PT92503B - Processo para a preparacao de novos derivados peptidicos com accao anti-coagulante - Google Patents

Description

PROCESSO PARA A PREPARAÇflO DE NOVOS DERIVADOS

PEPTTDICOS COM ACÇRO ANTICOAGULANTE

A presente invenção refere-se a novos derivados peptídi_ cos que são útei s como agentes anticoagulantes.

ANTECEDENTES DA INVENÇÃO

Os anticoagulantes são agentes terapêuticos úteis no tratamento farmacológico de, por exemplo, trombose aguda das veias profundas, embolismo pulmonar, embolia arterial aguda das extremidades, enfarte do miocãrdío e coagulação intravascular disseminada. A administração profiláctica de anticoagulantes im pede a recorrência de embolismo nos doentes com reumatismo e doença cardíaca por arteriosclerose e impede certas complicações tromboembÕlicas cirúrgicas, A administração de anticoagulantes também tem sido indicada para o tratamento da doença das artérias coronárias e cérebro-vascular. A trombose arterial, particularmente nas artérias que irrigam o coração e o cérebro, constitui uma causa de morte.

A hirudina consiste num polipéptido de 65 resíduos isolados das glândulas salivares da sanguessuga, Constitui um ageii te anticoagul ante que e um inibidor específico da trombina, Embora muito potente, o uso clinico da hirudina isolada provenieji te de extractos de sanguessuga parece improvável devido ã sua quantidade limitada, custo e reacçóes alérgicas que normalmen-2te seguem a administração de qualquer proteína estranha daquela dimensão.

Presentemente descobriu-se uma região específica da hirudina que ê responsável, pelo menos em parte, pela sua actividade anticoagulante. Esta região foi sintetizada quimicamente e certos dos seus análogos parecem ligar-se ao sítio de reconheci_ mento da trombina mas não ao sítio de cisão enzimática que se encontra especi a 1 mente separado. A ligação dos péptidos sintéti_ cos impede competitivamente a ligação do fibrinogenio ao sítio de reconhecimento da trombina, um oré-requisito para a produção de fibrina e formação do coágulo. Os peDtidos da Dresente inven ção possuem uma actividade anticoagulante significativa e a sua capacidade não usual para se ligarem somente ao sítio de reconhecimento sem ligação ao sítio de clivagem da trombina pode constituir um complemento de interesse científico e terapêutico significativo da terapêutica anticoagulante.

RESUMO DA INVENÇÃO

Derivados peptídicos de formula geral I

X-A_]-A₂-A₃-A₄-A₅-A₆-A₇-A₈-A₉-A_1θ-Υ na qual

X representa um átomo de hidrogénio, um resto terminal amino, 1 a 2 grupos alquilo com 1 a 6 átomos de carbono, 1 ou 2 grupos acilo com 2 a 10 átomos de

-3carbono, carbobenziloxi ou t - b u t i 1 o x i c a r b ο η i1 o;

A-| representa uma ligaçao ou um fragmento peptTdico com 1 a 11 resíduos de 1 aminoacido qualquer;

A₂ representa um grupo Phe, SubPhe, β-(2- e 3-tienilJ-alanina, β-(2- e 3-furanil]-alanina, β-(2-, 3- e 4-piridi1]-alanina, β- (benzotienil -2- e 3-il]-ala_ nina, β-(1- e 2-náftil)-alanina, Tyr ou Trp;

Ag representa Glu ou Asp;

A^ representa um aminoacido qualquer ou um grupo escolhido entre a ^23’

Ag representa Ile, Vai, Leu, Nle ou Phe;

Ag representa Pro, Hy p, 3,4-desidro Pro, tiazolidino-4-carboxi1 ato, Sar, NMePgl , D-Ala ou um grupo escolhido entre X a X ₂ 3 ;

Ay representa um aminoacido qualquer;

Ag representa um aminoacido qualquer;

Ag representa um aminoacido lipofílico escolhido entre Tyr, Trp, Phe, Leu, Nle, Vai, Cha e Pro ou um dipéptido contendo pelo menos um destes aminoãcidos 1i pofΤ1i cos;

-4Α_]0 representa uma ligação ou um fragmento peptídico co£ tendo de 1 a 5 resíduos de um aminoacido qualquer;

e

Y representa um resíduo carboxi terminal escolhido entre OH, alcoxi Cη_g , amino, mono- ou dialquil(C^ -amino substituído, ou benzilamino;

X-j a X₂₃ tem os significados seguintes:

N - C-COORg i

N- C-COOR

I ^(l)

H (Χ-Ό (L)

H

CX-21

CH

R_g-f ^ch₂

-— N-, C-COORg

I ^(l)

H (X-31

N-C-COORg (L)

H

CX-5)

(L)

CX-4) (X-6)

(L)

Η (X-7) '

CX-8J

(L)

H (X-9)

Η (X-10)

N-C-COOR.

o (L)

H (X-ll)

(X-12)

H

CX-13) (X-14) (X-15)

(X-H)

CX-16]

COORg (L)

(X-20) (X-21)

(X-23) (X-22)

em que

Ry representa um átomo de hidrogénio ou de halogéneo, um grupo alquilo NH-CO-alqui1 o C^-C^, amino, 0-ãlquilo, ou tio-alquilo ou um grupo de fórmula geral

-NR₂₂R₂₃, -NH-CO-CCH₂}_mPH, -(CH₂)_m-Y, O-CO-N(R_]5)₂ , -O-(CH₂)_m-F' ou S-(CH₂)_m-F';

Y representa Ph¹ ou um grupo tienilo, furilo, cicloalquilo, piridilo ou 1- ou 2-Nap;

Ph¹ representa um gruoo fenilo comportando, eventualmen te, como substituinte, um grupo de fórmula geral (^R13p“’

Nap representa um grupo naftilo comoortando, eventualmente, como substituinte, um grupo de fórmula geral (R₅i_p-;

F' representa Ph' ou Nap;

Rg representa um átomo de halogéneo, um gruoo alilo, al_ qui1CCi-C4}-1io ou alcoxi C-Cou de formula geral -0-C0-N(.R₁₅J₂, -o-CCH₂ ]_m-F ' ou S-(CH₂)_ni-F';

Rg representa um grupo alquilo C-|-ou ceto ou um grupo de fórmula geral -(CH₂)_m ^-Pb' ;

Riθ representa um átomo de halogéneo ou um gruoo de for mula geral Y ¹ -R_g ;

^R1 1 ’ ^R' 11 ’ ^R1 2 ^e hidrogénio ^R12 ^{e R}'12 drogénio e

R' 12 representam, cada um, um átomo de ou um grupo alquilo C^-C^; ou R¹^, representam, cada um, um átomo de hiR.|1 representa um grupo Rh;

Rη 3 representa um átomo de cloro, bromo ou flúor ou um grupo CF3, hidroxi, fenilo, fenoxi, fenil-tio, fe ni 1 -meti 1 0 , alquilo C^-C^, alcoxi C -j - C ou alquil(5 Ί ~ C 4)- tio;

Rg representa um átomo de cloro, bromo ou flúor ou um grupo CFg, hidroxi, alquilo C-pC^, alcoxi C-j - C ’ ou alquilfC^-C^j-tio;

m representa um número de zero a 4;

p representa um número de 1 a 3 com a condição de p representar um número maior do que 1 apenas quando R-|3 ou Rg representam um átomo de cloro, bromo ou flúor ou um gruoo Me ou MeO;

^R14 representa um átomo de hidrogénio ou um grupo alquilo C^-C^ Ph, tienilo, furilo ou piridilo;

R-|4 representa um átomo de hidrogénio ou um gruoo alqui_ lo Cj-C;

Y* representa um átomo de oxigénio ou de enxofre;

R1g representa um grupo alquilo C^-C^ ou um grupo de formula geral -Ph¹; ou os grupos representados por R-|g unem-se para formar um núcleo pentaou hexagonal em que um ou mais ãtomos de carbono contêm, eventualmente, como substituinte um qrupo alquilo C-j-C^ ou di-alquilo C-|-C^;

R-j 7 representa um átomo de hidrogénio ou um grupo alqui_ lo C-j-C^, cicloalquilo C-j-Cg ou fenilo;

R-| θ representa um átomo de hidrogénio ou um grupo alqui_ lo C-j-C^, alcoxi C-|-C^ ou fenilo;

v representa um numero de zero a 2;

R^g representa um grupo alquilo C-j-C^ ou um grupo de for mula geral -(CH^)-fenilo;

R₂₀ representa um átomo de hidrogénio, um gruoo alquilo, indan-2-i1 o , oer-hidroindan-2-i1 o ou um grupo de formula geral -(CH?) -Z com a condição de Z não representar um qrupo fenilo insubstituTdo;

R^i representa um átomo de hidrogénio, um grupo alquilo Ci-Cou um grupo de fórmula geral -(CH^)_f-G;

G representa um gruoo fenilo, 4-hidroxi- ou 3,4-di-hidroxi-feni1 o, OH, 1H-indol-3-i1 o, 1H-imidazol-4-i1 o , amino, sulfidrilo, S-alquilo, guanidino ou

-1.0C0NH₂ ;

representa um grupo alquilo C^-C^, Benzilo ou fen£ tilo;

F?23 representa um átomo de hidrogénio ou um grupo alquilo Ci-C4, benzilo ou fenetilo; e

Rg representa um átomo de hidrogénio, um grupo alquilo C-j-C₄, benzilo, benzidrilo ou um ião de um sal de metal alcalino ou alcalino-terroso ou um grupo de formula geral -CH(R^ y )-O-COR-| g ’ ou — CCH212iM^e3 » ^{com a} condição de um de A^ e Ag ou ambos representarem um grupo escolhido entre os grupos X-| a X^g e que A^ e Ag não oossam representar ambos Pro,

Descrição detalhada da presente invenção

As abreviaturas correntes que se seguem dos aminoãcidos são utilizadas durante esta memória descritiva;

G1 y - g 1 i c ΐ n a Ala - alanina

Vai - valina

Leu - leucina

11e - isoleucina

C h a - c i c 1 o-h e x i 1 a 1 a n i n a r n - ornitina

-11 Pro - prolina

Phe - fenilalanina

Trp - triptofano

Met - metionina

Ser - serina

Thr - treonina

Cys - cisteTna

Tyr - tirosina

Asn - asparagina

Gin - glutamína

Asp - acido aspartico

Glu - ácido glutámico

Lys - lisina

Arg - arginina

H i s - histidina

Nle - norleucina

Hyp - hidroxiprolina

Glt - glutarilo

Mal - m a 1e i 1

Npa - p-(2-naftil)alanina

3,4-des-hidroPro - 3,4-des-hidroprolina

TyrCSO-jH) - sulfato de tirosina

Pgl - fenilglicina

NMePgl - N-meti1-feni1glicina

Sar - sarcocina (N-meti1glicina) pSubPhe - para-fenilalanina substituída

SubPhe - orto, metaiòu para fenilalanina mono- ou di- subs t i t u T d a

DAla - D-alanina

-12Ac - acetilo

Suc - succinilo pCIPhe - para-cloro-feni1alanina pNC^Phe - para-nitro-fenilalanina Pip - acido L-2-pipecÕlico Azd - L-azetidino-2-carboxi1 ato

Tiq - L-l , 2,3,4-tetra-hidroisoqui nol ino-3-carboxi 1 ato

Thz - L-tiazolideno-4-carboxi1 ato

Um grupo alquilo e a fracção alquílica de um grupo alcoxi i ncl uem grupos alquilo de cadeia linear ramificada ou cíclica, por exemplo, metílo, etilo, propilo, isopropilo, butilo, isobutilo, terc.-buti1 o, pentilo, isopentilo, sec,-penti1 o , cic1ooenti1 o , he xilo, iso-hexilo, ciclo-hexilo e ciclopentilmeti1 o . Um grupo acilo com 2 a 10 átomos de carbono inclui qrupos acilo eventualmente insaturados de cadeia linear ramificada ou cíclica com 1 ou 2 radicais carbonilo por grupo, por exemplo acetilo, benzoílo, succinilo, malaílo e glutarilo. Um grupo halogéneo consiste num flúor, cloro, bromo ou iodo.

A designação aminoácido qualquer utiliza-se para designar os aminoácidos de ocorrência natural assim como outros «-aminoácidos não proteínicos correntemente utilizados na química peptídica quando se preparam análogos sintéticos dos péptidos de ocorrência natural. Os aminoácidos de ocorrência são a qlicina, alanina, valina, leucina, isoleucina, serina, metionina, treo nina, fenilalanina, tirosina, triptofan, cisteína, Drolina, histj_ dina, ácido aspãrtico, asparagina, acido glutamico, glutamina, arginina, ornitina e lisina. Exemplos de tx-aminoãcidos não proteí-

*» nicos são a norleucína, novalfna, a 1 oi sol eucina , Fiomoargi ni na, tiaprolina, desidropro 1 i na , hidroxiprol ina (Hyp), Fiomoserina, ciclo-hexilglicina (Chg), acido cx-amino-n-butírico (Aba), ciclo-he xilalanina (Cha), acido aminofenilbutirico (Pba), fenilalanina comportando como substi tuintes nas posições orto, meta ou para do grupo fenilo um ou dois átomos de halogeneo ou um ou dois grupos seguintes alquilo C-j-C^, alcoxi C^-C^, nitro ou meti 1 enodioxi ,

-2- e 3-tienilalanina , β-2- e 3-furani1alanina, (3-2-, 3- e 4-piri dilalanina, (J-(benzotienil -2- e 3-i1)-alanina, 0-(l- e 2-naftil)-alanina, derivados 0-alquilados de serina, trionina ou tirosina, S-alquilados da cisteína, O-sulfato ester de tirosina, 3,5-diodotirosina e D-isõmeros de aminoãcidos de ocorrência natural,

A designação aminoãcido lipofTlíco inclui Tyr, Phe,

Leu, Nle, Ile, Vai, His e Pro,

Os aminoãcidos de ocorrência natural com excepção da glicina contêm um ãtomo de carbono quirãlico. Salvo indicação especificamente diferente, os aminoãcidos opticamente activos referidos aqui apresentam a configuração-L. Por exemplo, qualquer dos aminoãcidos do grupo de A-j ou Α^θ pode aoresentar a configuração D- ou L-, como ê usual, a estrutura dos péptidos descritos ê tal que o aminoãcido da extremidade amino-terminal situa-se no lado esquerdo da cadeia e a extremidade carboxi-terminal situa-se no lado direito da cadeia,

Os pol ipêptidos de fõrmula geral I podem formar sais acei_ tãveis do ponto de vista farmacêutico com qualquer acfdo orgânico ou inorgânico não tóxico, Ácidos inorgânicos representativos apro

-14priados para formar sais incluem o acido clorídrico, o ácido bromídrico, o ácido sulfúrico e o ácido fosfórico e sais de metais ácidos como o mono-hidrogeno-ortofosfato de sódio e o hidrogeno-sulfato de potássio. Ácidos orgânicos representativos que podem formar sais apropriados incluem os ácidos mono, di e tricarboxí1icos. Re presentativos destes ácidos são, por exemplo, acido acético, ácido glicocõlico, ácido láctico, ácido pirúvico, ácido malõnico, acido succínico, acido glutãrico, acido fumárico, ácido mãlico, acido tartárico, acido cítrico, ácido ascÕrbico, ácido maleico, ácido hidroximaleico, acido benzóico, ácido hidroxibenzóico, ácido feni1acético, ácido cinâmico, ácido salicílico, ácido 2-fenoxibenzõico e ácidos sulfónicos como o ácido metanossulfónico e 2-hidroxietanossul fónico, Sais de aminoácidos de terminal carboxilo incluem os sais de ácidos carboxílicos não tóxicos formados com qualquer base inorgânica ou orgânica apropriada, Roresentativamente estes sais incluem os sais de metais alcalinos como por exemplo os sais de sódio e de potássio; sais de metais alcalino-terrosos como os sais de cálcio e de magnésio; metais leves do grupo IIIA incluindo o alumínio e aminas orgânicas primárias, secundárias e terciárias como, oor exemplo, trialquilaminas, incluindo trietilamina, procaína, dibenzi lamina, 1-etanamina, N ,N-dibenziletilenodiamina, di-hidroabietilamina, N-alquil(inferior)piperidina e qualquer outra amina apropriada.

Como qualquer outro grupo genérico de compostos químicos são preferidos certos grupos. Preferem-se aqueles derivados peptídicos de fórmula geral I na qual

X representa um átomo de hidrogénio, um grupo acetilo ou

-15succinilo.

Também se preferem os compostos de fórmula geral I na qual

A-| representa Thr-Pro-Lys-Pro-Gl n^Ser-Hf s-Asn-Asp-Gl y-Asp , -Ser-Thr-Pro-Asn-Pro-Glu-Ser-His-Asn-Asn-Gly-Asp-,

-His-Asn-Asp-Gly-Asp-,

-Asn-Asp-Gly-Asp-,

-Asp-Glv-Asn-,

- G1 y -A s p - ,

-Asp-, ou uma ligação,

Ag representa de preferência Phe, (3-2- e 3-tieni1alanina , Tyr, Trp, Npa ou pCIPhe;

A₃ representa Glu;

A^ representa Glu, Asp, Pro, Ala, Ptp, Azd, Tíq, ou Thz;

Ag representa Tle ou Leu;

Αθ representa Pro, Sar, D-Ala, Hyp, NMePgl, Pip, Azd, TTq, ou Thz;

Ay representa Glu, Gin, Asp ou Ala;

Αθ representa Glu, Asp ou Ala;

representa Pro, Ala-Tyr, Ala-Cha, Tyr-Cha, Tyr-Leu, Ala-Phe, Tyr-Tyr;

A*|0 representa Glu, Asn, Asp-Glu, Pro, Gin, Ala, uma 1 iga_ çao, D-Lys, Lys, D-Asp ou Orn; e

Y representa um grupo hidroxi ou amino.

São especia 1 mente preferidos os derivados peptidicos de formula geral I na qual X representa um grupo acetilo e representa Gly-Asp ou Asp ou X representa um grupo succinilo e A-j uma ligação e em que

A^ representa Phe, (2-ti eni 1 al ani na ) ou Tyr;

A₃ reoresenta Glu;

A^ representa Glu, Pro, Pip ou Azd

A^ reoresenta 11e;

Ag representa Pro, Pip ou Azd;

Ay representa Glu;

Ag representa Glu ou Asp;

Ag representa Tyr-Leu, Ala-Tyr, Tyr-Tyr, Ala-Phe, Ala-Cha ou Pro;

-1 7-Αιθ representa Gin, Asp, Pro, uma ligaçao, D-Asp, D-Lys, D-Glu ou Asp—Glu; e

Y representa um grupo hidroxi ou amino,

As proteínas da presente invenção podem preparar-se por uma diversidade de processos convencionais conhecidos. Estes processos incluem a sTntese sequencial de fase sólida e a síntese de blocos, clonagem de genes e associações destas técnicas, 0 proces^ so sequencial de fase sólida pode realizar-se utilizando-se métodos automatizados estabelecidos como a utilização de um sintetiz^ dor peptTdico automático. Neste processo um aminoácido <*-amino protegido liga-se a um suporte de resina. 0 suporte de resina uti_ lizado pode ser de qualquer resina apropriada utilizada correntemente na preparação de polipéptidos de fase sólida, de preferência de poliestireno que tem ligação cruzada com divinil-benze no em 0,5 a cerca de 3% e que pode ser clorometi1ada ou hidroximetilada para fornecer sítios Dara a formação de éster com o aminoãc^ do «-amino nrotegido introduzido inicialmente.

Um exemplo de uma resina hidroximetíVi ca esta descrito Dor Bodanszky et al., Chem, Ind, (London) 38, 1597-98 (1966). Uma resina clorometi1ada é comercializada pela Bio Rad Laboratories, Richmond, Califórnia,e a preparação desta resina estã descrita por Stewart et al, , Solid Phase Peptide Synthesis (Freeman & Co São Francisco, Capítulo 1, pág, 1-6, 1969), 0 aminoãcido protegido pode ligar-se a uma resina pelo processo Gi s i η, Heiv , Chem. Acta, 56, 1476 (1973). Muitas resinas ligadas a aminoácidos prot£ gidos são comercializadas, Como um exemplo, para preparar um poli

-18péptido desta invenção em que a extremidade de terminal carboxilo e um resíduo Thr, pode utilizar-se Thr protegido com terc,-butilo xicarbonilo (Boc) ligado a uma resina benzilada, hidroximetilada feni1acetamidometí1ica (PAM) que estã comercializada .

A seguir a liqação do aminoacido oc-ami no protegido ao suporte de resina, o grupo de protecção e retirado utilizando-se qualquer processo apropriado tal como aplicando-se ãcido trifluoro acético em cloreto de metileno, apenas ãcido trif1uoroacético ou ãcido clorídrico em dioxano, A desprotecção realiza-se a uma temperatura entre cerca de 0°C'e a temperatura ambiente, Pode utilizar-se outros reagentes de separação convencionais e condiçoes pa ra a eliminação de grupos de protecção <x-amino específicos. Após a remoção do grupo de protecção «X-amino os outros aminoãcidos ami_ no protegidos são ligados caso a caso na ordem desejada. Alternativamente, podem ligar-se grupos múltiplos de aminoãcidos pelo me todo de solução antes da ligação com a resina que suDorta a sequên cia de aminoãcidos.

grupo de protecção cx-amina utilizado com cada aminoãcido introduzido na sequência polipeptídica pode ser qualquer grupo de protecção conhecido, Entre as classes de grupos de orotecção amino contempladas encontra-se (1) grupos de protecção tipo acilo tais como formilo, trifluoroacéti1 o , ftalilo, toluenossulfoni1 o (tosilo), benzenossulfoni1 o, nitro-fenilsulfonilo, triti 1 sulfonilo, O-nitrofenoxiacetilo e<x-clorobutiri1 o; (2) grupos de protecção do tipo uretano aromático tais como benzi ! oxi carboni'1 o e benzi1oxicarboni1 o substi tuído, tal como p-clorobenziloxicarboni1 o, p-nitrobenzil-carbonilo, p-bromobenziloxicarbonilo, p-metoxiben-

-19z i 1 ox i ca rboni' 1 ο , 1 - (p-b tf en ΐ 1) -1 -metil etox i ca rbon ilo-, <X, cx-dimetil-3,5-dimetoxibenziloxicarbom'lo e b e η z i d r i 1 o x i c a r b ο η i' 1 o ; ( 3) grupos de protecção uretano alífãtíco tal como terc ,-butil oxi carboni_ lo (Boc), diisopropilmetoxicarbonilo, isopropi1oxicarboni1 o , etoxicarbonilo e ali1oxicarboni1 o; (4) grupos de protecção tipo uretano cic1oa1quT1ico tais como ciclopentiloxicarboni1 o , adamantilo xicarbonilo e ciclo-hexi1oxicarboni1 o; (5) grupos de protecção tio-uretano como feniltiocarbonilo; (6) grupos de protecção tipo alquilo como trifenilmetilo (tritilo) e benzilo; e (7) grupos de trialquilsilano como trimeti1 si 1 ano. 0 grupo de protecção cx-amino preferido e o grupo terc ,-butiloxicarboni1 o,

A selecção de um reagente de ligação aprooriado faz-se de acordo com a técnica corrente, Um reagente de ligação particularmente apropriado em que o aminoácido adicionado e Gin, Asn ou Arg é a N , N ¹ - d i i soorop i 1 ca rbod i i mi da e 1-hidroxibenzotriazol . A u t i 1 i_ zação destes reagentes impede a formação de nitrilo e de lactama. Outros agentes de ligação são (1) carbodiimidas, por exemplo, Ν,Ν'-diciclo-hexilcarbodfimida e N-eti 1-N'-(y-d i me tilami nopropi1 carbodiimida); (2) cianamidas, por exemplo N , N¹-dibenzilcianamida; (3) cetenimirias; (4) sais de isoxazol, por exemplo N-eti1-5-feni1 -isoxazol-3'-sulfonato; (5) amidas heterociclicas contendo azoto monociclico de carácter aromático comportando 1-4 átomos de azoto no núcleo tais como os imidazol i das , pirszolidas e 1 , 2,4-tri azol i_ das, Amidas heterocfclicas especificas oue são utilizáveis incluem N-N¹-carboni1diimidazol e N , N-carboni1-di-1,2,4-1riazo1; (6 ) acetileno alcoxilado, por exemplo etoxiacetileno; (7) reagentes que formam um anidrido misto com o grupo carboxilo do aminoácido, por exemplo eti1 cloroformato e isobuti1 cloroformato ou o anidrido si-

métrico do aminoácido a ligar, por exemplo Boc-Ala-O-Ala-Boc e (8) compostos heterocíclicos contendo azoto comportando um grupo hidroxi em um núcleo azotado, por exemplo N-hidroxiftalimida, N-hidroxisuccinimida e 1-hidroxibenzotriazol, Outros reagentes de activação e sua utilização na ligação peptídica são descritos oor Kapoor, J. Pharm, Sei., 59, pãgs, 1-27 (1970), Prefere-se utilizar anidridos simétricos como reagente de ligação para todos os aminoãcidos, excepto para Arg, Asn e Gin,

Cada aminoácido protegido ou sequência de aminoãcidos e introduzido no reactor de fase solida num excesso de.cerca de quatro vezes e a ligação realtza-se em um meio de dimetilformamida; cloreto de metileno a 1:1 ou apenas em dimetilformamida ou de preferência apenas em cloreto de metileno. Mos casos em que ocorre ligação incompleta, repete-se o Drocesso de liqação antes de se removerem os grupos de ligação cx-amino, antes da ligação do aminoácido seguinte no reactor de fase sólida, 0 sucesso da reacção de ligação em cada estádio da síntese é controlado pela reacção da ninidrina como descrito por E, Kaiser et al., - A n a 1 y t, >

Biochem. 34, 595 (1970),

Após a obtenção da sequência de aminoacidos desejada reti_ ra-se o pêptido da resina, Isto pode realizar-se por hidrólise tal como por tratamento do polipêptido ligado ã resina com uma sc> lução de sulfureto de dimetilo, p-cresol e tiocresol em solução de ãcido fluorídrico aquoso diluído.

Como ocorre na síntese peptídi ca de fase solida,mui tos dos aminoãcidos incluem funções que necessitam orotecção durante a Dro

-21-/ tecção da cadeia. A utilização e selecção dos grupos de protecção apropriados é uma capacidade dos peritos nesta matéria e dependera do aminoãcido a proteger e da presença de outros resíduos de aminoácidos no péptido, A selecção de um tal grupo de protecção de cadeia lateral ê critica porque deve ser tal que não seja remo vido por cisão durante a separação do grupo de protecção do qrupo <*-amino. Por exemplo grupos de protecção da cadeia lateral apro priados para a lisina são os grupos benziloxicarbonilo e benziloxicarbonilo substituTdos,sendo os referidos substituintes escolhi_ dos entre átomos de halogéneo, por exemplo cloro, bromo, flúor e grupos nitro, por exemplo (2-clorobenzi1oxicarbonilo, p-nitrobenzi 1 oxi-carboni 1 o , 3,4-diclorobenzi!oxicarbonil o), tosilo, t-amilc) xicarbonilo, t-butiloxicarboni1 o e diisooropilmetoxicarboni1 o, 0 grupo hidroxilo alcoólico da treonina e da serina podem proteger-se com um grupo acetilo, benzoTlo , terc,-buti1 o, tritilo, benzilo, 2,6-dicl orobenzi1 o ou benziloxicarbonilo, 0 grupo de Drotecção preferido é o benzilo.

Estes processos podem eliminar-se por métodos clássicos. Habitualmente o grupo de protecção remove-se apos a síntese da ca deia peptTdica se completar mas os grupos de protecção podem remo ver-se em qualquer momento apropriado,

A dose anticoagulante de um derivado pentidico da presente invenção está compreendida entre 0,2 mg/Kg e 250 mg/Kg de massa corporal e por dia dependendo do doente, da gravidade da situa_ ção trombõtica e do derivado peptTdico escolhido, A dose apropria_ da para um doente particular pode ser determinada facilmente, De preferência devem administrar-se 1-4 doses por dia, habitualmente

-2 2entre 5 mg e 100 mg de ingrediente activo por dose.

A terapêutica anticoagulante estã indicada no tratamento e prevenção de uma diversidade de situações tromboticas, partitularmente nas doenças da artéria coronária e cerebro-vascular.

As pessoas experimentadas neste campo sabem com facilidade quais as circunstâncias que necessitam teranêutica anticoagulante , 0 termo doente utilizado aqui refere-se a mamíferos tais como pri_ matas, i ncl ui ndo seres humanos, carneiros, cavalos, gado, porcos, cães, gatos, ratos e murganhos.

Embora alguns dos derivados peptídicos possam sobreviver ã passagem através do intestino apÕs a administração oral, Drefere-se que a administração não seja oral, por exemplo seja adminiy tração subcutânea, intravenosa, intramuscular ou intraperitona 1 ; administração por injecção depósito; preparação de implante; ou me diante aplicação âs membranas mucosas tais como através das membranas do nariz, garganta, brônquios, por exemplo sob a forma de um aerossol que contém um derivado peptídico desta invenção num pulverizador ou sob a forma de um oõ seco.

Para administração Darentêrica os compostos podem adminiy trar-se sob a forma de doses injectãveis de uma solução ou suspen são do composto num dissolvente compatível fisiologicamente com um veículo farmacêutico que pode ser um líquido estéril tal como ãgua e óleos com ou sem adição de um agente tensioactivo ou de oy tros agentes adjuvantes aceitáveis do ponto de vista farmacêutico. Õleos representativos que se podem utilizar nestas preparações são os õleos derivados da parafina, de origem animal fetal ou sinteti

ca, por exemplo óleo de amendoim, óleo de soja e oleos minerais, Em geral preferem-se veículos líquidos particularmente para soluções injectaveis, como agua, solução de cloreto de sodio, solução de dextrose aquosa e açúcares aparentados, etanol e glicõis tal como o propilenog1icol ou o polieti1enoglico 1 ,

Os compostos podem administrar-se sob a forma de uma injecção-deposito ou de uma preparação de implantação que pode ser formulada de tal forma que permita a libertação controlada do ingrediente activo. 0 ingrediente activo pode ser comprimido em grãos ou em pequenos cilindros e implantado subcutaneamente ou iri tramuscularmente sob a forma de injecções-depõsito ou de implantes. Os implantes podem utilizar materiais inertes tais como os polímeros biodegradáveis ou silicones sintéticos, por exemolo Silastic, borracha de silicone preparada pela Dow-Corning Corporation.

Exemplos

A presente invenção é ilustrada pelos exemplos que se seguem que não são limitativos.

Exemplo 1

Preparação de Suc-Tyr-Glu-Pro-Ile-Pip-Glu-Glu-Ala-Cha-D-Glu-OH

Sintetizou-se o péptido por métodos de fase sólida utilizando-se 0,5 mmole de uma resina,0,56 mmole/g de Boc-D-Glu(Bzl)-Merefield. Realizaram-se as ligações por anidrido simétrico duplo /

com 2,0 mrnoles de N_K-Boc-aminoãcido (Peptides International) excepto no caso de Boc-Pip, que foi acoplado por ligação simples, A protecção para a cadeia lateral utilizada era: Glu(Bzl), Tyr(2-BrZ). A protecção N«-Boc terminal retirou-se com ácido trifluorq acético a 50% em cloreto de metileno, Lavou-se a resina três vezes com cloreto de metileno, neutralizou-se com três lavagens de diisopropi1eti1amina em cloreto de metileno a 10%, lavou-se três vezes com cloreto de metileno, 0 péptido foi' capeado com anidrido succTnico (1,0 g) em dimettlformamida, lavado três vezes com dime ti 1formamida, tres vezes com cloreto de metileno e testado com amina livre, A reacção de capping repetiu-se mais duas vezes e secou-se a resina. Desprotegeu-se o péptido e separou-se da resina com acido fluorTdrico contendo 5% de anisol ã temperatura de 0°C, durante 45 minutos. Retirou-se o acido fluorTdrico sob vacuo ã temperatura de 0°C e extraiu-se o péptido da resina com aceton_i_ trilo aquoso a 3Q% e 1iofi1izou-se,

Purificou-se o péptido por HPLC preparativa realizada com g

uma coluna C Beckman (50,8 x 150 mm), com um acetonitrilo a

33-38% em TFA aquoso a 0,1% a 79 ml/mi nu to. 0 pico principal foi recolhido, liofilizado e depois nurificado na mesma coluna com um gradiente de acetonitrilo a 34-35,5% em TFA aquoso a 0,1% a 80 ml/minuto. Recolheu-se o pico principal e 1iofi1izou-se Dara se obterem 104 mg do produto desejado. Realizou-se a HPLC preparati1 R va numa coluna C Beckman (50,8 x 150 mm), com um gradiente de acetonitrilo a 33-38% em acido trifluoroacêtico aquoso a 0,1% a 79 ml/minuto. Recolheu-se o pico principal e liofilizou-se oara se obter 101 mg do produto desejado (rendimento 58% baseado na substituição da resina inicial). Determinou-se a homogeneidade por

-25HPLC e CCF. HPLC Vydac 218TP54 (250 x 4,6 mm) coluna C¹⁸, 2 ml/mi_ nuto, ίθ = 1,9 minutos: tempo de eluiçáo com um acetonitrilo a 15-40% em gradiente linear de ácido trifluoroacético a 9,1% a 1%/minuto. (HPLC] e 14,4 minutos,

Análise de aminoácidos: (6N HCl hidrólise; 24 hr. a 106° C). Glx 4,02 (4); Pro 0,99 (1); Ala 0,99 (1 ] ; Ile 9,95 (1); Tyr 0,97 (1); Pip 1,08 (1); £275 = 1490, Concentração de péptido em peso 91,5,

Prepararam-se os péptidos dos exemplos seguintes, 2-4,de forma idêntica.

Exemplo 2

Suc-Tyr-Glu-Pip-Ile-Pro-Glu-Glu-Ala-Cha-D-Glu-OH

Exemplo 3

Suc-Tyr-Glu-^Pro-Ile-Azd-Glu-Glu-Ala-Cha-D-Glu-OH

Exemplo ~ 4

Suc-^Tyr-Gl u-^Azd-Ile-Pro-Glu-Glu-Ala-Cha^D-Glu-OH > —

Exemplο No	Analise de aminoácidos (6N HCl Hidrólise: 24 Hrs a 106°C)
Glx	Pro	Ala	Ile	Tyr	Pio	Concentração de péptido
2	3,97(4)	1,03(1)	0,98(1)	0,95(1)	0,98(11	1,09(1)	84%
3	4,04(4)	1,03(11	0,98(1)	0,97(1)	0,98(1)		82%
4	4,01(4)	1,04(1)	0,99(1)	0,96(1)	1,00(1)		86%

CaracterTsticas físicas
Exemplo N9	HPLC tf (min) gradiente 15-40% t = 1,65 min 0	FAB-MS (M + H)+	£ 2 7 5
2	19,05	1 344	163Q
3	15,65	1316	1610
4	16,25	1316	1560

Claims (36)

1. Reivindicações

   1. - Processo para a preparaçao de derivados peptídicos de fórmula geral ^X'^A1 ’^A2~^A3“^A4^_A5^_A6~^A7’^A8~^A9^_A10’^Y na qual

   X representa um ãtomo de hidrogénio, um ou dois grupos al_ quilo com 1 a 6 átomos de carbono ou um ou dois gru pos acilo com 2 a 10 átomos de carbono;

   representa uma ligaçao ou um fragmento DeptTdico com 1 a 11 restos de um aminoácido qualquer;

   A^ representa um grupo Phe, SubPhe, β-(2- e 3-tienil)-al£ nina, β-(2- e 3-furani1J-alanina, p-(2-, 3- e 4-pi ridi 1 J-al anina , β-(benzotieni 1 -2- e 3-il )-alani_ na, β-(1- e 2-nafti 1)-a 1anina, Tyr ou Trp;

   Ag representa Glu ou Asp;

   A^ representa um aminoácido qualquer ou um grupo escolhido entre X-j a X ₃ ;

   Ag representa Ile, Vai, Leu, Nle ou Phe;

   Ag representa Pro, Hyp, 3,4-desidroPro , tiazolidiηο-4-car boxilato, Sar, NMePgl , D-Ala ou um grupo escolhido

   -28-, entre X a X 3 ;

   Ay representa um aminoãcido qualquer;

   Αθ representa um aminoãcido qualquer;

   Ag representa um aminoãcido lipofilico escolhido entre

   Tyr, Trp,Phe, Leu, Nle,rie, Vai, Cha ou Pro ou um dipêptido contendo pelo menos um destes aminoácidos 1ipofTli cos;

   Aiq representa uma ligação ou um fragmento peptTdico contendo de 1 a 5 resíduos de um aminoãcido qualquer; e

   Y representa um resto carboxi terminal escolhido entre OH, alcoxi Cη-Cg, amino, mono- ou di-alquil (Ci-C -a m i η o substituído; e (Ll os significados seguintes:

   HgC

   CH.

   ^R8

   C-COORj (L)

   CH, •CH,

   C-COOR, (L) (X-1)

   CX-2I

   CX-3I

   Η (Χ-4)

   Η (Χ-5)

   Η (Χ-6) (Χ-7) (L) (L) (Χ-8) (Χ-9) (Χ-10) (Χ-Π) (Χ-12) (Χ-13) (Χ-16] (Χ-17) (Χ-18) (Χ-19) (Χ-21) (Χ-22) (Χ-23) em que

   R? representa um ãtomo de hidrogénio ou de halogéneo, um grupo alquilo, -NH-CO-alquilo C -j - C , amino 0-alqui. lo ou tio-alquilo C-j-C^ ou um grupo de formula geral -NR₂₂R₂₃, -NH-CO-(CH₂)_mPh , -(CH₂)_m-Y, -0C0-N(R₁₅)₂, -0-(CH₂)_m-F' ou S-(CH₂)_ni-F^l ;

   Y representa Ph' ou um grupo lo, piridilo ou 1 - ou tienilo, f u r i1 o, cicloalqui2-Na p;

   Ph' representa um grupo fenilo comportando, eventualmente, como substituinte, um gruDO de formula geral C^R13 Ϊp~ ^;

   Nap representa um grupo naftilo comportando, eventualmente, como substituinte, um grupo de formula geral (^R5^p^- ’

   F¹ representa Ph' ou Nap;

   R_o representa um ãtomo de halogéneo, um grupo alilo, alO

   *.

   qui1CCι-C4ptϊo ou alcoxi (C^-C^) ou um grupo de fórmula geral -O-CO-N (R-j g) ¹ ou

   -S-C^cH₂)_ra-F';

   Rg representa um grupo alquilo ou ceto ou um grupo de formula geral -(CH₂) -Ph';

   R.| grepresenta um ãtomo de halogéneo ou um grupo de fõrmu-

   la geral Y ¹ ”^R16 ’ R ’ ₁ -j , R_{] 2} e R ¹12 representam , cada um, um ãtomo de hidrogénio ou um grupo alquilofC ou R ' *11’ ^R12 ^{e R}'12 representam, cada um, um átomo de hidro génio e R -j representa um grupo Ph; representa um ãtomo de cloro, bromo ou flúor ou um

   grupo CFg hidroxi, fenilo, fenoxi, fenil-tio, fenil-metilo, a 1 qu i 1 o (C-|-C^ ) , alcoxi (C-j -C^) ou alquil_ (C-,-C₄)-tio;

   Rg representa um ãtomo de cloro, bromo ou flúor ou um gru po CFg hidroxi, al qui 1 o (C-j-C^), al coxi (C^-C^) ou alquil (C i - C ₄) -1 i o ;

   m representa um número de zero a 4;

   p representa um número de 1 a 3 com a condição de p repre sentar um número maior do que 1 apenas quando R-j 3 ou Rg representam um ãtomo de cloro, bromo ou flúor

   -33s» ou um grupo Me ou MeO;

   R.|4 representa um átomo de hidrogénio ou um grupo alquilo C^-C^, Ph, tienilo, furilo ou piridilo;

   R-|5 representa um átomo de hidrogénio ou um grupo alquilo r -r · ^bl ^b4’

   Y' representa um átomo de oxigénio ou de enxofre;

   R-j 6 representa um grupo alquilo C^-C^ ou um grupo de fórmula geral C^CH2I_m-Phou os grupos representados por Rηg unem-se para formarem um núcleo penta- ou hexagonal em que um ou mais átomos de carbono contêm, eventual mente , como s ubs t i tu i nte , um grupo aj_ quilo C - C 4 ou di-alquilo C - C ;

   RΊ 7 representa um átomo de Ci-C4, cicloalquilo

   Rη q representa um átomo de C i - C , alcoxi C -| - C 4

   hidrogénio ou um grupo alquilo C^-CgOu fenilo; hidrogénio ou um grupo alquilo ou fenilo;

   v representa um numero de zero a 2 ;

   R1g representa um mula geral grupo alquilo C ^^2^r”^^en^°’ ou um grupo de fõrR₂₀ representa um átomo de hidrogénio, um grupo alquilo,

   -34-/ indan-2-ilo, per-hidroindan-2-ilo ou um grupo de fórmula geral -(^CH2^m^_Z’ ^{com a condl}Ç^{ao de z} não representar um grupo fenilo insubstituído;

   R₂₁ representa um átomo de hidrogénio, um grupo alquilo C-j-C^ ou um grupo de fórmula geral (CH₂)_r~G;

   G representa um grupo fenilo, 4-hidroxi- ou 3,4-dihidroxi-fenilo, OH, 1H-indol-3-i1 o, 1H-imidazol-4-ilo, NH₂, SH, S-alquilo, guanidino ou CONH₂;

   R₂₂ representa um grupo alquilo CpC^, benzilo ou fenet£ lo;

   R₂3 representa um átomo de hidrogénio ou um grupo alquilo Cι-C4, benzilo ou fenetilo; e

   Rg representa um átomo de hidrogénio, um grupo alquilo Ci-C4 benzilo, benzidrilo, um ião de um sal de metal alcalino ou alcalino-terroso ou um grupo de fórmula geral -CH(R^? )-O-COR^g ou -(CHg ) ₂SiMe^, com a condição de um de A^ e Ag ou ambos representarem um grupo escolhido entre os grupos a X₂₂ e de que A^ e Ag não possam representar ambos Pro;

   caracterizado pelo facto de se utilizar um método de síntese sequencial de fase sólida, ou de síntese de blocos, clonagem de gé nes ou uma sua associação.
2. 2. - Processo de acordo com a reivindicação 1, para a preparação de derivados peptídicos de formula geral I na qual A₂ repre senta um grupo Phe,p~(2- ou 3-1ieni1)-a 1anina ou Tyr, cara£ terizado pelo facto de se utilizarem compostos iniciais cor- respondentemente substituídos,
3. 3. - Processo de acordo com a reivindicação 1, para a Dreparação de derivados péptidicos de fórmula geral I na qual A^ representa Glu, caracterizado pelo facto de se utilizarem compostos iniciais correspondentemente substituídos.
4. 4. - Processo de acordo com a reivindicação 1, para a preparação de derivados péptidicos de fórmula geral Γ na qual A^ representa Glu, Ala ou Pro, caracterizado pelo facto de se utilizarem compostos iniciais correspondentemente substituídos.
5. 5. - Processo de acordo com a reivindicação 1, para a preparação de derivados péptidicos de fórmula geral I na qual Ag representa Ile, caracterizado pelo facto de se utilizarem compostos iniciais correspondentemente substituídos,
6. 6. - Processo de acordo com a reivindicação 1, para a preparação de derivados péptidicos de fórmula geral I na qual Ag representa Pro, caracterizado pelo facto de se utilizarem compostos iniciais correspondentemente substituídos,
7. 7. - Processo de acordo com a reivindicação 1, Dara a preparação de derivados péptidicos de formula geral I na qual Ay representa Glu ou Ala, caracterizado pelo facto de se utilizarem compostos iniciais correspondentemente substituídos,
8. 8. - Processo de acordo com a reivindicação 1, para a preparação de derivados péptidicos de formula geral I na qual Ag repre- senta Glu ou Asp, caracterizado pelo facto de se utilizarem compostos iniciais correspondentemente substituídos.
9. 9. - Processo de acordo com a reivindicação 1, para a preparação de derivados peptídicos de formula geral I na qual Ag representa Tyr-Leu, Ala-Tyr ou Ala-Cha, caracterizado pelo facto de se utilizarem compostos iniciais correspondentemente subs. t i t u í d o s ,
10. 10. - Processo de acordo com a reivindicação 1, para a preparação de derivados peptídicos de fórmula geral I na qual Α^θ repre senta Gin, Asp, Pro, uma ligação, Asn, Asp-Glu, Glu, Ala, D-Lys, Lys, D-Asp, D-Glu ou Orn, caracterizado pelo facto de se utilizarem compostos iniciais correspondentemente substituídos.
11. 11. - Processo de acordo com a reivindicação 1, para a preparação de derivados peptídicos de fórmula geral I na qual X representa um átomo de hidrogénio ou um grupo acetilo ou succinilo, caracterizado pelo facto de se utilizarem compostos iniciais correspondentemente substituídos,
12. 12. - Processo de acordo com a reivindicação 1, para a preparação de derivados peptídicos de formula geral I na qual Y reoresenta um grupo OH ou NH^, caracterizado pelo facto de se uti_ lizarem compostos iniciais correspondentemente substituídos,
13. 13. - Processo de acordo com a reivindicação 1, para a preparação de derivados peptídicos de fórmula geral I na qual A^ repre- senta -Ser-His-Asn-Asp-Gly-Asp,

    As n-As p-Gly-As p,

    Asp-Gly-Asp,

    G1y-As p,

    Asp, ou uma ligação, caracterizado pelo facto de se utilizarem compo£ tos iniciais correspondentemente substituídos,
14. 14, - Processo de acordo com a reivindicação 1, para a preparação de derivados peptídicos de fórmula geral I na qual A-j representa Thr-Pro-Lys-Pro-Gln-Ser-His-Asn-Asp-Gly-Asp, caracteri_ zado pelo facto de se utilizarem compostos iniciais correspondentemente substituídos,
15. 15, - Processo de acordo com a reivindicação 1, para a preparação de derivados peptTdicos de formula geral I na qual A^ representa Thr-Pro-Asn-Pro-Glu-Ser-His-Asn-Asn-Gly-Asp , caracteri, zado pelo facto de se utilizarem compostos iniciais correspondentemente substituídos,
16. 16, - Processo de acordo com a reivindicação 1, para a preparação do péptido Suc-Tyr-Glu-Pro-11e-Pip-Glu-Glu-Ala-Cha-D-Gl u-OH, caracterizado pelo facto de se utilizarem compostos iniciais correspondentemente substituídos,
17. 17, - Processo de acordo com a reivindicação 1, para a preparação de Suc-Tyr-Gl u-Pip-11 e-Pro-Gl u-Gl u-Al a-Cha-^D-Gl u-OH , caract£ rizado pelo facto de se utilizarem composto iniciais correspondentemente substituídos,
18. 18. - Processo de acordo com a reivindicação 1, para a preparação de Suc-Tyr-Glu-Pro-Πe-Azd-Glu-Glu-Ala-Cha-D-Glu-OH, caracte rizado pelo facto de se utilizarem compostos iniciais corres_ pondentemente substituídos.
19. 19. - Processo de acordo com a reivindicação 1, para a preparação de Suc-Tyr-Gl u-Azd-Π e-Pro-Gl u-Gl u-Al a-Cha-D-Gl u-OH , caracterizado pelo facto de se utilizarem compostos iniciais corre£ pondentemente substituídos.
20. 20. - Processo de acordo com a reivindicação 1, para a preparação de Suc-Tyr-Glu-Pro-Ile-Pro-Glu-Glu-Ala-Cha-D-Glu-OH , caracte rizado pelo facto de se utilizarem compostos iniciais corres_ pondentemente substituídos,
21. 21. - Processo para a preparação de composições farmacêuticas apro priadas para promover a diminuição da coagulação sanguínea em um doente necessitado, caracterizado pelo facto de se misturar um derivado peptídico, preparado de acordo com o processo descrito em uma qualquer das reivindicações 1 a 20, como ingrediente activo, com um ou mais veículos aceitáveis sob o ponto de vista farmacêutico.
22. 22. - Processo para a preparação de derivados peptídicos de fórmula geral I, tal como definida na reivindicação 1, caracterizado pelo facto de se utilizar uma síntese sequencial de fase solida ou síntese de blocos que consiste em se ligar a um suporte de resina activada um aminoãcido protegido apropriadamente, representado por A-p e em se ligar subsequentemente os outros a 1 fa-aminoãcidos- protegidos, representados pelos símbolos A? a Α^θ, ao grupo aminoãcido terminal da cadeia peptídica, que entretanto ficou exoosto por remoção do grupo de protecção amino.
23. 23. - Processo de acordo com uma das reivindicações 1 ou 22, para a preparação de derivados peptídicos de formula geral I na qual A-| representa

    Thr-Pro-Asn-Pro-Glu-Ser-Fíis-Asn-Asn-Gly-Asp, Thr-Pro-Lys-Pro-Gln-Ser-His-Asn-Asp-Gly-Asp , Ser-His-Asn-Asp-Gly-Asp,

    Asn-As p-Gly-Asp,

    Asp-Gly-As p,

    Gly-Asp,

    Asp, ou uma ligação caracterizado Delo facto de se utilizarem compostos iniciais correspondentemente substituídos.
24. 24. - Processo de acordo com uma das reivindicaçóes 1 ou 22, para a preparação de derivados peptídicos de formula geral I na qual A^ representa Phe, p-(2- ou 3-1ienΐ1)-a 1 anina ou Tyr, caracterizado pelo facto de se utilizarem comoostos iniciais correspondentemente substituídos,
25. 25. - Processo de acordo com uma das reivindicações 1 ou 22, oara a preparação de derivados peptídicos de formula qeral I na qual Ag representa Glu, caracteri zado pelo facto de se u t i 1 i_ zarem compostos iniciais correspondentemente substituídos.
26. 26, - Processo de acordo com uma das reivindicações 1 ou 22, para a preparação de derivados peptidicos de formula geral I na qual A^ representa Glu, Ala ou Pro, caracterizado Delo facto de se utilizarem compostos iniciais correspondentemente subs_ tituídos,
27. 27, - Processo de acordo com uma das reivindicações 1 ou 22, para a preparação de derivados peptidicos de formula geral I na qual A₅ representa íle, caracterizado pelo facto de se utiH zarem compostos iniciais correspondentemente substituídos.
28. 28, - Processo de acordo com uma das reivindicações 1 ou 22, para a preparação de derivados peptidicos de formula geral I na qual Ag representa Pro, caracterizado Delo facto de se utilizarem compostos iniciais corresoondentemente substituídos,
29. 29, - Processo de acordo com uma das reivindicações 1 ou 22, Dara a preparação de derivados peptidicos de formula geral I na qual Ay representa Glu ou Ala, caracterizado oelo ^acto de se utilizarem compostos iniciais correspondentemente substituídos.

    3Q,- Processo de acordo com uma qualquer das reivindicações 1 ou

    22, para a preparação de derivados peptidicos de formula geral I na qual Ag representa Glu ou Asp, caracterizado pelo facto de se utilizarem compostos iniciais correspondentemente substituídos.
30. 31,- Processo de acordo com uma das reivindicações 1 ou 22, oara

    -41/ a preparação de derivados peptídicos de formula geral I na qual Ag representa Tyr-Leu, Ala-Tyr ou Ala-Cha, caracterizado pelo facto de se utilizarem comoostos iniciais correspondentemente substituídos,
31. 32, - Processo de acordo com uma das reivindicaçoes 1 ou 22, para a preparação de derivados peptídicos de fórmula geral Γ na qual A*|q representa Gin, Asp, Pro, uma ligação, Asn, Aso-Glu, Glu, Ala, D-Lys, Lys, D-Asp, D-Glu ou Orn, caracterizado pelo facto de se utilizarem comoostos iniciais corresDondentemente substituídos,
32. 33, - Processo de acordo com uma das reivindicações 1 ou 22, para a preparação de Suc-Tyr-Glu-Pro-11e-Pip-Glu-Gl u-Al a-Cha-D-Glu-OH, caracterizado pelo facto de se utilizarem compostos iniciais correspondentemente substituídos.
33. 34, - Processo de acordo com uma das reivindicações 1 ou 22, oara a preparação de Suc-Tyr-G1u-Píp-I1e-Pro-Glu-G1u-Ala-Cha-D-Glu-OH, caracterizado pelo facto de se utilizarem compostos iniciais correspondentemente substituídos,
34. 35, - Processo de acordo com uma das reivindicações 1 ou 22, oara a preparação de Suc-Tyr-Glu-Pro-Ile-Azd-Glu-Glu-Ala-Cha-D-Glu-OH, caracterizado pelo facto de se utilizarem compostos iniciais correspondentemente substituídos,
35. 36, - Processo de acordo com uma das reivindicações 1 ou 22, para a preparação de Suc-Tyr-Glu-Azd-I1e-Pro-G1u-G1u-Ala-Cha-D-

    -42-Glu-OH, caracterízado pelo facto de se utilizarem compostos iniciais correspondentemente substituídos,
36. 37,- Processo de acordo com uma das reivindicações 1 ou 22, para a preparação de Suc-Tyr-Gl u-Pro-Il e-Pro-Gl u-Gl u-Al a-Cfia-D-Glu-OH, caracterizado pelo facto de se utilizarem comDOstos iniciais correspondentemente substituídos,