PT89253B - Processo para a preparacao de derivados de 4' e de composicoes farmaceuticas que os contem - Google Patents

Description

PROCESSO PARA A PREPARAÇÃO DE DERIVADOS DE

4'-DEMETILEPIPODOFILOTOXINA-GLUCDSIDDS

COMPORTANDO UM GRUPO ACILO EM POSIÇÃO 4' E DE

COMPOSIÇOES FARMACÊUTICAS QUE OS CONTÊM.

ANTECEDENTES DA INVENÇÃO

A presente invenção diz respeito a derivados 4'—acilo de 4'-demetilepipodofi1otoxina-glucosidos, à sua utilização como agente antitumorais e às composições farmacêuticas que os contêm. A presente invenção diz respeito, especialmente, a 4'-ésteres, 4'-carbonatos e 4'-carbamatos de 4'-demeti1epipodof i1otoxina-g1ucosidos.

2. Descrição de trabalhos anteriores □ etoposido (Ia) e o teniposido (Ib) são agentes antitumorais utilizados na prática médica derivados de um lignano natural, a podofilotoxina. A classe geral destes compostos que inclui o etoposídeo e o teniposídeo é, algumas vezes, designada por 4'-demeti1epipodofi1otoxina-glucosidos. A posição 4' encontra-se indicada na fórmula geral I apresentada seguidamente

Ib: F: = 2-tienilo

Derivados de 4'-demeti1epipodofi1otoxina-g1ucosidos e um método para a sua preparação, encontram-se descritos na patente de invenção norte-americana N^Q 3 408 441 da autoria de Wartburb et a1 e na patente de invenção norte-americana N^Q 3 524 Θ44 da autoria de Keller—Juslen et a 1 Estes compostos, em particular o etoposido e o teniposido, servem como compostos iniciais para a preparação descrita na presente invenção de derivados 4'-acilo de epipodofiloto>:ina-glucosidos.

Alguns 4'-ésteres e 4'-benzi 1-carbonatos de 4'-demetilepipodofilotoxina-glucosidos têm sido descritos na literatura da especia 1 idade como agentes intermédios utilizados na preparação dos 4'-demeti1epipodofi1otoxina-g1ucosidos correspondentes . Contudo, os grupos hidroxi posicionados no radical açúcar desses compostos são também protegidos e, consequentemente, não foi referida qualquer actividade biológica. Foram apenas referidos derivados 4'-acilo com grupos hidroxi livres no radical açúcar.

A patente de invenção canadiana N^Q

956 939 descreve compostos de fórmula geral

na qual R_x representa um grupo alquilo C_x__e; R₂ representa um grupo acetilD ou formilo; e R₃ representa um grupD fenilo eventualmente substituído; grupos fenilo substituídos possíveis, mencionados mas não exemplificados, são os grupos p-nitrofenilo e p-metoxifeni1 o. Descreve também o processo para a remoção selectiva de grupos representados pelo símbolo R₃ nos compostos de fórmula geral III na qual R_x e R₌ têm os significados definidos antes, para se obterem os 4'-benzi1oxicar— boni1-4'-demeti1epipodofi1otoxina-g1ucosidos de fórmula geral IV correspondentes. Exemplificada especificamente está a preparação de 4'-benzi1oxicarboni1-4'—demeti1epipodofi1otoxina— -glucosido de fórmula geral IV na qual R_x representa um grupo meti 1 o.

acetato de zinco

(IV)

A patente de invenção norte-americana

N^Q 4 564 675 descreve compostos de fórmula geral

na qual R representa um grupo de fórmula geral

-C(O)CH₌X na qual X representa um átomo de halogéneo.

pedidD de patente de invenção europeia N° 162 701 descreve compostos de fórmula geral

na qual R_x e R₃, iguais ou diferentes, representam, cada um, um grupo de fórmula geral -C(O)CHX₌ ou -C(O)CX,·^ em que X representa um átomo de halogéneo.

As patentes de invenção japonesas N^Q“ 58/225 096 (Derwent

Abst. N° 84-034268/06) e 58/219 196 (Derwent Abst. N^e

84-027495/05) descrevem compostos de fórmulas gerais VII e

VIII, respectivamente

(VII )

(VIII) grupo de fórmula geral representa zero ou o número número inteiro de 1 a 3, m+n em que A representa um

-CO^-CHss-C ( H) m ( X ) n na qual m inteiro 1 ou 2 e n representa um representa o número inteiro 3 e Ac representa um grupo aceti0 pedido de patente de invenção europeia

N° 226 202 diz respeito a um composto intermédio utilizado na síntese do etoposido de fórmula geral

(IX) na qual

A representa um grupo acetilo.

Preparam-se ésteres de podofilotoxina na posição C-4, de

fórmula geral X, que se ensaiaram na leucemia P3B8. Embora alguns ésteres apresentem actividade anti1eucémica, eles são, contudo, menos activos do que o composto original, a podofilotoxina (J. F'harm. Sei., 1983, 72:1158-61).

(X)

O símbolo R representa, por exemplo, um grupo metilo, etile no, fenilo, fenetilo, fenoxi ou etoxicarboni1-butilo.

prepararam-se e estudaram-se também ésteres C-4 de

4'-demeti1epipodofi1otoxína de fórmula gera 1

XI. Observou-se que estes compostos se comportavam tal com a podofilotoxina, como inibidores da associação de microtubulos não exibindo actividade similar à do etoposido/teniposido (Anti-Cancer

Drug Design, 1987, 2:13-23).

(XI ) símbolo R₌ representa um átomo de hidrogénio e Rx representa, por exemplo, um grupo metilo, fenilo ou furilo; ou R₌ representa um grupo benzi1oxicarboni1 o e R_x representa um grupo 2-tienilo ou 2,2-dimeti1eti1eno.

Recentemente, descobriu-se com surpresa que os 4'-aci1-4'-demeti 1 epipodof i lotox ina-g lucosidos são, eles próprios, agentes antitumorais potentes, exibindo muitos derivados 4'—acilo uma melhor actividade do que o etoposido na leucemia P388 experimen ta 1 .

A presente invenção fornece compostos de fórmula geral

RESUMO DA INVENÇÃO

(xii)

Ri e R₃ representam, cada um, um grupo alquilo

Cx-ita; ou Ri e R₃ e o átomo de carbono ao qual se ligam representam um grupo cicloalquilo C_S__A;

ou Rx representa um átomo de hidrogénio e R₃ representa um grupo alquilo Οχ_χ_β, alcenilo C₂-_10! cic 1 o-a 1 qui 1 o C₃_i,, furilo, tienilo, arilo C*_i₀ ou aralquilo C-z-x^»; e

Y representa um grupo de fórmula geral -C(O)R₃, -C(O)-X-Ru» ou —C (0)-NR_eRe,, em que X representa um átomo de oxigénio ou de enxofre; R₃ representa um átomo de hidrogénio ou um grupo alquilo

C x _ x o , alcenilo C₃-_3e3, c ic 1 o-a lqui 1 ο 0₃-_ώ , arilo

Ci-iB, aralquilo C-ζ-χ^ ou heteroarilo; compor— tando cada um destes grupos, eventualmente, um ou mais substituinte(s) escolhido(s) entre átomos de halogêneo ou grupos hidroxi, alcoxi Ci-*,

alcanoiloxi Ci_₆, ciano, amino, amónio quaternário, a 1qui1(C1-&)-amino, di-alqui1()-amino, carbDxilo, al qui 1 ( 0ι__ώ)-tiD , di-alquil(C_x-4»)-amino-a1qui1(C₃__A)-tio, mercapto, mercapto-tio, a1canoi1(Ci-₆)-amino, nitro, alcanoílo Ci-_Ô, carbamoílo, azido, a 1qui1()-su1fóxido ou sulfona; os substituintes comportados pelos grupos arilo, aralquilo ou heteroarilo podem incluir, adicionalmente, grupos alquilo ϋι__Λ;

tem o significado definido antes para o símbolo R₃ excepto que R^ não representa um grupo benzilo quando X representa um átomo de oxigénio, e R^ não representa um átomo de hidrogénio; ou R₄ representa um grupo antraquinoni1-2-meti1eno; e Ra e R_ô têm o significado definido antes para o símbolo R₃ ou R_e representa um átomo de hidrogénio e Rí, representa um grupo amina, alquil(Ci__A)-amina ou di-alqui 1 ( Ci-* ) -amina ; ou R₌, R_fe e o átomo de azoto ao qual se encontram ligados formam um núcleo tri- a hexagonal;

ou os seus sais aceitáveis sob o ponto de vista farmacêutico.

Um aspecto preferido diz respeito a compostos de fórmula geral XII na qual R_x representa um átomo de hidrogénio e R₃ representa um grupo metilo ou 2-tienilo.

Um outro aspecto tos intermédios, ' -c 1oroformatos de 4 ' -demeti lepipodof i. 1 otoina-g1ucosidos , de fórmula geral

XIII na qual R_x e R₌ tem os significados definidos antes.

(XIII )

Um outro aspecto da presente invenção diz respeito a um método que permite inibir tumores malignos em mamíferos e que consiste em administrar ao animal doente um composto de fórmula geral XII.

Ainda um outro aspecto da presente invenção diz respeito a composições farmacêuticas que incluem uma quantidade eficaz antitumoral de um composto de fórmula geral XII em associação com um veículo ou diluente inerte aceitável em farmácia.

DESCRIÇÃO DETALHADA DA INVENÇÃO

Quando utilizado na presente invenção o termo alquilo inclui cadeias carbonadas lineares ou ramificadas; o termo alcenilo significa cadeias carbonadas lineares ou ramificadas com pelo menos uma ligação dupla; os termos halo ou halogéneo representam átomos de flúor, bromo, cloro ou iodo; o termo heteroari1 o representa um núcleo aromático com, pelo menos, um átomo diferente do carbono no núcleo incluindo, embora não exclusivamente, um grupo piridina, furano, tiofenD, pirrol , pirimidina, quinoxalina ou outro similar; e o símbolo Z representa a configuração cis de uma ligação dupla.

Um aspecto preferido da presente invenção são os compostos de fórmula geral XII na qual R_x representa um átomo nio, R₃ representa um grupo alquilo Ci-i₀, fenilo e Y representa um grupo de fórmula geral -C(O)R₃, de hidrogéou tienilo;

-C(D)XR^ ou

-C(O)NR₃R_a em que X representa um átomo de oxigénio ou de enxofre; R₃ representa um grupo escolhido entre grupos cicloalquilo C₃__A, alcenilo C₃-_3tB;

al qui1 o

Ci-ia comportando, eventualmente, um ou mais substituinte(s) escDlhido(s) entre átomos de halogéneo ou grupos azido, ciano, a1qui1(Ci-*)tio, di-alquil (Cí-í, jamino, di-alquil (Ci_₆) amino-alqui 1 (C₃-<*>) tio, amónio quartenário, al qui 1 ( Cx_<,) sul f óxido; fenilo comportando, eventualmente, um ou mais substituinte(s) escolhido(s)

entre átomos	de halogéneo ou grupos alquilo Ci_*, hidroxi,
alcoxi Οχ—7	mercapto, alqui1(Cx_*)tio, ciano ou nitro; fe-

nil-alquilo(Ci__A) em que o núcleo fenilo comporta, eventual-

mente, um ou	mais substituinte(s) escolhido(s) na lista de
substituintes	do radical fenilD apresentada antes; ou piridi-
lo; R^ tem os	significados definidos antes para o símbolo R3,
excepto que R.	» não representa um átomo de hidrogénio e R^ não
representa um	grupo benzi lo quando X representa um átomo de

oxigénio; ou R₄ representa um grupo antraquinoni 1-2-meti 1 eno;

e R₃ e R* representam, cada um, independentemente, um átomo de hidrogénio ou um grupo alquilo Ci__io> comportando, eventualmente, um ou mais substituinte(s) escolhido(s) entre átomos de halogéneo ou grupos hidroxi, alcoxi Ci-*, mercapto, alqui1(Cl-*)tio, ciano, amino, a 1qui1(Ci_*)amino, di-alquil(Ci-e)-amino ou acido; ou R_e representa um átomo de hidrogénio e R* representa um grupo cicloalquilo Ci_₃, alcenilo C₂-=0, fenilo comportando, eventualmente, um ou mais substituinte(s) escolhido(s) na lista de substituintes do radical fenilo apresentada antes para o símbolo R₃, feni1-alquiloCi-é. na qual o núcleo fenilo comporta, eventualmente, um ou mais substituinte(s) escolhido(s) na lista de substituintes do radical fenilo apresentada antes para o símbolo R₃, amino, a 1 qui 1 ( Ci__& ) amino , di-a 1 qui 1 (Ci-*) amino e piridilo; ou os seus sais aceitáveis sob o ponto de vista farmacêutico.

O aspecto mais preferido diz respeito a compostos de fórmula geral XII na qual Y representa um grupo de fórmula geral -C(O)-R₃ e R₃ representa um grupo alquilo Ci_i₀ comportando, eventualmente, um ou mais substituinte(s) escolhido(s) entre átomos de halogéneo ou grupos azido, amónio quartenário, al qui 1 ( Cx-í, ) tio , di-alquil (Ci-_Ó)amino, di-alquil (Ci_*)aminoal qui 1 (C₃_6.) tio ou alqui Ι-sul f óxido; alcenilo C₃_ _3β); fenilo; ou piridilo.

Um outro aspecto ainda de maior preferência diz respeito a compostos de fórmula geral XII na qual Y representa um grupo de fórmula geral -C(O)-XR^; e na qual X representa um átomo de oxigénio ou de enxofre e R^ representa um grupo alquilo Cx-ia eventualmente substituído com grupos di-a1qui1(Ci-₄)amino ou um ou mais átomos de halogéneo; p-nitrobenzi1 o; e antraquinon i1-2-meti1eno.

Ainda um outro aspecto de maior prefer&ncia diz respeito a compostos de fórmula geral XII na qual Y representa um grupo de fórmula geral -C(O)-NR_aR_A e R_a e R_ô representam, independentemente, um átomo de hidrogénio ou um grupo alquilo Ci-_i(a eventualmente substituído com um grupo di-alqui 1 ( Ci-í, ) amino ou um mais átomos de halogéneo; ou R_a representa um átomo de hidrogénio e R^, representa um grupo amino.

□ grupo fenol dos 4'-demetilepipodofilotoxina-glucosidos pode acilar-se utilizando métodos convencionais. Contudo, devido à sensibilidade aos ácidos da ligação glicosídica e à tendência para a epimerização do átomo de carbono a da lactona, promovida pela base, devem evitar—se condiçBes reaccionais ácidas ou alcalinas muito fortes.

Assim a esterificação pode realizar-se utilizando um ácido carboxílico de fórmula geral R₃CO₃H ou um agente de acilação equivalente dele derivado, exemplos dos quais incluem um anidrido de ácido simétrico ou mixto; um éster activo; uma amida activa; ou um halogeneto de ácido. Quando se utiliza um ácido carboxílico, a reacção é conduzida, de preferência, na presença de um agente de condensação como, por exemplo, a di-ci c 1 o-he::i 1 -carbodiimida . Um halogeneto de ácido é o agente de acilação preferido, realizando-se a reacção no seio de um dissolvente orgânico anidro apropriado como, por exemplo, o acetonitri1 o, o tetra-hidrofurano ou a acetona e na presença de uma base apropriada, para neutralizar o ácido formado durante a reacção. Bases apropriadas são por exemplo aminas terciárias como, por exemplo, a trieti1amina, a piridina ou a diisopropi1eti1amina e bases inorgânicas como, por exemplo, o carbonato de potássio e o carbonato de sódio.

□s 4'-carbonatos podem obter-se fazendo reagir 4'-demetilépipodofi1otoxina-glucosidos com um halogenoformato de fórmula geral C1C(D)XR^ na presença de uma base. Alternativamente, epipodofi1otoxina-glucosido cloroformato de 4'-fenol, fosgénio ou cloroformato de

4'-feno1 g rupo 4'-feno1 em um composto de fórmula geral tric1orometi1 o; o pode depois acoplar-se, in situ, com do

4'-demeti1intermédio, um

XIII utili zando cloroformato de um álcool ou um tiol na tendidos presença de uma base para se obterem os produtos preExemplos de bases apropriadas são as citadas antes

Analogamente, obtêm-se 4'-carbamatos quando se condensa um cloroformato de 4'-fenol com uma amina apropriada de fórmula geral ΗΝΕ₌Η_ώ ou na presença de uma base ou utilizando um excesso do componente amínico para neutralizar o ácido formado.

Experimentalmente, observámos que o acetonitrilo é o dissolvente preferido e a diisopropiletilamina a base preferida para realizar estas reacçSes de acilação.

As transformaçBes descritas antes estão resumidas no Esquema I .

Esquema I

em que os diferentes grupos representados pelo símbolo R têm os significados definidos antes.

O curso da reacção pode ser controlado por cromatografia em camada fina técnica mediante a qual se pode avaliar o tempo to aspecto do produto ou o desaparecimento do material inicial ou fazendo ambas as pode estar compreendido entre, aproimadamente, 30 minutos e alguns dias a uma temperatura compreendida entre, aproximadamente, -20°C aproximadamente, a temperatura ambiente. As condiçBes e tempo reaccional óptimo dependerão da natureza e da reactividade dos reagentes u ti 1izados.

□ produto final pode ser separado da mistura reaccional mediante técnicas convencionais como, por exemplo, evaporação do dissolvente utilizado na reacção, partilha entre água, precipitação, filtração e secagem do produto. Este material pode ainda purificar-se utilizando métodos convencionais como, por exemplo, recristalização em dissolventes apropriados ou cromatografia em coluna ou cromatografia rápida.

Alguns dos produtos obtidos podem sofrer nova modificação de modo a obterem-se compostos incluídos no ãímbito da presente invenção. F'or exemplo, um éster ha 1 ogenoa 1 qui 1 o pode reagir com um nucleófilo (Nu) obtendo-se o correspondente éster Nu-alquí1ico. Exemplos específicos demonstrando esta característica apresentam-se na secção Exemplos da presente memória descritiva.

ACTIVIDADE BIOLÓGICA

Compostos representativos de acordo com a presente invenção foram avaliados na leucemia F'388 murina transplantável.

F’or v.ia intraperitonea1, implantaram-se em murganhos CDF_X fêmeas inóculos tumorais de 10·⁴· células ascíticas de leucemia

F'388 e trataram-se com doses diversas de um composto em en saio. Para cada concentracção do composto utilizou-se um gru po de quatro murganhos. Em cada uma das séries experimentais incluiram-se, como controlo negativo, dez murganhos tratados com soro fisiológico e como controlo positivo seis murganhos tratados com etoposido. Os compostos administrados por via intraperitoneal aos 5“ e 8° dias (considerando-se o primeiro dia o dia da implatação tumoral) ou aos 1° e 5^o dias. A duração dos ensaios oscilou entre 30 e 64 dias. Alguns dos análogos solúveis em água foram ensaiados em um sistema iv/iv, isto é, as células leucémicas F'388 foram implantadas por via intravenosa e os compostos em ensaio administrados por via intravenosa; o etoposido considerado controlo positivo foi administrado por via intraperitonea1. No final de cada ensaio registou-se o número de sobreviventes de cada um dos grupos. Determinou-se o tempo de sobrevivência para cada grupo de murganhos e exprimiu-se a actividade antitumoral sob a forma T/C (7.) que significa a proporção entre tempo de sobrevivência médio (MST) do grupo tratado com o composto e o tempo de sobrevivência médio do grupo de controlo tratado com soro fi18 y

í t

,.™-·⁴¹’

siológico. Um	composto que apresenta um valor de T/C, em per-
centagem, de	125 ou superior considera-se, na generaI idade,
que apresenta	uma significativa actividade antitumoral no en-
saio com F'388	. 0 Cluadro I apresenta os resultados da avalia-

ção descrita antes; incluídos nesse Quadro encontram-se o valor máximo da actividade antitumoral T/C, em percentagem, e a dose que apresenta a acção máxima, e outras concentrações de doses que mostram sobreviventes no final do período do ensaio.

Quadro i. Actividade antitumoral__contra leucemia F‘388 transplantável em murganhos

Dose¹

T/C

Sobreviventes

IlflAíZ±l5£l

HÁx.fXl

L L

-ch₂lCH₂)*CH=CHCH₂CH=CH(ch₂),ch₃

ea CMC*	280	290
ea DMSO	200	>395	(2/46d)
	50	>345	(2/46d)
.S(CH2)2N(CH3)2«HC1
ea soro fisiológico	200	215
Etoposido	60	250

-CH₂(CH₂)₂N(CH₃)₂»HC1

ea soro fisiológico	180	>355	(2/47d)3
-CH2(CH2)2N(CH3)2	90	245
	180	210	(l/47d)
4-piridi1«HC1 íea soro fisiológico)	160	180
4-piridilo	45	165
Etoposido	80	260

Quadro 1__( cont. ).

-CH2(CH2)2Br	45	205
-CH2(CH2)2I	160	230
CH2(CH2)aNj	160	335
p-nitrobenz iIdxí	180	335
antraquinona-2-«etiloxi	60	165
Etoposido	60	295
-CHa-Br	40	205
Etoposido	80	>370	(3/38d)
-ch=ch3	50	225
-CH2(CH2)9CHj	100	235
-dch3	70	235
Etoposido	40	365
-OCH2CC13	B02	290	(l/57d)
Etoposido	60a	>570	(4/57d)
fenilo	602	330	(l/45d)
benziloxi	120’	355	(2/45d)
Etoposido	602	260	(2/45d)

-N(CH₂CH₂Cl)₂

ea CMC	200	145
ea DMSO + H2O	100	210
Etoposido
ea CMC	100	270
ea DMSQ ♦ Ha0	60	260
-nhnh2	280	225
-O(CH2)2M(CH3)2	280	215
-NH(CH2)2N(CH3)2	140	190
-S(CH2)2N(CH3)2	280	230
Etoposido	100	295	(l/49d)
-N(CH3)2	300	170
-nh2	300	285	(l/64d)
Etoposido	120	7 510	(3/64d)
-nhch3	300	165
Etoposido	150	>480	(5/48d)

Quadro l_.ÍCLPnt._l

Células de leuce«ia P388 iiplantadas por via I.V,

-O(CH2)2N(CH3)2-HC1	70’	263
(ei H20)
-NH(CH2)2N(CH3)2’HC1	35’	175
(ei H20)
-S(CH2)2H(CH3)2’HC1	70’	256
(e· H20)
Etoposido	100	338

1. Composto administrado por via intraperitonea1 aos 5° e 8° dias caso não seja fornecida outra informação.

2. Composto administrado por via intraperitonea1 aos 1° e

5^o dias.

3. Murganhos sobreviventes sem tumor.

4. Todos os compostos foram administrados sob a forma de uma suspensão em água + carboximeti1ce1u1ose (CMC), eventualmente com Tween 80, a não ser que seja fornecida outra informação.

5. Composto administrado por via intravenosa aos 5^o e θ'³ dias.

f

,.-y ί

a

Como indicado pelos dados relativos aos tumores em murganho, fornecidos antes.

os compostos de acordo corri presente invenção são úteis como agentes antitumorais que permitem a inibição de tumores malignos em mamíferos como, por exemplo.

1eucemia

Ρ3Θ8.

presente invenção composiç Oes •f arma céuticas contendo uma quantidade eficaz rei ativamente à inibição tumoral, de um composto de acordo com a presente invenção, em associação com um veículo ou diluente inerte aceitável em farmácia. Estas composições podem conter também outros agen tes antitumorais activos e podem apresentar-se sob uma qualquer forma farmacêutica apropriada para a via de administração pretendida. Exemplos destas composições são composições sólidas para administração oral como, por primidos, cápsulas, pós e grânulos; composições líquidas para administração oral como , por exemplo, suspensões, xaropes ou elixires, e composições para administração parentérica como, por exemplo, soluções, suspensões ou emulsões estéreis.

Podem também apresentar—se sob a forma de composições sólidas esté— reis que se podem dissolver em água ou soro fisiológico estéreis ou em algum outro meio injectável estéril imediatamente antes da uti1ização.

□s entendidos na matéria facilmente determinarão a dose e a psologia óptimas para administrar a um mamífero, de um composto utilizado como agente antitumoral. Compreende-se, que a dose eficaz utilizada dependerá do composto escolhido, da composição farmacêutica utilizada, da via de administração e do local a tratar, do hospedeiro e da doença a tratar. Devem ter-se em consideração muitos factores que modificam a acção peso, sexo, dieta tempo de advelocidade de excreção, a situação do doente associações com outros fármacos sensibilidades reaccionais e gravidade da doença.

Nos exemplos seguintes, registaram-se os valores da ressonãnc ia magnética nuclear protónica

CDC1₃ ou

D₌0 como referência interna) utilizando um espectrómetro

Bruker WM360. Os espectros no infravermelho (IV) determinaram-se utilizando um espectrofotómetro de infravermelho

Perkin-Elmer 1800 Fourier Transform. Cromatografia rápida diz respeito a um método descrito por Still (Still, W. C.; Kahan, M.; Mitra, A.; J. Drg Chem., 1978, 2923) e realizou-se utilizando gel de sílica Merck E (230-400 malhas). Os exemplos seguintes servem apenas para ilustrar a presente invenção sem no entanto a limitarem, como definido pelas rei vindicaçBes.

EbiemplP- 1.

4'-bromoacetato de

Rapidamente, aqueceu-se uma suspensão agitada com um agitador magnético de 2,05 g (3,48 mmoles) de etoposido em 210 ml de acetonitrilo anidro, obtendo-se uma solução praticamente perfeita, depois do que se arrefeceu até à temperatura ambiente. A esta mistura adicionaram-se, durante mais de um minuto e através de uma seringa, 0,91 ml (5,2 mmoles) de N,N-diisopropiletilamina e depois 0,63 g (3,92 mmoles) de cloreto de bromoacetilo. Agitou-se a mistura durante 30 minutos à temperatura ambiente e tratou-se seguidamente com mais 0,246 g (1,56 mmoles) de cloreto de bromoaceti1o. Agitou-se a mistura durante mais 30 minutos depois do que se partilhou entre 250 ml de um tampão de fosfato 0,05M pH 7 e 300 ml de acetato de etilo. Lavou-se a camada orgânica com 2 200 ml de uma solução saturada de cloreto de sódio e secou-se sobre sulfato de sódio/su1fato de magnésio. A evaporação rotativa do dissolvente forneceu um sólido escuro que se purificou por cromatografia rápida utilizando uma eluição em gradiente, cloreto de meti 1 eno/metano 1 em cloreto de metileno (3 -> 47.). Obtiveram-se 1,89 g (rendimento 76,57.) do composto do título puro sob a forma de um sólido amarelo pouco intenso. Uma CCF preparativa de uma pequena amostra utilizando como agente de eluição metanol a 57. em cloreto de metileno -forneceu uma amostra analítica sob a forma de um sólido incolor. F.F. 192-196°C.

I . V.

(KBr)

1775, 1605,

1515,

1490, 1340, 1238, 1130, 1040,

1010,

935,

700 cm^-1

ΡΜΝ’-Η a 360 MHz (CDC1₃) δ 6,81 (s,lH),

6,54 (s,lH), 6,26 (s,

2H) ,

5,98 (d,2H),

4,89 (d,lH,J=3,4Hz),

4,7 (q,lH,J=5,0Hz),

4,65-4,61 (m,2H),

4,41 (dd,lH), 4,32 (s,lH) , 4,22 (dd,lH),

4,15 (dd,lH), 4,07 ( s , 1H ) , 3,73 (m,1H),

3,66 (s,6H), 3,56 (m,

1H) ,

3,43 (m,lH),

3,27 (dd,lH,J=5,2 e 14,1

Hz ) ,

2,90-2,78 (m,lH), 2,68 (d,1H,J=2,1Hz,OH), 2,40 (d,lH,J = =2,6Hz,DH), 1,38 (d,3H,J=5,0Hz).

Análise elementar para C3iH₃₃BrO₁₄:

Calculado: C, 52,48; H, 4,69;

Encontrado: C, 52,72; H, 4,77.

F- z. e m ρ 1 o jl.

4'-(4-bromobutirato) de etoposido

À temperatura ambiente, tratou-se uma solução praticamente perfeita de 3,20 g (5,44 mmoles) de etoposido, preparado de acordo com a técnica descrita no Exemplo 1, em 300 ml de acetonitrilo anidro, com 1,14 ml (6,54 mmoles) de N,N-diisopropi1eti1amina e adicionaram-se depois durante mais de um minuto

1,16 g (6,00 mmoles) de cloreto de 4-bromobutiri 1o.

Agitou-se a mistura durante uma hora à temperatura ambiente, arrefeceu-se até à temperatura de -10°C e partilhou-se depois entre 400 ml de um tampão de fosfato 0,051*1 pH 7 e 500 ml de acetato de etilo. Lavou-se a camada orgânica com 150 ml de água e 350 ml de uma solução saturada de cloreto de sódio e secou-se sobre sulfato de sódio/su1fato de magnésio. A evaporação rotativa forneceu 4,1 g (rendimento 1007.) do composto do título puro sob a forma de um sólido incolor. A recristalização na mistura etanol/hexano forneceu uma amostra analítica sob a forma de um sólido branco puro.

I.V. (KBr) 1769, 1602, 1506, 1486, 1465, 1421, 1386, 1362, 1338, 1237, 1159, 1131, 1099, 1078, 1039, 1004, 933 cnr¹.

a 360 MHz (CDC1,) 6 6,81 (s,lH), 6,54 (b,íH), 6,26 (s largo,2H), 5,98 (d,2H), 4,89 (d,1H,J=3,3Hz), 4,74 (q,ÍH,J=5,l Hz), 4,66-4,62 (m,2H), 4,41 (dd,lH), 4,24-4,13 (m,2H), 3,72 (m,lH), 3,65 (s,6H), 3,58 (m,lH), 3,55 (t,2H), 3,43 (m,lH),

3,34—3,23 (m,3H), 2,90-2,80 (m,lH), 2,75 (t,2H), 2,63 (d,lH, ΰ=2,1Ηζ,0Η), 2,33 (d,1H,J=2,4Hz,DH), 2,27 (t,2H), 1,38 (d,3H, J=5,1Hz).

Análise elementar para

Calculado: C, 53,74; H, 5,06; Br, 10,83;

Encontrado: C, 54,03; H, 5,13; Br, 10,80.

4'—(4—iodobutirato) de etoposjdo

Uma solução agitada com agitador magnético de 3,55 g (4,81 mmoles) de 4'-(4—bromobutirato) de etoposido em 175 ml de acetona, tratou-se com 12,8 g (85,4 mmoles) de iodeto de sódio e aqueceu-se a mistura, sob atmosfera de azoto, à temperatura de 48“C durante 22 horas e depois à temperatura de refluxo durante uma hora. Arrefeceu-se a mistura até à temperatura ambiente, filtrou-se através de uma camada de celite (lavada, três vezes, com acetona) e evaporou-se o filtrado sob vazio. Parti 1hou-se o resíduo entre 300 ml de cloreto de metileno e 250 ml de água e extraiu-se depois a porção aquosa com 2 x 50 ml de cloreto de metileno. Lavaram-se os extractos orgânicos reunidos com 150 ml de água e 150 ml de uma solução saturada de cloreto de sódio e secaram-se sobre sulfato de sódio/sulfato de magnésio. Uma evaporação rotativa seguida por secagem a 0,1 torr forneceram, quantitativamente, o composto do título puro sob a forma de um sólido amarelo suave.

RMN^H a 360 MHz (CDC1₃) δ 6,81 (s,lH), 6,54 (s,lH), 6,26 (s largo,2H), 5,98 (d,2H), 4,89 (d,1H,J=3,2Hz), 4,74 (q,lH,J=5,0 Hz), 4,65-4,61 (m,2H), 4,41 (dd,lH), 4,22 (dd,lH), 4,15 (dd, 1H,J=3,5 e 10,6Hz), 3,74 (m,lH), 3,66 (s,6H), 3,56 (m,lH), 3,42 (m,lH), 3,35-3,24 (m,3H), 3,31 (t,2H), 2,90-2,79 (m,lH), 2,69 (t,2H), 2,23 (t,2H), 1,38 (d,3H,J=5,0Hz).

'-zí 4-azidobutirato) de etoposido

Tratou-se uma solução de 115 mg (0,147 mmole) de 4'-(4-iodobutirato) de etoposido em 2 ml de dimeti1formamida anidra com

16,5 mg (0,337 mmole) de azida de lítio anidra e agitou-se sob atmosfera de azoto durante 28 horas à temperatura ambiente. Diluiu-se a mistura com 65 ml de acetato de etilo e partilhou-se entre 50 ml de um tampão de fosfato 0,05M pH 7. Lavou-se a camada orgânica com 4 >; 25 ml de água e 2 ;·: 40 ml de uma solução saturada de cloreto de sódio e secou-se sobre sulfato de sódio/su1fato de magnésio. A evaporação rotativa seguida por secagem a 0,1 torr forneceram 100 mg (rendimento

987.) do composto do título puro sob a forma de um sólido incolor .

I . V.	(KBr)	2102,	1768,	1736, 1602, 1486, 1337, 1237, 1158,
1133,	1096,	1078,	1038,	932, 699 cm-1.
RMNXH	a 360	MHz	(CDC13)	6 6,81 (s,lH), 6,54 (s,lH), 6,26 (s

largo,2H), 5,98 (d,2H), 4,89 (d,íH,J=3,3Hz), 4,73 (q,1H,J=5,1

Hz), 4,65-4,62 (m,2H), 4,41 (dd,lH,J=9,2 e 10,5Hz), 4,24-4,13 (m,2H), 3,74 (m,l.H), 3,65 (s, 6H) , 3,56 (m,lH), 3,43 (m,lH), 3,42 (t,2H), 3,34-3,30 (m,2H), 3,26 (dd,1H,J=5,2 e 14,1Hz), 2,90-2,80 (m,lH), 2,67 (t,2H), 1,99 (t,2H), 1,38 (d,3H,J= =5,lHz).

o acético do 4'-(4-aminobutiratD) de etoposido

(0,429 mmole) de etoposido e

Uma solução de

de 4'-(4-azidobutirato) ml de acetato de mg de catalisador

Lindlar (paládio a 57. sobre carbonato de cálcio envenenado com chumbo) e depois a mistura durante 2,5 horas à pressão de

2,46 kg/cm² (35 psi). Filtrou-se a mistura sobre uma camada de celite e adicionou-se o filtrado, lentamente, a

100 ml de uma mistura

Separou-se o lavou—se com precipitado branco resultante por filtração.

éter	e secou-se à	pressão de 0,1 torr.	□btiveram-se	38,1 mg
( rend	imento 12,17.)	do composto do título	puro.
RMNXH	a 360 MHz parcial (CDC13) 6 6,80	(s,lH),	6,53	(s,lH),
6,24	(s largo,2H)	, 5,98 (d,2H) , 4,89	(d,iH),	4,73
4,65	(d,ÍH), 4,59	(d,ÍH), 4,40 (m,lH), 4	,22-4,11	(m,2	H), 3,74

(s,6H), 3,73 (m,ÍH), 3,65 (s,2H), 3,56

6H), 2,92-2,82 (m,lH), 2,31 (t,2H), 2,08 (s,3H), 1,38 (d,3H)

4'-meti1-tioaçetato de etoposido

Sob atmosfera de azoto, trataram-se 3,10 g (5,27 mmoles) de etoposido, 1,76 g (8,53 mmoles) de dicic lo-he;:i 1-carbodiimida (DCC) e 792 mg (7,46 mmoles) de ácido meti 1-tioacético com 125 ml de tetra-hidrofurano anidro e agitou-se a solução incolor resultante durante 100 horas à temperatura ambiente, depois do que se adicionaram mais 180 mg de ácido metil-tioacético. Após agitação durante 17 horas à temperatura ambiente, adicionaram-se mais 250 mg de dic ic 1 o-he;: i 1 -car bodiimida e conservou-se a mistura reaccional durante 48 horas à temperatura ambiente, depois do que se concentrou sob vazio. Tratou-se o sólido branco resultante com 175 ml de acetato de etilo, agitou-se durante 5 minutos e filtrou-se através de uma pasta de celite. Lavaram-se os sólidos com 4 x 75 ml de acetato de etilo e partilharam-se os filtrados reunidos entre 300 ml de um tampão de fosfato 0,25M pH 7, depois do que se lavaram com 250 ml água e 2 x 200 ml de uma solução saturada de cloreto de sódio e secaram sobre sulfato de sódio/sulfato de magnésio. Uma evaporação rotativa

seguida por uma cromatografia rápida sobre gel de sílica, utilizando como agente de eluição cloreto de meti 1eno/metanol em gradiente (100:0 -> 98:2) forneceram 1,85 g (rendimento 527.) do composto do título puro sob a forma de um sólido branco.

ΚΜΝ^Η a 360 MHz (CDC1₃) δ 6,81 (s,lH), 6,54 (s,lH), 6,27 (s largo,2H), 5,97 (d,2H), 4,89 (d,1H,J=3,4Hz), 4,74 (q,lH,J=5 Hz), 4,65-4,62 (m,2H), 4,41 (dd,lH), 4,22 (dd,lH), 4,17 (dd, 1H), 3,72 (m,lH), 3,66 (s,6H), 3,56 (m,lH), 3,44 (m,lH), 3,43 (s,2H), 3,34-3,31 (m,lH), 3,26 (dd,1H,J=14,1 e 5,2Hz), 2,90-2,80 (m,lH), 2,64 (d , l.H , J = 2,2Hz , OH) , 2,38 (d,1H,J=2,5Hz,OH), 2,27 (s,3H), 1,38 (d,3H,J=5Hz).

À temperatura ambiente, tratou-se uma solução de 2,60 g (4,41 mmoles) de etoposido em 220 ml de acetonitrilo anidro com 2,20 ml (12,06 mmoles) de N, N-diisopropi1eti 1amina e adicionou-se depois esta solução, rapidamente, ao cloridrato do cloreto de 4-dimetilaminDbutirilo preparado a partir de 0,82 g (4,89 mmoles) do cloridrato de ácido correspondente e de cloreto de tionilo. Agitou-se a mistura durante 90 minutos à temperatura ambiente e verteu-se sobre 400 ml de uma solução aquosa saturada e gelada de carbonato de hidrogénio e de sódio,

400 ml de acetato de etilo e 60 ml de uma solução saturada de c1oreto de sódio

Lavou-se a camada orgânica com x 50 de água e 2 x 150 ml de uma solução saturada de cloreto de sódio e secou-se sobre sulfato de sódio. Uma evaporação rotativa seguida por uma cromatografia rápida sobre gel de sílica utilizando como agente de eluição metanol a 5-107.

cloreto de metileno, forneceram 1,28 mg (rendimento 41Z) em

do composto	do título
acastanhado,
I . V.	(KBr)	1770, 1602,
1160,	1130,	1078, 1038,
ΒΜΝΧΗ	a 360	MHz (CDC13
largo	,2H) ,	5,97 (d,2H)

4,89

I

4,65-4,61 )

δ 6,81 puro sob a forma de um sólido amarelo

1507, 1486, 1466, 1421, 1337, 1236,

1003, 932 cm^-1 (s,lH), (s (dd,1H <1

J=3,9 a

14,1Hz) , 4,41 ,74 (d,ÍH,J (dd,lH), (m,1H),

4Hz ) ,

4,22

3,65

1H), 3,

35—3,31 (m,2H),

3,27 (t,2H)

4,74 (q,lH (dd,lH), 4 (s,6H), (dd,lH,J=5,2

2,40 (s,6H), 2,01 (m,2H), 1,38

Espectro de massa (FAB), m/e,

M*, 701 , 2,40-2,36 (m,2H), (d,3H,J=5Hz).

702(M*+H). requer

Exemplo S

Cloridrato do 4' -.Γ L4-dimeti1amino)butiratol de etoposido

Uma solução de 155 mg (0,221 butirato) de etoposido em 7 ml agitada com agitador magético, de 0°C e tratou-se, lentamente tos, com 250 μΐ (0,250 mmole) clorídrico em éter etílico, tura de 0°C, concentrou-se mmole) de 4'-(4-dimeti1aminode cloreto de metileno anidro, arrefeceu-se até à temperatura e durante mais de dois minude uma solução 1,0M de ácido

Decorridos 10 minutos à temperaa solução sob atmosfera de azoto até ao volume aproximado de 2 ml. Adicionou-se depois esta solução, lentamente, a 60 ml de éter etílico anidro energicamente agitado. Separou-se o precipitado branco resultante por filtração, lavou-se com éter e secou-se à pressão de 0,1 torr até à obtenção de 146 mg (rendimento 897.) do composto do título puro sob a forma de um sólido esbranquiçado. Este sólido é insolúvel quer em água quer em dissolventes orgânicos.

RMN^XH a 360 MHz (CDC1-,) G 12,65 (s largo,lH), 6,82 (s,lH), 6,53 (s,lH), 6,27 (s largo,2H), 5,98 (d,2H), 4,89 (d,lH,J=3,6 Hz), 4,73 (q , IH,J=4,9Hz), 4,65-4,62 (m,2H), 4,42 (dd,lH), 4,22 (dd,lH), 4,15 (dd,lH,J=3,9 e 10,4Hz), 3,74 (m,lH), 3,66

(s,6H), 3,56 (m,lH), 3,42 (m,lH), 3,34-3,24 (m,3H), 3,10 (m,2H), 2,90-2,80 (m,lH), 2,76 (s,6H), 2,72 (t,2H), 2,25 (m,

2H), 1,38 (d,3H,J=4,9Hz).

A uma solução agitada com agitador magético de 2,15 g (3,65 mmoles) de etoposido em 210 ml de acetonitrilo anidro, adi cionaram-se 1,65 ml (9,47 mmoles) de N,N-diisopropi1eti1amina e depois 0,75 g (4,21 mmoles) de cloridrato do cloreto de isonicotinoilo.

Após a adição de mais 0,70 ml de N, N—diiso— propileti1amina, agitou-se a mistura durante dias à temperatura ambiente e partilhou-se seguidamente entre 300 m 1 de um tampão de fosfato pH 7, 400 ml de acetato de etilo ml de uma solução saturada de cloreto de sódio

Lavou-se camada orgãnica com 2 ml de água e 2 x 100 ml de uma solução saturada de cloreto de sódio, secou-se sobre sulfato de sódio e filtrou-se depois através de celite. Concentrou-se o filtrado até ao volume de 225 ml e adicionaram-se 20 ml de cloreto de metileno. Adicionou-se depois à solução hexano até ao

aparecimento de uma ligeira turvação. Conservou-se a mistura durante 90 minutos à temperatura de 0°C. Separou-se o produto resultante por filtração e secou-se sob vazio, obtendo-se 885 mg (rendimento 357.) do composto do título puro sob a forma de um sólido branco. A concentração do soluto mãe forneceu mais material que se apresentou contaminado apenas por uma pequena quantidade de etoposido.

a 360 MHz (CDC1₃) 8 8,83 (s largo,2H), 8,07 (s largo,

6,57 (s,lH), 6,32 (s largo,2H),

5,98 (ABq,

2H) ,

2H) ,

4,74 (q,lH,J=4,9Hz), 4,67-4,65 (m,

4,43 (dd,lH), 4,24 (dd,lH), 4,15 (dd,lH), 3,73 (m,lH),

3,65 (s,6H),

3,54 (m,lH), 3,44 (dd,lH), 3,36-3,26 (m,3H),

1,38 (d,3H,J=4,9Hz).

Exemplo 10

Cloridrato do 4'-íisonicotinoato) de etoposido.

Uma solução de 215 mg (0,310 mmole) de 4'-(isonicotinoato) de etoposido, composto do Exemplo 9, em 3 ml de cloreto de metileno anidro, agitada com um agitador magnético, arrefeceu-se até à temperatura de 0°C sob atmosfera de azoto e tratou-se.

lentamente durante mais de 5 minutos, com 300 μΐ (0,300 mmole) de uma solução etérea 1,01-1 de ácido clorídrico. Decantou-se o dissolvente e lavou-se o sólido amarelo restante com 2 x 2 ml de cloreto de metileno e secou-se sob vazio até à obtenção de 175 mg (rendimento 807.) do composto do título puro.

RMNiH a 360 MHz (d6-DMS0) 6 8,88 (d,2H,J=5,7Hz), 7,96 (d,2H, J=5,7Hz), 7,03 (s,ÍH), 6,58 (s,lH), 6,35 (s largo,2H), 6,16 (s largo,2H), 4,95 (d,1H,J=3,2Hz), 4,72 (q,1H,J=4,9Hz ) , 4,64 (d,lH,J=5,5Hz), 4,59 (d,1H,J=7,7Hz), 4,07 (dd,ÍH,J = 10,1 e 4,7Hz), 3,61 (s,6H), 3,50 (dd,lH), 3,39-2,89 (m,6H), 1,23 (d, 3H,J=4,9Hz).

mmoles)

N,N-d i isopropi1eti1amina etoposido e 1,60 ml

A uma solução de (9,19 mmoles) de em 210 ml de acetonitrilo anidro, adicionou-se, rapidamente e à temperatura ambiente, uma solução de cloreto de ácido linoleico em 20 ml de acetonitrílo anidro [o cloreto do ácido linoleico preparou-se r

a partir de 1,17 g (4,17 mmoles) de ácido linoleico e 1,10 ml de cloreto de oxalilo em cloreto de metileno; após a evaporação sob vazio e secagem à pressão de 0,1 torr, dissolveu-se o cloreto de ácido bruto em acetonitrilo anidro e utilizou-se imediatamente]. Agitou-se a mistura durante 45 minutos à temperatura ambiente e partilhou-se entre 250 ml de um tampão de •fosfato pH 7 e 300 ml de acetato de etilo. Lavou-se a camada orgânica com

100 m 1 de água e 150 ml de uma solução saturada de cloreto de sódio e secou-se sobre sulfato de sód io/su1 fato de magnésio. Uma evaporação rotativa forneceu um sólido incDlor que secou depois à pressão de 0,1 torr

Uma solução deste sólido em 15 ml de cloreto de metileno foi adicionada

1en tamente a 145 ml de hexano mediante agitação

Separou-se o precipitado branco resultante por filtração, lavou-se com e secou-se à pressão de 0,1 torr até à obtenção de hexano

3,25 g (rendimento 987.) do composto do título puro sob a forma de um sólido incolor.

I . V.	( KBr)	2929,	1770,	1601, 1506, 1486, 1466, 1421, 1337,
1236,	1159,	1132,	1098,	1078, 1038, 1003, 933 cm-1.
ΡΜΝ^-Η	a 360	MHz	(CDC13)	δ 6,81 (s,lH), 6,54 (s,lH), 6,25 (s

largo,2H), 5,97 (d,2H), 5,37-5,28 (m,4H), 4,88 (d,lH,J=3,4

Hz), 4,73 (q,1H,J=5,0Hz), 4,66-4,61 (m,2H), 4,41 (dd,lH),

4,21 (dd,lH), 4,15 (dd,lH,J=4,2 e 10,4Hz), 3,74 (m,l.H), 3,64 (s,6H), 3,56 (m,ÍH), 3,42 (dd,lH), 3,34-3,31 (m,2H), 3,25 (dd,lH,J=5,2 e 14,1Hz), 2,92-2,82 (m,lH), 2,76-2,72 (m,2H),

2,67 (s largo,1H,OH), 2,55 (t,2H,J=7,4Hz), 2,39 (s largo,1H, ί

□Η), 2,07-1,97 (m,4H), 1,75-1,27 (m,14H), 1,37 (d,3H,J=5,0

Hz), 0,86 (t,3H,J=6,7Hz).

Espectro de massa (FAB), m/e, 850 (M*) , 645 (M*-açucar).

requer Μ*, 850.

Análise elementar para Ε₄₇Η_ώ2Ο₁₄:

Calculado: C, 66,34; H, 7,34;

Encontrado: C, 65,67; H, 7,39.

Exemplo 12

4..' -_LaE_rí lato)_de etoposido

Utilizando a técnica descrita no Exemplo 1, 1,86 g (3,16 mmoles) de etoposido, 0,81 ml (4,65 mmoles) de N,N-diisopropi1etilamina e 0,35 ml (4,3 mmoles) de cloreto de acriloilo em

200 ml de acetonitrilo anidro, produziram 1,73 g (rendimento 857.) do composto do título puro após cristalização na mistura cloreto de meti 1eno/éter de petróleo.

RMN^XH a 360 MHz (CDC1₃) δ 6,80 (s,lH), 6,55 (m,2H), 6,34 (m, 1H), 6,27 (s,2H), 5,96 (m,3H), 4,88 (d,lH), 4,73 (q,lH), 4,61 (m,2H), 4,43 (dd,lH), 4,22 (dd,lH), 4,15 (dd,lH), 3,70 (m,

1Η), 3,64 (s,6H), 3,55 (m,lH), 3,41 (m,lH), 3,29 (m,3H), 2,85 (m,lH), 1,36 (d,3H).

Cloridrato do-4 '-f 3-Γ ( 2-dimeti lamino) eti. l-tiol propionatol de

Uma solução de 625 mg (0,97 mmole) de 4'-acrilato de etoposido, o composto do Exemplo 12, em 25 ml de etanol, tratou-se com 305 mg (2,14 mmoles) de cloridrato de 2-dimeti1aminoetanotiol e agitou-se a mistura durante 64 horas à temperatura

ambiente.	Evaporou-se o dissolvente sob vazio e purificou-se
o produto	bruto resultante por cromatografia rápida sobre gel
de sílica	utilizando como agente de eluição metanol a 107. em

cloreto de metileno. Obtiveram-se 610 mg (rendimento 847.) do composto do título puro após cristalização no éter de petróleo do material cromatografado.

I.V. (KBr) 1775, 1607, 1510, 1495, 1240, 1135 cm¹.

RI*1N^XH a 360 MHz (CDC1₃) 6 6,81 (s,lH), 6,52 (s,lH), 6,24 (s, 2H), 5,96 (dd,2H), 4,89 (d,lH), 4,72 (q,lH), 4,60 (m,2H), 4,40 (dd,lH), 4,21 (dd,lH), 4,16 (dd,ÍH), 3,68 (m,lH), 3,64 (Β,όΗ),

JI (m,lH),

3,39 (m,lH), 3,29 (m,3H), 2,87 (s,6H),

2,66 (m,2H), 2,51 (m,2H), 1,36 (d,3H).

Espectro de massa (FAE<), m/e, 748 (M*+H). requer (M*) 747.

Exemplo 14

Utilizando a técnica descrita no Exemplo 1, 1,80 g (3,06 mmo les) de etoposido, 0,63 ml (3,62 mmoles) de N,N-diisopropiletilamina e 0,63 ml (3,69 mmoles) de cloreto de octanoilo em

250 ml de acetonitrilo anidro, forneceram 2,03 g (rendimento 937.) do composto do titulo puro após uma cromatografia rápida e uma precipitação na mistura éter/éter de petróleo.

RMN^XH a 360 MHz (CDC1₃) 6 6,80 (s,lH), 6,53 (s,lH), 6,24 (s largo,2H), 5,96 (d,2H), 4,88 (d,1H,J=3,5Hz), 4,72 (q,lH,J=5 Hz), 4,60 (m,2H), 4,40 (dd,lH), 4,21 (dd,lH), 4,13 (dd,iH), 3,69 (m,l.H), 3,58 (s, 6H) , 3,57 (m,lH), 3,40 (dd,lH), 3,31 (m,2H), 3,28 (dd,lH), 2,86 (m,lH), 2,56 (t,2H), 1,73 (m,2H), 1,37 (m,5H), 1,29 (m,6H), 0,85 (t,3H).

Easmpla. 1J5.

Sob atmosfera de azoto, arrefeceu-se até à temperatura de 0°C uma mistura agitada mmole) de etoposido com agitador magnético de 133,5 mg (0,227 e de 379 mg (2,74 mmoles) de carbonato de potássio anidro em ml de acetona e tratou-se com 88 μΐ (0,758 mmole) de cloreto de benzoilo. Agitou-se a mistura durante 4,5 horas a uma temperatura compreendida entre 0 e

5°C e concentrou-se o filtrado sob vazio. Uma cromatografia rápida sobre gel de sílica, utilizando como agente de eluição metanol a 57. em cloreto de metileno, forneceu 94,1 mg (rendi-

mento 607.) do	composto do t	ítulo puro sob	a forma de um	sói i —
do incolor.
a 360	MHz (CDCls) i.	5 8,19	(d,2H),	7,59 (t,lH),	7,47
( m, 2H ) , 6,82	(s,lH), 6,54	(s,lH)	, 6,32	( s 1argo,2H) ,	5,97
(d,2H), 4,88	(d,lH), 4,72 i	(q,1H) ,	4,63 (m	,2H), 4,43 (dd	,1H) ,
4,24 (dd,lH),	4,17 (dd,lH)	, 3,69	(m,lH),	3,59 (s,6H),	3,58
(m,lH), 3,41	(dd,ÍH), 3,31	(m,2H) ,	3,28 (dd,lH), 2,85 (m	,1H) ,
1,38 (d,3H).

'-benzi. 1—carbonato de etoposido

Sob atmosfera de azoto, arrefeceu-se até à temperatura de 0°C uma mistura agitada com agitador magnético de 343,5 mg (0,584 mmole) de etoposido e 903 mg (6,53 mmoles) de carbonato de potássio anidro em acetona e tratou-se com 261 μΐ (312 mg, 1,83 mmoles) de cloroformato de benzilo. Agitou-se a mistura durante 25 horas à temperatura ambiente depois do que se filtrou. Concentrou-se o filtrado sob vazio e cromatografDu-se sobre gel de sílica utilizando como agente de eluição metanol a 47. em cloreto de metileno. Obtiveram-se 244 mg (rendimento 5S7.) do composto do título puro sob a forma de um sólido incolor .

RMN^XH a 360 MHz (CDC1₃) δ 7,43-7,32 (m,5H), 6,81 (s,!H), 6,53 (s,lH), 6,26 (s,2H), 5,97 (d,2H), 5,24 (s,2H), 4,88 (d,lH), 4,73 (q,lH), 4,65-4,59 (m,2H), 4,41 (dd,lH), 4,22 (dd,lH), 4,15 (dd,lH), 3,71 (m,lH), 3,64 (s,6H), 3,56 (m,lH), 3,41 (m, 1H), 3,31 (m,2H), 3,27 (dd,lH), 2,85 (m,lH), 2,73 (d,lH,OH), 2,55 (d,lH,DH), 1,37 (d,3H).

Utilizando a técnica descrita no Exemplo 16, obtiveram-se com 374 mg (0,635 mmole) de etoposido, 1,00 g (7,25 mmoles) de carbonato de potássio anidro e 25 ml de acetona, 245 mg (rendimento 507.) do composto do título pretendido sob a forma de um sólido incolor. Neste Exemplo substituiu-se o cloro-formato de benzilo por 98,5 μΐ (0,715 mmole) de cloroformato de 2,2,

RMN^XH a 360 MHz (CDC1₃) 6 6,81 (s,lH), 6,54 (s,lH), 6,28 (s,

2H) , 5,97	(d,2H),	4,88	(d,lH), 4,83	(s,2H), 4,74	(q	1H) ,	4,63
(m,2H), 4	,42 (dd,	1H) ,	4,24 (dd,lH)	, 4,16 (dd,lH),	3,71	(m,
1H), 3,67	(s,6H),	3,56	(m,lH), 3,41	(m,lH), 3,32	(m,	2H) ,	3,27

(dd,lH), 2,85 (m,lH), 2,67 (d,lH,OH), 2,43 (d,lH,OH), 1,37 (d,3H).

ia

4'—meti 1—carbonato de etoposido

Uma mistura agitada com agitador magnético de 340 mg (0,578 mmole) de etoposido em 10 ml de cloreto de metileno, tratou-se com 1,0 ml de piridina anidra e depois 190 μΐ (2,46 mmoles) de cloro-formato de metilo. Agitou-se a mistura durante 18 horas à temperatura ambiente e partilhou-se entre água e cloreto de metileno. Lavou-se o extracto orgânico com uma solução saturada de cloreto de sódio e secou-se sobre sulfato de magnésio. Uma cromatografia rápida sobre gel de sílica utilizando como agente de eluição metanol a 57 em cloreto de metileno e depois uma cristalização na mistura cloreto de metileno/éter de petróleo forneceram 95 mg (rendimento 287.) do composto do título puro sob a forma de um sólido incolor.

RMlsH-H a 360 MHz (CDC1₃) 5 6,81 (s,lH), 6,54 (s,lH), 6,26 (s,

2H) ,	5,97	(d,2H),	4,88	(d,lH,J=3,5Hz),	4,74	(q,lH), 4	,63 (m
2H) ,	4,41	(dd,1H)	, 4,24	(dd,lH), 4,14	(dd,	1H), 3,86	(s,3H)
3,71	(m,lH), 3,68	(s,6H)	, 3,53 (m,1H),	3,45	(m,lH), 3	,32 (m
2H) ,	3,27	(dd,lH)	, 2,85	(m,lH), 2,65	(d,lH	,0H), 2,37	(d,iH
OH) ,	1,37	(d,3H).

Espectro de massa (FAB), m/e, 647 (M*+H). C₃iH₃₄0i5 requer

M*, 646.

4'-Γ2-(meti 1)antraquinpna1—carbonato de etoposido

A uma solução agitada com agitador magnético de .145 μΐ (1,12 mmoles) de difosgénio em 3 ml de tetra-hidrofurano anidro.

adicionaram-se, lentamente durante mais de 3 minutos sob atmosfera de azoto e à temperatura de 0°C, uma solução de 505 mg (2,12 mmoles) de 2-(hidroximeti1)antraquinona em 21 ml de tetra-hidrofurano anidro contendo 180 pl (2,23 mmoles) de piridina anidra. Agitou-se a mistura durante 5 minutos à tem peratura de 0°C e depois durante 15 minutos à temperatura ambiente, depois do que se adicionaram a esta solução (contendo um precipitado branco), rapidamente através de uma canula e à temperatura de 0°C, uma solução gelada de 1,17 g (1,99 mmoles) de etoposido em 24 ml de tetra-hidrofurano anidro contendo 420 pl (2,41 mmoles) de N,N-diisDpropi1eti1amina. Agitou-se a mistura durante 65 horas sob atmosfera de azoto e no escuro, aqueceu-se até à temperatura de 40=42, agitou-se durante mais 6 horas e partilhou-se entre 25 ml de um tampão de fosfato pH 7, 150 ml de água e 350 ml de acetato de etilo. Lavou-se a camada orgânica com 100 ml de água e 150 ml de uma solução saturada de cloreto de sódio e secou-se sobre sulfato de sódio/sulfato de magnésio. Uma evaporação rotativa e seguidamente uma cromatografia rápida sobre gel de sílica, utilizando como agente de eluição em gradiente metanol em cloreto de metileno (0 -> 27.), forneceram 97,2 mg (rendimento 67.) do composto do título puro sob a forma de um sólido amarelo.

I.V. (KBr) 1774 (lactona), 1773 (carbonato), 1678 (quinona),

1602,	1506,	1486, 1464,	1454, 1435, 1422,	1386, 1327	, 1294,
1237,	1160,	1131, 1096,	1078, 933 cm-1.
RMNXH	a 360	MHz (CDCl.-s)	G 8,33-8,28 (m,4H),	7,84-7,78	(m,3H),
6,81	(S,1H),	6,53 (S,1H)	, 6,28 (s,2H), 5,97	(dd,2H), 5	,40 (s,

2H), 4,89 (d,IH,J=3,5Hz), 4,73 (q,IH,J=4,9Hz), 4,66-4,62 (m,

2H), 4,41 (dd,lH), 4,22 (dd,lH), 4,15 (dd,IH,J=10,4 e 4,2Hz),

3,71 (m,lH), 3,69 (s,6H), 3,56 (m,lH), 3,41 (m,lH), 3,34-3,31 (m,2H), 3,26 (dd,IH,J = 14,0 e 5,2 Hz), 2,89-2,83 (m,lH), 2,61 (d,ΙΗ,ΟΗ,J=2,2Hz), 2,30 (d,IH,OH,J=2,4Hz), 1,38 (d,3H,J=4,9

Hz) .

Espectro de massa (FAB), m/e, 853 (M*+H), 808, 723, 646, 587. C4_aH₄₀Di7 requer M*, 852.

4' - (4-nitrobenzi1)-carbonato de etoposido

Tratou-se, à temperatura ambiente e sob atmosfera de azoto, uma suspensão agitada com agitador magnético de 5,19 g (8,82 mmoles) de etoposido em 700 ml de acetonitrilo anidro, com 2,15 ml (12,3 mmoles) de N,N-diisopropi1eti1amina, depois do que se adicionaram 2,20 g (10,2 mmoles) de cloroformato de 4-nitrobenzilo. Lentamente, dissolveu-se todo o material durante mais de 30 minutos até à obtenção de uma solução de cor amarela pouco intensa, que se agitou durante 16 horas à temperatura ambiente. Eliminou-se o dissolvente sob vazio, dissolveu—se o resíduo em 500 ml de acetato de etilo, partilhou— -se entre 200 ml de um tampão de fosfato pH 7 e secou-se sobre sulfato de sódio/sulfato de magnésio. Uma evaporação rotativa forneceu um sólido que se dissolveu em 50 ml de acetato de etilo e filtrou através de celite. Lavou-se a celite com 2 x 25 ml de acetato de etilo preparado recentemente e, lentamente, adicionaram-se os filtrados reunidos a 600 ml de hexano agitado a uma velocidade rápida. Separou-se o precipitado resultante por filtração, lavou-se com hexano e secou-se à temperatura de 50°C e à pressão de 0,5 torr, obtendo-se 6,73 g (rendimento 997.) do composto do título puro sob a forma de um sólido amarelo pouco intenso.

ΡΜΝ^-Η a 360 MHz (CDC1,) 6 8,22 ( d , 2H, J = 8,6Hz ) , 7,56 (d,2H,J = =8,6Hz), 6,81 (s,lH), 6,52 (s,lH), 6,27 (s,2H), 5,98 (d,2H), 5,32 (s,2H), 4,89 (d,1H,J=3,4Hz), 4,73 (q,1H,J=5,0Hz) , 4,65-4,61 (m,2H), 4,42 (dd,lH), 4,22 (dd,lH), 4,15 (dd,1H,J=10,5 e 4,0Hz), 3,74 (m,lH), 3,66 (s,6H), 3,56 (m,lH), 3,43 (m,lH), 3,36-3,31 (m,2H), 3,27 (dd,1H,J=14,1 e 5,2Hz), 2,89-2,78 (m, 1H), 2,64 (s largo,1H,OH), 2,37 (s 1argo,1H,OH), 1,38 (d,3H, J=5,0Hz).

4'-ΓΝ_rN-bis(2-c1oroeti1)Ί-carbamato de etoposido

Sob atmosfera de azoto e à temperatura ambiente, tratou-se uma solução agitada com agitador magnético de 2,10 g (3,57 mmoles) de etoposido em 215 ml de acetonitrilo anidro, com 0,85 ml (4,88 mmoles) de N,N-diisopropi1eti1amina e arrefeceu-se até à temperatura de 0°C. A esta solução adicionaram-se, durante mais de um minuto e através de uma seringa, /

/

V.

“ζ'

361,5 mg (215 μΐ , .1,83 mmoles) de difosgénio. Decorridos 5 minutos, à temperatura de 0°C, interrompeu-se a reacção mediante a adição de 750 mg (4,20 mmoles) de cloridrato de bis(2-cloroeti1)amina sólido, seguindo-se imediatamente a adição de 1,60 ml (9,1? mmo1es) de N,N-diisopropileti1amina

Ag i tou-se a mistura reaccional durante 90 minutos à temperatura de

0^QC e depois durante uma hora à temperatura ambiente e partiIhou-se entre 300 ml de um tampão de fosfato pH 5, 400 ml de acetato de etilo e 100 ml de uma solução saturada de cloreto de sódio. Lavou-se a fase orgânica com 3 ;·: 150 ml de uma solução saturada de cloreto de sódio e secou-se sobre sulfato de sódio/sulfato de magnésio. Lima evaporação rotativa seguida por uma cromatografia rápida sobre gel de sílica, utilizando como agente de eluição em gradiente metanol em cloreto de metileno (0 -> 47.), forneceram 1,71 g (rendimento 637.) do composto do título puro sob a forma de um sólido incolor.

I.V. (KBr) 1773, 1728, 1602, 1506, 1486, 1468, 1420, 1338, .1236, 1191, 1160, 1130, 1097, 1077, 1038, 1003, 933, 890, 864 cm^-1 .

RMN^XH a 360 MHz (CDC1₃) δ 6,80 (s,lH), 6,52 (s,lH), 6,26 (s largo,2H), 5,97 (d,2H), 4,89 (d,1H,J=3,3Hz), 4,73 (q,lH,J=4,8 Hz), 4,64-4,61 (m,2H), 4,41 (dd,lH), 4,23-4,14 (m,2H), 3,81-3,67 (m,9H), 3,67 (s,6H), 3,57 (m,lH), 3,42 (m,lH), 3,34-3,31 (m,2H), 3,27 (dd,1H,J=14,1 e 5,2Hz), 2,90-2,80 (m,lH), 2,75 (s 1argo,1H,OH), 2,55 (s largo,1H,OH), 1,38 (d,3H,J=4,B

Hz) .

Espectro de massa (FAB), m/e, 756 (M*+H), 550 (M-açúcar).

C₃z»H₃<?C 1 ₌ΝΟχ^ requer M*, 755.

Espectro de massa de alta resolução (FAB), m/e, 755,1725 (M*). C₃₄H₃₉Cl₂NO_i4 requer 1*1*, 755,1747.

4meti 1—carbamato de etoposido

Uma solução agitada com agitador magnético de 2,00 g (3,40 mmoles) de etoposido em 200 ml de acetonitrilo anidro, tratou-se com 1,66 ml (9,53 mmoles) de N,N-diisopropi1eti1amina e arrefeceu-se, sob atmosfera de azoto, até à temperatura de 0°C. A esta solução adieionaram-se, rapidamente utilizando uma seringa, 2,20 ml (4,42 mmoles) de uma solução 1,931*1 de fosgénio em tolueno. Agitou-se a mistura reaccional durante 10 minutos à temperatura de 0^eC, depois do que se adicionaram, rapidamente, 5,86 ml (6,80 mmoles) de uma solução aquosa a 40X de metilamina. Agitou—se a mistura durante 30 minutos à temperatura de 0=Έ e partilhou-se depois entre 350 ml de acetato de etilo e 150 ml de ácido clorídrico 0,1N. Lavou-se a camada orgânica com 200 ml de água e 200 ml de uma solução /

(

saturada de cloreto de sódio e secou-se sobre sulfato de magnésio. Uma evaporação rotativa seguida por uma cromatografia rápida sobre gel de sílica, utilizando como agente de eluição metanol a 27. em cloreto de metileno, forneceram 673 mg (rendimento 317.) do composto do título puro.

I .9.	(KBr)	1775	(sh),	1740,	1604, 1517, 1490, 1425, 1335
1238,	1168,	1134, 1104,	1080,	1040, 1010, 936 cm-1.
ΡΓΊΝ^-Η	a 300	MHz	(CDC1	s) 6	6,79 (S,1H), 6,53 (s,lH), 6,2·

(s,2H), 5,96 (d,2H), 5,01 (t,lH), 4,87 (d,lH), 4,72 (q,lH), 4,64-4,60 (m,2H), 4,40 (m,lH), 4,23-4,12 (m,2H), 3,76-3,70 (m,lH), 3,66 (s,6H), 3,54 (m,lH), 3,42 (m,lH), 3,37-3,20 (m,3H), 2,90-2,82 (m,lH), 2,83 (d,3H), 2,70 (s largo,ΙΗ,ΟΗ), 2,47 (s largo,ΙΗ,ΟΗ), 1,36 (d,3H).

Espectro de massa (FAB), m/e, 646,2111 (M*+H), 03ΐΗ_3βΝΟ₁₄ requer 646,2136.

Utilizando a técnica descrita no Exemplo 22, preparou-se in situ ο 4'-c1oroformato de etoposido a partir de 2,00 g de

*.·<·· etoposido, interrompeu-se a reacção com 237 μΐ (3,74 mmoles) de uma solução aquosa de hidróxido de amónio (29,87. de NH₃) e continuou-se o tratamento da mistura reacdonal resultante depois do que se purificou de acordo com a técnica descrita no Exemplo 22 até à obtenção de 0,99 g (rendimento 467.) do

composto do	título puro sob a forma de um	sói ido	incolor
I . V.	( KBr)	1776, 1742 (sh), 1608,	1510,	1490,	1425,	1350,
1238,	1165,	1133, 1100, 1080, 1038, 1010,	935 cm	- JL
	a 300	i MHz (CDC13) f. 6,80 (s	,1H) ,	6,53	(s,lH),	6,24
(s,2H)	, 5,95 (d,2H), 5,94 (s largo	,2H) ,	4,88	(d,ÍH),	4,73
(q,lH)	, 4,6:	3-4,59 (m,2H), 4,39 (m.	1H) ,	4,20	(m,lH),	4,17

(dd,lH), 3,71 (m,lH), 3,67 (s,6H), 3,54 (m,lH), 3,38 (m,lH), 3,33-3,23 (m,3H), 2,90-2,82 (m,iH), 2,77 (s largo,1H,DH), 2,58 (s largo,ΙΗ,ΟΗ), 1,36 (d,3H).

Espectro de massa (FAB), m/e, 632,1973 (M*+H) , requer 632,1979.

Exemplo 24

4'.-dimetil-carbamato de etoposido

De acordo com a técnica descrita no Exemplo 22, preparou-se in situ o 4'-cIoroformato de etoposido a partir de 2,00 g de etoposido e interrompeu-se a reacção com 0,60 ml (8,9 mmoles) de dirnetilamina pura. Continuou-se o tratamento da mistura reaccional resultante de acordo com a técnica descrita no Exemplo 22 e submeteu-se o produto a uma cromatografia rápida sobre gel de silica utilizando como agente de eluição acetato de eti lo/hexano (3:1). Obtiveram-se 1,12 g (rendimento 507.) do composto do título puro sob a forma de um sólido incolor.

I . V.	(KBr)	1775,	1733,	1605,	1514, 1492, 1395, 13	40, 1239,
1165,	1132,	1100,	1080,	1040,	1007, 935 cm-1.
ΒΜΚΤΗ	a 300	MHz	(CDC13)	δ 6,	79 (s,lH), 6,54 (s,lH)	, 6,24 (s
largo	, 2H) ,	5,96	(d,2H),	4,88	(d,1H,3=3,4Hz), 4,73	(q,lH,J=5

Hz), 4,62 (dd,lH), 4,43-4,06 (m,2H), 3,68 (m,lH), 3,66 (s, 6H), 3,56 (m,lH), 3,39 (m,lH), 3,33-3,23 (m,3H), 3,08 (s largo,3H), 2,96 (s largo,3H), 2,91-2,82 (m,lH), 2,76 (d,lH,J=2,2 Hz,OH), 2,54 (d,1H,J=2,6Hz,DH), 1,37 (d,3H,J=5Hz).

Espectro de massa (FAB), m/e, 660 (M*+H). C₃-H.3₇NO₁4 requer M* = 659.

Utilizando a técnica descrita no Exemplo 22, preparou-se in

si tu o 4'-cloroformato de etoposido a partir de 2,0C g de etoposido e interrompeu-se a reacção com 0, B6 ml (27,2 mmoles) de hidrazina anidra. Agitou-se a mistura reaccional durante 90 minutos à temperatura de 0^aC e partilhou-se depois entre 250 ml de acetato de etilo e 100 ml de um tampão de fosfato pH 7,0. Lavou-se a camada orgânica com uma solução saturada de cloreto de sódio e secou-se sobre carbonato de potássio. Uma evaporação rotativa seguida por uma cromatografia rápida sobre gel de sílica, utilizando como agente de eluição metanol a 47. em acetato de etilo, forneceram 1,52 g do composto do título puro sob a forma de um sólido incolor.

I .V.	(KBr) 1774, 1604	, 1507,	1488, 1424, 1	390, 13	39, 1	238,
1163,	1132, 1100, 1078,	, 1038, 1004, 932 crrr1.
RMN±H	a 300 MHz (CDCl:s	/DMSO-d6	gota) δ 6,72	(5,1H),	6,37	( S 5
1H) ,	6,11 (s,2H), 5,83	(d,2H),	4,81 (d,lH,J=	=3,0Hz),	4,60	(q 5

lH,J=4,9Hz), 4,44 (d,1H,J=4,9Hz), 3,39-3,30 (m,2H), 4,12-4,00

(m,2H), 3,59-3,12 (m,6H), 3,52 (s,6H), 2,76-2,66 (m,lH), 1,23 (d,3H,J=4,9Hz).

Espectro de massa (FAB) , m/e, 647 (M*+H) . requer

M* = 646.

Exemplo 26 a ) 4.' -(2-dimeti lamino-eti 1 1 carbonato de etoposido

Tratou-se uma

solução agi tada com agitador magnético de 2,00 (3,40 mmoles) de etoposido em 250 ml de acetonitrilo anidro, com 1,30 ml (7,4Θ mmoles) de N,N-diisopropi1eti1amina e arreíeceu-se, sob atmosfera de azoto, até à temperatura de 0°C. A esta solução adicionaram-se, rapidamente e utilizando uma seringa, 1,94 ml (3,74 mmoles) de uma solução 1,93M de fosgénio em tolueno e agitou-se a mistura durante 5 minutos à temperatura de 0^aC. Adicionou-se 0,51 ml (5,10 mmoles) de 2-dimetilaminoetanol e agitou-se a mistura reaccional durante uma hora, depois do que se eliminou o dissolvente sob vazio e se dissolveu o resíduo resultante em 300 ml de cloreto de metileno. Partilhou-se a solução entre 150 ml de uma solução aquosa saturada de carbonato de hidrogénio e de sódio e 150

5Q ml de uma solução saturada de cloreto de sódio e secou—se sobre sulfato de magnésio

Uma evaporação rotativa seguida por uma cromatografia rápida sobre gel de sí1ica, utilizando como agente de eluição metanol em cloreto de metileno, forneceram 1,88 g (rendimento

797.) do composto do título puro sob um sólido incolor a forma de

I .V.	(KBr)	1775,	1606,	1511,	1490, 1470, 1424, 1340, 1238,
1167,	1136,	1100,	1080,	1040,	1005, 936	cm-i .
ΚΜΝ·*·Η	a 30ÍZ	I MHz	(CDC13)	í: 6,81 (s,lH),	6,52 (s,lH), 6,25 (s,
2H) ,	5,97	(d,2H)	, 4,88	(d,lH	,J=3,4Hz),	4,73 (q,!H,J=5,0Hz),

4,65-4,60 (t,2H,J=6,0Hz), 4 ji (m,lH), 4, (m,2H), 4,41

2,64

4,15 (dd,lH,J=6,l

10,6Hz) , 3,74 (m,ÍH), 3,67 (s,6H) (m,lH), 3,42 (m,ÍH),

34-^, ji - “ 5 (m,3H), 2,91=2,79 (m,lH) (t,2H,J=6,0Hz), 2,28 (s,6H),

1,38 (d,3H,J=5,0Hz)

Espectro de massa (FAB), requer

b) Cloridrato do 4'-(2-dimeti1amino-eti1)carbonato de etoposido

Sob atmosfera de azoto, arrefeceu-se até à temperatura de 0°C uma solução de 510 mg (0,725 mmole) do composto obtido na alínea a) descrita antes, em 50 ml de cloreto de metileno anidro e mediante agitação adicionaram-se 870 μΐ (0,87 mmole) de uma solução 1,0M de ácido clorídrico anidro em éter etílico

Decantou-se o dissolvente separando-o do produto oleoso resultante e triturou-se depois o resíduo com ml de éter etílico, obtendo-se um produto cristalino. Diluiu-se o dis solvente decantado com 100 ml de éter etílico, obtendo-se um produto adicional. Após filtração e secagem sob vazio obtiveram-se 50 mg (rendimento 957.) do composto do título puro.

I . V .	(KBr) 1775,	1606, 1512, 1487, 1467,	1422,	1340, 1238,
1161,	1132, 1098,	1079, 1038, 1004,	935 cm	a.
RMNXH	a 300 ΙΊΗζ	(CDC13) í: 6,70	(s,lH),	6 j, 33	(s,lH), 6,11

(s,2H), 5,81 (dd,2H), 4,80 (d,1H,J=3,2Hz) , 4,58-4,51 (m,3H), 4,42 (d,lH,J=5,4Hz), 4,34 (d,1H,J=7,5Hz), 4,31 (m,lH), 4,08 (m,lH), 4,00 (dd,lH,J=4,3 e 10,1Hz), 3,52 (s,6H), 3,53-3,07 (m,8H), 2,91-2,79 (m,lH), 2,50 (s largo,6H), 1,20 (d,3H,J=4,9 Hz) .

Espectro de massa (FAB), m/e, 704. C₃₄H₄₁NO_1S requer = = 704.

a) 4J r(2-dimetilamino-etil)carbamato de etoposido

Repetiu-se a técnica descrita no Exemplo 26a) utilizando 0,56 ml (5,10 mmoles) de 2-dimeti1aminoeti1amina em vez de 2-dimeti1aminoetanol para se obter, após eliminação do acetonitrilo, um sólido bruto. Dissolveu-se este sólido em cloreto de metileno e submeteu-se a uma cromatografia rápida sobre gel de sílica utilizando como agente de eluição em gradiente metanol em cloreto de metileno (1 -> 107.). Obtiveram-se 1,71 g (rendimento 71,57.) do composto do título puro sob a forma de um sólido incolor.

I.V. (KBr) 1776, 1736, 1603, 1507, 1486, 1465, 1422, 1383, 1338, 1236, 1165, 1134, 1102, 1080, 1042, 1006 cm¹.

RMNⁱH a 300 MHz (CDC1₃) 5 6,81 (s,lH), 6,54 (s,lH), 6,24 (s, 2H), 5,97 (d,2H), 5,79 (t 1 argo,1H,NH), 4,88 (d , 1H,J=3,4Hz) , 4,73 (q,lH,J=4,9Hz), 4,5B-4,50 (m,2H), 4,41 (m,lH), 4,24-4,13 (m,2H), 3,71 (m,lH), 3,67 (s,6H), 3,57 (m,ÍH), 3,44-3,20 (m, 6H), 2,91-2,79 (m,lH), 2,52 (t largo,2H), 2,28 (s, 6H) , 1,37 (d,3H,J=4,9Hz).

Espectro de massa (FAB), m/e, 703 (M*+H). C₃x»H^₃N₌Di^ requer M* = 702.

b)	Cloridrato. do 4'-(2-dimetilamino-eti1)carbamato de etoposido
Sob	atmosfera de azoto, arrefeceu-se até à temperatura de 0°C
uma	solução de 503,7 mg (0,717 mmole) do composto obtido na

alínea a) descrita antes em 125 ml de cloreto de metileno anidro. A esta solução adicionou-se, gota a gota e com agitação magnética, 0,72 ml (0,72 mmole) de uma solução 1,0M de ácido clorídrico anidro em éter etílico. Agitou-se a mistura reaccional durante 30 minutos à temperatura ambiente, tratou

-se com 350 ml de éter etílico e separou-se o precipitado resultante por filtração e secou-se sob vazio, obtendo-se 395 /

e mg (rendimento 757.) do composto do título purD sob a forma de um sólido incolor.

I.V. (KBr) 1776, 1739, 1604, 1510, 1485, 1466, 1422, 1390,

1338, 1237, 1164, 1133, 1099, 1080, 1039, 1005 cm~^x.

RMIM^XH a 300 MHz (CDC1₃/DMS0-d6 gota) 6 7,32 (t largo,lH),

6,44 (s,lH), 6,02 (s,lH), 5,78 (s,2H), 5,51 (s,2H), 4,56 (d, lH,J=4,2Hz), 4,50 (d,1H,J=3,3Hz) , 3,46 ( d,1H,J=3,9Hz), 4,26 (q,lH,J=4,9Hz), 4,10 (d , 1H,J = 5,3Hz), 4,04 (d , 1H,J=7,6Hz),

3,98 (m,lH), 3,76 (m,lH), 3,70 (dd,lH), 3,18 (s,6H) , 3,20-2,70 (m,8H), 2,39 (s,6H), 0,88 (d,3H,J=4,9Hz).

Espectro de massa (FAB), m/e, 703. C₃^H^₃N₃0x*HC1 requer Μ- + H = 703.

a ) zLÍ2--diflietil^mino-etil ) tiocarbamato de etoposido

Repetiu-se a técnica descrita no Exemplo 26a), utilizando 719 mg (5,10 mmoles) de cloridrato de 2-dimeti1aminoetanotiol em vez de 2-dimeti1aminoetanol. Observou-se que a reacção estava concluída decorridas três horas. Eliminou-se o dissolvente sob vazio, dissolveu—se o resíduo em cloreto de metileno e

submeteu-se a uma cromatografia rápida sobre gel de sílica utilizando como agente de eluição metanol a 57. em cloreto de metileno. Obtiveram-se 821 mg (rendimento 33,6%) do composto do título puro sob a forma de um sólido incolor.

I .V.	( KBr)	1775,	1732,	1604,	1510	, 1490, 1465,	1424, 1340,
1237,	1162,	1133,	1098,	1078,	1040,	1005, 933, 863, 765 cm'1.
RMNXH	a 300 MHz	(CDC1	3) í;	6,81	(s,lH), 6,51	(s,lH), 6,25

(s,2H), 5,97 (dd,2H), 4,89 (d,1H,J=3,4Hz), 4,73 (q,1H,J=5Hz), 4,64-4,60 (m,2H), 4,41 (m,lH), 4,24-4,13 (m,2H), 3,73 (m,lH), 3,67 (s,6H), 3,56 (m,lH), 3,41 (m,lH), 3,38-3,23 (m,3H), 3,02 (t,2H), 2,B9-2,79 (m,lH), 2,59 (t,2H), 2,26 (s,6H), 1,37 (d, 3H,J=5Hz).

b)

4'-(2-dimetilamino-etilitiocarbamato de

Repetiu-se a técnica descrita no Exemplo 26b), utilizando 459 mg (0,639 mmole) do composto obtido na alínea a) descrita antes. Após a adição de ácido clorídrico, reduziu-se o volume da mistura reaccional, sob vazio, até 20 ml e adicionaram-se depois 150 ml de éter. Separou-se o precipitado resultante por filtração e secou-se sob vazio, obtendo-se 373 mg (rendimento 817.) do composto do título puro.

I.V. (KBr) 1775, 1733, 1604, 1510, 1487, 1465, 1422, 1340, 1237, 1160, 1133, 1103, 1078, 1038, 1005 cm-¹.

RMN¹H a 300 MHz (CDC1₃/) 8 6,81 (s,lH), 6,50 (s,lH), 6,27 (s, 2H), 5,99 (dd,2H), 4,90 (d,1H,J=3,4Hz), 4,73 (q,1H,J=5Hz), 4,63-4,59 (m,2H), 4,43 (m,lH), 4,25-4,13 (m,2H), 3,73 (m,lH),

3,68 (s,6H), 3,56 (m,lH), 3,45-3,22 (m,8H), 2,90-2,80 (m,lH),

2,79 (s,6H), 1,37 (d,3H,J=5Hz).

Espectro de massa (FAB), m/e, 702 (Μ* + H). C_3AH_AiM0i_fl5 requer M* = 719.

4'-meti 1-su1fini1 acetato de etpppsido

A uma solução agitada com agitadpr magnético de 1,00 g (1,48 mmoles) do Exemplo 6 em 50 ml de cloreto de metilenp, adicionaram-se, à temperatura de -78*=Έ e sob atmosfera de azoto, 325 mg (1,51 mmoles) de ácido meta-c1oroperbenzóico (m-CFBA) a 807. fornecido por Aldrich e agitou-se a mistura reaccional durante uma hora à temperatura de -78^aC. Adicionaram-se mais 33 mg de ácido meta-c1oroperbenzóico e agitou-se a mistura reaccional durante uma hora à temperatura de -78=C depois do que se partilhou entre 100 ml de uma solução aquosa saturada de carbonato de hidrogénio e de sódio e extraiu com 5 50 ml de cloreto de metileno. Lavaram-se os extractos orgânicos reunidos com 100 ml de uma solução saturada de cloreto de sódio e secaram-se sobre sulfato de magnésio. Uma evaporação /

sob vazio forneceu 900 mg (rendimento 867.) do composto do título com uma pureza superior a 957. determinada por RMN e HPLC.

I.V. (KBr) 1769, 1603, 1506, 1486, 1466, 1422, 1337, 1237, 1160, 113.1, 1.100, 1078, 1038, .1005, 961 cm-¹.

RMN¹H a 300 MHz (CDC1₃) G 6,81 (s,lH), 6,51 (s,lH), 6,25 (s largo,2H), 5,95 (d,2H), 4,87 (d,lH), 4,72 (q,lH), 4,61-4,58 (m,2H), 4,40 (m,lH), 4,26-4,08 (m,3H), 3,82 (d,1H,J=13,2Hz), 3,70 (m,lH), 3,64 (s,6H), 3,55 (m,lH), 3,40 (m,lH), 3,33-3,25 (m,3H), 2,90-2,80 (m,lH), 2,83 (s,3H), 1,36 (d,3H,J=4,8Hz).

Espectro de massa (FAB), m/e, 693,1869 (M*+H). C₃₌H₃e,Dic>S requer 693,1853.

Utilizando os cloretos de ácido e os 4'-dimetilepipodofilotoxina-glucosidos (fórmula geral I) apresentados na lista seguinte, repete-se a técnica geral descrita no Exemplo 1 para se obterem os 4'-ésteres correspondentes.

Coaposto de fôrtula geral (I)

Cloreto de ácido

Produto

Cloreto dD ácido ciclo4'-ciclo-hexanoato

-hexanocarboxílico de etoposido

Cloreto do ácido ciclo4'-ciclo-propanoato

-propanocarboxílico de etoposido

Cloreto de 5-fluoro-44'-(5-fluoro-4-»etil )-etil-benzoílo benzoato de etoposido

	Cloreto	de	teni1-aceti 1 o	4'-fenil-acetato de etoposido
1	Cloreto	de	4-cianobenzoilo	4'-(4-cianD)ben2Dato
				de etoposido
	Cloreto	de	aetoxiaceti1 o	4’-aetoxiacetato de etoposido
	Cloreto	de	4-í4-aetoxifeni 1) -	4’-(4-eetoxifeni1(butirato de
	butiroílo		etoposido
-	Cloreto	de	4-nitrobenzoílo	4’-(4-nitro)ben2oato de
				etoposido
	Cloreto	de 2-«ercaptobenzoí1d	4'-(2-aercapto)benzoato de
				etoposido
Rj = CH3	Cloreto	de	6-acetaaido-hexanoilo	4'-(6-acetaaido)hexanoato de
				etoposido
Ri = CH3	Cloreto	de	2-quinoxalinocarbonilo	4'-(2-quinoxalinocarboxiloato)
				de etoposido
Ri = 2-tienilo	Cloreto	de	broaoacetilo	4'-broaoacetato de
				teniposido
1	Cloreto	de	aeti1-tioacetilo	4'-aetil-tioacetato de
				teniposido
V	Cloreto	de	4-diaetilaaino-	4'-(4-diaetilaaino)butirato
	butirilo		de teniposido
	Cloreto	de	isonicotinoilo	4'-isonicotinoato de teniposido
Ri - 2-tienilo	Cloreto	de	acriloilo	4'-acrilato de teniposido
	Cloreto	de	octanoilo	4’-octanoato de teniposido
	Cloreto	de	ben2oílo	4'-ben2Dato de teniposido

/ /

ϊ

Utilizando os álcoois descritos na lista seguinte, repete—se a técnica descrita no Exemplo 26 para se obterem os 4'-carbonatos correspondentes.

Álcool	Produto
Álcool alílico	4'-alil-carbonato de etoposido
Fend	4'-fenil-carbonato de etoposido
4-nitrofenol	4'-(4-nitro)fenil-carbonato de etoposido
2-broaoetanol	4'-(2-broao)etil-carbonato de etoposido
isopropanol	4'-isopropil-carbonato de etoposido

Utilizando as aminas descritas na lista seguinte, repete-se a técnica geral descrita no Exemplo 21 para se obterem os 4'-carbamatos correspondentes.

Aaina	Produto
fenilaaina	4'-(N-fenil)carbaaato de etoposido
piperídina	4'-piperidil-carbonil-etoposido
al i1aaina	4'-alil-carbaaato de etoposido
ben2ilaaina	4'-benzil-carbaaato de etoposido
1,1-diaeti1-hidrazina	4'-(l,l-dioetil)hidrazida de etoposido

etilenodiaaina

4’-(2-aainoetil)carbaaato de etoposido

Claims (44)

1. REIVINDICAÇÕES

   1.- Processo para a preparação de compostos de fórmula geral na qual

   R^ e R₂ representam, cada um, um grupo alquilo ou R^ e R₂ e o átomo de carbono ao qual se ligam representam um grupo cicloalquilo ou R^ repre/ { 69 senta um átomo de hidrogénio e R₂ representa um grupo alquilo alcenilo ^C2-10' ^cicl°^a4quilo C^_g , furilo, tienilo, arilo ^cg_^0 ^ou aralquilo ^c7_^₄; θ representa um grupo de fórmula geral -CfOÍ-R^, -C(O)-XR₄ ou -C (0)-NRt-Rg, em que X representa um átomo de oxigénio ou de enxofre; R^ representa um átomo de hidrogénio ou um grupo alquilo alcenilo C₂__2q cicloalquilo C

   3-6' ^aril° ^C6-10 aralquilo ou heteroarilo comportando cada um destes grupos, eventualmente, um ou mais substituinte(s) escolhido (s) entre átomos de halogéneo ou grupos hidroxi, alcoxi C. , , alcanoiloxi C. ,, ciano, l-o 1—0 amino, amónio quaternário, alquil (C^_₆)-amino, di-alquil (C^g )-amino, carboxilo, alquil (C^_₆) -tio, di-alquil (C^_g)-amino-alquil (C₂_^)-tio, mercapto, mercapto-tio, alcanoil (C. ,)-amino, nitro, alcanoílo C, ,, carbamoílo,

   1-b 1-6 azido, alquil (C^_g)-sulfóxido ou sulfona; os substituintes comportados pelos grupos arilo, aralquilo ou heteroarilo podem incluir, adicionalmente, grupos alquilo ^Cl-6^{; R}4 ^{tem 0 si<}9ⁿificado definido antes para o símbolo R^ excepto que não representa um grupo benzilo quando X representa um átomo de oxigénio, e R^ não representa um átomo de hidrogénio; ou R^ representa um grupo antraquinonil-2-metileno; e e têm o significado defenido antes para o símbolo R^ ou R^ representa um átomo de hidrogénio e R& representa um grupo amina, alquiKC., _r)-amina ou di-alquil (C. ^J-amiria; ou R_ e R,_

   -L-o f-b □ o e o átomo de azoto ao qual se encontrara ligados formam um núcleo tri- a hexagonal;

   ou dos seus sais aceitáveis sob o ponto de vista farmacêutico, ca racterizado pelo facto de se fazer reagir um composto de fórmula geral

   OH na qual e têm o significado definido antes, com um composto de fórmula geral

   Y - OH na qual

   Y tem o significado definido antes, ou com um agente de acilação seu equivalente.
2. 2.- Processo de acordo com a reivindicação 1, para a preparação de compostos de fórmula geral XII na qual R^ representa um átomo de hidrogénio, R£ representa um grupo alquilo f-enilo /

   V ou tienilo e Y representa um grupo de fórmula geral -C(O)R₃,

   -C(O)XR^ ou -CtONR^Rg, em que X representa um átomo de oxigénio ou de enxofre; R reoresenta um grupo cicloalquilo C, _r, alcenilo
3. 3 3-6 ^C2-2O' ^ci-io comportando, eventualmente, um ou mais substi tuintes escolhidos entre átomos de halogéneo ou grupos azido, ciano, alquil (C^_g)-tio, di-alquil (C/_g)-amino, di-alquil (C^_g)-amino-alquil (C_o -)-tio, amónio quaternário, alauil-(C. ,)-sulfóxido e fenilo comportando, eventualmente, um ou mais substituinte(s) escolhidos entre átomos de halogéneo ou grupos alquilo C. ,, hidróxido, alcoxi C. , , mercapto, alquil (C. ,)-tio, ciano ou nitro; fenil-alquilo C^_g, comportando, eventualmente, no núcleo fenílico, um ou mais substituinte (s) escolhido (s) entre os substituintes fenílicos citados antes; ou piridilo; R^ tem o significado definido antes para o símbolo R^ excepto que R^ não representa um átomo de hidrogénio nem um grupo benzilo quando X representa um átomo de oxigénio; ou R^ representa um grupo antraquinonil-2-metileno; e R<- e Rg representam, cada um, independentemente, um átomo de hidrogénio ou um grupo alquilo comportando, eventualmente, um ou mais substituinte(s} escolhido(s) entre átomos de halogéneo ou grupos hidroxi, alcoxi C^_g, ^mercaP^to' alquil (C^_g)-tio, ciano, amino, alquil (C^_g)-amino, di-alquil (C^_g)-amino ou azido; ou Rg representa um átomo de hidrogénio e Rg representa um grupo cicloalquilo Cg_g, alcenilo ^2-20' comportando, eventualmente, um ou mais substituinte(s) escolhido(s) entre os substituintes fenílicos citados antes oara o símbolo P.^, fenil-alquilo C. _r comportando o núcleo fenílico um ou mais substituinte(s) escolhico(s) entre os substituintes fenílicos citados antes para o símbolo R^, amino, alquil (C^_g)-amino, di-alcuil (C^_g)-amino ou piridilo; ou dos seus sais aceitáveis sob o ponto de vista farmacêutico, caracterizado pelo facto de se utilizar compostos iniciais correspondentemente substituídos.

   3.- Processo de acordo com a reivindicação 1, para a pre- paração de compostos de fórmula geral XII na qual representa um átomo de hidrogénio e R_? representa ura grupo metilo ou 2-tieni lo, caracterizado pelo facto de se utilizar compostos iniciais correspondentemente substituídos.
4. 4.- Processo de acordo com a reivindicação 1, para a preparação de compostos de fórmula geral XII na qual Y representa um grupo de fórmula geral -C(O)R₂, na qual R^ representa um grupo alquilo comportando, eventualmente, um ou mais substituin- te (s) escolhido(s) entre átomos de halogéneo ou grupos azido, amónio quaternário, alquil (C₁_g)-tio, alquil -sulfóxido, di-alquil (C^_₆)-amino , di-alquil -amino-alquil (0₂_θ)-tiol ;

   alcenilo ^C2-?o' ^ou pitldilo, ou dos seus sais aceitáveis sob o ponto de vista farmacêutico, caracterizado pelo facto de se utilizar compostos iniciais correspondentemente substituídos.
5. 5-73

   5. - Processo de acordo com a reivindicação 4, para a preparação de compostos de fórmula geral XII na qual R^ representa um átomo de hidrogénio e R₂ representa um grupo metilo, caracterizado pelo facto de se utilizar compostos iniciais correspondentemente substituídos.
6. 6. - Processo de acordo com a reivindicação 5, para a preparação de compostos de fórmula geral XII na qual R^ representa um grupo dimetil-amino-etil-tio-etilo, ou dos seus sais aceitáveis sob o ponto de vista farmacêutico, caracterizado pelo facto de se utilizar compostos iniciais correspondentemente substituídos.
7. 7. - Processo de acordo com a reivindicação 6, caracterizado pelo facto de se preparar o cloridrato a partir de compostos iniciais apropriadamente substituídos.
8. 8. - Processo de acordo com a reivindicação 5, para a preparação de compostos de fórmula geral XII na qual R^ representa um grupo heptilo, caracterizado pelo facto de se utilizar compostos iniciais correspondentemente substituídos.
9. 9. - Processo de acordo com a reivindicação 5, para a preparação de compostos de fórmula geral XII na qual R^ representa um grupo bromometilo, caracterizado pelo facto de se utilizar compostos iniciais correspondentemente substituídos.
10. 10. - Processo de acordo com a reivindicação 5, para a pre paração de compostos de fórmula geral XII na qual R^ representa um grupo 3-bromopropilo, caracterizado pelo facto de se utilizar compostos iniciais correspondentemente substituídos.
11. 11. - Processo de acordo com a reivindicação 5, para a pre paração de compostos de fórmula geral XII na qual representa um grupo 3-iodopropilo, caracterizado pelo facto de se utilizar compostos iniciais correspondentemente substituídos.
12. 12. - Processo de acordo com a reivindicação 5, para a pre paração de compostos de fórmula geral XII na qual R^ representa um grupo 3-azidopropilo, caracterizado pelo facto de se utilizar compostos iniciais correspondentemente substituídos.
13. 13. - Processo de acordo com a reivindicação 5, para a preparação de compostos de fórmula geral XII na qual R^ representa um grupo metil-tio-metilo, caracterizado pelo facto de se utilizar compostos iniciais correspondentemente substituídos.
14. 14. - Processo de acordo com a reivindicação 5, para a preparação de compostos de fórmula geral XII na qual representa um grupo metil-sulfinil-metilo, caracterizado pelo facto de se uti lizar compostos iniciais correspondentemente substituídos.
15. 15,-

    15. - Processo de acordo com a reivindicação 5, para a preparação de compostos de fórmula geral XII na qual F/ representa um grupo 3-(N,N-dimetilamino)-propilo, ou dos seus sais aceitáveis sob o ponto de vista farmacêutico, caracterizado pelo facto de se utilizar compostos iniciais correspondentemente substituídos.
16. 16. - Processo de acordo com a reivindicação 15, caracterizado pelo facto de se preparar o cloridrato a partir dos compostos iniciais apropriadamente substituídos.
17. 17. - Processo de acordo com a reivindicação 5, para a preparação de compostos de fórmula geral XII na qual F/ representa um grupo 3-amõnio-acetato-propilo, caracterizado pelo facto de se utilizar compostos iniciais correspondentemente substituídos.
18. 18. - Processo de acordo com a reivindicação 5, para a preparação de compostos de fórmula geral XII na qual R^ representa um grupo alcenilo ^2-20’ ^caracteri^za^° Ρθΐο facto de se utilizar compostos iniciais correspondentemente substituídos.
19. 19. - Processo de acordo com a reivindicação 18, para a preparação de compostos de fórmula geral XII na qual R^ representa um grupo etileno, caracterizado pelo facto de se utilizar compostos iniciais correspondentemente substituídos.
20. 20. 76

    20.- Processo de acordo com a reivindicação 18, para a preparação de comoostos de fórmula geral XII na cjual R-. representa

    Z Z um grupo -CH^ (CH₂ ) gCH=CHCH₂Cr?=CH (CH^ ) 4^3 , caracterizado pelo facto de se utilizar compostos iniciais correspondentemente substi tuídos.
21. 21.- Processo de acordo com a reivindicação 5, para a preparação de compostos de fórmula· geral XII um grupo fenilo, caracterizado pêlo facto de na qual R^ representa se utilizar compostos iniciais correspondentemente substituídos.
22. 22. - Processo de acordo com a reivindicação 5, para a preparação de compostos de fórmula geral XII na qual R^ representa um grupo 4-piridilo, ou dos seus sais aceitáveis sob o ponto de vista farmacêutico, caracterizado pelo facto de se utilizar compostos iniciais correspondentemente substituídos.
23. 23. - Processo de acordo com a reivindicação 22, caracterizado pelo facto de se preparar o cloridrato a partir de compostos iniciais apropriadamente substituídos.
24. 24. - Processo de acordo com a reivindicação 1, para a preparação de compostos de fórmula geral XII na qual Y representa um grupo de fórmula geral -CÍOJ-XR^, na qual X representa um átomo de oxigénio ou de enxofre e R representa um grupo alquilo

    C comportando, eventualmente, um ou mais substituinte (s) lhido(s) entre átomos de halogéneo e grupos di-alquil esço-nitrobenzilo ou antraquinonil-2-metileno, ou dos seus (C^_g /amino,ρεβίε aceitãveis sob o ponto de vista farmacêutico, caracterizado de se utilizar compostos iniciais correspondentemente pelo facto substituídos.
25. 25.- Processo de acordo com a reivindicação 24, para a preparação de compostos de fórmula geral XII na qual R^ representa um átomo de hidrogénio e R^ representa um grupo metilo, caracterizado pelo facto de se utilizar compostos iniciais correspondentemente substituídos.
26. 26. - Processo de acordo com a reivindicação 25, para a preparação de compostos de fórmula geral XII na qual X representa um átomo de oxigénio, caracterizado pelo facto de se utilizar compostos iniciais correspondentemente substituídos.
27. 27. - Processo de acordo com a reivindicação 26, para a preparação de compostos de fórmula geral XII na qual R^ representa um grupo metilo, caracterizado pelo facto de se utilizar compostos iniciais correspondentemente substituídos.
28. 28. - Processo de acordo com a reivindicação 26, para a preparação de compostos de fórmula geral XII na qual R^ representa um grupo 2,2,2-tricloroetilo, caracterizado pelo facto de se utili7 zar compostos iniciais correspondentemente substituídos.
29. 29.- Processo de acordo com a reivindicação 26, para a preparação de compostos de fórmula geral XII na qual F/ representa um grupo p-nitrobenzilo, caracterizado pelo facto de se utilizar composto iniciais correspondentemente substituídos.
30. 30.- Processo de acordo com a reivindicação 25, para a preparação de compostos de fórmula geral XII na qual R^ representa um gruDo antraquinonil-2-metileno, caracterizado pelo facto de se utilizar compostos iniciais correspondentemente substituídos.
31. 31.- Processo de acordo com a reivindicação 24, para a preparação de compostos de fórmula geral XII na qual R₄ representa um grupo 2-(dimetilamino)-etilo, ou dos seus sais aceitáveis sob o ponto de vista farmacêutico, caracterizado pelo facto de se utilizar compostos iniciais correspondentemente substituídos.
32. 32.- Processo de acordo com a reivindicação 25, para a preparação de compostos de fórmula geral XII na qual X representa um átomo de enxofre, caracterizado pelo facto de se utilizar compostos iniciais correspondentemente substituídos.
33. 33.- Processo de acordo com a reivindicação 32, para a preparação de compostos de fórmula geral XII na qual R^ representa um grupo 2-(dimetilamino)-etilo, ou dos seus sais aceitáveis sob o ponto de vista farmacêutico, caracterizado pelo facto de se utilizar compostos iniciais correspondentemente substituídos.
34. 34.- Processo de acordo com a reivindicação 1, para a preparação de compostos de fórmula geral XII na qual Y representa um grupo de fórmula geral -C(O)-NR₅R_g, na qual R_ e R_g representam, cada um, independentemente, um átomo de hidrogénio ou um grupo alquilo comportando, eventualmente, um ou mais substituintes escolhidos entre átomos de halogéneo e grupos di-alquil (C. ,)1-6

    -amino;

    ou R_g representa um átomo de hidrogénio e representa um grupo amino, ou dos seus sais aceitáveis sob o ponto de vista farmacêutico, caracterizado pelo facto de se utilizar compostos iniciais correspondentemente substituídos.
35. 35.- Processo de acordo com a reivindicação 34, para a preparação de compostos de fórmula geral XII na qual R^ representa um átomo de hidrogénio e R^ representa um grupo metilo, caracterizado pelo facto de se utilizar compostos iniciais correspondentemente substituídos.
36. 36.- Processo de acordo com a reivindicação 35, para a preparação de compostos de fórmula geral XII na qual R_c e R_r repre sentam, cada um, um grupo 2-cloroetilo, caracterizado pelo facto de sc utilizar compostos inici-ais correspondentemente substituídos.
37. 37. - Processo de acordo com a reivindicação 35, para a preparação de compostos de fórmula geral XII na qual Rg e Rg repre sentam, cada um, um átomo de hidrogénio, caracterizado pelo facto de se utilizar compostos iniciais correspondentemente substituídos.
38. 38. - Processo de acordo com a reivindicação 35, para a preparação de compostos de fórmula geral XII na qual Rg representa um átomo de hidrogénio e Rg representa um grupo metilo, caracterizado pelo facto de se utilizar compostos iniciais correspondentemente substituídos.
39. 39. - Processo de acordo com a reivindicação 35, para a preparação de compostos de fórmula geral XII na qual R_ e R. representam, cada um, um grupo metilo, caracterizado pelo facto de se utilizar compostos iniciais correspondentemente substituídos.
40. 40. - Processo de acordo com a reivindicação 35, para a preparação de compostos de fórmula geral XII na qual Rg representa um átomo de hidrogénio e Rg representa um grupo 2-(dimetil-amino)-etilo, ou dos seus sais aceitáveis sob o ponto de vista farmacêutico, caracterizado pelo facto de se utilizar compostos iniciais correspondentemente substituídos.
41. 41. - Processo de acordo com a reivindicação 35, para a preparação de compostos de fórmula geral XII na qual -Rg representa um átomo de hidrogénio e Κθ representa uma função amina, caracterizado pelo facto de se utilizar compostos iniciais correspondentemente substituídos.

    na qual e R^ têm o significado definido antes, caracterizado pelo facto de se fazer reagir um 4'-dimetilepipodofilotoxina-glucosido de fórmula geral na qual R^ e R^ têm o significado definido antes, com fosgénio ou cloroformato de triclorometilo.
42. 43. - Processo de acordo com a reivindicação 42, para a preparação de compostos intermédios de fórmula geral XIII na qual

    R^ representa um átomo de hidrogénio e R^ representa um grupo metilo, caracterizado pelo facto de se utilizar compostos iniciais corresponcentemente substituídos.
43. 44. - Processo para a preparação de composições farmacêuticas com acção anti-tumoral, caracterizado pelo facto de se .misturar, como ingrediente activo, uma quantidade eficaz de um composto de fórmula geral I preparado pelo processo de acordo com a reivindicação 1, com um veículo aceitável em farmácia.
44. 45. - Processo de acordo com a reivindicação 44, caracterizado pelo facto de se utilizar como ingrediente activo o 4'-benziloxicarbonil-etoposido,