PT1635698E - Processo para a análise quantitativa de soluções e dispersões por meio de espectroscopia de infravermelho próximo - Google Patents

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DESCRIÇÃO "PROCESSO PARA A ANÁLISE QUANTITATIVA DE SOLUÇÕES E DISPERSÕES POR MEIO DE ESPECTROSCOPIA DE INFRAVERMELHO PRÓXIMO" A invenção refere-se a um processo para a análise quantitativa de soluções e dispersões, como soluções e dispersões para fins farmacêuticos, por meio de espectroscopia de infravermelho próximo.

No âmbito da produção de medicamentos há esforços constantes para melhorar o controlo de qualidade para o aumento da segurança dos medicamentos. A produção efectua-se neste caso de acordo com o padrão internacional das boas práticas de produção (Current Good Manufacturing Practice, cGMP), que é predefinida pelas autoridades de supervisão do medicamento (por exemplo a Food and Drug Administration americana, FDA) . No caso de infracções graves face a esta prática de produção, a autorização para a produção de medicamentos a uma empresa pode ser revogada.

Uma parte importante da boa prática de produção é o teste físico-quimico e microbiológico e a aprovação do produto terminado. No decurso deste teste são testados vários parâmetros que descrevem a qualidade do produto e comparados face a especificações. As especificações estão consignadas, quer nos documentos de autorização, quer nas farmacopeias internacionais. Quando todas as especificações são cumpridas, o produto pode ser comercializado. Um desses parâmetros de teste é o teor de substância activa, que tem que ser determinado 1 quantitativamente. A determinação quantitativa efectua-se habitualmente por amostragem e na forma de um teste destrutivo. Como métodos de análise empregam-se, de um modo preferido, métodos de cromatografia liquida ou cromatografia gasosa, ou também métodos espectroscópicos que necessitam de um processamento de amostra. Estes processos caracterizam-se por uma precisão relativamente elevada, no entanto, a velocidade de análise é muito baixa. Por conseguinte, esses processos não são adequados para fornecer um resultado em linha, isto é, directamente durante o processo de produção. A medição pode, além disso, não ser realizada em produtos numa embalagem primária. A desvantagem do teste de carga por amostragem consiste em não poderem ser abrangidas tendências ou ocorrências extraordinárias dentro da produção, por exemplo no caso do enchimento de suspensões. Subsiste o perigo da mercadoria ser aprovada como satisfatória quanto às especificações, apesar de esta na realidade não se encontrar dentro dos limites de aprovação. Estes produtos "fora-de-especificação" (00S) podem ser produzidos, por exemplo, por problemas de produção de curta duração ou através de misturas de produto.

As exigências de uma verificação completa, não apenas por amostragem, de cada unidade produzida na linha de produção continua podem apenas ser preenchidas por métodos de análise não destrutivos e suficientemente rápidos. Ambas as exigências podem ser preenchidas, em princípio, por métodos espectroscópicos. A maior parte dos processos espectroscópicos não é, no entanto, adequada para fornecer resultados de análise quantitativos sem processamento prévio das amostras, por exemplo por dissolução, concentração ou diluição das amostras. Em regra, esses processos 2 também não são adequados para produzir espectros avaliáveis quantitativamente através da embalagem primária (por exemplo, de vidro ou material plástico) e/ou em sistemas dispersivos. Apenas a gama de comprimento de onda relativamente estreita da radiação de infravermelho próximo (IVP), que se estende de 800 até 2500 nm, pode ser empregue para o processamento de tarefas deste tipo.

Os processos em que são controlados objectos transportados por bandas, isto é, em tempo real e no essencial por completo, são conhecidos no contexto da separação de lixo e da separação de peças de material plástico. Esses processos servem-se em parte da espectroscopia de infravermelho próximo (IVP). O documento EP-B 1030740 revela um processo para a identificação e separação de objectos transportados por bandas transportadoras, em particular para a separação de lixo, em que a qualidade do material dos objectos é avaliada espectroscopicamente por meio de um aparelho de medição de IVP e a separação é efectuada na dependência do resultado da espectroscopia através da remoção de objectos da banda transportadora. O documento EP-B 0696236 revela um processo para a separação de peças de material plástico, em que as peças de material plástico são conduzidas diante de um sistema de reconhecimento de material que determina o tipo de material por exploração sem contacto de cada peça de material, num campo de medição • 0 sistema de reconhecimento do material contém um sensor de material que trabalha sem contacto, por exemplo, um sensor de microondas, um sensor de raios X ou um sensor de espectroscopia a trabalhar na gama do infravermelho próximo. 3 caso

No caso do enchimento das suspensões para fins farmacêuticos podem ocorrer variações durante o enchimento devido a processos de mistura. Essas variações podem conduzir a que uma parte das unidades cheias (por exemplo, cartuchos) apresente valores do teor para a substância activa (por exemplo, insulina) ou para substâncias auxiliares (por exemplo, sulfato de protamina) que se encontram fora da especificação exigida (por exemplo, 95,0 até 105,0% do valor declarado para insulina). O pedido de patente europeia EP-A 0887638 descreve um processo e um dispositivo para a análise da composição de uma amostra em movimento, em que é empregue uma fonte de radiação de infravermelho próximo (IVP) e é detectada a luz IVP reflectida pela amostra. Como amostras analisam-se comprimidos ou cápsulas sobre uma banda transportadora.

Para a análise quantitativa de amostras liquidas é adequada, em princípio, a cromatografia líquida de alta pressão (HPLC). Um controlo de qualidade através da análise quantitativa de amostras por meio de HPLC apresenta, no entanto, a desvantagem de ser lento e de não se efectuar sem destruição.

Assim, esta é adequada apenas para um controlo de qualidade por amostragem. Para um controlo em que cada uma das unidades de produto cheias deve ser testada para saber se o seu teor de substância activa se encontra dentro das especificações exigidas, este método é conceptualmente inadequado.

Em Herkert (2001, dissertação, Eberhard-Karls-Universitat Tiibingen) é avaliado um método de IVP para o controlo de fármacos numa via de embalamento. O objectivo do trabalho era, em particular, a avaliação do espectrómetro VisioIVP® (Uhlmann Visio Tec GmbH, Laupheim) . A avaliação foi realizada, entre 4 outros, com base em suspensões de insulina.

No trabalho de Herkert é detectada a remissão, isto é, a reflexão difusa da luz IVP irradiada. Neste caso apenas foi realizada uma diferenciação qualitativa de três tipos diferentes de insulina, que se diferenciam na sua composição de insulina solúvel e cristalina. Com base nas diferenças espectrais nos espectros brutos ou espectros derivados foi avaliado se é possível uma identificação dos produtos individuais com base nos espectros de IVP. Com o auxílio da análise de componentes principais (PCA) ou da estatística de avaliação VisioIVP®, pôde ser realizado, com base nessas diferenças, um reconhecimento da amostra. Não foi realizada uma análise quantitativa. A medição de líquidos (suspensões de insulina) não foi possível com o espectrómetro VisioNIR®, no caso da instrumentação sobre a via de embalamento. Os efeitos de dispersão no vidro e no espaço de ar sobre a suspensão impediram uma absorção válida do espectro (ver a dissertação de Herkert anteriormente citada, página 76, 2 0 parágrafo) . É objectivo da invenção disponibilizar um processo para a análise de produtos que contenham uma solução ou dispersão, por exemplo para fins farmacêuticos, com o qual seja possível uma determinação quantitativa rápida de substâncias contidas na solução ou dispersão e que não seja invasivo e que trabalhe sem destruição. 0 processo deve ser adequado em particular para a análise de um grande número de unidades de produto por unidade de tempo, para ser empregue, por exemplo, para o controlo da composição das soluções ou dispersões durante o seu enchimento numa instalação de enchimento ou numa via de embalamento durante o processo de produção. Por controlo entende-se, neste caso, um controlo em tempo real, que compreende no essencial todas as 5 unidades de produto.

Verificou-se agora, de um modo surpreendente, que pode ser utilizado um processo para a quantificação da composição de um produto em movimento com os seguintes passos:

Irradiação do produto com uma fonte de radiação na gama do infravermelho próximo;

Captação da radiação, que é transmitida pelo produto, e disponibilização de um sinal de partida correspondente à intensidade da radiação captada por um número de diferentes comprimentos de onda;

Determinação, à base do sinal de partida, com um processo matemático, se o produto se encontra ou não dentro dos critérios de integridade predeterminados. 0 processo de acordo com a invenção é caracterizado por o produto em movimento, que é uma solução ou dispersão numa embalagem primária, e à base do sinal de partida, ser determinado quantitativamente o teor de, pelo menos, uma substância contida na dispersão ou solução, em que o produto contém uma dispersão, e em que a, pelo menos uma, substância está presente na fase dispersa e na fase continua da dispersão, e em que a dispersão contém insulina cristalina e solúvel.

Quantitativo, no sentido da presente invenção, significa que o teor de, pelo menos, uma substância a determinar na solução ou dispersão pode ser inequívoco e correctamente determinado dentro de uma gama de em geral ± 3%, de um modo preferido ± 5%, de um modo particularmente preferido ± 10%, em 6 particular ± 20% do valor teórico (por exemplo, definido pela receita galénica) . Inequivocamente quer dizer que os valores determinados com o processo de acordo com a invenção são confiáveis com um desvio padrão relativo de não mais do que 1,5%, de um modo preferido, de não mais do que 1%, de um modo particularmente preferido, de não mais do que 0,5%. Consideram-se como correctos neste caso valores de referência que foram determinados por meio de um processo de referência validado e reconhecido, por exemplo, um processo cromatográfico como HPLC, em que o valor de referência e o valor determinado com o processo de acordo com a invenção desviam um do outro em no máximo 5%, de um modo preferido, em no máximo 3%, de um modo particularmente preferido em no máximo 1%. O produto pode conter soluções ou dispersões, habitualmente num recipiente transparente para a irradiação de IVP. Caso o produto contenha uma dispersão, então trata-se em geral de uma dispersão líquida, como uma emulsão ou suspensão. A substância contida na dispersão, cujo teor é determinado quantitativamente com o processo de acordo com a invenção, pode apresentar-se distribuída apenas na fase contínua ou apenas na fase dispersa ou então também em ambas as fases. No caso de dispersões ou soluções podem tratar-se de produtos farmacêuticos que contêm uma substância activa dissolvida e/ou dispersa. No caso da substância cujo teor deve ser determinado quantitativamente, pode tratar-se, por exemplo, de uma substância activa farmacêutica ou de uma substância auxiliar. Por exemplo, no caso da solução pode tratar-se de uma solução de insulina e no caso da dispersão, de uma suspensão de insulina, que contém insulina cristalina e dissolvida, como, por exemplo, as insulinas do tipo NPH (preparações de insulina neutras contendo protamina de acordo com Hagedorn), misturas de insulinas NPH e insulinas 7 dissolvidas, ou suspensões de insulina - zinco. No caso das insulinas, pode tratar-se, por exemplo, de insulina humana ou dos seus análogos geneticamente ou enzimaticamente modificados.

As soluções ou dispersões podem apresentar-se numa embalagem primária, por exemplo em cartuchos, ampolas ou frascos, por exemplo de vidro ou material plástico. Estes podem encontrar-se sobre uma banda transportadora e serem examinados com o processo de acordo com a invenção durante o processo de transporte, por exemplo, de uma instalação de enchimento para uma máquina de embalamento. 0 processo de acordo com a invenção é realizado numa disposição de transmissão, quer dizer, é captada a radiação transmitida através do produto. 0 produto, cuja composição deve ser verificada, é irradiado com uma fonte de radiação na gama do infravermelho próximo. A gama do infravermelho próximo compreende habitualmente a gama de comprimentos de onda de 800 até 2500 nm. As fontes de radiação adequadas são, por exemplo, as lâmpadas de mercúrio - halogéneo. A radiação reflectida ou transmitida pelo produto é captada por um dispositivo receptor de radiação. É disponibilizado um sinal de partida correspondente à intensidade da radiação captada por um número de diferentes comprimentos de onda. Isto pode ocorrer de maneira tal que a radiação captada num espectrómetro é dividida em vários comprimentos de onda e é detectada por um conjunto de fotodiodos. O feixe de cada fotodiodo pode ser integrado durante um período de tempo previamente seleccionado e, em seguida, por meio de um conversor analógico/digital (A/D), ser convertido num sinal digital. 0 período de tempo de integração pode ser iniciado na dependência da posição do produto em movimento por um despoletador, por exemplo uma barreira fotoeléctrica. 0 teor de a, pelo menos uma, substância contida na dispersão ou solução é determinado quantitativamente à base do sinal de partida disponibilizado pelos diferentes comprimentos de onda, com um processo matemático. Os processos matemáticos adequados são processos para a análise de dados multivariada. Os processos adequados são, por exemplo, o processo PLS (mínimos quadrados parciais) ou a análise de componentes principais (PCA) . Os processos deste tipo são conhecidos do especialista da técnica.

Os processos matemáticos podem utilizar factores de ponderação para reduzir a influência de variabilidades perturbadoras, não atribuíveis à composição, nos espectros de IVP registados na avaliação e para acentuar características espectrais que não variam entre amostras do mesmo tipo de produto.

Habitualmente, efectua-se, pelo menos, uma vez uma calibração, em que o teor de a, pelo menos uma, a substância na solução ou dispersão é determinado quantitativamente por meio de um processo alternativo.

Um processo alternativo preferido, que é empregue para a calibração, é a HPLC. A calibração pode ser repetida em intervalos regulares durante a execução do processo de acordo com a invenção.

Numa forma de realização do processo de acordo com a 9 invenção é utilizado o processo matemático descrito no documento EP-B 0887638 na página 5, linha 47, até à página 8, linha 12. No caso do processo matemático aí descrito empregam-se factores de ponderação.

Neste caso, os dados dos espectros brutos, que reproduzem as intensidades da radiação em intervalos (de, por exemplo, 3,8 nm) são corrigidos, em que é obtido um valor padrão que é independente da característica do espectrómetro e do dispositivo de captação de radiação. As intensidades assim calibradas são filtradas para minimizar os efeitos por ruídos de sinal, em que é empregue uma função de filtração de Gauss. Para a minimização das influências condicionadas pelo sistema, os dados podem ser auto-escalonados. Para o efeito, as intensidades individuais do espectro são normalizadas na totalidade da gama de comprimentos de onda relativamente a um desvio padrão de zero e uma variância de um. Pela formação da primeira derivação podem ser destacadas as diferenças dos espectros individuais em relação à subida e às características espectrais das amostras de produto individuais. Em lugar da primeira derivação também pode ser empregue a segunda ou nenhuma derivação.

Em seguida são calculadas as diferenças entre um espectro modelo e o espectro da amostra de produto (espectro da amostra) em cada comprimento de onda medido. Caso essas diferenças ultrapassem um limite determinado, então a amostra é reconhecida como significativamente diferente do modelo. O modelo (master model) é criado a partir dos registos de dados de calibração de um número de amostras iguais dos diferentes tipos de produto. Neste caso calcula-se um espectro de valor médio. Considerando-se a variância do modelo por ponto 10 de medição (comprimento de onda) , então encontram-se gamas espectrais com desvios padrão significativamente elevados. Essas gamas reflectem a variabilidade das amostras de calibração (iguais em relação à sua composição) em relação a diferentes factores de influência, por exemplo diferenças no vidro ou na posição de um cartucho. Para minimizar a influência dessas variâncias perturbadoras, são calculados factores de ponderação. Esses factores de ponderação exercem um peso maior em gamas espectrais com um desvio padrão menor do que em gamas com desvio padrão elevado. 0 factor de ponderação é determinado a partir do desvio padrão da distância entre os valores de intensidade e o valor de intensidade do modelo em cada comprimento de onda.

Em seguida, pela utilização dos factores de ponderação, calcula-se a distância euclidiana de um respectivo registo de dados dentro do registo de dados da amostra de calibração. 0 valor médio desse valor corresponde ao desvio padrão do modelo. No final da construção do modelo calcula-se ainda a distância euclidiana média do modelo. Esse valor é indicado nos desvios padrão do modelo como grandeza de referência.

No caso da realização do processo de acordo com a invenção, o espectro obtido para cada amostra de produto é confrontado com o espectro modelo. Para o efeito calcula-se a distância euclidiana entre a intensidade em cada comprimento de onda e a intensidade correspondente para o modelo, em que o factor de ponderação é aplicado em cada comprimento de onda. Os factores de ponderação empregues foram determinados na formação do modelo. 0 resultado é utilizado para o cálculo da distância euclidiana da amostra. Esta é indicada como grandeza de referência nos desvios padrão do modelo. 11 0 valor da distância euclidiana da amostra é finalmente comparado com um valor limite estipulado. 0 valor limite é calculado a partir da distância euclidiana média do modelo e uma gama de probabilidade.

Com o processo matemático anteriormente descrito pode ser verificada a composição de soluções e de dispersões. Caso seja verificada a composição de dispersões, então, numa forma de realização do processo preferida de um modo particular, utilizam-se no passo de determinação aqueles factores de ponderação que foram determinados à base de uma solução. Neste caso a solução em cuja base são determinados os factores de ponderação contém de um modo preferido a mesma substância a determinar que na dispersão. Na dispersão essa substância pode apresentar-se dispersa e adicionalmente dissolvida ou - em geral apresentar-se distribuída entre a fase contínua e a fase dispersa.

Por exemplo, as suspensões de insulina contêm uma parte de insulina dissolvida e uma parte de insulina suspensa na forma cristalina. Essa parte de insulina cristalina, no caso de teor constante de insulina, pode variar em gamas amplas. Neste caso pode comprovar-se como sendo vantajoso utilizar os factores de ponderação no passo de determinação, que foram determinados à base de uma solução pura de insulina. No caso da utilização dos factores de ponderação da solução pura é eliminada a influência de efeitos de reflexão, que são provocados pelos cristais suspensos.

Com os processos de avaliação matemáticos descritos pode realizar-se uma análise dos produtos em alta velocidade, por exemplo, dentro de uma janela temporal de apenas 5 ms. Isto 12 permite a análise de um grande número de produtos dentro de um curto período de tempo. Além disso, o processo não é invasivo e pode trabalhar sem contacto. Com isso ele é por exemplo muito bem adequado para a análise de produtos numa via de embalamento ou em combinação com uma instalação de enchimento para cartuchos ou frascos. Essa análise pode efectuar-se em tempo real e abranger 100% dos produtos transportados na via de embalamento. Com o processo de acordo com a invenção podem ser analisados sucessivamente no mínimo 3, de um modo preferido no mínimo 8 ou mesmo 50 ou mais produtos por segundo. Com isso, ele é adequado por exemplo para o controle de unidades de produto no caso da produção, enchimento e/ou embalamento de soluções e dispersões para fins farmacêuticos.

Com o processo de acordo com a invenção é possível, por exemplo no caso do enchimento de soluções ou dispersões para fins farmacêuticos, passar de um controlo por amostragem para um controle a 100%.

Uma aparelhagem para a realização do processo compreende: uma fonte de radiação, que emite radiação na gama do infravermelho próximo, para a irradiação do produto; um dispositivo de captação da radiação, que capta a radiação reflectida ou transmitida através do produto; um espectrómetro para a captação da radiação do dispositivo de captação da radiação e para disponibilizar um sinal de partida correspondente à intensidade da radiação captada por um número de diferentes comprimentos de onda; 13 um dispositivo para a determinação quantitativa, à base do sinal de partida, do teor de no minimo uma substância contida na dispersão ou solução. 0 dispositivo de captação da radiação pode apresentar uma lente convergente e uma fibra óptica. 0 espectrómetro pode apresentar um conjunto de fotodíodos como detector.

De um modo preferido, a aparelhagem apresenta adicionalmente um dispositivo de calibração, com o qual é determinado o teor quantitativo de a no mínimo uma substância de acordo com um processo alternativo, por exemplo um cromatógrafo líquido de alta pressão. A aparelhagem pode apresentar além disso adicionalmente um dispositivo de separação, com o qual os produtos não de acordo com as especificações, que são determinados com o processo de acordo com a invenção, são separados. Os produtos não de acordo com as especificações são os produtos que não se encontrem dentro dos critérios de integridade predeterminados.

Quando a aparelhagem (também) é empregue para a análise quantitativa de dispersões, então ela compreende de um modo preferido além disso um dispositivo para a homogeneização das dispersões a quantificar antes da análise das dispersões. As dispersões podem ser homogeneizadas por exemplo nos recipientes por um mecanismo de agitação ou por um mecanismo de rotação. No entanto também pode ser obtida uma homogeneização já através do processo de enchimento. A aparelhagem pode apresentar além disso um dispositivo para o reconhecimento da posição do produto, por exemplo um 14 sistema de imagem ou uma barreira fotoeléctrica. A aparelhagem pode ser utilizada em combinação com um dispositivo de enchimento, em que as soluções ou dispersões são introduzidas em embalagens primárias. A aparelhagem também pode ser componente de um dispositivo de enchimento deste tipo.

Numa forma de realização, o dispositivo apresenta uma fibra óptica que conduz a radiação emitida pela fonte de radiação para o local do produto. A invenção é em seguida elucidada de forma mais detalhada com referência às figuras. A figura 1 mostra esquematicamente um dispositivo para a realização do processo. 0 dispositivo compreende uma fonte (1) de radiação, por exemplo uma lâmpada de volfrâmio - halogéneo. A radiação de infravermelho próximo emitida pela fonte de radiação é colimada por uma lente (2) convergente e é conduzida por meio de uma fibra (3) óptica ao local do produto (4) . 0 produto pode ser por exemplo um cartucho de vidro, que contém uma suspensão de insulina e, por exemplo vindo de um dispositivo de enchimento, é conduzido ao longo de uma banda transportadora para a extremidade da fibra (3) óptica. A radiação transmitida pelo produto (4) é colimada por uma lente (5) convergente e é aduzida ao espectrómetro (6) por meio de uma fibra óptica. No espectrómetro (6), a radiação transmitida, que contém a informação espectral do produto (4) irradiado, é dividida em diferentes comprimentos de onda por meio de uma grelha (7) e é detectada por um conjunto (8) de fotodíodos. As intensidades detectadas pelo conjunto de fotodíodos na dependência do comprimento de onda são convertidas em sinais digitais por meio 15 de um conversor A/D (9) e sao avaliadas no dispositivo (10) de determinação, por exemplo um PC.

Exemplo 1 O objectivo de uma monitorização do enchimento de insulina é um controlo quantitativo do teor de insulina de 100% das ampolas de insulina cheias. O teor de insulina das suspensões de insulina cheias deve desviar neste caso apenas em no máximo + /- 5% do valor declarado. As divergências devem poder ser detectadas de forma irrepreensível.

Para a simulação da monitorização do enchimento de insulina construíram-se calibrações com uma série de amostras de calibração que continham insulina Insuman Basal® cristalina numa embalagem primária (cartuchos de vidro), e em seguida examinaram-se amostras de produção. Para a calibração foram empregues cartuchos de insulina com teores de insulina rigorosamente conhecidos de 90 até 120% do teor teórico. Os valores de referência foram determinados com HPLC. Antes das medições, os cartuchos foram exaustivamente agitados, de modo que se produziu uma suspensão homogénea.

Os espectros de insulina foram registados em transmissão com um espectrómetro de conjunto de fotodíodos (MCS 511 IVP 1.7) . A gama de comprimentos de onda da medição perfez de 960 até 1760 nm, em que foi avaliada a gama de comprimentos de onda de 960 até 1360 nm. Como fonte de radiação IVP utilizou-se uma lâmpada de halogéneo de 20 W. O espectrómetro foi igualado rotineiramente face ao padrão de referência. Como referência foram utilizados um filtro BG5 e um filtro BG9. 16

Para o pré-tratamento dos espectros, estes foram filtrados e normalizados. Foram utilizados os espectros na derivação 0. Neste caso, as propriedades de reflexão das amostras de insulina nos espectros permanecem conservadas.

Em seguida os espectros foram avaliados por meio de um processo de avaliação multivariado. Como processo de regressão foi utilizada uma regressão PLS (partial least squares), mas também podem ser utilizados outros processos de avaliação multivariada. Através da regressão é produzida uma associação matemática entre a informação espectral das amostras de insulina e o seu teor de insulina. Com o auxilio desta associação é possível calcular mais tarde o teor de insulina dessa amostra a partir do espectro de uma amostra desconhecida. A figura 2 mostra a correlação entre os valores medidos com HPLC e os valores determinados a partir dos espectros de transmissão IVP para o teor total de insulina das amostras de calibração de insulina Basal® (respectivamente em % do teor teórico). Torna-se evidente que existe uma boa correlação entre os valores determinados a partir dos espectros IVP e os valores determinados por meio de HPLC.

Em seguida foram examinadas amostras de processo do processo de produção de insulina. Neste caso trataram-se de amostras que foram obtidas no processo rotineiro de preparação e foram rejeitadas como sendo inúteis. A partir dos espectros IVP obtidos foi determinado o teor de insulina com o auxílio da equação de regressão multivariada. As mesmas ampolas foram examinadas em seguida por meio de HPLC. A figura 3 mostra o teor total de insulina determinado com HPLC, a figura 4 mostra o teor de insulina das amostras 17 examinadas determinado a partir dos espectros IVP com o processo de avaliação descrito na descrição (respectivamente em IE).

Os valores determinados a partir dos espectros de transmissão IVP e com HPLC mostram uma boa concordância. Torna-se evidente que as divergências determinadas por meio de HPLC com o auxílio dos espectros de transmissão IVP filtrados e normalizados podem ser claramente detectadas.

Exemplo 2 0 objectivo de uma monitorização do enchimento de insulina é um controlo quantitativo de 100% do teor de insulina das ampolas de insulina cheias. O teor de insulina das suspensões de insulina cheias deve neste caso desviar-se apenas em no máximo +/- 5% do valor declarado. As divergências devem ser detectadas de forma inequívoca. A monitorização deve efectuar-se quer durante o enchimento em cartuchos de insulina em movimento, ou após o enchimento em cartuchos já cheios. Em ambos os casos a medição efectua-se através do agente de embalagem primário (cartucho de vidro) e no produto medido em movimento.

Para a simulação das velocidades que se apresentam num enchimento de cartuchos de insulina foi utilizada uma máquina de controlo óptico da firma EISAI Machinery do tipo 288. Esta máquina pode ser abastecida com cartuchos de insulina (suspensões) e leva os cartuchos em rotação, de modo que com o auxílio das esferas de metal contidas no cartucho forma-se uma suspensão homogénea. Nessa máquina foi instalada a aparelhagem de medição IVP, que é montada de forma comparável à figura 1. A medição efectuou-se no cartucho em movimento, que se encontra em 18 rotação, com uma capacidade de 150 cartuchos por minuto. Neste caso deve ter-se em atenção que no momento da medição haja uma suspensão homogénea. A aparelhagem de medição instalada consiste numa lâmpada de halogéneo de 50 Watt (Cornar 12LL50), um suporte para a lâmpada com lente convergente integrada (p. ex., Cornar 20LH00), que foca o ponto focal da radiação no ponto médio do cartucho de insulina, uma segunda lente convergente (p. ex., Comar 80TC50), que colima a radiação transmitida e, através de um acoplamento (p. ex., Zeiss, n°. 772571-9020-000) e uma fibra óptica (p. ex., Zeiss, CZ-# 1050-724), aduz a um detector de conjunto de fotodíodos (Zeiss, MMS IVP n°. 301261). Os sinais análogos no detector são digitalizados e lidos num ficheiro de texto. No total, a radiação é medida em 128 fotodíodos através de uma gama de cerca de 900 até 16 70 nm. O momento da medição foi activado através de uma barreira fotoeléctrica (Wenglor UM55PA2 & 083-101-202), que durante a passagem do cartucho pela trajectória da radiação controlou o registo de um espectro. O detector PDA foi equilibrado no dia de cada medição em primeiro lugar face a Spectralon.

Com a aparelhagem descrita foram medidas preparações de insulina (suspensões) do tipo Insuman Basal, Insuman Comb 25 e Insuman Comb 50. A duração do registo dos espectros perfez 8 milissegundos [ms]. A avaliação dos espectros de insulina efectuou-se com o processo descrito na descrição face a espectros modelo. Os espectros modelo e a sua variabilidade foram obtidos através da medição de oito cartuchos cheios com água. Os espectros modelo e de insulina foram filtrados e auto-escalonados. Em seguida foi calculada a distância euclidiana de cada espectro de insulina relativamente ao espectro modelo médio, por utilização de 19 factores de ponderação específicos de comprimentos de onda.

Para cada tipo de preparação de Insuman Basal, Insuman Comb 25 e Insuman Comb 50 foram preparadas amostras de diferentes concentrações e calculadas as distâncias euclidianas relativamente ao espectro modelo. A dependência do teor de insulina da distância euclidiana é representada a título de exemplo para os diversos tipos de preparação na figura 5, para Insuman Comb 25. A precisão do processo também é aí reconhecível, uma vez que estão representadas 4 medições repetidas. Para cada tipo de preparação resulta una função de calibração (polinómio de segundo grau) com a qual a distância euclidiana pode ser convertida em teores de insulina. Após conversão da distância euclidiana em teores de insulina têm que ser considerados dois factores de correcção. O teor de insulina tem que ser corrigido pela temperatura do produto medido. Adicionalmente pode tornar-se importante um factor específico da preparação, que é atribuído às diferentes distribuições de tamanho dos cristais na suspensão. Com isso, o teor pode ser referido quer percentualmente em relação aos primeiros 20 resultados. Obtém-se então um teor em percentagem do valor teórico, em relação aos primeiros cartuchos de um enchimento. O teor de insulina determinado pode por outro lado ser também corrigido num factor que resulta da razão do valor não corrigido de uma amostra relativamente ao teor de insulina medido paralelamente. Na figura 6 este factor de correcção foi determinado com a amostra 16 e, a título de exemplo para outros tipos de preparação, foram avaliados desta maneira uma série de cartuchos de teor desconhecido para Insuman Comb 25. Neste caso tratam-se de amostras que foram obtidas no processo rotineiro de preparação e foram rejeitadas como sendo inúteis. O factor de correcção para a temperatura não foi aplicado, uma vez que não 20 houve quaisquer diferenças no decorrer da medição. Foram analisadas amostras adicionais por amostragem, por meio de HPLC.

Pode reconhecer-se que os resultados com o processo de acordo com a invenção (quadrados pretos) coincidem bem com os resultados através do processo convencional (HPLC, cruzes pretas). Pode avaliar-se claramente e precisamente se um valor se encontra dentro dos limites de 95 até 105% ou fora.

Lisboa, 15 de Outubro de 2013 21

Claims (7)

1. REIVINDICAÇÕES 1. Processo para a quantificaçao da composição de um produto em movimento com os seguintes passos: Irradiação do produto com uma fonte de irradiação na gama do infravermelho próximo; Captação da radiação, que é transmitida através do produto, e disponibilização de um sinal de partida correspondente à intensidade da radiação captada por um número de diferentes comprimentos de onda; Determinação à base do sinal de partida, com um processo matemático, se o produto se encontra ou não dentro dos critérios de integridade predeterminados, caracterizado por o produto em movimento, que é uma solução ou dispersão numa embalagem primária, e à base do sinal de partida, ser determinado quantitativamente o teor de, pelo menos, uma substância contida na dispersão ou solução, em que o produto contém uma dispersão e a, pelo menos uma, substância está presente na fase dispersa e na fase continua da dispersão, e em que a dispersão contém insulina cristalina e solúvel.
2. 2. Processo de acordo com a reivindicação 1, caracterizado por ser realizada, pelo menos, uma vez uma calibração, em que o teor de a, pelo menos uma, substância na solução ou na 1 dispersão é determinado quantitativamente por meio de um processo alternativo.
3. 3. Processo de acordo com a reivindicação 2, caracterizado por ser utilizada HPLC como processo alternativo.
4. 4. Processo de acordo com uma das reivindicações 1 a 3, caracterizado por o passo de determinação utilizar factores de ponderação.
5. 5. Processo de acordo com a reivindicação 4, caracterizado por o produto conter uma dispersão e no passo de determinação serem utilizados factores de ponderação, que são determinados à base de uma solução.
6. 6. Processo de acordo com a reivindicação 5, caracterizado por a solução para a determinação dos factores de ponderação e a dispersão conterem a mesma substância a determinar quantitativamente.
7. 7. Processo de acordo com uma das reivindicações 1 a 6, caracterizado por o produto em movimento ser uma ampola de insulina ou um cartucho de insulina. Lisboa, 15 de Outubro de 2013 2