PL59396B1 - - Google Patents
Download PDFInfo
- Publication number
- PL59396B1 PL59396B1 PL119096A PL11909667A PL59396B1 PL 59396 B1 PL59396 B1 PL 59396B1 PL 119096 A PL119096 A PL 119096A PL 11909667 A PL11909667 A PL 11909667A PL 59396 B1 PL59396 B1 PL 59396B1
- Authority
- PL
- Poland
- Prior art keywords
- inactivator
- kie
- crystals
- kallikrein
- solution
- Prior art date
Links
- 230000000937 inactivator Effects 0.000 claims description 22
- 102000001399 Kallikreins Human genes 0.000 claims description 17
- 108060005987 Kallikreins Proteins 0.000 claims description 17
- 239000000243 solution Substances 0.000 claims description 16
- QGZKDVFQNNGYKY-UHFFFAOYSA-N ammonia Chemical compound N QGZKDVFQNNGYKY-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 6
- 102000037197 Anion exchangers Human genes 0.000 claims description 4
- 108091006437 Anion exchangers Proteins 0.000 claims description 4
- ZMANZCXQSJIPKH-UHFFFAOYSA-N triethylamine Chemical compound CCN(CC)CC ZMANZCXQSJIPKH-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 4
- PIICEJLVQHRZGT-UHFFFAOYSA-N 1,2-ethanediamine Chemical compound NCCN PIICEJLVQHRZGT-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 3
- 239000007864 aqueous solution Substances 0.000 claims description 3
- 150000007530 organic bases Chemical class 0.000 claims description 3
- -1 hydroxyl ions Chemical class 0.000 claims description 2
- 238000000034 method Methods 0.000 claims description 2
- BAVYZALUXZFZLV-UHFFFAOYSA-N methylamine Chemical compound NC BAVYZALUXZFZLV-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 2
- NQRYJNQNLNOLGT-UHFFFAOYSA-N piperidine Chemical compound C1CCNCC1 NQRYJNQNLNOLGT-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 2
- 238000005349 anion exchange Methods 0.000 claims 1
- ROSDSFDQCJNGOL-UHFFFAOYSA-N dimethylamine Chemical compound CNC ROSDSFDQCJNGOL-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims 1
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Substances O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 14
- 238000002425 crystallisation Methods 0.000 description 8
- 230000005712 crystallization Effects 0.000 description 8
- DLYUQMMRRRQYAE-UHFFFAOYSA-N Phosphorus pentoxide Chemical compound O1P(O2)(=O)OP3(=O)OP1(=O)OP2(=O)O3 DLYUQMMRRRQYAE-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- CSNNHWWHGAXBCP-UHFFFAOYSA-L mgso4 Chemical compound [Mg+2].[O-][S+2]([O-])([O-])[O-] CSNNHWWHGAXBCP-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 6
- 229910052921 ammonium sulfate Inorganic materials 0.000 description 4
- 235000011130 ammonium sulphate Nutrition 0.000 description 4
- 230000000875 corresponding Effects 0.000 description 4
- 239000012190 activator Substances 0.000 description 3
- 239000001166 ammonium sulphate Substances 0.000 description 3
- XKUUMWKWUZRRPD-UHFFFAOYSA-N heptan-2-amine;sulfuric acid Chemical compound [O-]S([O-])(=O)=O.CCCCCC(C)[NH3+].CCCCCC(C)[NH3+] XKUUMWKWUZRRPD-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 229910052943 magnesium sulfate Inorganic materials 0.000 description 3
- 235000019341 magnesium sulphate Nutrition 0.000 description 3
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 description 3
- 239000000725 suspension Substances 0.000 description 3
- 210000000683 Abdominal Cavity Anatomy 0.000 description 2
- TZCXTZWJZNENPQ-UHFFFAOYSA-L Barium sulfate Chemical compound [Ba+2].[O-]S([O-])(=O)=O TZCXTZWJZNENPQ-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 2
- 229940088623 Biologically Active Substance Drugs 0.000 description 2
- 239000002253 acid Substances 0.000 description 2
- 230000002378 acidificating Effects 0.000 description 2
- 229910052760 oxygen Inorganic materials 0.000 description 2
- 239000001301 oxygen Substances 0.000 description 2
- 229920001184 polypeptide Polymers 0.000 description 2
- 239000002002 slurry Substances 0.000 description 2
- 239000000126 substance Substances 0.000 description 2
- KNIUHBNRWZGIQQ-UHFFFAOYSA-N 7-diethoxyphosphinothioyloxy-4-methylchromen-2-one Chemical compound CC1=CC(=O)OC2=CC(OP(=S)(OCC)OCC)=CC=C21 KNIUHBNRWZGIQQ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- BFNBIHQBYMNNAN-UHFFFAOYSA-N Ammonium sulfate Chemical compound N.N.OS(O)(=O)=O BFNBIHQBYMNNAN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- AXCZMVOFGPJBDE-UHFFFAOYSA-L Calcium hydroxide Chemical compound [OH-].[OH-].[Ca+2] AXCZMVOFGPJBDE-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 1
- 241000152160 Ira Species 0.000 description 1
- 101710006416 KTI3 Proteins 0.000 description 1
- 210000000496 Pancreas Anatomy 0.000 description 1
- 229940055695 Pancreatin Drugs 0.000 description 1
- 108010019160 Pancreatin Proteins 0.000 description 1
- 206010060932 Postoperative adhesion Diseases 0.000 description 1
- 229910000831 Steel Inorganic materials 0.000 description 1
- 241000282898 Sus scrofa Species 0.000 description 1
- GETQZCLCWQTVFV-UHFFFAOYSA-N Trimethylamine Chemical compound CN(C)C GETQZCLCWQTVFV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 238000002441 X-ray diffraction Methods 0.000 description 1
- 150000001450 anions Chemical class 0.000 description 1
- 239000007900 aqueous suspension Substances 0.000 description 1
- 239000010428 baryte Substances 0.000 description 1
- 229910052601 baryte Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000000920 calcium hydroxide Substances 0.000 description 1
- 229910001861 calcium hydroxide Inorganic materials 0.000 description 1
- 238000007796 conventional method Methods 0.000 description 1
- 238000001816 cooling Methods 0.000 description 1
- 230000000694 effects Effects 0.000 description 1
- 150000007529 inorganic bases Chemical class 0.000 description 1
- 238000003780 insertion Methods 0.000 description 1
- 238000002955 isolation Methods 0.000 description 1
- 230000003472 neutralizing Effects 0.000 description 1
- MYMOFIZGZYHOMD-UHFFFAOYSA-N oxygen Chemical compound O=O MYMOFIZGZYHOMD-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- ZLMJMSJWJFRBEC-UHFFFAOYSA-N potassium Chemical compound [K] ZLMJMSJWJFRBEC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000011591 potassium Substances 0.000 description 1
- 229910052700 potassium Inorganic materials 0.000 description 1
- 102000004169 proteins and genes Human genes 0.000 description 1
- 108090000623 proteins and genes Proteins 0.000 description 1
- 238000000746 purification Methods 0.000 description 1
- KEAYESYHFKHZAL-UHFFFAOYSA-N sodium Chemical compound [Na] KEAYESYHFKHZAL-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000011734 sodium Substances 0.000 description 1
- 229910052708 sodium Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000010959 steel Substances 0.000 description 1
- 150000003467 sulfuric acid derivatives Chemical class 0.000 description 1
- 238000001356 surgical procedure Methods 0.000 description 1
- 230000001225 therapeutic Effects 0.000 description 1
- 238000002211 ultraviolet spectrum Methods 0.000 description 1
Description
23.11.1966 Niemiecka Republika Federalna Opublikowano: 31.111.1970 59396 KI. 30 h, 2/04 M.KP A 61 k UKD wlot Twórca wynalazku: Fritz Schultz Wlasciciel patentu: Farbenfabriken Bayer Aktiengesellschaft, Leverkusen (Niemiecka Republika Federalna) Sposób otrzymywania inaktywatora kalikreiny w postaci krystalicznej Przedmiotem wynalazku jest sposób otrzymywa¬ nia inaktywatora kalikreiny w postaci krystalicznej.Inaktywator kalikreiny jest polipeptydem o cie¬ zarze czasteczkowym okolo 6500. Znany jest równiez pod nazwa inhibitora pankreatynowego trypsyny Kunitza i Northrop a.Inaktywator kalikreiny jest silna zasada. Dotych¬ czas nie udalo sie otrzymywac go jako takiego w po¬ staci krystalicznej, natomiast wydzielenie inaktywa¬ tora kalikreiny przeprowadza sie na drodze jego krystalizacji z wodnego roztworu siarczanu magne¬ zu lub siarczanu amonu o slabo kwasnym odczy¬ nie (F. Schultz, H. Kraut i N. Bhargava, Naturwis- senschaften 50, 375/1963). Otrzymuje sie przy tym krysztaly w postaci graniastoslupów szesciobocz- nych, zawierajace okolo 50% wagowych siarczanu magnezu, wzglednie siarczanu amonu. W celu uzy¬ skania czystej substancji biologicznie czynnej na¬ lezy te siarczany usunac, co udaje sie jedynie po ich ponownym rozpuszczeniu. Powyzszy sposób po¬ stepowania zgodny jest z danymi literaturowymi, które nie przewiduja mozliwosci otrzymania w po¬ staci krystalicznej polipeptydu o tak duzym (6500) ciezarze czasteczkowym, a poza tym zalecaja zobo¬ jetnianie roztworu inaktywatora jako rzekomo nie¬ trwalego w roztworze alkalicznym.Stwierdzono, ze czysty inaktywator kalikreiny* w postaci krystalicznej otrzymuje sie w ten sposób, ze jego wodny roztwór nastawia sie na wartosc pH w granicach 9 — 12,5 za pomoca dodawania zasad 10 15 20 25 lub za pomoca wymiany anionów na jony wodoro¬ tlenowe na anionicie, nastepnie wymieniony roz¬ twór zateza sie do uzyskania stezenia co najmniej 5000 KIE, przy którym nastepuje wykrystalizowanie inaktywatora (1 KIE jest iloscia inaktywatora deza- ktywujaca w 50% 2 jednostki kalikreiny z trzustki swin).Nastawienie na odpowiednia wartosc pH osiaga sie korzystnie za pomoca amoniaku. Mozna tez uzyc do tego celu i inne nieorganiczne lub orga¬ niczne zasady. Szczególnie wysokie wydajnosci osia¬ ga sie przy stosowaniu amoniaku i wartosci pH=ll i powyzej. Wieksza czesc wykrystalizowuje juz po uplywie 1 godziny, a maksymalna wydajnosc za¬ zwyczaj osiaga sie po uplywie 10 godzin. Krystali¬ zacja korzystnie przebiega przy chlodzeniu.Najdogodniejsze stezenie dla przeprowadzenia krystalizacji wynosi 1 g do 5 g inaktywatora kali¬ kreiny na 100 ml roztworu. Przy nizszych steze¬ niach wydajnosc spada.Przy uzyciu innych zasad zamiast amoniaku zmienia sie optimum wartosci pH, które latwo moz¬ na ustalic na drodze doswiadczalnej. Jezeli konco¬ we stezenie wynosi 1 g inaktywatora na 100 ml roztworu to dla lugu sodowego, lugu potasowego, wodorotlenku wapniowego i wody barytowej, naj¬ dogodniejsza dla krystalizacji jest wartosc pH = 11.Dla zasad organicznych optimum wartosci pH znaj¬ duje sie równiez w poblizu 11. Najlepsza krystali¬ zacje osiaga sie przy uzyciu etylenodwuaminy. Do- 593963 59396 4 bre wydajnosci daja tez metyloamina, trójmetylo- amina, trójetyloamina, piperydyna itp.Przy zatezaniu pod próznia obojetnego lub kwas¬ nego roztworu inaktywatora kalikreiny nie otrzy¬ muje sie krysztalów substancji biologicznie czynnej nawet przy najwiekszym stezeniu. Natomiast przy powolnym przepuszczeniu roztworu przez kolumne wypelniona silnie zasadowym wymieniaczem anio¬ nowym, otrzymuje sie silnie alkaliczny roztwór, z którego podczas zatezania przy wartosci pH po¬ miedzy 9 i 10 wykrystalizowuje inaktywator z wy¬ soka wydajnoscia w swojej zasadowej postaci.Jako material wyjsciowy najlepiej nadaja sie preparaty inaktywatora kalikreiny uwolnione od towarzyszacych mu substancji. Im dalej posuniete jest oczyszczanie, tym wyzsza jest wydajnosc pod¬ czas krystalizacji, a krystalizacja w postaci zasa¬ dy ulatwia uwolnienie inaktywatora od obcych protein i innych zwiazków towarzyszacych.Inaktywator kalikreiny krystalizuje w postaci czterokatnych slupów, wykazujacych czasem jedna lub wiecej krawedzi ukosnie scietych. Analiza rent¬ genowska krysztalów inaktywatora kalikreiny kry¬ stalizowanych z roztworu siarczanu amonu przy wartosci pH = 6 wykazuje strukutre jednoskosna oraz grupe przestrzenna P21? zas krysztalów otrzy¬ mywanych wedlug wynalazku strukture rombowa i grupe przestrzenna P2i 2^. Podobnie stwierdzo¬ no wyrazne róznice widm w nadfiolecie obu rodza¬ jów krysztalów.Krysztaly otrzymywane wedlug wynalazku . sa trudno rozpuszczalne w wodzie, jednakze rozpusz¬ czaja sie latwo przy obnizeniu wartosci pH. Tak wiec na przyklad wprowadzenie gazowego C02 do wodnej zawiesiny krysztalów powoduje ich roz¬ puszczenie. W zwiazku z tym konieczne jest wy¬ kluczenie C02 zawartego w powietrzu przy ozna¬ czaniu rozpuszczalnosci. W tych warunkach w 100 ml wody o temperaturze 20°C rozpuszcza sie 1 g krysztalów. Natomiast rozpuszczalnosc krysztalów uzyskanych z roztworów siarczanu magnezu lub siarczanu amonu w temperaturze 20°C wynosi 30 g w 100 ml wody.Specyficzna aktywnosc substancji wysuszonej nad pieciotlenkiem fosforu wynosi okolo 7000 KIE/mg.Zawiesina krysztalów w wodzie posiada wartosc pH okolo 10. Jezeli sie doda do niej troche kwasu, wówczas krysztaly przechodza do roztworu przy wartosci pH 9 i ponizej.Wszystkie wskazania lecznicze odnoszace sie do niekrystalicznego inaktywatora kalikreiny odnosza sie takze do nowych krystalicznych produktów. Po¬ nadto dla tych krysztalów istnieje nowa mozliwosc zastosowania. Dzieki ich trudnej rozpuszczalnosci, mozna je mianowicie równiez zastosowac w postaci zasypki. Taka zasypka jest pozyteczna jako srodek zapobiegawczy przed zrostami pooperacyjnymi. Po wprowadzeniu podczas operacji do jamy brzusznej pozostaje ona w niej dluzszy czas dzieki trudnej rozpuszczalnosci. Zasypke przygotowuje sie znany¬ mi sposobami.Przyklad I. 4,48 g liofilizowanego preparatu inaktywatora kalikreiny o stopniu czystosci 0,16 gamma/KIE = 28 mega KIE rozpuszcza sie w 56 cm3 wody redestylowanej. 1 cm3 zawiera zatem 500 000 jednostek KIE. Nastepnie dodaje sie 56 cm3 czystego 25% amoniaku. Wartosc pH wynosi wte¬ dy 11. Po 24 godzinnym staniu w temperaturze 20°C 5 wytraca sie gesta krystaliczna breja, która odsacza sie, przemywa 12 cm3 wody redestylowanej i suszy w prózniowym eksykatorze nad pieciotlenkiem fo¬ sforu. Otrzymuje sie 3,096 krysztalów = 22,12 mega KIE o czystosci 0,14 gamma, co odpowiada 79% io wydajnosci.Przyklad II. 20 cm3 = 2 mega KIE o stop¬ niu czystosci 0,16 gamma/KIE zadaje sie 0,63 cm3 nasyconej wody barytowej. Wartosc pH wynosi wtedy 11. Po 10 godzinnym staniu w temperaturze 15 4°C powstale krysztaly odsacza sie, przemywa wo¬ da i suszy pod próznia nad pieciotlenkiem fosforu.Otrzymuje sie 129 mg krysztalów = 920 000 jed¬ nostek KIE, co odpowiada wydajnosci 46% przy czystosci 0,14 gamma/KIE. 20 Przyklad III. 0,48 g inaktywatora kalikreiny o czystosci 0,16 gamma KIE rozpuszcza sie w wo¬ dzie i zadaje 0,39 cm3 etylenodwuaminy. Wartosc pH wynosi wtedy 11,2. Juz po uplywie 15 minut 25 rozpoczyna sie krystalizacja. Po 24 godzinach otrzy¬ mana krystaliczna breje oddziela sie, przemywa mala iloscia wody i suszy. Otrzymuje sie 239 mg krysztalów o czystosci 0,142 gamma/KIE, co odpo¬ wiada wydajnosci 56%. 30 Przyklad IV. Ig liofilizowanego preparatu inaktywatora kalikreiny o czystosci 0,2 gamma/ /KIE = 5 mega KIE rozpuszcza sie w 10 cm3 wo¬ dy redestylowanej. Nastepnie dodaje sie 0,6 cm3 amoniaku. Wartosc pH wynosi wtedy 10. Po 24 go- 35 dzinnym staniu w temperaturze +4°C odfiltrowuje sie krysztaly; przemywa i suszy. Otrzymuje sie 210 mg krysztalów o czystosci 0,15 gamma/KIE, co odpowiada wydajnosci 28%.Przyklad V. 3,4 g liofilizowanego inaktywa¬ tora kalikreiny o czystosci 0,17 gamma/KIE roz¬ puszcza sie w 150 cm3 wody. Roztwór wykazuje wartosc pH = 6,5. Nastepnie dodaje sie 50 cm8 silnie zasadowego wymieniacza anionowego Am- mm berlit IR A 410. Zawiesine miesza sie w ciagu 10 45 minut i pozostawia w spokoju w ciagu 24 godzin.Zawiesina wskazuje wówczas wartosc pH = 10,5.Przez przeszlamowanie i sitowanie zawiesina kry¬ staliczna zostaje oddzielona od wymieniacza, kry¬ sztaly odfiltrowuje sie, przemywa mala iloscia wo¬ dy i suszy. Otrzymuje sie 2,03 g krysztalów o czy¬ stosci 0,145 gamma/KIE, co odpowiada 70% wy¬ dajnosci.Przyklad VI. 15,4 litra silnie kwasnego roz- 55 tworu inaktywatora kalikreiny, zawierajacego 295 milionów jednostek KIE o czystosci 0,16 gamma/ /KIE, przepuszcza sie w ciagu 6 godzin przez ko¬ lumne wymieniacza wypelniona 5 litrami silnie za¬ sadowego wymieniacza anionowego Amberlit IRA 60 410. Otrzymany mocno alkaliczny roztwór zostaje zatezony do objetosci 1,5 litra w prózniowym cyr- kulacyjnym aparacie wyparnym. Juz w czasie zate¬ zania roztwór zaczyna metniec po czym wydziela sie inaktywator w postaci krystalicznej z wydaj no- 65 scia 71%.59396 PL PL PL PL PL PL PL
Claims (3)
1. Zastrzezenia patentowe 1. Sposób otrzymywania inaktywatora kalikreiny w postaci krystalicznej, znamienny tym, ze wodny roztwór inaktywatora kalikreiny doprowadza sie do wartosci pH = 9—12,5 za pomoca dodawania za¬ sad lub za pomoca wymiany anionów na jony wo¬ dorotlenowe na anionicie, nastepnie wymieniony roztwór zateza sie do uzyskania stezenia co naj¬ mniej 5000 KIE, przy którym nastepuje wykrysta¬ lizowanie inaktywatora.
2. Sposób wedlug zastrz. 1 znamienny tym, ze jako zasade stosuje sie amoniak. 5
3. Sposób wedlug zastrz. 1 znamienny tym, ze jako zasade stosuje sie zasade organiczna jak ety- lenodwuamina, metyloamina, dwumetyloamina, trójetyloamina, piperydyna. PL PL PL PL PL PL PL
Publications (1)
Publication Number | Publication Date |
---|---|
PL59396B1 true PL59396B1 (pl) | 1969-12-29 |
Family
ID=
Similar Documents
Publication | Publication Date | Title |
---|---|---|
RU2148018C1 (ru) | СПОСОБ ПОЛУЧЕНИЯ РЕАГЕНТА НА ОСНОВЕ КОМПЛЕКСНОГО СОЕДИНЕНИЯ КАЛЬЦИЯ И МАГНИЯ ОБЩЕЙ ФОРМУЛЫ (1,0 - 1,9)•Сa(NO3)2•Mg(NO3)2•8CO(NH2)2 И АНТИГОЛОЛЕДНЫЙ РЕАГЕНТ | |
UA88769C2 (uk) | Відновний агент для розчинного хромату, що міститься в цементі | |
NO174424B (no) | Fremgangsmaate for fremstilling av dinatrium-cefodizim | |
US6617444B1 (en) | Dinucleotide tetraphosphate crystals | |
ES2256509T3 (es) | Metodo para la preparacion de acido lactico y dihidrato de sulfato de calcio. | |
PL59396B1 (pl) | ||
FI75571B (fi) | Framstaellningsfoerfarande foer synnerligen kristalliniskt natriumcefoperazon. | |
US2972566A (en) | Process for the production of l-malic acid | |
US5847107A (en) | Method of preparing mixed glucosamine salts | |
ES337146A1 (es) | Procedimiento para la preparacion de inactivador de cali- creina cristalizado. | |
Markowitz | A convenient method for preparation of quaternary ammonium salts | |
NO951845D0 (no) | Fremgangsmåte for fremstilling av en höytetthets Cesium- og Rubidiumsaltopplösning | |
ES2211389T3 (es) | Procedimiento para la obtencion de derivados de guanidina. | |
ES2220383T3 (es) | Composicion retardante para yeso. | |
US4148753A (en) | Neutralization of phosphoric acid activated carbon | |
GB1091345A (en) | Process for the preparation of pure ammonium phosphate | |
US4124636A (en) | Method of preparing monopotassium L-malate and its monohydrate | |
EP0461520A2 (en) | Oxetanocin G anhydride crystals and process for producing the same | |
SU1234362A1 (ru) | Способ получени одноводного магнийаммонийфосфата | |
CS231802B1 (cs) | Způsob čištění surové kyseliny lysergové | |
NO169717B (no) | Fremgangsmaate for fremstilling av et stabilt hydrat av etpenicillinderivat. | |
SU767028A1 (ru) | Способ получени сульфата кали | |
JPS6219066A (ja) | 特殊塩の製造方法 | |
US2509084A (en) | Methylation of xanthine to form caffeine | |
RU2137775C1 (ru) | Способ выделения натриевой соли оксациллина |