SI9400118A

SI9400118A - Sredstva proti parazitom, ki so v sorodu z milbemicini in avermektini

Info

Publication number: SI9400118A
Application number: SI9400118A
Authority: SI
Inventors: Bernard Frank Bishop; David Austen Perry; Michael Stephen Pacey
Original assignee: Pfizer
Priority date: 1994-03-09
Filing date: 1994-03-09
Publication date: 1995-10-31
Also published as: SI9400118B

Abstract

Spojine proti parazitom s formulo (I), kjer črtkana linija na položaju 22-23 predstavlja opcijsko vez, ki je lahko prisotna in je v tem primeru R1 odsoten, ali pa te vezi ni in je R1 H, OH, okso ali oksimino, ki je lahko neobvezno substituiran s Ci-Ce alkilno skupino, R2 je Ci-Ce alkil, C2-C8 alkenil ali C3-C8 cikloalkilna skupina, ali 3- do 6- členski heterociklični obroč, ki vsebuje žveplov ali kisikov atom, omenjeni obroč pa je nasičen ali pa popolnoma ali delno nenasičen in neobvezno substituiran z eno ali večimi C1-C4 alkilnimi skupinami ali halogenimi atomi. Izum razkriva, da imajo določene spojine, katere se dajo sintetično pridobiti iz poznanih avermektinov in derivati avermektinov, nepričakovano koristne biološke lastnosti.

Description

SREDSTVA PROTI PARAZITOM, KI SO V SORODU Z MILBEMICINI IN AVERMEKTINI

Ozadje izuma

Ta izum se nanaša na nova sredstva proti parazitom, ki so v sorodu z milbemicini in avermektini in na postopek za njihovo pripravo in pripravo sestavkov iz njih.

Avermektini so skupina s širokim spektrom sredstev proti parazitom, glede na dosedanje, kot so spojine C-076.

Izdelane so s fermentacijo rodu mikroorganizma StrePtomvces avermitilis pri aerobnih pogojih v vodnem hranljivem mediju, ki vsebuje anorganske soli in prilagodljive vire ogljika in dušika. Izolacija in kemijska struktura osmih posameznih komponent, ki tvorijo C-076 kompleks, je do podrobnosti opisana v British Patent Specification 1573955.

Kompleks C-076 se sestoji iz osmih različnih vendar tesno si sorodnih spojin, ki so opisane kot C-076 Ala, Alb, A2a, A2b, Bla, Blb, B2a in B2b. Vrsta a teh spojin se nanaša na naravne avermektine, kjer je (S)-sec-butil 25-substituent, vrsta b pa na tiste kjer je izopropil 25-substituent. Oznaka A” in B pomenita avermektine, kjer je 5substituent metoksi ali hidroksi, oziroma številka 1 pomeni avermektine, kjer je dvojna vez prisotna na 22-23 položaju, številka 2 pa pomeni avermektine, ki nimajo dvojne vezi 22-23, imajo pa vodik na položaju 22 in hidroksi na položaju 23.

V naSih evropskih patentnih prijavah 0214731, 0284176, 0317148, 0308145, 0340832, 0335541 in 0350187 so opisane priprave spojin, ki so sorodne avermektinom, imajo pa na položaju 25 skupino, ki niso izopropil ali (S )-sec-buti1 ne skupine, katere najdemo v izvirnih spojinah avermektinov odkritih v British Patent Specification 1573955. Take spojine lahko pripravimo s fermentacijo določenih vrst Strentomvces avermit i1 is v prisotnosti organskih kislin ali njihovih derivatov. Proizvodnja takih avermektinov je opisana v Journal of Antibiotics (1991 ), 44, No. 3, pp 357365 .

Milbemicini tvorijo drugo skupino sorodnih makrolidov, ki se razlikujejo od avermektinov v tem, da nimajo ostanka sladkorja vezanega na položaju C-13. Primeri takih spojin so opisani v UK Patent 1390336 in v evropskih patentih publikacijah 170006, 254583, 334484 in 410615. Poleg teh fermentacijskih produktov, mnogo publikacij opisuje spojine pridobljene iz teh fermentacijskih produktov po 1 sintetično, mnogi izmed njih pa imajo uporabne antiparazitsne lastnosti. Nekaj te kemije je pregledano v Macrolide Antibiotics. Omura S., Ed., Academic press, New York ( 1984) in Davies, H.G., Green, R.H. v Natural product Reports (1986), 3, 87-121 in Chem. Soc. Rev., 1991, , 271-339.

Opis izuma

Odkrili smo, da imajo določene spojine, katere se dajo sintetično pridobiti iz poznanih avermektinov in derivati avermektinov, nepričakovano koristne biološke lastnosti.

Glede na enega izmed vidikov tega izuma, so določene spoj ine s formulo (I):

kjer Črtkana linija na položaju 22-23 predstavlja opcijsko vez, ki je lahko prisotna in je v tem primeru R¹ odsoten, ali pa te vezi ni in je R¹ H, OH, okso ali oksimino, ki je lahko neobvezno substituiran s Cj-Cg alkilno skupino, R je

Cj-Cg alkil, C2~Cg alkenil ali C3~Cg cikloalkilna skupina, ali 3- do 6- člen heterociklični obroč, ki vsebuje žveplov ali kisikov atom, omenjeni obroč pa je nasičen ali pa popolnoma ali delno nenasičen in neobvezno substituiran z eno ali večimi C1-C4 alkilnimi skupinami ali halogenimi . 3 atomi, R je H ali OH in

R je H ali skupina, ki je lahko hidro1 1 z 1 rana in vivo, da pridobimo spojino, v kateri je R⁴ enak H,

R5 je OH ali neobvezno substituiran s skupino, ki je lahko hidro1izirana in vivo. da pridobimo spojino, v kateri je R$ enak OH in R⁶ je H ali C1-C4 alkil, ali R⁶ je H in R⁵ je amino, ki je neobvezno lahko substituiran z vsaj eno skupino izbrano izmed Cj-Cg alkilnih in acilnih (ki so lahko alkanoilne) skupin.

Ce okoliščine drugače ne zahtevajo, so vsi alkilni in cik 1oa1keni1 ni substituenti, ki imajo 3 ali več ogljikovih atomov, ravne ali razvejane verige. Izraz aril vključuje fenil, ki je lahko substituiran z vsaj eno Cj-C^ alkil, hidroksi, C|-Cg alkoksi, halo, nitro ali CF3 skupino.

V predmetnem izumu ima izraz alkil namen označiti tiste alkilne skupine, ki imajo enega do osem ogljikovih atomov, kot so metil, etil, propil, izopropil, butil, pentil, heksil in podobne, z ravnimi ali razvejanimi verigami.

Izraz alkanoil ima namen označiti tiste alkanoilne skupine, ki imajo enega do osem ogljikovih atomov, kot je formil, acetil, propionil, butiril, pentanoil, heksanoil in podobne.

Izraz karbamoil ima namen označiti tiste -CONI^Rg

O skupine, kjer sta R7 in R enaka ali različna in sta H, alkil, aril, heteroaril ali iz 4-8 členega obroča, ki vsebuje 1 ali vež 0, N ali S atomov.

Zgornja strukturna formula je prikazana brez določene stereokemij e. Vendar pa so med potekom postopkov sintetiziranja, ki so bili uporabljeni za pripravo takih spojin, produkti teh postopkov lahko mešanice ali stereoizomere. Se posebej pa stereoizomere na položajih 4-, 4-’, 5, 13- in 23-, ki so lahko orientirane ali a- ali βpredstavljajo take skupine, ki so pod ali nad glavno ravnino vsake molekule. V vsakem izmed teh primerov je namen tega izuma vključiti v svoj obseg obe konfiguraciji a- in β-.

V določenih primerih je uporabljen izraz epi, da razloči stereoizomere, ki se razlikujejo od konfiguracije naravne spojine, v enem določenem asimetričnem atomu ogljika.

Skupine, ki so lahko hidrolizirane in vivo. da dobimo odgovarjajoče spojine, v katerih je skupina lahko zamenjana s H so dobro poznane v farmacevtski stroki na splošno, mnoge različice teh skupin pa so primerne za uporabo v spojinah predmetnega izuma. Primeri takih skupin so C2~Cg alkanoil, aroil, karbamoil, Cj-Cg alkoksikarbonilne skupine in ostanki dikarboksi1 ne kisline in aminske kisline. Posebne skupine so identificirane v spodnjih Primerih. Prednostne spojine so 9 tiste, v katerih je R raven ali razvejan C|-Cg alkilna ali cikloalkina skupina, kot je cikloheksil, izopropil ali secbutil, R je H in opcijska vez na položaju 22-23 obstaja, ali pa te vezi ni in je H ali OH.

A λ

Oksimni monosaharidi v katerih sta R^J in R* enaka H, so Se posebej željeni. Najbolj željena spojina je 5-oksimino22,23-dihidro-25-cikloheksi1 avermektin BI monosaharid.

Posamezne spojine v obsegu tega ziuma so opisane v spodaj opisanih Primerih.

Se posebej prednostne spojine so oksimni monosaharidi v 3 4 katerih sta R in R H, najbolj prednostna spojina pa je 5-oksimino-22,23-dihidro-25-cik 1oheksi 1 avermektin BI monosahar i d.

Glede na drug vidik tega izuma, je določen postopek za pripravo take spojine, ki se sestoji iz sledečih korakov:

(i) oksidacija spojine s formulo (II):

kjer so črtkana linija, R¹, R² , R³ in R⁶ kot je opisano zgoraj, R³, pa je kot je opisano zgoraj ali pa je α-ο1eandrosi 1 oksi in je H, da dobimo spojino s formulo (111):

in (ii), kjer pustimo spojino s formulo (lil) <1 a reagira s spojino s formulo R -O-NH2» kjer je R definiran kot zgoraj in kjer je R³ «-olcandroz.il oksi, da hidrolizira pridobljeno spojino, da pridobimo spojino s formulo (l) in (111) če je potrebno zamenjati skupino R , kadar je zadnje omenjeni H, z omenjeno skupino, ki se da bidro Iizirati in vivo. da dobimo spojino kjer je R⁴ enak H, če je potrebno, postopek nadalje obsega enega ali več sledečih korakov pred ali po korakih (i), (ii) in (iii), (iv) substitucija skupine R'’ kadar je zadnje omenjeni OH, z omenjeno skupino, ki se da hidro1izirati in vivo. da dobimo spojino kjer je R³ enak OH, (v) oksidacija skupine R^, kadar je zadnje omenjeni OH do okso, (vi) rakcija spojine pridobljene iz koraka (v) s hidroksi1aminom, ki je lahko neobvezno zamenjan s Cj-Cg alkilno skupino, da pridobimo spojino v kateri je R¹neobvezno substituirani okso, (vii) hidriranje spojine, da reduciramo dvojno vez na položaju 22-23, v enojno vez, (viii) oksidacija spojine v kateri je R' enak H v skupino v kateri je R³ enak OH, (ix) oksidacija spojine v kateri je OH in je H, v spojino kjer je R^ okso R^ pa je odsoten in ali:

(x) redukcija spojine pridobljene iz (ix) da produciramo spojino v kateri je R^ epi-OH skupina, ali (xi) reakcija spojine pridobljene iz (ix) z Gringnardovim reagentom, da pridobimo spojino v kateri je R·* OH, R⁶ pa je alkil, ali (xii) izpostavljanje spojine pridobljene iz (ix) redukcijskemu aminiranju, da pridobimo spojino v kateri je R·' amino ali alkilamino skupina in če je potrebno aciliranje pridobljene spojine, vsaka prost« OH skupina pa je, če je to potrebno, med izvajanjem vstikeg« izmed zgornjih korakov zaSči t ena.

Priprava spojin po tem izumu je spodaj razložena s pomočjo i lustracij.

Spojine predmetnega izuma lahko pripravimo tako, da začnemo s spojinami s formulo (iv), katere pa lahko pripravimo, kot je opisano v prej omenjenih patentnih publi kac i j ah.

cu,h’

Spoj i na	I I a	Dvojna	vez	prisotna
Spoj i na	I It)	Dvojna	v e z	odsot na,
S poj i n a	1 I c	Dvo j na	vez	odko t na ,

_

OH .

Po 1 sintetične modifikacije zahtevane za pridobivanje spojin, podanih s formulo I, lahko zahtevajo zaporedne reakcije na položajih -4’, 4, 4a, 13, 22, 23, 25 in 5 in natančen vrstni red, v katerem se morajo te transformacije izvajati, pa lahko variira. Poleg tega, med oksidacijskimi in določenimi substitucijskimi reakcijami, opisanimi spodaj, je potrebno 5-hidroksi skupino zaščititi, da se izognemo oksidaciji ali substituciji na tem položaju. S tem, ko je ta položaj zaščiten, lahko reakcije izvajamo na 4- ali 4’ položajih, ne da bi vplivali na preostanek molekule. Kasneje po katerikoli zgoraj opisani reakciji, lahko zaščiteno skupino odstranimo in nezaščiten produkt izoliramo. Za spojine iz tega izuma, prednostno izvajamo konverzijo 5-hidroksi skupine v ketone ali ketoksime, po substituciji na položajih 4’, 23 in 4a. Zaščitena skupina, ki smo jo upoorabili na položaju 5- je idealna in jo lahko takoj sintetiziramo, ne bo prizadeta s strani reakcij na položajih 4- in 4’- in jo lahko odstranimo, ne da bi prizadeli katerokoli drugo funkcionalnost molekule. Prednostna vrsta zaščitene skupine tipa molekule avermektin je trisubstituirana sililna skupina, še bolje tri-nižjia 1 ki1 sililna skupina.

Poseben prednostni primer je skupina t e r tbuli1 dimeti1 si1i1. Reakcijo s katero pripravljamo zaščiteno spojino, izvajamo z zreagiranjem hidroksi spojine s primerno substituiranim si 1 i 1 a 1dehidom, prednostno je to sililklorid v aprotičnem topilu kot so na primer metilen klorid, benzen, toluen, etil acetat, tetrahidrofuran, dimeti1formamid in podobni. Da bi kar najbolj zmanjšali stranske reakcije, je v reakcijsko mešanico vključena baza, da reagira s kislino, ki se sprosti med potekom reakcije. Prednostne baze so amini, kot imidazol, piridin ali trietilamin. Baze morajo biti dodane v količini, ki je ekvimolarna količini sproščenega vodikovega halida; vendar ponavadi uporabimo več ekvivalentov amina. Reakcijo mešamo pri 0’C do temperature refluksa reakcijske mešanice in traja od cca. 0.5 do 16 ur. Sililno skupino odstranimo z obdelavo siliine spojine z brezvodnim piridin-hidrogen fluoridom v tetrehidrofuranu. Reakcija traja od 3 do 24 ur, pri temperaturi od cca. 0’C do cca. 25 ’C.

Alternativno lahko sililno skupino odstranimo z mešanjem silirane spojine v metanolu, katalizator pa je kislina, prednostno je to monohidrat sulfonske kisline, kot npr. monohidrat p-to1uensu1fonske kisline. Reakcija traja od cca.

do 12 ur, pri temperaturi od cca. 0’C do cca. 50’C. Spojine, ki imajo 23-hidroksi1 no skupino (ali zaščiten derivat), lahko koncentriramo v ali odgovarjajočo 22,23dihidro spojino ali alternativno v odgovarjajočo spojino, ki ima na položaju 22-23 dvojno vez, na način opisan v US patent 4328335. Zadnje spojine lahko hidriramo tudi v 22,23dihidro spojine s pomočjo Wi]konsinovega katalizatorja, pri pogojih opisanih v US patent 4199569.

Spojine tega izuma lahko pripravimo najprej s konvertiranjem prej omenjenih disaharidov Ila, b in c v njihove odgovarjajoče monosaharide s pomočjo hidrolize. Nadomestni način za pripravo monosaharidov obsega neposreden fermentacijski postopek, ki se začne z odgovarjajočim aglikonom, kot je opisan v EP Application 463677. Položaj 5hidroksi nato zaščitimo, da se izognemo substituciji na tem položaju tako, da se reakcija lahko nadaljuje na položaju 4’ ali 23. Ker je 4’-hidroksi bolj reaktiven kot 23-hidroksi, dodatna primerna zaščita na C-4’ dovoljuje izbrano reakcijo na C-23 .

Spojine predmetnega izuma lahko prpiravimo tudi z izvedbo zgornjih sintetičnih manipulacij na disaharidih 11 a, b ali c in na koncu s hidro1iziranjem le-teh v Željene monosahar ide.

Kadar želimo, lahko skupine aciliramo, za kar uporabimo reagente kot so kisli anhidridi, ali kisli kloridi in aminske baze, da dobimo estre, po postopkih znanih v izkušenim stroki. Hidroksi skupine lahko konvertiramo v okso skupine z oksidacijo z manganovim dioksidom ali tetrapropilamonijevim perutenatom. Okso spojino lahko obdelamo s hidroksilaminom ali O-substituirana, da iz nje analogno pridobimo odgovarjajoči oksim.

o

Spojine v katerih je R OH, pripravimo iz primernih 5zaščitenih derivatov, kjer najprej hidrooksiliramo 4a metilno skupino ob uporabi postopka opisanega v objavljeni

Japonski Patentni prijavi St. 83-599S8.

η

Spojine v katerih je R amino skupina, ki je neobvezno lahko substituirana z eno ali večimi alkilnimi ali acilnimi skupinami, lahko pripravimo z redukcijskim aminiranjem odgovarjajoče spojine v kateri je R okso, na primer z reakcijo z amonijevo soljo ali aminovo soljo in natrijevim cianoborohidridom na znane načine. Amino skupino lahko nato nadalje substituiramo, z ocetilacijo, na primer z uporabo ocetne kisline.

, R

Spojine v katerih je R eoi-OH skupina, lahko pripravimo z redukcijo take okso spojine. Okso spojino lahko konvertiramo , , S v spojino v kateri je R OH, R pa je alkil, z reakcijo z Grignardovim reagentom, na poznani način.

Spojine predmetnega izuma so učinkovite pri zdravljenju različnih stanj, povzročenih od strani endoparazitov, še posebej in vključno glistavost, ki je najbolj pogosta v skupini parazitnih črvov, opisanih kot Nematode, ki lahko povzročijo resne ekonomske izgube pri prašičih, ovcah, konjih in govedu, prav tako pa prizadanejo tudi domače živali in perutnino. Spojine so prav tako učinkovite proti drugim Nematodam, ki prizadanejo različne živalske vrste, kot so na primer:- Dirofilaria pri psih in različni paraziti, ki lahko nadlegujejo živo živino, spremljajoče živali kot so mačke in psi in tudi ljudi, vključno z gastro11 intestinalnimi paraziti, kot so Ancv1 os torna. Necator.

Ascaris, £i..rQiigylQide.s , Trichine.1 la, Capillaria. Toxocara, Toxascaris, Trichuris, Enterobius in paraziti, katere najdemo v krvi ali drugem tkivu in organih, kot so filarialni črvi in posebna intestinalna stanja

Strongvloides , Toxocara in Tr i chine1 la.

Spojino so prav tako posebnega pomena pri zdravljenju infekcij, ki jih povzročijo ektoparaziti, še posebej vključno z členonožnimi ektoparaziti pri ljudeh, živalih in pticah, kot so klopi, pršice, uši, bolhe, mušja jajčeca, insekti ki pikajo in grizejo in migracijske ličinke dvokrilcev, ki lahko prizadenejo govedo in konje.

Spojine so tudi insekticidi učinkoviti proti gospodinjskemu mrčesu, kot so ščurki, hišni molji, hrošči in hišne muhe, kot je tudi uporaben proti členonožcem v vsk1adiščenemu žitu in poljedeljskih rastlinah kot so majhni pajki, listne uši, gosenice in proti migracijskim ravnokri1cem, kot je kobilica. Odkrili smo, da so spojine iz predmetnega izume varne, poleg tega pa imajo nepričakovano visok potencial sistemske učinkovitosti proti bolham in drugim pomembnim členonožnim parazitom, na mačkah in psih.

Spojine s formulo (I) lahko uporabimo v obliki formulacije, primerne za specifično uporabo in s preudarkom glede na določeno vrsto živali gostiteljice, katero zdravimo in na vrsto parazita ali insekta. Spojine lahko administriramo v obliki injekcij, ali podkožno ali intramusku1arno, lahko pa jih administriramo tudi oralno v obliki kapsul, večjih pilul, tablet, tablet za žvečiti ali zdravilnih napitkov, ali pa tudi v obliki lokalne formulacije ali kot implant. Za lokalno uporabo lahko uporabimo kopel, spray, prašek, prah, oblive, madeže, inercijskih tekočin, šamonov, ovratnikov, priveskov in vprežnih elementov. Take formulacije pripravimo na običajne načine, v skaldu s standardno veterinarsko prakso. Torej kapsule, večje pilule ali tablete, lahko pripravimo z mešanjem aktivne učinkovine s primernim, pravilno razporejenim razredčilom ali nosilcem, dodatno pa vsebujejo sredstva za razkroj in/ali veziva, kot je škrob, laktoza, lojevec ali magnezijev stearat. Zdravilne napitke lahko pripravimo z diserzijo aktivne učinkovine v vodni raztopini skupaj z disperzijo močljivih sredstev, injekcijske formulacije lahko pripravimo v obliki sterilnih raztopin ali emulzij. Formulacije za oblive in madeže lahko pripravimo z raztapljanjem aktivne učinkovine v sprejemljivem tekočem nosilcu, kot je butil digol, tekoči parafin ali nehlapljivi ester z ali brez dodatka hlapljive komponente, kot je izopropanol. Alternativno lahko formulacije za oblive in madeže pripravimo z vkapsu1acijo, da pustimo ostanek aktivne učinkovine na površini kože živali. Te formulacije variirajo glede na težo aktivne spojine v odvisnosti od zdravljene živali gostiteljice, resnosti in oblike infekcije in telesne teže Živali gostiteljice. Spojine lahko administriramo kontinuirano, še posebej za profilakso, na poznane načine. Odmerki za oralno, parenteralno administracijo in administracijo oblivov in so v glavnem od cca. 0.001 do 10 mg na kg telesne teže živali, v enem samem odmerku ali v razdeljenih dozah za čas od 1 do 5 dni, kar je v glavnem zadovoljivo, seveda pa se bodo pojavljali primeri, kjer bo potrebno odmerke povečati ali zmanjšati, vse to pa spada v obseg predmetnega izuma.

Alternativno lahko spojine administriramo v živalski hrani, za ta namen pa lahko pripravimo koncentrirani prehrambeni aditiv ali mešanico, z,a mešanje z. normalno ž i va1 s ko hrano.

Za uporabo kot insekticid in za obdelavo poljedeljskih škodljivcev, spojine uporabimo v obliki spray-ev, prahu, obliki spray-ev, prahu, oblivov, emulzij in podobno, v skladu s standardno poljedeljsko prakso.

Za uporabo na ljudeh, spojine administriramo v obliki farmacevtsko sprejemljivih formulacij v skladu z normalno medicinsko prakso.

Priprava spojin v skladu s tem izumom je prikazana s pomožjo naslednjih Primerov.

1. Primer

22,23-Dihidroavermektin Bla monosaharid

22,23-Dihidroavermektin Bla (50 g) smo raztopili v mešanici izopropanola (100 ml) in žveplove kisline (1 ml) in 48 ur mešali pri sobni temperaturi v dušikovi atmosferi. Reakcijsko mešanico smo prelili na zdrobljeni led in ckstrahirali z dik 1 orometanom (2 x 200 ml). Združene ekstrakte smo sprali z vodno nasičeno raztopino natrijevega bikarbonata (100 ml), osušili na brezvodnem MgSO^ in koncentrirali v vakuumu, da smo dobili bele kristale (14 g), katere smo odstranili s filtracijo. Masni in NMR spekter sta bila popolnoma skladna s predloženo strukturo.

Sorodno spojino Blb smo pridobili na enak način, za začetni material pa smo uporabili 22,23-dihidroavermektin Blb.

2. Primer

5-okso-22,23-l)ihidroavermekt i n Bla monosaharid

22,23-Dihidroavermektin Bla monosaharid (14 g) smo raztopili v dietil etru (200 ml) in dodali smo aktiviran manganov dioksid (14 g). Mešanico smo mešali 4 ure pri sobni temperaturi, jo filtrirali in evaporirali do suhega v vakuumu, da smo pridobili naslovni produkt (11,4 g), katerega NMR spekter je bil popolnoma skladen s predloženo strukturo.

Sorodno spojino Blb smo pridobili na enak način, za začetni material pa smo uporabili 22,23-dihidroavermektin Blb monosahar i d.

3. Primer

5-oksimino-22,23-Dihidroavermektin Bla monosaharid

5-okso-22,23-Dihidroavermektin Bla monosaharid (1 g) smo raztopili v suhem piridinu (25 ml) in dodali smo hidroksi1amin hidroklorid (1 g). Premešano reakcijsko mešanico smo 4 ure greli pri refluksu in po ohladitvi prelili na zdrobljen led in ekstrahirali z dik 1orometanom (2 x 50 ml). Združene ekstrakte smo osušili na brezvodnem MgS(>4 in evaporirali v vakuumu, da smo dobili surovo smolo (1,1 g). Ta meterial smo očistili s pomočjo visokotlačne tekočinske kromatografije na stolpcu Dynamax-a (blagovna znamka), (41,4 x 250 mm, 0.008 mm, ODS-S1O2, Rainin) eluiranim z metanol-voda 83:17 pri 42 ml na minuto. Primerne frakcije smo združili in evaporirali do suhega, da smo dobili naslovni produkt v obliki bele trdne snovi, m.p. 180^e-190*C. Masni in NMR spekter sta bila popolnoma skladna s predloženo strukturo.

5-oksimino-22,23-Dihidroavermektin Blb monosaharid smo pridobili na enak način, za začetni material pa smo uporabili 5-okso-22,23-Dihidroavermektin Blb monosaharid

4. Primer

22, 23-Dihidro-25-cikloheksi1avermektin BI monosaharid

25-cik 1oheksi1avermekt i n BI (9,9 g) smo raztopili v toluenu (1 liter) in dodali smo \Vilkinsonov katalizator (tris(trifeni1fosfin)rodij (I) klorid) (9,25 g). Raztopino smo hidrirali na velikem Parrovem (blagovna znamka) stresalniku pri sobni temperaturi in pri tlaku vodika 344.75 kPa. Po treh urah smo reakcijsko posodo dekompresira 1i in jo pustili stati 12 ur, preden smo dodali nadaljnje odmerke katalizatorja (5 g) in hidrirali kot prej, nadaljnji 2 uri, po čemer ni ostalo nobenega začetnega materiala. Raztopino smo filtrirali, evaporirali do suhega v vakuumu in ostanek kromatografira 1i na SiC>2, eluiranim z dik 1orometanom in nato dik 1orometan;metano1 9:1. Surovi produkt smo še ponovno kromatografira 1i na Si02 (200 g) eluirali z dik 1orometan:metano1 19:1, da smo po evaporaciji topila v vakuumu, dobili neprečiščen 22,23-dihidro-25cik 1oheksί1avermektin BI v obliki rjave pene (10 g) Ta meterial smo nato raztopili v mešanici izopropanola (200 ml) in žveplove kisline (2 ml) in rjavo raztopino pri sobni temperaturi mešali 15 ur, jo nato prelili v mešanico ledu in vode (500 ml) in ekstrahirali z dik 1orometanom ( 3 x 200 ml). Organsko plast smo sprali z nasičeno raztopino vodnega kalijevega hidrogen karbonata (100 ml), vode (2 x 50 ml) osušili na brezvodnem MgSC>4 in evaporirali v vakuumu, da smo dobili surovo smolo, katero smo kromatografira 1i na SiO2 (100 g) eluiranim z dik 1orometanom in nato z diklorometan : etil acetat 2:1, da smo dobili naslovno spojino (8.2 g). Masni in NMR spekter sta bila popolnoma skladna s predloženo strukturo.

5.Pr i me r

5-oksimino-22, 23-Dihidro-25-cik 1oheksi1avermektin BI monosahar id

22, 23-dihidro-25-cik 1oheksi 1 avermektin BI monosaharid (8,2 g) smo, z uporabo manganovega dioksida v brezvodnem dietil etru, po postopku iz 2. Primera, oksidirali v 5-okso derivat. Surovi produkt smo očistili s kromatografijo na S i C>2 (50 g), da smo dobili 5-okso spojino (3,22 g) v obliki rumene pene. To smo raztopili v brezvodnem piridinu (60 ml) in dodali hidroksilamin hidroklorid (3.22 g). Po 15 urnem mešanju pri sobni temperaturi smo dodali preostali del hidroksilamin hidroklorida (3,22 g) in raztopino greli do 50°C, dokler ni bil porabljen ves začetni material.

Raztopino smo prelili v vodo (50 ml) in jo ekstrahirali z dietil etrom (3 x 50 ml). Organsko plast smo sprali z vodo, nasičeno raztopino natrijevega klorida, osušili na brezvodnem natrijevem sulfatu in evaporirali do suhega v vakuumu. Surovi produkt smo kromatografira 1i na S1O2 (25 g) eluiranim z diklorometan : etil acetat 4:1 in na koncu očistili z visokotlačno tekočinsko kromatografijo na Dynamax stolpcu (41,4 x 250 mm, 0,008 mm ODS-S1O2, Rainin) eluiranim z metano1:voda 9:1 pri 65 ml na minuto. Primerne frakcije smo združili in jih evaporirali v vakuumu, da smo dobili naslovno spojino (1.53 g). Masni in NMR spekter sta bila popolnoma skladna s predloženo strukturo.

6. Primer

25-cik 1oheksi1avermektin B2 monosaharid

25-cik 1 oheksi 1 avermektin B2 (10 g) smo suspendirali v izopropanolu (100 ml) in nato dodali raztopino žveplove kisline (2 ml) v izopropanolu (100 ml). Po 24 urnem mešanju pri sobni temperaturi smo čisto raztopino prelili na led (600 g) in ekstrahirali z dik 1orometanom (2 x 100 ml). Organsko plast smo osušili na brezvodnem natrijevem sulfatu in evaporirali do suhega. Ostanek smo raztopili v tetrak1orometanu in raztopino shranili pri 4'C. Kristale, ki so se počasi izločili, smo periodično odstranjevali s filtracijo in ugotovili smo da gre za naslovno spo i i no

Masni in NMR spekter sta bila popolnoma skladna s predloženo strukturo.

7. Primer

5-oksimino-25-cik 1 oheksi1avermektin B2 monosaharid

Z uporabo postopkov iz primerov 2 in 3, smo 25cik 1 oheksi1avermektin B2 monosaharid konvertirali v nas 1ovno spoj i no. Masni in NMR spekter sta bila popolnoma skladna s predloženo strukturo.

8. Primer

25-cik 1oheksi1avermektin BI monosaharid

- cik 1oheksi1avermektin BI (20 g) smo raztopili v tetrahidrofuranu (250 ml) in nato dodali mešanico tetrahidrofurana (250 ml), vode (10 ml) in žveplove kisline (10 ml). Mešanico smo mešali 15 ur pri sobni temperaturi in jo nato prelili v mešanico ledu (500 g) in vode (1 1) in ekstrahirali z diklorometanom (2 x 500 ml). Organske plasti smo sprali z nasičenno raztopino vodnega natrijevega klorida, osušili na brezvodnem natrijevem sulfatu in evaporirali v vakuumu, da smo dobili peno. To smo krornatografira 1 i na SiO2 (150 g) eluiranim z etil acetat diklorometan 1:1, da smo dobili surovi produkt (13,3 g). Končno očiščenje smo dosegli z obratno fazo hplc (high pressure 1iquid chromatography -visokotlačna tekočinska kromatografija; Op.prev.) ob uporabi Dynatnax stolpca (41,4 x 250 mni, 0,008 mm ODS-S1O2, Rainin) eluiranim z metanol:voda 4:1 pri 70 ml na minuto, da smo dobili čisti nas 1ovno s no i i no. Masni in NMR spekter sta bila popolnoma skladna s predloženo strukturo.

9. Primer

5-oksimino-25-cikloheksilavermektin BI monosaharid

Z uporabo postopkov iz primerov 2 in 3, smo 25cik 1oheksi1avermektin BI monosaharid konvertirali v nas 1ovno soo i i no. Masni in NMR spekter sta bila popolnoma skladna s predloženo strukturo.

10. Primer

5-0-t-but ildimetilsili1-25-cik 1oheksi 1-22,23dihidroavermektin BI monosaharid

22, 23-dihidro-25-cik 1oheksi1-avermektin BI monosaharid (4.Pri mer) (12.1 g) in imidazol (7.2 g) smo raztopiil v suhem d imeti1formamidu (10 ml). V to raztopino smo pri sobni temperaturi dodali t-buti1 d imeti1 si1i1 klorid (7,9 g). Po 18 urah smo mešanico prelili v mešanico led-voda (200 ml) okisano na pH 2 z 2N MCI in ekstrahirali z dietil etrom (2 x 80 ml). Združene ekstrakte smo sprali z nasičeno vodno raztopino kalijevega bikarbonata (50 ml) in vodo (50 ml), osušili na brezvodnem natrijevem sulfatu in evaporirali v vakuumu, da smo dobili surovi produkt (14,9 g). Ta material smo nadalje očistili s kromatografijo na SiC>2 (Kieselgel 60, 230-240 mreža, Merck) (300 g) in eluirali z diklorometan etil acetat 9:1. Primerne frakcije smo združili in evaporirali do suhega, da smo dobili nas lovni produkt. NMR spekter je bil popolnoma skladen s predloženo strukturo.

11. Primer

5-okso-avermektin Bla

V dietil etru (50 ml) smo raztopili avermektin Bla (2,4 g) in dodali aktiviran manganov dioksid (2,0 g). Mešanico smo mešali 18 ur pri sobni temperaturi, jo filtrirali in evaporirali do suhega v vakuumu, da smo dobili nas lovni produkt. čigar NMR spekter je bil popolnoma skladen s predloženo strukturo.

12. Primer

5-oksimino-avermektin Bla

5-okso-avermektin Bla (800 mg) (11. Primer) smo raztopili v piridinu (10 ml) in dodali smo hidroksilamin hidroklorid (800 mg). Po 1 urnem mešanju pri sobni temperaturi smo mešanico prelili v mešanico ledu (50 g) in vode (50 ml) okisano s koncentrirano HC1 na pH 4 in ekstrahirali z d i k 1 o r orne t an (3 x 30 inl). Združene ekstrakte smo sprali z vodo (20 ml), osušili na brezvodnem natrijevem sulfatu in evaporirali do suhega pri zmanjšanem tlaku, da smo dobili surovi material (1 g). Ta material smo kromatografira 1 i na SiC>2 (Kieselgel 60, 230-400 mreža, Merck) (100 g) in eluirali z dik 1orometan - etil acetat 2:1 in končno očistili z visokotlačno tekočinsko kromatografijo, ob uporabi Dynamax stolpca (4 1,4 x 250 mm, 0,008 mm ODS-SiC>2, Rainin) eluiranim z metano1:voda 85:15 pri 70 ml na minuto. Primerne frakcije smo združili in evaporirali v vakuumu da smo dobili naslovno spo i i no. Masni in NMR spekter sta bila popolnoma skladna s predloženo strukturo.

13. Primer

5-oksimino-avermektin Bla monosaharid

5-oks imi no-avermekt i n Bla (50 mg) (12.Primer) sino raztopili v mešanici izopropano1 a (1 ml) in žveplove kisline (10 ml) in mešali 48 ur pri sobni temperaturi v dušikovi atmosferi. Nato smo dodali nasičeno vodno raztopino natrijevega bikarbonata (1 ml) in produkt ekstrahirali z etil acetatom (2x5 ml). Združene ekstrakte smo osušili na brezvodnem MgSO4 in jih koncentrirali v vakuumu. Dobljeni surovi produkt (25 g) očistili z visokotlačno tekočinsko kromatografijo v stolpcu Ultrasphere (blagovne znamka) (24 x 250 mm, 0.005 mm, ODS-SiC>2, Beckman) in eluirali z metanol:voda 85:15 pri 20 ml na minuto. Primerne frakcije smo združili, da srno dobili naslovni produkt. Masni in NMR spekter sta bila popolnoma skladna s predloženo strukturo.

14. Primer

4’-O-aceti1-25-cik 1oheksi1-22, 23-dihidroavermektin BI monosaharid

5-O-t-buti 1 d ime ti lsi1il-25-cikloheksi1-22,23dihidroavermektin BI monosaharid (10. Primer) (216 mg) smo raztopili v dik 1orometanu (25 ml), ki je vseboval piridin (400 mg). Nato smo v to raztopino počasi dodali ocetni anhidrid ( 255 mg) v d i k 1 oroine t anu (5 ml), pri sobni temperaturi in reakcijsko mešanico pustili stati 72 ur. Nato smo reztopino prelili v vodo (20 ml), organsko plast sprali z vodno raztopino citronske kisline (20%, 2 x 10 ml), nasičeno vodno raztopino kalijevega bikarbonata (2 x 10 ml), osušili na brezvodnem natrijevem sulfatu in evaporirali v vakuumu do suhega. Ta surovi produkt smo krornatografira 1 i na SiOo (25 g) eluiranim z diklorometan - etil acetat 9:1. Primerne frakcije smo združili in evaporiali v vakuumu, da smo dobili 4’-O-ac eti1 - 5-O-t-buti 1 dimeti 1 si1i 1 - 25 cik 1oheksi1-22, 23-dihidroavermektin BI monosaharid, katerega smo raztopili v metanolu (20 ml), ki je vseboval p-1o 1uensu1fonsko kislino (230 ml). Po 1 urnem mešanju pri sobni temperaturi smo dodali nasičeno vodno raztopino kalijevega bikarbonata, nato pa smo produkt ekstrahirali z dietil etrom (2 x 10 ml). Združene organske ekstrakte,smo osušili na brezvodnem natrijevem sulfatu in evaporirali v vakuumu do suhega, da smo dobili naslovni produkt v obliki belega prahu (139 mg), čigar NMR spekter je bil popolnoma skladen s predloženo strukturo. Ta melerial smo uporabili v naslednjem primeru brez nadaljnjega očiščevanja.

15. Primer

4’-O-ace t i1-5-oks i m i no-25-ci k 1oheks i1-22, 23dihidroavermektin BI monosaharid

4’-O-aceti1 -25-cik 1oheksi 1-22, 23-d ihidroavermektin RI monosaharid (139 ing) (14. Primer) smo oksidirali v 5-oksoderivat s pomočjo aktiviranega manganovega dioksida (140 mg) v dietil etru (20 ml) v skladu s postopkom opisanim v 2. primeru. V raztopino tega 4’-O-aceti 1 - 5-okso-25-cik 1oheksi1 22, 23-dihidroavermektin BI monosaharida v mešanici metanol - dioksan 1:1 (20 ml) smo dodali raztopino hidroksi1amin hidroklorida (176 mg) raztopljenega v vodi (5 ml). To mešanico smo pri temperaturi 40’C mešali 3 ure, preden smo jo pogasili z dodajanjem trdnega kalijevega bikarbonata (200 mg) in dietil etra (50 ml). Organske ekstrakte smo sprali z nasičeno vodno raztopino natrijevega klorida (10 ml), osušili na brezvodnem natrijevem sulfatu in evaporirali v vakuumu do suhega, da smo dobili surovi produkt. Ta material smo nato očistili s pomočjo kromatografije na SiO^ (Kieselgel 60, 230-400 mreža, Merck) (10 g) in eluirali z diklorometan - etil acetat 4:1. Primerne frakcije smo združili in evaporirali, da smo dobili željeno spojino, katero smo nadalje očistili s pomočjo visokotlačne tekočinske kromatografije na Ultrasphere (blagovne znamka) stolpcu (10 x 250 mm, 0.005 mm, ODS-SiCH, Beckman) eluirano z acetonitri 1 :metano1 :voda 71:14:15 pri 5 ml na minuto. Primerne frakcije smo združili in evaporirali do suhega, da smo dobili nas 1ovni produkt. v obliki bele trdne snovi (46 mg). Masni in NMR spekter sta bila popolnoma skladna s predloženo strukturo.

16. Primer

4’-okso-5-O-but ildimetilsili 1-25-cikloheks il-22, 23-dihidro avermektin BI monosaharid

5-O-butildimetilsilil — 25 — cikloheksi 1-22, 23dihidroavermektin BI monosaharid (10. Primer) (1.4 g) smo raztopili v dik 1orometanu (300 ml) pri sobni temperaturi, skupaj z N-metil morfo1in-N-oksidom (3,14 g) in tetra-npropi1amonij evim perrutenatom (233 mg). Dodali smo Dodali smo molekularno sito v prahu 0,4 nm (187 mg) in mešanico mešali. Po 1 uri smo dodali vodno raztopino natrijevega sulfita (50 ml, 5%) in ločene organske faze sprali z drugo porcijo vodne raztopine natrijevega sulfita (50 ml, 5%), vodo (2 x 50 ml) in nasičeno vodno raztopino natrijevega klorida (2 x 50 ml) in nato osušili na brezvodnem natrijevem sulfatu. Z evaporacijo topila v vakuumu, čemur je sledila kromatografija na SiC>2 (Kieselgel 60, 230-400 mreža, Merck) eluirano z diklorometan - etil acetat 9:1 in nato združevanje in evaporacija primernih frakcij, smo dobili naslovn i produkt. v obliki trdne snovi (857 mg). NMR spekter je bil popolnoma skladen s predloženo strukturo.

17. Primer

4’-ep i-5-Ο-t-butiIdimet i1 s i 1 i1-25-c i kloheks i 1-22, 23-dihidro avermektin BI monosaharid

4’-okso-5-0-t-but iIdi met i lsi 1 i1-25-cikloheksi1-22, 23dihidro avermektin BI monosaharid (200 mg) srno raztopili v metanolu (10 ml) pri 0°C in nato dodali natrijev borohidrid v enakomernih odmerkih med mešanjem. Po 15 minutah smo mešanico prelili v vodo, ekstrahirali z detil etrom (2 x 30 ml) in združene organske ekstrakte sprali z vodo (20 ml), nasičeno vodno raztopino natrijevega klorida (20 ml) in osušili na brezvodnem natrijevem sulfatu. Topilo smo v vakuumu evaporirali, da smo dobili nas 1ovn i produkt. v obliki bele trdne snovi, 141 mg. Masni in NMR spekter sta bila popolnoma skladna s predloženo strukturo.

18. Primer

4’-epi-25-cik 1oheksi1-22, 23-dihidroavermektin BI monosahar i d

4’-e pi-5-O-t-buti1 dimeti 1 si 1 i1 - 22, 23-dihidro avermektin BI monosaharid 141 mg srno raztopili v metanolu (20 ml), ki je vseboval p-to1uensu1fonsko kislino (200 mg). Po 18 urah smo reakcijsko mešanico naalkalili z dodajanjem nasičene vodne raztopine kalijevega bikarbonata (20 ml) in ekstrahirali z dietil etrom (2 x 50 ml). Združene ekstrakte smo sprali z vodo (20 ml), nasičeno vodno raztopino natrijevega klorida (20 ml), osušili na brezvodnem natrijevem sulfatu in evaporirali v vakuumu, da smo dobili surovi produkt. Ta meterial smo nato kromatografira 1i na SiC>2 (kieselgel 60, 230-400 mreža, Merck (2 g) eluirali z diklorometan - etil acetat 4:1 in združili primerne frakcije, nato pa evaporirali v vakuumu, da smo dobili naslovni produkt (100 mg). Masni in NMR spekter sta bila popolnoma skladna s predloženo strukturo.

19. Primer

4’-epi-5-okso-25-cik 1oheksi1-22, 23-dihidroavermektin BI monosahar i d

4’-epi-25-cik 1oheksi1-22 , 23-dihidroavermektin BI monosaharid (196 mg) smo oksidirali z aktiviranim manganovim dioksidom, v skladu s postopkom opisanim v 2. Primeru. NMR spekter produkta (160 mg) je bil popolnoma skladen s predloženo strukturo.

20. Primer

4’-epi-5-oksimiηο-25-cikloheksi1-22, 23-dihidroavermektin BI monosaharid

4’-e pi-5-okso-25-cik 1oheksi 1-22, 23-dihidroavermektin BI monosaharid (160 mg) smo obdelali s hidroksi1amino hidrok1 oridom (150 mg) v mešanici metanol - dioksan - voda v razmerju 1:1:0,5 (25 ml) in produkt ekstrahirali, v skladu s postopkom opisanim v 15. Primeru. Material smo očistili s pomočjo visoko tlačne tekočincke kromatografije na Utrasphere stolpcu (10 x 250 mm, 0.005 mm, ODS-SiC^,

Beckman) eluirano z acetonitril - metanol - voda 61:14:25 pri 4 ml na minuto. Primerne frakcije smo združili in evaporirali v vakuumu, da smo dobili naslovni produkt v obliki trdne snovi (25 mg). Masni in NMR spekter sta bila popolnoma skladna s predloženo strukturo.

21. Primer

4a-hidroksi-25-cik 1oheksi1-22, 23-dihidroavermektin BI monosahar id

V raztopino 25-cik 1oheksi1 -22, 23-dihidroavermektin BI monosaharida (4. Primer) (5 g) v dik 1orometanu (150 ml) smo dodali raztopino selenovega dioksida (370 mg) in tbuti1 hid roperoksida (70%, 3,7 ml) v dik 1 orornetanu (50 ml) in vse skupaj 48 ur mešali pri sobni temperaturi. Nato smo dodali nadaljno količino raztopine, ki je vsebovala selenov dioksid (370 mg) in t-butilhidroperoksid (70%, 3,7 ml) v diklorometanu (50 ml) in nadaljevali z mešanjem nadaljnjih 24 ur. Po dodajanju vode (20 ml), smo reakcijsko mešanico ekstrahirali z dik 1orometanom (2 x 25 ml) in združene ekstrakte sprali z 10% vodno raztopino natrijevega bikarbonata (20 ml) in vodo (20 ml), osušili na brezvodnem natrijevem sulfatu in evaporirali v vakuumu, da smo dobili surovi produkt v obliki rumene pene, 4,5 g. Ta material smo nadalje očistili s kromatografijo na SiC>2 (Kieselgel 60, 230-400 mreža, Merck( (120 g) eluirali z diklorometan metanol 97:3 in zbrali 200 ml frakcij. Material, ki je eluiral v frakcijah 21-24 smo združili in evaporirali v vakuumu, da smo dobili naslovno sooiino v obliki belega praška. Masni in NMR spekter sta bila popolnoma skladna s predloženo strukturo.

22. Primer

4a-t-butiIdime tilsi1ioksi-25-cikloheksi 1-22, 23dihidroavermekt in BI monosaharid

4a-hidroksi-25-cik 1oheksi1-22, 23-dihidroavermektin BI monosaharid (1,26 g), trietilamin (0,2 ml) in 4dimetilaminopiridin (26 mg) smo raztopili z mešanjem v suhem diklorometanu (120 ml) in v odmerkih smo dodali t-buti1 dimeti1 si1i1 klorid (0,32 g). Vse skupaj smo 18 ur mešali v dušikovi atmosferi, nato pa smo dodali nadaljnje količine trietilamina (0,4 ml), 4-dimeti1aminopiridina (252 mg) in t-buti1 dimeti1 si1i1 klorida (0,64 g), nato pa smo mešali nadaljnje 3 ure. V reakcijo smo dodali vodno raztopino natrijevega bikarbonata (10%, 100 ml) in organsko plast ločili, sprali z vodo (100 ml), osušili na brezvodnem natrijevem sulfatu in evaporirali v vakuumu, da smo dobili surovi produkt. Ta materila smo očistili s kromatografijo na SiO₂ (Kieselgel 60, 230-400 mreža, Merck) (120 g) eluirali z diklorometan - metanol, 98:2 in zbrali 130 ml frakcij. Material, ki je eluiral v frakcije 12-14 smo združili in evaporirali v vakuumu, da smo dobili naslovno spojino v obliki bele trdne snovi (1,1 g). Masni in NMR spekter sta bila popolnoma skladna s predloženo strukturo.

23. Primer

4a-t-but iIdimetilsi1iloksi-5-okso-25-cikloheks i1-22, 23dih idroavermektin BI monosaharid

4a-t-but i ldime tilsi1iloksi-25-cikloheksi1-22, 2 3dihidroavermektin BI monosaharid (1,1 g) smo oksidirali z aktiviranim magnezijevim dioksidom (1 g) v etru (10 ml), v skladu s postopkom opisanim v 2.Primeru, da smo dobili naslovno spojino (0,9 g), čigar NMR spekter je bil popolnoma skladen s predloženo strukturo.

24. Primer

4a-hidroksi-5-oksimino-25-cikloheksi1-22, 23dihidroavermektin BI monosaharid

4a-t-bu t iIdi met ilsi1iloksi-5-okso-25-cikloheksi1-22, 23dihidroavermektin BI monosaharid (0,9 g smo raztopili v mešanici metanol - dioksan (1:1; 36 ml) nato pa smo dodali hidroksi1amin hidroklorid raztopljen v vodi (18 ml). To reakcijsko mešanico smo mešali in greli na 40°C 1 uro, jo nato koncentrirali na približno 20 ml s pomočjo evaporacije v vakuumu in produkt ekstrahirali z dietil etrom (2 x x50 ml). Združene ekstrakte smo sprali z vodno raztopino natrijevega bikarbonata (10%; 30 ml), vodo (50 ml), jo osušili na brezvodnem natrijevem sulfatu in evaporirali v vakuumu, da smo dobili surovi produkt. Ta material smo kromatografira 1i na S1O2 (Kieselgel 60, 230-400 mreža,

Merck) (50 g) eluirali z diklorometan - metanol, v razmerju med 99:1 in 96:4 in zbrali v l,5ure 50 ml frakcij. Frakcije 50-54 smo združili in evaporirali v vakuumu, da smo dobili material, katerega smo nadalje očistili z visoko tlačno tekočinsko kromatografijo na Dynamax stolpcu (24 x 250 mm, 0,005 mm, ODS-S1O2, Rainin) eluirali z metanol - voda 80:20 pri 20 ml na minuto. Primerne frakcije smo združili in evaporirali v vakuumu, da smo dobili nas 1ovno soo i i no v obliki belega praška. Masni in NMR spekter sta bila popolnoma skladna s predloženo strukturo.

25. Primer

4’-met i1-5-O-1-butIdimet ilsi1i1-25-cikloheksi1-22,23 — dihidroavermektin BI monosaharid

4’-okso-5-0-butiIdi metilsi1i1-25-cikloheksi 1-22. 23dihidro avermektin BI monosaharid (16. Primer) (174 mg) smo raztopili v suhem etru (15 ml) in ohladili na 0°C v dušikovi atmosferi. V to raztopino smo po kapljicah dodali raztopino metil magnezijevega bromida (0,115 ml, 3 M v dietil etru) in mešali, 1 uro. Nato smo reakcijo pogasili z dodajanjem vodne raztopine amonijevega klorida, (10 ml, 10%), organsko plast ločili, sprali z vodo (2 x 10 ml), osušili na brezvodnem natrijevem sulfatu in evaporirali v vakuumu, da smo dobili surovi produkt. Ta meterial smo nato kromatografira 1i na SiCH (Kieselgel 60, 230-400 mreža, Merck) (20 g) eluirali z diklorometan - etil acetat. 9:1. Posamezne frakcije smo združili in evaporirali v vakuumu, da smo dobili produkt, katerega smo uporabili brez nadaljnjega očiščevanja.

26. Primer

4’-met i1-25-cikloheksi 1-22,23-dihidroavermekt in BI monosaharid

4’-metil-5-O-t-butldimetilsilil-25-cikloheksi 1-22,23dihidroavermekt in BI monosaharid (74 mg) (26. Primer) smo raztopili v metanolu (20 ml), ki je vseboval p-toluensu1fonsko kislino (36 mg) in pri sobni temperaturi mešali 2 uri. Po tem času smo dodali kalijev bikarbonat v trdnem stanju (50 mg) in mešanico razredčili z vodo (20 ml) in ekstrahirali z dietil etrom (2 x 20 ml). Ekstrakte smo združili in sprali z vodo (20 ml), nasičeno vodno razxtopino natrijevega klorida (10 ml), osušili na brezvodnem natrijevem sulfatu in evaporirali v vakuumu, da smo dobili surovi produkt. Ta material smo kromatografira 1i na SiO₂(Kieselgel 60, 230-400 mreža, Merck) (10 g) in eluirali z diklorometan - etil acetat 4:1. Primerne frakcije smo združili in evaporirali v vakuumu, da smo dobili produkt, katerega smo nadalje očistili s pripravljalno visoko tlačno tekočinsko kromatografijo na stolpcu Ultrasphere (10 x 250 mm, 0.005 mm ODS-SiO₂, Beckman) in eluirali z metanol-voda 85:15 pri 5 ml na minuto. Primerne frakcije smo združili in evaporirali v vakuumu, da smo dobili naslovni produkt v obliki belega praška. Masni in NMR spekter sta bila popolrloma skladna s predloženo strukturo.

27. Primer

4’-meti1-5-okso-25-cikloheksi1-22, 23-dihidroavermektin BI monosahari d

4’-met i1-25-cikloheksi1-22,23-dihidroavermekt in BI monosaharid (225 mg) smo oksidirali z aktiviranim magnezijevim oksidom (250 mg) v dietil etru (50 ml), v skladu s postopkom opisanim v 2. Primeru, da smo dobili naslovno spoiino (208 mg), katerega NMR spekter je bil popolnoma skladen s predloženo strukturo.

28. Primer

4’-met i1-5-oksimino-25-cik 1oheksi 1-22, 23-dihidroavermektin BI monosaharid

V raztopino 4’-meti1 -5-okso-25 - cik 1oheksi 1 - 22 , 23dihidroavermektin BI monosahar i dri (208 mg) v mešanici metano1:dioksan 1:1 (40 ml) smo dodali raztopino hidroksi1amin hidroklorida (416 mg) v vodi (10 ml). To mešanico smo mešali pri sobni temperaturi 3 ure in nato dodali nadaljni odmerek hidroksi1amin hidroklorida (208 mg), nato pa smo z mešanjem nadaljevali pri temperaturi 50°C še 5 ur in nato reakcijo pogasili z dodajanjem nasičene vodne raztopine kalijevega bikarbonata (20 ml) in dietil etra (50 ml). Organski ekstrakt smo zaporedoma sprali z vodo (20 ml) in nasičeno vodno raztopino natrijevega klorida (20 ni 1 ) , osušili na brezvodnem natrijevem sulfatu in evaporirali do suhega v vakuumu, da smo dobili surovi produkt. Ta material smo nato kromatografira 1i na SiO2 (Kieselgel 60, 230-400 mreža, Merck) (10 g) in eluirali z diklorometan : etil acetat 4:1. Primerne frakcije smo združili in evaporirali, da smo dobili željeno spojino, katero smo nadalje očistili s pomočjo visoko tlačne tekočinske kromatografije na stolpcu Dynamax (10 x 250 mm, 0,005 mm, Ultrasphere (blagovna znamka) ODS-SiO2, Beckman, eluirano z acetonitri1:metano1:voda v razmerju 63:12:25 pri 5 ml na minuto. Primerne frakcije smo združili in evaporirali do suhega, da smo dobili naslovni produkt v obliki bele trdne snovi (63 mg). Masni in NMR spekter sta bila popolnoma skladna s predloženo strukturo.

29. Primer

5-0-t-but ildimetilsililoks imino-22, 23-dihidro-25cikloheksilavermektin BI monosaharid

1. Način 5-oksimino-22, 23-dihidro-25-cik 1oheksi1avermekt i n BI monosaharid (5,93 g) 5. Primer), t-butildimetilsi 1 i 1 klorid (2,11 g) in imidazol (1,9 g) smo raztopili v dik1orometanu (20 ml) in mešanico mešali 1 uro. Nato smo dodali na dodatne količine t-buti1 dimeti1 si 1 i 1 klorida (2,11 g) in imidazola (1,9 g) in reakcijsko mešanico mešali pri 40°C naslednje 0,5 ure. Mešanico smo sprali z vodo (2 X 20 ml), nasičeno vodno raztopino kalijevega bikarbonata (10 ml), osušili na brezvodnem natrijevem sulfatu in evaporirali do suhega v vakuumu, da smo dobili surovi produkt. Material smo očistili s kromatografijo na SiC>2 (Kieselgel 60, 230-400 mreža, Merck) (250 g) in eluirali z diklorometan : etil acetat 9:1. Primerne frakcije smo združili in evaporirali in dobili naslovno spojino v obliki belega praška (4,0 g).

2. Način 22, 23-dihidro-25-cik 1oheksi1avermektin BI monosaharid (4. Primer) smo oksidirali v 5-okso derivat s pomočjo manganovega dioksida v brezvodnem dietil etru, v

skladu s postopkom iz	2.	Primera. 5 -	okso-	22 ,	23-d i h i d ro-25-
c i k 1oheks i1 avermekt i n	BI	monosaharid	(5,0	g)	srno raztopili v
diklormetanu (200 ml)	i n	nato doda 1 i	O-( t	-

buti1 d imeti1 si1i1)-hidroksi1 amin (2,5 g) in ledeno ocetno kislino (10 ml). Reakcijsko mešanico smo 18 ur mešali pri sobni temperaturi in jo nato sprali z vodo (50 ml) in nasičeno vodno raztopino kalijevega bikarbonata (50 ml), jo osušili na brezvodnem natrijevem sulfatu in evaporirali do suhega v vakuumu, da smo dobili surovi produkt. Končno čistst smo dosegli s kromatografijo na SiC>2 (Kieselgel 60,

230-400 mreža, Merck) (250 g) in eluirali z heksan:dieti1 eter v razmerju med 2:1 in 1:1. Primerne frakcije smo združili in evaporirali, da smo dobili naslovno spoiino v obliki belega praška (3,9 g).

NMR spekter produktov pridobljenih na oba načina je bil popolnoma skladen s predloženo strukturo.

30. Primer

4’-acet i1amino-4’-deoksi-5-oksimino-22, 23-dihidro-25cikloheksi1avermektin BI monosaharid

V raztopino 5-0-1-buti1 dimeti1 si1i1oksimino-22 , 23dihidro-25-cik 1 oheksi1avermektin BI monosaharida (620 mg) (29. Primer) v dik 1orometanu (40 ml) smo dodali tetrapropi1amonijev perrutenat (100 mg) in N-meti1 morfo 1in N-oksin (600 mg). Reakcijsko mešanico smo pri sobni temperaturi mešali 1 uro in jo nato položili na vreh S1O2 stolpca za kromatografijo (Kieselgel 60, 230-400 mreža, Merck) (30 g) in eluirali z dik 1orometanom. Primerne frakcije smo združili in evaporirali, da smo dobili 4’-oksoderivat, katerega smo uporabili neposredno v naslednjem koraku pri raztapljanju v metanolu (10 ml), kamor smo dodali amonijev acetat (1.0 g), nato pa še v odmerkih natrijev cianoborohidrid, dokler TLC (thin liquid cromatography; tenkoplastna tekočinska kromatografija; Op. prev.) ni pokazala, da je redukcija izvršena v celoti. Topilo smo nato odstranili z evaporacijo pri znižanem tlaku, ostanek pa smo dali v diklorometan (10 ml) in nato dodali trietilamin (5001) in ocetni anhidrid (2001). Po 1 uri je TLC pokazala, da je redukcija izvršena v celoti. Mešanico smo evaporirali pri znižanem tlaku in ostanek dali v metanol (10 ml) in dodajali p-toluensulfonsko kislino v trdnem stanju, dokler ni raztopina imela pH 3,0. Po 1 uri je TLC pokazala da je zaščita odstranjena v celoti in reakcijsko mešanico smo prelili v mešanico vodne raztopine natrijevega bikarbonata in etra 1:1 (20 ml). Organske plasti smo ločili, jih osušili na brezvodnem natrijevem sulfatu in evaporirali do suhega v vakuumu, da smo dobili surovi produkt. Čistost smo dosegli z visoko tlačno tekočinsko kromatografijo na stolpcu Dynamax (24 x 250 mm, 0,005 mm, ODS-SiO2, Rainin) eliurano z metano1-voda v razmerju 85:15 pri 20 ml na minuto. Primerne frakcije smo združili in evaporirali v vakuumu, da smo dobili produkt, katerega smo nadalje očistili z visoko tlačno tekočinsko kromatografijo na stolpcu Dynamax (24 x 250 mm, 0,005 mm, ODS-SiO2, Rainin) eliurano z metanol-voda v razmerju 82:12 pri 20 ml na minuto. Primerne frakcije smo združili in evaporirali v vakuumu, da smo dobili nas lovno spo i i no v obliki belega praška. Masni in NMR spekter sta bila popolnoma skladna s predloženo strukturo.

31. Primer

5-oksimino-25-cikloheksilavermektin B2

25-cik 1oheksi1avermektin B2 (50 g) smo oksidirali v njegov 5-okso derivat s pomočjo aktiviranega manganovega dioksida (2 x 50g) v dietil etru (500 ml), v skladu s postopkom opisanim v 2. Primeru. Nadaljnjo reakcijo z hidroksilamin hidrokloridom (53 g) v vodeni mešanici metano1-dioksan-voda (1:1:1) (900 ml), smo izvajali v skladu s postopkom opisanim v 28. Primeru. Naslovni produkt smo izolirali iz reakcije tako, da smo reakcijsko mešanico prelili v vodo (500 ml) in ekstrahirali z dietil etrom (3 x 500 ml). Združene organske ekstrakte smo osušili na brezvodnem magnezijevem sulfatu in evaporirali do suhega v vakuumu, da smo dobili produkt (53 g), katerega smo neposredno uporabili v naslednjem primeru, brez dodatnega čiščenja.

32. Primer

5-oksimino-23-okso-25-cikloheksilavermektin B2 monosaharid

Mešanico 5-oksimino-25-cik 1oheksi1avermektina B2 ( 500 mg) in piridin dikromata (1,87 g) v dimeti1formamidu (25 ml) smo 18 ur mešali pri sobni temperaturi v dušikovi atmosferi. Reakcijjsko mešanico smo nato prelili v mešanico ledu (25 g) in vode (50 ml) in jo ekstrahirali z dietil etrom (2 x 50 ml). Združene etrove ekstrakte smo sprali z 2N hidroklorovo kislino (20 ml), vodo (50 ml), osušili na brezvodnem magnezijevem sulfatu in evaporirali do suhega v vakuumu, da smo dobili ostanek (350 mg), katerega smo raztopili v izopropanolu (25 ml), ki je vseboval 1% žveplove kisline v/v. Po 18 urnem mešanju te mešanice v dušikovi atmosferi, smo jo prelili na mešanico voda-led (50 ml) inprodukt ekstrahirali z dik 1orometanom (2 x 30 ml). Združene organske ekstrakte smo osušili na brezvodnem magnezijevem sulfatu in evaporirali v vakuumu do suhega, da smo dobili surovi produkt (300 mg), katerega smo očistili z visoko tlačno tekočinsko kromatografijo na stolpcu Zorbax (blagovna znamka) (21,2 x 250 mm, 0,008 mm, ODS-SiO2, Rainin) eluirano z metano1:voda 78:22 pri 9 ml na minuto. Primerne frakcije smo združili in evaporirali v vakuumu, da smo dobili nas 1ovno sno i i no v obliki belega praška. Masni in NMR spekter sta bila popolnoma skladna s predloženo strukturo.

33. Primer

5-oks imino-23-metoks iimino-25-cikloheksilavermekt in B2 monosahar i d

V raztopino 5-oksimino-23-okso-25-cik 1oheksi 1 avermektin B2 monosaharida (300 mg) (32.Primer) v dioksanu (150 ml), ki je vseboval natrijev acetat (320 mg) in metoksilamin hidroklorid (370 mg) smo dodali ledeno ocetno kislino (10 ml). Reakcijo smo 18 ur mešali pri sobni temperaturi in jo nato prelili v vodo (200 ml) in ekstrahirali z dik 1 orometanom (2 x 200 ml). Združene ekstrakte smo sprali z nasičeno vodno raztopino natrijevega bikarbonata (2 x 100 ml) in vodo (100 ml), osušili na brezvodnem megnezijevem sulfatu in evaporirali v vakuumu do suhega, da smo dobili surovi produkt, katerega smo kromatografira 1 i na S1O2 (Kieselgel 60, 230-400 mreža, Merck) (10 g) in eluirali z heksan : dietil eter v razmerju med 1:1 do 0:1. Primerne frakcije smo združili in evaporirali, da smo dobili surovi produkt (98 mg), katerega smo nato očistili z visoko tlačno tekočinsko kromatografijo na stolpcu Zorbax (21,2 x 250 mm, 0,008 mm, ODS-SiC^, Rainin) eluirano z metanol:voda 82:12 pri 9 ml na minuto. Primerne frakcije smo združili in evaporirali v vakuumu, da smo dobili naslovno spo i i no v obliki belega praška (60 mg). Masni in NMR spekter sta bila popolnoma skladna s predloženo strukturo.

34. Primer

4’-0-sukcionil-5-0-t-buti Idi me tilsililoksimino-25cik 1oheksi 1-22, 23-dihidroavermektin BI monosaharid

V raztopino 5-0-1-bu t i 1 d i ine t i 1 s i 1 i 1 oks i ni i no-22 , 23dihidro-25-cik 1 oheksi1-avermektin BI monosaharida (29. Primer) (530 mg), di izopropi 1 eti1amina (770 mg) in 4dime Li1aminopiridin (73 mg) v dik 1orometanu (50 ml) smo dodali anhidrid jantarne kisline (3,6 g). Dobljeno suspenzijo smo 10 minut sonicirali in nato 18 ur mešali pri sobni temperaturi in nato sprali z vodo (2 x 10 ml), osušili na brezvodnem natrijevem sulfatu in evaporirali do suhega v vakuumu, da smo dobili surovi produkt, katerega smo kromatografira 1i na SiO^ (Kieselgel 60, 230-400 mreža,

Merck) (20 g) in eluirali z diklorometan : etil acetat v razmerju ined 9:1 in 4:1. Primerne frakcije smo združili in evaporirali, da smo dobili trdno snov, katero smo z dik 1orometanom (20 ml) pomešali v blato, filtrirali in filtrat evaporirali v vakuumu do suhega, da smo dobili surovi produkt, tega pa smo nadalje očistili z visoko tlačno tekočinsko kromatografijo na stolpcu Dynamax (41,4 x 250 mm, 0,008 mm, ODS-SiC^, Rainin) eluirano pri 9 ml na minuto z metanol - voda 90:10, mešanica pa se je spremenila v 45 minutah na 95:5. Primerne frakcije smo združili in evaporirali v vakuumu, da smo dobili nas lovno spo jino v obliki belega praška (407 mg). Masni in NMR spekter sta bila popolnoma skladna s predloženo strukturo.

35. Primer

4’-O-sukc i onil-5-oksimino-25-cikloheksi 1-22, 23dihidroavermektin BI monosaharid

Raztopino 4’-O-sukcioni1-5-O-t-buti ldimet i lsi 1 i1oks i mi no25-cik)oheksil-22, 23-dihidroavermektin BI monosaharida (34. Primer) (50 mg) in p-1o 1uensu1fonske kisline (50 mg) v mešanici dioksan - voda 10:1 (11 ml) smo pri sobni temperaturi 2 uri mešali. To reakcijsko mešanico smo nato pogasili z dodajanjem nasičene vodne raztopine kalijevega bikarbonata (5 ml) in vode (10 ml) in produkt ekstrahirali z dielil etrom (3 x 20 ml). Združene organske ekstrakte smo sprali z vodo (3 x 100 ml), nasičeno vodno raztopino natrijevega klorida (5 ml) jih osušili na brezvodnem natrijevem sulfatu in evaporirali do suhega v vakuumu, da smo dobili surovi produkt, tega pa smo kromatografira Ii na SiO₂ (Kieselgel 60, 230-400 mreža, Merck) (0,5 g) in eluirali z etil acetatom. Primerne frakcije smo združili in evaporirali, da smo dobili trdno snov (46 mg), katero smo nadalje čistili z visoko tlačno tekočinsko kromatografijo na stolpcu Ultrasphere (10 x 250 mm, 0,005 mm, ODS-SiC^, Beckman) eluirano pri 5 ml na minuto z metanol-voda 80:20, razmerje se je po 20 minutah spremenilo na 85:15 in po 40 minutah na 90:10. Primerne frakcije smo združili in evaporirali v vakuumu, da smo dobili kalijevo sol nas 1 ovne spoiine v obliki belega prahu (32 mg). To spojino smo raztopili v dietil etru (10 ml), jo sprali z vodno raztopino citronske kisline (20% w/v, 5 ml), osušili na brezvodnem natrijevem sulfatu in evaporirali do suhega v vakuumu, da smo dobili naslovno spoiino v obliki belega praška (25 mg). Masni in NMR spekter sta bila popolnoma skladna s predloženo strukturo.

36. Primer

4’-O-(3-metoksikarbonilpropioni1)-5-oksimino-25-cikloheksi1 22, 23-dihidroavermektin BI monosaharid

Raztopino 4’-O-sukcioni1-5-0-t-but iIdi mrt i lsi 1 iloksimino22, 23-dihidro-25-cik 1oheksi1avermektin BI monosaharida (34.Primer) (50 mg) in p-to 1uensu1fonsko kislino (50 mg) v metanolu *10 ml) smo mešali eno uro pri sobni temperaturi.

To reakcijsko mešanico smo nato pogasili z dodajanjem nasičene vodne raztopine kalijevega bikarbonata (2 ml) in vode (10 ml) in nato produkt ekstrahirali z dietil etrom (3 x 10 nil). Združene organske ekstrakte smo sprali z vodo (3 x 5 ml), nasičeno vodno raztopino natrijevega klorida (2 x 5 ml), osušili na brezvodnem natrijevem sulfatu in evaporirali do suhega v vakuumu, da smo dobili surovi produkt, katerega smo k romatografira 1 i na S1O2 (Kieselgel 60, 230-400 mreža,

Merck) (1 g) in eluirali z diklorometan : etil acetat 9:1. Primerne frakcije smo združili in evaporirali, da smo dobili naslovno spojino v obliki belega praška. Masni in NMR spekter sta bila popolnoma skladna s predloženo strukturo.

37. Primer

4’-0-3-(4-met i1 piperaz i n-1-i1)karboni1propanoi 1 )- 5oksimiηο-25-cikloheksi1-22, 23-dihidroavermektin BI monosahar i d

V raztopino 4’-O-sukcioni1-5-0-tbutiIdi me tilsi1iloksimino-25-cikloheksil-22, 2 3dihidroavermektin BI monosaharida (34. Primer) (100 mg), 1-hidroksibenzotriazola (15 mg) in l-(3-dimetilaminopropil)3-eti1karbodiimida (24 mg) v suhem N, N-dimeti1formamidu (5 ml), smo dodali N-meti1 piperazin (11 mg) in mašanico mešali 18 ur pri sobni temperaturi. Nato smo jo prelili v vodo (20 ml) in produkt ekstrahirali z dietil etrom (3 x 10 ml). Združž.ene ekstrakte smo sprali z vodo (3 x 5 ml), nasičeno vodno raztopino natrijevega klorida (2x5 ml), osušili na brezvodnem natrijevem sulfatu in evaporirali v vakuumu do suhega, da smo dobili material, katerega smo nato krornatografira 1i na SiO₉ (Kieselgel 60, 230-400 mreža,

Merck) (10 g) in eluirali z diklorometan : mrtanol 95:5. Primerne frakcije smo združili in evaporirali, da smo dobili material (85 mg), katerega smo raztopili v metanolu (10 ml), ki je vseboval p-toluensulfonsko kislino (85 mg) in vse skupaj eno uro mešali pri sobni temperaturi. To reakcijsko mešanico smo nato pogasili z dodajanjem nasičene vodne raztopine kalijevega bikarbonata (5 ml) in vode (20 ml) in produkt ekstrahirali z dietil etrom (3 x 10 ml). Združene organske ekstrakte smo sprali z vodo (3 x 5 ml), nasičeno vodno raztopino natrijevega klorida (2 x 5 ml), osušili na brezvodnem natrijevem sulfatu in evaporirali v vakuumu do suhega, da smo dobili surovi produkt, katerega smo kroinatogra f i ra 1 i na S1O2 (Kieselgel 60, 230-400 mreža,

Merck) (10 g) in eluirali z diklorometan : metanol 95:5.

Primerne frakcije smo združili in evaporirali, da smo dobili naslovno spojino v obliki belega praška (52 mg). Masni in NMR spekter sta bila popolnoma skladna s predloženo s t rukturo.

38. Primer

4’-O-(3—(pirid—4—ilamino)karbonilpropanoi1)-5-oksimino-25cik 1oheksi1 — 22, 23-dihidroavermektin BI

V raztopino 4’-O-sukcioni1-5-0-tbut i ldimet ilsi1iloksimino-25-cikloheksi1-22, 23dihidroavermektin BI monosaharida (34. Primer) (100 mg),

1-hidroksibenzotriazo1 a (30 mg) in 1 -(3-dimetiIaminopropi1) 3-eti1 karbodiimida (48 mg) in diizopropiI eti1amina (39 mg) v suhem N,N-dimeti1formamidu (5 ml) smo dodali 4-aminopiridin (21 mg) in mešanico 18 ur mešali pri sobni temperaturi. Nato smo jo prelili v etil acetat (20 ml) in dobljeno raztopino sprali z vodo (3 x 10 ml), nasičeno vodno raztopino natrijevega klorida (2 x 5 ml), osušili na brezvodnem natrijevem sulfatu in evaporirali v vakuumu do suhega, da smo dobili material (90 mg), katerega smo nato raztopili v metannolu (10 ml), ki je vseboval p-to 1uensu1fonsko kislino (20 mg) in vse skupaj mešali eno uro pri sobni temperaturi. To reakcijsko mešanico smo pogasili z dodajanjem nasičebe vodne 'raz topine kalijevega bikarbonata (5 ml) in vode (20 ml) in produkt ekstrahirali z dietil etrom (3 x 10 ml). Združene organske ekstrakte smo sprali z vodo (3x5 ml), nasičeno vodno raztopino natrijevega klorida (2x5 ml) jih osušili na brezvodnem natrijevem sulfatu in evaporirali do suhega v vakuumu, da srno dobili surovi produkt, katerega smo kromatografira 1i na SiC^ (Kieselgel 60, 230-400 mreža,

Merck) (5 g) in eluirali z etil acetatom. Primerne frakcije smo združili in evaporirali do suhega v vakuumu, da smo dobili naslovno spojino v obliki belega praška (29 mg).

Masni in NMR spekter sta bila popolnoma skladna s predloženo st rukturo.

39. Primer

4’-O-(N,N’-bis-(9-fluoreni1 metoks ikarbon i1)1i z in i1-5-0-tbutildimet iIsi1i1oksimino-25-cik 1oheksi1-22, 23dihidroavermektin BI monosaharid

V raztopino N,N’-bis-(9-f1uoreni1 metoksikarboni1)1izina (1,32 g) v dik 1orometanu (250 ml) smo dodali disik 1oheksi1karbodiimid (230 mg) in mešanico mešali pri sobni temperaturi eno uro. Dobljeno suspenzijo smo nato sonicirali o,5 ure in nato filtrirali skozi plast Hyflo (blagovna znamka) in filtrat koncentrirali pri znižanem pritisku na volumen cca. 100 ml, da smo dobili raztopino željenega N,N’-bis-(9-fluorenilmetoksikarboni1)1 iz in anhidrida. V to raztopino smo nato dodali 5-O-tbut ildimet i lsi 1 iloksimino-22, 2 3-d i h i d ro-2 5 cik 1oheksi1avemektin BI monosaharid (29.Primer) (670 mg), diizopropi1 eti1amin (249 mg) in 4-dimeti1aminopirid i n (185 mg). Reakcijsko mešanico smo nato pri sobni temperaturi mešali 90 ur in jo nato koncentrirali do suhega pri znižanem pritisku, da smo dobili ostanek, katerega smo kromatografira 1i na S1O2 (Kieselgel 60, 230-400 mreža,

Merck) (200 g) in eluirali z dik 1orometanom, ki se je spremenil v diklorometan : etil acetat 9:1, ko smo zbrali 11. Primerne frakcije smo združili in evaporirali do suhega v vakuumu, da smo dobili naslovno spo i i no v obliki belega praška (850 mg). NMR spekter je bil popolnoma skladen s predloženo strukturo.

40. Primer

4’-O-(N,N’-bis-(9-fluoreniImetoksi karbonil)lizinil — 5 — oksimino-25-cikloheksi1-22, 23-dihidroavermektin BI monosaharid

4’-0-(N,N’-bi s-(9-fluoreniIme toks i karbon i 1 ) 1i z ini1-5-0-tbut iIdi met ilsi1iloksimino-25-cikloheksi 1-22, 23dihidroavermektin BI monosaharid (850 mg) (39. Primer) smo raztopili v metanolu (20 ml), ki je vseboval pto 1uensu1fonsko kislino (20 mg) i n vse skupaj mešali pri sobni temperaturi 2 uri. To reakcijsko mešanico smo pogasili z dodajanjem nasičene vodne raztopine kalijevega bikarbonata (5 ml) in vode (20 ml) in produkt ekstrahirali z dieti 1 etrom (3 x 10 ml). Združene organske ekstrakte smo sprali z vodo ( 3x5 ml), nasičeno vodno raztopino natrijevega klorida (2x5 ml), osušili na brezvodnem natrijevem sulfatu in evaporirali v vakuumu do suhega, da smo dobili surovi produkt, katerega smo nato kromatografira 1 i na SiO₂(Kieselgel 60, 230-400 mreža, Merck) (25 g) in eluirali z diklorometan : etil acetat 9:1, koncentracija pa se je spremenila na 4:1, ko smo zbrali 200 ml eluata. Primerne frakcije smo združili in evaporirali v vakuumu do suhega, da smo dobili naslovno snoiino v obliki belega praška (274 mg). NMR spekter je bil popolnoma skladen s predloženo strukturo.

41. Primer

4’-O-1isinil-5-oksimino-25-cikloheksi1-22, 23dihidroavermektin BI monosaharid

4’-O-(N,N’-bis-(9-fluorenilmetoksikarboni 1 ) 1izini1-5oksimi no-25-cik 1oheksi1 -22 , 23-dihidroavermektin BI monosaharid (274 mg) (40.Pri mer) smo raztopili v acetonitrilu (30 ml), ki je vseboval piperdin (150 mg) in mešanico mešali 8 ur pri sobni temperaturi. To smo nato koncentrirali do suhega v vakuumu, da smo dobili surovi produkt, katerega smo kromatografira 1i na SiCb (Kieselgel 60, 230-400 mreža, Merck) (25 g) in eluirali z diklorometan : etanol : 0,880 amonijeva raztopina 80:20:1. Primerne frakcije smo združili in evaporirali v vakuumu do suhega, da smo dobili naslovno spojino, le-to pa smo s pomočjo tbutanola zmrznili in osušili, da smo pridobili bel prašek (157 mg). Masni in NMR spekter sta bila popolnoma skladna s predloženo strukturo.

42. Primer

5-(t r i me t ilacetoksiloksimino)-25~cikloheksi1-22, 23dihidroavermektin BI monosaharid

V premešano raztopino 5-oksimino-25 - cik 1oheksi1 - 22, 23dihidroavermektin Rl monosaharida (5. Primer) (50 mg) v dik 1orometanu (2 ml), smo pri sobni temperaturi dodali trie ti lamin (701), nato pa še trimetί1aceti 1 klorid (801).

Po tem, ko smo raztopino pustili 18 ur, smo dodali vodno raztopino citronske kisline (10% w/v, 2 ml) in organske plasti ločili, sprali z nasičeno vodno raztopino natrijevega klorida (2 ml), osušili na brezvodnem natrijevem sulfatu in evaporirali v vakuumu do suhega, da smo dobili surovi produkt, katerega smo nato kroma t ogra f i ra 1 i na SiC>2 (Kieselgel 60, 230-400 mreža, Merck) (5 g) in eluirali z dietil etrom. Primerne frakcije smo združili in evaporirali do suhega v vakuumu, da smo dobili material (53 mg) katerega smo dalje očistili z visoko tlačno tekočinsko kromatografijo na stolpcu Dynamax (21.2 x 250 mm, 0,005 mm. ODS-SiC^, Rainin) eluirano pri 20 ml na minuto z mešanico metanol voda v razmerju 95:5. Primerne frakcije smo združili in evaporirali v vakuumu, da smo dobili naslovno spo i ino v obliki belega praška (18 mg). Masni in NMR spekter sta bila popolnoma skladna s predloženo strukturo.

43. Primer

5-(benz i1oks imi no)-25-ci kloheks i 1-22, 23-dihidroavermekt in BI monosaharid

V premešano raztopino 5-oksimino-25-cik 1oheksί1 -22, 23dihidroavermektin BI monosaharida (5. Primer) (70 mg) v diklorometanu (30 ml), smo zreagirali s trieti1aminom (501), in benzoil kloridom (1001) in željeni produkt ekstrahirali na način opisan v 42. Primeru. Očiščenje smo dosegli s pomočjo visoko tlačne tekočinske kromatografije na stolpcu Dynamax (41,4 x 250 mm, 0,008 mm, ODS-SiO2, Rainin) eluirano pri 45 ml na minuto z mešanico metanol - voda 90:10.

Primerne frakcije smo združili in evaporirali v vakuumu, da smo dobili nas lovno sno i i no v obliki belega praška (28 mg). Masni in NMR spekter sta bila popolnoma skladna s predloženo strukturo.

44. Primer

5-(N-met i1karbamo iloksimino)-25-cikloheksi 1-22, 23dihidroavermekt in BI monosaharid

V premešano raztopino 5-oksimino-25-cik 1oheksi1 -22 , 23dihidroavermekt i n BI monosaharida (5. Primer) (106 mg) v diklorometanu (10 ml) smo dodali meti1izocianat (151) in mešanico mešali 1 uro. Nato smo dodali zopet odmerek izocianata (301) in reakcijo mešali naslednjih 72 ur, preden smo dodali nasičeno vodno raztopino natrijevega klorida (10 ml) in etra (30 ml). Organske ekstrakte smo osušili na brezvodnem natrijevem sulfatu in evaporirali v vakuumu do suhega, da smo dobili surovi produkt (150 mg), katerega smo očistili s visoko tlačno tekočinsko kromatografijo na Dynamax stolpcu (41,4 x 250 mm, 0,008 mm, ODS-SiOo, Rainin) eluirano pri 45 ml na minuto z mešanico metanol - voda 91:9.

Primerne frakcije smo združili in evaporirali v vakuumu, da smo dobili naslovni produkt v obliki belega praška (80 mg). Masni in NMR spekter sta bila popolnoma skladna s predloženo s t rukt uro.

45. Primer

5-(N, N-dimeti1karbamoiloksimi no)-25-cik 1oheksi 1-22, 23dihidroavermektin BI monosaharid

V premešano raztopino 5-oksimino-25-cik 1oheksi 1 -22, 23d i h i d roave rmek t i n BI monosaharida (5. Primer) (50 mg) v dik 1 orornetanu (2 ml) pri sobni temperaturi smo dodali trietilamin (721) in 4-dimeti1aminopiridin (1 mg), nato pa še N,N-dimeti1karbamoi1 klorid (581). Po treh urah smo dodali naslednjo količino N,N-dimeti1karbamoi 1 klorida (581), nato pa smo reakcijo pustili 18 ur stati. Nato smo dodali vodno raztopino citronske kisline (10% w/v, 2 ml) in dietil eter (20 in 1 ) in ločili organske plasti, jih sprali z nasičeno vodno raztopino natrijevega klorida (5 ml), osušili na brezvodnem natrijevem sulfatu in evaporirali v vakuumu do suhega, da smo dobili surovi produkt, katerega smo očistili s visoko tlačno tekočinsko kromatografijo na Dynamax stolpcu (21,2 x 250 mm, 0,005 mm, ODS-SiC>2, Rainin) eluirano pri 10 in 1 na minuto z mešanico metanol - voda; 90:10. Primerne frakcije smo združili in evaporirali v vakuumu do suhega da smo dobili naslovno sno ii no v obliki belega praška (18 mg). Masni in NMR spekter sta bila popolnoma skladna s predloženo strukturo.

46. Primer

5-( 4-meti1pi peran i z i1-1-karbon iloksimino)-25-cikloheksi1-22, 23-dihidroavermektin BI monosaharid

V premešano raztopino N-meti1 piperazina (0,65 ml) in trietilamina (1,3 ml) v toluenu (25 ml) pri 0°C smo po kapljicah dodali raztopino fosgena (COC1₂ Op.p rev.) v toluenu (20%, 5,1 ml) v času 15 minut. Reakcijo smo pustili, da se segreje na sobno temperaturo, mešali 3 ure. filtrirali in koncentrirali na cca. 10 ml, pri znižanem tlaku, da smo dobili 1 - k 1 o rokarboni1-4-meti 1 pipera zin, katerega smo pri sobni temperaturi /reagirali s 5-oksimino-25 - cik 1oheksi1 - 22 , 23-dihidroavermektin BI monosaharidom (5. Primer), trieti1aminom (1101) in 4-dimetilaminopiridinom (5 mg), v skladu s postopkom opisanim v 45. Primeru. Čistost smo željenega materiala smo dosegli s kromatografijo na SiO₂(Kieselgel 60, 230-400 mreža, Merck) (35 g) in eluirali z dik 1orometanom. Primerne frakcije smo združili in evaporirali v vakuumu do suhega, cla smo dobili material (53 mg), katerega smo nadalje očistili s visoko tlačno tekočinsko kromatografijo na stolpcu Dynamax (21,2 x x250 mm, 0,005 mm, ODS-SiO₂, Rainin) eluirano pri 20 ml na minuto z mešanico metanol - voda; 95:5. Primerne frakcije smo združili in evaporirali v vakuumu, da smo dobili nas 1ovno s po i i no v obliki belega praška. Masni in NMR spekter sta bila popolnoma skladna s predloženo strukturo.

47. Primer

-(t-bu t iloksikarboniloksimino)-2 5- cikloheksi 1-22, 23dihidroavermektin BI monosaharid

V premešano raztopino 5-oksimino-25-cikloheksil-22, 23d i h i d r oa ve rine k t i n BI monosahar i da (5. Primer) (60 mg) in trietilamina (5 ml) v dik 1 orometanu (5 ml) pri sobni temperaturi smo dodali anhidrid t-butiloksikarboniI a (60 mg). Raztopino smo pustili stati 48 ur, nato pa srno reakcijo evaporirali v vakuumu do suhega, da smo dobili ostanek, katerega smo raztopili v dik 1orometanu in kromatografira 1i na SiC>2 (Kieselgel 60, 230-400 mreža, Merck) (5 g) in eluirali z dik 1 orometanom. Primerne frakcije smo združili in evaporirali do suhega v vakuumu, da smo dobili nas lovno spo i i no v obliki belega praška (45 mg). Masni in NMR spekter sta bila popolnoma skladna s predloženo strukturo.

48. Primer

5-(N-(4-formi 1 feni 1)-karbamo i1oks i m i no)-25-c i k 1oheks i1-22, 23-dihidroavermektin BI monosaharid

4-f or m i 1 f e n i 1 i 7.oc i ana t smo pripravili v skladu s postopkom opisanim v J. Med. Chem., 32 (10), 2354, (1989), nato pa smo ga z r e a g i r a 1i s 5 -o k s i m i n o- 2 5 -c i k 1 o h e k s i1 - 2 2 , 2 3dihidroavermektin BI monosaharidom (5. Primer) (500 mg) v suhem dik 1orometanu (50 ml) pri sobni temperaturi 1 uro, v skladu s postopkom opisanim v 43. Primeru. Zeljeni material smo očistili s kromatografijo na S i C>2 (Kieselgel 60, 230-400 mreža, Merck) (125 g) in eluirali s heksan - eter v razmerju 1:1, ki se je spremenilo na 20:80. Primerne frakcije smo združili in evaporirali do suhega v vakuumu, da smo dobili nas lovno s po i i no v obliki belega praška (300 mg). Masni in NMR spekter sta bila popolnoma skladna s predloženo strukturo.

49. Primer

5-(N-(4-d iet i1ami nometi 1 )f en i1)-karbamoiloksimino)-25cik 1oheksi 1-22, 23-dihidroavermektin BI monosaharid

4-dieti1aminometi1benzo i 1 smo pripravili v skladu s postopkom opisanim v United States Patent Publication US46

4623486, nato pa smo ga /.reagirali s 5-oksimino-25cik 1oheksi 1-22 , 23-dihidroavermektin BI monosaharidom (5. Primer) (100 mg) v suhem dik 1orometanu (50 ml), ki je vseboval trietilamin (4501) in 4-dimeti1aminopiridin (126 mg) pri sobni temperaturi 1 uro, v skladu s postopkom opisanim v 45. Primeru. Zeljeni material smo očistili s kromatografijo na SiC>2 (Kieselgel 60, 230-400 mreža, Merck) (5 g) in eluirali z metanol - diklorometan v razmerju 0:100, ki se je spremenilo na 10:90. Primerne frakcije smo združili in evaporirali do suhega v vakuumu, da smo dobili nas 1ovno spoj i no v obliki belega praška (11 mg). Masni in NMR spekter sta bila popolnoma skladna s predloženo strukturo.

50. Primer

5-N-(4-(4-meti1-1-pi peraz i n i1-meti1)feni1)-karbamoi1 oksimino)-25-cik 1oheksi1-22, 23-dihidroavermektin BI monosahar i d

4-(4-meti1 piperazin-1-i1 meti1)benzoi1 klorid smo pripravili po postopku opisanem v IJSP publ icat ion US-4623468 in ga /reagirali s 5-oksimino-25 - cik 1oheksi1 - 22, 23dihidroavermektin BI monosaharidom (5. Primer) na enak način, kot je opisan v 48. Primeru. Naslovno spojino smo pridobili v obliki belega praška (18 mg). Masni in NMR spekter sta bila popolnoma skladna s predloženo strukturo.

51. Primer

5-N-(3-piridilkarboni1-karbamo iloksimino)-25-cikloheksi1-22, 23-dihidroavermektin BI monosaharid

V premešano raztopino nikotinamida (4,88 g) v suhem 1, 2dikloroetanu (500 ml), smo po kapljicah dodali oksalil klorid (5,24 ml). Mešanico smo greli pri refluksu 4,5 ure, jo nato ohladili in filtrirali, dobljeno raztopino, ki je vsebovala nikotinoil izocianat (50 ml) pa smo, pri sobni temperaturi zreagirali s 5-oksimiηο-25-cikloheksi1-22, 23dihidroavermektin BI monosaharidom (5. Primer) (500 mg) v dik 1orometanu (10 ml). Nato smo reakcijo pustili 18 ur stati in ji dodali naslednji odmerek raztopine nikotinil izocianata (25 ml), nato pa smo mešanico pustili stati nadaljnjih 18 ur pri sobni temperaturi, nato pa smo jo evaporirali do suhega v vakuumu, da smo dobili ostanek, katerega smo očistili s visoko tlačno tekočinsko kromatografijo na stolpcu Dynamax (41,4 x x250 mm, 0,008 mm, ODS-SiO₂, Rainin) eluirano pri 45 ml na minuto z mešanico metanol - acetonitril - voda; 20:65:15. Primerne frakcije smo združili in evaporirali v vakuumu, da smo dobili nas 1ovno s no i i no v obliki belega praška. Masni in NMR spekter sta bila popolnoma skladnu s predloženo strukturo.

52. Primer

5-(N-(3-piridi 1 ) - karbamoi loksimino)-25-cikloheksi1-22, 23dihidroavermektin BI monosaharid

V raztopino dihidroklorida hidra zida nikotinske kisline (2 g) v vodi (10 ml) smo dodali raztopino natrijevega nitrita (1,6 g) v vodi (10 ml) in temperaturo vzdrževali pod 20°C. Nato smo dodali dietil eter (50 ml) in mešanico naalkalili s previdnim dodajanjem natrijevega karbonata v trdnem stanju. Organške plasti smo ločili, jih sprali z vodo (20 ml), osušili na brezvodnem magnezijevem sulfatu in evaporirali v vakuumu do suhega, da smo dobili nikotinilov azid (1,1 g); m.p. 54°C. Ta azid (1,1 g) smo nato zmešali v suh toluen (10 ml) in ga 8 ur greli na 100°C, da smo dobili raztopino, ki je vsebovala 3-piridi1 izocianat. Odmerek te raztopine (1 ml) smo zreagirali s 5-oksimino-25-ci k 1 oheks i 1 - 22 , 23dihidroavermektin BI monosaharidom (5. Primer) (100 mg) v toluenu (10 ml) pri sobni temperaturi in sicer eno uro preden smo mešanico prelili v mešanico dietil eter-voda (1:1; 30 ml). Organsko plast smo ločili, osušili na brezvodnem magnezijevem sulfatu in evaporirali do suhega v vakuumu, da smo dobili ostanek (130 mg), katerega smo očistili s visoko tlačno tekočinsko kromatografijo na stolpcu Dynamax (41,4 x x250 mm, 0,00S mm, ODS-S1O2, Rainin) eluirano pri 45 ml na minuto z mešanico metanol - voda v razmerju 85:15, ki se je spremenilo po 15 minutah na 87:13. Primerne frakcije smo združili in evaporirali v vakuumu, da smo dobili nas 1 ovno sno i ino v obliki belega praška (52 mg). Masni in NMR spekter sta bila popolnoma skladna s predloženo strukturo.

53. Primer

5—(a 1 ilkarbamoiloksimino)-25-cikloheksi 1-22, 23dihiclroavermekt in BI monosaharid

5-oksimiηο-25-cik 1oheksi 1 -22 , 23-dihidroavermektin BI monosaharid (5. Primer) (500 mg) smo zreagirali z alil izoeianatom (108 mg) v diklorometanu (50 ml), po postopku opisanem v 43.Primeru, da smo dobili nas 1ovno spoi ino v obliki belega praška (352 mg). Masni in NMR spekter sta bila popolnoma skladna s predloženo strukturo.

Pfizer Inc.

Claims

PATENTNI ZAHTEVKI

1. Postopek za pripravo spojine s formulo (I):

kjer črtkana linija na položaju 22-23 predstavlja opcijsko vez, ki je lahko prisotna in je v tem primeru R^ odsoten, ali pa te vezi ni in je R^ H, OH, okso ali oksimino, ki je lahko neobvezno substituiran s C^-Cg alkilno skupino, R je Cg-Cg alkil, C₂~Cg alkenil ali Cg-Cg cikloalkilna skupina, ali 3- do 6- člen heterociklični obroč, ki vsebuje žveplov ali kisikov atom, omenjeni obroč pa je nasičen ali pa popolnoma ali delno nenasičen in neobvezno substituiran z eno ali večimi Cg-C^ alkilnimi skupinami ali halogenimi atomi,

R³ je H ali OH in

R^ je H ali skupina, ki je lahko hidrolizirana in vivo. da pridobimo spojino, v kateri je R^ enak H,

R5 je OH ali neobvezno substituiran s skupino, ki je lahko • 5 hidrolizirana in vivo. da pridobimo spojino, v kateri je R enak OH in R^ je H ali kadar je R^ enak OH ali C^-C^ alkilu,

5C ali ϊίθ je H in R^ je amino, ki je neobvezno lahko substituiran z vsaj eno skupino izbrano izmed C^-Cg alkilnimi in acilnimi skupinami, značilen po tem, da vsebuje Korak (1), kjer oksidiramo spojino s formulo (II):

kjer so črtkana linija, R¹, R² , R³ in R⁶ kot je opisano 5 zgoraj, R , pa je kot je opisano zgoraj ali pa je α-oleandrosiloksi in R^ je H, da dobimo spojino s formulo (III):

in (ii), kjer pustimo spojino s formulo (III) da reagira s spojino s formulo R⁴-O-NH2, kjer je R⁴ definiran kot zgoraj 5 in kjer je R α-ο1eandrozi1 oksi, da hidrolizira pridobljeno spojino, da pridobimo spojino s formulo (1) in (iii) če je potrebno zamenjati skupino R⁴, kadar je zadnje omenjeni H, z omenjeno skupino, ki se da hidrolizirati in vivo. da dobimo spojino kjer je R⁴ enak H, če je potrebno, postopek nadalje obsega enega ali več sledečih korakov pred ali po korakih (i), (ii) in (iii), (iv) substitucija skupine R^ kadar je zadnje omenjeni OH, z omenjeno skupino, ki se da hidrolizirati in vivo. da dobimo spojino kjer je R^ enak OH, (v) oksidacija skupine R¹, kadar je zadnje omenjeni OH do okso, (vi) rakcija spojine pridobljene iz koraka (v) s hidroksi1aminom, ki je lahko neobvezno zamenjan s Cj-Cg alkilno skupino, da pridobimo spojino v kateri je iČ neobvezno substituirani okso, (vii) hidriranje spojine, da reduciramo dvojno vez na položaju 22-23, v enojno vez, (viii) oksidacija spojine v kateri je R' enak H v skupino v kateri je R' enak OH, (ix) oksidacija spojine v kateri je R$ OH in R⁽’ je H, v spojino kjer je okso R^(l pa je odsoten in ali:

(x) redukcija spojine pridobljene iz (ix) da produciramo spojino v kateri je R⁵ ep i-OH skupina, ali (xi) reakcija spojine pridobljene iz (ix) z Gringnardovim reagentom, da pridobimo spojino v kateri je R⁵ OH, R⁶ pa je alkil, ali (xii) izpostavljanje spojine pridobljene iz ( ix) redukcijskemu aminiranju, da pridobimo spojino v kateri je r5 amino ali alkilamino skupina in če je potrebno aciliranje pridobljene spojine, vsaka prosta OH skupina pa je, če je to potrebno, med izvajanjem vsakega izmed zgornjih korakov zašč i t ena.

2. Postopek po zahtevku 1, značilen po tem, da so omenjene skupine, ki imajo sposobnost biti hidro1izirane in vivo neodvisno substituirana ali nesubstituirana C2-Cf, alkanoil, aroil, karbamoil, Cj-Cg alkoksikarbonil, dikarboksi1 na kislina ali amino kislinska skupina.

3. Postopek po zahtevku 2, značilen po tem, da je omenjena skupina, ki ima sposobnost biti hidro1izirana in vivo acetil, l-buti1 karboni1 , benzoil, meti1 piperazinkarboni 1 , N meti1karbamoi1, N, N-dimeti1karbamoi1, formi 1 feni1karbamoi1 N-(4-d i e t i lami norne ti 1f en i 1 )-karbamo i 1 , N-(4-me t i 1-1p i pe raz i n-me t i 1 f en i 1 ) - ka rbamo i 1 , N-(3-p i r i d i 1 ka rbon i 1 -

karbamoi 1 , N - ( 3 - p i r i d i 1 ) - k a i bamoi 1 , a 1 i lka rbamo i 1 , s u k c i o n i 1 , me t oks i sukc i on i 1 . , 4 - m e t i 1 p i p e i’ a z i n s u k c i o n i p i r i d - 4 - i 1ami nosukc i on i 1 , 1 i i z i n i 1 ali N-N¹-|₎j_s(q_ f 1 u o r e n i 1 me t oks i ka rbon i 1 ) 1 i : < i n i 1 s k u p i n a . 4 . Postopek po zahtevku 1 , 2 ali 3, značilen po tem, n R“ alkil na ali cikloalkil na skupina. 5 . Postopek po zahtevku 4 , znač i 1 en po tem, da je R

cikloheksil, izopropil ali sec-butil.

4'-0-lizinil-5-oksimino-25-cikloheksil-22, 23dihidroavermektin BI monosaharid,

4'-0-3-(4-metilpiperazin-l-il)karbonilpropanoil)-5-oksimino25-cikloheksil-22, 23-dihidroavermektin BI monosaharid 4'-0-(3-(pirid-4-ilamino)karbonilpropanoil)-5-oksimino-25cikloheksil-22, 23-dihidroavermektin BI monosaharid,

4¹—0—(N, N'-bis-(9-fluoreniImetoksikarbonil)lizinil)-5oksimino-25-cikloheksil-22, 23-dihidroavermektin BI monosaharid,

4'—0—(3-metoksikarbonilpropanoil)-5-oksimino-25-cikloheksil22, 23-dihidroavermektin BI monosaharid,

4'-0-sukcinil-5-oksimino-25-cikloheksil-22, 23dihidroavermektin BI monosaharid,

4'-acetilamino-4'-deoksi-5-oksimino- 22, 23-dihidro-25cikloheksilavermektin BI monosaharid,

4'-metil-5-oksimino-25-cikloheksil-22, 23-dihidroavermektin Bi monosaharid,

4- 0-acetil-5-oksimino-25-cikloheksil-22, 23dihidroavermektin BI monosaharid,

4'-epi-5-oksimino-25-cikloheksil- 22, 23-dihidroavermektin BI monosaharid,

4a-hidroksi-5-oksimino-25-cikloheksil-22, 23dihidroavermektin BI monosaharid,

4’-O- 1 i z i n i 1 - 5 -o k s i m i n o- 2 5 - c i k 1 o h e k s i 1-22, 2 3 54 dihidroavermektin BI monosaharid,

4’-0-(N, N’-b i s-(9-f1uoren iI me t oks i ka rbon i1)lizini 1)-5oksimiηο-25-cik 1oheksi1-22, 2 3-dihidroavermektin BI monosahar i d ,

4’-0-(3-me t oks i karbon i1 propano i1)-5-oksimino-25-cikloheksil22, 23-dihidroavermektin BI monosaharid,

4¹ -0- 3-(4 — me t i lpiperazin-l-i 1 )karbonilpropanoil)-5-oksimino25-cik 1oheksi 1 -22, 23-dihidroaverme ktin BI monosaharid 4’-0-(3 —(pirid-4-i1am i no)karbon i1propanoi1)-5-oksimino-25cik 1oheksi1-22, 23-dihidroavermektin BI monosaharid,

4’-Ο-sukcini l-5-oksimino-25-cikloheksi1-22, 23dihidroavermektin BI monosaharid,

4’-aeeti 1 amino-4’-deoksi-5-oksimino- 22, 23-dihidro-25cik 1oheksi1avermektin BI monosaharid,

4’-met i l-5-oksimino-25-cikloheksi1—22, 23-dihidroavermektin BI monosaharid,

4- O-ace t i1 - 5-oks i m i no-25-c i k 1 ohek s i1 - 22, 23dihidroavermektin BI monosaharid,

4’-epi-5-oksimino-25-cikloheksil- 22. 23-dihidroavermektin BI monosaharid,

4a-hidroksi-5-oksimino-25-cikloheksi1-22, 23dihidroavermektin BI monosaharid,

5-(N-alilkarbamoiloksimino)-25-cikloheksil-22, 23dihidroavermektin BI monosaharid

5-(N-(3-piridil)-karbamoiloksimino)-25-cikloheksil-22, 23dihidroavermektin BI monosaharid

5-(N-(3-piridilkarbonil)-karbamoiloksimino)-25-cikloheksil22, 23-dihidroavermektin BI monosaharid

5-(N-(4-(4-metil-l-piperzinil-metil)fenil)karbamoiloksimino)-25-cikloheksil-22, 23-dihidroavermektin BI monosaharid

5-(N-(4-(dietilaminometil)fenil)-karbamoiloksimino)-25cikloheksil-22, 23-dihidroavermektin BI monosaharid,

5-(N-(4-formilfenil)-karbamoiloksimino)-25-cikloheksil-22, 23-dihidroavermektin BI monosaharid,

5- (t-butiloksikarboniloksimino)-25-cikloheksil-22, 23dihidroavermektin BI monosaharid,

5-(4-metilpiperazinil-l-karboniloksimino-25-cikloheksil-22, 23-dihidroavermektin BI monosaharid,

5- (N,N-dimetilkarbamoiloksimino)-25-cikloheksi1-22, 23dihidroavermektin BI monosaharid,

5- (N-metilkarbamoiloksimino)-25-cikloheksil-22, 23dihidroavermektin BI monosaharid,

5-(benzoiloksimino)-25-cikloheksil-22, 23-dihidroavermektin BI monosaharid,

5-(trimetilacetiloksimino)-25-cikloheksil-22, 23dihidroavermektin BI monosaharid,

5-oksimino-23-metoksimino-25-cikloheksilavermektin B2 monosaharid,

5- oksimino-23-okso-25-cikloheksilavermektin B2 monosaharid,

5-oksimino-25-(4-tetrahidropiranil)-22, 23-dihidroavermektin BI monosaharid,

5-oksimino-25-cikloheksilavermektin BI monosaharid,

5-oksimino-25-cikloheksilavermektin B2 monosaharid,

5-oksimino-22, 23-dihidro-25-cikloheksilavermektin BI monosaharid,

5-oksimino-22, 23-dihidroavermektin Bla monosaharid,

5 -(N-a 1 i lkarbamoi1ok s i m i no)- 2 5 - c i k 1ohe ks i 1-22, 23dihidroavermektin BI monosaharid

5 - ( N - ( 3 — piridi 1 ) - ka r batno i loksimino)-25-cikloheksil-22, 23dihidroavermektin BI monosaharid

5 - ( N-(3- p i r i d i 1 k a r b o n i 1 )- k a r b a mo i 1 o k s i m i n o)- 2 5 - c i k 1 o h e k s i 1 22, 23-dihidroavermektin BI monosaharid

5 - ( N-(4 -(4 -me t i 1 - 1 - p i p e r z i n i 1 -me t i 1 )f e n i 1 ) k a r batno i 1 oks i m i no ) - 2 5 - c i k 1 oheks i 1-22, 2 3 - d i h i d roave rine k t i n BI monosaharid

5 -(N-(4-(d i c t i1 am i nomeliI )fe n i 1 )-ka r hamoi loksimino)-25cik 1 oheksil-22 , 23-dihidroavermektin BI monosaharid,

5 -(N-(4 -i o r m i 1f e n i 1 ) - k a r B a mo i 1 o k s i m i n o)- 2 5 -c i k I o h e k s i1-22, 23-dihidroavermektin BI monosaharid,

5-(t-bu t i 1oks i karbon i1 oks i mi no)-25-c i k 1oheks i1 - 22, 2 3dihidroavermektin BI monosaharid,

5-(4-me t i Ipiperazini 1-1-karboni Ioks i mi ηο-25-c i k 1 oheks i1-22, 23-dihidroavermektin BI monosaharid,

5 -(N,N-d i me t ilkarbamoi1 oks im i no)-25-c i k 1oheks i1-22, 23dihidroavermektin BI monosaharid,

5 -(N-me t ilkarbamoiloksimino)-25-cikloheksi1-22, 23dihidroavermektin BI monosaharid,

5-(benzo iloksimino)-25-cikloheksi1-22, 23-dihidroavermektin BI monosaharid,

5 -(tri metilacetiloksimino)-25-cikloheksi1—22, 23dihidroavermektin BI monosaharid,

5-oksimino-23-metoksimino-25-cik 1oheksilavermektin B2 monosahar i d,

5- oks imi no-2 3-okso-2 5-c i k 1oheksi lavermekt in B2 monosahar i d ,

5-oks i m i no-25-(4-t e t rah i d rop i ran i1)-22, 23-dihidroavermektin BI monosaharid,

5-oksimino-25-cik 1oheksi1 avermektin BI monosaharid,

5-oksimino-25-cik I oheksi1avermektin B2 monosaharid,

5-oksimino-22 , 23-dihidro-25-cikloheksilavermektin BI monosahar i d ,

5-oksimino-22, 23-dihidroavermektin Rla monosaharid,

6. Postopek po kateremkoli prejšnjem zahtevku, značilen po tem, da je R‘ enak H in da je opcijsk vez na položaju 22-23 prisotna ali pa te opcijske vezi ni in je r' enak H ali OH.

7. Postopek po zahtevku 1, značilen po tern, da sta v proizvedeni spojini R^ in R^ enaka H.

8. Postopek po zahtevku 1, značilen po tem, da je pridobljena spojina:

9. Spojina značilna po tem, da ima formulo (I):

kjer črtkana linija na položaju 22-23 predstavlja opcijsko vez, ki je lahko prisotna in je v tem primeru R odsoten, ali pa te vezi ni in je R H, OH, okso ali oksimino, ki je lahko neobvezno substituiran s C^-Cg alkilno

O skupino, R je C^-Cg alkil, C2-Cg alkenil ali C₃-Cg cikloalkilna skupina, ali 3- do 6- člen heterociklični obroč, ki vsebuje žveplov ali kisikov atom, omenjeni obroč pa je nasičen ali pa popolnoma ali delno nenasičen in neobvezno substituiran z eno ali večimi C^-C^ alkilnimi skupinami ali halogenimi atomi,

R³ je H ali OH in

R5 je OH ali neobvezno substituiran s skupino, ki je lahko hidrolizirana m vivo. da pridobimo spojino, v kateri je R enak OH in R⁶ je H ali kadar je R⁵ enak OH ali 0^-04 alkilu, ali r6 je H in R$ je amino, ki je neobvezno lahko substituiran z vsaj eno skupino izbrano izmed C^-Cg alkilnimi in acilnimi skupinami.

10. Spojina po zahtevku 9, značilna po tem, da so omenjene skupine, ki imajo sposobnost biti hidrolizirane in vivo neodvisno substituirana ali nesubstituirana C2-Cg alkanoil, aroil, karbamoil, C^-Cg alkoksikarbonil, dikarboksilna kislina ali amino kislinska skupina.

11. Spojina po zahtevku 10, značilna po tem, da je omenjena skupina, ki ima sposobnost biti hidrolizirana in vivo acetil, l-butilkarbonil, benzoil, metilpiperazinkarbonil, Nmetilkarbamoil, Ν,Ν-dimetilkarbamoil, formilfenilkarbamoil, N-( 4-dietilaminometilfeni1)-karbamoil, N-(4-metil-lpiperazin-metilfenil)-karbamoil, N-(3-piridilkarbonilkarbamoil, N-(3-piridil)-karbamoil, alilkarbamoil, sukcionil, metoksisukcionil, 4-metilpiperazinsukcionil, d

pirid-4-ilaminosukcionil, lizinil ali N-N-bis(9fluorenilmetoksikarbonil)lizinil skupina.

12. Spojina po zahtevku 9, 10 ali 11, značilna po tem, da je R² alkilna ali cikloalkilna skupina.

13. Spojina po zahtevku 12, značilna po tem, da je R cikloheksil, izopropil ali sec-butil.

14. Spojina po kateremkoli zahtevku od 9 do 13, značilna po tem, da je R² enak H in da je opcijske vez na položaju 22-23

Λ prisotna ali pa te opcijske vezi ni in je R enak H ali OH.

15. Spojina po zahtevku 9, značilen po tem, da sta v proizvedeni spojini R² in R⁴ enaka H.

16. Spojina po zahtevku 9, značilna po tem, ds je to katerakoli izmed naslednjih spojin:

17. Farmacevtski ali veterinarski sestavek, značilen po tem, da vsebuje spojino iz kateregakoli prejšnjega zahtevka in farmacevtsko sprejemljiv nosilec in ekscipient.

18. Spojina po kateremkoli zahtevku od 9 do 15, značilna po tem, da je primerna za uporabo v medicini živali in ljudi.

19. Spojina po kateremkoli zahtevku od 9 do 15, značilna po tem, da je primerna za uporabo kot sredstvo proti parazitom.

20. Uporaba spojine po kateremkoli zahtevku od 9 do 16, značilna po tem, da se nanaša na uporabo teh spojin za izdelavo zdravila za zdravljenje ali profilakso infekcij, ki jih povzročajo paraziti, še posebej bolhe na živalih.

21. Spojina značilna po tem, da ima formulo (III) kjer so črtkana linija, R¹, R², R³ in R^ kot je opisano v zahtevku 9, ali R^ je α-oleandrosiloksi in R^ je H.