PT1605937E - Tratamento de doenças proliferativas com derivados de epotilona e radiação - Google Patents

Description

ΡΕ1605937 1 DESCRIÇÃO "TRATAMENTO DE DOENÇAS PROLIFERATIVAS COM DERIVADOS DE EPOTILONA E RADIAÇÃO"

Esta invenção relaciona-se com compostos orgânicos, em particular com composições farmacêuticas para utilizar em combinação com radiação ionizante para retardar a progressão ou para tratamento de uma doença prolife-rativa, especialmente uma doença com tumor sólido. Nós descobrimos agora que certos derivados de Epotilona são eficazes quando utilizados em combinação com radiação ionizante para retardar a progressão ou para tratamento de uma doença proliferativa, especialmente uma doença com tumor sólido.

Concordantemente a invenção providencia um derivado de epotilona de fórmula I

R Z

2 ΡΕ1605937 em cujo composto A representa O, R é metilo, e Z é O que está na forma livre ou na forma de um sal farmaceuticamente aceitável e opcionalmente pelo menos um veículo farmaceu-ticamente aceitável para utilizar em combinação com radiação ionizante, na retardação de progressão ou tratamento de uma doença proliferativa, especialmente uma doença com tumor sólido.

Um composto de fórmula I em que A representa O, R é hidrogénio e Z é 0 é conhecido como epotilona A; um composto de fórmula I em que A representa 0, R é metilo e Z é 0 é conhecido como epotilona B; um composto de fórmula I em que A representa 0, R é hidrogénio e Z é uma ligação é conhecido como epotilona C; um composto de fórmula I em que A representa 0, R é metilo e Z é uma ligação é conhecido como epotilona D.

Adicionalmente a invenção providencia a utilização de epotilona (ou um seu sal farmaceuticamente aceitável) para a preparação de um medicamento para utilizar em combinação com radiação ionizante no tratamento de uma doença proliferativa.

Num aspecto adicional a invenção providencia a utilização de epotilona B (ou um seu sal farmaceuticamente aceitável) em combinação com radiação ionizante para o tratamento de uma doença proliferativa, especialmente um tumor sólido. 3 ΡΕ1605937

Num aspecto ainda adicional a invenção providencia uma epotilona B (ou seu sal farmaceuticamente aceitável) como componente activo para utilizar em combinação com radiação ionizante para o tratamento de uma doença proliferativa, especialmente um tumor sólido.

Acima e em qualquer outro lugar na presente descrição os termos seguintes possuem os significados dados adiante: 0 termo "retardar a progressão" como utilizado aqui significa a administração da combinação a pacientes estando numa fase precoce da doença proliferativa a ser tratada. O termo "doença com tumor sólido" como utilizado aqui compreende, mas não é restrito a glioma, cancro da tiróide, cancro da mama, cancro ovárico, cancro do cólon e geralmente do tracto GI, cancro da cérvix, cancro do pulmão, em particular cancro do pulmão de célula pequena, e cancro do pulmão não de célula pequena, cancro da cabeça e pescoço, cancro da bexiga, cancro da próstata ou sarcoma de Kaposi. Numa concretização preferida da invenção, a doença tumoral a ser tratada é glioma, cancro da próstata ou cancro da tiróide. A presente combinação inibe o crescimento de tumores sólidos, mas também de tumores liquidos. Adicionalmente, dependendo do tipo de tumor e da combinação particular utilizada, pode ser obtido um 4 ΡΕ1605937 decréscimo do volume do tumor. As combinações reveladas aqui são também adequadas para prevenir uma dispersão metastática de tumores e o crescimento ou desenvolvimento de micro-metástases. A combinação refere-se à administração de uma quantidade de derivado de epotilona de fórmula I em combinação com a administração de uma quantidade de radiação ionizante tal que exista um efeito sinergético que não seria obtido se um derivado de epotilona de fórmula I fosse administrado sem a administração separada, simultânea ou sequencial de radiação ionizante. Em que a administração de radiação ionizante pode ser continua sequencial ou esporádica. Ou um efeito que não seria obtido se a radiação ionizante fosse administrada sem a administração separada, simultânea ou sequencial de um derivado de Epotilona de fórmula I, em que a administração pode ser contínua, sequencial ou esporádica. Preferencialmente a combinação refere-se à administração de uma quantidade de derivado de epotilona de fórmula I em combinação com a administração de uma quantidade de radiação ionizante tal que exista um efeito anti-proliferativo sinergético e/ou um efeito de morte celular clonogénico que não seria obtido se a) 0 derivado de epotilona de fórmula I for administrado sem administração prévia, simultânea ou subsequente de radiação ionizante. Em que administração pode ser continua, sequencial ou esporádica; 5 ΡΕ1605937 b) Existe administração de radiação ionizante sem a administração prévia, simultânea ou subsequente de um derivado de epotilona de fórmula I. Em que a administração pode ser continua, sequencial ou esporádica. O termo "radiação ionizante" referido acima e daqui em diante significa radiação ionizante que ocorre quer como raios electromagnéticos (tais como raios-x e raios gama) ou partículas (tais como partículas alfa e beta). A radiação ionizante é providenciada em, mas não limitada a, terapia de radiação e é conhecida na técnica (Hellman, Principies of Radiation Therapy, Câncer, in Principies and Practice of Oncology, 248-275 (Devita et al., ed., 4th Ed., vl, 1993) .

Os derivados de Epotilona de fórmula I em que A representa O, R é metilo e Z é 0, e métodos para a preparação de um tal derivado de epotilona são em particular genericamente e especificamente revelados nas patentes e pedidos de patente W0 93/10121, US 6,194,181, WO 98/25929, WO 98/08849, WO 99/43653, WO 98/22461 e WO 00/31247. Estão igualmente compreendidos os estereoisómeros correspondentes assim como as modificações cristalinas correspondentes, e.g. solvatos e polimorfos, que são aí revelados.

A transformação de epotilona B na lactama correspondente é revelada no Esquema 21 (página 31, 32) e Exemplo 3 da WO 99/02514 (páginas 48 - 50). A transformação de um composto de fórmula I que é diferente da epotilona B 6 ΡΕ1605937 na lactama correspondente pode ser conseguida analogamente. Os correspondentes derivados de epotilona de fórmula I em que RN é alquilo inferior podem ser preparados por métodos conhecidos na técnica tais como uma reacção de alquilação redutiva partindo de um derivado de epotilona em que RN é hidrogénio. A epotilona B pode ser administrada como parte de composições farmacêuticas que são reveladas na WO 99/39694.

Uma combinação que compreende (a) um derivado de epotilona de fórmula I em cujo composto A representa O, R é metilo e Z é O que poderá estar presente na forma livre ou na forma de um sal farmaceuticamente aceitável e opcionalmente pelo menos um veículo farmaceuticamente aceitável e (b) radiação ionizante, será referida daqui em diante como a COMBINAÇÃO DA INVENÇÃO. A natureza de doenças proliferativas tais como doenças com tumor sólido é multifactorial. Sob certas circunstâncias, poderão ser combinados fármacos com diferentes mecanismos de acção. No entanto, considerando apenas qualquer combinação de fármacos possuindo diferente modo de acção não conduz necessariamente a combinações com efeitos vantajosos.

Na combinação da invenção, a Epotilona B e os sais farmaceuticamente aceitáveis são preferencialmente utilizados na forma de preparações farmacêuticas que contêm 7 ΡΕ1605937 a quantidade terapeuticamente eficaz relevante de componente activo opcionalmente juntamente com ou em mistura com veículos inorgânicos ou orgânicos, sólidos ou líquidos, farmaceuticamente aceitáveis que são adequados para administração .

Numa concretização preferida, cada paciente recebe doses de radiação ionizante, enquanto que o derivado de epotilona de fórmula I é administrado uma vez por semana i.v. durante três semanas, seguido por uma semana de paragem. Cada intervalo de quatro semanas será considerado um ciclo. O dia 1 de cada ciclo é definido como o dia de administração do derivado de epotilona de fórmula I e de radiação ionizante. A eficácia do tratamento pode ser determinada nestes estudos, e.g., após 18 ou 24 semanas por avaliação radiológica dos tumores a cada 6 semanas.

Numa concretização alternativa, a radiação ionizante é dada como um pré-tratamento, i.e. antes do tratamento com a COMBINAÇÃO DA INVENÇÃO ser iniciado; a radiação ionizante sozinha é administrada ao paciente durantes um período de tempo definido, e.g. administração diária da radiação ionizante sozinha durante dois ou três dias ou semanas.

Noutra concretização preferida, o derivado de epotilona de fórmula I é administrado uma vez semanalmente i.v. durante três semanas, seguido por uma semana de paragem. Cada intervalo de quatro semanas será considerado ΡΕ1605937 um ciclo. A eficácia do tratamento pode ser determinada nestes estudos, e.g., após 18 ou 24 semanas por avaliação radiológica dos tumores a cada 6 semanas.

As composições farmacêuticas de Epotilona B poderão ser, por exemplo, composições para administração entérica, tal como oral, rectal, inalação com aerossol ou nasal, composições para administração parentérica, tal como intravenosa ou subcutânea, ou composições para administração transdérmica (e.g. passiva ou iontoforética), ou composições para administração tópica.

Preferencialmente, as composições farmacêuticas de Epotilona B são adaptadas para administração oral.

As composições farmacêuticas de acordo com a invenção podem ser preparadas de um modo conhecido per se e são aquelas adequadas para administração entérica, tal como oral ou rectal, e parentérica a mamíferos (animais de sangue quente), incluindo o ser humano, compreendendo uma quantidade terapeuticamente eficaz de pelo menos um constituinte da combinação farmacologicamente activo sozinho ou em combinação com um ou mais veículos farmaceuticamente aceitáveis, especialmente adequado para aplicação entérica ou parentérica. A nova composição farmacêutica contém, por exemplo, desde cerca de 10% até cerca de 100%, preferencialmente desde cerca de 20% até cerca de 60%, dos 9 ΡΕ1605937 componentes activos. As preparações farmacêuticas para a terapia de combinação para administração entérica ou parentérica são, por exemplo, aquelas em formas de unidade de dosagem, tais como comprimidos revestidos com açúcar, comprimidos, cápsulas ou supositórios, e adicionalmente ampolas. Se não for indicado de outro modo, estes são preparados de um modo conhecido per se, por exemplo através de processos de mistura, granulação, revestimento com açúcar, dissolução ou liofilização convencionais. Entender-se-á que o teor da unidade de um constituinte da combinação contido numa dose individual de cada forma de dosagem não necessita constituir em si própria uma quantidade eficaz uma vez que a quantidade eficaz necessária pode ser atingida por administração de uma pluralidade de unidades de dosagem.

Na preparação das composições para a forma de dosagem oral, poderá ser empregue qualquer um dos meios farmacêuticos usuais, tais como, por exemplo, água, gli-cóis, óleos, álcoois, agentes aromatizantes, conservantes, agentes de coloração; ou veículos tais como amidos, açúcares, celulose microcristalina, diluentes, agentes de granulação, lubrificantes, aglutinantes, agentes desintegrantes e semelhantes no caso de preparações orais sólidas tais como, por exemplo, pós, cápsulas e comprimidos, com as preparações orais sólidas sendo preferidas sobre as preparações líquidas. Devido à sua fácil administração, os comprimidos e as cápsulas representam a forma dosagem 10 ΡΕ1605937 unitária oral mais vantajosa em cujo caso os veículos farmacêuticos sólidos são obviamente empregues.

Em particular, uma quantidade terapeuticamente eficaz de cada constituinte da combinação da COMBINAÇÃO DA INVENÇÃO poderá ser administrada simultaneamente ou sequencialmente e em qualquer ordem, e os componentes poderão ser administrados separadamente ou como uma combinação fixa. Por exemplo, o método de retardar a progressão ou de tratamento de uma doença proliferativa de acordo com a invenção poderá compreender (i) administração do primeiro constituinte da combinação e (ii) administração do segundo constituinte da combinação, em que a administração de um constituinte da combinação poderá ser simultânea ou sequencial em qualquer ordem, em conjunto com quantidades terapeuticamente eficazes, preferencialmente em quantidades sinergicamente eficazes, e.g. em dosagens diárias ou semanais correspondentes às quantidades descritas aqui. Os constituintes individuais da combinação da COMBINAÇÃO DA INVENÇÃO podem ser administrados separadamente a tempos diferentes durante o decurso da terapia ou concorrentemente. Adicionalmente, o termo administrar também compreende a utilização de um pró-fármaco de um derivado de epotilona de fórmula I que se converte in vivo no constituinte da combinação como tal. A presente invenção é consequentemente para ser entendida como englobando todos tais regimes de tratamento simultâneo ou alternante e o termo "administrar" é para ser interpretado concordantemente. 11 ΡΕ1605937 A dosagem de radiação ionizante e um derivado de epotilona de fórmula I em relação um ao outro está preferencialmente numa razão que é sinérgica.

Se o animal de sangue quente for um ser humano, a dosagem de um composto de fórmula I está preferencialmente na gama de cerca de 0,25 até 75, preferencialmente 0,5 até 50, e.g. 2,5 mg/m2 uma vez semanalmente durante duas até quatro, e.g. três, semanas, seguido por 6 até 8 dias de paragem no caso de um paciente adulto. Numa concretização da invenção, a epotilona B é administrada de acordo com o cronograma de tratamento descrito na US 6,302,838. O modo particular de administração e a dosagem de um composto de fórmula I poderá ser seleccionado pelo clinico assistente tendo em conta as particularidades do paciente, especialmente idade, peso, estilo de vida, nivel de actividade, etc. A dosagem de uma epotilona de fórmula I poderá depender de vários factores, tais como a eficácia e a duração de acção do componente activo, modo de administração, eficácia e duração da acção da radiação ionizante e/ou sexo, idade, peso e estado individual do sujeito a ser tratado. A dosagem de radiação ionizante poderá depender de vários factores, tais como eficácia e duração da acção da radiação ionizante, modo de administração, localização 12 ΡΕ1605937 da administração, eficácia e duração da acção do derivado de epotilona de fórmula I e/ou sexo, idade, peso e estado individual do sujeito a ser tratado. A dosagem de radiação ionizante é geralmente definida em termos de dose absorvida de radiação, tempo e fracção, e tem que ser definida cuidadosamente pelo clinico assistente.

Os grupos formadores de sal num composto de fórmula I são grupos ou radicais possuindo propriedades básicas ou acidicas. Os compostos possuindo pelo menos um grupo básico ou pelo menos um radical básico, por exemplo um grupo amino livre, um radical pirazinilo ou um radical piridilo, poderão formar sais de adição de ácido, por exemplo com ácidos inorgânicos, tais como ácido clorídrico, ácido sulfúrico ou a ácido fosfórico, ou com ácidos carboxílicos ou sulfónicos orgânicos adequados, por exemplo ácidos mono- ou di-carboxílicos alifáticos, tais como ácido trifluoroacético, ácido acético, ácido propiónico, ácido glicólico, ácido succínico, ácido maleico, ácido fumárico, ácido hidroximaleico, ácido málico, ácido tartárico, ácido cítrico ou ácido oxálico, ou aminoácidos tais como arginina ou lisina, ácidos carboxílicos aromáticos, tais como ácido benzóico, ácido 2-fenoxi-benzóico, ácido 2-acetoxi-benzói-co, ácido salicílico, ácido 4-aminosalicílico, ácidos carboxílicos aromáticos-alifáticos, tais como ácido mandé-lico ou ácido cinâmico, ácidos carboxílicos heteroaromá-ticos, tais como ácido nicotínico ou ácido isonicotínico, ácidos sulfónicos alifáticos, tais como ácido metano-, etano- ou 2-hidroxietanossulfónico, ou ácidos sulfónicos 13 ΡΕ1605937 aromáticos, por exemplo ácido benzeno-, p-tolueno- ou naftaleno-2-sulfónico. Quando estão presentes vários grupos básicos poderão ser formados sais de adição de mono- ou poli-ácidos.

Para os propósitos de isolamento ou purificação, assim como no caso de compostos que são utilizados adicionalmente como intermediários, é também possível utilizar sais farmaceuticamente inaceitáveis.

No entanto, apenas são utilizados sais não tóxicos, farmaceuticamente aceitáveis para propósitos terapêuticos, e esses sais são consequentemente preferidos.

Na combinação da invenção compreende epotilona B e radiação ionizante.

Adicionalmente, a presente invenção compreende a utilização de uma COMBINAÇÃO DA INVENÇÃO para retardar a progressão ou para o tratamento de uma doença proliferativa e para a preparação de um medicamento para retardar a progressão ou para o tratamento de uma doença proliferativa.

Numa concretização da invenção, é administrado um agente antidiarréico juntamente com a COMBINAÇÃO DA INVENÇÃO de modo a prevenir, controlar ou eliminar a diarreia que é por vezes associada à administração de epotilonas, especialmente da epotilona B. Assim, a presente invenção encontra utilidade na prevenção ou controlo de 14 ΡΕ1605937 diarreia associada à administração de um derivado de epotilona de fórmula I, que compreende a administração de uma quantidade eficaz de um agente antidiarréico ao paciente que recebe tratamento com a COMBINAÇÃO DA INVENÇÃO. Os agentes antidiarréicos e os protocolos para a sua administração são conhecidos daqueles peritos na técnica. Os agentes antidiarréicos adequados para utilização nos métodos e composições inventivos incluem, mas não estão limitados a, opióides naturais, tais como tintura de ópio, paregórico, e codeína, opióides sintéticos, tais como difenoxilato, difenoxina e loperamida, subsalicilato de bismuto, octreotide (e.g. disponível como SANDO-STATIN™), antagonistas de motilina e remédios antidiarréicos tradicionais, tais como caulino, pectina, berberina e agentes muscarínicos. O exemplo seguinte pretende ilustrar a invenção e não é para ser construído como sendo suas limitações.

Exemplo 1 A proliferação de células tumorais foi avaliada através do ensaio colorimétrico de Azul de Alamar de tipo MTT que é baseado na detecção de actividade do metabolito. Para determinar a sobrevivência clonogénica, foi ajustado o número de células singulares aplicadas para se obter cerca de 100 colónias por placa com um determinado tratamento. Após 24 h de exposição aos diferentes fármacos, as células foram irradiadas e em seguida deixadas crescer durante 8 a 15 ΡΕ1605937 10 dias antes da fixação em metanol/ácido acético (75%/25%) e manchamento com violeta cristal. Apenas foram contadas as colónias com mais de 50 células/colónias. A eficiência da aplicação (PE) de células não tratadas foi determinada e calculada como a (%) PE = (colónias qualificadas /número de células aplicadas) x 100. A fracção sobrevivente (SF) com um determinado tratamento foi determinada por SF = (colónias qualificadas)/(número de células aplicadas x PE/100) . Os ensaios clonogénicos foram realizados pelo menos duas vezes e a ausência de barras de erro é devida aos desvios padrão mínimos. A irradiação das culturas celulares foi levada a cabo em placas de 96 poços utilizando uma unidade de raios-X Pantak Therapax 3,300 kV a 0,7 Gy/min. A dosimetria foi controlada com um dosímetro Vigilant.

Foram realizados ensaios de proliferação inicial para determinar a gama de dose de epotilona B a ser aplicada para tratamento combinado com radiação ionizante. Foi observada uma clara resposta à dose anti-proliferativa durante 72 horas contra as duas linhas celulares (p53-/-MEF transformadas com ElA/ras; linha celular de adenocarcinoma de cólon humano SW480) numa gama subnanomolar e inferior a nanomolar de epotilona B. As células SW480 humanas revelaram uma melhor sensibilidade à epotilona B que as MEFs transformadas com o oncogene geneticamente definidas (Apêndice epotilona B-l). O tratamento combinado com epotilona B e radiação ionizante (5Gy) revelou um efeito anti-proli-ferativo pelo menos aditivo contra estas duas linhas celulares (Apêndice epotilona B-2, mostrado como uma concen- 16 ΡΕ1605937 tração representativa de epotilona B). Para esta modalidade de tratamento combinado as células foram pré-tratadas durante 24 h com epotilona B antes da irradiação.

Com base nestes resultados, os ensaios de sobrevivência clonogénica foram realizados com epotilona B em combinação com radiação ionizante. O ensaio clonogénico é baseado no crescimento excessivo de clones compactos a partir de células singulares que foram semeadas a baixa densidade numa placa de Petri. O crescimento clonal excessivo sob as diferentes condições de tratamento pode ser quantificado e comparado. A epotilona B-3 do Apêndice resume a sobrevivência clonogénica realizada com SW480 e MEFs transformadas com ElA/ras por tratamento com radiação ionizante e epotilona B sozinhas e em combinação. Semelhantemente ao ensaio de proliferação, as células SW480 foram mais sensíveis à epotilona B do que as MEFs e o tratamento combinado revelou novamente pelo menos um efeito aditivo em ambas as linhas celulares (as gamas de dose para a epotilona B são diferentes para SW480 e MEFs como ilustrado nos gráficos res-pectivos). Com base nestes resultados, a eficácia do tratamento combinado deveria ser testada in vivo utilizando modelos de tumor de aloenxerto/xenoenxerto.

Com base no interessante perfil de epotilona B como sendo um anti-proliferativo também em (certas) linhas celulares de tumor refractárias a Paclitaxel nós comparamos 17 ΡΕ1605937 o efeito de epotilona B e Paclitaxel em combinação com radiação ionizante contra estas duas linhas celulares. A linha celular de cancro do cólon S1U480 humana provou ser refractária a Paclitaxel (doses até 500 nM, Apêndice 4a). Não obstante o Paclitaxel e a epotilona B reduziram sozinhos a actividade proliferativa e em combinação com radiação ionizante na linha celular de fibrosarcoma murino numa extensão comparável (numa gama inferior a nanomolar, Apêndice 4b). Nós comparamos o efeito de tratamento combinado com Epotilona B/IR e Paclitaxel/IR também no ensaio de sobrevivência celular clonogénica. Ambas as linhas celulares revelaram pelo menos um efeito aditivo relativamente ao tratamento combinado com epotilona B/IR e Paclitaxel /IR respectivamente, mas apenas a concentrações muito elevadas de Paclitaxel na linha celular SW480resistente a Paclitaxel (Apêndice epotilona B-5). A resistência a Paclitaxel é muitas vezes devida a sobre-expressão de glicoproteina MDR-P em células tumo-rais, que pode ser inibida pelo agente de reversão de MDR verapamil. Consequentemente foram realizadas experiências de proliferação com diferentes modalidades de tratamento em células SW480 previamente tratadas com verapamil. As baixas doses de verapamil (5 pg/ml, adicionadas 30 min antes do tratamento com Paclitaxel) tornaram a sensibilizar as células SW480 para baixas doses de Paclitaxel sozinho e 18 ΡΕ1605937 para uma modalidade de tratamento combinado com radiação ionizante indicando que a sobre-expressão de glicoproteína MDR-P é responsável pelo efeito refractário a Paclitaxel nesta linha celular (Apêndice epotilona B-6). O verapamil não teve um efeito anti-proliferativo por si próprio a esta concentração e afectou apenas ligeiramente a resposta à epotilona B (não mostrado). Nós estamos actualmente a sondar o nivel de glicoproteína mdr-p num modo directo em células SW480 por imunotransferência.

Globalmente estes resultados mostram que ambos a epotilona B e o paclitaxel possuem um efeito anti-proliferativo e aniquilador de células clonogénicas pelo menos aditivo em combinação com radiação ionizante, a epotilona B retém a actividade completa sozinha e em combinação com radiação ionizante na linha celular SW480 de adenocarcinoma do cólon humano resistente a Paclitaxel. Assim a Epotilona poderá constituir uma a alternativa promissora em tumores resistentes a paclitaxel (e.g. tumores colo-rectais) para um regime de tratamento combinado utilizando IR e inibi-dores de microtúbulos. Experimentalmente os próximos passos irão envolver o ensaio in vivo de epotilona B/IR com modelos de tumor de murganho de aloenxerto /xenoenxerto.

Lisboa, 10 de Março de 2011

Claims (4)

1. ΡΕ1605937 1 REIVINDICAÇÕES 1. Um derivado de epotilona de fórmula I R Z

   em cujo composto A representa O, R é metilo e Z é O, que está na forma livre ou na forma de um sal farmaceuticamente aceitável, para utilizar em combinação com radiação ionizante, na retardação de progressão ou tratamento de uma doença proliferativa.
2. 2. A utilização de (a) um derivado de epotilona

   em cujo composto A representa O, R é metilo e Z é O, que está na forma livre ou na forma de um sal farmaceuticamente aceitável, para a preparação de um medicamento para utilizar em combinação com 2 ΡΕ1605937 (b) radiação ionizante, para retardar a progressão ou para tratamento de uma doença proliferativa.
3. 3. A utilização de acordo com a reivindicação 2 que compreende administrar uma quantidade que seja conjuntamente terapeuticamente eficaz contra uma doença proliferativa de um composto de fórmula I e de pelo menos um veiculo farmaceuticamente aceitável para utilização em combinação com radiação ionizante.
4. 4. A utilização de acordo com as reivindicações 2 ou 3, em que a doença proliferativa é um tumor sólido. Lisboa, 10 de Março de 2011 1 ΡΕ1605937 REFERÊNCIAS CITADAS NA DESCRIÇÃO Esta lista de referências citadas pelo requerente é apenas para conveniência do leitor. A mesma não faz parte do documento da patente Europeia. Ainda que tenha sido tomado o devido cuidado ao compilar as referências, podem não estar excluídos erros ou omissões e o IEP declina quaisquer responsabilidades a esse respeito. Documentos de patentes citadas na Descrição W© 9822461: A WQSSSÍMFA WO S8mA4 A WO SS33894 A «SS33$S38B » WQ S3SÔ121A * US 8181*1 B * womsm&A * VVO 88BS84& A * WO §943653.A Literatura que não é de patentes citada na Descrição *: . PrÉís&fe ofSsíáMsí; TfeíS^.,;C:íítiçs!\ Bspptr sí a<. Ríííscipiffs ísf Orsçoíegj?, !3SS. voi 1:. 24S-275 '