PT885222E

PT885222E - Derivados de heterociclil-ergolina como ligandos do receptor de 5-ht1a

Info

Publication number: PT885222E
Application number: PT97903245T
Authority: PT
Inventors: Carla Caccia; Sergio Mantegani; Maurizio Meroni; Tiziano Bandiera; Mario Varasi
Original assignee: Pharmacia & Upjohn Spa
Priority date: 1996-02-15
Filing date: 1997-02-07
Publication date: 2001-10-31
Also published as: ATE201683T1; NO983656L; DE69705032D1; ES2159838T3; CN1211253A; ZA971167B; TW360655B; EP0885222B1; MX9806341A; EP0885222A1; BR9707463A; HUP9900572A2; DE69705032T2; WO1997030050A1; CA2243992A1; NO983656D0; AR005820A1; IL125344A0; KR19990082680A; PL328373A1

Description

Μ9Ζ Ζ2. 1

Descrição “Derivados de heterociclil-ergolina como ligandos do receptor de 5-HT1A” A presente invenção diz respeito a novos derivados heterocíclicos de ergolina, a um processo para a sua preparação, à sua utilização como medicamentos e a uma composição farmacêutica que os contém.

Os novos compostos actuam sobre o sistema nervoso central mediante ligação aos receptores de 5-HT1A e, deste modo, podem ser utilizados para o controlo de patologias do sistema nervoso central.

Os referidos compostos podem ser utilizados para o tratamento de diversas perturbações associadas com disfunções serotoninérgicas, tais como deficiência da termo-regulação, da função cognitiva, perturbações do sono, controlo da saciedade (isto é, consumo de alimentos e de bebidas), habituação aos fármacos, controlo da retirada de fármacos, hipertensão, hiperemese, depressão, ansiedade, psicose e insulto isquémico.

Mais particularmente, a presente invenção diz respeito a compostos de fórmula geral I:

N

R R. '2 na qual o símbolo Rj representa um átomo de hidrogénio ou um grupo metilo; o símbolo R2

representa um átomo de hidrogénio, cloro ou bromo ou um grupo metilo; o símbolo n representa o número 0, 1 ou 2; o substituinte na posição 8 encontra-se na configuração α ou β; o símbolo Het representa um anel heterocíclico aromático pentagonal, tendo o referido anel três heteroátomos os quais podem ser iguais ou diferentes e que são escolhidos de entre o grupo que consiste em átomos de enxofre, oxigénio e azoto, ou um seu sal de adição de ácido aceitável sob o ponto de vista farmacêutico. A presente invenção proporciona igualmente uma formulação farmacêutica que compreende um composto de fórmula geral I ou os sais de adição de ácido apropriados aceitáveis sob o ponto de vista farmacêutico que incluem sais com tanto ácidos orgânicos como inorgânicos em combinação com um excipiente aceitável sob o ponto de vista farmacêutico. O anel heterocíclico aromático pentagonal contém, em particular, um ou mais átomos de azoto e até um átomo de enxofre ou um átomo de oxigénio mas não conjuntamente.

De preferência, estes anéis heterocíclicos pentagonais incluem oxadiazol, tiadiazol, triazol os quais se encontram ligados aos radicais ergolinilo e piridinilo através dos átomos de carbono conforme se ilustra a seguir:

N-N

O

N-N

1,3,4-Oxadiazóis 1,3,4-Tiadiazol 1,2,4-Triazol 1,2,4-Oxadiazol

Os ácidos aceitáveis sob o ponto de vista farmacêutico, que podem ser utilizados na formação de sais de adição de ácido, incluem ácidos maleico, cítrico, tartárico, fumárico, metano-sulfónico, acético, benzóico, succínico, glucónico, láctico, málico, mucóico, glutâmico ou ascórbico como ácidos orgânicos ou ácidos clorídrico, bromídrico, sulfurico ou fosfórico como ácidos inorgânicos.

De entre os sais de adição os que são obtidos mediante utilização de ácidos clorídrico, sulfurico, metano-sulfórico, cítrico e succínico são os sais mais preferidos.

Pode preparar-se os compostos de fórmula geral T utilizando como composto inicia] um derivado apropriado da função carboxílica na posição 8 da estrutura da ergolina e uma piridina substituída na posição 3 apropriada através de reacções bem conhecidas da química dos compostos heterocíclicos para a obtenção de anéis heterocíclicos penta-atómicos tendo três heteroátomos. A presente invenção proporciona igualmente um processo para a preparação dos compostos de fórmula geral I ou os seus sais de adição de ácido, processo esse que compreende.

(i) a reacção de um derivado activado de um composto de fórmula geral II

na qual os símbolos Rj, R2en têm os significados definidos antes, com um agente de desidratação, para se obter um composto de fórmula geral I na qual o símbolo Het representa um grupo de fórmula

N-N -V- ou (ii’) a reacção do composto resultante de fórmula geral IV com um agente de sulfuração tal como P2S5 ou similar para se obter um composto de fórmula geral I na qual o símbolo Het representa um grupo de fórmula

N—N

S ou (ii’) a reacção de um derivado activado de um composto de fórmula geral II conforme definida anteriormente com um composto de fórmula III”

Br

para se obter um composto de fórmula geral I, na qual o símbolo Het representa um grupo de fórmula

N-N

ou (i’”) a reacção de um composto de fórmula geral V 6

na qual os símbolos R2, R2 e n têm os significados definidos antes, com cloridrato de hidroxilamina na presença de uma base e (ii’”) a reacção do composto resultante de fórmula geral VI:

na qual os símbolos n, R[ e R2 têm os significados definidos antes, com um composto de fórmula IIF tal como definida anteriormente para se obter um composto de fórmula geral I na qual o símbolo Het representa um grupo de fórmula N—0

JLK

N

ou (ilv) a reacção de um composto de fórmula geraL VII 7

na qual os símbolos n, Rx e R2 têm os significados definidos antes, com um composto de fórmula III1V

Br

para se obter um composto de fórmula geral I na qual o símbolo Het representa um grupo de fórmula

ou

(Γ) a reacção de um composto de fórmula geral VIII

na qual os símbolos Rx, R2 e n têm os significados definidos antes com um composto 7£f

de fórmula IIP

Br

ou (Γ) a reacção de um composto de fórmula geral V tal como definida anteriormente cpm um composto de fórmula IIP'

Br

Pode obter-se os compostos de fórmula geral I na qual o símbolo Ri representa um grupo metilo a partir dos compostos correspondentes de fórmula geral I na qual o símbolo Ri representa um átomo de hidrogénio mediante alquilaçãoa propriada. »7kf

Pode converter-se um composto de fórmula geral I na qual o símbolo R2 representa um átomo de hidrogénio em um outro composto de fórmula geral I na qual o símbolo R2 representa um átomo de cloro ou de bromo mediante reacções apropriadas.

Os derivados activados de um composto de fórmula geral TI incluem um composto de fórmula geral IIA

na qual os símbolos Ri, R2 e n têm os significados definidos antes, que se obtém mediante reacção de um composto de fórmula geral II tal como definida anteriormente com 1,1 ’-carbonildi-imidazol.

Obtém-se os sais de adição de ácido aceitáveis sob o ponto de vista farmacêutico dos compostos de fórmula geral I mediante tratamento apropriado do composto de fórmula geral I com o ácido desejado. Realiza-se de uma maneira geral a fase (i) do processo mediante adição directa de um composto de fórmula ΙΠ a uma solução recentemente preparada de um derivado activado de um composto de fórmula geral II e aquecendo em seguida a refluxo durante 1 a 5 horas.

De uma maneira geral, isola-se o composto de fórmula geral IV mediante eliminação do solvente seguida por uma cristalização em etanol ou metanol.

Realiza-se convenientemente a fase (ii) do processo mediante reacção de um 756 composto de fónnula geral IV com um agente de desidratação tal como o pentacloreto de fósforo ou anidrido trifluoroacético ou ácido polifosfórico no seio de um solvente tal como tolueno ou piridina a refluxo ou de preferência utilizando polifosfato de trimetilsililo em tolueno a refluxo.

Realiza-se de uma maneira geral a fase (ii”) do processo mediante reacção de um composto de fónnula geral IV com pentasulíureto de fósforo em piridina a refluxo ou com o reagente de Lawesson [2,4-bis(4-metoxifeni1)-1,3-ditia-2,4--difosfetano-2,4-dissulfureto] em tolueno a refluxo.

Descobriu-se que os compostos de acordo com a presente invenção apresentam uma afinidade interessante para o receptor de 5-HTiA no cérebro com muito menos afinidade para outros receptores em particular os receptores Di e D2 e de 5-HT2.

Consegue-se completar de uma maneira geral a fase (i”) do processo mediante reacção de um derivado activado de um composto de fórmula geral II com um composto de fórmula ΙΠ” no seio de etanol a refluxo na presença de um equivalente de metóxido ou etóxido de sódio. Realiza-se a fase (i’”) do processo mediante reacção de um composto de fórmula geral V com cloridrato de hidroxilamina e um equivalente de etóxido de sódio em etanol a refluxo.

Uma vez terminada a conversão num composto de fónnula geral VI, realiza--se a fase (ii’”) seguinte mediante adição de um composto de fórmula IIF e um equivalente de etóxido de sódio e aquecendo-se a refluxo a mistura reaccional durante 4 a 15 horas.

Utiliza-se a mesma metodologia para a reacção de um composto de fórmula geral VII (facilmente disponível por reacção de um derivado activado de um 11 11

composto de fórmula geral II com cloridrato de hidroxilamina em piridina a 50--100°C) com um composto de fórmula III1V

Realiza-se de uma maneira geral a fase (iv) do processo mediante reacção de um composto de fórmula geral VIII (facilmente disponível mediante reacção de um derivado activado de um composto de fórmula geral II com metanol a refluxo) com um composto de fórmula ΙΙΓ na presença de um equivalente de etóxido de sódio no seio de etanol a refluxo.

Utiliza-se a mesma metodologia na reacção entre um. composto de fórmula geral V e um composto de fórmula ΙΙΓ1.

Pode realizar-se a N-alquilação de um composto de fórmula geral I na qual o símbolo Ri representa um átomo de hidrogénio de acordo com as metodologias conhecidas para a N-alquilação de indóis, utilizando um composto de fórmula geral R’rZ na qual o símbolo R’i representa um grupo metilo e o símbolo Z representa um grupo eliminável tal como um átomo de cloro, bromo ou iodo. Realiza-se convenientemente a reacção no seio de um solvente inerte tal como o sulfóxido de dimetilo e na presença de uma base forte tal como o hidróxido de potássio ou de sódio a uma temperatura compreendida entre 10 e 35°C.

Pode também realizar-se a cloração ou a bromação de um composto de fórmula geral I na qual o símbolo R2 representa um átomo de hidrogénio de acordo com as metodologias conhecidas, utilizando agentes de cloração ou agentes de bromação convencionais tais como N-Cl ou N-Br succinimida ou cloreto de sulfurilo.

Realiza-se convenientemente a reacção no seio de um solvente inerte tal como clorofórmio, cloreto de metileno ou tetra-hidrofurano a uma temperatura compreendida entre -5 e 30°C.

Pode obter-se um derivado activado de um composto de fórmula geral Π mediante reacção de um composto de fórmula geral II com um pequeno excesso de Ν,Ν’-carbonildiimidazol no seio de um solvente tal como o tetra-hidrofurano ou o 1,4-dioxano a uma temperatura compreendida entre 25 e 50°C até à dissolução completa do ácido inicial.

Os compostos iniciais de fórmulas Π, III, IIP, ΠΓ, IIIiv, ΙΙΓ, ΙΙΓ e V são compostos conhecidos ou podem ser preparados de acordo com metodologias bem conhecidas.

Descobriu-se que os compostos de acordo com a presente invenção apresentam afinidade interessante para o receptor de 5-HTIA no cérebro com muito menos afinidade para outros receptores em particular os receptores e D2

Os compostos de acordo com a presente invenção podem encontrar utilização no controlo da ansiedade, da depressão, da esquizofrenia e da dor (Pharmacology and Toxicology 1989, 64, p. 3-5, Drug of the future 1988, 13 (5), p. 429-437, J. Neural Transm. 1988, 74, p. 195-198), para o tratamento de stress (Neuropharmac, 1989, 25, (5), p. 471-476), para o alívio da retirada de fármacos (síndroma da abstinência) devida à supressão de benzodiazepinas, cocaína, álcool e nicotina, ou modificação da tomada de alimentos e comportamento sexual (J. Receptor Research, 1988, 8, p. 59-81), e para aliviar os danos neuronais após isquémia cerebral, actuando como agentes neuprotectores (Stroke 1990, 21 (IV) p. 161; J. Cereb. Blood

13 13

Flow Metabol. 1991, 11(Π), p. 426; Pharmacology of cerebral ischemia, 1990, Stuttgart 1990, p. 493-497).

Os exemplos biológicos seguintes ilustram o perfil de ligação dos compostos de fórmula geral I.

Exemplo a

Afinidade para o receptor de serotonina 1A (5-HTia) lensaio de ligação de 3H-8--Hidroxi-2-dipropilaminotetralina(3-H-8-OH-DPAT)l

Conduziu-se a preparação da ffacção bruta de sinaptosoma e o ensaio de ligação de acordo com o método referido em Journal of Neurochemistry, vol 44, pág. 1685, 1985 por Hall et al. Homogeneizou-se hipocampo congelado dissecado a partir de ratos em 40 volumes de tampão arrefecido com gelo de 50 mM de Tris--HC1 (pH 7.4) e centrifugou-se a suspensão a 500 x g durante 10 minutos à temperatura de 0°C.

Centrifugou-se o sobrenadante a 40 000 x g durante 20 minutos à temperatura de 0°C e homogeneizou-se o grânulo resultante em 40 volumes do tampão anterior e incubou-se à temperatura de 37°C durante 10 minutos. Uma vez terminada a reacção, centrifugou-se a suspensão a 40 000 x g durante 20 minutos à temperatura de 0°C. Lavou-se o grânulo resultante duas vezes mediante ressuspensão em 40 volumes do tampão anterior e centrifugação e suspendeu-se finalmente em 60 volumes de tampão de 50 mM de Tris-HCl arrefecido com gelo (pH 7,4) contendo 1 mM de de cloreto de magnésio para utilização no ensaio seguinte.

As alíquotas (900 ml) da solução de membranas de sinaptosoma adicionou-se 50 ml de uma solução tritiada de 8-OH-DPAT para a concentração terminal de 14 14

0,2 nM e 50 ml da solução do composto em estudo ou 50 ml do seu meio, e incubou-se à temperatura de 37°C durante 10 minutos. Em seguida, à mistura adicionou-se 5 ml de tampão de 50 mM de Tris-HCl arrefecido com gelo (pH 7,4) filtrou-se rapidamente sob vazio através de filtros WhatmanR GF/B e lavou-se duas vezes com 5 ml do mesmo tampão. Mediu-se a radioactividade do resíduo remanescente nos filtros mediante utilização de um contador de cintilação líquida. Determinou-se a ligação não específica na presença de 10'5M de serotonina (5-HT). Determinou-se graficamente a concentração de inibidora de 50% (CI50) do composto em estudo. Os resultados encontram-se reunidos no quadro.

Exemplo b

Afinidade para o receptor de serotonina 2 ί5-ΗΤ^) (ensaio de ligação da 3H--cetanserina).

Realizou-se a preparação da fracção bruta de sinaptosoma e o ensaio de ligação de acordo com o método referido em Molecular Pharmacology, vol. 21, pág. 301, 1981 por Leysen et al. Homogeneizou-se córtex cerebral congelado dissecado a partir de ratos em 30 volumes de uma solução de sacarose 0,32 M arrefecida com gelo e centrifugou-se a suspensão a 1000 x g durante 10 minutos à temperatura de 0°C. Centrifugou-se o sobrenadante a 40 000 x g durante 20 minutos à temperatura de 0°C e homogeneizou-se os grânulos resultantes em 30 volumes de tampão de 50 mM de Tris-HCl (pH 7,7) arrefecido com gelo e incubou-se à temperatura de 37°C durante 10 minutos. Centrifugou-se a suspensão a 40 000 x g durante 20 minutos à temperatura de 0°C novamente. Homogeneizou-se o grânulo resultante em 100 volumes do tampão anterior e proporcionou-se como solução de membranas de sinaptosoma para o ensaio seguinte. 15 15

Às alíquotas (900 m) da solução de membranas de sinaptosoma adicionou-se 50 ml de solução de 3H-cetanserina para a concentração terminal de 0,2 mM e 50 ml do composto em estudo ou o seu meio, e incubou-se à temperatura de 37°C durante 20 minutos. Uma vez terminada a reacção, filtrou-se a mistura rapidamente sob vazio através de filtros de WhatmanR GF/B. Lavou-se os filtros três vezes com 5 ml do tampão anterior e mediu-se em seguida a radioctividade do resíduo remanescente sobre os filtros mediante utilização de um contador de cintilação líquida. Determinou-se a ligação não específica na presença de 10 mM de mianserina. Determinou-se graficamente a concentração inibidora de 50% (CI50) do composto em estudo. Os resultados encontram-se reunidos no quadro.

Exemplo c

Afinidade para o receptor de donamina 2 (Ρ2) (ensaio de ligação da 3H-Espiperona)

Conduziu-se a preparação da fracção bruta de sinaptosoma e os ensaios de ligação de acordo com o método referido em European Journal of Pharmacology, vol. 46, pág. 377, 1977 por I. Creese et al. Homogeneizou-se o corpo estriado congelado dissecado obtido a partir de ratos em 100 volumes de tampão de 50 mM de Tris-HCl (pH 7,7) arrefecido com gelo e centrifugou-se a suspensão a 500 x g durante 10 minutos à temperatura de 0°C.

Centrifugou-se o sobrenadante a 50 000 x g durante 15 minutos à temperatura de 0°C e homogeneizou-se o grânulo resultante em 100 volumes do tampão anterior e em seguida centrifugou-se a suspensão a 50 000 x g durante 15 minutos à temperatura de 0°C novamente. Homogeneizou-se o grânulo resultante em 150 volumes de tampão de 50 mM Tris-HCl (pH 7,1) contendo 120 mM de cloreto de potássio, 2 mM de cloreto de cálcio, 1 mM de cloreto de magnésio, 0,1% 16 de ácido ascórbico e 10 mM de pargilina. Incubou-se a suspensão à temperatura de 37°C durante 10 minutos e em seguida proporcionou-se como solução de membranas de sinaptosoma para os ensaios seguintes. Às alíquotas (900 m) da solução de membranas de sinaptosoma adicionou-se 50 ml de uma solução de 3H-Espiperona para uma concentração terminal, de 0,2 nM e 50 ml da solução do composto em estudo ou 50 ml do seu meio e incubou-se à temperatura de 37°C durante 20 minutos. Uma vez terminada a reacção, filtrou-se rapidamente a mistura sob vazio através de filtros WhatmanR GF/B. Lavou-se os filtros três vezes com 5 ml do tampão anterior e mediu-se em seguida a radioactividade do resíduo remanescente nos filtros através de um contador de cintilação líquida. Determinou-se a ligação não específica na presença de 100 mM de L)-Sulpiride. Determinou-se graficamente a concentração inibidora 50% (CI50) do composto em estudo. Os resultados encontram-se reunidos no quadro.

Composto preparado no Dj d2 5-HT1A 5-HT2 Exemplo 2 1,12 3,64 0,2 2,4 Exemplo 4 1,4 2,93 0,3 3,4 Exemplo 8 2,04 1,95 0,009 0,027 Exemplo 10 2,48 2,51 0,011 0,89

Afinidade expressa como CI50 μΜ

Além disso, descobriu-se inesperadamente que os compostos de fórmula geral I eram susceptíveis de modular a translocação de PKC em sinaptosomas de diferentes áreas do cérebro tais como o hipocampo e estriado. Os compostos de acordo com a presente invenção podiam, por consequência, ser utilizados no tratamento de patologias associadas com uma funcionalidade reduzida do caminho de transdução do sinal de PKC tais como diversas formas de demência, perturbações da memória, doença de Alzheimer e síndroma de Down. 17 7½

Translocação de PKC em diferentes áreas do cérebro

Obtiveram-se sinaptosomas purificados seguindo o processo descrito por Dunkley (Dunkley P. R., Health J. W:, Harrison S. M., Jarvie P.E., Glenfield P.J. e Rostas J.A.P. Um processo de percolação gradiente rápida para o isolamento de sinaptosomas directamente a partir da fracção SI: homogeneidade e morfologia de fracções subcelulares. Brainres 441:59-71, 1988).

Incubou-se sinaptosomas purificados a partir de córtex, hipocampo (10 mg/ml) durante 15 minutos à temperatura de 30°C na presença de doses crescentes dos compostos de acordo com a presente invenção dissolvidos em ácido tartárico (pH 7,0) ou do veículo sozinho.

Terminada a incubação, isolou-se os sinaptosomas purificados em tampão frio de Krebs contendo 10 mM de EGTA e processou-se então de acordo com Shearmann et al (Shearman M. S., Shinomura T., Oda T. e Nishizuka Y. Protein kinase C subspecies in adult rat hippocampal synaptosomes. A activação por diacilglicerol e ácido araquidónico. FEBS Lett 279:261-264,1991).

Lisou-se os sinaptosomas nesta solução durante 30 minutos à temperatura de 4°C com agitação. Centrifugou-se a suspensão Usada a 100000 g durante 60 minutos. Processou-se o sobrenadante resultante como “fracção citosólica”. Voltou--se suspender-se de novo o grânulo em tampão de lise que contém 0,1% de Triton X-100 à temperatura de 4°C durante 45 minutos. Repetiu-se a fase de centrifugação e o sobrenadante resultante representa a “fracção membranar”. Separaram-se as proteínas presentes nas fracções citosólica e membranar por SDS-PAGE e representaram-se graficamente em papel de nitrocelulose. 18 18

Detectou-se as manchas de PKC sobre Western com um anticorpo total policlonal de PKC (Upstate Biotechnology). Realizou-se a análise das manchas de Western dos isozimas de PKC utilizando anticorpos monoclonais (GIBCO). Detectou-se os complexos antigénicos do anticorpo por quimioluminescência melhorada. Analisaram-se os resultados por análise de imagem assistida por computador e exprimiram-se como percentagem de translocação de PKC em condições de controlo.

Os valores de translocação do PKC nos sinaptosomas do hipocampo do composto de acordo com a presente invenção encontram-se indicados no quadro seguinte: CONTROLO 100 COMPOSTO PREPARADO NO EXEMPLO 4 126

Num ensaio fisiológico utilizando sinaptosomas purificados e viáveis, os compostos de acordo com a presente invenção são susceptíveis de aumentar a translocação de PKC para o compartimento membranar. Estes resultados são de particular interesse considerando que a concentração de PKC é significativamente reduzida a fracção particulada de diversas regiões do cérebro com doença de Alzheimer (Masliah E., Cole G., Shimohama S., Hansen L., De Teresa R., Terry R.D. e Saitoh T. Differential involvement of protein kinase C isozymes in Alzheimer disease. JNeurosci 10:2113-2124, 1990). A toxicidade dos compostos de acordo com a presente invenção é bastante desprezável, e eles são, por consequência, utilizáveis com segurança como fármacos úteis.

19 19

Trata-se um paciente de acordo com a presente invenção de acordo com um método que compreende a administração ao paciente de uma quantidade eficaz de um composto de fórmula geral I ou um seu sal aceitável sob o ponto de vista farmacêutico. Deste modo, pode utilizar-se um composto de fórmula geral I ou um seu sal aceitável sob o ponto de vista farmacêutico para controlar condições atribuíveis a maus funcionamentos serotoninérgicos tais como a redução da termo--regulação ou função cognitiva, perturbações do sono, habituação a fármacos, hipertensão, hiperemese, depressão, ansiedade ou psicose, ou o controlo da saciedade ou retirada de fármacos, isquémia cerebral. A invenção proporciona ainda uma composição farmacêutica que compreende um derivado da ergolina de fórmula geral I ou um seu sal aceitável sob o ponto de vista farmacêutico em mistura com um diluente ou veiculo aceitável sob o ponto de vista farmacêutico.

Os compostos de fórmula geral I e os seus sais descritos na presente memória descritiva podem ser administrados pela via parentérica ou oral, de preferência pela via oral. Dependendo da via de administração, as composições podem apresentar-se sob a forma de dosagem sólida, semi-sólida ou líquida, tal como, por exemplo, comprimidos, pastilhas, cápsulas, pós, líquidos, suspensões ou similares. A composição incluirá um veiculo farmacêutico convencional, adjuvantes, etc. A dosagem dos presentes fármacos varia de acordo com o sexo, a idade, ou o estado ou registo médico dos pacientes, bem como de acordo com a via ou a finalidade da administração. De uma maneira geral, pode administrar-se os fármacos como doses mais simples ou como doses divididas de modo a proporcionar,

20 digamos, cerca de 1-10 mg/kg de peso do corpo por dia de ingredientes activos, de preferência cerca de 0,1-5 mg/kg de peso do corpo.

Prepara-se as composições farmacêuticas que contêm os compostos de acordo com a presente invenção de acordo com métodos convencionais com os ingredientes habituais.

Deste modo, para a administração por via oral, as composições farmacêuticas que contêm os compostos de acordo com a presente invenção são de preferência comprimidos, pastilhas ou cápsulas que contêm a substância activa conjuntamente com diluentes, tais como, por exemplo, lactose, dextrose, sacarose, manitol, sorbitol, sacarose, celulose, lubrificantes, por exemplo sílica, talco, ácido esteárico, estearato de magnésio ou de cálcio e/ou polietilenoglicois; ou podem conter também ligantes, tais como, por exemplo, amidos, gelatina, metil-celulose, goma arábica, tragacanta, polivinilpirrolidona, agentes desintegrantes, tais como, por exemplo, amidos, ácido algínico, alginatos; misturas efervescentes; corantes; edulcorantes, agentes molhantes, tais como, por exemplo, lecitina, polisorbatos, laurilsulfatos e, de uma maneira geral, substâncias não tóxicas e farmacologicamente inactivas utilizadas em formulações farmacêuticas.

As referidas preparações farmacêuticas podem ser preparadas de acordo com uma maneira conhecida, por exemplo, mediante processos de mistura, granulação, compressão, revestimento com açúcar ou revestimento com película.

De igual modo, pode preparar-se as referidas formulações farmacêuticas que contêm os compostos de acordo com a presente invenção recorrendo a métodos conhecidos e podem ser, por exemplo, xaropes ou gotas ou comprimidos para a administração oral, solução estéril para injecção ou supositórios. r 21

Pode preparar-se uma formulação para comprimidos como segue:

INGREDIENTE ACTIVO AMIDO SECO ESTEARATO DE MAGNÉSIO QUANTIDADE (mg/comprimido) 25 425 10 460

TOTAL

Mistura-se conjuntamente os ingredientes anteriores e comprime-se para formar comprimidos pesando cada um 460 mg.

Os exemplos seguintes ilustram a preparação do composto de acordo com a presente invenção.

Exemplo 1 6-Metil-8B-metil-[ 5-bromo-piridin-3-ilV 1.2.4-oxadÍ£izol-3-ill-1 Oa-metoxi-ergolina A uma solução de 5,5 g de 6-metil-8p-cianometil-lΟα-metoxi-ergolina em 100 ml de etanol anidro adiciona-se 1,55 g de cloridrato de hidroxilamina seguido por uma solução recentemente preparada de 0,52 g de sódio em 25 ml de etanol anjdro.

Após agitação durante l hora à temperatura ambiente, elimina-se o precipitado formado (NaCl) mediante filtração e aquece-se a solução resultante a refluxo durante 10 horas.

Concentra-se então a solução até 35 ml e adiciona-se em seguida mais 8,9 g de 3-metoxicarbonil-5-bromo-piridina e uma solução recentemente preparada de 1,1 g de sódio em 10 ml de etanol anidro.

Aquece-se a solução resultante a refluxo durante 5 horas. Remove-se o solvente e cromatografa-se o resíduo sobre gel de sílica eluindo com acetato de etilo/ciclo-hexano a 1/1. 22 Μ

Após evaporação do solvente e cristalização a partir de um pequeno volume de acetona, obtém-se 2,7 g do composto do título, P.F. 195-198°C.

Exemplo 2 1.6-Pimetil-8B-metil-r5-(5-bromo-piridin-3 -il)-l ,2,4-oxadiazol-3 -ίΠ-1 Oq-metoxi--ergolina A uma solução agitada de 2 g de 6-metil-8p-metil-[5-(5-bromo-piridin-3-il)--l,2,4-oxadiazol-3-il]-10a-metoxi-ergolina em 30 ml de dimetilsulfóxido adiciona--se, à temperatura ambiente, 0,5 g de hidróxido de sódio fmamente moído. Após agitação durante 30 minutos, adiciona-se uma solução de 0,9 g de iodeto de metilo em 10 ml de sulfóxido de dimetilo e prossegue-se a agitação durante 1 hora.

Dilui-se a mistura reaccional resultante com acetato de etilo e lava-se cuidadosamente com salmpura.

Após secagem, elimina-se o solvente e cromatografa-se o resíduo sobre gel de sílica eluindo com acetato de etilo/ciclo-hexano a 1/3, para se obter o composto do título com um rendimento de 63%, P.F. 176-179°C.

Exemplo 3 6-Metil-8B-metil-13 -(5-bromo-piridin-3-ilV 1.2,4-oxadiazol-5-ill-1 Oa-metoxi-ergoli-na A uma solução agitada de 4 g de 6-metil-8p-cianometil-10a-metoxi-ergolina em 50 ml de etanol anidro adiciona-se 5,6 g de ácido 5-bromo-nicotinoil--hidroxâmico e uma solução recentemente preparada de 0,65 g de sódio em 15 ml de etanol anidro. Aquece-se a solução resultante a refluxo durante 24 horas e, em seguida, elimina-se o solvente e submete-se o resíduo a cromatografia de coluna sobre gel de sílica eluindo com acetona/ciclo-hexano a 1/4.

Separa-se a fracção que contém o produto e elimina-se o solvente para se obter, após cristalização a partir de etanol, 1,7 g do composto do título, P.F. 201--206°C.

Exemplo 4 1.6- Dimetil-8B-metil-r3-(5-bromo-piridin-3-il)-1.2.4-oxadiazol-5-ill-10a-metoxi--ergollna

Procedendo conforme descrito no Exemplo 2, mas utilizando 6-metil-8(3--metil-[3-(5-bromo-piridin-3-il)-l,2,4-oxadiazol-5-il]-10a-metoxi-ergolina em vez de 6-metil-8p-metil-[5-(5-bromo-pindin-3-il)-l,2,4-oxadiazol-3-il]-10a-metoxi-er-golina, obtém-se o composto do título com o rendimento 55%, P.F. 185-189°C. Exemplo 5 1.6- Dimetil-2-bromo-8B-metil-r3-(5-bromo-piridin-3-ill-1.2.4-oxadiazol-5-ill-10a--metoxi -ergolina A uma solução de 2 g de l,6-dimetil-8P-metil-[3-(5-bromo-piridin-3-il)--l,2,4-oxadiazol-5-il]-10a-metoxi-ergolina em 75 ml de dioxano adiciona-se gradualmente 0,9 g de N-bromo-succinimida. Após agitação à temperatura de 40°C durante 2 horas, elimina-se o solvente e cromatografa-se o resíduo sobre gel de sílica eluindo com acetato de etilo.

Após cristalização em isopropanol obtém-se 1,3 g do composto do título, P.F. 167-172°C.

Exemplo 6 1 6-Dimetil-2-cloro-8B-metil-r3-(5-bromo-piridin-3-ill-1.2.4-oxadiazol-5-ill-10q--metoxi-ergolina A uma solução agitada de 2 g de l,6-dimetil-8p-metil-[3-(5-bromo-piridin-3--il)-l,2,4-oxadiazol-5-il]-10a-metoxi-ergolina em 50 ml de acetonitrilo e 0,5 ml de BF3-2 Et20 adiciona-se, gota a gota, uma solução de 0,6 g de cloreto de sulfurilo (SO2CI2) em 15 ml de acetonitrilo a -5°C.

Prossegue-se a agitação durante 1 hora, dilui-se em seguida a solução com acetato de etilo e lava-se com uma solução 1 M de hidróxido de amónio.

Após secagem, elimina-se o solvente e cristaliza-se o resíduo duas vezes em acetona, para se obter 0,8 g do composto do título, P.F. 159-164°C.

Exemplo 7 6-Metil-8B-r2-('5-bromo-piridin-3-il,)-1.3.4-oxadiazol-5-ill-10a-metoxi-ergolma A uma solução agitada de 12 g de 6-metil-8p-carboxi-1 Oa-metoxi-ergolina em 150 ml de tetra-hidrofurano adiciona-se gradualmente 7,2 g Ι,Γ--carbonildiimidazol e aquece-se em seguida à temperatura de 50°C durante 15 minutos. À solução límpida adiciona-se 8,5 g de 5-bromo-nicotinoil-hidrazina e aquece-se a mistura turva a refluxo durante 3 horas.

Elimina-se o solvente e cristaliza-se o resíduo em metanol para se obter 12,3 g de N-(6-metil-8P-carbonil-10a-metoxi-ergoUna)-N’-(5-bromo-nicotinoil)-hidrazi-na, P.F. 214-217°C.

Trata-se uma suspensão agitada de 3 g de N-(6-metil-8β-carbonil-1 Ocx--metoxi-ergolina)-N’-(5-bromo-nicotinoil)-hidrazina em 100 ml de tolueno com 10 g de trimetilsililpolifosfato e aquece-se em seguida a refluxo durante 15 horas.

Lava-se a solução turva com uma solução de hidróxido de sódio 1 M e em seguida com salmoura. 25 25 ê

Após secagem e evaporação do solvente, cromatografa-se o resíduo sobre gel de sílica eluindo com acetato de etilo. A cristalização em etanol permite obter 0,8 g do composto do título, P.F. 155-157°C.

Exemplo 8 1,6-Dimetil-8B- r2-(5-bromo-piridin-3-ilVE3.4-oxadiazol-5-i11-10a-metoxi-ergolina Procedendo conforme descrito no Exemplo 2, mas utilizando 6-meti.l-8P-[2--(5-bromo-piridin-3-il)-l,3,4-oxadiazol-5-il]-10a-metoxi-ergolina em vez de 6--metil-8p-metil-[5-(5-bromo-pindin-3-il)-l,2,4-oxadiazol-3-il]-10a-metoxi-ergo1i-na, obtém-se o composto do título com um rendimento de 35%, P.F. 183-186°C. Exemplo 9 6-Metil-8p-metil-r2-(5-bromo-piridin-3-il)-l,3,4-oxadiazol-5-in-10a-metoxi-ergoli-na

Procedendo conforme descrito no Exemplo 7, mas utilizando 6-metil-8p--carboximetil-lOa-metoxi-ergolina em vez de 6-metil-8p-carboxi-10oc-metoxi--ergolina, obtém-se o composto do título com um rendimento de 27%, P.F. 196--198°C.

Exemplo 10 1.6-Dimetil-8B-meti1-[2-(5-bromo-piridin-3 -il)-1.3.4-oxadiazol-5-ill-1 Qq-metoxi--ergolina

Procedendo conforme descrito no Exemplo 2, mas utilizando 6-metil-8P--metil-[2-(5-bromo-piridin-3-il)-l,3,4-oxadiazol-5-il]-10a-metoxi-ergolina em vez de 6-metil-8P-metil-[5-(5-bromo-piridin-3-il)-l ,2,4-oxadiazol-3-il]-l Oa-metoxi-er-golina, obtém-se o composto do título com um rendimento de 35%, P.F. 171-174°C.

Exemplo 11 6-Metú-8B-r5-(5-bromo-piridin-3-ilV 1.3.4-tiadiazol-5-ill-1 Oa-metoxi-ergolina A uma solução agitada de 3,5 g de N-(6-metil-8P-carbonil-10a-metoxi--ergolina)-N’-(5-bromo-nicotinoil)-hidrazina em 100 ml de piridina adiciona-se 5 g de pentassulfureto de fósforo. Aquece-se a suspensão amarela durante 15 horas, em seguida arrefece-se à temperatura ambiente e trata-se com 100 ml de uma solução de hidróxido de amónio 5 M. Após agitação durante 2 horas, dilui-se a solução verde resultante com acetato de etilo e lava-se com salmoura.

Após secagem e eliminação do solvente, filtra-se o resíduo sobre uma pequena almofada de gel de sílica eluindo com acetona/ciclo-hexano a 1/2 para se obter 1,2 g do composto do título, P.F. 157-163°C.

Exemplo 12 6-Metil-8B-metil-r2-(5-bromo-piridin-3-il)-1.3,4-oxadiazol-5-ill-10a-metoxi-ergoli- na

Procedendo conforme descrito no Exemplo 7, mas utilizando 6-metil-8p--carboximetil-10a-metoxi-ergolina, em vez de 6-metil-8B-carboxi-10a-metoxi-ergo-lina, obtém-se o composto do título com um rendimento de 15%, P.F. 143-147°C. Exemplo 13 6-Metil-8B-[2-(5-bromo-piridin-3-iiyi ,2,4-triazol-5-ill-10a-metoxi-ergolina A uma solução agitada de 5 g de 6-metil-8p-carboxi-10a-metoxi-ergolina em 100 ml de 1,4-dioxano adiciona-se gradualmente 2,9 g de Ι,Γ-diimidazol-carbonilo e aquece-se em seguida à temperatura de 50°C durante 15 minutos. À solução límpida adiciona-se 6 g de 5-bromo-mcotmoil-hidrazidma e 0,8 g de etóxido de sódio recentemente preparado e aquece-se em seguida a mistura turva a refluxo durante 10 horas.

Elimina-se o solvente e lava-se com salmoura o resíduo que se retomou em acetato de etilo.

Após secagem, elimina-se o solvente e submete-se a mistura reaccional bruta a cromatografia de coluna sobre gel de sílica eluindo com acetato de etilo/ciclo--hexano a 1/3 para se obter, após cristalização em acetona, 1,8 g do composto do título, P.F. 178-181°C.

Exemplo 14 6-Metil-8B-metil-r2-(5-bromo-piridin-3-il)-1.3.4-triazol-5-iH-10(x-metoxi-ergolina Procedendo conforme descrito no Exemplo 12, mas utilizando 6-metil-8p--carboximetil-1 Οα-metoxi-ergolina em vez de 6-meti 1 -8P-carboxi-1 θα-metoxi-er-golina, obteve-se o composto do título com um rendimento de 17%, P.F. 163-168°C. Exemplo 15 6-Metil-8 β-Γ 2-(5-bromo-piridin-3 -ilV 1.3,4-triazol-5-ill-1 Oa-metoxi-ergolina

Procedendo conforme descrito no Exemplo 12, mas utilizando 6-metil-8a--carboximetil-1 Oa-metoxi-ergolina em vez de 6-metil-8P-carboxi-10a-metoxi--ergolina, obteve-se o composto do título com um rendimento de 23%, P.F. 142--146°C.

Exemplo 16 1.6-Dimetil-8P-f 5 -(5-bromo-piridin-3 -ilV 1.3.4-tiadiazol-5-ill-1 Oa-metoxi-ergolina 28

Procedendo conforme descrito no Exemplo 2, mas utilizando 6-metil-8p-[5--(5-bromo-piridin-3il)-l,3,4-tiadiazol-5-ilJ-10a-metoxi-ergolina em vez de 6-metil--8p-metil-[5-(5-bromo-piridin-3'il)-1,2,4-oxadiazo1~3-il]-10a-metoxi-ergo1ina, obteve-se o composto do título com um rendimento de 35%, P.F. 131-137°C. JUino de 2001 9 Agente Oficial da Propriedade Industrial

JOSÉ DE SAMPAIO A.O.P.l.

Ruíi do Salitre, 195, r/c-Drt. ’ 1269-063 LISBOA

Claims

na qual o símbolo Ri representa um átomo de hidrogénio ou um grupo metilo; o símbolo R2 representa um átomo de hidrogénio, cloro ou bromo ou um grupo metilo; o símbolo n representa o número 0,1 ou 2; o substituinte na posição 8 encontra-se na configuração α ou β; o símbolo Het representa um anel heterocíclico aromático pentagonal, tendo o referido anel três heteroátomos os quais podem ser iguais ou diferentes e que são escolhidos de entre o grupo que consiste em átomos de enxofre, oxigénio e azoto, ou um seu sal de adição de ácido aceitável sob o ponto de vista farmacêutico.
2. Composto de acordo com a reivindicação 1 em que o anel heterocíclico pentagonal representado pelo símbolo Het é um grupo oxadiazol, tiadiazol ou triazol que se encontra ligado aos radicais ergolinilo e piridinilo através dos átomos de carbono como segue: N-N N-N o s 2

Ν-Ν -Λ >- Η
3. Composição farmacêutica que compreende um diluente ou veículo aceitável sob o ponto de vista farmacêutico e, como ingrediente activo, um composto tal como reivindicado na reivindicação 1 ou 2.
4. Processo para a preparação de um composto tal como definido na reivindicação 1 ou 2, processo esse que compreende (i) a reacção de um derivado activado de um composto de fórmula geral II

na qual os símbolos Ri, R2 e n têm os significados definidos antes com um composto de fórmula III; Br III N conhnh2 ou (i”) a reacção do composto de fórmula geral II conforme definido anteriormente com hidrato de hidrazina e a reacção subsequente do derivado de hidrazida resultante com um composto de fórmula ΠΓ; 3

Br

(ii) a reacção do composto resultante de fórmula IV

na qual os símbolos Rj, R2 e n têm os significados definidos antes, com um agente de desidratação, para se obter um composto de fórmula geral I na qual o símbolo Het representa um grupo de fórmula N-N -Λ,*- ou (ii”) a reacção do composto resultante de fórmula geral IV com um agente de sulfuração para se obter um composto de fórmula geral I na qual o símbolo Het representa um grupo de fórmula N—N S ou (i’) a reacção de um derivado activado de um composto de fórmula geral II conforme definida anteriormente com um composto de fórmula ΙΙΓ ’ Br

para se obter um composto de fórmula geral 1, na qual o símbolo Het representa um grupo de fórmula N-N Λ >- N H ou (i’”) a reacção de um. composto de fórmula geral V

na qual os símbolos Ri, R2 e n têm os significados definidos antes, com cloridrato de hidroxilamina na presença de uma base e (ii’”) a reacção do composto resultante de fórmula geral VI: NH r

NHOH VI 5 na qual os símbolos n, Ri e R2 têm os significados definidos antes, com um composto de fórmula geral ΠΓ tal como definida anteriormente para se obter um composto de fórmula geral I na qual o símbolo Het representa um grupo de fórmula 5 N—0

ou (i,v) a reacção de um composto de fórmula geral VII

na qual os símbolos n, R, e R2 têm os significados definidos antes, com um composto de fórmula geral III1V Br

iv para se obter um composto de fórmula geral I na qual o símbolo Het representa um grupo de fórmula ou

6

(iv) a reacção de um composto de fórmula geral VIII

na qual os símbolos Ri, R2 e n têm os significados definidos antes com um composto de fórmula ΠΓ Br

para se obter um composto de fórmula geral I na qual o símbolo Het representa um grupo de fórmula

ou (ivl) a reacção de um composto de fórmula geral V tal como definida anteriormente com um composto de fórmula ΠΙνι Br 1 IIIvi NHOH 7 para se obter um composto de fórmula geral I na qual o símbolo Het representa um grupo de fórmula 7 Br
5. Processo de acordo com a reivindicação 4, que compreende ainda a alquilação de um derivado de ergolina de fórmula geral I em que o símbolo Ri representa um átomo de hidrogénio para produzir um derivado de fórmula geral I em que o símbolo Rj representa um grupo metilo.
6. Processo de acordo com a reivindicação 4 ou 5, que compreende ainda a conversão de um derivado de ergolina de fórmula geral I na qual o símbolo R2 representa um átomo de hidrogénio em um outro composto de fórmula geral 1 na qual o símbolo R2 representa um átomo de cloro ou de bromo.
7. Processo de acordo com a reivindicação 4, 6 ou 6, que compreende ainda o tratamento de um derivado de ergolina de fórmula geral I com um ácido para produzir um seu sal de adição de ácido aceitável sob o ponto de vista farmacêutico. ho de 2001 > Agente Oficial da Proprieda

Lisboa, 25 de Jul C /U' JOSÉ DE SAMPAIO A.O.P.l. Rua do Salitre, 195, r/c-Drt. 1269-063 LISBOA