PL178585B1 - Sposób wytwarzania 15α, 17e-dihydroksy-17a-metylo-4-androsten-3-onu - Google Patents

Abstract

1. Sposób wytwarzania 1)a, 17β-dihydroksy-17a-metylo-4-androsten-3-onu (wzór 2) na drodze mikrobiologicznej, wktórym jako substrat stosuje się 17a-metylotestosteron (wzór 1), znamienny tym, że hydroksylację 0 prowadzi się kulturą szczepu z gatunku Fusarium culmorum.

Description

Przedmiotem wynalazkujest sposób wytwarzania 15α, 17 β-dihydroksy-17a-metylo-4-androsten-3-onu, o wzorze 2 przedstawionym na rysunku. Związek ten może znaleźć zastosowanie w przemyśle farmaceutycznym, ze względu na aktywność biologiczną.

Znany jest sposób otrzymywania 15α-hydroksylowej pochodnej 17a-metylotestosteronu przez szczep Aspergillus flavus z wydajnościąnie przekraczającą20% (K. Schubert i inni, Endokrinologie, 59,11972, ss. 99 -114). W tym samym procesie nastąpiła jednocześnie hydroksylacja 15β pozycji 17α-metylotestosteronu, z taką samą wydajnościąjak związku poprzedniego.

Wynalazek dotyczy mikrobiologicznego sposobu wytwarzania 15α, 17e-dihydroksy-17α-metylo-4-androsten-3-onu (wzór 2), w którym jako substrat stosuje się 17a-metylotestosteron (wzór 1).

Istota wynalazku polega na tym, że hydroksylację substratu prowadzi się kulturą szczepu z gatunku Fusarium culmorum. Korzystnie jest, gdy hydroksylację prowadzi się wodną kulturą przy ciągłym wstrząsaniu reagentów - co zapewnia lepszy kontakt substratu z komórkami mikroorganizmu i szybszy ich wzrost - oraz w temperaturze 25 - 28°C.

Postępując zgodnie z wynalazkiem, w wyniku działania układu enzymatycznego zawartego w żywych komórkach kultury Fusarium culmorum, następuje wprowadzenie grupy hydroksylowej w 15α pozycję szkieletu steroidowego.

Zasadniczą zaletą wynalazku jest zwiększenie wydajności o około 80%, w porównaniu ze znaną metodą.

Wynalazek jest bliżej objaśniony w przykładzie wykonania.

Przykład. W kolbie o objętości 2 dm³ umieszcza się 0,5 dm³ pożywki zawierającej 30 g glukozy i 10 g peptonu w 1 dm3 wody. Pożywkę najpierw poddaje się sterylizacji, następnie zaszczepia się ją kulturą szczepu z gatunku Fusarium culmorum, po czym kolbę mocuje się na wstrząsarce. Hodowlę mikroorganizmu prowadzi się przy ciągłym wstrząsaniu w temperaturze około 27°C. Po czterech dniach do hodowanej kultury dodaje się 100 mg 17[3-hydroksy-17α-metylo-4-androsten-3-onu rozpuszczonego w 2 cm3 acetonu. Biotransformację prowadzi się przez dalsze 4 dni, w tych samych warunkach. Następnie roztwór ekstrahuje się trzykrotnie chloroformem. Po osuszeniu ekstraktu siarczanem magnezu i odparowaniu rozpuszczalnika otrzymuje się 100 mg suchej pozostałości. Surowy produkt oczyszcza się metodą chromatografii kolumnowej na żelu krzemionkowym, przy czym jako eluent stosuje się mieszaninę 2 objętości heksanu z 1 objętością acetonu. Otrzymuje się 37 mg 15α, 17β-dihydroksy-17α-metylo-4-androsten-3-onu. Uzyskany produkt posiada następujące dane spektralne:

Ή NMR (CDC13) δ: 0,92 (3H, s, C-18H); 1,26 (3H, s, C-19H); 1,35 (3H, s, C-^αΗ);

4,23 (H, m, C-15H); 5,73 (H, szeroki singlet, C-4H).

178 585

178 585

WZÓR 1

WZÓR 2

Departament Wydawnictw UP RP. Nakład 60 egz.

Cena 2,00 zł.

Claims (3)

1. Zastrzeżenia patentowe

   1. Sposób wytwarzania 15α, 17β-dihydroksy-17a-metylo-4-androsten-3-onu (wzór 2) na drodze mikrobiologicznej, w którym jako substrat stosuje się 17a-metylotestosteron (wzór 1), znamienny tym, że hydroksylację prowadzi się kulturą szczepu z gatunku Fusarium culmorum.
2. 2. Sposób według zastrz. 1, znamienny tym, że hydroksylację prowadzi się wodną kulturą przy ciągłym wstrząsaniu reagentów.
3. 3. Sposób według zastrz. 1, znamienny tym, że proces hydroksylacji prowadzi się w temperaturze 25 - 28°C.