PL185481B1 - Sposób wytwarzania 3p,7a-dihydroksy-5-androsten-17-onu - Google Patents

Abstract

Sposób wytwarzania 3β,7α-dihydroksy-5-androsten-17-onu, o wzorze 2, na drodze mikrobiologicznej, w którym jako substrat stosuje się 3(-hydroksy-5- androsten-17-on, o wzorze 1, znamienny HO tym, że hydroksylację prowadzi się kulturą szczepu z gatunku Fusarium culmorum.

Description

Przedmiotem wynalazku jest sposób wytwarzania 3p,7a-dihydroksy-5-androsten-17onu, o wzorze 2 przedstawionym na rysunku.

Znane są metody otrzymywania 7a-hydroksypochodnej 3p-hydroksy-5-androsten-17onu podczas transformacji mikrobiologicznej dehydroizoandrosteronu przez szczepy: Mucor piriformis i Fusarium graminearum z wydajnością nie przekraczającą odpowiednio: 18% i 38% (K. M. Madyastha, T. Joseph, Appl. Microbiol. Biotechnol., 1995, vol. 44, ss. 339-343;

G. Defaye, M. J. Luche and E. M. Chambaz, Journal of Steroid Biochemistry, 1978, Vol. 9, ss. 331 -336). W procesach tych tworzą się również inne metabolity, a wydzielenie związku będącego przedmiotem wspomnianych metod wymaga przeprowadzenia żmudnego rozdziału chromatograficznego, co stanowi zasadniczą niedogodność znanych sposobów.

Wynalazek dotyczy mikrobiologicznego sposobu wytwarzania 3p,7a-dihydroksv-5androsten-17-onu, o wzorze 2, w którym jako substrat stosuje się 3p-hydroksy-5-androsten17-on, o wzorze 1.

Istota wynalazku polega na tym, że hydroksylację prowadzi się kulturą szczepu z gatunku Fusarium culmorum.

Korzystnie jest gdy hydroksylację prowadzi się wodną kulturą szczepu, przy ciągłym mieszaniu reagentów, w temperaturze 391 - 397 K.

Postępując zgodnie z wynalazkiem, w wyniku działania układu enzymatycznego zawartego w żywych komórkach kultury Fusarium culmorum, następuje wprowadzenie grupy hydroksylowej w X7a pozycję szkieletu steroidowego. Uzyskany w ten sposób produkt wydziela się z wodnej kultury mikroorganizmu, znanym sposobem, przez ekstrakcję chloroformem,

Zasadniczą zaletą wynalazku jest otrzymywanie 3{,7a-dihydroksy-5-androsten-17-onu, jako głównego produktu reakcji, z wydajnością 80 - 98%.

Wynalazek jest bliżej objaśniony w przykładzie wykonania.

P r z y k ł a d. Do kolby Erlenmajera o pojemności 250 cm³, w której znajduje się 50 cm³ sterylnej pożywki zawierającej 1,5 g glukozy i 0,5 g peptobaku E, wprowadza się szczep Fusarium culmorum. Po trzech dniach wzrostu szczepu w temperaturze około 22°C i przy ciągłym wstrząsaniu, dodaje się 40 mg 3p-hydroksy-5-androsten-17-onu, o wzorze 1, rozpuszczonego w 0,5 cm3 acetonu. Transformację prowadzi się przy ciągłym wstrząsaniu przez 24 godziny. Następnie uzyskany roztwór transformacyjny ekstrahuje się trzykrotnie chloroformem, osusza siarczanem magnezu i odparowuje rozpuszczalnik. Otrzymuje się 36 mg surowego produktu, który oczyszcza się chromatograficznie używając jako eluentu mieszaniny heksan-aceton w stosunku 2:1.

Na tej drodze otrzymuje się 32 mg 3p,7a-dihydroksy-5-androsten-17-onu (wydajność 80%). Uzyskany produkt charakteryzuje się następującymi danymi spektralnymi:

Ή NMR (CDC1₃) δ: 0,867 (3H, s, C-18H); 1,000 (3H, s, C-19H); 5,621 (d, J=5,3 Hz, 6H); 3,558 (m, W_h= 9Hz, 3aH); 3,990 (m, W_h= 20Hz, 7pH).

185 481

185 481

Fusarium culmorunt

Departament Wydawnictw UP RP. Nakład 60 egz. Cena 2,00 zł.

Claims (3)

1. Zastrzeżenia patentowe

   1. Sposób wytwarzania 3P,7a-dihydroksy-5-androsten-17-onu, o wzorze 2, na drodze mikrobiologicznej, w którym jako substrat stosuje się 3{-hydroksy-5-andro.sten-17-on, o wzorze 1, znamienny tym, że hydroksylację prowadzi się kulturą szczepu z gatunku Fusarium culmorum.
2. 2. Sposób według zastrz. 1, znamienny tym, że hydroksylację prowadzi się wodną kulturą szczepu przy ciągłym mieszaniu.
3. 3. Sposób według zastrz. 1, znamienny tym, że hydroksylację prowadzi się w temperaturze 391 - 397 K.