Opis patentowy opublikowano: 25.02.1982 112 867 Int. Cl.2 C07H 15/2 Twórca wynalazku Uprawniony z patentu: Pfizer Corporation, Colon (Republika Panamy) Sposób wytwarzania nowych pochodnych kanamycyny Przedmiotem wynaHazku jest islpasób wytwarza¬ nia nowych pochodnych feanaimycyny o ogólnym wzorze 1, w którym iR1 oznalcza laltoim wodoru lub rodnik benzylowy, R2 oznacza grupe formyflowa, acetylowa lub trójfluoroacetyilowa, a R3 ozimacza ¦ grulpe hydroksylowa lujb grupe o wzorze -iNHR2, w którym R2 ma wyzej podane znaczenie. Zwiazki o wzorze X stanowia substancje wyjsciowe w pro¬ cesie wytwarzania pochodnych kanataiycjmy, pod¬ stawionych przy latoimde fazoftu w pozycjii 1, isitano- 10 wiaoych cenne antybiotyki Z belgijskiego opisu patentowego nr 817 546 zna¬ ny jest sposób formylioiwainaa wszystkich grup ami- _ nowych w zwiazkach amiinoglikozydowych z wy¬ jatkiem grupy aminoiwej w pozycjii 1. Pochodne 15 aminoglikozydów,, w których zabezpieczioina jelst grupa amijnoiwia w pozycjii 6' opisano w brytyjskim opisie patentowym nr 1:40il 321 i w opisiach paten¬ towych RFN nr 2 ai-1524, 2 350 169 i 2 512 587.Zgodmie ze znainyimii metodami otrzymywania 20 zwiazków iaimainoglikozydoiwychi, w tym rówiraiez kanamycyny, o selektywnie zabezpieczonych gru¬ pach aminowych, zwiazki tiakie poddaje sie nie^ selektywnemu zaibezipdeiczainiiiu grup aimiinoiwych, a naistepnie usuwa isde grupy zabezpieczajace z wy- 25 branych grup aminowych.Obecnlie nieoczekiwanie stwierdzono, ze nowe pochodne kanalmycyny o wzoirze 1^ w których grupyj amimowe zabezpieczone sa selektywndei, mozmal otrzymac sposobem wedlug wynalazku* M rótaniLacym istie w zaisadlniiczy sposób od sposobów znanych dotychczas. iCecha sposobu wedlug wynalazku jelst to, ze sól addycyjna kanamyicyny A, kaniamycyny B, 3^N- -foenzylokanamycyny A lub 3-iN-foeaizy)loikalnaimyH cyny B poddaje sde reakcji selektywnego acyio- wania reaktywnych grup hydliplksylowych za po^ moca nadmiaru ibezwodmika mrówkowoHoctoiwegioi, bezwodnika octowego lub bezwodnika tróijfluro- ocfoowegp jako srodka acylujacegip Huib tez po* chodine kanamycytny A kianamycyny B, 3-N-iberi- zylokanaimycyny A lub 3-N-foenzyiokiaoalmycyny B, w których wszystkie grupy aiminofwe zabezpieczone sa grupami ibenzyfloksykairbonyiloiwyma poddaje !sie reakcji iseJekitywnegio alcyiloiwandia reiatatyiwnych gnup hydirok&yilowych za pomoca nadmdialru bez¬ wodnika mrówkowpicctoiwego, bezwodnika octo¬ wego, bezwodnika; tróg^uoinocwtioiwe^ chlorku acetylu lufo chlorku itrójfluoroiaceltyiLu jako srodkja acylujacego, po czym droga hydix)igeirwarizy uisiuwta sie girupy foenizyflokaiilbor^^ jelsli sa one obecne, a nastepnie zobojetnia sae iroizitwór powstiajlej po¬ chodnej O-aicyilowainej,, powodujac weiwtnatirizclza- stetazfcowa migracje girupy acyflowej od laltolmu (Memu do latotmiu azotu, po czym droga hydjrofliiizy usuwa sie grupy O-iacylpwe, jetsli itoakojwe jesc^aze pozdsltaly. fW sposojbie wedlug wynalazku zbedne jest za^ bezpieczianiie wszystkich grulp laminiowych, a na¬ stepnie ich selektywne usuwanie k pozycjii 1 i 3|, gdyjz o (selektywnym zafoeizpiieczchiu decyduje me- 112 867112 867 30 chainizm reakcji. Mianowicie, migracja grupy za^ beapdjec^ajaiciej z atomu Itlenu grupy hyckicdraylloweij do altomu azotu grupy apniinowej zachodzi wyflacz- niiiel w: ityioh mliiejisiaach czasteczki kanamyicyny; w których zalbezpieczonia grupa aminowa jsajsiiiaduje a bezposrednio z grupa aminowa. Dzieki temu mi¬ gracja grup zabezpieczajacych nie nastepuje do atooimów azotu grup aminowych w pozycjach i ii 3, IW irezultiaiaie uzyskuje sde zwiazki w których izak bezpieczone isa wszysjtkie grupy almiinowe, oprócz io girup airninowych w pozycjach 1 i 3.Niojwe :zwiazkii wytwarzane sipoisioibeim wedlug wy- aailiazfcu statiiowia /Gemme substancje wyjsciowe do wtytrwiarzania droga aflkiillowialna® pochodnych kama,- raycyny podistawucnalch przy atomie lazotu w po- 1B zycjd 1. Zwaazki o wjzorze 1 maga szczególna war¬ tosc, jako suihstaaicje wyjsciowe do wytwarzania tych aoiityibdKttly3b6iw'9 gdyz w iloh przypadku zbedne jest zabezpieczanie podczas lallkiilowainta grupy amiiniowiej w pozycji 3, jako ze allkiiilowainie za- •M chodzi iciaAikjOfwdciie selektywnie ityflko przy altomie azotu w pozycji 1. Dzieje sie tak zarówno, gdy R1 we wzorze J. oznacza atom wodorM, jak ii wtedy gdy R1 oznacza grupe benzylowa. Jaktaodwiiek gnupa benzylowa, moze ibyc uwazana za grupe zaibezpie- M czajaca, to jednak grupa ibenzyOoamiinowa nie traci swej zaisiadowosci^ a wiec jest równiez podatna na alkillpwainiie.Zgodnyr z wyniatiiazkiem sposób wytwarzania zwiazków o wzorze ii jest (szczególnie odpowiedni do wytwarzania zwiazków, iw których R3 oznacza grupe hydroksylowa, a iR2 oznacza grupe itrój- iluaroaceltyflowa. W tych przypadkach kanamycyne A lujb 3-lN^benzyfljCfeantamycyne A inozpuazczai sie w fcwiajsiie forc^ftalopctowym i w itamperaturze 0°C 35 traktuje nadmitatram bezwodnika kwaisiu tr3j£luoxo- ocftowego. iReatacja dobiega konca w tej temipera- turze pochodma nadtlenoHtrójfluoroftce^ w postaci jej soM z kwasem trctflfluorooctowym 40 imozna wyosobnic przez' odparowanie irozpuisizciziaJl- nikórw pod zmniejszonym cisnieniem. Produkt roz- puszcza sie w obojetnym (rozpuszczalniku organicz¬ nym), tooizysltnie w czterowodorofurianiie i zobojet¬ nia zasada, np. mieszajac z iroztwotrem weglanu 45 sodowego lulb potasowego. Stwiienhaoino, ze w tych warunkach migiiiacjia grupy tacylowej od atonuu Hemu do taitomiu lazotu zachodzi iszybko al reakcja dobiega konca w temperaturze pokojowej w ciagu 20 mdinuit. Pozositafle grupy O-trójfluoanaaceitydofwe M uisiiiwa sie droga hydrolizy, po czym ptrzymjainy zwiazek 3", 6'^wiu-N-^jifi]a«oax)|aicetyi^^ wyosoft- nia sie ptrzez odpiaapwiahie irozpulszczgitodka i w ra¬ zie potrzeby oczyszcza metoda chromatografii ko- lujranowej- M . Mozna teiz pojstapowac w ten sposób, ze dio kar naJmycyaiy A lub 3-N4)eaizyilolkia3iiamycyny A aKaj- pderiw wjproiwadaa sde grupy zajbezpdeiczaaace grupy aminowe; dajace sie selektywnie usuwac, to jest grupy ibeoizyilokiSiykiajrbicinyilowe. Prodiukt zaibezpie- czomjy iprzy wszyisltkich atomach afzotu acyiluje sie nastepnie pmzy atotmie tlepu znanymi ispofiobamdj, np. diaiaaajac ibezwodnikiem octowym w pdiry^youa po czym luisuwa sde grupy izialbezpieczaj^ce, Gtrupy benzyloJeykar^oiyJowe; usuwa sie przez kaitaM^ w 60 tyczna hydrogeinfoiliize. Migracjia grup aCyilowych od atomów tlenu do altomów lazotu mofae maJstepnie odbywiac isie, jak opisano wyzej ii ipozostaJle grupy O-iacylowe usuiwa si^ i wyosoibniiia prloidukt, jak równiez poidane wyzej.W podobny sposób moznia traktowac toaoaimycyne B, przy czym w tym ptrzypaidku idoldialtkowo naisite- puje migracja grupy aicylioiwej od grupy hydroksy¬ lowej w ipozyipjii 3' do sasiiediriiej gmu^y aminowej w pozycji 2' i otrzyimuje sde ipdsiredinii prodiukt acy- lawtany przy trzech atomach azotu, iZwiazki o wzorze li, moga wylsltejpowac w róz¬ nych poistaciiach i wyinailazek wie ogriamicza sdle do wytwarzama zwliazków w jednej tylko poisitaci, Ogólnie (biorac, kazdy z pienscoenii jesit w postaci wka1zelslelkoiwej,, ii wszyistkie (podistalwniki sa ziwia- zane ekwiatorialnde z odpowdednirnd piiestsideinaamlL.Poza tym, glikozydowe wiazanie potmliedzy pieiriscie- ndami heksopiiainozyilowyma' i pieirsiciieiniiem z^dezo- ksylstoepitain^^ sa przetwaznlie iwiazajniajmi X w sto¬ sunku ido wiazan glikozyidowych. 3-rNHbenzyOJoikainamycyinia A jesit zwiazkiem no¬ wym, który mozna wytwarzac przez redukcyjne alkilowainie kanamycyny A za pomoca alldehydu benzoesowego iprlzyi sc&sHe reguilowialnej waflrtosci pH.Stwieirdzonoi, ze gdy kanamycyne A w .wodnym roztworze poddaje sie redukujacemu alkilowaniu w temperaftiuirze pokojowej ilu|b nizszej, za pomoca malego najdmiairu aldehydu benzoasowego w obec- noiscffl cyjanoborowodorku i iprzy wairtoisci pH wy¬ noszacej dokladnie 6, wówczais glównym .produk¬ tem reakcji jest 3^-tbeoizytlokaina|mycy^ A. pczy- wiscie otrzytmuje sie tez nieznaczne dOolsci dzomerów inaczej (podstawionych przy atomach azotu, ale izomery te mozna oddzielic znanym (sposobem ptzez ic^iinomaitograifiiczna .wymiaine jonów.Glówna frakcje wyeluowana z kolluiminy wo- doirotlenkiern lamonu stanowi 3-NHbenzyiokanamy- cynia A, zaniieczyszczionia malla illoscia izomeru 1-N- benzyilowego. W praktyce produkt ten jest na tyle czysty, ze mozna go ibezpofsredinio stosowac do pro- cesui wedilug wynadazku, alczkloilwiek oczywiiscie lizomer 1-benzylowy zawairty w pirodufccie wytwo¬ rzy po acyilowalndu lulb ailikidowianiiu i usunieciu grup ochironnych izomer podistaiwiony przy latomie azoitu w pozycji 3. Zanieczyszczenie to jest jednak ndeznaczne i moze byc latwo oddzielone oid pro¬ duktu p wzorze ,1 wspomniwnyim wyzej sposobem chaiomaltogralicznym w ostatnim stadium procesu.IW przykladzie I opisano wyitwairzanie 3-iN-ben- zyiloJkanamycytny A, ia przyklady II^V przedslta- wiaja wytwiamzamie nowych zwiazków o wzorze 1 zgodnie z wynalazkiem. iWyimdeniana w przykladach chroinaitogriaifie cienkowiairtstwowa wykonuje sie ma plytkach kirze- mdonkowych, eltosujac podany uklad rozpujszczalni- ków. Pliaimy ocenia aie iwzrokowo ipo wy,suszeniu plytek przez z^szenie ich 5°/a noztworem pod!- chUorynu Illnrzed. butylu w cykloheksanie, wy- susz&fnde plytek w temperaturze 100°C w ciagu 10 minut w przewiietrzanej suszaroa ochlodzenie i zroszenie roztworem skrobi w jodku potasu.Preparat „AmbertLit'1 tstanowi zywiczny wymieniacz jonowy-5 Pirizylkladl I. 24,3 g (0,03 nwflia) siairczamu toa^ mamycyiny A .rozpuszcza isiie iw 150 ml wody a pinzez wkinaplande -5n kwaisu solnego doprowadza wartosc pH noiztwtoiriu do 6,, po czym dodaije ' isde' 1,195 g (0,03 mjoila) cyijanoiborowodorku sodowego, chlodzi miesizanline do temperatury (PC ii irmeiszao^c dk- datfe powoli iw Ciagu 2i/z godaih iroztwóir 3,61 g (Q,033 imola) benzaildehydu w 15 ml metanolu. Mie¬ szanine pozostawia !sie dio ogrzania do temperatury pokojowej ii po uplywie 16 godzim dodaje In kwaisu solnego tak, (alby uzyskac wartosc pH 5,5, prze¬ saczaj i kieruje ma kolumne z zywicznego wymie¬ niacza, jonowego Amiberilite GG^50 iw postaci, ma^ jacej jon anionowy,. Najpierw efluuje isde woda,, a naistepniie wodnym roizitwoirem wodorotlenku amonowegoi o stezeniu roisinacym stopniowo dio 0,7n, Jako glówny produkt otiizymuje isie 5,0 ig (28°/o wydiajnoscii teoretycznej) 3^N-ibmzyilokana- mycyny A, mdeco zanieczyisz^zonej pochodna 1-N- -benzylowa. Produkt wykazuje wartosc (Rf =i 0,44 w metalu, chloroformie li il7°/o NH4OH (4:1:2), podczas gdy kanamycyna A ima wairltioisc Rif = 0,15.Próbke produktu traktuje) sie /beawodnik-iiem octojwym iw metanolu w iteaAperiatiuirze potojowej w ciagu 24 godzim ii naistepBiiie poddaije reakcji z mieiszaniiina 2:il isizeócioiinetylljódwrus^ Ivfcrój- metylochicrojsiilanu w temperaturze* pokojowej w ciagu 24 godzin, otrzymujac doltona pochodna tetra-N-;acetylo-hepta^O-trój.m Piror dukt wykaizuje — = 1246, podczas gdy dla wzorcu e ^^KW-^4^15^7 wa^^C ta wynosil równiez 1246.Pozycje podisjtiawieniia/ potwierdza sie prowadzac kolejno nialstepujace reakcje: (a) w wyniku dzaiaiai- niia azydkiem Ul-rzed. butyiliokl&ykairfboaiiyilu otrzy¬ muje 'isde zwdazek majjajcy 3 grupy lllnrzed, Jbufto- ksykairiboinyilowe oraz grupe benzylowa (daine nia podstawie widma mtagetyicznego rezonamisu jadro¬ wego), (b) luwodorniiande w celu uisainiedai grupy benzylowej (c) acyllowanie N-[(S)-4-belnzylokisy- karlbony[loamiinoH2-hydpiokisyibutyiiylioksy ]-lnraidu kwasu bursztynowego i (d) usuniecie grup ochron¬ nych przy aitomialch azioltu droga uwodorniianila. i nafsteproie traktowanie kwasem trójfluorooieto- wym. Jako glówny pnodiukit otrzymuje isiie 3-N- -[(S)-4-iaminio»2-hydroksybutyirylo]-kanamyicyine A (BB-K29) identyczna z produktem otrzymanym me¬ toda Nadto d wlspólpracowndków (J. Aintdbiotiias^ 1973, 26, 207).Przyklad II. 5,0 ml bezwodmika kwasu trój- fluorooctowego dodaje sie powoli, tmdeszajac, dio roztworu 1,0 g kamalmyicyny A w 40 ml kwafcu trójflupiroioictowegio w tempettiaiturzie 0^C i pozosta¬ wia roztwór w te,mpeaiatua:ze 0°—h4°iC uuai okries 20 godzin. Naisit.ejpniie odpairioiwuije sie irozpuiszczaliniik po;d zmniejszonym cisniiendemi, ipoaoistallotsc trakjtuje 10 ml toluenu ii odpairoiwuje do fsucte. Otjrzymalna sól kwasu tirójfliuoirpoicitoiwegio irozputeizCza siie w bez¬ wodnym czteirowodp»rot£uiianie i zpfboljetniiai, diodaóac powoli, miesizBijac zawietsane, naldmialr bezwodnego1 weglamu i)joita/siu w cztefrowodoirolEuirande. Otnzyimana zawiesime mieiszai siie w temptejrattuirze pojkofloweS w ciagu 20 miiniut, pirzesajazia i przesacz odpattiowuje do $iucha. Pozjositalotsc rozpuszcza siie w 20 ml tmetia- ackLu, utrzymuje1 w (tempetnalturze pokojowej 2887 6 w diagu 30 mdnjuife, cdjp»row,u!je iw^uisizcBailiriiik pod zmniejszonym idis^eniieim ii poaosita(ljoisc cliawmaitio- gjnatfuje ma kirzemtaiice, ediuiuijac nlajpieirw «;hlloirKr formem z meitaiTollem(3:l) i sitopnii^ ¦' putezczialliników chloirotfoliim,, meteniol i 17°/o NH4OH, diochodzate do uikladiu 8:4al. Otozyimiuje (sale 0,52 g wodzianu 3'V6'^wu-NHtiróJfiluoflioatoeityilolkaa^^ A w posjtiaicd higiroisikopijneg]o.icii(afta^^ isiWegO o jbatrwie bMej, mafiaicegoi wiaintpsc Hifi = 0JI w mlettalnelu io z ichloiroifotrmem i iWo iNH4OH (4:1:1) oriaz-Vc=^ = =i 1665 crn^1,, podKazais gdy wartosc iRf dla feannaimy- cyny A .wynoisii 0,05. . , ' Próbke produktu przeprowadzono sposobem po¬ danym w przyikladzde I w lotna pochodna dwu- 15 -N-a)oetyloihepta-OHtrcj1metyilo(^^ dlia kltórej wamtasc — =1264, podlaziajs gdy dla wzoru e C47H^4N4,015F6Si17 wie!lkolsc tla wynosi orówoiez 1264.Pirjzyikld III. 0,7 ml (5 rndOiiimolli) bezwodnika 20 kwalsu tróijfluoropiotowego idlodaje sae powoli w itempeiriaituirze 0°C ido iroziawoiru 0iy23 g (0,4 mdliii- mola) 3-iN-ibenzyilofcainiamyicyiniy A w 15 ml Ikwalau i^fliuofroocitowego, utaymuje iroztwór w (teimjpeirak tUirze ^°C w icdagu 20 goldziirn, oidpairoiwuije moz^ 85 pUBuacz^lmik, pozo^itaflosc ianakituje 10 mi toluemiu i ponowoie odpatrowujje do (aucba PozosWosc roz- pulszcza ;sae w 20 ml iczterówodopiolfuiranu ii miesza^ jajc dodjage powoda do zawiieisiiny iniadmiijairu weglainu potasowego w (rateiiowodorofufl^aniH po dzym mietsza 30 w tempema/tu/nze pokojowej w dajgu 30 mimiut, prze- sajazaf zaiwieisdne i pnzejsajcz od(pialrowiu}e óx jsiucha pod zmniejszonym iciisn(ieniem, Pozositaftoisc toz- pulszcza isiie w 20 ml meitanoliu d pozositawiiia w (tern- peiraibulrze pokojowe)} w ciagu 30 imddiam, ipo czym 35 cdpairowuje irozipuisECzailndk pod zmniiejiszonyim c;is- niieniem, oftrzymuijajc 3-N-ibeirizyQo-3,^6'^dwu-N4irój- fluolroai(^ylokianamycy/ne A, kttófflej wiairtosc Rf = 0,5 w meitanolu z chilorotformem i 6% NH4OH (4:,l:0i,l). Wiaintosc fil 3-iN^benzylloloainahiyicylii|y A 40 wynosi 0,1.Piiizyfkliajd IV, A. Roztwór 189,4 g il,3,3",6'- -czteiTo-N-ibetrizyloJksykairfbo^ A (BiulLChe!m.SolC.Japan^ 19615, 36, 1181) w 568 ml pirydyny ii 189 ml bezwodmilka octowego miesza 45 $de w ciagu inocy 'w temtpeinaituirze pokojowej, po czym wleiwa do 1,9 litria wody. Wodny iroiz^wór eksitmahuje sde chiloiofortneirn,' (1 Xii ,8 liiitnai 1X 1,0 Mtira), otrgjamiiczinei wylaiagiij odpairowuje do isuchia pod zmndlejszonyimi cifsniiendeimi pozoisitaflosc .rozciera 80 z etejreim, odsacza d isuiszy oisad ipod amniejszionym cilsnaeniiiem. Otirzymuje :siie 224,8 g penita-Ónajoetylo- -1,3,3'^6'^tiria-;N^banEy!lofcs^^ A o tein^pqria(tiuirze topnienia 223^-220°C, Rifitt0,55 w ic^lorofottirnde ze ispiiryibuistem ideoaituffowiaaiym 55 (12:1), S il,a^2,05 (1* multiplet protoniu, »5 gnup acetyilowyich) d 7,4 (20 isongleit protonu, 4 gnupy fenyiowe).B. Roztwór S3 g pentakOH^celtyloHl,3,3^6'^tetira«- -N-behzyloiksykap^onyiliotea^ A w 260 ml 60 ocitainu etylu z dodialtkiem i260 ml lodlowaltego kwasu octowego uwodonriia sde w tettr^peiriftairize 60°C, pod ciisndendem 3,5 laitm^ w obecnoisci 15 g 5P/o palladu na weglu^ w ciagu 7 godzin, po czym przesacza i ptrzesacz odparowuje pod zmndejlszonylm cdlsnde- 05 niejm, Pozostalosc irozciera sie z ejbeoem i po od*112 867 Baczeniu i wyjatoewiiu pdd zmtóejiszonym ciisniie- móem otrzymuje 9(2,0 g per^-O-aoetyioto^ntaim o fcempenaffctnae topróeraia 97—aO0°C, iwaliitoscd Rfl-sO^O w cWotfMfkJiiaiiiie z denaiurowianyim spiny* tupem (12rl). fWatrfasc Hf iwyijtsdlofwego pfroclutatu wynosi 0#5. Widmo magnetycznego rezonansu jadrowego wyfcaauije caiHkowdity forak airornajtycz- mych protourtw w otaizyimanytn pnouJUkrose.C. RoaJtwór 139,2 g peaiita-O-acetylliokainaimyi^^ A w M lirtma imetainoilu inalsyconegp aimcoiakiem poaobtowiiia jsde do Cldisftatndia w ciagu nocy w tern. pealaturaa pokojowej y po czym odpattowuje do sucha pod zmniejszonym caisnienieim. Pozotstafloisc *OZpujszcza sde w 140 mil meitaiiiiollu, .wyforaca smrowy piXxMc(t dodajac 2,5 latata odsacza osad d sutezy go pod anftuiieijlazDmytm cdsndeoieini. Surowy produkt nueisza Ede z 400 ml denalturowajnego epiJryltuisu, odsacza osad pnzeimywiai gio etenem i suszy, otrzy- iniuijAc 61j9 g 3^6'ndwu^^aicjeityilck^^ A o Ite&iperaitwrtBe itoprwieiniilai H5Ar-WBti°C d -waitosici R4 ^10,77 w meftanolu z Oj880 NH4OH (lnl). iWiidmo 13 C NJMjR. produktu d pirotonowe widmo NjMjR. w pedmd potwierdzaja' Ibudowe produktu, PirUyikiad V. 2<&pol (bezwodnika kwafcu trój. fluOroactawego , dodaje . siiie powola, umesiagac w tempepratarze 0°C do aoatworu 960 mg (2 mili- mole) fcaiiamycyny B w 50 ml kwantu ttrójfluoro- octowego i pozosttawaja w tempefarateze 0°^4°C ma okiree 20 godzia^ po czym odczarowuje rozpuszczal- nfik pod zmniefiiszcnym cilsndenaeim. Pozosftailosc fcrakltiuse loia ilO ml tolueirtu d odpataowuije do isuicha.Otrzymany tatijffluorioootain rozpuszcza, sie w 30 ml a&ecowpdupotuirlaiiiu i dodaje powofldfc mielszajac, do iraadmiaipu notatworiu toó^yiloamdny w czterowo- dbtttfuroniet po czym pocpsitawia (roztwór (w tem- peadatarze pokojoiwed iw ciagu 40 minut i maisitepniie pdpMWWUje anozpujszczaliniik pod zmindejiszionym ctó- riientiem. Fozosttafiosc rozpuszcza siiie w raert^ainoiu w ceflu zhydsroliKOwanria poaoisltailych grup 04inój- flucroaioeityJowyich i po uplywie 30 mcnuit odparo¬ wuje iiiozpuszczailnik pod zmniiejlszonym cisncendem.Pjozosjbalboisc chropnaitogiraifiuje sde mai (kanzemrOnce, etaijac ujteladelm rozpuisz^ataików, zawieratfacyim poczatkowo chJoroforirn d mcltiatnoil (3:1) d stopniowo zmiendafiajci uklad do mileiszaniiiny chloroforimu z metanolem d 17°/« (NH4OH (20a0:l). Otazytmuje &ie tó2 mg <20P/o wydajnosci teioreltyicznej) 2'l3'/,6'- -to^^Htrójlliupai}(aiCieity'lo^^ B w pojstacd iBJirinKAPifl^ prpdufldbu o iwoffttoscL iRtf = 0,70 w mdeisizjai- niirube meitainofliu z chlorofoirtmjeim, d 8°/o NH4OH 4:1:04 ("watrltosc Hf dila toalnamycyiny B rwymosli 0,0).Biudowe otrzymanego produfcfcu potwierdza sia w ten sposób, ze kolej stepujace aneakcijeL a) Aoatylude sie bezwodimkiiiem potowym iw metanolu iw ciagu 20 godaiin iw tem- pelnaituirze pokojowej, po czym (tinaktuje im roz¬ tworem NHjOH w cdagu 16 godtain w celu usu- niiewiia girup ftirójifluoroafceftyilowych;, ottnzyirmijate pro- diukt zawierajacy 2 grupy alceftyOowe, Wsaartosc 2 produfcbu iwymoisdi 508, podczaia gdy wzorowi « C^H^NgO^ odpoiwilada twartosc M+il 5«8. to) iriak- turjel sie ibezwodnfikiiem fcwiaeu deutejroofotowego w iteimpeiriaitufrze pokojowej w ciagu 24 godzin d nm. isteptnde poddiade ireiakcjd z mdeszandina 2:1 szescio- metyilodwulsiOaLatnu i trójir^etyilochloroe^ianiu 10 iw tempetrjaltuffze pokojowej w cdagiu 24 godzin, Otn«ymujaic lotna pochodna toój^Hfeutaroiac^ - E(produfetu wymosi 11134,- podczats gdy wzorowi » C46*Wi5D0Si6 odpowiada równiez wartosc 1134.Wzór tai^nesnitatcJL wyikatzuje; ze diwiuacetyJowaniie ntaattapilta w pdetriscieoiJiu 2-dezctoy^epAamdiny, co potwierdza, ze jtrójifiluoroaae(tyPowffi«ide maatapiiik) poczattkowia (w pozycjiach 2'^3" i 6lkamamycyinjy B. fo PL