PL198958B1 - Zastosowanie neurotoksyny botulinowej z Clostridium botulinum - Google Patents
Zastosowanie neurotoksyny botulinowej z Clostridium botulinumInfo
- Publication number
- PL198958B1 PL198958B1 PL352468A PL35246800A PL198958B1 PL 198958 B1 PL198958 B1 PL 198958B1 PL 352468 A PL352468 A PL 352468A PL 35246800 A PL35246800 A PL 35246800A PL 198958 B1 PL198958 B1 PL 198958B1
- Authority
- PL
- Poland
- Prior art keywords
- neurotoxin
- botulinum
- neurotoxins
- treatment
- complex
- Prior art date
Links
- 239000002581 neurotoxin Substances 0.000 title claims abstract description 61
- 231100000618 neurotoxin Toxicity 0.000 title claims abstract description 60
- 101710138657 Neurotoxin Proteins 0.000 title claims abstract description 41
- 239000003795 chemical substances by application Substances 0.000 title 1
- 108030001720 Bontoxilysin Proteins 0.000 claims abstract description 26
- 241000193155 Clostridium botulinum Species 0.000 claims abstract description 18
- 231100001103 botulinum neurotoxin Toxicity 0.000 claims abstract description 18
- 239000000203 mixture Substances 0.000 claims abstract description 18
- 239000000825 pharmaceutical preparation Substances 0.000 claims abstract description 15
- 102000004169 proteins and genes Human genes 0.000 claims abstract description 14
- 108090000623 proteins and genes Proteins 0.000 claims abstract description 14
- 230000000536 complexating effect Effects 0.000 claims abstract description 6
- 230000003472 neutralizing effect Effects 0.000 claims description 11
- 241001465754 Metazoa Species 0.000 claims description 10
- 238000000034 method Methods 0.000 claims description 10
- 239000002537 cosmetic Substances 0.000 claims description 9
- 208000014094 Dystonic disease Diseases 0.000 claims description 6
- 208000010118 dystonia Diseases 0.000 claims description 6
- 206010040954 Skin wrinkling Diseases 0.000 claims description 4
- 206010044074 Torticollis Diseases 0.000 claims description 4
- 208000037265 diseases, disorders, signs and symptoms Diseases 0.000 claims description 4
- 208000035475 disorder Diseases 0.000 claims description 4
- 208000018197 inherited torticollis Diseases 0.000 claims description 4
- 210000000653 nervous system Anatomy 0.000 claims description 4
- 230000037303 wrinkles Effects 0.000 claims description 4
- 208000012902 Nervous system disease Diseases 0.000 claims description 3
- 208000007542 Paresis Diseases 0.000 claims description 3
- 230000002490 cerebral effect Effects 0.000 claims description 3
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 claims description 3
- 230000035900 sweating Effects 0.000 claims description 3
- 230000001815 facial effect Effects 0.000 claims description 2
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 abstract description 12
- 239000003053 toxin Substances 0.000 description 21
- 231100000765 toxin Toxicity 0.000 description 21
- 108700012359 toxins Proteins 0.000 description 21
- 101710117542 Botulinum neurotoxin type A Proteins 0.000 description 16
- 229940089093 botox Drugs 0.000 description 16
- 241000283973 Oryctolagus cuniculus Species 0.000 description 13
- FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M Sodium chloride Chemical compound [Na+].[Cl-] FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 8
- 229940053031 botulinum toxin Drugs 0.000 description 8
- 108010079650 abobotulinumtoxinA Proteins 0.000 description 7
- 229940098753 dysport Drugs 0.000 description 7
- 238000012360 testing method Methods 0.000 description 7
- 229920005654 Sephadex Polymers 0.000 description 6
- 239000012507 Sephadex™ Substances 0.000 description 6
- 230000015572 biosynthetic process Effects 0.000 description 6
- 238000000746 purification Methods 0.000 description 6
- 230000004071 biological effect Effects 0.000 description 5
- 210000004027 cell Anatomy 0.000 description 5
- 210000002966 serum Anatomy 0.000 description 5
- 238000004587 chromatography analysis Methods 0.000 description 4
- 238000001514 detection method Methods 0.000 description 4
- 239000007924 injection Substances 0.000 description 4
- 238000002347 injection Methods 0.000 description 4
- 238000006386 neutralization reaction Methods 0.000 description 4
- 239000011780 sodium chloride Substances 0.000 description 4
- 239000000243 solution Substances 0.000 description 4
- 230000001225 therapeutic effect Effects 0.000 description 4
- 108090000790 Enzymes Proteins 0.000 description 3
- 102000004190 Enzymes Human genes 0.000 description 3
- 239000003814 drug Substances 0.000 description 3
- 230000000694 effects Effects 0.000 description 3
- 210000003743 erythrocyte Anatomy 0.000 description 3
- 210000001035 gastrointestinal tract Anatomy 0.000 description 3
- 210000003205 muscle Anatomy 0.000 description 3
- 239000001488 sodium phosphate Substances 0.000 description 3
- 229910000162 sodium phosphate Inorganic materials 0.000 description 3
- 235000000346 sugar Nutrition 0.000 description 3
- 210000001519 tissue Anatomy 0.000 description 3
- RYFMWSXOAZQYPI-UHFFFAOYSA-K trisodium phosphate Chemical compound [Na+].[Na+].[Na+].[O-]P([O-])([O-])=O RYFMWSXOAZQYPI-UHFFFAOYSA-K 0.000 description 3
- 238000002965 ELISA Methods 0.000 description 2
- 108090001090 Lectins Proteins 0.000 description 2
- 102000004856 Lectins Human genes 0.000 description 2
- JOCBASBOOFNAJA-UHFFFAOYSA-N N-tris(hydroxymethyl)methyl-2-aminoethanesulfonic acid Chemical compound OCC(CO)(CO)NCCS(O)(=O)=O JOCBASBOOFNAJA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 239000007983 Tris buffer Substances 0.000 description 2
- 230000004523 agglutinating effect Effects 0.000 description 2
- BFNBIHQBYMNNAN-UHFFFAOYSA-N ammonium sulfate Chemical compound N.N.OS(O)(=O)=O BFNBIHQBYMNNAN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 229910052921 ammonium sulfate Inorganic materials 0.000 description 2
- 235000011130 ammonium sulphate Nutrition 0.000 description 2
- 238000012512 characterization method Methods 0.000 description 2
- 238000011161 development Methods 0.000 description 2
- 238000010790 dilution Methods 0.000 description 2
- 239000012895 dilution Substances 0.000 description 2
- 229940079593 drug Drugs 0.000 description 2
- 210000002865 immune cell Anatomy 0.000 description 2
- 230000003053 immunization Effects 0.000 description 2
- 238000002649 immunization Methods 0.000 description 2
- 238000003018 immunoassay Methods 0.000 description 2
- 239000002523 lectin Substances 0.000 description 2
- 231100000252 nontoxic Toxicity 0.000 description 2
- 230000003000 nontoxic effect Effects 0.000 description 2
- 238000001556 precipitation Methods 0.000 description 2
- 239000000047 product Substances 0.000 description 2
- 150000008163 sugars Chemical class 0.000 description 2
- 238000002560 therapeutic procedure Methods 0.000 description 2
- 231100000331 toxic Toxicity 0.000 description 2
- 230000002588 toxic effect Effects 0.000 description 2
- LENZDBCJOHFCAS-UHFFFAOYSA-N tris Chemical compound OCC(N)(CO)CO LENZDBCJOHFCAS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 239000002028 Biomass Substances 0.000 description 1
- 241000193403 Clostridium Species 0.000 description 1
- 241000464664 Clostridium botulinum G Species 0.000 description 1
- 108010062580 Concanavalin A Proteins 0.000 description 1
- 206010016952 Food poisoning Diseases 0.000 description 1
- 208000019331 Foodborne disease Diseases 0.000 description 1
- WQZGKKKJIJFFOK-GASJEMHNSA-N Glucose Natural products OC[C@H]1OC(O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H]1O WQZGKKKJIJFFOK-GASJEMHNSA-N 0.000 description 1
- 241000282412 Homo Species 0.000 description 1
- 102000008100 Human Serum Albumin Human genes 0.000 description 1
- 108091006905 Human Serum Albumin Proteins 0.000 description 1
- 101000761717 Hydrophis lapemoides Short neurotoxin 1 Proteins 0.000 description 1
- 206010021118 Hypotonia Diseases 0.000 description 1
- DGAQECJNVWCQMB-PUAWFVPOSA-M Ilexoside XXIX Chemical compound C[C@@H]1CC[C@@]2(CC[C@@]3(C(=CC[C@H]4[C@]3(CC[C@@H]5[C@@]4(CC[C@@H](C5(C)C)OS(=O)(=O)[O-])C)C)[C@@H]2[C@]1(C)O)C)C(=O)O[C@H]6[C@@H]([C@H]([C@@H]([C@H](O6)CO)O)O)O.[Na+] DGAQECJNVWCQMB-PUAWFVPOSA-M 0.000 description 1
- 231100000911 LD50 test Toxicity 0.000 description 1
- 101710106950 Long neurotoxin 2 Proteins 0.000 description 1
- 208000019695 Migraine disease Diseases 0.000 description 1
- 208000008238 Muscle Spasticity Diseases 0.000 description 1
- 208000000112 Myalgia Diseases 0.000 description 1
- 101000800747 Ophiophagus hannah Long neurotoxin 1 Proteins 0.000 description 1
- 206010058667 Oral toxicity Diseases 0.000 description 1
- 229910019142 PO4 Inorganic materials 0.000 description 1
- 206010033799 Paralysis Diseases 0.000 description 1
- 108010033737 Pokeweed Mitogens Proteins 0.000 description 1
- 102000007327 Protamines Human genes 0.000 description 1
- 108010007568 Protamines Proteins 0.000 description 1
- 206010039424 Salivary hypersecretion Diseases 0.000 description 1
- 208000008630 Sialorrhea Diseases 0.000 description 1
- 229930006000 Sucrose Natural products 0.000 description 1
- CZMRCDWAGMRECN-UGDNZRGBSA-N Sucrose Chemical compound O[C@H]1[C@H](O)[C@@H](CO)O[C@@]1(CO)O[C@@H]1[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O1 CZMRCDWAGMRECN-UGDNZRGBSA-N 0.000 description 1
- 206010066901 Treatment failure Diseases 0.000 description 1
- 108010057266 Type A Botulinum Toxins Proteins 0.000 description 1
- 230000009471 action Effects 0.000 description 1
- 239000004480 active ingredient Substances 0.000 description 1
- 239000000910 agglutinin Substances 0.000 description 1
- 150000001413 amino acids Chemical class 0.000 description 1
- 239000001166 ammonium sulphate Substances 0.000 description 1
- 239000012491 analyte Substances 0.000 description 1
- 239000000427 antigen Substances 0.000 description 1
- 108091007433 antigens Proteins 0.000 description 1
- 102000036639 antigens Human genes 0.000 description 1
- 239000007864 aqueous solution Substances 0.000 description 1
- 238000003556 assay Methods 0.000 description 1
- 210000003719 b-lymphocyte Anatomy 0.000 description 1
- 230000008901 benefit Effects 0.000 description 1
- 206010005159 blepharospasm Diseases 0.000 description 1
- 239000000872 buffer Substances 0.000 description 1
- 229940041514 candida albicans extract Drugs 0.000 description 1
- 239000013065 commercial product Substances 0.000 description 1
- 230000008602 contraction Effects 0.000 description 1
- 230000008034 disappearance Effects 0.000 description 1
- 208000037765 diseases and disorders Diseases 0.000 description 1
- 230000000632 dystonic effect Effects 0.000 description 1
- 238000002474 experimental method Methods 0.000 description 1
- 238000009472 formulation Methods 0.000 description 1
- 239000008103 glucose Substances 0.000 description 1
- 230000036541 health Effects 0.000 description 1
- 239000000185 hemagglutinin Substances 0.000 description 1
- 229910052588 hydroxylapatite Inorganic materials 0.000 description 1
- 230000028993 immune response Effects 0.000 description 1
- 230000036039 immunity Effects 0.000 description 1
- 230000001571 immunoadjuvant effect Effects 0.000 description 1
- 230000002163 immunogen Effects 0.000 description 1
- 230000016784 immunoglobulin production Effects 0.000 description 1
- 239000000568 immunological adjuvant Substances 0.000 description 1
- 230000003308 immunostimulating effect Effects 0.000 description 1
- 230000006698 induction Effects 0.000 description 1
- 208000015181 infectious disease Diseases 0.000 description 1
- 230000031891 intestinal absorption Effects 0.000 description 1
- 150000002500 ions Chemical class 0.000 description 1
- 238000002955 isolation Methods 0.000 description 1
- 210000004324 lymphatic system Anatomy 0.000 description 1
- 239000012528 membrane Substances 0.000 description 1
- 206010027599 migraine Diseases 0.000 description 1
- 208000013465 muscle pain Diseases 0.000 description 1
- 230000036640 muscle relaxation Effects 0.000 description 1
- 210000001640 nerve ending Anatomy 0.000 description 1
- 230000002232 neuromuscular Effects 0.000 description 1
- 231100000957 no side effect Toxicity 0.000 description 1
- 238000010606 normalization Methods 0.000 description 1
- 102000039446 nucleic acids Human genes 0.000 description 1
- 108020004707 nucleic acids Proteins 0.000 description 1
- 150000007523 nucleic acids Chemical class 0.000 description 1
- 230000003287 optical effect Effects 0.000 description 1
- 231100000418 oral toxicity Toxicity 0.000 description 1
- XYJRXVWERLGGKC-UHFFFAOYSA-D pentacalcium;hydroxide;triphosphate Chemical compound [OH-].[Ca+2].[Ca+2].[Ca+2].[Ca+2].[Ca+2].[O-]P([O-])([O-])=O.[O-]P([O-])([O-])=O.[O-]P([O-])([O-])=O XYJRXVWERLGGKC-UHFFFAOYSA-D 0.000 description 1
- 230000000144 pharmacologic effect Effects 0.000 description 1
- NBIIXXVUZAFLBC-UHFFFAOYSA-K phosphate Chemical compound [O-]P([O-])([O-])=O NBIIXXVUZAFLBC-UHFFFAOYSA-K 0.000 description 1
- 239000010452 phosphate Substances 0.000 description 1
- 239000002504 physiological saline solution Substances 0.000 description 1
- 238000002264 polyacrylamide gel electrophoresis Methods 0.000 description 1
- 239000002244 precipitate Substances 0.000 description 1
- 238000012545 processing Methods 0.000 description 1
- 229950008679 protamine sulfate Drugs 0.000 description 1
- 108010009004 proteose-peptone Proteins 0.000 description 1
- 238000011160 research Methods 0.000 description 1
- 210000003019 respiratory muscle Anatomy 0.000 description 1
- 108010074523 rimabotulinumtoxinB Proteins 0.000 description 1
- 238000000926 separation method Methods 0.000 description 1
- 210000002460 smooth muscle Anatomy 0.000 description 1
- 229910052708 sodium Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000011734 sodium Substances 0.000 description 1
- 238000002415 sodium dodecyl sulfate polyacrylamide gel electrophoresis Methods 0.000 description 1
- 239000012064 sodium phosphate buffer Substances 0.000 description 1
- GNBVPFITFYNRCN-UHFFFAOYSA-M sodium thioglycolate Chemical compound [Na+].[O-]C(=O)CS GNBVPFITFYNRCN-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- 229940046307 sodium thioglycolate Drugs 0.000 description 1
- 230000001148 spastic effect Effects 0.000 description 1
- 208000018198 spasticity Diseases 0.000 description 1
- 210000003699 striated muscle Anatomy 0.000 description 1
- 239000005720 sucrose Substances 0.000 description 1
- 208000024891 symptom Diseases 0.000 description 1
- 210000003568 synaptosome Anatomy 0.000 description 1
- 208000011580 syndromic disease Diseases 0.000 description 1
- 229940124597 therapeutic agent Drugs 0.000 description 1
- 239000012138 yeast extract Substances 0.000 description 1
Classifications
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K16/00—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies
- C07K16/12—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from bacteria
- C07K16/1267—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from bacteria from Gram-positive bacteria
- C07K16/1282—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from bacteria from Gram-positive bacteria from Clostridium (G)
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K38/00—Medicinal preparations containing peptides
- A61K38/16—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K38/00—Medicinal preparations containing peptides
- A61K38/16—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof
- A61K38/43—Enzymes; Proenzymes; Derivatives thereof
- A61K38/46—Hydrolases (3)
- A61K38/48—Hydrolases (3) acting on peptide bonds (3.4)
- A61K38/4886—Metalloendopeptidases (3.4.24), e.g. collagenase
- A61K38/4893—Botulinum neurotoxin (3.4.24.69)
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P17/00—Drugs for dermatological disorders
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P17/00—Drugs for dermatological disorders
- A61P17/16—Emollients or protectives, e.g. against radiation
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P21/00—Drugs for disorders of the muscular or neuromuscular system
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P21/00—Drugs for disorders of the muscular or neuromuscular system
- A61P21/02—Muscle relaxants, e.g. for tetanus or cramps
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P25/00—Drugs for disorders of the nervous system
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P25/00—Drugs for disorders of the nervous system
- A61P25/02—Drugs for disorders of the nervous system for peripheral neuropathies
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P25/00—Drugs for disorders of the nervous system
- A61P25/04—Centrally acting analgesics, e.g. opioids
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P25/00—Drugs for disorders of the nervous system
- A61P25/06—Antimigraine agents
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P25/00—Drugs for disorders of the nervous system
- A61P25/08—Antiepileptics; Anticonvulsants
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P25/00—Drugs for disorders of the nervous system
- A61P25/14—Drugs for disorders of the nervous system for treating abnormal movements, e.g. chorea, dyskinesia
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P27/00—Drugs for disorders of the senses
- A61P27/02—Ophthalmic agents
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P29/00—Non-central analgesic, antipyretic or antiinflammatory agents, e.g. antirheumatic agents; Non-steroidal antiinflammatory drugs [NSAID]
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P43/00—Drugs for specific purposes, not provided for in groups A61P1/00-A61P41/00
-
- Y—GENERAL TAGGING OF NEW TECHNOLOGICAL DEVELOPMENTS; GENERAL TAGGING OF CROSS-SECTIONAL TECHNOLOGIES SPANNING OVER SEVERAL SECTIONS OF THE IPC; TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
- Y02—TECHNOLOGIES OR APPLICATIONS FOR MITIGATION OR ADAPTATION AGAINST CLIMATE CHANGE
- Y02A—TECHNOLOGIES FOR ADAPTATION TO CLIMATE CHANGE
- Y02A50/00—TECHNOLOGIES FOR ADAPTATION TO CLIMATE CHANGE in human health protection, e.g. against extreme weather
- Y02A50/30—Against vector-borne diseases, e.g. mosquito-borne, fly-borne, tick-borne or waterborne diseases whose impact is exacerbated by climate change
Landscapes
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- Pharmacology & Pharmacy (AREA)
- Animal Behavior & Ethology (AREA)
- Public Health (AREA)
- Veterinary Medicine (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
- General Chemical & Material Sciences (AREA)
- Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
- Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
- Neurology (AREA)
- Biomedical Technology (AREA)
- Neurosurgery (AREA)
- Pain & Pain Management (AREA)
- Immunology (AREA)
- Proteomics, Peptides & Aminoacids (AREA)
- Gastroenterology & Hepatology (AREA)
- Epidemiology (AREA)
- Biochemistry (AREA)
- Molecular Biology (AREA)
- Genetics & Genomics (AREA)
- Orthopedic Medicine & Surgery (AREA)
- Physical Education & Sports Medicine (AREA)
- Biophysics (AREA)
- Dermatology (AREA)
- Toxicology (AREA)
- Psychology (AREA)
- Rheumatology (AREA)
- Ophthalmology & Optometry (AREA)
- Medicines That Contain Protein Lipid Enzymes And Other Medicines (AREA)
- Peptides Or Proteins (AREA)
- Medicines Containing Material From Animals Or Micro-Organisms (AREA)
- Cosmetics (AREA)
- Medicines Containing Antibodies Or Antigens For Use As Internal Diagnostic Agents (AREA)
- Micro-Organisms Or Cultivation Processes Thereof (AREA)
Abstract
Wynalazek dotyczy zastosowania wolnej od bia lek kompleksuj acych neurotoksyny botulinowej z Clostridium botulinum typu A, B, C, D, E, F lub G, albo mieszaniny dwu lub wi ecej spo sród tych neu- rotoksyn do wytwarzania preparatu farmaceutycznego do traktowania kosmetycznego lub do leczenia dystonii b ad z zaburze n uk ladu nerwowego u pacjentów b ed acych lud zmi lub zwierz etami, u których uformowa ly si e przeciwcia la przeciw kompleksom neurotoksyny botulinowej. PL PL PL PL PL PL PL
Description
Opis wynalazku
Niniejszy wynalazek dotyczy zastosowania neurotoksyny botulinowej z Clostridium botulinum typu A, B, C, D, E, F lub G, albo mieszaniny dwu lub więcej spośród tych neurotoksyn, przy czym neurotoksyna lub mieszanina neurotoksyn jest wolna od białek kompleksujących, które w sposób naturalny kompleksują neurotoksyny botulinowe, do wytwarzania preparatu farmaceutycznego przeznaczonego do traktowania kosmetycznego lub do leczenia dystonii bądź zaburzeń układu nerwowego u pacjentów bę dących ludźmi lub zwierzę tami, u których uformowały się przeciwciała przeciw kompleksom neurotoksyny botulinowej.
Twórcy niniejszego wynalazku stwierdzili, że wolna neurotoksyna (w przeciwieństwie do zawierającego ją kompleksu) nie wywołuje, albo wywołuje w znacznie mniejszym stopniu tworzenie przeciwciał neutralizujących w organizmie chorego.
Kompleks toksyny Clostridium botulinum typu A (Mr 900000) już od wielu lat stosowany jest w leczeniu rozmaitych dystonii. Jak dotychczas do stosowania dopuszczone są dwa róż ne, zawierają ce ten kompleks preparaty - BOTOX® i DYSPORT® - przeznaczone do leczenia kurczu powiek (blepharospasmus), skurczów mięśni połowy twarzy i kręczu karkowego (torticollis spasmodicus). Obecnie prowadzone są badania kliniczne nad leczeniem innych schorzeń układu nerwowego (takich jak, na przykład, spastyczności, migrena, postrzał, zespół dyskopatii szyjnej, nadmierne ślinienie się). Ponadto, preparaty takie są używane we wskazaniach kosmetycznych w przypadkach nadmiernej potliwości i występowania zmarszczek. Także pozostałe kompleksy toksyn Clostridium botulinum (typów B, C, D, E, F, G) nadają się do tego rodzaju leczenia. Tym niemniej, obecnie wciąż nie ma na rynku jakiegokolwiek dopuszczonego do stosowania produktu zawierającego toksyny typów B-G.
Kompleksy toksyn botulinowych złożone są z mieszaniny białek Clostridium. Są to aglutyniny krwinek czerwonych o zróżnicowanych masach cząsteczkowych, a mianowicie nietoksyczne, nieaglutynujące krwinek czerwonych białko o Mr około 120000 i neurotoksyna o Mr około 150000. Tworzą one trwały w warunkach kwasowych kompleks, odpowiedzialny za toksyczność ustną w przypadku zatrucia środkami spożywczymi. W przeciwieństwie do czystej neurotoksyny, kompleks bazuje na oddziaływaniu agresywnego środowiska przewodu żołądkowo-jelitowego i umożliwia jelitową absorpcję neurotoksyny, która poprzez krwiobieg lub układ limfatyczny dociera do komórek docelowych i wyzwala blokadę uwalniania transmiterów. Wówczas następuje porażenie mięśni poprzecznie prążkowanych i mięśni gł adkich oraz dochodzi do zaniku rozmaitych funkcji wegetatywnych. Zatruci chorzy umieraj ą w związku z niewydolnoś cią mięśni oddechowych. Ponieważ czysta neurotoksyna ulega rozkładowi w przewodzie żołądkowo-jelitowym, dzięki czemu nie jest wchłaniana w jelitach, nie jest ona toksyczna po przyjęciu pokarmu. Działania lecznicze neurotoksyny i kompleksu po podaniu dojelitowym nie różnią się, ponieważ kompleks rozpada się w tkance na części składowe i do komórek docelowych dostaje się tylko neurotoksyna.
Według dzisiejszego stanu techniki dla stosowania terapeutycznego kompleks wstrzykuje się bezpośrednio do mięśnia dystonicznego lub spastycznego. W takich przypadkach, neurotoksyna, przy fizjologicznym pH, zostaje uwolniona z kompleksu i wywołuje pożądane działanie farmakologiczne. Pomimo tego, że kompleks podawany jest tylko w niezwykle małych dawkach (1-25 ng, każdorazowo według wskazania oraz odpowiednio do wielkości traktowanego mięśnia), u znacznej liczby chorych przy wielokrotnie powtarzanych wstrzyknięciach dochodzi do tworzenia się specyficznych przeciwciał neutralizujących, skierowanych także przeciw neurotoksynie. Bezpośrednim następstwem jest to, że pozytywni chorzy odnośnie przeciwciał nie reagują już na kompleks. Wprawdzie mogliby być leczeni toksynami innych typów, jednakże żaden z nich nie jest dopuszczony do stosowania do leczenia. W przypadku, gdy chory wypróbował już dział anie toksyn wszystkich typów i jego organizm wytworzył przeciwciała przeciw wszystkim, dalsze podawanie kompleksu toksyny botulinowej (wszystko jedno, którego typu) nie jest już pomocne. Przy tym należy zwrócić uwagę na fakt, że każda dawka kompleksu przyczynia się do zwiększenia miana przeciwciał, aż do poziomu, przy którym dalsze podawanie kompleksu nie ma już najmniejszego sensu, ponieważ nie wywołuje jakiegokolwiek skutku. Często mijają całe lata zanim miano przeciwciał spadnie w sposób znaczący; więc chorzy przez długi czas nie mogą być poddawani leczeniu neurotoksyną botulinową.
Tworzeniu specyficznych przeciwciał sprzyjają dwa czynniki. Po pierwsze, neurotoksyna, która jest związana w kompleksie, pozostaje w tkance przez dłuższy czas i może aktywować wędrujące do tkanki komórki odpornościowe do tworzenia przeciwciał. Jednak, długi czas pobytu nie prowadzi do wzmożonego przyjmowania przez komórki docelowe, ponieważ zatrute komórki docelowe nie mają
PL 198 958 B1 możliwości przyjmowania większej ilości toksyny. Powoli dysocjująca z kompleksu neurotoksyna jest w niewielkim stopniu skuteczna immunologicznie. Po drugie, białka zawarte w kompleksie wzmacniają odpowiedź immunologiczną. Hemaglutyniny są lektynami, a więc białkami, które wyróżniają się wysokim powinowactwem do określonych cukrów. Lektyny działają immunostymulująco na zasadzie wiązania się ze strukturami cukrów. Tak więc, można wykazać, że lektyny konkanawalina A, fitohemaglutynina i mitogen szkarłatki aktywują T- i B-limfocyty. Hemaglutyniny kompleksów toksyny botulinowej, które również wiążą się z cukrami wchodzącymi w skład błon, mogą także, w podobny sposób, funkcjonować jako immunoadiuwanty i przyczyniać się do tworzenia przeciwciał, a przez to do niepowodzenia kuracji.
Twórcy niniejszego wynalazku podjęli zadanie opracowania alternatywnych preparatów farmaceutycznych użytecznych do leczenia wyżej wspomnianych schorzeń i zaburzeń stanu zdrowia. W szczególności, wynalazcy opracowali odpowiednią substancję aktywną , którą mogliby być leczeni ci chorzy, u których stwierdzono obecność przeciwciał neutralizujących.
Rozwiązaniem wspomnianych powyżej zadań oraz alternatywą dla obu handlowych preparatów z kompleksem toksyny botulinowej typu A, a mianowicie BOTOX®-u i DYSPORT®-u, jak również jako w stosunku do znanych z dotychczasowego stanu techniki kompleksów pozostał ych typów (B, C, D, E, F, G), jest opracowanie nowego preparatu farmaceutycznego, który zawiera tylko neurotoksynę (typu A, względnie typów B, C, D, E, F, G), a nie zawiera hemaglutynin i innych białek obcych dla ustroju. Dzięki swej małej masie cząsteczkowej taki lek dyfunduje szybciej do przyjmujących go komórek docelowych niż zostaną zaktywowane przyciągane przez hemaglutyniny komórki odpornościowe. W trakcie badań nad antygenami, twórcy wynalazku stwierdzili, że czysta neuorotoksyna wszystkich typów, w przeciwieństwie do handlowych preparatów typu A i kompleksów typów B - G, nie sprzyja, albo sprzyja w bardzo niewielkim stopniu, tworzeniu przeciwciał. W przypadku leczniczego stosowania tego nowo opracowanego preparatu farmaceutycznego (czystej neurotoksyny typów A, B, C, D, E, F, G) nawet przy wielokrotnie powtarzanym podawaniu nie dochodzi do niepowodzenia kuracji powodowanego oddziaływaniem przeciwciał. Następnie wykazano, że czyste neurotoksyny, dzięki swej natychmiastowej dyspozycyjności biologicznej nadają się do dalszego leczenia tych chorych, u których już doszło (z powodu stosowania kompleksu toksyny botulinowej, na przykład w wyniku leczenia preparatami BOTOX® lub DYSPORT®), do powstania miana przeciwciał przeciw odpowiedniemu typowi (są to tak zwani pacjenci wtórnie nieodpowiadający na leczenie, ang. secondary non-responders), a więc dalsze leczenie takich chorych preparatami BOTOX® lub DYSPORT® nie jest już celowe, ponieważ podawanie handlowo dostępnej toksyny nie skutkuje jakimkolwiek złagodzeniem dolegliwości.
Niniejszy wynalazek dotyczy zastosowania neurotoksyny botulinowej z Clostridium botulinum typu A, B, C, D, E, F lub G, albo mieszaniny dwu lub więcej spośród tych neurotoksyn, przy czym neurotoksyna lub mieszanina neurotoksyn jest wolna od białek kompleksujących, które w sposób naturalny kompleksują neurotoksyny botulinowe, do wytwarzania preparatu farmaceutycznego do traktowania kosmetycznego lub do leczenia dystonii bądź zaburzeń układu nerwowego u pacjentów będących ludźmi lub zwierzętami, u których uformowały się przeciwciała przeciw kompleksom neurotoksyny botulinowej.
Korzystnie pacjent, który ma być poddany leczeniu wykazuje obecność neutralizujących przeciwciał przeciw kompleksowi Clostridium botulinum typu A lub B, albo kompleksowi Clostridium botulinum typów A i B.
Korzystnie traktowanie kosmetyczne stosuje się przy nadmiernym poceniu się.
W innym korzystnym wykonaniu wynalazku traktowanie kosmetyczne jest przeznaczone do traktowania zmarszczek, korzystniej zmarszczek twarzy.
Korzystnie dystonię lub zaburzenie układu nerwowego stanowią torticollis spasmodicus lub niedowład mózgowy.
Preparat farmaceutyczny według wynalazku nadaje się do stosowania jako środek terapeutyczny w szczególności u chorych, którzy wykazują miano przeciwciał przeciw toksynie botulinowej, a szczególnie przeciw toksynie typu A. Preparat farmaceutyczny zawierający czystą neurotoksynę lub mieszaninę kilku czystych neurotoksyn nadaje się do stosowania zwłaszcza u chorych, którzy wykazują miano przeciwciał nie większe od 50, korzystnie nie większe od 30, jeszcze korzystniej nie większe od 20, szczególnie korzystnie nie większe od 10 a szczególnie korzystnie nie większe od 5 mU/ml. Przy tym, 1 mU przeciwciał stanowi taką ilość przeciwciał, która zobojętnia 10 U toksyny.
Ponadto, preparat farmaceutyczny zgodnie z wynalazkiem szczególnie korzystnie stosuje się u tych chorych, którzy albo nigdy, albo przez wiele lat nie byli leczeni neurotoksyn ą botulinową , ponieważ ich miano przeciwciał od samego początku jest niskie lub ma wartość zerową. Korzyść niniejszego wynalazku polega na tym, że chorych traktowanych zgodnie z wynalazkiem preparatem zawie4
PL 198 958 B1 rającym czystą toksynę miano przeciwciał albo nie ulega w ogóle, albo ulega zwiększeniu w bardzo nieznacznym stopniu. Innymi słowy, taki preparat farmaceutyczny według wynalazku można podawać chorym przez długi okres, zanim dojdzie do zaniku jego działania.
W przypadku terapii prowadzonej toksyną Clostridium botulinum, indukowaniu tworzenia przeciwciał przeszkadza fakt, że zamiast toksycznych kompleksów o dużej masie cząsteczkowej aplikuje się czystą neurotoksynę. Neurotoksyną całkowicie oddzielona od białek tworzących kompleks jest od razu dostępna biologicznie i może bezpośrednio wiązać się z zakończeniami nerwowymi płytek nerwowo-mięśniowych.
Preparat farmaceutyczny stosowany zgodnie z wynalazkiem obejmujący neurotoksynę, względnie mieszaninę neurotoksyn, nie doprowadza u chorych w ogóle, albo (w porównaniu z kompleksami) tylko w nieznacznym stopniu, do wywoływania tworzenia się przeciwciał neutralizujących.
Taki preparat farmaceutyczny może zawierać jako neurotoksynę, względnie mieszaninę neurotoksyn, neurotoksynę naturalną, względnie mieszaninę neurotoksyn naturalnych, bądź neurotoksynę rekombinowaną, względnie mieszaninę neurotoksyn rekombinowanych.
Zastosowanie jednej z neurotoksyn, samej albo w mieszaninie, do wytwarzania preparatu farmaceutycznego umożliwia jego stosowanie do leczenia wyżej wspomnianych schorzeń układu nerwowego u pacjentów, korzystnie u czł owieka, ale takż e i u zwierzą t, którzy je już wykazują obecność neutralizują cych przeciwciał przeciw kompleksowi neurotoksyny botulinowej, zwłaszcza przeciw kompleksowi z Clostridium botulinum typu A lub B, albo przeciw wielu innym kompleksom, w szczególności przeciw kompleksowi z Clostridium botulinum typu A i B (są to tak zwani secondary non-responders).
Neurotoksyny, ich mieszaniny, względnie preparaty farmaceutyczne według wynalazku, mogą występować jako roztwory wodne, zwłaszcza jako wodne roztwory do wstrzykiwań, jak również jako wyroby liofilizowane.
Znane jako takie neurotoksyny typów A - G wytwarza się zgodnie z protokołami, zawartymi w publikacjach wskazanych poniżej i włączonych jako odnośniki literaturowe. Przykładowe sposoby oczyszczania dwu neurotoksyn (typu A i B) opisano w następujących przykładach.
P r z y k ł a d 1
Wyodrębnianie czystej neurotoksyny
Czystą neurotoksynę z Clostridium botulinum typu A otrzymuje się sposobem opartym na postępowaniu podanym przez DasGuptę & Sathyamoorthy'ego. Hodowlę Clostridium botulinum tupu A prowadzi się w 20-litrowym fermentorze, na podłożu składającym się z 2% Proteose Peptone, 1% ekstraktu drożdżowego, 1% glukozy i 0,05% tioglikolanu sodu. Po upływie 72 godzin wzrostu toksynę wytrąca się poprzez dodanie 3N H2SO4 (końcowe pH = 3,5). Wytrąconą i odwirowaną biomasę poddaje się ekstrakcji 0,2 M buforem z fosforanem sodu.
Po oddzieleniu kwasów nukleinowych przez wytrącenie siarczanem protaminy, toksynę wytrąca się za pomocą dodania siarczanu amonu. Solubilizowany i oddializowany wobec 50 mM fosforanu sodu pH 6,0 wytrącony osad zostaje związany na kolumnie DEAE-Sephadex przy tym samym pH a następnie usunięty z kolumny przy użyciu 150 mM NaCl. Kolejno toksynę poddaje się chromatografii na kolumnie QAE-Sephadex, zrównoważonej buforem 50 mM Tris/HCl pH 7,9. Toksynę wymywa się z gradientem NaCl. W ostatnim etapie, toksynę poddaje się chromatografii na SP-Sephadex przy pH 7,0. Związaną toksynę usuwa się z kolumny z gradientem NaCl 0 - 300 mM. Oczyszczoną toksynę poddaje się analizie metodą elektroforezy w żelu poliakryloamidowym (SDS-PAGE). Wykazuje ona czystość rzędu 95 ± 5 %. Aktywność biologiczną oznacza się w mysim teście LD50; jednej jednostce LD50 odpowiada 4,8 pg białka.
P r z y k ł a d 2
Wytwarzanie gotowego leku zawierającego neurotoksynę botulinową
Sporządza się roztwór zawierający oczyszczoną neurotoksynę z przykładu 1, 200 mysich jednostek LD50, 10 mg sacharozy i 2 mg ludzkiej albuminy surowiczej/ml. Roztwór ten wprowadza się, po 0,5 ml, do fiolek i poddaje liofilizacji. Liofilizatom przywraca się pierwotną postać przy użyciu fizjologicznego roztworu soli kuchennej, po czym oznacza się ich aktywność biologiczną. Fiolki zawierają 100 ± 30 jednostek LD50.
P r z y k ł a d 3
Wyodrębnianie czystej neurotoksyny B
Hodowlę Clostridium botulinum typu B prowadzi się w takim samym podłożu i w tych samych warunkach jak w przypadku typu A. Dalszą obróbkę prowadzi się aż do etapu wytrącania siarczanem amonu. Następnie, przeprowadza się chromatografię na kolumnie DEAE-Sephadex przy pH 6,0.
Wymyte z kolumny przy użyciu 150 mM NaCl frakcje łączy się ze sobą i dializuje wobec fosforanu
PL 198 958 B1 sodu pH 7,0. Następnie, po chromatografii na kolumnie QAE-Sephadex zawierające toksynę frakcje poddaje się chromatografii na kolumnie DEAE-Sephadex przy pH 8,5 (50 mM Tris/HCl pH 8,5).
Toksynę botulinową typu B o wysokim stopniu czystości otrzymuje się ostatecznie po chromatografii na hydroksyapatycie zrównoważonym 10 mM fosforanem sodu pH 8,0. Związaną jednorodną toksynę eluuje się 80 mM fosforanem sodu pH 8,0, po czym, w teście LD50, oznacza się jej aktywność biologiczną (2 - 4 x 107 jednostek LD50/mg białka).
P r z y k ł a d 4
Wykrywanie przeciwciał
Przez okres 12 tygodni, w odstępach 14-dniowych (5 wstrzyknięć) dwudziestu królikom wstrzykuje się doskórnie 25 U BOTOX®. Surowicę pobiera się po upływie 3 tygodni, a następnie co 14 dni.
Przeciwciała przeciw neurotoksynie A z Clostridium botulinum wykrywa się w teście immunoenzymatycznym, w którym jednorodną neurotoksynę immobilizuje się na mikropłytkach. Przeciwciało wiążące się z neurotoksyną zlicza się przy użyciu innego, oznaczonego enzymatycznie przeciwciała.
Otrzymane wyniki przedstawiono w zamieszczonej poniżej Tabeli 1. Już po upływie 5 tygodni od pierwszego podania można stwierdzić u 5 królików obecność przeciwciał. Po upływie 11 tygodni, surowice 17 królików (a więc 85 % zwierząt wykorzystanych do testu) zawierały przeciwciała przeciw neurotoksynie. W biologicznym teście na aktywność wykazano, że 12 na 17 surowic zawierało przeciwciała neutralizujące (Tabela 2).
T a b e l a 1
Oznaczanie w próbkach surowicy (rozcieńczenie 1 : 100) pobranych od królików traktowanych preparatem BOTOX®, przy zastosowaniu testu immunoenzymatycznego. Podano wartości OD490nm > 0,1. Wszystkie wartości OD są skorygowane w odniesieniu do wartości OD surowic preimmunizowanych (OD około 0,150)
| Królik nr | 3 tydzień | 5 tydzień | 7 tydzień | 9 tydzień | 11 tydzień |
| 1 | - | - | - | 0,11 | 0,36 |
| 2 | - | - | - | 2,36 | 2,23 |
| 3 | - | - | 0,57 | 1,43 | 1,44 |
| 4 | - | - | 0,68 | 1,68 | 0,93 |
| 5 | - | 0,97 | 3,52 | 3,49 | 3,44 |
| 6 | - | - | 1,34 | 2,32 | 2,70 |
| 7 | - | - | 2,13 | 3,09 | 3,00 |
| 8* | - | 0,53 | 1,47 | 2,75 | 2,75 |
| 9 | - | - | 0,43 | 2,44 | 2,85 |
| 10 | - | - | 2,99 | 3,15 | 2,73 |
| 11 | - | 0,10 | 2,42 | 2,45 | 1,93 |
| 12 | - | - | - | 1,13 | 1,95 |
| 13 | - | - | - | - | 1,89 |
| 14 | - | - | - | - | - |
| 15 | - | - | - | - | - |
| 16 | - | - | - | - | - |
| 17 | - | 2,93 | 3,62 | 3,72 | 3,44 |
| 18 | - | - | 1,18 | 2,28 | 2,62 |
| 19 | - | - | 0,43 | 0,43 | 0,81 |
| 20 | - | 1, 65 | 3,20 | 2,97 | 2,88 |
* Wartości nieskorygowane z powodu braku surowicy preimmunizowanej. - Oznacza gęstość optyczną (OD490) < 0,1.
PL 198 958 B1
T a b e l a 2
Neutralizacja przez surowice królików potraktowanych preparatem BOTOX® (11 tydzień od pierwszego uodpornienia) w mysim teście hemidiafragmowym (granica wykrywalności: 0,35 mU/ml przeciwciała).
| Króliki | Neutralizacja (mU/ml) |
| 1 | 2,0 |
| 2 | n.o. |
| 3 | n o. |
| 4 | > 10 |
| 5 | > 100 |
| 6 | n.o. |
| 7 | > 10 |
| 8 | > 10 |
| 9 | n.o. |
| 10 | n.o. |
| 11 | n. o. |
| 12 | > 10 |
| 13 | n.o. |
| 14 | n.o. |
| 15 | < 0,35 |
| 16 | 0,4 |
| 17 | > 10 |
| 18 | > 10 |
| 19 | 2,0 |
| 20 | > 10 |
n.o. = nie oznaczono.
P r z y k ł a d 5
Test antygenowości z udziałem produktu handlowego i czystej neurotoksyny
Po wykazaniu, że kompleks złożony z neurotoksyny i hemaglutynin oraz nietoksycznego, nieaglutynującego krwinek czerwonych białka wzbudza powstawanie przeciwciał neutralizujących, poddano badaniu działanie immunogenne czystej neurotoksyny (typu A). W tym celu, 8 królikom podawano kompleks toksyny, a 12 królikom czystą toksynę. Zgodnie z powyżej opisanym sposobem postępowania (patrz przykład 1), zwierzętom podawano doskórnie po 25 U każdorazowego preparatu. Dla obu preparatów ilość neurotoksyny (zmierzona jako jej masa) była ta sama (200 pg/dawkę), co potwierdzono techniką ELISA. BOTOX® zawierał dodatkowo białko kompleksujące (około 800 pg/dawkę).
Na osiem zwierząt potraktowanych preparatem BOTOX®, cztery wykazały w teście wykonanym techniką ELISA miano przeciwciała, podczas gdy w przypadku 12 zwierząt otrzymujących czystą neurotoksynę nie można było wykryć żadnych przeciwciał przeciw czystej neurotoksynie. Wynik taki potwierdzono w teście aktywności biologicznej. Wszystkie cztery surowice królicze wykazywały miano przeciwciał neutralizujących, przeszkadzających w działaniu toksyny (Tabela 3).
PL 198 958 B1
T a b e l a 3
Neutralizacja przez surowice (rozcieńczenie 1 : 3) królików potraktowanych preparatem BOTOX® (11 tydzień od pierwszego uodpornienia w mysim teście hemidiafragmowym (granica wykrywalności: 1 mU/ml przeciwciała)
| Królik | Neutralizacja (mU/ml) |
| 1 | 12 mU |
| 2 | > 30 mU |
| 3 | 4,5 mU |
| 8 | > 30 mU |
P r z y k ł a d 6 (p o r ó w n a w c z y)
W tym badaniu dokonano porównania wytwarzania przeciwciał pod wpł ywem preparatów BOTOX® i DYSPORT®. W tym celu każdorazowo potraktowano zgodnie z opisanym schematem 10 królików preparatem BOTOX® (grupa 1) i preparatem DYSPORT® (grupa 2) lub czystą neurotoksyną (grupa 3).
Podczas gdy w grupie 1 i grupie 2 ponad 50% poddanych badaniu zwierząt wytworzyło miano przeciwciał neutralizujących, w surowicach zwierząt z grupy 3 nie stwierdzono obecności przeciwciał.
P r z y k ł a d 7 (t e s t k l i n i c z n y)
Pacjent w wieku 45 lat leczony od 5 lat preparatem BOTOX® przeciw kręczowi karkowemu (torticollis spasmoticus) wykazywał miano przeciwciał wynoszące 3 mU/ml surowicy. Ani BOTOX®, ani DYSPORT® nie okazały się skuteczne w leczeniu jego przypadku. Eksperyment terapeutyczny polegający na podaniu czystej neurotoksyny botulinowej w dawce wynoszącej 145 U (równoważnej ostatnio wstrzykiwanej dawce BOTOX®) doprowadził w ciągu 72 godzin do rozluźnienia mięśnia, do normalizacji sposobu trzymania głowy i do zaniku bólu mięśniowego. Nie wystąpiły również jakiekolwiek działania niepożądane.
P r z y k ł a d 8 (t e s t k l i n i c z n y)
Pacjent w wieku 52 lat leczony był przez 3 lata preparatem BOTOX® na niedowład mózgowy. Doszło u niego do zaistnienia miana przeciwciał wynoszącego 1 mU/ml surowicy, w wyniku czego zaprzestano dalszego leczenia. Wstrzyknięcie 200 U czystej neurotoksyny umożliwiło skuteczną terapię.
Literatura
- B.R. DasGupta & V. Sathyamoorthy: Purification and Amino Acid Composition of Type A Botulinum Neurotoxin; Toxicon, 22(3), str. 415 - 424 (1984).
- K.S. De Jongh, C.L. Schwartzkoff & M.E.H. Howden: Clostridium botulinum Type D Neurotoxin Purification and Detection; Toxicon, 27(2), str. 221 - 228 (1989).
- J.J. Schmidt & L.S. Siegel: Purification of Type E Botulinum Neurotoxin by High Performance Ion
Exchange Chromatography; Analyt. Biochemistry, 156, str. 213 - 219 (1986).
- M. Nukina, Y. Mochida, S. Sakaguchi & G. Sakaguchi: Purification of Clostridium botulinum Type G Progenitor Toxin; Zbl. Bakt. Hyg., 268, str. 220 - 227 (1988).
- J. Terajima, B. Syuto, J.O. Ochanda & S. Kubo: Purification and Characterization of Neurotoxin Produced by Clostridium botulinum Type C 6813; Infection and Immunity, 48(2), str. 312 - 317 (1985).
- J.D.F. Wadsworth, M. Desai, H.S. Tranter i in.: Botulinum type F neurotoxin: Large-scale purification and Characterization of its Binding to Rat Cerebrocortical Synaptosomes11; Biochem. J., 268, str. 123 - 128 (1990).
Claims (6)
1. Zastosowanie neurotoksyny botulinowej z Clostridium botulinum typu A, B, C, D, E, F lub G, albo mieszaniny dwu lub więcej spośród tych neurotoksyn, znamienne tym, że neurotoksyna lub mieszanina neurotoksyn jest wolna od białek kompleksujących, które w sposób naturalny kompleksują neurotoksyny botulinowe, do wytwarzania preparatu farmaceutycznego do traktowania kosmetycznego lub do leczenia dystonii bądź zaburzeń układu nerwowego u pacjentów będących ludźmi lub zwierzętami, u których uformowały się przeciwciała przeciw kompleksom neurotoksyny botulinowej.
PL 198 958 B1
2. Zastosowanie według zastrz. 1, znamienne tym, że pacjent, który ma być poddany leczeniu wykazuje obecność neutralizujących przeciwciał przeciw kompleksowi Clostridium botulinum typu A lub B, albo kompleksowi Clostridium botulinum typów A i B.
3. Zastosowanie według zastrz. 1 albo 2, znamienne tym, że traktowanie kosmetyczne stosuje się przy nadmiernym poceniu się.
4. Zastosowanie według zastrz. 1 albo 2, znamienne tym, że traktowanie kosmetyczne stosuje się do traktowania zmarszczek.
5. Zastosowanie według zastrz. 3, znamienne tym, że traktowanie kosmetyczne stosuje się do traktowania zmarszczek twarzy.
6. Zastosowanie według zastrz. 1 albo 2, znamienne tym, że dystonię lub zaburzenie układu nerwowego stanowią torticollis spasmodicus lub niedowład mózgowy.
Applications Claiming Priority (2)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| DE19925739A DE19925739A1 (de) | 1999-06-07 | 1999-06-07 | Therapeutikum mit einem Botulinum-Neurotoxin |
| PCT/DE2000/001777 WO2000074703A2 (de) | 1999-06-07 | 2000-05-26 | Therapeutikum mit einem botulinum-neurotoxin |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| PL352468A1 PL352468A1 (en) | 2003-08-25 |
| PL198958B1 true PL198958B1 (pl) | 2008-08-29 |
Family
ID=7910318
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| PL352468A PL198958B1 (pl) | 1999-06-07 | 2000-05-26 | Zastosowanie neurotoksyny botulinowej z Clostridium botulinum |
Country Status (27)
| Country | Link |
|---|---|
| US (3) | US7964199B1 (pl) |
| EP (1) | EP1185291B2 (pl) |
| JP (2) | JP2003505343A (pl) |
| KR (1) | KR100466407B1 (pl) |
| CN (2) | CN101062009A (pl) |
| AR (1) | AR024306A1 (pl) |
| AT (1) | ATE258803T1 (pl) |
| AU (1) | AU774590B2 (pl) |
| CA (1) | CA2376193C (pl) |
| CO (1) | CO5170431A1 (pl) |
| CZ (1) | CZ20014351A3 (pl) |
| DE (3) | DE19925739A1 (pl) |
| DK (1) | DK1185291T3 (pl) |
| EA (1) | EA004202B1 (pl) |
| ES (1) | ES2215056T5 (pl) |
| GE (1) | GEP20043200B (pl) |
| HK (1) | HK1047403A1 (pl) |
| HU (1) | HUP0201530A3 (pl) |
| IL (2) | IL146974A0 (pl) |
| MX (1) | MXPA01012540A (pl) |
| NO (1) | NO20015964L (pl) |
| PL (1) | PL198958B1 (pl) |
| PT (1) | PT1185291E (pl) |
| TW (1) | TWI251492B (pl) |
| UA (1) | UA72253C2 (pl) |
| WO (1) | WO2000074703A2 (pl) |
| ZA (1) | ZA200110074B (pl) |
Families Citing this family (70)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| DE19925739A1 (de) | 1999-06-07 | 2000-12-21 | Biotecon Ges Fuer Biotechnologische Entwicklung & Consulting Mbh | Therapeutikum mit einem Botulinum-Neurotoxin |
| US20080038274A1 (en) | 1999-09-23 | 2008-02-14 | Foster Keith A | Inhibition of secretion from non-neuronal cells |
| US7838008B2 (en) | 1999-12-07 | 2010-11-23 | Allergan, Inc. | Methods for treating diverse cancers |
| US7838007B2 (en) | 1999-12-07 | 2010-11-23 | Allergan, Inc. | Methods for treating mammary gland disorders |
| US6821520B2 (en) | 2000-02-15 | 2004-11-23 | Allergan, Inc. | Clostridial toxin therapy for Hashimoto's thyroiditis |
| JP2003009897A (ja) | 2001-07-03 | 2003-01-14 | Keiji Oguma | ボツリヌス毒素の分離・精製法 |
| US6688311B2 (en) | 2002-03-14 | 2004-02-10 | Allergan, Inc. | Method for determining effect of a clostridial toxin upon a muscle |
| US7140371B2 (en) | 2002-03-14 | 2006-11-28 | Allergan, Inc. | Surface topography method for determining effects of a botulinum toxin upon a muscle and for comparing botulinum toxins |
| US20050163809A1 (en) * | 2002-03-29 | 2005-07-28 | Ryuji Kaji | Remedy for hypermyotonia |
| US7691394B2 (en) * | 2002-05-28 | 2010-04-06 | Botulinum Toxin Research Associates, Inc. | High-potency botulinum toxin formulations |
| EP2272340B1 (en) * | 2002-08-19 | 2018-03-14 | Ira Sanders | Botulinum toxin |
| US20120114697A1 (en) | 2002-08-19 | 2012-05-10 | Ira Sanders | Treatment of holocrine gland dysfunction with clostridia neurotoxins |
| US7824693B2 (en) | 2002-08-19 | 2010-11-02 | Ira Sanders | Treatment of fine wrinkles with clostridia neurotoxins |
| US8071550B2 (en) | 2003-03-03 | 2011-12-06 | Allergan, Inc. | Methods for treating uterine disorders |
| JP2007528352A (ja) * | 2003-03-06 | 2007-10-11 | ボツリヌム・トクシン・リサーチ・アソシエイツ・インコーポレイテッド | 洞炎に関連する慢性の顔面痛および頭痛のボツリヌス毒素での治療 |
| US6838434B2 (en) * | 2003-05-02 | 2005-01-04 | Allergan, Inc. | Methods for treating sinus headache |
| EP1640017A1 (en) * | 2003-06-20 | 2006-03-29 | Santen Pharmaceutical Co., Ltd. | Remedies for diseases with hypermyotonia |
| US6974579B2 (en) * | 2004-01-08 | 2005-12-13 | Allergan, Inc. | Methods for treating vascular disorders |
| WO2005120546A2 (en) | 2004-03-03 | 2005-12-22 | Essentia Biosystems, Inc. | Compositions and methods for topical diagnostic and therapeutic transport |
| US9211248B2 (en) | 2004-03-03 | 2015-12-15 | Revance Therapeutics, Inc. | Compositions and methods for topical application and transdermal delivery of botulinum toxins |
| LT2985039T (lt) | 2004-03-03 | 2018-11-12 | Revance Therapeutics, Inc. | Botulino toksinų vietinis taikymas ir jų įvedimas per odą |
| GB2416122A (en) * | 2004-07-12 | 2006-01-18 | Ipsen Ltd | Botulinum neurotoxin composition |
| US7879341B2 (en) * | 2004-07-26 | 2011-02-01 | Merz Pharma Gmbh & Co. Kgaa | Therapeutic composition with a botulinum neurotoxin |
| US7429386B2 (en) | 2004-09-03 | 2008-09-30 | Allergan, Inc. | Stretch mark treatment |
| US7179474B2 (en) | 2004-09-03 | 2007-02-20 | Allergan, Inc. | Methods for treating a buttock deformity |
| US20060067950A1 (en) * | 2004-09-27 | 2006-03-30 | Merz Pharma Gmbh & Co. Kgaa | Clostridial neurotoxins for use in wound healing |
| ES2420430T3 (es) * | 2005-03-03 | 2013-08-23 | Allergan, Inc. | Sistema libre de productos de origen animal y procedimiento de purificación de una toxina botulínica |
| JP2008531732A (ja) | 2005-03-03 | 2008-08-14 | ルバンス セラピュティックス インク． | ボツリヌス毒素の局所塗布及び経皮送達のための組成物及び方法 |
| US7419675B2 (en) | 2005-05-26 | 2008-09-02 | Allergan, Inc. | Method for treating peritoneal adhesions |
| ES2326916T3 (es) * | 2005-06-17 | 2009-10-21 | MERZ PHARMA GMBH & CO. KGAA | Aparato y metodo para la produccion de compuestos biologicamente activos por fermentacion. |
| WO2007059528A2 (en) | 2005-11-17 | 2007-05-24 | Revance Therapeutics, Inc. | Compositions and methods of topical application and transdermal delivery of botulinum toxins with reduced non-toxin proteins |
| EP1834962A1 (de) | 2006-03-15 | 2007-09-19 | Biotecon Therapeutics GmbH | PEGyliertes mutiertes Clostridium botulinum Toxin |
| AR061669A1 (es) * | 2006-06-29 | 2008-09-10 | Merz Pharma Gmbh & Co Kgaa | Aplicacion de alta frecuencia de terapia con toxina botulinica |
| US10792344B2 (en) | 2006-06-29 | 2020-10-06 | Merz Pharma Gmbh & Co. Kgaa | High frequency application of botulinum toxin therapy |
| KR20100020972A (ko) * | 2007-06-01 | 2010-02-23 | 메르츠 파마 게엠베하 운트 코. 카가아 | 보툴리늄 톡신의 신경독 성분에 기초한 온도-안정한 근육 이완제를 제공하는 방법 |
| EP2048156A1 (en) * | 2007-10-12 | 2009-04-15 | Merz Pharma GmbH & Co.KGaA | Process for providing a temperature-stable muscle relaxant on the basis of the neurotoxic component of botulinum toxin |
| DE102007038015A1 (de) * | 2007-08-10 | 2009-02-19 | Hefter, Harald, Prof. Dr. med. Dr. rer. nat. | Verwendung eines Neurotoxins |
| US9161970B2 (en) * | 2007-12-12 | 2015-10-20 | Allergan, Inc. | Dermal filler |
| EP2072057A1 (en) | 2007-12-21 | 2009-06-24 | Merz Pharma GmbH & Co.KGaA | Early administration of Botulinum toxin in the treatment of cerebrovascular event and spinal cord injury |
| EP2072039A1 (en) * | 2007-12-21 | 2009-06-24 | Merz Pharma GmbH & Co.KGaA | Use of a neurotoxic component of Clostridium botulinum toxin complex to reduce or prevent side effects |
| CN101965403B (zh) * | 2008-01-29 | 2013-07-03 | 株式会社抗体研究所 | A型肉毒杆菌毒素中和组合物及人抗a型肉毒杆菌毒素抗体 |
| US9107815B2 (en) * | 2008-02-22 | 2015-08-18 | Allergan, Inc. | Sustained release poloxamer containing pharmaceutical compositions |
| NZ588029A (en) * | 2008-03-14 | 2012-12-21 | Allergan Inc | Immuno-based botulinum toxin serotype a activity assays |
| EP2283849B1 (en) * | 2008-03-31 | 2016-05-04 | The Chemo-Sero-Therapeutic Research Institute | A2 botulinum neurotoxin for use in the treatment of muscle overactivity in the presence of type a1 neutralising antibodies |
| EP2337790B1 (en) | 2008-08-29 | 2016-07-13 | Merz Pharma GmbH & Co. KGaA | Clostridial neurotoxins with altered persistency |
| DK2161033T3 (da) | 2008-09-09 | 2013-08-05 | Susanne Dr Grafe | Botulinustoxin til at indføre midlertidig infertilitet i et hvirveldyr (f.eks. et menneske) |
| CN101386648B (zh) * | 2008-09-25 | 2012-05-30 | 中国人民解放军军事医学科学院微生物流行病研究所 | 抗b型肉毒神经毒素中和性单克隆抗体、其制备方法及用途 |
| WO2010096134A1 (en) | 2008-12-04 | 2010-08-26 | Botulinum Toxin Research Associates, Inc. | Extended length botulinum toxin formulation for human or mammalian use |
| EP2248518B1 (en) | 2009-04-17 | 2013-01-16 | Merz Pharma GmbH & Co. KGaA | Formulation for stabilizing proteins, peptides or mixtures thereof. |
| US8129139B2 (en) | 2009-07-13 | 2012-03-06 | Allergan, Inc. | Process for obtaining botulinum neurotoxin |
| JP2011074025A (ja) * | 2009-09-30 | 2011-04-14 | Chemo-Sero-Therapeutic Research Inst | ボツリヌス毒素の精製方法 |
| PT2490986T (pt) | 2009-10-21 | 2018-11-13 | Revance Therapeutics Inc | Métodos e sistemas para purificar neurotoxina botulínica não complexada |
| KR101134146B1 (ko) * | 2010-05-31 | 2012-04-19 | 메덱스젠 주식회사 | 국소 근마비 효과를 갖는 비확산형 보툴리눔 독소와 그의 정제방법 |
| AU2011316111B2 (en) | 2010-10-12 | 2015-05-28 | Merz Pharma Gmbh & Co. Kgaa | Formulation suitable for stabilizing proteins, which is free of mammalian excipients |
| AU2012276512B2 (en) * | 2011-06-27 | 2016-04-21 | Sang Duck Kim | Pharmaceutical composition for treating scars on the skin, and method for treating scars on the skin using same |
| US9393291B2 (en) | 2012-04-12 | 2016-07-19 | Botulinum Toxin Research Associates, Inc. | Use of botulinum toxin for the treatment of cerebrovascular disease, renovascular and retinovascular circulatory beds |
| JP6517800B2 (ja) * | 2013-07-30 | 2019-05-22 | メルツ ファーマ ゲゼルシャフト ミット ベシュレンクテル ハフツング ウント コンパニー コマンディト ゲゼルシャフト アウフ アクティーン | ボツリヌス毒素の高純度神経毒成分の製造方法とその使用 |
| US11484580B2 (en) | 2014-07-18 | 2022-11-01 | Revance Therapeutics, Inc. | Topical ocular preparation of botulinum toxin for use in ocular surface disease |
| US9901627B2 (en) | 2014-07-18 | 2018-02-27 | Revance Therapeutics, Inc. | Topical ocular preparation of botulinum toxin for use in ocular surface disease |
| EP3285800B1 (en) * | 2015-04-24 | 2019-09-18 | Consiglio Nazionale Delle Ricerche | A new therapeutic use of the botulinum neurotoxin serotype a |
| KR101775682B1 (ko) * | 2015-11-30 | 2017-09-06 | 주식회사 대웅 | 보툴리눔 독소의 제조방법 |
| ES2755815T3 (es) | 2016-09-13 | 2020-04-23 | Allergan Inc | Composiciones de toxina de Clostridium no proteicas estabilizadas |
| KR102463881B1 (ko) | 2016-10-04 | 2022-11-07 | (주)메디톡스 | 보툴리눔 독소 함유 용액으로부터 보툴리눔 독소를 분리하는 방법 |
| EP3600221A4 (en) * | 2017-03-22 | 2021-01-13 | Bonti, Inc. | BOTULINUM NEUROTOXINS FOR USE IN THERAPY |
| WO2018172264A1 (en) | 2017-03-24 | 2018-09-27 | Merz Pharma Gmbh & Co. Kgaa | Improved use of botulinum neurotoxin in the treatment of sialorrhea |
| US11191819B2 (en) | 2018-08-28 | 2021-12-07 | Ira Sanders | Skin therapeutics |
| EP3860640A1 (en) | 2018-10-02 | 2021-08-11 | Merz Pharma GmbH & Co. KGaA | Novel uses of botulinum neurotoxin for treating lipoedema |
| JP2022521237A (ja) | 2019-02-21 | 2022-04-06 | メルツ ファーマ ゲゼルシャフト ミット ベシュレンクテル ハフツング ウント コンパニー コマンディト ゲゼルシャフト アウフ アクティーン | 振戦治療のためのボツリヌス神経毒素の新規用途 |
| BR112022023413A2 (pt) | 2020-06-05 | 2022-12-20 | Merz Pharma Gmbh & Co Kgaa | Tratamento de rugas faciais com toxina botulínica de alta dose e baixo volume |
| TW202400122A (zh) | 2022-02-28 | 2024-01-01 | 德商梅茲製藥有限兩合公司 | 肉毒桿菌毒素用於降低皮膚毛孔尺寸及／或皮脂產生之用途、以及降低皮膚毛孔尺寸及／或皮脂產生的方法 |
Family Cites Families (18)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| EP0699078B1 (en) | 1993-05-14 | 2005-01-05 | Stephen S. Arnon | A method to prevent side effects and insensitivity to the therapeutic uses of toxins |
| CA2164626C (en) * | 1993-06-10 | 2004-11-23 | K. Roger Aoki | Multiple botulinum toxins for treating neuromuscular disorders and conditions |
| EP0737074B1 (en) | 1993-12-28 | 2001-08-01 | Allergan Sales, Inc. | Botulinum toxins for treating hyperhydrosis |
| US5766605A (en) * | 1994-04-15 | 1998-06-16 | Mount Sinai School Of Medicine Of The City University Of New York | Treatment of autonomic nerve dysfunction with botulinum toxin |
| DK0758900T3 (da) | 1994-05-09 | 2002-07-29 | William J Binder | Botulinumtoksin til reduktion af migræne-hovedpinesmerter |
| AU2907695A (en) | 1994-08-08 | 1996-03-07 | Wisconsin Alumni Research Foundation | Purification and pharmaceutical compositions containing type g botulinum neurotoxin |
| US5512547A (en) * | 1994-10-13 | 1996-04-30 | Wisconsin Alumni Research Foundation | Pharmaceutical composition of botulinum neurotoxin and method of preparation |
| US5756468A (en) | 1994-10-13 | 1998-05-26 | Wisconsin Alumni Research Foundation | Pharmaceutical compositions of botulinum toxin or botulinum neurotoxin and methods of preparation |
| DK0773788T3 (da) * | 1995-06-06 | 2003-09-01 | Allergan Inc | Forbedrede præparater og fremgangsmåder til kemodenervering under anvendelse af neurotoxiner |
| US5939070A (en) * | 1996-10-28 | 1999-08-17 | Wisconsin Alumni Research Foundation | Hybrid botulinal neurotoxins |
| PT1011695E (pt) * | 1997-07-15 | 2006-07-31 | Univ Colorado | Utilizacao de terapia com neurotoxina para tratamento de doencas da prostata |
| TW574036B (en) * | 1998-09-11 | 2004-02-01 | Elan Pharm Inc | Stable liquid compositions of botulinum toxin |
| DE19856897A1 (de) * | 1998-12-10 | 2000-06-15 | Biotecon Ges Fuer Biotechnologische Entwicklung & Consulting Mbh | Therapeutikum zur Unterdrückung von Schnarchgeräuschen |
| DE19925739A1 (de) | 1999-06-07 | 2000-12-21 | Biotecon Ges Fuer Biotechnologische Entwicklung & Consulting Mbh | Therapeutikum mit einem Botulinum-Neurotoxin |
| US6358917B1 (en) * | 1999-08-24 | 2002-03-19 | Jean D. A. Carruthers | Cosmetic use of botulinum toxin for treatment of downturned mouth |
| US6787517B1 (en) * | 2000-12-29 | 2004-09-07 | Allergan, Inc. | Agent and methods for treating pain |
| DE10333317A1 (de) * | 2003-07-22 | 2005-02-17 | Biotecon Therapeutics Gmbh | Formulierung für Proteinarzneimittel ohne Zusatz von humanem Serumalbumin (HSA) |
| AU2010267963B2 (en) * | 2009-07-02 | 2015-09-24 | Merz Pharma Gmbh & Co. Kgaa | Neurotoxins exhibiting shortened biological activity |
-
1999
- 1999-06-07 DE DE19925739A patent/DE19925739A1/de not_active Withdrawn
-
2000
- 2000-05-26 DE DE10081516T patent/DE10081516D2/de not_active Ceased
- 2000-05-26 EA EA200200017A patent/EA004202B1/ru not_active IP Right Cessation
- 2000-05-26 KR KR10-2001-7015668A patent/KR100466407B1/ko not_active IP Right Cessation
- 2000-05-26 US US10/018,373 patent/US7964199B1/en not_active Expired - Lifetime
- 2000-05-26 WO PCT/DE2000/001777 patent/WO2000074703A2/de active IP Right Grant
- 2000-05-26 JP JP2001501237A patent/JP2003505343A/ja active Pending
- 2000-05-26 GE GEAP20006278A patent/GEP20043200B/en unknown
- 2000-05-26 AU AU58047/00A patent/AU774590B2/en not_active Ceased
- 2000-05-26 ES ES00943666T patent/ES2215056T5/es not_active Expired - Lifetime
- 2000-05-26 HU HU0201530A patent/HUP0201530A3/hu unknown
- 2000-05-26 EP EP00943666A patent/EP1185291B2/de not_active Expired - Lifetime
- 2000-05-26 UA UA2002010181A patent/UA72253C2/uk unknown
- 2000-05-26 CN CNA2007101102394A patent/CN101062009A/zh active Pending
- 2000-05-26 MX MXPA01012540A patent/MXPA01012540A/es active IP Right Grant
- 2000-05-26 CA CA002376193A patent/CA2376193C/en not_active Expired - Fee Related
- 2000-05-26 PL PL352468A patent/PL198958B1/pl not_active IP Right Cessation
- 2000-05-26 DK DK00943666T patent/DK1185291T3/da active
- 2000-05-26 AT AT00943666T patent/ATE258803T1/de active
- 2000-05-26 PT PT00943666T patent/PT1185291E/pt unknown
- 2000-05-26 CN CNB008086419A patent/CN100389820C/zh not_active Expired - Fee Related
- 2000-05-26 DE DE50005208T patent/DE50005208D1/de not_active Expired - Lifetime
- 2000-05-26 CZ CZ20014351A patent/CZ20014351A3/cs unknown
- 2000-05-26 IL IL14697400A patent/IL146974A0/xx active IP Right Grant
- 2000-06-07 AR ARP000102818A patent/AR024306A1/es unknown
- 2000-06-07 CO CO00042309A patent/CO5170431A1/es not_active Application Discontinuation
- 2000-08-24 TW TW089111212A patent/TWI251492B/zh not_active IP Right Cessation
-
2001
- 2001-12-06 ZA ZA200110074A patent/ZA200110074B/xx unknown
- 2001-12-06 NO NO20015964A patent/NO20015964L/no unknown
- 2001-12-06 IL IL146974A patent/IL146974A/en not_active IP Right Cessation
-
2002
- 2002-12-06 HK HK02108892.0A patent/HK1047403A1/xx not_active IP Right Cessation
-
2007
- 2007-05-16 JP JP2007130686A patent/JP2007238627A/ja not_active Withdrawn
-
2011
- 2011-05-11 US US13/068,439 patent/US20110217287A1/en not_active Abandoned
- 2011-11-23 US US13/303,973 patent/US8398998B2/en not_active Expired - Lifetime
Also Published As
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| PL198958B1 (pl) | Zastosowanie neurotoksyny botulinowej z Clostridium botulinum | |
| EP0889730B1 (en) | Pharmaceutical compositions of botulinum toxin or botulinum neurotoxin and methods of preparation | |
| WO1996005222A1 (en) | Purification and pharmaceutical compositions containing type g botulinum neurotoxin | |
| EP0654040A1 (en) | Pharmaceutical composition containing botulinum b complex | |
| US5871731A (en) | Oral administration of immunoglobulin preparations for treatment of chronic pain syndrome | |
| KR20220003061A (ko) | 보툴리눔 톡신 a형 복합체, 이의 제형 및 이의 사용 방법 | |
| WO2008050866A1 (en) | Preparation containing highly purified botulinum toxin type a derived from infant botulism pathogen | |
| JPH0723398B2 (ja) | 初乳由来ポリペプチド因子 | |
| KR101853463B1 (ko) | 보툴리눔 독소의 정제 방법 | |
| US20050163809A1 (en) | Remedy for hypermyotonia | |
| CN1108818C (zh) | 活化免疫球蛋白 | |
| DE20023785U1 (de) | Therapeutikum mit einem Botulinum-Neurotoxin | |
| Bøvre | Unusual antineisserial activity expressed by a systemic isolate of Neisseria meningitidis. Antimeningococcal effect and properties | |
| US6927235B2 (en) | Vaccine composition comprising iron phosphate as vaccine adjuvant |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| LAPS | Decisions on the lapse of the protection rights |
Effective date: 20120526 |