CZ20014351A3 - Léčivo s botulinovým neurotoxinem - Google Patents

Léčivo s botulinovým neurotoxinem Download PDF

Info

Publication number
CZ20014351A3
CZ20014351A3 CZ20014351A CZ20014351A CZ20014351A3 CZ 20014351 A3 CZ20014351 A3 CZ 20014351A3 CZ 20014351 A CZ20014351 A CZ 20014351A CZ 20014351 A CZ20014351 A CZ 20014351A CZ 20014351 A3 CZ20014351 A3 CZ 20014351A3
Authority
CZ
Czechia
Prior art keywords
neurotoxin
neurotoxins
mixture
botulinum
medicament
Prior art date
Application number
CZ20014351A
Other languages
English (en)
Inventor
Hans Bigalke
Jürgen FREVERT
Original Assignee
Merz + Co. Gmbh & Co.
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Family has litigation
First worldwide family litigation filed litigation Critical https://patents.darts-ip.com/?family=7910318&utm_source=google_patent&utm_medium=platform_link&utm_campaign=public_patent_search&patent=CZ20014351(A3) "Global patent litigation dataset” by Darts-ip is licensed under a Creative Commons Attribution 4.0 International License.
Application filed by Merz + Co. Gmbh & Co. filed Critical Merz + Co. Gmbh & Co.
Publication of CZ20014351A3 publication Critical patent/CZ20014351A3/cs

Links

Classifications

    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K16/00—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies
    • C07K16/12—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from bacteria
    • C07K16/1267—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from bacteria from Gram-positive bacteria
    • C07K16/1282—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from bacteria from Gram-positive bacteria from Clostridium (G)
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K38/00—Medicinal preparations containing peptides
    • A61K38/16—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K38/00—Medicinal preparations containing peptides
    • A61K38/16—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof
    • A61K38/43—Enzymes; Proenzymes; Derivatives thereof
    • A61K38/46—Hydrolases (3)
    • A61K38/48—Hydrolases (3) acting on peptide bonds (3.4)
    • A61K38/4886—Metalloendopeptidases (3.4.24), e.g. collagenase
    • A61K38/4893—Botulinum neurotoxin (3.4.24.69)
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P17/00—Drugs for dermatological disorders
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P17/00—Drugs for dermatological disorders
    • A61P17/16—Emollients or protectives, e.g. against radiation
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P21/00—Drugs for disorders of the muscular or neuromuscular system
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P21/00—Drugs for disorders of the muscular or neuromuscular system
    • A61P21/02—Muscle relaxants, e.g. for tetanus or cramps
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P25/00—Drugs for disorders of the nervous system
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P25/00—Drugs for disorders of the nervous system
    • A61P25/02—Drugs for disorders of the nervous system for peripheral neuropathies
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P25/00—Drugs for disorders of the nervous system
    • A61P25/04—Centrally acting analgesics, e.g. opioids
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P25/00—Drugs for disorders of the nervous system
    • A61P25/06—Antimigraine agents
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P25/00—Drugs for disorders of the nervous system
    • A61P25/08—Antiepileptics; Anticonvulsants
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P25/00—Drugs for disorders of the nervous system
    • A61P25/14—Drugs for disorders of the nervous system for treating abnormal movements, e.g. chorea, dyskinesia
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P27/00—Drugs for disorders of the senses
    • A61P27/02—Ophthalmic agents
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P29/00—Non-central analgesic, antipyretic or antiinflammatory agents, e.g. antirheumatic agents; Non-steroidal antiinflammatory drugs [NSAID]
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P43/00—Drugs for specific purposes, not provided for in groups A61P1/00-A61P41/00
    • Y—GENERAL TAGGING OF NEW TECHNOLOGICAL DEVELOPMENTS; GENERAL TAGGING OF CROSS-SECTIONAL TECHNOLOGIES SPANNING OVER SEVERAL SECTIONS OF THE IPC; TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
    • Y02—TECHNOLOGIES OR APPLICATIONS FOR MITIGATION OR ADAPTATION AGAINST CLIMATE CHANGE
    • Y02A—TECHNOLOGIES FOR ADAPTATION TO CLIMATE CHANGE
    • Y02A50/00—TECHNOLOGIES FOR ADAPTATION TO CLIMATE CHANGE in human health protection, e.g. against extreme weather
    • Y02A50/30—Against vector-borne diseases, e.g. mosquito-borne, fly-borne, tick-borne or waterborne diseases whose impact is exacerbated by climate change

Description

Předložený vynález se týká léčiva, které obsahuje botulinový neurotoxin z Clostridium botulinum, přičemž neurotoxin je bez komplexujících proteinů, které jsou přirozeně v komplexu. Přímým následkem toho je za základ předloženého vynálezu položený poznatek, že volný neurotoxin v protikladu ke komplexu u pacienta nevede k žádné nebo vede ke zřetelně snížené indukci neutralizující protilátky. Předložený vynález se týká dále použití botulinových neurotoxinů z Clostridium botulinum pro přípravu léčiva pro léčení nemocí nervového systému. Další aspekt vynálezu se týká použití botulinových neurotoxinů z Clostridium botulinum pro kosmetické ošetřování.
Dosavadní stav techniky
Clostridium botulinum toxinový komplex typu A ( Mr 900 000) se používá již mnoho let k terapii různých dystonií. Nyní jsou povolené dva různé tento komplex obsahující preparáty pro léčení Blepharospasmus, hemifacialních spasmat a Torticollis spasmodicus : BOTOX® a DYSPORT®. Terapie dalších onemocnění nervového systému ( např. spasticity, migrény, lumbalgie, cervikální syndrom, hypersalivace ) se nyní klinicky zkouší. Preparáty se používají mimo jiné při kosmetické indikaci jako hyperhidróza a při tvorbě výrazných vrásek. Také ostatní Clostridium botulinum toxinové komplexy (typů B, C, D, E, F, G ) se hodí pro tyto terapie. Všeobecně nyní ještě není povolený žádný produkt na trhu, který obsahuje (Einsender) toxiny typů B až G.
Botulinový toxin se skládá ze směsi clostridiových proteinů. To jsou hemaglutininy s rozdílnými molekulovými hmotnostmi, jeden netoxický ne -hemaglutininující protein ( Mr cca 120 000 ) a jeden neurotoxin ( Mr cca 150 000 ). Tvoří proti kyselinám stabilní komplex , který je odpovědný za orální toxicitu při otravách potravinami.
V protikladu k čistému neurotoxinů odolává komplex agresivnímu prostředí v zažívacím traktu a umožňuje enterální resorpci neurotoxinů, který dosáhne krevním oběhem nebo lymfatickým systémem cílové buňky a tam iniciuje čidlo uvolnění
blokády.Přitom dochází k paralýze příčně pruhovaného a hladkého svalstva a k vysychání různých vegetativních funkcí. Otrávení pacienti umírají na insuficienci respiračního svalstva. Poněvadž se čistý neurotoxin v zažívacím traktu odbourává a tím se enterálně neresorbuje, není po ingesci jedovatý. Parenterální aplikací se neodlišují terapeutické účinky neurotoxinu a komplexu , neboť se komplex rozpadá ve tkáni na své podíly a pouze neurotoxin je přijímán cílovými buňkami.
K terapeutickému použití se vstřikuje komplex podle dnešního stavu techniky přímo do dystonie nebo spastického svalu, kde se neurotoxin uvolňuje z komplexu při fyziologickém pH a vyvolává požadovaný účinek. Ačkoliv se komplex aplikuje jen v krajně nepatrné dávce (1 až 25 ng, podle indikace a velikosti postiženého svalu ), dochází po opakované injekci u značného počtu pacientů k tvorbě specifických, neutralizujících protilátek, které jsou zaměřeny proti neurotoxinu. Přímým následkem je, že protilátka-positivní pacienti již více neodpovídají ( nereagují) na komplex.
Mohli by být léčeni ale jinými typy toxinů, z nichž obecně žádný není pro terapii povolený. Když pacient vyzkouší všechny toxinové typy a proti nim se vytvoří protilátky, není další aplikace botulino-toxinového komplexu (jedno jaký typ ) více nápomocná. Přitom je k přihlédnutí, že každá dávka komplexu přispívá ke zvýšení titru protilátky až k bodu, kde další aplikace komplexu nemá již žádný smysl, protože se nedosahuje již žádného efektu. Než titr protilátky hodný zmínění klesl, uběhly často roky, takže tito pacienti po dlouhý čas nebyli ( nemohli být) ošetřeni ( botulinovým neurotoxinem ).
Tvorbu specifických protilátek podporují dva faktory. U jednoho zůstává neurotoxin fixovaný v komplexu po dlouhou dobu uložen ve tkáni a může do tkáně putujícími imunitními buňkami aktivovat tvorbu protilátek. Dlouhá doba prodlevy nevede však k žádnému stoupajícímu příjmu do cílových buněk, neboť otrávené cílové buňky nemohou již přijímat žádný toxin. Jen pomalu se z komplexu disociující neurotoxin je tedy ještě imunologicky účinný. U druhých zesilují proteiny obsažené v komplexu' imunitní odpověď. Hemaglutininy jsou lektiny, tedy proteiny, které se vyznačují vysokou afinitou k určitým cukrům. Na základě jejich vazby na struktury cukrů účinkují lektiny imunostimulačně. Tak by se mohlo ukázat, že lektiny concanavalin A, fytohemaglutinin a pokeweed mitogen aktivují T- a B-lymfocyty. Hemaglutininy • · · · • · ♦ · • fc · · • ······ botulinových toxinových komplexů, které se váží rovněž na cukry stálé v membráně, mohou tedy fungovat podobným způsobem jako imunologický adjuvans a mohou přispívat k tvorbě protilátek a tím k selhání terapie.
Proto byla postavena pro řešitele předloženého vynálezu úloha, vyvinout alternativní cestu ošetření (léčení) výše uvedených nemocí a poruch. Zvláště chtěli řešitelé navrhnout vhodnou účinnou látku, kterou by se mohli léčit pacienti, u kterých se právě tvořila neutralizující protilátka.
Podstata vynálezu
Jako řešení výše uvedených úloh, jako alternativa obou komerčních preparátů z botulinum-toxinového komplexu typu A, BOTOX® a DYSPORT® a také jako alternativa stavu techniky popsaných komplexů zbývajících typů ( B, C, D, E, F, G ), bylo vyvinuto nové léčivo, které obsahuje pouze čistý neurotoxin (typ A popř. B, C,
D, E, F, G ) a je bez hemaglutininu a jiných genově cizích proteinů. Díky své nepatrné molekulové hmotnosti difundují rychleji k cílovým buňkám, kterými jsou přijímány a aktivovány, dříve než imunitní buňky, přilákané hemaglutininem.
V protilátkových studiích jsme nalezli, že čistý neurotoxin všech typů - na rozdíl od komerčních preparátů typu A a komplexů typu B až G nevyvolává žádnou nebo ve všech případech velmi nepatrnou tvorbu protilátek. Při terapeutickém použití tohoto nově vyvinutého léčiva ( čistý neurotoxin typů A, B, C, D, E, F, G ) nedochází po opakovaných aplikacích k žádnému selhání terapie podmíněné protilátkami. Dříve se ukázalo, že čisté neurotoxiny se hodí díky jejich okamžité bío-použitelnosti také dále k terapii pacientů, u kterých se po aplikaci botulinum toxinového komplexu , např. po léčení BOTOXem® nebo DYSPORTem®, vyvolal titr protilátky proti odpovídajícímu typu (tzv. secondary non-responders ), tedy další léčení BOTOXem® nebo DYSPORTem® není již více přístupné, neboť podávání komerčních toxinů nepřináší žádné zlepšení obtíží.
Léčivo připravené podle vynálezu se hodí jako léčivo zvláště u pacientů, kteří mají titr protilátky proti botulinovému toxinů, obzvláště proti typu A. Zvláště vhodné je léčivo podle vynálezu ( čistý neurotoxin nebo směs více čistých neurotoxinů ) u takových pacientů, kteří nemají titr protilátky vyšší než 50, výhodně vyšší než 30, nejvýhodněji ft ······ · · · · * · ♦ ftft··· ······ · ft · · · · • ·· ·· ft* ···· vyšší než 20, zvláště výhodně vyšší než 10, a zvláště nejvýhodněji vyšší než 5 mU/ml. Přitom je 1 mU protilátky takové množství protilátky, které neutralizuje 10 U toxinu.
Na druhé straně lze léčivo podle vynálezu zvláště výhodně použít u takových osob, které ještě nikdy předtím nebo již dlouhé roky nemohli být léčeni botulinovým neurotoxinem, neboť jejich titr protilátky je od počátku nízký nebo rovný nule. Výhoda předloženého vynálezu tkví pak v tom, že titr těchto pacientů léčených čistým toxinem podle předloženého vynálezu se nezvyšuje nebo ve všech případech jen nepatrně. Jinými slovy léčivo podle vynálezu lze podávat po dlouhou dobu, aniž by se ztratil jeho účinek.
Indukci protilátky při terapii s C.botulinum toxinem se tedy zabrání tím, že se místo vysokomolekulárních toxických komplexů aplikuje čistý neurotoxin. Od komplexních proteinů zcela oddělený neurotoxin je hned bio-odebíratelný a může se přímo vázat na nervová zakončení motorických koncových plotének.
Jeden aspekt předloženého vynálezu se tím týká léčiva, které obsahuje alespoň jeden botulinový neurotoxin z Clostridium botulinum typů A, B, C, D, E, F nebo G ( nebo směs dvou nebo více těchto neurotoxinů ), přičemž všechny neurotoxiny jsou volné bez komplexujících proteinů, které se přirozeně nacházejí v komplexu.
Podle výhodné formy provedení se jedná o léčivo, které je vyznačeno tím, že neurotoxin popř. směs neurotoxinů u pacientů nevede k žádné nebo ve srovnání s komplexy jen ke snížené indukci neutralizující protilátky.
Další výhodnou formu provedení předvídá léčivo, které obsahuje jako neurotoxin popř. jako směs neurotoxinů přírodní neurotoxin popř. směs rekombinačních neurotoxinů.
Další výhodnou formu provedení předvídá léčivo, který obsahuje jako neurotoxin popř. jako směs neurotoxinů rekombinační neurotoxin popř. směs rekombinačních neurotoxinů.
4 4 4 4 4 ·· ·» • · 4 4 4 · · • · · · 4 · • · 4 4 · « * • · · 4 4 4 « ·· ·· 44 444·
Další výhodnou formu provedení léčiva podle vynálezu předvídá prostředek, který má jako neurotoxin neurotoxin od Clostridium botulinum typu A nebo B popř. jako směs neurotoxinů směs neurotoxinů od Clostridium botulinum typu A a B.
Další aspekt předloženého vynálezu se týká použití botulinového neurotoxinů z Clostridium botulinum typů A, B, C, D, E, F, nebo G nebo směsi dvou nebo více těchto neurotoxinů pro přípravu léčiva pro léčení onemocnění nervového systému popř. dystonií. U onemocnění nervového systému popř. dystonií se jedná podle výhodné formy provedení o Torticollis spasmodicus a Blepharospasmus, o spasticity jako koňská noha, hemifasciální spasmata, migrény, lumbalgie, cervokální syndrom nebo hypersalivaci.
Další aspekt předloženého vynálezu se týká použití botulinového neurotoxinů z Clostridium botulinum typů A, B, C, D, E, F, nebo G nebo směsi dvou nebo více těchto neurotoxinů pro kosmetické ošetření, přičemž kosmetické ošetření je zvláště výhodné k ošetření hyperhidrózy a tvorby vrásek, obzvláště v obličejové části.
Nejvýhodnější ve smyslu předloženého vynálezu je použití neurotoxinů samotného nebo ve směsi pro přípravu léčiva pro léčení výše uvedených nervových onemocnění u takových osob ( přednostně člověk, ale také živočich ), které mají již neutralizující protilátky proti botulinovému neurotoxinovému komplexu, zvláště proti komplexu Clostridium botulinum typu A nebo B, nebo proti vícero komplexům, zvláště proti komplexům Clostridium botulinum typu A a B (tzv. secondary non-responders ).
Neurotoxiny, jejich směsi popř. léčivo podle vynálezu mohou být jako vodné roztoky, zvláště jako vodné injekční roztoky, ale také jako lyofilizované produkty.
Známé čisté neurotoxiny typů A až G byly připraveny podle protokolů, které jsou obsažené v seznamu uvedených publikací. Například je popsáno čištění dvou neurotoxinů (typ A a B ) v následujících příkladech.
k « · · · «
Příklady provedení
Příklad 1 : Isolace čistého neurotoxinu
Čistý neurotoxin z Clostridium botulinum typu A se získá podle způsobu, který se opírá o způsob DasGupta & Sathyamoorthy. Clostridium botulinum typu A se kultivuje ve 20 I fermentační nádobě v mediu, které sestává z 2% proteosy peptonu, 1% Yeast-extraktu, 1%glukosy a 0,05% hioglykolátu sodného. Po 72 hodinách růstu se toxin vysráží přídavkem 3N H2SO4 ( konec -pH= 3,5 ). Vysrážená a centrifugovaná biomasa se extrahuje 0,2 M pufrem fosforečnanu sodného.
Po oddělení nukleových kyselin vysrážením s protaminsulfátem se toxin sráží přídavkem síranu amonného. Rozpuštěná a proti 50 mM fosforečnanu sodného pH 6,0 dialysovaná sraženina se naváže na DEAE-Sephadex-sloupec při stejném pH a oddělí se 150 mM NaCl. Nakonec následuje chromatografie přes QAE-Sephadexsloupec, který byl korigován 50 mM tris/HCI-pufrem pH 7,9. Toxin se eluoval gradientem NaCl. V posledním kroku se toxin chromatografoval přes SP-Sephadex při pH 7,0. Navázaný toxin se přitom oddělil ze sloupce pomocí gradientu NaCl ( 0 až 300 mM ). Vyčištěný toxin se analyzoval SDS-polyakrylamid gelovou elektroforezou ( SDS-PAGE ) a má čistotu 95 ± 5 %. Biologická aktivita se určila v myši LD50analýzou: jednotce LD50 odpovídá 4,8 pg proteinu.
Příklad 2 : Příprava hotového léčiva obsahující botulinový neurotoxin
Z vyčištěného neurotoxinu z příkladu 1 se připravil roztok, který obsahuje 200 jednotek myšího LD50, 10 mg sacharosy a 2 mg lidského albuminového séra na ml. 0,5 ml roztoku se v lahvičkách (Vials ) oddělilo a mražením sušilo. Lyofilizáty se rekonstituovaly fyziologickým roztokem kuchyňské soli a určila se biologická aktivita. Lahvička obsahuje 100 ±30 LD50 jednotek.
Příklad 3: Isolace čistého neurotoxinu B
Clostridium botulinum typu B se kultivuje ve stejném médiu a za stejných podmínek jako typ A a zpracovává se až do vysrážení síranu amonného. Poté následuje opět
DEAE-Sephadex-chromatografie při pH 6,0. Frakce eluované 150 mM NaCl ze sloupce se čistily a dialyzovaly proti fosforečnanu sodnému pH 7,0, po čemž následovala chromatografie přes QAE-Sephadex. Frakce obsahující toxin se dále podrobily chromatografií přes DEAE- Sephadex- chromatografií při pH 8,5 ( 50 mM tris/HCI pH8,5).
Nakonec se získá vysoce čistý botulinový toxin typu B přes chromatografií na hydroxylapatitu vyváženém 10 mM fosforečnanu sodného pH 8,0. Navázaný homogenní toxin se eluuje 80 mM fosforečnanem sodným pH 8,0 a potom se stanoví biologická aktivita LD50 analýzou ( 2 až 4*107 LD50 jednotek/mg proteinu )
Příklad 4: Důkaz protilátek králíků bylo injikováno 25 U BOTOXu® po dobu 12 týdnů v intervalu 14 dní ( 5 injekcí). Po třech týdnech a pak v intervalu 14 dní se získalo sérum.
Protilátky proti Clostridium botulinum neurotoxinu A se dokázaly enzymimunologickým testováním tím, že homogenní neurotoxin byl znehybněn na mikrotitrační destičce. Na neurotoxinu vytvořené protilátky byly pomocí druhé enzymaticky označující protilátky kvantifikovány.
Výsledek je zaznamenán v tabulce 1. Již 5 týdnů po prvních aplikacích bylo možné u 5 králíků prokázat protilátky. Po 11 týdnech séra získaná od 17 králíků, tedy 85 % použitých zvířat, vykázaly protilátky proti neurotoxinu v biologickém testu aktivity, že 12 ze 17 sér zachovávaly neutralizující protilátky. (tabulka 2 ).
Tabulka 1 Analýza vzorků séra (1:100 zředěno ) z králíků, kteří byli léčeni BOTOXem® s enzymatickou imunologickou analýzou. OD49onm>0,1 jsou uvedeny. Všechny hodnoty OD jsou korigovány hodnotami preimunologických sér ( OD cca 0,150)
králík č. 3. týden 5. týden 7. týden 9. týden 11. týden
1 - - - 0,11 0,36
2 - - - 2,36 2,23
3 - - 0,57 1,43 1,44
4 - - 0,68 1,68 0,93
5 - 0,97 3,52 3,49 3,44
6 - - 1,34 2,32 2,70
7 - - 2,13 3,09 3,00
8 - 0,53 1,47 2,75 2,75
9 - - 0,43 2,44 2,85
10 - - 2,99 3,15 2,73
11 - 0,10 2,42 2,45 1,93
12 - - - 1,13 1,95
13 - - - - 1,89
14 - - - - -
15 - - - - -
16 - - - - -
17 - 2,93 3,62 3,72 3,44
18 - - 1,18 2,28 2,62
19 - - 0,43 0,43 0,81
20 - 1,65 3,20 2,97 2,88
* hodnoty nebyly korigovány, neboť nebylo k dispozici žádné preimunologické sérum znamená optická tloušťka ( OD490) < 0,1
Tabulka 2 Neutralizace králičích sér, která byla BOTOXem® (týden 11 po první imunizaci) analyzována v myší hemidiafragmě ( hranice detekce: 0,35 mU/ml protilátky)
králík neutralizace mU/ml
1 2,0
2 n.s.
3 n.s.
4 > 10
5 > 100
6 n.s.'
7 > 10
8 > 10
9 n.s.
10 n.s.
11 n.s.
12 > 10
13 n.s.
14 n.s.
15 <0.35
16 0,4
17 > 10
18 > 10
19 2,0
20 > 10
n.s. = nebylo stanoveno ·» · · • «····· fc * « • · · «
Příklad 5: Test na protilátky s komerčním produktem a s čistým neurotoxinem Jakmile se ukázalo, že komplex neurotoxinu a hemaglutininu a netoxického, nehemaglutinujícího proteinu inicializuje tvorbu neutralizujících protilátek, byl zkoušen imunologický účinek čistého neurotoxinu (typ A). K tomu bylo ošetřeno 8 králíků toxinovým komplexem a 12 králíků čistým toxinem. Podle výše popsaného způsobu (viz. Příklad 1 ) se aplikovalo 25 U každého preparátu intrakutánně. Množství neurotoxinu, měřeno jako hmotnost, bylo u obou preparátů shodné ( 200 pg/dávka ), jak bylo prokázáno testem ELISA. BOTOX® obsahoval navíc ještě komplexní proteiny ( cca 800 pg/dávka ).
Čtyři z osmi zvířat ošetřených BOTOXem® vykázali v testu ELISA titr protilátky, zatím co u 12 zvířat ošetřených čistým neurotoxinem nebyla prokázána žádná protilátka proti čistému neurotoxinu. Výsledek byl potvrzen (zjištěn ) testem aktivity. Všechna králičí séra obsahovala titr neutralizující protilátky, které bránily účinku toxinu (tabulka 3).
Tabulka 3 Neutralizace králičích sér (1:3 zředěno), která byla BOTOXem® (týden 11 po první imunizaci) analyzována v myší hemidiafragmě ( hranice detekce: 1 mU/ml protilátky)
králík neutralizace mU/ml
1 12 mU
2 > 30 mU
3 4,5 mU
8 > 30 mU
Příklad 6: ( Srovnávací příklad )
V tomto experimentu se porovnávala tvorba protilátky u BOTOXu® a u DYSPORTu®.
K tomu se ošetřilo podle popsaného schématu každých 10 králíků buď BOTOXem® ( skupina 1 ), DYSPORTem® ( skupina 2 ), nebo čistým neurotoxinem ( skupina 3 ).
* · * 4 4 • 4 4 4 •4 4444
Zatím co se ve skupinách 1 a 2 vytvořil titr neutralizujících protilátek vyšší než 50 %, byla séra zvířat 3. skupiny bez protilátek.
Příklad 7: Klinický test
Pacient (věk 45 let), který si léčil po dobu pěti let BOTOXem® Torticollis spasmodicus, měl titr protilátky 3 mU/ml séra. Ani BOTOX® a ani DYSPORT® nebyly u tohoto pacienta therapeuticky účinné. Léčebný pokus s čistým botulinovým neurotoxinem v dávce 145 U, která byla ekvivalentní poslední vstříknuté dávce BOTOXu®, vedl během 72 hodin k uvolnění svalu, k normalizování držení hlavy a ke ztrátě bolesti svalu. Nežádoucí účinky nenastaly.
Příklad 8: Klinický test
Pacient (věk 52 let) byl léčen BOTOXem® 3 roky kvůli cerebrální paréze. Měl titr protilátky 1 mU/ml séra, léčba proto musela být přerušena. Injekce 200 U čistého neurotoxinu umožnila úspěšnou léčbu.
Literatura:
DasGupta, B.R. & Sathyamoorthy, V. (1984), Purification and Amino Acid Composition of Type A Botulinum Neurotoxin; Toxicon 22(3), str. 415-424 De Jongh, K.S., Schwartzkoff, C.L. & Howden, M.E.H. (1989), Clostridium botulinum Type D Neurotoxin Purification and Detection; Toxicon 27(2), str. 221-228 Schmidt, J.J & Siegel, L.S. (1986), Purification of Type E Botulinum Neurotoxin by High-Performance Ion ExchangeChromatography; Analyt. Biochemistry 156, str. 213-219
Nukina,M., Mochida, Y., Sakaguchi, S. & Sakaguchi, G. (1988), Purification of Clostridium botulinum Type G Progenitor Toxin; ZBL. Bakt. Hyg. A 268, str. 220-227 Terajima,J., Syuto, B., Ochanda, J.O. & Kubo, S. (1985), Purification and Characterization of Neurotoxin Produced by Clostridium botulinum Type C 6813; Infection and Immunity 48(2), str. 312-317 • · · · · · • 9 ·· ····
Wadsworth,J.D.F., M., Tranter, H.S. et al. (1990), Botulinum type F neurotoxin: Largescale Purification and Characterization of its Binding to Rat Cerebrocortical Synaptosomes; Biochem. J. 268, str. 123-128

Claims (10)

1. Léčivo obsahující botulinový neurotoxin z Clostridium botulinum typů A, B, C, D, E, F nebo G nebo směs dvou nebo více těchto neurotoxinů vyznačující se tím, že neurotoxin popř. směs neurotoxinů je bez komplexujících proteinů, které přirozeně tvoří s neurotoxinem botulinum- neurotoxinové komplexy.
2. Léčivo podle nároku 1 vyznačující se tím, že neurotoxin popř. směs neurotoxinů nevede u pacientů k žádné nebo ve srovnání s komplexy jen ke snížené indukci neutralizujících protilátek.
3. Léčivo podle nároku 1 nebo 2 vyznačující se tím, že neurotoxin popř. směs neurotoxinů je nebo obsahuje přírodní neurotoxin popř. směs přírodních neurotoxinů.
4. Léčivo podle nároku 1 nebo 2 vyznačující se tím, že neurotoxin popř. směs neurotoxinů je nebo obsahuje rekombinační neurotoxin popř. směs rekombinačních neurotoxinů.
5. Léčivo podle jednoho z předchozích nároků vyznačující se tím, že neurotoxin je nebo obsahuje neurotoxin z Clostridium botulinum typu A nebo B popř. směs neurotoxinů je nebo obsahuje směs neurotoxinů z Clostridium botulinum typu A nebo B.
6. Použití botulinového neurotoxinů z Clostridium botulinum typů A, B, C, D, E, F nebo G nebo směsi dvou nebo více těchto neurotoxinů pro přípravu léčiva pro léčení onemocnění nervového systému popř. dystonií.
7. Použití podle nároku 6 vyznačující s tím, že se jedná u onemocnění nervového systému popř. dystonií o Toricollis spasmodicus a Blepharospasmus, spasticitu jako koňská noha ( Spitzfuss ), hemifasciální spasmata, migrénu, lumbalgii, cervikální syndrom nebo hypersalivaci.
8. Použití botulinového neurotoxinů z Clostridium botulinum typů A, B, C, D, E, F nebo G nebo směsi dvou nebo více těchto neurotoxinů pro kosmetické ošetření.
9. Použití podle nároku 8 vyznačující se tím, že kosmetické ošetření se děje ošetřením hyperhidrózy a tvorby vrásek zvláště v obličejové části.
10. Použití podle jednoho z nároků 6 až 9 vyznačující se tím, že neurotoxinem z Clostridie botulinum popř. směsí neurotoxinů léčenou osobou je člověk nebo • · • fefefe • fe • · fefefefe zvíře, který/které již má neutralizující protilátky proti botulinum-neurotoxinovému komplexu, zvláště proti vícero komplexům, zvláště proti komplexům z Clostridium botulinum typu A a B.
CZ20014351A 1999-06-07 2000-05-26 Léčivo s botulinovým neurotoxinem CZ20014351A3 (cs)

Applications Claiming Priority (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
DE19925739A DE19925739A1 (de) 1999-06-07 1999-06-07 Therapeutikum mit einem Botulinum-Neurotoxin

Publications (1)

Publication Number Publication Date
CZ20014351A3 true CZ20014351A3 (cs) 2002-06-12

Family

ID=7910318

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
CZ20014351A CZ20014351A3 (cs) 1999-06-07 2000-05-26 Léčivo s botulinovým neurotoxinem

Country Status (27)

Country Link
US (3) US7964199B1 (cs)
EP (1) EP1185291B2 (cs)
JP (2) JP2003505343A (cs)
KR (1) KR100466407B1 (cs)
CN (2) CN101062009A (cs)
AR (1) AR024306A1 (cs)
AT (1) ATE258803T1 (cs)
AU (1) AU774590B2 (cs)
CA (1) CA2376193C (cs)
CO (1) CO5170431A1 (cs)
CZ (1) CZ20014351A3 (cs)
DE (3) DE19925739A1 (cs)
DK (1) DK1185291T3 (cs)
EA (1) EA004202B1 (cs)
ES (1) ES2215056T5 (cs)
GE (1) GEP20043200B (cs)
HK (1) HK1047403A1 (cs)
HU (1) HUP0201530A3 (cs)
IL (2) IL146974A0 (cs)
MX (1) MXPA01012540A (cs)
NO (1) NO20015964L (cs)
PL (1) PL198958B1 (cs)
PT (1) PT1185291E (cs)
TW (1) TWI251492B (cs)
UA (1) UA72253C2 (cs)
WO (1) WO2000074703A2 (cs)
ZA (1) ZA200110074B (cs)

Families Citing this family (70)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
DE19925739A1 (de) 1999-06-07 2000-12-21 Biotecon Ges Fuer Biotechnologische Entwicklung & Consulting Mbh Therapeutikum mit einem Botulinum-Neurotoxin
US20080038274A1 (en) 1999-09-23 2008-02-14 Foster Keith A Inhibition of secretion from non-neuronal cells
US7838008B2 (en) 1999-12-07 2010-11-23 Allergan, Inc. Methods for treating diverse cancers
US7838007B2 (en) 1999-12-07 2010-11-23 Allergan, Inc. Methods for treating mammary gland disorders
US6821520B2 (en) 2000-02-15 2004-11-23 Allergan, Inc. Clostridial toxin therapy for Hashimoto's thyroiditis
JP2003009897A (ja) 2001-07-03 2003-01-14 Keiji Oguma ボツリヌス毒素の分離・精製法
US6688311B2 (en) 2002-03-14 2004-02-10 Allergan, Inc. Method for determining effect of a clostridial toxin upon a muscle
US7140371B2 (en) 2002-03-14 2006-11-28 Allergan, Inc. Surface topography method for determining effects of a botulinum toxin upon a muscle and for comparing botulinum toxins
US20050163809A1 (en) * 2002-03-29 2005-07-28 Ryuji Kaji Remedy for hypermyotonia
US7691394B2 (en) * 2002-05-28 2010-04-06 Botulinum Toxin Research Associates, Inc. High-potency botulinum toxin formulations
EP2272340B1 (en) * 2002-08-19 2018-03-14 Ira Sanders Botulinum toxin
US20120114697A1 (en) 2002-08-19 2012-05-10 Ira Sanders Treatment of holocrine gland dysfunction with clostridia neurotoxins
US7824693B2 (en) 2002-08-19 2010-11-02 Ira Sanders Treatment of fine wrinkles with clostridia neurotoxins
US8071550B2 (en) 2003-03-03 2011-12-06 Allergan, Inc. Methods for treating uterine disorders
JP2007528352A (ja) * 2003-03-06 2007-10-11 ボツリヌム・トクシン・リサーチ・アソシエイツ・インコーポレイテッド 洞炎に関連する慢性の顔面痛および頭痛のボツリヌス毒素での治療
US6838434B2 (en) * 2003-05-02 2005-01-04 Allergan, Inc. Methods for treating sinus headache
EP1640017A1 (en) * 2003-06-20 2006-03-29 Santen Pharmaceutical Co., Ltd. Remedies for diseases with hypermyotonia
US6974579B2 (en) * 2004-01-08 2005-12-13 Allergan, Inc. Methods for treating vascular disorders
WO2005120546A2 (en) 2004-03-03 2005-12-22 Essentia Biosystems, Inc. Compositions and methods for topical diagnostic and therapeutic transport
US9211248B2 (en) 2004-03-03 2015-12-15 Revance Therapeutics, Inc. Compositions and methods for topical application and transdermal delivery of botulinum toxins
LT2985039T (lt) 2004-03-03 2018-11-12 Revance Therapeutics, Inc. Botulino toksinų vietinis taikymas ir jų įvedimas per odą
GB2416122A (en) * 2004-07-12 2006-01-18 Ipsen Ltd Botulinum neurotoxin composition
US7879341B2 (en) * 2004-07-26 2011-02-01 Merz Pharma Gmbh & Co. Kgaa Therapeutic composition with a botulinum neurotoxin
US7429386B2 (en) 2004-09-03 2008-09-30 Allergan, Inc. Stretch mark treatment
US7179474B2 (en) 2004-09-03 2007-02-20 Allergan, Inc. Methods for treating a buttock deformity
US20060067950A1 (en) * 2004-09-27 2006-03-30 Merz Pharma Gmbh & Co. Kgaa Clostridial neurotoxins for use in wound healing
ES2420430T3 (es) * 2005-03-03 2013-08-23 Allergan, Inc. Sistema libre de productos de origen animal y procedimiento de purificación de una toxina botulínica
JP2008531732A (ja) 2005-03-03 2008-08-14 ルバンス セラピュティックス インク． ボツリヌス毒素の局所塗布及び経皮送達のための組成物及び方法
US7419675B2 (en) 2005-05-26 2008-09-02 Allergan, Inc. Method for treating peritoneal adhesions
ES2326916T3 (es) * 2005-06-17 2009-10-21 MERZ PHARMA GMBH &amp; CO. KGAA Aparato y metodo para la produccion de compuestos biologicamente activos por fermentacion.
WO2007059528A2 (en) 2005-11-17 2007-05-24 Revance Therapeutics, Inc. Compositions and methods of topical application and transdermal delivery of botulinum toxins with reduced non-toxin proteins
EP1834962A1 (de) 2006-03-15 2007-09-19 Biotecon Therapeutics GmbH PEGyliertes mutiertes Clostridium botulinum Toxin
AR061669A1 (es) * 2006-06-29 2008-09-10 Merz Pharma Gmbh & Co Kgaa Aplicacion de alta frecuencia de terapia con toxina botulinica
US10792344B2 (en) 2006-06-29 2020-10-06 Merz Pharma Gmbh & Co. Kgaa High frequency application of botulinum toxin therapy
KR20100020972A (ko) * 2007-06-01 2010-02-23 메르츠 파마 게엠베하 운트 코. 카가아 보툴리늄 톡신의 신경독 성분에 기초한 온도-안정한 근육 이완제를 제공하는 방법
EP2048156A1 (en) * 2007-10-12 2009-04-15 Merz Pharma GmbH & Co.KGaA Process for providing a temperature-stable muscle relaxant on the basis of the neurotoxic component of botulinum toxin
DE102007038015A1 (de) * 2007-08-10 2009-02-19 Hefter, Harald, Prof. Dr. med. Dr. rer. nat. Verwendung eines Neurotoxins
US9161970B2 (en) * 2007-12-12 2015-10-20 Allergan, Inc. Dermal filler
EP2072057A1 (en) 2007-12-21 2009-06-24 Merz Pharma GmbH & Co.KGaA Early administration of Botulinum toxin in the treatment of cerebrovascular event and spinal cord injury
EP2072039A1 (en) * 2007-12-21 2009-06-24 Merz Pharma GmbH & Co.KGaA Use of a neurotoxic component of Clostridium botulinum toxin complex to reduce or prevent side effects
CN101965403B (zh) * 2008-01-29 2013-07-03 株式会社抗体研究所 A型肉毒杆菌毒素中和组合物及人抗a型肉毒杆菌毒素抗体
US9107815B2 (en) * 2008-02-22 2015-08-18 Allergan, Inc. Sustained release poloxamer containing pharmaceutical compositions
NZ588029A (en) * 2008-03-14 2012-12-21 Allergan Inc Immuno-based botulinum toxin serotype a activity assays
EP2283849B1 (en) * 2008-03-31 2016-05-04 The Chemo-Sero-Therapeutic Research Institute A2 botulinum neurotoxin for use in the treatment of muscle overactivity in the presence of type a1 neutralising antibodies
EP2337790B1 (en) 2008-08-29 2016-07-13 Merz Pharma GmbH & Co. KGaA Clostridial neurotoxins with altered persistency
DK2161033T3 (da) 2008-09-09 2013-08-05 Susanne Dr Grafe Botulinustoxin til at indføre midlertidig infertilitet i et hvirveldyr (f.eks. et menneske)
CN101386648B (zh) * 2008-09-25 2012-05-30 中国人民解放军军事医学科学院微生物流行病研究所 抗b型肉毒神经毒素中和性单克隆抗体、其制备方法及用途
WO2010096134A1 (en) 2008-12-04 2010-08-26 Botulinum Toxin Research Associates, Inc. Extended length botulinum toxin formulation for human or mammalian use
EP2248518B1 (en) 2009-04-17 2013-01-16 Merz Pharma GmbH & Co. KGaA Formulation for stabilizing proteins, peptides or mixtures thereof.
US8129139B2 (en) 2009-07-13 2012-03-06 Allergan, Inc. Process for obtaining botulinum neurotoxin
JP2011074025A (ja) * 2009-09-30 2011-04-14 Chemo-Sero-Therapeutic Research Inst ボツリヌス毒素の精製方法
PT2490986T (pt) 2009-10-21 2018-11-13 Revance Therapeutics Inc Métodos e sistemas para purificar neurotoxina botulínica não complexada
KR101134146B1 (ko) * 2010-05-31 2012-04-19 메덱스젠 주식회사 국소 근마비 효과를 갖는 비확산형 보툴리눔 독소와 그의 정제방법
AU2011316111B2 (en) 2010-10-12 2015-05-28 Merz Pharma Gmbh & Co. Kgaa Formulation suitable for stabilizing proteins, which is free of mammalian excipients
AU2012276512B2 (en) * 2011-06-27 2016-04-21 Sang Duck Kim Pharmaceutical composition for treating scars on the skin, and method for treating scars on the skin using same
US9393291B2 (en) 2012-04-12 2016-07-19 Botulinum Toxin Research Associates, Inc. Use of botulinum toxin for the treatment of cerebrovascular disease, renovascular and retinovascular circulatory beds
JP6517800B2 (ja) * 2013-07-30 2019-05-22 メルツ ファーマ ゲゼルシャフト ミット ベシュレンクテル ハフツング ウント コンパニー コマンディト ゲゼルシャフト アウフ アクティーン ボツリヌス毒素の高純度神経毒成分の製造方法とその使用
US11484580B2 (en) 2014-07-18 2022-11-01 Revance Therapeutics, Inc. Topical ocular preparation of botulinum toxin for use in ocular surface disease
US9901627B2 (en) 2014-07-18 2018-02-27 Revance Therapeutics, Inc. Topical ocular preparation of botulinum toxin for use in ocular surface disease
EP3285800B1 (en) * 2015-04-24 2019-09-18 Consiglio Nazionale Delle Ricerche A new therapeutic use of the botulinum neurotoxin serotype a
KR101775682B1 (ko) * 2015-11-30 2017-09-06 주식회사 대웅 보툴리눔 독소의 제조방법
ES2755815T3 (es) 2016-09-13 2020-04-23 Allergan Inc Composiciones de toxina de Clostridium no proteicas estabilizadas
KR102463881B1 (ko) 2016-10-04 2022-11-07 (주)메디톡스 보툴리눔 독소 함유 용액으로부터 보툴리눔 독소를 분리하는 방법
EP3600221A4 (en) * 2017-03-22 2021-01-13 Bonti, Inc. BOTULINUM NEUROTOXINS FOR USE IN THERAPY
WO2018172264A1 (en) 2017-03-24 2018-09-27 Merz Pharma Gmbh & Co. Kgaa Improved use of botulinum neurotoxin in the treatment of sialorrhea
US11191819B2 (en) 2018-08-28 2021-12-07 Ira Sanders Skin therapeutics
EP3860640A1 (en) 2018-10-02 2021-08-11 Merz Pharma GmbH & Co. KGaA Novel uses of botulinum neurotoxin for treating lipoedema
JP2022521237A (ja) 2019-02-21 2022-04-06 メルツ ファーマ ゲゼルシャフト ミット ベシュレンクテル ハフツング ウント コンパニー コマンディト ゲゼルシャフト アウフ アクティーン 振戦治療のためのボツリヌス神経毒素の新規用途
BR112022023413A2 (pt) 2020-06-05 2022-12-20 Merz Pharma Gmbh & Co Kgaa Tratamento de rugas faciais com toxina botulínica de alta dose e baixo volume
TW202400122A (zh) 2022-02-28 2024-01-01 德商梅茲製藥有限兩合公司 肉毒桿菌毒素用於降低皮膚毛孔尺寸及／或皮脂產生之用途、以及降低皮膚毛孔尺寸及／或皮脂產生的方法

Family Cites Families (18)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
EP0699078B1 (en) 1993-05-14 2005-01-05 Stephen S. Arnon A method to prevent side effects and insensitivity to the therapeutic uses of toxins
CA2164626C (en) * 1993-06-10 2004-11-23 K. Roger Aoki Multiple botulinum toxins for treating neuromuscular disorders and conditions
EP0737074B1 (en) 1993-12-28 2001-08-01 Allergan Sales, Inc. Botulinum toxins for treating hyperhydrosis
US5766605A (en) * 1994-04-15 1998-06-16 Mount Sinai School Of Medicine Of The City University Of New York Treatment of autonomic nerve dysfunction with botulinum toxin
DK0758900T3 (da) 1994-05-09 2002-07-29 William J Binder Botulinumtoksin til reduktion af migræne-hovedpinesmerter
AU2907695A (en) 1994-08-08 1996-03-07 Wisconsin Alumni Research Foundation Purification and pharmaceutical compositions containing type g botulinum neurotoxin
US5512547A (en) * 1994-10-13 1996-04-30 Wisconsin Alumni Research Foundation Pharmaceutical composition of botulinum neurotoxin and method of preparation
US5756468A (en) 1994-10-13 1998-05-26 Wisconsin Alumni Research Foundation Pharmaceutical compositions of botulinum toxin or botulinum neurotoxin and methods of preparation
DK0773788T3 (da) * 1995-06-06 2003-09-01 Allergan Inc Forbedrede præparater og fremgangsmåder til kemodenervering under anvendelse af neurotoxiner
US5939070A (en) * 1996-10-28 1999-08-17 Wisconsin Alumni Research Foundation Hybrid botulinal neurotoxins
PT1011695E (pt) * 1997-07-15 2006-07-31 Univ Colorado Utilizacao de terapia com neurotoxina para tratamento de doencas da prostata
TW574036B (en) * 1998-09-11 2004-02-01 Elan Pharm Inc Stable liquid compositions of botulinum toxin
DE19856897A1 (de) * 1998-12-10 2000-06-15 Biotecon Ges Fuer Biotechnologische Entwicklung & Consulting Mbh Therapeutikum zur Unterdrückung von Schnarchgeräuschen
DE19925739A1 (de) 1999-06-07 2000-12-21 Biotecon Ges Fuer Biotechnologische Entwicklung & Consulting Mbh Therapeutikum mit einem Botulinum-Neurotoxin
US6358917B1 (en) * 1999-08-24 2002-03-19 Jean D. A. Carruthers Cosmetic use of botulinum toxin for treatment of downturned mouth
US6787517B1 (en) * 2000-12-29 2004-09-07 Allergan, Inc. Agent and methods for treating pain
DE10333317A1 (de) * 2003-07-22 2005-02-17 Biotecon Therapeutics Gmbh Formulierung für Proteinarzneimittel ohne Zusatz von humanem Serumalbumin (HSA)
AU2010267963B2 (en) * 2009-07-02 2015-09-24 Merz Pharma Gmbh & Co. Kgaa Neurotoxins exhibiting shortened biological activity

Also Published As

Publication number Publication date
PT1185291E (pt) 2004-06-30
WO2000074703A3 (de) 2001-04-26
HK1047403A1 (en) 2003-02-21
DE19925739A1 (de) 2000-12-21
PL198958B1 (pl) 2008-08-29
ES2215056T5 (es) 2011-03-15
NO20015964L (no) 2002-01-30
TWI251492B (en) 2006-03-21
IL146974A (en) 2007-05-15
CN1354670A (zh) 2002-06-19
CN100389820C (zh) 2008-05-28
AR024306A1 (es) 2002-09-25
EP1185291B1 (de) 2004-02-04
HUP0201530A3 (en) 2002-10-28
AU5804700A (en) 2000-12-28
EP1185291B2 (de) 2010-10-27
US20120088732A1 (en) 2012-04-12
ZA200110074B (en) 2003-03-06
WO2000074703A2 (de) 2000-12-14
DK1185291T3 (da) 2004-04-05
JP2003505343A (ja) 2003-02-12
US7964199B1 (en) 2011-06-21
DE10081516D2 (de) 2001-09-13
PL352468A1 (en) 2003-08-25
KR100466407B1 (ko) 2005-01-27
CA2376193C (en) 2008-09-16
ES2215056T3 (es) 2004-10-01
MXPA01012540A (es) 2004-09-27
EP1185291A2 (de) 2002-03-13
ATE258803T1 (de) 2004-02-15
CA2376193A1 (en) 2000-12-14
CO5170431A1 (es) 2002-06-27
UA72253C2 (uk) 2005-02-15
DE50005208D1 (de) 2004-03-11
US8398998B2 (en) 2013-03-19
EA004202B1 (ru) 2004-02-26
WO2000074703B1 (de) 2001-06-07
EA200200017A1 (ru) 2002-06-27
HUP0201530A2 (en) 2002-09-28
KR20020008214A (ko) 2002-01-29
NO20015964D0 (no) 2001-12-06
AU774590B2 (en) 2004-07-01
GEP20043200B (en) 2004-03-25
IL146974A0 (en) 2002-08-14
CN101062009A (zh) 2007-10-31
US20110217287A1 (en) 2011-09-08
JP2007238627A (ja) 2007-09-20

Similar Documents

Publication Publication Date Title
CZ20014351A3 (cs) Léčivo s botulinovým neurotoxinem
EP0889730B1 (en) Pharmaceutical compositions of botulinum toxin or botulinum neurotoxin and methods of preparation
KR101277280B1 (ko) 화학 조성물을 신경세포로 도입하기 위해 사용되는수송단백질
EP1103267B1 (en) Botulinum toxins for treating pain associated with muscle disorders
WO1996005222A1 (en) Purification and pharmaceutical compositions containing type g botulinum neurotoxin
US8921322B2 (en) Use of at least one botulinum neurotoxin for treating the pain induced by therapeutic treatments for the AIDS virus
KR20220003061A (ko) 보툴리눔 톡신 a형 복합체, 이의 제형 및 이의 사용 방법
WO2008050866A1 (en) Preparation containing highly purified botulinum toxin type a derived from infant botulism pathogen
US20050163809A1 (en) Remedy for hypermyotonia
US9623075B2 (en) Type A2 botulinum toxin preparation
DE20023785U1 (de) Therapeutikum mit einem Botulinum-Neurotoxin