PT1483264E - Derivados de alcalóides de 1-alilo de ferrugem das gramíneas, método para produzir os mesmos e a sua utilização para prevenir e tratar a enxaqueca. - Google Patents

Description

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DESCRIÇÃO "DERIVADOS DE ALCALOIDES DE l-ALILO DE FERRUGEM DAS GRAMÍNEAS, MÉTODO PARA PRODUZIR OS MESMOS E A SUA UTILIZAÇÃO PARA PREVENIR E TRATAR A ENXAQUECA"

Esta invenção refere-se a uma nova classe de derivados alcaloides de ferrugem das gramíneas com propriedades antagonísticas selectivas para os receptores 5-HT2 para a prevenção de, e o alivio de, dor de cabeça relacionada com a enxaqueca, doença de Parkinson, as disfunções da função do trombócito, etc.

Antecedentes e Estado da Técnica A enxaqueca é uma das doenças mais comuns. Cerca de 10 % da população sofre dela (Worthington, 1996, Teoria da Enxaqueca Corrente, Can. J. Clin. Pharm., 3, 39-51). Isto faz dela uma das doenças genuinamente endémicas. A caracteristica que se distingue da enxaqueca clássica é uma primeira fase acompanhada por visão prejudicada, a assim chamada aura visual (K. Kranda, J. J. Kulikowski, 1984, Aura Visual em enxaqueca clássica, em: Neurobiology of Pain, editores Holden e Wilmslow, MUP) que pode durar somente minutos ou durante várias horas. A dor unilateral ou bilateral que pulsa pode seguir a aura visual. A ocorrência da aura visual só é reportada por cerca de 20 % das pessoas que sofrem da enxaqueca e define a assim chamada "enxaqueca clássica" (M. L. Leon et al., 1995, uma revista do 2 tratamento de dores de cabeça primárias, Ital. J. Neurol. Sci.r 16, páginas 577-586) . A aura visual não é sempre seguida por dor de cabeça, e alguns pacientes podem ter ataques de dor com ou sem a aura visual em incidentes diferentes (W. F. Stewart et al., 1992, Prevalência da dor de cabeça por enxaqueca nos Estados Unidos, J.Ã.M.A., 267, páginas 64-69); J. Olesen et al., 1994, classificação e diagnóstico da Enxaqueca, Neurol., 44, páginas 56-510) .

Resumindo, a enxaqueca clássica consiste de duas fases principais: o a) a fase auricular que pode nem sempre ocorrer, e b) a fase aguda, dolorosa caracterizada pela dor de cabeça. Esta última fase de dor de cabeça é caracterizada por dor que pulsa e náusea. É frequentemente acompanhada por fotofobia ou sensibilidade ao barulho e pode durar durante dias (P. J. Goadsby, 1997, conceitos correntes da patofisiologia da enxaqueca, Neurol. Clin., 15, páginas 27-42) .

As causas e os mecanismos da enxaqueca não têm sido totalmente entendidos. A depressão que se estende no córtex cerebral tem sido proposta como o iniciador da aura visual da enxaqueca clássica (Lauritzen, 1994, Braín, 117, páginas 199-210) . No entanto, as considerações teóricas da citoarquitectura do córtex visual fazem esta hipótese parecer não com muita probabilidade (K. Kranda, J. J. Kulikowski, 1984, Aura Visual em enxaqueca clássica, em: Neurobiology of Pain, Editores Holden e Wilmslow, MUP).

Numerosos produtos farmacêuticos têm sido propostos ou estão já em utilização para o tratamento e a prevenção da enxaqueca. Estes incluem analgésicos, anti-histamínicos, bloqueadores do canal de cálcio, e o grupo de agonistas/antagonistas da serotonina tais como 3 os alcaloides de ferrugem das gramíneas, sumatriptano, pizotifeno, e propanolol. Outras classes farmacológicas podem ser potencialmente utilizadas para o tratamento e a prevenção da enxaqueca tais como, por exemplo, os vasodilatadores, os neurolépticos, os bloqueadores de β-receptores, e os antiepilépticostais como o valproato de sódio.

Embora tenha sido feito um progresso considerável no tratamento da enxaqueca nos últimos anos tal como a utilização de sumatriptano, um agonista 5-HTi, os pacientes que têm esta doença são muitas vezes diagnosticados de forma errada e impropriamente tratados (Worthington, 1996, Can. J. Clin. Pharm., 3, páginas 39-51). Nenhum dos tratamentos disponíveis causa o alívio permanente da dor de cabeça de tipo de enxaqueca. Por exemplo, a doença reocorre dentro de um período de 24 horas em 40 % dos pacientes aos quais foi dado sumatriptano. Todas as substâncias utilizadas no tratamento até agora não são muito específicas para os receptores de serotonina, que causa efeitos colaterais (tais como contracção coronária).

Os antagonistas de 5-HT2b são tidos como tendo grande potencial para a prevenção e o tratamento da enxaqueca. Foi observado que os agonistas de 5-HT2B tal como a piperazina de m-clorofenilo, pode causar ataques de enxaqueca em indivíduos sensíveis (Fozard e Gray, 1989, Trends Pharmacol. Sei, 10 (8), páginas 307-309). Inversamente, os antagonistas de HT2b podem prevenir um foco de enxaqueca (Kalkman, 1994, Life Sei., 54, páginas 641-644).

Os farmacêuticos até agora mais eficazes na prevenção da enxaqueca, a metisergida, o pizotifeno, e o propanolol, têm um efeito antagonístico em receptores de 5-HT2b (Kalkman, 1994, Life Sei., 54 (10), páginas 641-644). A metilergometrina como o metabólito 4 activo principal da metisergida era seres humanos também tem um efeito antagonístico forte em receptores de 5-HT2B (Fozard e Kalkman, 1994, Arch. Pharmakol. 350 (3), páginas 225-229). Os receptores de 5-HT2B foram localizados em células endoteliais (membrana interna) incluindo as células endoteliais de vasos sanguíneos no cérebro (Ullmer et. al, 1995, FEBS-Lett., 370 (3), páginas 215-221) e o disparo do relaxamento de vasos por se libertar óxido nítrico (NO). 0 NO também pode ter uma parte na causa da enxaqueca (Olesen et al., 1994, Ann. Neurol., 28, páginas 791-798) . Todos os agentes de enxaqueca acima mencionados têm efeitos colaterais consideráveis.

Uma outra característica desejada para um efeito de anti-enxaqueca é a forte eficácia das substâncias descritas em trombócitos uma vez que várias disfunções da função do trombócito são conhecidas como ocorrendo com a enxaqueca. Estas manifestam-se elas próprias pela adesão e a agregação aumentada durante um ataque, em aglomeração e a micro-circulação resultante bem como a libertação de serotonina, tromboxano A e outras substâncias vaso-activas (ver o resumo em S. Diamond, Migraine Prevention and Management, Mareei Dekker, Basileia, 1990). Os efeitos em trombócitos são desejados sempre que a agregação de trombócito seja dísturbada ou aumentada, independente da enxaqueca. É o problema desta invenção o de fornecer um produto farmacêutico para a prevenção e o alívio das enxaquecas.

De acordo com a invenção, novos derivados de alcaloides de alilo de ferrugem das gramíneas da fórmula geral (I) são fornecidos 5

R,

em que

Ri representa um grupo de etilo, n-propilo, i-propilo, ou de alilo, Ra é hidrogénio ou um grupo -OCH3, e R4 representa hidrogénio, um grupo de metilo, etilo, n-propilo, i-propilo, ou -CH2OH, e a ligação entre os átomos C 9 e 10 é tanto uma ligação singular como dupla enquanto que o resíduo R3 é omisso.

Os compostos de acordo com a invenção da fórmula geral (I) são produzidos por se fazer reagir um composto da fórmula geral (III)

f TII) fc _b. àtí. ííL· jf em que

Ri representa um grupo de etilo, n-propilo, i-propilo, ou de alilo, 6 R3 é hidrogénio ou um grupo -OCH3, e R4 representa hidrogénio, um grupo de metilo, etilo, n-propílo, i-propilo, ou -CH2OH, e a ligação entre os átomos C 9 e 10 é tanto uma ligação singular como dupla enquanto que o resíduo R3 é omisso, é feita reagir com brometo de alilo em CH2C12, opcionalmente por se adicionar hidróxido de amónio de tetraetilo e NaOH.

Os derivados de alcaloides de alilo de ferrugem das gramíneas da fórmula geral (I) da invenção podem ser opcionalmente convertidos em um sal de adição ácido por se utilizarem os procedimentos comuns, de um modo preferido o sulfato, bisulfato, nitrato, fosfato, fosfato de hidrogénio, cloridrato, hidrobrometo, hidroiodeto, acetato, tartarato, lactato, citrato, gluconato, fumarato, maleato, maleato de hidroxilo, succinato, pamoato, benzoato, propionato, piruvato, oxalato, maionato, cinamato, salicilato, sulfonato de alquilo, sulfonato de arilo e sulfonato de aralquilo.

Um outro objectivo da invenção são produtos farmacêuticos que contêm um ou vários alcaloides de alilo de ferrugem de gramíneas da fórmula geral (I). Estes alcaloides têm propriedades antagonísticas selectivas para os receptores de 5-HT2a e 5-HT2b-

Devido ao grupo de alilo inserido em N1, os compostos da invenção mostram uma estabilidade surpreendente contra a decomposição metabólica, o que estende o tempo em que o produto farmacêutico é eficaz. Além do mais, a eficácia selectiva em receptores de 5-HT2b ou de 5-HT2a é mais alta do que para outros compostos conhecidos depois de se introduzir o grupo de alilo. A especificidade aumentada permanece para 1-alilo de ergotamina e 1-alilo de di-hidroergotamina mesmo quando perde o componente parcialmente 7 agonístico das substâncias progenitoras.

As propriedades antagonísticas selectivas para os receptores de 5-HT2a e de 5-HT2B fazem dos compostos de acordo com a invenção altamente convenientes como um produto farmacêutico para a prevenção e o tratamento da enxaqueca. Uma ou outra propriedade na expressão específica é em particular adequada para actuar durante um ataque agudo no qual o núcleo serotoninérgico de rafe dorsal é activado a uma extensão aumentada de acordo com H. Raskin e 0. Appenzeller, ou na prevenção do ataque em que os receptores de serotonina nos vasos desempenham um papel especifico.

Além do mais, estas substâncias têm um efeito inibitivo na agregação do trombócito. Em adição ao tratamento da enxaqueca e as disfunções que acompanham a função do trombócito, as substâncias de acordo com a invenção são também convenientes para tratar a agregação do trombócito perturbada ou aumentada independente da enxaqueca.

As substâncias de acordo com a invenção também mostram uma alta afinidade para vários receptores de dopamina, em primeiro lugar, ao receptor de D2. Isto torna-os convenientes para tratar a doença de Parkinson e outras condições de deficiência de dopamina tal como a Síndroma de Pernas Agitadas e a hiperprolactinemia. Além disso, as substâncias de acordo com a invenção são convenientes para a utilização como antipsicóticos devido aos seus efeitos parcialmente agonísticos e parcialmente antagonístícos.

Da mesma forma, os derivados de alcaloides de alilo de ferrugem de gramíneas da fórmula geral (I) são adequados para a prevenção e/ou tratamento de doenças mentais e doenças gerais do sistema nervoso.

Um objectivo desta invenção são os produtos farmacêuticos para aplicação oral, sublingual, transdérmica, rectal, tópica, e parentérica (tal como intravenosa) que, em adição aos substratos e adjuvantes comuns, contêm um composto da fórmula geral (I) ou o seu sal de adição ácido farmaceuticamente compatível. 0 produto farmacêutico de acordo com a invenção pode ser administrado numa forma de depósito especial que facilita a libertação controlada do ingrediente activo, a libertação contínua tal como uma libertação de almofada transdérmica, intermitente, prolongada, ou dupla. A dosagem do produto farmacêutico de acordo com a invenção depende do paciente a ser tratado, a gravidade dos sintomas e a forma da administração. A dose eficaz para a administração oral, sublingual, transdérmica, rectal, tópica, e parentérica de um modo preferido é de 0,001-20 mg por kg de peso de corpo e dia. Os produtos farmacêuticos de acordo com a invenção são produzidos de uma forma conhecida por se utilizarem os substratos e adjuvantes sólidos ou liquidos comuns na engenharia farmacêutica dependendo da forma de aplicação.

Os substratos e adjuvantes podem incluir agentes de ligação, enchedores, auxiliares de aglomeração, diluentes, promotores de solubilidade, corantes, substâncias de sabor, agentes de humidificação, emulsionantes, adições tampão de pH, auxiliares de suspensão, adjuvantes não aquosos e conservantes.

Um enchedor pode ser seleccionado a partir de celulose, manitol, e lactose. Os promotores potenciais de solubilidade são o amido, os derivados de amido, e a pirrolidona de polivinilo. A adição de EDTA 9 a uma solução do ingrediente activo é benéfica. 0 sulfato de laurilo de sódio, a lecitina, o monooleato de sorbitao, e a goma arábica podem ser seleccionados como emulsionantes. Um auxiliar de suspensão pode ser seleccionado a partir de sorbitol, celulose de metilo, gelatina, celulose de hidroxietilo, celulose de carboximetilo, gel de estearato de alumínio e gorduras nutritivas hidratadas. Os adjuvantes não aquosos potenciais são o óleo de amêndoa, o óleo de coco, o éster de glicerina, o propileno glicol, e o álcool de etilo. Os conservantes convenientes são o metilo-p-hidroxibenzoato, o etil-p-hidroxibenzoato, o sulfeto de ácido de sódio, e o ácido ascórbico. 0 estearato de magnésio pode ser utilizado como um lubrificante. 0 ingrediente activo pode ser aplicado oralmente em forma sólida como comprimidos, cápsulas, aglomerações, pós, e losangos ou em forma líquida como solução aquosa, suspensão, xarope, ou pó solúvel. Uma outra forma potencial de aplicação seria um pulverizador oral.

As opções para a aplicação parentérica são por injecção subcutânea, intramuscular, ou intravenosa. 0 ingrediente activo da fórmula geral (I) pode ser uma suspensão líquida ou uma solução ou pode ser dissolvido ou suspenso imediatamente antes da injecção. A adição de emulsionantes ou agentes de humidificação a uma suspensão pode causar mesmo a distribuição do ingrediente activo no líquido. Os substratos potenciais líquidos são as soluções salinas ou a glicerina. A concentração preferida do ingrediente activo é de 0,1 1 Π 9-α _L u o ·

Para a aplicação transdérmica, o ingrediente activo da fórmula geral (I) é distribuído em uma matriz portadora que pode ser 10 seleccionada a partir de óleo mineral, óleo de parafina, um poliacrilato, ou uma cera. Um intensificador de transporte transdérmico e/ou um interruptor de estrutura tal como o sulfóxido de dimetilo ou o propileno glicol podem ser adicionados.

EXEMPLOS

Os exemplos a seguir são dados para ilustrar a invenção sem a limitar.

Exemplo 1: Síntese e Caracterização de Compostos de Acordo com a Invenção da Fórmula (I)

Uma solução de tergurida (5R, 8S, 10R) (4 g, 11,7 mM) em CH2CI2 (160 mL) foi misturada com 20 % (v/v) de uma solução de hidróxido de amónio de tetraetilo (8 mL) em 24 mL 50 % (p/v) de NaOH. Depois o brometo de alilo [5 mL, 58,6 mM) é adicionado gota a gota sob constante agitação. A agitação é mantida durante 5 minutos depois de se adicionar o brometo de alilo. Depois de se separar a fase orgânica, o produto é lavado duas vezes com a água e evaporado em um vácuo. O resíduo foi cromatografado sobre uma coluna de gel de sílica (40 g) por se utilizar um eluente como CH2CI2. As fracções com tergurida de alilo foram secas, e o produto puro foi cristalizado a partir de uma solução de éter de dietilo/éter de petróleo. O rendimento foi de 2,5 g de l-alilo-(5R, 8S, 10R)- tergurida.

Todos os outros compostos da fórmula geral (I) foram sintetizados por se utilizar um procedimento semelhante. A estrutura foi elucidada por se utilizar espectroscopia de massa e 11 XH e 13C-RMN. Os espectros de massa foram tomados por se utilizar um equipamento Finnigan MAT 90 (focagem dupla, geometria de BE ) sob as condições seguintes:

Energia de ionização: 70 eV Temperatura da fonte de ião: 250 °C Emissão de Catódo Corrente: 1 mA Voltagem de Aceleração: 5 kV; DIP: 170 °C

Espectros de aH e de 13C-RMN:

Frequência: 400 ou 100 MHz, respectivamente Solvente: CDC13, 25 °C Espectrómetro Varian Inova 400 TMS - Padrão

Resultados da caracterização: A) Pontos de Fusão de compostos selectivos de acordo com a invenção (°C) (para nomes triviais e a estrutura de resíduos Ri-R6: ver a Tabela 1):

Festuclavina de 1-alilo 81-81 Lisergol de 1-alilo 124-125 Luol de 1-alilo 203-205 Ergotamina (referência) 175-177 Ergotamina de 1-alilo 179-181 Di-hidroergotamina (referência) 237-238 Di-hidroergotamina de 1-alilo 165-167 Lisurida (referência) 173-175 Lisurida 1 de 1-alilo 72-74

Tergurida (referência) 206 Tergurida de 1-alilo 66-67 B) Dados de MS para a tergurida de 1-alilo [m/z (intensidade relativa)]: 381 (10), 380 (39), 308 (6), 307 (15), 265 (6), 264 (24), 263 (36), 249 (8), 221 (5), 220 (5), 209 (7), 208 (21), 207 (100), 195 (12), 194 (18), 100 (4), 74 (3). C) Dados de RMN para 1-alilo-(5R, 8S, 10R)-tergurida:

“C RMN 1H RMN Átomo δ mult. δ nH mult.a J (Hz) 2 121,73 d 6,774 1 d 1,7 3 110,84 S 4 26, 91 t 2,667 1 ddd 19,6, 11,1, 1,7 3,379 1 dd 14,6, 4,3 5 67, 61 d 2,205 1 ddd 11,1, 9,7, 4,3 13 7 61,89 t 2,485 1 dd 11,7, 2,6 2,874 1 ddd 11,7, 2,6, 2,4 8 44,95 d 4,282 1 m 9 32,55 t 1, 636 1 ddd 13,2, 13,0, 3,3 2,796 1 dddd 13,2, 4,3, 2,6, 2,6 10 36,52 d 3,052 1 m 11 133,52 s 12 112,83 d 6,888 1 ddd 6,9, 1,3, 0,9 13 122,73 d 7,158 1 dd 8,3, 6,9 14 107,12 d 7,100 1 ddd 8,3, 0,9, 0,8 15 133,68 s 16 126,71 s 14-CH3 43,39 q 2,416 3 s N-C=0 156,57 s 1' 48,91 t 4,674 2 ddd 5,5, 1,7, 1,5 2 ' 133,87 d 5,990 1 ddt 17,0, 10,2, 5,5 3' 117,00 t 5,124 1 ddt 17,0, 1,3, 1,7 5,188 1 ddt 10,2, 1,3, 1,5 α 41,06 t 3,250 1 dq 19,5, 7,1 3,347 1 dq 14,5, 7,1 β 13,85 q 1,152 3 t 7,1 N-H 5,572 1 d 8,2

Exemplo 2: Teste de Função Baseado em Tecido do Receptor de 5-HT2B 0 teste foi um teste de função in vitro para caracterizar os receptores de 5-HT2B na artéria pulmonar de um porco. A artéria pulmonar do porco foi preparada como se segue: as pequenas 14 ramificações foram dissecadas da artéria pulmonar e cautelosamente libertadas de tecido de órgão e tecido conectivo. Até seis anéis da artéria (comprimento de 2-3 mm e largura de 1,5-2 mm) foram suspensos em orientação horizontal entre dois ganchos de platina em forma de L (150 um em diâmetro) e fixados em um banho de órgão que contém 10 mL de tampão de Krebs-Henseleit modificado composto como se segue: 118 mM de NaCl, 4,7 mM de KC1, 2,5 mM de CaCl2, 1,2 mM de MgS04, 1,2 mM de KH2P04, 25 mM de NaHCCh, e 11 mM de glicose D. Um fluxo contínuo de uma mistura de gás de 95 % de 02 e 5 % de CO2 passou através da solução a qual foi guardada a uma temperatura constante de 35 °C. As preparações foram unidas a um conversor de potência isométrica (Hugo Sachs Elektronik, March, Alemanha) , e as modificações de voltagem foram continuamente registadas. A voltagem constante na condição estacionária foi ajustada a 20 mN no início de cada experiência. Durante um período de estabilização inicial de 60 minutos, o meio de banho foi substituído a cada 20 minutos e a voltagem foi repetidamente ajustada a 20 mN. As preparações de artéria foram estimuladas em intervalos de 45 minutos uma vez com KC1 (30 mM) e três vezes com prostaglandina-F2a (PGF2a, 3 μΜ) até que a resposta por contracção fosse visível. A condição não danificada do endotélio foi avaliada funcionalmente por se medir a extensão do relaxamento dependente do endotélio depois da aplicação de bradiquinina (10 nM). Depois da terceira contracção induzida por PGF2a ter estabilizado, a resposta ao relaxamento foi examinada para 5-HT por se determinar uma curva de resposta de concentração cumulativa na ausência e na presença do antagonista. A Figura 1 mostra os efeitos na resposta ao relaxamento quando se adiciona a ergotamina de 1-alilo e a di-hídroergotamina de 1-alilo, compostos de acordo com a invenção. A resposta de relaxamento para 0 composto de teste foi examinada 15 por se utilizar o mesmo método que com o 5-HT para testar a actividade agonística. A concentração do agonista foi aumentada em incrementos em tempo quando o sinal de resposta tinha alcançado uma plataforma. A plataforma foi tipicamente alcançada num prazo de 2 a 4 minutos. Os efeitos de relaxamento foram expressos como uma percentagem da contracção induzida por PGF2c<. Os antagonistas foram adicionados 30 minutos antes do registo das curvas de resposta de concentração de agonista ter começado. Os efeitos dos antagonistas foram examinados em segmentos de anel que foram adjacentes aos segmentos de referência. 0 efeito antagonistico dos compostos de acordo com a invenção para os receptores de 5-HT2b foi comprovado por se utilizar este método (ver a Tabela 1) . 0 efeito selectivo dos receptores de 5-HT2a ou dos receptores de 5-HT2b/ respectivamente, foi confirmado num exame comparativo. 5-ΗΓ -Hi—S-HT+wgoteminacle 1-eBo —^^s-HTn<^ldroergo>anÉia de 1-aBo

16

Ilustração i: Relaxamento induzido por 5-HT na presença e na ausência de ergotamina de 1-alilo e de di-hidroergotamina de 1-alilo

Exemplo 3: Teste de função baseado no tecido do receptor de 5-HT2a O exemplo a seguir descreve um teste de função in vitro para a caracterização dos receptores de 5-HT2a em artérias caudais do rato. A artéria caudal do rato foi preparada por se utilizar o método descrito por Schoning (Schoning et al., 2001, Die komplexe Wechselwirkung von Ergovalin mit 5-HT2a-/ 5-HTib/id und alphai-Rezeptoren in isolierten Arterien von Ratten und Guinea-Schweinen, J. Anim. Sci.r 79, páginas 2202-2209).

Os ratos macho Wistar (250-300 g) foram mortos através de sufocação. A artéria caudal anterior foi dissecada rapidamente e limpa de tecido conectivo anexado. Um fio de aço inoxidável (0,3 mm de diâmetro) foi introduzido na artéria para esvaziar o endotélio. Até 20 segmentos cilíndricos da artéria (comprimento de 3-4 mm) foram suspensos em orientação horizontal entre dois ganchos de platina em forma de L (150 pm de diâmetro) e fixados em um banho de órgão que contém 20 mL de tampão de Krebs-Henseleit modificado composto como se segue: 118 mM de NaCl, 4,7 mM de KC1, 2,5 mM de CaCl2, 1,2 mM de MgS04, 1,2 mM de KH2P04, 25 mM de NaHC03, e 10 mM de glicose D. Um fluxo contínuo de uma mistura de gás de 95 % de 02 e de 5 % de C02 passou através da solução a qual foi mantida a uma temperatura constante de 37 °C. As preparações foram conectadas a um conversor de potência isométrico (W. Fleck, Mainz, Alemanha) ligado com um acoplador de conversão TSE 4711 e um compensógrafo Siemens C1016 para registo contínuo de modulação de voltagem. A voltagem constante foi ajustada a 5 mN nc inicio de cada 17 experiência. Durante um período de equilíbrio de 120 minutos, as preparações foram estimuladas uma vez depois de 60 minutos com 5-HT (1 μΜ) .

Três curvas de resposta de concentração cumulativas (CRC) foram determinadas para cada segmento de artéria nestas experiências para o estudo de agonistas parciais. O primeiro CRC foi obtido para 5-HT, o segundo que seguiu 60 minutos depois para o agonista parcial. Finalmente, o terceiro CRC foi obtido 10-15 minutos depois do segundo CRC sem lavagem com o 5-HT e por se utilizar a concentração de agonista mais alta (0,3-3 μΜ). As experiências adicionais determinaram dois CRCs a um intervalo de 60 minutos como descrito em cima. O primeiro CRC foi determinado para O 5-HT. O segundo CRC foi determinado para testar o agonista parcial na presença de cetanserina. As preparações foram incubadas durante 30 minutos com uma solução de cetanserina (3 nM). O movimento axial para a direita das curvas determinadas na presença de cetanserina foi comparado com o movimento determinado para a respectiva preparação de controlo na ausência de cetanserina. Nestas experiências que utilizam a cetanserina, dois CRCs separados para o 5-HT foram obtidos de cada segmento de artéria a um intervalo de 90 minutos. Para os antagonistas, as preparações foram incubadas 60 minutos antes da determinação da segunda curva. A prazosina (0,1 μΜ) e a cocaína (6 μΜ) estiveram presentes na solução durante estas experiências para bloquear os adrenoreceptores de a-1 e a absorção neuronial de 5-HT. O teste que utiliza o método descrito em cima comprovou que os compostos de acordo ccm a invenção são antagonistas parciais ou completos de receptores de 5-HT2a (Tabela 1) . 18

Tabela 1: Teste para os efeitos antagonísticos de receptores de 5-HT2a e de 5-HT2B

Composto Estrutura (de acordo com a Fórmula I e II) 5-HTza 5-HTib Selectivídade ET2a : HT2B Ri r3 r3 r4 Rs Re Ligação C9-C10 Cone. (nM) i/alor àe PA? Cone. (nM) Valor de PA2 Lisurida (referência) ch3 -NHCON (C2H5)2 H Não saturadc 1C 8,60 10,32 1 : 52 Lisurida de 1-alilo ch3 -NHCON (C2 Hs)2 H Não saturadc 30 8,92 1 000 8,17 6 : 1 Tergurida (referência) ch3 -NHCON (C2Hd)2 H H saturada 300 8,38 10 8,49 1 : 1 Tergurida de 1-alilo ch3 -NHCON (C2H5)2 H H saturada 30 8,70 1 coo 7,67 11 : 1 Festuciavína* (referência) CH3 H H -ch3 saturada 6, 63 Festuclavina de i-alilo ch3 H H -ch3 saturada 10-30 7,89 1 000 6, 74 14 : 1 Lisergol* (referência) ch3 H -CH2OH Não saturadc 6,88 Lisergol de 1-alilo CHj H CH2OH Não saturadc 3-100 8,45 1 000 7,61 7 : 1 Luol de 1-alilo ch3 H OCH, CH2OH saturada 100 7, 3 6 1 000 7,03 2 : 1 Di- hidroergotamina de 1-alilo ch3 H Solução da Fórmula -ch3 Benzi lo saturada 10 7,65 30 9,30 1 : 45 Ergotamína de 1-alílo H _1 Solução da Fórmula (II) -ch3 Benzilo Não saturada 10 7,85 9,11** 1 : 18 —.................—....................—I---1_I_I.................. ..............L___ * Valores medidos de H. Pertz (1996) Planta Med. 62, páginas 387-392 **-logKp, calculado de acordo com Kenakin

Lisboa, 23 de Março de 2007

Claims (8)

1 REIVINDICAÇÕES 1. Derivados de alcaloides de alilo de ferrugem de gramíneas da fórmula geral (I)

em que Ri representa um grupo de etilo, n-propilo, i-propilo, ou de alilo, R3 é hidrogénio ou um grupo -0CH3, e R4 representa hidrogénio, um grupo de metilo, etilo, n-propilo, i-propilo, ou -CH2OH, e a ligação entre os átomos C 9 e 10 é tanto uma ligação singular como dupla enquanto que o resíduo R3 é omisso. Método para a produção de compostos da fórmula geral (I) de acordo com a reivindicação 1 em que um composto da fórmula geral (III) .

2. 2

em que Ri representa um grupo de etilo, n-propilo, í-propilo, ou de alilo, R3 é hidrogénio ou um grupo -OCH3, e R4 representa hidrogénio, um grupo de metilo, etilo, n-propilo, i-propilo, ou -CH2OH, e a ligação entre os átomos C 9 e 10 é tanto uma ligação singular como dupla enquanto que o resíduo R3 é omisso, é feita reagir com brometo de alilo em 0Η2012/ opcionalmente por se adicionar hidróxido de amónio de tetraetilo e NaOH.

3. Composição farmacêutica que contém pelo menos um composto da fórmula geral (I) de acordo com a reivindicação 1 assim como um ou vários adjuvantes e/ou substratos farmacologicamente seguros.

4. Utilização dos compostos da fórmula geral (I) de acordo com a reivindicação 1 e dos seus sais farmaceuticamente aceitáveis para a produção de um produto farmacêutico para a prevenção e/ou tratamento da enxaqueca. 3

5. Utilização dos compostos da fórmula geral (I) de acordo com a reivindicação 1 e dos seus sais farmaceuticamente aceitáveis para a produção de um produto farmacêutico para o tratamento da doença de Parkinson.

6. Utilização dos compostos da fórmula geral (I) de acordo com a reivindicação 1 e dos seus sais farmaceuticamente aceitáveis para a produção de um produto farmacêutico para a prevenção e/ou tratamento da agregação de trombócitos.

7. Utilização dos compostos da fórmula geral (I) de acordo com a reivindicação 1 e dos seus sais farmaceuticamente aceitáveis para a produção de um produto farmacêutico para a prevenção e/ou tratamento de doenças psíquicas.

8. Utilização dos compostos da fórmula geral (I) de acordo com a reivindicação 1 e dos seus sais farmaceuticamente aceitáveis para a produção de um produto farmacêutico para o tratamento do sistema nervoso. Lisboa, 23 de Março de 2007