quais seja prescrito um agente citoprotector que possua essas propriedades, por exemplo, nos casoa da ateroesclorese e da artrite.

Devido ás suas propriedades: únicas, os compostos da presehte invenção também podem ser utilizados na profilaxia ou no tratamento de infecções bacterianas e fúngicas, de dismenorreia, de esclorese múltipla e de estados clinicos para os quais seja prescrito um agente imuno--supressor, anti-convulsivo ou analgésico. Os compostos da presente invenção exibem também actividade hipocoles-tero-lémica. A quantidade necessária do composto da presente invenção (adiante designado por ingrediente activo] necessária para se conseguir um efeito terapêutico variará, como é evidente, com o composto particular, com a via de administração, com o paciente sob tratamento e com a doença ou disfunção particular que se pretende tratar. Considera--se uma dose adequada para o tratamento de um mamífero que sofra ou que eventualmente venha a sofrer de quaisquer das - 7 - f

situaçóes clinicas anteriomente descritas, uma dose compreendida entre 0,lpg e 5Q0mg de composto/quilograma de peso do corpo. Io caso da administração sistemática, digo, sistémica a dose estará tipicamente compreendida entre 0,5 e 500 mg de eomposto/quilograma de peso do corpo, mais preferencialmente a dose estará compreendida entre 0,5 e 50mg/kg de peso do corpo, por exemplo, entre 5 e 25mg/kg, sendo ã sua administração feita duas ou três vezes por dia. Io caso da administração tópica, por exemplo, á pele ou dos alhos, considera-se adequada uma dose compreendida entre 0,lng-100ug de base o quilograma tipicamente cerca de O.ljig/kg. Io caso de dosagem oral para a profilaxia ou para o tratamento de constrição do musculo liso das vias respiratórias, por exemplo, no caso da asma ou da broquite, pode especifar-se uma dose adequada do composto da presente invenção conforme descrito no parágrafo anterior, mas é mais preferencial que essa dose seja compreendida entre lmg e lOmg de base por quilograma de peso do corpo, considerando-se ainda mais preferencial uma dose compreendida entre lmg e 5m/kg de peso do corpo, por exemplo, entre 1 e 2mg/kg. Io caso da administração pulmonar, a dose estará tipicamente compreendida entre 2p.g e luOmg/kg, por exemplo, entre 20p.g e 0,5mg/kg, especialmente entre 0,1 e 0,5mg/kg.

Embora seja possível administrar o ingre- diente activo isoladamente, é preferível apresentá-lo como formulação farmacêutica constituída por um composto da presente invenção em associação com um veiculo ou excipiente, farmaceuticamente aceitáveis e, opcionalmente, um ou vários ingredientes terapêuticos diferentes. Como é evidente o veiculo ou excipiente deve ser compatível com os outros ingredientes da formulação e não deve ser prejucidial para o paciente. 0 ingrediente activo pode constituir entre 0,1% e 99,9% em peso da formulação. As doses unitárias tipicaê de uma formulação de. acordo com a presente invenção conte em entre 0,lmg e lg de ingrediente activo. 3Para administração • tópica, o ingrediente activo constitui preferencialmente 8 f entre 1% e 2% em peso da formulação, mas o ingrediente activo pode constituir até cerca de 10$ p/p. As formulações adequadas para administração nasal ou bucal contéem tipicamente entre 0,1 e 20fo p/p, por exemplo, 2fo p/p de ingrediente activo.

As formulações de acordo com a presente invenção englobam as que possuem forma adequada para administração oral, pulmonar, oftálmica, rectal, parenteral (incluindo as formas de administração subcutânea, intramuscular e intravenosa), intra-articular, tópica ou nasal/bucal.

Convenientemente as formulaçães da presen te invenção podem ser apresentadas na forma de dosagem unitária e podem ser preparadas por quaisquer métodos bem conhecidos na especialidade farmacêutica. Todos esses métodos englobam o passo de. associar o ingrediente activo com o veiculo o qual constitui um ou vários, ingredientes acessórios. Em geral, procede-se â preparação das formulações misturando uniforme intimamente o ingrediente activo com um veiculo liquido ou com um veiculo sólido finamente dividido ou com ambos, e depois, se desejado, confere-se ao produto a configuração pretendida.

As formulações de acordo com a presente invenção adequadas para administração oral podem ser apresentadas na forma de unidades discretas tais como as cápsulas, os comprimidos, as pastilhas ou as pílulas, contendo cada uma delas uma quantidade pré determinada de ingrediente activo; também se podem apresentar na forma de pó ou de grânulos; na forma de uma solução ou de uma suspensão num liquido aquoso ou não aquoso; ou na forma de uma emulsão do tipo óleo-em-água ou do tipo água-em-óleo. Q ingrediente activo também pode estar na forma de uma pílula grande, electuário ou pasta. É possível preparar uma pastilha comprimindo ou moldando o ingrediente activo, opcionalmente com | um ou vários ingredientes acessórios. Ê possível preparar • as pastilhas comprimidas fazendo a compressão, numa máquina - 9 - adequada, do ingrediente activo numa forma fluida livre tal como um pó ou grânulos, misturado opcionalmente com um agen te ligante, lubrificante, diluente inerte e/ou com um agente tensio-activo ou dispersante. Ê possível" preparar pastilhas moldadas fazendo a moldagem, numa máquina adequada, de uma mistura de ingredientes activo em pó e de um veiculo adequado humedecido com um diluente liquido inerte. As formulações para administração rectal podem assumir a forma de um supositório que incorpora o ingrediente activo e um veiculo tal como a manteiga de cacau, ou podem ainda assumir a foima de um clister.

As formulações adequadas para administração parenteral incorporam tipicamente uma preparação aquosa esterilizada do ingrediente activo a qual é preferencialmente isotónica com o sangue do paciente.

As formulações adequadas para administração intra-articular podem assumir a forma de uma preparação aquosa esterilizada do ingrediente activo, a qual pode assumir posteriormente uma forma micro-cristalina, por exemplo, uma suspensão aquosa micro-cristalina. As formulações lipossómicas e os sistemas poliméricos biodegradáveis também podem ser utilizados como veículos de ingrediente activo tanto para a administração intra-articular como para a administração oftálmica.

As formulações adequadas para administração tópica englobam as preparações liquidas e semi-liquidas tais como os linimentos, loções e aplicações; emulsões do tipo óleo-em-água e do tipo água-em-óleo tais como os cremes, os unguentos e as pastasj e as soluções e suspensões tais como as gotas. Por exemplo, para administração oftál-limica, pode apresentar-se o ingrediente activo na forma de gotas aquosas para os olhos, por exemplo, na forma de uma solução numa concentração variável entre 0,1 e 1,0fo p/v.

As formulações adequadas para administração por inalação englobam os pós de partículas finas ou vapores que podem ser gerados por meios de tipos diversos de aerossóis, nebulisadores ou insufladores pressurizados e de - 10

doses calibradas. Para administração pulmonar através da boca, as dimensães das partículas de pé ou das goticulas en-contrarse-á normalmente compreendida entre 0,5 e lOpm, de preferência entre 1 e 5jPi, para garantir o fornecimento a árvore bronquica. Para administração nasal a dimensão das partículas estará normalmente compreendida entre 10 e 500^am, para garantir a retenção da quantidade nasal.

Os inaladores de doses calibradas são aerossóis pressurizados contendo tipicamente uma formulação em suspensão ou solução do ingrediente activo num propulsor liquefeito. A utilização destes dispositivos processa-se de modo a proporcionar uma descarga da formulação através de uma válvula adaptada para fornecer um volume calibrado, tipicamente entre 10 e 150p.l, de modo a proporcionar uma as--persão de partículas finas contendo o ingrediente activo.

Os propulsores adequados englobam alguns compostos de cloro--fluoro-carbono, por exemplo, dicloro-difluoro-metano, tri-cloro-fluoro-metano, dicloro-tetra-etano e suas misturas. Adicionalmente a formulação pode conter um ou vários co-sol-ventes, por exemplo,Aetanol, agentes tensio-activos tais como o ácido oleico ou o trioleato de sor-bitano, anti-oxidan-tes e agentes aromatizantes adequados.

Os nebulisadores são dispositivos comercialmente disponíveis que transformam as soluçOes ou suspensões do ingrediente activo em névoas terapêuticas do tipo aerossol, quer por meio da aceleração de um gás comprimido através de um orifício de venturi estreito, tipicamente o proprio ar ou o oxigénio, ou por meio de agitação ultra-sónica. As formulações adequadas para utilização nos nebulisa-dores são constituídas pelo ingrediente activo num veiculo liquido e incorporam até 40£ p/p da formulação, de preferência menos do que 20fo p/p. Tipicamente o veiculu é água ou uma solução alcoolica aquosa diluída, de preferência isotó— nica com os fluidos do corpo através da adição de, por exemplo, cloreto de sódio. Os aditivos, opcionais englobam os • conservantes no caso de a formulação não ser esterilizada, Por exemplo, o hidroxi-benzoato de metilo, anti-oxidantes, - 11

agentes aromatizantes, óleos voláteis, agentes tampão e agentes tensio-activos.

As formulações adequadas para administração por insuflação englobam os pds finamente divididos, os quais podem ser fornecidos por meio de um insuflador ou introduzidos na cavidade nasal por aspiração. Io insuflador Q! p<5 fica oontido em cápsulas ou em cartuxos, tipicamente feitos de gelatina ou de plástico, os quais são perfurados ou abertos in situ sendo o pó libertado no ar através do dispositivo e posteriomente inalado, ou por meio de uma bomba aecionada manualmente. 0 pó utilizado no insuflador é constituido eventualmente apenas pelo ingrediente activo ou é constituido por uma mistura pulverulenta incorporando o ingrediente activo, um diluente em pó adequado tal como a lactose e opcionalmente um agente tensio-activo. Tipicamente o ingrediente activo constitui entre 0,1 e 100$ p/p da formulação. -

Para além dos ingredientes anteriormente referidos as formulações de acordo com a presente invenção podem incorporar um ou vários ingredientes adicionais tais como os diluentes, tampões, agentes aromatizantes, ligantes, agentes tensioactivo, espessantes, lubrificantes, conservantes, por exemplo, o hidroxi-benzoato de metilo, anti-axi dantes e agentes emulsionantes. Os compostos da presente invenção podem ser utilizados vantajosamente em combinação com um ou vários ingredientes terapêuticos diferentes selec cionados entre antibióticos (por exemplo, um agente anti-bacteriano), agentes anti-fungicos, ou agentes anti-virais, anti-histaminicos (particularmente uma anti-histaminieo de acção periféricaj, ou fánnacos anti-inflamatórios não este-róides (PAUTE).

Os compostos destas combinações podem ser administrados simultaneamente, por exemplo, na mesma formulação ou em formulações separadas, ou sequencialmente no decurso de um intervalo de tempo suficientemente curto para . proporcionar um efeito terapêutico combinado pretendido, lo ! caso de os compostos serem utilizados na mesma formulação, 12

pode utilizar-se uma formulação de acordo com a presente invenção contendo para além do composto da presente invenção outros ingredientes. A combinação com um agente anti-hista-minico é particularmente útil para utilização na profilaxia e no tratamento da asma. Pode seleccionar-se um anti--histaminico adequado entre os compostos descritos nos pedidos de patentes Europeias n® 0859959 e 0117502. A quantidade e o regime de dosagem para esses anti-histami-nicos podem ser determinados de acordo com as prescrições referidas nesses dois ducumentos. As anti-h.istam.inas especialmente preferidas são o ácido (E)-3-(6-(3-pirrolidi-no-l-(4-totil)prop-lE-enil-(2-piridil) acrílico e o ácido (E)-3-(6-(3-pirrolidino-l-(4-tolil)próp-lE-enil(2-piridilj propiónicò. Outra anti-histamina preferida é o (E)-1-(4--metil-fenil)-l-(2-piridil)-3-pirrolidino-prop-l-ene, também conhecido por triprólidina. A combinação com (ΡΑΙΝΕ) é particularmente útil para utilização na profilaxia e no tratamento de estados inflamatórios das articulações tais como os an-teriormente referidos. Descobriu-se que a utilização destas combinações no tratamento de estados inflamatórios das articulações proporcionam um efeito terapêutico superior ao que se obtém utilizando apenas o fármaco isolado. Em particular, a redução da intumescência da articulação são significativamente melhorados quando se utiliza a terapia combinada. Além disso existe uma redução nas perdas de proteoglicano da cartilagem articular da articulação e ve-rifica-se uma infiltração reduzida de leocócitos polimor-fonucleares e de leucócitos de outro tipo no interior do tecido sinovial, não se observando esses efeitos quando se utiliza apenas o fármaco isolado.

Sabe-se que os PAINE, particularmente quando utilizados em elevados niveis de dosagem, provocam ulceração gástrica. Para além do efeito terapêutico melhorado que se observa quando se utiliza os PAINE em combinação com um composto da presente invenção, verifica-se que - 13 - as propriedades anti-oxidantes deste último proporciona ci-to-protecção contra o efeito ulcerativo dos PAINE» pelo que é possível administrar doses superiores de PAINE com menor risco de provocar ulceração.

Deste, modo a presente invenção proporciona ainda uma formulação farmacêutica adequada para administração oral ou para injecção intra-articular, constituída por um composto da presente invenção (tal como an-teriormente defenido) e pelo menos por um PAINE. Os PAINE adequados englobam a acemetacina, alminoproféno, amfênác de sódio, aminoprofeni, antitrazafeno, antrafenina, aurano-fina, bendazac, lisinato, benzidamina, beprozina, bropera.-mol, bufezolac, carprofeno, cinmetacina, ciproquazona, cli-danac, cloximato, dazidamina, deboxamet, delmetacina, deto-midina,dexindoprofeno, diacereina, diclofenac, difisalmina, difenpiramida, emorfozona, ácido enfenâmico, enolicam, epi-rizol, etersalato, etodolac, etofenamato, fanetizol, mesi-lato, fenclofenac, fenclorac, fendosal, feniflumizol, fen-tiazac, feprazona, floctafenina, flunixina, flunoxaprofeno, fluproquazona, flurbiprofeno, fopirtolina, fosfosal, furclup profeno, furofenac, glucametacina, guaimesal, ibuprofeno, ibuproxam, indometacina, isofezolac, isonixim, isoprofeno, isoxepac, isoxicam, cetoprofeno, HC1 de lefetamina, leflu-nomida, lofemizol, lonazolac,de cálcio, lotifazol, loxopro-feno, lisina, clonixinato de lisina, meclofenamato de sódio, meseclazona, miroprofeno, nabumetona, naproxeno, nictindol, nimesulida, orpanoxina, oxametacina, oxapadol, oxaprozin, citrato de perisoxal, pimeprofeno, pimetacina, piproxeno, pirozolac, pirfenidona, piroxicam, pirprofeno, pranoprofeno, maleato de proglumetacina, proquazona, piridoxiprofeno, su-doxicam, suprofeno, talmetacina, talniflumato, tenoxicam, tiazolinobutazina, tielavina B, ácido tiaprofénico, HC1 de tiaramida, tiflamizol, timegadina, tioxaprofeno, ácido tol-fenâmico, tolpadol, triptamida, ufenamato e zidometacina.

Os EAINE preferidos são naproxeno, flu-biprofeno, cetoprofeno, aminoprofeno, carprofeno, clidanac, dexindoprofeno, diclofenac, ácido enfenâmico, fenclofenac, - 14 -

flunoxaprofeno, ibuprofeno, indometacina, isoprofeno, loxo— profeno, meclofenamato de sódi®, miroprofeno, piroxicam, pirprofeno, pranoprofeno, suprofeno, ácido tiaprofénico, tioxaprofeno e zidometacina.

Os ΡΑΠΤΕ particularmente preferidos para utilização de acordo Com este aspecto da presente invenção são clidanac, diclofenac, ibuprofeno, indometacina, supro--feno, naproxeno, piroxicam, flurbiprofeno, cetoprofeno e ácido tiaprofénico. Também se pode utilizar os PAINE seguin tes, designados pelo seguinte número de código de'fabricante (Ohemical Abstraets Index Guide, 1989)i 480156s, AA861, ADI491, ADI590, AEP802, APP86.0, AHR6293, A177B, AP504, AS8-001, BAY08276, BPPO, BW5400, B¥755C, CHINOII 127, 01100,-C0893XX, CPP, D10242, DKA9, DV17, EB382, EGYT2829, E1508, P1044, PZ, GP53633, GP650, CT3658, HG/3, ITC1, IIP, ITP182, KB1043, KC8973, ECN.TE16090, KME4, DA2851, LT696, BU20884, M7074, Ml Dl 5> MG18311, ME714, IE897, IY309, 10164, 0103144, PR823, PV102, PY108, QZ16, R830, RS2131, RU16029, RU26559, HUB265, SCE152, SH440, SIR133, SIR136, SIR92, SPAS510, SQ2-7239, ST281, SX1032, SY6001, SaH46798, TA60, TAI901, TEI615, TVX2706, TTO60, TZI615, U60257, UR2310, ¥y232G5, ¥Y41770, YM09561, YM13162, YS1033, e ZK31945.

Outros PAH1 englobam os salicilatos, es-pecificamente a aspirina, e também as fenil-butazonas e seus sais farmaceutieamente aceitáveis.

Uma formulação^ de acordo com este aspecto da presente invenção é constituída tipicamente por uma quantidade citoprotectora não tóxica de um composto da invenção e por uma quantidade eficaz não tóxica de um PAINE (mas potencialmente ulcerogénica na ausência do composto da presente invenção;. A quantidade DE PAINE na formulação dependerá do efeito pretendido e será selèccionado pelo médico tendo em consideração a idade, o peso, o estado geral de saúde e outras condições do paciente. A quantidade do com-. posto da presente invenção que se incorpora na composição é \ seleccionada de modo a ser compatível com o PAINE e também - 15 - de modo a proporcionar um efeito citoprotector suficiente para melhorar ou para prevenir o efeito ulcerogénico gástrico do iAXEE. As quantidades tipicas dos compostos da presente invenção para utilização em conjunto com um EAINE em formulaçSes oral ou intra-articular são as anteriormênte indicadas.

De acordo com um aspecto adicional da presente invenção proporciona-se também um processo para preparação de um composto da invenção, o qual consiste em fazer reagir um composto de fórmula (II).

Ahoh (II)

Em que R representa um grupo dê'fórmula

H Àr-O-Ar1-Y-è- ‘ Ah3

Conforme defenido para um composto de fórmula (I), com o agente ou com agentes adequados e sob condiç8es'de reacção tais que permitam efectuar a conversão do grupo n-hidrogénio num grupo n-C0IH2J E consiste em converter opcionalmente o composto da presente invenção assim formado num seu sal correspondente.

Tipicamente efectua-se a reacção tratando o composto de fórmula (II) com um cianato de um metal de grupo I, por exemplo, com cianato de potássio, num solvente não polar tal como o tetra-hidrofurano (THE), na presença de um ácido. Ê possível preparar os compostos de fórmula (,11) por oximação da cetona correspondente utilizando, por exemplo, hidroxil-amina num solvente polar adequado tal como o metanol, seguindo-se reducção da oxima in situ utilizando, por exemplo, ciano-boro-hidreto de sódio/acido oxálico. Acetona apropriada pode ser obtida comercialmente ou por reacção do aldeído correspondente com, por exemplo, hidroxido de sódio aquoso (MaOH)/acetona ou com acetil-me-til-fosfonato de dimetilo/carbonato de potássio anidro num - 16

solvente adequado tal como o THF. O aldeído apropriado pode ser obtido comereialmente ou, por exemplo, por litiação do correspondente composto de bromo seguindo-se tratamento com dimetil-formamida (DMF). ϋ composto de bromo pode ser obtido comercialmente ou, por exemplo, por reacção de um composto de fórmula ArlS, em que os radicais Ar e L possuem as significações anteriormente definidas e S representa um metal do grupo I, com um compost® de fórmula Ar'Br, em que Ar’ possui as'significações anteriormente definidas, num solvente adequado tal como a l-metil-2-pirrolidinona.

Tipicamente efectua-se a reacção de litiação utilizando butil-litio a uma baixa temperatura, por exemplo, a -60 C, num solvente não polar tal como o THF. Também se pode obter o aldeido tratando o correspondènte composto de dibromo-metilo com o sal de di-sódio do ácido etilenodiamina-tetra-acético (EDTA.21a)/carbonato de cálcio num sistema solvente polar tal como a mistura etanol/água. 0 composto de dibromo-metilo pode ser obtido comercialmente ou, por exemplo, irradiando um composto de fórmula ArLArOH-, em que os radicais Ar, L e Ar* possuem as significações an-teriormente definidas, num solvente não polar tal como o CCl^, na presença de I-bromo-succinimida (NBS)/azo-isobuti-ro-nitrilo (AIBI).

Os enentiómeros individuais do composto da presente invenção podem ser obtidos fazendo a separação dos componentes da mistura racemica, por exemplo, por meio de cromatografia quiral em coluna ou preparando e separando o diastereoisómeros adequados, ou por síntese directa a partir do composto quiral correspondente de fórmula (II), pelo método anteriormente descrito. '

Os compostos de centro quiral de fórmula (II) podem ser obtidos convenientemente por idrólise ácida ou'alcalina do correspondente composto quiral bi-bloqueado, por exemplo, o composto -H (CC^Me^CC^Me ou o composto -M(B0C)0B0C em que BOG significa t-butoxi-carbonilo este último composto pode ser obtido tratando o álcool de centro quiral apropriado com HH(B0C)0B00 na presença de trifenil- - 17 -

-fosfina/azo-dicarboxilato de dietilo (DEAD), a uma baixa temperatura num silvente não polar tal como o tolueno, ou fazendo reagir o correspondente composto quiral de fórmula (III). ? y°R (ui) H0C=CH-Ç-N ....... ά \ 5

' W IT

Em que o radical W possui as significa- 4 5 ções anteriormente definidas e os radicais R e S representam ambos grupos t-butoxi-carbonilo, com um composto de dórmula (IY).

Ar-l-Ar1-T (IY)

Em què os radicais L e Ar* possUem as significações definidas para o composto da presente invenção e T representa um grupo pemovivel adequado tal como o bromo, tipicamente a uma temperatura elevada na presença de acetato de paládio (II), de trio(o-tolil)fosfina e de uma base adequada, por exemplo, tri-(n-butil)amina.

Os compostos quiral de fórmula (III) podem ser obtidos convenientemente por tratamento do álcool B de centro quiral apropriado com H1(B0C)0B0C na presença de' trifenil-fosfina/DEAD, ou por redução parcial do correspondente alquino de centro quiral, por exemplo, por hidro-genação quantitativa utilizando um catalisador adequado tal como o sulfato de paládio ou de bário, num solvente alcalino tal como a piridina. 0 alquino de centro quiral pode ser obtido tratando o correspondente álcool C de centro quiral com iilJ(BOG)OBOC na presença de trifenil-fosfina/DEAD. Os alcoóis A, B e C de centroçquiral apropriados podem ser obtidos comercialmente ou preparados a partir dos correspondentes cetonas utilizando agentes redutores de centro quiral adequados (JAOS 109, 7925 (198?)).

Alternativamente, podem ser obtidos a partir de alcoóis racémicos por modificação e hidrólise se-lectiva (JCS Chem. Comm. 598 (1988)), ou fazendo-se a sepa-• ração dos diastereoisómeros adequados (J. Med. Chem. £1, . 156 (1988;). Os compostos de fórmula (IY) encontram-se co- - 18 -

mercialmente disponiveis ou podem ser preparados por métodos descritos na literatura. A conversão opcional do composto da presente invenção num correspondente sal de "base pode efectu-ar-se convenientemente através da reacção com uma base apropriada.

Para uma melhor compreensão da presente invenção proporciona-se seguidamente diversos exemplos a titulo de ilustração.

Exemplos de sintese Exemplo 1 de sintese

Preparação de (B) -I-Í3- [j3-(4-fluoro-fe-noxi)fenil] -l-(E,S)-metil-prop-2-en-l-ir^ -H-hiâroxi-ureia (a) 3-(4-fluoro-fenoxi)tolueno Durante 1 hora adiciona-se gota a gota uma solução de 4-fluoro-feno1 (112,0g$ Aldrich) em anisol (250ml) a uma suspensão agitada de NaH (26,4g) em anisol (250ml). Depois de completar a adição'agitou-se a mistura â temperatura ambiente durante 16 horas. Seguidamente, durante 30 minutos, adicionou-se sequencialmente 3-bromo-to-lueno (188,lg; AldrichJ, cloreto de cobre (I) (50,Og) e TDA-1 (tris-[2-(2-metoxi-etoxi;etil] amina, 158mlj depois de se completar a adição levou-se a mistura ao refluxo durante 22 horas e a seguir arrefeceu-se até & temperatura ambiente e adicionou-se-lhe éter (2000mlj. Eiltrou-se a mistura através de "Hiflo” e lavou-se o filtrado com uma solução aquosa de HC12I, com uma solução aquosa de HaOlH IN e com água e depois secou-se e evaporou-se in vacuo. Destilou-se o éleo remanescente para proporcionar o produto desejado (101,9g; com p.e. 129-134°G/9mm Hg. (b) l-dibrom'o-metil-3- (4-fluoro-feno-xi)benzeno

Aqueceu-se ao refluxo uma solução de produto do passo (a) (101,9g) e de MS (206,7g) em CC14 (500mlJ. Depois adicionou-se ΑΙΒΕΓ (lOOmg) e irradiou-se a mistura cdm uma lampada de pressão a 254nm enquanto se le- - 19 - vava ao refluxo durante 7 horas, Adicionou-se mais algumas porçóes de ΑΪΒΕ (lUOmg) decorridas 0,5; 1; 2; 4 e 6 horas. Arrefeceu-se'a mistura até à temperatura amhiente, filtrou--se e evaporou-se o filtrado in vacuo para proporcionar o produto desejado na forma de um óleo cor de laranja (195,¾) (c) 3-(4-fluoro-fenoxij benzaldeido

Durante 20 horas levou-se ao refluxo uma mistura do produto do passo (b) (181,8gj, de CaCO^ (151,7g) e de hDri'A2Ia2H20 (37,7gj em etanõl/água (1140ml/248mlj. A- ' refeceu-se a mistura ate à temperatura amhiente, filtrou-se e evaporou-se o filtrado in vacuo. Extraiu-se o óleo remanescente com éter (500mlj, lavou-se com EC1 aquoso 2H, com uma solução aquosa saturada de HaHGO^ e com água, secou-se e evaporou-se in vacou para proporcionar um óleo viscoso cor de laranja o qual se submeteu 2 vezes a cromatografia sobre gel de silica utilizando éter/éter do petróleo (40-60] (1:9) para proporcionar o produto desejado (69,6gj. (d) 1- [3-(4-fluoro-fenoxi)fenil]but-l- -en-3-ona

Durante 4 horas levou-se ao refluxo uma mistura do produto do passo (c) (69,6g), acetil-metil-fos-fonato de dimetilo (56,2g) e de K2G03 anidro (88,9g) em IHF (500ml), Arrefeceu-se a mistura para a temperatura ambiente, filtrou-se e evaporou-se o filtrado in vacuo. Extraiu-se o óleo remanescente com éter (500mlJ, lavou-se com água, lavou-se com uma solução aquoso saturada de EaHCO^ e novamente com água, secou-se e evaporou-se in vacuo para proporcionar o produto desejado (83,4gJ. te) lf-[3 -(4-fluoro-fenoxi)fenil] but-2--en-3-ilj hidroxi-amina

Gota a gota e durante 1 hora adicionou-se piridina (63,6gj a uma solução agitada do produto do passo (d) (82,5gj e de cloridrato de hidroxil-amina (33,6g) em metanol (lOOOmlj. Depois de se completar a adição agitou-se a mistura durante 1,5 horas e depois arrefeceu-se com gelo/ /água e adicionou-se-lhe ácido oxálico anidro (289,8g). A-dicionou-se-lhe mais metanol (750ml) e adicionou-se ciano- 20

-boro-hidreto de sódio (101,2g) % mistura agitada durante 3,5 horas. Depois de se completar a adição agitou-se a mistura durante 2 horas a uma temperatura compreendida entre 0 e 5° C e depois durante 20 horas a temperatura amhiente. Filtrou-se a mistura, evaporou-se o filtrado in vacuo e extraiu-se o óleo remanescente com éter (lOOOml), lavou-se com água e arrefeceu-se com gelo/água. Ajustou-se o pH da mistura para aproximadamente 9 utilizando uma solução' a-quosa de HaOH 10M e removeu-se a fase ôrganica. Extraiu-se a fase aquosa com éter e depois combinou-se a fase orgânica com o extrato, lavou-se com água, secou-se e evaporou--se in vacuo para proporcionar o produto desejado na forma de um óleo cor de bronze (92,7g) o qual cristalizou em repouso. (f; (ε)-ν-Ί 3-[3- (4-fluoro-fenoxi)fenij^--1(R,S)-metil-prop-2-en-l-il ^ -N-hidroxi-ureia

Durante 1,5 horas adicionou-se uma solução aquosa de HC1"21\T (645mlj, â temperatura de 0° 0, a uma solução agitada do produto do passo (e) (88,Qg) e de cianato de potássio (79,2gj em THE (750ml). Depois de se ter completado a adição agítou-Se a mistura â temperatura de 0° 0 durante 2 horas e depois permitiu-se a separação. Removeu-se a fase orgânica, extraiu-se a fase aquosa com eter e procedeu-se â combinação da fase orgânica e dos ex-tractos, lavou-se cóm uma solução aquosa saturada de NaHCO^ e com agua, secou-se e evaporou-se in vacuo para proporcionar um sólido viscoso incolor. Triturou-se esse sólido com eter/eter de petróleo (40-60° 0) (3í2) e dgpois fez-se a recristalização a partir de acetato de etilo/éter de petróleo (40-60 C) (2:1) para proporcionar um sólido incolor l67,8g) cujo p.f. | 135»5-135° C (decomposição). Os espectros de EM 1H a 200 MH2 e de IV foram consistentes com o produto desejado. Análise: C 64,81% (64,54%); H 5,43% (5, 42%); I 8,52% )8,86%). * Exemulo 2 de Sintesa ·_ Preparação de (E)-I-| 3-[3-(4-fluoro-fe- - 21 -

noxi; fen-ilj -1 (R) -metil-prop-2-en-il j -hidroxi-ureia (a) Bat3-in-2(S)-ol

Obteve-se but-^-in-2(S)-ol fazendo a resolução de (+)-but-3-in-2-ol (Aldrich; de acordo com o procedimento descrito em "J. Med. Qhem. 51, 156 (1988;". (b) U,0-bis-(t-butoxi-carbonil)-Έ- [but--3-in-2(R)-il] hidroxil-amina

Gota a gota e durante 1 hora adicionou--se DBAD (180,Og), a temperatura de -78° C, a uma solução agitada de but-^-in-2(S)-ol do-passo (a) (55,Og), de trife-nil-fosfina (258,Og) é de Η,Ο-bis(t-butoxi-carboxil-amina (185,Og; íTukaJ em tolueno (1500mi;. Depois de se completar a adição deixou-se a mistura aquecer ãté a temperatura ambiente e depois agitou-se durante 2 horas. Adicionou-se-lhe éter de petróleo (40-60° C) (1500mi;, filtrou-se a mistura através de "Hiflo" e evaporou-se o filtrado in vacuo para proporcionar 0 produto desejado na forma de um óleo (200,Cg) 0 qual cristalizou em repouso. (c) Η,Ο-bis(t-butoxi-carbonil;-I-[but --3-en-2(R)-iljhidroxil-amina

Hidrogenou-se uma mistura agitada do pr£ duto do passo (b) (200,Og; e de 5% de Pd/BaS04 p/p (8,8g) em piridina (lOOOml;, á pressão atmosférica, até secar a absorção do hidrogénio. Piltrou-se a mistura através de •'Hiflo", evaporou-se o filtrado in vacuo e extraiu-se 0 óleo remanescente com éter (lOOOmlj, lavou-se com uma soluçãã aquosa de ácido cítrico a 20$ p/v e com água, secou-se e evaporou-se in vacuo para proporcionar 0 produto desejado (192,Og). (dj l-bromo-3-(4-fluoro-fenoxi)benzeno

Adicionou-se uma solução aquosa de KOI (49,Og em lOOml de água) a uma solução agitada de 4-fluoro--fenol (84,Og; Aldrich; em metanol (250ml;. Depois de se completar a adição evaporou-se a mistura in vacuo e pulverizou-se 0 sólido residual e estraiu-se com l-metil-2-pirro- • lidinona (300ml;. Adicionou-se 3-fluoro-bromo-benzeno (131, • 3g; Aldrich; e levou-se a mistura ao refluxo durante 24 ho- 22 ras e depois arrefeceu-se para a temperatura ambiente, verteu-se em água (1500ml) e extraiu-se com éter. Os extractos combinados foram lavados com uma solução aquosa de NaOH 2M, com uma solução aquosa de HC1 2M e com água, procedeu-se a secagem e evaporou-se in vacuo. Destilou-se o <5leo remanescente para proporcionar 0 produto desejado (103»ug) para p.e. 85-100° C/0,25 mm Hg. (e)' (Ε)-Ν-|3“ 3-(4-fluoro-fenoxi)fenil--1(R) -metil-prop-2-en-il^ -bidroxil-amina

Durante 3 boras agitou-se a temperatura de 115° 0 uma mistura do produto do passo (c) (100,7g), do produto do passo (d) (103,Og), de tri(o-tolil)fosfina (10, Og) e de acetato de paládio (II) (4,0g) em trí(n-butil)ami-na (300mlj. Arrefeceu-se a mistura pará cerca de 90° C, evaporou-se in vacuo e extraiu-se 0 residuo com éter (1000 ml), lavou-se com uma solução aquosa de ácido citrico a 335b p/V e depois filtrou-se através de "Hiflo". lavou-se 0 filtrado com uma solução aquosa de ácido citrico a 105¾ p/v e com água, secou-se e evaporou-se in vacuo para proporcionar um óleo viscoso cor de bronze. Extraiu-se esse Óleo com metanol (lOOOmlj e com HC1 concentrado (lOOml) e levou-se a mistura ao refluxo durante 1 bora e depois arrefeceu-se até à, temperatura ambiente e evaporou-se in vacuo. Extraiu-se ó residuo com água (lOOOml) e com uma solução aquosa de ΝεΟΝ luM (125ml;, extraiu-se com éter e lavou-se com água os extractos combinados, secou-se e evaporou-se in vacuo. Submeteu-se 0 oleo remanescenta cor de bronze a cromatografia através de gel de silica utilizando éter/éter de petróleo (40-6u° 0) (9:1) e depois utilizando apenas éter para proporcionar 0 produto desejado na forma de um <5leo amarelo (21,9g). (f) (E)-1-^3- 3-(4-fluoro-fenoxi)fenil --1 (£) -metil-prop-2-en-l—il^-l\i-bidroxi-ureia tí-ota a gota e durante 1 bora adicionou--se uma solução aquosa de HC1 2N (I60ml), à temperatura de U° C, a uma solução agitada de produto do passoy(e) (2l,9g) e de cianato de potássio (19,7g) em THE (190ml). Depois de - 23 -

se completar a adição agitou-se a mistura â, temperatura de 0° C durante 1,5 boras e depois adicionou-se-lbe uma solução aquosa saturada de MaGl e removeu-se a fase orgânica. Extraiu-se a fase aquosa com éter e combinou-se a fase orgânica e os extractos, lavou-se com uma solução aquosa de HC1 2H, com uma solução aquosa saturada de NalíCO^, com água e com uma solução aquosa saturada de EaCl, secou-se e evaporou-se in vacuo para proporcionar um sólido cor de creme o qual recristalizou a partir de acetato de etilo/é-ter de petróleo (40-60° C) (2:1) para proporcionar lâminas incolores (17,7g) cujo p.f. é 133-135° C (decomposição).

Os espectros de EM 1Ξ a 200MZ e de IV foram consistentes com o produto desejado. Análise: G 64,10$ (64,54^)j Ξ 5,475¾ (5,42jb); I 8,78fo (8,86fo) [p{]^+40,810 G (c =1,0, EtOH). '

Exemplo 3 de Síntese

Preparação de (E)-N--^3-[3-(4-fluoro-fe-noxi) fenil] -1 (S) -metil-prop-2-en-ilj· -E-bidroxi-ureia (a) but-3-in-2(R)-ol

Obteve-se but-3-in-3(R)-ol fazendo a resolução de (+)-but-3-in-2-ol (Aldricb) de acordo com o procedimento descrito em "J. Med. Cbem. 156 (1988) (b) ΤΓ ,0-bis(t-butoxi-carbonil)-I-jbut--3-in-2(S)-il] bidroxil-amina

Gota a gota adicionou-se DEAD (81,8g) â temperatura de -70° C, durante 1 bora, a uma solução agitada de but-3-in-2(E)-ol do passo (a) (25,Og) de trifenil--fosfina (117,Og) e de 1,Q-bis(t-butoxi-carboniljbidroxil--amina (83,2g) em tolueno (760ml). Depois de se completar a adiçãS deixou-se a mistura aquecer até â temperatura ambiente, filtrou-se e evaporou-se o filtrado in vacuo. Submeteu-se o óleo resultante duas vezes a cromatografia através de gel de silica utilizando DCM e éter/éter de petróleo (40-60° C) (1:4), respectivamenté, para proporcionar o produto desejado na forma de um óleo amarelo ténue )98,6g). (c) N,0-bis (t-butoxi-carbonil)-E l[but-3--en-2(S)-ii]bidroxil-amina - 24 -

Hidrogenou-se uma mistura agitada do produto do passo (Ta·) (98,6g) e de 10$ de Pd/BaSO^ p/p (2,2g) em piridina (500ml), à pressão; atmosférica, até cessar a absorção de hidrogénio. Biltrou-se a mistura através de "Hiílo*, evaporou-se o filtrado in vacuo e extraiu-se o Óleo remanescente com éter (500mlj, lavou-se com uma solução aquosa de ácido citrico a 20$ p/v e com água, secou-se e evaporou-se in vacuo para proporcionar o produto desejado na forma de um óleo cor de laranja téme (90,Og). (d) l-bromo-3-(4-fluorofenoxijbenzeno

Preparou-se 1-bromo-3-(4-fluoro-fenoxi) benzeno pelo método descrito no passo (d) do exemplo 2 dé síntese supra. (e) (E)-H- j^3-(-(4-fluoro-fenoxi.)fenil)-l(S)-metil-prop-2--en-ilj· -hidroxil-amina

Durante 3,5 horas agitou-se á temperatura de 110-120 0 uma mistura do produto do passe (c) (57,4g) do produto do passo (d) (58,7gJ, de tri(o-toliljfosfina (5,0gJ e de acetato de paládio (II) (2,0g) em tri-(n-butil)amina ^150mi;. Arrefeceu-se a mistura até à temperatura ambiente, evaporou-se in vacuo e extraiu-se o resíduo com éter (500 mlj e depois filtrou-se através de "Hiflo". Lavou-se o filtrado com uma solução aquosa de aGiclo citrico a 10$ p/v e com água, secou-se e evaporou-se in vacuo para proporcionar um óleo cor de bronze. Bxtraiu-se este óleo com metanol i500mlj e com HC1 concentrado (50mlj e depois levou-se a mistura ao refluxo durante 1 hora e a seguir arrefeceu-se até à temperatura ambiente e evaporou-se in vacuo. Removeu--se o resíduo com água (500ml; e com uma solução aquosa de MaOH 10M (60ml), extraiu-se com éter e depois submeteu-se os extratos combinados a lavagem com água até à neutralida-. de, secou-se e evaporou-se in vacuo. S.ubmeteu-se a cromato-\ grafia intermitente através de gel de silica utilizando - 25 - éter/éter de petróleo (40.60°C) (1:1) (eliminou-se) e depois na proporção 9:1, para proporcionar o produto desejado na forma de um óleo amarelo ténue viscoso (32,5g). (f) (E)(3-(4--fluoro-fenoxijfenilj-1 (S)-metil-prop-2-- en-il J—ΙΊ-h. i d r o x i-u r e i a

Durante 45 minutos e a temperatura de 0°C adicionou-se gota à gota uma solução aquosa de HC1 2M (71,4 ml; a uma solução agitada do produto do passo (e) (32,5g; e de cianato de potássio (29,3g) em ϊΗΕ (282ml;. Depois de completar a adição agitou-se a mistura & temperatura de 0°C durante 45 minutos e a seguir adicionou-se-lhe uma solução-aquosa saturada de SaOl e removeu-se a fase orgânica.

Extraiu-se a fase aquosa com éter e com-binou-se a fase orgânica com o extracto, lavou-se com uma solução aquosa de HC1 2M e com agua, secou—se e evaporou—· -se in vácuo para proporcionar um sólido viscoso o qual re~ cristalizou a partir de acetato de etilo para proporcionar lâminas incolores (25,8g; cujo p.f. é 131-132,5°G (decomposição;. Os espectros de EΚΕΓ 1H a 200MHZ e de IV apresenta-ram-sé consistentes com o produto desejado. Análise: C 64. 37% (64.549«»)} H 5.42% (5.42%); I 8.79% (8.86%). #)jp -41. 61°C (c = 1.0, EtOH).

Exemplo 4 de síntese

Preparação de (E)-E-|3-(3-(4-cloro-feno-xi)fenil;-1(R,S) -metil-prop-2-en-il^ -H-hidroxi-ureia (a) (E)-l(3-(4-cloro-fenoxi)fenii;buten-3-ona

Adicionou-se uma solução aquosa de HaOH lOH (2ml; a uma solução de 3-(4-cloro-fenoxi)-benzaldeido (23,3g; Aldrich; em acetona (150mlj e agitou-se vigorosamente. Apos alguns minutos de agitação a temperatura subiu, para 32 C. Deixou-se a mistura em repouso durante 5 minutos e depois verteu-se uma solução aquosa de HC1 2M (600mi; e 26 — extraiu-se com éter/éter de petróleo (l:lj4O0ml). Lavou-se o extrato com água e com uma solução aquosa saturada de MaCl, secou-se sobre MgSO^ e extraiu-se para proporcionar o produto aldol. Removeu-se este último com tolueno (300nfl.), adicionou-se-lhe ácido p-tolueno-sulfónico (lg) e aqueceu--se a mistura durante 1 hora. Depois arrefeceu-se a mistura, lavou-se com uma solução aquosa saturada de IaH00„ e 3 com uma solução aquosa saturada de laCl, secou-se sobre HgSO^ e extraiu-se. Eez-se a eluição do residuo através de uma coluna de gel de silica utilizando cloreto de meti leno/ éter de petróleo (40-60° C) (1:1, e depois na proporção de 3:1) e depois extraiu-se o produto da eluição para proporcionar o produto desejado (19,Og). (b) (E)-l-jj3-(4-cloro-fenoxi)feniíj buten-3-ona oxima

Extraiu-se com metanol (lOOml) o produto do passo (a) (19,Og) e cloridrato de hidroxil-amina (6,9g), adiciohou-se-lhe piridina (20ml) e agitou-se a mistura durante 1 hora. Extraiu-se depois a mistura, dissolveu-se em eter (200ml), lavou-se com uma solução aquosa de HC1 2M e com uma solução aquosa saturada de JSaCl, secou-se sobre MgSO^ e extraiu-se para proporcionar o produto desejado (20,3ê). (c) (E)-E-|l-metil-3- (3(4“Cloro-fenoxi)feniljprop-2-enil^ hidroxil-amina

Removeu-se com metanol (lOOml) o produto do passo (b) (20g) e adicionou-se-lhe ácido oxálico (31,3g)· Arrefeceu-se a mistura em banho de gelo e adicionou-se-lhe diversas porçDes de ciano-boro-hidreto de sódio (22g), sob uma atmosfera de N2» durante 3 horas. Agitou-se a mistura mais 1,5 horas e depois adicionou-se-lhe ciano-boro-hidreto de sódio (2g) e manteve-se a agitação durante mais 0,5 horas. A seguir extraiu-se a mistura e repartiu-se o residuo entre acetato de etilo (300ml) e água (300ml). Separou-se - 27 -

a camada orgânica, lavou-se com uma solução aquosa saturada de HaHCO^ e com uma solução aquosa saturada de laCl e depois extraiu-se para proporcionar a hidroxil-amina bruta. (d) (E) -1-jjL-metil-3-^3- (4-cloro-f enoxi) fenil]prop-2-en-- il^· -I-h idroxi-ur e ia 'Extraiu-se com THE (60ml) uma porção do produto do passo (c) (6,0g) e adicionou-se-lhe cianeto dg potássio (4,9g) â temperatura de 0o 0. Decorridos 15 minutos adicionou-se-lhe goya a gota uma solução aquosa de HC1 5M (20ml) e agitou-se a mistura durante 10 minutos. Depois adicionou-se uma solução aquosa saturada de laCl (lOOml.) e éter (lOOml) e separou-se a camada orgânica, lavou-se com uma solução aquosa de HC1 21 (100ml) e com uma solução a-quosa saturada de HaOr (lOOml), secou-se sobre MgSO^ e extraiu-se para proporcionar o produto desejado o qual re-cristalizou a partir de acetato de etilo/éter de petróleo. Produção de 4,4g, p.f. 132-135° C.

Exemplo 5 de sintese

Preparação de (£)-1-^3-)^3-(4-cloro-fenoxi )f enil~J-1(S)-metil-prop-en-l-il^-M-hidroxi-ureia (a) (E)-l-)3-(4-cloro-fenoxi)fenil]but-l-en-3-ona

Durante 20 horas e sob uma atmosfera de

Ofi 12 agitou-se a uma temperatura compreendida entre 50 e 55 uma mistura de 3-(4-cloro-fenoxi)benzaldeido (50,0g; Aldri-ch), de acetil-metil-fosfonato de dimetilo (35,7g| Lancas-ter) e de i^CO^ anidro (59,4g) em THE (300ml). Eiltrou-se a mistura arrefecida, lavou-se o residuo com THE e submeteu-se os filtrados combinados a evaporação in vacuo para proporcionar um óleo cor de laranja o qual se submeteu a ero- • matigrafia intermitente em coluna de gel de silica utilizan- • do como eluente éter/éter de petróleo (40-60° C) (1í1 v/v) - 28 -

para proporcionar o produto desejado na forma de um óleo amarelo ténue e viscoso (52,Sgj. (b) (E)-l(P0-metil-3-|j3--(4-cloro-fenoxi)fenilJprop-2-en--l-ol

Sob uma atmosfera de N2 adicionou-se simultaneamente ΒΗ^.ΤΗΡ (1.0M, 96ml) numa solução do produto do passo (a) (52,7g) em THE (volume total de 96ml) a uma solução agitada de (S)-3,3-di-fenil-pirrolo- 1,2-c 1,3,- 2 oxazaboro-lidina em THE (0.3M; 33ml), preparada pelo método descrito em «J00 5J5, 2861 (1988)«. Depois de completadas as adiçbes ágotou-se a mistura ã temperatura durante 15 minutos e a seguir verteu-se em gelo/solução aquosa dg HC1 2M (300g/300ml), agitou-se durante 30 minutos e extraiu-se com éter (3 x 300ml). Os extractos combinados foram lavados com uma solução aquosa de HC1 2K (200ml), com uma solução aquosa de KatíCO^ (200ml) e com água (200ml), procedeu-se & secagem sobre Na2S0^'e evaporou-se in vácuo para proporcionar o produto desejado na forma de um óleo a-marelo viscoso (55,3g) o qual cristalizou parcialmente a partir de éter/óleo de petróleo (40-60° €) (1í1 v/v). De-cantou-se o licor mãe e submeteu-se a cromatografia intermitente em coluna de silica para propo.rcionar o produto desejada na forma de um óleo amarelo ténue (25,7g) +8,7 C (c = 3.0, EtOH). Os espectros de EM 1H a 200MHZ e de IV apresentaram-se consistentes com a estrutura proposta. (c) (E)-l,0-bis(t-butoxi-carbonil)-N-jl(S)-metil-3- {3-(4-cloro-fenoxi)fenil]-prop-2-en-il^bidroxil-amina

Adicionou-se uma solução de DEAD (24,5g) em tolueno (50mlj a uma mistura agitada de produto do passo (b) (25,7g), M,0-bis(t-butoxi-carbonil)hidroxil-amina (22,9g} Eluka) e de trifenil-fosfina (36,8g) em tolueno - 29 -

(375mi;, a uma temperatura compreendida entre -65 e -70° C. Depois de se completar a adição agitou-se a mistura durante 4 horas a uma temperatura compreendida entre -65 e -70° C e depois adicionou-se-lhe mais trifenil-fosfina (5,0g) seguindo-se a adição mais DEAD (3,3g) e agitou-se a mistura durante mais 1 hora a uma temperatura compreendida entre -65 e -70° C. A mistura aquecida foi evaporada in vácuo para proporcionar um óleo castanho a qual se suhmeteu se-cessivamente a eromatografia intermitente em duas colunas de silica utilizando como eluentes respectivamente DCM e DCM/éter de petróleo (40-60° C)/éter (3:6:0:25 v/v/v), para proporcionar o produto desejado na forna de um óleo amarelo voscoso (20,3g)· (d; (Ε)-ίϊ-·|ΐ (S)-metil-3- jj-(4-cloro-fenoxi) feniij prop-2--en-ilj-hidrõxil-amina

Sob uma atmosfera de e a temperatura de 0° 0 adicionou-se ácido trifluoro-acético (28mlJ a uma solução agitada do produto do passo (c; (20,3g) em DCM (112mlj. Depois de se completar a adição agitoú-se ã mistura à temperatura ambiente durante 3 horas e depois adicionou-se-lhe éter (lOOml; e água (lOOml;. 1 mistura vigoras amente agitada adicionou-se uma solução aquosa de laOH 101 (32mi;, a temperatura de 0° C. Alcalinizou-se a mistura com excesso de uma solução aquosa saturada de NaHCO^ extraiu-se com éter (200ml; e depois lavou-se o extracto com uma solução aquosa saturada de NaHCOj (lOOml; e com água (2 x lOOml;, secou-se sobre NagSO^ e evaporõu-se in vacuo para proporcionar um óleo viscoso o qual se submeteu a eromatografia intermitente em coluna de silica utilizando éter/éter de petróleo (4:1,) para proporcionar o produto desejado, p.f. 83-84° 0,03^-31.1° (0 = i.2, CHCl^. (ej (EJ-S—i 1 (S)-metil-3-|j3— (4-cloro-fenoxi;feniij prop-2--en-ilV-D-hidroxi-ureia - 30 -

Extraiu-se com THE (lOml) uma porção de produto do passo (dj (0,29g) e adicionou-se-lhe cianato da: potássio (0,25g) à temperatura de 0o C. Decorridos 15 minutos adicionou-se-lhe gota a gota uma solução aquosa de HC1 2M (2mlJ e agitou-se a mistura durante 2 horas. Depois adicionou-se uma solução aquosa saturada de UaCl (50ml) e éter (50ml) e separou-se a camada orgânica, lavou-se com uma solução aquosa saturada de laCl (50ml) secou-se sohre MgSO^ e extraiu-se para proporcionar o produto desejado o qual recristalizou a partir de acetato de etilo/éter de petróleo. Produção de 0,26g, p.f. U9-120°C, -40,0° (c = 1.0, EtOH). .

Exemplo 6 de sintese

Preparação do sal de sódio de (E)-E-*^3-- [3- (4-fluoro-f enoxi) f enilj -1 (R, S) -metil-prop-2-en-l-ilJ --E-hidroxi-ureia

Dissolveu-se o composto do exemplo 1 de sintese (l,0g) numa mistura de NaOH aquosa (0,llg em 25ml de água; e metanol (30ml). Evaporou-se o metanol in vacuo e a solução remanescente liofilizada para proporcionar o produto desejado como um sólido cremoso.

200MHZ H1 IMR(DIS0-d6, ppm) : 1, 10-1, 21(3H, d, -CH^), 4, 75-4, 92(1H, m,>CH-), 5,27 - 6,14(2H, hs, -HH2), 6,22 -“ 6,5i(2H, s, -HO = CH-) e 6,69 - 7,37(9H, m, aromáticojj nenhum sinal de -OH

Exemplos de formulações farmacêuticas 0 termo "ingrediente activo” nas formulações que se seguem significa qualquer compostõ da presente invenção (tal como anteriormente definido, por exemplo, qualquer dos compostos dos exemplos 1 a 5 de sintese) - 31 -

Por pastilha

Exemplo Aí Pastilha

Ingrediente activo 5,0 mg Lactose 82,0 mg Amido 10,0 mg Povidona 2,0 mg Estereato de magnésio 1,0 mg

Misturou-se conjuntamente o ingrediente activo, a lactose e o amido. Procedeu-se a granulação dos pos utilizando uma solução de povidona em água purificada. Efedtouo-se a secagem dos grânulos, adicionou-se o estea-rato de magnésio e compriu-se para proporcionar as pastilhas (lOOmg por pastilha.).

Exemplo B; Unguento

Ingrediente activo 1,0 g

Parafina macia até 100,0 g

Eaz-se a dispersão do ingrediente activo num pequeno volume de veiculo. Gradualmente proceder-se ã incorporação na massa total para proporcionar um produto homogéneo e macio. Com esse produto faz-se o enchimento de tuhos metálicos duráveis e compressiveis.

Exemplo 0; Creme para utilização tópica 1.0 g 20.0 g 2.0 g 2,5 g 0,1 g 100.0 g

Ingrediente activo Polawax GP 200 Lanolina anidra Cera branca

Hidroxi benzoato de metilo Água destilada a-^|

Aqueceu-se conjuntametste â temperatura de 60 C o complemento "Polawax”, a cera e a lanolina. Adicio- - 52 -

na-se uma solução hidro-benzoato de metilo. Procede-se á homogeneização agitando rapidamente. Deixa-se a temperatura diminuir para 50°Q. Adiciona-se e dispersa-se o ingrediente activo. Deixa-se arrefecer enquanto se agita suavemente.

Exemplo D; locção para utilização tópica

Ingrediente activo 1,0 g Monolaurato de sorbitano 0,6 g Polisorbato 20 0,6 g Álcool cetostearilico 1,2 g Glicerina 6,0 g Hidroxi benzoato de metilo 0,2 g Agua purificada BP até 100 ml

Dissolveu-se: o hidroxi-benzoato de metilo e a glicerina a 70ml de água á temperatura de 75°C. Fundiu--se conjuntamente e à temperatura de 75°C o mono-laurato de sorbitano, o polisorhato 20 e o álcool cetostearilico e adicionou-se á solução aquosa. Procedeu-se a homogeneização da emulsão resultante, deixou-se arrefecer sob agitação continua e adicionou-se o ingrediente activo sob a forma de suspensão na água restante. Agitou-se tudo até se obter homogeneidade.

Exemplo E: Gotas para os olhos

Ingrediente activo 0,5 g

Hidroxi benzoato de metilo 0,01 g

Midroxi benzoato de propilo 0,04 g

Agua purificada BP até 100 ml

Dissolveu-se o hidroxi-benzoato de metilo e propilo em 70ml de água purificada á temperatura de 75°C * e deixou-se arrefecer a solução resultante. Depois adicio- • nou-se o ingrediente activo e ajustou-se o volume da solu- - 33 -

ção até ΙϋΟηιΙ utilizando água purificada. Esterilizou-se a solução por filtração através de uma membrana filtrante cujos polos possuiam as dimensões médias de 0,22 1 e proce-deu-se á embalagem acética em recipiente esterilizados.

Exemplo ff; Solução in.ieotável

Ingrediente activo 10,0 mg Água para Injecções B.P. até 1,0 ml

Dissolveu-se o ingrediente activo em metade da água para injecções e depois ajustou-se o volume e procedeu-se a esterilização por filtração. Introduziu-se a solução resultante em ampolas sob condições *asépticas.

Exemplo G·; Cápsulas de pó para inalações

Ingrediente activo (pó de 0,5-7,0 m) 4 mg

Lactose (pó de 50-90 m) 46,0 mg

Bfectuou-se a mistura dos pós até obter homogeneidade e procedeu-se ao enchimento de cápsulas de gelatina dura de dimensões adequadas (50mg por cápsula).

Exemplo H: Aerossol para inalação

Ingrediente activo (pó de 0,5-7,0 m) 200 mg irioleato de sorbitano 100 mg

Sacarina de sódio (pó de 0,5-7,0 m) 5 mg

Mentol 2 mg

Iricloro-fluoro-metano 4,2 g

Dicloro-difluoro-metano até 10,0 ml

Dissolveu-se o trioleato de sorbitano no metanol em tricloro-fluoro-metano. Procedeu-se à dispersão . da sacarina de sódio e do ingrediente activo na mistura a \ qual se transferiu depois para um recipiente para aerossol - 54 -

adequado a seguir injectou-se-lhe dicloro-difluoro-metano airaves do sistema de valvulas. Esta composição proporciona 2mg de ingrediente activo em cada dose de 100 1.

Dados Biológicos

Inibição de 5-lipoxigenase ex-vivo

Os estudos preliminares em ratazanas e coelhos indicaram que o racemato do exemplo 1 de sintese e os correspondentes enantiómeros dos exemplos 2 e 3 de sintese inibiram eficazmente a sintese. estimulada do leucotrieno B^ (LTB^), um composto formado a partir de ácido araquidónico'via percurso da 5-lipoxigenas®.

Após a administração do composto testado mediu-se periódicamente a concentração de LTB^ no plasma e representou-se em percentagem do valor médio de controlo. 0 procedimento utilizado encontra-se descrito em HBr. <J. Phar-macol. 94, 528 (1988)” e pode resumir-se do modo que se segue.

Dois minutos após a recolha procedeu-se à estimulação de amostras (0,5ml) em duplicado de sangue utilizando o. ionoforo de cálcio A23187 (concentração final de 13 g/mi;, durante 30 minutos e à temperatura de 37°G. Depois de se ter completado a incubação procedeu-se centrifugação das amostras (12000 durante 2 minutos; e removeu-se o plasma livre de células. Depois determinou-se a concentração de LTB^ no plasma através de um ensaio radioimunológico específico. Os compostos dos exemplos 1 a 3 de sintese inibiram todos a sintese de LTB^ estimulada ex-vivo durante várias horas após a sua administração. Os compostos do exemplo 1 de sintese, por exemplo, quando administrados oralmen-te aos coelhos numa dose de 2mg/kg, inibiram a sintese de ITB^ em mais do que 50$ durante um período superior a 16 . horas. 0 mesmo composto, quando administrado oralmente ás • ratazanas numa dose de lOmg/kg, inibiu a sintese de BTBÁ em - 35 -

mais do que 50% durante um período superior a 10 horas. Os enentiómeros dos exemplos 2 e 3 de síntese produziram resultados idênticos.

Inibição de 5-lipoxigenase in vitro

Procedeu-se a centrifugação de sangue de voluntários normais isentos de aspirina, para se efectuar a separação de leucócitos e dos glóbulos vermelhos e das plaquetas. Adicionou-se ao homogenato celular (470 1) uma solução do composto testado em DMSO (10 1, concentração final compreendida entre 0,01-100 M) e depois fez-se a incubação da mistura a temperatura de 37°C durante 5 minutos. Depois adicionou-se simultaneamente soluções de ácido araquidónico em metanol (250 M, 10 1, concentração final de 5 M) e de cloreto de cálcio em água (100 M, 10 1, concentração final de 2mM), e procedeu-se á incubação da mistura a temperatura de 37°C durante mais 5 minutos. Interrompeu-se a reacção por efeito de ebulição. Efectuou-se o ensaio radioimunoló-gico para o leuctotrieno B^.

Bepetiu-se a experiência utilizando sangue humano completo estimulado pelo ionoforo.

Para os compostos dos exemplos 1 a 5 de síntese os resultados foram os seguintes: IC50 ( H)

Exemplo de síntese Homogenato Sangue completo 1 0,20 0,15 2 0,20 0,08 5 0,20 0,08 . Actividade anti-oxidante - Como medida da actividade anti-oxidante - 36 - determinou-s© a capacidade dos compostos da presente invenção para removerem o radical peróxilo, testando-se a capacidade de cada composto para inibir a peroxidação do ácido linoleico utilizando o método descrito em MBiochem. Pharm. 38, 1465 (1989)*'. 0 composto do exemplo 1 de sintese apresentou uma taxa aparente constante de 0,408 para a remoção dos radicais peroxilo.

Efeitos da combinação com os PAINE

Procedeu-se a imunização de coelhos brancos da Nova Zelândia (2.5-3&g) utilizando injecções intra-dermais de 4mg de ovalbumina a Iml de adjuvante completo de Preund. Eez-se nova imunização dos animais decorridos 14 dias e pelo mesmo processo. Cinco dias após a segunda imunização induziu-se artrite na articulação do joelho direito através da injecção de lml de umá solução esterilizada de ovalbumina (5mg/ml) introduzida na cavidade da articulação.

Procedeu-se á medição das articulações (.por um processo estritamente aleatório) utilizando compassos de calibre, em intervalos de tempo frequentes, ap<5s o estimulo com o antigeno. Os animais foram sacrificados decorridos 14 dias e procedeu-se à lavagem do espaço da articulação com lml de solução salina e removeu-se o fluido resultante para se efectuar a contagem total e diferencial dos leucócitos.

Agrupou-se aleatoriamente em grupos de 5-8 animais sensibilisados. Após 18 horas de trituração do composto do exemplo 1 de sintese (E)-N- j l-metil-5-(3-(.4--fluoro-fenoxi-oxi)feniljprop-2-en-l-ilJ -I-hidroxi-urèia (composto A), num moinho de esferas, preparou-se uma suspensão desse composto utilizando Celaeol a O,25f0 como veiculo, e depois procedeu-se â sua administração. Dissolveu-se in-dometacina anti-inflamatória não, esteróidal num pequeno volume de tris-tampão IN a pH8 e depois ajustou-se o volume com Celaeol a 0,25%, Os animais de controlo foram tratados - 37 -

com Celatol a 0,25$. Cada animal foi tratado com uma dose oral (aproximadamente 5ml) de veiculo ou de fármaco 3 vezes em cada 24 horas. As doses foram administradas ás 8,0 horas, 16,0 horas e 24»0 horas durante 1$—17 dias, tendo o inicio da administração começado uma hora antes do estímulo com antigeno no dia 0. Todas as doses foram administradas oralmente através de um'tubo introduzido no estômago. Os grupos foram os seguintes: 1-7: elementos de controlo (5ml de Ce-lacol a 0,25$ 3 x em 24 horas). 8-14: indometacina na proporção de lmg/kg, dissolvida em Celacol a 0,25$ 3 x em 24 horas. 15-21: composto A na proporção de 2mg/kg, em suspensão em Celacol a 0,25$ 3 x em 24 horas. 22-28; composto A na proporção de 2mg/kg em suspensão em Celacol a 0,25$ mais indometacina na proporção de lmg/kg, dissolvida em Celacol a 0,25$.

Intumecência das articulações los animais de controlo o estimulo provocado pelo antigeno originou o acréscimo no diâmetro da articulação de 6-7mm, o qual atingiu o seu máximo dois dias apés o estimulo. A intumecência das articulações continuou a verificar-se na grupo de controlo durante o periodo da experiência (14 dias) e no momento em que os animais foram sacrificados, os diâmetros das articulações artríticas eram aproximadamente 5mm superiores aos diâmetros das articulações contra laterais. lenhum dos fármacos utilizados no tratamento reduziu a intumescência das articulações durante os primeiros 2 dias após o estimulo, mas a partie do 3 dia, o composto A reduziu a intumescência aproximadamente 26$ e a indometacina reduziu-a cerca de 53$ tomando como comparação os animais de controlo tratados com veiculo. As maiores e mais consistentes reduções da intumescência (até 72$ . aproximadamente) foram observadas no grupo.· tratado com uma . combinação de composto A e de indometacina. Os resultados 38 - estão indicados no quadro 1. QUADRO 1 intumescência da articulação (mm)

Duração da artrite Composto A Indometacina A + Indo. Controlo 1 4.6 4.3 3.9 5.6 2 5.2 4.5 4.2 6.0 3 4.6 3.5 3.1 5.7 8 3.5 2.6 1.6 4.3 14 3.2 2.0 1.2 4.3

Estudos do fluido sinovial

Removeu-se da articulação tecido da membrana sinovial, fixou-se, efectuou-se o processamento, cortou-se e colorou-se para exame microscópico, A avaliação histológica derivou da massa total de membrana sinovial inflamada, da infiltração de linfócitos e do conteúdo poli-morfico, A leitura dos diapositivos foi feita de forma es-trictamente aleatória.

Os fluidos sinoviais das articulações artritricas doa animais de controlo continham aproximada-mente 10 leucócitos dos quais cerca de 80$ eram polimorfi— cos. 0 composto A ou a indometacina isoladamente reduziram apenas de forma ligeira o valor médio dos leucócitos infiltrados no fluido sinovial, mas a redução máxima obteve-se a partir do composto A conjuntamente com a indometacina. Os resultados estão indicados no quadro 2. QUADRO 2 - 39 - i

QUADRO 2 leucócitos (Número de células x IO61)

Composto A Indometacina A + Indo. Controlo 6,1 7,3 0,9 7,9

Ensaio do proteoglicano das cartilagens

Dissecou-se a cartilagem articular das extremidades dos fémures e fez-se a sua digestão com papai-na antes de se ter medido a concentração dos glicosa-mino-glicanos sulfatados (GAGrS). Extraiu-se 0 conteúdo de pro-teoglicano em g GAG/mg dé peso húmido de cartilagem e fez--se a comparação com os valores obtidos com a cartilagem da articulação de controlo contra lateral. A cartilagem articular dissecada das articulações artríticas de animais tratados com veiculo, 14 dias após 0 estimulo com 0 antigeno, continham 4Ύ/° menos proteoglicano do que a cartilegem das articulações contra laterais dos mesmos animais. Tanto 0 composto A composto indometacina isolados reduziram a perda de proteoglicano da cartilagem, mas a redução máxima foi observada no grupo tratado simultaneamente com 0 composto A e com a indometacina. Os resultados estão indicados no quadro 3. QUADRO 3

Perda de Proteoglicano (&)

Pombosto A Indometacina A + Indo. Controlo 34 38 26 43

Avaliação histológica da membrana sinoviai - 40 -

Claims (3)

1. A contagem de linfócitos e de células totais na membrana sinovial do grupo tratado com o composto A e com a indometacina foi significativamente reduzida. Os resultados encontramose no quadro 4. QUADRO 4 Composto A Indometacina A + Indo. Con- - - trolo Linfócitos 59 51 36 68 Células totais 367 365 255 435 Os dados anteriores demonstram o efeito citoprotector do composto A no caso da artrite, especialmente na presença do fármaco anti-inflamatorio não esterói-dal designado por indometacina. Dados Toxicológicos 0 composto do exemplo 1 de sintese foi administrada a murganhos, pela boca, em doses até 300mg/kg, e intraperitonialmente em doses até lOOmg/kg. Hão se observou qualquer morte ou quaisquer efeitos nocivos alarmantes. REXYIHDIGAOÕTíS - ia - Processo para a preparação de um composto de fórmula geral I - 41 Η Ar-O-Ar’-Y-G- Ah

   .OH 'COffiE^R2

   em que Ar é halo-feniloj Ar' é 1,3- ou 1,4-fenilenoj Y ‘é (E)-GH=GH-J e 1 2 R e R são independentemente seleccionados entre hidrogénio e alquilo > caracterizado por se fazer reagir um composto de fórmula geral II R^HHOH (II) -T-_____ em que R·^ é um grupo de fórmula 5 Ar-O-Ar'-Y-C- como definido anteriormente, com um agente ou agentes adequados e em condiçSes de reacção que convertam o l\í-hidrogénio num grupo H-GOHg e por se converter eventualmente o composto de fórmula (I) assim formado numa base correspondente ou num derivado'fisiologicamente funcional.
2. - 2§ - Processo de acordo com a reivindicação 1 caracterizado por se obter um composto de fórmula (I) em que Ar é 4-fluoro-fenilo; e/ou Ar1 é 1,3-fenileno; e/ou 1 2 R e R são ambos hidrogénio.
3. . - 3® - Processo de acordo com a reivindicação 2, caracterizado por o composto obtido ser (E)-I-jl-metil-3-(5-- (4-fluo ro fenox i) fenil) p rop -2- en-1 -il V -H-h idroxi-ureia na - 4a. -

   sua forma enantiomérica (E) ou quaisquer proporções. - 4ft - Processo de acordo com qualquer das reivindicações de 1 a 3, caracterizado por o composto de fórmula (.II) ser opticamente activo e o composto de fórmula (I) ser Obtido na sua forma enantiomérica (E) e estar substancialmente isento do isómero (S). - 5& _ Processo de acordo com qualquer das reivindicações 1 a 3> caracterizado por o composto de fórmula II ser opticamente activo e o composto de fórmula (I) ser obtido na sua forma enantiomérica e estar substanciálmente isento do isómero (E). - 6ft - Processo de acordo com as reivindicações de 1 a 3» caracterizado por o composto de fórmula (II) ser opticamente inactivo e o composto de fórmula (I) ser Obtido na sua forma racémica. - 7§ _ Processo para a preparação de uma composição farmacêutica caracterizado por a) se preparar um composto de fórmula I por um processo de acordo com as reivindicações de 1 a 6; e b) se adicionar misturando ou dissolver/ fazer a suspensão do produto do passo a) e, eventualmente, um ou mais outros ingredientes farmacologicamente activos com/num veiculo ou excipiente farmaceuticamente aceitável. - 43 - - 8§ - » Processo de acordo com a reivindicação 7, caracterizado por o passo bj consistir na adição com mistura ou d is solução/suspensão de um ou mais outros ingredientes farmacologicamente activos seleceionados entre antibióticos, antifúngicos, anti-virais, anti-histamínicos e drogas não-esteroidais anti-inflamatdrias com/no veículo ou excipiente - 9& - Processo de acordo com a reivindicação 8, caracterizado por o passo b) consistir na mistura ou disso-lução/suspensão de um ou vários fármacos, não esteroides e anti—inflamatórios, com o veículo ou excipiente. - 10ê - j* Processo de acordo com qualquer das rei-vindicaçSes de 7 a 9, caracterizado por incluir um passo adicional c) caracterizado por o produto do passo b) ser preparado para administração oral, tdpica, pulmonar ou in-t r a- ar t i cul ar. A requerente reivindica a prioridade do pedido britânico apresentado em 5 de Pevereiro de 1989, 25 de Agosto de 1989 e 5 de lovembro de 1989, sob os K2s, 8902472.5, 8919514.8, 8924867.8, respectivamente. Lisboa, 2 de Pevereiro de 1990 •S £<*Β*!ϊ3 (kJlOUEi BA I?E$j?j3I33L£3