CN109414445A - 9-氨基甲基米诺环素化合物及其在泌尿道感染(uti)治疗中的应用方法 - Google Patents

9-氨基甲基米诺环素化合物及其在泌尿道感染(uti)治疗中的应用方法 Download PDF

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Abstract

本公开的本发明提供以口服或IV剂量或这二者的组合应用9‑[(2,2‑二甲基‑丙基氨基)‑甲基]‑米诺环素或其盐来治疗泌尿道感染(UTI)的方法。

Description

9-氨基甲基米诺环素化合物及其在泌尿道感染(UTI)治疗中 的应用方法
相关申请的参考
本申请要求2016年5月2日提交的美国临时申请号62/330,436、2016年6月15日提交的美国临时申请号62/350,332、2016年11月1日提交的美国临时申请号62/415,988和2016年11月16日提交的美国临时申请号62/422,852的申请日的权益，其每一个的全部内容通过引用并入本文。
发明背景
四环素抗生素的开发是从世界许多地方收集的土壤样本的系统筛选的直接结果，所述筛选用于能够产生杀菌和/或抑菌组合物的微生物的证据。这些新化合物中的第一种是在1948年以金霉素的名称引入的。两年后，土霉素成为可得的。对这些化合物的化学结构的阐明证实了它们的相似性，并为1952年该组的第三个成员四环素的生产提供了分析基础。在1957年制备了新的米诺环素(minocycline)化合物家族，其没有在早期的四环素中存在的与环连接的甲基，并且其在1967年成为公开可得的；并且米诺环素至1972年使用。
最近，研究努力集中于开发在不同治疗条件和施用途径下有效的新的四环素抗生素组合物。还研究了新的四环素类似物，其可证明与最初引入的米诺环素化合物相同或比其更有效。实例包括美国专利号2,980,584、2,990,331、3,062,717、3,165,531、3,454,697、3,557,280、3,674,859、3,957,980、4,018,889、4,024,272和4,126,680。这些专利代表了药学活性四环素及四环素类似物组合物的范围。
历史上，在它们最初的开发和引入后不久，发现四环素在药理学上针对下列极其有效：立克次体；许多革兰氏阳性和革兰氏阴性细菌；以及造成性病淋巴肉芽肿、包涵体性结膜炎和鹦鹉热的因子。因此，四环素被称作“广谱”抗生素。随着其体外抗微生物活性、实验感染中的有效性和药理学性质的随后建立，四环素作为一类迅速地变得广泛用于治疗目的。然而，四环素对于主要和次要病症和疾病的这种广泛使用直接导致对这些抗生素的抗性的出现，即使在高度易感的共生的和致病的细菌物种(例如肺炎球菌(Pneumococci)和沙门氏菌(Salmonella))中。四环素抗性生物的增加导致四环素和四环素类似物组合物作为选择的抗生素的使用的一般下降。此外，其它抗菌剂也被过度使用，产生多重药物抗性细菌的菌株。因此，一般性地需要有效的抗菌剂来治疗细菌感染，特别是造成疾病的病原体没有严重抗性或具有较少严重抗性的抗菌剂。
泌尿道感染(UTI)是泌尿道的细菌感染，并且是患者被开具抗生素处方的最常见病症之一(Mazzulli，The Canadian Journal of Urology 19(s1)：42-48，2012)。当它影响下泌尿道时，它被称为单纯性膀胱炎(膀胱感染)。当它影响上泌尿道时，它被称为肾盂肾炎(肾脏感染)。来自下泌尿道的症状包括尿痛、和尿频或尿急(或两者)；而肾盂肾炎的症状除下UTI的症状外还包括发热和侧腹疼痛。在某些情况下，即使不排尿时也可存在尿道中的疼痛的灼烧感。
UTI在一般群体中相当普遍，近50％的女性(和12％的男性)在其一生中具有至少一次UTI，使得UTI为女性中最常见的细菌感染。UTI具有高复发率，约25％的女性在她们第一次UTI的6个月内经历第二次发作(Foxman，Disease-a-Month 49(2)：53-70，2003)。在美国，所有社区处方抗生素中的约15％被分发用于UTI，其估计每年总计超过10亿美元。归于UTI的直接和间接花费每年总计16亿美元。
UTI分类为简单的和复杂的UTI(cUTI)。简单的UTI通常在具有正常发挥功能的泌尿道的健康的绝经前女性中诊断。cUTI见于其泌尿道具有结构或功能异常的患者，所述患者可具有其它潜在的危险因素，诸如抗生素抗性生物、合并症或复发性UTI。此外，如果泌尿道感染涉及上尿道，并且本人患有糖尿病、是妊娠的、是雄性或免疫功能受损，则认为是复杂的。为了诊断简单的或复杂的UTI(uncomplicated or complicated UTI)，临床医生必须进行病史和身体检查，并发送样本用于尿检。急性症状由尿频、尿痛或排尿时灼热、尿急或恶臭味或混浊尿组成。涉及上泌尿道的更严重的UTI可以另外呈现患者不适、侧腹疼痛和发热。
虽然尿培养并不总是对简单的UTI进行，但是当怀疑cUTI时，它们是强制性的。尿中某些生物标志物如亚硝酸盐和白细胞酯酶的存在是UTI的指示物。如果怀疑感染已扩散到肾脏，则建议尿培养。对于其症状在治疗后2-4周不消退或复发的患者，也推荐尿培养。通常进行计算机断层扫描(CT)或超声扫描以排除cUTI的可纠正的解剖学原因。如果UTI未经治疗或不充分地治疗，患者可以发生并发症，例如复发性感染、肾衰竭或败血症(Nicolle，The Canadian Journal of Infectious Disease and Medical Microbiology 16(6)：349-360，2005)。
每年大约有700万和90万个简单的和复杂的UTI病例。生活质量受到影响，并且日常活动中断，患者由于UTI而失去工作或失学。
造成几乎所有UTI的病原体是尿路致病性大肠杆菌(UPEC)，其在超过75％的病例中被分离。复杂的UTI(cUTI)具有更多变化、更不可预测的细菌病原学，尽管在大约50％的病例中仍然见到UPEC。造成cUTI的病原体，包括MRSA、甲氧西林抗性凝固酶阴性葡萄球菌(MRCoNS)、万古霉素抗性肠球菌(VRE)和产生超广谱β内酰胺酶(ESBLs)的细菌，倾向于对目前的抗生素治疗更具抗性(Pallett and Hand，Journal of Antimicrobial Chemotherapy65(s3)：iii25-33，2010)。最常见的感染途径是UPEC进入尿道并上升到膀胱。感染后，UPEC迁移到更深的泌尿道上皮层并在细胞内簇集增殖，最终形成能够针对身体是免疫反应进行防御的生物膜。
至于治疗，IDSA推荐复方新诺明每日两次三天，作为绝经前女性中简单的UTI的一线治疗。复方新诺明的替代物包括呋喃妥因、阿莫西林-克拉维酸、头孢菌素、磷霉素、氧氟沙星和环丙沙星。不幸的是，细菌针对这些一线和二线抗生素表现出渐增的抗性。β-内酰胺抗生素不再被推荐为一线治疗，因为大肠杆菌抗性率目前超过20％。氟喹诺酮具有10％以下的较低抗性率，但这些抗性率已倾向上升。
但是，对cUTI的治疗没有明确定义。目前，治疗cUTI中的一线抗生素的推荐是使用氟喹诺酮、碳青霉烯、第三代头孢菌素或哌拉西林-他唑巴坦的IV治疗。在大多数cUTI病例中见到对复方新诺明的抗性，因此不推荐。对于具有最有可能由产ESBL细菌引起的败血症的患者，推荐亚胺培南或美罗培南。近年来，由于增大的抗性，头孢菌素和哌拉西林-他唑巴坦的效力降低，当存在抗性病原体时留下很少的治疗选择。
FDA批准了几种专门针对cUTI的抗生素，2007年的DORIBAX(多尼培南)、2014年的ZERBAXA(头孢洛扎/他唑巴坦)、和2015年的AVYCAZ(头孢他啶-阿维巴坦 )。几种其它的上市药物(诸如左氧氟沙星、厄他培南、头孢曲松、头孢他啶、亚胺培南/西司他丁)在其产品标签/完整的处方信息中也具有cUTI适应症。尽管DORIBAX对β-内酰胺酶稳定，但它对于碳青霉烯酶是不稳定的。这种药物也带有低癫痫发作风险，这对于碳青霉烯家族是常见的，并且增加了艰难梭菌(C. difficile)感染的风险。ZERBAXA带有在具有肾损害的患者中降低的有效性的警告，这可限制其在最严重的cUTI病例中的使用。
使UTI的治疗进一步复杂化的是下列事实：许多抗生素结合蛋白，因此严重限制它们在泌尿道(unitary tract)中的生物利用度和它们针对UTI的有效性。例如，甘氨酰环素(glycylcycline)是衍生自四环素的新类型的抗生素。甘氨酰环素(诸如替加环素(tigecycline)和伊拉瓦环素(eravacycline))专门设计用于克服四环素抗性的两种常见机制-由获得性外排泵和/或核糖体保护介导的抗性。目前，替加环素是唯一批准用于临床使用的甘氨酰环素。虽然确切的机制是不清楚的，但已观察到随着渐增的替加环素浓度，替加环素表现出增加的蛋白结合。在0.1和1.0 µg/mL的替加环素浓度下，蛋白结合如通过使用超滤技术测定分别为71％和87％，并且如通过使用超速离心测定分别为73％和79％(Meagher et al.，Clinical Infectious Diseases Vol. 41，Supp.5：S333-S340，2005)。泌尿道中生物利用度的这种明显限制因无法增加剂量而进一步加剧，这部分是由于与四环素类抗生素相关的许多不希望的副作用，诸如恶心、呕吐、腹泻和其它胃肠道(GI tract)不良事件(AE)。
最近宣布，在用于治疗复杂的泌尿道感染(cUTI)的、作为IV至口服转变疗法施用的伊拉瓦环素的IGNITE2 3期临床试验中，另一种甘氨酰环素伊拉瓦环素与比较物药物左氧氟沙星相比未能实现其统计学非劣性的主要终点。尽管之前报道了来自复杂的腹腔内感染(cIAI)中静脉内(IV)施用的伊拉瓦环素的IGNITE1 3期临床试验的阳性数据，其确实满足其主要终点(Tetraphase Press Release，Sept. 8，2015)。
候选药物伊拉瓦环素的开发者-Tetraphase Pharmaceuticals-后来已经显示分析，即单独使用IV治疗或较长停留于IV的对象比转为口服的那些反应更好，表明失败的临床试验可能是由于应用口服制剂的不充分暴露。Tetraphase也已宣布计划进行仅IV的cUTI研究。
因此总体上，抗性细菌使UTI的治疗前景复杂化。由于抗性机制的共表达，这些细菌也可对非β-内酰胺抗生素如氟喹诺酮、甲氧苄啶和庆大霉素具有抗性。渐增的抗性导致临床医生依赖效力较低且常常带来更大安全性风险的老药。替代选择有限，突出了对cUTI下一代治疗的需求。
而且，在尿路致病性细菌中抗生素抗性的目前环境中，没有是对UTI的可靠有效治疗的口服抗生素。目前的治疗可需要使用静脉内(IV)药物，这需医院访问并提高治疗总费用，更不用说给药选择的相对不灵活性。绝大多数医生认识到，需要对于这个问题的口服抗生素方案，并且不牺牲安全性的有效口服抗生素将可能广泛使用。
发明概述
本文描述的发明提供9-氨基甲基米诺环素，诸如9-[(2,2-二甲基-丙基氨基)-甲基]-米诺环素(化合物1，也称为奥玛环素(Omadacycline))，其用于治疗UTI。本发明部分基于以下发现：9-氨基甲基米诺环素诸如化合物1具有非常低或最低水平的蛋白结合，并且因此可在泌尿道中具有高生物利用度用于治疗UTI。特别地，该研究评估了化合物1在小鼠、大鼠、猴和人中的体外血浆蛋白结合(浓度依赖性)。结果显示，化合物1与所有测试物种的血浆蛋白弱结合，没有主要的物种差异。在10-10,000 ng/mL的化合物1的浓度范围内，未发现血浆蛋白结合的明显浓度依赖性。测定血浆中的下列均值未结合蛋白分数(fu)：大鼠(73.9±12.1%)≤猴(78.8±7.26%)≈人(78.7±9.72%)≤小鼠(84.7±5.31%)。
此外，在最近的I期研究中，申请人在患者尿中发现了高水平的化合物1，表明它可为治疗UTI中的有效前线疗法，所述UTI包括uUTI(膀胱炎)和cUTI、以及附着于膀胱壁并形成免疫反应抗性生物膜的大肠杆菌引起的UTI。泌尿道中化合物1的高生物利用度由下列事实进一步增强：化合物1具有相对温和或低的胃肠道AE，诸如恶心、呕吐和腹泻。
本发明也基于以下发现：9-氨基甲基米诺环素诸如化合物1可以作为口服剂型提供用于治疗UTI，所述口服剂型或是单独的、或与IV剂型组合(诸如初始IV剂量后的口服降低(step down)。在一个相关方面，本发明提供9-氨基甲基米诺环素诸如化合物1作为用于治疗UTI、特别是用于治疗cUTI的IV剂型的用途。
本发明进一步基于以下发现：9-氨基甲基米诺环素诸如化合物1具有针对与UTI相关的广泛多种病原体的相对广谱，所述病原体包括多药抗性(MDR)病原体，包括MRSA和大肠杆菌(例如，ESBL+大肠杆菌)。因此，9-氨基甲基米诺环素诸如化合物1有利于治疗与抗生素抗性病原体相关的UTI，包括其中关注抗性的社区获得性UTI。由于其针对抗性病原体的效力，在其中已知或怀疑的药物抗性细菌可为致病病原体的情况下，9-氨基甲基米诺环素诸如化合物1也可以用作前线治疗剂。另一方面，在之前已由其它抗生素治疗、但已具有不充分应答或发生/展示不可接受的或不希望的AE诸如胃肠道AE的患者中，9-氨基甲基米诺环素诸如化合物1也可以用作治疗剂。
因此，本发明的一方面提供在需要其治疗的对象中治疗泌尿道感染(UTI)的方法，包括向对象施用口服剂量的300-600mg的9-[(2,2-二甲基-丙基氨基)-甲基]-米诺环素或其盐，以致治疗对象。
在一些实施方式中，口服剂量是300-450mg的9-[(2,2-二甲基-丙基氨基)-甲基]-米诺环素或其盐。
在一些实施方式中，方法包括向对象施用一个口服剂量的300mg的9-[(2,2-二甲基-丙基氨基)-甲基]-米诺环素或其盐，每24小时一次，总共4或5天。
在一些实施方式中，方法包括向所述对象施用一个口服剂量的300mg的9-[(2,2-二甲基-丙基氨基)-甲基]-米诺环素或其盐，每24小时一次，总共5-14天。
在一些实施方式中，方法包括向所述对象施用一个口服剂量的450mg的9-[(2,2-二甲基-丙基氨基)-甲基]-米诺环素或其盐，每24小时一次，总共5-14天。
在一些实施方式中，方法包括向对象施用一个口服剂量的300mg的9-[(2,2-二甲基-丙基氨基)-甲基]-米诺环素或其盐，每24小时一次，总共5天，并且进一步包括在第一口服剂量后约12小时，向对象施用额外口服剂量的300mg的9-[(2,2-二甲基-丙基氨基)-甲基]-米诺环素或其盐。
在一些实施方式中，方法包括向对象施用一个口服剂量的300mg的9-[(2,2-二甲基-丙基氨基)-甲基]-米诺环素或其盐，每24小时一次，总共5-14天，并且进一步包括在第一口服剂量后约12小时，向对象施用额外口服剂量的300mg的9-[(2,2-二甲基-丙基氨基)-甲基]-米诺环素或其盐。
在一些实施方式中，方法包括向对象施用一个口服剂量的450mg的9-[(2,2-二甲基-丙基氨基)-甲基]-米诺环素或其盐，每24小时一次，总共5天，并且进一步包括在第一口服剂量后约12小时，向对象施用额外口服剂量的450mg的9-[(2,2-二甲基-丙基氨基)-甲基]-米诺环素或其盐。
在一些实施方式中，方法包括向对象施用一个口服剂量的450mg的9-[(2,2-二甲基-丙基氨基)-甲基]-米诺环素或其盐，每24小时一次，总共5-14天，并且进一步包括在第一口服剂量后约12小时，向对象施用额外口服剂量的450mg的9-[(2,2-二甲基-丙基氨基)-甲基]-米诺环素或其盐。
在一些实施方式中，方法包括向对象施用一个口服剂量的600mg的9-[(2,2-二甲基-丙基氨基)-甲基]-米诺环素或其盐，每24小时一次，总共5天，并且进一步包括在第一口服剂量后约12小时，向对象施用额外口服剂量的600mg的9-[(2,2-二甲基-丙基氨基)-甲基]-米诺环素或其盐。
在一些实施方式中，方法包括向对象施用：(1)在治疗的第一天，一个或多个负荷剂量的9-[(2,2-二甲基-丙基氨基)-甲基]-米诺环素或其盐；然后是(2)一个或多个维持剂量的9-[(2,2-二甲基-丙基氨基)-甲基]-米诺环素或其盐，其中维持剂量间隔约24小时施用。
在一些实施方式中，一个或多个负荷剂量是两个静脉内(IV)剂量的约100mg的9-[(2,2-二甲基-丙基氨基)-甲基]-米诺环素或其盐，间隔约12小时施用。
在一些实施方式中，一个或多个负荷剂量是一个静脉内(IV)剂量的约200mg的9-[(2,2-二甲基-丙基氨基)-甲基]-米诺环素或其盐。
在一些实施方式中，一个或多个负荷剂量是两个静脉内(IV)剂量的约200mg的9-[(2,2-二甲基-丙基氨基)-甲基]-米诺环素或其盐，间隔约12小时施用。
在一些实施方式中，一个或多个负荷剂量是一个口服剂量的约300mg的9-[(2,2-二甲基-丙基氨基)-甲基]-米诺环素或其盐。
在一些实施方式中，一个或多个负荷剂量是两个口服剂量的约300mg的9-[(2,2-二甲基-丙基氨基)-甲基]-米诺环素或其盐，间隔约12小时施用。
在一些实施方式中，一个或多个负荷剂量是两个口服剂量的约450mg的9-[(2,2-二甲基-丙基氨基)-甲基]-米诺环素或其盐，间隔约12小时施用。
在一些实施方式中，一个或多个负荷剂量是两个口服剂量的约600mg的9-[(2,2-二甲基-丙基氨基)-甲基]-米诺环素或其盐，间隔约12小时施用。
在一些实施方式中，一个或多个负荷剂量是一个静脉内(IV)剂量的约100mg的9-[(2,2-二甲基-丙基氨基)-甲基]-米诺环素或其盐、和一个口服剂量的约300mg的9-[(2,2-二甲基-丙基氨基)-甲基]-米诺环素或其盐，间隔约12小时施用。
在一些实施方式中，在所述一个口服剂量前施用一个IV剂量。
在一些实施方式中，一个或多个维持剂量中的每一个包含约300mg的9-[(2,2-二甲基-丙基氨基)-甲基]-米诺环素或其盐。
在一些实施方式中，一个或多个维持剂量中的每一个包含约450mg的9-[(2,2-二甲基-丙基氨基)-甲基]-米诺环素或其盐。
在一些实施方式中，一个或多个维持剂量中的每一个包含约600mg的9-[(2,2-二甲基-丙基氨基)-甲基]-米诺环素或其盐。
在一些实施方式中，一个或多个维持剂量包含一个或多个静脉内(IV)维持剂量的约100mg的9-[(2,2-二甲基-丙基氨基)-甲基]-米诺环素或其盐、和一个或多个口服维持剂量的约300mg或450mg的9-[(2,2-二甲基-丙基氨基)-甲基]-米诺环素或其盐。
在一些实施方式中，在口服维持剂量前施用IV维持剂量。
在一些实施方式中，在治疗的第2天至第5天施用一个或多个维持剂量。
在一些实施方式中，在治疗的第2天至第14天施用一个或多个维持剂量。
本发明的另一方面提供在需要其治疗的对象中治疗泌尿道感染(UTI)的方法，包括向对象施用静脉内(IV)剂量的约200mg的9-[(2,2-二甲基-丙基氨基)-甲基]-米诺环素或其盐，然后是四个口服剂量的300mg的9-[(2,2-二甲基-丙基氨基)-甲基]-米诺环素或其盐，以致治疗对象，其中IV剂量和四个口服剂量彼此间隔约24小时施用。
本发明的一个相关方面提供提供在需要其治疗的对象中治疗泌尿道感染(UTI)的方法，包括向对象施用静脉内(IV)剂量的约200mg的9-[(2,2-二甲基-丙基氨基)-甲基]-米诺环素或其盐，然后是4-13个口服剂量的300mg的9-[(2,2-二甲基-丙基氨基)-甲基]-米诺环素或其盐，以致治疗对象，其中IV剂量和4-13个口服剂量彼此间隔约24小时施用。
本发明的一个相关方面提供在需要其治疗的对象中治疗泌尿道感染(UTI)的方法，包括向对象施用两个静脉内(IV)剂量，其间隔12小时施用，每个为约100mg的9-[(2,2-二甲基-丙基氨基)-甲基]-米诺环素或其盐，然后是4-13个口服剂量的300mg的9-[(2,2-二甲基-丙基氨基)-甲基]-米诺环素或其盐，以致治疗对象，其中两个IV剂量中的第一个和4-13个口服剂量彼此间隔约24小时施用。
本发明的一个相关方面提供在需要其治疗的对象中治疗泌尿道感染(UTI)的方法，包括向对象施用静脉内(IV)剂量的约100mg的9-[(2,2-二甲基-丙基氨基)-甲基]-米诺环素或其盐，然后是4-13个口服剂量的300mg的9-[(2,2-二甲基-丙基氨基)-甲基]-米诺环素或其盐，其中IV剂量和4-13个口服剂量彼此间隔约24小时施用；进一步包括向对象施用额外口服剂量的300mg的9-[(2,2-二甲基-丙基氨基)-甲基]-米诺环素或其盐，距IV剂量约12小时施用，以致治疗对象。
本发明的一个相关方面提供在需要其治疗的对象中治疗泌尿道感染(UTI)的方法，包括向对象施用静脉内(IV)剂量的约200mg的9-[(2,2-二甲基-丙基氨基)-甲基]-米诺环素或其盐，然后是四个口服剂量的450mg的9-[(2,2-二甲基-丙基氨基)-甲基]-米诺环素或其盐，以致治疗对象，其中IV剂量和四个口服剂量彼此间隔约24小时施用。
本发明的一个相关方面提供在需要其治疗的对象中治疗泌尿道感染(UTI)的方法，包括向对象施用静脉内(IV)剂量的约200mg的9-[(2,2-二甲基-丙基氨基)-甲基]-米诺环素或其盐，然后是4-13个口服剂量的450mg的9-[(2,2-二甲基-丙基氨基)-甲基]-米诺环素或其盐，以致治疗对象，其中IV剂量和4-13个口服剂量彼此间隔约24小时施用。
本发明的一个相关方面提供在需要其治疗的对象中治疗泌尿道感染(UTI)的方法，包括向对象施用两个静脉内(IV)剂量，其间隔12小时施用，每个是约100mg的9-[(2,2-二甲基-丙基氨基)-甲基]-米诺环素或其盐，然后是4-13个口服剂量的450mg的9-[(2,2-二甲基-丙基氨基)-甲基]-米诺环素或其盐，以致治疗对象，其中两个IV剂量中的第一个和4-13个口服剂量彼此间隔约24小时施用。
本发明的一个相关方面提供在需要其治疗的对象中治疗泌尿道感染(UTI)的方法，包括向对象施用静脉内(IV)剂量的约100mg的9-[(2,2-二甲基-丙基氨基)-甲基]-米诺环素或其盐，然后是4-13个口服剂量的450mg的9-[(2,2-二甲基-丙基氨基)-甲基]-米诺环素或其盐，其中IV剂量和4-13个口服剂量彼此间隔约24小时施用；进一步包括向对象施用额外口服剂量的450mg的9-[(2,2-二甲基-丙基氨基)-甲基]-米诺环素或其盐，距IV剂量约12小时施用，以致治疗对象。
本发明的另一方面提供在需要其治疗的对象中治疗泌尿道感染(UTI)的方法，包括向对象施用五个口服剂量的各约300mg的9-[(2,2-二甲基-丙基氨基)-甲基]-米诺环素或其盐，彼此间隔约24小时施用；并且进一步包括向对象施用额外口服剂量的300mg的9-[(2,2-二甲基-丙基氨基)-甲基]-米诺环素或其盐，距所述五个口服剂量中的第一个约12小时施用，以致治疗所述对象。
本发明的一个相关方面提供在需要其治疗的对象中治疗泌尿道感染(UTI)的方法，包括向对象施用5-14个口服剂量的各约300mg的9-[(2,2-二甲基-丙基氨基)-甲基]-米诺环素或其盐，彼此间隔约24小时施用；并且进一步包括向对象施用额外口服剂量的300mg的9-[(2,2-二甲基-丙基氨基)-甲基]-米诺环素或其盐，距5-14个口服剂量的第一个约12小时施用，以致治疗对象。
本发明的又一方面提供在需要其治疗的对象中治疗泌尿道感染(UTI)的方法，包括向对象施用五个口服剂量的各约450mg的9-[(2,2-二甲基-丙基氨基)-甲基]-米诺环素或其盐，彼此间隔约24小时施用；并且进一步包括向对象施用额外口服剂量的450mg的9-[(2,2-二甲基-丙基氨基)-甲基]-米诺环素或其盐，距五个口服剂量中的第一个约12小时施用，以致治疗对象。
本发明的一个相关方面提供在需要其治疗的对象中治疗泌尿道感染(UTI)的方法，包括向对象施用5-14个口服剂量的各约450mg的9-[(2,2-二甲基-丙基氨基)-甲基]-米诺环素或其盐，彼此间隔约24小时施用；并且进一步包括向对象施用额外口服剂量的450mg的9-[(2,2-二甲基-丙基氨基)-甲基]-米诺环素或其盐，距5-14个口服剂量中的第一个约12小时施用，以致治疗对象。
本发明的再一方面提供在需要其治疗的对象中治疗泌尿道感染(UTI)的方法，包括向对象施用五个口服剂量的各约600mg的9-[(2,2-二甲基-丙基氨基)-甲基]-米诺环素或其盐，彼此间隔约24小时施用；并且进一步包括向对象施用额外口服剂量的600mg的9-[(2,2-二甲基-丙基氨基)-甲基]-米诺环素或其盐，距五个口服剂量中的第一个约12小时施用，以致治疗对象。
在一些实施方式中，UTI是简单的泌尿道感染(uUTI)或膀胱炎。在一些实施方式中，UTI是复杂的泌尿道感染(cUTI)或肾盂肾炎。在一些实施方式中，UTI是社区获得性的。在一些实施方式中，UTI是医院获得性的或与医疗保健相关的(例如，在尿道导管插入术(urinary catheterization)期间获得)。
在一些实施方式中，UTI的特征在于存在选自下列的病原体：大肠杆菌(Escherichia coli)(ESBL+、ESBL-、FQS、FQR、碳青霉烯抗性的、碳青霉烯易感的)、腐生葡萄球菌(Staphylococcus saprophyticus)、肺炎克雷伯菌(Klebsiella pneumoniae)(ESBL+、ESBL-、FQS、FQR)、和肠球菌属(Enterococcus)(粪肠球菌(E. faecalis)VS、粪肠球菌VNS、万古霉素抗性粪肠球菌(VRE)、屎肠球菌(E. faecium)VS、屎肠球菌VNS、万古霉素抗性屎肠球菌(VRE))、MSSA、MRSA、MSCoNS、MRCoNS、无乳链球菌(Streptococcus agalactiae)(B组链球菌)、产酸克雷伯菌(K. oxytoca)、阴沟肠杆菌(E. cloacae)CeftazS、阴沟肠杆菌CeftazR、枸橼酸杆菌属物种(Citrobacter spp.)、粘质沙雷菌(S. marcescens)和不动杆菌属(Acinetobacter)。病原体包括产生超广谱β-内酰胺酶(ESBL)的大肠杆菌(例如，对多种抗生素具有抗性的那些)。
在一些实施方式中，病原体在来自所述对象的尿培养物中具有≥105 CFU/mL的滴度。
在一些实施方式中，对象具有选自以下的UTI的临床体征和症状中的两种或更多种：(1)与发热相关的寒战或发冷或温暖(例如，口腔温度高于38℃)；(2)侧腹疼痛(肾盂肾炎)或骨盆疼痛(cUTI)；(3)恶心或呕吐；(4)排尿困难、尿频或尿急；(4)身体检查时肋脊角压痛；(5)具有脓尿证据的尿样本(例如，白细胞酯酶的试纸分析为阳性，或每立方毫米至少10个白细胞)；和(6)耻骨上疼痛。
在一些实施方式中，对象被治疗，如通过来自所述对象的尿培养物的病原体滴度的治疗后至少10倍减少所证明的。
在一些实施方式中，对象在来自所述对象的尿培养物上具有小于104 CFU/mL的治疗后病原体滴度。
在某些实施方案中，对象是雌性。例如，雌性可为糖尿病的、妊娠的、具有多发性硬化、和/或具有影响尿流动的状况(诸如肾结石、中风和脊髓损伤)。
在一些实施方式中，口服剂量中的每一个作为两个或三个150mg片剂独立施用。
在一些实施方式中，IV剂量的每一个经约30分钟(例如，至少30分钟且不超过45分钟)连续施用。
本发明的另一方面提供在需要其治疗的对象中治疗泌尿道感染(UTI)的方法，包括向对象施用IV剂量的约100-200mg的9-[(2,2-二甲基-丙基氨基)-甲基]-米诺环素或其盐，以致治疗对象。
在一些实施方式中，对象不施用口服剂量的9-[(2,2-二甲基-丙基氨基)-甲基]-米诺环素或其盐。
在一些实施方式中，IV剂量是约100mg或约200mg的9-[(2,2-二甲基-丙基氨基)-甲基]-米诺环素或其盐。
在一些实施方式中，方法包括向对象施用一个IV剂量的约100mg的9-[(2,2-二甲基-丙基氨基)-甲基]-米诺环素或其盐，每24小时一次，总共3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13或14天。
在一些实施方式中，方法包括向对象施用一个IV剂量的约100mg的9-[(2,2-二甲基-丙基氨基)-甲基]-米诺环素或其盐，每24小时一次，总共5-14天。
在一些实施方式中，方法进一步包括在第一个IV剂量后约12小时，向对象施用额外IV剂量的约100mg的9-[(2,2-二甲基-丙基氨基)-甲基]-米诺环素或其盐。
在一些实施方式中，UTI是cUTI或肾盂肾炎。
应当理解，除非明确否认或以其它方式不合适，否则本文描述的任何一个实施方式(包括仅在实施例部分中描述的那些)可以与任何一个或多个其它实施方式组合。
附图简述
图1显示通过标称血浆浓度的化合物1在小鼠、大鼠、猴和人血浆中的血浆蛋白结合分数。
图2显示用不同浓度的化合物1治疗24小时后浮游大肠杆菌(ATCC25922)的OD650。
图3显示化合物1针对24小时大肠杆菌生物膜的活性。*表示大致MIC值。
图4显示环丙沙星针对24小时大肠杆菌生物膜的活性。*表示大致MIC值。
图5显示化合物1针对添加浮游细菌建立6、12和24小时的生物膜的影响。*表示大致MIC值。
图6显示在化合物1存在下的生物膜生长。*表示大致MIC值。
图7显示在环丙沙星存在下的生物膜生长。*表示大致MIC值。
图8A(第1天)和第8B天(第5天)显示，在第一批31名入选的uUTI患者的血浆中，化合物1(奥玛环素)的三个剂量水平的均值浓度-时间概况(profile)。
图9显示通过治疗和天数叠加的个别尿浓度-时间概况。
发明详述
本发明至少部分涉及下列发现：基于特定剂量和施用方案，9-[(2,2-二甲基-丙基氨基)-甲基]-米诺环素(化合物1)有效治疗某些细菌感染，诸如泌尿道感染(UTI)，包括简单的和复杂的UTI(cUTI)。
因此，在一方面，本发明提供在需要其治疗的对象中治疗泌尿道感染(UTI)(例如，简单的UTI(uUTI)或复杂的UTI(cUTI))的方法。在第1实施方式中，方法包括向对象施用口服剂量的300-600mg的9-[(2,2-二甲基-丙基氨基)-甲基]-米诺环素或其盐，以致治疗所述对象。
在第2实施方式中，第1实施方式的口服剂量是300-450mg的9-[(2,2-二甲基-丙基氨基)-甲基]-米诺环素或其盐。
在第3实施方式中，第1实施方式的方法包括向对象施用一个口服剂量的300mg的9-[(2,2-二甲基-丙基氨基)-甲基]-米诺环素或其盐，每24小时一次，总共4或5天。
在第4实施方式中，方法包括向所述对象施用一个口服剂量的300mg的9-[(2,2-二甲基-丙基氨基)-甲基]-米诺环素或其盐，每24小时一次，总共5-14天。
在第5实施方式中，方法包括向所述对象施用一个口服剂量的450mg的9-[(2,2-二甲基-丙基氨基)-甲基]-米诺环素或其盐，每24小时一次，总共5-14天。
在第6实施方式中，第1实施方式的方法包括向对象施用一个口服剂量的300mg的9-[(2,2-二甲基-丙基氨基)-甲基]-米诺环素或其盐，每24小时一次，总共5天，并且进一步包括在第一口服剂量后约12小时，向所述对象施用额外口服剂量的300mg的9-[(2,2-二甲基-丙基氨基)-甲基]-米诺环素或其盐。
在第7实施方式中，方法包括向对象施用一个口服剂量的300mg的9-[(2,2-二甲基-丙基氨基)-甲基]-米诺环素或其盐，每24小时一次，总共5-14天，并且进一步包括在第一口服剂量后约12小时，向对象施用额外口服剂量的300mg的9-[(2,2-二甲基-丙基氨基)-甲基]-米诺环素或其盐。
在第8实施方式中，第1实施方式的方法包括向对象施用一个口服剂量的450mg的9-[(2,2-二甲基-丙基氨基)-甲基]-米诺环素或其盐，每24小时一次，总共5天，并且进一步包括在第一口服剂量后约12小时，向所述对象施用额外口服剂量的450mg的9-[(2,2-二甲基-丙基氨基)-甲基]-米诺环素或其盐。
在第9实施方式中，方法包括向对象施用一个口服剂量的450mg的9-[(2,2-二甲基-丙基氨基)-甲基]-米诺环素或其盐，每24小时一次，总共5-14天，并且进一步包括在第一口服剂量后约12小时，向对象施用额外口服剂量的450mg的9-[(2,2-二甲基-丙基氨基)-甲基]-米诺环素或其盐。
在第10实施方式中，第1实施方式的方法包括向对象施用一个口服剂量的600mg的9-[(2,2-二甲基-丙基氨基)-甲基]-米诺环素或其盐，每24小时一次，总共5天，并且进一步包括在第一口服剂量后约12小时，向对象施用额外口服剂量的600mg的9-[(2,2-二甲基-丙基氨基)-甲基]-米诺环素或其盐。
在第11实施方式中，第1实施方式的方法包括向对象施用：(1)在治疗的第一天，一个或多个负荷剂量的9-[(2,2-二甲基-丙基氨基)-甲基]-米诺环素或其盐；然后是(2)一个或多个维持剂量的9-[(2,2-二甲基-丙基氨基)-甲基]-米诺环素或其盐，其中维持剂量间隔约24小时施用。
在第12实施方式中，第11实施方式的一个或多个负荷剂量是两个静脉内(IV)剂量的约100mg的9-[(2,2-二甲基-丙基氨基)-甲基]-米诺环素或其盐，间隔约12小时施用。
在第13实施方式中，第11实施方式的一个或多个负荷剂量是一个静脉内(IV)剂量的约200mg的9-[(2,2-二甲基-丙基氨基)-甲基]-米诺环素或其盐。
在第14实施方式中，第11实施方式的一个或多个负荷剂量是两个静脉内(IV)剂量的约200mg的9-[(2,2-二甲基-丙基氨基)-甲基]-米诺环素或其盐，间隔约12小时施用。
在第15实施方式中，第11实施方式的一个或多个负荷剂量是一个口服剂量的约300mg的9-[(2,2-二甲基-丙基氨基)-甲基]-米诺环素或其盐。
在第16实施方式中，第11实施方式的一个或多个负荷剂量是两个口服剂量的约300mg的9-[(2,2-二甲基-丙基氨基)-甲基]-米诺环素或其盐，间隔约12小时施用。
在第17实施方式中，第11实施方式的一个或多个负荷剂量是两个口服剂量的约450mg的9-[(2,2-二甲基-丙基氨基)-甲基]-米诺环素或其盐，间隔约12小时施用。
在第18实施方式中，第11实施方式的一个或多个负荷剂量是两个口服剂量的约600mg的9-[(2,2-二甲基-丙基氨基)-甲基]-米诺环素或其盐，间隔约12小时施用。
在第19实施方式中，第11实施方式的一个或多个负荷剂量是一个静脉内(IV)剂量的约100mg的9-[(2,2-二甲基-丙基氨基)-甲基]-米诺环素或其盐、和一个口服剂量的约300mg的9-[(2,2-二甲基-丙基氨基)-甲基]-米诺环素或其盐，间隔约12小时施用。
在第20实施方式中，第19实施方式的一个IV剂量在一个口服剂量之前施用。
在第21实施方式中，第11至第20实施方式中任一个的一个或多个维持剂量中的每一个包含约300mg的9-[(2,2-二甲基-丙基氨基)-甲基]-米诺环素或其盐。
在第22实施方式中，第11至第20实施方式中任一个的一个或多个维持剂量中的每一个包含约450mg的9-[(2,2-二甲基-丙基氨基)-甲基]-米诺环素或其盐。
在第23实施方式中，第11至第20实施方式中任一个的一个或多个维持剂量中的每一个包含约600mg的9-[(2,2-二甲基-丙基氨基)-甲基]-米诺环素或其盐。
在第24实施方式中，第11至第20实施方式中任一个的一个或多个维持剂量包含一个或多个静脉内(IV)维持剂量的约100mg的9-[(2,2-二甲基-丙基氨基)-甲基]-米诺环素或其盐、和一个或多个口服维持剂量的约300mg或450mg的9-[(2,2-二甲基-丙基氨基)-甲基]-米诺环素或其盐。
在第25实施方式中，第24实施方式的IV维持剂量的在口服维持剂量之前施用。
在第26实施方式中，第11至第25实施方式中任一个的一个或多个维持剂量在治疗的第2天至第5天施用。
在第27实施方式中，第11至第25实施方式中任一个的一个或多个维持剂量在治疗的第2天至第14天施用。
在一个相关方面，本发明提供在需要其治疗的对象中治疗泌尿道感染(UTI)的方法。
具体地，在第28实施方式中，方法包括向对象施用静脉内(IV)剂量的约200mg的9-[(2,2-二甲基-丙基氨基)-甲基]-米诺环素或其盐，然后是四个口服剂量的300mg的9-[(2,2-二甲基-丙基氨基)-甲基]-米诺环素或其盐，以致治疗对象，其中IV剂量和四个口服剂量彼此间隔约24小时施用。
在第29实施方式中，方法包括向对象施用静脉内(IV)剂量的约200mg的9-[(2,2-二甲基-丙基氨基)-甲基]-米诺环素或其盐，然后是4-13个口服剂量的300mg的9-[(2,2-二甲基-丙基氨基)-甲基]-米诺环素或其盐，以致治疗对象，其中IV剂量和4-13个口服剂量彼此间隔约24小时施用。
在第30实施方式中，方法包括向对象施用两个静脉内(IV)剂量，间隔12小时施用，各为约100mg的9-[(2,2-二甲基-丙基氨基)-甲基]-米诺环素或其盐，然后是4-13个口服剂量的300mg的9-[(2,2-二甲基-丙基氨基)-甲基]-米诺环素或其盐，以致治疗对象，其中两个IV剂量中的第一个和4-13个口服剂量彼此间隔约24小时施用。
在第31实施方式中，方法包括向对象施用静脉内(IV)剂量的约100mg的9-[(2,2-二甲基-丙基氨基)-甲基]-米诺环素或其盐，然后是4-13个口服剂量的300mg的9-[(2,2-二甲基-丙基氨基)-甲基]-米诺环素或其盐，其中IV剂量和4-13个口服剂量彼此间隔约24小时施用；进一步包括向对象施用额外口服剂量的300mg的9-[(2,2-二甲基-丙基氨基)-甲基]-米诺环素或其盐，距IV剂量约12小时施用，以致治疗对象。
在第32实施方式中，方法包括向对象施用静脉内(IV)剂量的约200mg的9-[(2,2-二甲基-丙基氨基)-甲基]-米诺环素或其盐，然后是四个口服剂量的450mg的9-[(2,2-二甲基-丙基氨基)-甲基]-米诺环素或其盐，以致治疗对象，其中IV剂量和四个口服剂量彼此间隔约24小时施用。
在第33实施方式中，方法包括向对象施用静脉内(IV)剂量的约200mg的9-[(2,2-二甲基-丙基氨基)-甲基]-米诺环素或其盐，然后是4-13个口服剂量的450mg的9-[(2,2-二甲基-丙基氨基)-甲基]-米诺环素或其盐，以致治疗对象，其中IV剂量和4-13个口服剂量彼此间隔约24小时施用。
在第34实施方式中，方法包括向对象施用两个静脉内(IV)剂量，间隔12小时施用，各为约100mg的9-[(2,2-二甲基-丙基氨基)-甲基]-米诺环素或其盐，然后是4-13个口服剂量的450mg的9-[(2,2-二甲基-丙基氨基)-甲基]-米诺环素或其盐，以致治疗对象，其中两个IV剂量中的第一个和4-13个口服剂量彼此间隔约24小时施用。
在第35实施方式中，方法包括向对象施用静脉内(IV)剂量的约100mg的9-[(2,2-二甲基-丙基氨基)-甲基]-米诺环素或其盐，然后是4-13个口服剂量的450mg的9-[(2,2-二甲基-丙基氨基)-甲基]-米诺环素或其盐，其中IV剂量和4-13个口服剂量彼此间隔约24小时施用；进一步包括向对象施用额外口服剂量的450mg的9-[(2,2-二甲基-丙基氨基)-甲基]-米诺环素或其盐，距IV剂量约12小时施用，以致治疗对象。
在第36实施方式中，方法包括向所述对象施用五个口服剂量的各约300mg的9-[(2,2-二甲基-丙基氨基)-甲基]-米诺环素或其盐，彼此间隔约24小时施用；并且进一步包括向所述对象施用额外口服剂量的300mg的9-[(2,2-二甲基-丙基氨基)-甲基]-米诺环素或其盐，在距所述五个口服剂量中的第一个约12小时施用，以致治疗所述对象。
在第37实施方式中，方法包括向对象施用5-14个口服剂量的各约300mg的9-[(2,2-二甲基-丙基氨基)-甲基]-米诺环素或其盐，彼此间隔约24小时施用；并且进一步包括向对象施用额外口服剂量的300mg的9-[(2,2-二甲基-丙基氨基)-甲基]-米诺环素或其盐，距5-14个口服剂量中的第一个约12小时施用，以致治疗对象。
在第38实施方式中，方法包括向所述对象施用五个口服剂量的各约450mg的9-[(2,2-二甲基-丙基氨基)-甲基]-米诺环素或其盐，彼此间隔约24小时施用；并且进一步包括向所述对象施用额外口服剂量的450mg的9-[(2,2-二甲基-丙基氨基)-甲基]-米诺环素或其盐，在距所述五个口服剂量中的第一个约12小时施用，以致治疗所述对象。
在第39实施方式中，方法包括向对象施用5-14个口服剂量的各约450mg的9-[(2,2-二甲基-丙基氨基)-甲基]-米诺环素或其盐，彼此间隔约24小时施用；并且进一步包括向对象施用额外口服剂量的450mg的9-[(2,2-二甲基-丙基氨基)-甲基]-米诺环素或其盐，距5-14个口服剂量中的第一个约12小时施用，以致治疗对象。
在第40实施方式中，方法包括向所述对象施用五个口服剂量的各约600mg的9-[(2,2-二甲基-丙基氨基)-甲基]-米诺环素或其盐，彼此间隔约24小时施用；并且进一步包括向所述对象施用额外口服剂量的600mg的9-[(2,2-二甲基-丙基氨基)-甲基]-米诺环素或其盐，在距所述五个口服剂量中的第一个约12小时施用，以致治疗所述对象。
在第41实施方式中，第1至第40实施方式中任一个的UTI是简单的泌尿道感染(uUTI)或膀胱炎。
在第42实施方式中，第1至第40实施方式中任一个的UTI是复杂的泌尿道感染(cUTI)或肾盂肾炎。
在第43实施方式中，第1至第42实施方式中任一个的UTI是社区获得性的。
在第44实施方式中，第1至第42实施方式中任一个的UTI是医院获得性的或与医疗保健相关的(例如，在尿道导管插入术期间获得)。
在第45实施方式中，第1至第44实施方式中任一个的UTI的特征在于存在选自下列的病原体：大肠杆菌(Escherichia coli)(ESBL+、ESBL-、FQS、FQR、碳青霉烯抗性的、碳青霉烯易感的)、腐生葡萄球菌(Staphylococcus saprophyticus)、肺炎克雷伯菌(Klebsiella pneumoniae)(ESBL+、ESBL-、FQS、FQR)、和肠球菌属(Enterococcus)(粪肠球菌(E. faecalis)VS、粪肠球菌VNS、万古霉素抗性粪肠球菌(VRE)、屎肠球菌(E. faecium)VS、屎肠球菌VNS、万古霉素抗性屎肠球菌(VRE))、MSSA、MRSA、MSCoNS、MRCoNS、无乳链球菌(Streptococcus agalactiae)(B组链球菌)、产酸克雷伯菌(K. oxytoca)、阴沟肠杆菌(E. cloacae)CeftazS、阴沟肠杆菌CeftazR、枸橼酸杆菌属物种(Citrobacter spp.)、粘质沙雷菌(S. marcescens)和不动杆菌属(Acinetobacter)。任选地，9-[(2,2-二甲基-丙基氨基)-甲基]-米诺环素或其盐针对病原体的MIC90(最小90%抑制浓度)是16μg/mL或更低、8μg/mL或更低、4μg/mL或更低、或2μg/mL或更低。例如，病原体可为多药抗性(MDR)病原体，包括MRSA和大肠杆菌(例如，ESBL+大肠杆菌)。如本文所用，“多药抗性(MDR)”包括对两类或更多类抗生素的抗性，所述抗生素例如那些常用的口服抗生素，包括FQ 抗性、磺胺药物抗性、甲氧苄啶抗性、四环素抗性、头孢菌素抗性、青霉素抗性等或其组合。抗性可特异于化学类别或该类别的特定成员；和/或可在特定分离物中单独或以各种组合出现。
在第46实施方式中，第45实施方式的病原体包括产生超广谱β-内酰胺酶(ESBL)的大肠杆菌(例如，对多种抗生素具有抗性的那些)。
在第47实施方式中，第45或第46实施方式的病原体在来自所述对象的尿培养物中具有≥ 105 CFU/mL的滴度。
在第48实施方式中，第1至第47实施方式中任一个的对象具有选自以下的UTI的临床体征和症状中的两种或更多种：(1)与发热相关的寒战或发冷或温暖(例如，口腔温度高于38℃)；(2)侧腹疼痛(肾盂肾炎)或骨盆疼痛(cUTI)；(3)恶心或呕吐；(4)排尿困难、尿频或尿急；(4)身体检查时肋脊角压痛；(5)具有脓尿证据的尿样本(例如，白细胞酯酶的试纸分析为阳性，或每立方毫米至少10个白细胞)；和(6)耻骨上疼痛。
在第49实施方式中，第1至第48实施方式中任一个的对象被治疗，如通过来自对象的尿培养物的病原体滴度的治疗后至少10倍减少所证明的。
在第50实施方式中，第1至第49实施方式中任一个的对象在来自对象的尿培养物上具有小于104 CFU/mL的治疗后病原体滴度。
在第51实施方式中，第1至第50实施方式中任一个的对象是雌性。
在第52实施方式中，第51实施方式的雌性是糖尿病的、妊娠的、具有多发性硬化、和/或具有影响尿流动的病症(例如肾结石、中风和脊髓损伤)。
在第53实施方式中，第1至第52实施方式中任一个的口服剂量中的每一个作为两个或三个150mg片剂独立施用。
在第54实施方式中，第1至第53实施方式中任一个的IV剂量中的每一个经约30分钟(例如，至少30分钟且不超过45分钟)连续施用。
本发明的另一方面提供在需要其治疗的对象中治疗泌尿道感染(UTI)的方法，包括向对象施用IV剂量的9-[(2,2-二甲基-丙基氨基)-甲基]-米诺环素或其盐，以致治疗对象。
具体地，在第55实施方式中，本发明提供在需要其治疗的对象中治疗泌尿道感染(UTI)的方法，包括向对象施用IV剂量的约100-200 mg的9-[(2,2-二甲基-丙基氨基)-甲基]-米诺环素或其盐，以致治疗对象。
在第56实施方式中，第55实施方式的对象不施用口服剂量的9-[(2,2-二甲基-丙基氨基)-甲基]-米诺环素或其盐。
在第57实施方式中，第55或第56实施方式的IV剂量是约100 mg或约200 mg的9-[(2,2-二甲基-丙基氨基)-甲基]-米诺环素或其盐。
在第58实施方式中，根据第55至第57实施方式中任一个的方法包括向对象施用一个IV剂量的约100 mg的9-[(2,2-二甲基-丙基氨基)-甲基]-米诺环素或其盐，每24 小时一次，总共3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13或14天。
在第59实施方式中，第55至第57实施方式中任一个的方法包括向对象施用一个IV剂量的约100 mg的9-[(2,2-二甲基-丙基氨基)-甲基]-米诺环素或其盐，每24 小时一次，总共5-14天。
在第60实施方式中，第58或第59实施方式的方法进一步包括在第一个IV剂量后约12小时，向对象施用额外IV剂量的约100 mg的9-[(2,2-二甲基-丙基氨基)-甲基]-米诺环素或其盐。
在第61实施方式中，在第55至第60实施方式中任一个的方法中，UTI是cUTI或肾盂肾炎。
如本文所用，术语“对象”可包括能够患有细菌感染的动物(例如，非人哺乳动物)。对象的实例包括动物，诸如农场动物(例如，牛、猪、马、山羊、兔、绵羊等)、实验室动物(小鼠、大鼠等)、宠物(例如，狗、猫、雪貂等)和灵长动物(例如，人和非人灵长动物诸如猴、大猩猩、黑猩猩等)。
在上述实施方式的任一中，对象可为人、非人灵长动物或非人哺乳动物。
术语“治疗(treating)”或“治疗(treatment)”指改善、根除或减轻待治疗的病症例如细菌感染的一种或多种症状。在某些实施方案中，病症术语包括根除与待治疗感染关联的细菌。
术语“预防”意味着防止或减少细菌感染的风险。
术语“抗性”或“抗性的”指如由临床和实验室标准研究所(Clinical andLaboratories Standards Institute，CLSI)和/或食品与药物管理局(Food and DrugAdministration，FDA)定义的抗生素/生物标准。
在一些实施方式中，感染可对其它抗生素诸如青霉素或四环素具有抗性。
术语“有效量”包括治疗细菌感染(例如UTI)所需的四环素化合物的量。例如，有效量描述了足以通过杀死细菌和/或抑制细菌生长实现所需治疗效果的有效水平。优选地，当根除病原体(例如细菌)时，细菌感染得以治疗。当感染的至少一种症状减少、缓解或消除时，细菌感染也得以治疗。
术语“可评估的临床成功”指临床试验参与者，其：(1)不满足可评估的临床失败的任何标准；(2)未因任何其它原因接受潜在有效的非研究抗生素；和(3)盲法评估者在治愈评估试验中表明，感染已经充分解决，以致不需要抗生素。
术语“可评估的临床失败”指满足以下标准中任一的临床试验参与者：盲法评估者停止研究药物，并且表明感染不充分地反应以致需要一种或多种替代抗生素；由于被评估为可能或也许是药物相关的不良事件，盲法评估者停止研究药物；通过手术去除感染的主要部位；或者对象在静脉内或口服治疗结束后没有评估。
术语“临床成功率”指可评估的临床成功的数量除以试验中群体的总数量。
术语“微生物学可评估的临床成功率”指满足可评估的临床成功定义且在基线具有感染病原体的那些。
在一个实施方式中，当口服施用时，四环素化合物例如 9-[(2,2-二甲基-丙基氨基)-甲基]-米诺环素的有效量是约150至约600 mg、约150至约450 mg、约150至约300 mg、约300至约600 mg、约300至约450 mg、约450至约600 mg、约150 mg、约300 mg、约450 mg或约600 mg。
在一些实施方式中，口服剂量可为约300-600 mg、约300-450 mg、约350-550 mg、约400-500 mg或约450 mg。
在一些实施方式中，每一口服剂量以150 mg剂量的倍数(例如，150 mg、2 × 150mg、3 × 150 mg或4 × 150 mg)施用。例如，300 mg口服剂量可由2个150 mg片剂/丸剂/胶囊/凝胶等组成。
在另一实施方式中，当静脉内(IV)施用时，四环素化合物例如9-[(2,2-二甲基-丙基氨基)-甲基]-米诺环素的有效量是约50至约200 mg、约50至约150 mg、约50至约100 mg、约100 mg至约200 mg、约100 mg至约150 mg、约150 mg至约200 mg, 约100 mg或约200 mg。
IV制剂或口服制剂中的化合物可作为盐(例如甲苯磺酸盐或盐酸盐)或作为游离碱施用。
应理解，本文无论在何处提供值和范围，例如在对象群体的年龄、剂量和血液水平中提供值和范围，这些值和范围所涵盖的所有值和范围都意图包含在本发明的范围内，包括范围的所述上限和/或下限。而且，这些值和范围中的所有值也可为范围的上限或下限。
在另一实施方式中，四环素化合物(例如，化合物1)可每天一次或两次、或是静脉内或是口服地施用。在一些实施方式中，每天两次施用具有两个相等的剂量。
在一些实施方式中，9-[(2,2-二甲基-丙基氨基)-甲基]-米诺环素具有大于约60％的微生物学可评估的临床成功率。在一些实施方式中，在意图治疗(ITT)患者群体或在临床可评估(CE)患者群体中，本发明化合物具有大于约60%、65%、70%、75%、76%、77%、78%、79%、80%、81%、82%、83%、84%、85%、86%、87%、88%、89%、90%、91%、92%、93%、93.7%、94%、95%、96%、97%、97.5%、98%、99%或更多的临床成功率。在2015 FDA cUTI指南中，微生物学ITT被认为是效力的主要分析群体。
如本文所用，“意图治疗(或ITT)”群体指所有入选的临床试验对象。在一些实施方式中，ITT群体进一步限于已接受至少一个剂量的研究药物(例如化合物1)的所有入选的临床试验对象。“临床可评估的(或CE)”群体指具有如由相关临床方案定义的合格感染的所有ITT对象，例如具有UTI的那些。“临床成功”指在最后剂量的研究药物之后的设定时期(例如，10至17天)，由临床研究者评估的ITT或CE群体中基线症状的持续改善或完全解决。
在一个实例中，静脉内治疗对象，然后是口服降低(step down)。在一些实施方式中，通过口服剂量直接治疗对象，没有任何之前的IV剂量。
在一些实施方式中，本发明提供针对感染(例如UTI)治疗对象的方法，包括向对象施用有效量的化合物 1或其盐，其中对象最初静脉内治疗约1天，然后是约2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12或13天的口服治疗，以致治疗对象。在一些实施方式中，第一天的IV治疗由较高负荷剂量(例如，2× 剂量或2 × 100 mg 剂量)组成。在一些实施方式中，总治疗时期是约4、5、6或7天。在一些实施方式中，IV 负荷剂量中的一个(例如，第2 IV 负荷剂量)或两个被300 mg或450 mg 口服剂量代替。
在另一实施方式中，本发明提供针对感染(例如UTI)治疗对象的方法，包括向所述对象施用有效量的化合物 1或其盐，其中最初静脉内治疗的对象具有升高的化合物1血液水平，然后是用口服治疗降低的化合物1血液水平，以致治疗对象。在一些实施方式中，最初升高的化合物1血液水平通过更高(例如，2×)的一个或多个负荷剂量实现。
本发明的药物组合物
本发明也有关药物组合物，其包含：治疗有效量的四环素化合物(例如，9-氨基甲基四环素化合物，例如，9-[(2,2-二甲基-丙基氨基)-甲基]-米诺环素)或其盐；和任选地，药学上可接受的载体。
在一个进一步的实施方式中，本发明有关药物组合物，其包含约100至约700 mg(例如，约300、450或600 mg)的9-[(2,2-二甲基-丙基氨基)-甲基]-米诺环素或其盐、和药学上可接受的载体。在一个进一步的实施方式中，药学上可接受的载体是对于口服施用可接受的。在另一进一步的实施方式中，四环素化合物是游离碱或甲苯磺酸盐。
在又一进一步的实施方式中，组合物包含约110至约490 mg、约120至约480 mg、约130至约470 mg、约140至约460 mg、约150至约450 mg、约160至约440 mg、约170 mg至约430mg、约180 mg至约420 mg、约190 mg至约410 mg、约200 mg至约400 mg、约210 mg至约390mg、约220 mg至约380 mg、约230 mg至约370 mg、约240 mg至约360 mg、约250 mg至约350mg、约260 mg至约340 mg、约270 mg至约330 mg、约280 mg至约320 mg、约290 mg至约310mg、或约300 mg的9-[(2,2-二甲基-丙基氨基)-甲基]-米诺环素。任选地，药学上可接受的载体适于口服施用。
在另一实施方式中，本发明也有关药物组合物，其包含约50至约250 mg的9-[(2,2-二甲基-丙基氨基)-甲基]-米诺环素或其盐(例如，盐酸盐)、和适于静脉内施用的药学上可接受的载体。
在又一进一步的实施方式中，组合物包含约100至约300 mg、约125至约275 mg、约150 mg至约250 mg、约100 mg至约200 mg、约100 mg、或约200 mg的9-[(2,2-二甲基-丙基氨基)-甲基]-米诺环素。
语言“药学上可接受的载体”包括这样的物质，其能够与本发明的四环素化合物、例如9-[(2,2-二甲基-丙基氨基)-甲基]-米诺环素共同施用，并且其允许四环素化合物执行其意图的功能、例如治疗或预防细菌感染。合适的药学上可接受的载体包括但不限于：水、盐溶液、醇、植物油、聚乙二醇、明胶、乳糖、直链淀粉、硬酯酸镁、滑石、硅酸、粘性石蜡、芳香油、脂肪酸甘油一酯和甘油二酯、石油醚(petroethral)脂肪酸酯、羟甲基纤维素、聚乙烯吡咯烷酮等。药物制剂可以被灭菌，并且如果需要与助剂混合，所述助剂例如润滑剂、防腐剂、稳定剂、湿润剂、乳化剂、影响渗透压的盐、缓冲剂、着色剂、矫味剂和/或芳香物质等，它们不与本发明的活性化合物有害地反应。
性质为碱性的本发明的四环素化合物(例如，化合物 1)能够与各种无机酸和有机酸形成广泛多种的盐。可用于制备性质为碱性的本发明米诺环素化合物的药学上可接受的酸加成盐的酸为形成无毒酸加成盐的那些，所述酸加成盐即包含药学上可接受的阴离子的盐，例如盐酸盐、氢溴酸盐、氢碘酸盐、硝酸盐、硫酸盐、硫酸氢盐、磷酸盐、酸式磷酸盐、异烟酸盐、乙酸盐、乳酸盐、水杨酸盐、柠檬酸盐、酸式柠檬酸盐、酒石酸盐、泛酸盐、酒石酸氢盐、抗坏血酸盐、琥珀酸盐、马来酸盐、龙胆酸盐、富马酸盐、葡糖酸盐、葡糖二酸盐(glucaronate)、糖二酸盐(saccharate)、甲酸盐、苯甲酸盐、谷氨酸盐、甲磺酸盐、乙磺酸盐、苯磺酸盐、对甲苯磺酸盐和棕榈酸盐[即1,1’-亚甲基-二-(2-羟基-3-萘甲酸盐)]盐。尽管这些盐对于施用于对象例如哺乳动物必须是药学上可接受的，但是实践中常常需要最初作为药学上不可接受的盐从反应混合物中分离本发明的米诺环素化合物，并且然后通过用碱性试剂处理将药学上不可接受的盐简单地转化回游离碱化合物，并且接着将后者的游离碱转化为药学上可接受的酸加成盐。本发明的碱性化合物的酸加成盐容易通过下列制备：在水性溶剂介质中或在合适的有机溶剂例如甲醇或乙醇中，用实质上等价量的所选无机酸或有机酸处理碱化合物。在小心地蒸发溶剂后，容易获得所需的固体盐。优选地，本发明的四环素化合物作为甲苯磺酸盐(例如对甲苯磺酸盐)或作为游离碱、口服或作为盐酸盐静脉内施用。
本发明的四环素化合物(例如，化合物1)及其药学上可接受的盐可以通过口服、胃肠外或局部途径施用。一般而言，这些化合物最理想地以有效剂量施用，这取决于所治疗的对象的体重和状况以及所选择的具体施用途径。取决于所治疗对象的物种和其对所述药物的个别反应、以及所选择药物制剂的类型和进行这种施用的时期和间隔，可以发生改变。
本发明的药物组合物可单独施用、或与用于治疗对象例如哺乳动物中四环素反应状态的其它已知组合物组合施用。哺乳动物包括宠物(例如，猫、狗、雪貂等)、农场动物(牛、绵羊、猪、马、山羊等)、实验室动物(大鼠、小鼠、猴等)和灵长动物(黑猩猩、人、大猩猩)。语言与已知组合物“联合”意图包括同时施用本发明的组合物和已知组合物，先施用本发明的组合物、随后是已知组合物，以及先施用已知组合物、随后是本发明的组合物。本领域已知用于治疗四环素反应状态的治疗组合物中的任一可用于本发明的方法。
本发明的化合物可通过前述途径中的任一单独施用或与药学上可接受的载体或稀释剂组合施用，并且施用可以单个或多个剂量进行。例如，本发明的新的治疗剂可以有利地以广泛多种的不同剂型施用，即，它们可与各种药学上可接受的惰性载体以下列形式组合：片剂、胶囊剂、锭剂、糖锭剂、硬糖剂、散剂、喷雾剂、乳膏剂、油膏剂、栓剂、胶冻剂、凝胶剂、糊剂、洗剂、软膏剂、水性混悬剂、注射溶液、酏剂、糖浆剂等。这些载体包括固体稀释剂或填充剂、无菌水性介质和各种无毒有机溶剂等。此外，口服药物组合物可以适当地增甜和/或矫味。一般而言，本发明的治疗有效的四环素化合物在这些剂型中以按重量计从约5.0%至约70%变化的浓度水平存在。
对于口服施用，包含各种赋形剂的片剂可连同各种崩解剂与造粒粘合剂一起使用，所述赋形剂例如微晶纤维素、柠檬酸钠、碳酸钙、磷酸二钙和甘氨酸，所述崩解剂例如淀粉(并且优选地，玉米淀粉、马铃薯淀粉或木薯淀粉)、藻酸和某些复合硅酸盐，所述造粒粘合剂如聚乙烯吡咯烷酮、蔗糖、明胶和阿拉伯胶。另外，润滑剂例如硬酯酸镁、十二烷基硫酸钠和滑石对于压片目的通常是非常有用的。类似类型的固体组合物还可用作明胶胶囊中的填充剂；就此而言的优选材料还包括乳糖(lactose or milk sugar)以及高分子量聚乙二醇。
当需要水性混悬剂和/或酏剂用于口服施用时，活性成分可与各种甜味剂或矫味剂、着色物质或染料组合，并且如果如此需要也与乳化剂和/或悬浮剂连同这样的稀释剂组合，所述稀释剂如水、乙醇、丙二醇、甘油和其各种类似组合。
对于胃肠外施用(包括腹膜内、皮下、静脉内、皮内或肌内注射)，可使用本发明的治疗化合物在芝麻油或花生油或在水性丙二醇中的溶液。必要时，水性溶液应当适当地缓冲(优选地，pH大于8)，并且首先使液体稀释剂等渗。
这些水性溶液适合于静脉注射目的。油性溶液适合于关节内、肌内以及皮下注射目的。通过本领域技术人员公知的标准制药技术，容易在无菌条件下完成所有这些溶液的制备。对于胃肠外应用，合适制剂的实例包括溶液，优选地油性或水性溶液，以及混悬剂、乳化剂或植入剂，包括栓剂。治疗化合物可在多个或单个剂量形式中以无菌形式配制，例如分散于流体载体中，所述流体载体例如通常随注射剂应用的无菌生理盐水或5%盐水右旋糖溶液。
对于肠应用，特别适合的是具有滑石和/或碳水化合物载体粘合剂等的片剂、糖锭剂或胶囊剂，所述载体优选地是乳糖和/或玉米淀粉和/或马铃薯淀粉。可以使用糖浆剂、酏剂等，其中应用增甜运载体(vehicle)。可以配制持续释放组合物，包括其中例如通过微囊化、多重包衣等用可差别降解包衣保护活性成分的那些。
除了人对象的治疗之外，本发明治疗方法还将具有显著的兽医应用，例如，用于治疗牲畜例如牛、绵羊、山羊、母牛、猪等；家禽例如鸡、鸭、鹅、火鸡等；马；和宠物例如狗和猫。本发明化合物还可用于治疗非动物对象，例如植物。
针对UTI 病原体的效力
在插入导管的患者中或在具有多重抗性细菌的来自社区的患者中发生的泌尿道感染(UTI)对医生提出了治疗挑战。虽然在医院环境中最常见的是，这些多重抗性细菌、特别是产生ESBL并具有其它抗性机制的肠杆菌科(Enterobacteriaceae)在社区中变得越来越普遍。在任一环境中，用于可靠的一线治疗的治疗UTI的抗生素的选择是有限的。此外，包括MRSA和肠球菌属物种的具有渐增抗性的革兰氏阳性生物也是治疗关注点。最常见的泌尿道病原体是大肠杆菌。对于产ESBL的临床分离物的抗性率使得一些常见抗生素的使用不太可靠，并且可导致进展为生物向肾脏、血流和其它器官的非常严重的扩散。例如，对于重要头孢菌素的抗性率从对于头孢他啶50％到对于头孢曲松95％、对于左氧氟沙星和其它喹诺酮76.5％、和对于多西环素46％变化。
本文呈现的数据证明化合物1是有效的抗生素剂，其针对最常见的UTI病原体具有广谱活性。例如，与对于头孢曲松>8 μg/mL和对于左氧氟沙星>4 μg/mL相比，针对产生ESBL的大肠杆菌的化合物1的MIC90是< 4 μg/mL。在一个人1期研究中，单一口服剂量的化合物 1导致经24小时平均为7.6至11.2μg/mL的尿中估计浓度；并且包括肾脏的组织中的化合物1浓度是血浆中该浓度的大约 4倍。预期静脉内(IV)给药后和稳态(steady-state)的浓度甚至更高。因此，化合物1可以在尿中实现将有效治疗产生ESBL的大肠杆菌和其它关键病原体的浓度，因此，当抗性的影响降低当今最目前可得的IV和口服抗生素的可靠性时，其为UTI提供可靠的一线治疗。
a) 啮齿动物药代动力学
动物和人药代动力学研究二者表明，化合物1良好地分布至组织。在小鼠中的研究表明，化合物1实现大于在血浆中的组织浓度，如表1中所示。在肺和大腿肌肉中实现了类似的浓度。
表1. 化合物1在小鼠血浆相对于肾脏中的药代动力学
在大鼠中，基于静脉内给药的14C-化合物1，大约30％的剂量(5mg/kg)在尿中排泄，且25％在最初的24小时中排泄。剩余的剂量排泄到粪便中。IV给药后，肾脏中的放射性浓度(皮质：12,700 ng/g；髓质：11,500 ng/g；肾盂11,300 ng/g)在剂量后5分钟和剂量后24小时超过血液浓度(1,570 ng/ml)(血液：57.6 ng/ml；肾皮质318 ng/g；肾髓质：167 ng/g；肾盂：161 ng/g)。进一步地，在口服给药后，肾脏中的Cmax(皮质：721 ng/g；髓质：722 ng/g；肾盂1580 ng/g)超过血液的Cmax(125 ng/ml)，如同AUCinf (血液：3030 ng*h/ml；肾皮质：11,000 ng*h/ml；肾髓质：10,900 ng*h/ml；肾盂：10,500 ng*h/ml)。与口服化合物1相比，IV化合物1的肾脏浓度与血液的比更大，表明血浆和肾脏/尿浓度之间有关联，与口服给药相比，其在IV给药后获得高得多和更快的Cmax。
b) 人药代动力学
将14C标记的化合物1作为单一口服300 mg 剂量施用给健康人对象。血浆Cmax (563ng/ml)和AUCinf (9418 ng*hr/ml)与之前的口服给药研究一致。尿中化合物1的浓度显示在表2中，并且表明在整个给药间隔尿浓度超过血浆浓度。尿中的AUC0-24是186.1 μg*hr/ml。
表2. 人尿浓度(单一300 mg口服剂量)
如果人中的尿浓度反映Cmax和血浆浓度，如大鼠中显示的，则化合物1的IV剂量(单一IV剂量后，Cmax 大约 1800 ng/ml)和当前剂量方案(负荷剂量)预期导致较高的尿浓度，尤其是在给药间隔的第一段中。化合物1的稳态AUC (IV和口服)和Cmax (口服)是单一IV或口服剂量的那种的大约1.5×，其在治疗过程中可能反映在尿和肾脏浓度二者中。据信，时间 > MIC是UTI中效力的驱动因素- 因此，经整个给药间隔，应用单一口服剂量，化合物1的尿浓度超过4 μg/mL大约2×。因此，在稳态下多个剂量后，化合物1的尿浓度将接近将是4μg/ mL的3-4倍的浓度。此外，有证据表明，化合物1可以在低于抑制(sub-inhibitory)浓度、并且在最大暴露后药物消散时的延长时期发挥抗毒力因子作用。因此，基于抑制必需因子合成的能力，化合物1可以干扰生物膜产生和粘附、运动和细胞毒素产生。
c) 微生物学
化合物1的体外活性在表3中表明。之前的研究表明，在培养基中化合物1的体外活性至pH6.0稍微降低。但是，最近的研究证实，相对于标准培养基，化合物1针对尿病原体大肠杆菌和腐生葡萄球菌(S. saprophyticus)的活性在尿中是稳定的。化合物1在膀胱中的尿中的效力的药效学驱动因素被推测为时间> MIC。预期时间因子在给药间隔的50％范围内。因此，基于人尿浓度推测MIC ≤ 4 μg/mL将代表易感分离物，并且如果在单一剂量ADME研究中稳态尿浓度大于所表明的，这可能更大。
来自2010年4171个大肠杆菌分离物的监测研究的数据证明，> 97％的分离物具有<4μg/ mL的MIC值(下表3)，所述大肠杆菌分离物包括具有ESBL+和喹诺酮抗性表型的分离物。这一活性水平对于UTI的经验性治疗特别重要，因为大肠杆菌是迄今为止在这一适应症中最常见的病原体，并且口服治疗对于允许患者尽快从急诊室或医院离开进行在家中治疗是重要的。
表3. 通过化合物1的累积抑制(粗体：感兴趣的生物)
*MS =甲氧西林易感的；MR =甲氧西林抗性的；CoNS =凝固酶阴性葡萄球菌；VS =万古霉素易感的；VNS =万古霉素非易感的(包括万古霉素抗性的或VRE)；ESBL =超广谱β-内酰胺酶表型；FQS =氟喹诺酮易感的；FQR =氟喹诺酮抗性的；CeftazS = 头孢他啶易感的；CeftazR =头孢他啶抗性的
**来自CMI 07的数据。
来自2006-2008的2008 CDC NHSN研究总结了医院ICU中与导管相关的UTI相关的主要病原体。如预期的，大肠杆菌是主要的病原体，并且革兰氏阳性生物占感染的显著比例。对几种重要基准抗生素的抗性率在所有关键病原体中是显著的，并且当今的情况可能更糟。表4总结了报告的结果。
表4. 导管相关UTI中的细菌病原体* (粗体：关键病原体)
*Hidron, A. et al. 2008. Antimicrobial-Resistant Pathogens AssociatedWith Healthcare-Associated Infections: Annual Summary of Data Reported to theNational Healthcare Safety Network at the Centers for Disease Control andPrevention，2006–2007. Infection Control and Hospital Epidemiology. November2008, vol. 29, no. 11 **根据发生率。念珠菌属物种(Candida spp)评级#2。
对于来自Sentry 2010监测研究的UTI中的关键生物，化合物1的比较体外活性在表5中显示。ESBL肠杆菌科对于许多药物的抗性率高，所述药物包括氟喹诺酮(左氧氟沙星)、老四环素(多西环素)和氨基糖苷类(庆大霉素)。
表5. 化合物1(奥玛环素)和比较物药剂针对关键UTI生物的活性
a 当N <10时，显示MIC的范围
* % 抗性，其基于CLSI断点(北美洲和拉丁美洲)或Eucast断点(欧洲和亚洲/太平洋)
** N ( ) = 具有抗性表型的物种的%。
上述数据表明，化合物1的体外活性足以覆盖关键的UTI病原体，尤其是考虑到人中实现的稳健的尿和肾脏浓度(基于初步的单一剂量口服人研究)。啮齿动物药代动力学数据为人中预期的尿排泄和肾脏浓度提供更多的支持和细节。
存在可有利地影响化合物1在UTI治疗中的效力的另外的因素。由于化合物 1抑制蛋白合成，可损害生物产生毒力因子的能力，包括产生生物膜、粘附生物膜和上行泌尿道的能力。已显示化合物1即使在低于生长抑制浓度也抑制细胞毒素产生，表明除了其对细菌增殖的影响之外，化合物1具有引起和维持蛋白合成抑制的能力。预期在肾脏组织中实现的高组织浓度有助于治疗或预防上行组织感染，包括菌血症。
因此，化合物1的体外活性及其在泌尿道中的药代动力学提供下列强证据，即化合物1作为一线IV-至-口服或完全口服经验单药疗法治疗选择有效治疗UTI。
本发明的实施例
实施例1 在具有膀胱炎的成年雌性中，评估9-[(2,2-二甲基-丙基氨基)-甲基-米诺环素(化合物1)的安全性和药代动力学(PK)的1b期研究
化合物1是氨甲环素类抗生素的第一个成员，它是四环素类的半合成衍生物。化合物1具有针对与膀胱炎相关的最常见细菌病原体的体外活性，并且已经显示具有由肾脏排泄的显著分数的施用剂量。
化合物1具有针对关键泌尿道感染(UTI)病原体的体外活性，所述病原体包括对多种抗生素具有抗性的产生超广谱β-内酰胺酶(ESBL)的大肠杆菌。初步的单一口服剂量研究显示，稳健的尿和肾脏化合物1浓度可以在人中实现。目前的研究设计为，在具有简单的泌尿道感染(膀胱炎)的对象的治疗中，证明化合物1的四个多剂量方案的安全性、药代动力学和效力。
因此，研究的主要目的是在具有膀胱炎的成年雌性对象中评估化合物1的尿和血浆浓度。研究的次要目的是在具有膀胱炎的成年雌性对象的治疗中评估化合物1的安全性。另外的次要目的可包括：(1)评估根据治疗组或根据给药方案的微生物学反应和临床反应；和(2)评估具有膀胱炎的成年对象中化合物1的药代动力学(PK)和药效学(PD)关联。
此外，研究的一个探索性目的是探索具有膀胱炎的成年雌性对象中化合物1的潜在临床效力。
根据研究设计，进行随机的(1:1:1)、开放标签、平行设计的1b期研究，其比较在具有膀胱炎的成年雌性的治疗中化合物 1 (9-[(2,2-二甲基-丙基氨基)-甲基-米诺环素)的3个给药方案。满足纳入和排除标准的具有简单的泌尿道感染(膀胱炎)的约31个雌性患者在2-4个美国治疗中心入选。所有入选的对象参与研究大约5-6周。在筛选至多48小时后，将合格的对象随机指定为接受如下所示的化合物1治疗的3种给药方案中的一种。所有治疗组中的对象居住5天治疗时期。下面进一步描述研究的细节。
剂量方案选择的基本原理：
本研究根据FDA Guidance for Industry: Uncomplicated Urinary TractInfections – Developing Antimicrobial Drugs for Treatment (FDA, 1998)设计。
在1期研究中，将536名对象暴露于化合物 1 IV或口服制剂。已经研究了至多600mg的单一IV剂量和至多600 mg的单一口服剂量。已经研究了多个IV剂量的100mg每天一次、和200mg每天一次，分别至多14和7个连续天。也在没有任何严重的不良事件的情况下研究了多个口服剂量的200 mg每天一次、和300mg每天一次，至多10个连续天。在所有1期研究中，在接受多剂量化合物1的任何对象中，没有由于药物相关不良事件(AE)的停止。
化合物1的半衰期为大约 18 小时。本研究包括应用负荷剂量实现快速稳态条件。
简单的 UTI分别在80%和5-15%的病例中最通常由大肠杆菌和腐生葡萄球菌(Staphylococcus saprophyticus)引起(American Urological Association,www.auanet.org)。对于化合物1针对这些常见病原体测试的至少90％的分离物的最小抑制浓度(MIC90)是，对于腐生葡萄球菌(S. saprophyticus)为1 µg/mL，对于ESBL阴性大肠杆菌为2 µg/mL，和对于产生ESBL的大肠杆菌为4 µg/mL。
尽管化合物1在UTI中的效力的驱动因素不完全已知，并且尽管不希望受任何特定理论的束缚，但申请人认为，最大化尿浓度高于病原体MIC的时间(理想地，在整个给药间隔)是理想的。这一观点部分基于评估单一300mg口服剂量的14C-化合物1的处置的临床研究。在这一研究中，血浆浓度与之前的口服给药研究一致(浓度-时间曲线下面积从0到无穷大[AUC0-inf] 9.4 µg•h/mL)，并且确定大约40％的吸收剂量在尿中排除。未直接测量化合物1的尿浓度，但估计浓度(基于排泄的放射性的部分)超过血浆浓度，并且在给药后经24小时平均为7.6至11.2 µg/mL。这些尿浓度将超过产生ESBL的大肠杆菌的MIC90(4 µg/mL)大约2倍。从申请人的临床研究还已知，基于血浆浓度对化合物1的暴露在稳态比在单一剂量后高大约 50%。因此，申请人预期，每口服剂量300mg的多个剂量的化合物1将导致是常见的简单的 UTI 病原体的MIC90的至少3倍的尿浓度。
基于这些预测，并允许对象间变异性，这些数据表明，300 mg是化合物1的最低每日口服剂量，其将维持有利的尿浓度来治疗这些病原体。因此，在第1天都包含“负荷-剂量”策略的两种不同方案中，300 mg每日口服剂量应当更快地达到稳态。
因此，在一些实施方式中，一种方案在第1天提供初始200mg IV剂量的化合物1，然后是口服每日一次剂量的300 mg。已知300mg剂量的化合物1片剂与100mg IV剂量生物等效，因此，预期200 mg IV与口服600 mg相当。尽管GI AE的增加的发生率可与400mg或更高的口服剂量相关，预期200 mg IV剂量可为提供快速负荷剂量的更好耐受的手段。
在相关的实施方式中，另一方案在第1天提供口服两个剂量的300 mg(分开12小时)，然后是口服每日一次剂量的300 mg。
与简单的 UTI相比，复杂的UTI(cUTI)可以由比简单的 UTI更广泛多种的病原体引起。尽管大肠杆菌仍然是主要的病原体，但复杂的 UTI 也可以与其它需氧革兰氏阴性菌(例如，克雷伯菌属(Klebsiella)或变形杆菌属(Proteus)物种)或革兰氏阳性菌(例如，肠球菌属(Enterococcus)物种)相关。对于这些生物中的一些，化合物1的MIC90 可大于4 µg/mL。因此，在一些实施方式中，第三给药方案提供更高剂量的化合物1，且目标是实现更大的泌尿道暴露。在这一方案中，在第1天施用两个口服剂量的450 mg(分开12小时)，然后是口服每日一次剂量的450 mg。
此外，又一方案提供IV剂量的约100-200 mg的化合物1。间隔约24小时施用的IV剂量中的每一个可将化合物1的所需尿浓度维持为高于对于UTI病原体的MIC90，特别是对于cUTI。第一IV剂量可补充以12小时后施用的第二IV剂量(例如，100mg)，以在治疗的第一天提供化合物1浓度的快速升高。
患者纳入/排除标准
入选患者为年龄18岁或更大的雌性。在随机化之前≤ 72 小时内，患者具有UTI的下列临床体征和症状中的两种或更多种的发作：排尿困难、尿频、尿急和耻骨上疼痛。患者能够供给中段的、清洁捕获的尿样品用于微生物学分析。患者对白细胞酯酶具有阳性尿试纸测试。此外，所有对象在筛选时都进行了阴性妊娠测试，并且同意从筛选到治疗后评估(PTE)遵守使用高效避孕形式(例如，禁欲、口服避孕药、宫内节育器[IUD]、屏障避孕[避孕套]、输卵管结扎、子宫切除术、双侧卵巢切除术或输精管切除的伴侣)。
具有以下状况中任一的患者不允许进入试验：雄性或妊娠或哺乳(母乳喂养)女性；在随机化前48小时时期内接受1个或多个剂量的全身抗菌治疗；具有倾向于发展泌尿道感染的因素的证据，包括肾结石、狭窄、原发性肾疾病(例如，多囊肾病)、神经源性膀胱、或倾向于泌尿道感染的其它解剖或功能异常；具有发热、侧腹疼痛、发冷或提示上泌尿道感染的任何其它表现；在随机化之前具有或临床怀疑具有下列中的1个或多个：丙氨酸氨基转移酶(ALT)或天冬氨酸氨基转移酶(AST) ≥ 3 × 正常上限(ULN)，总胆红素> 1.5 × ULN，或终末期肝病的证据(例如，腹水、肝性脑病)；具有已知的在筛选前3个月内经历过不稳定性心脏病(例如，不稳定性心绞痛、心肌梗塞、充血性心力衰竭、心律失常等)的病史；需要任何形式的透析(例如，血液透析、腹膜透析)；具有严重肾脏疾病的病史或证据或已知具有使用Cockcroft-Gault方程计算的<30 mL /分钟的肌酸酐清除率(CrCl)；具有通过下列任一确定的显著免疫疾病的证据：当前或预期的定义为<500嗜中性粒细胞/mm3的中性粒细胞减少症，感染人免疫缺陷病毒(HIV)和分化簇4(CD4)计数< 200细胞/mm3，或另一获得性免疫缺陷综合症(AIDS)-定义疾病，在过去3个月内接受癌症化学疗法、放射疗法或强效非皮质类固醇免疫抑制药物(例如，环孢菌素、硫唑嘌呤、他克莫司、免疫调节单克隆抗体疗法等)，或在之前30天中每天或超过14天接受等价于或大于40毫克泼尼松的皮质类固醇；对任何四环素(例如，米诺环素、多西环素或替加环素)具有超敏性或过敏反应(例如，过敏反应、荨麻疹、其它显著反应)的病史；具有假性脑瘤的病史，或之前(筛选前2周内)或计划同时使用维A酸；具有系统性红斑狼疮或狼疮样综合征的病史；具有目前胰腺炎的证据；在5个半衰期或筛选前30天内使用其它研究药物，以较长者为准；之前已用化合物1治疗或之前入选本研究；具有可能干扰遵守研究要求的能力或影响数据解释的任何计划的医疗干预；和具有研究者认为可能干扰研究下感染的反应的评估、不良事件(AE)的确定或预期的治疗过程的完成的任何伴随状况。
计算肌酸酐清除率(CrCl)的Cockcroft-Gault方程(与上文的排除标准相关)是：
。
皮质类固醇转换(与上述排除标准相关)根据下表进行：
。
给药方案
对象随机化(1:1:1)至以下治疗臂(arm)之一：
1. 组1：IV负荷，每日口服(200 mg化合物1 IV每24小时(q24h)进行1个剂量，然后是300 mg口服q24h总共5天)；
2. 组2：口服负荷，每日口服(300 mg化合物1口服每12小时(q12h)进行2个剂量，然后是300 mg口服q24h总共5天)；
3. 组3：高口服负荷，高每日口服(450 mg化合物1口服q12h进行2个剂量，然后是450mg口服q24h总共5天)。
代表性的给药时间表在下表中提供：
h = 小时；iv = 静脉内；OMC = 化合物 1；po = 口服；t = 时间；--- = 在指定时间没有给予剂量。
a 作为经30分钟(至少 30分钟且不超过45分钟)的110 mL连续输注施用200 mg静脉内剂量的化合物1。
b 在禁食状态(在给药前至少6小时没有食物或除水之外的饮料)作为2 × 150 mg片剂连同水施用300 mg 口服剂量的化合物 1。
c 在禁食状态(在给药前至少6小时没有食物或除水之外的饮料)作为3 × 150 mg片剂连同水施用450 mg 口服剂量的化合物 1。
在治疗期间，收集连续的血液和尿样品用于化合物1的安全性分析、微生物学分析和药代动力学(PK)分析。安全性评估包括监测不良事件(AE)、临床实验室测试结果、生命体征测量、12导联心电图(ECG)结果、妊娠测试和身体检查结果。
从治疗开始当天(第1天)将对象限制在临床位置，直到完成治疗结束(EOT)评估的PK和安全性评估(第6天)。对象在最后剂量的测试物后5至9天内返回临床位置进行治疗后评估(PTE)。在第一剂量的测试物后30至37天内进行最终的跟踪访问(最终随访)。
基于治疗组的患者人口统计数据呈现在下面。
研究中入选的前31名患者的患者处置数据呈现在下面。
药物施用
静脉内(IV)或口服施用化合物1。治疗(IV和/或口服)的总持续时间是5天。
用于输注的化合物1用甲苯磺酸反离子、蔗糖、盐酸和氢氧化钠以调节pH来配制。用乳糖一水合物、微晶纤维素、硬脂酰富马酸钠、交聚维酮、胶体二氧化硅、亚硫酸氢钠、聚乙烯醇、二氧化钛、滑石、甘油单辛基癸酸酯、十二烷基硫酸钠和氧化铁黄配制化合物1口服片剂。
对于IV施用，将用于复原的无菌冻干化合物1粉末包装在具有橡胶塞和铝封口的透明玻璃小瓶中。小瓶的标记含量为100mg化合物1碱。存在4％的过量填充以允许提取100mg剂量。通过添加5mL无菌注射用水将每个小瓶复原成澄清溶液。将小瓶轻轻旋转以确保在使用前完全溶解，因为过度摇动会导致小瓶中起泡。立即使用复原的小瓶来制备输注溶液。通过从两个100mg小瓶中的每一个中取出5mL复原溶液并缓慢注入100mL注射用生理盐水(NS)(0.9％氯化钠)输液袋中，制备200mg输注溶液。制备的输注溶液在8小时内使用或在2至8℃(35.6至46.4°F)储存至多24小时。在室温经30分钟(至少30分钟且不超过45分钟)连续施用110mL输注溶液。
对于口服施用，化合物 1 150 mg片剂作为2 (300 mg口服剂量)或3(450 mg口服剂量)个片剂随水q12h (仅第一天)或q24 h(随后的天)禁食服用。片剂在禁食状态下(没有食物、抗酸剂或含有多价阳离子[例如铝、镁、钙、铋、铁或锌]的多维生素(multivitamin)、或除水以外的饮料至少6小时)随水服用。给药后，不食用食物2小时；无乳制品、抗酸剂或含有多价阳离子(例如铝、镁、钙、铋、铁或锌)的多维生素4 小时。
药代动力学变量：
血液收集：(血浆)
在以下时间收集血液样品并分析化合物1浓度。剂量前血液PK评估基于每次开始(例如，第1天t = 0小时剂量，第2天t = 24小时剂量等)10分钟内收集的血液样品。
• 第1天：剂量前，以及t = 0小时剂量(对于组2和3，t = 12小时剂量之前12小时样品)后0.75、1、2、3、4、6、8和12小时；
• 第2天：t = 24小时剂量之前；
• 第3天：t = 48小时剂量之前；
• 第4天：t = 72小时剂量之前；
• 第5天：剂量前，以及t = 96小时剂量后0.5、1、2、3、4、6、8和12小时；
• 第6天：t = 120小时(第5天t = 96小时剂量后24小时)。
图8A和8B分别显示在三个剂量水平下前31名入选的uUTI患者在第1天和第5天的化合物1血浆浓度-时间概况。
第1天初始剂量后的化合物1血浆浓度-时间数据用于确定：最大血浆浓度(Cmax)；达到Cmax的时间(Tmax)；浓度-时间曲线下面积(AUC)；从时间0到时间‘t’的血浆(或血清或血液)浓度-时间曲线下面积，其中t是施用后的规定时间点(AUC0-t)；从0到24小时的浓度时间曲线下面积(AUC0-24)(组 1)；和从0到12小时的浓度-时间曲线下面积(AUC0-12)(组2和3)。此外，在第1天静脉内剂量后，仅对组 1估计化合物 1的从0到无穷大的浓度-时间曲线下面积(AUC0-inf)、终末消除半衰期(T1/2)、消除速率常数(λz)、全身清除率(CL)和表观分布容积(Vd)。在第5天的最终口服剂量后，组1、2和3的化合物1血浆浓度-时间数据用于确定Cmax、Tmax、AUC24h、AUCt。还测定每次剂量(第2天至第6天)后的谷血浆浓度(C谷)。
来自PK群体的血浆药代动力学(PK)参数的上面测量的描述性统计总结在下表中。
NA：不适用；N = PK群体中对象的数量。 n = 特定类别中的对象的数量。参数日和组测量：λ，半衰期：第1天、第5天，对于IV_PO300；AUC0-inf，清除率，容积分布：第1天，对于IV_PO300；AUC0-12：第1天，对于PO300、PO450；AUC0-24，AUC0-t：第1天、第5天，对于IV_PO300，和第5天，对于PO300和PO450；Cmax, Tmax：第1天、第5天，对于所有3组。
代表性的化合物1血浆PK参数在下面总结。
均值(%CV)；a 中值(最大值，最小值)；ND，未确定。
尿收集
收集尿，记录体积，并在以下时间分析化合物1浓度：
• 第1至2天：t = 0小时剂量后0至4、4至8、8至12和12-24小时合并的总尿；12至24小时样品的收集应在第2天t = 24小时之前完成；
• 第5至6天：t = 96小时剂量后0至4、4至8、8至12和12-24小时合并的总尿；
在上述间隔期间合并尿。在每个间隔结束时，记录时间和总体积。图9显示由治疗和天叠加的个别尿浓度-时间概况。
尿浓度数据总结在下表中。
PK群体中尿药代动力学参数的描述性统计也在下面显示。
化合物1尿浓度数据用于确定给药间隔中排泄的量、尿排泄率、以及与血浆浓度数据一起用于估计化合物1的肾脏清除率(CLr)。
代表性化合物1尿PK参数在下面总结。
Ae，尿中排泄的量；fe，尿中排泄的剂量的分数；均值，(%CV)。
该数据提供了向具有膀胱炎的雌性成年对象施用3种剂量方案后，关于化合物1的血浆和尿浓度的大小的重要信息。基于吸收的剂量，尿中排泄的剂量的均值分数在用3种剂量方案治疗的第1天从11.4％至20.4％、并且在第5天从30.7％至36.4％变化。针对常见尿病原体的体外活性和24小时持续的尿浓度表明，化合物1可以是用于治疗由易感病原体引起的下泌尿道细菌感染的有用抗菌剂。
安全性评估
入选对象的安全性评估包括身体检查、生命体征(血压、脉搏率、体温)、AE和SAE、实验室评估(血液学、血清化学、尿分析)、12导联心电图(ECG)评估、伴随药物和妊娠评估。
所有筛选评估在随机化前48小时内完成。在筛选时收集对象人口统计学和基线特征数据。这些包括：人口统计学、身体检查、生命体征、12导联ECG、血液学、血清化学和血清妊娠试验(所有对象)。记录相关的病史和当前的医学状况，包括直至签署ICF的数据。记录对象在4点量表(无、轻度、中度、重度)上的UTI体征和症状严重程度的评估。收集清洁捕获的中段尿样品，并立即送到当地微生物学实验室进行尿试纸白细胞酯酶测试以及显微镜检查和培养。
在筛选时，身体检查包括检查一般外观、皮肤、颈部(包括甲状腺)、眼睛、耳朵、鼻子、喉咙、肺、心脏、腹部、背部、淋巴结、四肢、以及血管和神经系统。如果根据病史和/或症状指示，则进行直肠、外生殖器、乳房和/或盆腔检查。
所有身体检查的信息包含在研究场所的源文档中。在测试物开始之前存在的重要发现包括在对象的eCRF中。在测试物开始之前存在的相关发现包括在对象eCRF的相关病史/当前医学状况屏幕上。在测试物开始后做出的满足AE定义的重要发现记录在对象eCRF的不良事件屏幕上。
在以下时间点收集包括血压(BP)、脉搏率和体温的生命体征：筛选，第1天，第3天，治疗结束(EOT)，治疗后评估(PTE)。在第1天和第3天完成每个剂量(t = 0小时剂量，t = 12小时剂量，如果适用的话，和t = 48小时剂量)之前30分钟内和之后大约(±15分钟)1小时和3小时，测量血压和脉搏率。
在以下时间点对象处于仰卧位至少5分钟后获得单个12导联ECG：筛选和EOT，以及如另外临床指示的。报告了以下参数的测量：心率，RR间期，PR间期，QRS持续时间，QT间期，QTc和QTcF。此外，研究者确定ECG是否正常、无临床意义地异常、或有临床意义地异常。对于任何异常ECG，记录异常的描述。如果需要，研究者根据具体情况咨询心脏病专家，以讨论异常结果。
在筛选、EOT和PTE访问时，从所有对象收集血液用于在中心实验室的血清β-hCG妊娠测试。从签署ICF到最终随访评估，记录并报告对象的AE和SAE。如果筛选的血液培养物对潜在病原体呈阳性，则根据需要重复血液培养直至获得阴性培养物。在筛选时、在治疗时每天、以及在EOT和PTE访问时，收集清洁捕获的中段尿样，并立即送到当地微生物学实验室进行显微镜检查和培养。使用校准的环进行通过适当方法的定量尿培养，所述校准的环将以103 CFU/mL的下限鉴定细菌。通过显微镜检查从旋转或未旋转的尿、或白细胞酯酶的试纸分析，确定尿中的WBC计数。
效力评估
效力评估包括感染的微生物学评估；在4点量表(无、轻度、中度、重度，基于Clayson et al., BJU International 96:350-359, 2005)上UTI体征和症状严重程度的对象评估；和研究者对临床反应的评估，其定义为感染体征和症状的解决，以达到不需要进一步抗菌治疗的程度。
a)微生物学评估
血液培养
在筛选时收集两组血液培养物(第一组= 1个需氧瓶+ 1个厌氧瓶，第二组= 2个需氧瓶)。通过直接静脉穿刺从独立身体部位相隔15-30分钟收集每组血液培养物。如果从基线血液培养物中分离细菌，则在检测到阳性血液培养物的当天收集重复血液培养物。如果随后的血液培养物也是阳性的，则根据需要重复血液培养直至获得阴性血液培养物。血液培养物分离物被送至中心实验室。
尿培养
在筛选和所有研究访问(即筛选、在治疗时每天、以及在EOT和PTE访问)时，进行研究下感染的微生物学评估。收集清洁捕获的中段尿样，并立即送至当地微生物学实验室进行显微镜检查和培养。
在以下时间收集清洁捕获的中段尿样，以避免扰乱用于PK的总尿收集。
• 第1天 – 第一测试物剂量(t = 0小时)之前
• 第2天 – 在t = 0 小时剂量后12至24小时总尿收集结束后
• 第3天 – 任何时间
• 第4天 – 任何时间
• 第5天 – 测试物剂量(t = 96小时)之前
• 第6天 – 在t = 96 小时剂量后12至24 小时总尿收集结束后。
在显微镜下针对脓尿(白细胞[WBC]计数在未旋转尿中>10/μL或在旋转尿中每高倍视野≥10)、或通过白细胞酯酶的尿试纸测试来分析尿样品。在筛选时，根据纳入标准进行白细胞酯酶的尿试纸测试。
使用校准的环进行通过适当方法的定量尿培养，所述校准环将以1 × 103 CFU/mL的下限鉴定细菌。通常，认为以1 × 105菌落形成单位(CFU)/mL或更高鉴定的细菌是细菌病原体(真病原体的概率大于污染的概率)。此外，如果在任何CFU计数下在血液和尿中分离出相同的细菌，则认为其是病原体。培养结果将包括将所有病原体鉴定为属和种的水平。使用由实验室选择的标准方法，在当地进行分离物对可用于治疗UTI的抗微生物药物的体外抗微生物易感性测试。
由当地实验室从尿或血液培养物中鉴定的所有细菌分离物被提交给中心实验室，用于验证属和种，以及对化合物1和一组目前批准的抗生素进行的标准化最小抑制浓度(MIC)测试。
研究者使用来自当地微生物学实验室的培养和易感性结果来帮助指导治疗。
下面列出了安全性群体中来自基线微生物学评估的结果和来自基线培养的病原体。
b)研究者的临床反应评估
研究者在EOT的临床反应评估
EOT访问在第6天进行。对任何过早退出的对象也进行该评估。以下评估在EOT访问时进行：UTI体征和症状严重程度的对象评估、尿培养和白细胞酯酶试纸测试或显微镜检查、身体检查、生命体征、12导联ECG、血液学和血清化学、血清妊娠试验(所有对象)和研究者的临床反应评估。在完成研究之前停止研究治疗的对象和因任何原因过早退出研究的那些对象被安排尽快访问，此时进行EOT访问所列的所有评估。
确定对象是否满足以下临床结果之一的标准：
• 临床成功：在EOT访问时解决体征和症状，并且不使用额外的抗微生物治疗。
• 临床失败：对治疗没有明显反应，在EOT访问时感染症状和体征的持续，或对当前感染使用额外的抗微生物治疗。
• 不确定：EOT访问未完成。
研究者在PTE的临床反应评估
在对象最后一天治疗后5至9天进行PTE访问。对任何过早退出的对象也进行该评估。在PTE访问时进行以下评估：尿培养和白细胞酯酶试纸测试或显微镜检查、身体检查、生命体征、血液学、血清化学、血清妊娠测试(所有对象)和研究者的临床反应评估。
确定对象是否满足以下临床结果之一的标准：
• 临床成功：在PTE访问时解决体征和症状，并且不使用额外的抗微生物治疗。
• 临床失败：对治疗没有明显反应，在PTE访问时或之前感染体征和症状的持续、或体征和症状的再次出现，或对当前感染使用额外的抗微生物治疗。
• 不确定：PTE访问未完成。
在对象的第一剂量测试物后30至37天进行最后的跟踪访问。对任何过早退出的对象也进行了该评估。对于被认为是临床成功、并且在PTE访问时或之后没有注意到AE或临床上显著的实验室或ECG异常的对象，通过电话联系或通过另一互动技术进行最终随访评估。否则，访问必须亲自进行。
不同组中的临床成功率的结果在下面总结。
下表总结了在PTE (治疗后评估)访问时在具有基线病原体的安全性群体中的每一病原体微生物反应的结果
c)药代动力学评估
PK样品收集的许可窗如下：
PK血液收集- 相对于测试物剂量的安排时间 窗
第1天 – 剂量前(t = 0小时) 剂量前10分钟内
第1天 - 0.75 至1 小时 ±2分钟
第1天 - 1.5 小时至8 小时 ±5分钟
第1天 - 12 小时 ±15分钟(对于组2和3在t = 12小时剂量前收集)
第2天 – 剂量前 (t = 24小时) 剂量前10分钟内
第3天 - 剂量前(t = 48 小时) 剂量前10分钟内
第4天- 剂量前 (t = 72 小时) 剂量前10分钟内
第5天 – 剂量前 (t = 96小时) 剂量前10分钟内
第5天 - 0.5至1 小时 (t = 96小时剂量后) ±2分钟
第5天 - 1.5 小时至8 小时 (t = 96小时剂量后) ±5分钟
第5天 - 12 小时 (t = 96小时剂量后) ±15分钟
第6天 - 24 小时 (t = 96小时剂量后) ±15分钟
尿 窗
安排的时间段 总剂量后尿在具有记录的确切时间的指定时间窗收集
PK = 药代动力学。
PK血液收集和处理
用于PK的血液样品在下面指定的时间点收集。
• 第1天：剂量前，和t = 0小时(对于组2和3，t = 12小时剂量前的12小时样品)剂量后0.75、1、2、3、4、6、8和12 小时；
• 第2天：t = 24小时剂量之前；
• 第3天：t = 48 时剂量之前；
• 第4天：t = 72 时剂量之前；
• 第5天：剂量前，和t = 96小时剂量后0.5、1、2、3、4、6、8和12 小时 ；
• 第6天：在t = 120小时(第5天t = 96小时剂量后24 小时)。
通过新鲜静脉穿刺或通过仅用于该目标的套管收集血液。记录所有剂量的测试物和PK样品收集的日期和时间。对于静脉内施用剂量的测试物，记录每次输注的开始和停止时间。收集样品后，立即将试管轻轻倒转5至8次以彻底混合抗凝剂，并且然后直立放置在由冰包围的低温块或试管架中直至离心。在收集30分钟内，将样品在大约4℃以1500×g离心10分钟。将得到的血浆分成2个相等的等分试样，置于个别的冷冻管中，并在收集1小时内立即在-20℃或更冷下冷冻。将样品在-20℃或更冷下保持冷冻，直至运输到生物分析实验室。
PK尿收集和处理
在以下时间收集尿并记录体积：
• 第1至2天：t = 0小时剂量后0至4、4至8、8 至12和12-24小时合并的总尿；
• 第5至6天：t = 96小时剂量后0至4、4至8、8 至12和12-24小时合并的总尿；
在每个收集时间段结束时，将合并的尿在-20℃或更冷下冷冻，并记录该时间段收集的尿的总体积。将样品在-20℃或更冷下保持冷冻，直至运输到生物分析实验室。
d) 不良事件评估
AE是在临床研究中给予测试物的人中发生的体征、症状、疾病或实验室或生理学观察形式的任何不利、不期望或无计划的事件。该事件不需要与测试物或临床研究因果相关。AE包括但不限于下列：
• 之前存在的状况的任何临床显著恶化；
• 由过量测试物引起的AE，无论是偶然的还是故意的。过量是大于方案中指定的剂量；
• 由测试物的滥用(例如，非临床原因的使用)引起的AE；
• 与停止使用测试物相关的AE。
SAE是下列AE：
• 导致死亡；
• 危及生命(见下文)；
• 需要住院或延长现有住院(见下文)；
• 导致持续或显著的残疾或无能力(见下文)；
• 导致癌症；
• 导致先天性异常或出生缺陷；
• 此外，当基于适当的医学判断，它们可危及对象并可需要医疗或外科干预以防止该定义中列出的结果之一时，可不导致死亡、危及生命或需要住院的重要医学事件可被视为SAE。这些事件的实例包括需要在急诊室或家中强化治疗的过敏性支气管痉挛、不导致住院的血液恶液质或抽搐、或药物依赖或药物滥用的发展。
危及生命指按照报告者在事件发生时立即的死亡风险。危及生命的经历不包括以更严重的形式发生则可能导致死亡、但当其实际发生时不产生立即的死亡风险的经历。例如，在没有肝功能衰竭证据的情况下解决的肝炎不会被认为是危及生命的，即使更严重性质的肝炎可以是致命的。类似地，导致面部血管性水肿的过敏反应不会危及生命，即使喉部血管性水肿、过敏性支气管痉挛或过敏反应可以是致命的。
住院是医院的正式准许。住院或延长住院构成AE严重的标准；但是，它本身不被视为SAE。在没有AE的情况下，住院或延长住院不应由参与研究者报告为SAE。在以下情况中是这种情况：
• 方案要求的程序需要住院或延长住院；
• 住院或延长住院是常规程序的一部分，所述常规程序然后是中心(例如手术后支架去除)。这应该记录在研究文件中。
此外，针对未恶化的之前存在状况的住院不构成SAE。
残疾被定义为人进行正常生活功能的能力的实质性破坏。
如果对信息是否构成SAE有任何疑问，则将该信息作为SAE对待。
与方案相关的AE是在临床研究期间发生的AE，其与测试物无关，但被研究者或医学监测者(或指定人员)认为与研究状况有关，即与对象参与研究的事实有关。例如，与方案相关的AE可为与方案所需的医疗过程相关的不利事件。
其它可报告信息：某些信息虽然不被视为SAE，但必须按照对SAE所指示记录、报告和随访。这包括：
• 对测试物的妊娠暴露：如果确认妊娠，必须立即停止使用测试物。关于妊娠暴露的信息包括整个妊娠和分娩过程以及围产期和新生儿结果，即使没有异常发现。母亲和父亲暴露都被认为是其它可报告的信息。对于涉及雄性对象的雌性伴侣的暴露，必须从对象收集必要的信息，同时尊重伴侣的机密性。
• 测试物的哺乳期暴露，有或没有AE；
• 如本方案中指定的测试物的过量，有或没有AE；
无意或意外暴露于测试物或，有或没有AE。
统计分析
计划总共24名对象(每个治疗组8名对象)的入选以实现至少18名可评估对象。选择的样本大小基于提供PK参数估计所需的对象数量。总共31名对象(每个治疗组10-11名)入选。
定义了下列对象分析群体：意图治疗(ITT)群体是所有随机化对象；安全性群体是接受任何数量测试物的所有随机化对象；和PK群体是接受测试物并且具有可评估的PK参数数据的所有对象。
在初始(第1天)和最终(第5天)剂量之后，通过治疗组呈现AUC、Cmax和Tmax的血浆PK参数估计的描述性统计。此外，针对第1组第1天静脉内剂量呈现T1/2、λz、CL和Vd的PK参数估计的描述性统计。
通过治疗组总结尿样品体积、化合物1浓度、和给药间隔内排泄的量、尿排泄率和CLr(初始和最终剂量后)的描述性统计。
所有安全性数据通过治疗组总结，并且AE的发生率由系统器官类别和根据Medical Dictionary of Regulatory Affairs(MedDRA®)的优选术语、与测试物的关系和严重性呈现。呈现临床实验室、生命体征和12导联ECG结果以及从基线的变化的描述性统计，如临床值得注意的值的总结。
a)分析群体
在通过治疗组测量的每个时间点，呈现具有临床反应的对象报告、临床反应和微生物学反应的研究者评估的对象的数量和百分比。
已经针对效力和安全性的各种分析定义了许多对象群体，如下：
意图治疗(ITT)群体由所有随机对象组成，即，已经接受至少一个剂量的研究药物的所有入选对象。
安全性群体由接受至少1个剂量的测试物的所有随机对象组成。安全性将通过使用报告的AE、生命体征中的变化、ECG的总结统计和临床综述和从研究期间采集的血液样本获得的实验室结果来评估。
PK群体由接受测试物并具有可评估的PK参数数据的所有对象组成。
此外，针对不良事件(AE)监测研究中的患者。不良事件是与对象中医疗产品的使用暂时相关的任何不利医疗事件，无论该事件是否被认为与医疗产品因果相关。AE可以是新事件或强度或频率显著增加的现有过程。
b)人口统计学和基线特征
人口统计学(包括年龄、族群和种族)和基线特征通过治疗组在ITT群体中总结。通过治疗组和对象列出人口统计学、相关病史、当前医疗状况、实验室筛查结果、药物测试和任何其它相关信息。通过治疗组提供测试物治疗的持续时间的描述性统计。通过治疗组呈现过早停止测试物的对象的数量和百分比以及停止的原因、以及过早停止研究的对象的数量和百分比和停止的主要原因。
c)药代动力学变量的统计分析
通过时间点和治疗组列出并总结化合物1血浆浓度数据。从化合物1血浆浓度-时间数据估计以下PK参数：
参数 描述
AUC<sub>0-12</sub> 对于组2和3，初始(第1天)剂量后时间0至12小时的血浆浓度-时间曲线下面积，其由线性梯形法则计算。
AUC<sub>0-24</sub> 对于组1初始剂量(第1天)、和对于组1、2和3在第5天最终剂量后时间0至24小时的血浆浓度-时间曲线下面积，其由线性梯形法则计算。
AUC<sub>inf</sub> 仅对于组1初始剂量(第1天)后时间0至无穷大的血浆浓度-时间曲线下面积，其由线性梯形法则计算。
AUC<sub>0-t</sub> 在给药间隔中时间0至最后可定量浓度的血浆浓度-时间曲线下面积，其由线性梯形法则计算。
C<sub>max</sub> 最大(峰)观察的血浆浓度。
T<sub>max</sub> 达到最大观察的血浆浓度的时间。
T<sub>1/2</sub> 终末消除半衰期，计算为T<sub>1/2</sub> = ln(2)/ λ<sub>z</sub> (仅组1，第1天)
λ<sub>z</sub> 终末期速率常数，在ln-浓度相对于时间曲线的终末部分上应用线性回归计算(仅组1，第1天)
通过初始(第1天)和最后(第5天)剂量后的治疗组，呈现曲线下面积(AUC)、最大血浆浓度(Cmax)和达到Cmax的时间(Tmax)的PK参数估计的描述性统计。还将针对静脉内剂量后第1天的组1，呈现T1/2、λz 、全身清除率(CL)和表观分布容积(Vd)的PK参数估计的描述性统计。
通过治疗组总结初始第1天和最终第5天剂量后的尿样品体积、其化合物1浓度、经给药间隔尿中排泄的化合物1的量(体积和浓度的乘积)、化合物1的尿排泄率和肾脏清除率(CLr)。
d)安全性分析
安全性群体中的所有对象包括在安全性分析中。使用采用Anatomic TherapeuticChemical (ATC)分类系统的World Health Organization (WHO) Drug Reference List，对进入数据库的之前和伴随药物进行编码。使用Medical Dictionary for RegulatoryActivities (MedDRA)术语对不良事件进行编码。
通过治疗组、对象和访问/时间列出所有生命体征数据，并且如果可获得范围，则标示异常(和相关的直立性变化)。通过访问/时间和针对从基线变化的生命体征的描述性统计通过治疗组提供。通过治疗组呈现任何基线后临床值得注意的值的总结。
所有12导联ECG数据通过治疗组、对象和访问/时间列出，并标示异常。通过访问/时间和针对从基线变化的ECG参数的描述性统计通过治疗组提供。通过治疗组呈现任何基线后临床值得注意的值的总结。
所有临床实验室数据通过治疗组、对象和访问/时间列出，并标示异常。通过治疗和访问/时间提供总结统计。通过访问/时间和对于从基线变化的临床实验室参数的描述性统计通过治疗组提供。通过治疗组呈现任何基线后临床值得注意的值的总结。
在AE上获得的所有信息通过对象和治疗显示。治疗紧急AE(TEAE)的发生率由系统器官类别和根据MedDRA的优选术语、与测试物施用的关系和严重性呈现。列表呈现TEAE，其导致过早停止研究药物和用于严重的AE。TEAE定义为在第一剂量测试物期间或之后发生的AE。具有发生超过一次的相同AE的对象仅针对优选术语计数一次，并且身体系统内具有多个AE的对象仅针对该身体系统的总数计数一次。
所有伴随疗法通过对象列出。
e)效力分析
基于UTI症状严重程度的对象评估，以编程方式确定在EOT访问的对象报告的临床反应。对象报告的临床反应可以是临床成功、临床失败和不确定(在下面定义)。
• 临床成功：如果在筛查时报告的症状(排尿困难、尿频、尿急、耻骨上疼痛)中的至少两种中，如通过对象报告的，与筛查时的评估相比改善至少1个数的得分(任何其它症状中没有恶化)，则临床结果被认为是成功的。
• 临床失败：在研究过程期间，UTI症状的持续或恶化、或对象需要一种或多种替代抗生素用于治疗他们的UTI。
• 不确定：访问未完成。
在较早时间点临床失败的对象被认为在随后的时间点临床失败。通过治疗组针对EOT和PTE访问呈现具有成功、失败和不确定的临床反应的对象的数量和百分比。
基于当地和中心实验室微生物学分析，以编程方式确定微生物学结果。对于在筛选时被认为是病原体的分离物，其必须以≥ 105 CFU/mL呈现在尿样品中，或应当以任何CFU计数从血液和尿二者中分离病原体。微生物学结果定义为：
• 根除：在PTE访问时采取的尿培养显示，以 > 105 CFU/mL在筛选时发现的所有病原体降低至 < 104 CFU/mL。
• 持续：在治疗完成后的任何时间采取的尿培养，生长> 104 CFU/mL的原始病原体。
• 不确定：未获得随访尿培养。
在基线分离的病原体通过治疗组由属和种呈现。呈现具有通过对象和通过病原体根除、持续和不确定微生物学反应的对象的数量和百分比。提供所有基线和基线后分离物的列表。
在EOT和PTE访问的研究者临床反应评估具有上文定义的临床成功、临床失败或不确定结果。在较早时间点临床失败的对象被认为在随后的时间点临床失败。通过治疗组针对EOT和PTE访问呈现具有成功、失败和不确定的研究者评估的对象的数量和百分比。
本领域技术人员仅使用常规实验认识或能够确定本文所述的具体程序、实施方式、权利要求和实施例的许多等价物。这些等价物被认为是在本发明的范围内，并且由其所附的权利要求覆盖。整个本申请中引用的所有参考文献、授权专利和公开的专利申请的内容通过引用在此并入。
实施例2 应用化合物1的体外蛋白结合
化合物 1是首创的(first-in-class)氨甲环素抗生素，其正经历作为每日一次口服或静脉内单药疗法、用于急性细菌性皮肤和皮肤结构感染和社区获得性细菌肺炎的临床开发。在体外，化合物1证明针对下列的活性：革兰氏阳性和革兰氏阴性需氧菌，包括葡萄球菌属物种(Staphylococcus spp.)和链球菌属物种(Streptococcus spp.)的多药抗性株；以及厌氧菌和非典型细菌，包括军团菌属物种(Legionella spp.)、支原体属物种(Mycoplasma spp.)和艰难梭菌(Clostridium difficile) (Macone et al.,Antimicrob. Agents Chemother., 58:1127-1135, 2014)。在1期研究中，化合物1证明线性剂量-血浆浓度概况、大约 17 小时的消除半衰期、以及300 mg 口服和100 mg IV剂量后分别为0.6和1.8 mg/L的峰血浆浓度(Sun et al., Poster，呈现于21st EuropeanCongress on Clinical Microbiology and Infectious Diseases, May 7-11, 2011,Milan, Italy；Ting et al., Abstract K-124, 呈现于the 50th ICAAC, September 12-15, 2010, Washington, DC)。对于肝损伤不需要剂量调整，并且基于人转运蛋白机制和细胞色素P-450介导的代谢的研究，化合物 1具有药物-药物相互作用的低可能性(Hanna et al., Br J Pharmacol. 2016a；Hanna et al., Drug Metab Disp. 2016b)。
在具有复杂皮肤和皮肤结构感染的患者中，化合物1证明与利奈唑胺(linezolid)相当的临床效力和耐受性(Noel et al., Antimicrob. Agents Chemother., 56:5650–5654, 2012；Noel et al., Poster，呈现于22nd European Congress on ClinicalMicrobiology and Infectious Diseasess, March 31-April 3, 2012a, London, UK)。作为用于治疗急性细菌性皮肤和皮肤结构感染(ABSSSI)和社区获得性细菌性肺炎(CABP)的口服和静脉内(IV)单药治疗，化合物 1正经历3期研究中的临床开发。
在本实施例中，在小鼠(CD-1)、大鼠(HanWistar)、猴(食蟹猴)和人血浆(解冻的血浆库)中的体外研究期间，研究了化合物1蛋白结合。在10、100、1,000和10,000 ng/mL的标称化合物1浓度确定结合。对于人结合研究，从三名健康雄性志愿者的血液获得血浆。在使用前将血浆从-20℃储存解冻，并将人血浆库用于所有研究。来自小鼠、大鼠和猴的血浆分别由Harlan Laboratories Ltd. (Netherlands)、Milan Analytica AG (Rheinfelden,Switzerland)和Centre de Primatologie ULP (France)供应。
使用超滤方法测量蛋白结合。为了评估超滤的适用性，研究了[14C]-标记的化合物1在PBS缓冲液中的回收和自由渗透。将两个等分试样的PBS(4mL)掺入(spiked with)储备溶液B和C(1:200, v:v)，分别给出1,000和100 ng/mL [14C]-化合物 1的最终标称浓度。将每种浓度的3个1mL等分试样引入CENTRIFREE®装置并在2000g旋转1分钟(滤液≤ 500 μL)。通过LSC定量掺入溶液、滤液和渗余物的样品；通过称重确定体积。
测试化合物在PBS中的自由渗透评估如下：
比率 = [Cuf/Cr]
Cuf是超滤液中的浓度(ng/mL)并且Cr是渗余物中的浓度(ng/mL)。> 0.70的比率表明化合物相对自由地通过CENTRIFREE®装置的超滤膜。
从回收中评估测试化合物在PBS和血浆中的非特异性吸附如下：
回收率(%) = (离心后回收的量 × 100)/(引入的量)
> 0.8的回收率表明由于非特异性吸附到装置上而导致的化合物损失是可接受的。在PBS中回收率小于80％但在血浆中回收率较高且化合物自由渗透的情况下，则仍可采用该方法。
用于标准超滤方法的缓冲液对照表明，由于非特异性吸附到装置上而导致的化合物损失是可接受的。回收率≥90％，并且自由渗透比≥ 0.99。
通过LC-MS/MS方法测定化合物1的血浆结合和未结合浓度，且定量下限 = 5.0ng/mL。具体地，通过UPLC-MS/MS方法测定化合物1的浓度。将空白人血浆/人血浆超滤液(50:50)和研究样品解冻，并将每个解冻样品的0.1mL等分试样转移到2 mL容量96孔聚丙烯块中的适当孔中。在分析当天，通过添加适当标准品或甲醇中的QC掺入溶液的20μL等分试样，制备标准品和质量控制样品。将内标(在甲醇中200ng/mL)的25μL等分试样加入到除空白的每个孔中。将所有超滤液样品与人血浆1:1混合。所有血浆样品与超滤液1:1混合。将10,000 ng/mL超滤液和10,000 ng/mL血浆样品以1:9稀释并处理。
使用蛋白沉淀处理样品。向每个样品中加入乙腈/乙醇/乙酸混合物(90:10:0.1,v:v:v)的0.5mL等分试样；使用涡旋混合器将样品混合10分钟，并在10℃以3800rpm(大约2500 × g)离心10分钟。将上清液的500 μL等分试样转移至干净的2ml 96孔板。将80:20(水：乙腈)的等分试样500 μL加入所有样品。通过涡旋混合样品0.5分钟。将6μL样品体积注入UPLC/MS/MS系统进行分析。
然后在UPLC-MS/MS系统上测定样品，该系统由具有四元泵的Acquity UPLC、充足的管理器和样品组织器组成，与运行Analyst软件版本1.4.2的Sciex API4000质谱仪(Foster City, CA, USA)连接。质谱仪以正离子模式运行，其使用电喷雾电离，具有500℃的源温度。色谱分离在Acquity BEH C18, 50 × 2.1, 1.7 μ颗粒(Waters, MA)上以1.0mL/min的流速进行。柱温保持在65℃。使用梯度方法洗脱化合物1和内标，且流动相由A：10mM 甲酸铵加0.2 % 甲酸、和B：乙腈加0.2％甲酸组成。梯度是2% B，0.25 min.，在0.60分钟增加至95% B，然后是在95％B保持0.40分钟。化合物1的保留时间为0.56分钟。对于化合物1监测的离子是母体[M+H]+离子，在m/z 557.3.0；产物离子在m/z 453.4。
数据处理：应用加权的(1/x2或1/x)二次最小二乘回归作为数学模型，生成由分析物或内标的各峰面积比(y)相对于校准样本的浓度(x)的图表示的校准曲线(y = x2 + xb+ c或y = ax +b)。使用Analyst软件和Watson LIMS版本7.2.0.01进行定量。从所得峰面积比和从各校准曲线的回归方程插值，计算QC和研究样品中的浓度。对于化合物1的定量下限为5.0 ng/mL。
结果在下面的表中显示。
化合物1质量控制样品的分析性能
结果显示，化合物1与人血浆以及猴、小鼠和大鼠血浆中的血浆蛋白弱结合(参见下面的数据)。
对于小鼠、大鼠、猴和人血浆中的化合物1的均值(SD)血浆蛋白结合参数
(经10-10,000 ng/mL的标称浓度范围计算的值)
物种 均值(SD)结合分数(%)
小鼠 15.3 (5.31)
大鼠 26.1 (12.3)
猴 21.2 (7.26)
人 21.3 (9.72)
因此，在10-10,000 ng/mL的浓度范围内，未观察到化合物1对血浆蛋白结合的明显浓度依赖性作用。人血浆中均值 ± SD未结合蛋白分数为78.7 ± 9.7%。在动物中，均值未结合蛋白分数为大鼠(73.9 ± 12.1%)、猴(78.8 ± 7.3%)和小鼠(84.7 ± 5.3%)。也参见图1。
抗微生物剂的游离、未结合分数与抗微生物活性相关(Schmidt et al.,Antimicrob. Agents Chemother., 52(11):3994-4000, 2008；Gonzalez et al., Clin Microbiol Rev. 26:274-288, 2013)。这些结果显示，化合物1与人血浆蛋白是21%结合的，并且结合不是浓度依赖性的。同时，化合物1与动物物种中的血浆蛋白弱结合(15%至26%)。化合物1的低人血浆蛋白结合与其它四环素呈明显对比，所述其它四环素表现出接近80％的高的、通常浓度依赖性的蛋白结合(参见下表)。
化合物1质量控制样品的分析性能
(Agwuh and MacGowan, J Antimicrob Chemother. 58(2):256-265, 2006；Muralidharan et al., 2005；Singh et al., Abstract A-015，呈现于53rd ICAACMeeting, September 10-13, 2013, Denver, CO)。
化合物1的低人血浆蛋白结合(21%)与其它四环素呈明显对比，所述其它四环素表现出高浓度依赖性蛋白结合(大约 80%)。具体地，伊拉瓦环素和替加环素证明非典型的非线性蛋白结合-非典型是因为血浆蛋白结合随着渐增的药物浓度而增加(Muralidharan et al., Antimicrob. Agents Chemother,. 49(1):220-229, 2005；Singh et al.,Abstract A-015，呈现于53rd ICAAC Meeting, September 10-13, 2013, Denver, CO)。达托霉素、德拉沙星(delafloxacin)、奥利万星(oritavancin)、替拉万星(telavancin)、索利霉素(solithromycin)和泰地唑胺(tedizolid)在人血浆中是>75%蛋白结合的(Lawrenceet al., Abstract A-1956，呈现于52nd ICAAC Annual Meeting, September 9-12,2012；Arhin et al., Antimicrob. Agents Chemother., 54(8):3481-3483, 2010；Rodvold et al., Antimicrob. Agents Chemother., 56(10):5076-5081, 2012；McCullough et al., Abstract A-1878，呈现于IDSA Annual Meeting, October 27,2008；Housman et al., Antimicrob. Agents Chemother., 56(5):2627-2634, 2012)。利奈唑胺是31%蛋白结合的(见包装插页)。
因此，与其它四环素衍生的抗生素相比，化合物1具有显著低的人血浆蛋白结合(21%)，没有浓度依赖性结合。这些数据可与化合物1的临床有效性相关，因为药物的游离未结合分数通常与抗微生物活性最密切相关。
实施例中引用的参考文献列于下面，并且都通过引用并入：
实施例3 化合物 1针对大肠杆菌生物膜的体外活性
微生物生物膜由致密的细胞外聚合物质定义，所述聚合物质可以充当对外部环境的物理屏障，并导致代谢静止微生物的亚群，其可以导致对通常杀死浮游细菌的抗生素的显著耐受性。
已经发现，低于MIC剂量的许多不同种类的抗生素刺激暴露细菌的生物膜生长模式。例如，已证明，用低于MIC剂量的包括四环素(化合物1的化学类似物)的五种不同类型的翻译抑制剂治疗大肠杆菌导致增加的生物膜生长(Boehm et al., Molecular Microbiology 72(6): 1500-1516, 2009；Hoffman et al., Nature 436(7054): 1171-1175, 2005；Kaplan, International Journal of Artificial Organs 34(9): 737-751,2011)。考虑到微生物生物膜的临床意义、以及患者的血清在治疗开始和结束时以及剂量之间常规地含有低于抑制剂量的抗生素的事实，这一发现特别相关。
本文呈现的数据证实，化合物1针对包括大肠杆菌的革兰氏阴性菌和革兰氏阳性菌二者表现出有效的抑菌活性，大肠杆菌是大多数UTI患者中的主要病原体。数据还证明，化合物1在体外针对大肠杆菌生物膜具有抗生物膜活性。
具体地，使用MBEC™ 96孔板高通量筛选装置，通过关注作为社区获得性感染的常见原因的大肠杆菌(ATCC 25922)，评估高于和低于对浮游细胞的最小抑制浓度(MIC)的化合物1的剂量，用于生物膜防止和/或诱导，并且对抗已建立的生物膜。
MBEC™测定(以前为Calgary生物膜装置；Innovotech Inc., Canada)是充分确立的高通量测定，用于以96孔格式评估测试试剂的抗生物膜活性。在该测定中，生物膜形成在板盖的塑料钉上。将接种的培养基引入96孔板的孔后，将板置于振荡培养箱中以产生必要的剪切力，用于在钉上生物膜生长。在合适的温育时间后，可以用不同浓度的测试试剂处理个别生物膜(攻击板)。在所需的处理时间之后，通过超声处理从钉取回剩余的生物膜相关细菌(回收板)。回收的细菌悬浮液的系列稀释和/或铺板允许定量测试试剂针对预形成的生物膜的效力。此外，可以使用来自生物膜处理的攻击板的读数来确定测试试剂的MIC值。回收板中缺乏生长表明完全生物膜根除，并且实现这一点的测试试剂的最低浓度指定为最小生物膜根除浓度(MBEC)。MBEC™测定也适用于评估组合治疗的潜在协同效应、以及测试试剂在抑制或诱导生物膜形成中的效力。
化合物1针对大肠杆菌的抗微生物活性
使用标准肉汤微量稀释法(CLSI in Methods for Dilution AntimicrobialSusceptibility Tests for Bacteria That Grow Aerobically, Approved StandardM7-A8, Clinical and Laboratory Standards Institute, Wayne, PA (USA), 2011，通过引用并入本文)并稍作修改，确定化合物1针对大肠杆菌(ATCC 25922)的抗微生物活性。结果在图2中示出。
从图(图2)推断，化合物1的最小抑制浓度(MIC)估计为1.13 µg/mL。这与报道的针对大肠杆菌的MIC为0.5-2 µg/mL(Macone, Antimicrobial agents and Chemotherapy 58(2): 1127-1135, 2014)一致。
化合物1的抗生物膜活性
用107 CFU/mL的稳定期大肠杆菌(ATCC 25922)接种MBEC™ 板并温育24小时以允许形成稳健的生物膜。用不同浓度的抗生素攻击在钉上形成的个别生物膜24小时，然后回收存活的细菌。
使用最大或然数(Most Probable Number，MPN)测定(Sutton, Journal of Validation Technology 16 (3): 35-38, 2010，通过引用并入本文)以96孔格式进行细菌计数。作为与化合物1效力的比较，使用另一小分子抗生素环丙沙星。
在MIC值(1.13 µg/mL)附近，化合物1使总生物膜相关细菌减少1-2个对数单位(图3)。在较高浓度，效果更明显，且生物负荷降低至多4-5个对数单位。与之相比，在MIC值(5.6ng/mL)，环丙沙星不显示活性(图4)，尽管在较高浓度，它也能够引起显著的生物负荷降低(至多5个对数单位)。
上述结果还显示，虽然两种抗生素均显示存活细菌总数中的显著减少，但没有一种处理导致完全生物膜根除。
低于-MIC化合物 1不促进浮游粘附
用107 CFU/mL的稳定期大肠杆菌(ATCC 25922)接种MBEC™ 板并温育6、12或24小时。然后用不同浓度的化合物1和另外的106 CFU/mL浮游大肠杆菌同时攻击钉上的生物膜。24小时温育后，回收并计数生物膜相关细菌(如上所述)，以确定对低于MIC剂量的化合物1的暴露是否导致浮游细菌对生物膜的额外粘附(图5)。
对于所有测试的生物膜时期(6、12、24小时)，用低于MIC浓度的化合物1处理时的均值生物负荷低于未处理的对照生物膜的那种。平均而言，相对于对照，用低至4％的MIC(0.046μg/mL)的剂量处理的24小时生物膜在总生物膜相关细菌中减少约1个对数(a log)，即使在浮游细菌存在的情况下。结果显示，化合物1的低于MIC浓度不促进浮游细菌的额外粘附。
生物膜形成的抑制
用105 CFU/mL(低接种物)或107 CFU/mL(高接种物)的稳定期大肠杆菌(ATCC 25922)接种MBEC™板，且同时添加抗生素以评估抗生素攻击下生物膜形成的进展。24 小时温育后，回收并计数细菌(如上所述)。图6。仅在低接种条件下评估环丙沙星的作用。图7。
与对照相比，化合物1的低于MIC浓度导致总生物膜相关细菌的减少的数量，且均值生物量随着渐减的剂量以逐步方式增加。例如，0.743μg/ mL的化合物1导致总生物负荷降低约3-4个对数单位的生物膜。与显示在低于MIC剂量诱导生物膜形成的其它翻译抑制剂(Boehm et al., Molecular Microbiology 72(6): 1500-1516, 2009；Hoffman et al.,Nature 436(7054): 1171-1175, 2005；Kaplan, International Journal of Artificial Organs 34(9): 737-751, 2011)不同，这些数据表明，低于MIC剂量的化合物1不仅不能诱导生物膜形成，而且实际上防止生物膜形成。
环丙沙星(氟喹诺酮抗生素)在低于MIC水平也不诱导生物膜形成。但是，化合物1在生物膜防止中的作用更明显。在各自MIC值的约15％，化合物1(0.183μg/ mL)导致与对照相比生物负载减少约2个对数单位的生物膜，而环丙沙星(1 ng/mL)显示总生物负荷中没有减少。
总之，上述数据显示，化合物1显示出针对大肠杆菌生物膜的良好体外活性，并且即使在接近MIC的浓度也能够显著降低总生物负荷。实际上，生物膜防止/诱导测定表明，化合物1在高于MIC的所有剂量强烈抑制生物膜形成。
也许更重要的是，化合物1的低于MIC浓度(例如，0.74 µg/mL)不诱导大肠杆菌生物膜形成，而是似乎具有防止作用，因为分别在高和低接种物条件下，均值生物膜形成与对照相比减少大约 3至4个对数单位。与其它翻译抑制剂相反，化合物 1的低于MIC剂量不仅不能诱导高于对照水平的生物膜形成，低于MIC的几个剂量似乎对生物膜形成具有抑制作用。
实施例4 化合物 1针对各种UTI 病原体的体外活性
使用标准肉汤微量稀释法(CLSI in Methods for Dilution AntimicrobialSusceptibility Tests for Bacteria That Grow Aerobically, Approved StandardM7-A8, Clinical and Laboratory Standards Institute, Wayne, PA (USA), 2011，通过引用并入本文)并稍作修改，确定化合物1针对UTI中发现的各种常见病原体的抗微生物活性。结果在下表中显示。
病原体 分离物的数目 MIC<sub>50</sub> (μg/mL) MIC<sub>90</sub> (μg/mL)
大肠杆菌(碳青霉烯抗性) 25 1 4
大肠杆菌(非-ESBL表型) 10,696 0.5 2
大肠杆菌(ESBL表型) 2,743 1 4

Claims (56)

1.在需要其治疗的对象中治疗泌尿道感染(UTI)的方法，其包括向所述对象施用口服剂量的300-600 mg的9-[(2,2-二甲基-丙基氨基)-甲基]-米诺环素或其盐，以致治疗所述对象。
2.权利要求1的方法，其中所述口服剂量是300-450 mg的9-[(2,2-二甲基-丙基氨基)-甲基]-米诺环素或其盐。
3.权利要求1的方法，其包括向所述对象施用一个口服剂量的300 mg的9-[(2,2-二甲基-丙基氨基)-甲基]-米诺环素或其盐，每24小时一次，总共4或5天。
4.权利要求1的方法，其包括向所述对象施用一个口服剂量的300 mg的9-[(2,2-二甲基-丙基氨基)-甲基]-米诺环素或其盐，每24小时一次，总共5-14天。
5.权利要求1的方法，其包括向所述对象施用一个口服剂量的450 mg的9-[(2,2-二甲基-丙基氨基)-甲基]-米诺环素或其盐，每24小时一次，总共5-14天。
6.权利要求1的方法，其包括向所述对象施用一个口服剂量的300 mg的9-[(2,2-二甲基-丙基氨基)-甲基]-米诺环素或其盐，每24小时一次，总共5天，并且进一步包括在第一口服剂量后约12小时，向所述对象施用额外口服剂量的300 mg的9-[(2,2-二甲基-丙基氨基)-甲基]-米诺环素或其盐。
7.权利要求1的方法，其包括向所述对象施用一个口服剂量的300 mg的9-[(2,2-二甲基-丙基氨基)-甲基]-米诺环素或其盐，每24小时一次，总共5-14天，并且进一步包括在第一口服剂量后约12小时，向所述对象施用额外口服剂量的300 mg的9-[(2,2-二甲基-丙基氨基)-甲基]-米诺环素或其盐。
8.权利要求1的方法，其包括向所述对象施用一个口服剂量的450 mg的9-[(2,2-二甲基-丙基氨基)-甲基]-米诺环素或其盐，每24小时一次，总共5天，并且进一步包括在第一口服剂量后约12小时，向所述对象施用额外口服剂量的450 mg的9-[(2,2-二甲基-丙基氨基)-甲基]-米诺环素或其盐。
9.权利要求1的方法，其包括向所述对象施用一个口服剂量的450 mg的9-[(2,2-二甲基-丙基氨基)-甲基]-米诺环素或其盐，每24小时一次，总共5-14天，并且进一步包括在第一口服剂量后约12小时，向所述对象施用额外口服剂量的450 mg的9-[(2,2-二甲基-丙基氨基)-甲基]-米诺环素或其盐。
10.权利要求1的方法，其包括向所述对象施用：
(1) 在治疗第一天，一个或多个负荷剂量的9-[(2,2-二甲基-丙基氨基)-甲基]-米诺环素或其盐；然后是
(2) 一个或多个维持剂量的9-[(2,2-二甲基-丙基氨基)-甲基]-米诺环素或其盐，其中所述维持剂量间隔约24小时施用。
11.权利要求10的方法，其中所述一个或多个负荷剂量是两个静脉内(IV)剂量的约100mg的9-[(2,2-二甲基-丙基氨基)-甲基]-米诺环素或其盐，间隔约12小时施用。
12.权利要求10的方法，其中所述一个或多个负荷剂量是一个静脉内(IV)剂量的约200mg的9-[(2,2-二甲基-丙基氨基)-甲基]-米诺环素或其盐。
13.权利要求10的方法，其中所述一个或多个负荷剂量是两个静脉内(IV)剂量的约200mg的9-[(2,2-二甲基-丙基氨基)-甲基]-米诺环素或其盐，间隔约12小时施用。
14.权利要求10的方法，其中所述一个或多个负荷剂量是一个口服剂量的约300 mg的9-[(2,2-二甲基-丙基氨基)-甲基]-米诺环素或其盐。
15.权利要求10的方法，其中所述一个或多个负荷剂量是两个口服剂量的约300 mg的9-[(2,2-二甲基-丙基氨基)-甲基]-米诺环素或其盐，间隔约12小时施用。
16.权利要求10的方法，其中所述一个或多个负荷剂量是两个口服剂量的约450 mg的9-[(2,2-二甲基-丙基氨基)-甲基]-米诺环素或其盐，间隔约12小时施用。
17.权利要求10的方法，其中所述一个或多个负荷剂量是一个静脉内(IV)剂量的约100mg的9-[(2,2-二甲基-丙基氨基)-甲基]-米诺环素或其盐、和一个口服剂量的约300 mg的9-[(2,2-二甲基-丙基氨基)-甲基]-米诺环素或其盐，间隔约12小时施用。
18.权利要求17的方法，其中所述一个IV剂量在所述一个口服剂量之前施用。
19.权利要求10-18中任一项的方法，其中所述一个或多个维持剂量中的每一个包含约300 mg的9-[(2,2-二甲基-丙基氨基)-甲基]-米诺环素或其盐。
20.权利要求10-18中任一项的方法，其中所述一个或多个维持剂量中的每一个包含约450 mg的9-[(2,2-二甲基-丙基氨基)-甲基]-米诺环素或其盐。
21.权利要求10-18中任一项的方法，其中所述一个或多个维持剂量包含一个或多个静脉内(IV)维持剂量的约100 mg的9-[(2,2-二甲基-丙基氨基)-甲基]-米诺环素或其盐、和一个或多个口服维持剂量的约300 mg或450 mg的9-[(2,2-二甲基-丙基氨基)-甲基]-米诺环素或其盐。
22.权利要求21的方法，其中所述IV维持剂量在所述口服维持剂量之前施用。
23.权利要求10-22中任一项的方法，其中所述一个或多个维持剂量在治疗第2天至第5天施用。
24.权利要求10-22中任一项的方法，其中所述一个或多个维持剂量治疗第2天至第14天施用。
25.在需要其治疗的对象中治疗泌尿道感染(UTI)的方法，其包括向所述对象施用静脉内(IV)剂量的约200 mg的9-[(2,2-二甲基-丙基氨基)-甲基]-米诺环素或其盐，然后是四个口服剂量的300 mg的9-[(2,2-二甲基-丙基氨基)-甲基]-米诺环素或其盐，以致治疗所述对象，其中所述IV剂量和所述四个口服剂量彼此间隔约24小时施用。
26.在需要其治疗的对象中治疗泌尿道感染(UTI)的方法，其包括向所述对象施用静脉内(IV)剂量的约200 mg的9-[(2,2-二甲基-丙基氨基)-甲基]-米诺环素或其盐，然后是4-13个口服剂量的300 mg的9-[(2,2-二甲基-丙基氨基)-甲基]-米诺环素或其盐，以致治疗所述对象，其中所述IV剂量和所述4-13个口服剂量彼此间隔约24小时施用。
27.在需要其治疗的对象中治疗泌尿道感染(UTI)的方法，其包括向所述对象施用两个静脉内(IV)剂量，所述剂量间隔12小时施用，各为约100 mg的9-[(2,2-二甲基-丙基氨基)-甲基]-米诺环素或其盐，然后是4-13个口服剂量的300 mg的9-[(2,2-二甲基-丙基氨基)-甲基]-米诺环素或其盐，以致治疗所述对象，其中所述两个IV剂量中的第一个和所述4-13个口服剂量彼此间隔约24小时施用。
28.在需要其治疗的对象中治疗泌尿道感染(UTI)的方法，其包括向所述对象施用静脉内(IV)剂量的约100 mg的9-[(2,2-二甲基-丙基氨基)-甲基]-米诺环素或其盐，然后是4-13个口服剂量的300 mg的9-[(2,2-二甲基-丙基氨基)-甲基]-米诺环素或其盐，其中所述IV剂量和所述4-13个口服剂量彼此间隔约24小时施用；进一步包括向所述对象施用额外口服剂量的300 mg的9-[(2,2-二甲基-丙基氨基)-甲基]-米诺环素或其盐，距所述IV剂量约12小时施用，以致治疗所述对象。
29.在需要其治疗的对象中治疗泌尿道感染(UTI)的方法，其包括向所述对象施用静脉内(IV)剂量的约200 mg的9-[(2,2-二甲基-丙基氨基)-甲基]-米诺环素或其盐，然后是四个口服剂量的450 mg的9-[(2,2-二甲基-丙基氨基)-甲基]-米诺环素或其盐，以致治疗所述对象，其中所述IV剂量和所述四个口服剂量彼此间隔约24小时施用。
30.在需要其治疗的对象中治疗泌尿道感染(UTI)的方法，其包括向所述对象施用静脉内(IV)剂量的约200 mg的9-[(2,2-二甲基-丙基氨基)-甲基]-米诺环素或其盐，然后是4-13个口服剂量的450 mg的9-[(2,2-二甲基-丙基氨基)-甲基]-米诺环素或其盐，以致治疗所述对象，其中所述IV剂量和所述4-13个口服剂量彼此间隔约24小时施用。
31.在需要其治疗的对象中治疗泌尿道感染(UTI)的方法，其包括向所述对象施用两个静脉内(IV)剂量，各为约100 mg的9-[(2,2-二甲基-丙基氨基)-甲基]-米诺环素或其盐，间隔12小时施用，然后是4-13个口服剂量的450 mg的9-[(2,2-二甲基-丙基氨基)-甲基]-米诺环素或其盐，以致治疗所述对象，其中所述两个IV剂量中的第一个和所述4-13个口服剂量彼此间隔约24小时施用。
32.在需要其治疗的对象中治疗泌尿道感染(UTI)的方法，其包括向所述对象施用静脉内(IV)剂量的约100 mg的9-[(2,2-二甲基-丙基氨基)-甲基]-米诺环素或其盐，然后是4-13个口服剂量的450 mg的9-[(2,2-二甲基-丙基氨基)-甲基]-米诺环素或其盐，其中所述IV剂量和所述4-13个口服剂量彼此间隔约24小时施用；进一步包括向所述对象施用额外口服剂量的450 mg的9-[(2,2-二甲基-丙基氨基)-甲基]-米诺环素或其盐，距所述IV剂量约12小时施用，以致治疗所述对象。
33.在需要其治疗的对象中治疗泌尿道感染(UTI)的方法，其包括向所述对象施用五个口服剂量的各约300 mg的9-[(2,2-二甲基-丙基氨基)-甲基]-米诺环素或其盐，彼此间隔约24小时施用；并且进一步包括向所述对象施用额外口服剂量的300 mg的9-[(2,2-二甲基-丙基氨基)-甲基]-米诺环素或其盐，在距所述五个口服剂量中的第一个约12小时施用，以致治疗所述对象。
34.在需要其治疗的对象中治疗泌尿道感染(UTI)的方法，其包括向所述对象施用5-14个口服剂量的各约300 mg的9-[(2,2-二甲基-丙基氨基)-甲基]-米诺环素或其盐，彼此间隔约24小时施用；并且进一步包括向所述对象施用额外口服剂量的300 mg的9-[(2,2-二甲基-丙基氨基)-甲基]-米诺环素或其盐，距所述5-14个口服剂量中的第一个约12小时施用，以致治疗所述对象。
35.在需要其治疗的对象中治疗泌尿道感染(UTI)的方法，其包括向所述对象施用五个口服剂量的各约450 mg的9-[(2,2-二甲基-丙基氨基)-甲基]-米诺环素或其盐，彼此间隔约24小时施用；并且进一步包括向所述对象施用额外口服剂量的450 mg的9-[(2,2-二甲基-丙基氨基)-甲基]-米诺环素或其盐，在距所述五个口服剂量中的第一个约12小时施用，以致治疗所述对象。
36.在需要其治疗的对象中治疗泌尿道感染(UTI)的方法，其包括向所述对象施用5-14个口服剂量的各约450 mg的9-[(2,2-二甲基-丙基氨基)-甲基]-米诺环素或其盐，彼此间隔约24小时施用；并且进一步包括向所述对象施用额外口服剂量的450 mg的9-[(2,2-二甲基-丙基氨基)-甲基]-米诺环素或其盐，距所述5-14个口服剂量中的第一个约12小时施用，以致治疗所述对象。
37.权利要求1-36中任一项的方法，其中所述UTI是简单的泌尿道感染(uUTI)或膀胱炎。
38.权利要求1-36中任一项的方法，其中所述UTI是复杂的泌尿道感染(cUTI)或肾盂肾炎。
39.权利要求1-38中任一项的方法，其中所述UTI是社区获得性的。
40.权利要求1-38中任一项的方法，其中所述UTI是医院获得性的或与医疗保健相关的(例如，在尿道导管插入术期间获得)。
41.权利要求1-40中任一项的方法，其中所述UTI的特征在于存在选自下列的病原体：大肠杆菌(Escherichia coli)(ESBL+、ESBL-、FQS、FQR、碳青霉烯抗性的、碳青霉烯易感的)、腐生葡萄球菌(Staphylococcus saprophyticus)、肺炎克雷伯菌(Klebsiella pneumoniae)(ESBL+、ESBL-、FQS、FQR)、和肠球菌属(Enterococcus)(粪肠球菌(E. faecalis)VS、粪肠球菌VNS、万古霉素抗性粪肠球菌(VRE)、屎肠球菌(E. faecium)VS、屎肠球菌VNS、万古霉素抗性屎肠球菌(VRE))、MSSA、MRSA、MSCoNS、MRCoNS、无乳链球菌(Streptococcus agalactiae)(B组链球菌)、产酸克雷伯菌(K. oxytoca)、阴沟肠杆菌(E. cloacae)CeftazS、阴沟肠杆菌CeftazR、枸橼酸杆菌属物种(Citrobacter spp.)、粘质沙雷菌(S. marcescens)和不动杆菌属(Acinetobacter)。
42.权利要求41的方法，其中所述病原体包括产生超广谱β-内酰胺酶(ESBL)的大肠杆菌(例如，对多种抗生素具有抗性的那些)。
43.权利要求41或42的方法，其中所述病原体在来自所述对象的尿培养物中具有≥105CFU/mL的滴度。
44.权利要求1-43中任一项的方法，其中所述对象被治疗，如通过来自所述对象的尿培养物的病原体滴度中的治疗后至少10倍减少所证明的。
45.权利要求1-44中任一项的方法，其中所述对象在来自所述对象的尿培养物上具有小于104 CFU/mL的治疗后病原体滴度。
46.权利要求1-45中任一项的方法，其中所述对象是雌性。
47.权利要求46的方法，其中所述雌性是糖尿病的、具有多发性硬化、和/或具有影响尿流动的状况(诸如肾结石、中风和脊髓损伤)。
48.权利要求1-47中任一项的方法，其中所述口服剂量中的每一个作为两个或三个150-mg片剂独立施用。
49.权利要求1-48中任一项的方法，其中所述IV剂量中的每一个经约30分钟(例如，至少30分钟并且不超过45分钟)连续施用。
50.在需要其治疗的对象中治疗泌尿道感染(UTI)的方法，其包括向所述对象施用IV剂量的约100-200 mg的9-[(2,2-二甲基-丙基氨基)-甲基]-米诺环素或其盐，以致治疗所述对象。
51.权利要求50的方法，其中所述对象不施用口服剂量的9-[(2,2-二甲基-丙基氨基)-甲基]-米诺环素或其盐。
52.权利要求50或51的方法，其中所述IV剂量是约100 mg或约200 mg的9-[(2,2-二甲基-丙基氨基)-甲基]-米诺环素或其盐。
53.权利要求50-52中任一项的方法，其包括向所述对象施用一个IV剂量的约100 mg的9-[(2,2-二甲基-丙基氨基)-甲基]-米诺环素或其盐，每24小时一次，总共3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13或14天。
54.权利要求50-52中任一项的方法，其包括向所述对象施用一个IV剂量的约100 mg的9-[(2,2-二甲基-丙基氨基)-甲基]-米诺环素或其盐，每24小时一次，总共5-14天。
55.权利要求53或54的方法，进一步包括在第一IV剂量后约12小时，向所述对象施用额外IV剂量的约100 mg的9-[(2,2-二甲基-丙基氨基)-甲基]-米诺环素或其盐。
56.权利要求50-55中任一项的方法，其中所述UTI是cUTI或肾盂肾炎。
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