PL178581B1 - Sposób wytwarzania 12β, 15a-dihydroksy-4-androsten-3-onu - Google Patents

Abstract

1 · Sposób wytwarzania 12β, 15a-dihydroksy-4-androsten-3-onu (o wzorze 2) na drodze mikrobiologicznej, w którym jako substrat stosuje się 4-androsten-3-on(o wzorze 1), znamienny tym, że hydroksylację prowadzi się kulturą O szczepu z gatunku Fusarium culmorum·

Description

Przedmiotem wynalazku jest sposób wytwarzania 12β, 15a-dihydroksy-4-androsten-3-onu, o wzorze 2 przedstawionym na rysunku. Związek ten może znaleźć zastosowanie w przemyśle farmaceutycznym, ze względu na swą aktywność biologiczną.

Znany jest sposób otrzymywania 12β, 15a-dihydroksy-4-androsten-3-onu (wzór 2) z 4-androsten-3-onu (wzór 1), w którym do transformacji mikrobiologicznej substratu użyto szczepu Caloneclriadecora (A. M. Bell i inni, J. Chem. Soc. PerkinI, 1972, s. 2081). W reakcji tej uzyskano produkt z wydajnością 55%.

Wynalazek dotyczy mikrobiologicznego sposobu wytwarzania 12e,15a-dihydroksy-4-androsten-3-onu, w którym jako substrat stosuje się 4-androsten-3-on.

Istota wynalazku polega na tym, że hydroksylację substratu prowadzi się kulturą szczepu z gatunku Fusarium culmorum. Korzystnie jest, gdy hydroksylację prowadzi się wodną kulturą przy ciągłym wstrząsaniu reagentów - co zapewnia lepszy kontakt substratu z komórkami mikroorganizmu - oraz w temperaturze 22-28°C.

Postępując zgodnie z wynalazkiem, w wyniku działania układu enzymatycznego zawartego w żywych komórkach kultury Fusarium culmorum następuje wprowadzenie dwóch grup hydroksylowych w 12β i 15a pozycje szkieletu steroidowego.

Zasadniczą zaletą wynalazku jest zwiększenie wydajności o około 15%, w porównaniu ze znaną metodą.

Wynalazek jest bliżej objaśniony w przykładzie wykonania.

Przykład.W kolbie o objętości 2 dm³ umieszcza się 0,5 dm³ pożywki zawierającej 30 g glukozy i 10 g peptonu w 1 dm.3 wody. Pożywkę najpierw poddaje się sterylizacji, następnie zaszczepia się ją kulturą szczepu z gatunku Fusarium culmorum, po czym kolbę mocuje się na wstrząsarce. Hodowlę mikroorganizmu prowadzi się w temperaturze około 28°C. Po trzech dniach do hodowanej kultury dodaje się 100 mg 4-androsten-3 -onu (wzór 1) rozpuszczonego w 3 cm3 acetonu. Biotransformację prowadzi się przez 4 dni przy ciągłym wstrząsaniu i w temperaturze około 26°C. Następnie roztwór ekstrahuje się trzykrotnie chloroformem. Po osuszeniu ekstraktu siarczanem magnezu i odparowaniu rozpuszczalnika otrzymuje się 100 mg suchej pozostałości. Surowy produkt oczyszcza się przez chromatografię kolumnową na żelu krzemionkowym, przy czym jako eluent stosuje się mieszaninę 3 objętości heksanu z 1 objętością acetonu. Otrzymuje się 55 mg 12β, 15a-dihydroksy-4-androsten-3-onu (wzór 2) oraz 30 mg nieprzereagowanego substratu. Uzyskany produkt posiada następujące dane fizykochemiczne i spektralne:

temperatura topnienia 199 - 201°C, [a]_D + 14-2°,

Ή NMR δ: 5,8 szeroki singlet (H-4); 4,287 d.t. (H-15); 3,55 t (H-12); 1,24 s (19-H3);

0,825 (18-H3).

178 581

178 581

Departament Wydawnictw UP RP. Nakład 60 egz.

Cena 2,00 zł.

Claims (3)

1. Zastrzeżenia patentowe

   1. Sposób wytwarzania 12β, 15a-dihydroksy-4-androsten-3-onu (o wzorze 2) na drodze mikrobiologicznej, w którym jako substrat stosuje się 4-androsten-3-on (o wzorze 1), znamienny tym, że hydroksylację prowadzi się kulturą szczepu z gatunku Fusarium culmorum.
2. 2. Sposób według zastrz. 1, znamienny tym, że hydroksylację prowadzi się wodnąkulturą przy ciągłym wstrząsaniu reagentów.
3. 3. Sposób według zastrz. 1, znamienny tym, że proces hydroksylacji prowadzi się w temperaturze 22-28°C.