NO853444L

NO853444L - Analogifremgangsmaate ved fremstilling av aminosyrederivater

Info

Publication number: NO853444L
Application number: NO853444A
Authority: NO
Inventors: Otto Roos; Walter Loesel; Gerd Schnorrenberg; Ingrid Wiedemann; Wolfram Gaida; Wolfgang Hoefke
Original assignee: Boehringer Ingelheim Kg
Priority date: 1984-09-03
Filing date: 1985-09-02
Publication date: 1986-03-04
Also published as: GR852112B; NZ213317A; ES555391A0; CS254345B2; ES555392A0; ES8706720A1; ES555389A0; CS624285A2; DK400085A; FI853354A0; ES555390A0; EP0174571A2; ES8707258A1; DK400085D0; ZA856691B; KR860002463A; DE3432307A1; FI853354L; ES546649A0; AU4702285A

Description

Foreliggende oppfinnelse vedrører en analogifremgangsmåte ved fremstilling av nye terapeutisk aktive aminosyrederivater med den generelle formel samt deres salter.

I formel I betyr:

H, fenyl, benzyl, fenetyl; R2H, acetyl, benzoyl, 3-sulfonamido-4-klor-benzoyl, 3-sulfonamido-4-klor-6-hydroksy-benzoyl, 3-sulfonamido-4-klor-5-[(furyl)-amino]-benzoyl, 2,3-diklor-4-(ø-fenyl-akryloyl)-fenoksy-acetyl, pivaloyl, C1-C2-alkylaminokarbonyl, C^- C^' alkylaminotiokarbonyl, pivaloylmetoksy eller resten A resten av en av a-aminosyrene eller

R3hydrogen, Cj-C^-alkyl, rettkjedet eller forgrenet, C^-C^-cykloalkyl, hvorunder en fenylring kan være kondensert på, fenyl, fenyl-C^-C4-alkyl, en hetero-C^ -C^-alkylrest, hvorunder heterocyklusen består av en 5- eller 6-ring med 1 til 2 av heteroatomene 0, S eller N,

R4hydrogen, -C4-alkyl, rettkjedet eller forgrenet, fenyl, fenyl-Cj-C^-alkyl eller en hetero-C^-C4-alkylrest, hvorunder heterocyklusen består av en 5- eller 6-ring med 1 til 2 av heteroatomene 0, S eller N,

R^ og R^danner sammen med N- og C-atomet en 5-, 6- eller 7-leddet ring som kan være mettet eller inneholde en dobbelt binding og eventuelt er substituert med okso, dimerkaptoetylen eller en eller to hydroksy eller metoksygrupper, eller en 4-, 5- eller 6-leddet ring, som inneholder ett

eller to ytterligere av heteroatomene 0, S eller N;

R5OH, C1-C4-uj-hydroksyalkyl, C1-C4-alkoksy, fenyl-Cj-C^-alkoksy, C1-C4-alkylamino, -C4~dialkylamino, en av gruppene

eller

eller en a-aminosyre som peptidaktig er forbundet med molekylets CO-gruppe;

R6Cj-C^-alkyl, Cj-C3-alkenyl, Cj-C3-alkinyl, rettkjedet eller forgrenet hydroksy, nitro, amino, C1-C4-alkoksy, merkapto, C1-C4~alkyltio, hydroksy-C^-C4-alkyl, merkapto-Cj-C4~alkyl, F, Cl, Br, amino-C1-C4-alkyl, sulfonamido, metylendioksy, fluor-Cj-C4~alkyl, klor-C^-C4-alkyl, brom-C1-C4~alkyl, cyano

eller trifluormetyl;

R^hydrogen eller metyl;

Rg Cj-C^-alkyl, rettkjedet eller forgrenet, hvorunder alkylresten kan være substituert med F, Cl, Br, CF^, fenyl eller

pyridyl;

X, Y og Z 0, S, CR1Q,<CH>R1Q,

med det forbehold at bare en av restene X, Y og Z kan bety 0, S

en eller to av restene X, Y og Z NRg;

R9hydrogen eller C1-C4-alkyl, rettkjedet eller forgrenet;

R^q hydrogen, eller sammen med en vicinalt stående rest R^q en fenylring, eller, for m og n = 1, dens dihydroform med dobbeltbinding i konjugasjon til den C-terminale karboksygruppe og

m og n 0,1 eller 2, hvorunder summen av m og n er 1 eller 2.

Betyr restene R^og/eller R^en 5- eller 6-leddet hetero-alkylrest, nevnes som eksempler på den heterocykliske ring tiofen, furan, pyrrol, tiazol, oksazol, isoksazol, pyrazol, imidazol, pyran, tiopyran, pyridin, morfolin, pyrazin, pyrimidin, pyridazin, oksatiin samt deres di- og tetrahydroformer.

Danner restene R^og R^sammen med N- og C-atom en 5-ring, blir som eksempel på den usubstituerte ring pyrrolidindiyl og på den substiuterte ring gruppen

hvorunder Rx og Rx' kan være like eller forskjellige og betyr hydrogen, hydroksy eller metoksy, eller Rx og Rx' betyr til sammen okso eller dimerkaptoetylen.

De eventuelt substituerte alkylrester som er nevnt som betydning på resten Rckan være rettkjedede eller forgrenede; som a-aminosyrer, som kan være peptidaktig bundet til CO-gruppen i molekylet kommer spesielt prolin, valin, leucin, isoleucin og fenylalanin i betraktning.

Ved en av betydningene for A kan 5- eller 6-ring-hetero-cyklen som er kondensert på pyrrolidin- henholdsvis piperidin-karboksylsyren er mettet eller umettet. Foretrukne heterocykler er furan, pyrrol, tiofen, benzofuran, indol, benzotiofen, oksazol, imidazol, tiazol, isoksazol, pyrazol, pyrrolidin, tetra-hydrof uran, tetrahydrotiofen, pyridin, pyridazin, kinolin, isokinolin eller piperidin.

De nye forbindelser er i alminnelighet flere asymmetrisentre og foreligger derfor som diastereomere eller i form av deres racemater henholdsvis deres racemiske blandinger. Oppfinnelsen omfatter både fremstilling av de racemiske blandinger og de enkelte diastereomere. Foretrukne er de enantiomere hvori de asymmetriske C-atomer foreligger i S-konfigurasjonen.

De nevnte racemater kan erholdes på vanlig måte, for eksempel ved fraksjonert krystallisering, ved kjemisk eller ved biokjemisk spaltning anriket•eller det ene i sine sterisk enhetlige former.

Syrene fremstilt ifølge foreliggende oppfinnelse danner salter med uorganiske og organiske baser. Eksempler på organiske baser er ammoniakk, alkalimetallhydroksyder såsom natrium- eller kaliumhydroksyd eller jordalkalimetallhydroksyd såsom kalsium-eller magnesiumhydroksyd; som organiske baser nevnes dicyklo-heksylamin, N,N'-dibenzyletylendiamin, N,N'-bis(dehydroabietyl)-etylendiamin, N-metyl-D-glycamin, arginin eller lysin.

De nye stoffer med den generelle formel I kan fremstilles ved forskjellige fremgangsmåter:

a) Ved kondensasjon av en syre med den generelle formel hvori

R1og R2har den forut angitte betydning, med et dipeptid med den generelle formel

hvori

A har den forut angitte betydning,

b) en forbindelse med den generelle formel

hvori

R^og Rj har den ovenfor angitte.betydning kondenseres med en aminosyre A, hvorunder A har den ovenfor angitte betydning, og en forbindelse med den generelle formel Ila kan erholdes ved peptidisk tilknytning en forbindelse med den generelle formel II til alanin,

c) en forbindelse med den generelle formel

hvori

R1og A har den ovenfor angitte betydning omsettes med en merkaptoforbindelse med den generelle formel

hvori

R2har den ovenfor angitte betydning, og

forbindelser med formel V kan erholdes ved kondensasjon av en bromkarboksylsyre med den generelle formel

hvori

R^har den ovenfor angitte betydning med dipeptid med den generelle formel II,

d) kondensasjon av en forbindelse med den generelle formel

hvori

R^har den ovenfor angitte betydning, med en aminosyre A, hvorunder A har den forut angitte betydning og etterfølgende omsetning av det således fremstilte kondensasjonsprodukt med den generelle formel V med en merkaptoforbindelse med formel VI, og en forbindelse med den generelle formel IVa kan fremstilles ved peptidaktig tilknytning av en forbindelse med den generelle formel IV med alanin,

e) omvandling av en forbindelse med formel I hvori R2er acetyl eller benzoyl i en forbindelse med formel I hvori R2betyr hydrogen ved forsåpning med basiske reagenser,

f) omvandling av en forbindelse med formel I hvori R2 er hydrogen ved omsetning med en forbindelse B-R2, hvori R2har en

annen betydning enn hydrogen, og B betyr en lett avspaltbar gruppe, for eksempel klor, brom, i en forbindelse med formel I, hvori R2har den ovenfor angitte betydning unntatt hydrogen. Om-

setning foretaes hensiktsmessig i nærvær av et syrebindende middel (for eksempel en base eller et alkalikarbonat).

I de ovennevnte fremgangsmåter a) til f) avspaltes enhver beskyttelsesgruppe på et egnet trinn i prosessen. Man overfører eventuelt et således erholdt sluttprodukt med den generelle formel i et salt, eller når R o,, er -0H, i en ester med formel I.

De foran beskrevne kondensasjoner skjer ved generelt vanlige metoder slik det er beskrevet i Houben-Weyl, bind XV/1, 4. utgave, 1974 for syntesen av peptider.

Generelt benytter man de koblingsreaksjoner som er vanlige i peptidkjemien under anvendelse av en aktivert form av syrene II, Ila, IV og IVa; som karboksylaktiverende grupper kommer syre-klorid, azid, anhydrid, p-nitrofenylester, triklorfenylester, tiofenylester, o-cyanometylester osv. på tale. Som koblings-middel foretrekkes karbonyldiimidazol, dicykloheksylkarbodiimid, etoksyacetylen, difenylfosforylazid eller klormausyreestere; omsetningen finner sted ved temperaturer mellom 0°C og +10°C.

I foreliggende tilfelle har anvendelse av metylenklorid vist seg som fordelaktig løsningsmiddel sammen med dicykloheksylkarbodiimid og trietylamin.

Omsetningen av brom-mellomproduktet med en merkaptoforbindelse med den generelle formel VI skjer med fordel i eter som løsningsmiddel . Ved omsetning med tiolsyre (for eksempel tioleddiksyre) erholdes de tilsvarende acylmerkaptoforbindelser; acylgruppen kan avspaltes med sterke baser.

Dimere med den generelle formel I ( R^ = får man for eksempel

a) ved oksydasjon av en forbindelse med den generelle formel I hvori R2betyr hydrogen med et oksydasjonsmiddel såsom

oksygen eller jod;

0) ved omsetning av en forbindelse med den generelle formel IVa med tioleddiksyre til en forbindelse Ila og etterfølgende forsåpning til en forbindelse med fri merkaptogruppe. Oksydasjonen til den tilsvarende dimere skjer som beskrevet

under a); det erholdte mellomprodukt kondenseres som under fremgangsmåten b) beskrevet forut med en aminosyre A.

Foretrukne er forbindelsene med den generelle formel I hvori R1betyr hydrogen, fenyl, benzyl eller fenetyl; R2hydrogen, acetyl eller 3-sulfonamido-4-klor-benzoyl og A prolin.

Med den ovenfor beskrevne fremgangsmåte kan de følgende sluttprodukter fremstilles, eventuelt i form av deres salter: 1. N-[N-(2-merkaptoacetyl)-alanyl]-prolin, 2. N-[N-(2-fenyl-2-merkaptoacetyl)-alanyl]-prolin, 3. N-[N-(3-fenyl-2-merkaptopropanoyl)-alanyl]-prolin, 4. N-[N-(4-fenyl-2-merkaptobutyryl)-alanyl]-prolin, 5. N-[N-(2-acetylmerkaptoacetyl)-alanyl]-prolin, 6. N-[N-(2-fenyl-2-acetylmerkaptoacetyl)-alanyl3-prolin, 7. N-[N-(3-fenyl-2-acetylmerkaptopropanoyl)-alanyl]-prolin, 8. N,N'-[N,N'-{2,2'-ditiobis-(3-fenylpropanoyl)}-bis-S-alanyl]-bis-S-prolin, 9. N-[N-(3-fenyl-2-S-merkaptopropanoyl)-S-alanyl]-S-prolin-pivaloyloksymetylester, 10. N-[N-(3-fenyl-2-S-{4-klor-3-sulfon-amindobenzoyl}-merkapto-propanoyl)-S-alanyl]-S-prolin, 11. N-[N-(3-fenyl-2-S-merkaptopropanoyl)-S-alanyl]-S-prolyl-S-fenylalanin, 12. N-[N-(3-fenyl-2-S-merkaptopropanoyl)-S-alanyl]-S-prolyl-S-valin, 13. N-[N-(3-fenyl-2-S-merkaptopropanoyl)-S-alanyl]-S-prolyl-S-prolin, 14. N-[N-(3-fenyl-2-S-merkaptopropanoyl)-S-alanyl]-S-tiazolidin-4-karboksylsyre, 15. N-[N-(3-fenyl-2-S-merkaptopropanoyl)-S-alanyl]-4,5,6,7-tetrahydro-tieno[2,3-c]pyridin-7-karboksylsyre, 16. N-[N-(3-fenyl-2-S-merkaptopropanoyl)-S-alanyl]-4,5,6,7-tetrahydro-tieno[3,2-c]pyridin-4-karboksylsyre, 17. N-[N-(3-fenyl-2-S-benzoylmerkaptopropanoyl)-S-alanyl]-S-prolin, 18. N-[N-(3-fenyl-2-S-pivaloylmerkaptopropanoyl)-S-alanyl]-S-prolin, 19. N-[N-(3-fenyl-2-S-acetylmerkaptopropanoyl)-S-alanyl]-S-prolin-pivaloyloksymetylester, 20. N-[N-(3-fenyl-2-S-benzoylmerkaptopropanoyl)-S-alanyl]-S-prolin-pivaloyloksymetylester, 21. N-[N-(3-fenyl-2-S-pivaloylmerkaptopropanoyl)-S-alanyl]-S-prolin-pivaloyloksymetylester, 22. N-[N-(3-fenyl-2-S-acetylmerkaptopropanoyl)-S-alanyl]-N-cyklopentylglycin, 23. N-CN-(3-fenyl-2-S-metylaminotiokarbonyl-merkaptopropanoyl)-S-alanyl]-S-prolin, 24. N-[N-(3-fenyl-2-S-etylaminokarbonyl-merkaptopropanoyl)-S-alanyl]-S-prolin.

Utgangsmaterialene var for det meste kjente forbindelser, og også eventuelt nye utgangsmaterialer fremstilles etter i og for seg kjente metoder; forbindelsen med den generelle formel III får man for eksempel ved peptidaktig tilknytning av alanin til en aminosyre A.

Aminosyrederivatene med den generelle formel I har en sterk, langvarig blodtrykksenkende virkning. Dette skyldes en hemning av det angiotensin I konverterende enzym og dermed en blokkering av dannelsen av vasokonstriktoren angiotensin II ut fra angiotensin I. Dertil virker de nye forbindelser hemmende på enzymet kininase II som er ansvarlig for bradykinin-nedbrytningen, hvilket gjelder som identisk med det ovenfor nevnte konver-teringsenzym. Da bradykinin har en karutvidende virkning, forsterkes den blodtrykksenkende virkningen ved denne ytterligere virkning. Blodtrykksenkningen som oppnåes med bradykinin på normale rotter forsterkes med de nye forbindelser. Også den observerte blodtrykksenkende virkning på ikke forbehandlede genetiske høytrykksrotter kun var uttrykk for denne virkning.

Således gir N-[N-(3-fenyl-2-S-merkaptopropanoyl)-S-alanyl]-S-prolin på narkotisert rotte i en dosering på 0,3 mg pr. kg i.v. en langvarig blodtrykksenkning på 67 % når man forut gjennom en i.v.-innsprøytning øker blodtrykket med 0,1 mg pr. kg angiotensin

I.

På de våkne rotter observeres etter en angiotensin I-stimulering (0,2 mg/kg, i.v.) ved administrering av en 1 mg pr. kg p.o. av den nevnte forbindelse en langvarig 100 % ig opphevelse av blodtrykksøkningen.

På kanin (blodtrykksforsøk fra karotis) observeres etter administrering av 1 mg pr. kg substans, i.v., en blodtrykksenkning på 37 mm.

N-[N-(3-fenyl-2-S-merkaptopropanoyl)-S-alanyl]-S-prolin viser på det angiotensin I konverterende enzym in vitro en hem-nxngsaktivitet ICC_ =5,0• 10 [M]. Den S-acetylanaloge av bO _g forbindelsen har en hemningsverdi ICC„ =7,4 ■ 10 [M]. DU

Som ICD,-U_ betegnes her den hemningsstof f konsentrasjonen som hemmer det angiotensin I konverterende enzym med 50 % (s. H. S. Cheung, D. W. Cushman, Biochem. Biophys. Acta 293, 451 (1973)).

For terapeutisk anvendelse blandes de nye forbindelser med vanlige farmasøytiske fyll- eller bærestoffer, strekk-, spreng-, binde-, glide-, fortyknings- eller fortynningsmidler. Som farma-søytiske preparatformer kommer for eksempel tabletter, kapsler, suppositorier, løsninger, safter, emulsjoner eller dispergerbare pulvere på tale, hvorunder man om ønsket kan tilsette ytterligere kjente virkestoffer, for eksempel saluretika, diuretika og/eller antihypertonika.

Tilsvarende tabletter kan for eksempel fremstilles ved blanding av virkestoffet eller virkestoffene med kjente hjelpestoffer, for eksempel inerte fortynningsmidler såsom kalsium-karbonat, kalsimfosfat eller melkesukker, sprengningsmidler såsom maisstivelse eller alginsyre, bindemidler såsom stivelse eller gelatin, smøremidler såsom magnesiumstearat eller talkum, og/eller midler for å oppnå depot-effekt såsom karboksypoly-metylen, karboksymetylcellulose, celluloseacetatftalat eller polyvinylacetat. Tablettene kan også bestå av flere sjikt.

Tilsvarende kan dragéer fremstilles ved overtrekking av kjerne fremstilt analogt med tablettene med midler som normalt anvendes i dragée-overtrekk, for eksempel kollidon eller skjellakk, gummi-arabikum, talkum, titandioksyd eller sukker.

For å oppnå en depot-effekt eller for å unngå uforenligheter kan kjernen også bestå av flere sjikt. Likeledes kan også dragée-hylsen for å oppnå en depot-effekt bestå av flere sjikt, hvorunder de samme hjelpestoffer som med tabletter nevnt ovenfor kan anvendes.

Safter av virkestoffene fremstilt ifølge oppfinnelsen henholdsvis virkestoff-kombinasjoner kan videre også inneholde et søtningsraiddel såsom sakkarin, cyklamat, glycerol eller sukker, samt et smaksforbedrende middel, for eksempel aromastoffer såsom vanillin eller orange-ekstrakt. De kan dessuten inneholde opp-slemningshjelpestoffer eller fortykningsmidler såsom natrium-karboksymetylcellulose, fuktemidler, for eksempel kondensasjons-produkter av fettalkoholer med etylenoksyd, eller beskyttelses-stoffer såsom p-hydroksybenzoater.

Injeksjonsløsninger fremstilles på vanlig måte, for eksempel under tilsetningen av konserveringsmidler såsom p-hydroksybenzoater eller stabilisatorer såsom alkalisalter eller etylen-diamintetraeddiksyre og under tilsetning av egnet løsnings-formidler og fylles i injeksjonsflasker eller ampuller.

Kapslene som inneholder ett eller flere virkestoffer henholdsvis virkestoff-kombinasjoner kan likeledes fremstilles ved at man blander virkestoffene med inerte bærere såsom melkesukker eller sorbitol og innkapsler i gelatinkapsler.

Den daglige dose for anvendelsen av forbindelsen fremstilt ifølge oppfinnelsen med den generelle formel I henholdsvis deres salter bør være 5 til 500 fortrinnsvis 10 til 100 mg og kan gies i 1 til 4 enkeltdoser.

De følgende eksempler tjener til nærmere belysning av oppfinnelsen. Strukturen av alle syntetiserte eksempler er bekreftet med NMR-spektret.

Eksempel 1

N-[ N-( 3- fenvl- 2- S- merkaptopropanoyl)- S- alanvl]- S- prolin

En løsning av 5,33 g (70 mMol) tioleddiksyre i 150 ml vannfri eter blandes under nitrogen og iskjøling langsomt med 7,1 g (70 mMol) trietylamin og settes deretter dråpevis til en løsning av 15,9 g (35 mMol) N-[N-(3-fenyl-2-R-brompropanoyl)-S-alanyl]-S-prolin-tert.butylester i 75 ml vannfri eter under røring. Man koker så ytterligere 90 minutter ved tilbakeløp, filtrerer den forut avkjølte løsning og vasker med fortynnet KHS04- og NaHCO^-løsning, vann og mettet NaCl-løsning. Etter tørking over MgSO^destilleres løsningsmidlet av og den oljeaktige rest (16,4 g) kromatograferes over kiselgel (eluent: eddikester, n-heksan (2:1)). 13,1 g (= 83,4 % av det teoretiske) acetylmerkapto-tert.butylestere fåes som fargeløs, seig olje;

Rf = 0,41 (eddikester, n-heksan =2:1, silikagel).

For å forsåpe den tertiære butylester røres en løsning av 13,1 g (29,2 mMol) av den ovennevnte ester i 65 ml anisol og 130 ml trifluoreddiksyre i 2 timer ved romtemperatur. Så inndampes ved vakuum og resten oppløses tre ganger i ca. 100 ml aceton, deretter i kloroform og rotasjonsfordampes så i vakuum. Resten løses i diklormetan og ekstraheres to ganger med mettet NaHCO^-lØsning. De samlede NaHCO^-løsninger vaskes med diklormetan, den vandige fasen surgjøres med kons. HC1 og ekstraheres med diklormetan. Diklormetan-løsningen vaskes med vann, mettet NaCl-løsning, tørkes over MgSO^og inndampes i vakuum.

10,6 g (= 92,5 % av det teoretiske) av den frie syre, N-[N-(3-fenyl-2-S-acetylmerkaptopropanoyl)-S-alanyl]-S-prolin, isoleres som størknet skum;

R^= 0,6 (kloroform, metanol, iseddik = 90:10:5, silikagel).

For å forsåpe tioleddiksyreesteren tilsettes 10,6 g (27 mMol) N-[N-(3-feny1-2-S-acetyImerkaptopropanoyl)-S-alanyl]-S-alanyl]-S-prolin under N2-atmosfære og røring 250 ml H20 og 22 ml 5 n NaOH og løsningen for stå 1,5 time ved romtemperatur. Deretter tilsettes ytterligere 10 ml 5 n NaOH, og man rører videre 1,5 time ved samme temperatur. Den vandige løsning vaskes to ganger med diklormetan, surgjøres med halvkonsentrert HC1 og ekstraheres tre ganger med diklormetan. Den organiske fasen vaskes med mettet NaCl-løsning, tørkes over MgSO^og inndampes. 9,2 g (= 97,2 % av det teoretiske) av tittelforbindelsen isoleres som størknet skum, og strukturen ble bekreftet ved IR- og NMR-data.

Rf = 0,6 (kloroform, metanol, iseddik = 90:10:5, silikagel). Utgangsforbindelsene fremstilles på følgende måte:

3- fenyl- 2- R- brompropionsyre

Litt.: Chemistryk of the Amino Acids, Vol. I, N.Y. (1961),

s. 165; Ann. 357, 1 (1907).

Modifisert litteraturtorskrift:

51,2 g (0,31 mol) R-fenylalanin blandes i rekkefølge med 620 ml 2,5 n H2S04og 125 g KBr (1,05 mol). Etter avkjøling av løsningen til 0°C tilsettes porsjonsvis i løpet av 80 minutter 32,75 g (0,475 mol) NaN02og røres videre 1 time ved romtemperatur. Den dannede emulsjon ekstraheres tre ganger med ca. 200 ml eter hver gang, den organiske fasen vaskes med vann og mettet NaCl-løsning, tørkes over MgSO^og eteren destilleres vekk. Den oljeaktige rest (63 g) renses over kiselgel med eddikester, n-heksan (= 2:1) som elueringsmiddel kromatografisk.

45,1 g av tittelforbindelsen oppnåes som rødlig olje, og strukturen og den optiske renhet bekreftes NMR-spektroskopisk. Fremstillingen av S- og R,S-analogene foregår etter den samme forskrift.

N-( 3- fenyl- 2- R- brompropanovl)- S- alanin

Til en løsning av 22,9 g (0,1 mol) 3-fenyl-2-R-brompropionsyre, 13,9 g (0,1 mol) S-alaninmetylesterhydroklorid og 10 g (0,1 mol) trietylamin i 500 ml vannfri diklormetan settes under røring ved 0°C 20,6 g (0,1 mol) N,N'-dicykloheksylkarbodiimid, og det røres videre 15 minutter ved 0°C og deretter natten over ved romtemperatur. Etter filtrering og avdestillering av løsnings-midlet oppløses resten i eddikester og filtreres fra etter kjøling. Esterløsningen vaskes i rekkefølge med fortynnet KHS04~, mettet NaHCO-^-løsning, vann, mettet NaCl-løsning og tørkes over MgS04>Etter avdestillering av eddikesteren kromato-graf eres den oljeaktige rest (29,9 g) over kiselgel (n-heksan, eddikester = 2:1) og derved erholdes 23,9 g (= 76 % av det teoretiske; tilsv. 76 mMol) av tittelforbindelsen som metylester.

For å forsåpe den oppløser man den i 150 ml metanol, avkjøler til 0°C og tilsetter under røring 80 ml 1 n NaOH

(80 mMol). Etter tre timers røring ved romtemperatur inndampes i vakuum, resten fortynnes med vann og ekstraheres tre ganger med diklormetan. Etter fordampning av diklormetanet som oppløses i vannfasen under vakuum surgjøres med konsentrert HC1 og de utfelte krystaller filtreres fra.

Utbytte: 17,8 g (= 78 % av det teoretiske) av tittelforbindelsen med smeltepunkt 156-157°C.

Rf = 0,7 (kloroform, metanol, iseddik 90:10.5, silikagel). Analogt erholdes den S S- og (R,S) S-diastereomere.

En NMR-spektroskopisk samling av S S- og R,S-diastereomerene viser et stereoselektivt forlag av syntesen.

N-[ N-( 3- fenyl- 2- R- brompropanoyl)- S- alanvl]- S- prolin- tert. butylester

a) 17,8 g (59,3 mMol) N-(3-fenyl-2-R-brompropanoyl)-S-alanin og 10,1 g (59,3 mMol) S-prolin-tert.butylester oppløses i

250 ml vannfri diklormetan og blandes under røring og kjøling (0°C) med 12,2 g (59,3 mMol) N,N'-dicykloheksylurea. Etter frafiltrering av dicykloheksylurea destilleres løsningsmidlet vekk i vakuum, den oljeaktige rest løses i eddikester og stilles koldt en stund. Etter ny frafiltrering vaskes i rekkefølge med fortynnet KHSO^-løsning, mettet NaHC03~løsning, vann og mettet NaCl-løsning og etter tørking over MgSO^destilleres løsningsmidlet vekk i vakuum. Den oljeaktige rest (24,2 g) kromatograferes over kiselgel (eluent: eddikester, n-heksan (2:1)).

15,9 g (=59,1 % av det teoretiske) av tittelforbindelsen kan isoleres som fargeløs, seig olje, som viser seg enhetlig NMR-spektroskopisk og kromatografisk.

Rf = 0,45 (eddikester, heksan (2:1), silikagel).

Analogt erholdes de S S S- og R,S S S-analoge diastereomere.

b) En løsning av 2,29 g (10 mMol) 3-fenyl-2-S-brompropionsyre, 2,78 g (19 mMol) S-alanyl-S-prolin-trietylamin oppløses i

100 ml vannfri diklormetan og blandes under røring og kjøling (0°C) med 2,06 g (10 mMol) N,N'-dicykloheksylkarbodiimid. Man rører natten over ved romtemperatur videre, avkjøler og filtrerer fra utfelt dicykloheksylurea. Løsningsmidlet destilleres vekk i vakuum, den oljeaktige rest løses i eddikester, kjøles, filtreres fra uløst materiale og vaskes i rekkefølge med fortynnet KHSO^-løsning, mettet NaHC03~løsning, vann og mettet NaCl-løsning. Etter tørking over MgSO^destilleres løsningsmidlet vekk og

man får 4,3 g (= 94,8 % av det teoretiske) av en fargeløs, seig olje.

Analogt fremstilles de R S S- og R,S S S-analoge diastereomere.

Eksempel 2

N-[N-( 3- fenvl- 2- R- merkaptopropanoyl)- S- alanvl]- S- prolin

Analogt eksempel 1 får man ved anvendelse av N-[N-(3-fenyl-2-S-brompropanoyl)-S-alanyl]-S-prolin-tert.butylester den diastereomere tittelforbindelsen N-[N-(3-fenyl-2-R-merkapto-propanoyl)-S-alanyl]-S-prolin.

Rf = 0,54 (kloroform, metanol, iseddik = 90:10:5, silikagel).

Eksempel 3

N-[ N-( 3- fenvl- 2- R, S- merkaptopropanovl)- S- alanvl]- S- prolin

Analogt eksempel 1 får man ved anvendelse av N-[N-(3-fenyl-2-R,S-brompropanoyl)-S-alanyl]-S-prolin-tert.butylester tittelforbindelsen N-[N-(3-fenyl-2-R,S-merkaptopropanoyl)-S-alanyl]-S-prolin.

Eksempel 4

N-[N-( merkaptoacetvl)- S- alanvl]- S- prolin

Analogt eksempel 1 får man ved anvendelse av N-[N-brom-acetyl)-S-alanyl]-S-prolin-tert.butylester tittelforbindelsen N-[N-(merkaptoacetyl)-S-alanyl-S-prolin.

R^= 0,35 (kloroform, metanol, iseddik = 90:10:5, silikagel).

Eksempel 5

N-[ N-( 2- fenvl- 2- R. S- merkaptoacetvl)- S- alanin]- S- prolin

Analogt eksempel 1 får man ved anvendelse av N-[N-(2-fenyl-2-R,S-bromacetyl)-S-alanin]-S-prolin-tert.butylester tittelforbindelsen N-[N-(2-fenyl-2-R,S-merkaptoacetyl)-S-alanin]-S-prolin.

Rf = 0,48 (kloroform, metanol, iseddik = 90:10:5, silikagel).

Eksempel 6

N-[ N-( 4- fenvl- 2- R. S- merkaptobutanoyl)- S- alanin]- S- prolin

Analogt eksempel 1 får man ved anvendelse av N-[N-(4~fenyl-2-11 , S-brombutanoy1)-S-alanin]-S-prolin tittelforbindelsen N-[N-(4-fenyl-2-R,S-merkaptobutanoyl)-S-alanin]-S-prolin.

Rf = 0,59 (kloroform, metanol, iseddik = 90:10:5, silikagel).

Eksempel 7

N. N'- CN. N'-{ 2. 2'- ditiobis-( 3- fenvlpropanovl) >- bis- S- alanvl]- bis-S- prolin

2,5 g (4,95 mMol) N,N'-[2,2'-S-ditiobis-(3-fenylpropanoyl)]-bis-S-alanin og 1,69 g (9,9 mMol) S-prolin-tert.butylester ble oppløst i 50 ml vannfri diklormetan og under røring og isvann-kjøling blandet med 2,0 g (9,90 mMol) N,N'-dicykloheksylkarbodiimid. Det røres ytterligere 15 minutter, deretter natten over ved romtemperatur, filtreres fra og løsningsmidlet avdestilleres. Resten oppløses i eddikester, stilles koldt, filtreres på nytt og vasket med fortynnet KHS04~10sning, mettet NaHCO^-løsning, vann og mettet NaCl-løsning. Etter tørking over MgS04fradestilleres eddikesteren i vakuum og man får derved 3,4 g av et stivnet skum. Resten kromatograferes over kiselgel (eluent: diklormetan, metanol (95:5)). 2,6 g av tittelforbindelsen i bis-tert.butyl-esterform erholdes enhetlig kromatografisk og NMR-spektroskopisk.

For å forsåpe diesteren røres en blanding av 2,6 g (3,2 mMol) av den ovenfor nevnte dimere tert.butylestere, 13 ml anisol og 26 ml trifluoreddiksyre 2 timer ved romtemperatur og inndampes så i vakuum til tørrhet. Resten (2,7 g) blandes tre ganger med aceton og kloroform og inndampes på nytt i vakuum. Råproduktet tas opp i diklormetan, vaskes med mettet NaHCO^-løsning, den vandige fasen surgjøres med konsentrert HC1 og den krystallinske utfelling filtreres fra, vaskes med vann og tørkes. 1,1 g (= 49 % av det teoretiske) av tittelforbindelsen erholdes kromatografisk og NMR-spektroskopisk ren; smp. 178°C. R^= 0,62 (kloroform, metanol, iseddik = 90:10:5, silikagel).

Fremstillingen av R,S S S-analog dimer forløper etter samme forskrift. Smp. 174°C.

Rf = 0,57 (kloroform, metanol, iseddik = 90:10:5, silikagel).

Utgangsforbindelsene fremstilles som følger:

N-( 3- fenyl- 2- S- acetylmerkaptopropanoyl)- S- alanin- roetvlester

Til en løsning av 1,98 g (26 mMol) tioleddiksyre i 70 ml vannfri eter drypper man under røring, kjøling ved 0°C og N2~atmosfære 2,6 g (26 mMol) trietylamin oppløst i 20 ml vannfri eter langsomt. Deretter tilsettes denne løsningen dråpevis 4,1 g (13 mMol) N-(3-fenyl-2-R-brompropanoyl)-S-alanin-metylester (fremstilling se eksempel 1) i 50 ml vannfri eter og kokes 90 minutter ved tilbakeløp. Etter avkjøling til romtemperatur filtreres og løsningsmidlet destilleres av. Den oljeaktige rest (6,2 g) kromatograferes over kiselgel med n-heksan, eddikester (2-.1) og 3,9 g (96,9 % av det teoretiske) av et NMR-spektroskopisk enhetlig krystallinsk produkt erholdes som tittelforbindelsen.

N. N'-[ 2, 2'- S- ditiobis-( 3- fenylpropanoyl)]- bis- S- alanin

3,9 g (12,6 mMol) N-(3-fenyl-2-S-acetylmerkaptopropanoyl)-S-alanin-metylester oppløses i 40 ml metanol og blandes under røring og iskjøling med 37,8 ml (37,8 mMol) 1 n NaOH. Løsningen røres 3 timer ved romtemperatur og blandes så med en 2 % metanolisk jodløsning til blivende gulfarge. Deretter avfarges med fortynnet Na2S20.j-løsning, løsningsmidlet destilleres vekk i vakuum, resten løses i vann og vaskes med diklormetan. Den vandige fasen inndampes i vakuum for å fjerne diklormetanet og surgjøres med konsentrert HC1. Det utfelte reaksjonsprodukt ekstraheres med diklormetan, vaskes med mettet NaCl-løsning, tørkes over MgS04og løsningsmidlet destilleres vekk.

2,5 g (= 78,6 % av det teoretiske) av tittelforbindelsen kan isoleres som stivnet skum.

Rf = 0,5 (kloroform, metanol, iseddik = 90:10:5, silikagel).

Fremstillingen av de R S S- og R,S S S-analoge diastereomere skjer etter den samme fremgangsmåte.

Eksempel 8

N- TN-( 3- fenvl- 2- S- merkaptopropanoyl)- S- alanyl]- S- prolin- pivaloyl-oksvmet<y>lester

1,75 g (5 mMol) N-[N-(3-fenyl-2-S-merkaptopropanoyl)-S-alanyl]-S-prolin oppløses i 30 ml aceton og tilsettes under røring og nitrogenatmosfære i rekkefølge 500 mg (5 mMol) KHC03,

140 mg (0,84 mMol) KJ og 0,81 ml (5 mMol) klormetylpivalat. Blandingen kokes 3 timer ved tilbakeløp og filtreres etter av-kjøling. Filtratet inndampes i vakuum, resten taes opp i eddikester og vaskes i rekkefølge med vann, mettet NaHC03-løsning, vann og mettet NaCl-løsning. Man tørker over MgS04og avdestillerer løsningsmidlet i vakuum. Den oljeaktige rest (1,5 g = 69 % av det teoretiske) kromatograferes over kiselgel (eluent: eddikester, n-heksan (2:1)) og derved erholdes 2 frak-sjoner: 0,7 g (= 32 % av det teoretiske) tilsvarende tittelforbindelsen; R f = 0,28.

0,3 g (13,7 % av det teoretiske) tilsvarer S-alkyleringsproduktet N-[N-(3-fenyl-2-S-pivaloyloksymetylmerkaptopropanoyl)-S-alanyl]-S-prolin-pivaloyloksymetylester.

Fremstillingen av R S S- og R,S S S-analoge diastereomere samt de tilsvarende S-acylforbindelser skjer på den måte som er beskrevet i eksempel 11.

Eksempel 9

N-[ N-( 3- fenyl- 2- S-{ 4- klor- 3- sulfon- amidobenzoyl}- merkaptopropan-oyl- S- alanyl]- S- prolin

Til en løsning av 2,1 g (6 mMol) N- [ N- (3-f enyl^-S-merkapto-propanoyl )-S-alanyl]-S-prolin i 100 ml vann og 1,008 g (12 mMol) NaHC03settes 1,524 g (6 mMol) 4-klor-3-sulfamoylbenzoesyreklorid og røres 2 timer videre ved romtemperatur. Etter 2 dagers henstand vaskes med diklormetan, den vandige fase surgjøres med fortynnet HC1 og de utfelte krystaller filtreres fra.

1,4 g (= 82,1 % av det teoretiske) av tittelforbindelsen kan isoleres som fast substans.

Rj = 0,3 (butanon, aceton, vann = 60:6:10, silikagel). De NMR-spektroskopiske data bekrefter substansens struktur og renhet.

Eksempel 10

N-[ N-( 3- fenyl- 2- S- merkaptopropanovl)- S- alanyl]- S- prolyl- S- fenvlalanin

Til en løsning av 815 mg (10,7 mMol) tioleddiksyre i 35 ml vannfri eter dryppes under N2~atmosfære, iskjøling og røring langsomt 1,08 g (10,7 mMol) trietylamin. Deretter tilsettes en løsning av 3 g (5,37 mMol) N-[N-(3-fenyl-2-R-brompropanoyl)-S- alanyl]-S-prolyl-S-fenylalaninmetylester dråpevis i 20 ml vannfritt diklormetan til ovenfor nevnte løsning og kokes 90 minutter ved tilbakeløp. Etter avkjøling filtreres fra og filterkaken oppløses i diklormetan. Man vasker med mettet NaHCO^-løsning, fortynnet KHS04-løsning, vann og mettet NaCl-løsning. Etter tørking over MgS04destilleres løsningsmidlet av og man får 3,3 g av en fast rest som etter omkrystallisering fra eddikester ga et utbytte på 2,03 g (= 68 % av det teoretiske).

Metylesteren og dens smeltepunkt på 157-158°C og en R^-verdi på 0,13 (eddikester, n-heksan = 2:1, silikagel).

For å forsåpe setter man til en suspensjon av 2 g (3,6 mMol) av ovennevnte merkaptoacyl-metylester i 50 ml metanol og 20 ml vann under røring og i en N2-atmosfære 6 ml 5 n NaOH og rører 1,5 time ved romtemperatur. Man tilsetter videre 2 ml 5 n NaOH og rører igjen videre 1,5 time. Metanolen roteres vekk i vakuum, resten fortynnes med vann og vaskes to ganger med diklormetan. Den vandige fasen surgjøres med fortynnet HCl-løsning og ekstraheres tre ganger med diklormetan. Den organiske fasen vaskes så med mettet NaCl-løsning, tørkes over MgS04og inndampes i vakuum. 1,7 g (= 94,9 % av det teoretiske) av tittelforbindelsen erholdes som stivnet skum hvis struktur ble bekreftet NMR-spektroskopisk. R^= 0,48 (kloroform, metanol, iseddik = 90:10:5, silikagel).

Etter den samme fremgangsmåte fremstiltes de R,S S S - og R S S - analoge diastereomere.

Utgangsforbindelsen fremstilles som følger: N- CN-( 3- fenvl- 2- R- brompropanoyl)- S- alanvl]- S- prolvl- S- fenvlalanin

Til en løsning av 2,8 g (7 mMol) N- [N- (3-f enyl^-R-brora-propanoyl )-S-alanyl]-S-prolin, 1,5 g (7 mMol) S-fenylalaninmetyl-ester-hydroklorid og 708 mg (7 mMol) trietylamin i 50 ml vannfritt diklormetan settes under røring ved 0°C 1,44 g (7 mMol) N,N'-dicykloheksylkarbodiimid, og man rører 15 minutter ved 0°C og deretter natten over ved romtemperatur. Man filtrerer, destillerer av løsningsmidlet i vakuum og løser resten i eddikester. Så avkjøles løsningen, filtreres på nytt og vaskes i rekkefølge med fortynnet KHS04-løsning, mettet NaHCO-^-løsning, vann, mettet NaCl-løsning. Man tørker over MgS04og destillerer løsningsmidlet av i vakuum. Resten (4 g) omkrystalliseres fra litt eddikester;

Utbytte: 3 g (76,7 % av det teoretiske)

Rf = 0,37 (eddikester, n-heksan = 2:1, silikagel).

Eksempel 11

N- CN-( 3- fenvl- 2- S- merkaptopropanovl)- S- alanvl]- S- prolvl- S- valin

Analogt eksempel 10 får man ved anvendelse av N-[N-(3-fenyl-2-R-brompropanoyl)-S-alanyl]-S-prolyl-S-valin tittelforbindelsen. Rf = 0,48 (kloroform, metanol, iseddik = 90:10:5, silikagel).

Eksempel 12

N- EN-( 3- fenyl- 2- S- merkaptopropanovl)- S- alanvl3- S- prolvl- S- prolin

Analogt eksempel 10 får man ved anvendelse av N-[N-(3-fenyl-2-R-brompropanoyl)-S-alanyl3-S-prolyl-S-prolin tittelforbindelsen .

Rf = 0,26 (eddiksyreetylester, silikagel).

Eksempel 13

N-[N-( 3- fenvl- 2- S- merkaptopropanoyl)- S- alanyl3- S- tiazolidin- 4-karboksylsyre

Analogt eksempel 1 får man ved anvendelse av S-tiazolidin-4-karboksylsyre tittelforbindelsen i utbytter på 85,4 % av det teoretiske. Smp. 144-146°C

Rf = 0,46 (kloroform, metanol, iseddik = 90:10:5, silikagel). Elementæranalyse: ,Ho„N-0.S„

16 20242

Strukturen er NMR-spektroskopisk bekreftet.

Eksempel 14

N- CN-( 3- fenyl- 2- S- merkaptopropanovl)- S- alanyl1- 4. 5. 6. 7- tetra-hydro- tieno[ 2. 3- c 3 pyridin- 7- karboksylsyre

Analogt eksempel 1 får man ved anvendelse av 4,5,6,7-tetra-hydro-tienoC2,3-c3pyridin-7-karboksylsyre i R,S-, R- og S-konfigurasjon de tilsvarende diastereomere av tittelforbindelsen. Rf-verdien for S S R,S-diastereomer-blandingen: 0,18 (kloroform, metanol, iseddik = 90:10:5, silikagel).

Eksempel 15

N-[ N-( 3- fenvl- 2- S- merkaptopropanovl)- S- alanyl3- 4. 5. 6. 7- tetra-hydro- tieno[ 3. 2- c3pyridin- 4- karboksylsyre

Analogt eksempel 1 får man ved å anvende 4,5,6,7-tetrahydro-tieno[3,2-c3pyridin-4-karboksylsyre de tilsvarende diastereomere av tittelforbindelsen.

Rf-verdien for S S R,S-diastereomer-blandingen: 0,53 (kloroform, metanol, iseddik = 90:10:5, silikagel).

Eksempel 16

N-[ N-( 3- fenyl- 2- S- benzoylmerkaptopropanoyl)- S- alanyl3- S- prolin

Til en løsning av 2,1 g (15,4 mMol) tiolbenzoesyre i 50 ml vannfri eter settes ved 0°C, nitrogenatmosfære og røring langsomt 1,56 g (15,4 mMol) trietylamin. Deretter drypper man til en løsning av 3,5 g (7,7 mMol) N-[N-(3-fényl-2-R-brompropanoyl)-S-alanyl3-S-prolin-tert.butylester i 30 ml vannfri eter og koker 90 minutter under tilbakeløp. Etter frafiltrering vaskes eterløs-ningen med fortynnet KHS04~løsning, mettet NHCO-j-løsning, vann og mettet NaCl-løsning, tørkes over MgS04og inndampes til tørrhet. Resten (3,7 g) kromatograferes over kiselgel (eluent: eddikester, n-heksan = 1:1) og 3,4 g (= 86,5 % av det teoretiske) av den tertiære butylester av tittelforbindelsen erholdes som stivnet skum.

Rf = 0,27 (eddikester, n-heksan = 1:1, silikagel).

For å forsåpe oppløses 3,4 g (6,6 mMol) av den ovenfor nevnte tert.butylester i 34 ml trifluoreddiksyre og 17 ml anisol og røres 2 timer ved romtemperatur. Reaksjonsløsningen inndampes i vakuum og oppløses tre ganger med aceton og kloroform og roteres på nytt inn i vakuum. Resten oppløses i diklormetan og vaskes med vann og mettet NaCl-løsning. Etter tørking over MgS04inndampes og resten (3,1 g) kromatograferes over kiselgel (elueringsmiddel: diklormetan, metanol, iseddik = 120:5:2).

2,2 g (= 73,3 % av det teoretiske) av tittelforbindelsen erholdes som fargeløst, stivt skum.

Rf = 0,25 (diklormetan, metanol, iseddik = 120:5:2, silikagel).

Eksempel 17

N-[N-( 3- fenvl- 2- S- pivalovlmerkaptopropanovl)- S- alanvl- S- prolin

Man går frem som beskrevet i det forangående eksempel. I

stedet for tiolbenzoesyre anvendes tiolpivalinsyre. Omsetningen av 3,17 g (7 mMol) N-[N-(3-fenyl-2-R-brompropanoyl)-S-alanyl]-S-prolin-tert.butylester og 1,65 g (14 mMol) tiolpivalinsyre 3,3 g (= 96 % av det teoretiske) av tert.butylestrene av tittelforbindelsen.

Rf = 0,34 (eddikester, n-heksan = 1:1, silikagel).

Forsåpningen av denne trifluoreddiksyre førte til tittelforbindelsen i et utbytte på 2,4 g (= 82,4 % av det teoretiske).

Rf = 0,3 (diklormetan, metanol, iseddik = 120:6:2, silikagel).

Eksempel 18

N- CN-( 3- fenyl- 2- S- acetvlmerkaptopropanoyl)- S- alanyl3- S- prolin-pivalovloksymetylester

2,3 g (5,8 mMOl) N-[N-(3-fenyl-2-S-acetylmerkaptopropanoyl)-S-alanyl]-S-prolin (mellomprodukt fra eksempel 1) oppløses i 40 ml vannfritt aceton og tilsettes under røring og nitrogenatmosfære i rekkefølge 580 mg (5,8 mMol) KHC03, 161 mg (0,97 mMol) kaliumjodid og 873 mg (5,8 mMol) klormetylpivalat. Blandingen kokes 3 timer ved tilbakeløp og filtreres etter av-kjøling. Filtratet inndampes i vakuum, resten tas opp i eddikester og vaskes i rekkefølge med vann, mettet NaHCO^-løsning, vann og mettet NaCl-løsning.

Man tørker over MgSO^og avdestillerer løsningsmidlet i vakuum. Den oljeaktige rest (2,7 g) kromatograferes over kiselgel (eluent: eddikester, n-heksan = 2:1) og derved erholdes 2,2 g (= 75 % av det teoretiske) av tittelforbindelsen som olje. Rf = 0,42 (eddikester, n-heksan = 2:1, silikagel).

Eksempel 19

N- CN-( 3- fenyl- 2- S- benzovlmerkaptopropanoyl)- S- alanyl]- S- prolin-pivaloyloksvmetvlester

Analogt eksempel 18 får man ved å anvende N-[N-(3-fenyl-2-S-benzoylmerkaptopropanoyl)-S-alanyl-S-prolin tittelforbindelsen. Rf = 0,43 (eddikester, n-heksan = 1:1, silikagel).

Eksempel 20

N- CN-( 3- fenvl- 2- S- pivaloylmerkaptopropanoyl)- S- alanvl3- S- prolin-pivaloyloksymetvlester

Analogt eksempel 18 får man ved anvendelse av N-[N-(3-fenyl-2-S-pivaloylmerkaptopropanoyl)-S-alanyl3-S-prolin tittelforbindelsen .

Rf = 0,45 (eddikester, n-heksan = 2:1, silikagel).

Eksempel 21

N- CN-( 3- fenyl- 2- S- acetvlmerkaptopropanoyl)- S- alanyl3- N- cyklo-pentvlalycin 6 g (20 mMol) N-(3-fenyl-2-R-brompropanoyl)-S-alanin og 4 g (20 mMol) N-cyklopentylglycin-tert.butylester oppløses i 100 ml diklormetan og blandes under røring ved kjøling (0°C) med 4,1 g (20 mMOl) N.N'-dicykloheksylkarbodiimid og røres 15 minutter ved denne temperaturen og deretter natten over ved romtemperatur. Etter frafiltrering av dicykoheksylurea destilleres løsnings-midlet av i vakuum, den oljeaktige rest oppløses i eddikester og får stå en stund koldt. Etter ny filtrering vaskes filtratet med fortynnet KHS04-løsning, mettet NaHC03~10sning, vann og mettet NaCl-løsning og inndampes i vakuum etter tørking over MgSO^. Den oljeaktige rest (6,7 g) kromatograferes over kiselgel (eluent: eddikester, n-heksan = 1:2).

Utbytte: 4,3 g (= 44,6 % av det teoretiske) brom-tert.butylester erholdes som fargeløs olje.

Rj = 0,28 (eddikester, n-heksan = 1:2, silikagel).

Utskiftningen av bromet med tioleddiksyre og den etter-følgende forsåpning av den tertiære butylester til tittelforbindelsen skjer på den måte som er beskrevet i eksempel 1.

Rf = 0,55 (kloroform, metanol, iseddik = 90:10:5).

Eksempel 22

N-[ N-( 3- fenyl- 2- S- metylaminotiokarbonyl- merkaptopropanoyl)- S-alanvl3- S- prolin

En løsning av 1,73 g (4,96 mMol) N-[N-(3-fenyl^-S-merkapto-propanoy 1 )-S-alanyl3-S-prolin i 10 ml 0,5 n NaOH og 25 ml pyridin blandes under nitrogenatmosfære med 0,4 g (5,47 mMol) metyliso-tiocyanat og oppvarmes 2 timer ved 40°C. Deretter inndampes til tørrhet i vakuum, resten oppslemmes med vann og surgjøres med konsentrert HC1. Den vandige fasen ekstraheres med eddikester, vaskes med NaCl-løsning og tørkes over MgS04. Eddikester-ekstrakt inndampes til tørrhet og derved erholdes 1,5 g (71,4 % av det teoretiske) av tittelforbindelsen som størknet skum som renses kromatografisk over kiselgel. (Eluent: toluen, eddiksyre = 75 : 25) .

Rf = 0,47 (kloroform, metanol, iseddik = 90:10:5, silikagel).

Eksempel 23

N- CN-( 3- fenvl- 2- S- etvlaminokarbonvl- merkaPtopropanovl)- S- alanyl]-S- prolin

En løsning av 1,72 g (4,92 mMol) N-[N-(3-fenyl^-S-merkapto-propanoyl )-S-alanyl]-S-prolin i 5 ml 1 n NaOH og 5 ml pyridin blandes med 0,45 ml (5,7 mMol) etylisocyanat og røres 4 timer ved 40°C under N2~atmosfære. Deretter inndampes til tørrhet i vakuum. Resten oppslemmes i vann, surgjøres med 0,1 n HCl og behandles videre som beskrevet i det foregående eksempel.

1,7 g (82,1 % av det teoretiske) av tittelforbindelsen erholdes som størknet skum.

R^ = 0,45 (kloroform, metanol, iseddik = 90:10:5, silikagel).

NMR-data for flere forbindelser fremstilt ifølge oppfinnelsen:

Eksempel 1

<1>H-NMR-data (CD30D)

6 = 1,31, d, J=7Hz, 3H, CH_3-CH-, 1,80-2,41, m, 4H, Pro - CH2CH2, 3,16, m, 2H, 0 - CH2- CH -, 3,43-3,89, m, 3H, Pro - NCH2,

ø - CH2- CH -, 4,41, m, 1H, Pro a CH, 4,61, m, 1H, CH3- CH -, 7,24, m, 5H, aryl - H, SH, NH, C00H, i løsningsmiddel-blindtopp.

Eksempel 2

<1>H-NMR-data (CDC1-)

5 = 1,15, d, J=7Hz, 3H, CH3- CH -, 1,77-2,39, m, 4H, Pro CH2CH2-, 2,05, d, J=10Hz, SH, 3,13, m, 2H, 0 - CH2- CH -, 3,43, m, 1H, 0 - CH2- CH -, 3,63, m, 2H, Pro-N-CH2". 4,55, m, 1H, Pro a H, 4,77, m, 1H, CH3- CH -, 7,25, m, 5H, aryl-H, 8,93, s, bred,

COOH.

Eksempel 4

<1>H-NMR-data (CD3OD)

6 = 1,35, d, 3H, J=7Hz, £H3- CH -, 1,81-2,52, m, 4H, Pro-CH2CH2-, 3,17, s, 2H, S CH2- C, 3,69, m, 2H, Pro N - CH2, 0 , 4,47, m, 1H, Pro a - CH-, 4,64, qu, 1H, J=7Hz, CJ£3- CH -, Sfl, NH og COOH i løsningsmiddel-blindtopp.

Eksempel 5

<1>H-NMR-(CD3OD)

5 = 1,32, d, J=7Hz, 3H, CH3- CH -, 1,77-2,45,m, 4H, Pro - CH2CH2, 3,65, m, 2H, Pro - N - CH2, 4,48, m, 1H, Pro a CH-, 4,66, m, 1H, CH3-£H-, 4,82, s, 1H, 0 - QE~, 7,24-7,59, m, 5H, aryl-H, SH, NH, COOH i løsningsmiddel-blindtopp.

Eksempel 6

5 = 1,35, d, 3H, CH3-CH-, J=7Hz, 2,08, m, 2H, 0 - CH2- £H2-, 1,80-2,44, m, 4H, Pro - CH2- CH2-. 2.72, m, 2H, 0 - CJi2-, 3,26, m, 1H, 0 - CH2CH2- CH -, 3,65, m, 2H, Pro - NCH2-, 4,50, m, 1H, Pro a CH-, 4,77, m, 1H, CH3- £H~, 7,23, m, 5H, aryl-H, 7,50, m, 1H, NH, 8,96, S, 2H, SH p COOH.

Eksempel 7

<1>H-NMR-data (CDC1_)

5 = 1,28, d, J=7Hz, 6H, CH3- CH -, 1,66-2,51, m, 8H, Pro - CH2CH2-, 3,06, m, 4H, 0 - CH_2- CH -, 3,33-4,01, m, 6H, Pro - NCH2, 0 - CH2- CH -, 4,42, m, 2H, Pro a CH, 4,75, m, 2H, CH3- CH -, 6,75, s, 2H, COOH, 7,21, m, 10H, aryl-H, 7,50, d, J=8Hz, 2H, NH.

Eksempel 8 - Tittelforbindelse

<1>H-NMR-data (CDC13)

5 = 1,20, s, 9H, C(CH3)3, 1,34, d, J=7Hz, 3H, CH3- CH -, 1,96, d, J=10Hz, 1H, SH, 1,82-2,42, m, 4H, Pro - CH2CH2-, 2,91-3,81, m, 5H, Pro N-CH2, 0 - CH2- CH -, 4,49, m, 1H, Pro a CH, 4,66, m, 1H, CH3- Qi -, 5,75, m, 2H, - 0 CH2- O, J23, m, 6H, 5 aryl-H,

NH.

Eksempel 8 - N-[N-3-fenyl-2-S-pivaloyloksymetylmerkaptopropa-noyl)-S-alanyl]-S-tiazolidin-4-karboksylsyre<1>H-NMR-data (CDCl3) 6 = 1,16, s, 9H, C(CH3)3, 1,21, s, 9H, C(CH3)3, 1,33, d, J=7Hz, 3H, CH3- CH -, 1,78-2,43, m, 4H, Pro - CH2CH2, 3,14, m, 2H,

0 - CH2- CH -, 3,34-3,89, m, 3H, 0 - CH2- CH - , Pro - N CH2, 4,36-4,89, m, 2H, Pro a CH, CH3- £H_ -, 5,75, m, 2H, 0 CH2- 0, 7,14, d, J=8Hz, 1H, NH, J23, m, 5H, aryl-H.

Eksempel 12

<1>H-NMR-data (CDC13)

5 = 1,34, d, J=7Hz, 3H, CH3- CH -, 1,97, d, J=10Hz, 1H, SH, 1,71-2,43, m, 8H, Pro CH2CH2, 2,84-4,00, m, 7H, Pro N CH2,

0 - CH2- £H -, 4,26-4,96, m, 3H, Pro a CH, CH3- £H -, 6,20, s, 2H, NH, COOH, 7,26, m, 5H, aryl-H.

Eksempel 13

<1>H-NMR-data (CDC13)

6 = 1,35, d, J=7Hz, 3H, CH3- CH -, 2,03, d, J=10Hz, 1H, SH, 3,20, m, 2H, 0 - CH2- CH -, 3,27, d, 2H, S - C_E2- CH -, J=7Hz, 3,50, m, 1H, 0 - CH2- £H -, 4,72, m, 2H, N - CH2- S, 4,77, m, 1H, CH3- CH -, 5,10, t, J=7Hz, S CH2- CH - , 6,52, s, 1H, COOH, 7,27, m, 5H, aryl-H, 7,78, d, J=8Hz, 1H, NH.

Eksempel 14

<1>H-NMR-data (CD30D)

6 = 1,33, d, J=7Hz, 3H, CH3- CH -, 2,50-3,91, m, 7H,

0 -CH2- CH -, - £H2- CH2-, 4,99, m, 1H, CH3- CH -, 5,85, S, 1H, N - CH - C=0, 6,84, d, 1H, tiofen 4H, 7,34, d, 1H, tiofen 5H, 7,18, m, 5H, aryl-H, SH, NH, COOH i løsningsmiddel-blindtop.

Eksempel 15

1H-NMR-data (CDC13> 6 = 1,34, d, J=7Hz, 3H, CH3- CH -, 2,02, d, J=9Hz, 1H, SH, 2,72-4,43, m, 7H, 0 -<C>H2<-><£>H -, - CH2"CH2-, 5,00, m, 1H,

CH3- CH -, 5,91, s, 1H, CH - COOH, 7,23, m, 9H, aryl-H, tiofen-H, NH, COOH.

Eksempel 16

<1>H-NMR-data (CDCl )

6 = 1,61, d, 3H, J=7,0Hz, CH-, - CH -, 1,77-2,39, m, 4H, Pro - CH2CH2-, 3,24, m, 2H, 0 - C_H2 - CH -, 3,58, m, 2H, Pro - N CH2, 4,47, m, 1H, 0 - CH2CH -, 4,53, m, 1H, Pro a - CH -, 4,75, m, 1H, CH3- £H -, 7,02-8,00, m, 10H, 2-aromater, 8,50, s, 1H, COOH.

Eksempel 17

<1>H-NMR-data (CDCl.)

5 = 1,17, s, 9H, C(CH3)3, 1,26, d, 3H, J=7Hz, £H3- CH -, 1,82-2,27, m, 4H, Pro - CH2CH2-, 3,14, m, 2H, 0 - CH2- CH -, 3.57, m, 2H, Pro N - CH2-, 4,19, m, 1H, 0 - CH2-£H -, 4,50, m, 1H, Pro a - CH -, 4,73, m, 1H, CH3- CH - , 6,98, d, 1H, J=8Hz, -NH, 7,21, m, 5H, aryl-H, 8,30, s, 1H, COOH.

Eksempel 18

<1>H-NMR-data (CDCl.)

6 = 1,21, s, 9H, C(CH3)3, 1,23, d, 3H, J=7Hz, CH3- CH -, 1,77-2,27, m, 4H, Pro CH2CH2-, 2,30, s, 3H, CH3- C=0, 3,15, m, 2H, 0 - £H2- CH -, 3,58, m, 2H, Pro - N CH2-, 4,15, m, 1H, 0 - CH2- CH -, 4,48, m, 1H, Pro a CH -, 4,67, m, 1H, CH3- CH -, 5,75, m, 2H, - O - CH2- 0 -, 6,92, d, 1H, J=8Hz, NH, 7,23, m, 5H, aryl-H.

Eksempel 19

<1>H-NMR-data (CDC13)

6 = 1,19, s, 9H, C(CH3)3, 1,31, d, 3H, Cfi3 - CH -, J=7Hz, 1,80-2,34, m, 4H, Pro - CH2CH2-, 3,26, m, 2H, 0 - CH2- CH -, 3.58, m, 2H, Pro - N CH2-, 4,48, m, 1H, 0 - CH2- CH -, 4,50, m, 1H, Pro a CH -, 4,73, m, 1H, CH3- CH -, 7,00, d, 1H, J=7Hz, NH-, 5,76, m, 2H, 0 CH2- 0, 7,27, m, 5H, aryl-H, 7,34-8,02, m, 5H, 0 - C - H. 0

Eksempel 20

<1>H-NMR-data (CDC13)

5 = 1,16, s, 9H, C(CH3)3, 1,20, s, 9H, C(CH3)3, 1,27, d, 3H, J=7Hz, CJi3- CH -, 1,82-2,32, m, 4H, Pro CH2CH2, 3,16, m, 2H, Phc - CH2CH -, 3,57, m, 2H, Pro N CH2-, 4,16, m, 1H,

0 - CH2- CH"r 4,48, m, 1H, Pro a CH -, 4,71, m, 1H, CH3- CH -. 5,76, m, 2H, 0 CH2- 0, 6,82, d, 1H, J=8Hz, NH, 7,22, m, 5H, aryl-H.

Eksempel 21

<1>H-NMR-data (CDC13)

6 = 1,31, d, 3H, J=7Hz, CH - CH -, 1,16-2,11, m, 8H, cyklopentyl-CH2, 2,28, s, 3H, CH3- C=0, 3,15, m, 2H, 0 - CH2- CH -, 2,92, m, 2H, N - CH2- C=0, 4,22, m, 1H, cyklopentyl-C_H, 4,26, m, 1H, 0 - CH2- CH -, 4,92, m, 1H, CH3- CH -, 5,61, s, 1H, COOH, 7,18, d, 1H, J=8Hz, NH, 7,24, m, 5H, aryl-H.

Eksempel 22

<1>H-NMR-data (CDC13)

5 = 1,27, d, J=7Hz, 3H, CH3- CH -, 1,73-2,41, m, 4H, Pro - CH2-CH2-, 3,18, d, J=4Hz, 3H, NH - CH_3, 3,21, m, 2H, 0 - CH2- CH -, 3,57, m, 2H, Pro N - CH2, 4,48, m, 1H, Pro a - CH, 4,65, m, 1H, CH3- CH -, 4,48, m, 1H, 0 - CH2- CH -, 7,24, m, 5H, aryl-H, 7,47, d, J=7Hz, NH - CH -, 8,48, qu, J=4Hz, NH - CH3, 8,77, s, 1H, COOH-

Eksempel 23

<1>H-NMR-data (CDC13)

5= 1,11, t, J=7Hz, 3H, CH3- CH2, 1,28, d, J=7Hz, 3H, CH3- CH, 1,77-2,41, m, 4H, Pro CH2CH2, 3,15, m, 2H, 0 - CH2- CH -, 3,23, m, 2H, N - CH2- CH3, 3,56, m, 2H, Pro - N - CH2, 4,18, m, 0 - CH3- CH -, 4,52, m, Pro a CH, 4,73, m, CH3- CH -, 5,65, s, bred, 2 x NH p COOH, 7,23, m, 5H, aryl-H.

<1>H-NMR-data (CDC13)

6 = 1,15, s, 9H, C(CH3)3, 1,22, s, 9H, C(CH3)3, 1,36, d, J=7Hz, 3H, CH_ - CH -, 2,83-3,49, m, 4H, 0 - CH„ - CH -, 3,74, m, 1H, 0 - CH2- CH -, 4,39-4,84, m, 3H, N-CH2"S, CH3- CE - , 5,07, m, 1H, S CH2- CH -, 5,76, m, 2H, O CH2- 0, 7,23, m, 6H, aryl-H,

NH.

Rf = 0,48 (eddikester, n-heksan = 1:1).

<1>H-NMR-data (CDC13)

5 = 1,05, d, J=7Hz, 3H, CH_3- CH -, 2,08, d, J=10Hz, 1H, SH, 1,59-2,25, m, 4H, Pro - CH„CH„, 2,84-3,93, m, 7H, Pro - N CH,, COOH i 0 - CH2 - CH -, 0 - CH2- CH , 4,46-4,99, m, 3H, Pro a CH, CH3- CH -, 0 - CH2- CH - COOH, 7,24, m, 12H, aryl-H, NH, COOH, 7,75, d, J=8Hz, NH.

<1>H-NMR-data (CDC13)

6 = 0,86, d, J=7Hz, 6H, isobutyl-CH3, 1,32, d, J=7Hz, 3H, CH3- CH -, 2,09, d,J=10Hz, 1H, SH, 1,71-2,70, m, 5H, Pro - CH2CH2, isobutyl - CH(CH3)2, 3,14, m, 2H, 0 -C]J2- CH -, 3,41-4,00, m, 3H, Pro - N CH2, 0 - CH2- £H - , 4,34-4,99, m, 3H, Pro a CH, CH- - £H_ -, isobutyl - CH, 6,58, s, 1H, COOH, 7,22, m,

CH-

5H, aryl-H, 7,53, d, J=10Hz, 1H, HH - CH , 7,75, d, J=8Hz, 1H, NH - isobutyl.

<1>H-NMR-data (CD30D)

5 = 1,30, d, J=7Hz, 3H, CH3- CH -, 1,78-2,40, m, 4H, Pro CH2CH2, 2,90-3,42, m, 2H, 0 - CH„ - CH -, 3,56, m, 2H, Pro N-CH,, 4,27-4,84, m, 3H, Pro a CH, 0 - CH2- £H -, CH3- £H -, 7,27, m, 5H, aryl-H, 7,73, d, J=8Hz, 1H, orto-aryl-H, 8,08, dd, J=8Hz, 3Hz, 1H, orto/meta-aryl-H, 8,57, d, J=3Hz, 1H, meta-aryl-H, NH_2, NH, COOH i løsningsmiddel-blindtopp.

<1>H-NMR-data (CDC13)

6 = 1,33, d, J=7Hz, 3H, CH_3- CH -, 2,02, d, J=10Hz, 1H, SH, 2,00-2,50, m, 2H, Pro p - CH2-, 2,84-3,66, m, 3H,

0 - CH2- £H -,3,48-3,89, m, 2H, Pro - N- CH2, 4,50, m, 2H, Pro a - CH, CH - OH, 5,40, s, bred, OH, COOH, 7,24, m, 5H, aryl-H, 7,46, d, J=8Hz, 1H, NH.

R^= 0,23 (kloroform, metanol, iseddik = 90:10:5).

<1>H-NMR-data (CDC13)

6 = 1,34, d, 3H, J=7Hz, £H-. - CH -, 1,34-1,99, m, 8H, cyklopentyl - CH2-, 2,00, d, J=10Hz, SH, 3,16, m, 2H, 0 - Cfi2- CH -, 3,53,

m, 1H, 0 - CH2- CH -, 3,92, m, 2H, N - CH2- C=0, 4,28, m, 1H, cyklopentyl-CH, 4,99, m, 1H, CH3-CJ3 -, 5,91, s, 1H, COOH, 7,24, m, 5H, aryl-H, 7,46, d, 1H, J=8Hz, NH.

Rf = 0,63 (kloroform, metanol, iseddik = 90:10:S).

<1>H-NMR-data (CDClg)

6 = 1,23, d, (3H), J=7Hz, CH_3- CH -, 1,76-2,31, m, 4H, Pro

- CH2-CH2, 2,16, s, 3H, CH3- C =, 2,31, s, 3H, CH3- C - „

3,13, m, 2H, 0 - CH2, 3,58, m, 2H, Pro N - CH2-, 4,24, m, 1H,

0 - CH2- CH -, 4,48, m, 1H, CH3- CH -, 4,58, m, 1H, Pro a CH -, 4,78, m, 2H, 0 - CH2-, 6,87, d, 1H, J=7,5Hz, NH, 7,23, m, 5H, aryl-H.

Rf = 0,17 (eddikester, heksan = 2:1).

<1>H-NMR-data (CDCl )

5 = 1,19, s, 9H, C(CH3)3, 1,32, d, J=7Hz, 3H, CH3 - CH -, 2,30, s, 3H, CH3 - C=0, 3,11, m, 2H, 0 - CR2- CH -, 3,22, m, 2H, S - £H2- CH -, 4,12, m, 1H, 0 - CH2- £H -, 4,59, m, 2H, N - CH2- S -, 4,64, m, 1H, CH3- CH - , 5,07, m, 1H, N - £h - C=0, 5,74, m, 2H, 0 CH2- 0, 6,86, d, J=8Hz, 1H, NH, 7,18, m, 5H, aryl-H.

R, = 0,35 (eddikester, n-heksan = 1:1)

<1>H-NMR-data (CDCl_)

5 = 1,32, d, 3H, J=7Hz, CH3- CH -, 2,30, s, 3H, CH3 - C=0, 3,14, m, 2H, 0 - CH2- CH -, 3,25, d, 2H, J=6Hz, S CJ32 - CH -, 4,25, m, 1H, 0 - CH2- SB -, 4,65, m, 2H, N - £H2- S, 4,78, m, 1H, CH3- CH -, 5,07, t, 1H, J=6Hz, N - CH - C00, 7,16, d, 1H, J=8Hz, NH, 7,20, m, 5H, aryl-H, 8,48, s, 1H, COOH.

Rf = 0,47 (kloroform, metanol, iseddik = 90:10:5).

<1>H-NMR-data (CDC13)

6 = 1,30, d, J=7Hz, 3H, CH3- CH -, 2,09, d, J=10Hz, 1H, SH, 2,48-3,81, m, 5H, 0 - CH2- CH -, CH2- C=0, 4,13, m, 2H, N - CH2, 4,64, m, 1H, CH3- CH -, 4,99, m, 1H, CH - COOH, 7,24, m, 5H, aryl-H, 7,57, d, J=8Hz, 1H, NH, 9,69, s, 1H, COOH.

Rf = 0,34 (kloroform, metanol, iseddik = 120:5:2).

<1>H-NMR-data (CDC13) I

5 = 1,31, d, 3H, J=7Hz, £H^ - CH -, 2,05, d, 1H, J=10Hz, SH, 2,35, d, 2H, J=7Hz, Pro - CH_2 - CH -, 3,19, m, 2H, 0 -

CH2- CH -, 3,27, s, 6H, 2 0 CH3, 3,50, m, 1H, 0 - CH2- CH -, 3,68, m, 2H, Pro - N - CH2, 4,59, m, 1H, Pro a - CH -, 4,70, m, 1H, CH3- £H -, 5,95, s, bred, 2H, NH m COOH, 7,23, m, 5H, aryl-H.

Rf = 0,49 (kloroform, metanol, iseddik = 90:10:5).

<1>H-NMR-data (CDC13)

6 = 1,30, d, J=7Hz, 3H, CH3- CH -, 2,02, d, J=10Hz, 1H, SH, 2,67, m, 2H, Pro - CH2- CH -, 3,15, m, 2H, 0 CH2 - CH -, 3,36, S, 4H, - S CH2CH2-S-, 3,55, m, 1H, 0 - CH2- CH 4,00, m, 2H, Pro - N - CH2-, 4,14, m, 2H, CH3- CH -, Pro a - CH -, 7,23, m, 5H, aryl-H, 7,41, d,J=8Hz, 1H, NH, 7,56, s, 1H, COOH.

Rf = 0,5 (kloroform, metanol, iseddik = 90:10:5).

<1>H-NMR-data (CDCl )

5 = 1,18 (s, 9H, C(CH3)3, 1,34, d, J=7Hz, 3H, CH^ - CH -, 1,99, d, J=10Hz, 1H, S H, 2,93-3,77, m, 5H, 0 - CH2- CH

S CH2- CH -, 4,41-4,84, m, 3H, N - CH2- S, CH3- CH -, 5,07, m, 1H, S - CH2- CH -, 5,77, m, 2H, 0 CH2- 0, 7,07, d, J=9Hz, 1H, NH, 7,23, m, 5H, aryl-H.

Rf = 0,33 (eddikester, n-heksan = 1:1).

Farmasøytiske anvendelseseksempler

a) Dragéer

Fremstilling:

Blandingen av virkesubstansen med melkesukker og maisstivelse granuleres med en 10 % iq vandig gelatin-løsning gjennom en sikt med 1 mm maskevidde, tørkes ved 40°C og rives igjen gjennom en sikt. Det derved erholdte granulat blandes med magnesiumstearat og presses. De derved erholdte kjerner over-trekkes på vanlig måte med en omhylling som påføres ved hjelp av en vandig suspensjon av sukker, titandioksyd, talkum og gummi arabikum. De ferdige dragéer poleres med bivoks.

b) Tabletter

Fremstilling:

Virkestoff og magnesiumstearat granuleres med en vandig løsning eller løselig stivelse, granulatet tørkes og blandes grundig med melkesukker og maisstivelse. Blandingen presses deretter til tabletter med 230 mg vekt, som inneholder hver 100 mg virkestoff.

c) Inieksionslflsninger

Fremstilling

Virkestoffer og hjelpestoffene oppløses i en tilstrekkelig mengde destillert vann og bringes med den nødvendige mengde vann til den ønskede konsentrasjon. Løsningen filtreres og fylles under aseptiske betingelser 2 ml ampuller. Ampullene sterili-seres og lukkes. Hver ampulle inneholder 5 mg virkestoff.

d) Kapsler

Virkestoff, melkesukker og maisstivelse blandes først i

mikser og så i en knusemaskin. Blandingen bringes igjen i mikseren, blandes grundig med talkum og fylles maskinelt i hårgelatin-kapsler.

e) Suppositorier

Kakaosmør av karnaubavoks smeltes, blandes grundig og avkjøles til 45°C. Denne massen rører det finpulveriserte virkestoff inn. Deretter helles blandingen i svakt forut avkjølte suppositorieformer av en størrelse og får avkjøles.

Claims

1. Fremgangsmåte for fremstilling av terapeutisk aktive nye aminosyrederivater med den generelle formel

hvori R1 betyr H, fenyl, benzyl, fenetyl; R2 betyr H, acetyl, benzoyl, 3-sulfonamido-4-klor-benzoyl, 3-sulfonamido-4-klor-6-hydroksy-benzoyl, 3-sulfonamido-4-klor-5-[(furyl)-amino]-benzoyl, 2,3-diklor-4-(p-fenyl-akryloyl ) -f enoksy-acetyl , pivaloyl, Cj -C2 -alkylaminokarbo-nyl, C1 -C2 -alkylaminokarbonyl, Cj-C2 -alkylaminotiokarbonyl, pivaloylmetoksy eller resten

A resten av en av a-aminosyrene

eller

R3 hydrogen, Cj -C^ -alkyl, rettkjedet eller forgrenet, C5~ C7 -cykloalkyl, hvorunder en fenylring kan være kondensert på, fenyl, fenyl-Cj -C4~alkyl, en hetero-C^-C4 -alkylrest, hvorunder heterocyklusen består av en 5- eller 6-ring med 1 til 2 av heteroatomene 0, S eller N, R4 hydrogen, Cj -C^-alkyl, rettkjedet eller forgrenet, fenyl, fenyl-C1 -C4~ alkyl eller en hetero-C1 -C4 -alkylrest, hvorunder heterocyklusen består av en 5- eller 6-ring med 1 til 2 av heteroatomene 0, S eller N, R3 og R^ danner sammen med N- og C-atomet en 5-, 6- eller 7-leddet ring som kan være mettet eller inneholde en dobbelt binding og eventuelt er substituert med okso, dimerkaptoetylen eller en eller to hydroksy eller metoksygrupper, eller en 4-, 5- eller 6-leddet ring, som inneholder ett eller to ytterligere av heteroatomene 0, S eller N; R5 OH, C1 -C4 -uj-hydroksyalkyl, C1 -C4 -alkoksy, fenyl-Cj -C^-alkoksy, C^ -C^ -alkylamino, Cj -C4 -dialkylamino, en av gruppene

eller en a-aminosyre som peptidaktig er forbundet med molekylets CO-gruppe; R6 C1 -C4~ alkyl, C1 -C^ -alkenyl, Cj -C3 -alkinyl, rettkjedet eller forgrenet hydroksy, nitro, amino, C1 -C4 -alkoksy, merkapto, C.|-C4-alkyltio, hydroksy-Cj -C4~ alkyl, merkapto-Cj-C4~alkyl, F, Cl, Br, amino-C1 -C4 -alkyl, sulfonamido, metylendioksy, fl uor-Cj -C^ alkyl, klor-Cj -C4~ alkyl, brom-C1 -C4~ alkyl, cyano eller trifluormetyl; R^ hydrogen eller metyl; Rg C1 -C4~ alkyl, rerttkjedet eller forgrenet, hvorunder alkylresten kan være substituert med F, Cl, Br, CF3 , fenyl eller pyridyl; X, Y og Z 0, S, CR1Q , CHR1Q ,

med det forbehold at bare en av restene X, Y og Z kan bety 0, S

en eller to av restene X, Y og Z NRg; Rg hydrogen eller C^ -C^ -alkyl, rettkjedet eller forgrenet; R1Q hydrogen, eller sammen med en vicinalt stående rest R1Q en fenylring, eller, for m og n = 1, dens dihydroform med dobbeltbinding i konjugasjon til den C-terminale karboksygruppe og m og n 0,1 eller 2, hvorunder summen av m og n er 1 eller 2, og deres salter og dimere forbindelser, karakterisert ved at mana) kondenserer en syre med den generelle formel

hvoriR^ og R2 har den ovenfor angitte betydning, med et dipeptid med den generelle formel

hvori A har den ovenfor angitte betydning, eller at man b) kondeserer en forbindelse med den generelle formel

hvori R.j og R2 har den ovenfor angitte betydning, med en aminosyre A, hvorunder A har den ovenfor angitte betydning, eller at man c) omsetter en forbindelse med den generelle formel hvori og A har den ovenfor angitte betydning, med en merkapto-forbindelse med den generelle formel

hvori R2 har den ovenfor angitte betydning, d) kondenserer en forbindelse med den generelle formel

hvori R1 har den ovenfor angitte betydning, med en aminosyre A, hvorunder A har den foran angitte betydning, og omsetter den således erholdte kondensasjonsprodukt med den generelle formel V med en merkapto-forbindelse med den generelle formel VI, e) omvandler en forbindelse med formel I hvori R2 er acetyl eller benzoyl i en forbindelse med formel I hvori R^ betyr hydrogen ved forsåpning med basiske midler, f) omvandler en forbindelse med formel I hvori R2 er hydrogen ved omsetning med en forbindelse B-R2 , hvori R2 er en annen betydning enn hydrogen, og B er en lett avspaltbar gruppe, for eksempel klor, brom, i en forbindelse med formel I, hvori R2 har ovennevnte betydning unntatt hydrogen, idet omsetningen hensiktsmessig utføres i nærvær av et syrebindende middel (for eksempel en base eller et alkalikarbonat), og at eventuelle tilstedeværende beskyttelses-grupper avspaltes på et egnet trinn i fremgangsmåtene a), b), c), d), e) eller f), og man eventuelt overfører et således erholdt sluttprodukt med den generelle formel I i et salt, eller overfører et således erholdt sluttprodukt med den generelle formel I hvori R^ er -OH i en ester med formel I, eller for fremstilling av dimere forbindelser med den generelle formel I, hvori R2 betyr gruppen

og de øvrige rester har de foran angitte betydninger, behandler en forbindelse med den generelle formel I, hvori R^ betyr hydrogen, med et oksydasjonsmiddel, og at man eventuelt overfører en således fremstilt dimer forbindelse i et salt.

2. Fremgangsmåte ifølge krav 1 ved fremstilling av forbindelser med formel I hvori R1 betyr H, fenyl, benzyl eller fenetyl, R2 betyr H, acetyl eller 3-sulfonamido-4-klor-benzoyl og A betyr prolin, og deres salter, karakterisert ved at man anvender tilsvarende substituerte utgangsmaterialer.

3. Fremgangsmåte ifølge krav 1 ved fremstilling av N-[N-(3-fenyl-2-S-merkaptopropanoyl)-S-alanyl]-S-prolin og dets salter, karakterisert ved at man anvender tilsvarende substituerte utgangsmaterialer.

4. Fremgangsmåte ifølge krav 1 ved fremstilling av forbindelser ifølge krav 1 til 3, hvori de asymmetriske karbonatomer foreligger i S-konfigurasjon, karakterisert ved at man anvender tilsvarende substituerte utgangsmaterialer. Sammendrag Nye aminosyrederivater med den generelle formel

hvori R1 betyr H, fenyl, benzyl, fenetyl; R2 betyr H, acetyl, benzoyl, 3-sulfonamido-4-klor-benzoyl, 3-sulfonamido-4-klor-6-hydroksy-benzoyl, 3-sulfonamido-4-klor-5-t(furyl)amino]--benzoyl, 2,3-diklor-4-(p-fenyl-akryloyl)-fenoksy-acetyl, pivaloyl, C1 -C2 -alkylaminokarbonyl, C1 -C2 -alkylaminokarbonyl, C1 -C2 -alkylaminotiokarbonyl, pivaloylmetoksy eller resten

A resten av en av a-aminosyrene

R3 hydrogen, Cj-C^-alkyl, rettkjedet eller forgrenet, Cg-C^ -cykloalkyl, hvorunder en fenylring kan være kondensert på, fenyl, fenyl-C^C^-alkyl, en hetero-Cj-C^ -alkylrest, hvorunder heterocyklusen består av en 5- eller 6-ring med 1 til 2 av heteroatomene 0, S eller N, R4 hydrogen, C^ -C^ -alkyl, rettkjedet eller forgrenet, fenyl, fenyl-C1 -C4 -alkyl eller en hetero-Cj-C^ -alkylrest, hvorunder heterocyklusen består av en 5- eller 6-ring med 1 til 2 av heteroatomene 0, S eller N, R3 og R4 danner sammen med N- og C-atomet en 5-, 6- eller 7-leddet ring som kan være mettet eller inneholde en dobbelt binding og eventuelt er substituert med okso, dimerkaptoetylen eller en eller to hydroksy eller metoksygrupper, eller en 4-, 5- eller 6-leddet ring, som inneholder ett eller to ytterligere av heteroatomene 0, S eller N; R5 OH, C1-C4-u)-hydroksyalkyl, C1 -C4 -alkoksy, fenyl-Cj -C4 -alkoksy, C^^-alkylamino, C1 -C4 -dialkylamino, en av gruppene

eller en a-aminosyre som peptidaktig er forbundet med molekylets C0-gruppe; Rc C.-C.-alkyl, C.-C,-alkenyl, C.-C_-alkinyl, rettkjedet eller forgrenet b 1 4 1 J 1 J hydroksy, nitro, amino, C^ -C^ -alkoksy, merkapto, C1 -C4 -alkyltio, hydroksy-Cj -C^ -alkyl, merkapto-C1 -C4 -alkyl, F, Cl, Br, amino-C^ -C4-alkyl, sulfonamido, metylendioksy, fluor-C1 -C4 -alkyl, klor-C.j -C^ alkyl, brom-C^ -C^ -alkyl, cyano eller trifluormetyl; R 7 hydrogen eller metyl; Ro C.-C.-alkyl, rettkjedet eller forgrenet, hvorunder alkylresten 0 14 kan være substituert med F, Cl, Br, CF^ , fenyl eller pyridyl; X, Y og Z 0, S, CR1Q , CER^,

med det forbehold at bare en av restene X, Y og Z kan bety 0, S

en eller to av restene X, Y og Z NR^ ; R9 hydrogen eller Cj-C^alkyl, rettkjedet eller forgrenet; R10 hydrogen, eller sammen med en vicinalt stående rest R1Q en fenylring, eller, for m og n = 1, dens dihydroform med dobbeltbinding i konjugasjon til den C-terminale karboksygruppe og m og n 0,1 eller 2, hvorunder summen av m og n er 1 eller 2, og deres salter og dimere forbindelser. Fremstilling av forbindelsene er beskrevet. Forbindelsene har en sterk angiotensin-I-konverterings-enzym-hemning og kan anvendes som hypotensive midler.