PT117254B - Método de síntese de compostos 9-aminometil tetraciclinas - Google Patents

Abstract

É DIVULGADO UM MÉTODO PARA SINTETIZAR COMPOSTOS DE 9-AMINOMETIL TETRACICLINA. O MÉTODO COMPREENDE A) REAGIR MINOCICLINA E UM DERIVADO DE HIDROXIMETILAMIDA PARA FORMAR UMA 2,9-(METILAMIDA SUBSTITUÍDA) MINOCICLINA E UMA MINOCICLINA 2-(METILAMIDA SUBSTITUÍDA) MINOCICLINA; B) REAGIR A 2,9-(METILAMIDA SUBSTITUÍDA) MINOCICLINA DO PASSO A) E UMA AMINA OU DIAMINA PARA FORMAR UM INTERMEDIÁRIO 9-AMINOMETIL TETRACICLINA; E C) REACÇÃO DO INTERMEDIÁRIO 9-AMINOMETIL TETRACICLINA DO PASSO B) E UM ALDEÍDO NA PRESENÇA DE UM AGENTE REDUTOR PARA FORMAR UM COMPOSTO 9-AMINOMETIL TETRACICLINA; OU D) REACÇÃO DO INTERMEDIÁRIO 9-AMINOMETIL TETRACICLINA DO PASSO B) E UM HALOGENETO DE ALQUILO OU UM REAGENTE ALQUILO PARA FORMAR UM COMPOSTO 9-AMINOMETIL TETRACICLINA. O PASSO B) PODE SER OPERADA NA AUSÊNCIA DE UMA REAÇÃO DE HIDROGENAÇÃO. O MÉTODO PODE SER UM PROCESSO DE FLUXO SEMICONTÍNUO OU CONTÍNUO. OPCIONALMENTE, EM UM PROCESSO DE FLUXO SEMICONTÍNUO, DOIS DOS PASSOS A), B) E C) OU D) PODEM SER REALIZADAS SEM O USO DE REATORES DESCONTÍNUOS E SEM A NECESSIDADE DE ISOLAR PRODUTOS INTERMEDIÁRIOS ENTRE OS PASSOS DE REAÇÃO, POR EXEMPLO, OS PASSOS B) E C) OU OS PASSOS B) E D) PODEM OPERAR DE MANEIRA CONTÍNUA COM O INTERMEDIÁRIO 9-AMINOMETIL TETRACICLINA FORMADO NO PASSO B) SENDO USADO DIRETAMENTE NO PASSO C) OU D). O COMPOSTO DE 9-AMINOMETIL TETRACICLINA FORMADO NO PASSO C) OU D) PODE SER OMADACICLINA.

Description

Descrição

Método de Síntese de Compostos 9-Aminometil Tetraciclinas

Antecedentes da Invenção

A presente invenção está relacionada com um novo e melhorado método para produzir compostos 9-aminometil tetraciclinas conhecidas no estado da arte (US 9365500 B2), incluindo, mas não limitado à omadaciclina.

Descrição do estado da arte

Antibióticos são fármacos que revolucionaram a medicina, sendo essenciais para salvar vidas. Ά história começou com a discoberta da penicilina em 1928 (Singh, S.; Barrett, J. Empirical Antibacterial Drug Discovery-Foundation in Natural Products. Biochem. Pharmacol. 2006, 71, 1006-1015), e desde então um grande número de antibióticos altamente efetivos tem sido descoberto e desenvolvido para uso clinico no tratamento de infeções bacterianas (Brown, E. ; Wright, G. Antibacterial Drug Discovery in the Resistance Era. Nature 2016, 529, 336-343). Muitos destes antibióticos têm um largo espectro de atividade, sendo efetivos no tratamento de infeções provocadas por bactérias Gram-positivas e também Gram-negativas, enquanto outros são efetivos contra apenas bactérias Gram-positivas. Um antibiótico ideal é um fármaco que elimina e inibe o crescimento de bactérias prejudiciais ao ser humano independentemente do local de infeção, sem afetar a flora microbiana benéfica existente na pele e sistema digestivo. De qualquer forma, um antibiótico sendo ideal ou não, dificilmente permanece efetivo para sempre devido ao uso excessivo e à prescrição inadequada que tem resultado na emergência de bactérias multi-resistentes (Singh, S. B.; Young, K.; Silver, L. L. What Is an Ideal Antibiotic? Discovery Challenges and Path Forward. Biochem. Pharmacol. 2017, 133, 63-73).

A resistência antimicrobiana (Antimicrobial resistance AMR) diminui a capacidade do organismo humano responder a doenças infecciosas e ameaça a realização de cirurgias de rotina. Dois documentos internacionais (European Commission. A European One Health Action Plan against Antimicrobial Resistance (AMR); 2017 e U.S Department of Health and Human Services, Antibiotic Resistance Threats in the United States - Report 2019) sublinham que a resistência antimicrobiana é um problema global com ramificações sérias a nível de saúde e economia. Um desafio importante é o uso excessivo e de antibióticos em humanos mas também em animais, que por si também contribuem na evolução de estirpes resistentes, causando, por ano, cerca de 33 000 mortes na Europa e mais de 35 000 mortes nos Estados Unidos (Cassini, A.; Hõgberg, L. D.; Plachouras, D.; Quattrocchi, A.; Hoxha, A.; Simonsen, G. S.; Colomb-Cotinat, M.; Kretzschmar, Μ. E.; Devleesschauwer, B.; Cecchini, M.; Ouakrim, D. A.; Oliveira, T. C.; Struelens, M. J.; Suetens, 0.; Monnet, D. L. Attributable Deaths and Disability-Adjusted Life-Years Caused by Infections with Antibiotic-Resistant Bactéria in the EU and the European Economic Area in 2015: A PopulationLevel Modelling Analysis. Lancet 2019, 19, 56-66). Estimase que atualmente morre uma pessoa a cada 1 minuto e 23 segundos devido a infeções resistentes a antibióticos, enquanto em 2050 se espera que o mesmo aconteça, a cada 3 segundos, isto se a investigação e desenvolvimento de novas terapias permanecer ao ritmo atual (O'Neill, J. Tackling Drug-Resistant Infections Globally: Final Report and Recommendations; 2016).

Os atuais modelos de incentivos não oferecem uma solução sustentável; são necessárias novas abordagens empresariais, incluindo novos incentivos para desenvolver antibióticos, bem como novos sistemas de preços.

investimento em pesquisa e desenvolvimento de medicamentos e tratamentos inovadores é essencial para avançar na prevenção e no tratamento de doenças. 0 acesso a medicamentos seguros, de alta qualidade e eficazes é um elemento-chave do bem-estar social (European Commission. Pharmaceutical Strategy for Europe 2020; 2020). 0 desenvolvimento contínuo de novos agentes antibacterianos é reconhecido como muito importante para a saúde humana. Diante do aumento da resistência, há necessidade de novos agentes antibacterianos adequados para o tratamento de infeções em pacientes

Nos últimos anos têm surgido iniciativas para reavaliar regimes terapêuticos de alguns antibióticos já comerciais para maximizar a sua eficácia e minimizar o risco de selecionar bactérias resistentes (ΕΜΕΆ Guideline on the Evaluation of Medicinal Products Indicated for Treatment of Bacterial Infections (Draft). EMEA Eur. Med. Agency 2010, 44 (February), 1-26). No entanto, o número de novos antibióticos a chegar ao mercado tem sido muito pequeno devido à falta de interesse comercial (Wright, G. D. Perspective Antibiotics : A New Hope. Chem. Biol. 2012, 19 (1), 3-10) ou mesmo devido a limitações no conhecimento científico. Como exemplos existem ameaças emergentes vistas nos últimos anos como as infeções pelo Síndrome Respiratório do Médio Oriente (MERS) e Síndrome Respiratório Agudo por Coronavirus 2, e a falta de tratamento para grupos específicos da população como para grávidas e idosos.

desenvolvimento de novos antibióticos ou alternativas é um excelente exemplo de uma necessidade médica não atendida, dada a falta de opções terapêuticas para abordar a AMR.

A identificação de novos alvos terapêuticos para desenvolver novas classes de antibióticos é um processo complexo e com um baixo retorno de investimento. Antibióticos inovadores que chegam ao mercado sem se conhecer resistência, são protegidos por guidelines da forma a reservá-los para último recurso, sendo apenas utilizados após falha das outras opções terapêuticas, o que leva a um valor de vendas reduzido. A este facto junta-se também a disponibilidade de vários atibióticos genéricos de baixo custo (Sertkaya, A.; Eyraud, J. ; Birkenbach, A.; Franz, C.; Ackerley, N.; Overton, V. Analytical Framework for Examining the Value of Antibacterial Products.; Washington D. C., 2014). Os mecanismos de incentivos que existem atualmente não proporcionam uma solução sustentável para a investigação em novos antibióticos, pelo que são necessários novos modelos de negócio com novos incentivos para o desenvolvimento de atibióticos bem como novos sistemas de preços para estes fármacos.

Em 2012, foi aprovado nos Estados Unidos a iniciativa GAIN (Generating Antibiotic Incentives Now - Iniciativa para a criação imediata de antibióticos) para apoiar programas dedicados a trazer para o mercado antibacterianos e antifungicos para tratar infeções sérias e ameaçadoras para a saúde, conhecidas como QIDPs - Qualified Infectious Disease Products - Produtos qualificados para doenças infeciosas. As entidades podem submeter as suas candidaturas aos fundos GAIN para o desenvolvimento de um fármaco e a FDA (Food and Drug Administration- Agência para o medicamento e alimentação) revê e responde num prazo de 60 dias após submissão (FDA Generating Antibiotics Incentive Now; 2 017) .

Organizações que desenvolvem e enviam inscrições para QIDPs podem qualificar se para receber incentivos por meio do GAIN. 0 principal incentivo contido no GAIN é que a designação como QIDP qualifica o medicamento para 5 anos de exclusividade de comercialização a serem adicionados á exclusividade já fornecida pela Food, Drug, and Cosmetic Act (lei dos alimentos medicamentos e cosméticos)

Um dos incentivos principais obtidos após assegurar apoio da GAIN, é a designação de QIDP ao fármaco desenvolvido, o que atribui uma exclusividade de mercado adicional a outros incentivos conferidos pela FDA. Estes fármacos também ganham a designação de Fast Tract e prioridade na revisão da aplicação para aprovação regulamentar na FDA.

Tetraciclinas

As tetraciclinas são uma classe de antibióticos de largo espetro. 0 seu mecanismo de ação é através da inibição da síntese proteica e consequente inibição do crescimento bacteriano. De uma forma geral, as tetraciclinas ligam-se à subunidade ribosomal 30S bacteriana prevenindo a adição de aminoácidos à cadeia polipeptidica em crescimento (US 9365500 B2, Bradford, P.; Jones, C. Antibiotic Discovery and Development - Chapter 5 (Tetracyclines); Springer, Boston, MA, 2012). As tetraciclinas têm demonstrado ser seguras e eficazes por mais de sete décadas, desde que a primeira tetraciclina foi descoberta (Bradford, P.; Jones, C. Antibiotic Discovery and Development - Chapter 5 (Tetracyclines); Springer, Boston, MA, 2012).

Fórmula 1 - Estrutura geral de uma tetraciclina: numeração dos carbonos e identificação dos ciclos.

Em 1945, Benjamin Duggar isolou a 7-clorotetraciclina (composto 1, fórmula 2) a partir de uma cultura bacteriana (Duggar, B. M. Aureomycin: A Product of the Continuing Search for New Antibiotics. Ann. N. Y. Acad. Sei. 1948, 51, 177181), que foi aprovada para uso clinico em 1948 (Lederle Laboratories:

https://www.accessdata.fda.gov/scripts/eder/daf/index.cfm? event=overview.process&ApplNo=050404). Dois anos depois, a 5-oxitetraciclina (composto 2, Fórmulas 2) foi isolada (Finlay, A.; Hobby, G.; Regna, P.; Routien, J.; Seeley, D.; Shull, G. Terramycin, a New Antibiotic. Science (80) 1950, 11 (27), 85-85) por cientistas da Pfizer e aprovada pelo FDA para uso clínico (Pfizer, https://www.accessdata.fda.gov/scripts/cder/daf/ index.cfm?event=overview.process&ApplNo=050286). Em 1953, químicos também da Pfizer modificaram a 7-clorotetraciclina para produzir um antibiótico ainda mais potente (Bradford, P.; Jones, C. Antibiotic Discovery and Development - Chapter 5 (Tetracyclines); Springer, Boston, MA, 2012), a molécula conhecida como tetraciclina (composto 3, fórmulas 2).

Os laboratórios Lederle lideraram a investigação na descoberta de novas tetraciclinas, enquanto a Pfizer, e mais recentemente a Paratek Pharmaceuticals e a Tetraphase, têm acrescentado valor a esta classe de antibióticos. Infelizmente durante a última década, tem havido um declínio na investigação e desenvolvimento também nesta classe de antibióticos, nomeadamente no esforço de evitar os mecanismos de resistência já conhecidos (Bradford, P.; Jones, C. Antibiotic Discovery and Development - Chapter 5 (Tetracyclines); Springer, Boston, MA, 2012).

A eficácia das tetraciclinas tem sido significamente afetada por mecanismos de resistência específicos desta classe de antibióticos como a expressão de bombas de efluxo específicas e outros mecanismos de proteção ribossomal. Em 1999, a tigeciclina (composto 4, fórmulas 2), um derivado da minociclina, da subclasse das glicilciclinas, emergiu como uma tetraciclina de largo-espetro que conseguia evitar os mecanismos de resistência e mantia boa atividade contra bactérias Gram-positiva e Gram-negativa (Glycylcyclines : Third-Generation Tetracycline Antibiotics lan Chopra. 2001, 464-469; Bush, K. Improving Known Classes of Antibiotics : An Optimistic Approach for the Future. Curr. Opin. Pharmacol. 2012, 12 (5), 527-534). Em 2005, foi aprovada para o tratamento de infeções complicadas da pele e tecidos moles e também infeções intra-abdominais complicadas (Babinchak, T.; Ellis-Grosse, E.; Dartois, N.; Rose, G. ; Loh, E. The Efficacy and Safety of Tigecycline for the Treatment of Complicated Intra-Abdominal Infections: Analysis of Pooled Clinicai Trial Data. Clin. Infect. Dis. 2005, 41 (s5) , S354S367).

Em 2008, a tigeciclina é aprovada pelo FDA para o tratamento de infecções respiratórias bacterianas adquiridas na comunidade (Stein, G. E.; Babinchak, T. Tigecycline: An Update. Diagn. Microbiol. Infect. Dis. 2013, 75 (4), 331336) . No entanto, é um medicamento administrado apenas por via intravenosa e causa significativamente mais náuseas e vómitos do que outras tetraciclinas (Shen, F.; Han, Q.; Xie, D.; Fang, M.; Zeng, H.; Deng, Y.; Efficacy and Safety of Tigecycline for the Treatment of Severe Infectious Diseases: An Updated Meta-Analysis of RCTs. International Journal of Infectious Diseases. 2015, pp 25-33), e pode causar mutações nas bombas de efluxo em bactérias Gram-negativas durante a terapia (Pournaras, S.; Koumaki, V.; Spanakis, N.; Gennimata, V. Current Perspectives on Tigecycline Resistance in Enterobacteriaceae Susceptibility Testing Issues and Mechanisms of Resistance. Int. J. Antimicrob. Agents 2016, 48, 11-18) . Mais recentemente, uma nova geração de tetraciclinas surgiu para superar a toxicidade da tigeciclina, nomeadamente Omadaciclina (5), Eravaciclina (6) e Sareciclina (7) - Fórmulas 2.

A omadaciclina da Paratek Pharmaceuticals, conhecida como Nuzyra™, é um derivado aminometil da minociclina (composto 8, Fórmulas 2). Nuzyra™ foi aprovado pela FDA em outubro de 2018 (https://www.accessdata.fda.gov/scripts/cder/ob/results_pro duct.cfm?

Appl_Type=N&Appl_No=209817) na forma de comprimido (NDA 209816) e forma de pó (NDA 209817) para o tratamento de pneumonia bacteriana adquirida na comunidade (CABP) e infecções bacterianas agúdas da pele e da estrutura da pele (ABSSSI) (Paratek Pharmaceuticals. Full Prescribing Information NUZYRA (omadacycline). Paratek Pharmaceuticals, Inc 2018).

(7) (8)

Fórmulas 2 - Estrutura química da 7-clorotetraciclina (1),

5-oxitetraciclina (2) , Tetraciclina (3), Tigeciclina (4),

Omadaciclina(5), Eravaciclina(6), Sareciclina(7), Minociclina(8).

Omadaciclina

A omadaciclina é uma nova aminometilciclina primeira na classe e um derivado semi-sintético da minociclina (Honeyman, L.; Ismail, M.; Nelson, M. L.; Bhatia, B.; Bowser, T. E.; Chen, J. ; Mechiche, R. ; Ohemeng, K. ; Verma, A. K. ; Cannon, E. P.; Macone, A.; Tanaka, S. K.; Levy, S. StructureActivity Relationship of the Aminomethylcyclines and the Discovery of omadacycline. Antimicrob. Agents Chemother. 2015, 59 (11), 7044-7053). É caracterizada por ter um substituinte aminometil na posição 09 do anel D da tetraciclina de acordo com a Fórmula 1 (US 9365500 B2) . Modificações nesta posição resultaram numa atividade melhorada contra bactérias Gram-positivas e Gram-negativas, superando mecanismos de resistência conhecidos por afetar tetraciclinas de geração mais antiga (ou seja, efluxo e proteção ribossomal) (Chopra, I.; Roberts, M. Tetracycline Antibiotics: Mode of Action, Applications, Molecular Biology, and Epidemiology of Bacterial Resistance. Microbiol. Mol. Biol. Rev. 2001, 65 (2), 232-260; Gotfried, Μ. H.; Horn, K.; Garrity-Ryan, L.; Villano, S.; Tzanis, E.; Chitra, S.; Manley, A.; Tanaka, S. K. ; Rodvoldb, K. A. Comparison of omadacycline and Tigecycline Pharmacokinetics in the Plasma, Epithelial Lining Fluid, and Alveolar Cells of Healthy Adult Subjects. Antimicrob. Agents Chemother. 2017, 61 (9) , 1-13).

O mecanismo de ação principal da omadaciclina é a potente inibição da síntese proteica bacteriana (Draper, Μ. P.; Weir, S.; Macone, A.; Donatelli, J. ; Trieber, C. A.; Tanaka, S. K.; Levy, S. B. Mechanism of Action of the Novel Aminomethylcycline Antibiotic omadacycline. Antimicrob. Agents Chemother. 2014, 58 (3), 1279-1283). Atua ligando-se à subunidade ribossômica 30S no complexo de tradução de mRNA das bactérias e inibindo a ligação do aminoacil-tRNA ao complexo mRNA-ribossoma, e como resultado inibe a expressão de proteínas. (Gotfried, Μ. H.; Horn, K.; Garrity-Ryan, L.; Villano, S.; Tzanis, E.; Chitra, S.; Manley, A.; Tanaka, S. K.; Rodvoldb, K. Ά. Comparison of omadacycline and Tigecycline Pharmacokinetics in the Plasma, Epithelial Lining Fluid, and Alveolar Cells of Healthy Adult Subjects. Antimicrob. Agents Chemother. 2017, 61 (9), 1-13).

Em janeiro de 2013, o FDA designou a omadaciclina como um QIDP para formulações intravenosas e orais no tratamento de infecções bacterianas agudas da pele e da estrutura da pele (ABSSSI) e pneumonia bacteriana adquirida na comunidade (CABP) ( (Liapikou, Ά.; Cilloniz, C.; Mensa, J.; Torres, A. Pulmonary Pharmacology & Therapeutics New Antimicrobial Approaches to Gram Positive Respiratory Infections. Pulm. Pharmacol. Ther. 2015, 32, 137-143; Berg, J. K.; Tzanis, E.; Garrity-Ryan, L.; Bai, S.; Chitra, S.; Manley, A.; Villano, S. Pharmacokinetics and Safety of omadacycline in Subjects with Impaired Renal Function. Antimicrob. Agents Chemother. 2018, 62 (2), 1-9). Ά ABSSSI inclui celulite/erisipela, infecção de feridas e abscessos cutâneos maiores. (FDA Acute Bacterial Skin and Skin Structure Infections: Developing Drugs for Treatment; 2 013) . Ά CABP é uma doença comum em adultos com 5,16 a 7,06 casos por 1.000 pessoas por ano (Marrie, T. J. ; Huang, J. Q. Epidemiology of CommunityAcquired Pneumonia in Edmonton, Alberta: An Emergency Department-Based Study. Can. Respir. J. 2005, 12 (3), 139143) .

Em outubro de 2018, a omadaciclina recebeu a aprovação da FDA (Paratek Pharmaceuticals. Full Prescribing Information NUZYRA (omadacycline). Paratek Pharmaceuticals, Inc 2018; FDA Omadacycline Injection and Oral Products https://www.fda.gov/drugs/development- resources/omadacycline-injection-and-oral-products (accessed Mar 1, 2021)) para o tratamento de doentes com infecções graves de pele e tecidos moles e pneumonia bacteriana adquirida na comunidade (CAPB). (0'Riordan, W.; Green, S.; Overcash, J. S.; Puljiz, I.; Metallidis, S.; Gardovskis, J. ; Garrity-Ryan, L.; Das, Ά. F.; Tzanis, E.; Eckburg, P. B.; Manley, Ά.; Villano, S. A.; Steenbergen, J. N.; Loh, E. omadacycline for Acute Bacterial Skin and SkinStructure Infections. N. Engl. J. Med. 2019, 380 (6), 528538; Stets, R.; Popescu, M. ; Gonong, J. R.; Mitha, I.; Nseir, W. ; Made j, A.; Kirsch, C.; Das, Ά. F. ; Garrity-Ryan, L.; Steenbergen, J. N.; Manley, Ά.; Eckburg, P. B.; Tzanis, E.; McGovern, P. C.; Loh, E. omadacycline for Community-Acquired Bacterial Pneumonia. N. Engl. J. Med. 2019, 380 (6), 517527; Chopra, T.; Sandhu, A.; Theriault, N.; Meehan, J. ; Tillotson, G. omadacycline: A Therapeutic Review of Use in Community-Acquired Bacterial Pneumonia and Acute Bacterial Skin and Skin Structure Infections. Future Microbiol. 2020, 15 (14), 1319-1333; Lakota, E. A.; Van Wart, S. A.; Trang, M.; Tzanis, E.; Bhavnani, S. M.; Safir, M. C.; Friedrich, L.; Steenbergen, J. N.; Ambrose, P. G. ; Rubino, C. M. Population Pharmacokinetic Analyses for omadacycline Using Phase 1 and 3 Data. Antimicrob. Agents Chemother. 2020, 64 (Ί), 1-10; US 2018/0153908 Al).

A omadaciclina pode ser administrada por via intravenosa ou oral. O seu espectro de atividade é superior ao da doxiciclina (Draper, Μ. P.; Weir, S.; Macone, Ά.; Donatelli, J.; Trieber, C. A.; Tanaka, S. K.; Levy, S. B. Mechanism of Action of the Novel Aminomethylcycline Antibiotic omadacycline. Antimicrob. Agents Chemother. 2014, 58 (3), 1279-1283), minociclina, clindamicina, linezolida (0'Riordan, W.; Cardenas, C.; Shin, E.; Sirbu, A.; GarrityRyan, L.; Das, A. F.; Eckburg, P. B.; Manley, A.;

Steenbergen, J. N.; Tzanis, E.; McGovern, P. C.; Loh, E. Once-Daily Oral omadacycline versus Twice-Daily Oral Linezolid for Acute Bacterial Skin and Skin Structure Infections (OASIS-2): A Phase 3, Double-Blind, Multicentre, Randomised, Controlled, Non-Inferiority Trial. Lancet Infect. Dis. 2019, 19 (10), 1080-1090; Noel, G. J.; Draper, Μ. P.; Hait, H.; Tanaka, S. K. ; Arbeit, R. D. A Randomized , Evaluator-Blind , Phase 2 Study Comparing the Safety and Efficacy of omadacycline to Those of Linezolid for Treatment of Complicated Skin and Skin Structure Infections. 2012, 56 (11), 5650-5654) ou vancomicina (Macone, A. B.; Caruso, B. K.; Leahy, R. G. ; Donatelli, J. ; Weir, S.; Draper, Μ. P.; Tanaka, S. K.; Levy, S. B. In Vitro and in Vivo Antibacterial Activities of omadacycline, a Novel Aminomethylcycline. Antimicrob. Agents Chemother. 2014, 58 (2), 1127-1135). Possui uma atividade bacteriostática potente contra Staphylococcus Aureus resistente à meticilina Gram-positivo (MRSA), S. pneumonia multirresistente, enterococos resistentes à vancomicina, E. faecalis ou E. Faecium, e Clostridium difficille anaeróbico (WO2017/165729A1, 2016). Também contra Gram-Negativo Haemophilus influenzae, E.coli e Legionella (Huband, M. D.; Pfaller, Μ. A.; Shortridge, D.; Flamm, R. K. Surveillance of omadacycline Activity Tested against Clinicai Isolates from the United States and Europe: Results from the SENTRY Antimicrobial Surveillance Programme, 2017. <J. Glob. Antimicrob. Resist. 2019, 19, 5663; US 9724358 B2). Consequentemente, a omadaciclina pode ser uma alternativa importante e desejável para pacientes com infecções onde a epidemiologia sugere uma prevalência problemática de bactérias resistentes (Macone, A. B.; Caruso, B. K.; Leahy, R. G.; Donatelli, J.; Weir, S.; Draper, Μ. P.; Tanaka, S. K. ; Levy, S. B. In Vitro and in Vivo Antibacterial Activities of omadacycline, a Novel Aminomethylcycline. Antimicrob. Agents Chemother. 2014, 58 (2), 1127-1135). Métodos de tratamento com omadaciclina também estão descritos para infecções do trato urinário (ITU), infecções bacterianas causadas por armas biológicas e para regulação da expressão de genes (US 9724358 B2; Bal, A. M.; David, Μ. Z.; Garau, J. ; Gottlieb, T.; Mazzei, T.; Scaglione, F. ; Tattevin, P.; Gould, I. M. Future Trends in the Treatment of Methicillin-Resistant Staphylococcus Aureus (MRSA) Infection: An in-Depth Review of Newer Antibiotics Active against an Enduring Pathogen. J. Glob. Antimicrob. Resist. 2017, 10, 295-303; WO 2017/192516 Al; WO 2016/154332 Al; WO 2007/133798 Al; WO 2018/026987 Al; US 9078811 B2; WO 2009/120389 Al) . Estão atualmente em curso ensaios clínicos de fase 1 para penetração nos tecidos em pacientes diabéticos com infecções de feridas por hemodiálise (NCT04144374) e para o tratamento de infecções do pé diabético (NCT04714411) . Os ensaios clínicos de fase 2 estão completos para o tratamento de pielonefrite aguda em adultos (NCT03757234) e tratamento oral de cistite aguda em mulheres (NCT03425396) (Overcash, J. S.; Bhiwandi, P.; Garríty-ryan, L.; Steenbergen, J. ; Bai, S.; Chitra, S. ; Manley, A.; Tzanis, E. Pharmacokinetics, Safety, and Clinicai Outcomes of omadacycline in Women with Cystitis: Results from a Phase 1b Study. Antimicrob. Agents Chemother. 2019, 63 (5), 1-10).

Em 2019, a Paratek Pharmaceuticals Inc. recebeu um contrato de 5 anos do Projeto BARDA BioShield num valor aproximado de US$ 285 milhões para apoiar o desenvolvimento do NUZYRA® (omadaciclina) para o tratamento do antraz pulmonar e a opção de adquirir até 10.000 tratamentos de NUZYRA® para o Armazém Nacional Estratégico dos Estados Unidos (Strategic National Stockpile - SNS) para uso contra potenciais ameaças biológicas (Paratek Pharmaceuticals. Paratek Awarded BARDA Project BioShield Contract for NUZYRA® https://www.globenewswire.com/news-release/2019/12/18/

1962517/0/en/Paratek-Awarded-BARDA-Project-BioShieldContract-for-NUZYRA.html (accessed Mar 5, 2021)).

A síntese atual de omadaciclina, representada no Esquema 1, foi utilizada para produção de vários quilos e está descrita na patente US 9434680 B2 (outros derivados 9-aminometil tetraciclina diferentes da omadaciclina também estão descritos na patente US 9434680 B2).

^SN^/

Esquema 1 - Síntese da omadaciclina usando minociclina como substrato e N' -(hidroximetil)ftalimida como reagente.

A minociclina tem vários grupos funcionais reativos, sendo que a amida primária em C2 é mais reativa para eletrófilos do que C9 ou CIO (Fórmula 1). Devido a esta reatividade, o primiero passo do Esquema 1 requer quase três equivalentes de N(hidroximetil)-ftalimida em ácido tríflico, produzindo um derivado de tetraciclina aminometil-ftalimida bissubstituida. No segundo passo do Esquema 1, as ftalimidas são desprotegidas com um grande excesso de metilamina em solução alcoólica, para se obter um intermediário bissubstituido de aminometil tetraciclina. No terceiro passo do Esquema 1, o intermediário resultante é utilizado numa hidrogenação para formar um intermediário aminometil tetraciclina C9-substituído. No quarto passo do Esquema 1, o composto formado reage com pivaldeído em condições de hidrogenação para se obter a omadaciclina final. 0 produto é depois purificado por cromatografia de fase reversa, seguindo-se um ajuste de pH e precipitação, obtendo-se um sólido amorfo e instável. Para um processo de produção de larga escala, os desafios da instabilidade do intermediário aminometil e da etapa de purificação por cromatografia devem ser ultrapassados.

Uma via de síntese de três passos para a obtenção da omadaciclina é descrita por meio de uma derivação da reação de Friedel Crafts (reação de Tscherniac-Einhorn) usando um ião acilimínio como material de partida com 15 ~ 18% de rendimento geral (ver Esquema 2 e Chung, J. Y. L.; Hartner, F. W.; Cvetovich, R. J. Synthesis Development of an Aminomethylcycline Antibiotic via an Electronically Tuned Acyliminium Friedel-Crafts Reaction. Tetrahedron Lett. 2008, 49 (42), 6095-6100).

TfOH, 22 °C, 30 min

33%

50%

55:45 (α:β)

98:2 (α:β)

Purificação por HPLC preparativo

Esquema 2 - Síntese da omadaciclina utilizando minociclina como substrato e um reagente aciliminio preparado a partir do anidrido 2-cloroacético, paraformaldeído e neopentilamina.

reagente de aciliminio é preparado a partir da neopentilamina e paraformaldeído para se obter um triazano, seguido pelo tratamento com anidridos (Chung, J. Y. L.; Hartner, F. W.; Cvetovich, R. J. Synthesis Development of an Aminomethylcycline Antibiotic via an Electronically Tuned Acyliminium Friedel-Crafts Reaction. Tetrahedron Lett. 2008, 49 (42), 6095-6100; Taguchi, M.; Aikawa, N.; Tsukamoto, G. Reaction of Rifamycin S with Hexahydro-1,3,5-Triazines Prepared from Formaldehyde and Primary Aliphatic Amines. Buli Chem Soc Jpn 1988, 61, 2431-2436; Anderson, J. ; Casarini, D.; Ijeh, A. Eclipsed Conformation for Both Axial and Equatorial N-CH2 Bonds in N,Ν',N''-Tris(Neopentyl)1,3,5-Triazane. J. Am. Chem. Soc. 1995, 117 (11), 3054-3056). 0 ácido tríflico é o solvente utilizado, porque segundo Chung

J. et. al, soluções de minociclina em ácido triflico são estáveis à oxidação do ar, epimerização em C4 e outras formas de degradação. No primeiro passo do Esquema 2, o rendimento otimizado é de 83% usando 5 equivalentes de aciliminio a 35/40°C por 24 horas. 0 segundo passo consiste na remoção do grupo cloro-acetil, aquecendo o intermediário cloro-acetil em HC1 3N a 70°C por 20 horas. A retro-epimerização é realizada aquecendo a mistura racêmica de omadaciclina a 105°C em n-butanol aquoso na presença de cloreto de cálcio e etanolamina. O sólido amorfo resultante é instável em temperaturas acima de 0°C e quando exposto ao ar, portanto, é necessário preparar um sal estável. Os sais cristalinos da omadaciclina (mono-tosilato, bis HC1 e mesilato) são estáveis a 25°C (US 2018/0104262 Al). No entanto, nesta via de síntese, a etapa de purificação deve ser alterada de cromatografia para operações mais viáveis e rentáveis à escala industrial.

A US 9365500 B2 descreveu uma rota sintética para omadaciclina com base na reação de Tscherniac-Einhorn e é descrita no Esquema 3. No primeiro passo do Esquema 3, o intermediário aminometil pode ser sintetizado usando N'(hidroximetil) benzil carbamato em meio ácido em 25 °C por 24 horas usando minociclina como substrato. O segundo passo consiste na aminação redutiva do intermediário produzindo Omadaciclina (US 9365500 B2).

Esquema 3 - Preparação da omadaciclina utilizando a reação Tscherniac-Einhorn e N' - (hidroximetil) benzil carbamato como reagente.

Em 1983, Baillargeon et al (Baillargeon, V. ; Stille, J. Direct Conversion of Organic Halides to Aldehydes with Carbon Monoxide and Tin Hydride Catalyzed by Palladium. J. Am. Chem. Soo. 1983, 105, 7175) descreveu uma formilação, catalizada por paládio, de haletos de alquilo na presença de monóxido de carbono, formando aldeídos em bons rendimentos. Seyedi F. et al. Descreveu na patente US9522872 B2, um procedimento para a preparação de 9-iodo minociclina e subsequentemente de 9-formil minociclina com 99% de rendimento. 0 intermediário resultante reage depois com triacetoxiborohidreto de sódio para dar omadaciclina.

TFA, 25°C, 24h

CO, Pd(OAc)₃ Xantphos

Νθ2θθ3

NMP, Et₃SiH

Esquema 4 - Preparação da omadaciclina utilizando minociclina como substrato e N-iodo sucinimida para se obter

9-iodo minociclina, seguindo-se uma formilação com monóxido de carbono utilizando acetato de paládio, para se obter 9formil minociclina. 0 terceiro passo consiste na aminação redutiva do grupo formil com a neopentilamina.

Ά omadaciclina demonstrou ser segura e muito eficaz contra bactérias Gram-positivas e Gram-negativas multirresistentes, mas, até ao momento, todos os métodos descritos para sintetizar compostos de 9-aminometil tetraciclina apresentam baixos rendimentos, baixa seletividade e grande dificuldade nas etapas de purificação. Para um método sintético à escala industrial, ainda há necessidade de otimização para se obter melhores rendimentos e com redução de impurezas na preparação deste tipo de fármaco. Esta invenção apresenta um novo método usando estratégias químicas inovadoras. Fazendo uso de tecnologias de fluxo contínuo, os inventores aproveitaram a intensificação do processo (por exemplo, altas temperaturas e pressão) e melhor transferência de massa e calor para aumentar a seletividade e superar os desafios de purificação, baixos rendimentos e o isolamento de um intermediário instável. Além disso, mantendo os conceitos da química verde em mente, os inventores desenvolveram um método que escolhe solventes e reagentes com menos impacto ecológico sempre que possível.

Os inventores procuraram desenvolver métodos novos, mais ecológicos, baratos e melhores para sintetizar 9-aminometil tetraciclinas especialmente a omadaciclina, cujos métodos podem beneficiar pacientes, empresas e o meio ambiente. Ά presente invenção atende a estes objetivos, uma vez que apresenta um método que reduz ou elimina um ou mais dos problemas dos métodos conhecidos, conforme descrito acima.

De acordo com a presente invenção, os inventores desenvolveram um método que pode ser operado como um processo semi-continuo ou continuo, cujo método é utilizado para preparar compostos de amino-alquil tetraciclina, como 9aminometil minociclina, da maneira mais ecologica possível, reduzindo tempo e desperdício. Os inventores descobriram que é possível usar solventes mais ecologicos, evitar a degradação de intermediários sensíveis e controlar a formação de epímeros utilizando tecnologias de química de fluxo, o que permite obter compostos de aminometil tetraciclina com pureza acima de 50%, preferencialmente entre 70 e 80% e mais preferencialmente entre 81 e 100%. Além disso, rendimentos globais (também conhecidos como rendimentos acumulados) acima de 30%, preferencialmente entre 50 e 70%, e mais preferencialmente entre 71 e 100%. Um exemplo de um composto de aminometil tetraciclina que pode ser preparado pelo método da presente invenção é a omadaciclina.

Descrição da Invenção

De acordo com um aspeto da presente invenção, é apresentado um método para sintetizar compostos de 9-aminometil tetraciclina de acordo com a Fórmula 3, em que R é um hidrogénio ou um grupo alquil de cadeia linear Cl a CIO, um grupo alquil de cadeia ramificada C3-C20, um grupo alquil substituído, (opcionalmente substituído por pelo menos um halogênio, grupos hidroxilo, cetonas e éteres), um grupo aril C3 a CIO ou C6 a CIO, um grupo aril C3 a CIO ou C6 a CIO substituído(opcionalmente substituído por pelo menos um halogênio, grupos hidroxilo, cetonas e éteres) ou um grupo heteroaril C3 a CIO compreendendo pelo menos um átomo de oxigénio, azoto, enxofre ou fósforo

Ν Ν

Fórmula 3 - Estrutura geral dos compostos 9-aminometil tetraciclina.

o método compreendendo:

a) reagir minociclina e um derivado de hidroximetilamida para formar uma minociclina 2,9-(substituída com metilamida) e uma minociclina 2-(substituída com metilamida);

b) reagir a minociclina 2,9-(substituída com metilamida) do passo a) e uma amina ou diamina para formar um intermediário 9-aminometil tetraciclina; e

c) reagir o intermediário 9-aminometil tetraciclina da etapa b) e um aldeído na presença de um agente redutor para formar um composto 9-aminometil tetraciclina; ou

d) reagir o intermediário 9-aminometil tetraciclina da etapa b) e um haleto de alquil ou um reagente de alquil para formar um composto 9-aminometil tetraciclina.

método da presente invenção é um método de várias etapas que utiliza uma substituição eletrofílica aromática entre a minociclina e um derivado de hidroximetilamida na etapa a) para fornecer uma minociclina 2,9-(substituída com metilamida), uma reação de aminólise entre a 2,9 minociclina (substituída com metilamida) e uma amina ou diamina na etapa b) para gerar um intermediário de 9-aminometil tetraciclina e uma reação de aminação redutiva entre o intermediário de 9-aminometil com um aldeído, um agente redutor na etapa c) ou N '-alquilação entre o intermediário 9-aminometil e um haleto de alquil ou um reagente de alquil na etapa d) para formar o composto 9-aminometil tetraciclina desejado. 0 termo síntese química em várias etapas, conforme utilizado neste documento, refere-se geralmente a um método sintético que compreende várias reações químicas. 0 termo não se destina a abranger um método sintético em que apenas uma reação química pode ser realizada em várias etapas.

derivado de hidroximetilamida utilizado na etapa a) pode estar de acordo com a Fórmula 4

O RÍ^N^OH R₂

Fórmula 4 em que Ri é um grupo alquil de cadeia linear C1-C10, um grupo alquil de cadeia ramificada C3-C20, um grupo alquenil de cadeia linear C2-C10, um grupo alquenil de cadeia ramificada C3-C20, um grupo alquinil de cadeia linear C2-C10, um grupo alquinil de cadeia ramificada C3-C20, um grupo aril C3 a CIO ou C6 a CIO, um grupo heteroaril C3 a CIO compreendendo pelo menos um átomo de oxigénio, azoto, enxofre ou fósforo, ou um halogénio selecionado entre cloro, bromo e iodo; e R2 é um grupo alquil de cadeia linear C1-C10, um grupo alquil de cadeia ramificada C3-C20, um grupo alquenil de cadeia linear C2-C10, um grupo alquenil de cadeia ramificada C3-C20, um grupo alquinil de cadeia linear C2-C10, um grupo alquinil de cadeia ramificada C3-C20, um grupo aril C3 a CIO ou C6 a CIO ou um grupo heteroaril C3 a CIO compreendendo pelo menos um átomo de oxigénio, azoto, enxofre ou fósforo. R2 está opcionalmente ligado a Ri para formar um anel de 4-8 membros, em que o anel pode ser opcionalmente substituído e compreender átomos de carbono e/ou heteroátomos, tais como oxigénio, azoto e enxofre. Opcionalmente, o derivado de hidroximetilamida na etapa a) é N'-hidroximetil-ftalimida.

termo alquil, conforme aqui utilizado é um termo geral que se refere a um grupo derivado de um alcano pela remoção de um átomo de hidrogénio de qualquer átomo de carbono do alcano, inclui grupos alifáticos saturados, incluindo grupos alquil de cadeia linear (por exemplo, metil, etil, propil, butil, pentil, etc.), grupos alquil de cadeia ramificada (por exemplo, isopropil, terc-butil, isobutil, etc.), e grupos cicloalquil (por exemplo, ciclopropil, ciclopentil, etc). 0 termo grupo alquil substituído inclui grupos alquil, que podem incluir ainda átomos de oxigénio, azoto, enxofre ou fósforo.

termo aril, conforme aqui utilizado é um termo geral que se refere a qualquer grupo aromático derivado de um areno (também conhecido como hidrocarboneto aromático) pela remoção de um átomo de hidrogénio de qualquer átomo de carbono de um aromático.

A amina ou diamina utilizada na etapa b) pode estar de acordo com a Fórmula 5

NHR3R4

Fórmula 5 em que R3 e R4 é um átomo de hidrogénio, um grupo alquil de cadeia linear C1-C10, um grupo alquil de cadeia ramificada C3-C20 ou um grupo alquil substituído (opcionalmente substituído com álcoois ou éteres). De preferência, R3 e R4 são selecionados de um grupo alquil de cadeia linear C1-C4, um grupo alquil de cadeia ramificada C3-C4 ou um grupo alquil substituído. Opcionalmente, a amina ou diamina na etapa b) é selecionada de metilamina, etanolamina e n-propilamina.

Um excesso de amina ou diamina pode ser utilizado na etapa b) . Opcionalmente, o excesso de amina ou diamina pode ser removido continuamente antes da etapa c) ou d).

Em contraste com alguns métodos da técnica anterior, a etapa b) pode ser operada na ausência de uma reação de hidrogenação. Isto é, a reação da minociclina 2,9(substituída com metilamida) e uma amina ou diamina forma diretamente um intermediário 9-aminometil tetraciclina sem a necessidade de realizar uma reação de hidrogenação em um composto para formar o intermediário.

aldeído utilizado na etapa c) pode estar de acordo com a Fórmula 6

RsCOH

Fórmula 6 em que R5 é um hidrogénio, um grupo alquil de cadeia linear C1-C10, um grupo alquil de cadeia ramificada C3-C20, um grupo alquil substituído (opcionalmente substituído com álcoois ou éteres), um grupo aril C3 a CIO ou C6 a CIO, um grupo aril C3 a CIO substituído ou um grupo heteroaril C3 a CIO compreendendo pelo menos um átomo de oxigénio, azoto, enxofre ou fósforo.

Opcionalmente, o aldeído utilizado na etapa c) é selecionado de pivaldeído, acetaldeído e benzaldeído.

agente redutor utilizado na etapa c) pode ser um agente redutor imobilizado, opcionalmente cianoborohidreto de sódio imobilizado.

Quando um haleto de alquilo é utilizado na etapa d), o haleto de alquila pode estar de acordo com a Fórmula 7

R₆X

Fórmula 7 em que Rg pode ser um grupo alquil de cadeia linear C1-C10, um grupo alquil de cadeia ramificada C3-C20, um grupo alquil substituído, um grupo aril C3 a CIO ou C6 a CIO, um grupo aril C3 a CIO ou C6 a CIO substituído ou um grupo heteroaril C3 a CIO; compreendendo pelo menos um átomo de oxigénio, azoto, enxofre ou fósforo e X é um halogénio selecionado entre cloro, bromo e iodo. Opcionalmente, o haleto de alquil utilizado na etapa d) compreende l-cloro-2,2-dimetilpropano, l-bromo-2,2-dimetilpropano ou l-iodo-2,2-dimetilpropano.

Quando um reagente alquil é utilizado na etapa d), o reagente alquil pode ter um bom grupo abandonante, como mesil ou tosil. Opcionalmente o reagente alquil é neopentil 4metilbenzenosulfonato, neopentil metanosulfonato ou misturas dos mesmos.

A reação na etapa c) ou d) pode ser realizada na presença de um aceitador de protões, opcionalmente um aceitador de protões selecionado de trietilamina, amónia e 4dimetilaminopiridina.

A reação na etapa c) pode ser realizada na presença de um ácido orgânico, tal como ácido fórmico ou ácido acético, um ácido inorgânico ou suas misturas.

Um método pode ser definido como um processo de fluxo continuo quando há uma alimentação contínua de reagentes/materiais de partida a um reator com uma corrente contínua de produto a sair do reator. Os processos de fluxo contínuo utilizam equipamentos, materiais e condições que permitem que as sínteses químicas sejam realizadas em modo contínuo utilizando reatores de fluxo. Um procedimento de fluxo contínuo aqui utilizado não compreende o procedimento tradicional de síntese química em lote.

método da presente invenção pode ser um processo de fluxo semicontínuo ou contínuo. Assim, num processo de fluxo contínuo, toda a sequência sintética do método da presente invenção pode ser realizada a partir da minociclina reagida na etapa a) ao composto de 9-aminometil tetraciclina formado na etapa d) sem o uso de reatores descontínuos, sem a necessidade de isolar o intermediário 9-aminometil tetraciclina formado na etapa b) e na ausência de uma reação de hidrogenação antes da etapa c) ou d) . Alternativamente, em um processo de fluxo semicontinuo, duas das etapas a), b) e c) ou d) podem ser realizadas sem o uso de reatores descontínuos, sem a necessidade de isolar produtos intermediários entre as etapas da reação. As etapas a) e b) do método da presente invenção podem operar de maneira contínua, as etapas b) e c) do método da presente invenção podem operar de maneira contínua, ou as etapas b) e d) da método da presente invenção pode operar de maneira contínua. Quando as etapas b) e c) ou as etapas b) e d) operam de maneira contínua, o intermediário 9-aminometil tetraciclina formado na etapa b) pode ser utilizado diretamente na etapa c) ou d).

Num processo semi-contínuo, nem todos os passos da presente invenção precisão ser realizados em regime contínuo. Num process contínuo, todos os passos reacionais poderão ser realizados num único reator contínuo ou em múltiplos reatores contínuos interligados.

passo a) do método da presente invenção, poderá compreender a alimentação contínua de uma solução ou suspensão contendo Minociclina e de outra solução ou suspensão contendo um derivado de hidroximetilamida, num solvente adequado ou mistura de solventes, para um reator contínuo que produz continuamente uma solução ou suspensão contendo 2,9(metilamida substituída) minociclina recolhida à saída do reator.

passo b) do método da presente invenção poderá compreender a alimentação contínua de uma solução ou suspensão contendo 2,9-(metilamida substituída) minociclina e de outra solução ou suspensão contendo uma amina ou diamina, num solvente adequado ou mistura de solventes, para um reator contínuo que produz continuamente uma solução ou suspensão contendo um intermediário derivado da 9-aminometil tetraciclina recolhida à saída do reator.

passo c) do método da presente invenção poderá compreender a alimentação contínua de uma solução ou suspensão contendo um intermediário derivado da 9-aminometil tetraciclina, uma solução ou suspensão de um composto pertencente ao grupo dos aldeídos, num solvente adequado, para um reator contínuo contendo um agente redutor para produzir continuamente uma solução ou suspensão contendo a desejada 9-aminometil tetraciclina recolhida à saída do reator. Alternativamente, o passo d) do método da presente invenção poderá conter a alimentação contínua de uma solução ou suspensão contendo um intermediário derivado da 9-aminometil tetraciclina, uma solução ou suspensão de um composto pertencente ao grupo dos alcanos halogenados ou outros alcanos substituídos num solvente adequado, para um reator contínuo que produz continuamente uma solução ou suspensão contendo a desejada 9-aminometil tetraciclina recolhida à saída do reator. Omadaciclina é um antibiótico que poderá ser produzido através do método reproduzido na Figura 1.

Surpreendentemente, foi descoberto que é possível preparar o intermediário derivado da 9-aminometil tetraciclina a partir da 2,9-(metilamida substituída) minociclina ao induzir a intensificação do processo, como por exemplo usar altas temperaturas em curtos espaços de tempo, coisa que só é possível utilizando tecnologias contínuas de processo.

tempo de residência das reações dos passos a), b) , e c) ou d) poderá cerca de 2 horas ou menos, preferencialmente entre 1 minuto e as 2 horas. Os tempos de residência poderão ser diferentes para cada passo reacional.

tempo de residência dos reagentes para um dado comprimento do reator contínuo associado ao passo a) substituição eletrofilica aromática, ao passo b) aminólise, ao passo c) aminação redutiva ou passo d) Ν'-alquilação poderão variar entre 1 minuto a 2 horas. 0 rendimento para cada passo reacional poderá ser 5% ou mais, preferencialmente de 50% ou mais, e mais preferencialmente 80% ou mais. A pureza cromatográfica do crude reacional dos passos a) e b) deverá ser 50% ou mais, preferencialmente de 80% ou mais.

Os solventes utilizados no método da presente invenção poderão ser solventes orgânicos comuns, solventes aquosos, água ou misturas. Qualquer solvente ou misturas de solventes compatíveis com o equipamento e reações poderá ser utilizado. O sistema de solventes utilizado poderá conter colóides ou emulsões. O sistema de solventes utilizado poderá conter alcóois, água ou uma mistura dos dois. Poderá conter solventes orgânicos miscíveis com água, água, ou uma mistura dos dois. Poderá também conter solventes orgânicos imiscíveis em água em contacto ou não com água. Quaisquer combinações específicas dos solventes acima mencionados poderão ser usadas. Os passos do método da presente invenção poderão ser realizados com diferentes solventes e quando necessário, pequenos ajustes do solvente/composição de solventes ou troca de solvente poderá ser efetuada de uma maneira contínua sem ser necessário o isolamento dos intermediários de reação.

A minociclina usada no passo a) poderá estar em solução ou suspensão, opcionalmente a solução ou suspensão compreendendo um solvente ou mistura de solventes pertencente ao grupo dos ácidos orgânicos ou ácidos minerais como ácido sulfúrico, ácido metanosulfónico, ácido triflico e ácido sulfúrico fumegante 65% SO3.

Opcionalmente, no passo a) a solução ou suspensão da minociclina em ácido sulfúrico terá concentrações entre 130230 mg/mL.

derivado de hidroximetilamida utilizado no passo a) poderá estar em solução ou suspensão que opcionalmente poderá conter um solvente ou mistura de solventes pertencentes ao grupo dos ácidos orgânicos ou mineirais como o ácido sulfúrico, ácido metanosulfónico, ácido triflico, ácido sulfúrico fumegante 65% SO3. Opcionalmente a solução ou suspensão do derivado de hidroximetilamida em ácido sulfúrico deverá ter concentrações entre 100-160 mg/mL.

A minociclina e o derivado de hidroximetilamida poderão reagir ambos em soluções, um em solução e o outro em suspensão, ou ambos em suspensão. Adicionalmente, a minociclina e o derivado de hidroximetilamida poderão estar em solução ou suspensão contendo o mesmo solvente, ou mistura de solventes, ou ter solventes ou mistura de solventes diferentes.

A 2,9-(metilamida substituída) minociclina usada no passo b) poderá estar em solução ou suspensão, que opcionalmente poderá conter um solvente pertencente ao grupo dos álcoois, como por exemplo álcool benzílico ou pertencente ao grupo dos solventes polares apróticos como dimetilsulfóxido, dimetilformamida, diclorometano ou misturas dos mesmos solventes. Opcionalmente, a solução ou suspensão da 2,9(metilamida substituída) minociclina com uma concentração entre 50-200 mg/mL poderá ser usada no passo b). A amina ou diamina usada no passo b) poderá estar em solução ou suspensão, que opcionalmente poderá conter um solvente pertencente ao grupo dos álcoois, como por exemplo álcool benzílico ou pertencente ao grupo dos solventes polares apróticos como dimetilsulfóxido, dimetilformamida, diclorometano ou misturas dos mesmos solventes. Opcionalmente, no passo b) a solução ou suspensão da amina ou diamina terá uma concentração entre 50-200 mg/mL.

A 2,9-(metilamida substituída) minociclina e a amina ou diamina poderão reagir ambos em soluções, um em solução e o outro em suspensão, ou ambos em suspensão.

Além disso, a minociclina 2,9-(substituída com metilamida) e a amina ou diamina podem estar em soluções ou suspensões compreendendo o mesmo solvente ou misturas de solventes, ou solventes diferentes, ou combinações diferentes de solventes

Além do mais, a 2,9-(metilamida substituída) minociclina e a amina ou diamina poderão estar em soluções ou suspensões com as mesmas ou diferentes concentrações.

intermediário de 9-aminometil tetraciclina utilizado no passo c) ou d) poderá estar em solução ou suspensão, que opcionalmente poderá conter um solvente pertencente ao grupo dos álcoois, como por exemplo álcool benzílico ou pertencente ao grupo dos solventes polares apróticos como dimetilsulfóxido, dimetilformamida, diclorometano ou misturas dos mesmos solventes. Opcionalmente, a solução ou suspensão o intermediário de 9-aminometil tetraciclina poderá estar a concentrações entre 20-100 mg/mL para ser usada no passo c) ou d) . O aldeído utilizado no passo c) poderá estar em solução ou suspensão, que opcionalmente poderá conter um solvente pertencente ao grupo dos álcoois, como por exemplo álcool benzílico, metanol, ou etanol ou pertencente ao grupo dos solventes polares apróticos como dimetilsulfóxido, dimetilformamida, diclorometano ou misturas dos mesmos solventes. Opcionalmente, no passo c) a solução ou suspensão do aldeído terá uma concentração entre 5-100 mg/mL. Assim, o intermediário de 9-aminometil tetraciclina e o aldeído poderão reagir ambos em soluções, um em solução e o outro em suspensão, ou ambos em suspensão. Além disso, o intermediário 9-aminometil tetraciclina e o aldeído podem estar em soluções ou suspensões compreendendo o mesmo solvente ou misturas de solventes, ou diferentes solventes, ou diferentes combinações de solventes.

Além do mais, o intermediário de 9-aminometil tetraciclina e o aldeído poderão estar em soluções ou suspensões com as mesmas ou diferentes concentrações.

A concentração das soluções ou suspensões usadas em cada passo do método da presente invenção dependerá da solubilidade dos reagentes a serem usados.

Uma vantagem em utilizar o método da seguinte invenção em regime contínuo, utilizando reatores contínuos, como por exemplo reatores tubulares, o volume de solvente é reduzido comparativamente aos usados em regime descontínuo. Esta vantagem leva a que haja uma subsequente dimuição de efluentes, fazendo com que o método seja mais amigo do ambiente.

uso de reatores em contínuo poderá trazer a vantagem de realizar-se reações químicas com uma maior seletividade, rendimento e pureza e para além do mais poderá reduzir os efluentes, sendo uma tecnologia amiga do ambiente. Em muitos casos, as tecnologias contínuas poderão reduzir os custos e tempo de processo necessário para produzir um determinado produto pois esta tecnologia permite a intensificação de processo (uso de temperaturas e pressões elevadas). 0 regime em contínuo envolve a alimentação de um ou mais fluidos contendo um ou mais precursores/matéria-prima num sistema de fluxo contendo por exemplo um reator por exemplo tubular, que permitirá a mistura eficiente e deslocação dos fluidos, onde ocorrerá a reação química desejada.

uso de tecnologias contínuas oferece a possibilidade de se usar temperaturas e pressões que não são prontamente atingíveis em processos descontínuos. 0 uso de temperaturas e pressões elevadas pode facilitar a conversão da espécie precursora em um produto de reação, sem necessidade de aditivos ou catalisadores.

Em alguns casos, as reações nos passos a), b) e c) ou d) são realizadas a uma temperatura de pelo menos 10°C, pelo menos 20° C pelo menos 75°C, pelo menos 100°C, pelo menos 125°C, a pelo menos 150°C, pelo menos 175°C, pelo menos 200°C, pelo menos 225°C, pelo menos 250°C, pelo menos 275°C, pelo menos 300°C, ou, em alguns casos, maior. As reações químicas dos passos a), b) e c) ou d) são realizadas a uma temperatura de 20°C a 150°C. A reação do passo a) é realizada em temperaturas de 25°C a 200°C, ou de 25°C a 50°C. A reação do passo b) é realizada em temperaturas de 25°C a 200°C, ou de 100°C a 200°C. A reação do passo c) é realizada a temperaturas de pelo menos 10°C, ou de 20°C a 80°C. A reação do passo d) é realizada em temperaturas de 25°C a 200°C, ou de 20°C a 50°C.

Em alguns casos, as reações nos passos a), b) e c) ou d) são realizadas a uma pressão de pelo menos 100 psi (689 KPa), pelo menos 125 psi (862 KPa), pelo menos 150 psi (1034175 KPa) ), pelo menos 175 psi (1207 KPa), pelo menos 200 psi (1379 KPa), pelo menos 225 psi (1551 KPa), pelo menos 250 psi (1724 KPa), pelo menos 275 psi (1896 KPa), pelo menos 300 psi (2068 KPa), pelo menos 400 psi (2758 KPa), pelo menos 500 psi (3447 KPa), ou, em alguns casos, maior. Opcionalmente, as reações nos passos a) , b) e c) ou d) são realizadas a uma pressão de 689 a 3447 KPa

O termo sistema de fluxo contínuo é usado para se referir a um sistema que compreende um ou mais reatores que permitem que reações químicas ocorram em um fluxo contínuo. O método da presente invenção pode ser realizado em um reator tubular, um microchip, um reator de placa continua, um reator de leito empacotado, um reator de tanque agitado continuo (CSTR), ou outro reator de fluxo continuo comercialmente disponível, ou uma combinação de dois ou mais desses reatores para formar um sistema de fluxo contínuo. 0 sistema de fluxo poderá ser desenhado e fabricado para ser capaz de suportar uma ampla gama de solventes e condições químicas, incluindo alta temperatura, alta pressão, exposição a vários solventes e reagentes.

Um reator de fluxo contínuo pode ser feito de qualquer material compatível adequado compreendendo vidro, diferentes tipos de polímeros (PFA Perfluoroalkoxy alkaneperfluoroalcóxialcano, ETFE Ethylene tetrafluoroethylene - etileno tetrafluoretileno, PEEK Polyether ether ketone - Poli (éter-éter-cetona) , etc), Hastelloy®, aço inoxidável e/ou uma ou mais ligas de alto desempenho. 0 reator de fluxo contínuo pode compreender uma ferramenta para promover a mistura dos fluidos. A um reator de fluxo contínuo poderá ser alimentado suspensões adequadas para serem submetidas a temperatura ou faixa de temperatura e/ou pressão. Quando um ou mais dos mesmos reatores de fluxo contínuo ou uma combinação dos diferentes reatores de fluxo contínuo listados acima são usados, os reatores podem ser conectados um ao outro de modo que a comunicação de fluido seja possível. Com relação ao termo conectado, isso deve ser entendido como significando que os reatores de fluxo contínuo não precisam necessariamente ser conectados diretamente um ao outro, mas os reatores devem estar em comunicação fluida com pelo menos um outro reator. No entanto, se desejado, os reatores podem ser diretamente ligados um ao outro.

Uma das vantagens de usar um reator de leito empacotado é que este tipo de reator proporciona uma molaridade efetiva mais alta de quaisquer reagentes imobilizados, diminuindo assim os tempos de reação. Além disso, qualquer reagente imobilizado está contido na matriz e, consequentemente, não é necessário separar a mistura de reação desses reagentes. Em alguns casos, o perfil de reação (por exemplo, tempo de reação, rendimento global, distribuição de produtos de reação, etc) pode ser substancialmente independente do volume de amostra de fluido, de modo que a reação química possa ser realizada em escalas maiores sem alteração substancial no perfil de reação.

método da presente invenção compreende pelo menos um passo de reação química realizada continuamente com isolamento do produto. Além disso, o método da presente invenção pode compreender pelo menos dois passos de reação química realizadas no modo contínuo sem isolamento de um intermediário de reação. Poderá efetuar-se a mudança de solvente e/ou remoção de um excesso de um reagente entre os passos reacionais. Além disso, o produto do passo de reação b) é um intermediário que é usado como reagente no passo de reação c) para preparar o produto desejado.

Se desejado, o método da presente invenção pode incluir um ou mais passos adicionais. Os passos adicionais podem compreender um ou mais passos de lavagem, um ou mais passos de purificação, um ou mais passos de isolamento ou combinações dos mesmos.

Quando são usados reatores de fluxo contínuo, as condições dentro de um ou mais reatores de fluxo contínuo podem ser controladas. Isso pode ser feito, por exemplo, para permitir que uma determinada reação ocorra ou para obter uma taxa de reação desejada. Controlar as condições dentro de um ou mais reatores de fluxo contínuo pode compreender ajustar ou alterar um ou mais dos seguintes: as temperaturas dentro do(s) reator(es) de fluxo contínuo; as pressões dentro do(s) reator(es) de fluxo continuo; os solventes ou sistemas de solventes dentro do(s) reactor(es) de fluxo; e taxas de fluxo dentro do(s) reator (es) de fluxo contínuo. A concentração de cada uma das soluções ou suspensões utilizadas em cada passo a), b) e c) ou d) influencia o caudal, o tempo de residência e a proporção dos reagentes. Portanto, ajustar ou alterar a concentração de cada uma das soluções ou suspensões usadas em cada um dos passos a) , b) e c) ou d) também pode ajudar a controlar as condições dentro de um ou mais reatores de fluxo contínuo.

caudal de reagentes alimentado através de um reator de fluxo contínuo pode ser controlado, alterado ou ajustado dependendo da reação realizada dentro do reator. A taxa de fluxo de reagentes pode ser diferente ao longo de uma ou mais distâncias selecionadas de um reator de fluxo contínuo. 0 caudal de reagentes associado a um passo de reação pode afetar a taxa de fluxo associada à etapa de reação subsequente. Os reagentes podem ser alimentados ao longo de uma distância selecionada de um reator de fluxo contínuo em diferentes taxas de fluxo. As taxas de fluxo de reagentes através do reator de fluxo contínuo podem ser controladas, ajustadas ou alteradas usando bombas.

termo reação refere-se à formação de uma ou mais ligações entre dois ou mais componentes para produzir um composto isolável estável (reação intermolecular) ou à formação de uma ou mais ligações entre duas ou mais partes do mesmo molécula para formar um composto estável e isolável (reação intramolecular). Ou seja, o termo reagir não se refere à interação de solventes, catalisadores ou outros materiais, que possam ser utilizados para promover a ocorrência da reação dos reagentes.

Cada reação é realizada em um ambiente heterogéneo ou homogéneo. Os reatores de fluxo contínuo podem ser adaptados para realizar reações em um ambiente heterogéneo e/ou homogéneo. Em particular, um ou mais reatores de fluxo contínuo podem ser adaptados para realizar reações heterogéneas e/ou homogéneas. Por exemplo, os reatores de fluxo contínuo podem compreender (por exemplo, dentro de seus orifícios) um ou mais reagentes ou catalisadores. Os catalisadores podem ser homogéneos ou heterogéneos em relação aos reagentes, reagentes e/ou solventes.

A velocidade de reação de cada passo reacional, o caudal dos reagentes, e caudal de solvente através de cada um dos sistemas de fluxo, podem ser ajustados de modo que o fluxo através de todo o sistema da presente invenção não exija o uso de tanques de retenção em estágios intermediários. Embora, em certas circunstâncias, o uso de tanques de retenção em entre certas operações possa ser uma opção.

Quando são usados reatores de fluxo contínuo, a(s) sua(s) saída(s) pode(m) ser cuidadosamente controlada(s) de modo que a composição em relação ao intermediário, reagentes, impurezas e solventes, etc., seja adequada para ser alimentada em reatores contínuos subsequentes para permitir condições de reação ideais.

Quando um sistema de fluxo contínuo é usado, as condições no sistema contínuo (por exemplo, sistemas compreendendo vários reatores tubulares) podem variar. Em particular, as condições podem variar de condições de reação homogéneas a condições heterogéneas. Por exemplo, uma reação heterogénea pode ser usada na reação de aminação redutiva no passo c) onde o reator de fluxo contínuo, tal como um reator tubular, é preenchido com um catalisador heterogéneo. 0 catalisador heterogéneo pode, por exemplo, ser um agente redutor.

Além disso, etapas contínuas de extração/lavagem com solvente ou purificação por membrana podem ser aplicadas para remover impurezas, reagentes em excesso ou outros materiais indesejáveis, que podem ser prejudiciais às reações químicas subsequentes ou à pureza do produto final. A pressão em cada um dos reatores dentro de um sistema de fluxo pode ser atmosférica ou acima da pressão atmosférica e as temperaturas podem variar desde abaixo da ambiente até acima de 200°C.

A purificação, o isolamento e a secagem do produto final, quando necessário, também podem ser realizados de forma contínua usando processos contínuos de extração, membranas, cristalização, filtração e secagem.

Descrição das figuras

Figura 1 Método da invenção (I) Compostos minociclina 2,9-(metilamida) substituídos (II) Intermediários 9-aminometil tetraciclina (III) Compostos 9-aminometil tetraciclina (IV) Omadaciclina

Figura 2 configuração do exemplo 1

1. Frasco A 2. Frasco B 3. Bomba HPLC #1 4. Bomba HPLC #2 5. Misturador estático 6. Reactor tubular #1 7. Reactor tubular #2 8. Frasco de produto TI indicador de temperatura

Figura 3 configuração do exemplo 2

1. (Frasco) 2-9'-Metilftalimida minociclina

2. (Frasco) Metilamina

3. Bomba de HPLC #1

4. Bomba de HPLC #2

5. Misturador estático #1

6. Reator tubular #1

7. Reator tubular #2

8. Regulador de pressão #1

9. (Operação) Evaporação da metilamina

10. (Frasco) 9-Aminometil minociclina

11. Bomba de HPLC #3

12. Bomba de HPLC #4

13. (Frasco) Pivaldeido

14. Misturador estático #2

15. Regulador de pressão #2

16. (Operação) Purificação

TI indicador de temperatura

PI indicador de pressão

Exemplos

Exemplo 1

As experiências de fluxo contínuo foram realizadas usando a configuração na Figura 2. Ά solução A foi preparada por dissolução de minociclina (10,00 g) em ácido sulfúrico (50 mL) . A solução B foi preparada dissolvendo Ν'(hidroximetil)ftalimida (7,75 g) em ácido sulfúrico (50 mL).

As soluções A e B foram alimentadas a um reator tubular numa proporção de 2:1 para atingir 5 minutos de tempo de residência (504 pL) a 80 °C. A solução resultante apresentou uma conversão de 100% do resultando em 50% de 2,9metilftalimida minociclina e 50% de 2-metilftalimida minociclina.

Exemplo 2

As experiências de fluxo contínuo foram realizadas usando a configuração na Figura 3.

A soluçãoA foi preparada por dissolução de 2,9metilftalimida minociclina (15,00 g) em álcool benzilico (150 mL). A solução B foi preparada misturando solução etanólica de metilamina (33%) (41,85 g) e álcool benzilico (94,65 mL) . As soluções A e B foram alimentadas em uma proporção de 1:1 para atingir 6 minutos de tempo de residência em um reator tubular (10 mL) a 115°C e 7 bar (700 KPa) de pressão. A solução contendo produto foi recolhida à saída em um frasco de fundo redondo contendo etanol absoluto (200 mL) a 30°C. A destilação da mistura forneceu uma solução com uma quantidade residual de metilamina (solução C) . A solução D foi preparada misturando pivaldeído (4,90 mL) , trietilamina (2,52 mL) e álcool benzilico (292,6 mL) . As soluções C e D foram alimentadas em uma proporção de 1:1 e completamente misturadas para atingir 30 minutos de tempo de residência em um reator de leito empacotado contendo cianoborohidreto de sódio imobilizado (25 g) a uma temperatura de 25°C. Uma vez que o estado estacionário fora alcançado, a solução contendo produto foi recolhida para analise por HPLC. A solução resultante apresentou uma conversão de 78%.

Claims (31)

1. Um método para sintetizar compostos de 9-aminometil tetraciclina de acordo com a Fórmula 3,

OH

H

R.

NH₂

Fórmula 3

OH OH O OH O O em que R é um hidrogénio ou um grupo alquil de cadeia linear Cl a CIO, um grupo alquil de cadeia ramificada C3-C20, um grupo alquil substituído, um grupo aril C3 a CIO, um grupo aril C3 a CIO substituído, um grupo aril C6 a CIO substituído ou um grupo heteroaril C3 a CIO compreendendo pelo menos um átomo de oxigénio, nitrogénio, enxofre ou fósforo caracterizado pelo facto de compreender:

a) reagir a minociclina e um derivado de hidroximetilamida a uma temperatura de 25 °C a 50 °C para formar uma 2,9(metílamída substituída) minociclina e 2-(metilamida substituída) minociclina;

b) reagir a minociclina 2,9-(metilamida substituída) minociclina do passo a) e uma amina ou diamina a uma temperatura de 100 °C a 200 °C para formar um intermediário de 9-aminometil tetraciclina; e

c) reagir o intermediário 9-aminometil tetraciclina do passo b) e um aldeído na presença de um agente redutor a uma temperatura de 20 °C a 80 °C para formar um composto 9-aminometil tetraciclina; ou

d) reagir o intermediário 9-aminometil tetraciclina do passo b) e um halogeneto de alquilo ou um reagente alquilo a uma temperatura de 20 °C a 50 °C para formar um composto 9-aminometil tetraciclina, caracterizado pelo facto de que o método é um processo de fluxo semicontínuo ou contínuo.

2. Método, de acordo com a reivindicação 1, caracterizado pelo facto de que o passo b) é operado na ausência de uma reação de hidrogenação.

3. Método, de acordo com a reivindicação 2, caracterizado pelo facto de que (i) os passos a) e b) do método da presente invenção operam de maneira continua, (ii) os passos b) e c) do método da presente invenção operam de maneira continua, ou (iii) os passos b) e d) do método da presente invenção operam de maneira continua.

4. Método, de acordo com a reivindicação 2 ou 3, caracterizado pelo facto de que o tempo de residência das reações nos passos a), b) e c) ou d) é de 2 horas ou menos.

5. Método, de acordo com a reivindicação 2, 3 ou 4, caracterizado pelo facto de que as reações nos passos a), b) e c) ou d) são realizadas em um reator tubular, um microchip, um reator de placa continua, um reator de leito empacotado, um reator de tanque agitado continuo (CSTR) ou outro reator de fluxo continuo comercialmente disponível ou uma combinação de dois ou mais desses reatores.

6. Método, de acordo com qualquer reivindicação anterior, caracterizado pelo facto de que a minociclina no passo a) está em solução ou suspensão, opcionalmente em que a solução ou suspensão compreende um solvente selecionado de um ácido orgânico ou ácido mineral tal como ácido sulfúrico, ácido metanossulfônico, ácido tríflico, ácido sulfúrico fumegante 65% S03 ou suas misturas.

7. Método, de acordo com qualquer reivindicação anterior, caracterizado pelo facto de que o derivado de hidroximetilamida no passo a) está em solução ou suspensão, opcionalmente em que a solução ou suspensão compreende um solvente selecionado a partir de um ácido orgânico ou mineral, tal como ácido sulfúrico, ácido metanossulfônico, ácido tríflico, vapor de ácido sulfúrico 65 %S03.

8. Método, de acordo com qualquer reivindicação anterior, caracterizado pelo facto de que o derivado de hidroximetilamida no passo a) está de acordo com a Fórmula 4

O

R₂

Fórmula 4 em que RI é um grupo alquilo de cadeia linear C1-C10, um grupo alquilo de cadeia ramificada C3-C20, um grupo alceno de cadeia linear C2-C10, um grupo alceno de cadeia ramificada C3-C20, um grupo alcino de cadeia linear C2-C10, um C3 -grupo alcino de cadeia ramificada C20, um grupo aril C3 a CIO, , um grupo aril C6 a CIO, um grupo heteroaril C3 a CIO compreendendo pelo menos um átomo de oxigénio, nitrogénio, enxofre ou fósforo, ou um halogênio selecionado de cloro, bromo e iodo; e R2 é um grupo alquilo de cadeia linear C1-C10, um grupo alquilo de cadeia ramificada C3-C20, um grupo alceno de cadeia linear C2-C10, um grupo alceno de cadeia ramificada C3-C20, um grupo alcino de cadeia linear C2-C10, um grupo alquinil de cadeia ramificada C3C20, um grupo aril C3 a CIO, um grupo aril C6 a CIO, ou um grupo heteroaril C3 a CIO compreendendo pelo menos um átomo de oxigénio, nitrogénio, enxofre ou fósforo, opcionalmente em que R2 está ligado a R1 para formar um anel de 4-8 membros, e opcionalmente em que o anel é substituído e compreende átomos de carbono e/ou heteroátomos, tais como oxigénio, nitrogénio e enxofre.

9. Método, de acordo com qualquer reivindicação anterior, caracterizado pelo facto de que o derivado de hidroximetilamida no passo a) é Ν'-hidroximetil-ftalimida.

10. Método, de acordo com qualquer reivindicação anterior, caracterizado pelo facto de que a 2,9-(metilamida substituída) minociclina no passo b) está em solução ou suspensão, opcionalmente em que a solução ou suspensão compreende um solvente selecionado de um álcool, tal como álcool benzílico, ou um solvente polar aprótico como o dimetilsulfóxido, dimetilformamida, diclorometano ou suas misturas.

11. Método, de acordo com qualquer reivindicação anterior, caracterizado pelo facto de que a amina ou diamina no passo b) está em solução ou suspensão, opcionalmente em que a solução ou suspensão compreende um solvente selecionado de um álcool, tal como álcool benzílico, um solvente polar aprótico como o dimetilsulfóxido, dimetilformamida, diclorometano ou suas misturas.

12. Método, de acordo com qualquer reivindicação anterior, caracterizado pelo facto de que a amina ou diamina no passo b) está de acordo com a Fórmula 5

NHR3R4

Fórmula 5 em que R3 e R4 é um átomo de hidrogénio, um grupo alquilo de cadeia linear C1-C10, um grupo alquilo de cadeia ramificada C3C20 ou um grupo alquilo substituído, preferencialmente, R3 e R4 são selecionados de um grupo alquilo de cadeia linear C1-C4, um grupo alquilo de cadeia ramificada C3-C4 ou um grupo alquilo substituído.

13. Método, de acordo com qualquer reivindicação anterior, caracterizado pelo facto de que a amina ou diamina no passo b) é selecionada de metilamina, etanolamina e n-propilamina.

14. Método, de acordo com qualquer reivindicação anterior, caracterizado pelo facto de que um excesso de amina ou diamina é utilizado no passo b).

15. Método, de acordo com a reivindicação 14, caracterizado pelo facto de que o excesso de amina ou diamina é continuamente removido antes do passo c) ou d).

16. Método, de acordo com qualquer reivindicação anterior, caracterizado pelo facto de que o intermediário de 9-aminometil tetraciclina no passo c) ou d) está em solução ou suspensão, opcionalmente em que a solução ou suspensão compreende um solvente selecionado de um álcool, tal como álcool benzílico, etanol ou metanol, um solvente polar aprótico como o dimetilsulfóxido, dimetilformamida, diclorometano ou suas misturas.

17. Método, de acordo com qualquer reivindicação anterior, caracterizado pelo facto de que o aldeído no passo c) está em solução ou suspensão, opcionalmente, em que a solução ou suspensão compreende um solvente selecionado de um álcool, tal como álcool benzílico, etanol ou metanol, um solvente polar aprótico como o dimetilsulfóxido, dimetilformamida, diclorometano ou suas misturas.

18. Método, de acordo com qualquer reivindicação anterior, caracterizado pelo facto de que o aldeído no passo c) está de acordo com a Fórmula 6

RsCOH

Fórmula 6 em que R5 é um hidrogénio, um grupo alquilo de cadeia linear CICIO, um grupo alquilo de cadeia ramificada C3-C20, um grupo alquilo substituído, um grupo aril C3 a CIO, um grupo aril C6 a CIO, um grupo aril C3 a CIO substituído, um grupo aril C6 a CIO substituído, ou um grupo heteroaril C3 a CIO compreendendo pelo menos um átomo de oxigénio, nitrogénio, enxofre ou fósforo.

19. Método, de acordo com qualquer reivindicação anterior, caracterizado pelo facto de que o aldeído no passo c) é selecionado de pivaldeído, acetaldeído e benzaldeído.

20. Método, de acordo com qualquer reivindicação anterior, caracterizado pelo facto de que o agente redutor no passo c) é um agente redutor imobilizado.

21. Método, de acordo com a reivindicação 20, caracterizado pelo facto de que o agente redutor imobilizado é cianoborohidreto de sódio imobilizado.

22. Método, de acordo com qualquer reivindicação anterior, caracterizado pelo facto de que o halogeneto de alquilo está de acordo com a Fórmula 7

R₆X Fórmula 7 em que R6 pode ser um grupo alquilo de cadeia linear C1-C10, um grupo alquilo de cadeia ramificada C3-C20, um grupo alquilo substituído, um grupo aril C3 a CIO, um grupo aril C6 a CIO, um grupo aril C3 a CIO substituído, um grupo aril C6 a CIO substituído ou um grupo heteroaril C3 a CIO; compreendendo pelo menos um átomo de oxigénio, nitrogénio, enxofre ou fósforo e X é um halogênio selecionado de cloro, bromo e iodo.

23. Método, de acordo com a reivindicação 22, caracterizado pelo facto de que o halogeneto de alquilo é selecionado de 1cloro-2,2-dimetilpropano, l-bromo-2,2-dimetilpropano e 1-iodo2,2-dimetilpropano.

24. Método, de acordo com qualquer reivindicação anterior, caracterizado pelo facto de que os passos de reação c) ou d) são realizados na presença de um aceitador de protões.

25. Método, de acordo com a reivindicação 24, caracterizado pelo facto de que o aceitador de protões é selecionado de trietilamina, amónia e 4-dimetilaminopiridina.

26. Método, de acordo com qualquer reivindicação anterior, caracterizado pelo facto de que o passo de reação c) ou d) é realizada na presença de um ácido orgânico, tal como ácido fórmico ou ácido acético, um ácido inorgânico ou suas misturas.

27. Método, de acordo com qualquer reivindicação anterior, caracterizado pelo facto de que as reações nos passos a), b), c) e/ou d) são realizadas a uma pressão de 689 a 3447 KPa.

28. Método, de acordo com qualquer reivindicação anterior, caracterizado pelo facto de que o composto de 9-aminometil tetraciclina formado no passo c) ou d) é omadaciclina.

29. Método, de acordo com qualquer reivindicação anterior, caracterizado pelo facto de que, após o passo c) ou d), a troca de contra-ião é realizada para formar um sal de omadaciclina.

30. Método, de acordo com a reivindicação 28 ou 29, caracterizado pelo facto de que a omadaciclina ou sal de omadacilina formado tem uma pureza superior a 50%, opcionalmente entre 70 e 80% ou entre 81 e 100% que foi determinada por HPLC.

31. Método, de acordo com a reivindicação 28, 29 ou 30, caracterizado pelo facto de que a omadaciclina ou sal de omadacilina formado tem um teor de epimero inferior a 10%, opcionalmente inferior a 2% que foi determinado por HPLC.