PT825197E

PT825197E - Novos derivados de 6-hidroxi e 6-oxo-androstano com actividade sobre o sistema cardiovascular e composicoes farmaceuticas que os contem

Info

Publication number: PT825197E
Application number: PT97111651T
Authority: PT
Inventors: Piero Melloni; Simona Sputore; Elena Folpini; Sergio De Munari; Marco Frigerio; Fulvio Serra
Original assignee: Sigma Tau Ind Farmaceuti
Priority date: 1996-08-19
Filing date: 1997-07-09
Publication date: 2001-01-31
Also published as: DE19633349A1; DE69703228T2; ATE196768T1; JP4297994B2; JPH1077292A; EP0825197A2; US5914324A; EP0825197B1; ES2151698T3; EP0825197A3; DK0825197T3; DE69703228D1; GR3034821T3; HK1009139A1

Description

DESCRIÇÃO "NOVOS DERIVADOS DE 6-HIDROXI E 6-OXO-ANDROSTANO COM ACTIVIDADE SOBRE O SISTEMA CARDIOVASCULAR E COMPOSIÇÕES FARMACÊUTICAS QUE OS CONTÊM" A presente invenção relaciona-se com novos derivados de 6-hidroxi e 6-oxo-androstano e com composições farmacêuticas que os contêm para o tratamento de doenças cardiovasculares tais como insuficiência cardíaca e hipertensão.

Os compostos da invenção têm a seguinte fórmula geral (I): OR2

I em que: o símbolo A representa CH-OR, C=N-OR, CH-CH=N-OR e C=CH-CH=N-OR, em que: R representa um grupo C2-C6 alquilo substituído por grupos NR3R4, NHC(NH)NHR5, C(NH)NR6R7 ou -0-(C2-C4-alquil)-NR3R4, em que R3 e R4, que podem ser iguais ou diferentes, são H, um grupo C1-C6 alquilo inferior, benzilo ou fenilo ou R3 e R4, tomados conjuntamente com o átomo de azoto, formam um anel mono-heterocíclico com 5 ou 6 membros saturado ou l /—\ insaturado não substituído ou substituído opcionalmente contendo outro heteroátomo seleccionado de oxigénio, enxofre ou azoto, r5, r6 e R7, que são iguais ou diferentes, podem ser H ou C1-C4 alquilo inferior; o símbolo =-=-=- na posição 6 e na posição 17 representa independentemente uma ligação simples ou dupla; quando o símbolo representa uma ligação simples r! representa grupos H, C1-C4 alquilo inferior e C2-C6 acilo; R2 representa H, metilo, um grupo C2-C6 alquilo não substituído ou substituído por nr^r4, grupos C2-C6 acilo, benzoílo, benzoílo substituído por um ou mais grupos hidroxilo, metoxi, amino, cloro, flúor, metilmercapto; quando o símbolo representa uma ligação dupla, significa um grupo ceto e R1 ou R2 não está presente.

Nesta invenção também estão incluídos sais farmaceuticamente aceitáveis de (I), que retêm a actividade biológica da base e são derivados de ácidos conhecidos tais como, por exemplo, ácido clorídrico, sulfúrico, fosfórico, málico, tartárico, maleico, cítrico, metanossulfónico, benzóico ou outros ácidos utilizados na arte.

Os grupos alquilo e alcenilo podem ser grupos de cadeia ramificada ou linear. 0 grupo C2-C6 alquilo é preferencialmente um grupo C2-C4 alquilo, e.g., etilo, n-propilo, iso-propilo, n-butilo, sec-butilo. 0 C2-C6 acilo é preferencialmente um grupo C2-C4 acilo, e.g. acetilo, propionilo, butirilo. O grupo NR2R4 é preferencialmente amino, metilamino, etilamino, n-propilamino, iso-propilamino, alilamino, 2 propargilamino, Ν,Ν-dimetilamino, Ν,Ν-dietilamino, N,N-di-n-propilamino, N,N-di-iso-propilamino, pirrolidinilo, piperidino, morfolino, 4-metil-piperazin-l-ilo, 1-imidazolilo. 0 grupo -0-C2-C4-alquil-NNR3R4 é preferencialmente 2-amino-etoxi, 2-N,N-dimetilamino-etoxi, 2-(l-pirrolidinil)etoxi.

Exemplos preferidos de compostos (I) específicos de acordo com a presente invenção sãos •3β-(4-N-etilaminobutoxi)-5a-androstano-6,17-diona • SP-í^-N^-dimetilaminoetoxiJ-Sa-androstano-õ, 17-diona •3a-(3-N/N-dimetilaminopropoxi)-5a-androstano-6/17-diona •3β-(3-N,N-dimetilaminopropoxi)-5a-androstano-6,17-diona •3β-(4-N,N-dimetilaminobutoxi)-5a-androstano-6,17-diona •3β-(2-N-pirrolidiniletoxi)-5a-androstano-6,17-diona •3β-[2-(2-N,N-dimetilaminoetoxi)etoxi]-5a-androstano-6,17-diona •3β-[2-(2-N-pirrolidiniletoxi)etoxi]-5a-androstano-6,17-diona •3β-(2-N-imidazoliletoxi)-5a-androstano-6,17-diona •3β-(3-N-imidazolilpropoxi)-5a-androstano-6,17-diona •3β-(2-N-piperidinoetoxi)-5a-androstano-6/17-diona •3β-[2-(4-metilpiperazin-l-il)etoxi]-5a-androstano-6,17-diona •3β-(2-aminoetoxi)-5a-androstano-6a,17β-άίο1 •3β-(3-aminopropoxi)-5α-androstano-6α/17β-άΐο1 •3β-(3-N-metilaminopropoxi)-5a-androstano-6a, 17β-άίο1 •3β-(2-Ν,Ν-άΐπιβ^ΐ3ΐηίηοθΐοχϊ)-5α^ηάΓθ3ΐ3ηο-6α, 17β-άίο1 • 3a-(3-N,N-dimetilaminopropoxi)-5a-androstano-6a,17β-άίο1 •3β-(S-NjN-dimetilaminopropoxiJ-Sa-androstano-óa,17β-άΐο1 •3β-(4-N/N-dimetilaminobutoxi)-5a-androstano-6a,17β-άίο1 •3β-(2-N^pirrolidiniletoxi)-5a-andros tano-6 α, 17β-diol • 3βί-[.2—(2-N,N-dimetilaminoetoxi)etoxi]-5a-androstano-6a, 17β-άΐο1 •3β-[ 2— (2-N-pirrolidiniletoxi)etoxi]-5a-androstano-6a,17β-άΐο1 •3β-(2-aminoetoxi)-5α-androstano-6β,17β-άΐο1 •3β-(3-N/N-dimetilaminopropoxi)-5α-3ηάΓθ3ΐηηο-6β/17β-άίο1 •3β-(2-guanidinoetoxi)-5a-androstano-6a,17β-άϊο1 •3β-(3-guanidinopropoxi)-5α-androstano-6β/17β-άΐο1 •3β-(2-guanidinoetoxi)-5α-androstano-6β, 17β-άίο1 3

•3β-[2-(2-N,N-dimetilaminoetoxi)etoxi]-5a-androstano-6p,17β-άίο1 •3β-(2-N,N-dimetilaminoetoxi)-5a-androstano-17β-acetato-6α-ol •3β-(3-Ν,N-dimetilaminopropoxi)-5a-androstano-17 β-acetato-6α-Gl • 3β-(3-N,N-dimetilaminopropoxi)-5a-androstano-17β-benzoato-6a-ol • 3β-(3-N,N-dimetilaminopropoxi)-5a-androstano-17β-(2-N,N-dimetilaminoetoxi)-6α-ο1 •3β-(2-aminoetoxi)-5a-androstano-6a-hidroxi-17-ona •3β-(3-N,N-dimetilaminopropoxi)-5a-androstano-6a-hidroxi-17-ona • 3β- (2 -N, N-dimetilaminoetoxi) -5a-andros t ano-17β-1ι1άΓθχί- 6-ona • (E,Z)-3-(2-aminoetoxiimino)-5a-androstano-6,17-diona • (E)-3-(2-aminoetoxiimino)-5a-androstano-6,17-diona • (Z)-3-(2-aminoetoxiimino)-5a-androstano-6,17-diona • (E)-3-(2-N,N-dimetilaminoetoxiimino)-5a-androstano-6,17-diona •(Z)-3-(2-N,N-dimetilaminoetoxiimino)-5a-androstano-6,17-diona •(E)-3β-(2-aminoetoxiiminometil)-5a-androstano-6,17-diona •(Z)-3β-(2-aminoetoxiiminometil)-5a-androstano-6,17-diona •(E)-3β-(2-N,N-dimetilaminoetoxiiminometil)-5a-androstano-6,17- diona •(Z)-3β-(2-N,N-dimetilaminoetoxiiminometil)-5a-androstano-6,17-diona • (E)-3-[2-(2-N,N-dimetilaminoetoxiimino)(E)-etilideno-5a-androstano-6,17-diona • (Z)-3-[2-(2-N,N-dimetilaminoetoxiimino)(E)-etilideno-5a-androstano-6,17-diona • (E)-3-[2-(2-N,N-dimetilaminoetoxiimino)(Z)-etilideno-5a-androstano-6,17-diona • (Z)-3-[2-(2-N,N-dimetilaminoetoxiimino) (Z)-etilideno-5cc-androstano-6,17-diona • (E,Z)-3-(2-aminoetoxiimino)-5a-androstano-6a,17β-άϊο1 • (E)-3-(2-N,N-dimetilaminoetoxiimino)-5a-androstano-6a,17β-άίο1 • (Z)-3-(2-N,N-dimetilaminoetoxiimino)-5cx-androstano-6a,17β-άϊο1 •(E) — 3β—(2-aminoetoxiiminometil)-5a-androstano-6a,17β-άιο1 • (Z) -3β- (2-aminoetoxiiminometil) -5cx-androstano-6a, 17β-άιο1 •(E)-3β-(2-N,N-dimetilaminoetoxiiminometil)-5a-androstano-6α,17β-άιο1 4

•(Ζ)-3β-(2-Ν,N-dimetilaminoetoxiiminometil)-5a-androstano-6α,17β-άϊο1 • (E)-3-[2-(2-N,N-dimetilaminoetoxiimino)(E)-etilideno-5a-androstano-δα, 17β-άΐο1 •(Ζ)-3-[2-(2-N,N-dimetilaminoetoxiimino)(E)-etilideno-5a-androstano-6a, 17β-άΐο1 • (Ε,Ζ)-3-[2-(2-Ν,N-dimetilaminoetoxiimino)(Ζ)-etilideno-5a-androstano-6a,17β-άίο1 •(Ε)-3-[2-(2-Ν,N-dimetilaminoetoxiimino)(Ζ)-etilideno-5a-androstano-6a,17β-άίο1 • (Ζ)-3-[2-(2-Ν,N-dimetilaminoetoxiimino)(Z)-etilideno-5a-androstano-6a, 17β-άΐο1

Os 6-hidroxi esteróides são metabolitos esteroidais produzidos tanto em seres humanos como em animais tais como o rato, o cão ou o babuino (Derks H. J. G. M. e Drayer N. M., Steroids 1978, 289; Setchell K. D., FEBS Lett. 1976, 70, 197; Miyabo S., Kishida S., Asato T. e Saito Z., Nippon Naibumpi Gakkai Zasshi 1976, 52, 630; Jellink Η. P. e Galraith A. R., J. Steroid Biochem. Mol. Biol. 1991, 39, 947). Presume-se que a principal função do processo de 6-hidroxilação é a eliminação do esteróide-mãe (Jellink Η. P. loc. cit., Orlowski J. e Clark A. F., Endocrinology 1991, 128, 872).

Os 6-hidroxi e 6-oxo-androstanos simples, tais como por exemplo 5α-androstano-3β, 6α, 17β-ΐΓίο1 ou 3β, 17β-άΐ30β^χϊ-5α- androstan-6-ona são compostos conhecidos (Isaacs J. T., McDermott I. R. e Coffey D. S., Steroids 1979, 33, 639). Também são compostos conhecidos derivados de pregnano tais como 17a-acetato-3a,6a-dihidroxi-5a-pregnan-20-ona ou 3β,17a-diacetato-5a-pregnano-6,2 0-diona (Templeton J. F. e Kumar V. P. S., J. Chem. Soc., Perkin Trans. I 1987, 1361). Os referidos derivados estão descritos como desprovidos de actividade farmacológica (Isaacs J. T. loc. cit.; Templeton J. F. loc. cit.; Templeton J. F., Kumar V. P. S., Kim S. R. e LaBella F. S., Steroids 1987, 383; Celotti F., Avogadri N., Ferraboschi P., Motta M., Negri- 5

Cesi P. e Santaniello E., J. Steroid Biochem. 1983, 397) e de facto são normalmente preparados como intermediários para a síntese de derivados em que o grupo ligado à posição 6 é diferente de oxigénio (e.g.: metilo, metileno, flúor, cloro, bromo. Ver por exemplo: Templeton J. F. loc. cit.; Buzzetti, F. Longo A., Crugnola A., Di Salle E., WO 93/14105). São evidentes as diferenças estruturais bem como farmacobiológicas entre os compostos (I) da presente invenção e os 6-oxo e 6-hidroxiandrostanos já conhecidos. 0 EP-A-590,489 descreve derivados de 17a aril androstanos 17-substituídos com actividade cardiotónica. A invenção proporciona adicionalmente um processo para a preparação de compostos de fórmula geral (I) que compreende a condensação de compostos de fórmula geral (II):

II em que o símbolo B representa CH-OH, C=0, CH-CH=0 ou C=CH-CH=0, o símbolo =-=^- representa uma ligação simples ou dupla e R^a tem os mesmos significados que R1 ou representa um grupo protector de hidroxilo tal como um grupo sililo, R2a tem os mesmos significados que R2 ou representa um grupo protector de hidroxilo tal como um grupo sililo, com um composto de fórmula geral (III) em que B representa CH- OH, 6

III

R-X em que R é como já definido, e em que X é um bom grupo de saída tal como um grupo halogéneo, mesiloxi, tosiloxi ou trifluoroacetoxi e com um composto de fórmula geral (IV) em que B representa C=0, CH-CH=0 ou C=CH-CH=0 R-0NH2 IV em que R é como já definido em que, se desejado, os grupos hidroxilo e/ou amino livres opcionalmente presentes em R, Rla e/ou r2^ estão protegidos por métodos bem conhecidos pelos especialistas na matéria, para dar, se necessário após remoção de grupos protectores conhecidos possivelmente presentes em R, Rla e/ou R^a, um composto de fórmula geral (I) que pode ser convertido noutro composto de fórmula geral (I) e/ou, se desejado, transformado num sal e/ou submetido a separação de isómeros. A reacção entre um composto de fórmula geral (II) e um composto de fórmula geral (III) é melhor realizada num solvente inerte, tal como tetrahidrofurano, dioxano, dimetilformamida, sulfóxido de dimetilo, benzeno, tolueno, diclorometano, clorofórmio ou suas misturas na presença de um agente de condensação tal como uma base forte (e.g.: hidreto de sódio ou de potássio), ou um ácido (e.g.: ácido p-toluenossulfónico, cloreto de hidrogénio, ácido trifluoroacético) ou um sal de um metal pesado (e.g.: carbonato de prata, óxido de prata, triflato de prata, óxido de mercúrio ou tetrafluoroborato de mercúrio) a uma temperatura na gama desde -10°C até à temperatura de refluxo da mistura reaccional. A reacção entre um composto de fórmula geral (II) e um composto de fórmula geral (IV) é melhor realizada num solvente tal como tetrahidrofurano, dioxano, dimetilformamida, sulfóxido 7

de dimetilo, benzeno, tolueno, diclorometano, metanol, etanol, água ou suas misturas, a uma temperatura na gama desde 0°C até à temperatura de refluxo das misturas reaccionais. A reacção pode ser realizada na presença de uma base, tal como hidróxido de sódio ou de potássio, carbonato de sódio ou de potássio, ou na presença de um ácido, tal como ácido clorídrico, ácido bromídrico ou ácido acético, o tempo de reacção varia desde alguns minutos até várias horas.

Todas as referidas transformações são apenas exemplos de procedimentos bem estabelecidos descritos em Química Orgânica (ver por exemplo: J. March "Advanced Organic Chemistry", J. Wiley & Sons, 1992; D. Barton e W. D. Ollis "Comprehensive Organic Chemistry", Pergamon Press, 1979) bem conhecidos pelos especialistas na matéria.

Os compostos de fórmula geral (II) são preparados a partir de prasterona (V):

V

HO por uma série de transformações químicas conhecidas que incluem por exemplo a oxidação do grupo hidroxilo a um grupo ceto, a oxidação de uma ligação dupla a um álcool, a transformação de um grupo ceto no aldeído homólogo, a transformação de um grupo ceto no éster vinílogo e redução de um éster ao correspondente aldeído ou álcool, bem como a protecção e a desprotecção de 8

grupos hidroxilo e ceto, por métodos correntes bem conhecidos pelos especialistas na matéria.

Gs compostos de fórmula geral (III) e (IV) são compostos conhecidos, frequentemente disponíveis comercialmente ou que podem ser preparados a partir de compostos disponíveis comercialmente por procedimentos correntes. A prasterona (V) está disponível comercialmente.

Verificámos que os derivados (I), preparados de acordo com a invenção, e os seus sais farmaceuticamente aceitáveis são agentes úteis para o tratamento de doenças cardiovasculares, tais como insuficiência cardíaca e hipertensão.

Além disso os compostos apresentam afinidade e inibem a actividade enzimática de Na+,K+-ATPase. Para testar a afinidade para o sítio receptor da Na+,K+-ATPase e a actividade inibidora sobre a enzima, foram utilizados os ensaios seguintes: a) deslocamento da ligação especifica de 3H-oubaína do receptor de Na+,K+-ATPase purificado de acordo com Jorghensen (Jorghensen P., BBA, 1974, 356, 36) e Erdmann (Erdmann E. et al., Arzneim. Forsh., 1984, 34, 1314); b) inibição da actividade da Na+,K+-ATPase purificada medida como % da hidrólise de 32P-ATP na presença e na ausência do composto de teste (Mall F. et al., Biochem. Pharmacol., 1984, 33, 47).

Acresce que os compostos da invenção possuem características inotrópicas positivas, tal como ilustrado pelo átrio esquerdo de cobaio controlado electricamente de acordo com Bova (Bova S., Blaustein Μ. P., Ludens J. H., Harries D. W., Ducharme D. W. e Hamlyn J. M., Hypertension, 1991, 17, 944).

Finalmente, os compostos da invenção têm uma baixa toxicidade quando comparados com esteróides cardiotónicos correntes. Murganhos que fizeram jejum durante nove horas foram tratados oralmente com uma administração única de doses 9 crescentes, depois colocados em gaiolas e alimentados normalmente. A toxicidade aguda (LD50) orientadora foi avaliada ao sétimo dia após o tratamento. A actividade de alguns compostos de fórmula geral (I) nos ensaios acima referidos está ilustrada na Tabela 1 a seguir-

Tabela 1

Exemplo Ligação a Inibição de Actividade Toxicidade N.s Na,K-ATPase Na,K-ATPase inotrópica aguda oral em EC50 (um IC50 (UM) in vltro EC50 (um murganhos LD50 (mg/kg) Digoxina 0,06 0,5 0,5 18 i-a 0,10 1,6 2,5 >600 i-d 0,13 1,6 10,5 >600 i-e 0,16 2.0 5,6 >600 I-f 0,10 1,0 0,8 560 I-h 0,02 0,3 0,6 520 I—i 0,50 12,0 7,1 >1000 i-k 0,32 3,2 12,6 >600 I-m 1,30 50,0 20,0 >1000

Para obter o efeito terapêutico desejado, os compostos da invenção de fórmula geral (I) podem ser administrados numa variedade de formas de dosagem, e.g. oralmente, na forma de comprimidos, cápsulas, comprimidos revestidos com açúcar ou com película, soluções ou suspensões liquidas; rectalmente, na forma de supositórios; parentericamente, e.g. intramuscularmente, ou por injecção intravenosa ou infusão; na forma de uma preparação "depot" administrada por implantação (por exemplo subcutaneamente ou intramuscularmente) ou por injecção intramuscular. 10

A dosagem depende da idade, peso, estado do doente e da via de administração; por exemplo, a dosagem adoptada para seres humanos adultos (com aproximadamente 70 kg de peso corporal) é 0,01 até 10 mg por dose, desde 1 até 3 vezes por dia para administração oral e 0,01 até 50 mg por dose, desde 1 até 3 vezes por dia para administração parentérica. A via oral é utilizada, em geral, para todas as patologias que requerem esses compostos. É dada preferência à via parentérica, e.g. injecção intravenosa ou infusão, para o tratamento da hipertensão aguda. É claro que os regimes de dosagem podem ser ajustados para proporcionar a resposta terapêutica óptima. A invenção inclui uma composição farmacêutica compreendendo um composto da invenção em associação com um excipiente (que pode ser um veiculo ou diluente) farmaceuticamente aceitável.

As composições farmacêuticas da invenção são normalmente preparadas seguindo métodos convencionais e são administradas numa forma farmacêutica adequada. Por exemplo, as formas sólidas podem conter, juntamente com o composto activo, diluentes, e.g., lactose, dextrose, sacarose, celulose, amido de milho e amido de batata, lubrificantes, e.g. silica, talco, ácido esteárico, estearato de magnésio ou de cálcio, e/ou polietileno glicóis; agentes ligantes, e.g. amidos, gomas arábicas, gelatina, metilcelulose, carboximetil celulose, polivinil pirrolidona, agentes desintegrantes, e.g. um amido, ácido alginico, alginatos, amido glicolato de sódio; misturas efervescentes; corantes; edulcorantes; agentes molhantes, por exemplo, lecitina, polissorbatos, laurilsulfatos; e, em geral, substâncias não-tóxicas e farmacologicamente inactivas utilizadas em formulações farmacêuticas. 11 7

As referidas composições farmacêuticas podem ser fabricadas de modo conhecido, por exemplo, por meio de processos de mistura, granulação, compressão, revestimento com açúcar, ou de revestimento com película.

As dispersões líquidas para administração oral podem ser e.g. xaropes, emulsões, suspensões e soluções.

Os xaropes podem conter como veículo, por exemplo, sacarose ou sacarose com glicerina e/ou manitol e/ou sorbitol; em particular um xarope para ser administrado a doentes diabéticos pode conter como veículos só produtos não metabolizáveis em glucose, ou metabolizáveis em muito pequenas quantidades de glucose, tais como sorbitol.

As suspensões e as emulsões podem conter como veículo, por exemplo, uma goma natural, agar, alginato de sódio, pectina, metilcelulose, carboximetilcelulose, ou álcool polivinílico.

As soluções para administração oral podem conter como veículo, por exemplo, água, etanol, propileno glicol, glicerina, sacarose, e, possivelmente, sais farmaceuticamente aceitáveis.

As soluções para injecções intramusculares podem conter juntamente com o composto activo um veículo farmaceuticamente aceitável, e.g. água estéril, azeite, oleato de etilo, glicóis, e.g. propileno glicol, e se desejado, uma quantidade adequada de cloridrato de lidocaína.

As soluções para injecções intravenosas ou infusões podem conter como veículo, por exemplo, água estéril, etanol, propileno glicol e, possivelmente, sais farmaceuticamente aceitáveis para preparar soluções aquosas salinas isotónicas estéreis. O.s supositórios podem conter juntamente com o composto activo um veículo farmaceuticamente aceitável, e.g. manteiga de 12 ^7 cacau, polietileno glicol, um éster tensoactivo de ácido gordo e polioxietileno sorbitano ou lecitina.

Os exemplos seguintes ilustram a invenção sem a limitar.

Exemplo 1

Oxalato de (E, Z)-3-(2-aminoetoxiimino)-5a-androstano-6α,17β-ά1ο1 (I-a)

Adicionou-se uma solução de dicloridrato de 0-(2- aminoetilj-hidroxilamina (350 mg) em água (4 mL) a uma solução de 3-oxo-5a-androstano-6a,17β-άϊο1 (Il-b, Prep. 2, 500 mg) em dioxano (4 mL) e a mistura resultante foi agitada durante 2 h. Adicionou-se hidróxido de sódio (1 N) até pH = 9 e a mistura foi extraída com clorofórmio (5 x 20 mL). As camadas orgânicas combinadas foram secas sobre sulfato de sódio e evaporadas até à secura a pressão reduzida. 0 resíduo foi purificado por cromatografia "flash" (S1O2, clorofórmio/metanol/amónia 90/10/1) para dar 460 mg de (E,z)-3-(2-aminoetoxiimino)-5a-androstano-6α,17β-άίο1, que foram dissolvidos em acetato de etilo/metanol 70/30 (5 mL) e tratados com ácido oxálico (110 mg) para dar 510 mg de oxalato de (E,Z)-3-(2-aminoetoxiimino)-5a-androstano- 6α,17β-άίο1 (I-a), como um pó branco, p.f. 151-156°C.

Exemplo 2 (E)-3-(2-N,N-dimetilaminoetoxiimino)-5a-androstano-6α,17β-άίο1 (I-b) (Z)-3-(2-N,N-dimetilaminoetoxiimino)-5a-androstano-6ct,17p-diol (I-c)

Adicionou-se uma solução de dicloridrato de 0-(2-N,N-dimetilaminoetil)-hidroxilamina (425 mg) em água (5 mL) a uma solução de 3-oxo-5a-androstano-6a,17β-όΐο1 (ΙΙ-b, Prep. 2, 500 mg) em dioxano (15 mL). Adicionou-se ácido clorídrico (1 N) até 13

ρΗ = 1 e a mistura resultante foi agitada de um dia para o outro. Adicionou-se hidróxido de sódio (4 N) até pH = 10,5 e a mistura foi extraída com acetato de etilo (3 x 50 mL). as camadas orgânicas combinadas foram secas sobre sulfato de sódio e evaporadas até à secura a pressão reduzida. 0 resíduo (640 mg) foi purificado por cromatografia "flash" (Si02, clorofórmio/metanol/amónia 90/10/1) para dar 240 mg de uma fracção A e 180 mg de uma fracção B. A fracção a foi cristalizada de acetato de etilo/metanol 70/30 para dar 46 mg de (Z)-3-(2-N,N-dimetilaminoetoxiimino)-5a-androstano-6a,17β-όϊο1 (I-c), como um pó branco, p.f. 117-120°C. A fracção B cristalizou de acetato de etilo/éter dietllico 50/50 para dar 33 mg de (E)-3-(2-N,N-dimetilaminoetoxiimino)-5a-androstano-6a,17β-όΐο1 (I-b), como um pó branco, p.f. 102-106°C.

Exemplo 3

Oxalato de ( Z ) -3 β - ( 2 - am i η o e t o x i i mi nome t i 1 ) - 5 α-androstano-6a, 17β-άϊο1 (I-d)

Uma solução de 3-formil-5cx-androstano-6a, 17β-άΐο1 (II-c, Prep. 3, 240 mg) em dioxano/água (2/1, 30 mL) foi tratada com hidróxido de sódio (0,1 N) até pH = 13-14 e agitada durante 15 minutos, depois adicionou-se uma solução de dicloridrato de 0-(2-aminoetil)-hidroxilamina (170 mg) em água (3 mL). Após 1 h, o solvente orgânico foi removido por destilação e a solução aquosa foi extraída com clorofórmio (5 x 20 mL). As camadas orgânicas combinadas foram secas sobre sulfato de sódio e evaporadas até à secura a pressão reduzida. O resíduo foi purificado por cromatografia "flash" (SÍO2, clorofórmio/metanol/amónia 90/10/1) para dar (Z)-3β-(2-aminoetoxiimino)-5a-androstano-6a,17β-άίο1, que foi dissolvido em acetato de etilo/metanol 70/30 e tratado com ácido oxálico para dar 85 mg de oxalato de (Z)—3β— (2 — aminoetoxiiminometil)-5a-androstano-6a,17β-άίο1 (I-d), como um pó branco, p.f. 190-192°C. 14

Exemplo 4

Oxalato de (Z)-3β-(2-N,N-dimetilaminoetoxiiminometil)-5a-androstano-6a,17β-άΐο1 (1-e)

Utilizando as mesmas condições reaccionais que as descritas no Ex. 3, e partindo de 3-formil-5a-androstano-6a,17β- diol (ΙΙτ-c, Prep. 3) e de dicloridrato de 0-(2-N,N-dimetilaminoetil)-hidroxilamina obteve-se o composto em epígrafe oxalato de (Z)-3β-(2-N,N-dimetilaminoetoxiiminometil)-5a-androstano-6a,17p~diol (I-e), p.f. 113-114°C, com rendimento de 42%.

Exemplo 5 (E)-3-[2-(2-N,N-dimetilaminoetoxiimino)(E)-etilideno-5a-androstano-6a,17β-άίο1 (I-f)

Uma solução de dicloridrato de O-(2-N,N-dimetilaminoetil)-hidroxilamina (215 mg) em "solução tampão pH 7" (Janssen 25.859.57, 5 mL) foi lentamente adicionada gota a gota a uma solução de (Ε)-3-ίοπηί1π^ΐ1βηο-5α^ηάΓθ3ΐ3ηο-6α,17β-άΐο1 (Il-d,

Prep. 4, 240 mg) em dioxano (20 mL) e "solução tampão pH 7" (5 mL). Durante a adição do reagente, o pH da mistura reaccional foi mantido entre 4 e 6,5 por adição de hidróxido de sódio (0,1 N). Após 2 h, adicionou-se hidróxido de sódio (4 N) até pH = 7,5 e a mistura foi extraída com clorofórmio (3 x 50 mL). As camadas orgânicas combinadas foram secas sobre sulfato de sódio e evaporadas até à secura a pressão reduzida. O resíduo (304 mg) foi purificado por cromatografia "flash" (S1O2, clorofórmio/metanol/amónia 95/5/0,1) para dar, após trituração com éter diisopropilico, 100 mg de (E)-3-[2-(2-N,N-dimetilaminoetoxiimino)(E)-etilideno-5a-androstano-6a,17β-άίο1 (I-f) como um sólido branco pálido, p.f. 110-115°C. 15

Exemplo 6 (E,Z)-3-[2-(2-N,N-dimetilaminoetoxiimi.no)(Z)-etilideno-5a-androstano-6a, 17β-άίο1 (I-g)

Uma solução de dicloridrato de 0-(2-N,N-dimetilaminoetil)-hidroxilamina (215 mg) em "solução tampão pH 10" (Janssen 25.860.58/ 10 mL) foi lentamente adicionada gota a gota a uma solução de (Z)-3-formilmetileno-5«-androstano-6a,17p-diol (Il-e,

Prep. 4, 240 mg) em dioxano (12 mL) e "solução tampão pH 10" (5 mL). Após 36 h a mistura foi extraída com clorofórmio (3 x 70 mL). As camadas orgânicas combinadas foram secas sobre sulfato de sódio e evaporadas até à secura a pressão reduzida. 0 resíduo (285 mg) foi purificado por cromatografia "flash” (Si02, clorofórmio/metanol/amónia 95/5/0,1) para dar, após trituração com éter diisopropílico, 70 mg de (E,Z)-3-[2-(2-N,N- dimetilaminoetoxiimino) (Z) -etilideno-5cx-androstano-6a, 17β-άΐο1 (I-g) como um sólido branco , p.f. 111-114°C.

Exemplo 7

Hemioxalato de ( E , Z ) - 3 - ( 2 - ami η o e t o x i im i η o ) - 5 a-androstano-6,17-diona (1-h)

Adicionou-se ácido o-iodoxibenzóico (560 mg) numa porção a uma solução de (E,Z)-3-(2-aminoetoxiimino)-5a-androstano-6a,17p- diol (I-a, 290 mg) e ácido trifluoroacético (60 μΕ) em sulfóxido de dimetilo (9 mL). A mistura reaccional foi agitada de um dia para o outro, depois foi diluída com hidróxido de sódio (0,1 N) e extraída com clorofórmio (3 x 50 mL). As camadas orgânicas combinadas foram secas sobre sulfato de sódio e evaporadas até à secura a pressão reduzida. 0 resíduo foi purificado por cromatografia "flash" (Si02, clorofórmio/metanol/amónia 90/10/1) e tratado com ácido oxálico para dar 250 mg de hemioxalato de (E,Z)-3-(2-aminoetoxiimino)-5cx-androstano-6,17-diona (I-h), p.f. 148-151°C. 16

kM'·

Exemplo 8 (Z)-3-(2-N,N-dimetilaminoetoxiimino)-5a-androstano-6,17-diona (I-i)

Adicionou-se ácido o-iodoxibenzóico (300 mg) numa porção a uma solução de (Z)-3-(2-N,N-dimetilaminoetoxiimino)-5a-androstano-6a,17β-άϊο1 (I-c, 140 mg) em sulfóxido de dimetilo (4 mL). A mistura reaccional foi agitada de um dia para o outro, depois foi diluida com hidróxido de sódio (0,1 N) e extraída com acetato de etilo (3 x 20 mL). As camadas orgânicas combinadas foram secas sobre sulfato de sódio e evaporadas até à secura a pressão reduzida. O resíduo (160 mg) foi purificado por cromatografia "flash" (Sic>2, clorofórmio/metanol/amónia 90/10/1) para dar 100 mg de (Z)-3-(2-N,N-dimetilaminoetoxiimino)-5a- androstano-6,17-diona (I-i), como um sólido amarelo claro, p.f. 141-145°C.

Exemplo 9

Oxalato de (Ε)-3β-(2-N,N-dimetilaminoetoxiiminometil)-5a-androstano-6,17-diona (I-j)

Utilizando as mesmas condições reaccionais descritas no Ex. 8, e partindo de (Ζ)-3β-(2-Ν,Ν-άΐιηθΐϋηπιχηοβΐοχϋιηίηοιηβ^1)-5a-androstano-6a,17β-όΐο1 (I-e, Ex. 4), obteve-se o composto em epígrafe oxalato de (E,Z)-3β-(2-N,N-dimetilaminoetoxiiminometil )-5a-androstano-6,17-diona (I-j) como um sólido, p.f.162-164°C. 17

10

Exemplo

Oxalato de (E)-3-[ 2-(2-N, N-dimetilaminoetoxiimi.no) (E)-etilideno-5a-androstano-6,17-diona (1-k)

Utilizando as mesmas condições reaccionais descritas no Ex. 8, e partindo de (E)-3-[2-(2-N,N-dimetilaminoetoxiimino)(E)-etilideno-5a-androstano-6a, 17f:5-diol (i-f, Ex. 5), obteve-se o composto em epígrafe oxalato de (E,Z)-3-[2-(2-N,N-dimetilaminoetoxiimino)(E)-etilideno-5a-androstano-6,17-diona (I-k) como um sólido, p.f.177-178°C.

Exemplo 11 3β-(3-N,N-dimetilaminopropoxi)-5a-androstano-6a,17β-άϊο1 (1-1)

Adicionou-se hidreto de sódio (300 mg, dispersão a 60% em óleo) a uma solução de 6a,17β-dietoximetoxi-5α-androstan-3β-ol (Il-f, Prep. 5, 1,8 g) e 3-N,N-dimetilamino-l-cloropropano (1,7 g) em 25 mL de tetrahidrofurano anidro, sob atmosfera de árgon à temperatura ambiente. A mistura foi aquecida a refluxo durante 32 h, depois foi arrefecida até à temperatura ambiente, adicionou-se solução saturada de cloreto de sódio e acetato de etilo, a camada orgânica foi separada e extraída várias vezes com HC1 1 N. A fase aquosa recolhida foi neutralizada com hidróxido de potássio 4 N e extraída com clorofórmio para dar, após processamento, um óleo castanho amarelado que foi dissolvido em acetonitrilo/água (85/15, 60 mL). Adicionou-se ácido p-toluenossulfónico até pH = 0,9 e a mistura reaccional foi agitada durante 24 h. Após o processamento usual o resíduo foi purificado por cromatografia "flash" (Si02, clorofórmio/metanol/amónia 90/10/1) para dar 400 mg de 3β-(3-N,N-dimetilaminopropoxi)-5a-androstano-6a,17β-άϊο1 (1-1) como um sólido branco, p.f. 117-123°c. 18

' ΜΛ

Exemplo 12 3p-(3-N,N-dimetllaminopropoxi)-5a-androstano-6,17-diona (I-m)

Adicionou-se ácido o-iodoxibenzóico (500 mg) numa porção a uma solução de 3β-(3-N,N-dimetilaminopropoxi)-5a-androstano-6α,17β-άίο1 (1-1, 200 mg) em sulfóxido de dimetilo (8 mL) e a mistura reaccional foi agitada de um dia para o outro. Foi diluida com hidróxido de sódio (0,1 N) e extraída com clorofórmio (3 x 30 mL). As camadas orgânicas combinadas foram secas sobre sulfato de sódio e evaporadas até à secura a pressão reduzida. 0 resíduo foi purificado por cromatografia "flash" (Si02, clorofórmio/metanol/amónia 90/10/1) para dar 140 mg de 3β-(3-N,N-dimetilaminopropoxi)-5a-androstano-6,17-diona (I-m) como um sólido amarelo claro, p.f. 124-125°C.

Exemplo 13 3β- (2-N-pirrolidiniletoxi)-5a-androstano-6,17-diona (I-n)

Utilizando as mesmas condições reaccionais descritas nos Exs. 11 e 12, e partindo de 6a,^3-dietoximetoxi-5a-androstan-3β-ο1 (ΙΙ-f, Prep. 5) e N-(2-cloroetil)-pirrolidina, obteve-se o composto em epígrafe 3β-(2-N-pirrolidiniletoxi)-5a-androstano-6,17-diona (I-n), p.f.136-140°C.

Exemplo 14 3β-(4-N,N-dimetilaminobutoxi)-5a-androstano-6,17-diona (I-o)

Utilizando as mesmas condiçoes reaccionais descritas nos Exs. 11 e 12, e partindo de 6a,17β-dietoximetoxi-5α-androstan-3β-ol (Il-f, Prep. 5) e 4-N,N-dimetilamino-l-clorobutano, 19

obteve-se o composto em epígrafe 3P-(4-N,N-dimetilaminobutoxi)- 5a-androstano-6,17-diona (I-o) como um óleo viscoso. l-H-RMN (300 MHz, CDCI3, ppm em relação a TMS): 3,60-3,40 (4H, m), 3,25 (1H, m), 2,55-1,20 (30H, m), 0,90 (3H, s), 0,78 (3H, s).

Exemplo 15

Oxalato de 3β- [ 2 - ( 2 - N-pi r r ol idini let oxi ) etoxi J - 5a-androstano-6,17-diona (I-p)

Utilizando as mesmas condições reaccionais descritas nos Exs. 11 e 12, e partindo de 6a,17p-dietoximetoxi-5a-androstan-3β-ο1 (ΙΙ-f, Prep. 5) e 2-(2-N-pirrolidinil)etoxi-l-cloroetano obteve-se o composto em epígrafe 3β-[2-(2-Ν-pirrolidiniletoxi)etoxi]-5a-androstano-6,17-diona e purificou-se como o sal oxalato (I-p), p.f. 69-73°c.

Exemplo 16 3β-[2-(2-N,N-dimetilaminoetoxi)etoxi]-5a-androstano-6,17-diona (I-q)

Utilizando as mesmas condições reaccionais descritas nos Exs. 11 e 12, e partindo de 6a,17p-dietoximetoxi-5a-androstan-3β-ο1 (Il-f, Prep. 5) e 2-(2-N,N-dimetilamino)etoxi-l-cloroetano obteve-se o composto em epígrafe 3β-[ 2 - ( 2-N , N-dimetilaminoetoxi)etoxi]-5a-androstano-6,17-diona (I-q) como um sólido amorfo.

Ifí-RMN (300 MHz, CDCI3, ppm em relação a TMS): 3,80-3,50 (8H, m), 3,25 (1H, m), 2,60-1,20 (26H, m), 0,90 (3H, s), 0,78 (3H, s). 20

Exemplo 17 3β-(3-N,N-dimetilaminopropoxi)-5a-androstano-6p,17β-άΐο1 (I-r)

Adicionou-se borohidreto de sódio (70 mg) a uma solução de 3β-(3-N,N-dimetilaminopropoxi)-5a-androstano-6,17-diona (I-m,

Ex. 12, 350 mg) em metanol (10 mL) e a mistura reaccional foi agitada de um dia para o outro à temperatura ambiente. Adicionou-se ácido acético glacial e a mistura reaccional foi evaporada até à secura a pressão reduzida. 0 resíduo foi purificado por cromatografia "flash" (Si02, clorofórmio/metanol/amónia 90/10/1) para dar 320 mg de 3β-(3-N,N-dimetilaminopropoxi)-5a-androstano-6p,17β-άίο1, p.f. 161-166°C.

Exemplo 18

Pode fabricar-se comprimidos, pesando cada um 100 mg e contendo 1 mg do principio activo, como se segue:

Composição (para 10.000 comprimidos): hemioxalato de (E,Z)-3-(2-aminoetoxiimino)- 5a-androstano-6,17-diona (I-h) 10,0 g Lactose 700,0 g Amido de milho 240,0 g Pó de talco 35,0 g Estearato de magnésio 15,0 g Ó principio activo é peneirado através de um adeguado e misturado com lactose e amido de milho. Adiciona-se volumes adequados de água purificada e granula-se os pós. Após secagem, os grânulos são passados por um tamiz e misturados com talco e estearato de magnésio. Os grânulos são então sujeitos a

compressão em comprimidos utilizando punções de 7 mm de diâmetro.

Podem ser preparados comprimidos com outras concentrações por alteração da proporção de princípio activo para lactose ou o peso de compressão e utilizando punções adequados.

Exemplo 19

Pode fabricar-se soluções para administração oral contendo 5 mg do princípio activo por dissolução de 5 mg de hemioxalato de (E,Z)-3-(2-aminoetoxiimino)-5a-androstano-6,17-diona (I-h) em 10 mL de etanol a 70%. Pode diluir-se um número adequado de gotas em água.

Exemplo 20

Pode fabricar-se ampolas para injecções intramusculares contendo 0,1 mg do principio activo como se segue:

Composição (para 10.000 ampolas): hemioxalato de (E,z)-3-(2-aminoetoxiimino)-5a-androstano-6,17-diona (I-h) 1,0 g

Água estéril 10,0 L O princípio activo foi dissolvido em água estéril. A solução foi esterilizada por filtração através de um filtro adequado e o enchimento feito nas ampolas. 22

Preparação 1 3β-terc-Butildimetilsililoxi-5a-androstano-6a,17β-άΐο1 (Il-a)

Adicionou-se cloreto de terc-butildimetilsililo (9,72 g), à temperatura ambiente, a uma solução de prasterona (V, 15 g) em piridina (60 mL). Após 24 h, a mistura reaccional foi vertida em água gelada (600 mL). Adicionou-se acetato de etilo, as duas camadas foram separadas, a camada orgânica foi lavada com bicarbonato de sódio (5%), dihidrogenofosfato de sódio (5%) e solução saturada de cloreto de sódio, seca sobre sulfato de sódio e evaporada até à secura a pressão reduzida. 0 residuo em bruto, [3^-terc-butildimetilsililoxi-androst-5-en-17-ona, 23,9 g? íh-RMN (300 MHz, CDCI3, ppm a partir de TMS): 5,32 (1H, d), 3,48 (1H, hept), 2,49 (1H, dd), 2,35-0,8 (33H, m), 0,03 (6H, s)] foi dissolvido em éter dietilico/etanol (335 mL/250 mL), arrefecido a 0°C e tratado com borohidreto de sódio (4 g). A mistura reaccional foi agitada à temperatura ambiente durante 1 h, depois tratada com ácido clorídrico 1 N até pH = 7, diluída com solução saturada de cloreto de sódio (300 mL) e extraída com éter dietílico. A camada orgânica foi separada, seca sobre sulfato de sódio e evaporada até à secura a pressão reduzida. O resíduo em bruto [ 3β-ίβΓθ-^^Μίιηβ^ΐ3ί1χ1οχΐ-3ηόΓθ3^5-θη-17β-ol, 21 g; !h-RMN (300 MHz, CDCI3, ppm a partir de TMS): 5,32 (1H, m), 3,62 (1H, m), 3,48 (1H, hept), 2,35-0,8 (34H, m), 0,03 (6H, s)] foi dissolvido em tetrahidrofurano (850 mL), arrefecido a 0°C e tratado com complexo de borano-sulfureto de dimetilo (THF, 1 M, 155 mL). A mistura reaccional foi agitada à temperatura ambiente durante 2 h, depois foi arrefecida a 0°C e tratada com água (300 mL), e tetrahidrato de perborato de sódio (43 gy. A mistura foi agitada de um dia para o outro à temperatura ambiente, adicionou-se cloreto de amónio (30%, 300 mL), as duas camadas foram separadas, a orgânica foi seca sobre sulfato de sódio e evaporada a pressão reduzida. 0 resíduo em bruto foi purificado por cromatografia "flash" (SÍO2; n- 23 Γ\

hexano/acetato de etilo 75/25) para dar 18 g do composto em epígrafe (Il-a) como uma espuma. 1H-RMN (300 MHz, CDCI3, ppm a partir de TMS): 3,68 (1H, t), 3,52 (1H, hept), 3,42 (1H, dd), 2,20-0,6 (35H, m), 0,03 (6H, s).

Preparação 2 3-Oxo-5a-androstano-6a,17β-άίο1 (Il-b)

Uma solução de 3p-terc-butildimetilsililoxi-5a-androstano-6α,17β-άιο1 (ΙΙ-a, Prep. 1) (20 g) e anidrido acético (25 mL) em piridina anidra (50 mL) foi agitada à temperatura ambiente durante 24 h. A mistura foi então vertida em gelo e água e extraída com acetato de etilo para dar após processamento usual 3β-ίβΓθ^υ^1άΐπιβΐϋ8ί1ϋοχΐ-6α, 17β-άί3σβ^χΐ-5α-3ηάΓθ8ΐ3ηο em bruto [23 g, l-H-RMN (300 MHz, CDC13, ppm a partir de TMS): 4,67 (1H, dd), 4,58 (1H, t), 3,50 (1H, hept)], utilizado como tal na reacção seguinte sem purificação adicional. Este intermediário foi desprotegido com fluoreto de tetrabutilamónio (21 g) em THF (350 mL), para dar 6a,17β-diacetoxi-5ã-androstan-3β-ol [18 g, l-H-RMN (300 MHz, CDCI3, ppm a partir de TMS): 4,67 (1H, dd), 4,58 (1H, t), 3,55 (1H, hept)], utilizado como tal na reacção seguinte sem purificação adicional.

Uma solução de 6a,17β-diacetoxi-5α-androstan-3β-ol (18 g) e ácido 0-iodoxibenzóico (27 g) em sulfóxido de dimetilo (180 mL) foi agitada à temperatura ambiente de um dia para o outro, depois foi diluída com água (1,5 L) e éter dietílico (400 mL) e filtrada. As duas camadas foram separadas, a fase aquosa foi extraída com éter dietílico (3 x 200 mL), as camadas orgânicas combinadas foram secas sobre sulfato de sódio e evaporadas até à secura a pressão reduzida, para dar 17 g de 6α, 17β-άΐ3σβ^χϊ-5α- androstan-3-ona. 0 resíduo em bruto foi dissolvido em metanol (380 mL) e hidróxido de sódio (4 N, 125 mL), agitado à temperatura ambiente durante 1 h. Foi então evaporado até à secura a pressão reduzida, o resíduo foi dissolvido em 24

diclorometano (600 mL) e água (5000 niL). As duas camadas foram separadas e a camada aquosa foi extraída com diclorometano (3 x 100 mL). As camadas orgânicas combinadas foram lavadas com ácido clorídrico (1 N) e água, secas sobre sulfato de sódio e evaporadas a pressão reduzida para dar 15 g de um resíduo em bruto, que foi purificado por cromatografia "flash" (Si02; clorofórmio/metanol 99/1) para dar 12 g de 3-oxo-5a-androstano-6α,17β-άίο1 (Il-B) como um sólido branco, p.f. 195-205eC.

Preparação 3 3-Formil-5a-androstano-6a,17β-άϊο1 (II-c)

Lavou-se hidreto de sódio (50% em óleo mineral, 640 mg) cuidadosamente com n-hexano, sob atmosfera de azoto. Em seguida adicionou-se sulfóxido de dimetilo anidro (160 mL) e iodeto de trimetilsulfoxónio (2,9 g) e a mistura reaccional foi agitada até dissolução completa. Adicionou-se 3-oxo-5a-androstano-6α,17β-άίο1 (Il-b, Prep. 2, 600 mg) e a mistura reaccional foi agitada à temperatura ambiente durante 2 h, depois foi vertida em gelo e água e extraída com acetato de etilo para dar, após processamento usual, 3-espiro-oxirano-5cx-androstano-6a, 17β-όίο1 [590 mg, iH-RMN (300 MHz, CDCI3, ppm a partir de TMS): 3,65 (1H> t), 3,39 (1H, m), 2,70-2,60 (2H, m)]. Adicionou-se complexo de trifluoreto de boro-éter dietílico destilado de fresco (300 μL) a uma solução de 3-espiro-oxirano-5cx-androstano-6a, 17β-άΐο1 em bruto (590 mg) em tetrahidrofurano anidro (25 mL) a -30°C, sob atmosfera de azoto. Após 70 minutos, a mistura reaccional foi vertida em hidrogeno fosfato dissódico (5%), extraída com clorofórmio (3 x 50 mL), as camadas orgânicas combinadas foram separadas e secas sobre sulfato de sódio anidro para dar, após evaporação até à secura, 530 mg de 3-formil-5a-androstano-6α,17βΓ-άίο1 (II-c) em bruto como um sólido amorfo (3α-ίοπηϊ1/3β-formil =1/6 determinado por 1H-RMN). 25

7 iH-RMN (300 ΜΗζ, CDC13, ppm a partir de TMS): 9,71 (1H, s), 9,67 (1H, s), 3,75 (1H, m), 3,65 (1H, t), 3,50 (1H, m), 2,40-06 (25H, m).

Preparação 4 (E)-3-Formilmetileno-5a-androstano-6a,17β-άίο1 (ΙΙ-d) e (Z)-3-formilmetileno-5a-androstano-6a,17β-άϊο1 (Il-e)

Adicionou-se fosfonoacetato de trimetilo (1,9 mL) a uma mistura de hidreto de sódio (50%, 500 mg) em tetrahidrofurano anidro (25 mL), e a mistura foi agitada à temperatura ambiente sob atmosfera de azoto durante 15 min, em seguida adicionou-se 3-oxo-5a-androstano-6a,17p-diol (Il-b, Prep. 2, 2,0 g) dissolvido em tetrahidrofurano anidro (5mL). Após lha reacção foi tratada com dihidrogeno fosfato de sódio (5%). A mistura foi extraída várias vezes com acetato de etilo, as camadas orgânicas combinadas foram secas sobre sulfato de sódio anidro e evaporadas até à secura a pressão reduzida. O resíduo em bruto foi purificado por cromatografia (SÍO2; n-hexano/acetato de etilo 50/50) para dar 780 mg de (E)-3-metoxicarbonilmetileno-5a-androstano-6a,17β-άΐο1 e 1,04 g de (Z)-3-metoxicarbonilmetileno-5a-androstano-6a,17β-άϊο1 como sólidos amorfos. (E)-3-metoxicarbonilmetileno-5cx-androstano-6a,17β-όίο1 1h-RMN (300 MHz, CDCI3, ppm a partir de TMS): 5,65 (1H, s largo), 3,75 (1H, m), 3,65 (3H, s), 3,52 (1H, t), 3,48 (1H, ddd), 2,55 (1H, m), 2,20-0,6 (24h, m). (Z)-3-metoxicarbonilmetileno-5a-androstano-6a,17β-άΐο1 1H-RMN (30 0 MHz, CDCI3, ppm a partir de TMS): 5,62 (1H, s largo), 4,10 (1H, m), 3,65 (3H, s), 3,52 (1H, t), 3,48 (1H, ddd), 2,40-0,6 (25H, m).

Adicionou-se hidreto de diisobutilaluminio (1 M em hexano, 10 mL) a -78°C a uma solução de (E)-3-metoxicarbonilmetileno-5a-androstano-6a,17β-άϊο1 (700 mg) em tetrahidrofurano anidro (25 mL) sob atmosfera de azoto. A mistura foi agitada de um dia para 26 Γ\

o outro, depois foi tratada (-78°C) com ácido sulfúrico (0,1 N, pH = 3-4) e extraída com acetato de etilo. As camadas orgânicas combinadas foram secas sobre sulfato de sódio anidro e evaporadas até à secura a pressão reduzida. O resíduo foi purificado por cromatografia "flash" (Si02; n- hexano/clorofórmio/acetona 10/45/45) para dar 640 mg de (E)-3-(2-hidroxietileno) -5a-androstano-6cx, 17β-άΐο1. l-H-RMN (300 MHz, CDCI3, ppm a partir de TMS): 5,35 (1H, m), 4,10 (2H, m), 3,52 (1H, t), 3,48 (1H, m), 2,55 (1H, m), 2,20-0,6 (25H, m).

Uma mistura de (E)-3-(2-hidroxietileno)-5a-androstano-6a,17p^diol (630 mg) e dióxido de manganês (3 g) em dioxano (60 mL) foi agitada à temperatura ambiente durante 40 h, depois foi filtrada sobre uma camada de celite. A solução orgânica foi seca sobre sulfato de sódio e evaporada até à secura a pressão reduzida, para dar 530 mg de (E)-3-formilmetileno-5a-androstano-6a,17p-diol (Il-d). 1H-RMN (300 MHz, CDCI3, ppm a partir de TMS): 10,03 (1H, d), 5,90 (1H, m), 3,65 (1H, t), 3,48 (1H, m) , 3,28 (1H, m), 2,55 (1H, m), 2,20-0,6 (24H, m).

Analogamente, partindo de (Z)-3-metoxicarbonilmetileno-5a-androstano-6a,17β-άΐο1 e utilizando as condições experimentais descritas acima foi possível preparar (Z)-3-formilmetileno-5a-androstano-6a, 17β-άϊο1 (Il-e). Í-H-RMN (300 MHz, CDCI3, ppm a partir de TMS): 10,08 (1H, d), 5,82 (1H, m), 3,65 (1H, t), 3,52 (1H, m), 2,5-0,6 (26H, m).

Preparação 5 6a,17β-Dietoximetoxi-5a-androstan-3β-ol (Il-f)

Uma solução de 3β-terc-butildimetilsililoxi-5a-androstano-6α,17β-άΐο1 (ΙΙ-a, Prep. 1, 10 g), éter clorometil etílico (16 mL) e di-isopropiletilamina (120 mL) em diclorometano seco (500 27 mL) foi agitada de um dia para o outro a 0°C. Adicionou-se ácido cítrico (solução aquosa a 10%, 1,5 L), a camada orgânica foi separada, lavada com água e seca sobre sulfato de sódio anidro. O solvente foi removido sob vácuo. O resíduo foi purificado por cromatografia (hexano/acetato de etilo 85/15) para dar 10,8 g de 3p-terc-butildimetilsililoxi-6a,17p-dietoximetoxi-5a-androstano. ^H-RMN (300 MHz, CDCI3, ppm a partir de TMS): 4,60 (4H, m), 3.70- 3,40 (7H, m), 2,20-0,6 (41H, m), 0,03 (6H, s).

Este intermediário foi desprotegido com fluoreto de tetrabutilamónio (12 g) em THF (100 mL), para dar 7,7 g de 6a, 17P-dietoximetoxi-5a-androstan-3(3-ol como um sólido amorfo. iH-RMN (300 MHz, CDCI3, ppm a partir de TMS): 4,62 (4H, m) , 3.70- 3,40 (7H, m), 2,20-0,6 (32H, m).

28

Claims

REIVINDICAÇÕES Compostos de fórmula geral (I) OR2

I em que: o símbolo A representa CH-OR, C=N-OR, CH-CH=N-OR e C=CH- CH=N-OR, em que: R representa um grupo C2-C6 alquilo substituído por grupos NR3R4, NHC(NH)NHR5, C(NH)NR6R7 ou -0-(C2-C4-alquil)-NR3R4, em que R3 e R4, que podem ser iguais ou diferentes, são H, um grupo C1-C6 alquilo inferior, benzilo ou fenilo ou R3 e R4, tomados conjuntamente com o átomo de azoto, formam um anel mono-heterociclico com 5 ou 6 membros saturado ou insaturado não substituído ou substituído opcionalmente contendo outro heteroátomo seleccionado de oxigénio, enxofre ou azoto, r5, r6 e R7, que são iguais ou diferentes, podem ser H ou C1-C4 alquilo inferior; o simbolo =^=.=. na posição 6 e na posição 17 representa independentemente uma ligação simples ou dupla; quando o símbolo --- representa uma ligação simples r! representa grupos H, C1-C4 alquilo inferior e C2--C6 acilo;

R2 representa H, metilo, um grupo C2-C6 alquilo não substituído ou substituído por Nr3r4, grupos C2-C6 acilo, benzoílo, benzoílo substituído por um ou mais grupos hidroxilo, metoxi, amino, cloro, flúor, metilmércapto; quando o símbolo representa uma ligação dupla, significa um grupo ceto e R^ ou R2 não está presente, ou os seus sais farmaceuticamente aceitáveis.
2. Composto de fórmula (I) de acordo com a reivindicação 1 seleccionado de: • 3p^(4-N-etilaminobutoxi)-5oc-androstano-6,17-diona •3β-(2-N,N-dimetilaminoetoxi)-5a-androstano-6,17-diona • 3a- (3-N,N-dimetilaminopropoxi)-5a-androstano-6,17-diona •3β-(3-N,N-dimetilaminopropoxi)-5a-androstano-6,17-diona •3β-(4-N,N-dimetilaminobutoxi)-5a-androstano-6,17-diona •3β-(2-N-pirrolidiniletoxi)-5a-androstano-6,17-diona •3β-[2-(2-N,N-dimetilaminoetoxi)etoxi]-5a-androstano-6,17- diona •3β-[2-(2-N-pirrolidiniletoxi)etoxi]-5a-androstano-6,17- diona •3β-(2-N-imidazoliletoxi)-5a-androstano-6,17-diona •3β-( 3-N-imidazolilpropoxi) -5cx-androstano-6,17-diona •3β-(2-N-piperidinoetoxi)-5a-androstano-6,17-diona •3β-[2-(4-metilpiperazin-1-il)etoxi]-5a-androstano-6,17-diona •3β—(2-aminoetoxi)-5a-androstano-6a,17β-άίο1 •3β-(3-aminopropoxi)-5a-androstano-6a, 17β-άΐο1 •3β-(3-N-metilaminopropoxi)-5a-androstano-6a, 17β-άΐο1 •3β-(2-N,N-dimetilaminoetoxi)-5a-androstano-6a,17β-άΐο1 • 3α- (3-N,N-dimetilaminopropoxi) -5a-androstano-6a, 17β-άίο1 •3β-(3-N,N-dimetilaminopropoxi)-5a-androstano-6a, 17β-άϊο1 •3β-(4-N,N-dimetilaminobutoxi)-5a-androstano-6a,17β-άΐο1 •3β-(2-N-pirrolidiniletoxi)-5a-androstano-6a,17β-άίο1 •3β-[2-(2-N,N-dimetilaminoetoxi)etoxi]-5a-androstano-6α,17β-άίο1 2

• 3p-,[2-(2-N-pirrolidiniletoxi)etoxi]-5a-androstano-6a/17p-diol • 3β-(2 -aminoetoxi)-Sa-androstano-õp,17p~diol • 3β- (3-N,N-dimetilaminopropoxi) -5a-androstano-6p, 17β-ά1ο1 •3β-(2-guanidinoetoxi)-5a-androstano-6a, 17β-άΐο1 • 3β-( 3^μ3ηΐάίηορι:οροχϊ)-5α-3ηάιχ^3ηο-6β, 17β-άϊο1 •3β-(2-guanidinoetoxi)-5α-3ηάιχ^3ηο-6β,17β-άίο1 •3β^[2-(2-Ν,N-dimetilaminoetoxi)etoxi]-5a-androstano-6β,17β-άϊο1 •3β-(2-N,N-dimetilaminoetoxi)-5α-androstano-17β-acetato-6α-ο1 •3β-(3-N,N-dimetilaminopropoxi)-5α-androstano-17β-acetato-6α-ο1 •3β-(3-N,N-dimetilaminopropoxi)-5α-androstano-17β-benzoato-6a-ol •3β-(3-Ν,N-dimetilaminopropoxi)-5a-androstano-17 β-(2-Ν,Ν-dimetilaminoetoxi)-6α-ο1 •3β-(2-aminoetoxi)-5a-androstano-6a-hidroxi-17-ona •3β-(3-N,N-dimetilaminopropoxi)-5a-androstano-6a-hidroxi-17 -ona • 3β- (2-N,N-dimetilaminoetoxi) -5cx-androstano-l^-hidroxi-6-ona • (E, Z)-3-(2-aminoetoxiimino)-5a-androstano-6,17-diona • (E) -3- (2-aminoetoxiimino) -5cx-andros tano-6,17-diona • (Z )-3-( 2-aminoetoxiimino )-5cc-andros tano-6,17-diona •(E)-3-(2-N/N-dimetilaminoetoxiimino)-5a-androstano-6/17-diona • (Z)-3-(2-N,N-dimetilaminoetoxiimino)-5a-androstano-6,17-diona • (Ε)-3β-( 2-aminoetoxiiminometil)-5a-androstano-6,17-diona • (Z) -3β-(2-aminoetoxiiminometil)-5oc-androstano-6,17-diona •(E)-3β-(2-N,N-dimetilaminoetoxiiminometil)-5a-androstano- 6.17- diona •(Z)-3β-(2-N,N-dimetilaminoetoxiiminometil)-5a-androstano- 6.17- diona 3 • (E)-3-[2-(2-N,N-dimetilaminoetoxiimino)(E)-etilideno-5a-androstano-6,17-diona •(Z)-3-[2-(2-N,N-dimetilaminoetoxiimino)(E)-etilideno-5a-androstano-6,17-diona • (E)-3-[2-(2-N,N-dimetilaminoetoxiimino)(Z)-etilideno-5a-androstano-6,17-diona •(Z)-3-[2-(2-N,N-dimetilaminoetoxiimino)(Z)-etilideno-5a-androstano-6,17-diona • (E,Z)-3-(2-aminoetoxiimino)-5a-androstano-6a,17p-diol • (E)-3-(2-N,N-dimetilaminoetoxiimino)-5a-androstano-6a,17p-diol •(Z)-3-(2-N,N-dimetilaminoetoxiimino)-5a-androstano-6α,17β-άϊο1 •(Ε)-3β-(2-aminoetoxiiminometil)-5a-androstano-6a, 17β-άίο1 •(Z)—3β—(2-aminoetoxiiminometil)-5a-androstano-6a,17β-άΐο1 •(E)-3β-(2-N,N-dimetilaminoetoxiiminometil)-5a-androstano-6α,17β-άϊο1 •(Z)-3β-(2-N,N-dimetilaminoetoxiiminometil)-5a-androstano-6α,17β-άίο1 • (E)-3-[2-(2-N,N-dimetilaminoetoxiimino)(E)-etilideno-5a-androstano-6a,17β-άιο1 • (Z)-3-[2-(2-N,N-dimetilaminoetoxiimino)(E)-etilideno-5a-androstano-6a,17β-άΐο1 •(E,Z)-3-[2-(2-N,N-dimetilaminoetoxiimino)(Z)-etilideno-5a-androstano-6a,17β-άΐο1 • (E)-3-[2-(2-N,N-dimetilaminoetoxiimino)(Z)-etilideno-5a-androstano-6a,17β-άϊο1 • (Z)-3-[2-(2-N,N-dimetilaminoetoxiimino)(Z)-etilideno-5a-androstano-6a,17β-άΐο1
3. Composição farmacêutica compreendendo um composto de acordo com a reivindicação 1 ou 2 ou um seu sal farmaceuticamente aceitável e um veículo farmacologicamente aceitável. 4 I
4. Utilização de um composto de acordo com a reivindicação 1 ou 2 na preparação de um medicamento útil para o tratamento de doenças cardiovasculares.
5. Utilização de acordo com a reivindicação 4 em que as doenças cardiovasculares são insuficência cardíaca ou hipertensão. Lisboa, 6 de Outubro de 2000 f AGENjTK OFICIAL DA PROPRIEDADE INDUSTRIAL

5