PT91702B

PT91702B - Processo para a preparacao de novos nitratos organicos

Info

Publication number: PT91702B
Application number: PT91702A
Authority: PT
Inventors: Joachim Hutter; Klaus Sandrock; Eike Noack
Original assignee: Sanol Arznei Schwarz Gmbh
Priority date: 1988-09-15
Filing date: 1989-09-13
Publication date: 1995-06-30
Also published as: CZ530389A3; DK452989A; EP0362575B1; PT91702A; HUT51229A; DE58909173D1; HU209716B; DK452989D0; CZ284586B6; YU48302B; IE892932L; ES2073418T3; YU176289A; SK530389A3; IE65918B1; PL163343B1; FI894350A0; HRP920987A2; FI95569B; JPH0291054A

Description

DESCRITIVA presente invento diz respeito um processo para preparação de novos nitratos orgânicos com uma estrutura específica, constituídos por ácidos gordos contendo nitrato (ácidos nitrato-a 1canóicos5 e amino ácidos contenda enxofre, ou pêptidos, de fórmula oeral:

.(CH_) —C—N—(CH„> 2 m 2 π

-C—< Cl-L· }

L)

-C—R em que R representa, por exemplo, hidroxi, alquenoxi inferior; R^ representa hidrogénio.

alcoxi inferior ou alquilo com 1 a 6 ,1 átomos de carbono ou alquilo inferior substituído; R“ tal como R representa hidrogénio ou alquilo inferior; R'' representa hidrogéu mo ou alquilo inferior, R' representa, por exemplo, hidrogénio, cr alquilo inferior ou fenilo; R^u representa, por exemplo, alquil iπferior-tiol os seus compostos :ilo, de preferencia, podem estar ligados 4

S-acetato, S-propionato ou S-butirato; R e R um com o outro mediante a formação de uma tio 1actona; R e R ti

BAD ORIGINAL

Li.iTi u m •Λ

ρ >_! ij iií -Ξ _ =t Γ i 1 y -3 u u éster ou amida; R' e R‘ podem estar ligados mediante a formação de, por exemplo, uma ponte alquilen 4 átomos de carbono; m, n d o s s e u. s s ais f a ι ~ m a o e u t i c a. m e n t e a c e i t á v

Estes compostos são preparados, mediante a condensação dos correspondentes ácidos gordos contendo nitrato ou dos seus derivados reactivos com o grupo amino de um amino ácido ou de um péptido e/ou eventualmente mediante u.m passo de reacção subsequente para a alquilação da cadeia lateral.

BAD original .# no‘/o« ni tratos orqânicos.

S Uílii u ι'”SO p zt ΐ'’’ ·?.

Os nitratos orgânicos (ésteres de ácido nítrico) tfeín 'indo a ser empregados com bons resultados na terapia das doenças

Eles manifestam a sua accão tanto através de u.m alívio c a r d í a c a d e v i d o a u m a b a i;: a m e n t o d a m ε s m a , c o m o atra v é s de uma melhoria do fornecimento de oxigénio ao coração provocada por um a 1 a rgamen to dos va.sos c o r onár i os .

Aliás, verificou-se nos últimos anos gue os nitratos orgânicos até agora utilizados na terapia, tais como α trinitrato de glicerol (BTN), 5-mononitrato de isosorbitol ou binitrato de isosorbitol apresentam, quando administrados ao organismo em doses elevadas e continuamente durante um período relativamente curto, um nítido enfraquecimento dos efeitos, ou seja, tolerância aos nitratos. Numerosas experiências indicam—nos que a presença de grupos sulfidrilo impedem uma tolerância aos nitratos, podando enfraquecer uma tolerância já verificada.

criação d hoje em dia, da seguinte maneira;

to i erancia

De acordo com os conhecimentos actuais, os afeitos farmacológicos dos compostos orgânicos nitro estão dependentes da presença da cisteina. 0 nitrato orgânico forma com esta uma. etapa prévia comum, através de cuja decomposição se libertam radicais NO, que activam a enzima alvo, a guani1 atoeic1 ase solúvel dos músculos lisos. Outras reacções em série desencadeadas pela formação de cGMP conduzem ao relaxamento ou à dilatação dos vasos sanguíneos.

BAD OFUGINAL

No que

?re so até agora ainda, hiootético produto :urtã duração, pensa-ss tratar-se tíe um tioéster do ácido nítrico ou de um tiomtrato. Através de um b1oquesmento intramolscular e de outras reacçSss em serie que ainda não estão explicadas pressupõe—se finalmente a formação de L.un nitrosotiol a partir tío qual se libertam seguidamente monóxido de azoto ou .iSes de nitrito. A decomposição dependente das enzimas com o auxilo da ESH-reductase deveria, pelo contrário, uma vez que conduz exclusivamente à formação de iSes de nitrito, não ter significado sobre o efeito farmacológico. A decomposição não—enzimática necessita também, tal como se referiu, da cisteína e esgota-se, por consequência, tíe acordo com as doses respectivas (esgotamento do pool dos grupos SH), de forma que, com o tempo, deixa de se formár NO suficiente que é o verdadeiro activatíor tía ciuanilcic.le.se, o que conduz clinicamente a uma redução do efeito.

Nas substâncias tíe acordo com o invento trata-se tíe compostos especificamente formados, constituídos por ácidos aminoá-J ·' .dos contendo enxofre ou de oentídeoi objectivo do presente invento consiste, criar novos nitratos orgânicos que em virtude do seu constitutivo comum — a presença de grupos sulfidrilo Quem por evitar ou enfraquecer uma tolerância já relativamente aos nitratos.

pois, em p r i π c ί p i o ss distinverificada

Este objectivo foi atingido pelo facto dos compostos

BAD ORIGINAL ο

em que representa hidroxi, alcoxi inferior, alquenoxi inferior, di-alquil infericr-amino-alcoxi inferior, acilar i1 όχι, aril-alquil inferior-oxi, arakoxi inferior substituído, metilo, halogénio ou. metoxi; -amino, di alquil inferior amino, aril-alq a r i 1 o ;·: i s u. b s t i t u. í d o o u amino, alquil inferiorl inferior-amino, hidroxiamino ou radicais de amino ácidos com 1 i g a ç S o pe ρ tíe! i c a, representa hidrogénio, alquilo com 1 átomos de carbono, alquilo inferior substituído, em que o su.bstituinte é haloqénio, hidroxi, alcoxi inferior, ariloxi, amino, alquil inferior-amino, acilamino, aciloxi, arilamino, mercapto, alquil inferior-tio, ariltio, tal como R^ representai hidrogénio ou alquilo inferior,

R representa hidrogénio ou alquilo inferior,

R representa hidrogénio, alquilo inferior, fenilo, metoxifeni1 o, feni1-alquilo inferior, metoxi-feni1 —a1quilo inferior, hidrox.if eni 1-a.l qui lo inferior, hidroxialquilo inferior, alcoxialquilo inferior, amino-alqu.ilo inferior, ac i 1 amimo-a I qui 1 o inferior

-alquilo inferior ou alquil inferior, mercaptoi n f e r i o r -1 i o -alquilo

BAD ORIGINAL r< ·=. seu s C O |7>. p O = t Ο S S^—ρ r ο ρ ι o n a t o,

Γ _e p _r q _{e n} r 3. a i q u 1 í 1Π t £' Γ 1 Q t

S-aci.Io, de preferência,

S-butirato, S-capronato e B-caprilato

0 0

H H ”

3-C-Q-R, S-C-M-R, Alquil-inferior-S-C-O-R

II alquilo inferior-S-C-N-R-, ácido alquil inferior-tic—alquil inf erior-carbox ί 1 i.co e/ou. oe seus ésteres ç amidas, alquil inferior-tio-alquilo inferior, er

R e R^1- podem estar liqados um com o outro mediante a f o r m a ç ão d e u m a t i o 1 a c t o η Ά, /1

R e R^r podem estar liqados um com o outro mediante a formação de um éster ou amida,

R e R' podem estar ligados um com o outro mediante a formação de uma ponte alquileno _IUI xi -ç’.

átomos carbono, de uma ponte alquileno com 2 a 3 átomos de carbono e um átomo de enxofre, de uma ponte alquileno com 3 a 4 átomos de carbono, que contém uma ligação dupla ou uma ponte alquileno tal como adirás se referiu, substituída com hidroxi, alcoxi inferior, alquilo inferior ou di-alquilo inferior, m, n e o representam os números 0 — 10;

e os seus sais farmaceuticamente aceitáveis..

E>e acordo com uma outra forma de realização do invento os componentes de ácidos gordos contendo nitrato têm um

BAD ORIGINAL

L·-

comprimento de cadeia de d.-, - eles» podem ser isóítwfijs de c a d e i. a 1 x n e a r , r a m i f i c a d a , r a *_ s* m x»— a o u. o p l i a .

Sao utilizados, de preferência, os aminoácidos cisteína, metionina ou homocisteína.

Os aminoácidos apresentam vantajosamente a forma estersoguímica L.

A cisteína e/ou a metionina podem» apresentar-se sob a forma dos seus ésteres metilicos, etílicos ou propí1icos.

grupo SH da cisteína pode ser esterificado com ácido alcanocarboxílicQ· inferior com 2 a 7 átomos de carbono.

De acordo com um modo de realização do invento particularmente vantajoso os compostos em causa apresentam as seguintes f ó r muIas gu í mi c as s lico de M-(2-nitratocetil) lico de N-(2-nitratoceti1) lico de N-(2-nitratoaceti 1 lico de N~<2-nitratoaceti1 ílico de N-(2-nitratoacsti atopropionil/-cisteína

-cisteína — S—aceti1 —cisteína )-S-prapion i1-cisteína )-S-pivaloi1-c isteína 1)—metionina é s t e r' e t. í éster etí é s t e r e t í éster etí éster met

Ν-ί 2-nitr éster etílico de N-(2-nitratopropioni1)-cisteína éster etílico de N-(2-nitratopropioni1)-metionina

M—(2-nitratobutiri1)-cisteína

éster	etílico	de	IM- (2-ni tratobuti ri 1 )	—c isteina
éster	e t.í 1 ico	de	M-(2-n itratobutiri 1/	-S-aceti 1 -ci.
éster	etílico	de	N-(2-n i t r a tobu t i ri1)	—S-buti ri1-c
és ter	etílico	de	IM-(2-n itratobutiri1)	-metion ina

N-(2-ni tratoisobuti ri 1/-cisteína s te ί n a isteína

BAD ORIGINAL

éf Ξ· h E? Γ e? t £	1 i c o	d f-*	f-4— (	2—n i t raf o i =.nbu f i r	i1>-cisteína
éster stí	1 ico	de	t,L. '	2—n i t ra t o i so bu t i r	il)-S-bensoi1—cisteína
éster etí	1 i c o	de	N- (.	2 - n i t r s t c? i s o b u. t i r	i1)—3—aceti1—cisteína
éster stí	I ico	de	J'.i— \	2-n i tratoi sobutir	i1)—S—piva1oi1 —c i stsín
éster etí	1 ico	de	N~<	2 - π i t r a t o .i s o b u t i r	i 1 ) —me t i ori i n a
M-!3-nitr	atobu	,ti	τ v , _L 1 /	-cisteína
éster etí	1 i c o	de	N- (	3-nitratobutiri1>	—cisteína
éster etí	1 ico	de	M- (	3-nitratobutiri 1)	-S-aceti1—cisteína
éster etí	1 ico	de	N- (	3-n.i tratobutiri 1 >	- 3 — propionil-cis te í na
éster etí	1 ICO		M- (	3-nitratobutiril)	—me f i oni na
t i o 1 ac t ori	o. d ç?	N-	(3-n	i t r a t o b Li t i r i 1 ) h o m o c i s t e í n a
N- ·'. 3-ni tr	atcpi	a	lei 1	)-cisteína
éster etí	1 i c o	de	N~(	3-nitratopivaloi1	)-cisteína
15 C r*. Γ” D (J í 1 d	to -de	é	s ter	etílico de N-(	3-n i tratopi va1oi1)-ci s
teína	1 ico	d&	N- (	3-nitratopivaloi 1	) -S-aceti1-cisteína
éster etí	1 ico	de	N~ (	3-nitratopiva1oi1	)-3-propion i1-c isteína
éster etí	1 ico	de	N- (	3-nitratopivaloi1	)-3-fcu t i ri1-cisteí n a
éster etí	1 i c o	de	N- (	3 - n .i trato pi valoil ) -tí - i s o b u t i r i 1 - c i s t e í n
-2 b l5·- út í	’ÍCD	u E'	W- (	3-n itratopiva1oi1	>—S—piva1 οι 1-cistsina
éster e tí	1 ico	de	N-(	3-ni tratopiva1oi1	) -3-bensoi 1-cisteína
éster etí	1 ico	de	N-(	3-nitratopivaloi 1	>-metionina
N~(3-n i tr	atcpi	va1oi1	)-metionina
tiolactona de	N-	(3-ni tratopiva1oi1)-horaocisteina
éster etí	1 ico	de	N- (	2-n itratohexariai 1 ) -c is teína
éster etí	1 ico	d e	N- (	2-riitratchexanoi 1	)—S—propionil—cisteína
éster etí	1 ico	de	N-(	3-n i tratchexanoi1	)-cisteína
éster etí	1 ico	de	N- (	3-ni t r a t d he x a η c i 1	)-metionina
N-<12-nit	r atol	auroi1	)—cisteína
dó Cj ^J- p 1' }	1 ico	de		12-n i trato1auroi1	) -cisteína
éster etí	1 ico	de	N- (	12 - n i t r a t o 1 a u r o i 1	) -S-aceti 1-cisteína
éster stí	1 ico	de	N-(	12-nitrato1auroi 1	) -S-piva1 oil-cisteína.

t.

r

BAD ORIGINAL

De acordo coai uma outra forma de realização do inverto,, os medicamentes contem um teor de um composto e/ou de uma mistura de compostos de acordo com o invento.

Este de doenças do das coronárias da, da insufic bral ou renal,, medicamentos podem ser utilizados no tratamento istema circulatório, por exemplo, como dilatadores como produtos para, o tratamento da. tensão eleva— ência cardíaca e ainda do sistema vascular cereFinalments, os compostos podem ser preparados de maneira conhecida per se, condensando os ácidos gordos contendo os nitratos correspondentes ou os seus derivados reactivos, com o grupo amino de um amimo ácido ou de um peptideo. Os compostos obtidos podem eventualmente, mediante um passo de reacção subsequente, ser submetidos a uma alquilação ou acilação da cadeia lateral.

Os derivados reactivos dos ácidos gordos contendo nitrato utilizados de acordo com o invento são, por exemplo, os haletos de ácido, os anidridos de ácido, as amidas activadas ou os ésteres activados. Usam-se, de preferência, os cloretos de ácido, as azidas de ácido, os anidridos de ácido simétricos, os ésteres activados e cs anidridos mistas com ácidos orgânicos ou inorgânicos.

condensação de ácidos gordos contendo de amino ácidos podem também efectuar—se cresença de um agente de condensação que

As reacções tíe nitrato com grupos amino num solvente inerte e na promova a formação de compostos de amidas de ácido, de u.ina carbodiimida, tais como cadeias difeni1-N-ciclohexi1imina ou cadeias pentameti1en-N-ciclohexi1imina, ou de um fosfato, ou de um fosfito, tal como o trieti1fosfito, eti1po1ifosfato ou

BAD ORIGINAL

L

Í=>ijpr<_f μΐ 1 μι_ι 1 Í f'_J = f'3. to , d LI 1' ·—,! i t - Uíil peTludu de 1 3 Ή-3 horas, ώ temperaturas compreendidas entre — 10'-C e s. temperatura de refluxo do solvente utilizado.

Os exemplos de realização do invento servem para ilustrá-lo sem serem, de qualquer modo, limitativos.

Exemplo 1

Preparação do éster etílico de N-(3-nitratobutiri1)-cistaína

Passo da reacção

Saponificação do éster etílico do ácido 3-hidroxibutírico

Adicionarant-se 13,2 g (0,1 mol) de éster etílico de ácido 3-hidroxibutírico (Aldrich) a 4,0 g (0,1 mol) em NaOH diluído em 100 ml de água. A reacção terminou quando a solução se tornou homogénea.

D processamento continuou acidificando-se a. solução obtida com 10 ml de HC1 concentrado e extraindo—se duas vezes com com 100 ml de acetato de etilo de cada vez. A solução foi seguidamente introduzida num agitador rotativo, obtendo-se um óleo fluido.

rendimento foi de 8,SI g (em teoria: 10,4 g) de ácido 3-hid roxi butí rico.

F‘asso da reacção

Nitração do ácido 3-hidroxibutírico

Dissolveram-se 8,31 g (0,03 mol) de ácido 3-hidroxibutírico e 50 mg de ureia em 50 ml de ácido acético à temperatura r

BAD ORIGINAL

de 5° C. Adicionaram-se qota a oota

-ímei ro ml (õ,15 moI) de ΗΐΜΟ_ e sequidamente 14,17 ml (0,15 mol) de Ac_n sob arrefecimento,

A mistura da rea foi agitada durante a noite,

Efectu.ou-se depois processamento, adicionando obtida 200 tri 1 ds água gelada e extraindo-se com acetato de etilo. A fase orgânica foi extraída com NaHCQ-,. A fase Na.HCO-, foi acidificada con! HCl-conc. e extraída com acetato de etilo. A solução foi seguidamente agitada com rotação, obtendo— -se um óleo f1u ido.

rendimento foi de 9,4 g (em teoria: 11,9 g) de ácido 3-bidroxi butírico.

Passo da reacção

Preparação do éster etílico de N-<3-nitratobutiri1)-cisteína

Dissolveram-se 16,6 q (O,11 mol) de ácido 3-nitratobu, tírico em 1Ô0 ml de diclorometano. Introduziu-se N,_ a 15''' C e

Q ad ic ion aram-ss mol ) .ter etílic tema

:.m iequ.ida adicionou —se lentamente cota a qota, a com introdução de 24, g (0,12 mol) de dicic1ohexi1carba~ diimida (DCC) dissolvida em 30 ml de diclorometano. Terminada a reacção removeu—se por sucção a dicic1ohexiiureia obtida e lavou-se a solução com 150 ml de HC1, após o que a solução foi agitada com rotação.

A purificação da substância efectuou—se por cromatografia preparativa de coluna e na recristalização usou-se etanol/n— h ea η o .

Rendimento: 6,88 g (em teoria: 30,83)

Ί

BAD ORIGINAL

Fp: 77,S'^:'C

Preparação do éster etílico N-(3-nitratobutiri1)-metionina

Dissolveram-se, 6,35 g (©,©43 mol) de ácido 3-nitrato-

fautíri	co,	7,47 g í ©	«1 -· -Γ	, (TiQ	1 )	de	éster	et	í 1 i c o	de metionina	e LUTi
pOLíC O	de	d ime ti. 1 ami	η o p i	r id	i Π 3.	( D14AP ) ,	com	agi. t	a. ç ã o e a r r e f e	c ÍiTiSn~
to até	1©	-, em 1©©	ml	d&	rj ΐ <2	1ororaetan	C* u	Diss	olveram-se 1©
	mo 1	) d s D C C	£ iTi	2 0	(Ti 1	de	CH_O	CI,,	que	foram adiei	C u ?.d O -í
1 en taiTi	en f	e, gota a	gota.	i. 5 <5,	iTi	edida que	·—	i. n t r	oduzia simui	tanea-

mente azoto. No final da reacção a solução foi extraída por sucção com NaHCOÇ e finalmente lavada com HC1. A solução foi agitada com rotação, obtendo—se um óleo.

A purificação efectuou-se por cromatografia preparativa de coluna ou por cristalização no frio.

□ rendimento foi de 1,95 q (em teoria: 12,©5 g) de éster etílico de N-(3—nitratobutiri 1)—metionina sob a forma da um

61οο incolor.

E e m p 1 o 3

Preparação do éster etílico N- (3— n i t ra topi va. 1 oi 1 ) -c isteí na

Passo da reacção

Preparação do éster metílico do ácido nitratopivaiínico

Dissolveram-se 25,© g (©,19 mol) de éster etílico de ácido hidroxipiva1ínico à temperatura ambiente em 25© ml de CH,.C1^, e arrefeceram-se com agitação até 5° C. Λ mistura

BAD ORIGINAL adicionaram-se gota a gota, mediante agitação, 23,8 g (0,33 mol) de HNO, (a 1007), de modo a que a temperatura não ultrapassasse

10* C. Seguidamente arrefeceu-se a mistura para 5° C e adicionaram-se qota a oota, mediante agitação, 38,6 g (0,38 mol) de

a ou a a.

-'H* j de moc passasse os 10* C. A mistura foi agitada durante 15 minutos num banho gelado e depois aquecida lentamente até à temperatura ambiente, continuando-se a agitar à temperatura ambiente durante

a η o i t a	„ u produto foi	vertido lenta	.men t	e, com a	.gitação, s	O b Γ E'
500 ml	de á q u a q e1a d a.	Separou-se a	fase	CH^ul^	e lavou—se	uma
vez com	10O ml de H^O	destilada, uma v	ez com	100 ml de	um-a
so1ução	saturada, aquos	a, de NaHCO^- e	mais	uma vez	com 100 ml	ds
H^O des	tilada. 0 extr	acto de CH_OC1-,	foi	depois	concert trado	no
•4-
çva.Dcrã	dor rotativo, a	uma temperatur	a de	banho	de, no má;·:	imo,

C, sob um vácuo provocado por jacto ds y !_·. --Λ , > t a ±.

secura.

resíduo oleoso, amarelo pálido, foi destilado no vácuo obtido por meio de bomba de óleo, a uma temperatura de banho de 60* C, obtendo-se um óleo claro e muito fluido.

Pend imento:

94,0 7. do valor teórico.

2?2 Passo da reacção

F' r e p a r a ção d o á eido π i t r a t o p i v a 1 í n i c o

Disso!veram-ss 14,O g (0,350 mol) de NaOH em H^D destilada e arrefeceram-se para cerca de 10* C. Adicionou—se á mistura, com agitação, uma solução de 31,0 g (0,175 mol) de éster metílico de ácido n i. tratopival ín ico em 250 ml de metanol, o que deu à mistura da reacção uma cor amarelada e fez aumentar a temperatura até cerca de 25* C„ Depois de agitado durante 90 minutos o produto foi neutralizado com 29,5 ml (0,35 mol) de HC1 a 377 e o metanol foi totalmente destilado no evaporador rotativo. A fase aquosa foi extraída duas vezes com 200 ml de cloreto

BAD ORIGINAL de meti lena de cads vez. 0 conjunto de extractos de cloreto de metileno foi lavado uma vez cosi 50 ml de HO e a fase de cloreto de metileno foi concentrada no evaporador rotativo até à secura. 0 resíduo oleoso e incolor foi dissolvido em 100 ml de acetato de etilo e concentrado de novo no evaporadr rotativo até à secura, obtendo-se um resíduo sólido branco do qual foram eliminados os resíduos de solvente no vácuo obtido por uma bomba. de óleo (0,4 ·;···· num admr r o ta. ti vo uma temperatura df jar; ho cerca de 40* C, durante 15 minutos. U resíduo sólido e branco de 25,44 q (89,1% do valor teórico) foi dissolvido em 100 ml de n—hexano levado à ebulição a. que se adicionaram 2 ml de éter Da ρο ι s de se arrefcíL^r a t s a temperatura a m o c—? r te e de se adicionarem cristais semente o produto cristalizou.. Dsixou-se o produto em repouso durante 72 horas s. 0° C, os cristais foram removidos por sucção, depois lavados duas vezes

com	to	in 1
Ξ-Ε/C 3.		DC?r
	se a t i n

de n-hexano de cad;

ecos no dispositivo de cerca de ι orr

U;n pes.j — _ _ ... X. .. J--u. C i j _u ί ι TI :.-±

Pr·.· 54 O*r f J-.· . ·_' ‘t , ·Rendimen to:

b’2, V% do valor teórico, ·_·.ο Passo reac

Preparação de éster etílico de N-(3-nitratopiva1 oi 1 )-cisteína

Dissolveram-se 10,7 q (71,7 mmol) de u.ma base de i'4_n, em

J-a etílico de L-cisteína, sob uma atmosfera ds cloreto de metileno, à temperatura ambiente, median Adieionaram—se—lhe 11,4 q (70,0 mmol) de ácido de éster il de línico cristalino e dissolveu-se com [ 1 fA ι AO ay i u.açao .

• nitroxipivaá temoeratura imbiente. A esta mistura adicionou—se qota a qota sob uma r j

BAD ORIGINAL

atmosfera de azoto, um cic1ohexi1ureia (DCC> t u r a a m b i en t e, d u r a π t e ·— Γ) 1 Γ q (71,7 mmol) de N-N-diclohexilureia de cor br temperatura ambiente e ag de azoto, A d ic ic 1 one:·; i succão num filtro de frit

ÍTí ·.J Φ : I i 1 c e r c a d e Continu cloreto de metileno, à temperaminutos, o QU.e fez a te aí per a·t—, íO j q cj ““ iC: \y ·— — c: i _t— η — anca. 0 produto foi arrefecido até à itado durante a noite sob uma atmosfera lureia foi, em seguida, removida por id

CFL.Cl^. 0 conjunto 1 a v a. d a e um a v e z c o m H_o0 destilada de caddas seguidamente num banho de cerca de 40 550 mbar inicial *até de soluçSes de cloreto de metileno foram 100 ml de HC1 IN e duas vezes com 100 ml de a vez (sob uma atmosfera de N,-.) e concentraevaporador rotativo, a uma temperatura de ^CC e num vácuo obtido por jacto de á.gua. de cerca de 20 mbar. Qbteve-se um óleo castanho

C i cl Γ O Rendimento: 21,2 g ~ 102,7 X do valor teórico

A substância foi purificada por cristalização, com arrefecimento, a partir de etanol/hexano.

Rendimento: 13,42 g > 65,1 X do valor teórico do ésteretílico de N-(3-nitratopiva1oi1)-cisteína sob a forma de um óleo cor de rosa claro.

Passo da reacção

Preparação do éster etílico de

N—(3—πi tratopiva1oi1)—S-aceti1 —c isteína

Adicionou—se gota a gota, com agitação e arrefecimento, a 10,3 g (35,0 mmol) de éster etílico de N~(3-nitratopiva1oi 1 >~ -cisteína dissolvido em 70 ml de dic1orometano uma solução de 4,3 g (42,0 mmol) de anidrido de ácido acético em 10 ml de

BAD ORIGINAL j

diclorometano. Seguidament cimento uraa solução ds 5,0 de diclorometano. No final HlJ 1 IN, uma solução aquosa □ extracto de dic1orometano vo até á secura. OotivBr amarelo claro, a. partir do partir de etanol/água, com cristais semente, 7,8 g de teórico)„ e a d i c i on o u. - se c o m a. q i g (48,0 mm o1) de t r i e t da reacção o produto de bicarbonato ds sódi foi concentrado no ev am se 11,ΰ g d e um» qual se obteve por arrefecimen to atravé produto cristalino ( ilamina em foi lavado oal Ο λ e aparador ro produto o cristalizaç s da adiçã •i' O , · J^: /. d O ca οιF_P: < 5°C.

AQ Passo da rsacção/Variante 1

Preparação do éster etílico de

N- 3 ( n i t r a t op i va I oi 1 ) -S-but i r i 1 -c i s t e í n a

Utilizando fe,7 g (42,O mmol) de anidrido de tal m lugar do anidrido de ácido acético c 4, obtêm-se seguindo os mesmos passos 1 , P g de um prod como foi o no a ο ί o o casso j-? i u <_ O O i ϊζ* Ο to ·_> η c\ íTl cl 5 1 O C. i. rd. Γ* D cí descrito no referido c-sssa de ree proooosc-íPon co

- q -i H !~i •istalizacáo coín arrs:eciinentc produto cristalino (= 7ó,2 7. do valor teórico)

Fp: < 5*C.

Fasso da reacção/Variante 2

Preparação do éster etílico de N- ( 3—n i tratopiva 1 oi 1 ) -S-cisteíria

BAD ORIGINAL·

Utilizando 7,a q (42,õ mmol) de anidrido de ácido pivalínico em lugar do anidrido de ácido acético descrito no passo de reacção 4, obtêm-se seguindo os mesmos passos e processaraento descritos, 14,1 g de um produto oleoso, amarelo claro a partir do qual, tal como foi descrito no referido passo de reacção 4, através da cristalização, se obtêm 10,5 g de produto cristalino <= 79,5 '/. do valor teórico).

o'asso da reacção/Variante 3

Preparação do ϋ-carbonato do éster etílico de N-( s-nitratcrpivaloi 1) -S-cisteína

4,3 g (42,0 mmol) de éster etíliCD do ácido do anidrido de ácido acético descrito no btãm-se seguindo os mesmos passos e proces,5 q de uni produto oleoso, amare lo claro a como foi descrito no referido passo de cristalização, se obtêm 9,5 g de produto do valor teórico).

Uti1izando clorofórmico em lugar passo de reacção 4, o sarnento descritos, 11 partir do qual, tal reacção 4, através de crista1ino (- 74,1 3

Fp: 3ó'^:'C

Exemplo 4

Preparação do éster N-(3-nitratopivaloi1)-metionina

Dissolveram-se 12,4 g (70,0 mmol) ds uma base de éster etílico de L—metionina, sob uma atmosfera de azoto, em 250 ml de cloreto de metileno, à temperatura ambiente e com agitação. Adicionaram-se-lhe 11,4 g (70,0 mmol) de ácido nitratopivalínico

Ί

BAD ORIGINAL

cristalino e dissolvidos com .agitação à temper esta mistura adicionou-se gota a gota, com a atmosfera de azoto, uma solução de 14,3 q (71, cic íohexi wreii e lõ υ s me'

a amoie	^: η τ. e .
ção e	sob
o 1 ) de	N—N
eno, à	tem
fez a	temo

tura ambiente, durante cerca de 15 minutos, o que fez a tura subir para 35’⁵ C. Continuando a agitar-se obteve-se diciclohexilureia branca. 0 produto foi arrefecido até á. temperatura numa itmosfera de azotc

DCC—ureia foi, em sequida, removida por filtro de frita de vidro e lavado uma vt com 50 ml ds CH^Cl^. 3 conjunto de soluções de cloreto de metileno foi lavado uma vez com ICO ml de HC1 IN e duas vezes com 100 ml de H._,0 destilada de cada vez ( sob uma atmosfera, de N_o) e sequidamen te concentrado num evaporador rotativo, a‘ u.ma temperatura de banho de cerca de 40-'C e sob vácuo obtido por jacto de água primeiro de 550 mbar até cerc de

220 mbar. Obteve-se um óleo amarelo claro.

Rendimento: 24,9 g - 110,3 7. do valor teórico de éster etílica de N-(3-nitratapivalai 1)-L-metionina em bruto.

produto em bruto foi purificado por meio de cromatografia preparativa de coluna.

Rendimento: 17,ó g - 73,0 7. do valor teórico de éster etílico de Ν-3-nitratopivaloi1)-metionina.

Ex emalo

N- ( 12-IMi trato 1 auroi 1 ) -S~aceti 1 -cisteí na

Passo da reacção

Preparação do ácido 12-nitratolaurínico

Ί

BAD ORIGINAL ’

Dissolveram—se 54,1 g (0,250 mol) de ácido 12-nitrato1 au r í n i c o e 0 , 3 q d e ur e i. a - so □ ag u ec i men t o suave, em 1 , _· x de CHCI.. e arrefeceram-se até 20 *C. fidicionaram-se gota a gota, lentamente e mediante agitação, 23,6 g (0,375 mol) de HNU.^ (a 10O%) , o que fez a temperatura subir até 27'-'C. Sequidamente a arrefecimento, 33 mantendo-se um limite de temperatura de 25 *C. Agitou-se durante a adicionaram-ss gota a gota, com agitação g (0,375 mol) de anidrido de ácido acético, *C„ Agite a noite à temperatura ambiente. Finalmente lavou—se cinco vezes com 0,5 1 ds H_,D destilada ds cada vez. A fase CHC1-. seca sobre Ma^SQ^ e clarificada vpí da até è :ura num evaporador rotativo.

uma temperatura de banho de 50'^:‘C sob um vácuo oroduzido por jacta de áqua..

resíduo oli de g foi dissolvido em 50y ml de n-hexano em ebulição e, após arrefecimento até à temperatura ambiente, deixado em repouso durante a noite a 0*C na câmara frigorífica. 0 produto obtido por cristalização foi removido por sucção e lavado duas vezes com 50 ml de n-hexano. 0 produto foi finalmente seco no dispositivo de secagem a vácuo, á temperatura ambiente erí de 2 Torr. até se atingir um peso constantf

Rendimento: 39,4 - 60,3 % do valor teórico,

2° Passo da reacção

Preparação de cloreto de ácido 12-nitrato laurínico

Dissolveram-se 2,61 g (10 mmol) de ácido nitratolaurínico em 50 ml de cloreto de metileno e adicionaram—se gota a. gota. 4,44 g (35 mmol) de cloreto de oxalilo em 50 ml de cloreto de metileno à temperatura ambiente e sob agitação. A mistura foi

BAD ORIGINAL

rada durante a noite. 0 oroduto foi finaimente concenorado :é à secura no evaporador rotativc r? oimento

Preparação de N-(12-nitratolauroi1)-c.

Misturaram-se mediante aqitação.

sd!:i uma atmosfera de-?

r-iMp· Adiciona— azoto 6,Oó g (50 mmol) de L-c ram-se qota a gota 5,60 q (20 mmol) de cloreto de ácido 12-nitratolaurínico em 50 ml de diclorometano. Uma vez que não se obteve uma solução clara, aqueceu-se até Ó0^,?C. Adicionaram-se seguidamente 10D ml de* H_OD destilada e agitou-se durante a noite à temperatura ambiente. Diluiu-se depois com 300 ml de H^O destilada e e;;traiu-se quatro vezes com 200 ml de acetato de etilo de cada vez. Secou-se a fase orgânica sobre Na^SO^ e em seguida concentrou-se. 0 resíduo foi tomado em 100 ml de éter e deixado no frigorífico durante a noite a 0*C para que cristalizasse. 0bfciver a m—se cristais u rancos.

Γ-* —- „ ~7 Λ “TCôp r ρ ϊ / — / u · t

Rendimento 4,1 g de N—(12-nitratolauroi1) —cisteírm

Passo da reacção

Preparação de N—(12—nitratolauroi1) —S—aceti1—cisteína

Introduziram-se sob uma atmosfera de azoto 1,32 g (5 mmol ) de N-- ( 12-ni tratolauroi 1 )— cisteína em 20 ml de acetato de etilo. Em seguida arrefeceu—se até 0'-'C e adicionaram—se qota .a gota 2,5 ml de anidrido de ácido acético. Depois adicionaram-se gota a qota, lentamente, a ~5°C, 1,52 g (15 mmol) de trieti1amina

BAD ORIGINAL j

L..

dissolvida em 5 ml de acetato de etilo. A solução da lavada com áqua e concentrada até à secura.

O.I.

Exemolo ·Fp: á temperatur

Rendimento: 2 q - 98,47 do valor :eorico

Preparação do éster ílico de N-tlz-nitratolauroil-cisteín

Dissolveram-se 4 g de uma base do éster etílico de cisteína em 50 ml de cloreto de metileno e adicionaram-se gota a gota, sob agitação, 2,8 q (IO mmol) de cloretao de ácido nitratolaurínico, dissolvido em 30 ml de cloreto de metileno, sendo a mistura agitada durante a noite. 0 éster etílico de cisteína Hui que precipitou foi removido por sucção e o solvente eliminado no evaporador rotativo. 0 resíduo oleoso (6 g) foi dissolvido em 100 ml de éter e deixado em repouso no frigorífico, a 0'^:'C durante a noite. 0 produto precipitado foi removido por sucção.

rp; o

Rendimento: 1,6 g - 40,0 7. do valor teóricc

Exemplo 7

Passo da reacção

Preparação do éster etílico do ácido nitratoláctico

Dissolv eram-s£ , v- ·->

moj de éster etíli ácido láctico em 300 ml de diclorometano. Depois da se adicionar 100 mg de ureia, _iuntaram-se gota a gota a uma temperatura de 5 BAD ORIGINAL 1

nítrico a lOO X. A solução arrefecida para 0^C,C, Em seguida adicionaram-se gota a gota cri .1 r* •Jx-id fi> i V r e ρ o u s o d li r ante ·. Separou—se a fase de anidrido acético, A solução foi deixada em noite e depois lavada com 250 ml de água, orgânica e secou-se sobre sulfato de sódio.

Após filtração o diclorometano foi destilado. 0 resíduo oleoso obtido foi submetido a processamento destiletivo.

Rendimento: 30,34 - do valor teórico

Kp: 34*C (0,25 Torr)

Passo da reacção

Preparação do ácido nitratoláctico

Dissolveram-se 30 g (0,13 mol! de ést<

etílico ácido nitratoláctico em 80 ml de dioxano,

Adie ionaram—se solução 30 ml de água e 2 levou—se ao refluxo durante até a um volume de cerca de do à

e q (0,02 mol) de Acido sulfúrico 19 noras. A solução foi concentrada ml e depois diluída com água. IJ valor do pid foi ajustado para 6 — 7 através da adição de bicarbonato de sódio. 0 éster que não reagiu foi removido por extracção com diclorometano. A fase aquosa foi ajustada com ácido clorídrico concentrado para um pH 1 e extraída três vezes com 150 ml de cada, vez com acetato de etilo. Ds extractos foram reunidos e secos sobre sulfato de sódio. Depois de filtrado o acetato de etilo foi comp1etamente removido no evaporador rotativo.

Rendimento: 14,ó q de um óleo incolor - 59,27 do valor zeorico,

Passo da reaccão

BAD ORIGINAL

Preparação de éster st.

i c o de w•n i trate jropiom i ,< -cxsDissolveram-se sob uma atmosfera de azoto 17 q (O,13 mol) de ácido nitratoláctico e 18,9 q («,13 mol) de éster de cisteína, a 10 - 15° C, em 200 ml de diclorometano. Adicionou-se ” 2C°C uma solução de 23,ó g <0,14 mol) de ml de diclorometano. Passada precipitada foi filtrada e □ filtrado foi extraído duas g o l a a g o l a, a x _>

N,N-dicic1ohexi1carbodiimida e 75 uma hora a N , N-d ic ic 1 ohexi. 1 ureia lavada com 75 ml de diclorometano.

vezes com 50 ml de ácido clorídrico 0,1 N de cada vez. A fase orgânica foi comp1etamente concentrada no evaporador rotativo. D produto bruto cristalino (22,4 g) foi recristalizada a partir 100 ml de etanol /n-hexano (1:1).

de

Rendimento: 7, Ag s- 22,67 do valor teórico

Fg: ?2,3'^:'C efeito farmacológico dos compostos de acordo com o invento é explicado mais detalhadamente através de uma série de >--? >·. e* i §’ π c i <?. s «.

Ex per i eno ia farmaco I óq ica_1_

Influência dos novos nitratos orgânicos sobre osparâmetros circulatórios no cão desperto a fim de comprovar o efeito dos nitratos.

objectivo da prova foi o de determinar o modo cdmo actuam os novos nitratos orgânicos, após aplicação intravenosa e oral, sobre diversos parâmetros circulatórios, no cão desperto. Todas as experiências foram executadas em cães Beagle

BAD ORIGINAL

sistó1icas a r t e r i a 1 pressure) .

(TPR-totai treinados; os parâmetros circulatórios foram medidos com um cateter com manómetro na ponta introduzido numa artéria e com um cateter flutuante introduzido na veia jugular» Para descrição dos efeitos no sistema arterial foram medidas a tensão arterial (BR—blood pressure) e as pulsações (HR—beart rate) (SAR-systolic arterial pressure), médias (MAP-mean pressure) e disstólicas (DAP-diasto1ic arterial Calcularam-se através delas a resistência periférica periphereal resistance) e a elasticidade da caixa de ar (COMFL). Cl sistema da baixa tensão foi descrito através da tensão venosa central ( CVF'—cen tra 1 venous pressure) e da tensão pulmonoarterial (RAR-pu1 mona1 arterial pressure). Como substância de referência utilizou-se o 5-monon.i trato de isosorbeto (ISM-5).

Os Quadros 1 e 2 que ss seguem revelam através de uma representação gráfica o espectro de actuação dos, nitratos orgânicos de acordo com o invento»

No Quadro 1 encontram—se representadas os efeitos orais p 11 c dÇ e intravenosos do ISM-5 administrado. Após as dua=

ISM-5 faz baixar a tensão sanguínea sistólica, a tensão éd.ia quase não é influenciada e a elasticidade da caixa de ar aumenta nitidamente diminuindo a tensão no sistema de baixa tensão»

Quadro 2 apresenta os efeitos respectivos do éster etílico de N-(3~nitratopiva1oi1)-metionina (nitrato-piv-met-et) nos corresponder;tes troços circulatórios. A comparação entre a aplicação oral e intravenosa indica, também aqui, uma boa bio— aρ1icab11i da d e.

A substância constituída pelo éster etílico N-(3-nitratopivaloi1)-cisteína revela igualmente uma boa bioaplicabi1 idade e uma evolução dos efeitos típica dos nitratos.

BAD ORIGINAL

Os resultados mostram que as duas substâncias testada. t'ã'm uma aplicação comparável com a do ISM-5 e uma boa bioaolica bilidade.

BAD ORIGINAL

Quadro 1

200-,ΒΡ [aoHgl HA íl/aln]

160 —

120 —

—

i- I 1 -+—

I

40i^z^4-i--<-·*·-i--i_j .

_Η4Η__Η}--ί-ί —' r0

Fig. 1 —Γ60

120 iao —I240 —i—

300 —ι

360 [HIN]

Abb. 1

10—, CVP (meHfl] CO [1/aln] —

—

0-1 ,-_n

60

Fig. 2 —r^-

120 —r^-

ISO —I-1-1

240 300 360 [HIN]

ISM—5 aean + sem · N

5.12 aoAa p.O.. ^em etanol 3

Quadro 1

(MIN]

Fig. 3

100—,

Abb. 1

SV [el]

TPfl ί·βΗβ/1/·1η] —

6040-

200-1 ,-τ0 80

Fig. 4 —I—

120 —i—

180 —-1-1

240 300 380 (MIN]

ISM—5 5.12 eo/ko p.Q.. em etanol «Man + sen . N - 3

Quadro 1

200—₁ BP [mmHQ] HA ί1/·1π]

ί^-ι-Η-Η-ί-ΗΗ4-Μ-Μ-Ι-4-Μ-Τ·ί-ΐ4Q —I ,-p.

60

Fig. 5 —,-,120 180 240

-1~-1

300 360

ÍMIN]

10—1 CVP (meHg] CO ll/alnl —

2H

Ο-l _r0 —ι—

120

180

-1240 ι 300

360

Fig. 6

IMIN]

ISM—5. 5.12 ag/kg i.v..em N«C1 0.9X oaan + _sem . N - 3

Quadro 1 —

PAP ' [aunHe]

Coapl [al/4QmmHg]

30F 1ΤΤΤΓΓ

2010- Γ -ί “Ι 4 ~ Ϊ· -í- -<- ··

I

120 . __ 4 - ? -F 4-ί-Η -I- -ί *~ —ι-r-,-—ι

ISO 240 300 360 [MIN]

100—, sv TPfl [1] [mmHg/l/min]

Abb. 1

— ~ι~ I^- - 1

120 160

Fig. 8

-,--Γ—¹ Ί £40 300 360

ÍHIN]

ISM-5. 5.12 ao/ko i.v.. em N«C1 0.9X *ean + sem .

Quadro 2

200—1

160 — eo120 —

BP [mmHo] Hfl [i/aln]

40ο—* Γ —r— —r~

-1~ —ι—

120 —f—

150

ISO —ι 210

Fig. 1 [MIN]

10-,CVP fnmHo] CO [1/min]

0R-H+-H i-i-1-1-1-i-J-1

0-1 —r30 —γΒΟ —ι—

120

150 1BQ —ι 210

Fig. 2 [MIN]

Nitroxy-Ptv-Meth-£t.

pean + sem. N - 3

8.63 ·Β/Κθ I.V.. em OMSO ÍOOX

Quadro 2 — PAP ΓποΗο] ___

Coepl [al/40mmHg] _

30-

20F--Í

10H— 4--4--44__ 4-4--4--4-- Ί o — ,-----γ0 30

Fig. 3 —i---—γΒΟ 90 — --1-,-,

120 150 1Β0 210 [ΜΙΝ]

100 -,

SV Iml]

ΤΡΗ (amHg/1/ain]

ΒΟ— —

40Μι 4 I I 1 ί—Η-Η-ί—ί

200-1 '---,-Γ

30 βο ~ι-1-1-1-1

120 150 1Β0 210

Fig. 4 ÍMIN]

Nitroxy-Piv-Math-Et.

pean + sem . Ν - 3

β.63 Pg/kg l.v.. _em DMSO 100Χ

Quadro 2

200—ι SP [eoiHg] Hfl [1/ain]

60

Fig. 5 —ι-1—

120 1B0 ι————,--,

240 300 360 [HIN]

10· cvp co ímmHg] [1/nln]

Ηη·-Ι I I I I I θ 60 120

Fig. 6 ^Γ ι ---,

160 240 300 360

ÍHIN]

Nltroxy-Piv-Meth-Et. + sem · N — 5

8.63 mg/kg p.o., em OMSO 100X

Quadro 2 —,

PàP [mmHg]

Conpl [al/40mmHg] —

—

Fig. 7

100-, —

—

4020-

Η-ηή-ΗΉ-ΗΉ-Η+ ¹ ~*- -H4-i-l·-1--i-f -I--I- -i- i-í- -Ϊ- *- * -1- * - * -I

120 —1~

160

I i---—i

240 3Q0 360 [MIN]

Abb. 2

SV [ral]

TPH [amHg/l/mln] ^4-_Η__η._η.Η+ΗΒ^-Ηη-^Ή

IfaH 1 l I I ¹ - -*-) ] 1 I ] 1 1 1 1 M-I-HH

0-4 r —«----1-1-——ΓΒΟ 120 1B0 240

Fig. 8 —I-1

300 360 [MINI

Nltroxy-Plv-Meth—Et.

pean + sem . N — S

8.63 ngAg p.O.. em OMSO 100X t oeriení a farmaco 1óqi ca 2

Influência dos novos nitratos orgânicos sobre o aumento de fluxo nas coronárias, num coração isolado, submetido a perfusão, a fim de se comprovar a não-tolerância.

objectivo da presente experiência foi o de verificar o efeito e a criação cie tolerância dos novos compostos de nitratos orgânicos no coração de uma ratazana, isolado, submetido aí perfusão. Para tal, isolou-se um coração de ratazana que foi preparado como coração de ensaio (working heart).

□ cora*ção realizou nesta experiência um trabalho circulatório definido, do qual resultou um determinado consumo de oxigénio e de fluxo nas coronárias induzido fsrmaco1ogicamente.

Num coração de ratazana em funcionamento, isolado, fci escolhida como parâmetro·, a resistência dos vasos coronários a fim de se comorovar o efeito dos nitratos. Nur uma perfusão através aurícula esquerda. com uma solução idêntica ao plasma a. qual continha substâncias nutritivas e se encontrava saturada com oxigénio. 0 ventrículo esquerdo bombeou a solução para a aorta, vencendo uma certa pressão. De acordo com as condiçSes fisiológicas uma. parte desta solução correu através dos vasos coronários para □ próprio abastecimento dD coração. Quando o coração efectua um trabalho definido esta parte, a partir da qual se pode calcular a resistência das coronárias, é constante, A adição de um nitrato ou de outros produtos farmacêuticos dilatadores das coronárias provoca uma redução desta resistência coronária. Por isso, caso se administre so coração uma concentração constante de um nitrato orgânico, verifica-se, após uma. redução inicial da

BAD ORIGINAL

r e - ι i u '6' n i_ i a , Neste modelo.

uma perda as no íspaço de 20 minutos..

d i 1 a t .3 d o r d a s c o r o n á r i a s , q u e n ã o substâncias revelaram igualmente um Ç, no entanto, seguid perda da sua efeito o de uma redução

4- 4- -j 1 ...

máxima da resistência das coronárias ainda se v mente. As substâncias testadas foram comparadas em doseamentos -.1 nitroe;1icerina 10 ’ M. Uma infusão equimolares com trinitrato d contínua de nitrog1icerina provocou um rápido aumento do fluxo $ π das coronárias da ordem dos 7,ó ± 1,33 ml/min ’ ww ( ± SD5. No espaço de 2Ό minutos o fluxo reduziu de 55,97.. Continuando-se a ia manteve-se inalterado. Ds neste modelo, um aumento do ienas foi seguido de u.m muito ^ste resultado indica que os novos compostos descritos não tãm, relativamente à tolerância, um comportamento igual ao dos nitratos correntes.

per fu	sa.O o eisluO da	nit
novos	n i t r a t o s r e v e 1	aram
f 1 u. x o	nas coronárias,	que
reduz	ido retrocesto	do e

bad original ’ —jU

Quadro 1; Efeito dos novo

fluxo das coronárias no coração da ratazana, isolado a perfusão, quando comparado com o da nitroglicsrina

SUDiDÍ

100 μΜ nitroqlicerina

7,

100 μΜ éster etílico de

N- (3-nitratopi valoi 1 ) c i s t e ι n a

100 μΜ éster etílico de

M- ( 3-ni tratopivaloi 1 ) -metionina

A u m e n t o m á x .

do fluxo das coronárias ( m 1 / m i n * g ) ww ± 0,71

6,6 ± 0,83 ± 0,92

Reduçâo efeito

7.

/ «I ± SEM = desvie do valor médio padrão n = número dos desvios do padrão

Caractsrizou-se finalmente o efeito do éster etílico de N-(3-nitrato pivaloi1)-cisteina (Nitrato-Piv-Ci-Et) no porquinho da índia. 0 Nitrato-Piv-Ci-Et conduziu, no modelo do working heart (i.e. coração do porquinho da índia) a um aumenta do flu.xo das coronárias dependente da concentração, já numa gama de doseamento extremamente baixa. Obteve-se um aumento do fluxo de 257. apenas com um meio de perfusão contendo 380; g de Nitrato-Piv-Ci-Et/1 correspondendo a 1,3 mol/1. A concentração equivalente para o trinitrato de glicsrol (GTN) com 5 mg/Ί é pelo menos 12 ^5

BAD ORIGINAL ;

N i hr a to—Pí v—Ci—E t,

T r a t a — a s s x m, η o q uv u i. — t· ⁱ~ ~ ρ e x o um composto particularmente activo

L f (I i cl w cl íj Ni trato—Piv-C

02.-Et conduz, atraves

Ka c ic1 ase guanilato isolada a uma Lunufintra^áu das enzimas dspendante concentração, correspondendo a uma formação acrescida de cGNP de da

5ΟΓ unidade de tempo (comparar c/ Uuadro!

e>

composto é, contudo, quando se compara, com os compostos clássicos de ni.tratos orgânicos, que a activação in vitro também se verifica na ausência da cisteína. isto explica simultaneamente a observação de que o Nitrato—Piv—Ci—Et e os compostos químicos,, não provocam, por exemplo, no chamado “working heart modell nenhuma tolerância, descoberta essa que possui. um significado prático garticula.rmente importante na aplicação clínica prolongada. A concentração necessária para se obter metade da activação máxima (ED,_. ) da. ciclase de Quanilato έ de cerca, de 2©0 mol/1. D valor comparável para o GNT (na presença de 5 mmol/1 de cisteína.) situa-se em termos comparativos à roda de 3Θ mol/1.

BAD ORIGINAL 1

q.

Processo para

Hera ι

preparação de compostos de fórmul»

RO.-,N—0—C— ( CH.-, ) _m—C—N—( CH₂ > _n—C— ( CH_? ) _Q—C—R A²

Ti qUt?

R representa hidroxi, alcoxi inferior, alquenoxi inferior, di-alqui.1 inferior-amino-alcoxi inferior, acilamino-alcoxi inferior, aciloxi-alcoxi inferior, arilo— ;:i, aril-alquil inferior-oxi, ariloxi substituído ou aralcoxi inferior substituído, em que o substituinte é metilo, halogénio ou metoxi; amino, alquil inferior-aAmino, di-alquil inferior amino, aril-alquil inferior-amino, hidro:·:iamino ou radicais de amino ácidos com 1igação peptídica, representa hidrogénio, alquilo com 1 a 6 átomos de carbono, alquila inferior' substituído, em que a substituinte é halogénio, hidroxi, alcoxi inferior, amino, alquil inferior-amino, acilamino, arilamino, mercapto, alquil inferior-tio, at tal como R^ representa hidrogénio ou alquilo inferior.

representa hidrogénio ou alquilo inferio:

representa hidrogénio, alquilo inferior, fenilo, metoxifenilo, feni1-alquilo inferior,

BAD ORIGINAL ma toxi-fenil-alquila inferior, inferior, hidro;·; ia Iqui lo inferior, al interior , amiúu-slquilu íuferiuf , inferior, mercapto-a 1qui1 o inferior : i i a m ι n u—a 1 q u 11 o alqu.il inferior11. u~ci 1 q u i 1 i_í ι. n f e ι^- ι ur , represent;

Iqu;

inferior-tio1

H’S-acilo, de preferência, S-acetato, S-propionato, Ξ-butirato, S-caoronato e Ξ

S-pivalato, S-berizoato, Alqui1-inferior-S-C-O-R

11 alquilo inferior-S-C-N-R-, ácido aiquil inferior-tio-alquil inferior-carboxílico e/ou os seus ésteres e amidas, aiquil inferior-1io-alqui1 o inferior, cr

R e R” podem estar ligados um com o outro mediante a formação de uma. tio 1 ac tona,

R e R ⁺ podem estar ligados um com o outro mediante a formação de um éster ou amida,

R'	r-, -4 S r\ pudtíiTi	estar ligados	um com o	outro	íTi £* d j. 3. n t s	a
	formação	de uma ponte	alquileno	com	2 3. 4 à	tomos de
	cair tono,	de uma ponte	a1qui1eno	c om	'-v _ “Ti ct ·.;< ct	tomos de
	carbono	e um átomo de	en xof re,	de u.ma	ponte	a 1qui1eno
	com 3 a	4 átomos de c	arbono, que contém uma	ligação
	dupla ou	uma ponte alquileno tal	como	atrás se	referiu.,
	substitu	ida com hidro	ι;: j. ,, a 11_ u	xi in	ferior,	alqui1 o
	inferior	ou di—alquilo	in ferior,

BAD ORIGINAL ’

Claims

RU.RÍÍ caracterizado por os referidos compo mediants a condensação dos correspcndent nitrato ou dos seus derivados reactivos amino ácido ou de um péptido e/ou eventu de reacção subsequente para a. alquilação stos serem prepar ss ácidos gordos con com o grupo amino d aImente mediante um da cadeia, lateral .

a dos , tendo e um pa· vindicação 1, o r d o c on t en d o arem lineares na - processo de acordo com a Rei rizado por os seus componentes de ácido g terem um comprimento de cadeia de C_-C, e s xl <5 cados, racémicos *ou isómeros ópticos.

caracteni. trato raraifi3é - Processo de acordo com as Reivindicações 1 ou 2, caracterizado por os amino ácidos serem, de preferência, a cisteina, a metionina ou a homocisteína.
4ê - Processo de acordo com as Reivindicações í a 3, caracteriíado por os amino ácidos se apresentarem sob a forma estereoquímica L.
5â — Processo de acordo com as Reivindicações la 4, caracterizado por os amino ácidos cisteina e/ou metionina se apresentarem sob a forma de ésteres de metilo, etilo ou propilo.

óé - processa de acordo com as Reivindicações 1 a 5, caracterizado por a. cisteina estar esterifiçada no grupo BH com ácidos a 1 canocarboxί 1 icos com um comprimento de cadeia de C_r,-Cg.

7é - Processo de acordo com as Reivindicações 1 a 6, caracterizado por se prepararem c>s seguintes compostos químicos:

BAD ORIGINAL t-

e t í 1 i c o de N-(2-ni tratoceti 1 )-· c .i S11? £ Γί -5 etílico d e N— ( 2-n i t r a t o c etil ) — 3-acetil-cisteína e t í lico de M-(2~nitratoaceti1) -S-propiorsi 1-cisteín etílico de IM~ ( 2-ni tratoacsti 1 ) -S-piva1oi1-cisteína metílico de N-(2-nitratoaceti 1 ) — m e t i o n i π a itratopr o p i cn1 ) —c i steín a

na éster etílico de N-(2-nitratopropioni1)-cisteí éster etílic □ de N- 2-nitratopropioni 1 J-metionina

N-(2- ni tra tobu .tir i 1 É t Ed Γ etil ICO H *-' h ’ i '·;— éster etí 1 ico d t? N- éster etí 1 ÍlO de Η 1 éster e t í 1 i c o dE? N- n i t r a foi s • O fc L iti éster etíl ico de? 1 s éster etil ÍlD de IM- éster etí 1 ico de N- é s ter etíl ico d e IM- éster etí 1 ico de N-

:ratobuti ri 1i-cistsína iratobutiril ) -5-aceti 1 -cisteíria :ratobutiri1)-S-butiril-ci=teína ;ratobutiri1)—metionina

Kl.. ' __ iitratofci li t i r i 1 ) - c i é s t e r e t í 1 i c o d e N - (3-n zi. rz: + p r* etílico de IM- (3—n éster etílico de N- / /q — r. -£. ... etílico d e !M-

co de IM- (2-nitratoisobutiri 1 ) -S-piva 1 oi 1 -c isteína “ato i so bu t i r i1)-me tionina e ί n a

-n i tratobuti ri 1 > -c is te í na

-atobutiri1)-S-aceti1-cisteína -atobu.tiri 1 ',· -3-propioni1 -cisteína '•atobuti ri 1 > -metionina tiolactona de N-(3-nitratobutiri1>homocisteína

N-(3-nitratopiva1oi1) -cisteí ria éster etílico de IM-( 3-ni tratopi val oi 1 >-c isteí na

S-carbonato de éster etílico de IM- ( 3-nitratopivaloi 1 )-cisteí na

éster f t ílico •_j — .j —. í 3-n i t ra topi v a .1 o i 1 ) — S- acetil—cisteína éster etílico d t? N- ( 3-nitratopivaloi 1 ) -S-- p ro p i o n i 1 - c i s t e ί n a éster etílico de- N- (3-nitratopivaloi1)-S- butiril-cistsína éster etí1ico de N- (3—nitratopivaloi1)-S- isobutiri 1— cisteín

BAD ORIGINAL

éster E* t. £ 1 i C O d e N— ( 3—ni tra tap.i va 1 oi 1 )-S-piva1oi1-cisteína éster et £ 11co H -r·· N-(3-nitratopivaloi1 )-S-benzoiI-cisteína éster eti 1i c o de N - (3 - n i t r a t o p i v a 1 o i I )-metionina itratopi N— \ .3-í i V cí 1 οι I ) -menonina tiolac tona de N- (3-ni tratopivaloi1> ~h omocisteina é s t p r etílico de N— 2— n i tr atohe x a π o i 1 ) ~õ i Ξ í êí Pi cí éster etílico d-G N-(2-ni tratohexanoi1 )-S-propionil-cisteín éster e t í 1 i c o d E* N-(3—ni t ratohexanoi1 )-cisteína éster e t í 1 .i c o de N-(3-ni tratohexanoi1 )-metionina N-(12- n i trato1 au ro i I ) -c i s t e í n a éster e t í 1 i c o de N-(12-n i trato 1auroi1 )-cisteína éster etílico de N—(12—nitratolauroi 1 )—S-aceti1-cisteína éster e t í 1 i c o de N-(12-ni tratolauroi1 )-S-DÍva1oi1-cisteína

isboa, 13 de Setembro de 1989

Agente Gíiclal da Prôpriídsde Industrial