PT688314E - Derivados pro-droga de inibidores enzimaticos com grupos hidroxilo processo para a sua preparacao e sua utilizacao - Google Patents

Description

DESCRIÇÃO

"DERIVADOS PRÓ-DROGA DE INIBIDORES ENZIMÁTICOS COM GRUPOS HIDRÓXILO, PROCESSO PARA A SUA PREPARAÇÃO E SUA UTILIZAÇÃO" A presente invenção refere-se a pró-drogas, com as quais podem ser melhoradas a solubilidade e os parâmetros farmacocinéticos de inibidores enzimáticos. É conhecido que um gama variada de compostos com grupos hidróxilo (-0H) constituem compostos activos necessários para o tratamento ou combate de percursores de doenças ou estados de doença. Também é conhecido que estes compostos correspondentes, de acordo com o estado da técnica, são caracterizados parcialmente através de determinadas desvantagens inerentes, em especial problemas associados à biodisponibilidade após a administração do composto, bem como, problemas associados à estabilidade ou à formulação farmacêutica. Uma biodisponibilidade diminuída desta forma, pode parcialmente ser consequência de uma baixa solubilidade em água e também numa perca de composto durante e depois de uma administração convencional. Uma baixa solubilidade dificulta ou torna impossível a preparação de formulações, com os produtos correspondentes do estado da técnica, utilizados posteriormente para injecções intravenosas ou intramusculares ou aplicações oftálmicas.

Um facto muito prometedor para a solução deste problema é constituído pela esterificação da função hidróxilo dos compostos activos, de forma a se obter uma melhoria farmacológica das formas de pró-droga. 1

Alguns tipos de ésteres foram já descritos como compostos activos de pró-drogas contendo grupos hidróxilo (Hans Bundgaard, Design of Prodrugs, Elsevier Science Publishers B.V., Amsterdam, 1985).

EsLas pró-drogas esterificadus são dependentes da hidrólise enzimática (esterases), de forma a ser obtida uma velocidade de transformação utilizável das pró-drogas como compostos activos. Esta actuação tem consequentemente muitas desvantagens: 1) Existência de fortes oscilações das concentrações de esterase em diferentes indivíduos. Isto pode conduzir a um padrão de presença dos compostos activos desequilibrado e imprevisto. 2) A velocidade da hidrólise enzimática dos ésteres através das esterases depende, quer dos ácidos quer também do teor de grupos hidróxilo dos ésteres (Bundgaard acima citado). Alguns ésteres, por exemplo, ésteres de compostos activos com grupos hidróxilo impedidos, constituem maus substractos para as esterases. É objectivo desta invenção disponibilizar medicamentos contendo pró-drogas de ésteres contendo grupos hidróxilo, nos quais não se observam as desvantagens acima mencionadas.

Foi assim descoberto que determinadas pró-drogas de inibidores enzimáticos não possuem as desvantagens acima mencionadas. São consequentemente objecto da invenção os compostos de fórmula I em que os vários grupos podem ser definidos igualmente sendo independentes entre si, como W-[R5]a I, em que W significa um grupo mono, bis ou tris-hidroxilado 2 ,„7 de um composto com as seguintes fórmulas

3

Antimicrobial Agents and Chemotherapy, 35, 2209, (1991) F. 4

n = !, 2 F. 5 J. Med Chem., 35, 2687, (1990)

Antimicrobial Agents and Chemotherapy, 35, 2209, (1991)

4

F. 9

F . 10

Antiviral Research, 17, 265, (1992) F.ll 5 Γ\

Peptide Chemistry, 399, (1991) F.13

Biochem. Biophys. Res. Commun., 181, 1459, (1991) F.14 6

7

Proc. Natl. Acad. Sei., USA, 87, 8805, (1990) F.18

a significa 1, 2 ou 3 e R5 significa um grupo de fórmula III, O II -O-C- R -C— R12 15 FT i -N- .15 ,21 ,24 ,16 L16 -tn X significa O, S, NR20 ou N+(R20)2/ de preferência S ou NR20, em que

Rz0 significa H, (Ci-C6)-alquilo, (C3-C7) -ciclo-alquilo, - CH2- (CH2) n-NR21R24, -CH2-C (O) -R28, CH2CONH (Ci-Ce) -alquilo, que pode estar substituído com até 5 grupos -OH, COO (Ci~C6) -alquilo, ou -CH2-P (0)Me2 ( (Ci-C4) -alquilo) 2, 8

de preferencia significa H, (Cx-C6) -alquilo, -CH2-C(0)-R26 ou -CH2-P(0) ( (Ci-C4) -alquilo) 2, tendo o significado especialmente preferido de H, (Ci~ C4)- alquilo, R11, R12, R15 e R16 significam, independentemente entre si, H ou (C1-C4)-alquilo, de preferência H ou metilo, R21 significa H, (Ci-C5)-alquilo, (C3-C?) -ciclo- ou (C1-C4)-alcóxialquilo, de preferência H, (Cí-Cí)-alquilo, R24 significa H, (Ci-Ci8)-alquilo, (C3-C14) -ciclo-alquilo, (C2-C18)-alquenilo, (C2-Ci8) -alquinilo ou (Cs-Ci4) -arilo, em que cada um destes pode estar uma vez, duas vezes ou tês vezes substituído através de (C6-Ci4) -arilo, (Cê-Cu) -arilóxilo, (C3-C14)-ciclo-alquilo, hidróxilo, (Ci-C4)-alcóxilo, -C- (O) -R28, P (O) ( (C!-C4)-alquilo) 2 ou halogéneos, e está directamente ligado a NR2- ou eventualmente ligado através de CO, ou um a-aminoácido ligado através do grupo carbonilo, ou R24 significa ((C3-C4)-alquilo)-N-( (C^C,) -alquilo) - (Ci~C4) -alquilo-NH- ( (Ci-C4)-alquilo, ou R24 forma com R21 um heterociclo, significando de preferência R24 H, (Ci-C4)-alquilo, que pode estar substituído eventualmente por fenilo, NH2 ou (C3-C·?)-ciclo-alquilo e está directamente ligado a NR21 ou eventualmente ligado através de CO, um α-aminoácido natural ligado através do grupo carbonilo, -CH2C(0)R28, -CH2-P (0) Me2, - (CH2) 0n (Me) (C.h2) aNHMe, sendo especialmente preferido o significado para R24 de H ou (Ci-C4)-alquilo, R2ê significa OH, - (Ci~C6) -alquilo, 0- (C3-C6) -ciclo-alquilo, NH2, -NH-(Ci-Cg)-alquilo, que se pode encontrar susbtituído com até 5 grupos -OH, -NH-(C3-C7)-ciclo- 9 t? alquilo ou -N-bis(Ci—C4)-alquilo, de preferência R2t significa OH, NH2, O (Ci-C6) -alquilo, -NH-(C1-C4)-alquilo ou N-bis (C1-C4)-alquilo, significando R28 de forma especialmente preferida, independentemente entre si, OH, NH2 ou O (Cí-Cí) -alquilo, em que 1 s m n o pode significar 2 ou e, de preferência 2, pode significar 1, 2, 3, 4 ou 4, de preferência 1, 4 ou 5, e de forma especialmente preferida 1, pode significar 0, 1, 2, 3 ou 4, de preferência 2 ou 3, pode signiifcar 1, 2 ou 3, de preferência 1 ou 2 pode significar 0, 1, 2 ou 3, de preferência 0, 1, ou 2, de forma especialmente preferida 0.

Os grupos R5 especialmente preferidos, com os quais os grupos -OH estão derivatizados com os grupos acima referidos, são os seguintes:

,32 1.1

R

RJU RJi rJZ I.l.l H H H 1.1.2 Metilo H H 1.1.3 Etilo H H 1.1.4 H Metilo H 1.1.5 H Etilo H 1.1.6 H Propilo H 1.1.7 H Isopropilo H 1.1.8 H butilo H 1.1.9 H 2-Butilo H 1.1.10 H t-Butilo rH 10

r- ~R3D Rix I.l.ll H Ciclo-hexilmetilo H 1.1.12 H 2-Ciclo-hexiletilo H 1.1.13 H Benzilo H 1.1.14 Metilo Metilo H 1.1.15 Etilo Etilo H 1.1.16 Propilo Propilo H 1.1.17 Butilo Butilo H 1.1.18 Metilo Etilo H 1.1.19 Metilo Propilo H 1.1.20 Metilo Isopropilo H 1.1.21 Metilo Butilo H 1.1.22 Metilo 2-Butilo H 1.1.23 Metilo t-Butilo H 1.1.24 Metilo Ciclo-hexilmetilo H 1.1.25 Metilo 2-Ciclo-hexiletilo H 1.1.26 Metilo Benzilo H 1.1.27 H Metilo Metilo 1.1.28 H Etilo Etilo 1.1.29 Metilo Metilo Metilo 1.1.30 Etilo Etilo Etilo 1.1.31 Metilo - (CH2) 3N (Me) CH2CH2NHMe Metilo 1.1.32 -CH2P0Me2 Metilo H 1.1.33 Metilo -CH2P0Me2 H 1.1.34 -CH2C02tBu Metilo H 1.1.35 -ch2co2h Metilo H 1.1.36 -CH2C02tBu H H 1.1.37 -ch2co2h H H 1.1.38 Metilo -CHzC02tBu H 1.1.39 Metilo -ch2co2h H 1.1.40 H -CH2C02tBu H τ—1 ! i 1—1 M H -ch2co2h H 1.1.42 Metilo Glicilo Metilo 11

ΊΡ "Ã31 RJ^ 1.1.43 Metilo Glicilo H 1.1.44 Η Glicilo H 1.1.45 Η Glicilo Metilo 1.1.46 Metilo Arginilo Metilo 1.1.47 Metilo Arginilo H 1.1.48 Η Arginilo H 1.1.49 Η Arginilo Metilo 1.1.50 Metilo Glutamilo Metilo 1.1.51 Metilo Glutamilo H 1.1.52 Η Glutamilo H 1.1.53 Η Glutamilo Metilo 1.1.54 Metilo Lisilo Metilo 1.1.55 Metilo Lisilo H 1.1.56 Η Lisilo H 1.1.57 Η Lisilo Metilo 1.1.58 Metilo Asparagilo Metilo 1.1.59 Metilo Asparagilo H 1.1.60 Η Asparagilo H 1.1.61 Η Asparagilo Metilo 1.1.62 Metilo Sarcosilo Metilo 1.1.63 Metilo Sarcosilo H 1.1.64 Η Sarcosilo H 1.1.65 Η Sarcosilo Metilo 1.1.66 Metilo Acetilo H 1.1.67 Η Acetilo H 1.1.68 Metilo Propionilo H 1.1.69 Η Propionilo H 1.1.70 MeLilo Butanoilo II 1.1.71 Η Butanoilo H 1.1.72 Metilo Pivaloilo H 1.1.73 Η Pivaloilo H 1.1.74 Met i1 ο Pentanoílo H 12

Rjl RiZ 1.1.75 Η Pentanoílo H 1.1.76 Metilo Hexanoílo H 1.1.77 Η Hexanoílo H 1.1.78 Metilo Benzoilo H 1.1.79 Η Benzoílo H 1.1.80 Metilo Fenilacetilo H 1.1.81 Η Fenilacetilo H 1.1.82 Metilo 3-Fenílpropionílo H 1.1.83 Η 3-Fenilpropionílo H 1.1.84 Metilo 3,3-Dimetilbutanoílo H 1.1.85 Η 3,3-Dimetilbutanoílo H

1.2

RJU RJi -ψ2 1.2.1 H 2-(Metilamino)etilo Metilo 1.2.2 H 2-(Dimetilamino)etilo Metilo 1.2.3 H - (CH2) 2N (Me) (CH2) 3NH2 Metilo 1.2.4 H H H 1.2.5 Metilo H H 1.2.6 Etilo H H 1.2.7 H Metilo H 1.2.8 H Etilo H 1.2.9 H Prnpí1 o H 1.2.10 H Isopropilo H 1.2.11 H Butilo H 1.2.12 H 2-Butilo H 1.2.13 H t-Butilo H 13

1.2.14 Η Ciclo-hexilmetilo H 1.2.15 Η 2-Ciclo-hexiletilo H 1.2.16 Η Benzilo H 1.2.17 Metilo Metilo H 1.2.18 Etilo Etilo H 1.2.19 Propilo Propilo H 1.2.20 Butilo Butilo H 1.2.21 Metilo Etilo H 1.2.22 Metilo Propilo H 1.2.23 Metilo Isopropilo H 1.2.24 Metilo Butilo H 1.2.25 Metilo 2-Butilo H 1.2.26 Metilo t-Butilo H 1.2.27 Metilo Ciclo-hexilmetilo H 1.2.28 Metilo 2-Ciclo-hexiletilo H 1.2.29 Metilo Benzilo H 1.2.30 H Metilo Metilo 1.2.31 H Etilo Etilo 1.2.32 Metilo Metilo Metilo 1.2.33 Etilo Etilo Etilo 1.2.34 -CH2C02tBu Metilo H 1.2.35 -ch2co2h Metilo H 1.2.36 -CH2C02tBu H H 1.2.37 -CH2C02H H H 1.2.38 Me -CH2C02tBu H 1.2.39 Me -ch2co2h H 1.2.40 H -CH2C02tBu H 1.2.41 H -CII2C02II H 1.2.42 Metilo Glicilo Metilo 1.2.43 Metilo Glicilo H 1.2.44 H Glicilo H 1.2.45 H Glicilo Metilo 14 7 Γ*' Λ·χ I \ 7

RJ± ’R32 1.2.46 Metilo Arginilo Metilo 1.2.47 Metilo Arginilo H 1.2.48 Η Arginilo H 1.2.49 Η Arginilo Metilo 1.2.50 Metilo Glutamilo Metilo 1.2.51 Metilo Glutamilo H 1.2.52 Η Glutamilo H 1.2.53 Η Glutamilo Metilo 1.2.54 Metilo Lisilo Metilo 1.2.55 Metilo Lisilo H 1.2.56 Η Lisilo H 1.2.57 Η Lisilo Metilo 1.2.58 Metilo Asparagilo Metilo 1.2.59 Metilo Asparagilo H 1.2.60 Η Asparagilo H 1.2.61 Η Asparagilo Metilo 1.2.62 Metilo Sarcosilo Metilo 1.2.63 Metilo Sarcosilo H 1.2.64 Η Sarcosilo H 1.2.65 Η Sarcosilo Metilo 1.2.66 Metilo Acetilo H 1.2.67 Η Acetilo H 1.2.68 Metilo Propionilo H 1.2.69 Η Propionilo H 1.2.70 Metilo Butanoílo H 1.2.71 Η Butanoílo H 1.2.72 Metilo Pivaloílo H 1.2.73 Η Pivaloilo H 1.2.74 Metilo Pentanoílo H 1.2.75 Η Pentanoilo H 1.2.76 Metilo Hexanoílo H 1.2.77 Η Hexanoilo H 15

ΊΡ -ψτ — R3Z 1.2.78 Metilo Benzoílo H 1.2.79 Η Benzoílo H 1.2.80 Metilo Fenilacetilo H 1.2.81 Η Fenilacetilo H 1.2.82 Metilo 3-fenilpropionílo H 1.2.83 Η 3-Fenilpropionilo H 1.2.84 Metilo 3,3-Dimetilbutanoílo H 1.2.85 Η 3,3-Dimetilbutanoílo H

1.3

RJi R32 1.3.1 H H 1.3.2 Metilo H 1.3.3 Etilo H 1.3.4 Propilo H 1.3.5 Isopropilo H 1.3.6 Butilo H 1.3.7 2-Butilo H 1.3.8 t-Butilo H 1.3.9 Ciclo-hexilmetilo H 1.3.10 2-Ciclo-hexiletilo H T.3.11 Benzilo H 1.3.12 Metilo Metilo 1.3.13 Etilo Etilo 1.3.14 -CH2C02tBu H 1.3.15 -ch2co2h H 16

Ju/Αλ

Rjl RJ~ 1.3.16 Glicilo H 1.3.17 Glicilo Metilo 1.3.18 Arginilo H 1.3.19 Arginilo Metilo 1.3.20 Glutamilo H 1.3.21 Glutamilo Metilo 1.3.22 Lisilo H 1.3.23 Lisilo Metilo 1.3.24 Asparagilo H 1.3.25 Asparagilo Metilo 1.3.26 Sarcosilo H 1.3.27 Sarcosilo Metilo 1.3.28 Acetilo H 1.3.29 Propionilo H 1.3.30 Butanoilo H 1.3.31 Pívaloílo H 1.3.32 Pentanoílo H 1.3.33 Hexanoilo H 1.3.34 Benzoílo H 1.3.35 Fenilacetilo H 1.3.36 3-Fenilpropionílo H 1.3.37 3,3-Dimetilbutanoilo H 17 ο

1.4 IP R31 R32 1.4.1 H H H 1.4.2 H Metilo H 1.4.3 H Etilo H 1.4.4 Metilo Metilo H 1.4.5 Etilo Etilo H 1.4.6 H Metilo Metilo 1.4.7 H Etilo Etilo 1.4.8 Metilo Metilo Metilo 1.4.9 Etilo Etilo Etilo

Os compostos de acordo com a presente invenção especialmente preferidos, são os compostos nos quais W(OH)a significa F.15, que se encontra substituído uma ou duas vezes através de um grupo de fórmula 1.1, em que R30 significa hidrogénio, Ci-C4-alquilo, CH2P(0)Me2, CH2- C02H ou CH2C02t.Bu, R31 significa hidrogénio, Ci-C4-alquilo, eventualmente substituído com NH2 ou NH (C1-C3)-alquilo; Arg, Gly, Sar, Lys, Pro, His, Trp, - (CH2) 3~N (Me) CH2-CH2NHMe, CHzP(0)Me2, CH2C02tBut ou CH2C02H e R32 significa hidrogénio ou Ci-C4-alquilo, ou que se encontra substituído uma ou duas vezes por um grupo de fórmula 1.2 em que R3u significa hidrogénio ou c^-Ca-alquilo, 18

R31 significa hidrogénio, Ci-C3~alquilo, 2 (metilamino)etilo, Arg, ou - (CH2) -N(Me) (CH2)3NH2, e R32 significa hidrogénio ou Ci-C3-alquilo, ou que se encontra substituído uma ou duas vezes por um grupo de fórmula I.3 em que R31 significa hidrogénio, Gly, Leu, (C1-C5) -alcanoílo eventualmente substituído com fenilo ou com até 3 grupos metilo, e R32 significa hidrogénio ou Ci-C3-alquilo, ou que se encontra substituído uma ou duas vezes por um grupo de fórmula 1.4 em que R30 significa Ci-C^-alquilo, R31 significa Ci-C3_alquilo, e R32 significa Ci-C3_alquilo, ou hidrogénio.

Como Exemplo indicam-se consequentemente os exemplos de compostos de fórmula I W-[R5]a, em que W' deve estar na base do inibidor enzimático. 1) a = 1; W' = F.15, respectivamente com 1.1.1 a 1.1.85, 1.2.1 a 1.2.85, 1.3.1 a 1.3.37 e 1.4.1 a 1.4.9 2) a = 2; W' = F.15, respectivamente com 1.1,1 a 1.1.85, 1.2.1 a 1.2.85, 1.3.1 a 1.3.37 e 1.4.1 a 1.4.9 3) a = 1; W' = F.l, F.2, F.4, F.5 (n=l), F.5 (n=2), F.7, F.ll, F.12, F.16, F.17 e F.19, respectivamente com: 1.1.2, 1.1.8, 1.1.14, 1.1.15, 1.1.10, 1.1.17, 1.1.29, 1.1.31, 1.1.55, 1.1.66, PO 00 1—í H 1.1.85, 1.2.17, 1.2.18, 1.2.44, 1.2.45, 1.2.70, I. 2.82, 1.2.83, 1.3.2, 1.3.3, 1.3.4, 1.3.16, 1.3.30, 1.3.2 19

V Γ\ V*' (~r>y- 7 São muito especialmente preferidos compostos, nos quais W(OH)a é o composto de fórmula F.15, que se encontra substituído uma ou duas vezes através de um grupo de fórmula 1.1 ou 1.2, em que

R 30 4) a = 2; W' = 5) a = 3; W' = I. 3, .36, 1.3.37, I. 4. .4, 1.4.5, I. 4.8, I. 4.9 F. 3, , F. 4, F.5 (n -2), F. 12, respectivamente com: : I. 1.2, 1.1. 14, 1.1 .15, 1.1 .16, 1.1. 17, I. 1, .31, 1.1.55, 1.1. 66, 1.1 • 71, 1.1 .82, I. 1, .84, I. 2, .17, 1.2.18, 1.2. 44, 1.2 .45, 1.2 .70, I. 2. • 71, 1.2.82, 1.2. 83 I. 3, .2, 1.3.3, I. 3.4, I. 3.16 , i. 3.30 , 1.3 .36, I. 3. .37, I. 4. .4, 1.4.5, I. 4.8, I. 4.9 F. 8, - re spectivamente com: I. 1. 2, 1.1.14, I .1.15, 1.1. 16, 1.1. 17 I. 1. .31, 1.1.55, 1.1. 66, 1.1 71, 1.1 .82, I. 1. .84, I. 2. .17, 1.2.18, 1.2. 44, 1.2 .45, 1.2 .70, I. 2. .71, 1.2.82, 1.2. 83 I. 3. .2, 1.3.3, I. 3.4, I. 3.16 , i. 3.30 , 1.3 .36, I. 3. .37, I. 4. • 4, 1.4.5, I. 4.8, I. 4.9 significa hidrogénio, Ci-C3-alquilo, R31 significa hidrogénio, Ci-C3-alquilo, eventualmente substituído por NH2 ou NH (Cx-C3) -alquilo, e Rj2 significa hidrogénio ou CH3.

Ao objecto da presente invenção pertencem também os sais dos compostos de fórmula I farmacologicamente compatíveis, por exemplo, hidrocloretos, hidrobrometos, citronatos, tartaratos, etanosulfonatos, fumaratos, glucuronatos, 20 sulfatos, isopropanosulfonatos, malonatos, gluconatos, lactatos, metanosulfonatos, tosilatos, tartronatos, propanosulfonatos.

Para além disso, pertence ao objecto da presente invenção, um processo para a preparação de compus Los de fórmula la, que é caracterizado por um composto activo, de fórmula W-(OH)b, em que W se encontra definido acima e b pode significar 1, 2 ou 3, mas maior ou igual a a com A) sendo um composto de fórmula (X)

V

O

II

C-AG (X) que se transforma num composto de fórmula (XX) [OH]b-a-W-[OCO- (CR11, R12) S-V]a (XX) e de seguida B) o composto resultante de fórmula (XX) por sua vez ser transformado por nucleófilos de fórmulas (XI) 15 ,21 15 ,21 H-X- R' ,24 ,16 16 -τη (XI) em que W, a, b, X, R11, R12, r15, r16, r21, R24, 1, m, η, o p, q, r e s possuem os significados mencionados 21 acima

V constitui um grupo abandonante adequado, de preferência Br, Cl, OTs, sendo especialmente preferido Br, AG significa um grupo abandonante adequado para esterificação, de preferência Br ou Cl ou um grupo resultante dos métodos de activação de ésteres para ácidos carboxilicos (Bodansky, Peptide Research, vol. 3, 1992, página 134 a 139). O passo A do processo acima referido decorre num solvente orgânico como acetonitrilo, THF ou acetato de etilo (EE) . As monoacilações decorrem com, ou de preferência, sem bases catalíticas ou sob adição de "sieves" moleculares, decorrendo as biacilações na presença de uma base, de preferência N-etil-di-isopropilamina e/ou 4-dimetilaminopíridina (DMAP),ou através de adição de "sieves" moleculares, de preferência de -78°C a 66°C, sendo especialmente preferido de 0 a 40°C. O tratamento decorre de forma conhecida, através de extracção, cromatografia, recristalização, precipitação, etc. 0 passo B do processo acima referido decorre também num solvente orgânico, como por exemplo, THF, EE, dimetilformamída (DMF) em acetonitrilo, de preferência de -78°C a 82°C, dendo especialmente preferido de 0°C a 40°C, eventualmente sob adição de iodo.

Os grupos de protecção que ainda se encontram contidos na molécula após a substituição, de preferência benzilóxicarbonilo (Z) , metóxitritilo (Mtr), tert.butilóxicarbonilo (BOC) e éster -tert-butílico (OtBu), são hidrolioados por processos estandartizados (Greene, Protective Groups in Organic Synthesis, Wiley 1979). 0 tratamento decorre também de acordo com processos conhecidos, através de extracção, cromatografia, recristalização, precipitação, etc. 22 Γ\

—; / A preparação de compostos de fórmula 1 a 15 decorre de acordo com as referências citadas

Os compostos de fórmulas XI a XIII são obtidas comercialmente (por exemplo, Aldrich Chemie GmbH & Co. KG, Steinheim) ou podem ser sintetizados de acordo com métodos gerais conhecidos, por exemplo, de acordo com Beilstein, "Handbuch der Organischen Chemie", volume IV, bem como obras complementares, Springer Verlag Berlim, Heidelberg, New-York ou Houben Weyl, "Methoden der Organischen Chemie", Vol. 11/1, 11/2 e E 16d2, Thieme Verlag Stuttgart,

Helv. Chim. Acta, 74, 654 e seguintes (1991), J. Med. Chem., 34, 2, 269 e seguintes (1991) ou Greene a.a.O, em particular de acordo com a literatura citada nos documentos anteriores.

Devido às suas caracteristicas, os novos compostos de acordo com a presente invenção são especialmente adequados para a administração na forma de soluções aquosas esterilizadas, através de injecção intravenosa, infusão intravenosa ou intramuscular ou injecção subcutânea ou para utilização tópica em olhos. Devido à sua boa solubilidade a valores de pH ácidos, estas pró-drogas são úteis também para a administração perorai, por exemplo, para melhorar a biodisponibiliade de compostos activos de partida de difícil solubilidade, que contêm um grupo hidróxilo. Para além disso, as novas pró-drogas, devido às suas caracteristicas de solubilidade e estabilidade, são muito adequadas para a administração rectal ou dermal.

Os derivados de pró-droga lipofílicos de fórmula I podem ser ligeiramente modificados ou controlados através da correspondentes escolha dos substituíntes nos compostos, quer relativamente à basicidade amínica e consequentemente o 2? grau de ionização a valores de pH fisiológicos, quer também relativamente à hidrofobia dos substituintes. Assim, podem ser escolhidos derivados de pró-droga de fórmula I que se encontrem em posição de, em combinação, melhorar a solubiliade e lipofilia, possuindo assim uma capacidade de transporte de membrana melhorada, de forma que se melhore a biodisponibilidade dos compostos activos de partida do ponto de administração.

Os compostos de acordo com a fórmula I podem ser utilizados no tratamento de um qualquer conjunto de doenças, para as quais são úteis compostos activos de partida, medicamentos ou fármacos contendo grupos hidróxilo. Assim, as pró-drogas de compostos de fórmula I podem ser administradas em formas de administração ou formulações tópicas, parenteral, rectal ou através de um "spray" de inalação, que contêm agentes veiculares, agentes auxiliares ou veículos não tóxicos e farmaceuticamente aceitáveis. A formulação e a preparação de cada forma deste largo espectro de formas de administração, nos quais as pró-drogas podem ser transformadas, são conhecidas do especialista. Informações adicionais podem ser obtidas através de "Remington's Pharmaceutical Sciences", décima sexta edição, 1980.

As composições farmacêuticas, que contêm o princípio activo, podem existir em formas adequadas para administração oral, por exemplo, comprimidos, pastilhas, rebuçados, suspensões aquosas ou soluções aquosas, pós dispersáveis ou granulados dispersáveis, emulsões, cápsulas rijas ou moles, xarope ou elixir. Para a administração oral, podem ser preparadas determinadas composições correspondentes a métodos de preparação de composições farmacêuticas de acordo com o estado da técnica, podendo estas composições conter uma ou mais substâncias do grupo dos edulcorantes, agentes de paladar, corantes e conservantes, de forma a que 24 \ seja obtida uma preparação farmacêutica elegante e boa para ser administrada.

No âmbito das formulações para administração oral encontram-se comprimidos, que contêm o composto activo em mistura com agentes veiculares farmaceuLicamente aceitáveis. Estes agentes veiculares podem ser, por exemplo, agentes de diluição (como o carbonato de cálcio, cloreto de sódio, lactose, fosfato de potássio, ou fosfato de sódio, granulados ou agentes de digestão (degradação) (por exemplo, amido de batata, ácido alginico), agentes de ligação (como amido, gelatina, ou goma arábica) e agentes lubrificantes (como estearato de magnésio, ácido esteárico ou talco) Os comprimidos podem não ser revestidos ou podem ser revestidos através de técnicas conhecidas de revestimento, de forma a retardar a dissolução e resorpção no tracto do estômago-intestino, e assim manter o efeito durante um período de tempo mais prolongado. Assim podem ser utilizados, por exemplo, agentes retardadores como o monoestearato de glicerilo ou diestearato de glicerilo.

As formulações para a administração oral podem também existir na forma de cápsulas de gelatina rija, nas quais o composto activo se encontra misturado com agente de diluição sólido, por exemplo, carbonato de cálcio, fosfato de cálcio ou caolino, ou na forma de cápsulas de gelatina dura, nas quais o composto activo se encontra misturado com água ou um meio oleoso, por exemplo, óleo de amendoim, parafina líquida ou óleo de azeitona (azeite).

Para a utilização rectal, os compostos de acordo com a fórmula I da presente invenção, as formas de administração típicas compreendem, supositórios, cápsulas de gelatina rectais (soluções e suspensões) ou clisteres ou micro-clisteres (soluções ou suspensões). Assim, numa 25 formulação típica para supositórios, combina-se um inúmero conjunto de compostos, de acordo com á presente invenção, com um inúmero conjunto de bases para supositório farmaceuticamente aceitáveis como manteiga de cacau, ácidos gordos esterifiçados (C10-C18), gelatina glicerinizada, e diferentes substâncias solúveis ou dispersíveis em âgua, como polietilenoglicol e éster de polietileno de ácido sórbico. Podem ser incluídos diferentes aditivos como salicilato ou tenso-activos. Podem ser obtidos os clisteres ou micro-clisteres da solução tipo, simplesmente através da dissolução em água das pró-drogas solúveis em água, de acordo com a presente invenção, ou em qualquer outra substância contendo água, por exemplo, 0,5% de metilcelulose ou um outro tipo de substância contendo água com uma viscosidade maior.

Para uma utilização tópica, as pró-drogas são aplicadas na forma de cremes, unguentos, geis, soluções ou similares, de acordo com método conhecidos do estado da técnica.

As soluções aquosas dos compostos de fórmula I, para administração parenteral ou aplicação oftálmica, contêm também outros constituintes como conservantes, anti-oxidantes, formadores de quelantes, s.usbtâncias tampão ou outros agentes de estabilização.

Naturalmente o espectro das doses terapêuticas dos compostos de acordo com a presente invenção, varia com o tamanho e necessidades do paciente, e das dores a serem tratadas ou simptomas de doenças. Em geral, pode-se contudo afirmar, que são suficientes aa seguintes indicações de doseamento. Para administração oral corresponde a dose terapêutica necessária de um composto de acordo com a presente invenção com a base molecular, que fôr necessária para o composto de partida activo contendo grupos hidróxilo. Para a utilização tópica, o composto de acordo com a 26 presente invenção a utilizar, deve-se encontrar numa concentração de 0,01% a 5% (num material veicular tópico adequado), que seja suficiente para o local que atinja. A quantidade de composto activo, que pode ser combinada com as substâncias veiculares, de forma a resultar uma única forma de administração, varia com o indivíduo a ser tratado e com cada uma das formas de administração. Assim, por exemplo, uma determinada formulação para uma pessoa para uma administração oral conter entre 5 mg e 5 g de composto activo com uma quantidade conveniente e razoável de compostos veiculares, que constituam 5 a 95% do total da preparação. Outras formas de administração, possuem uma quantidade menor de teor de composto activo, por exemplo de 0,1 mg e 5 mg. As unidades de dose contêm em geral entre cerca de 0,1 mg e 500 mg do composto activo. É compreensível que a dose específica para cada paciente isoladamente depende de um grande conjunto de factores, inclusivamente da actividade do composto específico, e que é utilizado, idade, peso do corpo, estado de saúde geral, sexo, da alimentação, do período de administração, via de administração, velocidade de secreção, efeitos de metabolismo com outros medicamentos e da complexidade da doença sob tratamento.

Exemplos

Exemplo 1 R5 = 0C0CH2Br

Bromoacetóxilo R5* = OH W = F.15 27

1,13 g de Ν,Ν'-bis-f (2S- (1,1-dimetiletilsulfonilmetilo) -3- (1-naftilo) - (propionilo) -L-valilo]-2S, 5S-diamino-l, 6-difenilo-hexano-3R,4R-diol (R5=R5*=OH) foram adicionados em 25 mL de THF seco com 610 mg de dimetilaminopiridina e uma solução a partir de 400 mg de brometo de bromoacetilo em 1 mL de THF seco, sob atmosfera de árgon a 0°C durante 10 minutos. Após 20 minutos de agitação a 0°C, levou-se à temperatura ambiente e removeu-se o solvente a vácuo à temperatura ambiente. O resíduo foi dissolvido em EE (acetato de etilo) e agitado com KHSO4 (3x) e depois com uma solução de NaCl. A fase orgânica foi concentrada a vácuo e o resíduo purificado em sílica-gel (tolueno:EE 1:1 a 2:1).

Rendimento: 340 mg RMN (270 Mhz, CDCL3) : 0,57 (d, 7Hz, 3H) ; 0,69-0,80 (m, 9H) ; 1,23 (s, 9H) ; 1,33 (s, 9H) ; 2,07 (m, 2H) ; 2,56 (dd, 14HZ, 8Hz, 1H) ; 2, 70-2, 97 (m, 3H); 3,09 (dd, 14 Hz, 2Hz, 1H); 3,17 (dd, 14 Hz, 3Hz, 1H); 3,28-3, 60 (m, 9H); 3,75-3,90 (m, 3H) ; 4,08 (s, 2H); 4,25 (m, 1H); 4,58 (m, 1H) ; 4,88 (d, 9Hz, 1H); 5,68 (d, 8Hz, 1H); 5,86 (d, 8Hz, 1H); 6,09 (d, 8Hz, 1H); 6,19 (d, 10Hz, 1H) ; 6,98 (m, 2H) ; 7, 08-7,44 (m, 12H) ; 7,52 (m, 2H); 7,63 (m, 2H); 7,74-7,94 (m, 4H); 8,09 (d, 8Hz, 1H); 8,15 (d, 8Hz, 1H) MS (FAB): [1253, 7, 1251,7] (M+H) ®, 1235, 6, 1233,6

Exemplo 2 R5 = 0C0CH2Br

Bromoacetóxilo R5* = OH W = F.15 Método A: 10 g de de N, N'-bis-[ (2S-(1,1-dimetiletilsulfonilmetilo)-3-(1-naftilo)-(propionilo)-L- valilo]-2S, 5S-diamino-l,6- 28 difenilo-hexano-3R,4R-diol (R5=R5*=OH) foram suspensos em 100 mL de tolueno e adicionados de 3,2 g de DMAP em 10 mL de tolueno. Sob agitação, foram adicionados gota-a-gota a -20°C, 10,7 g de brometo de bromoacetilo em 10 mL de tolueno. Adicionam-se 70 mL de acetonitrilo e agitou-se durante 7 horas à temperatura ambiente. A solução levauente turva foi diluida com EE e lavada com solução fria de 0,5N de HC1 (2x), NaHC03 (2x) e NaCl, secou-se sobre MgSCL e concentrou-se a vácuo. Purificou-se em sílica-gel (tolueno:EE 1:1) e obtiveram-se 12,6 g de produto. Método B: 5 g de de N, Ν' -bis-[ (2S- (1,1-dimetiletilsulfonilmetilo)-3- (1-naftilo) - (propionílo) -L-valilo]-2S, 5S-diamino-l, 6-difenilo-hexano-3R,4R-diol (R5=R5*=0H) foram agiatados a 2,5 g de "sieves" de moleculares 4 Ã, secos e na forma de pó, em 80 mL de EE à temperatura ambiente. Adicionou-se lentamente 2,35 mL de brometo de bromoacetilo e agitou-se durante 6 horas à temperatura ambiente. Os "sieves" moleculares foram filtrados e a solução orgânica foi lavada com água (2x) e solução de NaHC03. Secou-se sobre MgS04 e removeu-se o solvente em vácuo. 0 resíduo foi retomado em tolueno e de novo concentrado em vácuo. Após secagem, obtiveram-se 6,4 g de produto. RMN (270 Mhz, DMSO <D6>) : 0,83 (d, 7Hz, 6H) ; 0,88 (d, 7Hz, 6H) ; 1,06 (s, 18H) ; 1,92 (m, 2H) ; 2, 60-2,77 (m, 6H) ; 3,05 (dd, 10 Hz, 14Hz, 2H) ; 3,21 (dd, 14 Hz, 5Hz, 2H) ; 3,41 (m, 2H) ; 3,63 (dd, 14Hz, 9Hz, 2H) ; 4,02-4,15 (m, 2H) ; 4,20 (m, 2H); 5,07 (m, 2H); 5,14 (s, 2H); 6,98 (m, 2H); 7,12-7,45 (m, 2H); 7,49-7,64 (m, 4H); 7,82 (m, 2H); 7,88-7,98 (m, 4H); 8,20 (d, 8Hz, 4H). MS (FAB): [1375, 6, 1373, 6, 1371, 6] (M+H) ® 29 <Γ \

Exemplo 3 R5 = 0C0CH2C1

Cloroacetóxilo R5* = OH W = F.15 1,13 g de de N,N'-bis~[(2S-(1,1-dimetiletilsulfonilmetilo)-3-(1-naftilo)-(propionílo)-L-valilo]-2S, 5S-diamino-l,6-difenilo-hexano-3R,4R-diol (R5=R5*=0H) foram dissolvidos em 25 mL de THF secos e adicionados de 610 mg de DMAP. A 0°C adicionaram-se, gota-a-gota, 120 pL de cloreto de cloroacetilo em 1 mL de THF e agitou-se durante 10 minutos a 0°C. Deixou-se arrefecer à temperatura ambiente, dilui-se com 100 mL de EE e extraiu-se com uma solução de KHS04. A fase de EE foi seca sobre MgS04, e concentrada em vácuo, sendo o residuo cromatografado em silica-gel (EE:tolueno 1:1 a 1,5:1). Obtiveram-se 644 mg de produto de monoacilação. RMN (270 Mhz, CDCL3) : 0,56 (d, 7Hz, , 3H) ; 0, 69 -0,80 (m, 9H) ; 1,23 (s, 9H) ; 1, 34 (s , 9H) ; 2, 06 (m, 2H) 2 ,54 (dd, 14Hz, 8Hz, 1H) ; 2,68 -2, 97 (m , 3H) ; 3, 09 (dd, 14Hz, 2Hz, 1H) ; 3, 18 (dd, 14 Hz, 3Hz, 1H) ; 3,28- 3, 60 (m, r 9H) ; 3,92 (m, 2H) ; 4, 08 (m, 3H) ; 4,24 (m, 1H) ; 4,58 (m, 1H) ; 4,89 (d, 9Hz, 1H) ; 5, 68 (d, 8Hz, 1H) ; 5, 8 6 (d, 8Hz, 1H) ; • 6, 05 (d, 8Hz, 1H) ; 6,2 1 (d, 10Hz, 1H) ; 6,97 (m, 2H) ; 7, 08-7,44 (m, 12H) ; 7,53 (m, 2H) ; 7,63 (m, 2H); 7,74-7,94 (m, 4H); 8,80 (d, 8Hz, 1H); 8,15 (d, 8Hz, 1H). MS (FAB): [1209,6, 1207,6] (M+H) ®, 1191,6, 1189,6 30

Exemplo 4 R5 = OCOCH2CI Cloroacetóxilo R5* = OH W = F. 15 1,13 g de de N,N' -bis-[ {2S— (1,1-dimetiletilsulfonilmetilo)-3-(1-naftilo)-(propionilo)-L-valilo]-2S, 5S-diamino-l,6-difenilo-hexano-3R,4R-diol (R5=R5*=0H) foram dissolvidos em 25 mL de THF secos e adicionados de 1,22 mg de DMAP. A 0°c adicionaram-se, gota-a-gota, 320 μΕ de cloreto de cloroacetilo em 5 mL de THF e agitou-se durante 2 horas a 0°c e adicionaram-se mais 150 μΕ de cloreto de cloroacetilo. Após 30 minutos removeu-se o THF em vácuo, retomou-se o resíduo e extraiu-se com uma solução de KHSO4 secando-se sobre MgS04. O solvente foi destilado a vácuo e o resíduo purificado sobre sílica-gel (EEitolueno 1:2 a 1:1). Obtiveram-se 815 mg de produto de bisacilação. RMN (270 Mhz, CDCL3) : 0,75 (d, 7Hz, 6H) ; 0,82 (d, 7Hz, 6H) ; 1,27 (s, 18H); 1,98 (m, 2H) ; 2,56 (dd, 8Hz, 14Hz, 2H) ; 2,84 (dd, 14Hz, 5Hz, 2H); 3,30-3,45(m, 6H); 3,51 (dd, 13 Hz, 7Hz, 2H); 3,93 (s, 4H) ; 4,07 (m, 2H) ; 5,00 (m, 2H); 5,18 (s, 2H) ; 5,95 (d, 9Hz, 2H) ; 6,07 (d, 8Hz, 1H) ; 7, 07-7,28 (m, 12H) ; 7,35 (t, 8Hz, 2H) ; 7,52 (t, 8Hz, 2H); 7,61 (m, 2H); 7,77 (d, 8Hz, 2H); 7,88 (d, 8Hz, 2H); 8,10 (d, 8Hz, 2H) . MS (FAB): [1287, 5, 1285, 5, 1283, 5] (M+H) ®

Exemplo 5 R5 = OCO(Me) 2Br

a-Bromo-isobutirilóxilo R5* = OH 31

'“7 / W = F.15 2,26 g de de N, N'-bis-[ (2S- (1,1-dimetiletilsulfonilmetilo)-3-(1-naftilo) - (propionílo) -L-valilo]-2S, 5S-diamino-l, 6-difenilo-hexano-3R,4R-diol (R5=R5*=0H) foram agitados com 1,48 g de DMA.P e 2,76 g de brometo de ácido a-bromo-isobutírico em 10 mL de THF durante 120 horas à temperatura ambiente. Dilui-se com EE, lavou-se com solução fria de HC1 a 0,5 N (2x) , NaHCCb (2x) e com solução de NaCl. Secou-se sobre MgS04 anidro, concentrou-se a vácuo e purificou-se o resíduo por cromatografia em sílica-gel (tolueno:EE 4:1 a 1:1). Obtiveram-se 1,7 g de produto. MS (FAB): [1282,5 1281, 5, 1280,5, 1279, 5] (M+H) ®, 1264,5, 1263,5, 1262,5, 1261,5.

Exemplo 6 R5 = 0C0CH2N (Et) (CH2)2N(Et)2 [N-Etilo-N- (2-dietilaminoetilo) -amino]-acetóxilo R5* = R5 W = F.15 128 mg do composto do Exemplo 4 em 2 mL de THF secos, foram agitados com 87 mg de N,N'-trietiletilenodiamina durante 16 horas a 50°C. A solução reaccional foi retomada em 50 mL de EE e extraída com solução de KHC03/NaCl, sendo a fase orgânica seca sobre Na2S04, filtrou-se e o solvente destilado a vácuo. O produto bruto foi purificado em sílica gel (CHsOH:trietilamina 98:2). O rendimento foi de: 40 mg MS (FAB): 1500,0(M+H)®, 1315,8, 750,5 32

Exemplo 7 R5 = OCOCH2N (Et) (CH2) 2N (Et) 2 [N-Etilo-N- (2-dietilaminoetilo) -amino]-acetóxilo

R5* = OH W = F.15 128 mg do composto do Exemplo 3 foram transformados de acordo com o Exemplo 6.

Rendimento: 52 mg MS (FAB): 1315,8(M+H)®

Exemplo 8 R5 = OCOCH2N (Me) (CH2)2N(Me)COOCMe3

[N-Metilo-N-{2-tert-butóxicarbonilo-N-metilo)amino-etilo}-amino]-acetóxilo R5* = OH W = F.15 128 mg do composto do Exemplo 3 em 1 mL de THF seco, foram adicionados de 113 mg de N-(t-butóxicarbonilo)-N,N'-dimetil-etilenodiamina (Exemplo 8-a) à temperatura ambiente. Agitou-se durante 16 horas a 50 °C. O THF foi destilado, o resíduo retomado em EE e agitado com uma solução de KHCO3 (2x) , seco sobre MgS04 e concentrado em vácuo. Purificou-se em sílica-gel (DCMrCHsOH 98:2 a 90:10). O rendimento foi de 95 mg. MS (FAB): 1359,7(M+H)® a) Preparação de N-(tert-butóxicarbonilo)-N,N'-dimetil-etilenodiamina 8,8 g de N,Ν'-dimetiletilenodiamina foram dissolvidos em 50 mL de éter e arrefecidos a 0°C. Adicionaram-se 33 \

\5ί ηXja

lentamente gota-a-gota 18,5 g de BOC-ON [2-(tert-butóxicarbonilo-oxi-imíno)-2-fenilacetonitrilo], e agitou-se durante 16 horas. Adicionaram-se 6 g de metilato de sódio e agitou-se mais 18 horas à temperatura ambiente. A substância que precipitou foi lavada com éter. As soluções etéreas reunidas foram concentradas em vácuo, sendo o resíduo destilado (p.ebulição 58-60°C/0,5 mber).

Obtiveram-se 11,3 g na forma de óleo incolor. MS (Cl): 189 (M+H)®, 133

Exemplo 9 R5 = OCOCHjN(Me) (CH2)2NHMe [N-Metilo-N- (2-metilaminoetilo) -amino]-acetóxilo (na forma de sal de HC1)

R5* = OH W = F.15 75 mg do composto do Exemplo 8 foram adicionados com 3 mL de uma solução de HC1 a 5N em dimetóxietano e agitpu-se durante 1 hora. 0 solvente foi destilado a vácuo e o resíduo na forma de óleo foi lavado vários vezes com éter.

Rendimento: 55 mg MS(FAB): 1259,7 (M+H)®

Exemplo 10 R5 = OCOCH2NH (CH2) 3NHCOOC (Me) 3

[N{3 (N-tert-butóxicarbonilo)-aminopropilo}-amino]-acetóxilo R5* = OH W = F.15 mg do composto do Exemplo 3 foram transformados com 104 34 121

\ /? mg de Ν-(tert-butóxicarbonilo)-1,3-diaminopropano (Exemplo 10-a) de forma análoga ao Exemplo 8. o tempo de duração da reacção foi de 3 horas a 50°C.

Rendimento: 69 mg MS(FAB): 1345,7 (M+H)® a) Preparação de N-(tert-butóxicarbonilo)-1,3-diaminopropano 37 g de 1,3-propanodiamina em 180 mL de dioxano seco, foram adicionados á temperatura ambiente com uma solução de 14,7 g de dicarbonato de di-tertbutilico em 200 mL de dioxano seco, durante 2 horas. Agitou-se durante 12 horas à temperatura ambiente. Filtrou-se o precipitado formando e concentrou-se o filtrado em vácuo. De seguida evaporou-se o resíduo 3 x com 100 mL de tolueno de cada vez. O resíduo na forma de óleo foi suspendido em 350 mL de água, e filtrado do precipitado. O filtrado foi extraído 4 x com 250 mL de cada vez de DCM, e secou-se sobre Na2SCL, concentrando-se em vácuo. A purificação decorreu em sílica-gel (CH3OH).

Rendimento: 5 g MS(Cl): 175 (M+H)®, 119

Exemplo 11 R5 = OCOCH2N (Me) (CH2) 3N (Me) COOC (Me) 3 [N-metilo-N-{3-(N-tert-butóxicarbonilo-N-metilo)-aminopropilo}-amino]-acetóxilo

R5* = OH W = F.15 121 mg de composto do Exemplo 3 foram transformados com 121 mg de N-tert-butóxicarbonilo-N,Ν'-dimetilo-1,3-propanodiamina (Exemplo 11-a) de forma a náloga ao Exemplo 10.

Rendimento: 52 mg 35 MS(FAB): 1373,7 (M+H) a) Preparação de N-tert-butóxicarbonilo-N,Ν'-dimetilo-1,3-propanodiamina 10,2 g de N,N' -dimetil-1,3-propanodiamin em 40 mL de dioxano seco, foram adicionados á temperatura ambiente com uma solução de 2,79 g de dicarbonato de di-tertbutilico em 40 mL de dioxano seco, durante 2 horas. Agitou-se durante 16 horas à temperatura ambiente. O solvente foi então destilado em vácuo, e evaporado 2 x com 100 mL de tolueno de cada vez. O resíduo foi dissolvido em água e extraído com 3 x 50 mL de EE de cada vez. A fase orgânica foi lavada com uma solução aquosa de KHS04/NaCl, e seca sobre Na2S04, e depois concentrada.

Rendimento: 2,14 MS(Cl): 203 (M+H)®, 147 Exemplo 12 R5 = OCOCH2N (Me) (CH2) 3N (Me) [N-metilo-N- (3-metilaminopropilo) -amino]-acetóxilo (na forma de sal de HC1)

R5* = OH W = F.15 40 mg de composto do Exemplo 11 foram transformados de acordo com o Exemplo 9.

Rendimento: 32 mg MS(FAB): 1273,9 (M+H)®

Exemplo 13 R5 = OCOCH2NH(CH2)3NH2 36

[N- (3-metilaminopropilo) -aminol-acetóxilo (na forma de sal de HC1)

R5* = OH W = F.15 50 mg de composto do Exemplo 10 foram transformados de acordo com o Exemplo 9.

Rendimento: 35 mg MS(FAB): 1245,8 (M+H)®

Exemplo 14 R5 = OCOCH2N(Me) (CH2) 3N(Me) COO (Me) 3 [N-metilo-N-{3 (N-tert-butóxicarbonilo-N-metilo)-aminopropilo}-amino]-acetóxilo R5* = R5 W = F. 15 193 mg do composto do Exemplo 4 foram dissolvidos com 364 mg de N-tert-butóxicarbonilo-N,Ν'-dimetilo-1,3-propanodiamina (Exemplo 11-a) em 3 mL de THF seco sob atmosfera de azoto e agitados durante 16 horas a 50°C. 0 solvente foi destilado, o resíduo retomado em EE e agitou-se com solução de KHC03 e KHSO4. A fase orgânica foi seca sobre Na2S04 e concentrada. A purificação decorreu em sílica gel (EE:CH30H 98:2 a 90:10). Rendimento: 183 mg MS(FAB): 1615,8 (M+H)®

Exemplo 15 R5 = 0C0CH2N(Me) (CH2)3NHMe [N-metilo-N- (3-metilaminopropilo) -amino]-acetóxilo (na forma de sal de HC1) R5* = R5 37

W = F.15 150 mg de composto do Exemplo 14 foram transformados de acordo com o Exemplo 9.

Rendimento: 121 mg MS(FAB): 1415,8 (M+H)®

Exemplo 16 R5

R5* W OCOCH2N (Me) (CH2) 2N (Me) COO (Me) 3 [N-metilo-N-{2-(N-tert-butóxicarbonilo-N-metilo)-aminoetilo}-amino]-acetóxilo R5 F. 15 3,6 g do composto do Exemplo 4 foram agitados com 1,24 mL de N-tert-butóxicarbonilo-N,Ν'-dimetiloetilenodiamina e 1,06 mL de N-etilo-di-isopropilamina em 40 mL de EE durante 20 horas à temperatura ambiente. Extraiu-se com uma solução aquosa a 5% de ácido cítrico (2x), água, solução de NaHC03 (2x) e solução de NaCl (2x). Após secagem que decorreu sobre Na2S04 anidro, destilou-se o solvente a vácuo. Purificou-se com EE em sílica-gel, que foi previamente desactivada com 10% de água. Obtiveram-se 3,15 g de produto. MS(FAB): 1587,9 (M+H)®

Exemplo 17 R5 = OCOCH2N (Me) (CH2)2NHMe [N-meti Ιο-ΙΊ- (3-metilaminoetilo) -amino]-acetõxilo (na forma de sal de HCl) R5* = R5 W = F.15 110 mg de composto do Exemplo 16 foram transformados de 38

θ’ / acordo com o Exemplo 9 com solução de 5N de HCl em dioxano. Rendimento: 8 5 mg MS(FAB): 1387,7 (M+H)®

Exemplo 18 R5 = OCOCH2N (Me) (CH2)2N(Me) (CH2)3N(Me) (CH2)2NHMe [(3,6, lO-trimetilo-3,6,10,13-tetra-aza-tetradecanoilóxílo]

R5* = OH W = F.15 125 mg do composto do Exemplo 1 em 1,5 mL de DMF seco, foram adicionados de uma solução de 29 mg de 5,9-dimetilo-(2,5,9,12)-tetra-aza)-tridecano (Exemplo 18-a) em 1,5 mL de DMF seco à temperatura ambiente. De seguida adicionaram-se 26 mg de N-etilo-di-isopropilamina. Agitou-se durante 5 horas a 50°C. A solução reaccional foi destilada a vácuo e o resíduo retomado em DCM. Agitou-se com uma solução aquosa de KHSO4 2x e depois com uma solução saturada de NaCl. A fase orgânica foi seca sobre MgSCL e evaporada. 0 resíduo foi várias vezes lavado com éter.

Rendimento: 101 mg MS(FAB): 1387,8 (M+H)® a) Preparação de 5,9-dimetilo-(2,5,9,12)-tetra-aza)-tridecano (na forma de sal de HCl) 208 mg de 2,12-ditert-butóxicarbonilo-5,9-dimetilo-(2,5,9,12-tetra-aza)-tridecano (Exemplo 18-b) foram transformados de acordo com o Exemplo 9.

Rendimento: 160 mg RMN (200MHz, DMSO<D6>): 2,15 (m, 2H); 2,54 (s, 6H); 2,76 (s, 6H); 3,1-3,5 (m, cerca de 14H); 9,4 (m, largo, cerca de 4H). 39 MS (Cl): 217 (M+H) , 172 b) Preparação de 2,12-ditert-butóxicarbonilo-5,9-dimetilo-(2,5,9,12-tetra-aza)-tridecano 414 mg de N-(tert-butóxicarbonilo)-N,Ν' -dimetiletilenodiamina (Exemplo 8-a) em 10 mL de EtOH foram colocados a refluxo com 202 mg de 1,3-dibromopropano sob adição de 253 mg de N-etilmorfolina, durante 6 horas. De seguida a mistura reaccional foi agitada à temperatura ambiente com 185 mg de cloreto de propionilo durante 30 minutos e adicionada com 10 mL de água. Após mais 30 minutos, diluíu-se com EE e extraiu-se com solução aquosa de KHS04. A fase aquosa foi ajustada a pH entre 7-8 com NaHC03 sólido, extraiu-se com EE 2x e secou-se as fases orgânicas reunidas com Na2S04, filtrou-se e concentrou-se em vácuo. A purificação do produto bruto decorreu em sílica-gel (DCM:MeOH 95:5).

Rendimento: 225 mg RMN (200 MHz, CDC13) : 1,48 (s, 18H); 1,63 (quintupleto, 2H); 2,26 (s, 6H); 2, 33-2, 58 (m, 8H); 2,88 (s, 6H); 3,31 (m, 4H) . MS(Cl): 417 (M+H)®, 317, 272

Exemplo 19 R5 = OCOCH2N (Me) (CH2) ?N (Me) 2 N-(2-dimetilamino-etilo)-N-metilo-amino-acetóxilo (na forma de sal de HCl) R5* = R5 W = F.15 94 mg de composto do Exemplo 4 foram dissolvidos em 2,5 mL de DMF secos e adicionados à temperatura ambiente com 84 mg de N,N,N'-trimetiletilenodiamina e uma ponta de espátula de Kl. Agitou-se durante 3 horas à temperatura ambiente e 8 horas a 40 \ 1---+ 60°C. Ο solvente foi destilado a vácuo, sendo o resíduo retomato em EE, lavou-se com uma solução saturada de KHC03 (2x) e solução de NaCl, secou-se sobre MgS04 e concentrou-se em vácuo. Após cromatografia em sílica-gel (DCM:MeOH 8:2 a 1:1, depois DCM:MeOH:NEt3 15:15:1), obtiveram-se 21 mg de produto, que toi conduzido ao nidrocloreto através de tratamento com uma solução etanólica a 0,1 N de HC1. MS(FAB): 1415,8 (M+H)®

Exemplo 20 R5 = OCOCH2NH(CH2) 3N(Me) (CH2)2N(Me) (CH2)3NH2 7,10-Dimtilo-3,7,10,14-tetra-aza-tetradecanoílo (na forma de sal de HCl)

R5* = OH W = F.15 204 mg de composto do Exemplo 3 foram agitados com 250 mg de N-(3-amininopropilo)-Ν' -(3-tert-butóxicarbonilaminopropilo)-N,Ν'-dimetilo-etilenodiamina (Exemplo 20-a) em 5 mL de acetonitrilo e uma proção de ponta de espátula de Kl durante 16 horas à temperatura ambiente. Concentrou-se em vácuo, particionando-se o resíduo entre acetato de etilo e solução de KHC03. A fase orgânica foi seca e concentrada em vácuo. Cromatografou-se em sílica-gel (EE:MeOH:Tríetíalmina 90:10:',2 a 80:20:1) originando 86 mg mais produto protegido com tert.butóxicarbonilo, [MS(FAB): 1474,1 (M+H)®], dos quais 33 mg fotam desprotegidas por tratamento com uma solução a 6 N de Hcl em dioxano de forma análoga ao Exemplo 9 e transformados em sal. Obtiveram-se 34 mg de produto. MS(FAB): 1373,8 (M+H)® a) Preparação de N-(3-amininopropilo)-Ν' -(3-tert- bulóxicarbonilaminopropilo)-N,Ν'-dimetilo-etilenodiamina 41 07 07

,^ΙλΜ 4,4 g de N,N'-dimetilo-etilenodiamina foram adicionadas lentamente sob arrefecimento em gelo com acrilonitrilo. Deixou-se aquecer lentamente até à temperatura ambiente e agitou-se durante 14 horas à temperatura ambiente. Aquceu-se durante 3 horas a 80°c e removeu-se de seguida a coxiiponeate volátil em vácuo, num banho a uma temperatura de 80°C. Obtiveram-se 9,6 g de N,Ν'-bis-(2-cianoetilo)-N,N'-dimetilo-etilenodiamina. MS (Cl): 195 (M+H)®, 154 9,8 g deste foram dissolvidos, sob arrefecimento em gelo, em 35 mL de ácido acético e 35 mL de HC1 concentrado. Após adição de 0,4 g de Pt02, efectuou-se uma hidrogenação durante 24 horas à temperatura ambiente com 5 atm de H2. Após filtração do catalizados o filtrado foi concentrado em vácuo, retomado várias vezes em etanol e concentrado em vácuo de novo. O resíduo foi agitado em etanol, o etanol decantado, e o resíduo seco a vácuo. Obtive-se N, N'-bis-(3-aminopropilo)- N, Ν'-dimetilo-etilenodiamina na forma de sal. MS(Cl): 203 (M+H)® 9,81 g deste foram dissolvidos em 200 mL de dioxano/água (1:1), adicionados de 141 mL de NaOH a 1 N e de seguida adicionados durante 2 horas com 3,79 g de dicarbonato de ditert-butílico em 25 mL de dioxano. Agitou-se 1 hora a 0°C, 2 horas à temperatura ambiente. O dioxano foi destlado a vácuo, o resíduo particionado entre EE e solução de K2C03. A fase orgânica foi seca, filtrada e concentrada em vácuo. Obtiveram-se 4,4 g de N-(3-aminopropilo)-N-(3-tert-butóxicarbonilamino-propilo)-N,N'-dimetilo-etilenodiamina, que foi purificado como se descreve de seguida. O, 7 g deste, dissolvido em 30 mL de THF, foram adicionados 42 lentamente a 0°C com 750 mg de N-(benzóxicarbonilóxilo)-succinimida em 30 mL de THF. Agitou-se durante 1 hora a 0°C, 1 hora à temperatura ambiente, removeu-se o solvente em vácuo e particionou-se o resíduo entre EE e uma solução de KHCO3. A fase orgânica foi seca (Na2S04) e concentrada em vácuo. Cromatografou-se em sílica-gel (EE;MeOH 8:2, 1% de trietilamina) obtendo-se 0,38 g de N-(3-tert-butóxicarbonilamino-propilo)-Ν'(3-carbobenzóxicarbonilo-amino-propilo)-N,Ν'-dimetilo-etilenodiamina. KMN (200 Mhz, CDC13) : 1,42 (s, 9H) ; 1,50-1,70 (m, 4H) ; 2,1-2,5 (m, 14H) ; 3,05-3,35 (m, 4H) ; 5,1 (s, 2H) ; cerca de 6,15 (largo, 2H); 7,3-7,4 (m, 5H). MS (Cl): 437 (M+H)®, 337 0,36 g deste foram dissolvidos em 30 mL de MeOH e qadicionados de 100 mL de Pd (10% em carvão) . Agitou-se durante 2 horas à temperatura ambiente e 1 atm de H2. Após filtração do catalisador obtiveram-se 0,25 g da amina desej ada.

Exemplo 21 R5 = 0C0CH2NH (CH2) 3N (Me) (CH2)2N(Me) (CH2) 3NH2 7,10-Dimetilo-3,7,10,14-tetra-aza-tetradecanoílo (na forma de sal de HC1) R5* = R5 W = F.15 Síntese de acordo com o Exemplo 20 partindo do composto do Exemplo 4. MS (FAB): 1116,9 (M+H)® 43

Exemplo 22 R5 = OCOCH2N (Et) (CH2)2NH(Et) N-Etilo-N-(2-etilaminoetilo)-amino-acetóxilo (na forma de sal de HC1)

R5* = OH W = F.15 Síntese de acordo com o Exemplo 24 e 23 a partir do composto de Exemplo 1. MS(FAB): 1287,6 (M+H)®

Exemplo 23 R5 = OCOCH2N (Et) (CH2) 2NH (Et) COOC (Me) 3 N-[2 (N-tertbutóxicarbonilo-N-etilo-amino) -etilo]-N-etilo-amino-acetóxilo R5* = R5 W = F.15 A partir de 216 mg de composto do Exemplo 4 e 5 em 5 mL de acetonitrilo e 272 mg de N-tert-butóxicarbonilo-N,N'-dietilenodiamina, obtiveram-se, com uma ponta de espátula de Kl após doi dias de agitação à temperatura ambiente e tratamento habitual e cromatografia em sílica-gel (EE:tolueno 7:3), 157 mg de produto. MS (FAB): [1644, 9, 1643,9] (M+H)®

Exemplo 24 R5 = OCOCH2N(Et) (CH2)2NH(Et) N-Etilo-N-(2-etilaminoetilo)-amino-acetóxilo (na forma de sal de HCl) R5* = R5 44

Γ\

w F. 15 Síntese de acordo com o Exemplo 9 a partir do composto do Exemplo 23. 0 composto precipita na forma de hidrocloreto. MS(FAB): 1443,7 (M+H)®

Exemplo 25 R5 = OCOCH2NH(CH2)3N(Me) (CH2)2NH(Me) 7-Metilo-3,7,10-triaza-undecanoílóxilo (na forma de sal de HC1)

R5* = OH W = F.15 218 mg de composto do Exemplo 3 foram agitados em 5 mL de acetonitrilo com 133 mg de N-(3-aminopropilo)-N'-(tert-butóxicarbonilo)-N,Ν'-dimetilo-etilenodiamina e uma ponta de espátula de Kl durante 24 horas à temperatura ambiente. O solvente foi destilado em vácuo e o resíduo retomado em EE. Agitou-se 2 x com uma solução saturada de KHCO3, a fase orgânica foi seca sobre Na2SC>4 e evaporou-se em vácuo. A purificação decorreu em sílica-gel (EE .MeOH:trietilamina 90:10:0,2). O produto que se pretendia foi evaporado 2 x com tolueno em vácuo e de seguida lavado com n-pentano e seco. Obtiveram-se 146 mg de produto, que após tratamento com uma solução de HC1 a 6N em dioxano, foi transformado em no produto final desejado de acordo com o Exemplo 9. O rendimento foi de 102 mg. MS(FAB): 1316,6 (M+H)® a) Preparação de N-(3-aminopropilo)-Ν' -(tert- butóxicarbonilo)-N,N'-dimetilo-etilenodiamina 1,9 g de N-(tert-butóxicarbonilo)-N'(2-cianoetilo)-N,N'-dimetilo-etilenodiamina (Exemplo 25-b) foram dissolvidos em 45 100 mL de uma solução metanólica saturada com amoníaco, e hidrgenou-se com 5 g de Raney-Nickel durante 24 horas à temperatura ambiente com 10 atm de H2. Filtrou-se o catalisador, lavou-se o catalisador com MeOH, sendo o filtrado concentrado em vácuo. O resíduo foi retomado em tolueno, filtrou-se o sobrenadante, o filtrado foi concentrado em vácuo e seco. Obtiveram-se 1,93 g de produto. MS(Cl): 246 (M+H)®, 190, 146 b) Preparação de N-(tert-butóxicarbonilo)-Ν'(2-cianoetilo)-N,Ν'-dimetilo-etilenodiamina 1,88 g de N-(tert-butóxicarbonilo)-N,Ν'-dimetilo- etilenodiamina foram adicionados lentamente sobre arrefecimento em gelo com 530 mg de acrilonitrilo. Agitou-se durante 1 hora a 0°C, 14 horas à temperatura ambiente e 2 horas a 60°C. Removeu-se a componente volátil em vácuo, e purificou-se o resíduo através de cromatografia em sílica-gel (EE:MeOH 9:1). Obtiveram-se 1,92 g de produto. MS(Cl): 242 (M+H)®, 186, 142

Exemplo 26 R5 = OCOCH2NH(CH2)3N(Me) (CH2)2NH(Me) 7-Metilo-3,7,10-triaza-undecanoílóxilo R5* = R5 W = F.15

Preparação de forma análoga ao Exemplo 25 a partir do composto do Exemplo 3. MS(FAB): 1501,8 (M+H)® 46 \

r\ \ \

*7 /

Exemplo 29 R5 = OCOC(Me)2NH(CH2)2N(Me)2

a-[2- (dimetiloamino) -etilo-amino]-isobutirilóxilo R5* = OH W = F.15 Síntese a partir do composto do Exemplo 3 e N, N-dimetiletilenodiamina em acetonitrilo (8 h, 50°C), purificação através de cromatografia em sílica-gel (EE:MeOH 9:1, 1% de trietilamina) MS(FAB): 1287,7 (M+H)®; 1197,7

Exemplo 31 R5 = 0C0CH2S (CH2) 2NHCO (CH2) 2C6H5

2-(3—fenilpropioniloamino)-etilo-tioacetóxilo R5* = OH W = F.15 125 mg de composto do Exemplo 1, 42 mg de 3-(3- fenilpropionilamino)-etiltiol (Exemplo 30-a) e 26 mg de N-etilo-di-isopropilamina foram agitados durante 3 dias à temperatura ambiente em 2,5 mL de THF seco. Removeu-se o solvente em vácuo, retomou-se o resíduo em EE e extraiu-se com uma solução de NaCl (3x) , secou-se a fase orgânica e concentrou-se em vácuo, cromatografou-se em sílica-gel (DCM:MeOH 97:3) obtendo-se o produto desejado, que ainda foi lavado em éter.

Rendimento: 131 mg MS (FAB): 1380, 6 (M+H)®, 1362,5 a) Preparação de 3-(3-fenilpropionilamino)-etiltiol 47

A uma solução de 5,68 g de hidrocloreto de de 2-mercaptoetilamina e 10,12 g de trietilamina em 200 mL de DCM, adicionou-se gota-a-gota a 0°C, 6,75 g de cloreto de ácido 3-fenilpropiónico em 10 mL de DCM durante 20 minutos. Após o final da adição, agitou-se por mais 40 minutos a 0°C. A mistura reaccional foi lavada sucessivamente com água, 0,4 N de HCl e denovo com água, seca sobre Na2S04, e concentrada em vácuo. O resíduo foi purificado em sílica-gel (tolueno:EE 7:3) .

Rendimento: 6,2 g, ponto de fusão: 69-61°C MS (Dl):210 (M+H)®

Exemplo 32 R5 = OCOCH2S(CH2)2NHCO(CH2)2C6H5 2-(3-fenilpropioniloamino)-etilo-tioacetóxilo R5* = R5 W = F.15 Síntese de acordo com o Exemplo 31, a partir do composto do Exemplo 4. MS (FAB): 1629, 7 (M+H)®

Exemplo 33 R5 = 0C0CH2S (CH2) 2NHCOCH2NHCO2 (Me) 3

2-(tert-butóxicarbonilaminometilcarbonilamino)-etil-tioacetóxilo R5* = OH W = F. 15 Síntese de acordo com o Exemplo 31, a partir dos compostos do Exemplo 1 e Exemplo 33-b. MS(FAB): 1405,7 (M+H)®, 1387,6, 1305,7 48 a) Preparação de dissulfureto de bis-[2-(tert- butóxicarbonilaminometilcarbonilamino)-etano] A 0,9 g de hidrocloreto de cistamina, 2,1 g de N-tert-butóxicarbonilglicina, 1,62 g de HOBT e 3,85 g de TBTU em 50 mL de DMF absoluto, adicionaram-se gota-a-gota durante um período de 5 minutos a 10-15°C, 4,14 g de N-etilo-di-isopropilamina. Após terminar a adição, agitou-se à temperatura ambiente durante 2 horas. O solvente foi evaporado em vácuo, o resíduo dissolvido em EE e lavado com uma solução saturada de NaHC03 2 x e depois com uma solução de NaCl, secou-se sobre Na2S04, filtrou-se e concentrou-se em vácuo. O resíduo foi purificado em sílica-gel (EE:MeOH 99:1 a 95:5).

Rendimento: 1,8 g MS(DI): 467 (M+H)®, 367, 267 b) Preparação de 2-tert-butóxicarbonilaminometilcarbonilamino)-etiltiol A 1,0 g de dissulfureto de bis-[2-(tert-butóxicarbonilaminometilcarbonilamino)-etano] em 35 mL de MeOH foram adicionados sob arrefecimento em gelo, em porções, 0,33 g de NaBH4. Após terminar a adição, agitou-se ainda 30 minutos a 0°C, depois mais 30 minutos à temperatura ambiente. A mistura reaccional foi concentrada em vácuo e o resíduo retomado em EE. Ajustou-se cuidadosamente o pH a 3, por adição de IIC1 a 0,1 N, agitou-sc 15 minutos, separaram-se as fases, a fase orgânica foi lavada 2 x com solução de NaCl, secou-se sobre Na2S04, filtrou-se e concentrou-se em vácuo. 0 resíduo foi purificado em sílica-gel (EE:MeOH 96:4). Rendimento: 0, 8 g MS(Cl): 235 (M+H)®, 135 49

Exemplo 34 R5 = 0C0CH2S(CH2)2NHC0CH2NHC02(Me)3 2-(tert-butóxicarbonilaminometilcarbonilamino)-etil-tioacetóxilo R5* = R5 W = F.15 Síntese de acordo com o Exemplo 33, a partir dos compostos do Exemplo 4 e Exemplo 33-a. MS(FAB): 1679,7 (M+H)®, 1580,0, 1479,9

Exemplo 35 R5 = OCOCH2S (CH2) 2NHCOCH2NH2 2-(Aminometilcarbonilamino)-etilo-tioacetóxilo (na forma de sal de HC1)

R5* = OH Síntese de acordo com o Exemplo 9, a partir do composto do Exemplo 33. MS (FAB): 1305,7 (M+H)®

Exemplo 36 R5 = OCOCH2S(CH2)2NHCOCH2NH2 2-(Aminometilcarbonilamino)-etilo-tioacetóxilo (na forma de sal de HC1) R5* = R5 Síntese de acordo com o Exemplo 9, a partir do composto do Exemplo 34. MS(FAB): 1479,9 (M+H)® 50

Exemplo 37 R5 = OCOCH2S(CH2)2NHCO(CH2)3CH3

2-(Butanoilamino)-etilo-tioacetóxilo R5* = OH W = F.15 Síntese de acordo com o Exemplo 31, a partir dos compostos do Exemplo 1 e Exemplo 37-a. MS(FAB): 1340,7 (M+Na)®, 1318 (M+H)®, 1300,6 a) Preparação de 2-(butanoilamino)-etiltiol A uma solução de 5,68 g de hidrocloreto de de 2-mercaptoetilamina e 10,12 g de trietilamina em 200 mL de DSM, adicionou-se gota-a-gota a 0°C, 4,26 g de cloreto de ácido butanóico em 10 mL de DSM durante 20 minutos. Após o final da adição, agitou-se por mais 40 minutos a 0°C. A mistura reaccional foi lavada sucessivamente com água, 0,4 N de HC1 e de novo com água, seca sobre Na2S04, e concentrada em vácuo. O resíduo foi purificado em sílica-gel (toluenorEE 7:3). Rendimento: 4,1 g MS(Dl):148 (M+H)®

Exemplo 38 R5 = OCOCH2S(CH2)2NHCO(CH2)C(CH3)3

2-(2,2-dimetilbutanoilamino)-etilo-tioacetóxilo R5* = OH W = F.15 Síntese de acordo com o Exemplo 31, a partir dos compostos do Exemplo 1 e Exemplo 38-a. MS (FAB) : 1368,7 (M+Na)®, 134G (MUI)®, 1328,7 51 a) Preparação de 2-(2, 2-dimetilbutanoilamino)-etiltiol A uma solução de 5,68 g de hidrocloreto de de 2-mercaptoetilamina e 10,12 g de trietilamina em 200 mL de DSM, adicionou-se gota-a-gota a 0°C, 5,39 y de cloreto de ácido dimetilbutanóico em 10 mL de DSM durante 20 minutos. Após o final da adição, agitou-se por mais 40 minutos a 0°C. A mistura reaccional foi lavada sucessivamente com água, 0,4 N de HC1 e de novo com água, seca sobre Na2S04, e concentrada em vácuo. O resíduo foi purificado em sílica-gel (toluenorEE 7:3) .

Rendimento: 4, 5 g MS(Dl):176 (Μ+Η)φ

Exemplo 39 R5 = OCOCH2S (CH2) 2NHCOCH (GH2CH (CH3) 2) NHC02C (Me) 3

2-(N-tert-butóxicarbonilo-L-leucilamino)etil-tioacetóxilo R5* = OH W = F.15 Síntese de acordo com o Exemplo 31, a partir dos compostos do Exemplo 1 e Exemplo 39-b. MS(FAB): 1484,2 (M+Na)®, 2462,2 (M+H)®, 1444,1, 1362,0 a) Preparação de dissulfureto de bis-[2-(N-tert-butóxicarbonilo-L-leucilamino)etano] Síntese de acordo com o Exemplo 33-a, a partir de di-hidrocloreto de cistamina e N-tert-butóxicarbonilo-L-leucina. MS(Dl): 579 (M+H)®, 479, 379 52 7 '1' b) Preparação de 2-(N-tert-butóxicarbonilo-L-leucilamino)-etiltiol Síntese de acordo com o Exemplo 33-b a partir de 39-a. MS (Cl): 291 (M+H)®, 191

Exemplo 41 R5

R5* W OCOCH2 S (CH2) 2NHCOCH (CH2CH (CH3) 2) NH2 2-(L-leucilamino)etil-tioacetóxilo (na forma de sal de HC1) ^ OH = F. 15 Síntese de acordo com o Exemplo 9, a partir do composto do Exemplo 39. MS(FAB): 1361,7 (M+H)®

Exemplo 42 R5

R5* W = OCOCHaS (CH2) 2NHCOCH (CH2CH (CH3) 2) nh2 2-(L-leucilamino)etil-tioacetóxilo (na forma de sal de HC1) = R5 = F. 15 Síntese de acordo com o Exemplo 9, a partir do composto do Exemplo 40. MS(FAB):1592,2 (M+H)®

Exemplo 43

Rb = OCOCH2CH2CH2Br 53

V

4-Bromobutirilóxilo R5* = OH W = F.15 1,13 g (1 mmole de N,N' -bis-[ (2S- (1,1- dimetiletilsulfonilmetilo)-3-(1-naftilo)-(propionílo)-L-valilo]-2S,5S-diamino-l,6-difenilo-hexano-3R,4R-diol (R5=R5*=0H) foram dissolvidos em 5 mL de THF absoluto e adicionados de 0,46 mL (4 mmole) de cloreto de ácido 4-bromobutírico. De seguida agitou-se durante 12 horas à temperatura ambiente. Diluiu-se a solução reaccional com 100 mL de acetato de etilo e extraiu-se várias vezes com água e solução de cloreto de sódio. A fase orgânica foi seca sobre sulfato de sódio, filtrou-se em vácuo e evaporou-se. Resultaram 640 mg de produto amorfo. MS: 1279,5 (M+H)®

Exemplo 44 R5 = 0C0CH2CH2CH2Br 4-Bromobutirilóxilo R5* = R5 W = F.15 800 mg (1 mmole de N, N' -bis-[ (2S- (1,1- dimetiletilsulfonilmetilo)-3-(1-naftilo)-(propionílo)-L-valilo]-2S, 5S-diamino-l,6-difenilo-hexano-3R,4R-diol (R5=R5*=OH) e 864 mg de DMAP foram dissolvidos em conjunto em 2 0 mL de THF absoluto e adicionados de 0, 2 mL de cloreto de ácido 4-bromobutírico. Agitou-se durante 18 horas à temperatura ambiente. De seguida diluiu-se com acetato de etilo e extraiu-se várias vezes com água e solução a 10% de ácido cítrico e solução saturada de cloreto de sódio. A fase orgânica foi seca sobre sulfato de sódio, filtrou-se 54 em vácuo e evaporou-se, resultando 570 mg de produto amorfo. MS: 1429,55 (M+H)®

Exemplo 45

R5 = OCOCH2N(CH3) CH2CH2NH-Arg-H

[N-Metilo-N-(2-L-arginilamino)etilo]

R5* = OH W = F.15 205 mg de composto de 45g foram dissolvidos em 1 mL de diclorometano, 5 mL de ácido trifluoroacético e 0,45 mL de m-cresol. DE seguida, adicionaram-se 0,48 mL de brometo de trimetilsililo e agitou-se 2 horas à temperatura ambiente. A solução reaccional foi adicionada a 100 mL de éter tert-butilmetílico e o produto da reacção isolado por centrifugação. Após secagem resultaram 160 mg de composto em titulo na forma de tri-hidrobrometo MS: 1403 (M+H)

Exemplo 45a Z-N(CH3)-CH2CH2-OH N-Benzilóxícarbonilo-2-metilamino-etanol 4,5 g (0,06 mole) de 2-metilamino-etanol foram dissolvidos em 50 mL de tetra-hidrofurano absoluto, e adicionados, sob ligeiro arrefecimento, com 14,9 g (0,06 mole) de N-(benzilóxicarbonilóxilo)-succinimida em 30 mL de THF. De seguida agitou-se durante 4 horas à temperatura ambiente. A solução reaccional foi levada ao rotavapor sob vácuo, e o resíduo resultante, retomado em acetato de etilo. A fase orgânica foi lavada várias vezes com uma solução a 10% de ácido cítrico e 10% de solução de hidrogenocarbonato de poLássio e solução saturada de NaCl. Secou-oc cobre sulfato 55

V Γ\ ί \ \;-1 "7 / de sódio, filtrou-se e levou-se ao evaporador rotativo para secar. Resultou um óleo incolor.

Rendimento: 11,4 g MS: 210 (M+H)

Exemplo 45a Z-N (CH3) -CH2CH2-0Ts N-Benzilóxicarbonilo-2-metilamino-l-p-tosilóxilo-etano 11,3 g (0,054 mole) de N-Z-metilamino-etanol (composto a partir do Exemplo 45a) foram dissolvidos em 100 mL de piridina e arrefeceu-se a 0°C. Adicionou-se gora a gota, durante 30 minutos uma solução de 12,2 g (0,064 mole) de cloreto de 4-toluenosulfonilo em 60 mL de clorofórmio e agitou-se durante a noite a 0°C. De seguida levou-se a solução reaccional ao evaporador rotativo, retomou-se o residuo em 200 mL de acetato de etilo e lavou-se várias vezes com uma solução a 10% de ácido cítrico e solução saturada de cloreto de sódio, secou-se sobre sulfato de sódio, filtrou-se e levou-se o filtrado ao rotavapor sob vácuo. O produto bruto resultante foi purificado por cromatografia em sílica-gel (éter metilo-tert-butílico/ciclo-hexano: 3/1).

Rendimento: 13 g MS: 364 (M+H)

Exemplo 45c Z-N(CH3) -ch2ch2-n3 N-Benzilóxicarbonilo-2-metilamino-etilazida 4,7 g (0,013 mole) de composto dc Exemplo 45b com 2,5 g (0,039 mole) de azida de sódio e 1 g de étar crôa 18-crôa-6 foram aquecidos em conjunto em 100 mL de dimetilformamida absoluta durante 1 hora a 70°C. De seguida levou-se ao rotavapor a vácuo, retomou-se o resíduo em 150 mL de acetato de etilo, lavou-se várias vezes com uma solução a 10% 56

\

de ácido cítrico, solução a 10% de de KHCO3 e solução de cloreto de sódio saturada. Secou-se sobre sulfato de sódio, filtrou-se e levou-se o filtrado ao rotavapor a vácuo. Resultou um liquido amarelado, que se movimenta muito ligeiramente.

Rendimento: 2,7 g MS: 235 (M+H)

Exemplo 45d Z-N(CH3) -CH2CH2-NH2 * HC1 2- (N-Benzilóxicarbonilo-N-metilo-amino)-etilamina hidrocloreto 2,1 g (9 mmole) da azída do Exemplo 45c foram dissolvidos em 50 mL de metanol com 6 g (27 mmole) de cloreto de zinco (II) di-hidratado. Agitou-se durante 2 horas à temperatura ambiente (até se verificar o fim da produção de N2) e concentrou-se em vácuo até à secura. O resíduo foi retomado numa pequena quantidade de água, e ajustou-se o pH a um valor de 11 com 2 M de NaOH. A solução alcalina foi extraída 3 x com 100 mL de éter metil-tert-butílico e as fases orgânicas reunidas foram lavadas com uma solução saturada de cloreto de sódio por 2 x. A fase orgânica foi seca sobre sulfato de sódio, filtrada e levada ao rotavapor em vácuo. O óleo resultante foi misturado com 100 mL de éter dietílico e adicionou-se uma solução etérea de Hcl a 1M até se verificar a precipitação do hidrocloreto. 0 precipitado foi filtrado, lavado abundantemente com éter e seco no excicador.

Rendimento: 2 g MS: 209 (M+II)

Exemplo 45e

Boc-Arg (Mtr) -NH-CH2CH2-N (CH3) -Z N-[N„-tert-butilóxicarbonilo-N(o- (4-metóxilo-2, 3, 6- 57

trimetilbenaosulfonilo) -L-argi τνί 1 o]-N' -[benzilo-OXÍcarbonilo-N'-metiletilenodiamina] 2,43 g (5 mmole) de Boc-Arg (Mtr)-OH, 675 mg de N- hidróxibenzotriazolo e 1,22 g (5 mmole) de 2-(N- benzilóxicarbonilo-N-metilamino)-etilamina hidrocloreto [45d] foram dissolvidos em conjunto em 25 mL de dimetilformamida e adicionados a 0°C de 1,13 g (5,5 mmole) de N,Ν' -diciclo-hexilcarbodi-ímida e 0,85 mL (5 mmole) de di- isopropiletílamina. A solução foi agitada durante 20 minutos a 0°C e 3 horas à temperatura ambiente. 0 precipitado foi filtrado, e o filtrado levado ao rotavapor a vácuo. O residuo foi retomado em acetato de etilo, e lavado vários vezes com uma solução a 10% de ácido cítrico, solução a 10% de KHC03 e solução saturada de cloreto de sódio. Secou-se sobre sulfato de sódio, filtrou-se e evaporou-se o filtrado a vácuo. Rendimento: 2,4 g de produto amorfo MS: 677,3 (M+H)

Exemplo 45f

Boc-Arg (Mtr) -NH-CH2CH2-N (CH3) -H N-[Na-tert-butilóxicarbonilo-N(o- (4-metóxilo-2, 3, 6-trimetilbenzosulfonilo) -L-arginilo]-N' -metilo-etilenodiamina 2,1 g do composto do Exemplo 45e foram dissolvidos em 30 mL de tetra-hidrofurano e hidrogenados com 400 mg de catalisador (10% Pd/C) durante 4 horas à temperatura ambiente. 0 catalisador foi filtrado e o filtrado evaporado à secura sob vácuo.

Rendimento: 1,4 g de produto amorfo MS: 544 (M+H) 58

Exemplo 45g R5 = OCOCH2N(CH3)CH2CH2NH-Arg(Mtr)-Boc

{N-Metilo-N-[2- (Na-tert-butilóxicarbonilo-fNa,- (4-metóxilo-2, 3, 6-trimetilbenzosulfonilo) -L-arginilo]-N-aminoetilo]amina}-acetóxilo R5* = OH W = F.15 250,4 mg (0,2 mmole) de composto do Exemplo 1 com (0,4 mmole) 217,1 mg de composto do Exemplo 45f e uma quantidade catalítica de 10 mg de iodeto de potássio, foram dissolvidos em conjunto em 2 mL de acetonitrilo e agitados durante 12 horas à temperatura ambiente. Após evaporação do solvente, o produto bruto foi purificado em sílica-gel. (Diclorometano/metanol: 15/1) MS: 1175 (M+H)

Exemplo 46

R5 = 0C0CH2N(CH3)CH2CH2NH-Arg-H {N-Metilo-N-[2-L-arginilo]-aminoetilo}amina}-acetilóxilo R5* = R5 W = F.15 A hidrólise dos grupos de protecção decorre de acordo com o método descrito no Exemplo 45 a partir de 46a.

Exemplo 46a R5 = OCOCH2N(CH3)CH2CH2NH-Arg-(Mtr)-Boc R5* = R5 W = F.15 59

ΐ.'Λ'

? 274 mq (0,2 rnmole) de composto do Exemplo 2 com 434 mg (0,8 mmole) de composto do Exemplo 45f e uma quantidade catalítica de 20 mg de iodeto de potássio foram dissolvidos em conjunto em 3 mL de ecetonitrilo e agitados durante 24 horas à temperatura ambiente. Após remoção do solvente, o produto bruto foi purificado por cromatogratía em sílica-gel. (Diclorometano/metanol: 12/1)

Rendimento: 330 mg MS: 2297 (M+H)

Exemplo 47

R5 = OCOCH2N(CH3) CH2CH2NH-Gly-H

{N-Metilo-N-[2-glicilo]-aminoetilo}amina}-acetilóxilo R5* = OH W = F.15 A hidrólise dos grupos de protecção decorre de acordo com o método descrito no Exemplo 45 a partir de 47a.

Exemplo 47a

Boc-Gly-NH-CH2CH2-N (CH3) -Z N-Benzilóxicarbonilo-[N-metilo-N- (tert-butilóxicarbonilo-glicilo-aminoetilo) Jamina A síntese decorre de acordo com os métodos descritos no Exemplo 45c a partir de Boc-Gly-OH e do composto do Exemplo 45d. MS: 366 (M+H)

Exemplo 47b

Boc-Gly-NH-CH2CH2-N(CH3) -H

[N-metilo-N-(tert-butilóxicarbonilo-glicilo-aminoetilo) ]amina 60

, V '-V í—J7

descritos no A síntese decorre de acordo com os métodos Exemplo 45f a partir 47a e hidrogénio. MS: 252 (M+H)

Exemplo 47c R5 OCOCH2N(CH3)CH2CH2NH-Bly-Boc

[N-metilo-N-{2-(tert-butilóxicarbonilo-glicilo)-aminoetilojaminoj-acetóxilo R5* = OH W = F.15 A síntese decorre de acordo com os métodos descritos no Exemplo 45g a partir 47b e do composto do Exemplo 1. MS: 1402,8 (M+H)

Exemplo 48

R5 = OCOCH2N(CH3)CH2CH2NH-Gly-H {N-Metilo-N-[2-glicilo]-aminoetilo}amina}-acetilóxilo R5* = R5 W = F.15 A hidrólise dos grupos de protecção decorre de acordo com o método descrito no Exemplo 45 a partir de 48a. MS: 1445 (m+H)

Exemplo 48a R5 = OCOCH2N(CH3) CH2CH2NH-Gly-Boc [N-Metilo-N-[2-tert-nutilóxicarbonilo-glicilo- aminoetilo) amino]-acetilóxilo R5* = R5 61 W = F.15 A síntese decorre de acordo com os métodos descritos no Exemplo 46a a partir de 47b e composto do Exemplo 2. MS: 1674 (M+H)

Exemplo 49

R5 = 0C0CH2N(CH3)CH2CH2NH-Sar-H

{N-Metilo-N-[2-sarcoxilo]-aminoetilo}amina}-acetilóxilo R5* = OH W = F.15 A hidrólise dos grupos de protecção decorre de acordo com o método descrito no Exemplo 45 a partir de 49c. C72H97N7O12S2 M: 1316,7 MS: 1316,7 (M+H)

Exemplo 49a

Boc-Sar-NH-CH2CH2-N (CH3) -Z N-Benzilóxicarbonilo-[N-metilo-N- (tert-butilóxicarbonilo-sarcosilo-aminoetilo) Jamina A síntese decorre de acordo com os métodos descritos no Exemplo 45e a partir de Boc-Sar-OH e do composto do Exemplo 45d. MS: 380 (M+H)

Exemplo 49b

Boc-Sar-NH-CH2CH2-N (CH3) -H

[N-metilo-N-(tert-butilóxicarbonilo-sarcosilo-aminoetilo) ]amina 62 \ A síntese decorre de acordo com os métodos descritos no Exemplo 45f a partir 49a e hidrogénio. MS: 246 (M+H)

Exemplo 49c R5 = OCOCH2N(CH3)CH2CH2NH-Sar-Boc

[N-metilo-N-(2-(tert-butilóxicarbonilo-sarcosilo-aminoetilo) amino]-acetóxilo R5* = OH W = F.15 A síntese decorre de acordo com os métodos descritos no Exemplo 45g a partir 49b e do composto do Exemplo 1. MS: 1416,7 (M+H)

Exemplo 50

R5 = OCOCH2N(CH3) CH2CH2NH-Sar-H

[N-Metilo-N-[2-ter-butilóxicarbonilo-sarcosilo-aminoetilo}amina]-acetilóxilo R5* = R5 W = F.15 A hidrólise dos grupos de protecção decorre de acordo com o método descrito no Exemplo 45 a partir de 50a e composto do Exemplo 2. MS: 1503 (m+H)

Exemplo 50a R5 = 0C0CH2N (CH3) CH2CH2NH-Sar-Boc [N-Metilo-N-[2-tert-nutilóxicarbonilo-sarcosilo-aminoetilo)amino]- acetilóxilo 63

R5* = R5 A síntese decorre de acordo com os métodos descritos no Exemplo 46a a partir de 49b e composto do Exemplo 2. MS: 1702,6 (M+H)

Exemplo 51

R5 = OCOCH2N (CH3) CH2CH2NH-D-Lys-H

{N-Metilo-N-[2-D-lisilo]-aminoetilo}amina}-acetilóxilo R5* = OH W = F.15 A hidrólise dos grupos de protecção decorre de acordo com o método descrito no Exemplo 45 a partir de 51c. C72H97N7Oi2S2 M: 1316,7 MS: 1373,4 (M+H)

Exemplo 51a

Boc-D-Lys-NH-CH2CH2-N(CH3) -Z A síntese decorre de acordo com os métodos descritos no

Exemplo 45e a partir de Boc-D-Lys(Boc)-OH e do composto do Exemplo 45d. MS: 538 (M+H)

Exemplo 51b

Boc-D-Lys (Boc) -NH-CH2CH2-N (CH3) — H A síntese decorre de acordo com os métodos descritos no

Exemplo 45f a partir 51a e hidrogénio. MS: 403 (M+H) 64 \ \

Exemplo 51c R5 = OCOCH2N(CH3)CH2CH2NH-D-Lys(Boc)-Boc

[N-metilo-N- (2-D-lisilo-aminoetilo) aiaino]-acetilóxilo R5* = OH W = F.15 A síntese decorre de acordo com os métodos descritos no Exemplo 45g a partir 51b e do composto do Exemplo 1. MS: 1573 (M+H)

Exemplo 52

R5 = OCOCH2N(CH3)CH2CH2NH-D-Lys-H

[N-Metilo-N-[2-D-lisilo-aminoetilo}amina]-acetilóxilo R5* = R5 W = F.15 A hidrólise dos grupos de protecção decorre de acordo com o método descrito no Exemplo 45 a partir de 52a. MS: 1617 (M+H)®

Exemplo 52a R5 = OCOCH2N (CH3) CH2CH2NH-D-Lys (Boc) -Boc [N-Metilo-N-[2-D-lisilo-aminoetilo) amino]-acetilóxilo R5* = R5 W = F.15 A síntese decorre de acordo com os métodos descritos no Exemplo 46a a partir de 51b e composto do Exemplo 2. MS: 2017 (M+H) 65

Exemplo 53

R5 = OCOCH2N(CH3) CH2CH2NH-Arg-H {N-Metilo-N-[2-D-arginilo]-aminoetilo}amina}-acetilóxilo R5* = R5 W = F.15 A hidrólise dos grupos de protecção decorre de acordo com o método descrito no Exemplo 45 a partir de 53c. MS: 1673 (M+H)®

Exemplo 53a

Boc-D-Arg-NH-CH2CH2-N (CH3) -Z N-Benzílóxícarbonilo-{N-metilo-N-[Na-tert-butilóxicarbonilo-Νω-(4-metóxilo-2,3,6-trimetil-benzosulfonilo)-D-arginilo]-aminoetilo}amina A síntese decorre de acordo com os métodos descritos no

Exemplo 45e a partir de Boc-D-D-Arg (Mtr) -OH e do composto do Exemplo 45d. MS: 678 (M+H)®

Exemplo 53b

Boc-D-Arg (Mtr) -NH-CH2CH2-N (CH3) -H {N-metilo-N-[Na-tert-butilóxicarbonilo-N(o- (4-metóxilo-2,3, 6-trimetil-benzosulfonilo) -D-arginilo]-aminoetilo}amina A síntese decorre de acordo com os métodos descritos no

Exemplo 45f a partir 53a e hidrogénio. MS: 544 (M+H) ® 66

Exemplo 53c R5 = OCOCH2N(CH3)CH2CH2NH-D-Lys(Boc)-Boc {N-metilo-N-[2-Na-tert-butilóxicarbonilo-Nco- (4-metóxilo-2,3,6-trimetil-benzosulfonilo)-D-arginilo}-aminoetilo]amina]-acetílóxilo R5* = R5 W = F.15 A síntese decorre de acordo com os métodos descritos no Exemplo 46a a partir 53b e do composto do Exemplo 2. MS: 2297 (M+H) ®

Exemplo 54

R5 = OCOCH2N(CH3)CH2CH2NH-Pro-H

[N-Metilo-N-[2-D-prolilo-aminoetilo}amina]-acetilóxilo R5* = OH W = F.15 A hidrólise dos grupos de protecção decorre de acordo com o método descrito no Exemplo 39h a partir de 48g. MS: 1344 (M+H)®

Exemplo 54a

Boc-Pro-NH-CH2CH2N (CH3) -Z N-Benzilóxicarbonilo-[N-Metilo-N-[tert-butilóxicarbonilo-L-prolilo-aminoetilo) ]-amina A síntese decorre de acordo com os métodos descritos no Exemplo 45e a partir Boc-Pro-OH e composto do Exemplo 45d. MS: 406 (M+H) ® 67 \

n

Exemplo 54b

Boc-Pro-NH-CH2CH2-N (CH3) -H A síntese decorre de acordo com os métodos descritos no

Exemplo 45f a partir ò4a e hidrogénio. MS: 272 (M+H)®

Exemplo 54c

R5 = OCOCH2N(CH3)CH2CH2NH-Pro-Boc R5* = OH W = F.15 A síntese decorre de acordo com os métodos descritos no

Exemplo 45g a partir 54b e do composto do Exemplo 1. MS: 1442,6 (M+H)®

Exemplo 55

R5 = OCOCH2N(CH3) CH2CH2NH-Pro-H

[N-Metilo-N-[2-D-prolilo-aminoetilo}amina]-acetilóxilo R5* = R5 W = F.15 A hidrólise dos grupos de protecção decorre de acordo com o método descrito no Exemplo 40 a partir de 54b e composto do Exemplo 2. MS: 1555 (M+H)®

Exemplo 55a R5 = OCOCH2N(CH3)CH2CH2NH-D-Pro-Boc 68 V V \ Γ\ Λ yx Λ,Λ>-ν R5* = R5 W = F.15 A síntese decorre de acordo com os métodos descritos no Exemplo 46a a partir de 54b e composto do Exemplo 2. MS: 1754 (M+H)®

Exemplo 56

R5 = OCOCH2N (CH3) CH2CH2N (CH3) -Arg-D-H

[N-Metilo-N-[2-D-arginilo-N-2-metilo-aminoetilo}ainina]-acetilóxilo R5* = OH W = F.15 300 mg de composto do Exemplo 56 d foram dissolvidos em 1 mL de díclorometano, 5 mL de ácido trifluoroacético e 0, 45 mL de m-cresona. DE seguida adicionaram-se 0,48 mL de brometo de trimetilsililo e agitou-se durante 2 horas. A solução reaccional foi adicionada de 100 mL de éter metil-ter-butílico, e o produto da reacção foi isolado por centrifugação. Após secagem, resultaram 260 mg de composto em título na forma de tribrometo. MS: 1415,6 (M+H)®

Exemplo 56a Z-N(CH3) -CH2CH2N(CH3) -h N-Metilo-(N-benzilóxicarbonilo-2-metilaminoetilo)amina A 22,8 g (0,25 mole) de N,Ν'-dimetilenodiamina em 250 mL de tetra-hidrofurano foi adicionada gota-a-gota a 0°C durante 30 minutos uma solução de 18,7 g (0,075 mole) de z-OSu em 150 mL de THF. Após 60 minutos à temperatura ambiente, resulta um precipitado (sal de HOSU do educto) , que foi filtrado e 69 lavado com THF. O filtrado foi levado ao rotavapor em vácuo. 0 produto bruto resultante foi purificado por cromatografia em silica-gel. (Diclorometano/metanol/ácido acético/água: 50:12:2:2). A base livre do composto desejado foi obtida através de neutralização de uma solução aquosa do acetato precipitado e extracção com éter dietilico.

Rendimento: 8,5 g MS: 223 (M+H)®

Exemplo 56b

Boc-D-Arg (Mtr) -N (CH3) -CH2CH2N (CH3) -Z , N-benzilóxicarbonilo-{N-metilo-N-[Na-tert-butilóxicarbonilo-Νω- (4-metóxilo-2, 3, 6-trimetilo-benzosulfonilo-D-arginilo]-metilaminoetilo}amina A síntese decorre de acordo com o método descrito no Exemplo 45e a pratir de Boc-D-Arg(Metr)-OH r composto do Exemplo 56a. MS: 691/ 3 (M+H)®

Exemplo 56c

Boc-D-Arg (Mtr) -N (CH3) -CH2CH2N (CH3) -H {N-metilo-N-[Na-tert-butilóxicarbonilo-No>- (4-metóxilo-2,3, 6-trimetilo-benzosulfonilo-D-arginilo]-metilaminoetilo}amina A síntese decorre de acordo com o método descrito no Exemplo 45f a partir de 56b e hidrogénio. MS: 557,3 (M+H) ®

Exemplo 56d R5 = OCOCH2N (CH3) CH2CH2N (CH3) -D-Arg (Mtr) -Boc {N-metilo-N-[Na-tert-butilóxicarbonilo-[N«>- (4-metóxilo-2,3, 6-trimetilo-benzosulfonilo]-D-arginilo]-N-metilaminoetilojamina}- acetilóxilo 70 \

-ff

R5* W OH F. 15 250,4 mg (0,2 mmole) de composto do Exemplo 1 (0,4 mmole) 222,6 mg de composto do Exemplo 56c e uma quantidade catalítica de 10 mg de iodeto de potássio foram dissolvidos em conjunto em 2 mL de acetonitrilo e agitados durante 12 horas à temperatura ambiente. Após evaporação do solvente, o produto bruto foi purificado por cromatografia em sílica-gel. (Diclorometano/metanol: 15/1). (M+H) MS: 172 í

Exemplo 57

R5 = OCOCH2N(CH3) CH2CH2NH-Gly-H

[N-Metilo-N-[2-glicilo-aminoetilo}amina]-acetilóxilo

R5* = OH W = F.15 A hidrólise dos grupos de protecção decorre de acordo com o método descrito no Exemplo 45 a partir de 57c. (M+H) MS: 1317,6

Exemplo 57a

Boc-Gly-N (CH3) -CH2CH2N(CH3) -H N-Benzilôxocarbonilo-[N-metilo-N- (tert-butilóxicarbonilo-glicilo-metilaminoetilo) ]amina A síntese decorre dc acordo com os métodos descritos no Exemplo 45e a partir de Boc-Gly-OH e composto do Exemplo 56a. MS: 380,2 (M+H)® 71

Exemplo 57b

Boc-Gly-N (CH3) -CH2CH2N (CH3) -H

[N-metilo-N-(tert-butilóxicarbonilo-glicilo- metilaminoetilo) Jamina A síntese decorre de acordo com os métodos descritos no Exemplo 45f a partir de 57a e hidrogénio. MS: 246 (M+H)® 57c

Exemplo R5 = OC0CH2N (CH3) CH2CH2N (CH3) -Gly-Boc

[N-Metilo-N-[2-tert-butilóxicarbonilo-glicilo-aminoetilo}amina]-acetilóxilo R5* = OH W = F.15 A síntese decorre de acordo com os métodos descritos no Exemplo 45g a partir de 57b e composto do Exemplo 1. MS: 1688,2 (M+H)®

Exemplo 58

R5 = OCOCH2N (CH3) CH2CH2N (CH3) -Gly-H

[N-Metilo-N-[2-glicilo-N-2-metilaminoetilo) amina]-acetilóxilo R5* = R5 W ' = F.15 A hidrólise dos grupos de protecçao decorre de acordo com o método descrito no Exemplo 45h a partir de 58a. MS: 1473,4 (M+H)® 72

Exemplo 58a R5 = OCOCH2N(CH3)CH2CH2N(CH3) -Gly-Boc [N-Metilo-N- (Boc-glicilo-N-2-metilaminoetilo}amina]-acetilóxilo R5* = R5 W = F.15 A síntese decorre de acordo com os métodos descritos no Exemplo 46a a partir de 57b e composto do Exemplo 2. MS: 1702,6 (M+H)®

Exemplo 59

R5 = OCOCH2N(CH3)CH2CH2NH-Sar-H

[N-Metilo-N-[2-sarcosilo-N-2-metilo-aminoetilo}amina]-acetilóxilo R5* = OH W = F.15 A hidrólise dos grupos de protecção decorre de acordo com o método descrito no Exemplo 45 a partir de 59c. MS: 1330,7 (M+H)®

Exemplo 59a

Boc-Sar-N (CH3) -CH2CH2N (CH3) -Z N-Benzilóxicarbonilo-[N-metilo-N- (tert-butilóxicarbonilo-sarcosilo-metilaminoetilo) ]amina A síntese decorre de acordo com os métodos descritos no Exemplo 45e a partir de Boc-Sar-OH e composto do Exemplo 56a. MS: 394,4 (M+H)® 73 Γ\ /- \ y r r"\ Γ\ /- \ y r r"\ a. Λα/

Exemplo 59b

Boc-Sar-N (CH3) -CH2CH2N(CH3) -Η [N-metilo-N-(tert-butilóxicarbonilo-sarcosilo-metilaminoetilo) ]amina A síntese decorre de acordo com os métodos descritos no

Exemplo 45f a partir de 59a e hidrogénio. MS: 260,2 (M+H)®

Exemplo 59c

R5 = OCOCH2N(CH3)CH2CH2N(CH3)-Sar-Boc R5* = OH W = F.15 A síntese decorre de acordo com os métodos descritos no

Exemplo 39g a partir de 54b e composto do Exemplo 1. MS: 1431,4 (M+H)®

Exemplo 60

R5 = 0C0CH2N (CH3) CH2CH2N (CH3) -Sar-H

[N-Metilo-N-[2-sarcosilo-N-2-metilaminoetilo) amina]-acetilóxilo R5* = R5 W = F.15 A hidrólise dos grupos de protecção decorre de acordo com o método descrito no Exemplo 45 a partir de 60a. MS: 1531 (M+H)®

Exemplo 60a R5 = OCOCH2N(CH3) CH2CH2N(CH3) - Sar-Boc 74

[N-Metilo-N-(2-tert-butilóxicarbonilo-sarcosilo-N-2-metilaminoetilo}amina]-acetilóxilo R5* = R5 W = F.15 A síntese decorre de acordo com os métodos descritos no Exemplo 46a a partir de 59b e composto do Exemplo 2. MS: 1731 (M+H)® 61

Exemplo

R5 = OCOCH2N(CH3) CH2CH2N(CH3)-L-Arg-H

[N-Metilo-N-[2-L-arginilo) -N- (2-metilo-aminoetilo}amina]-

acetilóxilo R5* = OH W = F.15 A hidrólise dos grupos de protecção decorre de acordo com o método descrito no Exemplo 45 a partir de 61c. MS: 1415,6 (M+H)®

Exemplo 61a

Boc-Arg (Mtr) -N(CH3) -CH2CH2N (0¾) -Z N-Benzilóxicarbonilo-[N-metilo-N-[Na-tert-butilóxicarbonilo-Νω-(4-metóxilo-2,3, 6-trimetilo-benzosulfonilo)-L-arginilo]-metilaminoetilo]amina A síntese decorre de acordo com os métodos descritos no Exemplo 45e a partir de Boc-Arg(Mtr)-OH e composto do Exemplo 56a. MS: 691,3 (M+H)® 75 ί Λ ί »Âr^

Exemplo 61b

Boc-Arg (Mtr) -N (CH3) -CH2CH2N (CH3) -H {N-metilo-N-[Na-tert-butilóxicarbonilo-N<o- (4-metóxilo-2,3, 6-trimetilo-benzosulfonilo) -L-arginilo]-metilaminoetilo}amina A síntese decorre de acordo com os métodos descritos no

Exemplo 45f a partir de 61a e hidrogénio. MS: 557,3 (M+H)®

Exemplo 61c R5 = OCOCH2N (CH3) CH2CH2N (CH3) -L-Arg (Mtr) -Boc

{N-metilo-N-[2-Na-tert-butilóxicarbonilo-N6)- (4-metóxilo-2,3,6-trimetilo-benzosulfonilo)-L-arginilo]-N-2 metilaminoetilo}amina}-acetilóxilo R5* = OH W = F.15 A síntese decorre de acordo com os métodos descritos no

Exemplo 46aa partir de 61b e composto do Exemplo 2. MS: 1431,4 (M+H)®

Exemplo 62

R5 = OCOCH2N(CH3) CH2CH2N(CH3)-Arg-H

[N-Metilo-N-[2-L-arginilo-N- (2-metilaminoetilo) amina]-acetilóxilo R5* = R5 W = F.15 A hidrólise dos grupos de protecção decorre de acordo com o método descrito no Exemplo 45h a partir de 62a. MS: 1700,9(M+H)® 76

Exemplo 62a R5 = 0C0CH2N (CH3) CH2CH2N (CH3) -Arg (Mtr) -Boc R5* = R5 W = F.15 A síntese decorre de acordo com os métodos descritos no Exemplo 46a a partir de 61b e composto do Exemplo 2. MS: 2325. (M+H)®

Exemplo 63

R5 = OCOCH2N (CH3) CH2CH2N (CH3) -Arg-D-H

[N-Metilo-N-[2-D-arginilo-N- (2-metilaminoetilo) amina]-acetílóxilo R5* = R5 W = F.15 A hidrólise dos grupos de protecção decorre de acordo com o método descrito no Exemplo 45 a partir de 63a. MS: 1700,9(M+H)®

Exemplo 63a R5 = OCOCH2N(CH3)CH2CH2N(CH3)-Arg(Mtr)-Boc R5* = R5 W = F.15 A síntese decorre de acordo com os métodos descritos no Exemplo 46a a partir de 56c e composto do Exemplo 2. MS: 2325 (M+H)® 77

r\ •r) Λ*'·

Exemplo 64

R5 = OCOCH2N (CH3) CH2CH2N (CH3) -Lys-H

[N-Metilo-N-[2-L-lisilo-N-2-metilo-aminoetilo}amina]-acetilóxilo R5* = OH W = F.15 A hidrólise dos grupos de protecção decorre de acordo com o método descrito no Exemplo 39h a partir de 60d. MS: 1389 (M+H)

Exemplo 64a

Boc-Lys-N (CH3) -CH2CH2N (CH3) -Z N-Benzilóxicarbonilo-[N-nietilo-N-[N0/NE-tert- butilóxicarbonilo-L-lisilo-metilaminoetilo]amina A síntese decorre de acordo com os métodos descritos no Exemplo 45e a partir de Boc-Lys(Boc)-OH e composto do Exemplo 56a. MS: 551,3 (M+H)®

Exemplo 64b

Boc-Lys (Boc) -N (CH3) -CH2CH2N (CH3) -H {N-metilo-N-[Na/ NE-tert-butilóxicarbonilo-L-lisilo-meti1aminoeti1 o]amina A síntese decorre de acordo com os métodos descritos no Exemplo 45f a partir de 64a e hidrogénio. MS: 417,3 (M+H)® 78

Exemplo 64c

R5 = OCOCH2N(CH3)CH2CH2N(CH3) -Lys (Boc) -Boc R5* = OH W = F.15 A síntese decorre de acordo com os métodos descritos no Exemplo 46g a partir de 64b e composto do Exemplo 1. MS: 1588,9 (M+H)®

Exemplo 65

R5 = OCOCH2N (CH3) CH2CH2N (CH3) -Lys-H

[N-Metilo-N-[2-L-lisilo-N- (2-metilaminoetilo) amina]-acetilóxilo R5* = R5 W = F.15 A hidrólise dos grupos de protecção decorre de acordo com o método descrito no Exemplo 45 a partir de 65a. MS: 1644,2 (M+H)®

Exemplo 65a R5 = OCOCH2N (CH3) CH2CH2N (CH3) -Lys (Boc) -Boc R5* = R5 W = F.15 A síntese decorre de acordo com os métodos descritos no Exemplo 46a a partir de 64b e composto do Exemplo 2. MS: 2045 (M+H)® 79

Exemplo 66

R5 = OCOCH2N(CH3)CH2CH2N(CH3) -D-Lys-H

[N-Metilo-N-[2-L-lisilo-N-2-metilo-aminoetilo}amina]-acetilóxilo R5* = OH W = F.15 A hidrólise dos grupos de protecção decorre de acordo com o método descrito no Exemplo 45 a partir de 66c. MS: 1389 (M+H)®

Exemplo 66a

Boc-D-Lys (Boc) -N (CH3) -CH2CH2N (CH3) -Z N-Benzilóxicarbonilo-[N-metilo-N-[Na, N„-tert-butilóxicarbonilo-D-lisilo-metilaminoetilo]amina A sintese decorre de acordo com os métodos descritos no

Exemplo 45e a partir de Boc-D-Lys(Boc)-OH e composto do Exemplo 56a. MS: 551,3 (M+H)®

Exemplo 66b

Boc-D-Lys (Boc) -N (CH3) -CH2CH2N (CH3) -H {N-metilo-N-[Na,NE-tert-butilóxicarbonilo-D-lisilo- metilaminoetilo]amina A sintese decorre de acordo com os métodos descritos no

Exemplo 45f a partir de 64a e hidrogénio. MS: 417,3 (M+H)® 80 V-í Ç ,i c%aí- -f

Exemplo 66c R5 = OCOCH2N(CH3) CH2CH2N(CH3)-Lys (Boc)-D-Boc

R5* = OH W = F.15 A síntese decorre de acordo com os métodos descritos no Exemplo 45g a partir de 66b e composto do Exemplo 1. MS: 1588,9 (M+H)®

Exemplo 67

R5 = 0C0CH2N(CH3)CH2CH2N(CH3)-D-Lys-H

[N-Metilo-N-[2-D-lisilo-N- (2-metilaminoetilo) amina]- acetilóxilo R5* = R5 W = F.15 A hidrólise dos grupos de protecção decorre de acordo com o método descrito no Exemplo 45 a partir de 67a. MS: 1644,2 (M+H)®

Exemplo 67a R5 = OCOCH2N (CH3) CH2CH2N (CH3) -D-Lys (Boc) -Boc R5* = R5 W = F.15 A síntese decorre de acordo com os métodos descritos no Exemplo 46a a partir de 66b e composto do Exemplo 2. MS: 2045 (M+H)® 81 $

c

Exemplo 68

R5 = OCOCH2N (CH3) CH2CH2N (CH3) -Pro-H

[N-Met ilo-N-[2-L-prol ilo-N-2 -meti lo-aminoe tilo} amina]-acetilóxilo R5* = OH W = F.15 A hidrólise dos grupos de protecção decorre de acordo com o método descrito no Exemplo 45h a partir de 68c. MS: 1358 (M+H)

Exemplo 68a

Boc-Pro-N (CH3) -CH2CH2N (CH3) -Z N-Benzilóxicarbonilo-[N-metilo-N-tert-butilóxicarbonilo-L- prolilo-metilaminoetilojamina A síntese decorre de acordo com os métodos descritos no Exemplo 45e a partir de Boc-Pro-OH e composto do Exemplo 56a. MS: 420,3 (M+H)®

Exemplo 68b

Boc-Pro-N (CH3) -CH2CH2N (CH3) -H {N-metilo-N-(tert-butilóxicarbonilo-L-prolilo-metilaminoetilo]amina A síntese decorre de acordo com os métodos descritos no Exemplo 45f a partir de 68a e hidrogénio. MS: 286 (M+H)® 82

L 7

Exemplo 68c R5 = OCOCH2N(CH3)CH2CH2N(CH3)-Pro-Boc

{N-metilo-N-((2-prolilo-N-2-metilo-aminoetilo)amino]-acetilóxilo R5* = OH W = F.15 A síntese decorre de acordo com os métodos descritos no Exemplo 45g a partir de 68b e composto do Exemplo 1. MS: 1457,6 (M+H)®

Exemplo 69

R5 = OCOCH2N (CH3) CH2CH2N (CH3) -D-Pro-H

[N-Metilo-N-[2-D-prolilo-N-2-metilo-aminoetilo}amina]-acetilóxilo R5* = OH W = F.15 A hidrólise dos grupos de protecção decorre de acordo com o método descrito no Exemplo 45 a partir de 69c. MS: 1357,9 (M+H)®

Exemplo 69a

Boc-D-Pro-N (CH3) -CH2CH2N (CH3) -Z A síntese decorre de acordo com os métodos descritos no Exemplo 45e a partir de Boc-D-Pro-OH e composto do Exemplo 56a. MS: 420,2 (M+H)® 83

r~~ \ V.

Exemplo 69b

Boc-D-Pro-N (CH3) -CH2CH2N (CH3) -H {N-metilo-N- (tert-butilóxicarbonilo-D-prolilo-metilaminoetilojamina A síntese decorre de acordo com os métodos descritos no

Exemplo 45f a partir de 69a e hidrogénio. MS: 286 (M+H)®

Exemplo 69c R5 = OCOCH2N(CH3) CH2CH2N(CH3)-D-Pro-Boc

{N-metilo-N-(2-D-prolílo-N-2-metilo-aminoetilo)amino]-acetilóxilo R5* = OH W = F.15 A síntese decorre de acordo com os métodos descritos no

Exemplo 45g a partir de 69b e composto do Exemplo 1. MS: 1457, 6 (M+H)®

Exemplo 7 0

R5 = 0C0CH2N(CH3)CH2CH2N(CH3)-His-H

[N-Metilo-N-[2-L-histidilo-N-2-metilo-aminoetilo}amina]-acetilóxilo R5* = OH W = F.15 A hidrólise dos grupos de protecção decorre de acordo com o método descrito no Exemplo 45 a partir de 70c. 84

Γ\

Exemplo 70a

Boc-His (Boc) -N (CH3) -CH2CH2N (CH3) -Z N-Benzilóxicarbonilo-[N-metilo-N-[2-bis-Na/ Ne-tert-butilóxicarbonilo-L-histidilo-metilaminoetilo]amina A síntese decorre de acordo com os métodos descritos no Exemplo 45e a partir de Boc-His(Boc)-OH e composto do Exempl° 56a. MS: 560,3 (M+H)®

Exemplo 70b

Boc-His (Boc) -N (CH3) -CHzCH2N (CH3) -H {N-metilo-N-[2-bis-Na, Νε-tert-butilóxicarbonilo-L-histidilo-metilaminoetilo]amina A síntese decorre de acordo com os métodos descritos no

Exemplo 45f a partir de 70a e hidrogénio. MS: 426,3 (M+H)®

Exemplo 70c R5 = OCOCHzN(CH3) CH2CH2N(CH3)-His (Boc)-D-Boc

R5* = OH W = F.15 A síntese decorre de acordo com os métodos descritos no

Exemplo 39g a partir de 66c e composto do Exemplo 1. MS: 1396,7 (M+H)®

Exemplo 71

R5 = OCOCH2N (CH3) CH2CH2N (CH3) -Trp-H

[N-Metilo-N-[2-L-triptofilo-N-2-metilo-aminoetilo}amina]- 85

ο* acetilóxilo

R5* = OH W = F.15 A hidrólise dos grupos de protecção decorre de acordo com o método descrito no Exemplo 45 a partir de 71c. MS: 1447 (M+H)®

Exemplo 71a

Boc-Trp-N (CH3) -CH2CH2N (CH3) -Z N-Benzilóxicarbonilo-[N-metilo-N-tert-butilóxicarbonilo-L- tripto±ilo-metiiaminoetilo]amina A síntese decorre de acordo com os métodos descritos no

Exemplo 45e a partir de Boc-Trp-OH e composto do Exemplo 56a. MS: 509,3 (M+H)®

Exemplo 71b

Boc-Trp-N (CH3) -CH2CH2N (CH3) -H {N -metilo-N-(tert-butilóxicarbonilo-L-triptofilo-metilaminoetilo]amina A síntese decorre de acordo com os métodos descritos no

Exemplo 45f a partir de 71a e hidrogénio. MS: 375,2(M+H)®

Exemplo 71c R5 = OCOCH2N(CH3) CH2CH2N(CH3)-Trp-Boc

{N-metilo-N-(2-tert-butilóxicarbonilo-triptofilo-N-2-metiloaminoetilo) amino]-acetilóxilo R5* = OH W = F. 15 86

A síntese decorre de acordo com os métodos descritos no Exemplo 45g a partir de 71b e composto do Exemplo 1. MS: 1447 (M+H)®

Exemplo 72

R5 = OCOCH2N(CH3)CH2CH2CH2N(CH3)-Arg-H

[N-Metilo-N-[2-L-argínilo-N-2-metilo-aminopropilo}amina]-acetilóxilo R5* = OH W - F.15 Ά hidrólise dos grupos de protecção decorre de acordo com o método descrito no Exemplo 45h a partir de 72d. MS: 1431 (M+H)®

Exemplo 72a Z-N (CH3) -CH2-CH2-CH2-N- (CH3) -z A síntese decorre de acordo com os métodos descritos no Exemplo 56a a partir de N-(benzilóxicarbonilóxilo)-succinimída e N,Ν'-dimetilo-1,3-propanodiamina. MS: 237 (M+H)®

Exemplo 72b

Boc-Arg (Mtr) -N (CH3) -CH2-CH2-CH2-N- (CH3) -Z A síntese decorre de acordo com os métodos descritos no Exemplo 45e a partir de Boc-Arg(Mtr)-OH e composto do Exemplo 72a. MS: 706 (M+H)® 87 Γ / ? ' V ν'' ' F.xemplo 72c

Boc-Arg (Mtr) -N (CH3) -CH2-CH2-CH2-N- (CH3) -H A síntese decorre de acordo com os métodos descritos no

Exemplo 45f a partir de 72b e hidrogénio. MS: 571,3 (M+H)®

Exemplo 72d R5 = OCOCH2N (CH3) CH2CH2CH2N (CH3) -Arg (Mtr) -Boc

R5* = OH W = F.15 A síntese decorre de acordo com os métodos descritos no

Exemplo 45g a partir de 72c e composto do Exemplo 1. MS: 1743 (M+H)®

Exemplo 73

R5 = OCOCH2N (CH3) CH2CH2CH2N (CH3) -Arg-H

[N-Metilo-N-[2-L-arginilo-N-2-metilo-aminopropilo}amina]-acetilóxilo R5* = R5 W = F.15 A hidrólise dos grupos de protecção decorre de acordo com o método descrito no Exemplo 45h a partir de 73a. MS: 1729 (M+H)®

Exemplo 73a R5 = OCOCH2N(CH3) CH2CH2CH2N(CH3)-Arg (Mtr)-Boc R5* = R5 W = F.15 A síntese decorre de acordo com os métodos descritos no 88 7

..r X -j-y

Exemplo 46a a partir de 72c e composto do Exemplo 2. MS: 2352 (M+H)®

Exemplo 74

R5 = OCOCHzCH2CH2(CH3)CH2CH2N(CH3)-H

[N-Metilo-N-[2-metilo-aminoetilo) aminaj-butirilóxilo R5* = OH W = F.15 A hidrólise dos grupos de protecção decorre de acordo com o método descrito no Exemplo 45h a partir de 74a. C72H98N60O11S2 M: 1287,9 MS; 1289 (M+H)®

Exemplo 74a R5 = 0C0CH2CH2CH2(CH3)CH2CH2N(CH3)-Boc

[N-Metilo-N-[2-metilo-aminoetilo) amina]-butirilóxilo R5* = OH W = F.15 A hidrólise decorre de acordo com os métodos descritos no Exemplo 45ga partir de 8a e de composto do Exemplo 43. MS: 1389 (M+H)®

Exemplo 75

R5 = OCOCH2CH2CH2 (CH3) CH2CH2N (CH3) -H

[N-Metilo-N-[2-metilo-aminoetilo) amina]-butirilóxilo R5* = R5 W = F.15 A hidrólise dos grupos de protecção decorre de acordo com o método descrito no Exemplo 45h a partir de 75a. 89

MS: 1445 (M+H)

Exemplo 75a R5 = OCOCH2CH2CH2 (CH3)CH2CH2N(CH3) -Boc [N-Metilo-N-[2-metilo-aminoetilo) amina]-butirilóxilo R5* = R5 W = F.15 A síntese decorre de acordo com os métodos descritos no Exemplo 46a a partir de 8a e de composto do Exemplo 44. MS: 1645 (M+H)®

Exemplo 7 6

R5 = OCOCH2-N-[CH2PO (CH3) 2]CH2CH2N (CH3) -H R5* = OH W = F.15 230 mg de produto do Exemplo 76d foram dissolvidos em 10 mL de ácido acético/metanol: 2/1 e hidrogenados com 80 mg de catalisador (10% Pd/C) durante 40 minutos à temperatura ambiente. O catalisador foi filtrado e o filtrado evaporado à secura sob vácuo. Resultaram 1110 mg de produto em título.

Exemplo 76a CH3-NH-CH2CH2Br*HBr

Brometo de 2-metilaminoetilo hidrobrometo 26,2 g (0,35 mole) de N-metilaminoetanol foram dissolvidos em 200 mL de tolueno, arrefeceu-se a 0°C e durante 1 hora, adicionaram-se 27,9 mL (0,36 mole) de brometo de tionilo. A solução reaccional foi aquecida até 60°C, e agitada fortemente durante 45 minutos. De seguida levou-se ao evaporador rotativo sob vácuo. A massa rígida resultante foi 90

retomada em 1L de acetona em ebulição, adicionou-se carvão activado e filtrou-se. Depois adicionou-se cerca de 600 mL de éter di-isopropilico e deixou-se cristalizar a 0°C. O precipitado foi filtrado, abundantemente lavado com éter di-isopropilico e imediatamente de seguida, seco em excicador sobre KOH.

Rendimento: 48 g

Exemplo 7 6b Z- (CH3)NH~CH2CH2Br

Brometo de (N-benzilóxicarbonilo-2-metilaminoetilo) 10,94 (0,05 mole) de brometo de 2-metilaminoetilo hidrobromado foram dissolvidos em 80 mL de acetonitrilo e adicionados de 12,5 g (0,05 mole) de Z-OSu e 6,9 mL (0,05 mole) de trietilamina. Agitou-se durante 45 minutos à temperatura ambientem levou-se ao rotavapor em vácuo e retomou-se o resíduo do balão em 150 mL de acetato de etilo. De seguida lavou-se várias vezes cim uma solução de 10% de ácido cítrico, e solução saturada de cloreto de sódio, secou-se sobre sulfato de sódio, filtrou-se e concentrou-se o filtrado em vácuo até à secura. 0 produto bruto foi purificado por cromatografia em sílica-gel. (n-Heptano/acetato de etilo: 5/1).

Rendimento: 7,8 g MS: 272 (M+H)®

Exemplo 76c Z- (CH3) NH-CH2CH2-NH-CH2PO (CH3) 2 N-Dimetiloxofosforilmetilo-(N-benzilóxicarbonilo-2-metilaminoetilo)amina 2,7 g (10 mmole) de brometo de (N-benzilóxicarbonilo-2-metilaminoetilo) e 5,35 g (50 mmole) de dimetiloxofosforilmetilamina foram agitados em conjunto 91

com 250 mg de óxido de prata em 20 rttL de acetonitrilo durante 24 horas à temperatura ambiente. Após evaporação do solvente, purificou-se o produto bruto através de cromatografia em silica-gel. (Diclorometano/metanol: 8/1)

Rendimento: 2,4 g de óleo MS: 299 (M+H)®

Exemplo 76d

R5 = OCOCH2-N-[CH2PO(CH3)2]CH2CH2N(CH3)-Z {[N-Benzilóxicarbonilo-N-metilo-N-(2-

dimetiloxofosforilmetilo) -amino-etilo]axnina}-acetilóxilo R5* = OH W = F.15 250,4 mg (0,2 mmole) de composto do Exemplo 1, (0,4 mmole) 119,3 mg de composto do Exemplo 76c e uma quantidade catalítica d© 10 mg de iodeto de potássio foram dissolvidos em conjunto em 2 mL de acetonitrilo, e agitados durante 12 horas à temperatura ambiente. Após evaporação do solvente, o produto bruto fou purificado através de cromatografia em silica-gel. (Diclorometano/metanol: 15/1). MS: 1470,5 (M+H)®

Exemplo 77

R5 = OCOCH2-N-[CH2PO (CH3) 2]CH2CH2N (CH3) -H {[N-Metilo-N-(2-dimetiloxofosforilmetilo)-amino-etilo]amina}-acetilóxilo R5* = R5 W = F.15 350 g do produto do Exemplo 77d foram dissolvidos em 10 mL de ácido acético/metanol 2/1 e hidrogenados com uma 80 mg de 92 Γλ ν \

catalisador (10% Pd/C), à temperatura ambiente. O catalisador foi filtrado e o filtrado levado à secura sob vácuo. Resultaram 260 mg de composto em título. MS: 1541 (M+H)®

Exemplo 77a

R5 = 0C0CH2-N-[CH2P0(CH3)2]CH2CH2N(CH3)-Z {[N-Benzilóxicarbonilo-N-metilo-N-(2- dimetiloxofosforilmetilo) -amino-etilo]amina}-acetilóxilo R5* = R5 W = F.15 A síntese decorre de acordo com os métodos descritos no Exemplo 46a ou 7 6d, a partir de 76c e composto do Exemplo 2. MS: 1808 (M+H)®

Exemplo 78 R5 = OCO-CH2-N- (CH3)CH2CH2NH-CH2PO(CH3)2

{N -metilo-N-[- (2-dimetiloxofosforilmetilo) -amino-etilo]amina}-acetilóxilo R5* = OH W = F.15 A hidrólise dos grupos de protecção decorre de acordo com o método descrito no Exemplo 45 a partir de 78c. MS: 1336 (M+H)®

Exemplo 78a Z- (CH3)N-CH2CH2N(Boc) -CH2P0(CH3)2 N-tert-Butilóxicarbonilo-[N-dimetilfosforilmetilo- (N- benzilóxicarbonilo-2-metilo-aminoetilo) ]amina 93 1.5 g de N-dimetilfosforilmetilo-(N-benzilóxicarbonilo-2- metilo-aminoetilo) amina 76c e 1,13 g (5,2 mmole) de dicarbonato de di-tert.butilo foram, em conjunto, dissolvidos em 5 mL de acetonitrilo e agitados durante 4 horas à temperatura ambiente. De seguida levou-se ao rotavapor a vácuo, retomou-se o resíduo em acetato de etilo e lavou-se várias vezes ciom uma solução de 10% de ácido cítrico, bem como solução saturada de cloreto de sódio. Secou-se sobre Na2S04, filtrou-se e levou-se ao rotavapor sob vácuo até à Dccura.

Rendimento: 1,7 g óleo MS: 399 (M+H)®

Exemplo 78b H- (CH3)N-CH2CH2N (Boc) -CH2PO (CH3) 2 N-tert-Butílóxicarbonilo-[N-dimetilfosforilmetilo-(N-2-metilo-aminoetilo) ]amina 1.5 g de N-tert-butilóxicarbonilo-[N-dimetilfosforilmetilo- (N-benzilóxicarbonilo-2-metilo-aminoetilo) ]amina foram dissolvidos em 20 mL de metanol com 150 g de catalisador (10% Pd/Carvâo) e hidrogenados durante 4 horas à temperatura ambiente. 0 catalisador foi filtrado e o filtrado levado à secura em rotavapor sob vácuo.

Rendimento: 0,99 g óleo MS: 265 (M+H)®

Exemplo 78c R5 = 0C0-CH2-N(CH3)-CH2CH2N(Boc)-CH2P0(CH3)2 {[N-Benzilóxicarbonilo-N-metilo-N-(2-

dimetiloxofosforilmetilo) -amino-etilo]amina}-acetilóxilo R5* - OH 94 A síntese decorre de acordo com os métodos descritos no Exemplo 45g a partir de 78b e composto do Exemplo 1. MS: 1436 (M+H)®

Exemplo 79 R5 = 0C0-CH2-N(CH3) -CH2CH2NH-CH2PO(CH3)2 {N-metilo-N-[- (2-dimetiloxofosforilmetilo) -amino-etilo]amina}-acetilóxilo R5* = R5 W = F.15 A hidrólise dos grupos de protecçao decorre de acordo com o método descrito no Exemplo 45, a partir de 79a. MS: 1541 (M+H)®

Exemplo 79a R5 = OCO-CH2-N(CH3)-CH2CH2NH-CH2PO(CH3)2 {N-metilo-n-[ (2-N-tert-butilóxicarbonilo- (2-dimetiloxofosforilmetilo) -amino-etilo]amina}-acetilóxilo R5* = R5 W = F.15 A síntese decorre de acordo com o método descrito no Exemplo 46a, a partir de 78b e de composto do Exemplo 2. MS: 1740 (M+H)®

Exemplo 80

R5 = 0C0CH2-N-[CH2C02H])-CH2CH2N(CH3)-H R5* = OH 95

Cl '

Cl ' As ΛΑ W = F.15 A hidólise dos grupos de protecção decorre de acordo com os métodos descritos no Exemplo 45h a partir de 80c.

Exemplo 80a Z- (CH3) N-CHzCH2-NH-CH2COOCH (CH3) 3 N-tert-Butilóxicarbonil~metilo-(N-benzilóxicarbonilo-2-metilaminoetilo)amina 6,5 g (50 mmole) de tert-butilato de glicina, 2,7 g (10 τητηοίο) de brometo de (N-benzilóxi oarbonilo-2- metilaminoetilo) (76b) e 100 mg de óxido de prata foram agitados em 20 mL de acetonitrilo durante 24 horas à temperatura ambiente. A solução reaccional foi filtrada e o filtrado evaporado sob vácuo. 0 resíduo foi retomado em acetato de etilo e lavado várias vezes com água e solução saturada de NaCl até remoção do H-Gly-OBut. A solução de acetato de etilo foi seca sobre Na2so4, filtrada e evaporada a vácuo. 0 produto bruto foi purificado por cromarografia em silica-gel- (Diclorometano/metanol: 30/1).

Rendimento: 2,7 g óleo MS: 323 (M+H)®

Exemplo 80b

R5 = 0C0CH2-N[CH2C02tBu]-CH2CH2N (CH3) -Z

{[N-Benzilóxicarbonilo-N-metilo-N-tert-butilóxicarbonilmetilo)-amino-etilamino}-acetilóxilo R5* = OH W = F.15 A síntese decorre de acordo com o método descrito no Exemplo 45g a partir de 80a e composto do Exemplo 1 MS: 1495 (M+H)® 96

7L Λ,.

Exemplo 80c

R5 = 0C0CH2-N[CH2C02tBu]-CH2CH2N(CH3)-H

{[N -metilo-N-(tert-butilóxicarbonilmetilo)-amino-etilamino}-acetilóxilo R5* = OH W = F.15 550 mg de composto 80b foram dissolvidos em 10 rtiL de metanol e foram hidrogenados com 100 g de catalisador (10% Pd/C) durante 2 horas à temperatura ambiente. 0 catalisador foi removido por filtração, e o filtrado e o filtrado levado à secura em rotavapor sob vácuo. 0 resíduo foi lavado com éter dietílico, filtrado, lavado e seco em excicador Rendimento: 411 mg de diacetato MS: 1361 (M+H)®

Exemplo 81 R5 - OCOCIl2-N[CII2C02tDu] CII2CII2N (CII3)-II R5* = R5 W = F . 1 5 200 mg de 81a foram dissolvidos em 10 mL de metanol/ácido acético (1/1) e hidrogenados com 20 mg de catalisador (10% Pd/C) durante 1 hora à temperatura ambiente. Após remoção do catalisador e do solvente, o resíduo foi lavado com éter dietílico, filtrado e lavado, sendo seco em excicador. Rendimento: 140 mg de tetra-acetato MS: 1588,8 (M+H)®

Exemplo 81a R5 = 0C0CH2-NtCH2C02tBu]-CH2CH2N(CH3) -Z R5* = R5 W = F.15 97 A síntese decorre de acordo com o método descrito no Exemplo 46a a partir de 80a e composto do Exemplo 2. MS: 1857,2 (M+H)®

Exemplo 82 R5 = OCOCH2-N(CH3)-CH2CH2N(Boc)CH3COOCH(CH3)3

{N-metilo-N- (2-N-tert-butilóxicarbonilo)-(2-tert-butilóxicarbonilmetilo) -amino-etilo]amino}-acetilóxilo R5* = OH W = F.15 A síntese decorre de acordo com o método descrito no Exemplo 45g, a partir de 82b e composto do Exemplo 1. MS: 1459,7 (M+H)®

Exemplo 02a Z-N (CH3) -CH2CH2N (Boc) CH3COOCH (CH3) 3 N- tert-Butilóxicarbonilo-[N- tert-butilóxicarbonilmetilo- (N-benzilóxicarbonilo-2-metilo-amino-etilo]amina 2,25 g (7 mmole) de N-tert-Butilóxicarbonil~metilo-(N- benzilóxicarbonilo-2-metilaminoetilo)amina (80a) e 2,32 g (7,2 mmole) de dicarbonato de di-tertbutilo foram agitados em conjunto em 10 mL de acetonitrilo durante 4 horas à temperatura ambiente. De seguida levou-se a rotavapor e o resíduo foi purificado por cromatografia em sílica-gel. (Diclorometano/metanol: 60/1).

Rendimento: 2,2 óleo MS: 423 (M+H)®

Exemplo 82b H-N (CH3) -CH2CH2N (Boc) CH3COOCH (CH3) 3 N-1ert-Butilóxicarbonilo-[N-tert-butilóxicarbonilmetilo- (2- 98

η λ. },λ/

metiloaxninoetilo]amina 2 g de N-tert-butilóxicarbonilo-[N-tert- butilóxicarbonilmetilo-(N-benzilóxicarbonilo~2-metilo-amino-etilo]amina foram dissolvidos em 20 mL de metanol e hidrogenados com 100 mg de catalisador (10% Pd/C) durante 4 horas à temperatura ambiente. O catalisador foi filtrado e o filtrado levado à secura por evaporação.

Rendimento: 1,4 g óleo MS: 289 (M+H)®

Exemplo 83 R5 = OCOCH2-N(CH3)-CH2CH2N(Boc)CH3COOCH(CH3)3 (N-metilo-N-[2-N-tert-butilóxicarbonilo- (2-tert- butilóxicarbonilmetilo) -amino-etilo]amino}-acetilóxilo R5* = R5 W = F.15 A síntese decorre de acordo com o método descrito no Exemplo 46a, a partir de 82b e composto do Exemplo 2. MS: 1789 (M+H)®

Exemplo 84

Determinação das características farmacocinéticas dos

compostos de fórmula I

Os preparados foram administrados em ratos NMRI por via suebutânea, intravenosa ou oral. Em determinados tempos, foram efectuadas, em cada 2 ou 3 ratos narcotizados, punções no coração. A narcose decorreu através de administração intraperitoneal de 0,3 mL de solução de uretano (0,2 mg/mL). O sangue colhido foi armazenado a 4°C até coagular e de seguida foi centrifugado. O soro assim obtido, foi de novo 99 centrífugado para ser purificado (centrífuga modelo 5414,5 min) . Até à análise, o soro foi armazenado a -20°C. A análise das amostras decorreu através de extracçâo com éter seguido da separação através de cromatografia líquida de elevada eficiência em fase reversa (RP-HPLC). Os resultados foram representados graficamente. Na Fig.l (administração subcutânea) e na Fig.2 (administração intravenosa) a concentração no soro do composto activo F.15 é representada em relação ao tempo após a administração do composto activo F.15, bem como após a administração de diferentes compostos dos Exemplos acima mencionados. Ao lado da melhor solubilidade dos compostos pró-drogas, verifica-se uma farmacocinética melhorada.

Lisboa, 7 de Dezembro de 2001

AGENTE OFICIAL DA PROPRIEDADE INDUSTRIAL

Claims (6)

1. ι..... V 1. ι..... V 1.

   REIVINDICAÇÕES Compostos de fórmula I, em que se encontram várias vezes grupos habituais definidos da mesma forma, e independentes uns dos outros W-[R5 em que W significa um grupo mono, bis ou tris-de-hidroxilado de um composto com as seguintes fórmulas:

   F. 1 1 Í-"Y?

   2

   F. 8 J?\

   F . 12 4 '-.Η, V—

   F. 13

   F. 14

   5

   6 , -----Π ,. ), λ λλλ^·

   a significa 1, 2 ou 3 e R5 significa um grupo de fórmula III, Γ R1 l R21 R15 R21 Kl r* M “V *12 R16 . s I u -m j X significa 0, S, NR20 ou N+(R20)2, de preferência S ou NR20, em que R20 significa H, (Ci-C6)-alquilo, (C3-C7) -ciclo-alquilo, -CH2- (CH7)„-NR21R24, -CH9-C (0) -R28, CH2C0NH (Ci-Cç) -alquilo, que pode estar substituído com até 5 grupos -OH, COO (Ci-C6)-alquilo, ou -CH2-P(0) ( (Ci— C4) -alquilo) 2, de preferência significa H, (Ci-C4)-alquilo, -CH2-C (0) -R28 ou -CH2-P (0)Me2, tendo o significado especialmente preferido de (C2-C4)-alquilo, 7 Rn, R12, R15 e Rlfe significam, independentemente uns dos outros, H ou (C1-C4) -alquilo, de preferência H ou metilo, R21 signifca H, (Ci-C6) -alquilo, (C3-Ci) -ciclo- ou (Ci~ C4)-alcóxialquilo, de preferência H, (C1-C4)-alquilo, R24 significa H, (Ci-Ci8)-alquilo, (C3-C14)-ciclo- alquilo, (C2-C18) -alquenilo, (C2-Ci8) -alquinilo ou (Cs-Cn)-arilo, em que cada um destes pode estar uma vez, duas vezes ou tês vezes substituído através de (C6-C14)-arilo, (C6-Cn)- arilóxilo, {C3—Ci4) -ciclo-alquilo, hidróxílo, (C1-C4)- alcóxilo, -C-(0) -R28, P (0) ( (C1-C4)-alquilo) 2 ou halogéneos, e está directamente ligado a NR21 ou eventualmente ligado através de CO, ou um a-aminoácido ligado através do grupo carbonilo, ou Ri4 significa ((Ci-C4)-alquilo)-N-((Ci-C4)-alquilo)- (C1-C4)-alquilo-NH-( (Ci~ C4) -alquilo ou R24 forma com R21 um heterociclo, significando de preferência R24 H, (C1-C4)-alquilo, que pode estar substituído por fenilo, NH2 ou (C3-C7) -ciclo-alquilo e está directamente ou eventualmente ligado através de CO, a NR21 um α-aminoácido natural ligado através do grupo carbonilo, -CH2C(0)R28, -CH2- P (0)Me2, - (CH2)3N(Me) (CH2)2NHMe, sendo especialmente preferido o significado para R24 de H ou (C1-C4) -alquilo, R28 significa OH, - (Ci-C6)-alquilo, 0-(C3-C6)- ciclo-alquilo, NH2, -NH-(Ci-C6)-alquilo, 8 que se pode encontrar suobtituido com ate 5 grupos -OH, -NH-(C3-C7)-ciclo- alquilo ou -N-bis (C1-C4)-alquilo, de preferência R28, significa OH, NH2, 0 (Ci~C4)-alquilo, -NH- (Ci~ C4)-alquilo ou N-bis(C1-C4)-alquilo, significando R26 de forma especialmente preferida, independentemente uns dos outros, OH, NH2 ou 0 (C1-C4) -alquilo, em que 1 pode significar 2 ou e, de preferência 2, s pode significar 1, 2, 3, 4 ou 5, de preferência 1, 4 ou 5, e de forma especialmente preferida 1, m pode significar 0, 1, 2, 3 ou 4, de preferência 2 ou 3, n pode signiifear 1, 2 ou 3, de preferência 1 ou 2 o pode significar 0, 1, 2 ou 3, de preferência 0, 1, ou 2, de forma especilamente preferida 0.
2. 2. Processo para a preparação de compostos de fórmula I, de acordo com a reivindicação 1, caracterizado por um composto activo de fórmula W-(OH)b em que W é definido como se menciona acima, e b pode ser 1, 2 ou 3, mas maior ou igual a a com A) sendo um composto de fórmula (X) V R 1C 1R 11 O IIC-AG 12 s (X) se transformar num composto de fórmula (XX) 9 c~ \.

   [OH]b-a-W-[OCO- (CR11, R12) a-V]a (XX) e de seguida B) o composto resultante de fórmula (XX) por sua vez ser transformado por nucleófilos de fórmulas (XI) ,15 ,21 H-X- -c—R16 R15C— R16 ,21 R‘ ,24 Hm (XI) em que W, a, b, X, R11, R12, R15, R16, R21, R24, 1, m, o e s possuem os significados mencionados acima, V constitui um grupo abandonante adequado, de preferência Br, Cl, OTs, sendo especialmente preferido Br, AG significar um grupo abandonante adequado para esterif icação, de preferência Br ou Cl ou um grupo resultante dos métodos de activação de ésteres para ácidos carboxílicos.
3. 3. Um composto de fórmula I de acordo com a reivindicação 1 para ser utilizado como medicamento.
4. 4. Utilização de um composto de fórmula I, de acordo com a reivindicação 1 para a preparação de um medicamento para o tratamento de doenças de virus.
5. 5. Medicamento, contendo uma quantidade efectiva de um composto de acordo com a reivindicação 1. 10 4
6. 6. Utilização de um composto de acordo com a reivindicação 1, para o tratamento do síndroma da imunodeficiência adquirida ou do ARC ("Aids related complex"). 4 Lisboa, 7 de Dezembro de 2001

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