NO742274L - - Google Patents
Info
- Publication number
- NO742274L NO742274L NO742274A NO742274A NO742274L NO 742274 L NO742274 L NO 742274L NO 742274 A NO742274 A NO 742274A NO 742274 A NO742274 A NO 742274A NO 742274 L NO742274 L NO 742274L
- Authority
- NO
- Norway
- Prior art keywords
- approx
- tissue
- solution
- trichloroacetic acid
- hematoxylin
- Prior art date
Links
- WSFSSNUMVMOOMR-UHFFFAOYSA-N Formaldehyde Chemical compound O=C WSFSSNUMVMOOMR-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 42
- WZUVPPKBWHMQCE-UHFFFAOYSA-N Haematoxylin Chemical compound C12=CC(O)=C(O)C=C2CC2(O)C1C1=CC=C(O)C(O)=C1OC2 WZUVPPKBWHMQCE-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 40
- 239000000243 solution Substances 0.000 claims description 27
- JIAARYAFYJHUJI-UHFFFAOYSA-L zinc dichloride Chemical compound [Cl-].[Cl-].[Zn+2] JIAARYAFYJHUJI-UHFFFAOYSA-L 0.000 claims description 26
- OKKJLVBELUTLKV-UHFFFAOYSA-N Methanol Chemical compound OC OKKJLVBELUTLKV-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 24
- 238000000034 method Methods 0.000 claims description 20
- YNJBWRMUSHSURL-UHFFFAOYSA-N trichloroacetic acid Chemical compound OC(=O)C(Cl)(Cl)Cl YNJBWRMUSHSURL-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 17
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Substances O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 14
- 239000011592 zinc chloride Substances 0.000 claims description 13
- 235000005074 zinc chloride Nutrition 0.000 claims description 13
- 238000007654 immersion Methods 0.000 claims description 8
- 239000000203 mixture Substances 0.000 claims description 6
- 238000010186 staining Methods 0.000 claims description 5
- AXDJCCTWPBKUKL-UHFFFAOYSA-N 4-[(4-aminophenyl)-(4-imino-3-methylcyclohexa-2,5-dien-1-ylidene)methyl]aniline;hydron;chloride Chemical group Cl.C1=CC(=N)C(C)=CC1=C(C=1C=CC(N)=CC=1)C1=CC=C(N)C=C1 AXDJCCTWPBKUKL-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 4
- YQGOJNYOYNNSMM-UHFFFAOYSA-N eosin Chemical group [Na+].OC(=O)C1=CC=CC=C1C1=C2C=C(Br)C(=O)C(Br)=C2OC2=C(Br)C(O)=C(Br)C=C21 YQGOJNYOYNNSMM-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 4
- XGZVUEUWXADBQD-UHFFFAOYSA-L lithium carbonate Chemical compound [Li+].[Li+].[O-]C([O-])=O XGZVUEUWXADBQD-UHFFFAOYSA-L 0.000 claims description 4
- 229910052808 lithium carbonate Inorganic materials 0.000 claims description 4
- 229940037003 alum Drugs 0.000 claims description 3
- 239000007864 aqueous solution Substances 0.000 claims description 3
- 239000000994 contrast dye Substances 0.000 claims description 2
- WSFSSNUMVMOOMR-NJFSPNSNSA-N methanone Chemical compound O=[14CH2] WSFSSNUMVMOOMR-NJFSPNSNSA-N 0.000 claims description 2
- LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N Ethanol Chemical compound CCO LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 19
- 210000001519 tissue Anatomy 0.000 description 18
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 description 8
- PEDCQBHIVMGVHV-UHFFFAOYSA-N Glycerine Chemical compound OCC(O)CO PEDCQBHIVMGVHV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 7
- 239000012153 distilled water Substances 0.000 description 6
- 239000000834 fixative Substances 0.000 description 5
- QTBSBXVTEAMEQO-UHFFFAOYSA-N Acetic acid Chemical compound CC(O)=O QTBSBXVTEAMEQO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- CTQNGGLPUBDAKN-UHFFFAOYSA-N O-Xylene Chemical compound CC1=CC=CC=C1C CTQNGGLPUBDAKN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 210000004027 cell Anatomy 0.000 description 4
- 239000008096 xylene Substances 0.000 description 4
- LRHPLDYGYMQRHN-UHFFFAOYSA-N N-Butanol Chemical compound CCCCO LRHPLDYGYMQRHN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 239000000975 dye Substances 0.000 description 3
- 235000011187 glycerol Nutrition 0.000 description 3
- KFZMGEQAYNKOFK-UHFFFAOYSA-N Isopropanol Chemical compound CC(C)O KFZMGEQAYNKOFK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 229960000583 acetic acid Drugs 0.000 description 2
- 238000003745 diagnosis Methods 0.000 description 2
- 239000012362 glacial acetic acid Substances 0.000 description 2
- 229910000474 mercury oxide Inorganic materials 0.000 description 2
- UKWHYYKOEPRTIC-UHFFFAOYSA-N mercury(ii) oxide Chemical compound [Hg]=O UKWHYYKOEPRTIC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- OXNIZHLAWKMVMX-UHFFFAOYSA-N picric acid Chemical compound OC1=C([N+]([O-])=O)C=C([N+]([O-])=O)C=C1[N+]([O-])=O OXNIZHLAWKMVMX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 238000004321 preservation Methods 0.000 description 2
- BDERNNFJNOPAEC-UHFFFAOYSA-N propan-1-ol Chemical compound CCCO BDERNNFJNOPAEC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 239000012192 staining solution Substances 0.000 description 2
- 238000003860 storage Methods 0.000 description 2
- WZUVPPKBWHMQCE-XJKSGUPXSA-N (+)-haematoxylin Chemical compound C12=CC(O)=C(O)C=C2C[C@]2(O)[C@H]1C1=CC=C(O)C(O)=C1OC2 WZUVPPKBWHMQCE-XJKSGUPXSA-N 0.000 description 1
- HZLHRDBTVSZCBS-GHTYLULLSA-N 4-[(z)-(4-aminophenyl)-(4-imino-3-methylcyclohexa-2,5-dien-1-ylidene)methyl]-2-methylaniline;hydrochloride Chemical compound Cl.C1=CC(=N)C(C)=C\C1=C(C=1C=C(C)C(N)=CC=1)\C1=CC=C(N)C=C1 HZLHRDBTVSZCBS-GHTYLULLSA-N 0.000 description 1
- WZUKKIPWIPZMAS-UHFFFAOYSA-K Ammonium alum Chemical compound [NH4+].O.O.O.O.O.O.O.O.O.O.O.O.[Al+3].[O-]S([O-])(=O)=O.[O-]S([O-])(=O)=O WZUKKIPWIPZMAS-UHFFFAOYSA-K 0.000 description 1
- 208000019901 Anxiety disease Diseases 0.000 description 1
- 206010028980 Neoplasm Diseases 0.000 description 1
- RZUBARUFLYGOGC-MTHOTQAESA-L acid fuchsin Chemical compound [Na+].[Na+].[O-]S(=O)(=O)C1=C(N)C(C)=CC(C(=C\2C=C(C(=[NH2+])C=C/2)S([O-])(=O)=O)\C=2C=C(C(N)=CC=2)S([O-])(=O)=O)=C1 RZUBARUFLYGOGC-MTHOTQAESA-L 0.000 description 1
- 150000001298 alcohols Chemical class 0.000 description 1
- 239000001063 aluminium ammonium sulphate Substances 0.000 description 1
- 235000011124 aluminium ammonium sulphate Nutrition 0.000 description 1
- LCQXXBOSCBRNNT-UHFFFAOYSA-K ammonium aluminium sulfate Chemical compound [NH4+].[Al+3].[O-]S([O-])(=O)=O.[O-]S([O-])(=O)=O LCQXXBOSCBRNNT-UHFFFAOYSA-K 0.000 description 1
- 230000036506 anxiety Effects 0.000 description 1
- 229940052223 basic fuchsin Drugs 0.000 description 1
- 230000009286 beneficial effect Effects 0.000 description 1
- 230000015572 biosynthetic process Effects 0.000 description 1
- 201000011510 cancer Diseases 0.000 description 1
- 125000004432 carbon atom Chemical group C* 0.000 description 1
- 210000003855 cell nucleus Anatomy 0.000 description 1
- 239000003153 chemical reaction reagent Substances 0.000 description 1
- 238000004140 cleaning Methods 0.000 description 1
- 239000003086 colorant Substances 0.000 description 1
- 239000013078 crystal Substances 0.000 description 1
- 238000012631 diagnostic technique Methods 0.000 description 1
- 238000007598 dipping method Methods 0.000 description 1
- 230000009189 diving Effects 0.000 description 1
- 238000001035 drying Methods 0.000 description 1
- 238000004043 dyeing Methods 0.000 description 1
- -1 for 4 seconds Chemical compound 0.000 description 1
- 239000011521 glass Substances 0.000 description 1
- 230000003993 interaction Effects 0.000 description 1
- 230000036210 malignancy Effects 0.000 description 1
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 description 1
- 239000000463 material Substances 0.000 description 1
- 238000007431 microscopic evaluation Methods 0.000 description 1
- IPSIPYMEZZPCPY-UHFFFAOYSA-N new fuchsin Chemical compound [Cl-].C1=CC(=[NH2+])C(C)=CC1=C(C=1C=C(C)C(N)=CC=1)C1=CC=C(N)C(C)=C1 IPSIPYMEZZPCPY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000003960 organic solvent Substances 0.000 description 1
- 239000012188 paraffin wax Substances 0.000 description 1
- AFAIELJLZYUNPW-UHFFFAOYSA-N pararosaniline free base Chemical compound C1=CC(N)=CC=C1C(C=1C=CC(N)=CC=1)=C1C=CC(=N)C=C1 AFAIELJLZYUNPW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- GRLPQNLYRHEGIJ-UHFFFAOYSA-J potassium aluminium sulfate Chemical compound [Al+3].[K+].[O-]S([O-])(=O)=O.[O-]S([O-])(=O)=O GRLPQNLYRHEGIJ-UHFFFAOYSA-J 0.000 description 1
- 238000011470 radical surgery Methods 0.000 description 1
- 239000012047 saturated solution Substances 0.000 description 1
- 238000007447 staining method Methods 0.000 description 1
- 239000000126 substance Substances 0.000 description 1
- 238000001356 surgical procedure Methods 0.000 description 1
- 238000005406 washing Methods 0.000 description 1
Classifications
-
- G—PHYSICS
- G01—MEASURING; TESTING
- G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
- G01N1/00—Sampling; Preparing specimens for investigation
- G01N1/28—Preparing specimens for investigation including physical details of (bio-)chemical methods covered elsewhere, e.g. G01N33/50, C12Q
- G01N1/30—Staining; Impregnating ; Fixation; Dehydration; Multistep processes for preparing samples of tissue, cell or nucleic acid material and the like for analysis
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A01—AGRICULTURE; FORESTRY; ANIMAL HUSBANDRY; HUNTING; TRAPPING; FISHING
- A01N—PRESERVATION OF BODIES OF HUMANS OR ANIMALS OR PLANTS OR PARTS THEREOF; BIOCIDES, e.g. AS DISINFECTANTS, AS PESTICIDES OR AS HERBICIDES; PEST REPELLANTS OR ATTRACTANTS; PLANT GROWTH REGULATORS
- A01N1/00—Preservation of bodies of humans or animals, or parts thereof
- A01N1/02—Preservation of living parts
- A01N1/0205—Chemical aspects
- A01N1/0231—Chemically defined matrices, e.g. alginate gels, for immobilising, holding or storing cells, tissue or organs for preservation purposes; Chemically altering or fixing cells, tissue or organs, e.g. by cross-linking, for preservation purposes
-
- G—PHYSICS
- G01—MEASURING; TESTING
- G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
- G01N1/00—Sampling; Preparing specimens for investigation
- G01N1/28—Preparing specimens for investigation including physical details of (bio-)chemical methods covered elsewhere, e.g. G01N33/50, C12Q
- G01N1/30—Staining; Impregnating ; Fixation; Dehydration; Multistep processes for preparing samples of tissue, cell or nucleic acid material and the like for analysis
- G01N2001/305—Fixative compositions
Description
Fremgangsmåte for farvning av vev.
Nærværende oppfinnelse vedrorer en histologisk farvnings-metode for vevprover for mikroskopisk undersokelse. Den selektive farvning av vevceller både for å identifisere forskjellige deler av cellen og å skjelne forskjellige typer celler er en velkjent diagnostisk teknikk. Egnede fremgangsmåter for å gi reproduserbare resultater er ofte tidskrevende og besværlige. Ved en typisk ryogen anvendelse folges to hoved-arbeidsmåter. Vevet fryses hurtig og deles i snitt. Disse snitt fikseres f.eks. i formaldehyd eller alkohol, farves med en enkel farve, dekkes med dekkglass og undersokes. Dette
preparat er ikke permanent og har en begrenset levetid på
bare noen få timer. Skjont den tillater en mer eller mindre hurtig undersokelse av vevet, har arbeidsmetoden flere ulemper, av hvilke det forskjellige utseendet for prover fra vanlig mikroskopiske preparater er den storste og hvilket oker vanskeligheten med å oppnå en riktig fortolkning.
For å kunne utfore en mer definitiv mikroskopisk analyse og
et permanent preparat av det originale vev folges en annen arbeidsmåte. Her tines det frosne vev, fikseres, dehydratiseres, behandles med organiske opplosningsmidler, legges ned i parafin og snitt fremstilles. Disse snitt avparafineres i tur og orden, hydratiseres, farves, dehydratiseres og dekkes med dekkglass. Dette gir et permanent mikroskopisk preparat av materialet opprinnelig undersokt ved den temporære kryogene metode.
Som det vil bemerkes er denne arbeidsmåte meget lang og besværlig og dessuten er provene ikke en noyaktig gjengivelse av det originale vev. I tillegg til den mulige skade som er forårsaket av iskrystalldannelse, tapes noe vev i lopet av den kjemiske og fysiske behandling.
Samspillet mellom disse to arbeidsmåter, og deres ledsagende ulemper, kan lettest f .eks. sees i tilfellet av antatt ondartet-het. Typisk vil en vevprove f j ernet fra en pasient i lopet av en under-sokende operasjon gjores til gjenstand for den forste arbeidsmåte for å tillate kirurgen å ta en umiddelbar avgjorelse vedrorende naturen og graden av radikal operasjon. Fremstilling av en permanent mikroskopisk prove for å få bekreftelse på diagnosen kan kreve så meget som 24 timer eller mer, hvilket klart begrenser den mikroskopiske undersokelse av vev som fjernes under operasjon til de mindre definitive temporære preparater da pasienten ikke kan holdes i operasjonssalen i den lange periode som kreves for en permanent fremstilling. Dessuten kjennes ikke endelige resultater fra vevstudier på flere dager og derved okeseller forlenges den naturlige uro hos pasient og familie. Da de prover ved hvilke diagnosen var basert ofte ikke er egnet for oppbevaring, må besværlige preserverings-trinn tas hvis den medisinske tilstand eller hospitale politikk
nodvendiggjor oppbevaring av proven i mer enn noen få dager.
I U.S. patentsoknad Ser. No. 338 732 beskrives et nytt
histologisk fiksativ som består av en opplosning av trikloreddiksyre, sinkklorid og formaldehyd i en vandig lavere alkanol. Dette fiksativ forårsaker minimal skade på .vevcellen,
er lettvint i bruk og kan brukes i forbindelse med en rekke varianter av vevtyper. Det er nå blitt funnet at dette fiksativ kan brukes i en meget forbedret metode ved å farve vevtyper. Den totale farvningsprosess kan utfores i lopet av minutter og de resulterende farvede prover oppviser tilstrek-kelig permanens for å tillate oppbevaring av disse i måneder uten spesielle foranstaltninger.
Prover som skal farves fryses hurtig ved en av de velkjente metoder. Fra det frosne vev fremstilles derpå snitt med en vanlig mikrotom og snittene senkes ned i en fikseringsopplosning som består av en vandig lavere alkanolisk opplosning av trikloreddiksyre, sinkklorid og formaldehyd. Snittet er allerede selvfolgelig tint opp for denne neddykking men fikseres på sekunder. En typisk periode for neddykking er 5 sekunder og skjont denne periode kan forlenges, så blir resul-tatet ikke mer fordelaktig ved en lenger neddykking.
Snittet dykkes deretter ned i en vandig opplosning av
hematoxylin. Hematoxylin er en velkjent farve som kjemisk er 7,llb-dihydrobenz[b]indeno[l,2-d]pyran-3,4,6a,9,10(6H)-pentol. Dette trinn av fremgangsmåten kan utfores i ett trinn eller
to trinn. Ved en utforelsesform senkes snittet ned i opplosningen av hematoxylin inntil farvningen er fullstendig, hvilket vanligvis er fra 10 til 30 sekunder. Ved en annen utforelsesform senkes proven ned for et tidsrom i en forste opplosning av hematoxylin, fjernes og renses med vann og senkes ned i en annen opplosning av hematoxylin. Ved et foretrukket trekk ved denne annen utforelsesform forutgås nedsenkningen av proven i den annen opplosning av hematoxylin ved en kort nedsenkning i en opplosning av litiumkarbonat som virker som en aksellerator. Således dykkes f.eks. snittet fra
fikseringsopplosningen ned i en forste hematoxylinopplosning i ca. 15 sekunder, skylles ved å dyppe den ned i vann, senkes kort ned i en opplosning av litiumkarbonat, f.eks. i 4 sekunder,
og senkes igjen ned i en opplosning av hematoxylin i ca. 5 sekunder. Etter dette er proven fiksert og cellekjernene farvet med en blålig purpurfarve. Proven kan derpå prepareres for montering ved vasking og torking, det siste utfores på
vanlig måte ved etterfølgende neddykking i progressivt mer hydrofile organiske media, f.eks. 95% etanol, absolutt.etanol og xylen.
Hvis onsket kan proven også kontrafarves ved bruk av de
velkjente differensierende farver som f.eks. eosin, en fuchsin slik som rosanilin, pararosanilin, magenta II, magenta III
eller sur fuchsin; pikrinsyre eller lignende.
Som angitt foran består fiksativet av en opplosning av trikloreddiksyre, sinkklorid og formaldehyd i en vandig lavere alkanol. Den lavere alkanol kan være enhver at de velkjente alkoholer
som har fra 1 til 4 karbonatomer som for eksempel metanol, etanol, n-propanol, isopropanol, n-butanol og de forskjellige forgrenede butanoler. Metanol er meget tilfredsstillende og foretrukket ut fra okonomiske betraktninger og opplosningsevne.. Den vandige lavere alkanol vil ha et volumforhold mellom alkohol og vann på ca. 1:1 til 1:3.- Et foretrukket forhold er ca.
1:1.1 til 1:1.5. Opplost i den vandige alkohol er en blanding av trikloreddiksyre, sinkklorid og formaldehyd. Et forhold mellom sinkklorid og trikloreddiksyre, på vektsbasis, er ca.
fra 2:1 til 4:1. Et forhold på 3:1 er meget tilfredsstillende Forholdet mellom formaldehyd og trikloreddiksyre er fra ca.
8:1 til 10:1, et typisk forhold er 9:1.
En foretrukket endelig konsentrasjon er ca. 10% vekt/volum av trikloreddiksyre, sinkklorid og formaldehyd i den vandig lavere alkanol.
Hematoxylinet kan foreligge i enhver av de vanlige former.
Disse omfatter Harris' Hematoxylin, Mayer's Haemalum,
Erlich's Hematoxylin, alunhematoxylinet beskrevet av Lie et al., Mayo Clinic Proceedings, 46 319 (May 1971), og lignende.
Et særlig anvendelig preparat er ett som inneholder hematoxylin, gult mercuryoksyd og aluminium-ammoniumsulfat i vandig glycerin , og denne reagens er generelt kjent som alun-hematoxylin.
Preparater
A. Fikserinqsopplosninq
400 g sinkklorid blandes med 120g trikloreddiksyre og 2.64 1
37% formaldehyd (tilsvarende 1055 g 100% formaldehyd) i 7.3 1
95% metanol (tilsvarende 7 1 100% metanol) og 7 liter vann.
En svak eksotermisk reaksjon inntreffer og etter at opplosningen har gjenvunnet romtemperatur, filtreres den og fylles på
beholder. Denne opplosning som er ferdig for bruk som et vevfiksativ, tilsvarer en 9,8 vekts%/volum opplosning av trikloreddiksyre, sinkklorid og formaldehyd, hvor vektsforhoIdet • av sinkklorid til trikloreddiksyre er ca. 3.33:1 og vektsforholdet mellom formaldehyd og trikloreddiksyre er ca. 9:1,
i vandig metanol hvor volumforholdet mellom alkanol og totalt vann (inklusive det som tilsettes separat, som inneholdes i den 95%'ige metanol og det som er inneholdt i den 37%'ige formaldehyd) er ca. 1:1.3.
B. ( I) farqeopplosning
Til en opplosning av 0.67 g hematoxylin i 33 ml absolutt
etanol tilsettes 33 ml destillert vann, 33 ml glycerol, 3.3 ml iseddik og et overskudd av kalium-aluminium-sulfat. Blandingen rystes godt om og får henstå i flere uker, hvoretter den er ferdig for bruk.
B. ( 2) farqeopplosning
1 gram hematoxylin, 0.5 g gult mercuryoksyd og 12 g aluminium-ammonium-sulfat blandes med 140 ml destillert vann. Denne blanding kokes i 10 minutter, avkjoles og justeres til sitt opprinnelige volum med destillert vann. 60 milliliter glycerin og 8 ml iseddiksyre tilsettes og blandingen filtreres deretter.
C. kontrastfarveopplosninq
Denne kan kjopes som sådan og omfatter vandige opplosninger av eosin, basisk fuchsin, pikrinsyre og lignende.
EKSEMPEL 1
Frosne vevprover deles opp i snitt med en mikrotom til en
tykkelse på ca. 5ju. De individuelle snitt dyppes ned i fiks-seringsopplosningen i tilnærmelsesvis 5 sekunder og deretter i farveopplosningen B(2) i tilnærmet 15 sekunder. Etter ned-dypping i destillert vann i ca. 3 sekunder, dyppes snittene ned i en mettet opplosning av litiumkarbonat i omtrent 4 sekunder og dyppes imidlertid deretter igjen ned i farveopplosning B(2)
i ca. 5 sekunder. Det fikserte og farvede snitt renses derpå
i destillert vann i 3 sekunder og senkes derpå i rekkefolge ned i
.95% etanol, absolutt etanol, xylen nr. 1 og xylen nr. 2,
hver neddykking varer i ca. 2 sekunder, hvoretter snittet dekkes med et dekkglass.
EKSEMPEL 2
Et kontra stfar vet snitt oppnås ifolge. fremgangsmåten i eksempel 1 ved å rense proven med destillert vann i 3 sekunder etter at den er fjernet fra den annen neddykking iB(2) farvnings-opplosningen, senke den ned i 95% etanol i 2 sekunder og derpå dyppe denne ned i en standard eosinopplosning i cai 15 sekunder. Det således differensierte snitt senkes derpå i rekkefolge ned i 95% etanol, absolutt etanol og xylen som beskrevet i eksempel I.
Claims (7)
- Fremgangsmåte for å farve vev for mikroskopisk undersokelse, karakterisert ved at (a) det frosne vev senkes ned i en 8 til 20 vekt s%/volum opplosning av en blanding av trikloreddiksyre, sinkklorid og formaldehyd hvor vektsforholdet mellom sinkklorid og trikloreddiksyre er fra ca. 2:1 til 4:1, og vektsforholdet mellom formaldehyd og trikloreddiksyre er fra ca. 8:1 til 10:1, i en vandig lavere alkanol hvor volumforholdet mellom alkanol og totalt vann er fra ca. 1:1 til ca. 1:3, og (b) deretter senke vevet minst en gang ned i en vandig opplosning av 0.1 til 2% hematoxylin.
- 2. Fremgangsmåte etter krav 1, karakterisert ved at opplosning (a) er en 9 til 11 vekt%/volum av en blanding av trikloreddiksyre, sinkklorid og .formaldehyd, hvor vektsforholdet mellom sinkklorid og trikloreddiksyre er fra ca. 3:1 til ca. 3.5:1 og vektsforholdet mellom formaldehyd og trikloreddiksyre er fra ca. 8:1 til ca. 10:1, i vandig metanol hvor volumforholdet mellom metanol og totalt vann er fra ca. 1:1.1 til ca. 1:1.5.
- 3. Fremgangsmåte etter krav 1, karakterisert ved at hematoxylinet er kompleksert med alun.
- 4. Fremgangsmåte etter krav 1, karakterisert ved at minst en av nedsenkningene av vevet i nevnte opplosning av hematoxylin forutgås av nedsenkning av vevet i litiumkarbonat.
- 5. Fremgangsmåte etter krav 1, karakterisert ved at vevet kontrastfarves minst en gang etter nedsenkningen av vevet i nevnte hematoxylinopplosning.
- 6. Fremgangsmåte etter krav 5, karakterisert ved at nevnte kontrastfarve er eosin.
- 7. Fremgangsmåte etter krav 5, karakterisert ved at den nevnte konstrastfarve er fuchsin.
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| US37327673A | 1973-06-25 | 1973-06-25 |
Publications (1)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| NO742274L true NO742274L (no) | 1975-01-20 |
Family
ID=23471724
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| NO742274A NO742274L (no) | 1973-06-25 | 1974-06-21 |
Country Status (16)
| Country | Link |
|---|---|
| JP (1) | JPS5049026A (no) |
| AU (1) | AU7049174A (no) |
| BE (1) | BE816786R (no) |
| BR (1) | BR7405213D0 (no) |
| CA (1) | CA1037366A (no) |
| DD (1) | DD112519A5 (no) |
| DE (1) | DE2429647A1 (no) |
| DK (1) | DK338574A (no) |
| ES (1) | ES427568A1 (no) |
| FI (1) | FI193074A (no) |
| FR (1) | FR2234558B2 (no) |
| HU (1) | HU168582B (no) |
| NL (1) | NL7408556A (no) |
| NO (1) | NO742274L (no) |
| SE (1) | SE7407899L (no) |
| ZA (1) | ZA743995B (no) |
Families Citing this family (3)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| JPH068818B2 (ja) * | 1987-11-27 | 1994-02-02 | サクラ精機株式会社 | 生体組織検査用固定液 |
| EP1605244A1 (en) * | 2004-06-09 | 2005-12-14 | Boon, Mathilde Elisabeth | Fixative composition |
| CN110823666A (zh) * | 2019-11-27 | 2020-02-21 | 李雄 | 苏木素在制备减少病理常规切片染色后褪色的染色剂中的应用 |
-
1974
- 1974-06-14 SE SE7407899A patent/SE7407899L/ not_active Application Discontinuation
- 1974-06-20 DE DE2429647A patent/DE2429647A1/de active Pending
- 1974-06-21 CA CA203,034A patent/CA1037366A/en not_active Expired
- 1974-06-21 NO NO742274A patent/NO742274L/no unknown
- 1974-06-21 ZA ZA00743995A patent/ZA743995B/xx unknown
- 1974-06-22 ES ES427568A patent/ES427568A1/es not_active Expired
- 1974-06-24 HU HUAI236A patent/HU168582B/hu unknown
- 1974-06-24 DK DK338574A patent/DK338574A/da unknown
- 1974-06-24 BE BE145822A patent/BE816786R/xx active
- 1974-06-24 DD DD179409A patent/DD112519A5/xx unknown
- 1974-06-24 FI FI1930/74A patent/FI193074A/fi unknown
- 1974-06-25 BR BR5213/74A patent/BR7405213D0/pt unknown
- 1974-06-25 NL NL7408556A patent/NL7408556A/xx unknown
- 1974-06-25 JP JP49072710A patent/JPS5049026A/ja active Pending
- 1974-06-25 FR FR7422137A patent/FR2234558B2/fr not_active Expired
- 1974-06-25 AU AU70491/74A patent/AU7049174A/en not_active Expired
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| NL7408556A (no) | 1974-12-30 |
| ZA743995B (en) | 1975-06-25 |
| FR2234558B2 (no) | 1977-02-11 |
| DD112519A5 (no) | 1975-04-12 |
| AU7049174A (en) | 1976-01-08 |
| FI193074A (no) | 1974-12-26 |
| BR7405213D0 (pt) | 1975-01-28 |
| JPS5049026A (no) | 1975-05-01 |
| HU168582B (no) | 1976-06-28 |
| BE816786R (fr) | 1974-12-24 |
| DE2429647A1 (de) | 1975-01-16 |
| FR2234558A2 (no) | 1975-01-17 |
| CA1037366A (en) | 1978-08-29 |
| ES427568A1 (es) | 1976-07-16 |
| DK338574A (no) | 1975-02-24 |
| SE7407899L (no) | 1974-12-27 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| Limbourg et al. | Permeabilization of Drosophila eggs | |
| US3997656A (en) | Tissue staining method and composition | |
| DK167134B1 (da) | Histologisk fikseringsmiddel | |
| Windle et al. | A Nissl method using buffered solutions of thionin | |
| US8158381B2 (en) | Methods for integrated tissue processing and staining | |
| Beament | The waterproofing process in eggs of Rhodnius prolixus Stähl | |
| Dempster | Rates of penetration of fixing fluids | |
| Fregerslev et al. | Golgi potassium-dichromate silver-nitrate impregnation: Nature of the precipitate studied by X-ray powder diffraction methods | |
| US5482676A (en) | Visualization system for retrieval, identification, and positioning of biological samples for subsequent microscopic examination | |
| US3862300A (en) | Histological fixative | |
| CN111811909A (zh) | 一种组织自发荧光淬灭剂的制备及应用 | |
| Bhat et al. | Fixation and different types of fixatives: Their role and functions: A review | |
| Harrison | An ethanol-acetic acid-formol saline fixative for routine use with special application to the fixation of non-perfused rat lung | |
| NO742274L (no) | ||
| Estable et al. | Technical procedures for the study of the nucleolonema | |
| CN103884562B (zh) | 氯化醋酸as-d萘酚酯酶（as-dnce）染色液 | |
| CN108693183A (zh) | 通过超弱生物光子成像系统检测化妆品成分致敏性的方法 | |
| CN105651579B (zh) | 一种α-丁酸萘酚酯酶染色试剂盒 | |
| US5508175A (en) | Environmentally safe parasitology fixative and stain | |
| CN111879590A (zh) | 肾活检免疫荧光冰冻剩余组织重制石蜡切片的方法 | |
| Harman | The selective staining of mitochondria | |
| Bryan | Differential staining with a mixture of safranin and fast green FCF | |
| CN109781492A (zh) | 一种着色持久的组织固定液 | |
| CN109900537A (zh) | 一种组织病理学的组织样本的处理方法 | |
| CN109490049A (zh) | 一种苏木素染色液及配制方法 |