PT1999159E

PT1999159E - Processo para a separação e estabilização de aminoglicanos de baixo peso molecular a partir de resíduos de casca de ovo

Info

Publication number: PT1999159E
Application number: PT07713234T
Authority: PT
Inventors: Bomi Patel Framroze
Original assignee: Romano Dev Inc
Priority date: 2006-03-25
Filing date: 2007-03-12
Publication date: 2012-03-05
Also published as: MX2008011829A; CA2647782A1; WO2007110789A3; ZA200809145B; US20070225484A1; EP1999159B1; RU2008139958A; ATE534655T1; CN101501014A; JP4987959B2; DK1999159T3; KR20080108573A; US7868165B2; KR101407863B1; EP1999159A4; IL194315A; US20080051368A1; BRPI0708989A2; CN101501014B; JP2009531513A

Description

ΕΡ 1 999 159/ΡΤ

DESCRIÇÃO "Processo de separação e estabilização de aminoglicanos de baixo peso molecular a partir de resíduos de casca de ovo"

Campo da invenção método para eficiente, partir de

As concretizações da invenção referem-se a um separar e estabilizar, de maneira simples e aminoglicanos de peso molecular ultrabaixo, a resíduos de casca de ovo.

Antecedentes da invenção

As concretizações da invenção dizem respeito a processos para a separação, estabilização e formulação de aminoglicanos de baixo peso molecular a partir de resíduos de casca de ovo. 0 extrato de aminoglicano é útil para a preparação de cremes cosméticos com propriedades antirrugas e hidratantes.

Nakano et al. (Poult. Sei. (1991), Vol. 70 (12), pp. 2524-8) demonstraram que a composição química das frações de glicosaminoglicano da cristã e barbela de galos da raça Leghorn Branca de cristã única consistem de glicosaminoglicanos de peso molecular muito elevado e que encontram aplicação em terapia de reposição de cartilagem.

Balazs et al. (U.S. 4141973) descreveu um processo para a separação, a partir de tecidos animais, de ácido hialurónico puro com um peso molecular na faixa de 1 MD a 6MD, útil como substituto do líquido sinovial e do humor vítreo.

Heaney et al. (Biochim Biophys Acta. (1976), Vol.18; 451(1), pp. 133-42) demonstraram que a parte orgânica da casca do ovo de galinha é composta por colagénio, proteínas e polissacarídeos, que provavelmente se encontram presentes como glicoproteínas e glicosaminoglicanos. Por cromatografia, identificaram ainda os componentes orgânicos, encontrando glicosaminoglicanos com um peso molecular mínimo de 30 000 Daltons. A determinação da velocidade de sedimentação num gradiente de densidade mostrou que os polissacarídeos continham quantidades equimolares de glicosamina (36,3% p/p) e 2 ΕΡ 1 999 159/ΡΤ de ácido glicurónico (35,6% p/p). A identificação dos produtos de degradação mostrou que o glicosaminoglicano é principalmente ácido hialurónico.

Stahl et al. (U.S. 6 537 795) descreveram um processo para produzir e separar aminoglicanos de estirpes cultivadas da fermentação com estreptococos. Estes aminoglicanos caracterizam-se por pesos moleculares extremamente elevados, superiores a 6 MD, e são úteis na terapia de reposição de cartilagem.

Processos afins para a separação e purificação de glicosaminoglicanos de outras fontes naturais e de tecidos animais também podem ser encontrados nas Patentes U.S. n.°s 5 824 658, 6 660 853, 6 451 326 e em WO 2004/080388.

Resumo da invenção

As concretizações da invenção proporcionam um processo novo para a separação, a partir de uma fonte natural até então desconhecida de resíduos de casca de ovo, de um composto de aminoglicano de baixo peso molecular, constituído por unidades alternadas de ácido glicurónico e de n-acetilglicosamina, da Fórmula I,

na qual M pode ser, em uma ou mais instâncias, Na, Ca, K, Mg; e n é um número inteiro entre 20 e 40, o referido processo compreendendo as etapas de: (a) pré-preparação dos resíduos de casca de ovo para a extração do composto de aminoglicano embrionário de baixo peso molecular da Fórmula I, por meio de um solvente orgânico polar dissolvido em água, 3 ΕΡ 1 999 159/ΡΤ (b) extração de um composto de aminoglicano de baixo peso molecular da Fórmula I, na forma do seu sal solúvel em água, por meio de uma solução salina aquosa polar, (c) separação de um composto purificado de aminoglicano de baixo peso molecular da Fórmula I, através da formação de gel na mistura salina aquosa por meio de um solvente orgânico polar, seguido de filtração ou centrifugação, (d) estabilização do extrato de aminoglicano separado através da introdução sequencial de óleos orgânicos no gel semisseco, para formar os compostos de aminoglicano da Fórmula I.

As concretizações da invenção dizem especialmente respeito à etapa (b) , na qual a solução salina aquosa polar pode ser constituída pelos sais de sódio, potássio, cálcio ou magnésio de citrato, glutamato, acetato, pirrolidonacarbonato, tartarato, glicinato, sulfato, sulfito, nitrato, carbonato, oxalato, para produzir uma solução contendo os compostos de aminoglicano da Fórmula I, que é apropriada para a gelificação e separação seletivas. 0 processo aqui descrito é um método novo para produzir de maneira seletiva e simples compostos de aminoglicano de baixo peso molecular da Fórmula I, a partir de resíduos de casca de ovo. Mais especificamente, em comparação com os procedimentos divulgados na arte prévia de separação de aminoglicanos, o processo da invenção é diferenciado pelo seguinte: a) Identificação de uma fonte nova, não utilizada até à data, ou seja, resíduos de casca de ovo, que é difícil de eliminar e possui um impacto negativo no ambiente, b) Contém concentrações muito baixas de proteínas e nucleotídeos prejudiciais, c) Não requer nenhumas separações dispendiosas e ineficientes de materiais orgânicos e inorgânicos dos resíduos de casca de ovo, d) Compreende extrações mais simples que envolvem reagentes e solventes moderados, e 4 ΕΡ 1 999 159/ΡΤ e) Não requer acetilação ou outra derivatização, por exemplo, por meio de anidrido acético e ácido sulfúrico como descrito na Patente U.S. 5 679 657, para se atingir tanto a viscosidade desejada, como as propriedades de formação de fios necessárias à aplicação de cosméticos.

Os compostos de aminoglicano da Fórmula I possuem um peso molecular especialmente baixo e ainda assim são estabilizados sem derivatização, proporcionando excelente penetração cutânea para reduzir rugas superficiais. Além disso, apresentam efeitos excelentes de suavização e de hidratação.

Descrição pormenorizada da invenção

Resíduos de casca de ovo produzidos na indústria de transformação de ovos são em geral lavados com solventes e tratados para eliminar odores desagradáveis antes de serem utilizados como aterro. 0 carbonato de cálcio das cascas só é utilizável após procedimentos extensos de separação e limpeza, que tornam o processo comercialmente rentável. Não é necessário pulverizar as cascas de ovo numa faixa estreitamente limitada, uma vez que o processo da invenção presente não depende da separação da membrana interna da casca de ovo, tal como acontece no processo e equipamento complexos descritos por MacNeil (Patente U.S. n.° 6 176 376), para se obter carbonato de cálcio puro.

Identificámos processos para separar seletivamente valiosos compostos orgânicos, especificamente compostos de aminoglicano da Fórmula I, a partir de casca de ovo triturada, sem necessidade da dispendiosa separação dos componentes orgânicos e inorgânicos.

As cascas de ovo esmagadas podem ser tratadas com água morna ou solução morna de etanol a 5% e filtradas para remover resíduos orgânicos aderidos à sua superfície. A razão entre a massa orgânica e o carbonato de cálcio pode variar entre 1% e 15% p/p. Proporções mais elevadas de massa orgânica indicam a presença de massa de ovo não removido cascas de ovos esmagadas, que pode conduzir à presença de produtos prejudiciais de proteínas e nucleotídeos no extrato de aminoglicano. Note-se que, ao contrário de outras fontes de 5 ΕΡ 1 999 159/ΡΤ aminoglicanos, tais como tecidos animais e caldos de fermentação conhecidos na arte prévia, a utilização de resíduos de casca de ovo aqui apresentada é única devido à ausência, no meio extraído, de significativos componentes antigénicos de proteínas e nucleotídeos, conduzindo assim a métodos mais fáceis de extração do composto de aminoglicano purificado da Fórmula I. As cascas de ovo podem ainda ser pré-tratadas com luz ultravioleta para destruir possíveis micróbios presentes mesmo após a limpeza com líquidos. A etapa seguinte consiste em submeter a referida massa de casca de ovo a uma extração altamente seletiva do componente carboidrato na forma do seu sal solúvel em água. Os processos envolvem a suspensão da massa de casca de ovo num volume de 1:2 a 1:10 de uma solução salina aquosa contendo 5% a 40% em peso dos sais citrato, glutamato, acetato, pirrolidonacarbonato, tartarato, glicinato, sulfato, sulfito, nitrato, carbonato e oxalato de sódio, potássio, cálcio ou magnésio ou uma combinação das soluções salinas referidas conforme necessário. Mais especificamente, são preferidos os sais monovalentes de ácidos orgânicos. A suspensão é mantida entre 1 e 24 horas, mais de preferência entre 6 e 12 horas, sob agitação vigorosa periódica, a temperaturas entre 10°C e 35°C. A suspensão é posteriormente filtrada ou centrifugada para recolha da solução aquosa contendo o sal adequado dos compostos de aminoglicano da Fórmula I. A massa de casca de ovo assim separada apresenta uma ligação mais solta das membranas à casca de ovo e, por isso, pode ser mais facilmente tratada por processos conhecidos na arte de separação de carbonato de cálcio puro contendo casca de ovo dos resíduos orgânicos. A etapa seguinte compreende a precipitação na solução aquosa de gel do composto de aminoglicano da Fórmula I sob a sua forma de sal apropriada. O processo envolve a redução da polaridade da solução aquosa e, portanto, da solubilidade do composto de aminoglicano da Fórmula I através da adição sequencial de quaisquer solventes orgânicos miscíveis aquosos, como álcoois, acetona, dimetilformamida, N-metilpirrolidinona ou 1,4-dioxano. O solvente orgânico é adicionado às porções, sob agitação moderada e resfriamento, para se manter a temperatura da reação entre 20°C e 25°C e produzir um gel 6 ΕΡ 1 999 159/ΡΤ branco suspenso na camada aquosa. A solução é deixada a repousar durante 2 a 24 horas até a formação de gel estar concluída. 0 gel é então filtrado ou centrifugado, obtendo-se um extrato semisseco de composto de aminoglicano da Fórmula I. É importante não deixar o extrato secar completamente, uma vez que é necessária uma certa quantidade de fase aquosa durante o processo de estabilização realizado a seguir. A etapa final compreende a estabilização do composto de aminoglicano de baixo peso molecular da Fórmula I, ordenando as moléculas num meio lipofílico para impedir o cruzamento de ligações (cross-linking) que é característico dos aminoglicanos não acetilados de baixo peso molecular, tal como descrito na arte prévia (Patente U.S. n.° 5 679 657) . Esta etapa do processo envolve a adição sequencial de dois óleos. 0 primeiro óleo é de natureza mais hidrofóbica e pode ser selecionado entre os óleos normalmente encontrados em frutos secos oleaginosos. Especificamente, como primeiro óleo é preferido o óleo de amêndoa ou o óleo de jojoba. 0 segundo óleo, mais hidrofílico em natureza, pode ser selecionado entre os óleos normalmente obtidos de ervas e especiarias das partes vegetativas das plantas. Especificamente, o óleo de salva, o óleo de alecrim ou o óleo de lavanda são os mais preferidos como segundo óleo. A quantidade total de óleos adicionados pode variar entre 5% e 50% do peso do aminoglicano extraído, enquanto a razão entre os dois óleos pode variar entre 0,1:1 e 1:0,1. O peso molecular do composto de aminoglicano da Fórmula I assim separado é difícil de medir diretamente e por isso foi determinado a partir do valor de viscosidade intrínseca (Laurent et al., Biochimica et Biophysica Acta, Vol. 42, pág. 476 (1960)). Determinaram-se as viscosidades intrínsecas de várias soluções contendo o composto de aminoglicano da Fórmula I, que variavam entre 4 cm3/gm e 7 cm3/gm, e foram representadas graficamente em função de soluções padrão de sais de ácido hialurónico (peso molecular de aproximadamente 1,2 MD), conduzindo à atribuição de um específico peso molecular natural ultrabaixo para o composto de aminoglicano da Fórmula I na faixa de 15 000 Daltons a 28 000 Daltons. Não há relatos na arte anterior de um composto de aminoglicano de peso molecular ultrabaixo da Fórmula I obtido a partir de uma 7 ΕΡ 1 999 159/ΡΤ fonte natural (por exemplo, como resumido por Balazs et al. na Patente U.S. 4 582 865).

Resultados experimentais

Exemplo 1

Adicionou-se 500 g de resíduos pré-tratados de casca de ovo com um teor orgânico de aproximadamente 10% a um recipiente de vidro de boca larga, com uma tampa de enroscar. Acrescentou-se 750 ml de uma solução aquosa de citrato de sódio a 5% e o recipiente foi selado e colocado num agitador durante 24 horas, a uma velocidade moderada. Após 24 horas, toda a mistura foi transferida para um funil de filtração e os resíduos sólidos de casca de ovo foram separados da suspensão aquosa. Os sólidos foram lavados com 1 x 250 ml de solução aquosa de citrato de sódio a 5%, as camadas aquosas combinadas foram lavadas uma vez com 250 ml de cloreto de metileno para remover potenciais matérias proteicas e a camada aquosa assim obtida foi transferida para um copo de 2 L. O copo foi colocado num banho-maria de água fria e deu-se início a uma lenta adição de metanol absoluto sob agitação moderada. Após a adição de cerca de 200 ml de metanol, começou a formar-se um precipitado branco e a agitação foi interrompida. A mesma quantidade adicional de metanol foi adicionada lentamente e o copo foi deixado a repousar durante 12 horas para assegurar a formação completa de gel. Em seguida, toda a massa foi transferida para um funil de filtração e filtrada, obtendo-se um gel de cor creme do composto de aminoglicano da Fórmula I. O precipitado foi seco até um teor de humidade de 5-7% ter sido medido. O peso final do composto de gel de aminoglicano da Fórmula I era de 42 g.

Exemplo 2 O material de gel contendo o composto de aminoglicano da Fórmula I e do Exemplo 1 foi misturado com 4 g de óleo de jojoba a 15°C-20°C e agitado vigorosamente durante 20 minutos. 0 gel resultante foi aquecido a 25°C e deixado sob agitação moderada durante 1 hora. A esta massa adicionou-se 1 g de óleo de salva e o gel resultante foi mantido sob agitação suave durante ainda 10 minutos. O gel foi então deixado a arrefecer 8 ΕΡ 1 999 159/ΡΤ lentamente até 10°C, ao longo de 4 horas, obtendo-se o composto de aminoglicano da Fórmula I, que é estável na ausência de circulação de ar, à temperatura ambiente, durante pelo menos 3 meses.

Exemplo 3 0 Exemplo 1 anterior foi repetido com uma solução aquosa de tartarato de potássio a 10%, obtendo-se 46 g de gel do composto de aminoglicano da Fórmula I.

Exemplo 4 O Exemplo 1 anterior foi repetido com uma solução de acetato de sódio a 20%, obtendo-se 43 g de gel do composto de aminoglicano da Fórmula I.

Exemplo 5 O Exemplo 1 atrás foi repetido, exceto que etanol foi utilizado em vez de metanol para se atingir a formação completa de gel, obtendo-se 47 g de gel do composto de aminoglicano da Fórmula I.

Exemplo 6 O Exemplo 1 anterior foi repetido, exceto que acetona foi utilizada em vez de metanol para se atingir a formação completa de gel, obtendo-se 41 g de gel do composto de aminoglicano da Fórmula I.

Exemplo 7 O Exemplo 1 anterior foi repetido com uma solução de carbonato de sódio a 10%, obtendo-se 24 g de gel do composto de aminoglicano da Fórmula I.

Exemplo 8 O Exemplo 1 anterior foi repetido com uma solução de carbonato de cálcio a 25%, obtendo-se 14 g de gel do composto de aminoglicano da Fórmula I. 9 ΕΡ 1 999 159/ΡΤ

Exemplo 9

Adicionou-se 10 g do anterior gel estabilizado, produzido conforme o procedimento do Exemplo 2, a 50 ml de água destilada contendo 3 ml de glicerina e agitou-se até se obter uma suspensão uniforme. A esta suspensão acrescentou-se um fundido consistindo de 10 g de cera emulsionante, 10 g de cera de parafina, 4 g de cera de abelhas branca e 13 g de uma mistura de óleos vegetais cosmeticamente úteis, tais como óleo de amêndoa, óleo de lavanda, óleo de sândalo e óleo de noz e a mistura foi agitada vigorosamente para se obter um creme uniforme com excelentes caracteristicas físicas e propriedades antirrugas.

Em relação aos géis isolados e estabilizados do composto de aminoglicano da Fórmula I, foram conduzidos os testes analíticos e de utilidade descritos adiante.

Ausência de sulfato de condroitina É sabido na arte anterior que todas as fontes comerciais de aminoglicanos estão geralmente associadas com outros componentes de tecidos, como sulfato de condroitina (Arkins and Sheehan, Structure of Hyaluronic Acid, Nature New Biol 235, 253, 1972 e Bettelheim and Philpott, Electron Microscopic Studies of Hyaluronic Acid - Protein Gels, Biochim Biophys Acta 34, 124, 1959). O extrato de gel isolado de acordo com os métodos descritos atrás contém menos de 2% de sulfato de condroitina devido provavelmente à baixa associação permitida com o tamanho extra-pequeno do composto aminoglicano da Fórmula 1 aqui isolado.

Ausência de proteínas

Uma vez que as proteínas são potencialmente antigénicas, para formulações cosméticas é essencial isolar um gel de aminoglicano praticamente livre de proteínas. 0 extrato de gel do Exemplo 1 foi submetido ao ensaio colorimétrico altamente sensível de deteção da presença de proteínas descrito por Lowry et al. (J. Biol. Chem., 193, 265-275, 1951) . Não se obteve qualquer resultado positivo que indicasse que a presença de proteínas era inferior a 0,1% em peso. 10 ΕΡ 1 999 159/ΡΤ A ausência de uma concentração apreciável de proteínas constitui uma nítida diferença dos outros compostos de glicoaminoglicano isolados de outras fontes naturais, tais como cristãs de galo e caldos de fermentação. Foi relatado (Kludas, Patente U.S. n.° 5 055 298) que estes aminoglicanos estão geralmente ligados covalentemente com proteínas para formar proteoglicanos. A remoção clinicamente relevante de todas estas proteínas, que não são componentes da pele humana, revelou-se difícil e não é facilmente realizada. A presença destas proteínas em vários outros extratos de aminoglicano foi identificada como sendo uma causa de reações inflamatórias significativas na superfície da pele, tornando problemática a sua utilização em formulações cosméticas.

Ausência de nucleotídeos

Utilizou-se espectroscopia de ultravioleta para certificar a ausência de nucleotídeos de DNA e RNA potencialmente antigénicos no composto de aminoglicano da Fórmula I aqui extraído. Foi preparada uma solução a 1% do extrato de aminoglicano do Exemplo 1 numa solução de cloreto de sódio a 10%. Esta solução foi submetida a espectroscopia de ultravioleta a 257 nm para se medir o nível de nucleotídeos em solução. A ausência de qualquer tipo de absorção a este comprimento de onda foi assumida como uma medida da ausência de nucleotídeos no extrato de aminoglicano do Exemplo 1.

Viscosidade

Uma pequena amostra do gel foi liofilizada para se obter um sólido branco com uma estrutura do tipo fio que foi lentamente dissolvida em água. Preparou-se uma solução com 1 mg do pó em 1000 ml de um tampão de fosfato em pH 7. A viscosidade foi determinada com um viscosímetro de Ostwald, a uma temperatura de 25°C. Mediu-se a viscosidade relativa da solução, que se situava entre 0,76 e 0,80. Em relação aos conhecidos aminoglicanos de peso molecular mais elevado, esta medição de viscosidade sugere pesos moleculares para o composto de aminoglicano da Fórmula I entre 15 000 Daltons e 28 000 Daltons. 11 ΕΡ 1 999 159/ΡΤ

Presença de glicosamina A presença de glicosamina no composto de aminoglicano da Fórmula I foi determinada pelo método de Elson e Morgan (Biochem J, Vol. 27, (1933), p. 1894,), em material que tinha sido hidrolisado durante 6 horas com ácido clorídrico 5 N a 100°C e evaporado até à secura. 0 teor de glicosamina do composto de aminoglicano da Fórmula I situava-se entre 38% e 41%, o que corresponde ao esperado valor calculado.

Presença de ácido urónico A presença de ácido urónico no composto de aminoglicano da Fórmula I foi determinada por digestão com hialuronidase. 0 composto de aminoglicano extraído da Fórmula I foi lavado com água destilada e hidrolisado com Streptomyces-hialuronidase (1 mg de enzima/g de aminoglicano) em 10 ml de tampão de CaCl2 10 mM/Tris 50 mM/HCl, pH 7,6, durante 48 h a 37°C. Inibidores da protease, nomeadamente fluoreto de fenilmetanossulfonilo (2 mM) e N-etilmaleimida (10 mM) , foram adicionados às amostras para inibir a proteólise não específica. A hidrólise foi interrompida pela adição de ureia até uma concentração final 6 Μ. O hidrolisado foi centrifugado a 4000 g e o sobrenadante (hialuronidase digerida) foi removido e comparado com padrões de ácido urónico por análise por HPLC (cromatografia líquida de alta resolução).

Capacidade de formação de fios

Está bem documentado na arte prévia que quanto maior for a capacidade de formação de fios, mais hidratante é o efeito do aminoglicano. Recorreu-se a muitos derivados de uma aminoglicanos de alto e médio peso molecular, tal como derivados de acetilação e de copolimerização (Patente U.S. 5 679 657), para aumentar o valor intrínseco de formação de fios dos aminoglicanos isolados de fontes animais e bacterianas. Inesperadamente, observou-se que o composto de aminoglicano de peso molecular ultrabaixo da Fórmula I aqui isolado apresenta uma capacidade de formação de fios notavelmente elevada, o que pode explicar em parte os marcados efeitos antirrugas observados. Numa câmara húmida, a uma temperatura de 25°C e a uma humidade relativa de 50%, 12 ΕΡ 1 999 159/ΡΤ vareta de vidro de 1 cm foi imersa numa solução aquosa de extrato de aminoglicano a 1% do Exemplo 1 e o comprimento do fio obtido ao baixar o copo a uma velocidade de 10 cm/min foi observado. O comprimento do fio do composto de aminoglicano da Fórmula I desta invenção situava-se entre 2,8 e 3,5 cm, que é consideravelmente mais longo do que o comprimento de 0,8 cm a 1,3 cm observado para o hialuronato de sódio comercialmente disponível, e ainda melhor do que os comprimentos observados para os aminoglicanos derivatizados.

Propriedades antirrugas

As propriedades antirrugas do creme produzido de acordo com o método descrito no Exemplo 9 foram testadas por meio de um sistema de imagem 3D de medição da profundidade das rugas superficiais. Recorreu-se ao método descrito por S. Jaspers et al, ("Microtopometry Measurement of Human Skin in vivo by a new Digital Optical Projection System", Preprints 5th Congress of the International Society for Skin Imaging, Viena 1997) para mostrar uma redução de 25% a 38% na profundidade das rugas após 4 semanas de uso diário.

Lisboa, 2012-02-20

Claims

ΕΡ 1 999 159/ΡΤ 1/3 REIVINDICAÇÕES 1. Processo para a separação, a partir de resíduos de casca de ovo, de compostos de aminoglicano de baixo peso molecular da Fórmula I,

na qual M pode ser em uma ou mais instâncias Na, Ca, K, Mg e n é um número inteiro entre 20 e 40/ em que o referido processo compreende as seguintes etapas: (a) pré-preparação dos resíduos de casca de ovo para a extração do composto de aminoglicano embrionário de baixo peso molecular da Fórmula I, utilizando um solvente orgânico polar em água, em que as cascas de ovo pré-tratadas são misturadas completamente com o solvente orgânico polar em água, a temperaturas entre 25°C e 40°C, entre 1 hora e 4 horas, seguido de decantação do líquido sobrenadante e transferência das cascas de ovo para a extração; (b) extração do composto de aminoglicano de baixo peso molecular da Fórmula I na forma do seu sal solúvel em água, onde as cascas de ovo da etapa (a) são agitadas vigorosamente com uma solução salina aquosa polar, entre 25°C e 40°C e durante 6 a 24 horas, seguido de decantação, filtração ou centrifugação para recolha da camada aquosa contendo o composto dissolvido de aminoglicano da Fórmula I; (c) separação do composto purificado de aminoglicano de baixo peso molecular da Fórmula I, através da formação de gel na mistura salina aquosa por meio de um solvente orgânico polar, em que a solução da etapa (b) é sujeita à adição sequencial ΕΡ 1 999 159/ΡΤ 2/3 faseada do solvente orgânico polar, numa quantidade entre 75% e 150% volume/volume do solvente orgânico polar, entre 10°C e 20°C e durante 1 hora a 2 horas, e o gel formado é deixado a repousar por 4 horas a 12 horas para completar a precipitação, seguido de decantação, filtração ou centrifugação para isolar o composto de aminoglicano semisseco da Fórmula I contendo entre 4% e 8% de humidade; (d) estabilização do composto de aminoglicano isolado da Fórmula I da etapa (c) através da introdução sequencial no gel semisseco de óleos orgânicos para formar o composto de aminoglicano da Fórmula I.
2. Processo de acordo com a reivindicação 1, em que o solvente orgânico polar utilizado na etapa (a) é selecionado do grupo constituído por um álcool, acetona, metiletilcetona ou 1,4-dioxano.
3. Processo de acordo com a reivindicação 1, em que a referida solução salina aquosa polar utilizada na etapa (b) é selecionada do grupo constituído pelos sais citrato, glutamato, acetato, pirrolidonacarbonato, tartarato, glicinato, sulfato, sulfito, nitrato, carbonato ou oxalato de sódio, potássio, cálcio ou magnésio.
4. Processo de acordo com a reivindicação 1, em que o solvente orgânico polar utilizado na etapa (c) é um álcool inferior selecionado entre metanol, etanol, propanol ou butanol ou um éter orgânico selecionado entre éter dietílico, tetra-hidrofurano, metilal ou etilal.
5. Processo de acordo com a reivindicação 1, em que os óleos orgânicos utilizados na etapa (d) são óleos obtidos a partir de fontes vegetais.
6. Processo de acordo com a reivindicação 5, em que o referido óleo orgânico é selecionado entre óleo de jojoba, óleo de amêndoa, óleo de salva, óleo de alecrim, óleo de lavanda, óleo de sândalo ou óleo de aloé.
7. Processo de acordo com a reivindicação 1, que compreende ainda a adição de pelo menos um excipiente ΕΡ 1 999 159/ΡΤ 3/3 farmaceuticamente aceitável ao composto estabilizado de aminoglicano da Fórmula I obtido na etapa (d), para formar uma composição com propriedades antirrugas. Lisboa, 2012-02-20