NO335946B1 - Cykliske derivater, farmasøytiske preparater omfattende slike, slike forbindelser for anvendelse i terapi samt slike forbindelser for behandling av sykdommer - Google Patents

Cykliske derivater, farmasøytiske preparater omfattende slike, slike forbindelser for anvendelse i terapi samt slike forbindelser for behandling av sykdommer Download PDF

Info

Publication number
NO335946B1
NO335946B1 NO20060717A NO20060717A NO335946B1 NO 335946 B1 NO335946 B1 NO 335946B1 NO 20060717 A NO20060717 A NO 20060717A NO 20060717 A NO20060717 A NO 20060717A NO 335946 B1 NO335946 B1 NO 335946B1
Authority
NO
Norway
Prior art keywords
methyl
amino
isopropyl
tert
oxopyrrolidin
Prior art date
Application number
NO20060717A
Other languages
English (en)
Other versions
NO20060717L (no
Inventor
Douglas Guy Batt
Soo Sung Ko
John V Duncia
Daniel S Gardner
Percy H Carter
Robert J Cherney
Anurag S Srivastava
Michael G Yang
Original Assignee
Bristol Myers Squibb Co
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Family has litigation
First worldwide family litigation filed litigation Critical https://patents.darts-ip.com/?family=34228609&utm_source=google_patent&utm_medium=platform_link&utm_campaign=public_patent_search&patent=NO335946(B1) "Global patent litigation dataset” by Darts-ip is licensed under a Creative Commons Attribution 4.0 International License.
Application filed by Bristol Myers Squibb Co filed Critical Bristol Myers Squibb Co
Publication of NO20060717L publication Critical patent/NO20060717L/no
Publication of NO335946B1 publication Critical patent/NO335946B1/no

Links

Classifications

    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D207/00—Heterocyclic compounds containing five-membered rings not condensed with other rings, with one nitrogen atom as the only ring hetero atom
    • C07D207/02—Heterocyclic compounds containing five-membered rings not condensed with other rings, with one nitrogen atom as the only ring hetero atom with only hydrogen or carbon atoms directly attached to the ring nitrogen atom
    • C07D207/18—Heterocyclic compounds containing five-membered rings not condensed with other rings, with one nitrogen atom as the only ring hetero atom with only hydrogen or carbon atoms directly attached to the ring nitrogen atom having one double bond between ring members or between a ring member and a non-ring member
    • C07D207/22—Heterocyclic compounds containing five-membered rings not condensed with other rings, with one nitrogen atom as the only ring hetero atom with only hydrogen or carbon atoms directly attached to the ring nitrogen atom having one double bond between ring members or between a ring member and a non-ring member with hetero atoms or with carbon atoms having three bonds to hetero atoms with at the most one bond to halogen, e.g. ester or nitrile radicals, directly attached to ring carbon atoms
    • C07D207/24—Oxygen or sulfur atoms
    • C07D207/26—2-Pyrrolidones
    • C07D207/273—2-Pyrrolidones with hetero atoms or with carbon atoms having three bonds to hetero atoms with at the most one bond to halogen, e.g. ester or nitrile radicals, directly attached to other ring carbon atoms
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D207/00—Heterocyclic compounds containing five-membered rings not condensed with other rings, with one nitrogen atom as the only ring hetero atom
    • C07D207/02—Heterocyclic compounds containing five-membered rings not condensed with other rings, with one nitrogen atom as the only ring hetero atom with only hydrogen or carbon atoms directly attached to the ring nitrogen atom
    • C07D207/18—Heterocyclic compounds containing five-membered rings not condensed with other rings, with one nitrogen atom as the only ring hetero atom with only hydrogen or carbon atoms directly attached to the ring nitrogen atom having one double bond between ring members or between a ring member and a non-ring member
    • C07D207/22—Heterocyclic compounds containing five-membered rings not condensed with other rings, with one nitrogen atom as the only ring hetero atom with only hydrogen or carbon atoms directly attached to the ring nitrogen atom having one double bond between ring members or between a ring member and a non-ring member with hetero atoms or with carbon atoms having three bonds to hetero atoms with at the most one bond to halogen, e.g. ester or nitrile radicals, directly attached to ring carbon atoms
    • C07D207/24—Oxygen or sulfur atoms
    • C07D207/26—2-Pyrrolidones
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P1/00—Drugs for disorders of the alimentary tract or the digestive system
    • A61P1/04—Drugs for disorders of the alimentary tract or the digestive system for ulcers, gastritis or reflux esophagitis, e.g. antacids, inhibitors of acid secretion, mucosal protectants
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P11/00—Drugs for disorders of the respiratory system
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P11/00—Drugs for disorders of the respiratory system
    • A61P11/06—Antiasthmatics
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P13/00—Drugs for disorders of the urinary system
    • A61P13/12—Drugs for disorders of the urinary system of the kidneys
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P17/00—Drugs for dermatological disorders
    • A61P17/06—Antipsoriatics
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P19/00—Drugs for skeletal disorders
    • A61P19/02—Drugs for skeletal disorders for joint disorders, e.g. arthritis, arthrosis
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P19/00—Drugs for skeletal disorders
    • A61P19/08—Drugs for skeletal disorders for bone diseases, e.g. rachitism, Paget's disease
    • A61P19/10—Drugs for skeletal disorders for bone diseases, e.g. rachitism, Paget's disease for osteoporosis
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P25/00—Drugs for disorders of the nervous system
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P25/00—Drugs for disorders of the nervous system
    • A61P25/28—Drugs for disorders of the nervous system for treating neurodegenerative disorders of the central nervous system, e.g. nootropic agents, cognition enhancers, drugs for treating Alzheimer's disease or other forms of dementia
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P29/00—Non-central analgesic, antipyretic or antiinflammatory agents, e.g. antirheumatic agents; Non-steroidal antiinflammatory drugs [NSAID]
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P29/00—Non-central analgesic, antipyretic or antiinflammatory agents, e.g. antirheumatic agents; Non-steroidal antiinflammatory drugs [NSAID]
    • A61P29/02—Non-central analgesic, antipyretic or antiinflammatory agents, e.g. antirheumatic agents; Non-steroidal antiinflammatory drugs [NSAID] without antiinflammatory effect
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P31/00—Antiinfectives, i.e. antibiotics, antiseptics, chemotherapeutics
    • A61P31/12—Antivirals
    • A61P31/14—Antivirals for RNA viruses
    • A61P31/18—Antivirals for RNA viruses for HIV
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P35/00—Antineoplastic agents
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P37/00—Drugs for immunological or allergic disorders
    • A61P37/02—Immunomodulators
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P37/00—Drugs for immunological or allergic disorders
    • A61P37/02—Immunomodulators
    • A61P37/04—Immunostimulants
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P37/00—Drugs for immunological or allergic disorders
    • A61P37/02—Immunomodulators
    • A61P37/06—Immunosuppressants, e.g. drugs for graft rejection
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P37/00—Drugs for immunological or allergic disorders
    • A61P37/08—Antiallergic agents
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P43/00—Drugs for specific purposes, not provided for in groups A61P1/00-A61P41/00
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P9/00—Drugs for disorders of the cardiovascular system
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P9/00—Drugs for disorders of the cardiovascular system
    • A61P9/04—Inotropic agents, i.e. stimulants of cardiac contraction; Drugs for heart failure
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P9/00—Drugs for disorders of the cardiovascular system
    • A61P9/08—Vasodilators for multiple indications
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P9/00—Drugs for disorders of the cardiovascular system
    • A61P9/10—Drugs for disorders of the cardiovascular system for treating ischaemic or atherosclerotic diseases, e.g. antianginal drugs, coronary vasodilators, drugs for myocardial infarction, retinopathy, cerebrovascula insufficiency, renal arteriosclerosis
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P9/00—Drugs for disorders of the cardiovascular system
    • A61P9/14—Vasoprotectives; Antihaemorrhoidals; Drugs for varicose therapy; Capillary stabilisers
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C04—CEMENTS; CONCRETE; ARTIFICIAL STONE; CERAMICS; REFRACTORIES
    • C04B—LIME, MAGNESIA; SLAG; CEMENTS; COMPOSITIONS THEREOF, e.g. MORTARS, CONCRETE OR LIKE BUILDING MATERIALS; ARTIFICIAL STONE; CERAMICS; REFRACTORIES; TREATMENT OF NATURAL STONE
    • C04B35/00—Shaped ceramic products characterised by their composition; Ceramics compositions; Processing powders of inorganic compounds preparatory to the manufacturing of ceramic products
    • C04B35/622—Forming processes; Processing powders of inorganic compounds preparatory to the manufacturing of ceramic products
    • C04B35/626—Preparing or treating the powders individually or as batches ; preparing or treating macroscopic reinforcing agents for ceramic products, e.g. fibres; mechanical aspects section B
    • C04B35/63—Preparing or treating the powders individually or as batches ; preparing or treating macroscopic reinforcing agents for ceramic products, e.g. fibres; mechanical aspects section B using additives specially adapted for forming the products, e.g.. binder binders
    • C04B35/632—Organic additives
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D207/00—Heterocyclic compounds containing five-membered rings not condensed with other rings, with one nitrogen atom as the only ring hetero atom
    • C07D207/02—Heterocyclic compounds containing five-membered rings not condensed with other rings, with one nitrogen atom as the only ring hetero atom with only hydrogen or carbon atoms directly attached to the ring nitrogen atom
    • C07D207/30—Heterocyclic compounds containing five-membered rings not condensed with other rings, with one nitrogen atom as the only ring hetero atom with only hydrogen or carbon atoms directly attached to the ring nitrogen atom having two double bonds between ring members or between ring members and non-ring members
    • C07D207/34—Heterocyclic compounds containing five-membered rings not condensed with other rings, with one nitrogen atom as the only ring hetero atom with only hydrogen or carbon atoms directly attached to the ring nitrogen atom having two double bonds between ring members or between ring members and non-ring members with hetero atoms or with carbon atoms having three bonds to hetero atoms with at the most one bond to halogen, e.g. ester or nitrile radicals, directly attached to ring carbon atoms
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D211/00—Heterocyclic compounds containing hydrogenated pyridine rings, not condensed with other rings
    • C07D211/04—Heterocyclic compounds containing hydrogenated pyridine rings, not condensed with other rings with only hydrogen or carbon atoms directly attached to the ring nitrogen atom
    • C07D211/80—Heterocyclic compounds containing hydrogenated pyridine rings, not condensed with other rings with only hydrogen or carbon atoms directly attached to the ring nitrogen atom having two double bonds between ring members or between ring members and non-ring members
    • C07D211/84—Heterocyclic compounds containing hydrogenated pyridine rings, not condensed with other rings with only hydrogen or carbon atoms directly attached to the ring nitrogen atom having two double bonds between ring members or between ring members and non-ring members with hetero atoms or with carbon atoms having three bonds to hetero atoms, with at the most one bond to halogen directly attached to ring carbon atoms
    • C07D211/86—Oxygen atoms
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D401/00—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, at least one ring being a six-membered ring with only one nitrogen atom
    • C07D401/02—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, at least one ring being a six-membered ring with only one nitrogen atom containing two hetero rings
    • C07D401/04—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, at least one ring being a six-membered ring with only one nitrogen atom containing two hetero rings directly linked by a ring-member-to-ring-member bond
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D401/00—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, at least one ring being a six-membered ring with only one nitrogen atom
    • C07D401/02—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, at least one ring being a six-membered ring with only one nitrogen atom containing two hetero rings
    • C07D401/12—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, at least one ring being a six-membered ring with only one nitrogen atom containing two hetero rings linked by a chain containing hetero atoms as chain links
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D401/00—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, at least one ring being a six-membered ring with only one nitrogen atom
    • C07D401/14—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, at least one ring being a six-membered ring with only one nitrogen atom containing three or more hetero rings
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D403/00—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, not provided for by group C07D401/00
    • C07D403/02—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, not provided for by group C07D401/00 containing two hetero rings
    • C07D403/12—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, not provided for by group C07D401/00 containing two hetero rings linked by a chain containing hetero atoms as chain links
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D405/00—Heterocyclic compounds containing both one or more hetero rings having oxygen atoms as the only ring hetero atoms, and one or more rings having nitrogen as the only ring hetero atom
    • C07D405/02—Heterocyclic compounds containing both one or more hetero rings having oxygen atoms as the only ring hetero atoms, and one or more rings having nitrogen as the only ring hetero atom containing two hetero rings
    • C07D405/12—Heterocyclic compounds containing both one or more hetero rings having oxygen atoms as the only ring hetero atoms, and one or more rings having nitrogen as the only ring hetero atom containing two hetero rings linked by a chain containing hetero atoms as chain links
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D405/00—Heterocyclic compounds containing both one or more hetero rings having oxygen atoms as the only ring hetero atoms, and one or more rings having nitrogen as the only ring hetero atom
    • C07D405/14—Heterocyclic compounds containing both one or more hetero rings having oxygen atoms as the only ring hetero atoms, and one or more rings having nitrogen as the only ring hetero atom containing three or more hetero rings
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D409/00—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, at least one ring having sulfur atoms as the only ring hetero atoms
    • C07D409/02—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, at least one ring having sulfur atoms as the only ring hetero atoms containing two hetero rings
    • C07D409/12—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, at least one ring having sulfur atoms as the only ring hetero atoms containing two hetero rings linked by a chain containing hetero atoms as chain links
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D409/00—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, at least one ring having sulfur atoms as the only ring hetero atoms
    • C07D409/14—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, at least one ring having sulfur atoms as the only ring hetero atoms containing three or more hetero rings
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D413/00—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, at least one ring having nitrogen and oxygen atoms as the only ring hetero atoms
    • C07D413/02—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, at least one ring having nitrogen and oxygen atoms as the only ring hetero atoms containing two hetero rings
    • C07D413/12—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, at least one ring having nitrogen and oxygen atoms as the only ring hetero atoms containing two hetero rings linked by a chain containing hetero atoms as chain links
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D417/00—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, at least one ring having nitrogen and sulfur atoms as the only ring hetero atoms, not provided for by group C07D415/00
    • C07D417/02—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, at least one ring having nitrogen and sulfur atoms as the only ring hetero atoms, not provided for by group C07D415/00 containing two hetero rings
    • C07D417/12—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, at least one ring having nitrogen and sulfur atoms as the only ring hetero atoms, not provided for by group C07D415/00 containing two hetero rings linked by a chain containing hetero atoms as chain links
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D417/00—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, at least one ring having nitrogen and sulfur atoms as the only ring hetero atoms, not provided for by group C07D415/00
    • C07D417/14—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, at least one ring having nitrogen and sulfur atoms as the only ring hetero atoms, not provided for by group C07D415/00 containing three or more hetero rings
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D487/00—Heterocyclic compounds containing nitrogen atoms as the only ring hetero atoms in the condensed system, not provided for by groups C07D451/00 - C07D477/00
    • C07D487/02—Heterocyclic compounds containing nitrogen atoms as the only ring hetero atoms in the condensed system, not provided for by groups C07D451/00 - C07D477/00 in which the condensed system contains two hetero rings
    • C07D487/04—Ortho-condensed systems

Landscapes

  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
  • Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
  • Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • Pharmacology & Pharmacy (AREA)
  • General Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Animal Behavior & Ethology (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Public Health (AREA)
  • Veterinary Medicine (AREA)
  • Immunology (AREA)
  • Cardiology (AREA)
  • Rheumatology (AREA)
  • Heart & Thoracic Surgery (AREA)
  • Physical Education & Sports Medicine (AREA)
  • Ceramic Engineering (AREA)
  • Pulmonology (AREA)
  • Manufacturing & Machinery (AREA)
  • Biomedical Technology (AREA)
  • Orthopedic Medicine & Surgery (AREA)
  • Neurosurgery (AREA)
  • Neurology (AREA)
  • Materials Engineering (AREA)
  • Inorganic Chemistry (AREA)
  • Structural Engineering (AREA)
  • Virology (AREA)
  • Vascular Medicine (AREA)
  • Hospice & Palliative Care (AREA)
  • Pain & Pain Management (AREA)
  • Urology & Nephrology (AREA)
  • Molecular Biology (AREA)
  • Tropical Medicine & Parasitology (AREA)
  • Dermatology (AREA)
  • Oncology (AREA)
  • AIDS & HIV (AREA)

Abstract

Foreliggende søknad beskriver modulatorer av MCP-1 med formel (I): eller farmasøytisk akseptable saltformer derav, anvendelige for behandling av revmatoid artritt, multippel sklerose, aterosklerose og astma.

Description

OPPFINNELSENS OMRÅDE
Foreliggende oppfinnelse angår generelt modulatorer av kjemokinreseptor-aktivitet, farmasøytiske preparater inneholdende dem og metoder for anvendelse av dem som midler for behandling og forebygging av inflammatoriske sykdommer, allergiske og autoimmune sykdommer og spesielt astma, revmatoid artritt, aterosklerose og multippel sklerose.
BAKGRUNN FOR OPPFINNELSEN
Kjemokiner er kjemotaktiske cytokiner med molekylvekt 6-15 kDa, som blir frigjort av en rekke celler for å tiltrekke og aktivere, blant andre celletyper, makrofager, T- og B-lymfocytter, eosinofiler, basofiler og nøytrofiler (oversikt i: Luster, New Eng. J. Med. 1998, 338, 436-445 og Rollins, Blood 1997, 90, 909-928). Det er to hovedeklasser av kjemokiner, CXC og CC, avhengig av hvorvidt de første to cysteiner i aminosyresekvensen er separert med en enkel aminosyre (CXC) eller er nabostilt (CC). CXC-kjemokiner, så som interleukin-8 (IL-8), nøytrofil-aktiverende protein-2 (NAP-2) og melanom-vekst stimulerende aktivitet protein (MGSA) er kjemotaktiske primært for nøytrofiler og T-lymfocytter, mens CC-kjemokiner, så som RANTES, MIP-1a, MIP-1B, monocytt kjemotaktiske proteiner (MCP-1, MCP-2, MCP-3, MCP-4 og MCP-5) og eotaksiner (-1 og -2) er kjemotaktiske for blant andre celletyper, makrofager, T-lymfocytter, eosinofiler, dendrittiske celler og basofiler. Det eksisterer også kjemokiner lymfotaktin-1, lymfotaktin-2 (begge C-kjemokiner) og fraktalkin (et CX3C kjemokin) som ikke faller inn i noen av hoved-kjemokin-subfamiliene.
Kjemokinene binder til spesifikke celleoverflate-reseptorer som tilhører familien av G-protein-koblede sju-transmembran-domene proteiner (oversikt i: Horuk, Trends Pharm. Sei. 1994, 15, 159-165) som er betegnet "kjemokinreseptorer." Ved binding av deres kognate ligander, transduserer kjemokinreseptorer et intracellulært signal gjennom de assosierte trimere G-proteiner, hvilket resulterer i, blant andre responser, en rask økning i intracellulær kalsiumkonsentrasjon, endringer i celleform, øket ekspresjon av cellulære adhesjonsmolekyler, degranulering og fremming av cellemigrering. Det er minst ti humane kjemokinreseptorer som binder eller responderer på CC-kjemokiner med de følgende karakteristiske mønstere (oversikt i Zlotnik og Oshie Immunity 2000, 12, 121): CCR-1 (eller "CKR-1" eller "CC-CKR-1")
[MIP-1a, MCP-3, MCP-4, RANTES] (Ben-Barruch, et al., Ce//1993, 72, 415-425 og Luster, New Eng. J. Med. 1998, 338, 436-445); CCR-2A og CCR-2B (eller "CKR-2A"/"CKR-2B" eller "CC-CKR-2ATCC-CKR-2B") [MCP-1, MCP-2, MCP-3, MCP-4, MCP-5] (Charo, et al., Proe. Nati. Acad. Sei. USA 1994, 91, 2752-2756 og Luster, New Eng. J. Med. 1998, 338, 436-445); CCR-3 (eller "CKR-3" eller "CC-CKR-3") [eotaksin-1, eotaksin-2, RANTES, MCP-3, MCP-4]
(Combadiere, et al., J. Biol. Chem. 1995, 270,16491-16494 og Luster, New Eng. J. Med. 1998, 338, 436-445); CCR-4 (eller "CKR-4" eller "CC-CKR-4")
[TARC, MDC] (Power, et al., J. Biol. Chem. 1995, 270, 19495-19500 og Luster, New Eng. J. Med. 1998, 338, 436-445); CCR-5 (eller "CKR-5" eller "CC-CKR-5") [MIP-1a, RANTES, MIP-1B] (Sanson, et al., Biochemistry 1996, 35, 3362-3367); CCR-6 (eller "CKR-6" eller "CC-CKR-6") [LARC] (Baba, et al., J. Biol. Chem. 1997, 272, 14893-14898); CCR-7 (eller "CKR-7" eller "CC-CKR-7") [ELC] (Yoshie et al., J. Leukoc. Biol. 1997, 62, 634-644); CCR-8
(eller "CKR-8" eller "CC-CKR-8") [I-309] (Napolitano et al., J. Immunol., 1996, 157, 2759-2763); CCR-10 (eller "CKR-10" eller "CC-CKR-10") [MCP-1, MCP-3] (Bonini, et al., DNA and Cell Biol. 1997, 16, 1249-1256); og CCR-11 [MCP-1, MCP-2 og MCP-4] (Schweickert, et al., J. Biol. Chem. 2000, 275, 90550).
I tillegg til pattedyr-kjemokinreseptorer er pattedyr-cytomegalovirus, herpesvirus og poxvirus vist å uttrykke, i infiserte celler, proteiner med bindingsegenskapene til kjemokinreseptorer (oversikt i: Wells og Schwartz, Curr. Opin. Biotech. 1997, 8, 741-748). Humane CC-kjemokiner, så som RANTES og MCP-3, kan forårsake rask mobilisering av kalsium via disse viralt kodede reseptorer. Reseptorekspresjon kan tillate infeksjon ved å tillate nedbrytning av normal immunsystem-overvåkning og respons på infeksjon. I tillegg kan humane kjemokinreseptorer, så som CXCR4, CCR2, CCR3, CCR5 og CCR8 virke som co-reseptorer for infeksjon av pattedyrceller av mikrober som ved for eksempel det humane immunsvikt-virus (HIV).
Kjemokinene og deres kognate reseptorer er implisert ved å være viktige mediatorer av inflammatoriske, infeksiøse og immunoregulerende lidelser og sykdommer, omfattende astma og allergiske sykdommer, så vel som autoimmune patologier så som revmatoid artritt og aterosklerose (oversikt i: P. H. Carter, Current Opinion in Chemical Biology 2002, 6, 510; Trivedi, et al, Ann. Reports Med. Chem. 2000, 35, 191; Saunders og Tarby, Drug Dise. Today 1999, 4, 80; Premack og Schall, Nature Medicine 1996, 2, 1174). For eksempel spiller kjemokinet monocytt kjemoattraktant-1 (MCP-1) og dens reseptor CC kjemokinreseptor 2 (CCR-2) en sentral rolle i tiltrekning av leukocytter til inflammasjonssteder og deretter i aktivering av disse celler. Når kjemokinet MCP-1 binder til CCR-2 fremkaller det rask økning i intracellulær kalsiumkonsentrasjon, øket ekspresjon av cellulære adhesjonsmolekyler, cellulær degranulering og fremming av leukocytt-migrering. Demonstrasjon av betydningen av MCP-1/CCR-2 interaksjon er vist ved forsøk med genetisk modifisert mus. MCP-1 -/- mus hadde normale antall av leukocytter og makrofager, men var ute av stand til å rekruttere monocytter til steder med inflammasjon etter mange forskjellige typer av immun-utfordring (Bao Lu, et al., J. Exp. Med. 1998, 187, 601). Likeledes var CCR-2 -/- mus ute av stand til å rekruttere monocytter eller produsere interferon-y når utfordret med forskjellige eksogene midler; videre migrerer leukocytter i CCR-2-null mus ikke som respons på MCP-1 (Landin Boring, et al., J. Clin. Invest. 1997, 100, 2552), som derved demonstrerer spesifisiteten av MCP-1/CCR-2 interaksjon. To andre grupper har uavhengig angitt ekvivalente resultater med forskjellige stammer av CCR-2 -/- mus (William A. Kuziel, et al., Proe. Nati. Acad. Sei. USA 1997, 94, 12053 og Takao Kurihara, et al., J. Exp. Med. 1997, 186, 1757). Levedyktighet og generelt normal helse til MCP-1 -/- og CCR-2 -/- dyr er bemerkelsesverdig, ved at avbrudd av MCP-1/CCR-2 interaksjon ikke fremkaller fysiologisk krise. Tatt sammen fører disse data til konklusjonen at molekyler som blokkerer virkningene av MCP-1 ville være anvendelige for behandling av flere inflammatoriske og autoimmune lidelser. Denne hypotesen har nå vært validert i flere forskjellig dyresykdom-modeller, som beskrevet nedenfor.
Det er kjent at MCP-1 er oppregulert hos pasienter med revmatoid artritt (Alisa Koch, et al., J. Clin. Invest. 1992, 90, 772 - 779). Videre har mange undersøkelser demonstrert den potensielle terapeutiske verdi av antagonisme av MCP-1/CCR2 interaksjon ved behandling av revmatoid artritt. En DNA-vaksine som koder for MCP-1 ble nylig vist å forbedre kronisk polyadjuvans-fremkalt artritt i rotter (Sawsan Youssef, et al., J. Clin. Invest. 2000, 106, 361). Likeledes kunne inflammatoriske sykdomssymptomer kontrolleres via direkte administrering av antistoffer for MCP-1 til rotter med kollagen-fremkalt artritt (Hiroomi Ogata, et al., J. Pathol. 1997, 182, 106) eller streptokokk cellevegg-fremkalt artritt (Ralph C. Schimmer, et al., J. Immunol. 1998, 160, 1466). Kanskje mest betydningsfullt ble en peptid-antagonist for MCP-1, MCP-1 (9-76), vist både å forhindre sykdomsbegynnelse og å redusere sykdomssymptomer (avhengig av tiden for administrering) i MRL-lpr musemodell av artritt (Jiang-Hong Gong, et al., J. Exp. Med. 1997, 186, 131).
Det er kjent at MCP-1 er oppregulert i aterosklerotiske lesjoner og det er vist at sirkulerende nivåer av MCP-1 redusert gjennom behandling med terapeutiske midler, spiller en rolle i sykdomsprogresjon (Abdolreza Rezaie-Majd, et al, Arterioscler. Thromb. Vase. Biol. 2002, 22, 1194 -1199). Fire nøkkel-undersøkelser har demonstrert den potensielle terapeutiske verdi av antagonisme av MCP-1/CCR2 interaksjon ved behandling av aterosklerose. Når for eksempel MCP-1 -/- mus ble paret med LDL-reseptor-manglende mus, ble en 83% reduksjon i aortisk lipid-avsetning observert (Lang Gu, et al., Mol. Cell 1998, 2, 275). Tilsvarende, når MCP-1 ble genetisk fjernet fra mus som allerede overuttrykte humant apolipoprotein B, ble den resulterende mus beskyttet fra aterosklerotisk lesjonsdannelse i forhold til MCP-1 +/+ apoB kontrollmus (Jennifa Gosling, et al., J. Clin. Invest. 1999, 103, 773). Likeledes, når CCR-2 -/- mus ble krysset med apolipoprotein E -/- mus, ble en betydelig reduksjon i forekomst av aterosklerotiske lesjoner observert (Landin Boring, et al, Nature 1998, 394, 894). Endelig, når apolipoprotein E -/- mus blir administrert et gen som koder for en peptid-antagonist av CCR2, da blir lesjonsstørrelse redusert og plaque-stabilitet øket (W. Ni, et al. Circulation 2001, 103, 2096-2101).
Det er kjent at MCP-1 er oppregulert ved human multippel sklerose og det er vist at effektiv terapi med interferon b-1b reduserer MCP-1-ekspresjon i perifert blod mononukleære celler, hvilket indikerer at MCP-1 spiller en rolle i sykdomsprogresjon (Carla larlori, et al., J. Neuroimmunol. 2002, 123, 170 - 179). Andre undersøkelser har demonstrert den potensielle terapeutiske verdi av antagonisme av MCP-1/CCR-2 interaksjon ved behandling av multippel sklerose; alle disse undersøkelser er demonstrert ved eksperimentell autoimmun encefalomyelitt (EAE), den konvensjonelle dyremodell for multippel skelerose. Administrering av antistoffer for MCP-1 til dyr med EAE reduserte betydelig sykdomstilbakefall (K. J. Kennedy, et al., J. Neuroimmunol. 1998, 92, 98). Videre har to nyere rapporter nå vist at CCR-2 -/- mus er resistente mot EAE (Brian T. Fife, et al., J. Exp. Med. 2000, 192, 899; Leonid Izikson, et al., J. Exp. Med. 2000, 192, 1075).
Det er kjent at MCP-1 er oppregulert hos pasienter som utvikler bronkiolitis obliterans syndrom etter lungetransplantasjon (Martin Reynaud-Gaubert, et al., J. of Heart and Lung Transplant, 2002, 21, 721 - 730; John Belperio, et al., J. Clin. Invest. 2001, 108, 547 - 556). I en murin modell av bronkiolitis obliterans syndrom førte administrering av et antistoff til MCP-1 til redusering av luftveis-obliterasjon; likeledes ble CCR2 -/- mus resistente mot luftveis-obliterasjon i denne samme modell (John Belperio, et al., J. Clin. Invest. 2001, 108, 547 - 556). Disse data indikerer at antagonisme av MCP-1/CCR2 kan være fordelaktig ved behandling av avvisning av organer etter transplantasjon.
Andre undersøkelser har demonstrert den potensielle terapeutiske verdi av antagonisme av MCP-1/CCR2 interaksjon ved behandling av astma. Sekvestrering av MCP-1 med et nøytraliserende antistoff i ovalbumin-utfordrede mus resulterte i markert reduksjon i bronkial hyperresponsivitet og inflammasjon (Jose-Angel Gonzalo, et al., J. Exp. Med. 1998, 188, 157). Det viste seg mulig å redusere allergisk luftveisinflammasjon i Schistosoma mansoni egg-utfordrede mus ved administrering av antistoffer for MCP-1 (Nicholas W. Lukacs, et al., J. Immunol. 1997, 158, 4398). I overensstemmelse med dette viste MCP-1 -/- mus redusert respons på utfordring med Schistosoma mansoni egg (Bao Lu, et al., J. Exp. Med. 1998, 187, 601).
Andre undersøkelser har demonstrert den potensielle terapeutiske verdi av antagonisme av MCP-1/CCR2 interaksjon ved behandling av nyresykdom. Administrering av antistoffer for MCP-1 i en murin modell av glomerulonefritt resulterte i en markert reduksjon i glomerulær halvmåne-("crescent") dannelse og avsetning av type I kollagen (Clare M. Lloyd, et al., J. Exp. Med. 1997, 185, 1371). I tillegg viste MCP-1 -/- mus med fremkalt nefrotoksisk serum nefritt betydelig mindre tubulær skade enn deres MCP-1 +/+ motstykker (Gregory H. Tesch, et al., J. Clin. Invest. 1999, 103, 73).
Én studie har demonstrert den potensielle terapeutiske verdi av antagonisme av MCP-1/CCR2 interaksjon ved behandling av systemisk lupus erythematosus. Krysning av MCP-1 -/- mus med MRL- FASlPr mus - hvor den sistnevnte har en dødelig autoimmun sykdom som er analog med human systemisk lupus erythematosus - resulterer i mus som har mindre sykdom og lenger overlevelse enn villtype MRL- FAS^ mus (Gregory H. Tesch, et al., J. Exp. Med. 1999, 190, 1813).
Én studie har demonstrert den potensielle terapeutiske verdi av antagonisme av MCP-1/CCR2 interaksjon ved behandling av kolitt. CCR-2 -/mus ble beskyttet fra virkningene av dekstran-natriumsulfat-fremkalt kolitt (Pietro G. Andres, et al., J. Immunol. 2000, 164, 6303).
Én studie har demonstrert den potensielle terapeutiske verdi av antagonisme av MCP-1/CCR2 interaksjon ved behandling av alveolitt. Når rotter med IgA immunkompleks lungeskade ble behandlet intravenøst med antistoffer fremkalt mot rotte MCP-1 (JE) ble symptomene på alveolitt delvis lindret (Michael L. Jones, et al., J. Immunol. 1992, 149, 2147).
Én studie har demonstrert den potensielle terapeutiske verdi av antagonisme av MCP-1/CCR2 interaksjon ved behandling av kreft. Når immundefekte mus som bærer humane brystkarsinom-celler ble behandlet med et anti-MCP-1 antistoff ble hemning av lunge-mikrometastaser og økninger i overlevelse observert (Rosalba Salcedo, et al., Blood 2000, 96, 34 -40).
Én studie har demonstrert den potensielle terapeutiske verdi av antagonisme av MCP-1/CCR2 interaksjon ved behandling av restenose. Mus som manglet CCR2 viste reduksjoner i det intimale område og i intima/media forhold (i forhold til villtype-kull) etter skade av femoralarterie (Merce Roque, et al. Arterioscler. Thromb. Vase. Biol. 2002, 22, 554 - 559).
Andre undersøkelser har gitt bevis for at MCP-1 er overuttrykt ved forskjellige sykdomstilstander ikke nevnt ovenfor. Disse rapporter gir korrelative bevis for at MCP-1 antagonister kan være anvendelige terapeutiske midler mot slike sykdommer. To rapporter har beskrevet overekspresjonen av MCP-1 i intestinale epitelceller og intestinal mukosa hos pasienter med inflammatorisk tarmsykdom (H. C. Reinecker, et al., Gastroenterology 1995, 108, 40 og Michael C. Grimm, et al., J. Leukoc. Biol. 1996, 59, 804). To rapporter beskriver overekspresjonen av MCP-1 i rotter med fremkalt hjernetraume (J. S. King, et al., J. Neuroimmunol. 1994, 56,127 og Joan W. Berman, et al., J. Immunol. 1996, 156, 3017). En annen studie har demonstrert overekspresjonen av MCP-1 i gnagerhjerte-allografter, hvilket indikerer en rolle for MCP-1 i patogenese av transplantat- arteriosklerose (Mary E. Russell, et al. Proe. Nati. Acad. Sei. USA 1993, 90, 6086). Overekspresjonen av MCP-1 er registrert i lungeendotel-celler til pasienter med idiopatisk pulmonal fibrose (Harry N. Antoniades, et al., Proe. Nati. Acad. Sei. USA 1992, 89, 5371). Tilsvarende er overekspresjonen av MCP-1 registrert i huden til pasienter med psoriasis (M. Deleuran, et al., J. Dermatol. Sei. 1996, 13, 228 og R. Gillitzer, et al., J. Invest. Dermatol. 1993, 101, 127). Endelig har en nyere rapport vist at MCP-1 er overuttrykt i hjerne og cerebrospinalvæske hos pasienter med HIV-1-assosiert demens (Alfredo Garzino-Demo, WO 99/46991).
Det skal også bemerkes at CCR-2 er implisert som en co-reseptor for noen stammer av HIV (B. J. Doranz, et al., Cell 1996, 85, 1149). Det har også vært funnet at anvendelse av CCR-2 som en HIV co-reseptor kan være korrelert med sykdomsprogresjon (Ruth I. Connor, et al., J. Exp. Med. 1997, 185, 621). Dette funn er i overensstemmelse med det nyere funn at tilstedeværelse av en CCR-2 mutant, CCR2-64I, er positivt korrelert med forsinket begynnelse av HIV i den humane populasjon (Michael W. Smith, et al., Science 1997, 277, 959). Selv om MCP-1 ikke er implisert i disse prosesser, kan det være at MCP-1 antagonister som virker via binding til CCR-2 kan ha fordelaktige terapeutiske effekter ved forsinking av sykdomsprogresjon til AIDS hos HIV-infiserte pasienter.
Det skal bemerkes at CCR-2 også er reseptor for kjemokinene MCP-2, MCP-3, MCP-4 og MCP-5 (Luster, New Eng. J. Med. 1998, 338, 436-445). Siden de nye forbindelsene med formel (I) beskrevet her antagoniserer MCP-1 ved å binde til CCR-2-reseptor, kan det være at disse forbindelser med formel (I) også er effektive antagonister av virkningene av MCP-2, MCP-3, MCP-4 og MCP-5 som blir mediert av CCR-2. Følgelig, når det her er referert til "antagonisme av MCP-1," skal det antas at dette er ekvivalent med "antagonisme av kjemokin-stimulering av CCR-2."
OPPSUMMERING AV OPPFINNELSEN
Følgelig tilveiebringer foreliggende oppfinnelse nye antagonister eller partielle agonister/antagonister av MCP-1-reseptoraktivitet eller farmasøytisk akseptable salter derav.
Foreliggende oppfinnelse tilveiebringer farmasøytiske preparater omfattende en farmasøytisk akseptabel bærer og en terapeutisk effektiv mengde av minst én av forbindelsene ifølge foreliggende oppfinnelse eller et farmasøytisk akseptabelt salt derav.
Forbindelsene ifølge oppfinnelsen kan anvendes for behandling av revmatoid artritt, multippel sklerose og aterosklerose, omfattende administrering til en vert med behov for slik behandling av en terapeutisk effektiv mengde av minst én av forbindelsene ifølge foreliggende oppfinnelse eller et farmasøytisk akseptabelt salt derav.
Forbindelsene ifølge oppfinnelsen kan også anvendes for behandling av inflammatoriske sykdommer, omfattende administrering til en vert med behov for slik behandling av en terapeutisk effektiv mengde av minst én av forbindelsene ifølge foreliggende oppfinnelse eller et farmasøytisk akseptabelt salt derav.
Foreliggende oppfinnelse tilveiebringer nye cykliske derivater for anvendelse i terapi.
Foreliggende oppfinnelse tilveiebringer anvendelse av nye cykliske derivater for fremstilling av et medikament for behandling av inflammatoriske sykdommer.
Disse og andre trekk ifølge oppfinnelsen, som vil bli klare etter den følgende detaljerte beskrivelse, er oppnådd ved oppfinnerenes oppdagelse at forbindelser med formel (la):
eller stereoisomerer eller farmasøytisk akseptable salter derav, hvor Z, R<1>, R<2>og R<5>er som definert nedenfor, er effektive modulatorer av MCP-1 og kjemokin-aktivitet.
DETALJERT BESKRIVELSE AV UTFØRELSESFORMER AV
FORELIGGENDE OPPFINNELSE
I én utførelsesform angår foreliggende oppfinnelse en forbindelse med formel (la)
eller en stereoisomer eller et farmasøytisk akseptabelt salt derav, hvor: Z er valgt fra -NR<8>c(0)- og -NR<9->;
R<1>er valgt fra H, R<6>, C<\. q alkyl substituert med 0-3 R<6>, C2-6alkenyl substituert med 0-3 R<6>, C2-6alkynyl substituert med 0-3 R<6>, C6-10
arylgruppe substituert med 0-5 R<§>og et 5-10 leddet heteroarylsystem inneholdende 1-4 heteroatomer valgt fra N, O og S, substituert med 0-3R6;
R<2>er valgt fra en C6-10arylgruppe substituert med 0-5 R<7>og et 5-10 leddet heteroarylsystem inneholdende 1-4 heteroatomer valgt fra N, O og S, substituert med 0-3 R<7>;
R5 er-NR5aR5a;
R^<a>, ved hver forekomst, er uavhengig valgt fra H, metyl, C1-6alkyl substituert med 0-2 R^<e>hvor alkylgruppen er valgt fra etyl, propyl, i-propyl, butyl, i-butyl, pentyl, heksyl; allyl substituert med 0-1 R^<e>;
propynyl substituert med 0-1 R^<e>; og en (CH2)r-C3-4karbocyklisk rest substituert med 0-5 R^<e>, hvor den karbocykliske resten er valgt fra cyklopropyl og cyklobutyl;
R<5e>jved hver forekomst, er valgt fra C1-6alkyl, C2-8alkenyl, C2-8alkynyl,
C3-6cykloalkyl, Cl, F, Br, I, CN, NO2, (CF2)rCF3, (CH2)rOCi-5alkyl,
OH, SH, (CH2)rSCi-5alkyl, (CH2)rNR5fR5<f>og (CH2)r<f>enyl;
R5f ved hver forekomst, er valgt fra H, C1-6alkyl og C3-6cykloalkyl;
R<6>, ved hver forekomst, er valgt fra C1-8alkyl, (CH2)rC3-6cykloalkyl, Cl, Br,
I, F, NO2, CN, (CR'R')rNR<6a>R6a, (CR^rOH, (CR^rOCCR^rR6^
(CR'R')rSH, (CR'R')rC(0)H, (CR,R,)rS(CR,R,)rR<6d>,
(CR,R,)rSC(0)(CR,R,)rR<6b>, (CR<*>R<*>)rC(0)OH,
(CR^^rCCOJCC^R^rR615, (CR'R,)rC(0)NR6aR6aj(CR^JrNRSfCfOXCRTCJrR61*, (CR,R,)rC(0)0(CR,R,)rR6d,
(CR^JrOCfOXCRKOrR61*, (CR'R')rOC(0)NR6a(CR,R,)rR<6d>j(CRWJrNRSaCfOJNRSafCRWJrR6*1,
(CR'R,)rNR6ac(S)NR6a(CR,R,)rR6dj (CR,R,)rNR6fC(0)0(CR,R,)rR6b,
(CR'R')rC(=NR6f)NR6aR6aj (CR'R')rNHC(=NR6f)NR6fR6f (CR,R,)rS(0)p(CR,R')rR6b, (CR'R')rS(0)2NR<6a>R6aj(CR'R,)rNR<6f>S(0)2NR6aR6aj(CR,R,)rNR<6f>S(0)2(CR,R,)rR6b, C1-6
halogenalkyl, C2-8alkenyl substituert med 0-3 R', C2-8alkynyl substituert med 0-3 R', (CR'R')rfenyl substituert med 0-3 R<6e>og et (CH2)r-5-6 leddet heterocyklisk system inneholdende 1-2 heteroatomer valgt fra N, O og S, substituert med 0-2 R<6e>;
alternativt kan to R^ på nabostilte atomer på R^ kombineres for å danne et
cyklisk acetal;
R6ajvecj hver forekomst, er valgt fra H, metyl substituert med 0-1 R^9, C2-6
alkyl substituert med 0-2 R^<e>, C3-8alkenyl substituert med 0-2 R^<e>og C3-8alkynyl substituert med 0-2 R^e;
R(<5>bvecj hver forekomst, er valgt fra H, C1-6alkyl substituert med 0-2 R<®e>,
C3-8alkenyl substituert med 0-2 R<®e>og C3-8alkynyl substituert med 0-2R6e;
R<6d>jVed hver forekomst, er valgt fra C3-8alkenyl substituert med 0-2 R^<e>,
C3-8alkynyl substituert med 0-2 R<6e>, metyl, CF3, C2-6alM
substituert med 0-3 R$ e og C2-4halogenalkyl;
R<6e>jved hver forekomst, er valgt fra C1-6alkyl, C2-8alkenyl, C2-8alkynyl,
(CH2)rC3-6cykloalkyl, Cl, F, Br, I, CN, NO2, (CF2)rCF3, (CH2)rOCi-5
alkyl, OH, SH, (CH2)rSCi-5 alkyl, (CH2)rNR6fR6f og (CH2)rfenyl;
R6f ved hver forekomst, er valgt fra H, C1-5alkyl og C3-6cykloalkyl og fenyl;
R<6g>er uavhengig valgt fra -C(0)R<6>b, -C(0)OR6d, -C(0)NR6fR6f0g
(CH2)r<f>enyl;
R<7>, ved hver forekomst, er valgt fra C1-8alkyl, (CH2)rC3-6cykloalkyl, Cl, Br,
I, F, NO2, CN, (CR'R')rNR<7a>R7a, (CR'R')rOH, (CR^JrCKCR^JrR™
(CR'R')rSH, (CR'R')rC(0)H, (CR^JrSCCR^JrR™ (CR'R')rC(0)OH,
(CR,R,)rC(0)(CR,R,)rR7b,(CR'R,)rC(0)NR7aR7a,
(CR,R,)rNR7fC(0)(CR,R,)rR7<b>, (CR,R,)rC(0)0(CR,R,)rR<7d>,
(CR,R,)rOC(0)(CR,R,)rR7b, (CRK^OCCCONR^C^R')^,
(CR,R,)rNR7aC(0)NR7<a>(CR,R,)rR7<a>, (CR^rNR^CCCOOCCR^VR™,
(CR'R')rC(=NR<7f>)NR7aR7a, (CR'R')rNHC(=NR7f)NR7fR<7f>,
(CR^^rSCOJpCCR^^rR715, (CR'R')rS(0)2NR<7a>R7a,
(CR'R')rNR7<a>S(0)2NR7aR7a, (CR,R,)rNR<7f>S(0)2(CR,R,)rR7b, C1-6
halogenalkyl, C2-8alkenyl substituert med 0-3 R', C2-8alkynyl substituert med 0-3 R' og (CR'R')rfenyl substituert med 0-3 R<7e>;
alternativt kan to R<7>på nabostilte atomer på R<2>kombineres for å danne et cyklisk acetal;
R<7a>, ved hver forekomst er uavhengig valgt fra H, metyl substituert med 0-1
R<7>9, C2-6alkyl substituert med 0-2 R<7e>, C3-8alkenyl substituert med 0-2R7<e>, C3-8 alkynyl substituert med 0-2 R<7e>, en (CH2)r-C3-lO
karbocyklisk rest substituert med 0-5 R<7e>og et (CH2)r-5-10 leddet heterocyklisk system inneholdende 1-4 heteroatomer valgt fra N, O og S, substituert med 0-2R7e;
R<7>b, ved hver forekomst, er valgt fra C1-6alkyl substituert med 0-2 R<7e>, C3-8
alkenyl substituert med 0-2 R<7e>, C3-8alkynyl substituert med 0-2 R<7e>,
en (CH2)rC3-6karbocyklisk rest substituert med 0-3 R<7e>og et (CH2)r 5-6 leddet heterocyklisk system inneholdende 1-4 heteroatomer valgt fra N, O og S, substituert med 0-2 R<7>e;
R<7d>, ved hver forekomst, er valgt fra C3-8alkenyl substituert med 0-2 R<7e>,
C3-8alkynyl substituert med 0-2 R<7e>, metyl, CF3, C2-4halogenalkyl,
C2-6alkyl substituert med 0-3 R<7e>, en (CH2)r-C3-io karbocyklisk rest substituert med 0-3 R<7e>og et (CH2)r-5-6 leddet heterocyklisk system inneholdende 1-4 heteroatomer valgt fra N, O og S, substituert med 0-3R7e;
R<7e>, ved hver forekomst, er valgt fra C1-6alkyl, C2-8alkenyl, C2-8alkynyl,
(CH2)rC3-6cykloalkyl, Cl, F, Br, I, CN, NO2, (CF2)rCF3, (CH2)rOCi-5
alkyl, OH, SH, C(0)OCi-5alkyl, (CH2)rSCi-5alkyl, (CH2)rNR7fR7f og (CH2)r<f>enyl;
R<7*>, ved hver forekomst, er valgt fra H, C1-5alkyl og C3-6cykloalkyl og fenyl;
R<7>9 er uavhengig valgt fra -C(0)R7b, -C(0)OR7d, -C(0)NR<7f>R<7f>og
(CH2)r<f>enyl;
R', ved hver forekomst, er valgt fra H, C1-6alkyl substituert med R^<e>, C2-8
alkenyl, C2-8alkynyl, (CH2)rC3-6cykloalkyl;
R8 er valgt fra H, C1.4alkyl og C3.4cykloalkyl;
R<9>er valgt fra H, C1.4alkyl, C3.4cykloalkyl, -C(0)H og -C(0)-Ci_4alkyl;
p, ved hver forekomst, er uavhengig valgt fra 0, 1 og 2; og r, ved hver forekomst, er uavhengig valgt fra 0,1, 2, 3 og 4.
Foretrukket er forbindelsene over hvor
R^<a>, ved hver forekomst, er uavhengig valgt fra H, metyl, etyl, propyl, i-propyl,
butyl, i-butyl, pentyl, heksyl, cyklopropyl og cyklobutyl; og
r, ved hver forekomst, er valgt fra 0,1 og 2.
Ytterligere foretrukket er forbindelsene over hvor
R<1>er valgt fra H, R<6>, Ci_e alkyl substituert med 0-3 R<6>, C2-6alkenyl substituert med 0-3 R<6>, C2-6alkynyl substituert med 0-3 R<6>, C6-10
arylgruppe substituert med 0-5 R<6>, hvor arylgruppen er valgt fra fenyl og naftyl og et 5-10 leddet heteroarylsystem inneholdende 1-4 heteroatomer valgt fra N, O og S, substituert med 0-3 R<6>, hvor heteroarylgruppen er valgt fra indolyl, benzimidazolyl, benzofuranyl, benzotiofuranyl, benzoksazolyl, benztiazolyl, benztriazolyl, benztetrazolyl, benzisoksazolyl, benzisotiazolyl, benzimidazalonyl, cinnolinyl, furanyl, imidazolyl, indazolyl, indolyl, isonikotinyl, isokinolinyl
isotiazolyl, isoksazolinyl, isoksazolyl, oksazolyl, ftalazinyl, pikolinyl, pyrazinyl, pyrazolyl, pyridazinyl, pyridyl, pyridinyl, pyrimidinyl, pyrrolyl, kinazolinyl, kinolinyl, tiazolyl, tienyl, triazinyl og tetrazolyl;
R<2>er valgt fra fenyl substituert med 0-2 R<7>og et 5-10 leddet heteroarylsystem inneholdende 1-4 heteroatomer valgt fra N, O og S, substituert med 0-3 R<7>hvor heteroarylgruppen er valgt fra indolyl, benzimidazolyl, benzofuranyl, benzotiofuranyl, benzoksazolyl, benztiazolyl, benztriazolyl, benztetrazolyl, benzisoksazolyl, benzisotiazolyl, benzimidazalonyl, cinnolinyl, furanyl, imidazolyl, indazolyl, indolyl, isokinolinyl isotiazolyl, isoksazolyl, oksazolyl, ftalazinyl, pyrazinyl, pyrazolyl, pyridazinyl, pyridyl, pyridinyl, pyrimidinyl, pyrrolyl, pyrrolotriazinyl, kinazolinyl, kinolinyl, tiazolyl, tienyl og tetrazolyl; og
R<8>er valgt fra H, metyl, etyl, propyl, i-propyl og cyklopropyl.
Også foretrukket er forbindelsene over hvor
R<6>, ved hver forekomst, er valgt fra C1-8alkyl, C2-8alkenyl, C2-8alkynyl,
(CH2)rC3-6 cykloalkyl, Cl, Br, I, F, NO2, CN, (CH2)rNR<6a,>R<6a>',
(CH2)rOH, (CH2)rO(CH2)rR6d, (CH2)rSH, (CH2)rC(0)H,
(CH2)rS(CH2)rR6d, (CH2)rC(0)OH, (CH2)rC(0)(CH2)rR<6b>,
(CH2)rC(0)NR<6a>R<6a>j(CH2)rNR<6f>C(0)R<6>b', (CH2)rC(0)0(CH2)rR<6d>,
(CH2)rNR6aC(0)NR6a'R6d,j (CH2)rNR6aC(S)NR6aR6aj (CH2)rOC(0)(CH2)rR6b, (CH2)rS(0)pR6b'i (CH2)r<S>(0)2NR6aR6aj(CH2)rNR6fS(0)2(CH2)rR<6b>, (CH2)rNR6fS(0)2NR6aR6ajq^ q halogenalkyl og (CH2)rfenyl substituert med 0-3 R<6e>og et (CH2)r-5-6 leddet heterocyklisk system inneholdende 1-2 heteroatomer valgt fra N,
O og S, substituert med 0-2 R^ e, hvor det heterocykliske systemet er valgt fra aziridinyl, azetidinyl, pyrrolyl, piperidinyl og morfolinyl;
R<6a>, ved hver forekomst, er uavhengig valgt fra H, metyl, etyl, propyl, i-propyl,
butyl, i-butyl, t-butyl, pentyl og heksyl;
R^<a>', ved hver forekomst, er valgt fra H, C1-6alkyl og C3.6cykloalkyl;
R6b ved hver forekomst, er valgt fra H, metyl, etyl, propyl, i-propyl, butyl, i-butyl, t-butyl, pentyl og heksyl;
R<f>Sb', vecj hver forekomst, er valgt fra H, C1-6alkyl og C$. q cykloalkyl;
R6d ved hver forekomst, er valgt fra metyl, CF3, etyl, propyl, i-propyl, butyl, i-butyl, t-butyl, pentyl og heksyl;
rGc<T>, ved hver forekomst, er valgt fra H, CF3og C1-6alkyl og C3.6
cykloalkyl;
R<6e>, ved hver forekomst, er valgt fra C1-6alkyl, C2-8alkenyl, C2-8alkynyl,
(CH2)rC3-6cykloalkyl, Cl, F, Br, I, CN, NO2, (CF2)rCF3, (CH2)rOCi-5
alkyl, OH, SH, (CH2)rSCi-5alkyl, (CH2)rNR<6f>R6f C(0)OCi-5alkyl, og (CH2)r<f>enyl;
R6f ved hver forekomst, er valgt fra H, metyl, etyl, propyl, i-propyl, butyl, i-butyl, t-butyl, pentyl, heksyl, cyklopropyl og fenyl;
R<7>er valgt fra metyl, etyl, propyl, i-propyl, butyl, i-butyl, s- butyl, t-butyl,
pentyl, heksyl, (CH2)rC3-6cykloalkyl, Cl, Br, I, F, NO2, CN,
(CH2)rNR7aR7a, (CH2)r<O>H, (CH2)rO(CH2)rR7d (CH2)rSH,
(CH2)rC(0)H, (CH2)rS(CH2)rR7d, (CH2)rC(0)OH,
(CH2)rC(0)(CH2)rR7b, (CH2)rC(0)NR7aR7a,
(CH2)rNR7fC(0)(CH2)rR7b, (CH2)rC(0)0(CH2)r<R7d>,
(CH2)rOC(0)(CH2)rR7b,(CH2)rOC(0)NR7aR7a,
(CH2)rNR<7a>C(0)NR7aR<7a>, (C<H>2)rNR<7a>C(0)0(CH2)rR<7d>,
(CH2)rS(0)p(CH2)rR7b (CH2)rS(0)2NR7aR7a,
(CH2)rNR7fS(0)2(CH2)rR7<b>, C1-6halogenalkyl og (CH2)rfenyl substituert med 0-3 R<7e>og et (CH2)r-5-6 leddet heterocyklisk system inneholdende 1-4 heteroatomer valgt fra N, O og S, substituert med 0-3 R<7e>, hvor det heterocykliske systemet er valgt fra tienyl, pyridinyl, benzotiazolyl og tetrazolyl;
R<7a>, ved hver forekomst, er valgt fra H, metyl, etyl, propyl, i-propyl, butyl, i-butyl, t-butyl, pentyl, heksyl, prop-2-enyl, 2-metyl-2-propenyl, cyklopropyl, cyklobutyl, cyklopentyl, cykloheksyl, CH2cyklopropyl og benzyl;
R<7b>, ved hver forekomst, er valgt fra metyl, etyl, propyl, i-propyl, butyl, i-butyl,
t-butyl, pentyl, heksyl, cyklopropyl, cyklopentyl, CH2-cyklopentyl, cykloheksyl, CH2-cykloheksyl, CF3, pyrrolidinyl, morfolinyl, piperizenyl substituert med 0-1 R<7e>og azetidinyl;
R<7d>, ved hver forekomst, er valgt fra metyl, CF3, CF2CF3, CHF2, CH2F, etyl,
propyl, i-propyl, butyl, i-butyl, t-butyl, pentyl, heksyl og cyklopropyl;
R<7e>, ved hver forekomst, er valgt fra C1-6alkyl, C2- 8 alkenyl, C2- 8 alkynyl,
(CH2)rC3-6cykloalkyl, Cl, F, Br, I, CN, N02, (CF2)rCF3, (CH2)rOCi-5
alkyl, OH, SH, C(0)OCi-5alkyl, (CH2)rSCi-5alkyl, (CH2)rNR7fR7f og (CH2)r<f>enyl;
R<7*>, ved hver forekomst, er valgt fra H, metyl, etyl, propyl, i-propyl, butyl, i-butyl, t-butyl, pentyl, heksyl, cyklopropyl og fenyl; og
rer 0 eller 1.
Foretrukket er også forbindelsene over hvor
R<7>, ved hver forekomst, er valgt fra metyl, etyl, propyl, i-propyl, butyl, i-butyl,
s- butyl, t-butyl, pentyl, heksyl, (CH2)rC3-6cykloalkyl, Cl, Br, I, F, NO2,
CN, (CH2)rNR7aR7a, (CH2)rOH, (CH2)rOR7d, (CH2)rSH,
(CH2)rC(0)H, (CH2)rSR7d, (CH2)rC(0)OH, (CH2)rC(0)R7b,
(CH2)rC(0)NR7aR7a, (CH2)r<N>R<7f>C(0)R7b, (CH2)rC(0)OR7d,
(CH2)rOC(0)R7b,(CH2)rOC(0)NR7aR7a,(CH2)rNR<7a>C(0)NR7aR7a,
(CH2)rNR<7f>C(0)OR<7d>, (CH2)rS(0)pR7b, (CH2)rS(0)2NR<7a>R7a,
(CH2)rNR7aS(0)2NR7aR7a, (CH2)rNR7fS(0)2R7bC1-2
halogenalkyl,(CH2)rfenyl substituert med 0-3 R<7e>.
Foretrukket er også forbindelsene over hvor
Z er valgt fra -NHC(O)- og -NH-;
R<1>er valgt fra Ci_6alkyl substituert fra 0-1 R<6>og -C(0)0-Ci_6alkyl; og
R<2>er valgt fra fenyl substituert med 0-2 R<7>og et 5-10 leddet heteroaryl system inneholdende 1-4 heteroatomer valgt fra N, O og S, substituert med 0-3 R<7>hvor heteroarylsystemet er valgt fra kinazolinyl, triazinyl, pyrimidinyl, pikolinyl, isonikotinyl, furanyl, indolyl, pyridinyl, pyrazolyl, pyrazinyl, tiazolyl, tiofenyl og isoksazolyl.
Foretrukket er også forbindelsene over hvor
R<1>er valgt fra H, C<\_ q alkyl substituert med 0-1 R<6>og -C(0)0-Ci_6alkyl.
Spesielt foretrukket er forbindelsene over som har strukturen
eller et farmasøytisk akseptabelt salt derav.
Spesielt foretrukket er forbindelsene over som har strukturen
eller et farmasøytisk akseptabelt salt derav.
Spesielt foretrukket er forbindelsene over som har strukturen
eller et farmasøytisk akseptabelt salt derav.
I en annen utførelsesform tilveiebringer foreliggende oppfinnelse nye forbindelser med formel (la), hvor forbindelsen er valgt fra forbindelsene i krav 11.
I en annen utførelsesform angår foreliggende oppfinnelse forbindelser med formel (la) for anvendelse i terapi.
I en annen utførelsesform angår foreliggende oppfinnelse et farmasøytisk preparat, omfattende en farmasøytisk akseptabel bærer og en terapeutisk effektiv mengde av en forbindelse med formel (la).
I en annen utførelsesform angår foreliggende oppfinnelsen forbindelsene over for anvendelse i behandling av en lidelse valgt fra osteoartritt, aneurisme, feber, kardiovaskulære effekter, Crohn's sykdom, kongestiv hjertesvikt, autoimmune sykdommer, HIV-infeksjon, HIV-assosiert demens, psoriasis, idiopatisk pulmonal fibrose, transplantat arteriosklerose, fysisk- eller kjemisk-fremkalt hjerne traume, inflammatorisk tarmsykdom, alveoleritt, kolitt, systemisk lupus erythematosus, nefrotokisk serum nefritt, glomerulærnefritt, astma, multippel sklerose, artherosklerose, revmatoid artritt, restinose, organ transplantasjon og kreft.
I en annen utførelsesform angår foreliggende oppfinnelsen forbindelsene over for anvendelse i behandling av en lidelse valgt fra alveolertis, kolitt, systemisk lupus erythematosus, nefrotoksisk serum nefritt, glomerulærnefritt, astma, multippel sklerose, artherosklerose, revmatoid, artritt restinose, organ transplantasjon og kreft.
I en annen utførelsesform angår foreliggende oppfinnelsen forbindelsene over for anvendelse i behandling av en lidelse valgt fra astma, multippel sklerose, artherosklerose og revmatoid artritt.
Foreliggende oppfinnelse omfatter alle kombinasjoner av alternative aspekter ifølge oppfinnelsen som angitt i kravene.
DEFINISJONER
Følgende definisjoner gjelder om ikke på annen måte angitt i kravene.
Forbindelsene beskrevet her kan ha asymmetriske sentere. Forbindelser ifølge foreliggende oppfinnelse inneholdende et asymmetrisk substituert atom kan isoleres i optisk aktive eller racemiske former. Det er velkjent på området hvorledes fremstille optisk aktive former, så som ved spaltning av racemiske former eller ved syntese fra optisk aktive utgangsmaterialer. Mange geometriske isomerer av olefiner, C=N dobbeltbindinger og lignende kan også være til stede i forbindelsene beskrevet her og alle slike stabile isomerer er omfattet av foreliggende oppfinnelse. Cis og trans geometriske isomerer av forbindelsene ifølge foreliggende oppfinnelse er beskrevet og kan isoleres som en blanding av isomerer eller som separerte isomere former. Alle chirale, diastereomere, racemiske former og alle geometriske isomere former av en struktur er omfattet, hvis ikke den spesifikke stereokjemi eller isomere form er spesifikt angitt.
Én enantiomer av en forbindelse med formel I kan oppvise overlegen aktivitet sammenlignet med den andre. Således er alle stereokjemier betraktet som del av foreliggende oppfinnelse. Når nødvendig kan separering av det racemiske materiale oppnås ved HPLC ved anvendelse av en chiral kolonne eller ved spaltning ved anvendelse av et oppløsningsmiddel så som kamfonsyreklorid ("camphonic chloride") som i Steven D. Young, et al, Antimicrobial Agents and Chemotherapy, 1995, 2602-2605.
Betegnelsen "substituert" som anvendt her, betyr at hvilket som helst eller flere hydrogenatomer på det angitte atom eller ring er erstattet med et valg fra den angitte gruppe, forutsatt at de angitte atomers eller ringatomers normale valens ikke blir oversteget og at substitusjonen resulterer i en stabil forbindelse. Når en substitent er keto (dvs. =0), da er 2 hydrogenatomer på atomet erstattet.
Når hvilken som helst variabel (f.eks. R<1>^) forekommer mer enn én gang i hvilken som helst bestanddel eller formel for en forbindelse, er dens definisjon ved hver forekomst uavhengig av dens definisjon ved hver andre forekomst. Således, hvis for eksempel en gruppe er vist å være substituert med 0-2 R<10>, da kan nevnte gruppe eventuelt være substituert med opptil to R10 grupper og R<1>0 ved hver forekomst er uavhengig valgt fra definisjonen av R10. Videre er kombinasjoner av substituenter og/eller variabler tillatt bare hvis slike kombinasjoner resulterer i stabile forbindelser.
Når en binding til en substituent er vist å krysse en binding som forbinder to atomer i en ring, da kan en slik substituent være bundet til hvilket som helst atom i ringen. Når en substituent er listet opp uten indikasjon av atomet via hvilket en slik substituent er bundet til resten av forbindelsen med en gitt formel, da kan en slik substituent være bundet via hvilket som helst atom i substituenten. Kombinasjoner av substituenter og/eller variabler er tillatt bare hvis slike kombinasjoner resulterer i stabile forbindelser.
Som anvendt her skal "C1-8alkyl" omfatte både forgrenede og rettkjedede mettede alifatiske hydrokarbongrupper som har det spesifiserte antall karbonatomer, idet eksempler omfatter metyl, etyl, n-propyl, i-propyl, n-butyl, i-butyl, sek-butyl, t-butyl, pentyl og heksyl. C1-8alkyl skal omfatte C-|, C2, C3, C4, C5, C6, C7og C8alkylgrupper. "Alkenyl" skal omfatte hydrokarbonkjeder med enten en lineær eller forgrenet konfigurasjon og én eller flere umettede karbon-karbon-bindinger som kan forekomme på hvilket som helst stabilt punkt langs kjeden, så som etenyl, propenyl og lignende. "Alkynyl" skal omfatte hydrokarbonkjeder med enten en lineær eller forgrenet konfigurasjon og én eller flere umettede triple karbon-karbon-bindinger som kan forekomme på hvilket som helst stabilt punkt langs kjeden, så som etynyl, propynyl og lignende. "C3-6cykloalkyl" skal omfatte mettede ringgrupper som har det spesifiserte antall karbonatomer i ringen, omfattende mono-, bi- eller poly-cykliske ringsystemer, så som cyklopropyl, cyklobutyl, cyklopentyl, cykloheksyl og cykloheptyl i tilfellet av C7cykloalkyl. C3-6cykloalkyl, skal omfatte C3, C4, C5og C6cykloalkylgrupper
"Halogen" som anvendt her angir fluor, klor, brom og jod; og "halogenalkyl" skal omfatte både forgrenede og rettkjedede mettede alifatiske hydrokarbongrupper, for eksempel CF3, som har det spesifiserte antall karbonatomer, substituert med 1 eller flere halogenatomer (for eksempel
-CVFWhvor v = 1 til 3 og w = 1 til (2v+1)).
Som anvendt her skal betegnelsen "5-6-leddet cyklisk ketal" bety 2,2-disubstituert 1,3-dioksolan eller 2,2-disubstituert 1,3-dioksan og deres derivater.
Som anvendt her skal "karbocyklyl" eller "karbocyklisk rest" bety hvilken som helst stabil 3-, 4-, 5-, 6- eller 7-leddet monocyklisk eller bicyklisk eller 7-, 8-, 9-, 10-, 11-, 12- eller 13-leddet bicyklisk eller tricyklisk gruppe, som hvilken som helst kan være mettet, delvis umettet eller aromatisk. Eksempler på slike karbocykliske grupper omfatter cyklopropyl, cyklobutyl, cyklopentyl, cykloheksyl, cykloheptyl, adamantyl, cyklooktyl, [3.3.0]bicyklooktan, [4.3.0]bicyklononan, [4.4.0]bicyklodekan (dekalin), [2.2.2]bicyklooktan, fluorenyl, fenyl, naftyl, indanyl, adamantyl eller tetrahydronaftyl (tetralin).
Som anvendt her skal betegnelsen "heterocyklisk gruppe" eller "heterocyklisk system" bety en stabil 5-, 6- eller 7-leddet monocyklisk eller bicyklisk eller 7-, 8-, 9- eller 10-leddet bicyklisk heterocyklisk ring som er mettet, delvis umettet eller umettet (aromatisk) og som består av karbonatomer og 1, 2, 3 eller 4 heteroatomer uavhengig valgt fra gruppen bestående av N, NH, O og S og omfatter hvilken som helst bicyklisk gruppe hvor hvilken som helst av de ovenfor definerte heterocykliske ringer er kondensert til en benzenring. Nitrogen- og svovel-heteroatomene kan eventuelt være oksydert. Den heterocykliske ringen kan eventuelt omfatte - C(O)-, karbonyl. Den heterocykliske ringen kan være bundet til dens vedhengende gruppe ved hvilket som helst heteroatom eller karbonatom som resulterer i en stabil struktur. De heterocykliske ringene beskrevet her kan være substituert på karbon eller på et nitrogenatom hvis den resulterende forbindelsen er stabil. Hvis spesifikt angitt kan et nitrogen i den heterocykliske gruppen eventuelt være kvaternisert. Det er foretrukket at når det totale antall av S- og O-atomer i den heterocykliske gruppen overstiger 1, da er disse heteroatomer ikke i nabostilling til hverandre. Som anvendt her skal betegnelsen "aromatisk heterocyklisk system" eller "heteroaryl" bety en stabil 5- til 7-leddet monocyklisk eller bicyklisk eller 7- til 10-leddet bicyklisk heterocyklisk aromatisk ring som består av karbonatomer og fra 1 til 4 heteroatomer uavhengig valgt fra gruppen bestående av N, O og S og er aromatisk av natur.
Eksempler på heterocykliske grupper omfatter 1 H-indazol, 2-pyrrolidonyl, 2H,6H-1,5,2-ditiazinyl, 2H-pyrrolyl, 1 H-indolyl, 4-piperidonyl, 4aH-karbazol, 4H-kinolizinyl, 6H-1,2,5-tiadiazinyl, akridinyl, azocinyl, benzimidazolyl, benzofuranyl, benzotiofuranyl, benzotiofenyl, benzoksazolyl, benztiazolyl, benztriazolyl, benztetrazolyl, benzisoksazolyl, benzisotiazolyl, benzimidazalonyl, karbazolyl, 4aH-karbazolyl, B-karbolinyl, kromanyl, kromenyl, cinnolinyl, dekahydrokinolinyl, 2H,6H-1,5,2-ditiazinyl, dihydrofuro[2,3-b]tetrahydrofuran, furanyl, furazanyl, imidazolidinyl, imidazolinyl, imidazolyl, indazolyl, indolenyl, indolinyl, indolizinyl, indolyl, isobenzofuranyl, isokromanyl, isoindazolyl, isoindolinyl, isoindolyl, isokinolinyl (benzimidazolyl), isotiazolyl, isoksazolyl, morfolinyl, naftyridinyl, oktahydroisokinolinyl, oksadiazolyl, 1,2,3-oksadiazolyl, 1,2,4-oksadiazolyl, 1,2,5-oksadiazolyl, 1,3,4-oksadiazolyl, oksazolidinyl, oksazolyl, oksazolidinylperimidinyl, fenantridinyl, fenantrolinyl, fenarsazinyl, fenazinyl, fenotiazinyl, fenoksatiinyl, fenoksazinyl, ftalazinyl, piperazinyl, piperidinyl, pteridinyl, piperidonyl, 4-piperidonyl, pteridinyl, purinyl, pyranyl, pyrazinyl, pyrazolidinyl, pyrazolinyl, pyrazolyl, pyridazinyl, pyridooksazol, pyridoimidazol, pyridotiazol, pyridinyl, pyridyl, pyrimidinyl, pyrrolidinyl, pyrrolinyl, pyrrolyl, kinazolinyl, kinolinyl, 4H-kinolizinyl, kinoksalinyl, kinuklidinyl, karbolinyl, tetrahydrofuranyl, tetrahydroisokinolinyl, tetrahydrokinolinyl, 6H-1,2,5-tiadiazinyl, 1,2,3-tiadiazolyl, 1,2,4-tiadiazolyl, 1,2,5-tiadiazolyl, 1,3,4-tiadiazolyl, tiantrenyl, tiazolyl, tienyl, tienotiazolyl, tienooksazolyl, tienoimidazolyl, tiofenyl, triazinyl, 1,2,3-triazolyl, 1,2,4-triazolyl, 1,2,5-triazolyl, 1,3,4-triazolyl, tetrazolyl og xantenyl. I et annet aspekt ved oppfinnelsen omfatter de heterocykliske gruppene pyridinyl, tiofenyl, furanyl, indazolyl, benzotiazolyl, benzimidazolyl, benzotiafenyl, benzofuranyl, benzoksazolyl, benzisoksazolyl, kinolinyl, isokinolinyl, imidazolyl, indolyl, isoidolyl, piperidinyl, piperidonyl, 4-piperidonyl, piperonyl, pyrrazolyl, 1,2,4-triazolyl, 1,2,3-triazolyl, tetrazolyl, tiazolyl, oksazolyl, pyrazinyl og pyrimidinyl. Også omfattet er kondenserte ring- og spiro-forbindelser inneholdende, for eksempel de heterocykliske grupper ovenfor.
Eksempler på heteroaryl er 1H-indazol, 2H,6H-1,5,2-ditiazinyl, indolyl, 4aH-karbazol, 4H-kinolizinyl, 6H-1,2,5-tiadiazinyl, akridinyl, azocinyl, benzimidazolyl, benzofuranyl, benzotiofuranyl, benzotiofenyl, benzoksazolyl, benztiazolyl, benztriazolyl, benztetrazolyl, benzisoksazolyl, benzisotiazolyl, benzimidazalonyl, karbazolyl, 4aH-karbazolyl, B-karbolinyl, kromanyl, kromenyl, cinnolinyl, dekahydrokinolinyl, 2H,6H-1,5,2-ditiazinyl, dihydrofuro[2,3-6]tetrahydrofuran, furanyl, furazanyl, imidazolidinyl, imidazolinyl, imidazolyl, indazolyl, indolnyl, indolinyl, indolizinyl, indolyl, isobenzofuranyl, isokromanyl, isoindazolyl, isoindolinyl, isoindolyl, isokinolinyl (benzimidazolyl), isotiazolyl, isoksazolyl, morfolinyl, naftyridinyl, oktahydroisokinolinyl, oksadiazolyl, 1,2,3-oksadiazolyl, 1,2,4-oksadiazolyl, 1,2,5-oksadiazolyl, 1,3,4-oksadiazolyl, oksazolidinyl, oksazolyl, oksazolidinylperimidinyl, fenantridinyl, fenantrolinyl, fenarsazinyl, fenazinyl, fenotiazinyl, fenoksatiinyl, fenoksazinyl, ftalazinyl, piperazinyl, piperidinyl, pteridinyl, piperidonyl, 4-piperidonyl, pteridinyl, purinyl, pyranyl, pyrazinyl, pyrazolidinyl, pyrazolinyl, pyrazolyl, pyridazinyl, pyridooksazol, pyridoimidazol, pyridotiazol, pyridinyl, pyridyl, pyrimidinyl, pyrrolidinyl, pyrrolinyl, pyrrolyl, kinazolinyl, kinolinyl, 4H-kinolizinyl, kinoksalinyl, kinuklidinyl, karbolinyl, tetrahydrofuranyl, tetrahydroisokinolinyl, tetrahydrokinolinyl, 6H-1,2,5-tiadiazinyl, 1,2,3-tiadiazolyl, 1,2,4-tiadiazolyl, 1,2,5-tiadiazolyl, 1,3,4-tiadiazolyl, tiantrenyl, tiazolyl, tienyl, tienotiazolyl, tienooksazolyl, tienoimidazolyl, tiofenyl, triazinyl, 1,2,3-triazolyl, 1,2,4-triazolyl, 1,2,5-triazolyl, 1,3,4-triazolyl, tetrazolyl og xantenyl. I et annet aspekt ved oppfinnelsen er eksempler på heteroaryl indolyl, benzimidazolyl, benzofuranyl, benzotiofuranyl, benzoksazolyl, benztiazolyl, benztriazolyl, benztetrazolyl, benzisoksazolyl, benzisotiazolyl, benzimidazalonyl, cinnolinyl, furanyl, imidazolyl, indazolyl, indolyl, isokinolinyl isotiazolyl, isoksazolyl, oksazolyl, pyrazinyl, pyrazolyl, pyridazinyl, pyridyl, pyridinyl, pyrimidinyl, pyrrolyl, kinazolinyl, kinolinyl, tiazolyl, tienyl og tetrazolyl.
Som anvendt her skal betegnelsen "cyklisk acetal" eller uttrykket når to variabler "sammen danner et cyklisk acetal" bety substituenten -O-CH2-O-.
Uttrykket "farmasøytisk akseptable" blir anvendt her for å referere til de forbindelser, materialer, preparater og/eller doseformer som, innenfor omfanget av sunn medisinsk bedømmelse, er egnet for anvendelse i kontakt med vevet til mennesker og dyr uten for høy toksisitet, irritasjon, allergisk respons eller andre problemer eller komplikasjoner, som er i samsvar med et rimelig nytte/risiko-forhold.
Som anvendt her refererer "farmasøytisk akseptable salter" til derivater av de beskrevne forbindelser hvor stamforbindelsen blir modifisert ved å danne syre- eller basesalter derav. Eksempler på farmasøytisk akseptable salter omfatter mineralske eller organiske syresalter av basiske rester så som aminer; alkaliske eller organiske salter av sure rester så som karboksylsyrer. De farmasøytisk akseptable salter omfatter de konvensjonelle ikke-toksiske salter eller de kvaternære ammoniumsalter av stamforbindelsen dannet for eksempel fra ikke-toksiske uorganiske eller organiske syrer. For eksempel omfatter slike konvensjonelle ikke-toksiske salter de avledet fra uorganiske syrer så som saltsyre, bromhydrogensyre, svovelsyre, sulfaminsyre, fosforsyre, salpetersyre og lignende; og saltene fremstilt fra organiske syrer så som eddiksyre, propionsyre, ravsyre, glykolsyre, stearinsyre, melkesyre, eplesyre, vinsyre, sitronsyre, askorbinsyre, pamoinsyre, maleinsyre, hydroksymaleinsyre, fenyleddiksyre, glutaminsyre, benzosyre, salicylsyre, sulfanilsyre, 2-acetoksybenzosyre, fumarsyre, toluensulfonsyre, metansulfonsyre, etan- disulfonsyre, oksalsyre og isetionsyre.
De farmasøytisk akseptable salter ifølge foreliggende oppfinnelse kan syntetiseres fra stamforbindelsen som inneholder en basisk eller sur gruppe ved konvensjonelle kjemiske metoder. Generelt kan slike salter fremstilles ved omsetning av de frie syre- eller baseformer av disse forbindelser med en støkiometrisk mengde av den passende base eller syre i vann eller i et organisk løsningsmiddel eller i en blanding av de to; generelt er ikke-vandige medier som eter, etylacetat, etanol, isopropanol eller acetonitril foretrukket. Lister over egnede salter kan finnes i Remington' s Pharmaceutical Sciences, 17th ed., Mack Publishing Company, Easton, PA, 1985, s. 1418.
"Prodrug" omfatter hvilke som helst kovalent bundede bærere som frigjør et aktivt parentalt medikament ifølge foreliggende oppfinnelse in vivo når slikt prodrug blir administrert til et pattedyr. Prodrug blir fremstilt ved
modifikasjon av funksjonelle grupper til stede i forbindelsen på en slik måte at modifikasjonene blir spaltet, enten ved rutinemessig manipulering eller in vivo, til stamforbindelsen. Prodrug omfatter forbindelser hvor en hydroksy-, amino-eller sulfhydryl-gruppe er bundet til hvilken som helst gruppe som, når
legemiddelforløperen ifølge foreliggende oppfinnelse blir administrert til et pattedyr, spaltes den for å danne henholdsvis en fri hydroksyl-, fri amino- eller fri sulfhydryl-gruppe. Eksempler på prodrug omfatter acetat-, formiat- og benzoat-derivater av alkohol og amin funksjonelle grupper.
"Stabil forbindelse" og "stabil struktur" menes å angi en forbindelse som er tilstrekkelig robust til å overleve isolering til en anvendelig grad av renhet fra en reaksjonsblanding og formulering til et effektivt terapeutisk middel. Foreliggende oppfinnelse skal omfatte stabile forbindelser.
"Terapeutisk effektiv mengde" skal omfatte en mengde av en forbindelse ifølge foreliggende oppfinnelse alene eller en mengde av kombinasjonen av forbindelser krevet eller en mengde av en forbindelse ifølge foreliggende oppfinnelse i kombinasjon med andre aktive bestanddeler effektive til å hemme MCP-1 eller effektive til å behandle eller forhindre inflammatoriske lidelser.
Som anvendt her dekker "behandling av" eller "behandling" behandling av en sykdomstilstand hos et pattedyr, spesielt hos et menneske og omfatter: (a) forhindring av at sykdomstilstanden forekommer hos et pattedyr, spesielt når et slikt pattedyr er predisponert for sykdomstilstanden, men ennu ikke har vært diagnostisert å ha den; (b) hemming av sykdomstilstanden, dvs. stanse dens utvikling; og/eller (c) lindring av sykdomstilstanden, dvs. forårsake regresjon av sykdomstilstanden.
SYNTESE
Forbindelsene ifølge foreliggende oppfinnelse kan fremstilles på flere måter velkjent for fagfolk på området organisk syntese. Forbindelsene ifølge foreliggende oppfinnelse kan syntetiseres ved anvendelse av metodene beskrevet nedenfor, sammen med syntese-metoder kjent på området syntetisk organisk kjemi eller variasjoner derav som det vil forstås av fagfolk på området. De nye forbindelsene ifølge foreliggende oppfinnelse kan fremstilles ved anvendelse av reaksjonene og teknikkene beskrevet i dette avsnittet. Reaksjonene blir utført i løsningsmidler som passer for reagensene og materialene anvendt og er egnet for omdannelsene som utføres. I beskrivelsen av syntese-metodene beskrevet nedenfor, skal det også forstås at alle foreslåtte reaksjonsbetingelser, omfattende valg av løsningsmiddel, reaksjonsatmosfære, reaksjonstemperatur, varighet av forsøket og opparbeidingsprosedyrer, er valgt å være betingelsene standard for den reaksjon, som lett vil være kjent av fagfolk på området. Det vil forstås av fagfolk på området organisk syntese at funksjonaliteten til stede på forskjellige deler av molekylet må være kompatible med reagensene og reaksjonene foreslått. Slike restriksjoner for substituentene som er kompatible med reaksjonsbetingelsene vil være klare for fagfolk på området og alternative metoder kan da anvendes. Dette vil noen ganger kreve bedømmelse for å modifisere rekkefølgen av syntesetrinn eller velge ett spesielt prosess-skjema fremfor et annet for å oppnå en ønsket forbindelse ifølge oppfinnelsen. Det vil også forstås at en annen vesentlig betraktning ved planlegging av hvilken som helst synteserute på dette området er et fornuftig valg av beskyttelsesgruppen anvendt for beskyttelse av de reaktive funksjonelle grupper til stede i forbindelsene beskrevet ved foreliggende oppfinnelse. En pålitelig rapport som beskriver de mange alternativer for en fagmann er Greene og Wuts ( Protective Groups in Organic Synthesis, Wiley og Sons, 1999).
Kjemokin-antagonister kan avledes fra forbindelser med formel 1.1, som vist i Skjemaene -2 og 4; syntese av forbindelser med formel 1.1 er beskrevet i Skjema 7 og den ledsagende tekst.
Forbindelser med formel 2,4, som inneholder et fem-leddet laktam, blir syntetisert som vist i Skjema 2. Syre-mediert Boc-fjerning, peptidkobling med det kjente metionin-derivat 2.1, svovelalkylering og intramolekylær amid-alkylering under basiske betingelser (NaH kan også anvendes, se Freidinger et al., J. Org. Chem. 1982, 47, 104) tilveiebringer gamma-laktamet 2.3 fra karbamatet 1.1. Fjerning av beskyttelsesgruppen tilveiebringer et primært amin, som kan være konjugert på en rekke måter velkjent for fagfolk på området (se også Skjema 4 og ledsagende tekst).
Laktamer med formel 4.1 kan fremstilles fra forbindelser så som 2.3 (avbeskyttelse og eventuell reduktiv aminering for å innføre R8). Derivatisering av aminer med formel 4.1 kan gjennomføres gjennom flere konvensjonelle metoder for å danne kjemokin-reseptorantagonister; noen av disse metoder er illustrert i Skjema 4. Således gir amidbinding-dannelse forbindelser 4.2. Alternativt kan aminet 4.1 være arylert (se D. Zim & S. L. Buchwald, Organic Letters 2003, 5, 2413 og T. Wang, D. R. Magnia, & L. G. Hamann, ibid, 897 og referanser angitt der), for å gi forbindelse 4.5. Alternativt kan aminet 4.1 være arylert med iminoylklorider, for å gi 4.6.
Kombinasjon av kjemien illustrert i Skjemaene 1-4 kan produsere et stort antall av kjemokinreseptorantagonister.
Gitt tilgjengeligheten av kjemien beskrevet ovenfor i Skjemaene 2 og 4, er alt som er igjen å beskrive syntese av forbindelser med formel 1.1. Forbindelser med formel 1.1 kan noen ganger avledes på en triviell måte ved manipulering av kommersielt tilgjengelig cykliske aminer (NB: selv om aminer med formel 1.1 er vist med Cbz-beskyttelse, kan de syntetiseres med alternative beskyttelsesgrupper eller i ubeskyttet form; bare mindre justeringer til kjemien i skjemaer 1 og 2 ville måtte gjøres i dette tilfellet). I andre tilfeller blir de lett avledet fra kommersielt tilgjengelige ketoner med den generelle formel 7.1, som vist i Skjema 7. Disse ketoner kan være alfa-funksjonaliserte (som veldokumentert i synteselitteratur; er enantioselektive varianter av denne alkyleringen tilgjengelig) for å gi forbindelser med formel 7.2. I noen tilfeller (El = halogenid, hydroksyl eller azid) kan disse forbindelser opparbeides videre (gjennom nukleofil eller elektrofil fortrengningskjemi, med tilflukt til beskyttelsesgrupper når nødvendig), for å gi forbindelser med formel 7.3, som kan omdannes gjennom reduktiv aminering og beskyttelse (se note ovenfor), hvilket gir forbindelser med formel 7.4 (en variant av 1.1). Hvis R1 er en karbon-bundet linker, er en hensiktsmessig metode for forbindelse-syntese vist ved den enantioselektive omdannelsen av 7.2 (El = CO2R) til 7.6 via enamin 7.5 (C. Cimarelli, et al, J. Org. Chem. 1996, 61, 5557 og Y. Hayashi, et al., J. Am. Chem. Soc. 1996, 118, 5502). Opparbeidelse til 7.4 (et derivat med formel 1.1) kan skje direkte fra 7.6 eller via innledende epimerisering til 7.7.
Andre metoder for syntese av 1,2-diaminokarbo- og heterocykliske grupper (se R. Cherney WO-PCT 02/060859) og syntese av 2-aminocykloalkankarboksylsyrer eksisterer (oversikt i Ference Fulop, Chem. Rev. 2001, 101, 2181; se også J. Duan, et al. WO-01/70673 og Soo S. Ko, et al. WO-02/02525). Spesielt er 2-aminocykloalkankarboksylsyrer (og deres heterocykliske varianter) allsidige forløpere for forbindelser med formel 1.1, fordi karboksylsyren kan derivatiseres til en rekke R1 -grupper gjennom addisjonsreaksjoner, amiddannelse, Wittig-utvidelse, reduksjon og alkohol-derivatisering, reduksjon og deretter reduktiv aminering, Curtius-omleiring osv. I tilfeller hvor cykloalkylgruppen inneholder et tilknyttet olefin, kan karboksylsyren også tjene til å bringe videre stereokjemisk informasjon og tillate ytterligere funksjonalisering av ringen, så som for å tilveiebringe stereoselektiv innføring av R5. Denne kjemi er generelt beskrevet i litteraturen (Ference Fulop, Chem. Rev. 2001, 101, 2181); spesifikke eksempler på denne strategi er beskrevet i eksempelavsnittet (se nedenfor). Når disse metoder er betraktet sammen med de belyst i Skjema 7, vil det være klart at et stort antall forbindelser med formel 1.1 kan syntetiseres.
Én diastereomer av en forbindelse med formel I kan oppvise overlegen aktivitet sammenlignet med den andre. Således, mens de ikke begrenser oppfinnelsen, er de følgende stereokjemier eksempler på stereokjemier som er betraktet som en del av foreliggende oppfinnelse.
Ytterligere stereoisomerer er forutsett basert på skjemaet vist nedenfor. Forbindelsene ifølge foreliggende oppfinnelse kan også eksistere i ytterligere stereoisomerer som ikke er vist her.
Når nødvendig kan separering av det racemiske materiale oppnås ved HPLC ved anvendelse av en chiral kolonne eller ved spaltning ved anvendelse av et oppløsningsmiddel så som kamfonsyreklorid som i Wilen, S. H. Tables ofResolving Agents and Optical Resolutions 1972, 308 s. eller ved anvendelse av enantiomert rene syrer og baser. En chiral forbindelse med formel I kan også syntetiseres direkte ved anvendelse av en chiral katalysator eller en chiral ligand, f.eks. Jacobsen, E. Acc. Chem. Res. 2000, 33, 421-431 eller ved anvendelse av andre enantio- og diastereo-selektive reaksjoner og reagenser kjent for fagfolk på området asymmetrisk syntese. Andre trekk ifølge oppfinnelsen vil bli klare i løpet av de følgende beskrivelser av eksempler på utførelsesformer som er gitt for illustrasjon av oppfinnelsen.
EKSEMPLER
Hvis ikke annet er angitt kan det antas at reaksjoner er kjørt under inert atmosfære (N2- eller Ar-gass). Forkortelser anvendt i eksemplene er definert som følger: "1 x" for én gang, "2 x" for to ganger, "3 x" for tre ganger, "°C" for grader Celsius, "ekv" for ekvivalent eller ekvivalenter, "g" for gram, "mg" for milligram, "ml" for milliliter, "<1>H" for proton, "h" for time eller timer, "M" for molar, "min" for minutt eller minutter, "MHz" for megahertz, "MS" for massespektroskopi, "NMR" for kjernemagnetisk resonans-spektroskopi, "rf for romtemperatur, "tic" for tynnskiktskromatografi, "volum/volum" for volum til volum-forhold. "a", "B", "R" og "S" er stereokjemiske betegnelser kjent for fagfolk på området. "RP-HPLC" angir revers-fase høyytelse væskekromatografi. Kromatografiske metoder er typisk ikke spesifisert, siden mange forskjellige metoder vil gi like god ytelse; gradient-eluering ved anvendelse av syre-stimulert MeOH/vann eller syre-stimulert acetonitril/vann ble typisk anvendt. Produkter ble ofte oppnådd som syresalter etter RP-HPLC; om ønsket kan deres parentale frie base avledes ved oppløsning i vandig base og ekstraksjon med organiske løsningsmidler, som vil være klart for fagfolk på området. Kjemiske navn ble avledet ved anvendelse av ChemDraw Ultra, versjon 8.0.8 (mai 2004). Når dette program ikke klarte å gi et navn for den nøyaktige aktuelle struktur, ble et passende navn angitt ved anvendelse av samme metodikk som anvendt av programmet.
Fremstilling av ikke- standard reagenser og syntetiske mellomprodukter anvendt i eksemplene
Fremstilling A1: Syntese av benzyloksykarbonylamino-7-okso-6-aza-bicyklo[3.2.1]oktan-6-karboksylsyre-tert-butylester
Fremstillin<g>A1. Trinn 1: (1 S,2/?)-cis-2-metoksykarbonyl-cykloheks-4-en-1 - karboksylsyre (66,0 g, se Bolm et al. J. Org. Chem. 2000, 65, 6984-6991) ble oppløst i tørr aceton (815 ml) før tilsetning av trietylamin (43,4 g). Denne løsningen ble avkjølt til 0°C og etylklorformiat (46,7 g) ble tilsatt. Den resulterende løsningen ble omrørt 1 time før NaN3(35,0 g) ble tilsatt. Kjølebadet ble fjernet og reaksjonsblandingen ble oppvarmet til romtemperatur natten over. Alt fast materiale ble fjernet ved filtrering og løsningen ble delvis konsentrert. Vann ble langsomt tilsatt og det organiske laget ble separert. Det vandige laget ble ekstrahert med eter. De samlede organiske lag ble vasket med vann og saltløsning før de ble tørket, filtrert og konsentrert. Den resulterende olje (66,1 g) ble oppløst i benzen (800 ml) og ble oppvarmet til et svakt tilbakeløp. Etter 4 timer ble løsningen avkjølt tilbake til romtemperatur. Benzylalkohol (37,5 g) og p-TsOH (1,5 g) ble tilsatt og løsningen ble oppvarmet tilbake til et svakt tilbakeløp natten over. Etter avkjøling til romtemperatur ble reaksjonsblandingen vasket med NaHCOaog saltløsning, tørket, filtrert og konsentrert, hvilket ga (1R,6S)-6-benzyloksykarbonylamino-cykloheks-3-enkarboksylsyre-metylester (97,7 g). MS funnet: (M + H)<+>= 290,2.
Fremstilling A1, Trinn 2: En prøve av (1 R,6S)-6-benzyloksykarbonylamino-cykloheks-3-enkarboksylsyre-metylester (91,4 g) ble oppløst i MeOH (500 ml) før dråpevis tilsetning av NaOH (25,3 g) i vann (95 ml). Etter 3 timer ble løsningen delvis konsentrert og en Et20/vann-blanding ble tilsatt. Det vandige laget ble separert og ble surgjort (pH~2) med konsentrert HCI. Den resulterende blandingen ble ekstrahert med EtOAc. De samlede organiske lag ble vasket med vann og saltløsning før de ble tørket, filtrert og konsentrert, hvilket ga (1 R,6S)-6-benzyloksykarbonylamino-cykloheks-3-enkarboksylsyre (72,7 g). MS funnet: (M + H)<+>= 276,2.
Fremstillin<g>A1, Trinn 3: En prøve av (1 R,6S)-6-benzyloksykarbonylamino-cykloheks-3-enkarboksylsyre (72 g) ble oppløst i CH2CI2(750 ml) før tilsetning av CDI (50,9 g). Etter 2,5 timer ble vann tilsatt og løsningen ble ekstrahert med CH2CI2. De samlede organiske lag ble tørket, filtrert og konsentrert. Det resulterende materialet ble oppløst i CH2CI2og ammoniakk-gass ble boblet gjennom løsningen i 1,5 timer. Etter omrøring natten over ble mesteparten av løsningsmidlet fjernet og Et20 ble tilsatt. Produktet ble utfelt som et hvitt, fast stoff og ble oppsamlet, hvilket ga (1 R,6S)-6-karbamoyl-cykloheks-3-enyl)-karbaminsyre-benzylester (61,5 g). MS funnet: (M+H)<+>= 275,3.
Fremstilling A1, Trinn 4: En prøve av (1 R,6S)-6-karbamoyl-cykloheks-3-enyl)-karbaminsyre-benzylester (30,7 g) ble oppløst i THF (1100 ml) og NMP (220 ml). Ved -780C ble 2,3M n-BuLi (96,3 ml) tilsatt dråpevis. Etter 2 timer ble en løsning av B0C2O (24,4 g) i THF (40 ml) tilsatt dråpevis. Denne løsningen ble omrørt 1,2 timer før den ble behandlet med en mettet NH4CI-løsning. Vann og Et20 ble tilsatt. Det organiske laget ble filtrert og deretter vasket med vann, saltløsning, tørket, filtrert og konsentrert. "Flash" kromatografi av det resulterende residuet ga (1R,6S)-(6-tert-butoksykarbonylaminokarbonyl-cykloheks-3-enyl)-karbaminsyre-benzylester (29,2 g). MS funnet: (M + Na)<+>= 397,4.
Fremstilling A1, Trinn 5: En prøve av (1 R,6S)-(6-tert-butoksykarbonyl-aminokarbonyl-cykloheks-3-enyl)-karbaminsyre-benzylester (29,0 g) ble oppløst i THF (1290 ml). Dette ble avkjølt i et is/saltløsningbad før tilsetning av n-BuLi (1,5 ml, 2,4M). Etter 30 min ble jod (59,0 g) tilsatt i en enkel porsjon. Badet ble fjernet og reaksjonsblandingen ble oppvarmet til romtemperatur natten over. Den resulterende løsningen ble behandlet med mettet tiosulfat-løsning. Vann og EtOAc ble tilsatt. Det organiske laget ble vasket med vann, saltløsning, tørket, filtrert og konsentrert. Den resulterende oppslemningen ble fortynnet med Et20 og (1/?,2S,4S,5f?)- 2-benzyloksykarbonylamino-4-jod-7-okso-6-aza-bicyklo[3.2.1]oktan-6-karboksylsyre-tert-butylester (22,8 g) ble oppsamlet ved vakuumfiltrering. MS funnet: (M - C5H802+ H)<+>= 401,1.
Fremstilling A1. Trinn 6: En prøve av (1/?,2S,4S,5/?)-2-benzyloksykarbonylamino-4-jod-7-okso-6-aza-bicyklo[3.2.1]oktan-6-karboksylsyre-tert-butylester (43,3 g) ble oppløst i benzen (580 ml) før tilsetning av Bu3SnH (27,8 g) og AIBN (0,7 g). Den resulterende blandingen ble oppvarmet til et svakt tilbakeløp i 3 timer. Etter avkjøling ble løsningsmidlet fjernet og heksan ble tilsatt. Det resulterende hvite fast stoff ble oppsamlet ved vakuumfiltrering, hvilket ga tittelforbindelsen, (1/?, 2S, 5/?)-2-benzyloksykarbonylamino-7-okso-6-aza-bicyklo[3.2.1]oktan-6-karboksylsyre-tert-butylester (29,5 g). MS funnet: (M + Na)<+>= 397,4.
Fremstilling A2: Syntese av 7-okso-6-oksa-bicyklo[3.2.1]okt-2-yl)-karbaminsyre-benzylester
Tittelforbindelsen ble fremstilt ved anvendelse av metoden ifølge Suga (H. Suga et al., J. Am. Chem. Soc. 1994, 116,11197 - 98) fra den kjente 1 S, 2R-c/'s-2-metoksykarbonyl-cykloheks-4-en-1-karboksylsyre (se: Bolm et al., J. Org. Chem. 2000, 65, 6984-6991).
Fremstilling A3: Syntese av (1 R,2S,5R)-tert-butyl-2-((S)-3-(benzyloksykarbonylamino)-2-oksopyrrolidin-1-yl)-7-okso-6-aza-bicyklo[3.2.1]oktan-6-karboksylat
Fremstilling A3, Trinn 1: (1 R,2S,5R)-tert-butyl-2-benzyloksykarbonylamino-7-okso-6-aza-bicyklo[3.2.1]oktan-6-karboksylat (4,0 g) i MeOH (30 ml) ble tilsatt 10% Pd/C, Degussa (600 mg). Reaksjonskolben ble evakuert og deretter fylt igjen med hydrogen; dette ble gjentatt tre ganger til. Reaksjonsblandingen ble omrørt under 1 atm av H2i 3 timer og deretter filtrert og konsentrert for å gi (1 R,2S,5R)-tert-butyl 2-amino-7-okso-6-aza-bicyklo[3.2.1]oktan-6-karboksylat (2,5 g). MS (ES+) = 241,1 (M + H)<+>.
Fremstilling A3, Trinn 2: En løsning av (1 R,2S,5R)-tert-butyl 2-amino-7-okso-6-aza-bicyklo[3.2.1]oktan-6-karboksylat (2,5 g) ble oppløst i DMF (34 ml) og avkjølt til 0°C før tilsetning av N-Cbz-metionin (5,3 g), 4-metylmorfolin (3,7 g) og BOP (8,3 g). Reaksjonsblandingen ble omrørt i 12 timer ved romtemperatur og deretter fordelt mellom EtOAc og 1N HCI-løsning. De organiske fasene ble samlet, vasket med mettet NaHCCbog saltløsning, tørket (MgS04), filtrert og konsentrert i vakuum. Residuet ble renset ved "flash" kromatografi, hvilket ga (1R,2S,5R)-tert-butyl-2-((S)-2-(benzyloksykarbonylamino)-4-(metyltio)butanamido)-7-okso-6-aza-bicyklo[3.2.1]oktan-6-karboksylat (5,1 g). MS funnet: (M + H)<+>= 506,2.
Fremstilling A3. Trinn 3: (1 R,2S,5R)-tert-butyl-2-((S)-2-(benzyloksykarbonylamino)-4-(metyltio)butanamido)-7-okso-6-aza-bicyklo[3.2.1]oktan-6-karboksylat (5,1 g) ble oppløst i jodmetan (40 ml). Den resulterende løsningen ble omrørt ved romtemperatur i 12 timer før den ble konsentrert i vakuum. Residuet ble oppløst i metylenklorid og den resulterende løsningen ble konsentrert; dette ble gjentatt, hvilket ga saltet. Dette materialet ble oppløst i DMF (30 ml) og løsningen ble tilsatt CS2CO3(6,6 g). Etter 12 timer ble reaksjonsblandingen fordelt mellom EtOAc og saltløsning. Den organiske fasen ble tørket (MgS04), filtrert og konsentrert. Det resulterende residuet ble renset ved "flash" kromatografi, hvilket ga
(1 R,2S,5R)-tert-butyl 2-((S)-3-(benzyloksykarbonylamino)-2-oksopyrrolidin-1 - yl)-7-okso-6-aza-bicyklo[3.2.1]oktan-6-karboksylat (2,0 g). MS funnet: (M + H)<+>= 458,6.
Fremstilling B1: Syntese av 2-(3-etylureido)-5-(trifluormetyl)benzosyre
Fremstilling B1, Trinn 1: A/-Boc-2-amino-5-(trifluormetyl)benzosyre (S. Takagishi, et al., Synlett 1992, 360; 5,1 g, 17 mmol) ble oppløst i DMF (42 ml) og løsningen ble tilsatt allylbromid (3,8 ml, 44 mmol) og kaliumkarbonat (3,4 g, 25 mmol). Oppslemningen ble omrørt i 14 timer ved romtemperatur, fortynnet med EtOAc og vasket suksessivt med saltløsning, vann og saltløsning. Den organiske fasen ble tørket (Na2S04), filtrert og konsentrert i vakuum for å gi allylesteren som et hvitt, fast stoff. Dette materialet ble oppløst i metylenklorid (30 ml) og TFA (15 ml) og omrørt ved romtemperatur i 2 timer før det ble konsentrert i vakuum. Residuet ble oppløst i metylenklorid og løsningen ble konsentrert i vakuum; denne prosedyren ble gjentatt to ganger for å gi det antatte TFA-salt av allyl-2-amino-5-(trifluormetyl)benzoat. MS funnet: (fri M + H)<+>= 246,29.
Fremstilling B1, Trinn 2: Allyl-2-amino-5-(trifluormetyl)benzoatet fra trinn 1 (ca. 15,7 mmol) ble oppløst i THF (60 ml) og fosgen (24,9 ml, 47 mmol) ble tilsatt dråpevis ved 0°C. Reaksjonsblandingen ble omrørt i 15 minutter ved 0°C. Trietylamin (13,1 ml, 94 mmol) ble langsomt tilsatt og omrøring ble fortsatt i 2 timer. Reaksjonsblandingen ble konsentrert i vakuum, hvilket ga et gult, fast stoff. En porsjon (2,4 g, ca. 7,7 mmol) av det gule faste stoffet ble oppløst i THF (40 ml) og løsningen ble tilsatt etylamin (20 ml av en 2,0 M løsning i THF). Reaksjonsblandingen ble omrørt i 14 timer ved romtemperatur og deretter fortynnet med EtOAc. Den organiske fasen ble vasket suksessivt med 1N HCI (2 x) og saltløsning (1 x) før den ble tørket (Na2S04), filtrert og konsentrert i vakuum, hvilket ga allyl-2-(3-etylureido)-5-(trifluormetyl)benzoat som et hvitt, fast stoff (1,8 g). MS funnet: (M + Na)<+>= 339,29.
Fremstilling B1, Trinn 3: Allyl-2-(3-etylureido)-5-(trifluormetyl)benzoatet (1,8 g, ca. 5,7 mmol) ble oppløst i acetonitril (50 ml). Løsningen ble tilsatt pyrrolidin (1,0 ml, 12 mmol) og Ph(PPh3)4(140 mg, 0,17 mmol) og deretter omrørt i 2 timer ved romtemperatur før den ble konsentrert i vakuum. Residuet ble fortynnet med EtOAc og dette ble vasket suksessivt med 1N HCI
(2 x) og saltløsning (1 x) før det ble tørket (Na2S04), filtrert og konsentrert i vakuum. Residuet ble utgnidd med metylenklorid, hvilket ga ren 2-(3-etylureido)-5-(trifluormetyl)benzosyre (0,89 g).<1>H-NMR (300 MHz, d4-MeOH): 8 8,59 (d, 1 H, J = 9,6 Hz), 8,26 (d, 1 H, J = 1,5 Hz), 7,72 (dd, 1 H, J = 9,2, 1,8 Hz), 3,23 (q, 2 H, J = 7,3 Hz), 1,17 (t, 3 H, J = 7,2 Hz).
Fremstilling B2: Syntese av 2-(isopropylureido)-5-(trifluormetyl)benzosyre
Den fullstendige tre-trinns prosedyre beskrevet i Fremstilling B1 ble fulgt, ved anvendelse av isopropylamin istedenfor etylamin i Trinn 2 for å gi tittelforbindelsen. MS funnet: (M - H)- = 289.
Fremstilling B3: Syntese av 2-(azetidin-1-karboksamido)-5-(trifluormetyl)benzosyre
Den fullstendige tre-trinns prosedyre beskrevet i Fremstilling B1 ble fulgt, ved anvendelse av azetidin istedenfor etylamin i Trinn 2 for å gi tittelforbindelsen. MS funnet: (M - H)- = 287.
Fremstilling B4: Syntese av 2-(cyklopropyl ureido)-5-(trifluormetyl)benzosyre
Den fullstendige tre-trinns prosedyre beskrevet i Fremstilling B1 ble fulgt, ved anvendelse av cyklopropylamin istedenfor etylamin i Trinn 2 for å gi tittelforbindelsen.<1>H NMR (300 MHz, CD3OD) 8 8,56 (d, J = 9,8 Hz, 1H), 8,32 (s, 1H), 7,59 (d, J= 9,8 Hz, 1H), 2,62-2,61 (m, 1H), 0,83 (s, 2H), 0,58 (s, 2H);<19>F NMR (282 MHz, CD3OD) 8 -61,7.
Fremstilling B5: Syntese av 2-(metylsulfonamido)-5-(trifluormetyl)benzosyre
Fremstilling B5, Trinn 1: Til en løsning av 4-(trifluormetyl)benzenamin (10,0 g, 0,0617 mol) i tørr metanol (200 ml) ble satt jodmonoklorid (10,49 g, 0,148 mol) i tørr MDC (40 ml) langsomt ved romtemperatur. Reaksjonsblandingen ble omrørt ved romtemperatur natten over. Reaksjonsblandingen ble konsentrert, vann ble tilsatt og ekstrahert med etylacetat (2 x 100 ml). Det organiske laget ble vasket med vann, saltløsning (2 x 50 ml), tørket over Na2SC>4og konsentrert. Råproduktet ble renset ved kolonnekromatografi ved anvendelse av 6% etylacetat i pet-eter, hvilket ga 2-jod-4-(trifluormetyl)benzenamin (12,5 g, 70 %) som blekgul væske.<1>H NMR (400 MHz, CDCI3)8 4,42 (bs, 2H), 6,75 (d, 1H), 7,38 (d, 1H), 7,87 (s, 1H).
Fremstilling B5. Trinn 2: En blanding av 2-jod-4-(trifluormetyl)benzenamin (11,0 g, 0,0382 mol), pyridin (40 ml), metansulfonlylklorid (5,3 g, 0,046 mol) og DMAP (0,46 g, 0,0038 mol) i en 100 ml RB kolbe ble oppvarmet langsomt til 105°C og holdt ved samme temperatur natten over. Reaksjonsblandingen ble konsentrert for å fjerne pyridin. Det oppnådde råproduktet ble renset ved kolonnekromatografi ved anvendelse av 10% etylacetat i pet.eter som elueringsmiddel hvilket ga N-(2-jod-4-(trifluormetyl)fenyl)metansulfonamid (4,5 g, 32 %) som hvitt fast stoff.<1>H NMR (400 MHz, CDCI3) 8 3,08 (s, 3H), 6,88 (bs, 1H), 7,65 (d, 1H), 7,75 (d, 1H), 8,07 (s, 1H).
Fremstilling B5, Trinn 3: Til en blanding av N-(2-jod-4-(trifluormetyl)fenyl)metansulfonamid (3,5 g, 9,589 mmol), tørr metanol (30 ml) DMF (30 ml) ble satt palladium(ll)acetat (0,07 g,0,35 mmol), 1,1-bis(difenylfosfen)ferrocen (0,32 g, 0,577 mmol) og TEA (1,96 g, 19,4 mmol) ved romtemperatur. Reaksjonsblandingen ble spylt med karbonmonoksyd i 30 min ved romtemperatur. Reaksjonsblandingen ble langsomt oppvarmet til 60°C og holdt ved samme temperatur natten over under karbonmonoksyd atm. Vann ble tilsatt og reaksjonsblandingen ble ekstrahert med etylacetat (3 x 50 ml). Det organiske laget ble vasket med saltløsning, tørket (Na2SC>4) og konsentrert. Råproduktet ble renset ved kolonnekromatografi med 15% etylacetat i pet.eter som elueringsmiddel, hvilket ga metyl-2-
(metylsulfonamido)-5-(trifluormetyl)benzoat (2,0 g, 70 %) som hvitt fast stoff.<1>H NMR (400 MHz, CDCI3) 8 3,14 (s, 3H), 3,99 (s, 3H), 7,78 (d, 1H), 7,87 (d, 1H), 8,34 (s, 1H), 10,75 (bs, 1H).
Fremstilling B5, Trinn 4: Til en blanding av metyl-2-(metylsulfonamido)-5-(trifluormetyl)benzoat (1,0 g, 3,367 mmol) i THF (20 ml) og vann (20 ml) ble satt litiumhydroksyd (0,4242 g, 10,10 mmol) og omrørt ved romtemperatur i 6 timer. Reaksjonsblandingen ble surgjort med 1,5 N HCI og ekstrahert med etylacetat (3 x 50 ml). Det organiske laget ble vasket med vann, saltløsning, tørket (Na2SC>4) og konsentrert. Det faste stoffet ble filtrert og tørket under vakuum, hvilket ga 2-(metylsulfonamido)-5-(trifluormetyl)benzosyre (0,7 g, 73 %) som hvitt fast stoff.<1>H NMR (400 MHz, CDCI3) 8 3,31 (s, 3H), 7,78 (d, 1H), 7,97 (d, 1H), 8,24 (s, 1H), 11,13 (bs, 1H);<13>C NMR (100 MHz, CDCI3) 8 40,74, 116,5, 118,3, 122,8 (m), 128,8, 131,6, 144,3, 169,1. MS funnet: (M - H)-= 282.
Fremstilling B6: Syntese av 5-(trifluormetyl)-2-(trifluormetylsulfonamido)benzosyre
Fremstilling B6. Trinn 1: Til en løsning av 4-trifluormetylanilin (5 g, 0,031 mol) i 50 ml tørr benzen ble satt trietylamin (6,26 g, 8,63 ml, 0,06 mol) ved 0°C. Pivaloylklorid (4,5 g, 0,04 mol) ble tilsatt langsomt og omrørt ved romtemperatur natten over. Reaksjonsblandingen ble behandlet med vann og ekstrahert med etylacetat. Det organiske laget ble vasket med vann, saltløsning og konsentrert. Det faste stoffet ble utgnidd med pet.eter og
filtrert, hvilket ga N-(4-(trifluormetyl)fenyl)-pivalamid (6,7 g) som hvitt fast stoff.
Fremstilling B6, Trinn 2: Til en løsning av N-(4-(trifluormetyl)fenyl)pivalamid (1 g, 4,08 mmol) i 20 ml tørr THF under nitrogen ble satt n-butyllitium (0,65 g, 4,1 ml) ved 0°C. Reaksjonsblandingen ble holdt ved 0°C i 3 timer og tilsatt på tørris og omrørt ved romtemperatur natten over. Reaksjonsblandingen ble konsentrert og det faste oppnådde produktet ble oppløst i 25 ml tørr metanol og spylt med HCI-gass i 30 min ved 0°C. Blandingen ble omrørt ved romtemperatur i 2 timer og oppvarmet ved 55°C natten over. Reaksjonsblandingen ble konsentrert, gjort basisk med natriumbikarbonat-løsning og ekstrahert med etylacetat. Det organiske laget ble vasket med vann, saltløsning og konsentrert. Råproduktet ble renset ved "flash" kromatografi, hvilket ga metyl-2-amino-5-(trifluormetyl)benzoat (0,55 g) som hvitt fast stoff.
Fremstilling B6, Trinn 3: Til en løsning av metyl-2-amino-5-(trifluormetyl)benzoat (0,25 g, 1,141 mmol) og trietylamin (0,115 g, 0,16 ml, 1,14 mmol) i 3 ml tørr diklormetan ble satt trifluormetansulfonsyreanhydrid (0,64 g, 2,28 mmol) ved -78°C. Blandingen ble holdt under -40°C i 3 timer og omrørt ved romtemperatur natten over. Vann ble tilsatt og ekstrahert med diklormetan. Det organiske laget ble tørket og konsentrert. Produktet ble renset ved "flash" kromatografi, hvilket ga 0,3 g (75 %) av metyl-5-(trifluormetyl)-2-(trifluormetylsulfonamido)benzoat som hvitt fast stoff. MS funnet: (M + H)<+>= 352.
Fremstilling B6. Trinn 4: Til en løsning av metyl-5-(trifluormetyl)-2-(trifluormetylsulfonamido)benzoat (2,7 g, 7,7 mmol) i 55 ml THF ble satt litiumhydroksyd (0,97 g, 23,1 mmol) i 55 ml vann og omrørt ved romtemperatur natten over. Reaksjonsblandingen ble surgjort med 1,5N HCI og ekstrahert med etylacetat. Det organiske laget ble vasket med vann, saltløsning og konsentrert, hvilket ga 5-(trifluormetyl)-2-(trifluormetylsulfonamido)benzosyre (2 g) som hvitt fast stoff. 1H NMR (DMSO-de, 400 MHz) 8 7,77 (m, 2H), 8,18 (s, 1H). MS funnet: (M - H)- = 336.
Fremstilling B7: Syntese av 5-isopropyl-2-(trifluormetylsulfonamido)-benzosyre
Den fullstendige fire-trinns prosedyre beskrevet i Fremstilling B6 ble fulgt, ved anvendelse av 4-isopropylanilin istedenfor 4-trifluormetylanilin i Trinn 1 for å gi tittelforbindelsen.<1>H NMR (DMSO-d6, 400 MHz) 8 1,19 (d, 6H), 2,92 (m, 1H), 7,37 (d, 1H), 7,47 (d, 1H), 7,77 (s, 1H). MS funnet: (M - H)- = 310.
Fremstilling C1: Syntese av 2-tert-butylpyrimidin-4-karboksylsyre
Fremstilling C1. Trinn 1: En 22% løsning av natriumetoksyd i etanol (53 ml, 165 mmol) ble satt dråpevis til en magnetisk omrørt suspensjon av tert-butylkarbamidin-hydroklorid (20,0 g, 146 mmol) i etanol (100 ml). Da tilsetningen var fullstendig ble den gule suspensjonen oppvarmet til 50°C, oppvarmningskappen ble fjernet og en løsning av mukobromsyre (15,7 g, 61 mmol) i etanol (50 ml) ble tilsatt dråpevis med en hastighet som ikke tillater at temperaturen overstiger 55°C. Da denne tilsetning var fullstendig ble en 22% løsning av natriumetoksyd i etanol (32 ml, 98 mmol) tilsatt dråpevis, og deretter fikk blandingen avkjøles til romtemperatur. Suspensjonen ble filtrert, de faste stoffene ble skyllet med etanol (2 x 20 ml) og de samlede filtrater ble konsentrert i vakuum. Det således oppnådde residuet ble omrørt i 2N vandig HCI (30 ml). De resulterende faste stoffer ble oppsamlet ved filtrering, skyllet med iskaldt vann (2 x 20 ml) og lufttørket, hvilket ga 12,1 g 5-brom-2-tert-butyl-pyrimidin-4-karboksylsyre som et beige pulver. MS (ES+) = 259, 261 (M
+ H)<+>.
Fremstilling C1, Trinn 2: En blanding av 5-brom-2-tert-butyl-pyrimidin-4-karboksylsyre (1,65 g, 6,37 mmol) og vandig natriumhydroksyd (1,0 N, 19,1 ml, 19,1 mmol) i metanol (100 ml) ble behandlet med en katalytisk mengde av 10% palladium på karbon. Blandingen ble avgasset under vakuum/nitrogen, deretter hydrogenert ved 3,5 kg/cm<2>i 2 timer. Katalysatoren ble fjernet ved filtrering, metanolen ble fjernet under vakuum og det vandige lag ble surgjort ved tilsetning av 1,0 N vandig saltsyre (40 ml). Den resulterende suspensjonen ble ekstrahert med etylacetat (4 x 50 ml), de samlede organiske faser ble vasket med saltløsning, tørket over natriumsulfat og konsentrert i vakuum, hvilket ga 1,06 g 2-tert-butylpyrimidin-4-karboksylsyre som et hvitt pulver. MS (ES+) = 181 (M+H+).
Fremstilling C2: Syntese av 3-tert-butyl-benzosyre
Fremstilling C2, Trinn 1: En blanding av kommersielt tilgjengelig metyl-3-brom-5-tert-butylbenzoat (700 mg, 2,58 mMol), vandig NaOH (1 N, 7,75 ml, 7,75 mMol) og Pearlman's katalysator (100 mg) i metanol (20 ml) ble hydrogenert ved 3,5 kg/cm<2>i 22 timer. Katalysatoren ble fjernet ved filtrering og skyllet med en liten mengde av metanol. Filtratet ble konsentrert i vakuum for å fjerne metanol og den vandige blandingen ble surgjort med 1N HCI (10 ml), deretter ekstrahert med etylacetat (3 x 20 ml). De samlede organiske faser ble tørket over natriumsulfat, deretter konsentrert i vakuum. Analyse av det resulterende materialet ved LC/MS viste at esteren hadde hydrolysert til karboksylsyren, men at bromidet fortsatt var til stede. Materialet ble oppløst i metanol (20 ml) og hydrogenert natten over ved 3,5 kg/cm<2>i nærvær av 1N vandig NaOH (5,2 ml, 5,2 mMol) og 10% palladium på aktivert karbon (50 mg). Analyse av den rå reaksjonsblandingen ved LC/MS viste at brom fortsatt var stede, så Pearlman's katalysator (200 mg) ble tilsatt og hydrogenering ved 3,5 kg/cm<2>ble fortsatt i 23 timer. MS viste at reaksjonen nå var fullstendig, så reaksjonen ble opparbeidet som beskrevet tidligere i dette eksemplet, hvilket ga 376 mg (81% utbytte) av hvitt pulver som produkt. MS (AP-) = 177
(M- H)
Fremstilling C3: Syntese av 6-ferf-butylpikolinsyre-HCI-salt.
Fremstilling C3, Trinn 1: 2-ferf-butylpyridin (2,00 g, 14,8 mmol, 1 ekv.) ble oppløst i HOAc (10 ml) og 30% hydrogenperoksyd (1,68 ml, 14,8 mmol, 1 ekv.) ved romtemperatur, og deretter ble reaksjonsblandingen tilbakeløpskokt i 20 timer. Reaksjonen ble strippet for å oppnå en ravgul olje som ble oppløst i metylenklorid (10 ml) og deretter tørket over natriumsulfat og strippet for å oppnå 2-fert-butylpyridin-N-oksyd (1,60 g) som en ravgul olje. Utbytte = 71,5%. LCMS detekterer (M+H)<+>= 152,09.
Fremstilling C3, Trinn 2: 2-ferf-butylpyridin-N-oksyd (1,60 g, 10,6 mmol, 1 ekv) ble oppløst i metylenklorid (25 ml) ved romtemperatur under nitrogen og deretter ble trimetylsilylcyanid (1,79 ml, 13,4 mmol, 1,27 ekv.) tilsatt fulgt av dråpevis tilsetning av dimetylkarbamylklorid (1,24 ml, 13,4 mmol, 1,27 ekv.) over 3 minutter. Omrørt i 20 timer. Opparbeidet ved tilsetning av 10% kaliumkarbonat (vandig) (25 ml). Skumming skjedde. Omrørt 10 minutter, deretter ekstrahert 3 ganger med metylenklorid (25 ml). De organiske lag ble samlet, tørket over natriumsulfat, deretter strippet, hvilket ga en ravgul olje. Renset over silikagel i 3:1 heksaner/etylacetat. 6-ferf-butylpikolinonitril (1,08 g) oppnådd som en ravgul olje. Utbytte = 59%. LCMS detekterer (M+H)<+>= 161,14.
Fremstilling C3. Trinn 3: 6-fe/t-b uty I p i ko I i no n it ri I (1,05 g) ble oppløst i 6N HCI (vandig) ved romtemperatur deretter tilbakeløpskokt i 20 timer. Opparbeidet ved stripping 3 ganger fra acetonitril. Faste stoffer oppnådd. De faste stoffene ble tilbakeløpskokt i 10 ml acetonitril. Faste stoffer som ikke ble oppløst ble filtrert fra. Filtratet ble strippet, hvilket ga 6-feAf-butylpikolinsyre-HCI-salt (680 mg) som en fargeløs olje. Utbytte = 48%. LCMS detekterer (M+H)<+>= 180,16.
Fremstilling C4: Syntese av 6-(trifluormetyl)pikolinsyre
Fremstillin<g>C4. Trinn 1: 2-brom-6-(trifluormetyl)-pyridin (100 mg, 0,44 mmol, 1 ekv.) ble oppløst i dietyleter ved romtemperatur under nitrogen, deretter avkjølt til -70°C. 1,6M n-butyllitium i heksaner (0,28 ml, 0,44 mmol, 1 ekv.) tilsatt dråpevis med en tilsetningstrakt. Omrørt ved -40 °C i 15 minutter, deretter avkjølt til -70°C og boblet inn C02-gass i 10 minutter. Fikk oppvarmes til romtemperatur. Tilsatt vann, deretter skyllet 3 ganger med dietyleter. Den vandige pH ble regulert til = 3 med kons. HCI. Det sure vandige lag ekstrahert 3 ganger med etylacetat. Etylacetatlaget ble samlet, tørket over natriumsulfat og strippet, hvilket ga 6-(trifluormetyl)pikolinsyre (30 mg) som et hvitt, fast stoff. Utbytte = 35%. LCMS detekterer (M+H)<+>= 192,06.
Fremstilling C5: Syntese av 3-(adamant-1-yl)-pyrrol-5-karboksylsyre
Fremstilling C5, Trinn 1: Etyl-pyrrol-2-karboksylat (2,09 g, 15 mmol, 1 ekv), ble satt til en blanding av gallium(lll)klorid (2,90 g, 16,5 mmol, 1,1 ekv) i karbondisulfid (40 ml) og innholdet oppvarmet ved 40°C i 30 min. Deretter ble 1-kloradamantan (2,82 g, 16,5 mmol, 1,1 ekv), tilsatt og innholdet oppvarmet i ytterligere 40 minutter. Reaksjonsblandingen ble hellet i en blanding av is og 1,0 N HCI og ekstrahert med kloroform. Ekstraktene ble vasket med mettet natriumbikarbonat, tørket (MgSCv) og løsningsmidlet strippet, hvilket ga et rått fast stoff. Omkrystallisering fra EtOAc ga 2 porsjoner av etyl-3-(adamanty-1-yl)-pyrrol-5-karboksylat. 1. porsjon vekt = 0,67 gram. 2. porsjon vekt =1,10 gram. MS funnet: (M+H)+ henholdsvis = 274,44 og 274,45.
Fremstillin<g>C5. Trinn 2: Etyl-3-(adamanty-1-yl)-pyrrol-5-karboksylat (0,29 g, 1,1 mmol, 1 ekv), 1,000 N NaOH (2,20 ml, 2,2 mmol, 2 ekv) og MeOH (15 ml) ble blandet og omrørt natten over. Etter bare delvis reaksjon ble mer 1,000 N NaOH (21 ml) sammen med mer MeOH for oppløsning tilsatt og innholdet tilbakeløpskokt i 4 timer. Innholdet ble surgjort til pH=1 med 1,0 N HCI. MeOH ble strippet av, hvilket ga faste stoffer og vandig lag. Blandingen ble ekstrahert med EtOAc, EtOAc-laget ble samlet, vasket med saltløsning, tørket (MgS04) og strippet, hvilket ga 250 mg 3-(adamant-1-yl)-pyrrol-5-karboksylsyre som et hvitt pulver. MS funnet: (M+H)+ =246,44
Fremstilling C6: Syntese av 3-(adamant-1-yl)-1-metylpyrrol-5-karboksylsyre
Fremstillin<g>C6. Trinn 1. Etyl-3-(adamant-1-yl)-pyrrol-5-karboksylat (0,20 g, 0,7 mmol, 1 ekv) ble oppløst i THF (20 ml). Kalium-bis(trimetylsilyl)amid (0,5 M i Tol, 1,62 ml, 0,81 mmol, 1,1 ekv) ble tilsatt, fulgt av jodmetan (0,102 ml, 1,6 mmol, 2,2 ekv). Neste dag ble samme mengder av kalium-bis(trimetylsilyl)amid og jodmetan igjen tilsatt for å drive reaksjonen til fullførelse. Etter 4 timer ble reaksjonen avsluttet. Etylacetat ble tilsatt (100 ml) og det organiske laget ble vasket med vann (2x), saltløsning, tørket (MgSCv) og strippet, hvilket ga 600 mg etyl-3-(adamant-1-yl)-1-metylpyrrol-5-karboksylat, som ble anvendt som det var i neste trinn. MS funnet: (M+H)+ =288,16.
Fremstilling C6, Trinn 2: Forsåpning av etyl-3-(adamant-1-yl)-1-metylpyrrol-5-karboksylat (hele innholdet fra Trinn 1) ved metoden i Fremstilling C5, trinn 2 ga 160 mg 3-(adamant-1-yl)-1-metylpyrrol-5-karboksylsyre. MS funnet: (M-H)+ =258,10.
Fremstilling C7: Syntese av 6-tert-butyl-4-klor-pyrrolo[2,1-f][1,2,4]triazin
Fremstilling C7, Trinn 1: Etyl-pyrrol-2-karboksylat (7,24 g, 52 mmol, 1 ekv), 2-klor-2-metylpropan (6,18 ml, 57 mmol, 1,1 ekv), gallium-triklorid (10,0 g, 57 mMol, 1,1 ekv) og karbondisulfid (200 ml) ble blandet og tilbakeløpskokt i 45 min. Reaksjonsblandingen ble hellet i en blanding av is og 1,0 N HCI. Den vandige blandingen ble ekstrahert med kloroform, kloroformlaget ble vasket med mettet natriumbikarbonat, tørket over magnesiumsulfat og strippet, hvilket ga 9,78 g av en gylden olje, som til slutt krystalliserte. "Flash" kromatografi over silikagel i 9:1 heksan/etylacetat ga 3,62 g etyl-4-fetr-butyl-1H-pyrrol-2-karboksylat. MS funnet: (M-H)+=196,28.
Fremstilling C7. Trinn 2: Fremstilling av monokloramin ved metoden ifølge John Hynes, Jr., et al., J. Org. Chem., 2004, 69,1368: NH4CI (3 g, 56 mmol, ble blandet i eter (110 ml) og avkjølt til -5°C. Konsentrert NH4OH (4,7 ml) ble deretter tilsatt fulgt av dråpevis tilsetning av blekemiddel (Klorx, 72 ml) over 15 minutter. Blandingen ble omrørt i 15 minutter, lagene separert og det organiske laget vasket med saltløsning. Det organiske laget ble tørket over pulverisert CaCb i fryser i 1 time og anvendt for det påfølgende trinn umiddelbart. Etyl-4-tert-butyl-1H-pyrrol-2-karboksylat (1,67 g, 8,6 mmol, 1 ekv) ble oppløst i DMF. Natriumhydrid (60% suspensjon i olje) (0,41 g, 10 mmol, 1,2 ekv) ble deretter tilsatt forsiktig og omrørt i 45 minutter ved romtemperatur under nitrogen. Monokloramin ble deretter tilsatt (0,15M i eter, 68,4 ml, 10 mmol, 1,2 ekv). Neste morgen ble reaksjonen stanset med mettet vandig Na2S2C>3, og blandingen fortynnet med vann og ekstrahert inn i eter. Eterlaget ble tørket, filtrert og strippet, hvilket ga 3,19 g av etyl-3-fe/t-butyl-1-aminopyrrol-5-karboksylat som en gul olje som til slutt krystalliserte som lange nåler. MS funnet: (M+H)+ =211,34.
Fremstillin<g>C7. Trinn 3: Etyl-3-ferf-butyl-1-aminopyrrol-5-karboksylat (1,00 g, 4,76 mmol, 1 ekv), formamidinacetat (1,46 g, 14,3 mmol, 3 ekv.) og 2-etoksyetanol (10 ml) ble blandet og tilbakeløpskokt i 3 timer. Løsningsmidlet ble strippet og deretter igjen strippet fra kloroform (3X), hvilket ga et fast stoff. Dette faste stoffet ble omrørt i 5 ml MeOH, filtrert og de oppsamlede faste stoffer skyllet med Et20 og tørket, hvilket ga 233 mg 6-tert-butyl-pyrrolo[2,1-f][1,2,4]triazin-4-ol som et hvitt, fast stoff. LCMS funnet: (M+H)+ = 191.
Fremstillin<g>C7, Trinn 4: 6-tert-butyl-pyrrolo[2,1-f][1,2,4]triazin-4-ol (0,43 mg, 2,26 mmol, 1 ekv.) og POCI3(4,21 ml, 45,2 mmol, 20 ekv.) ble blandet og tilbakeløpskokt i 4 timer. Blandingen ble strippet, deretter igjen strippet 3X fra metylenklorid og deretter oppløst i metylenklorid og skyllet 3X med mettet NaHC03, 1X med saltløsning. De organiske lag ble oppsamlet, tørket og strippet i vakuum, hvilket ga 490 mg 6-ferf-butyl-4-klor-pyrrolo[2,1-f][1,2,4]triazin som en ravgul olje. LCMS detekterer (M+H)+ = 210.
Fremstilling C8: Syntese av 3-(tert-butyl)-pyrrol-5-karboksylsyre
Fremstillin<g>C8. Trinn 1: Etyl-4-tert-butyl-1 H-pyrrol-2-karboksylat (fra C7, Trinn 1) (38 mg, 1,95 mmol, 1 ekv), 1,000 N NaOH (39 ml, 39 mmol, 20 ekv) og MeOH (50 ml) ble blandet og tilbakeløpskokt i 1 time. Blandingen ble surgjort med 1,0 N HCI, (1,0 N), MeOH strippet og det gjenværende vandige lag ekstrahert med etylacetat (2x). De organiske lag ble samlet, tørket (MgS04) og strippet, hvilket ga 290 mg av et gråhvitt, fast stoff. NMR (CDCI3+ 2 dråper DMSO-D6) 8 6,50 (s, 1H); 6,46 (s, 1H); 0,95 (s, 9H).
Fremstilling C9: Syntese av 3-(ferf-butyl)-1-metylpyrrol-5-karboksylsyre
Fremstilling C9. Trinn 1: Etyl-4-tert-butyl-1 H-pyrrol-2-karboksylat ble først metylert ved metoden ifølge C6, Trinn 1 og deretter forsåpet ved metoden ifølge C8, Trinn 1 (tilbakeløp som vedvarte 4 timer) hvilket ga 3-(fert-butyl)-1-metylpyrrol-5-karboksylsyre. MS funnet: (M+H)<+>= 182,10.
Fremstilling C10: Syntese av litium-2-tert-butyl-1-okso-pyrimidin-4-karboksylat
Tittelforbindelsen ble fremstilt fra 2-tert-butylpyrimidin-4-karboksylsyre ved anvendelse av metodene anvendt for å syntetisere litium-2-fenylisonikotinat-N-oksyd (Fremstilling H1). Syntesen ga en 3:1 blanding av ønsket produkt, litium-2-tert-butyl-1-okso-pyrimidin-4-karboksylat og des-okso-derivatet, litium-2-tert-butylpyrimidin-4-karboksylat. Denne blandingen ble anvendt som den var. MS funnet: (M + H)<+>= 197,24.
Fremstilling D1: Syntese av 6-klorkinazolin-4-ol
Fremstilling D1, Trinn 1: 2-amino-5-klorbenzosyre (1,00 g, 5,86 mmol, 1 ekv.) og maursyre (3,94 ml, 104 mmol, 17,8 ekv.) ble blandet ved romtemperatur og deretter tilbakeløpskokt i 2,5 timer. Avkjølt til romtemperatur og deretter tilsatt 15 ml vann. Faste stoffer utfelt. De faste stoffene omrørt i 10 minutter. De faste stoffene ble filtrert, skyllet på ny 2 ganger med vann (5 ml). De faste stoffene ble filtrert, deretter omrørt i etylacetat (10 ml) i 5 minutter. De faste stoffene ble filtrert, hvilket ga 6-klorkinazolin-4-ol (800 mg) som gyldenbrunt fast stoff. Utbytte = 75%. Masse Spek. (ESI) detekterer (M+H)<+>= 180,8. Fremstilling D1, Trinn 2: 6-klorkinazolin-4-ol (400 mg, 2,21 mmol, 1 ekv.), fosforoksyklorid (1,99 ml, 21,4 mmol, 9,64 ekv.) og trietylamin (0,99 ml, 7,11 mmol, 3,21 ekv.) ble blandet ved romtemperatur under nitrogen og deretter tilbakeløpskokt i 2,5 timer. Opparbeidet ved stripping av reaksjonsblandingen, deretter rotasjonsinndampning av residuet igjen 2 ganger fra toluen for å oppnå brune faste stoffer. Metylenklorid (25 ml) ble tilsatt for å oppløse de faste stoffene. Den organiske blanding ble deretter skyllet 2 ganger med mettet ammoniumklorid (25 ml). Det organiske laget ble tørket (natriumsulfat) og strippet, hvilket ga brune faste stoffer. De faste stoffene ble renset over silikagel i 9:1 til 3:1 heksaner/etylacetat. 4,6-diklorkinazolin (300 mg) oppnådd som et gråhvitt, fast stoff. Utbytte = 68%.<1>H NMR (400 MHz) (DMSO-D6) 8 9,16 (s, 1H): 8,33 (s, 1H), 8,17 (tilsynelatende t, 2H, J = 7 Hz).
Fremstilling D2: Syntese av 6-fluorkinazolin-4-ol
Fremstilling D2, Trinn 1: 2-amino-5-fluorbenzosyre (2,00 g, 13,0 mmol, 1 ekv.) og maursyre (8,72 ml, 231 mmol, 17,8 ekv.) ble blandet ved romtemperatur og deretter tilbakeløpskokt i 2,5 timer. Avkjølt til romtemperatur, deretter tilsatt 25 ml vann. Faste stoffer utfelt. De faste stoffene omrørt i 1 time. De faste stoffene ble filtrert, deretter omrørt med heksaner (20 ml). De faste stoffene ble filtrert og tørket ved 110°C under vakuum i 4 timer, hvilket ga 6-fluorkinazolin-4-ol (1,66 g) som et hvitt, fast stoff.<1>H NMR (400 MHz) (CD3OD) 8 8,07(s, 1H); 7,85 (D, 1H); 7,74 (T, 1H); 7,62 (M, 1H).
Fremstilling D2, Trinn 2: 6-fluorkinazolin-4-ol (1,00 g, 6,09 mmol, 1 ekv.), fosforoksyklorid (3,41 ml, 36,6 mmol, 6 ekv.) og trietylamin (5,09 ml, 36,6 mmol, 6 ekv.) ble blandet ved romtemperatur og deretter tilbakeløpskokt i 2 timer. Opparbeidet ved stripping 3 ganger fra metylenklorid. Residuet ble oppløst i metylenklorid (25 ml) og skyllet 3 ganger med mettet natriumbikarbonat (25 ml) og 1X med saltløsning (25 ml). Det organiske laget ble tørket (natriumsulfat) og strippet, hvilket ga en rå olje. Renset over silikagel i 9:1 til 3:1 heksaner/etylacetat. 4-klor-6-fluorkinazolin (0,96 g) oppnådd som et gyldenbrunt, fast stoff. Utbytte = 86%. LCMS detekterer (M+H)<+>= 183,16.
Fremstilling D3: Syntese av 4-klor-6-(trifluormetyl)kinazolin
Fremstilling D3, Trinn 1: En suspensjon av 2-(tert-butoksykarbonylamino)-5-(trifluormetyl)benzosyre (56,34 g, 185 mmol, se: S. Takagishi, et al., Synlett 1992) i dioksan (100 ml) ble behandlet ved dråpevis tilsetning av 4N saltsyreløsning i dioksan (250 ml, 1,0 mol) og blandingen ble omrørt i 4 timer. Analyse ved LC/MS viste at reaksjonen ikke var fullstendig, så ytterligere 4N saltsyreløsning i dioksan (250 ml, 1,0 mol) ble tilsatt og blandingen ble omrørt natten over. Analyse ved LC/MS viste at reaksjonen fortsatt inneholdt c. 5% av utgangsmaterialet, så ytterligere 4N saltsyreløsning i dioksan (100 ml, 0,4 mol) ble tilsatt og blandingen ble omrørt i 4 timer. Analyse ved LC/MS viste at reaksjonen nå var fullstendig. Blandingen ble konsentrert i vakuum og residuet ble strippet 2 x fra metylenklorid for å fjerne eventuell gjenværende HCI. 2-amino-5-(trifluormetyl)benzosyre-hydroklorid således oppnådd ble anvendt umiddelbart i neste trinn. MS (ES+) = 206 (M+H+).
Fremstilling D3, Trinn 2: En suspensjon av 2-amino-5-(trifluormetyl)benzosyre-hydroklorid (44,7 g, 185 mmol) og formamidin-acetat (38,52 g, 370 mmol) i 2-etoksyetanol (200 ml) ble oppvarmet ved tilbakeløp natten over, i løpet av hvilken tid en klar løsning ble observert. Blandingen ble avkjølt til romtemperatur og de resulterende faste stoffer ble oppsamlet ved filtrering, skyllet med en liten mengde av 2-etoksyetanol fulgt av dietyleter og tørket under vakuum, hvilket ga 9,7 g av et gråhvitt, fast stoff, som ikke var ønsket produkt ved NMR. De samlede filtrater ble konsentrert i vakuum og residuet ble krystallisert fra metanol, hvilket ga 31,07 g 6-(trifluormetyl)kinazolin-4-ol som gråhvite plater i to porsjoner.<1>H NMR (400 MHz, DMSO) 8 ppm 12,60 (s, 1 H), 8,35 (s, 1 H), 8,24 (d, J=4,83 Hz, 1 H), 8,13-8,09 (m, 1 H), 7,85 (dd, J=8,35, 4,39 Hz, 1 H). MS (ES+) = 215 (M+H+).
Fremstilling D3, Trinn 3: En suspensjon av 6-(trifluormetyl)kinazolin-4-ol (10,41 g, 48,4 mmol) i fosforoksyklorid (100 ml) ble oppvarmet ved tilbakeløp i 3 timer, i løpet av hvilken tid en klar, ravgul løsning ble observert. Løsningen ble avkjølt til romtemperatur, konsentrert i vakuum og strippet 3 x fra 150 ml metylenklorid for å fjerne eventuelt gjenværende fosforoksyklorid. Residuet ble fordelt mellom EtOAc og mettet natriumbikarbonat (1:1, 300 ml) og blandingen ble omrørt inntil gassutvikling opphørte. Lagene ble separert, den organiske fasen ble vasket suksessivt med mettet natriumbikarbonat og saltløsning, de samlede vandige faser ble ekstrahert med EtOAc (50 ml) og de samlede organiske faser ble tørket over natriumsulfat og deretter konsentrert i vakuum. Residuet ble renset over silikagel under eluering med 25% EtOAc/heptan, hvilket ga 8,14 g 4-klor-6-(trifluormetyl)kinazolin som et hvitt, fast stoff. MS (ES+) = 233, 235 (M+H+).
Fremstilling D4: Syntese av 4-klor-6-trifluormetoksykinazolin
Fremstilling D4, Trinn 1 ( Syntese av ( 4- trifluormetoksy- fenyl)- karbaminsyre-tert- butylester) : En løsning av 4-(trifluormetoksy)fenyl-isocyanat (9,75 g, 48,0 mMol) i THF (100 ml) ble avkjølt til 0°C og en 1,0 M THF-løsning av kalium-tert-butoksyd (53 ml, 53 mMol) ble tilsatt dråpevis. Blandingen fikk oppvarmes til romtemperatur og ble omrørt i 7 timer. Løsningen ble hellet i en blanding av mettet ammoniumklorid-løsning (200 ml) og dietyleter (200 ml). Nok vann ble tilsatt til å gjenoppløse ammoniumkloridet som var felt ut, blandingen ble ristet i en separasjonstrakt og lagene ble separert. Den organiske fasen ble vasket med mettet ammoniumklorid (100 ml), vann (100 ml), saltløsning (100 ml),
tørket over natriumsulfat og konsentrert i vakuum. Residuet ble renset over silikagel, under eluering med 10% - 20% etylacetat/heptan, hvilket ga 11,7 g
hvite faste stoffer som produkt. NMR (500 MHz, DMSO) 8 9,54 (s, 1 H), 7,54 (d, 2H, J = 7 Hz), 7,23 (d, 2H, J = 8 Hz), 1,45 (s, 9H). Utbytte = 88%.
Fremstilling D4, Trinn 2 ( Syntese av 2- tert- butoksvkarbonylamino- 5-trifluormetoksy- benzosyre) : En løsning av (4-trifluormetoksy-fenyl)-karbaminsyre-tert-butylester (2,31 g, 8,33 mMol) i vannfri THF (50 ml) ved -78°C ble behandlet med en 1,4 M løsning av sek-butyllitium i cykloheksan (13 ml, 18,33 mMol), med en hastighet som ikke tillot den indre temperatur å overstige -60°C. Løsningen ble omrørt ved -78°C i 15 minutter, fikk deretter oppvarmes til -40° C og ble omrørt i 2,5 timer. Reaksjonsblandingen ble behandlet med gassformig CO2, omrørt 30 minutter under oppvarming til -20°C, og deretter behandlet med mettet ammoniumklorid. Blandingen ble oppvarmet til romtemperatur og ekstrahert med etylacetat (3 x 50 ml). De samlede organiske faser ble vasket med vann (50 ml), saltløsning (50 ml), tørket over natriumsulfat og konsentrert i vakuum. Residuet ble utgnidd med varm heptan, hvilket ga 1,9 g hvitt pulver som produkt. NMR (500 MHz, DMSO) 8 12,89 (s, 1H), 8,24 (d, 1 H, J = 9 Hz), 7,84 (s, 1H), 7,21 (d, 1H, J = 7 Hz), 1,51 (s, 9 Hz). Utbytte = 72%.
Fremstilling D4, Trinn 3 ( Syntese av 2- amino- 5- trifluormetoksy- benzosyre-HCI- salt) : 2-tert-butoksykarbonylamino-5-trifluormetoksy-benzosyre (1,9 g, 5,91 mMol) ble oppløst i en 4N HCI-løsning i dioksan (15 ml) og den resulterende suspensjonen ble omrørt ved romtemperatur i 6 timer. Analyse ved LC/MS viste at reaksjonen var ufullstendig, så konsentrert HCI (1 ml) ble tilsatt, fulgt av metylenklorid (20 ml) for å oppløse de faste stoffene og reaksjonsblandingen ble omrørt natten over ved romtemperatur. Blandingen ble konsentrert i vakuum, deretter strippet fra metanol (3 x 50 ml) for å fjerne eventuelt overskudd av HCI. De resulterende faste stoffer ble anvendt som de var i neste trinn. MS (ES+) = 222 (M + Hf.
Fremstilling D4, Trinn 4 ( Syntese av 6- trifluormetoksy- kinazolin- 4- ol) : En blanding av 2-amino-5-trifluormetoksy-benzosyre-HCI-salt (1,52 g, 5,91 mMol) og formamidin-acetat (1,84 g, 17,73 mMol) i 2-etoksyetanol (20 ml) ble oppvarmet ved tilbakeløp i 2 timer. Analyse ved LC/MS viste at reaksjonen var fullstendig, så blandingen ble konsentrert i vakuum og residuet ble renset over silikagel, under eluering med 50% etylacetat/heptan -100% etylacetat, hvilket ga 1,1 g hvite faste stoffer som produkt. MS (ES+) = 231 (M + H)<+>. Utbytte = 82%.
Fremstilling D4, Trinn 5: En suspensjon av 6-(trifluormetoksy)kinazolin-4-ol (515 mg, 2,23 mmol) i fosforoksyklorid (1,9 ml) ble behandlet med trietylamin (3 ml, 21,1 mmol) og blandingen ble oppvarmet ved tilbakeløp i 2 timer. Den resulterende løsningen ble avkjølt til romtemperatur og strippet 3 x fra metylenklorid for å fjerne gjenværende fosforoksyklorid. Residuet ble oppløst i 100 ml metylenklorid, 100 ml mettet natriumbikarbonat ble forsiktig tilsatt, som forårsaket kraftig gassutvikling og blandingen ble omrørt i 10 min, inntil gassutvikling opphørte. Lagene ble separert og den organiske fasen ble vasket med mettet natriumbikarbonat (2 x 30 ml), fulgt av saltløsning, tørket over natriumsulfat og konsentrert i vakuum. Residuet ble renset over silikagel under eluering med 40% EtOAc/heptan, hvilket ga 377 mg 4-klor-6-(trifluormetoksy)kinazolin som en fargeløs olje.<1>H NMR (400 MHz, CDCI3) 8 ppm 9,10 (s, 1 H), 8,16 (d, J=9,23 Hz, 1 H), 8,10 (s, 1 H), 7,83 (dd, J=9,23, 2,20 Hz, 1 H). MS (ES+) = 249 (M + Hf.
Fremstilling D5: Syntese av 2-tert-butyl-8-klor-pyrimido[5,4-d]pyrimidin
Fremstilling D5, Trinn 1 ( Syntese av 5- brom- 2- tert- butyl- pvrimidin- 4-karboksylsyre- metvlester) : En 2,0 M heksan-løsning av trimetylsilyldiazometan (11,8 ml, 23,62 mMol) ble satt dråpevis til en omrørt løsning av 5-brom-2-tert-butyl-pyrimidin-4-karboksylsyre (6,12 g, 23,62 mMol) i 9 : 1 benzen/metanol (100 ml) og reaksjonsblandingen ble omrørt i 2 dager. TLC analyse viste at reaksjonen var fullstendig, så blandingen ble konsentrert i vakuum. Residuet ble oppløst i etylacetat (100 ml), vasket med vann (3 x 20 ml), tørket over natriumsulfat, deretter konsentrert i vakuum. Renset over silikagel under eluering med 10% etylacetat/heksaner, hvilket ga 5,2 g av en fargeløs olje som produkt. MS (ES+) = 273,275 (M + H)<+>. Utbytte = 81%.
Fremstilling D5, Trinn 2 (Syntese av 5-tert-butoksykarbonylamino-2-tert-butyl-pyrimidin-4-karboksylsyre-metylester): Et flammetørket reaksjonsrør fylt med tert-butylkarbamat (140 mg, 1,2 mMol), cesiumkarbonat (456 mg, 1,4 mMol), 4,5-bis(difenylfosfino)-9,9-dimetylxantan (18 mg, 0,03 mMol) og tris(dibenzylidinaceton)dipalladium(0) (19 mg, 0,02 mMol) ble evakuert under vakuum, deretter fylt igjen med argon. Dioksan (2 ml) og 5-brom-2-tert-butyl-pyrimidin-4-karboksylsyre-metylester (273 mg, 1,0 mMol) ble tilsatt og blandingen ble avgasset under vakuum. Røret ble deretter fylt igjen med argon, lukket og oppvarmet ved lOO^C i 2 timer. Analyse ved LC/MS viste fullstendig forbruk av utgangsbromid. Blandingen ble fortynnet med metylenklorid (20 ml), filtrert for å fjerne faste stoffer og konsentrert i vakuum. Residuet ble renset over silikagel, under eluering med 10% etylacetat/heptan, hvilket ga 152 mg hvite faste stoffer som produkt. MS (ES+) = 310 (M + H)<+>. Utbytte = 50%.
Fremstilling D5, Trinn 3 ( Syntese av 5- amino- 2- tert- butvl- pyrimidin- 4-karboksylsyre- metylester, HCI salt) : 5-tert-butoksykarbonylamino-2-tert-butyl-pyrimidin-4-karboksylsyre-metylester (2,4 g, 7,75 mMol) ble oppløst i en 4 M løsning av HCI i dioksan (30 ml). Etter 10 minutter med omrøring, ble et tykt hvitt fast stoff utfelt. Reaksjonsblandingen ble omrørt natten over, i løpet av hvilken tid blandingen ble en homogen, ravgul løsning. Konsentrert i vakuum og residuet strippet fra toluen (2 x 50 ml) fulgt av metylenklorid (3 x 50 ml) for å fjerne overskudd av HCI. De resulterende 1,85 g gule faste stoffer ble anvendt uten ytterligere rensning i neste trinn. MS (ES+) = 210 (M + H)<+>.
Fremstilling D5, Trinn 4 (Syntese av 6-tert-butyl-pyrimido[5,4-d]pyrimidin-4-ol): En blanding av 5-amino-2-tert-butyl-pyrimidin-4-karboksylsyre-metylester, HCI salt (1,1 g, 4,48 mMol) og formamidin-acetat (1,86 g, 17,90 mMol) i 2-etoksyetanol (20 ml) ble oppvarmet ved tilbakeløp i 5 timer. LC/MS-analyse viste at reaksjonen i det vesentlige var fullstendig, så blandingen ble avkjølt til romtemperatur, deretter konsentrert i vakuum. Residuet ble renset over silikagel, under eluering med etylacetat, 1% metanol/etylacetat, deretter 2% metanol/etylacetat, hvilket ga 1,06 g av et beige fast stoff som produkt. MS (ES+) = 205 (M + H)<+>. Utbytte = 94%.
Fremstilling D5, Trinn 5 ( Syntese av 2- tert- butvl- 8- klor- pvrimido[ 5, 4-dlpyrimidin) : 6-tert-butvl-pyrimido[5,4-dlpvrimidin-4-ol (210 mg, 1,03 mMol) ble oppløst i fosforoksyklorid (10 ml) og blandingen ble oppvarmet ved tilbakeløp i 4 timer. Løsningen ble konsentrert i vakuum, deretter strippet fra metylenklorid (3 x 50 ml) for å fjerne overskudd av fosforoksyklorid. Residuet ble omrørt i 10 minutter i mettet natriumbikarbonat (50 ml), deretter ekstrahert med etylacetat (3 x 30 ml). De samlede organiske faser ble vasket med vann (30 ml), fulgt av saltløsning (30 ml), tørket over natriumsulfat, deretter konsentrert i vakuum. Residuet ble renset over silikagel, under eluering med 50% etylacetat/heptan, hvilket ga 150 mg av et hvitt, fast stoff som produkt. NMR (500 MHz, CDCI3) 8 9,61 (s, 1H), 9,15 (S, 1H), 1,52 (s, 9H).
Fremstilling D6: Syntese av 4-klor-6-(2-metoksyfenyl)kinazolin
Fremstilling D6, Trinn 1: En suspensjon av 2-amino-5-brombenzosyre (2,00 g, 9,26 mmol) og formamidin-acetat (3,86 g, 37,0 mmol) i 2-etoksyetanol (20 ml) ble oppvarmet ved tilbakeløp i 2 timer, i løpet av hvilken tid en klar løsning ble observert. Reaksjonsblandingen fikk avkjøles til romtemperatur, i løpet av hvilken tid faste stoffer ble utfelt. Fellingen ble oppsamlet ved filtrering og skyllet med dietyleter, hvilket ga materiale som inneholdt ønsket produkt, men ikke var rent ved NMR-analyse. De faste stoffene ble fordelt mellom etylacetat og vann, en liten mengde av materiale som ikke ble oppløst ble fjernet ved filtrering og lagene ble separert. Den organiske fasen ble vasket to ganger med vann, tørket over natriumsulfat og konsentrert i vakuum, hvilket ga 690 mg 6-bromkinazolin-4-ol som et gyldenbrunt, fast stoff. Det innledende organiske filtrat ble konsentrert, hvilket ga faste stoffer som ble omrørt i dietyleter, oppsamlet ved filtrering og lufttørket, hvilket ga 430 mg 6-bromkinazolin-4-ol som et gyldenbrunt, fast stoff. MS (ES+) = 225/227
(M+H+).
Fremstilling D6. Trinn 2: En blanding av 6-bromkinazolin-4-ol (227 mg, 1,01 mmol), 2-metoksyfenylboronsyre (307 mg, 2,02 mmol), 2,0 M kaliumfosfat (vandig) (1,5 ml, 3,0 mmol) og DMF (3 ml) i et 5 ml mikrobølgerør ble avgasset under vakuum/Ar. En katalytisk mengde av tetrakis(trifenylfosfin)palladium(0) ble satt til røret, blandingen ble avgasset igjen, røret ble lukket og reaksjonsblandingen ble oppvarmet ved 150° C i mikrobølger i 30 min. Den resulterende sorte blanding ble filtrert, deretter konsentrert i vakuum. Residuet ble tatt opp i 9:1 etylacetat/heptan (50 ml), vasket med vann (3 x 20 ml), deretter saltløsning, deretter tørket over natriumsulfat og konsentrert i vakuum. Residuet ble renset over silikagel, under eluering med 1:1 etylacetat/heptan, 100% etylacetat, deretter 9:1 etylacetat/metanol, hvilket ga 250 mg 6-(2-metoksyfenyl)kinazolin-4-ol som et hvitt pulver. MS (ES+) = 253 (M+H+).
Fremstilling D6. Trinn 3. En suspensjon av 6-(2-metoksyfenyl)kinazolin-4-ol (250 mg, 0,99 mmol) i POCI3(10 ml) ble oppvarmet ved tilbakeløp i 1 time, i løpet av hvilken tid en klar løsning ble observert. Blandingen ble avkjølt til romtemperatur, konsentrert i vakuum, deretter konsentrert fra metylenklorid (3 X 100 ml) for å fjerne eventuelt gjenværende POCI3. Residuet ble fordelt mellom etylacetat (25 ml) og mettet NaHC03(30 ml) og blandingen ble omrørt inntil gassutvikling opphørte (10 min). Lagene ble separert, den organiske fasen ble vasket med mettet NaHC03, vann og saltløsning, tørket over natriumsulfat og konsentrert i vakuum. Residuet ble renset over silikagel under eluering med 1:3 etylacetat/heptan, hvilket ga 217 mg 4-klor-6-(2-metoksyfenyl)kinazolin som et hvitt, fast stoff.<1>H NMR (500 MHz, CDCI3) 8 ppm 9,03 (s, 1 H), 8,36 (s, 1 H), 8,19 (d, J=7,15 Hz, 1 H), 8,10 (d, J=8,80 Hz, 1 H), 7,42 (m, 2 H), 7,10 (t, J=7,42Hz, 1 H), 7,04 (d, J=8,25 Hz, 1 H), 3,86 (m, 3 H).
Fremstilling D7: Syntese av 3-(4-klorkinazolin-6-yl)benzonitril
Metoden beskrevet i Fremstilling D6 ble fulgt ved anvendelse av 3-cyanobenzenboronsyre istedenfor 2-metoksyfenylboronsyre i Fremstilling D6, trinn 2. MS (ES+) = 266/268 (M+H+).
Fremstilling E1: 4-tert-butyltiazol-2-karboksylsyre
En løsning av etyl-tiooksamat (0,75 g, 5,6 mol) og 1-brompinakolon (1,0 g, 5,6 mol) i etanol ble oppvarmet til tilbakeløp i 2 timer. Løsningsmidlet ble fjernet i vakuum og residuet oppløst i CH2CI2og vasket med vann og saltløsning, konsentrert og residuet kromatografert på silikagel (10% etylacetat/ heksan), hvilket ga 0,8 g etyl-4-tert-butyltiazol-2-karboksylat som en olje. Esteren ble oppløst i metanol (5 ml) og behandlet med 1N NaOH (30 ml) og omrørt natten over ved romtemperatur. Løsningen ble surgjort med 1N HCI og ekstrahert inn i CH2CI2og vasket med vann. Løsningsmidlet ble fjernet under vakuum, hvilket ga 0,55 g 4-tert-butyltiazol-2-karboksylsyre som et gråhvitt fast stoff.
MS funnet: (M + Hf = 186,24
Fremstilling E2: 4-(perfluoretyl)tiazol-2-karboksylsyre
Denne ble syntetisert ved anvendelse av metoden beskrevet for Fremstilling E1. MS funnet: (M + Hf = 248
Fremstilling E3: 4-(3-(trifluormetyl)fenyl)tiazol-2-karboksylsyre
Denne ble syntetisert ved anvendelse av metoden beskrevet for Fremstilling E1. MS funnet: (M + Hf = 274,3
Fremstilling E4: 4-fenyltiazol-2-karboksylsyre
Denne ble syntetisert ved anvendelse av metoden beskrevet for Fremstilling E1. MS funnet: (M + H)<+>= 206,17
Fremstilling E5: 4-(4-klorfenyl)tiazol-2-karboksylsyre
Denne ble syntetisert ved anvendelse av metoden beskrevet for Fremstilling E1. MS funnet: (M + H)<+>= 240,14
Fremstilling E6: 4-(benzo[d]tiazol-2-yl)tiazol-2-karboksylsyre
Denne ble syntetisert ved anvendelse av metoden beskrevet for Fremstilling E1. MS funnet: (M + H)<+>= 263,13
Fremstilling E7: 4-(1-adamantyl)tiazol-2-karboksylsyre
Denne ble syntetisert ved anvendelse av metoden beskrevet for Fremstilling E1. MS funnet: (M - H)" = 262,25
Fremstilling E8: 4-(pyridin-2-yl)tiazol-2-karboksylsyre
Denne ble syntetisert ved anvendelse av metoden beskrevet for Fremstilling E1. MS funnet: (M + H)<+>= 207,22
Fremstilling E9: 4-(tiofen-2-yl)tiazol-2-karboksylsyre
Denne ble syntetisert ved anvendelse av metoden beskrevet for Fremstilling E1. MS funnet: (M + H)<+>= 212,05
Fremstilling E10: 4-(tiofen-3-yl)tiazol-2-karboksylsyre
Denne ble syntetisert ved anvendelse av metoden beskrevet for Fremstilling E1. MS funnet: (M + H)<+>= 212,05
Fremstilling F1: 4-fenylfuran-2-karboksylsyre
Fremstilling F1, Trinn 1: Syntese av 4- bromfuran- 2- karboksylsyre: Kommersielt tilgjengelig 4,5-dibromfuran-2-karboksylsyre (6,1 g, 22,6 mol) ble suspendert i 100 ml ammoniumhydroksyd og behandlet porsjonsvis med sinkstøv (1,48 g, 22,6 mol) og omrørt ved romtemperatur i noen få minutter. Reaksjonsblandingen ble filtrert og filtratet surgjort med 5N HCI og ekstrahert flere ganger med metylenklorid. Ekstrakten ble vasket med saltløsning og konsentrert, hvilket ga 2,93 g av et hvitt, fast stoff bestående hovedsakelig av 4-bromfuran-2-karboksylsyre. MS (ES")funnet: (M - H)" = 190,95 og 188,95. NMR (500 MHz, DMSO-D6) 8 13,3 (bs, 1 H), 8,14 (s, 1 H), 7,36 (s, 1 H). Produktet var forurenset med 25% furan-2-karboksylsyre-biprodukt. NMR (500 MHz, DMSO-D6) 8 13,3 (bs, 1 H), 7,90 (m, 1 H), 7,19 (m, 1 H), 6,64 (m, 1 H).
Fremstilling F1, Trinn 2: Syntese av 4- fenvlfuran- 2- karboksylsyre: En løsning av 4-bromfuran-2-karboksylsyre (380 mg, 2 mmol), fenylboronsyre (488 mg, 4 mmol) i DMF (3 ml) ble plassert i et mikrobølge reaksjonsrør og behandlet med 2 M K3PC>4(vandig) (2 ml, 4 mmol). Løsningen ble spylt med nitrogen i 10 minutter før tilsetning av Pd(PPh3)4(1,5 mg) katalysator. Blandingen ble igjen spylt med nitrogen i 5 minutter før reaksjonsrøret ble lukket. Blandingen ble oppvarmet i en mikrobølgeovn ved 150<*>C i 30 minutter. Reaksjonsblandingen ble filtrert og filtratet hellet i 1N HCI (100 ml) med omrøring. Fellingen ble filtrert og lufttørket, hvilket ga 190 mg 4-fenylfuran-2-karboksylsyre. MS (ES-) funnet: (M - HV = 187,07.
Fremstilling F2: 4-(4-metoksyfenyl)furan-2-karboksylsyre
Denne ble syntetisert ved anvendelse av metoden beskrevet for Fremstilling F1. MS (ES")funnet: (M - HV = 217,12
Fremstilling F3: 4-(4-(trifluormetyl)fenyl)furan-2-karboksylsyre
Denne ble syntetisert ved anvendelse av metoden beskrevet for Fremstilling F1. MS (ES-)funnet: (M - HV = 255,14
Fremstilling G1: Syntese av 5-fenylfuran-2-karboksylsyre.
En løsning av 5-bromfuran-2-karboksylsyre (381 mg, 2 mmol), fenylboronsyre (488 mg, 4 mmol) i DMF (3 ml) ble plassert i et mikrobølge-reaksjonsrør og behandlet med 2 M K3P04(vandig) (2 ml, 4 mmol). Løsningen ble spylt med nitrogen i 10 minutter før tilsetning av Pd(PPh3)4(1,5 mg) katalysator. Blandingen ble igjen spylt med nitrogen i 5 minutter før reaksjonsrøret ble lukket. Blandingen ble oppvarmet i en mikrobølgeovn ved 1 50°C i 30 minutter. Reaksjonsblandingen ble filtrert og filtratet hellet i 1N HCI (100 ml) med omrøring. Fellingen ble filtrert og lufttørket, hvilket ga 209 mg 5-fenylfuran-2-karboksylsyre. MS (ES") funnet: (M - H)" = 187,13.
Fremstilling G2: Syntese av 5-(4-(trifluormetyl)-fenyl)furan-2-karboksylsyre
Denne ble syntetisert ved anvendelse av metoden beskrevet for Fremstilling G1. MS (ES")funnet: (M - HV = 255,11
Fremstilling G3: Syntese av 5-(4-fluorfenyl)furan-2-karboksylsyre.
Denne ble syntetisert ved anvendelse av metoden beskrevet for Fremstilling G1. MS (ES")funnet: (M - HV = 205,10
Fremstilling G4: Syntese av 5-(3-fluorfenyl)furan-2-karboksylsyre.
Denne ble syntetisert ved anvendelse av metoden beskrevet for
Fremstilling G1. MS (ES")funnet: (M - HV = 205,10
Fremstilling G5: Syntese av 5-(3,4-difluorfenyl)furan-2-karboksylsyre.
Denne ble syntetisert ved anvendelse av metoden beskrevet for Fremstilling G1. MS (ES")funnet: (M - HV = 223,09
Fremstilling G6: Syntese av 5-(4-isopropylfenyl)furan-2-karboksylsyre.
Denne ble syntetisert ved anvendelse av metoden beskrevet for Fremstilling G1. MS (ES-) funnet: (M - HV = 229,15
Fremstilling G7: Syntese av 5-(3-metoksyfenyl)furan-2-karboksylsyre.
Denne ble syntetisert ved anvendelse av metoden beskrevet for Fremstilling G1. MS (ES")funnet: (M - HV = 217,13
Fremstilling G8: Syntese av 5-(3-cyanofenyl)furan-2-karboksylsyre.
Denne ble syntetisert ved anvendelse av metoden beskrevet for Fremstilling G1. MS (ES")funnet: (M - HV = 212,12
Fremstilling G9: Syntese av 5-(4-cyanofenyl)furan-2-karboksylsyre.
Denne ble syntetisert ved anvendelse av metoden beskrevet for Fremstilling G1. MS (ES-)funnet: (M - HV = 212,12
Fremstilling H1: Syntese av litium-2-fenylisonikotinat-N-oksyd
Fremstilling H1, Trinn 1: En blanding av 2-brom-4-pyridinkarboksylsyre (1,1 g, 5,45 mmol), fenylboronsyre (1,3 g, 10,9 mmol), 2,0 M kaliumfosfat (vandig)
(8,2 ml, 16,34 mmol) og DMF (10 ml) i et 20 ml mikrobølge-rør ble avgasset under vakuum/Ar. En katalytisk mengde av tetrakis(trifenylfosfin)palladium(0)
ble satt til røret, blandingen ble avgasset igjen, røret ble lukket og reaksjonsblandingen ble oppvarmet ved 150^ i mikrobølger i 30 min.
Reaksjonsblandingen ble filtrert, filtratet ble konsentrert i vakuum og residuet ble oppløst i vann (10 ml). Blandingen ble surgjort til pH = 6 med tilsetning av 1,0 N HCI og det resulterende utfelte stoff ble oppsamlet ved filtrering, skyllet med to porsjoner av iskaldt vann og lufttørket, hvilket ga 575 mg 2-fenylisonikotinsyre som et gråhvitt, fast stoff. MS (ES+) = 200 (M+H+).
Fremstilling H1, Trinn 2: En løsning av 2-fenylisonikotinsyre (459 mg, 2,30 mmol) i 9:1 benzen/metanol (20 ml) ble avkjølt til O^C og behandlet ved dråpevis tilsetning av en 2,0 M heksanløsning av (trimetylsilyl)diazometan (1,15 ml, 2,30 mmol). Blandingen fikk komme til romtemperatur og ble omrørt i 6 timer. Analyse ved TLC viste ufullstendig reaksjon, så blandingen ble behandlet med ytterligere (trimetylsilyl)diazometan-løsning (230^L, 0,23 mmol) og reaksjonsblandingen ble omrørt i ytterligere 2 timer. TLC av blandingen forble uendret. Løsningsmidlet ble strippet og residuet ble fordelt mellom etylacetat og mettet natriumbikarbonat. Lagene ble separert, den organiske fasen ble vasket 2X med mettet natriumbikarbonat, de samlede vandige faser ble ekstrahert med etylacetat og de samlede organiske faser ble vasket med saltløsning, tørket over natriumsulfat og konsentrert i vakuum. Residuet ble renset over silikagel under eluering med 20% etylacetat/heptan, hvilket ga 372 mg metyl-2-fenylisonikotinat som en fargeløs olje.<1>H NMR (400 MHz, CDCI3) 8 ppm 8,83 (d, J=5,27 Hz, 1 H), 8,29 (s, 1 H), 8,04 (d, J=7,03 Hz, 2 H), 7,77 (d, J=3,52 Hz, 1 H), 7,51-7,42 (m, 3 H), 3,98 (s, 3 H).
Fremstilling H1, Trinn 3: Metyl-2-fenylisonikotinat-N-oksyd ble fremstilt ved metoden ifølge Sharpless, et. al., (J. Org. Chem. 1998, 63, 1740.). En løsning av metyl-2-fenylisonikotinat (370 mg, 1,73 mmol) og metyltrioksorhenium(VII) (3 mg, 0,01 mmol) i metylenklorid (2 ml) ble behandlet med 30% vandig hydrogenperoksyd (347 \ iL, 3,47 mmol), som forårsaket at den fargeløse løsningen ble gul og blandingen ble omrørt natten over. Analyse ved LCMS viste en 8:2 blanding av ønsket produkt til utgangsmateriale, så ytterligere metyltrioksorhenium(VII) (30 mg, 0,1 mmol) ble tilsatt og blandingen ble omrørt i 6 timer. En katalytisk mengde av mangandioksyd ble tilsatt og blandingen ble omrørt inntil gassutvikling opphørte (30 min). Blandingen ble fortynnet med metylenklorid (20 ml), lagene ble separert, det vandige laget ble ekstrahert med metylenklorid (5 ml) og de samlede organiske faser ble tørket over natriumsulfat, deretter konsentrert i vakuum til 397 mg av et fargeløst glass. Analyse ved LCMS viste et forhold på 95:5 metyl-2-fenylisonikotinat-N-oksyd/metyl-2-fenylisonikotinat. Dette materialet ble anvendt som det var i neste trinn. MS (ES+) = 230 (M+H+).
Fremstilling H1, Trinn 4: En løsning av metyl-2-fenylisonikotinat-N-oksyd (397 mg, 1,73 mmol) i THF (6 ml) ble behandlet med 0,5 N vandig litiumhydroksyd (3,65 ml, 1,81 mmol) og blandingen ble omrørt natten over. THF ble strippet og den vandige løsningen ble frysetørket, hvilket ga litium-2-fenylisonikotinat-N-oksyd som et fargeløst glass, som ble anvendt som det var i neste trinn.
Fremstilling H2; Syntese av 5- fenylnikotinsyre
Fremstilling H2. Trinn 1: 5-bromnikotinsyre (500 mg, 2,48 mmol, 1 ekv.), fenylboronsyre (454 mg, 3,71 mmol, 1,5 ekv.), tetrakis(trifenylfosfin)-palladium(O) (143 mg, 0,124 mmol, 0,05 ekv.) og natriumkarbonat (787 mg, 7,43 mmol, 3 ekv.) ble blandet i etanol (5 ml), toluen (25 ml) og vann (5 ml) ved romtemperatur under nitrogen. Reaksjonsblandingen ble deretter tilbakeløpskokt i 20 timer. Opparbeidet ved tilsetning av vann deretter frastrippet etanolen. Det vandige laget skyllet 2 ganger med dietyleter. Det vandige laget regulert til pH = 3 med kons. HCI. Det sure vandige laget ble ekstrahert 3 ganger med etylacetat og litt THF. Etylacetat/THF-lag ble samlet, tørket over natriumsulfat og strippet, hvilket ga 5-fenylnikotinsyre (332 mg) som et hvitt, fast stoff. Utbytte = 67%. LCMS detekterer (M+H)<+>= 198,1.
Fremstilling H3: Syntese av 3'-trifluormetylsulfonamido-[1,1'-bifenyl]-3-karboksylsyre
Fremstilling H3, Trinn 1: Etyl-3-jodbenzoat (0,92 g, 3,34 mmol, 1 ekv.), fenylboronsyre (0,87 g, 5,02 mmol, 1,5 ekv.), palladium(ll)acetat (37 mg, 0,167 mmol, 0,05 ekv.) og natriumkarbonat (706 mg, 6,66 mmol, 2 ekv.) ble oppløst i DMF (20 ml) ved romtemperatur under nitrogen. Reaksjonen ble deretter oppvarmet ved 80°C i 1,5 timer. Opparbeidet ved tilsetning av etylacetat og skylling 4 ganger med vann. Det organiske laget ble tørket over natriumsulfat og strippet, hvilket ga en mørk olje. Renset over silikagel i 9:1 til 1:1 heksaner/etylacetat for å oppnå 3'-amino-[1,1'-bifenyl]-3-karboksylsyre-etylester (420 mg) som en olje. Utbytte = 55%. LCMS detekterer (M+H)<+>= 242,41.
Fremstilling H3, Trinn 2: Etyl-3-(3-aminofenyl)benzoat (100 mg, 0,44 mmol, 1 ekv.) ble oppløst i metylenklorid (10 ml) ved romtemperatur og kaliumkarbonat (91 mg, 0,66 mmol, 1,5 ekv.) ble tilsatt. Avkjølt til -70 °C deretter tilsatt triflinsyre-anhydrid (74 uL, 0,44 mmol, 1 ekv.) dråpevis via en tilsetningstrakt. Etter 1 time tilsatt 0,2 ekv til av hver av reagensene ovenfor. Etter 1 time ble reaksjonsblandingen strippet, hvilket ga 3'-trifluormetylsulfonamido-[1,1'-bifenyl]-3-karboksylsyre-etylester (150 mg) som en olje. Utbytte = 91 %. Masse Spek. (ESI) detekterer (M+H)<+>= 372,1.
Fremstilling H3, Trinn 3: 3'-trifluormetylsulfonamido-[1,1 -bifenyl]-3-karboksylsyre-etylester (150 mg, 0,40 mmol, 1 ekv.) og 1,000 N NaOH (0,80 ml, 0,80 mmol, 2 ekv.) ble oppløst i THF (5 ml) ved romtemperatur og omrørt i 20 timer. Liten reaksjon. Tilsatt 100 mg NaOH og oppvarmet ved 50°C i 20 timer. Opparbeidet ved tilsetning av vann deretter skylling 2 ganger med dietyleter. Det vandige lagets pH ble regulert til 3 med 1N HCI. Det sure vandige lag ble ekstrahert 3 ganger med etylacetat. Etylacetatlag ble samlet, tørket over natriumsulfat og strippet, hvilket ga 3'-trifluormetylsulfonamido-
[1,1 '-bifenylj-3-karboksylsyre (90 mg) som et ravgult fast stoff. Utbytte = 65%. Masse Spek. (ESI) detekterer (M+H)<+>= 344,0.
Fremstilling H4: Syntese av 3-fenyl-4-hydroksybenzosyre
Fremstilling H4, Trinn 1: 3-brom-4-hydroksybenzosyre (500 mg, 2,30 mmol, 1 ekv.), fenylboronsyre (281 mg, 2,30 mmol, 1 ekv.), palladium(ll)acetat (16 mg, 0,069 mmol, 0,03 ekv.) og 1,5M cesiumkarbonat (vandig) (4,61 ml) ble oppløst i DMF (10 ml) ved romtemperatur under nitrogen og deretter oppvarmet ved 45°C i 20 timer. Opparbeidet ved tilsetning av vann (10 ml) deretter regulering til pH = 3 med 1N HCI. Det sure vandige lag ekstrahert 3 ganger med etylacetat. Etylacetatlag ble samlet og skyllet 3 ganger med vann (10 ml). Etylacetatlaget ble deretter tørket over natriumsulfat og strippet til en olje. Oljen ble renset over silikagel i 1:1 heksaner/etylacetat. 3-fenyl-4-hydroksybenzosyre (330 mg) oppnådd som en olje som til slutt stivnet. Utbytte = 67%. LCMS detekterer (M+H)<+>= 257,23.
Fremstilling H5: Syntese av 2-fenylpyrazin-6-karboksylsyre
Fremstillin<g>H5. Trinn 1: 2-fenylpyrazin-6-karboksylsyre ble syntetisert ved metoden ifølge E. Felder, D. Pitre, S. Boveri og E. B. Grabitz, Chem. Ber. 100
(1967) 555-559.
LCMS detekterer (M+H)<+>= 201,29.
Fremstilling H6: Syntese av 3-tert-butyl-5-(2H-tetrazol-5-yl)benzosyre
Fremstilling H6. Trinn 1: Til en løsning av dimetyl-5-tert-butylisoftalat (2,5 g, 10 mmol) i 20 ml THF avkjølt til 0°C ble satt dråpevis en løsning av litiumhydroksyd-monohydrat (168 mg, 7 mmol) i 5,0 ml vann. Reaksjonsblandingen ble omrørt ved romtemperatur i 3 timer. THF ble fjernet under redusert trykk, hvilket ga en gul olje som ble fortynnet med 10 ml 1N HCI. Den vandige fasen ble ekstrahert med EtOAc (2 x 25 ml) og ekstraktene ble samlet, tørket over Na2S04og konsentrert, hvilket ga 700 mg 3-tert-butyl-5-(metoksykarbonyl)benzosyre. MS funnet: (M + H)<+>= 237.
Fremstilling H6, Trinn 2: Til en løsning av 3-tert-butyl-5-(metoksykarbonyl)benzosyre (700 mg) i DMF (15 ml) ved romtemperatur ble tilsatt HATU (1,2 ekv), 3-aminopropannitril (1,2 ekv) og iPrøNEt (1,2 ekv). Blandingen ble omrørt ved romtemperatur i 16 timer før vann og EtOAc ble tilsatt. Det organiske laget ble separert og vasket påny to ganger før det ble oppsamlet, tørket over Na2S04og konsentrert for å gi metyl-3-tert-butyl-5-((2-cyanoetyl)karbamoyl)benzoat som et glassaktig fast stoff (520 mg). MS funnet: (M + H)<+>= 289.
Fremstilling H6. Trinn 3: Til en løsning av 3-tert-butyl-5-((2-cyanoetyl)karbamoyl)benzoat (520 mg, 1,8 mmol) i MeCN (15 ml) ved 0°C ble satt NaN3(117 mg, 1,8 mmol) og Tf20 (0,3 ml, 1,8 mmol). Blandingen ble omrørt ved romtemperatur i 16 timer før vandig NaHC03og EtOAc ble tilsatt. Det organiske laget ble separert og vasket påny to ganger før det ble oppsamlet, tørket over Na2S04og konsentrert til metyl-3-tert-butyl-5-(2-(2-cyanoetyl)-2H-tetrazol-5-yl)benzoat som en olje (450 mg, 80% utbytte). MS funnet: (M + H)<+>= 314.
Fremstilling H6, Trinn 4: Til en løsning av metyl-3-tert-butyl-5-(2-(2-cyanoetyl)-2H-tetrazol-5-yl)benzoat (500 mg) i 20 ml THF avkjølt til 0°C ble satt dråpevis en løsning av litiumhydroksyd-monohydrat (76 mg) i 5,0 ml vann. Reaksjonsblandingen ble omrørt ved romtemperatur i 16 timer. THF ble fjernet under redusert trykk, hvilket ga en gul olje som ble fortynnet med 10 ml 1N HCI. Den vandige fasen ble ekstrahert med EtOAc (2 x 25 ml) og ekstraktene ble samlet, tørket over Na2S04og konsentrert, hvilket ga 3-tert-butyl-5-(2H-tetrazol-5-yl)benzosyre. MS funnet: (M + H)<+>= 247.
Fremstilling H7: Syntese av 3-(1 H-tetrazol-5-yl)benzosyre
Fremstilling H7, Trinn 1: Til en løsning av 3-(metoksykarbonyl)benzosyre (800 mg, 4,4 mmol) i DMF (15 ml) ved romtemperatur ble satt HATU (2 g, 5,3 mmol), 3-aminopropannitril (0,33 ml, 4,4 mmol) og iPrøNEt (0,92 ml, 5,3 mmol). Blandingen ble omrørt ved romtemperatur i 16 timer før vann og EtOAc ble tilsatt. Det organiske laget ble separert og vasket påny to ganger før det ble oppsamlet, tørket over Na2S04og konsentrert for å gi metyl-3-((2-cyanoetyl)karbamoyl)benzoat som et glassaktig fast stoff (900 mg). MS funnet: (M + H)<+>= 233.
Fremstilling H7, Trinn 2: Til en løsning av metyl-3-((2-cyanoetyl)karbamoyl)benzoat (400 mg, 1,7 mmol) i MeCN (15 ml) ved 0°C ble satt NaN3(111 mg, 1,7 mmol) og Tf20 (0,3 ml, 1,7 mmol). Blandingen ble omrørt ved romtemperatur i 16 timer før vandig NaHC03og EtOAc ble tilsatt. Det organiske laget ble separert og vasket påny to ganger før det ble oppsamlet, tørket over Na2S04og konsentrert til metyl-3-(1-(2-cyanoetyl)-1H-tetrazol-5-yl)benzoat som en olje (180 mg, 41% utbytte). MS funnet: (M + H)<+>= 258.
Fremstilling H7, Trinn 3: Til en løsning av metyl-3-(1-(2-cyanoetyl)-1H-tetrazol-5-yl)benzoat (180 mg, 0,7 mmol) i 20 ml THF avkjølt til 0°C ble satt dråpevis en løsning av litiumhydroksyd-monohydrat (50 mg, 2,1 mmol) i 5,0 ml vann. Reaksjonsblandingen ble omrørt ved romtemperatur i 16 timer. THF ble fjernet under redusert trykk, hvilket ga en gul olje som ble fortynnet med 10 ml 1N HCI. Den vandige fasen ble ekstrahert med EtOAc (2 x 25 ml) og ekstraktene ble samlet, tørket over Na2S04og konsentrert, hvilket ga 100 mg (58% utbytte) av 3-(1H-tetrazol-5-yl)benzosyre. MS funnet: (M + H)<+>= 191.
Fremstilling H8: Syntese av 3-(4-metyltiazol-2-yl)benzosyre
Tittelforbindelsen ble syntetisert ved å følge litteraturprosedyrene beskrevet i Bioorg. Med. Chem. 1999, 8, 7, 1559-1566. MS funnet: (M + H)<+>= 220.
Fremstilling H9: Syntese av 6-fenylpikolinsyre
Fremstilling H9, Trinn 1: 6-brompikolinsyre (1,0 g) ble oppløst i 1,2-dimetoksyetan (15 ml) før tilsetning av palladium-tetrakistrifenylfosfin (572 mg), 2M Na2CC>3 (5 ml) og fenyl-boronsyre (905 mg). Den resulterende løsningen ble oppvarmet ved tilbakeløp i 48 timer. Etter avkjøling ble 1N HCI tilsatt for å regulere pH < 4. Et hvitt presipitat ble dannet og ble fjernet ved filtrering. En liten porsjon av filtratet ble renset ved revers fase HPLC (gradient-eluering, vann/acetonitril/TFA), hvilket ga 6-fenylpikolinsyre (25 mg). MS funnet: (M + H)<+>= 200,1.
Fremstilling H10: Syntese av 5-fenylnikotinsyre-N-oksyd
Fremstillin<g>H10. Trinn 1: 5-fenylnikotinsyre (50 mg) ble oppløst i dikloretan (2 ml) før tilsetning av 77% mCPBA (250 mg). Reaksjonsblandingen ble omrørt i 15 timer og deretter ble den konsentrert, filtrert og renset ved revers fase HPLC (gradient-eluering, vann/acetonitril/TFA), hvilket ga 5-fenylnikotinsyre-N-oksyd (20 mg). MS funnet: (M + H)<+>= 216,1.
Fremstilling H11: Syntese av 3-(tiazol-2-yl)benzosyre
Fremstilling H11. Trinn 1:10 g (0,068 mol) 3-cyano-benzosyre ble tatt i 150 ml tørr diklormetan og avkjølt til 0°C. Tilsatt 50 ml oksalylklorid dråpevis fulgt av 5 dråper tørr DMF. Reaksjonsblandingen ble omrørt ved romtemperatur natten over. Diklormetan ble fjernet og tørr metanol (50 ml) ble tilsatt og omrørt ved romtemperatur i 2 timer. Overskudd av metanol ble fjernet og residuet ble oppløst i etylacetat. Etylacetatlaget ble vasket med 10% av natriumbikarbonat, saltløsning og konsentrert, hvilket ga metyl-3-cyanobenzoat (7 g) som et hvitt, fast stoff.
Fremstilling H11, Trinn 2: En løsning av 2 g (0,01 mol) metyl-3-cyanobenzoat i 32 ml THF og 8 ml vann ble tilsatt 2,3 g (0,012 mol) dietyl- ditiofosfat og oppvarmet ved 80°C i 24 timer. THF ble fjernet og residuet ble tatt i etylacetat. Ekstrakten ble vasket med vann og konsentrert, hvilket ga metyl-3-karbamotioylbenzoat (2,0 g) som et blekgult, fast stoff.
Fremstilling H11, Trinn 3: En løsning av 0,6 g (0,003 mol) metyl-3-karbamotioylbenzoat i 6 ml eddiksyre ble tilsatt 1,15 g (0,009 mol) kloracetaldehyd-dimetylacetal og en katalytisk mengde av PTSA. Reaksjonsblandingen ble oppvarmet til 100°C natten over. Eddiksyre ble fjernet under vakuum og råproduktet ble renset ved 60-120 silikagel-kolonne ved anvendelse av 5% av etylacetat i pet.eter som elueringsmiddel for å gi metyl-3-(tiazol-2-yl)benzoat (0,5 g) som et hvitt, fast stoff.
Fremstilling H11. Trinn 4: En løsning av 0,6 g (0,0027 mol) metyl-3-(tiazol-2-yl)benzoat i 6 ml THF og 1,2 ml vann ble tilsatt 0,11 g (0,0046 mol) litiumhydroksyd. Reaksjonsblandingen ble omrørt ved romtemperatur natten over. THF ble fjernet og det vandige laget ble vasket med eter og surgjort med 1,5N HCI. Det faste produktet ble ekstrahert med etylacetat. Det organiske laget ble vasket med saltløsning og konsentrert, hvilket ga 3-(tiazol-2-yl)benzosyre (0,4 g) som et gråhvitt, fast stoff.<1>H NMR (400 MHz, CDCI3): 7,45 (d, 1H), 7,63 (m, 1H), 8,0 (d, 1H), 8,22 (d, 1H), 8,30 (d, 1H), 8,79 (s, 1H). MS funnet: (M - H)- = 204.
Eksempler 1 a - 1 i
Eksempel 1a: Syntese av c/s- og frans-(3S)-1-(4-(ferf-butylamino)-cykloheksyl)-3-(6-(trifluormetyl)kinazolin-4-ylamino)pyrrolidin-2-on
Eksempel 1a. Trinn 1: 1,4-cykloheksandion-etylenketal (5,00 g, 32,0 mmol, 1 ekv.), natrium-triacetoksyborhydrid (8,14 g, 38,4 mmol, 1,2 ekv.) og benzylamin (3,50 ml, 32,0 mmol, 1 ekv.) ble blandet i metylenklorid (100 ml) ved romtemperatur. Omrørt i 20 timer. Tilsatt 50 ml 1,0 N NaOH. Omrørt i 10 minutter. Ekstrahert 3 ganger med metylenklorid (50 ml). De organiske lag ble samlet, tørket over natriumsulfat og strippet, hvilket ga N-(fenylmetyl)-1,4-dioksaspiro[4.5]dekan-8-amin (7,91 g) av en lys ravgul olje som produkt. Utbytte = 100%. LCMS detekterer (M+H)<+>= 248,26.
Eksempel 1a. Trinn 2: 20% palladiumhydroksyd (1,00 g) ble forsiktig fuktet under nitrogen med metanol (50 ml), deretter ble N-(fenylmetyl)-1,4-dioksaspiro[4.5]dekan-8-amin (7,91 g) i metanol (50 ml) tilsatt. Blandingen ble hydrogenert på en Parr-shaker i 20 timer. Opparbeidet ved frafiltering av katalysatoren under nitrogen gjennom fiberglass-filtrerpapir. Filtratet ble strippet, hvilket ga 1,4-dioksaspiro[4.5]dekan-8-amin (6,40 g) som et oljeaktig fast stoff. Utbytte = 100%. LCMS detekterer (M+H)<+>= 158,1.
Eksempel 1a, Trinn 3: 1,4-dioksaspiro[4.5]dekan-8-amin (5,03 g, 32,0 mmol, 1 ekv.), CBZ-L-metionin (10,90, 38,4 mmol, 1,2 ekv.), 1-hydroksybenzotriazol-hydrat (HOBT) (5,19 g, 38,4 mmol, 1,2 ekv.), 1-[3-(dimetylamino)propyl]-3-etylkarbodiimid HCI (EDCI) (7,36 g, 38,4 mmol, 1,2 ekv.), trietylamin (8,92 ml, 64,0 mmol, 2 ekv.) og metylenklorid (150 ml) ble omrørt ved romtemperatur under nitrogen i 72 timer. Opparbeidet ved skylling 3 ganger med mettet natriumbikarbonat (50 ml). Det organiske laget ble tørket over natriumsulfat og strippet, hvilket ga en ravgul olje som stivnet. De faste stoffene ble utgnidd med dietyleter (100 ml) og omrørt natten over. De faste stoffene ble filtrert, hvilket ga 8-((2S)-2-(benzyloksykarbonylamino)-4-(metyltio)butanamido)-1,4-dioksaspiro[4.5]dekan (8,75 g) som et hvitt, fast stoff. Utbytte = 64%. Masse Spek. (ESI) detekterer (M+H)<+>= 423,22.
Eksempel 1a. Trinn 4a: 8-((2S)-2-(benzyloksykarbonylamino)-4-(metyltio)butanamido)-1,4-dioksaspiro[4.5]dekan (8,75 g, 20,7 mmol, 1 ekv.) ble omrørt i jodmetan (38,76 ml, 621,0 mmol, 30 ekv.) ved romtemperatur under nitrogen i 20 timer. Reaksjonen ble strippet 4 ganger fra metylenklorid (50 ml) deretter 2 ganger fra kloroform (50 ml). Det tilsvarende sulfoniumsalt (12,0 g) oppnådd som et gyldenbrunt amorft fast stoff. LCMS detekterer (M+)<+>= 437,06.
Dette sulfoniumsalt (11,7 g, 20,7 mmol, 1 ekv.) og cesiumkarbonat (33,7 g, 103,5 mmol, 5 ekv.) ble omrørt i DMF (75 ml) ved romtemperatur under nitrogen i 20 timer. Tilsatt etylacetat (100 ml) og det organiske laget skyllet 4 ganger med saltløsning (50 ml). Det organiske laget ble tørket over natriumsulfat og strippet, hvilket ga en olje. Renset over silikagel i 3:1 til 1:1 heksaner/etylacetat til 100 % etylacetat. 8-((3S)-3-(benzyloksy-karbonylamino)-2-oksopyrrolidin-1-yl)-1,4-dioksaspiro[4.5]dekan (2,70 g) oppnådd som et gyldenbrunt glass. Utbytte = 35%. LCMS detekterer (M+)<+>= 375,14.
Eksempel 1a. Trinn 4b: Sulfoniumsaltet fra 1 a, Trinn 4a, (1,00 g, 1,77 mmol, 1 ekv.) ble oppløst i THF ved romtemperatur under nitrogen og deretter ble 60% natriumhydrid (370 mg, 9,30 mmol, 5 ekv.) tilsatt i 5 porsjoner. Omrørt i 20 timer. Opparbeidet ved tilsetning av mettet ammoniumklorid (20 ml) deretter ekstraksjon 3 ganger med etylacetat. Den organiske ekstrakten ble samlet, tørket over natriumsulfat og strippet, hvilket ga en olje. Renset over silikagel i 3:1 til 1:1 heksaner/etylacetat til 100 % etylacetat. 8-((3S)-3-(benzyloksykarbonylamino)-2-oksopyrrolidin-1-yl)-1,4-dioksaspiro[4.5]dekan (460 mg) oppnådd som en nær fargeløs olje som produkt. Utbytte = 69%. LCMS detekterer (M+)<+>= 375,14.
Eksempel 1a, Trinn 5: 8-((3S)-3-(benzyloksykarbonylamino)-2-oksopyrrolidin-1-yl)-1,4-dioksaspiro[4.5]dekan (2,70 g, 7,21 mmol, 1 ekv.) og p-toluensulfonsyre (0,14 g, 0,721 mmol, 0,1 ekv.) ble oppløst i aceton (20 ml) ved romtemperatur. Tilbakeløpskokt i 4 timer. Reaksjon var ikke fullstendig ved TLC. Tilsatt 1N HCI (10 ml). Tilbakeløpskokt i 10 minutter. Aceton strippet fra. Tilsatt mettet natriumbikarbonat (25 ml). Ekstrahert 3 ganger med metylenklorid (25 ml). De organiske lag ble samlet, tørket over natriumsulfat og strippet, hvilket ga benzyl-(3S)-2-okso-1-(4-oksocykloheksyl)-pyrrolidin-3-ylkarbamat (2,40 g) som et ravgult glass. Utbytte = 95%. LCMS detekterer (M+)<+>= 375,14.
Eksempel 1a, Trinn 6: Benzyl-(3S)-2-okso-1 -(4-oksocykloheksyl)-pyrrolidin-3-ylkarbamat (2,40 g, 7,26 mmol, 1 ekv.), ferf-butylamin (0,84 ml, 7,99 mmol, 1,1 ekv.) og titan-isoproproksyd (4,68 ml, 16,0 mmol, 2,2 ekv.) ble blandet og omrørt ved romtemperatur under nitrogen i 20 timer. Opparbeidet ved tilsetning av metanol (50 ml) og omrørt i 1 time, deretter tilsatt natrium-borhydrid (pellet) (0,27 g, 7,26 mmol, 1 ekv.). Etter 1 time tilsatt 50 ml 1,0 N NaOH og omrørt. Etter 20 minutter ekstrahert 3 ganger med metylenklorid (50 ml). De organiske lag ble samlet, tørket over natriumsulfat og strippet, hvilket ga en ravgul olje. Renset over silikagel i 100% etylacetat til 4:1 metylenklorid/metanol. En blanding av c/s- og frans-isomerer av benzyl-(3S)-1-(4-(tert-butylamino)cykloheksyl)-2-oksopyrrolidin-3-ylkarbamat (700 mg) oppnådd som en ravgul olje. Utbytte = 25%. LCMS detekterer (M+H)<+>= 388,2.
Eksempel 1a, Trinn 7: 20% palladiumhydroksyd (150 mg) ble forsiktig fuktet under nitrogen med metanol (10 ml) og deretter ble blandingen av c/s- og frans-isomerer av benzyl-(3S)-1 -(4-(tert-butylamino)cykloheksyl)-2-oksopyrrolidin-3-ylkarbamat (700 mg) oppløst i metanol tilsatt. Blandingen ble hydrogenert på en Parr-shaker i 20 timer. Opparbeidet ved frafiltering av katalysatoren under nitrogen gjennom fiberglass-filtrerpapir. Filtratet ble strippet, hvilket ga c/s- og frans-(3S)-3-amino-1-(4-(tert-butylamino)-cykloheksyl)pyrrolidin-2-on (450 mg) som en olje. Utbytte = 98%. LCMS detekterer (M+H)<+>= 254,26.
Eksempel 1a og 1b, Trinn 8: Blandingen av c/s- og frans-isomerer av (3S)-3-amino-1-(4-(ferf-butylamino)cykloheksyl)pyrrolidin-2-on (60 mg, 0,237 mmol, 1 ekv.), 4-klor-6-(trifluormetyl)kinazolin (72 mg, 0,308 mmol, 1,3 ekv.) og trietylamin (0,13 ml, 0,947 mmol, 4 ekv.) ble oppløst i etanol ved romtemperatur og deretter mikrobølgebehandlet ved 100°C i 1 time. Renset ved HPLC. Isolert to fraksjoner: første fraksjon ga en 1:1 blanding av cis:trans (3S)-1-(4-(fe/t-butylamino)cykloheksyl)-3-(6-(trifluormetyl)kinazolin-4-ylamino)pyrrolidin-2-on, TFA-salt (25 mg) som et hvitt, fast stoff. LCMS detekterer (M+H)<+>= 450,17. Andre fraksjon ga 100% frans-(3S)-1-(4-(fert-butylamino)cykloheksyl)-3-(6-(trifluormetyl)kinazolin-4-ylamino)pyrrolidin-2-on, TFA-salt (27 mg) som et hvitt, fast stoff. LCMS detekterer (M+H)<+>= 450,17.
Eksempler 1e og 1f: Syntese av c/s- og frans-(3S)-3-ferf-butyl-N-(1-(4-(ferf-butylamino)cykloheksyl)-2-oksopyrrolidin-3-yl)-4-hydroksybenzamid
Eksempler 1e og 1f, Trinn 1: Blandingen av c/s- og frans-isomerer av (3S)-3-amino-1-(4-(fe/t-butylamino)-cykloheksyl)pyrrolidin-2-on (60 mg, 0,237 mmol, 1 ekv.), fe/f-butyl-4-hydroksybenzosyre (55 mg, 0,284 mmol, 1,2 ekv.), 1-hydroksybenzotriazolhydrat (HOBT) (38 mg, 0,284 mmol, 1,2 ekv.), 1-[3-(dimetylamino)propyl]-3-etylkarbodiimid-HCI (EDCI) (54 mg, 0,284 mmol, 1,2 ekv.), trietylamin (66 uL, 0,474 mmol, 2 ekv.) og metylenklorid (5 ml) ble omrørt ved romtemperatur under nitrogen natten over. Renset ved HPLC. Isolert to fraksjoner. Første fraksjon ga en 3:1 blanding av c/s- og frans-(3S)-3-ferf-butyl-N-(1-(4-(fe/t-butylamino)-cykloheksyl)-2-oksopyrrolidin-3-yl)-4-hydroksybenzamid, TFA-salt (10 mg) som et hvitt, fast stoff. LCMS detekterer (M+H)<+>= 430,23. Andre fraksjon ga 100% frans-(3S)-3-fert-butyl-N-(1-(4-(fert-butylamino)-cykloheksyl)-2-oksopyrrolidin-3-yl)-4-hydroksybenzamid, TFA-salt (20 mg) som et hvitt, fast stoff. LCMS detekterer (M+H)<+>= 430,23.
Tabell 1- A
Forbindelsene i den følgende tabell ble fremstilt ved anvendelse av metodene eksemplifisert ovenfor. Substituentene listet opp i hver tabell skal pares med strukturen inntatt i tabell-overskriften. Ved syntesen av visse eksempel-forbindelser, ble substitusjoner av nøkkelreagenser utført for å gi en forskjellig forbindelse og punktet (punktene) med varians er angitt i "Trinn endret" kolonnen. Noen av disse endringer krever reagenser som ikke er kommersielt tilgjengelige og syntese av slike spesialiserte reagenser er beskrevet ovenfor i avsnittet betegnet "Fremstilling av ikke-standard reagenser og syntetiske mellomprodukter anvendt i eksemplene". Typen av hvilken som helst gitt endring vil være klar for fagfolk på området, gitt den store mengden av beskrivelse gitt i eksemplene som går foran og følger etter denne Tabell. Referansen "n/a" i Trinn endret-kolonnen indikerer "ikke anvendbar," ettersom metoden er utført som skrevet uten endring. Dataene i "MS" kolonner representerer verdiene observert for (M + H)<+>ioner i elektrospray massespektroskopi forsøk.
Eksempler 2a - 2bc
Eksempel 2a: Syntese av N-{(3S)-1-[(1S, 2R, 4/?)-4-(isopropyl-metyl-amino)-2-propyl-cykloheksyl]-2-okso-pyrrolidin-3-yl}-2-(3-isopropyl-ureido)-5-trifluormetyl-benzamid
Eksempel 2a. Trinn 1: Til en avkjølt (0°C) løsning av (1/?,2S,5/?)-2-benzyloksykarbonylamino-7-okso-6-aza-bicyklo[3.2.1]oktan-6-karboksylsyre-tert-butylester (4,6 g, 12,3 mmol) i CH2CI2(100 ml) ble satt DIBAL-H (37 ml av en 1,0 M løsning i THF). Blandingen ble omrørt i 105 min ved 0°C. Reaksjonen ble stanset med 1N HCI og blandingen ekstrahert med EtOAc (2 x). De organiske ekstrakter ble samlet, vasket med saltløsning, tørket (Na2S04), filtrert og konsentrert i vakuum, hvilket ga tert-butyl-(1/?,2S,5R,7R/S)-2-(benzyloksykarbonylamino)-7-hydroksy-6-aza-bicyklo[3.2.1]oktan-6-karboksylat som en blanding av diastereomerene. MS funnet: (M-H20+HV<+>= 359,2. Dette materialet ble oppløst i THF (20 ml) og tilsatt med kanyle (6 ml THF skylling) til en forhåndsblandet (15 min), forhåndsavkjølt (O^C) løsning av etyltrifenylfosfoniumjodid (6,4 g, 14,8 mmol) og KHMDS (31 ml av en 0,5 M løsning i toluen). Reaksjonsblandingen ble omrørt i 25 min ved O^C før den ble behandlet ved tilsetning av mettet NH4CI. Den bifasiske blanding ble ekstrahert med EtOAc (2 x). De organiske ekstrakter ble samlet, vasket med saltløsning, tørket (Na2S04), filtrert og konsentrert i vakuum. Rensning av residuet via "flash" kromatografi ga den ønskede [(1/?,3/?,4S)-(4-benzyloksykarbonyl-amino-3-propenyl-cykloheksyl)-karbaminsyre-tert-butylester som en fargeløs olje (3,44 g, 72% utbytte). MS funnet: (M + H)<+>= 389,3.
Eksempel 2a, Trinn 2: En løsning av [(1/?,3f?,4S)-(4-benzyloksykarbonyl-amino-3-propenyl-cykloheksyl)-karbaminsyre-tert-butylester (3,44 g) i MeOH (50 ml) ble tilsatt 5% Pd/C, Degussa (1 g). Reaksjonskolben ble evakuert og deretter fylt opp med hydrogen; dette ble gjentatt tre ganger til. Reaksjonsblandingen ble omrørt under 1 atm H2i 4 timer og deretter filtrert og konsentrert i vakuum, hvilket ga (1f?,3f?,4S)-(4-amino-3-propyl-cykloheksyl)-karbaminsyre-tert-butylester (kvantitativt). MS funnet: (M + H)<+>= 257,3.
Eksempel 2a. Trinn 3: En prøve av (1/?,3f?,4S)-(4-amino-3-propyl-cykloheksyl)-karbaminsyre-tert-butylester (1,9 mmol) ble oppløst i 1:1
CH2CI2/DMF (40 ml) og den resulterende løsningen ble tilsatt N-Cbz metionin (591 mg, 2,1 mmol), N,N-dietylisopropylamin (1 ml, 5,7 mmol) og BOP (1,0 g, 2,3 mmol). Reaksjonsblandingen ble omrørt i 12 timer ved romtemperatur og deretter fordelt mellom EtOAc og mettet NaHC03; den vandige fasen ble tilbakeekstrahert med EtOAc (1 x). De organiske fasene ble samlet, vasket med saltløsning, tørket (Na2S04), filtrert og konsentrert i vakuum. Residuet ble renset ved "flash" kromatografi, hvilket ga (1R3R4S)-[4-((2S)-2-benzyloksykarbonylamino-4-metylsulfanyl-butyrylamino)-3-propyl-cykloheksyl]-karbaminsyre-tert-butylester (375 mg). MS funnet: (M + H)<+>= 522,3.
Eksempel 2a. Trinn 4: Forbindelsen (1f?,3f?,4S)-[4-((2S)-2-benzyloksykarbonylamino-4-metylsulfanyl-butyrylamino)-3-propyl-cykloheksyl]-karbaminsyre-tert-butylester (375 mg) ble "fuktet" med EtOAc og deretter ble mesteparten av EtOAc fjernet under nitrogenstrøm. Residuet ble oppløst i jodmetan (6 ml) og den resulterende løsningen ble omrørt ved romtemperatur i 48 timer før den ble konsentrert i vakuum. Residuet ble oppløst i metylenklorid og den resulterende løsningen ble konsentrert; dette ble gjentatt, hvilket ga saltet. MS funnet: (M + H)<+>= 536,3. Dette materialet ble oppløst i DMF (12 ml) og løsningen ble tilsatt CS2CO3(470 mg, 1,4 mmol) og omrørt i 12 timer ved romtemperatur før den ble fordelt mellom EtOAc og saltløsning. Den organiske fasen ble tørket (Na2S04), filtrert og konsentrert i vakuum. Residuet ble renset ved "flash" kromatografi, hvilket ga {(3S)-1-[(1S,2/?,4/?)-4-tert-butoksykarbonylamino-2-propyl-cykloheksyl]-2-okso- pyrrolidin-3-yl}-karbaminsyre-benzylester (185 mg). MS funnet: (M + H)<+>= 474,3.
Eksempel 2a. Trinn 5: En løsning av {(3S)-1-[(1S,2f?,4f?)-4-tert-butoksykarbonylamino-2-propyl-cykloheksyl]-2-okso-pyrrolidin-3-yl}-karbaminsyre-benzylester (185 mg, 0,54 mmol) i MeOH (8 ml) ble tilsatt 5% Pd/C, Degussa (180 mg). Reaksjonskolben ble evakuert og deretter fylt opp med hydrogen; dette ble gjentatt tre ganger til. Reaksjonsblandingen ble omrørt under 1 atm av H2i 12 timer og deretter filtrert og konsentrert i vakuum, hvilket ga (1/?,3f?,4S)-{4-[(3S)-3-amino-2-okso-pyrrolidin-1-yl]-3-propyl-cykloheksyl}-karbaminsyre-tert-butylester. MS funnet: (M + H)<+>= 340,3.
Eksempel 2a. Trinn 6: En løsning av (1/?,3f?,4S)-{4-[(3S)-3-amino-2-okso-pyrrolidin-1 -yl]-3-propyl-cykloheksyl}-karbaminsyre-tert-butylester (0,27 mmol antatt) i DMF (4 ml) ble tilsatt 2-(3-isopropyl-ureido)-5-trifluormetyl-benzosyre (82 mg, 0,3 mmol), N,N-dietylisopropylamin (0,19 ml, 1,1 mmol) og BOP (142 mg, 0,32 mmol). Reaksjonsblandingen ble omrørt i 48 timer ved romtemperatur og deretter fordelt mellom EtOAc og mettet NaHC03; den vandige fasen ble tilbakeekstrahert med EtOAc (1 x). De organiske fasene ble samlet, vasket med saltløsning, tørket (Na2S04), filtrert og konsentrert i vakuum, hvilket ga (1/?,3f?,4S)-(4-{(3S)-3-[2-(3-isopropyl-ureido)-5-trifluormetyl-benzoylamino]-2-okso-pyrrolidin-1-yl}-3-propyl-cykloheksyl)-karbaminsyre-tert-butylester. MS funnet: (M + H)<+>= 612,3.
Eksempel 2a, Trinn 7: En løsning av (1/?,3f?,4S)-(4-{(3S)-3-[2-(3-isopropyl-ureido)-5-trifluormetyl-benzoylamino]-2-okso-pyrrolidin-1-yl}-3-propyl-cykloheksyl)-karbaminsyre-tert-butylester i CH2CI2(6 ml) ble behandlet med trifluoreddiksyre (4 ml) og blandet. Etter 1 time ble reaksjonsblandingen konsentrert i vakuum og det resulterende residuet ble igjen oppløst i CH2CI2(6 ml) og igjen tilsatt trifluoreddiksyre (4 ml). Etter 1 time ble reaksjonsblandingen konsentrert i vakuum og det resulterende residuet ble fordelt mellom EtOAc og mettet NaHC03. Den organiske fasen ble vasket med saltløsning, tørket (Na2S04), filtrert og konsentrert i vakuum, hvilket ga aminet. MS funnet: (M + H)<+>= 512,3. Aminet ble oppløst i MeOH (6 ml) og tilsatt aceton (~0,75 ml); blandingen ble omrørt i 5 min før den ble tilsatt NaCNBH3 (~100 mg). Reaksjonsblandingen ble omrørt i 4 timer ved romtemperatur og deretter tilsatt formaldehyd (~0,3 ml av en 30% vandig løsning). Blandingen ble omrørt i 1,5 timer, behandlet med mettet NaHC03og ekstrahert med EtOAc (2 x). De organiske ekstrakter ble samlet, vasket med saltløsning, tørket (Na2S04), filtrert og konsentrert i vakuum. Residuet ble renset ved revers fase HPLC, hvilket ga TFA-saltet av tittelforbindelsen, N-{(3S)-1-[(1S,2/?,4/?)-4-(isopropyl-metyl-amino)-2-propyl-cykloheksyl]-2-okso-pyrrolidin-3-yl}-2-(3-isopropyl-ureido)-5-trifluormetyl-benzamid (også kjent som 1-{2-[((S)-1-((1S,2f?,4f?)-4-(isopropyl(metyl)amino)-2-propylcykloheksyl)-2-oksopyrrolidin-3-yl)karbamoyl]-4-(trifluormetyl)fenyl}-3-etylurinstoff), som et hvitt pulver (9 mg) etter lyofilisering. MS funnet: (fri M + H)<+>= 568,3.
Eksempel 2c: Syntese av 1-{2-[((S)-1-((1S,2R,4R)-4-(isopropyl(metyl)amino)-2-propylcykloheksyl)-2-oksopyrrolidin-3-yl)karbamoyl]-4-(trifluormetyl)fenyl}-3-etylurinstoff
Eksempel 2c. Trinn 1: Til en løsning av {(3S)-1-[(1S,2/?,4f?)-4-tert-butoksykarbonylamino-2-propyl-cykloheksyl]-2-okso-pyrrolidin-3-yl}-karbaminsyre-benzylester (3,88 g, 8,2 mmol) i CH2CI2(90 ml) ble satt TFA (45 ml) ved romtemperatur. Reaksjonsblandingen ble omrørt i 5 timer og konsentrert i vakuum. Residuet ble fordelt mellom 1N NaOH (100 ml) og EtOAc (150 ml). Det vandige laget ble ekstrahert med EtOAc (2 x 50 ml) og de organiske fasene ble samlet, vasket med saltløsning (25 ml), tørket (Na2S04), filtrert og konsentrert i vakuum, hvilket ga benzyl-(S)-1-[(1S,2/?,4/?)-4-amino-2-propylcykloheksyl]-2-oksopyrrolidin-3-ylkarbamat. MS funnet: (M + H)<+>= 374,3.
Eksempel 2c, Trinn 2: Alt benzyl-(S)-1-[(1S,2/?,4/?)-4-amino-2-propylcykloheksyl]-2-oksopyrrolidin-3-ylkarbamat fremstilt i Trinn 1 (antatt 8,2 mmol) ble oppløst i metanol (40 ml). Den resulterende løsningen ble tilsatt aceton (6 ml, 82 mmol) og omrørt ved romtemperatur i 10 min før natriumcyanoborhydrid (2,6 g, 41 mmol) ble tilsatt i én porsjon. Reaksjonsblandingen ble omrørt ved romtemperatur i 10 timer og deretter suksessivt tilsatt formaldehyd (3,0 ml 37 vekt% vandig løsning, 41 mmol) og natriumcyanoborhydrid (0,52 g, 8,2 mmol). Reaksjonsblandingen ble omrørt i ytterligere 9 timer ved romtemperatur og deretter behandlet med mettet NaHC03(150 ml). Den vandige blandingen ble ekstrahert med EtOAc (200 ml, deretter 2 x 75 ml). De organiske ekstrakter ble samlet, vasket med saltløsning (30 ml), tørket (MgS04), filtrert og konsentrert i vakuum. Etter at den resulterende olje har stått, stivnet noen paraformaldehyd-relaterte produkter; disse ble fjernet ved oppløsning av blandingen i et minimalt volum av EtOAc og filtering. Påfølgende konsentrasjon ga benzyl-(S)-1-[(1S,2/?,4/?)-4-(isopropyl(metyl)amino)-2-propylcykloheksyl]-2-oksopyrrolidin-3-ylkarbamat. MS funnet: (M + H)<+>= 430,5.
Eksempel 2c. Trinn 3: Alt benzyl-(S)-1-[(1S,2/?,4/?)-4-(isopropyl(metyl)amino)-2-propylcykloheksyl]-2-oksopyrrolidin-3-ylkarbamat fremstilt i Trinn 2 (antatt 8,2 mmol) ble fuktet med 3 ml EtOAc og deretter tilsatt 30% HBr/AcOH (30 ml). Reaksjonskaret oppvarmes og en kraftig gassutvikling skjer. Blandingen ble omrørt i 25 min ved romtemperatur og deretter ble kolben plassert i et avkjølt vannbad før tilsetning av 150 ml 1:1 Et20/H20. Denne blandingen ble blandet og separert og den vandige fasen ble ekstrahert én gang med Et20. Den vandige fasen ble gjort basisk til pH 14 ved tilsetning av fast NaOH (temperaturen til denne eksoterme prosess ble kontrollert ved periodisk anvendelse av et ytre isbad) og den resulterende blandingen ble ekstrahert med EtOAc (75 ml, deretter 2 x 35 ml). De organiske ekstrakter ble samlet, vasket med saltløsning (30 ml), tørket (Na2S04), filtrert og konsentrert i vakuum, hvilket ga en oransje olje, forurenset med noe pulveraktig hvitt fast stoff (antatt å være formaldehyd-relatert). Blandingen ble oppløst i et minimalt volum av EtOAc, filtrert og konsentrert for å gi (S)-3-amino-1-[(1S,2/?,4/?)-4-(isopropyl(metyl)amino)-2-propylcykloheksyl]pyrrolidin-2-on (2,31 g; 1H-NMR viser~30% EtOAc, som indikerer en beregnet 7,0 mmol av produkt fra Trinn 1 -3). MS funnet: (M + H)<+>= 296,6.
Eksempel 2c. Trinn 4: Til en løsning av (S)-3-amino-1-[(1S,2/?,4/?)-4-(isopropyl(metyl)amino)-2-propylcykloheksyl]pyrrolidin-2-on (77 mg, 0,26 mmol) i DMF (2 ml) ble satt N,N-diisopropyletylamin (0,32 ml), 2-(3-etylureido)-5-(trifluormetyl)benzosyre (80 mg) og HATU (129 mg). Reaksjonsblandingen ble omrørt ved romtemperatur i 14 timer, fortynnet med vann, filtrert og renset ved RP-HPLC, hvilket ga 1-{2-[((S)-1-((1S,2/?,4/?)-4-(isopropyl(metyl)amino)-2-propylcykloheksyl)-2-oksopyrrolidin-3-yl)karbamoyl]-4-(trifluormetyl)fenyl}-3-etylurinstoff. MS funnet: (M + H)<+>= 554,4. [Bemerk: for større skala fremstilling ble reaksjonen ofte kjørt med CH2CI2som et med-løsningsmiddel og den følgende vandige opparbeiding ble anvendt før RP-HPLC rensning. Flyktige stoffer ble fjernet og residuet ble oppløst i EtOAc. Den organiske fasen ble vasket med mettet NaHC03, vann, 1N HCI, mettet NaCI og deretter tørket (MgS04), filtrert og konsentrert i vakuum.]
Eksempel 2i: Syntese av 6-fert-butyl-N-((3S)-1-((1S,2R,4R)-4-(isopropyl(metyl)amino)-2-propylcykloheksyl)-2-oksopyrrolidin-3-yl)pikolinamid
Eksempel 2i, Trinn 1: (3S)-3-amino-1-((1S,2R,4R)-4-(isopropyl(metyl)amino)-2-propylcykloheksyl)pyrrolidin-2-on (41,7 mg, 0,14 mmol, 1 ekv.), 6- tert-butylpikolinsyre, HCI-salt (37 mg, 0,168 mmol, 1,2 ekv.), 1-hydroksybenzotriazol-hydrat (HOBT) (19 mg, 0,168 mmol, 1,2 ekv.), 1-[3-(dimetylamino)propyl]-3-etylkarbodiimid HCI (EDCI) (28 mg, 0,168 mmol, 1,2 ekv.), trietylamin (24 uL, 0,282 mmol, 2 ekv.) og THF (5 ml) ble omrørt ved romtemperatur under nitrogen natten over. Renset ved RP-HPLC. 41 mg av TFA-salt av 6-fert-butyl-N-((3S)-1-((1S,2R,4R)-4-(isopropyl(metyl)amino)-2-propylcykloheksyl)-2-oksopyrrolidin-3-yl)pikolinamid, bis TFA-salt oppnådd som et hvitt, fast stoff etter lyofilisering. MS funnet: (M+H)+ = 457,4.
Eksempel 2k: Syntese av (S)-1-[(1S,2f?,4f?)-4-(isopropyl(metyl)amino)-2-propylcykloheksyl]-3-(6-(trifluormetyl)kinazolin-4-ylamino)pyrrolidin-2-on
Eksempel 2k, Trinn 1: Til en løsning av (S)-3-amino-1-[(1S,2/?,4/?)-4-(isopropyl(metyl)amino)-2-propylcykloheksyl]pyrrolidin-2-on (7,0 mmol) i EtOH (23 ml) ble satt trietylamin (2,5 ml, 17,5 mmol) og 4-klor-6-(trifluormetyl)kinazolin (2,03 g, 8,75 mmol). Blandingen ble oppvarmet ved 75°C i 14 timer og deretter konsentrert i vakuum. [Merk: i mindre skala reaksjon kunne dette residuet fortynnes i vann/acetonitril, filtreres og renses direkte ved RP-HPLC] Residuet ble oppløst i 60 ml 2:1 H20/AcOH og ekstrahert med Et20 to ganger. Den vandige fasen ble gjort basisk til pH 14 med fast NaOH (temperaturen til denne eksoterme prosess ble kontrollert ved periodisk anvendelse av et ytre isbad) og deretter ekstrahert med EtOAc tre ganger. De organiske ekstrakter ble samlet, vasket med saltløsning, tørket (Na2S04), filtrert og konsentrert i vakuum, hvilket ga et fast stoff. Materialet ble omkrystallisert fra EtOAc to ganger for å gi tittelforbindelsen, (S)-1-[(1S,2/?,4/?)-4-(isopropyl(metyl)amino)-2-propylcykloheksyl]-3-(6-(trifluormetyl)kinazolin-4-ylamino)pyrrolidin-2-on, som et hvitt mikrokrystallinsk fast stoff (1,83 g, 52% utbytte). MS funnet: (M + H)<+>= 492,4. [Merk: Rensning av moderlutene ved anvendelse av RP-HPLC ga mer av tittelforbindelsen som dens bis-TFA-salt.]
Eksempel 2p: Syntese av (3S)-1-((1S,2R,4R)-4-(isopropyl(metyl)amino)-2-propylcykloheksyl)-3-(6-(2-metoksyfenyl)kinazolin-4-ylamino)pyrrolidin-2-on
Eksempel 2p, Trinn 1: En løsning av (3S)-3-amino-1-((1S,2R,4R)-4-(isopropyl(metyl)amino)-2-propylcykloheksyl)pyrrolidin-2-on (38 mg, 0,13 mmol), 4-klor-6-(2-metoksyfenyl)kinazolin (42 mg, 0,15 mmol) og trietylamin (0,054 ml, 0,39 mmol) i etanol (2 ml) i et lukket 5 ml mikrobølgerør ble oppvarmet i mikrobølger ved 100°C i 60 min. Reaksjonsblandingen ble avkjølt til romtemperatur, konsentrert i vakuum og residuet ble renset ved RP-HPLC, hvilket ga TFA-saltet av tittelforbindelsen som et hvitt pulver etter lyofilisering (38 mg). MS funnet: (M + H)<+>= 530.
Eksempler 2r og 2s: Syntese av (S)-3-(6-klorkinazolin-4-ylamino)-1-((1S,2R,4R)-4-(isopropylamino)-2-propylcykloheksyl)pyrrolidin-2-on og (S)-3-(6-klorkinazolin-4-ylamino)-1-((1S,2R,4R)-4-(etyl(isopropyl)amino)-2-propylcykloheksyl)pyrrolidin-2-on
Eksempler 2r og 2s. Trinn 1: En løsning av (1/?,3/?,4S)-{4-[(3S)-3-amino-2-okso-pyrrolidin-1-yl]-3-propyl-cykloheksyl}-karbaminsyre-tert-butylester (0,66 mmol) i EtOH (8 ml) ble tilsatt trietylamin (0,5 ml, 3,3 mmol) og 4,6-diklorkinazolin (200 mg, 1,0 mmol) før den ble oppvarmet ved 80°C i 12 timer. Reaksjonsblandingen ble avkjølt og renset ved "flash" kromatografi, hvilket ga tert-butyl-(1R,3R,4S)-4-((S)-3-(6-klorkinazolin-4-ylamino)-2-oksopyrrolidin-1-yl)-3-propylcykloheksylkarbamat. MS funnet: (M + H)<+>= 502,2.
Eksempler 2r og 2s. Trinn 2: En porsjon avtert-butyl-(1R,3R,4S)-4-((S)-3-(6-klorkinazolin-4-ylamino)-2-oksopyrrolidin-1-yl)-3-propylcykloheksylkarbamat ble ført gjennom prosessen beskrevet i Eksempel 2a, Trinn 7, ved anvendelse av acetaldehyd istedenfor formaldehyd. Rensning ved RP-HPLC ga to produkter: TFA-saltet av (S)-3-(6-klorkinazolin-4-ylamino)-1-((1S,2R,4R)-4-(isopropylamino)-2-propylcykloheksyl)pyrrolidin-2-on [MS funnet: (M + H)<+>= 444] og TFA-saltet av (S)-3-(6-klorkinazolin-4-ylamino)-1-((1S,2R,4R)-4-(etyl(isopropyl)amino)-2-propylcykloheksyl)pyrrolidin-2-on [MS funnet: (M + H)<+>= 472].
Eksempler 2t og 2u: Syntese av (S)-1-((1S,2R,4R)-4-(tert-butylamino)-2-propylcykloheksyl)-3-(6-(trifluormetyl)kinazolin-4-ylamino)pyrrolidin-2-on og (S)-1-((1S,2R,4S)-4-(tert-butylamino)-2-propylcykloheksyl)-3-(6-(trifluormetyl)kinazolin-4-ylamino)pyrrolidin-2-on
Eksempler 2t og 2u, Trinn 1: En løsning av 7-okso-6-oksa-bicyklo[3.2.1]okt-2-yl)-karbaminsyre-benzylester (2,2 g, 8,2 mmol) i toluen (80 ml) ble avkjølt til -78°C og behandlet med DIBAL-H (15 ml av en 1,5 M løsning i toluen). Reaksjonsblandingen ble omrørt i 4 timer ved -78°C og behandlet med 1N HCI-løsning. Blandingen ble oppvarmet til romtemperatur og ekstrahert med EtOAc. De organiske ekstrakter ble samlet, vasket med saltløsning, tørket, filtrert og konsentrert i vakuum. Residuet ble oppløst i THF (20 ml) og satt til en forhåndsblandet (30 min), forhåndsavkjølt ( 0°C) løsning av etyltrifenylfosfoniumjodid (3,6 g, 9,8 mmol) og KHMDS (20,6 ml av en 0,5 M løsning i toluen). Reaksjonsblandingen ble omrørt ved 0°C i 20 min før den ble behandlet med mettet ammoniumklorid. Det organiske laget ble separert og den vandige blandingen ble ekstrahert med etylacetat. De samlede organiske faser ble vasket med saltløsning, tørket, filtrert og konsentrert i vakuum. Residuet ble renset ved "flash" kromatografi, hvilket ga benzyl-(1 S,2S,4R)-4-hydroksy-2-((Z)-prop-1 -enyl)cykloheksylkarbamat, forurenset med små mengder av dens (E)-isomer (1,2 g). MS funnet: (M + H)<+>= 290.
Eksempler 2t og 2u, Trinn 2: En løsning av benzyl-(1S,2S,4R)-4-hydroksy-2-((Z)-prop-1-enyl)cykloheksylkarbamat (6,0 g, 20,7 mmol) i metylenklorid (60 ml) ble behandlet med imidazol (2,1 g) og avkjølt til O^C. Den resulterende løsningen ble tilsatt tert-butylklordimetylsilan (3,4 g, 22,8 mmol) og deretter omrørt i 18 timer ved SO^C før den ble behandlet med vann. Den organiske fasen ble separert og den vandige fasen ble ekstrahert med metylenklorid. De samlede organiske faser ble vasket med saltløsning, tørket, filtrert og konsentrert i vakuum. Residuet ble renset ved "flash" kromatografi, hvilket ga benzyl-(1S,2S,4R)-4-(tert-butyldimetylsilyloksy)-2-((Z)-prop-1-enyl)cykloheksylkarbamat (6,0 g). MS funnet: (M + H)<+>= 404. Eksempler 2t og 2u, Trinn 3: En løsning av benzyl-(1S,2S,4R)-4-(tert-butyldimetylsilyloksy)-2-((Z)-prop-1-enyl)cykloheksylkarbamat (0,3 g, 0,74 mmol) i 10 ml 7:3 EtOH:EtOAc ble tilsatt palladiumhydroksyd og omrørt under hydrogenatmosfære i 22 timer. Palladium ble fjernet ved filtrering og løsningen ble tilsatt frisk palladiumhydroksyd før den igjen ble plassert under hydrogenatmosfære (5 kg trykk). Etter 3 timer ble blandingen filtrert gjennom celite med EtOAc vaskevæsker og konsentrert i vakuum. Residuet ble oppløst i DMF (3 ml) og den resulterende løsningen ble avkjølt til 0°C før den suksessivt ble tilsatt (S)-Cbz-metionin (0,31 g, 1,1 mmol), N-metylmorfolin (0,24 ml, 2,2 mmol) og BOP-reagens (0,48 g, 1,1 mmol). Reaksjonsblandingen ble langsomt oppvarmet til 30 °C og deretter omrørt i 12 timer før reaksjonen ble stanset med vann. Blandingen ble ekstrahert med EtOAc og de samlede organiske faser ble vasket med saltløsning, tørket, filtrert og konsentrert i vakuum. Residuet ble renset ved "flash" kromatografi, hvilket ga benzyl-(S)-1 -((1 S,2R,4R)-4-(tert-butyldimetylsilyloksy)-2-propylcykloheksylamino)-4-(metyltio)-1 -oksobutan-2-ylkarbamat (0,25 g). blah, blah. MS funnet: (M + H)<+>= 537.
Eksempler 2t og 2u. Trinn 4: En prøve av benzyl-(S)-1-((1S,2R,4R)-4-(tert-butyldimetylsilyloksy)-2-propylcykloheksylamino)-4-(metyltio)-1-oksobutan-2-ylkarbamat (4,0 g, 7,45 mmol) ble oppløst i jodmetan (8 ml) og omrørt ved 30°C i 3 dager. Løsningen ble konsentrert i vakuum. Residuet ble oppløst i metylenklorid og den resulterende løsningen ble konsentrert i vakuum igjen; denne prosedyren ble gjentatt to ganger før residuet ble plassert under høyvakuum i 4 timer. Det resulterende blekgule skumaktige faste stoff ble oppløst i THF (40 ml) og den resulterende løsningen ble avkjølt til O^C før den ble behandlet med natriumhydrid (0,9 g, 37 mmol) i én porsjon. Blandingen ble langsomt oppvarmet til 30oC og omrørt i 12 timer før den ble behandlet med mettet ammoniumklorid. Det organiske laget ble separert og det vandige laget ble ekstrahert med EtOAc. De samlede organiske faser ble vasket med saltløsning, tørket, filtrert og konsentrert i vakuum. Residuet ble renset ved "flash" kromatografi, hvilket ga benzyl-(S)-1-((1S,2R,4R)-4-(tert-butyldimetylsilyloksy)-2-propylcykloheksyl)-2-oksopyrrolidin-3-ylkarbamat (0,9
g). MS funnet: (M + H)<+>= 489,2.
Eksempler 2t og 2u. Trinn 5: En prøve av benzyl-(S)-1-((1S,2R,4R)-4-(tert-butyldimetylsilyloksy)-2-propylcykloheksyl)-2-oksopyrrolidin-3-ylkarbamat (0,4 g, 0,82 mmol) ble oppløst i 36 ml 4:1:1 HOAc/THF/vann og omrørt ved romtemperatur i 5 dager. De flyktige stoffene ble fjernet i vakuum og residuet ble oppløst i EtOAc. Den organiske fasen ble vasket med mettet NaHC03, tørket (MgS04), filtrert og konsentrert i vakuum. Residuet ble oppløst i metylenklorid (4 ml) og den resulterende løsningen ble avkjølt til 0°C og tilsatt Dess-Martin-perjodinan (0,54 g, 1,27 mmol). Etter omrøring i 2 timer ved romtemperatur ble løsningen igjen avkjølt til O^C og tilsatt Dess-Martin perjodinan (0,27 g). Reaksjonsblandingen ble omrørt ved romtemperatur i 14 timer og behandlet med Et20. Den resulterende suspensjon ble vasket med 1N NaOH, mettet Na2S203og mettet NaHC03. Den organiske fasen ble tørket (MgS04), filtrert og konsentrert i vakuum, hvilket ga benzyl-(S)-2-okso-1-((1S,2R)-4-okso-2-propylcykloheksyl)pyrrolidin-3-ylkarbamat (114 mg). MS funnet: (M + Na)<+>= 395,4.
Eksempler 2t og 2u. Trinn 6: En prøve av benzyl-(S)-2-okso-1-((1S,2R)-4-okso-2-propylcykloheksyl)pyrrolidin-3-ylkarbamat (114 mg) ble oppløst i Ti(OiPr)4(1,5 ml, 5,0 mmol) og tert-butylamin (0,14 ml, 1,8 mmol). Den resulterende løsningen ble omrørt ved romtemperatur i 3 timer før den ble avkjølt til O^C og suksessivt tilsatt MeOH (2 ml) og NaBH4(22,8 mg, 0,6 mmol). Blandingen ble omrørt i 90 min mens løsningen langsomt ble oppvarmet til romtemperatur. Løsningen ble fortynnet med metylenklorid (10 ml) og 0,5 N NaOH ble tilsatt. Den resulterende suspensjon ble filtrert gjennom et sjikt av celite med EtOAc-vaskevæsker og filtratet ble tørket, filtrert og konsentrert i vakuum, hvilket ga benzyl-(S)-1-((1S,2R,4R/S)-4-(tert- butylamino)-2-propylcykloheksyl)-2-oksopyrrolidin-3-ylkarbamat som en inseparerbar blanding av diastereomerene. MS funnet: (M + H)<+>= 430,5.
Eksempler 2t og 2u. Trinn 7: En prøve av (S)-1-((1S,2R,4R/S)-4-(tert-butylamino)-2-propylcykloheksyl)-2-oksopyrrolidin-3-ylkarbamat (110 mg) ble oppløst i MeOH og den resulterende løsningen ble tilsatt 10% Pd/C, Degussa type (22 mg) før den ble evakuert og fylt med hydrogen. Blandingen ble omrørt i 14 timer under 1 atm hydrogen før den ble filtrert gjennom celite med EtOAc-vaskevæsker. Filtratet ble konsentrert i vakuum, hvilket ga en rest (41 mg), som ble oppløst i EtOH. Den resulterende løsningen ble tilsatt trietylamin (0,15 ml) og 4-klor-6-trifluormetylkinazolin før den ble oppvarmet ved 80°C i 14 timer. Reaksjonsblandingen ble avkjølt til romtemperatur og konsentrert i vakuum. Residuet ble oppløst i EtOAc og vasket med mettet NaHC03, vann og mettet NaCI. Den organiske fasen ble tørket (MgS04), filtrert og konsentrert i vakuum. Residuet ble renset ved RP-HPLC, hvilket ga TFA-saltet av (S)-1 -((1 S,2R,4R)-4-(tert-butylamino)-2-propylcykloheksyl)-3-(6-(trifluormetyl)kinazolin-4-ylamino)pyrrolidin-2-on som et hvitt pulver etter lyofilisering. MS funnet: (M + H)<+>= 492,4. Diastereomeren av dette produktet, (S)-1 -((1 S,2R,4S)-4-(tert-butylamino)-2-propylcykloheksyl)-3-(6-(trifluormetyl)kinazolin-4-ylamino)pyrrolidin-2-on, ble også isolert ved RP-HPLC. MS funnet: (M + H)<+>= 492,4.
Eksempler 2al og 2am: Syntese av (S)-1-((1S,2R,4R)-4-(isopropyl(metyl)amino)-2-propylcykloheksyl)-3-(6-(trifluormetyl)kinolin-4-ylamino)pyrrolidin-2-on og (R)-1-((1S,2R,4R)-4-(isopropyl(metyl)amino)-2-propylcykloheksyl)-3-(6-(trifluormetyl)kinolin-4-ylamino)pyrrolidin-2-on
Eksempler 2al og 2am. Trinn 1: Til en løsning av (S)-3-amino-1-((1S,2R,4R)-4-(isopropyl(metyl)amino)-2-propylcykloheksyl)pyrrolidin-2-on (100 mg) i toluen (2 ml) ble satt natrium-tert-butoksyd (42 mg), acetato(2'-di-t-butylfosfino-1,1'-difenyl-2-yl)palladium(ll) (7,8 mg) og 4-klor-6-
(trifluormetyl)kinolin (102,3 mg). Blandingen ble oppvarmet ved 80°C i 14 timer før den ble filtrert og konsentrert i vakuum. Residuet ble renset ved chiral kromatografi (OD kolonne, 80/20/0,1 heksan/iPrOH/Et2NH som mobil fase), hvilket ga (R)-1-((1S,2R,4R)-4-(isopropyl(metyl)amino)-2-propylcykloheksyl)-3-(6-(trifluormetyl)kinolin-4-ylamino)pyrrolidin-2-on [8 mg; MS funnet: (M + H)+ = 491,3] og (S)-1-((1S,2R,4R)-4-(isopropyl(metyl)amino)-2-propylcykloheksyl)-3-(6-(trifluormetyl)kinolin-4-ylamino)pyrrolidin-2-on [18 mg; MS funnet: (M + H)+ = 491,3].
Eksempel 2bb: Syntese av 3-(((S)-1-((1S,2R,4R)-4-(isopropyl(metyl)amino)-2-propylcykloheksyl)-2-oksopyrrolidin-3-yl)karbamoyl)-5-tert-butylbenzosyre
Ved å følge metoden beskrevet i Eksempel 2c, Trinn 4 ble (S)-3-amino-1-[(1S,2/?,4/?)-4-(isopropyl(metyl)amino)-2-propylcykloheksyl]pyrrolidin-2-on (223 mg) koblet med 3-tert-butyl-5-(metoksykarbonyl)benzosyre (165 mg, se Fremstilling H6, Trinn 1) i 8 ml DMF. Etter 14 timer ble 2 ml av denne reaksjonsblandingen fjernet og renset, hvilket ga Eksempel 2ba. Den gjenværende porsjon av reaksjonsblandingen ble suksessivt tilsatt vandig LiOH (48 mg i 2 ml vann) og MeOH (1 ml) før den ble omrørt ved romtemperatur i 14 timer. Blandingen ble fortynnet med 2,0% TFA/vann, filtrert og renset direkte ved RP-HPLC, hvilket ga tittelforbindelsen. MS funnet: (M + H)<+>= 500,4.
Eksempler 3a - 3e
Eksempel 3a: Syntese av (S)-1-((1S,2S,4R)-2-isopropyl-4-(isopropyl(metyl)amino)cykloheksyl)-3-(6-(trifluormetyl)kinazolin-4- ylamino)pyrrolidin-2-on og dens diastereomer, (S)-1-((1S,2S,4S)-2-isopropyl-4-(isopropyl(metyl)amino)cykloheksyl)-3-(6-(trifluormetyl)kinazolin-4-ylamino)pyrrolidin-2-on
Eksempel 3a, Trinn 1: N,0-dimetylhydroksylamin-hydroklorid (5,7 g) ble suspendert i CH2CI2(80 ml) og avkjølt til 0°C før tilsetning av 2,0 M AIMe3(29,1 ml) i heksan. Blandingen ble oppvarmet til romtemperatur over 1 time, deretter avkjølt til 0°C før tilsetning av benzyl-(1 R,2S,5R)-7-okso-6-oksa-bicyklo[3.2.1]oktan-2-ylkarbamat (8,0 g) i CH2CI2(80 ml). Etter 5 timer ved O^C ble reaksjonen stanset med en 10% Rochelle saltløsning og ekstrahert med EtOAc (2 x). De organiske ekstrakter ble samlet, vasket med saltløsning, tørket (MgS04), filtrert og konsentrert. Det resulterende residuet ble oppløst i DMF (100 ml) før tilsetning av imidazol (1,97 g) og TBSCI (4,4 g). Reaksjonsblandingen ble omrørt i 12 timer ved romtemperatur og deretter fordelt mellom EtOAc og en mettet saltløsning. De organiske fasene ble samlet, tørket (MgS04), filtrert og konsentrert i vakuum. Residuet ble renset ved "flash" kromatografi, hvilket ga benzyl-(1S,2R,4R)-4-(tert-butyldimetylsilyloksy)-2-(metoksy(metyl)karbamoyl)cykloheksylkarbamat (11,2
g). MS funnet: (M + H)<+>= 451,3.
Eksempel 3a. Trinn 2: Benzyl-(1 S,2R,4R)-4-(tert-butyldimetylsilyloksy)-2-(metoksy(metyl)karbamoyl)cykloheksylkarbamat (4,0 g) ble oppløst i THF (40 ml) og avkjølt til -22°C før tilsetning av 1,6 M MeLi (14,5 ml) i Et20. Etter 40 min ved - 22°C ble reaksjonen stanset med 0,5 N HCI-løsning og ekstrahert med EtOAc (2 x). De organiske ekstrakter ble samlet, vasket med saltløsning, tørket (MgS04), filtrert og konsentrert. Det resulterende residuet ble renset ved "flash" kromatografi, hvilket ga benzyl-(1 S,2R,4R)-2-acetyl-4-(tert-butyldimetylsilyloksy)cykloheksylkarbamat (5,7 g). MS funnet: (M + H)<+>= 406,3.
Eksempel 3a. Trinn 3: Metyltrifenylfosfoniumbromid (1,2 g) ble suspendert i toluen (16 ml) før tilsetning av 0,5M kalium-bis(trimetylsilyl)amid (5,8 ml) i toluen. Etter 1 time ble denne løsningen avkjølt til 0°C før tilsetning av benzyl-(1S,2R,4R)-2-acetyl-4-(tert-butyldimetylsilyloksy)cykloheksylkarbamat (660 mg) i toluen (5,4 ml). Etter 20 min ved 0°C ble reaksjonen stanset med mettet NH4CI-løsning og ekstrahert med EtOAc (2 x). De organiske ekstrakter ble samlet, vasket med saltløsning, tørket (MgS04), filtrert og konsentrert. Det resulterende residuet ble renset ved "flash" kromatografi, hvilket ga benzyl- (1S,2S,4R)-4-(tert-butyldimetylsilyloksy)-2-(prop-1-en-2-yl)cykloheksylkarbamat (380 mg). MS funnet: (M + H)<+>= 404,2.
Eksempel 3a. Trinn 4: Benzyl-(1 S,2S,4R)-4-(tert-butyldimetylsilyloksy)-2-(prop-1-en-2-yl)cykloheksylkarbamat (4,8 g) i MeOH (40 ml) ble tilsatt 10% Pd/C, Degussa (600 mg). Reaksjonskolben ble evakuert og deretter fylt opp med hydrogen; dette ble gjentatt tre ganger til. Reaksjonsblandingen ble omrørt under 1 atm H2i 4 timer og deretter filtrert og konsentrert for å gi (1 S,2S,4R)-4-(tert-butyldimetylsilyloksy)-2-isopropylcykloheksanamin (2,9 g). MS (ES+) = 272,3 (M + H)<+>.
Eksempel 3a. Trinn 5: (1S.2S.4R)-4-(tert-butvldimetvlsilvloksv)-2-isopropylcykloheksanamin (2,9 g) ble oppløst i DMF (36 ml) og avkjølt til 0°C før tilsetning av N-Cbz-metionin (5,5 g), 4-metylmorfolin (3,8 g) og BOP (8,7 g). Reaksjonsblandingen ble omrørt i 12 timer ved romtemperatur og deretter fordelt mellom EtOAc og 1N HCI-løsning. De organiske fasene ble samlet, vasket med mettet NaHCOsog saltløsning, tørket (MgS04), filtrert og konsentrert i vakuum. Residuet ble renset ved "flash" kromatografi, hvilket ga benzyl-(S)-1-((1S,2S,4R)-4-(tert-butyldimetylsilyloksy)-2-isopropylcykloheksylamino)-4-(metyltio)-1 -oksobutan-2-ylkarbamat (5,3 g). MS funnet: (M + H)<+>= 537,3.
Eksempel 3a. Trinn 6: Benzyl-(S)-1 -((1 S,2S,4R)-4-(tert-butyldimetylsilyloksy)-2-isopropylcykloheksylamino)-4-(metyltio)-1 -oksobutan-2-ylkarbamat (5,3 g) ble oppløst i jodmetan (90 ml) og den resulterende løsningen ble omrørt ved romtemperatur i 72 timer før den ble konsentrert i vakuum. Residuet ble oppløst i metylenklorid og den resulterende løsningen ble konsentrert; dette ble gjentatt, hvilket ga saltet. MS funnet: (M + H)<+>= 586,5. Dette materialet ble oppløst i DMSO (30 ml) og løsningen ble tilsatt CS2CO3(12,7 g). Etter 6 timer ble reaksjonsblandingen fordelt mellom EtOAc og saltløsning. Den organiske fasen ble tørket (MgS04), filtrert og konsentrert i vakuum. Residuet ble renset ved "flash" kromatografi, hvilket ga benzyl-(S)-1-((1S,2S,4R)-4-hydroksy-2-isopropylcykloheksyl)-2-oksopyrrolidin-3-ylkarbamat [580 mg; MS funnet: (M + H)<+>= 375,3] og benzyl-(S)-1-((1S,2S,4R)-4-(tert-butyldimetylsilyloksy)-2-isopropylcykloheksyl)-2-oksopyrrolidin-3-ylkarbamat [1,0 g; MS funnet: (M + H)<+>= 489,4].
Eksempel 3a. Trinn 7: Benzyl-(S)-1 -((1 S,2S,4R)-4-(tert-butyldimetylsilyloksy)-2-isopropylcykloheksyl)-2-oksopyrrolidin-3-ylkarbamat (1,0 g) ble oppløst i en 4/1/1 blanding av AcOH/THF/H20 (60 ml). Etter 72 timer ble ytterligere 4/1/1 blanding av AcOH/THF/H20 (30 ml) tilsatt. Denne løsningen ble omrørt ytterligere 24 timer før den ble konsentrert. Residuet ble oppløst i EtOAc og vasket med mettet NaHC03, tørket (MgS04), filtrert og konsentrert i vakuum, hvilket ga benzyl-(S)-1-((1S,2S,4R)-4-hydroksy-2-isopropylcykloheksyl)-2-oksopyrrolidin-3-ylkarbamat (750 mg). MS funnet: (M + H)<+>= 375,3.
Eksempel 3a. Trinn 8: Benzyl-(S)-1 -((1 S,2S,4R)-4-hydroksy-2-isopropylcykloheksyl)-2-oksopyrrolidin-3-ylkarbamat (333 mg) ble oppløst i CH2CI2(5 ml) og avkjølt til O^C før tilsetning av Dess-Martin reagens (678,9 mg). Denne løsningen ble oppvarmet til romtemperatur over 1 time og deretter avkjølt til O^C før tilsetning av mer Dess-Martin reagens (260 mg). Etter 1 time ved romtemperatur ble reaksjonen stanset med Et20 og 1N NaOH. De organiske ekstrakter ble samlet, vasket med mettet Na2S203- og NaHCXVIøsninger, tørket (MgS04), filtrert og konsentrert, hvilket ga benzyl-(S)-1-((1S,2S)-2-isopropyl-4-oksocykloheksyl)-2-oksopyrrolidin-3-ylkarbamat (350 mg). MS funnet: (M + H)<+>= 373,4.
Eksempel 3a, Trinn 9: Benzyl-(S)-1 -((1 S,2S)-2-isopropyl-4-oksocykloheksyl)-2-oksopyrrolidin-3-ylkarbamat (350 mg) ble oppløst i Ti(Oi-Pr)4(2 ml) før tilsetning av iPr(Me)NH (642 mg). Etter 3 timer ble denne løsningen avkjølt til 0°C før tilsetning av MeOH (3 ml) og NaBH4(66,8 mg). Etter 1 time ved romtemperatur ble reaksjonen stanset med 0,5N NaOH-løsning og blandingen ekstrahert med CH2CI2(2 x). De organiske ekstrakter ble samlet, tørket (MgS04), filtrert og konsentrert til en blanding av diastereomerene benzyl-(S)-1-((1S,2S,4R/S)-2-isopropyl-4-(isopropyl(metyl)amino)-cykloheksyl)-2-oksopyrrolidin-3-ylkarbamat (162,4 mg). MS funnet: (M + H)<+>= 430,5.
Eksempel 3a. Trinn 10: Benzyl-(S)-1-((1S.2S.4R/S)-2-isopropyl-4-(isopropyl(metyl)amino)cykloheksyl)-2-oksopyrrolidin-3-ylkarbamat (160 mg) ble oppløst i MeOH (6 ml) før tilsetning av 20% Pd(OH)2(50 mg) i en Parr flaske. Flasken ble evakuert og deretter fylt opp med hydrogen; dette ble gjentatt tre ganger til. Reaksjonsblandingen ble omrørt under 4,2 kg/cm<2>H2i 5 timer og deretter filtrert og konsentrert. Det resulterende residuet ble oppløst i MeOH (6 ml) før tilsetning av 20% Pd(OH)2(75 mg) i en Parr flaske. Flasken ble evakuert og deretter fylt opp med hydrogen; dette ble gjentatt tre ganger til. Reaksjonsblandingen ble omrørt under 3,5 kg/cm<2>H2i 24 timer og deretter filtrert og konsentrert for å gi (S)-3-amino-1-((1S,2S,4R/S)-2-isopropyl-4-(isopropyl(metyl)amino)cykloheksyl)pyrrolidin-2-on (101 mg). MS (ES+) = 296,3 (M + H)<+.>
Eksempel 3a. Trinn 11: Til en løsning av (S)-3-amino-1-((1S,2S,4R/S)-2-isopropyl-4-(isopropyl(metyl)amino)cykloheksyl)pyrrolidin-2-on (85 mg) i EtOH (2,5 ml) ble satt trietylamin (0,2 ml) og 4-klor-6-(trifluormetyl)kinazolin (100,1 mg). Blandingen ble oppvarmet ved 80°C i 14 timer før den ble filtrert og konsentrert i vakuum. Residuet ble renset ved chiral kromatografi (AD kolonne, EtOH som mobil fase), hvilket ga (S)-1-((1S,2S,4R)-2-isopropyl-4-(isopropyl(metyl)amino)cykloheksyl)-3-(6-(trifluormetyl)kinazolin-4-ylamino)pyrrolidin-2-on [52 mg; MS funnet: (M + H)<+>= 492,4] og (S)-1-
((1Sr2S,4S)-2-isopropyl-4-(isopropyl(metyl)amino)cykloheksyl)-3-(6-(trifluormetyl)kinazolin-4-ylamino)pyrrolidin-2-on [8 mg; MS funnet: (M + H)<+>= 492,4].
Eksempler 4a - 4d
Eksempel 4a: Syntese av N-((S)-1-((1S,2R,4R)-4-(isopropyl(metyl)amino)-2-metylcykloheksyl)-2-oksopyrrolidin-3-yl)-3-(trifluormetyl)benzamid
Eksempel 4a. Trinn 1: (1 R,2S,5R)-tert-butyl-2-((S)-3-(benzyloksykarbonylamino)-2-oksopyrrolidin-1-yl)-7-okso-6-aza-bicyklo[3.2.1]oktan-6-karboksylat (2,0 g) ble oppløst i THF (50 ml) og vann (15 ml) før tilsetning av NaBH4(827 mg). Etter 5 timer ble reaksjonen stanset med mettet NaHCCMøsning og ekstrahert med EtOAc (2 x). De organiske ekstrakter ble samlet, tørket (MgS04), filtrert og konsentrert i vakuum, hvilket ga tert-butyl-(1 R,3R,4S)-4-((S)-3-benzyloksykarbonylamino-2-oksopyrrolidin-1-yl)-3-(hydroksymetyl)cykloheksylkarbamat (2,1 g). MS (ES+) = 462,5 (M +
H)<+>.
Eksempel 4a, Trinn 2: Tert-butyl-(1 R,3R,4S)-4-((S)-3-benzyloksykarbonylamino-2-oksopyrrolidin-1-yl)-3-(hydroksymetyl)-cykloheksylkarbamat (2,0 g) ble oppløst i THF (50 ml) før tilsetning av fenyl-disulfid (190 mg) og n-Bu3P (0,16 ml). Reaksjonsblandingen ble oppvarmet ved tilbakeløp i 12 timer. Etter avkjøling til romtemperatur ble reaksjonsblandingen konsentrert. Det resulterende residuet ble renset ved "flash" kromatografi, hvilket ga tert-butyl-(1R,3R,4S)-4-((S)-3-benzyloksykarbonylamino-2-oksopyrrolidin-1-yl)-3-(fenyltiometyl)-cykloheksylkarbamat (200 mg). MS funnet: (M + H)<+>= 554,4.
Eksempel 4a. Trinn 3: Tert-butyl-(1 R,3R,4S)-4-((S)-3-benzyloksy-karbonylamino-2-oksopyrrolidin-1-yl)-3-(fenyltiometyl)cykloheksylkarbamat (150 mg) ble oppløst i EtOH (2 ml) før tilsetning av Raney 2800 nikkel (100 mg) i vann. Reaksjonsblandingen ble oppvarmet ved tilbakeløp i 12 timer. Etter avkjøling til romtemperatur ble reaksjonsblandingen konsentrert. Det resulterende residuet ble renset ved "flash" kromatografi, hvilket ga tert-butyl-(1R,3R,4S)-4-((S)-3-benzyloksykarbonylamino-2-oksopyrrolidin-1-yl)-3-metylcykloheksylkarbamat (64 mg). MS funnet: (M + H)<+>= 446,4.
Eksempel 4a. Trinn 4: Tert-butyl-(1 R,3R,4S)-4-((S)-3-benzyloksy-karbonylamino-2-oksopyrrolidin-1-yl)-3-metylcykloheksylkarbamat (91 mg) ble oppløst i CH2CI2(3 ml) før tilsetning av trifluoreddiksyre (2 ml). Etter 1 time ble reaksjonsblandingen konsentrert i vakuum. Det resulterende residuet ble oppløst i MeOH (3 ml) og tilsatt aceton (0,15 ml). Blandingen ble omrørt i 5 min før den ble tilsatt NaCNBH3(68 mg). Reaksjonsblandingen ble omrørt i 4 timer og deretter tilsatt formaldehyd (0,5 ml av en 37% vandig løsning). Blandingen ble omrørt i 1,5 timer, behandlet med mettet NaHC03og ekstrahert med EtOAc (2 x). De organiske ekstrakter ble samlet, tørket (MgS04), filtrert og konsentrert. Residuet ble renset ved revers fase HPLC (gradient eluering, vann/acetonitril/TFA), hvilket ga TFA-saltet av (S)-3-benzyloksykarbonylamino-1-((1S,2R,4R)-4-(isopropyl(metyl)amino)-2-metylcykloheksyl)pyrrolidin-2-on (81 mg). MS funnet: (M + H)<+>= 388,3.
Eksempel 4a. Trinn 5: (S)-3-benzyloksykarbonylamino-1-((1 S,2R,4R)-4-(isopropyl(metyl)amino)-2-metylcykloheksyl)pyrrolidin-2-on (47 mg) i MeOH (5 ml) ble tilsatt 20% Pd(OH)2(70 mg). Reaksjonskolben ble evakuert og deretter fylt opp med hydrogen; dette ble gjentatt tre ganger til. Reaksjonsblandingen ble omrørt under 1 atm H2i 4 timer og deretter filtrert og konsentrert for å gi (S)-3-amino-1-((1S,2R,4R)-4-(isopropyl(metyl)amino)-2-metylcykloheksyl)pyrrolidin-2-on (30 mg). MS (ES+) = 268,3 (M + H)<+>.
Eksempel 4a. Trinn 6: (S)-3-amino-1 -((1 S,2R,4R)-4-(isopropyl(metyl)amino)-2-metylcykloheksyl)pyrrolidin-2-on (28 mg) ble oppløst i DMF (1 ml) før tilsetning av 3-(trifluormetyl)benzosyre (37 mg), 4-metylmorfolin (0,07 ml) og BOP (86 mg). Reaksjonsblandingen ble omrørt i 1 time før den direkte ble renset ved revers fase HPLC (gradient-eluering, vann/acetonitril/TFA), hvilket ga TFA-saltet av N-((S)-1-((1S,2R,4R)-4-(isopropyl(metyl)amino)-2-metylcykloheksyl)-2-oksopyrrolidin-3-yl)-3-(trifluormetyl)benzamid (6 mg). MS funnet: (M + H)<+>= 440,4.
Eksempel 4d: Syntese av (S)-1-((1S,2R,4R)-2-etyl-4-(isopropyl(metyl)amino)-cykloheksyl)-3-(6-(trifluormetyl)kinazolin-4-ylamino)pyrrolidin-2-on
Eksempel 4d. Trinn 1: Ved å følge metodene beskrevet i Eksempel 2a, Trinn 1 - 4 og anvende metyl-trifenylfosfoniumjodid i Trinn 1, ble (1/?, 2S, 5/?)-2-benzyloksykarbonylamino-7-okso-6-aza-bicyklo[3.2.1]oktan-6-karboksylsyre-tert-butylester omdannet til {(3S)-1-[(1S, 2R, 4/?)-4-tert-butoksykarbonyl-amino-2-etyl-cykloheksyl]-2-okso-pyrrolidin-3-yl}-karbaminsyre-benzylester. En porsjon av dette materialet (995 mg, 2,2 mmol) ble oppløst i 20 ml 4:1 CH2CI2/TFA. Den resulterende løsningen ble omrørt ved romtemperatur i 3 timer og konsentrert i vakuum. Residuet ble oppløst i metylenklorid og konsentrert i vakuum; denne prosedyren ble gjentatt to ganger til, hvilket ga benzyl-(S)-1-((1S,2R,4R)-4-amino-2-etylcykloheksyl)-2-oksopyrrolidin-3-ylkarbamat. MS funnet: (M + H)<+>= 360,2.
Eksempel 4d. Trinn 2: Benzyl-(S)-1 -((1 S,2R,4R)-4-amino-2-etylcykloheksyl)-2-oksopyrrolidin-3-ylkarbamatet (antatt 2,2 mmol) ble oppløst i 1,2-dikloretan (27 ml) og den resulterende løsningen ble suksessivt tilsatt eddiksyre (0,27 ml), aceton og NaHB(OAc)3(1,15 g) før den ble oppvarmet til 50<0>C i 18 timer. Reaksjonsblandingen ble konsentrert i vakuum og residuet ble oppløst i acetonitril. Den resulterende løsningen ble suksessivt tilsatt formaldehyd og natriumcyanoborhydrid. Reaksjonsblandingen ble konsentrert i vakuum og renset ved "flash" kromatografi, hvilket ga benzyl-(S)-1-((1S,2R,4R)-2-etyl-4-(isopropyl(metyl)amino)cykloheksyl)-2-oksopyrrolidin-3-ylkarbamat (607 mg). MS funnet: (M + H)<+>= 416,3.
Eksempel 4d. Trinn 3: En prøve av (S)-1-((1S,2R,4R)-2-etyl-4-(isopropyl(metyl)amino)cykloheksyl)-2-oksopyrrolidin-3-ylkarbamat (100 mg) ble oppløst i 2,5 ml 33% HBr/AcOH og omrørt i 25 min før den ble behandlet med Et20. Et fast materiale fremkom. Eteren ble dekantert og det gjenværende faste stoff ble tørket under vakuum for å gi (S)-3-amino-1-((1S,2R,4R)-2-etyl-4-(isopropyl(metyl)amino)cykloheksyl)pyrrolidin-2-on, bis-HBr-salt, som et hvitt, fast stoff (43 mg). MS funnet: (M + H)<+>= 283,2.
Eksempel 4d, Trinn 4: En prøve av bis-HBr-saltet av (S)-3-amino-1-((1S,2R,4R)-2-etyl-4-(isopropyl(metyl)amino)cykloheksyl)pyrrolidin-2-on (147 mg) ble oppløst i EtOH (5 ml) og den resulterende løsningen ble tilsatt trietylamin (0,55 ml) og 4-klor-6-trifluormetylkinazolin (183 mg) før den ble oppvarmet ved 80°C i 14 timer. Reaksjonsblandingen ble avkjølt og konsentrert under redusert trykk og residuet ble fordelt mellom dietyleter og vann. Den organiske fasen ble ekstrahert to ganger med vann. De samlede vandige ekstrakter ble lyofilisert og det resulterende pulver ble renset ved RP-HPLC, hvilket ga (S)-1-((1S,2R,4R)-2-etyl-4-(isopropyl(metyl)amino)-cykloheksyl)-3-(6-(trifluormetyl)kinazolin-4-ylamino)pyrrolidin-2-on. MS funnet: (M + H)<+>= 478,4.
Eksempler 5a - 51
Eksempel 5a: Syntese av N-((S)-1-((1S,2R,4R)-4-(isopropyl(metyl)amino)-2-(metoksymetyl)cykloheksyl)-2-oksopyrrolidin-3-yl)-3-(trifluormetyl)benzamid
Eksempel 5a, Trinn 1: En løsning av (1R,2S,5R)-2-benzyloksykarbonyl-amino-7-okso-6-aza-bicyklo[3.2.1]oktan-6-karboksylsyre-tert-butylester (2,0 g) i tetrahydrofuran (40 ml) ble behandlet med vann (8 ml) og deretter med natrium-borhydrid (1,01 g). Blandingen ble omrørt ved romtemperatur i 5 timer, ble deretter behandlet med vandig natriumhydroksyd (1,0 M, 100 ml) og omrørt i 60 min. Blandingen ble ekstrahert fire ganger med etylacetat. De samlede ekstrakter ble vasket med mettet vandig natriumklorid, tørket over natriumsulfat og konsentrert under vakuum. Residuet ble omkrystallisert fra etylacetat-heksan for å gi (1 R,3R,4S)-(4-benzyloksy-karbonylamino-3-hydroksymetyl-cykloheksyl)-karbaminsyre-tert-butylester som et hvitt, fast stoff (1,44 g). MS funnet: (M + H)<+>= 379,28.
Eksempel 5a. Trinn 2: (1 R,3R,4S)-(4-benzyloksykarbonylamino-3-hydroksymetyl-cykloheksyl)karbaminsyre-tert-butylester (1,8 g) ble oppløst i N,N-dimetylformamid (15 ml). Jodmetan (50 ml) ble tilsatt, fulgt av sølvoksyd (5,52 g) og blandingen ble omrørt ved romtemperatur natten over. Blandingen ble filtrert gjennom Celite og de faste stoffene ble vasket med etylacetat. Filtratet ble vasket sekvensielt med vann og saltløsning, tørket over natriumsulfat og konsentrert. Residuet ble renset ved "flash" kromatografi for å gi (1R,3R,4S)-(4-benzyloksykarbonylamino-3-metoksymetylcykloheksyl)karbaminsyre-tert-butylester som en fargeløs gummi (1,78 g). MS funnet: (M + H)<+>= 393.
Eksempel 5a. Trinn 3: En løsning av (1 R,3R,4S)-(4-benzyloksykarbonylamino-3-metoksymetylcykloheksyl)karbaminsyre-tert-butylester (1,24 g) ble oppløst i MeOH (20 ml) og den resulterende løsningen ble tilsatt 20 vekt% Pd(OH)2/C (300 mg) før den ble evakuert og spylt med hydrogen. Reaksjonsblandingen ble omrørt under 1 atm H2i 3 timer og deretter filtrert gjennom celite med EtOAc-vaskevæsker. Filtratet ble konsentrert i vakuum for å gi (1 R,3R,4S)-(4-amino-3-metoksymetyl-cykloheksyl)-karbaminsyre-tert-butylester (815 mg). MS funnet: (M + H)<+>= 259,2.
Eksempel 5a, Trinn 4: En løsning av (1 R,3R,4S)-(4-amino-3-metoksymetyl-cykloheksyl)-karbaminsyre-tert-butylester (1,6 g, 6,2 mmol) i MeCN (30 ml) ble sekvensielt tilsatt N,N-diisopropyletylamin (2,2 ml, 12,4 mmol), N-Cbz Metionin (1,75 g, 6,2 mmol) og HATU (2,59 g, 6,82 mmol). Reaksjonsblandingen ble omrørt natten over og konsentrert i vakuum. Residuet ble oppløst i EtOAc og vasket med 1N HCI, mettet NaHC03, vann og saltløsning. Den organiske fasen ble tørket (Na2S04), filtrert og konsentrert i vakuum. Residuet ble kromatografert for å gi (1 R,3R,4S)-[4-(2S)-(2- benzyloksy-karbonylamino-4-metylsulfanylbutyrylamino)-3-metoksy-metylcykloheksyl]karbaminsyre-tert-butylester (1,74 g) som et hvitt skum. MS funnet: (M + H)<+>= 524,6.
Eksempel 5a. Trinn 5: En prøve av (1R,3R,4S)-[4-(2S)-(2-benzyloksykarbonylamino-4-metylsulfanylbutyrylamino)-3-metoksymetylcykloheksyl]karbaminsyre-tert-butylester (0,95 g, 1,82 mmol) ble oppløst i jodmetan (50 ml) med kraftig mekanisk påvirkning og den resulterende løsningen ble omrørt ved romtemperatur i ca. 20 timer før den ble konsentrert i vakuum. Residuet ble oppløst i metylenklorid og den resulterende løsningen ble konsentrert; denne prosedyren ble gjentatt to ganger til før materialet ble plassert under høyvakuum i 12 timer. Det faste produktet ble oppløst i THF (50 ml) og den resulterende løsningen ble avkjølt til 0°C og tilsatt natriumhydrid (218 mg, 9,1 mmol) i én porsjon. Reaksjonen fikk løpe i 2,5 timer før blandingen ble behandlet med mettet NH4CI og ekstrahert med EtOAc. De organiske ekstrakter ble samlet, tørket, filtrert og konsentrert i vakuum. Residuet ble renset ved kromatografi, hvilket ga (3S)-[1-(1S,2R,4R)-(4-tert-butoksy-karbonylamino-2-metoksymetylcykloheksyl)-2-oksopyrrolidin-3-yl]karbaminsyre-benzylester (570 mg). MS funnet: (M + H)<+>= 476,3.
Eksempel 5a. Trinn 6: En prøve av (3S)-[1-(1S,2R,4R)-(4-tert-butoksy-karbonylamino-2-metoksymetylcykloheksyl)-2-oksopyrrolidin-3- yljkarbaminsyre-benzylester (0,57 g) ble underkastet metodene beskrevet i Eksempel 2c, Trinn 1 og 2, hvilket ga et råprodukt. Dette ble renset ved RP-HPLC, hvilket ga TFA-saltet av benzyl-(S)-1-((1S,2R,4R)-4-(isopropyl(metyl)amino)-2-(metoksymetyl)cykloheksyl)-2-oksopyrrolidin-3-ylkarbamat som et hvitt pulver (415 mg). MS funnet: (M + H)<+>= 432,4.
Eksempel 5a. Trinn 7: En prøve av TFA-saltet av benzyl-(S)-1-((1S,2R,4R)-4-(isopropyl(metyl)amino)-2-(metoksymetyl)cykloheksyl)-2-oksopyrrolidin-3-ylkarbamat (75 mg) ble omdannet til (S)-3-amino-1-((1S,2R,4R)-4-(isopropyl(metyl)amino)-2-(metoksymetyl)cykloheksyl)pyrrolidin-2-on (57 mg) ved anvendelse av metoden beskrevet i Eksempel 5a, Trinn 3 (ved anvendelse av EtOH istedenfor MeOH som løsningsmiddel). MS funnet: (M + H)<+>= 298,3.
Eksempel 5a, Trinn 8: Ved å følge metoden beskrevet i 2c, Trinn 4, ble en prøve av (S)-3-amino-1-((1S,2R,4R)-4-(isopropyl(metyl)amino)-2-(metoksymetyl)cykloheksyl)pyrrolidin-2-on omdannet til tittelforbindelsen. Rensning ved RP-HPLC ga TFA-saltet av N-((S)-1-((1S,2R,4R)-4-(isopropyl(metyl)amino)-2-(metoksymetyl)cykloheksyl)-2-oksopyrrolidin-3-yl)-3-(trifluormetyl)benzamid som et hvitt pulver. MS funnet: (M + H)<+>= 470,3.
Eksempel 5j: Syntese av N-((S)-1-((1S,2S,4R)-4-(isopropyl(metyl)amino)-2-(2-metoksyetyl)cykloheksyl)-2-oksopyrrolidin-3-yl)-3-(trifluormetyl)benzamid
Eksempel 5i, Trinn 1: Ved å følge protokollen beskrevet ovenfor i Eksempel 2a, Trinn 1, ble 1,3 g tert-butyl-(1/?, 2S, 5R, 7/?/S)-2-(benzyloksykarbonylamino)-7-hydroksy-6-aza-bicyklo[3.2.1]oktan-6-karboksylat kombinert med en løsning av ylid dannet fra 1,7 g metyl-trifenylfosfoniumjodid og 8,5 ml 0,5 M KHMDS, hvilket ga [(1S, 2R, 4R)- [4-tert-butoksykarbonylamino-2-(vinyl)-cykloheksyl]-karbaminsyre-benzylester etter silikagel-kromatografi (0,50 g). MS funnet: (M + H)<+>= 375,2.
Eksempel 5i, Trinn 2: Forbindelsen [(1S, 2R, 4f?)-[4-tert-butoksykarbonylamino-2-(vinyl)-cykloheksyl]-karbaminsyre-benzylester (0,82 g, 2,2 mmol) ble oppløst i THF (15 ml). Den resulterende løsningen ble avkjølt til 0°C og tilsatt 9-BBN (11 ml av en 0,5 M løsning i THF). Blandingen ble omrørt i 20 timer ved romtemperatur og deretter behandlet sekvensielt med vandig natriumacetat (0,6 g i 1,5 ml vann) og 30% hydrogenperoksyd (1,5 ml). Dette ble omrørt ved romtemperatur i 14 timer og fordelt mellom EtOAc og mettet NaHC03. Den vandige fasen ble ekstrahert med EtOAc og de samlede organiske ekstrakter ble vasket med saltløsning, tørket (Na2S04), filtrert og konsentrert i vakuum. Residuet ble renset ved silikagel-kromatografi, hvilket ga [(1S,2/?,4/?)-[4-tert-butoksykarbonylamino-2-(hydroksyetyl)-cykloheksyl]-karbaminsyre-benzylester (0,42 g) som et hvitt skum. MS funnet: (M + H)<+>= 393.
Eksempel 5i. Trinn 3: En løsning av [(1S,2/?,4/?)-[4-tert-butoksy-karbonylamino-2-(hydroksyetyl)-cykloheksyl]-karbaminsyre-benzylester (0,42 g, 1,07 mmol) i DMF (4 ml) ble tilsatt jodmetan (20 ml) og Ag20 (1,24 g, 5,35 mmol) og omrørt ved romtemperatur i 14 timer. Blandingen ble filtrert og filtratet ble fortynnet med mettet NaHC03og minimum EtOAc. Blandingen ble separert (organisk på bunnen). Det vandige laget ble ekstrahert med EtOAc og de samlede organiske ekstrakter ble vasket med saltløsning, tørket (Na2S04), filtrert og konsentrert i vakuum. Residuet ble renset ved silikagel-kromatografi, hvilket ga [(1S, 2R, 4/?)-[4-tert-butoksykarbonylamino-2-(metoksyetyl)-cykloheksyl]-karbaminsyre-benzylester (0,255 g). MS funnet: (M + H)<+>= 429,2.
Eksempel 5i, Trinn 4: En prøve av [(1S, 2R, 4/?)-[4-tert-butoksykarbonyl-amino-2-(metoksyetyl)-cykloheksyl]-karbaminsyre-benzylester fikk gjennomgå prosessene detaljert angitt i 5, Trinn 3-8, hvilket ga tittelforbindelsen, N-((S)-1-((1S,2S,4R)-4-(isopropyl(metyl)amino)-2-(2-metoksyetyl)cykloheksyl)-2- oksopyrrolidin-3-yl)-3-(trifluormetyl)benzamid, som et hvitt pulver etter RP-HPLC rensning og lyofilisering. MS funnet: (M + H)<+>= 484,4.
Eksempler 6a - 6k
Eksempel 6a: Syntese av 1-((1S,2R,4R)-2-(1-hydroksypropyl)-4-(isopropyl(metyl)amino)cykloheksyl)-3-(6-(trifluormetyl)kinazolin-4-ylamino)pyrrolidin-2-on
Eksempel 6a. Trinn 1: Til en omrørt løsning av (1R,2S,5R)-tert-butyl-2-((S)-3-(benzyloksykarbonylamino)-2-oksopyrrolidin-1-yl)-7-okso-6-aza-bicyklo[3.2.1]oktan-6-karboksylat (520 mg, 1,14 mmol) i THF (16 ml) ved 0°C ble satt 2,0 M etylmagnesiumklorid i THF (1,7 ml, 3,4 mmol). Blandingen ble omrørt i 20 min ved 0°C og i 30 min ved romtemperatur. Etter avkjøling til 0°C ble reaksjonen stanset med mettet NH4CI og blandingen ekstrahert med EtOAc (2 x). De organiske ekstrakter ble samlet, vasket med saltløsning, tørket (Na2S04), filtrert og konsentrert i vakuum, hvilket ga hemi-aminal som en olje. MS funnet: (M+H)<+>= 488,1.
Eksempel 6a, Trinn 2: Til en løsning av hemi-aminalet (1,27 mmol) i Trinn 1 i THF (12 ml) og vann (6 ml) ble satt NaBH4(85 mg, 2,25 mmol) ved 0°C og blandingen ble omrørt i 20 min ved O^C og i 40 min ved romtemperatur. Reaksjonen ble stanset med mettet NH4CI og blandingen ble ekstrahert med EtOAc (2 x). De organiske ekstrakter ble samlet, vasket med saltløsning, tørket (Na2S04), filtrert og konsentrert i vakuum. Rensning av residuet ved "flash" kromatografi på silikagel med eluering med 6:4, 7:3, deretter 8:2 EtOAc og heksan ga to diasteromerer (~1:5 rask og langsom isomer) av den ønskede ((1 R,3R,4S)-4-((S)-3-(benzyloksykarbonyl)amino-2-oksopyrrolidin-1 - yl)-3-(1 -hydroksypropyl)cykloheksyl)karbaminsyre-tert-butylester som oljer. MS funnet: (M+HV<+>= 490,3.
Eksempel 6a. Trinn 3: Til en løsning av den langsomme isomer av hydroksypropylforbindelsen (419 mg, 0,86 mmol) i Trinn 2 i CH2Cl2(4 ml) ble satt trifluoreddiksyre (0,66 ml, 8,6 mmol) og blandingen ble omrørt i 75 min. Syre og løsningsmiddel ble avdampet og residuet ble oppløst i CH2CI2. Løsningen ble vasket med mettet Na2C03, tørket (Na2S04), filtrert og konsentrert i vakuum, hvilket ga det ønskede benzyl-(S)-1-((1S,2R,4R)-4-amino-2-(1-hydroksypropyl)cykloheksyl)-2-oksopyrrolidin-3-ylkarbamat som en olje. MS funnet: (M+H)<+>= 390,2.
Eksempel 6a. Trinn 4: Til en løsning av benzyl-(S)-1-((1S,2R,4R)-4-amino-2-(1-hydroksypropyl)cykloheksyl)-2-oksopyrrolidin-3-ylkarbamat (0,86 mmol) i MeOH (5 ml) ble satt aceton (0,6 ml) og blandingen ble omrørt i 10 minutter. Deretter ble natrium-triacetoksyborhydrid (544 mg, 2,58 mmol) tilsatt og blandingen ble omrørt i 4 timer ved romtemperatur. Ved slutten av omrøringen ble 37% vandig HCHO (0,4 ml) tilsatt og blandingen ble omrørt i 30 min ved romtemperatur. Til slutt ble ytterligere natrium-triacetoksyborhydrid (181 mg, 0,86 mmol) tilsatt og blandingen ble omrørt i 18 timer ved romtemperatur. Reaksjonen ble stanset ved tilsetning av mettet Na2C03og produktet ble ekstrahert med EtOAc (3x). De samlede ekstrakter ble vasket med saltløsning, tørket (Na2S04), filtrert og konsentrert i vakuum. Rensning av residuet ved "flash" kromatografi på silikagel med eluering med 1:9:90 cNH40H-MeOH-CH2Cl2ga det ønskede benzyl-(S)-1-((1S,2R,4R)-2-(1-hydroksypropyl)-4-(isopropyl(metyl)amino)cykloheksyl)-2-oksopyrrolidin-3-ylkarbamat (267 mg) som en olje.
Eksempel 6a. Trinn 5: En løsning av benzyl-(S)-1-((1S,2R,4R)-2-(1-hydroksypropyl)-4-(isopropyl(metyl)amino)cykloheksyl)-2-oksopyrrolidin-3-ylkarbamat (267 mg) i MeOH (15 ml) ble tilsatt 10% Pd/C, Degussa (-100 mg). Reaksjonskolben ble evakuert og deretter fylt opp med hydrogen; dette ble gjentatt to ganger til. Reaksjonsblandingen ble omrørt under 4,2 kg/cm<2>H2i 4 timer og deretter filtrert og konsentrert i vakuum, hvilket ga det ønskede (S)-3-amino-1-((1S,2R,4R)-2-(1-hydroksypropyl)-4-(isopropyl(metyl)amino)cykloheksyl)pyrrolidin-2-on (190 mg) som en olje.
Eksempel 6a. Trinn 6: En løsning av (S)-3-amino-1-((1S,2R,4R)-2-(1-hydroksypropyl)-4-(isopropyl(metyl)amino)cykloheksyl)pyrrolidin-2-on (47,6 mg, 0,153 mmol) i EtOH (3 ml) ble tilsatt 4-klor-6-(trifluormetyl)kinazolin (46,3 mg, 0,2 mmol) og trietylamin (0,064 ml, 0,46 mmol). Blandingen ble oppvarmet i 30 min ved lOO^C i mikrobølgeovn. Løsningsmiddel ble avdampet og residuet ble renset ved "flash" kromatografi på silikagel med eluering med 0,8:7,2:92 cNH40H-MeOH-CH2Cl2, hvilket ga tittelforbindelsen 1-((1S,2R,4R)-2-(1-hydroksypropyl)-4-(isopropyl(metyl)amino)cykloheksyl)-3-(6-(trifluormetyl)kinazolin-4-ylamino)pyrrolidin-2-on (47,3 mg) som et fast stoff. MS funnet: (M+H)<+>= 508,3
Eksempel 6b: Syntese av 1-((1S,2R,4R)-2-(1-hydroksypropyl)-4-(isopropyl(metyl)amino)cykloheksyl)-3-(6-(trifluormetyl)kinazolin-4-ylamino)pyrrolidin-2-on
Den langsomme isomer av hydroksypropylforbindelsen i eksempel 6a, Trinn 2 ble omdannet til tittelforbindelsen 1-((1S,2R,4R)-2-(1-hydroksypropyl)-4-(isopropyl(metyl)amino)cykloheksyl)-3-(6-(trifluormetyl)kinazolin-4-ylamino)pyrrolidin-2-on, som er isomer til eksemplet 6a ved hydroksylgruppen i propylkjeden, ved metodene beskrevet i eksempel 6a, Trinn 3-6. MS funnet: (M+H)<+>= 508,3
Eksempel 6c: Syntese av N-(1-((1S,2R,4R)-2-(1-hydroksypropyl)-4-(isopropyl(metyl)amino)cykloheksyl)-2-oksopyrrolidin-3-yl)-3-(trifluormetyl)benzamid
Til en løsning av (S)-3-amino-1-((1S,2R,4R)-2-(1-hydroksypropyl)-4-(isopropyl(metyl)amino)cykloheksyl)pyrrolidin-2-on (47,6 mg, 0,153 mmol) i CH3CN (2 ml) ble satt trietylamin (0,08 ml, 0,46 mmol), 3-trifluormetylbenzosyre (38 mg, 0,2 mmol) og TBTU (73,7 mg, 0,23 mmol) og blandingen ble omrørt i 8 timer ved romtemperatur. Reaksjonsblandingen ble fortynnet med EtOAc og vasket med 1N NaOH og vann. Det organiske laget ble tørket (Na2S04), filtrert og konsentrert i vakuum. Residuet ble renset ved "flash" kromatografi på silikagel med eluering med 0,8:7,2:92CNH4OH-MeOH-CH2Cl2, hvilket ga tittelforbindelsen N-(1-((1S,2R,4R)-2-((R)-1-hydroksypropyl)-4-(isopropyl(metyl)amino)cykloheksyl)-2-oksopyrrolidin-3-yl)-3-(trifluormetyl)benzamid (38,5 mg) som et fast stoff. MS funnet: (M+H)<+>= 484,3.
Eksempel 6f: Syntese av 1-((1S,2R,4R)-2-(1-hydroksyetyl)-4-(isopropyl(metyl)amino)cykloheksyl)-3-(6-(trifluormetyl)kinazolin-4-ylamino)pyrrolidin-2-on
Tittelforbindelsen 1 -((1 S,2R,4R)-2-(1 -hydroksyetyl)-4-(isopropyl(metyl)amino)cykloheksyl)-3-(6-(trifluormetyl)kinazolin-4-ylamino)pyrrolidin-2-on ble fremstilt ved metodene beskrevet i eksempel 6a, Trinn 1-6 ved å starte fra (1 R,2S,5R)-tert-butyl-2-((S)-3-(benzyloksykarbonylamino)-2-oksopyrrolidin-1-yl)-7-okso-6-aza-bicyklo[3.2.1]oktan-6-karboksylat ved anvendelse av metylmagnesiumbromid istedenfor etylmagnesiumklorid i Trinn 1. MS funnet: (M+H)<+>= 494,3.
Eksempel 6 g: Syntese av N-(1-((1S,2R,4R)-2-(1-hydroksyetyl)-4-(isopropyl(metyl)amino)cykloheksyl)-2-oksopyrrolidin-3-yl)-3-(trifluormetyl)benzamid
Tittelforbindelsen N-(1 -((1 S,2R,4R)-2-(1 -hydroksyetyl)-4-(isopropyl(metyl)amino)cykloheksyl)-2-oksopyrrolidin-3-yl)-3-(trifluormetyl)benzamid ble fremstilt ved metodene beskrevet i eksempel 6c ved anvendelse av (S)-3-amino-1-((1S,2R,4R)-2-(1-hydroksyetyl)-4-(isopropyl(metyl)amino)cykloheksyl)pyrrolidin-2-on, som ble fremstilt i Trinn 5 av eksempel 6f.
MS funnet: (M+H)<+>= 470,3.
Eksempel 6 h: Syntese av 1-((1S,2R,4R)-2-(hydroksymetyl)-4-(isopropyl(metyl)amino)cykloheksyl)-3-(6-(trifluormetyl)kinazolin-4-ylamino)pyrrolidin-2-on
Til en løsning av ((1R,2S,5R)-5-(isopropyl(metyl)amino)-2-(2-okso-3-(6-(trifluormetyl)kinazolin-4-ylamino)pyrrolidin-1-yl)cykloheksyl)metyl-isobutyrat (Eksempel 7a, 4 mg) i MeOH (1 ml) ble satt 1N NaOH (0,1 ml) og blandingen ble omrørt i 9 timer ved romtemperatur. Etter nøytralisering med mettet NH4CI, ble den ekstrahert med EtOAc (2x). De samlede ekstrakter ble vasket med saltløsning, tørket (Na2S04), filtrert og konsentrert i vakuum. Residuet ble renset ved "flash" kromatografi på silikagel med eluering med 0,8:7,2:92 cNH40H-MeOH-CH2Cl2, hvilket ga tittelforbindelsen 1-((1S,2R,4R)-2-
(hydroksymetyl)-4-(isopropyl(metyl)amino)cykloheksyl)-3-(6-(trifluormetyl)kinazolin-4-ylamino)pyrrolidin-2-on. MS funnet: (M+H)<+>= 480,2.
Eksempel 6i: Syntese av 1-((1S,2R,4R)-2-(2-hydroksypropan-2-yl)-4-(isopropyl(metyl)amino)cykloheksyl)-3-(6-(trifluormetyl)kinazolin-4-ylamino)pyrrolidin-2-on
Eksempel 6i. Trinn 1: Til 3M metylmagnesiumbromid i eter (1,1 ml, 3,3 mmol) ved O^C ble dråpevis satt en løsning av (1R,2S,5R)-metyl-2-((S)-3-(benzyloksykarbonyl)amino-2-oksopyrrolidin-1-yl)-5-(isopropyl(metyl)amino)cykloheksankarboksylat (295 mg, 0,66 mmol) i THF og blandingen ble omrørt i 2,5 timer ved 0~lO^C og i 40 min ved 10~25<>C. Reaksjonen ble stanset ved tilsetning av mettet NH4CI og produktet ble ekstrahert med EtOAc (3x). De samlede ekstrakter ble vasket med saltløsning, tørket (Na2S04), filtrert og konsentrert i vakuum. Residuet ble renset ved "flash" kromatografi på silikagel med eluering med 0,8:7,2:92 cNH40H-MeOH-CH2Cl2, hvilket ga det ønskede produkt benzyl-(S)-1-((1S,2R,4R)-2-(2-hydroksypropan-2-yl)-4-(isopropyl(metyl)amino)cykloheksyl)-2- oksopyrrolidin-3-ylkarbamat (164 mg) og gjenvunnet utgangsmateriale (119 mg).
Eksempel 6i. Trinn 2: En løsning av benzyl-(S)-1 -((1 S,2R,4R)-2-(2-hydroksypropan-2-yl)-4-(isopropyl(metyl)amino)cykloheksyl)-2-oksopyrrolidin-3- ylkarbamat (224 mg) i MeOH (15 ml) ble tilsatt 10% Pd/C, Degussa (-100 mg). Reaksjonskolben ble evakuert og deretter fylt opp med hydrogen; dette ble gjentatt to ganger til. Reaksjonsblandingen ble omrørt under 4,2 kg/cm<2>H2i 7 timer og deretter filtrert og konsentrert i vakuum, hvilket ga det ønskede (S)-3-amino-1 -((1 S,2R,4R)-2-(2-hydroksypropan-2-yl)-4-(isopropyl(metyl)amino)cykloheksyl)pyrrolidin-2-on som en olje. MS funnet: (M+H)<+>= 312,2.
Eksempel 6i, Trinn 3: Ved metodene beskrevet i Eksempel 6a, Trinn 6 ble (S)-3-amino-1 -((1 S,2R,4R)-2-(2-hydroksypropan-2-yl)-4-(isopropyl(metyl)amino)cykloheksyl)pyrrolidin-2-on omdannet til det ønskede 1-((1S,2R,4R)-2-(2-hydroksypropan-2-yl)-4-(isopropyl(metyl)amino)-cykloheksyl)-3-(6-(trifluormetyl)kinazolin-4-ylamino)pyrrolidin-2-on. MS funnet: (M+H)<+>= 508,3.
Eksempel 6j: Syntese av N-((S)-1-((1S,2R,4R)-2-(2-hydroksypropan-2-yl)-4-(isopropyl(metyl)amino)cykloheksyl)-2-oksopyrrolidin-3-yl)-3-(trifluormetyl)benzamid
Ved metodene beskrevet i Eksempel 6c ble (S)-3-amino-1-((1S,2R,4R)-2-(2-hydroksypropan-2-yl)-4-(isopropyl(metyl)amino)cykloheksyl)pyrrolidin-2-on omdannet til det ønskede N-((S)-1-((1S,2R,4R)-2-(2-hydroksypropan-2-yl)-4-(isopropyl(metyl)amino)cykloheksyl)-2-oksopyrrolidin-3-yl)-3-(trifluormetyl)benzamid. MS funnet: (M+H)<+>= 484,4.
Eksempler 7a - 7f
Eksempel 7a: Syntese av ((1R,2S,5R)-5-(isopropyl(metyl)amino)-2-(2-okso-3-(6-(trifluormetyl)kinazolin-4-ylamino)pyrrolidin-1-yl)cykloheksyl)metyl-isobutyrat
Eksempel 7a, Trinn 1: Til en løsning av (1R,2S,5R)-tert-butyl-2-((S)-3-(benzyloksykarbonylamino)-2-oksopyrrolidin-1-yl)-7-okso-6-aza-bicyklo[3.2.1]oktan-6-karboksylat (4,55 g, 9,94 mmol) i THF (50 ml) og vann (50 ml) ble satt NaBH4og blandingen ble omrørt i 5 timer ved romtemperatur. Etter stansing av reaksjonen med mettet NaHC03ble produktet ekstrahert med EtOAc (2x). De samlede ekstrakter ble vasket med saltløsning, tørket (MgS04), filtrert og konsentrert i vakuum, hvilket ga et oljeaktig residuum, som krystalliserte ved utgnidning med 4:6 EtOAc og heksan for å gi ren ((1R,3R,4S)-4-((S)-3-(benzyloksykarbonyl)amino-2-oksopyrrolidin-1-yl)-3-(hydroksymetyl)cykloheksyl)karbaminsyre-tert-butylester (2,61 g).
Eksempel 7a, Trinn 2: Til en løsning av hydroksymetylforbindelsen (2,61 g, 5,66 mmol) i Trinn 1 i CH2CI2(22 ml) ble satt trifluoreddiksyre (4,36 ml, 56,6 mmol) og blandingen ble omrørt i 2 timer ved romtemperatur. Syre og løsningsmiddel ble avdampet og residuet ble oppløst i EtOAc. Løsningen ble nøytralisert med mettet NaHC03og EtOAc og vann ble avdampet i vakuum. Det faste residuet ble behandlet i MeOH og filtrert. Filtratet ble inndampet, hvilket ga det ønskede benzyl-(S)-1-((1S,2R,4R)-4-amino-2-(hydroksymetyl)cykloheksyl)-2-oksopyrrolidin-3-ylkarbamat som et voksaktig fast stoff.
Eksempel 7a. Trinn 3: Til en løsning av råproduktet i Trinn 2 i dikloretan (52 ml) ble satt aceton (4,5 ml) og blandingen ble omrørt i 1 time ved romtemperatur. Deretter ble natrium-triacetoksyborhydrid (3,9 g, 18,4 mmol) tilsatt og blandingen ble omrørt i 16 timer ved romtemperatur. En stor mengde fast stoff ble felt ut av løsningen. Ved slutten av omrøringen ble 37% vandig HCHO (2,9 ml) tilsatt og MeOH (20 ml) ble også tilsatt for å gjøre løsningen homogen. Etter omrøring i 1 time ble ytterligere natrium-triacetoksyborhydrid (2 g, 9,4 mmol) tilsatt og blandingen ble omrørt i 2 timer ved romtemperatur. Deretter ble en annen 2 g porsjon av triacetoksyborhydrid (9,4 mmol) tilsatt og omrøring fortsatt i 20 timer. Reaksjonen ble stanset ved tilsetning av mettet Na2C03og produktet ble ekstrahert med EtOAc (3x). De samlede ekstrakter ble vasket med saltløsning, tørket (Na2S04), filtrert og konsentrert i vakuum. Residuet ble renset ved kolonnekromatografi på silikagel med eluering med 1:9:90 cNH40H-MeOH-CH2Cl2, hvilket ga 0,8 g benzyl-(S)-1-((1S,2R,4R)-2-(hydroksymetyl)-4-(isopropyl(metyl)amino)cykloheksyl)-2-oksopyrrolidin-3-ylkarbamat, MS funnet: (M + H)<+>= 418,2, og 1,1 g benzyl-(S)-1-((1S,2R,4R)- 4-(dimetylamino)-2-(hydroksymetyl)cykloheksyl)-2-oksopyrrolidin-3-ylkarbamat MS funnet: (M+H)<+>= 390,2, som krystaller.
Eksempel 7a, Trinn 4: Til en omrørt løsning av (S)-1-((1S,2R,4R)-2-(hydroksymetyl)-4-(isopropyl(metyl)amino)cykloheksyl)-2-oksopyrrolidin-3-ylkarbamat (300 mg, 0,77 mmol) i pyridin (3 ml) ble satt isobutyrylklorid (0,16 ml, 1,54 mmol) og 4-(dimetylamino)pyridin (20 mg) og blandingen ble omrørt i 4 timer ved romtemperatur. Reaksjonen ble stanset ved tilsetning av MeOH (mange dråper) og omrøring i 30 min. Deretter ble flyktige materialer avdampet og residuet ble fordelt mellom EtOAc og vann. Det vandige laget ble ekstrahert med EtOAc (6x) og de samlede ekstrakter ble vasket med saltløsning, tørket (Na2S04), filtrert og konsentrert i vakuum, hvilket ga ((1R,2S,5R)-2-((S)-3-(benzyloksykarbonyl)-2-oksopyrrolidin-1-yl)-5-(isopropyl(metyl)amino)cykloheksyl)metyl-isobutyrat som en olje.
Eksempel 7a, Trinn 5: En løsning av råproduktet i Trinn 4 ((1 R,2S,5R)-2-((S)-3- (benzyl oksy karbonyl )-2-o ksopyrrol id in-1 -yl )-5-(isopropyl(metyl)amino)cykloheksyl)metyl-isobutyrat (0,77 mmol) i MeOH (15 ml) ble tilsatt 10% Pd/C, Degussa (~100 mg). Reaksjonskolben ble evakuert og deretter fylt opp med hydrogen; dette ble gjentatt to ganger til. Reaksjonsblandingen ble omrørt under 4,2 kg/cm<2>H2i 4 timer og deretter filtrert og konsentrert i vakuum, hvilket ga det ønskede ((1R,2S,5R)-2-((S)-3-amino-2-oksopyrrolidin-1-yl)-5-(isopropyl(metyl)amino)cykloheksyl)metyl-isobutyrat som en olje.
Eksempel 7a. Trinn 6: Ved metodene beskrevet i Eksempel 6a, Trinn 6, ble ((1 R,2S,5R)-2-((S)-3-amino-2-oksopyrrolidin-1 -yl)-5-(isopropyl(metyl)amino)cykloheksyl)metyl-isobutyrat omdannet til det ønskede ((1R,2S,5R)-5-(isopropyl(metyl)amino)-2-(2-okso-3-(6-(trifluormetyl)kinazolin-4- ylamino)pyrrolidin-1-yl)cykloheksyl)metyl-isobutyrat. MS funnet: (M+H)<+>= 550,4.
Eksempel 7b: Syntese av ((1R,2S,5R)-5-(isopropyl(metyl)amino)-2-(2-okso-3-(3-(trifluormetyl)benzamido)pyrrolidin-1-yl)cykloheksyl)metyl-isobutyrat
Ved metodene beskrevet i Eksempel 6c ble ((1R,2S,5R)-2-((S)-3-amino-2-oksopyrrolidin-1-yl)-5-(isopropyl(metyl)amino)cykloheksyl)metyl-isobutyrat omdannet til det ønskede ((1R,2S,5R)-5-(isopropyl(metyl)amino)-2-(2-okso-3-(3-(trifluormetyl)benzamido)pyrrolidin-1-yl)cykloheksyl)metyl-isobutyrat. MS funnet: (M+H)<+>= 526,3.
Eksempel 7d: Syntese av ((1R,2S,5R)-5-(dimetylamino)-2-(2-okso-3-(6-(trifluormetyl)kinazolin-4-karboksamido)pyrrolidin-1-yl)cykloheksyl)metyl-isobutyrat
Ved metodene beskrevet i Eksempel 7a, Trinn 4-6, ble (S)-1-((1S,2R,4R)-4-(dimetylamino)-2-(hydroksymetyl)cykloheksyl)-2-oksopyrrolidin-3-ylkarbamat, et produkt fra Eksempel 7a, Trinn 3, omdannet til det ønskede ((1R,2S,5R)-5-(dimetylamino)-2-(2-okso-3-(6-(trifluormetyl)kinazolin-4-karboksamido)pyrrolidin-1 -yl)cykloheksyl)metyl-isobutyrat. MS funnet: (M+H)<+>= 522,3.
Eksempel 7e: Syntese av ((1R,2S,5R)-5-(dimetylamino)-2-(2-okso-3-(3-(trifluormetyl)benzamido)pyrrolidin-1-yl)cykloheksyl)metyl-isobutyrat
Ved metodene beskrevet i Eksempel 6c ble (S)-1-((1S,2R,4R)-4-(dimetylamino)-2-(hydroksymetyl)cykloheksyl)-2-oksopyrrolidin-3-ylkarbamat, et produkt fra Eksempel 7a, Trinn 3, omdannet til det ønskede ((1R,2S,5R)-5-(dimetylamino)-2-(2-okso-3-(3-(trifluormetyl)benzamido)pyrrolidin-1-yl)cykloheksyl)metyl-isobutyrat. MS funnet: (M+H)<+>= 498,3.
Eksempler 8a - 8s
Eksempel 8a: Syntese av N-((S)-1-((1S,2R,4R)-4-(isopropyl(metyl)amino)-2-(metylsulfonylmetyl)cykloheksyl)-2-oksopyrrolidin-3-yl)-3-(trifluormetyl)benzamid
Eksempel 8a, Trinn 1: (1R 2S, 5f?)-2-benzyloksykarbonylamino-7-okso-6-aza-bicyklo[3.2.1]oktan-6-karboksylsyre-tert-butylester (500 mg, 1,3 mmol) ble oppløst i THF (10 ml) og vann (2,2 ml) før tilsetning av NaBH4(252,4 mg). Etter 5 timer ble reaksjonen stanset med mettet NaHCCMøsning og ekstrahert med EtOAc (2 x). De organiske ekstrakter ble samlet, tørket (MgS04), filtrert og konsentrert i vakuum, hvilket ga tert-butyl-(1 R,3R,4S)-4-benzyloksykarbonylamino-3-(hydroksymetyl)cykloheksylkarbamat (505 mg). MS (ES+) = 375,4 (M + H)<+>.
Eksempel 8a. Trinn 2: Tert-butyl-(1 R,3R,4S)-4-benzyloksykarbonylamino-3-(hydroksymetyl)cykloheksylkarbamat (500 mg) ble oppløst i CH2CI2(4,5 ml) før tilsetning av Et3N (186,9 mg). Etter avkjøling til 0°C ble metansulfonylklorid (196,7 mg) tilsatt dråpevis. Løsningen ble oppvarmet til romtemperatur over 1 time før den ble behandlet med mettet NaHC03-løsning og ekstrahert med CH2CI2(2 x). De organiske ekstrakter ble samlet, tørket (MgS04), filtrert og konsentrert i vakuum, hvilket ga ((1R,2S,5R)-2-benzyloksykarbonylamino-5-(tert-butoksykarbonyl)cykloheksyl)metyl-metansulfonat (MS (ES+) = 457,4 (M + H)<+>) som et skum. Dette ble umiddelbart oppløst i DMF og tilsatt dråpevis til en kolbe inneholdende natrium-tiometoksyd (370 mg) i DMF (7 ml) og vann (0,5 ml) ved lO^C. Etter 20 min ble reaksjonen stanset med mettet NaHC03-løsning og ekstrahert med EtOAc (2 x). De organiske ekstrakter ble samlet, tørket (MgS04), filtrert og konsentrert. Det resulterende residuet ble oppløst i MeOH (15 ml) og vann (4 ml). Etter avkjøling til O^C ble oxone (2,1 g) tilsatt. Dette ble omrørt i 5 timer før det ble filtrert og konsentrert. Residuet ble renset ved "flash" kromatografi for å gi tert-butyl-(1 R,3R,4S)-4-benzyloksykarbonylamino-3-(metylsulfonylmetyl)cykloheksylkarbamat (348 mg). MS (ES+) = 441,2 (M +
H)<+>.
Eksempel 8a, Trinn 3: En løsning av tert-butyl-(1 R,3R,4S)-4-benzyloksykarbonylamino-3-(metylsulfonylmetyl)cykloheksylkarbamat (5,5 g) i MeOH (40 ml) ble tilsatt 10% Pd/C, Degussa (800 mg). Reaksjonskolben ble evakuert og deretter fylt opp med hydrogen; dette ble gjentatt tre ganger til. Reaksjonsblandingen ble omrørt under 1 atm H2i 3 timer og deretter filtrert og konsentrert. Det resulterende residuet ble oppløst i DMF (41 ml) og avkjølt til 0°C før tilsetning av N-Cbz-metionin (6,35 g), 4-metylmorfolin (4,4 g) og BOP (9,92 g). Reaksjonsblandingen ble omrørt i 12 timer ved romtemperatur og deretter fordelt mellom EtOAc og 1N HCI-løsning. De organiske fasene ble samlet, vasket med mettet NaHC03og saltløsning, tørket (MgS04), filtrert og konsentrert i vakuum. Residuet ble renset ved "flash" kromatografi, hvilket ga tert-butyl-(1 R,3R,4S)-4-((S)-2-benzyloksykarbonylamino-4-(metyltio)butanamido)-3-(metylsulfonylmetyl)cykloheksylkarbamat (6,9 g). MS funnet: (M + H)<+>= 572,4.
Eksempel 8a, Trinn 4: Tert-butyl-(1 R,3R,4S)-4-((S)-2-benzyloksy-karbonylamino-4-(metyltio)butanamido)-3-(metylsulfonylmetyl)-cykloheksylkarbamat (6,9 g) ble oppløst i jodmetan (100 ml) og den resulterende løsningen ble omrørt ved romtemperatur i 72 timer før den ble konsentrert i vakuum. Residuet ble oppløst i metylenklorid og den resulterende løsningen ble konsentrert; dette ble gjentatt, hvilket ga saltet. MS funnet: (M + H)<+>= 586,5. Dette materialet ble oppløst i DMF (20 ml) og løsningen ble tilsatt CS2CO3(12,0 g). Etter 12 timer ble reaksjonsblandingen fordelt mellom EtOAc og saltløsning. Den organiske fasen ble tørket (MgS04), filtrert og konsentrert i vakuum. Residuet ble renset ved "flash" kromatografi, hvilket ga tert-butyl-(1 R,3R,4S)-4-((S)-3-benzyloksykarbonylamino-2-oksopyrrolidin-1-yl)-3-(metylsulfonylmetyl)-cykloheksylkarbamat (2,4 g). MS funnet: (M + H)<+>= 524,3.
Eksempel 8a, Trinn 5: En løsning av tert-butyl-(1R,3R,4S)-4-((S)-3-benzyloksykarbonylamino-2-oksopyrrolidin-1-yl)-3-
(metylsulfonylmetyl)cykloheksylkarbamat (835 mg) i MeOH (5 ml) ble tilsatt 10% Pd/C, Degussa (800 mg). Reaksjonskolben ble evakuert og deretter fylt opp med hydrogen; dette ble gjentatt tre ganger til. Reaksjonsblandingen ble omrørt under 1 atm H2i 2 timer og deretter filtrert og konsentrert, hvilket ga tert-butyl-(1 R,3R,4S)-4-((S)-3-amino-2-oksopyrrolidin-1 -yl)-3-(metylsulfonylmetyl)cykloheksylkarbamat (566 mg). MS funnet: (M + H)<+>= 390,3.
Eksempel 8a, Trinn 6: 3-(trifluormetyl)benzosyre (252,4 mg) ble oppløst i DMF (5 ml) og 4-metylmorfolin (0,42 ml) ble tilsatt før tilsetning av BOP (511 mg). Etter 10 min ble tert-butyl-(1R,3R,4S)-4-((S)-3-amino-2-oksopyrrolidin-1-yl)-3-(metylsulfonylmetyl)cykloheksylkarbamat (300 mg) tilsatt. Reaksjonsblandingen ble omrørt i 1 time før den ble fordelt mellom EtOAc og 1N HCI-løsning. De organiske fasene ble samlet, vasket med mettet NaHCOaog saltløsning, tørket (MgS04), filtrert og konsentrert i vakuum. Residuet ble renset ved "flash" kromatografi, hvilket ga tert-butyl-(1 R,3R,4S)-3-(metylsulfonylmetyl)-4-((S)-2-okso-3-(3-(trifluormetyl)benzamido)pyrrolidin-1-yl)cykloheksylkarbamat (560 mg). MS funnet: (M + H)<+>= 562,2.
Eksempel 8a, Trinn 7: Tert-butyl-(1 R,3R,4S)-3-(metylsulfonylmetyl)-4-((S)-2-okso-3-(3-(trifluormetyl)benzamido)pyrrolidin-1-yl)cykloheksylkarbamat (560 mg) ble oppløst i CH2CI2(5 ml) før tilsetning av trifluoreddiksyre (5 ml). Etter 1 time ble reaksjonsblandingen konsentrert i vakuum. Det resulterende residuet ble oppløst i MeOH (5 ml) og tilsatt aceton (0,6 ml) og NaOAc (316 mg). Blandingen ble omrørt i 5 min før den ble tilsatt NaCNBH3(261 mg). Reaksjonsblandingen ble omrørt i 4 timer og deretter tilsatt formaldehyd (~0,3 ml av en 37% vandig løsning). Blandingen ble omrørt i 1,5 timer, behandlet med mettet NaHC03og ekstrahert med EtOAc (2 x). De organiske ekstrakter ble samlet, tørket (MgS04), filtrert og konsentrert. Residuet ble renset ved revers fase HPLC (gradient-eluering, vann/acetonitril/TFA), hvilket ga TFA-saltet av N-((S)-1-((1S,2R,4R)-4-(isopropyl(metyl)amino)-2-
(metylsulfonylmetyl)cykloheksyl)-2-oksopyrrolidin-3-yl)-3-(trifluormetyl)benzamid (347 mg). MS funnet: (M + H)<+>= 504,2.
Eksempel 8p: Syntese av (S)-1-((1S,2R,4R)-4-(isopropyl(metyl)amino)-2-(metylsulfonylmetyl)cykloheksyl)-3-(6-(trifluormetyl)kinazolin-4-ylamino)pyrrolidin-2-on
Eksempel 8p. Trinn 1: Tert-butyl-(1 R,3R,4S)-4-((S)-3-benzyloksy-karbonylamino-2-oksopyrrolidin-1-yl)-3-(metylsulfonylmetyl)-cykloheksylkarbamat (714 mg) ble oppløst i CH2CI2(15 ml) før tilsetning av trifluoreddiksyre (7 ml). Etter 1 time ved romtemperatur ble reaksjonsblandingen konsentrert i vakuum. Dette residuet ble oppløst i MeOH (15 ml) og tilsatt aceton (1,0 ml) og NaOAc (558 mg). Blandingen ble omrørt i 5 min før den ble tilsatt NaCNBH3(461 mg). Reaksjonsblandingen ble omrørt i 2 timer og deretter tilsatt formaldehyd (0,5 ml av en 37% vandig løsning) og NaCNBH3(461 mg). Blandingen ble omrørt i 1 time, behandlet med mettet NaHC03og ekstrahert med EtOAc (2 x). De organiske ekstrakter ble samlet, tørket (MgS04), filtrert og konsentrert, hvilket ga benzyl-(S)-1-((1S,2R,4R)-4-(isopropyl(metyl)amino)-2-(metylsulfonylmetyl)cykloheksyl)-2-oksopyrrolidin-3-ylkarbamat (1,5 g). MS funnet: (M + H)<+>= 466,4.
Eksempel 8p, Trinn 2: Materialet fra benzyl (S)-1-((1S,2R,4R)-4-(isopropyl(metyl)amino)-2-(metylsulfonylmetyl)cykloheksyl)-2-oksopyrrolidin-3-ylkarbamatet (600 mg) ovenfor ble oppløst i 33% HBr/AcOH (10 ml) ved romtemperatur. Løsningen ble omrørt i 30 min før Et20 ble tilsatt. Dette resulterte i et presipitat som ble isolert, hvilket ga bis-hydrogenbromidsaltet av (S)-3-amino-1-((1S,2R,4R)-4-(isopropyl(metyl)amino)-2-(metylsulfonylmetyl)-cykloheksyl)pyrrolidin-2-on (525 mg). MS funnet: (M + H)<+>= 346,5.
Eksempel 8p, Trinn 3: Til en løsning av (S)-3-amino-1-((1S,2R,4R)-4-(isopropyl(metyl)amino)-2-(metylsulfonylmetyl)cykloheksyl)pyrrolidin-2-on (100 mg) i EtOH (5 ml) ble satt trietylamin (0,14 ml) og 4-klor-6-
(trifluormetyl)kinazolin (68,7 mg). Blandingen ble oppvarmet ved SO^C i 14 timer før den ble filtrert og konsentrert i vakuum. Residuet ble renset ved revers fase HPLC (gradient-eluering, vann/acetonitril/TFA), hvilket ga TFA-saltet av (S)-1 -((1 S,2R,4R)-4-(isopropyl(metyl)amino)-2-(metylsulfonylmetyl)-cykloheksyl)-3-(6-(trifluormetyl)kinazolin-4-ylamino)pyrrolidin-2-on (30 mg). MS funnet: (M + H)<+>= 542,6.
Eksempler 9a - 9m
Eksempel 9a: Syntese av N-((S)-1-((1S,2R,4R)-2-(tert-butylsulfonylmetyl)-4-(isopropyl(metyl)amino)cykloheksyl)-2-oksopyrrolidin-3-yl)-4-fluor-3-(trifluormetyl)benzamid
Eksempel 9a, Trinn 1: ((1 R,2S,5R)-2-benzyloksykarbonylamino-5-(tert-butoksykarbonyl)cykloheksyl)metyl-metansulfonat (12,1 g) ble oppløst i DMF (50 ml) og HM PA (25 ml) ved 0°C før tilsetning av natrium-2-metyl-2-propantiolat (6,3 g) i DMF (50 ml). Etter oppvarmning til romtemperatur ble reaksjonen stanset med kaldt vann og ekstrahert med EtOAc (2 x). De organiske ekstrakter ble samlet, vasket med saltløsning, tørket (MgS04), filtrert og konsentrert. Residuet ble renset ved "flash" kromatografi for å gi tert-butyl- (1R,3R,4S)-4-benzyloksykarbonylamino-3-(tert-butyltiometyl)-cykloheksylkarbamat (13,0 g). MS (ES+) = 451,4 (M + H)<+>.
Eksempel 9a, Trinn 2: Tert-butyl-(1 R,3R,4S)-4-benzyloksykarbonylamino-3-(tert-butyltiometyl)cykloheksylkarbamat (12,1 g) ble oppløst i MeOH (120 ml) og vann (60 ml). Etter avkjøling til O^C ble oxone (41,0 g) tilsatt. Dette ble omrørt i 5 timer før det ble filtrert og konsentrert. Residuet ble renset ved "flash" kromatografi for å gi tert-butyl-(1 R,3R,4S)-4-benzyloksykarbonylamino-3-(tert-butylsulfonylmetyl)cykloheksylkarbamat (7,35 g). MS (ES+) = 483,3 (M
+ H)<+>.
Eksempel 9a, Trinn 3: En løsning av tert-butyl-(1 R,3R,4S)-4-benzyloksykarbonylamino-3-(tert-butylsulfonylmetyl)cykloheksylkarbamat (7,3
g) i MeOH (80 ml) ble tilsatt 10% Pd/C, Degussa (5,0 g). Reaksjonskolben ble evakuert og deretter fylt opp med hydrogen; dette ble gjentatt tre ganger
til. Reaksjonsblandingen ble omrørt under 1 atm H2i 3 timer og deretter filtrert og konsentrert for å gi tert-butyl-(1 R,3R,4S)-4-amino-3-(tert-butyltiometyl)cykloheksylkarbamat (5,0 g). MS (ES+) = 349,3 (M + H)<+>.
Eksempel 9a, Trinn 4: En løsning av tert-butyl-(1 R,3R,4S)-4-amino-3-(tert-butyltiometyl)cykloheksylkarbamat (4,8 g) ble oppløst i DMF (40 ml) og avkjølt til O^C før tilsetning av N-Cbz-metionin (4,3 g), 4-metylmorfolin (7,6 g) og BOP (7,9 g). Reaksjonsblandingen ble omrørt i 12 timer ved romtemperatur og deretter fordelt mellom EtOAc og 1N HCI-løsning. De organiske fasene ble samlet, vasket med mettet NaHC03og saltløsning, tørket (MgS04), filtrert og konsentrert i vakuum. Residuet ble renset ved "flash" kromatografi, hvilket ga tert-butyl-(1R,3R,4S)-4-((S)-2-benzyloksykarbonylamino-4-(metyltio)butanamido)-3-(tert-butylsulfonylmetyl)cykloheksylkarbamat (8,4 g). MS funnet: (M + H)<+>= 614,4.
Eksempel 9a, Trinn 5: Tert-butyl-(1 R,3R,4S)-4-((S)-2-benzyloksy-karbonylamino-4-(metyltio)butanamido)-3-(tert-butylsulfonylmetyl)-cykloheksylkarbamat (6,2 g) ble oppløst i jodmetan (60 ml) og CH2CI2(15 ml). Den resulterende løsningen ble omrørt ved romtemperatur i 72 timer før den ble konsentrert i vakuum. Residuet ble oppløst i metylenklorid og den resulterende løsningen ble konsentrert; dette ble gjentatt, hvilket ga saltet. Dette materialet ble oppløst i DMF (60 ml) og løsningen ble tilsatt CS2CO3(13,2 g). Etter 12 timer ble reaksjonsblandingen fordelt mellom EtOAc og saltløsning. Den organiske fasen ble tørket (MgS04), filtrert og konsentrert, hvilket ga tert-butyl-(1 R,3R,4S)-4-((S)-3-benzyloksykarbonylamino-2-oksopyrrolidin-1 -yl)-3-(tert-butylsulfonylmetyl)cykloheksylkarbamat (5,5 g). MS funnet: (M + H)<+>= 566,5.
Eksempel 9a. Trinn 6: Tert-butyl-(1 R,3R,4S)-4-((S)-3-benzyloksykarbonylamino-2-oksopyrrolidin-1-yl)-3-(tert-butylsulfonylmetyl)cykloheksylkarbamat (880 mg) ble oppløst i CH2CI2(5 ml) ved O^C før tilsetning av trifluoreddiksyre (10 ml). Etter 1 time ved romtemperatur ble reaksjonsblandingen konsentrert i vakuum. Det resulterende residuet ble oppløst i EtOAc og ble vasket med mettet Na2C03-løsning. Den organiske fasen ble tørket (MgS04), filtrert og konsentrert. Dette residuet ble oppløst i dikloretan (6 ml) og aceton (6 ml) før tilsetning av NaBH(OAc)3(637,6 mg). Etter 2 timer ble formaldehyd (6,0 ml av en 37% vandig løsning) tilsatt sammen med NaBH(OAc)3(310 mg). Blandingen ble omrørt i 1 time, behandlet med mettet Na2C03og ekstrahert med EtOAc (2 x). De organiske ekstrakter ble samlet, tørket (MgS04), filtrert og konsentrert, hvilket ga benzyl-(S)-1-((1S,2R,4R)-2-(tert-butylsulfonylmetyl)-4-(isopropyl(metyl)amino)cykloheksyl)-2-oksopyrrolidin-3-ylkarbamat (1,0 g). MS funnet: (M + H)<+>= 522,5.
Eksempel 9a, Trinn 7: Materialet ovenfor benzyl-(S)-1-((1S,2R,4R)-2-(tert-butylsulfonylmetyl)-4-(isopropyl(metyl)amino)cykloheksyl)-2-oksopyrrolidin-3-ylkarbamat (1,0 g) ble oppløst i 33% HBr/AcOH (5 ml) ved romtemperatur. Løsningen ble omrørt i 30 min før Et20 ble tilsatt. Dette resulterte i et presipitat som ble isolert. Det faste stoffet ble oppløst i EtOAc og ble vasket med mettet Na2C03-løsning. Den organiske fasen ble tørket (MgS04), filtrert og konsentrert, hvilket ga (S)-3-amino-1-((1S,2R,4R)-2-(tert-butylsulfonylmetyl)-4-(isopropyl(metyl)amino)cykloheksyl)pyrrolidin-2-on (250 mg). MS funnet: (M + H)<+>= 388,4.
Eksempel 9a, Trinn 8: (S)-3-amino-1 -((1 S,2R,4R)-2-(tert-butylsulfonylmetyl)-4-(isopropyl(metyl)amino)cykloheksyl)pyrrolidin-2-on (23 mg) ble oppløst i DMF (1,5 ml) og avkjølt til 0°C før tilsetning av 4-fluor-3-(trifluormetyl)benzosyre (23 mg), 4-metylmorfolin (0,02 ml) og BOP (49 mg). Reaksjonsblandingen ble omrørt i 12 timer ved romtemperatur og deretter fordelt mellom EtOAc og mettet Na2C03-løsning. De organiske fasene ble samlet, tørket (MgS04), filtrert og konsentrert i vakuum. Residuet ble renset ved revers fase HPLC (gradient-eluering, vann/acetonitril/TFA), hvilket ga TFA-saltet av N-((S)-1 -((1 S,2R,4R)-2-(tert-butylsulfonylmetyl)-4-(isopropyl(metyl)amino)cykloheksyl)-2-oksopyrrolidin-3-yl)-4-fluor-3-(trifluormetyl)benzamid (8 mg). MS funnet: (M + H)<+>= 578,3.
Eksempel 9j: Syntese av (S)-1-((1S,2R,4R)-4-(isopropyl(metyl)amino)-2-(tert-butylsulfonylmetyl)cykloheksyl)-3-(6-(trifluormetyl)kinazolin-4-ylamino)pyrrolidin-2-on
Eksempel 9i, Trinn 1: Til en løsning av (S)-3-amino-1-((1S,2R,4R)-4-(isopropyl(metyl)amino)-2-(tert-butylsulfonylmetyl)cykloheksyl)pyrrolidin-2-on-bis-hydrogenbromid (100 mg) i EtOH (2 ml) ble satt trietylamin (0,076 ml) og 4-klor-6-(trifluormetyl)kinazolin (63 mg). Blandingen ble oppvarmet ved 80<*>^ i 6 timer før den ble filtrert og konsentrert i vakuum. Residuet ble renset ved revers fase HPLC (gradient-eluering, vann/acetonitril/TFA), hvilket ga TFA-saltet av (S)-1 -((1 S,2R,4R)-4-(isopropyl(metyl)amino)-2-(tert-butylsulfonyl-metyl)cykloheksyl)-3-(6-(trifluormetyl)kinazolin-4-ylamino)pyrrolidin-2-on (63 mg). MS funnet: (M + H)<+>= 584,6.
Eksempler 10a - 10m
Eksempel 10a: Syntese av N-((S)-1-((1S,2R,4R)-4-(isopropyl(metyl)amino)-2-(isopropylsulfonylmetyl)cykloheksyl)-2-oksopyrrolidin-3-yl)-3-(trifluormetyl)benzamid
Eksempel 10a, Trinn 1: Til en løsning av N-(1 S, 2R, 4R)-4-(benzyloksy-karbonylamino-3-hydroksymetyl-cykloheksyl)-karbaminsyre-tert-butylester (440 mg, 1,16 mmol, Se Eksempel 5a, Trinn 1) i 20 ml CH2CI2avkjølt til 0°C ble satt Et3N (0,3 ml, 2 mmol) og MsCI (0,1 ml, 1,39 mmol). Reaksjonsblandingen ble omrørt ved romtemperatur i 2 timer før vann ble tilsatt. Den vandige fasen ble ekstrahert med EtOAc (2 x 25 ml) og konsentrert til en olje for videre anvendelse. I en separat kolbe ble propan-2-tiol (0,22 ml, 2,3 mmol) oppløst i 10 ml DMF, avkjølt til 0°C og fulgt av NaH (93 mg, 2,32 mmol). Reaksjonsblandingen ble omrørt ved romtemperatur i 2 timer før en løsning av den nylig fremstilt olje i 10 ml DMF langsomt ble tilsatt. Blandingen ble omrørt ved romtemperatur i 16 timer før vann og EtOAc ble tilsatt. Det organiske laget ble separert, tørket over Na2S04og konsentrert, hvilket ga en olje som ble renset ved kolonne-kromatografi på silikagel med EtOAc:heksan (30:70), hvilket ga N-(1S, 2R, 4R)-4-benzyloksykarbonylamino-3-isopropylsulfanylmetyl-cykloheksyl)-karbaminsyre-tert-butylester (160 mg, 33%). MS [M + H]<+>437.
Eksempel 10a, Trinn 2 Til en løsning av N-(1S, 2R, 4R)-4-benzyloksykarbonylamino-3-isopropylsulfanylmetyl-cykloheksyl)-karbaminsyre-tert-butylester (1 g, 2,3 mmol) i iPrOH (20 ml) ved romtemperatur ble satt Oxone (2,8 g, 4,6 mmol) i vann (10 ml). Blandingen ble omrørt ved romtemperatur i 16 timer før vann og EtOAc ble tilsatt. Det organiske laget ble separert, tørket over Na2S04og konsentrert, hvilket ga rå N-(1 S, 2R, 4R)-4-benzyloksykarbonylamino-3-(propan-2-sulfonylmetyl)-cykloheksyl]-karbaminsyre-tert-butylester (900 mg, 90%). MS [M + H]<+>469. Eksempel 10a, Trinn 3: En løsning av N-(1S, 2R, 4f?)-4-benzyloksykarbonylamino-3-(propan-2-sulfonylmetyl)-cykloheksyl]-karbaminsyre-tert-butylester (2 g) i MeOH (50 ml) ble tilsatt 10% Pd/C, Degussa (1,5 g). Reaksjonskolben ble evakuert og deretter fylt opp med hydrogen; dette ble gjentatt tre ganger til. Reaksjonsblandingen ble omrørt under 1 atm H2i 4 timer og deretter filtrert og konsentrert i vakuum, hvilket ga tert-butyl-(1R,3R,4S)-4-amino-3-(isopropylsulfonylmetyl)cykloheksylkarbamat (1 g). MS funnet: (M + H)<+>= 335.
Eksempel 10a, Trinn 4: En prøve av tert-butyl-(1 R,3R,4S)-4-amino-3-(isopropylsulfonylmetyl)cykloheksylkarbamat (1 g, 2,9 mmol) ble oppløst i DMF (20 ml) og den resulterende løsningen ble tilsatt N-Cbz-metionin (850 mg, 2,9 mmol), N,N-dietylisopropylamin (0,5 ml, 2,9 mmol) og HATU (1,1 g, 2,9 mmol). Reaksjonsblandingen ble omrørt i 12 timer ved romtemperatur og deretter fordelt mellom EtOAc og mettet NaHC03; den vandige fasen ble tilbakeekstrahert med EtOAc (1 x). De organiske fasene ble samlet, vasket med saltløsning, tørket (Na2S04), filtrert og konsentrert i vakuum. Residuet ble renset ved "flash" kromatografi, hvilket ga benzyloksykarbonyl-tert-butyl (1R,3R,4S)-4-((S)-2-amino-4-(metyltio)butanamido)-3-(isopropylsulfonylmetyl)cykloheksylkarbamat (1,4 g, 82%). MS funnet: (M + H)<+>= 599.
Eksempel 10a, Trinn 5: Forbindelsen benzyloksykarbonyl-tert-butyl-(1R,3R,4S)-4-((S)-2-amino-4-(metyltio)butanamido)-3-(isopropylsulfonylmetyl)cykloheksylkarbamat (1,4 g) ble "fuktet" med EtOAc og deretter ble mesteparten av EtOAc fjernet under nitrogenstrøm. Residuet ble oppløst i jodmetan (20 ml) og den resulterende løsningen ble omrørt ved romtemperatur i 48 timer før den ble konsentrert i vakuum. Residuet ble oppløst i metylenklorid og den resulterende løsningen ble konsentrert; dette ble gjentatt, hvilket ga saltet. MS funnet: (M + H)<+>= 616. Dette materialet ble oppløst i DMF (20 ml) og løsningen ble tilsatt CS2CO3(2,2 g) og omrørt i 12 timer ved romtemperatur før den ble fordelt mellom EtOAc og saltløsning. Den organiske fasen ble tørket (Na2S04), filtrert og konsentrert i vakuum. Residuet ble renset ved "flash" kromatografi, hvilket ga benzyloksykarbonyl-tert-butyl-(1 R,3R,4S)-4-((S)-3-amino-2-oksopyrrolidin-1 -yl)-3-(isopropylsulfonylmetyl)cykloheksylkarbamat (185 mg). MS funnet: (M + H)<+>= 552.
Eksempel 10a. Trinn 6: En løsning av benzyloksykarbonyl-tert-butyl-
(1 R,3R,4S)-4-((S)-3-amino-2-oksopyrrolidin-1 -yl)-3-(isopropylsulfonylmetyl)cykloheksylkarbamat (1 g) i MeOH (20 ml) ble tilsatt 10% Pd/C, Degussa (250 mg). Reaksjonskolben ble evakuert og deretter fylt opp med hydrogen; dette ble gjentatt tre ganger til. Reaksjonsblandingen ble omrørt under 1 atm H2i 12 timer og deretter filtrert og konsentrert i vakuum, hvilket ga tert-butyl-(1 R,3R,4S)-4-((S)-3-amino-2-oksopyrrolidin-1-yl)-3-(isopropylsulfonylmetyl)cykloheksylkarbamat. MS funnet: (M + H)<+>= 418.
Eksempel 10a. Trinn 7: En prøve av tert-butyl-(1 R,3R,4S)-4-((S)-3-amino-2-oksopyrrolidin-1 -yl)-3-(isopropylsulfonylmetyl)cykloheksylkarbamat (200 mg, 0,47 mmol) i DMF (10 ml) ble tilsatt 3-(trifluormetyl)benzosyre (109 mg, 0,57 mmol), N,N-dietylisopropylamin (0,1 ml, 0,57 mmol) og HATU (216 mg, 0,57 mmol). Reaksjonsblandingen ble omrørt i 48 timer ved romtemperatur og deretter fordelt mellom EtOAc og mettet NaHC03; den vandige fasen ble tilbakeekstrahert med EtOAc (1 x). De organiske fasene ble samlet, vasket med saltløsning, tørket (Na2S04), filtrert og konsentrert i vakuum, hvilket ga tert-butyl-(1R,3R,4S)-3-(isopropylsulfonylmetyl)-4-((S)-2-okso-3-(3-(trifluormetyl)benzamido)pyrrolidin-1-yl)cykloheksylkarbamat. MS funnet: (M + H)<+>= 590.
Eksempel 10a, Trinn 8: En løsning av tert-butyl-(1 R,3R,4S)-3-(isopropylsulfonylmetyl)-4-((S)-2-okso-3-(3-(trifluormetyl)benzamido)pyrrolidin-1-yl)cykloheksylkarbamat i CH2CI2(10 ml) ble behandlet med trifluoreddiksyre (4 ml). Etter 1 time ble reaksjonsblandingen konsentrert i vakuum og det resulterende residuet ble fordelt mellom EtOAc og mettet
NaHC03- Den organiske fasen ble vasket med saltløsning, tørket (Na2S04),
filtrert og konsentrert i vakuum, hvilket ga aminet. MS funnet: (M + H)<+>= 490. Aminet (30 mg, 0,06 mmol) ble oppløst i CH2CI2(10 ml) og tilsatt aceton (~2 ml); blandingen ble omrørt i 5 min før den ble tilsatt NaCNBH3(50 mg, 0,12 mmol). Reaksjonsblandingen ble omrørt i 4 timer ved romtemperatur og deretter tilsatt formaldehyd (2 ml av en 30% vandig løsning). Blandingen ble omrørt i 1,5 timer, behandlet med mettet NaHC03og ekstrahert med EtOAc (2 x). De organiske ekstrakter ble samlet, vasket med saltløsning, tørket (Na2S04), filtrert og konsentrert i vakuum. Residuet ble renset ved revers fase HPLC, hvilket ga TFA-saltet av tittelforbindelsen, N-((S)-1-((1S,2R,4R)-4-(isopropyl(metyl)amino)-2-(isopropylsulfonylmetyl)cykloheksyl)-2-oksopyrrolidin-3-yl)-3-(trifluormetyl)benzamid, som et hvitt pulver (15 mg) etter lyofilisering. MS funnet: (M + H)<+>= 546.
Eksempel 10b: Syntese av (S)-1-((1S,2R,4R)-4-(isopropyl(metyl)amino)-2-(isopropylsulfonylmetyl)cykloheksyl)-3-(6-(trifluormetyl)kinazolin-4-ylamino)pyrrolidin-2-on
Eksempel 10b, Trinn 1: Til en løsning av benzyloksykarbonyl-tert-butyl-(1R,3R,4S)-4-((S)-3-amino-2-oksopyrrolidin-1-yl)-3-(isopropylsulfonylmetyl)-cykloheksylkarbamat (1 g) i CH2CI2(30 ml) ble satt TFA (6 ml) ved romtemperatur. Reaksjonsblandingen ble omrørt i 5 timer og konsentrert i vakuum. Residuet ble fordelt mellom 1N NaOH (100 ml) og EtOAc (150 ml). Det vandige laget ble ekstrahert med EtOAc (2 x 50 ml) og de organiske fasene ble samlet, vasket med saltløsning (25 ml), tørket (Na2S04), filtrert og konsentrert i vakuum, hvilket ga benzyl-(S)-1-((1S,2R,4R)-4-amino-2-(isopropylsulfonylmetyl)cykloheksyl)-2-oksopyrrolidin-3-ylkarbamat. MS funnet: (M + H)<+>= 452.
Eksempel 10b, Trinn 2: Alt benzyl-(S)-1-((1S,2R,4R)-4-amino-2-(isopropylsulfonylmetyl)cykloheksyl)-2-oksopyrrolidin-3-ylkarbamat fremstilt i
Trinn 1 (1 ekv) ble oppløst i CH2CI2(20 ml). Den resulterende løsningen ble tilsatt aceton (10 ekv) og omrørt ved romtemperatur i 10 min før natriumcyanoborhydrid (2 ekv) ble tilsatt i én porsjon. Reaksjonsblandingen ble omrørt ved romtemperatur i 10 timer og deretter suksessivt tilsatt formaldehyd (10 ekv i 37 vekt% vandig løsning) og natriumcyanoborhydrid (2 ekv). Reaksjonsblandingen ble omrørt i ytterligere 9 timer ved romtemperatur og deretter behandlet med mettet NaHC03. Den vandige blandingen ble ekstrahert med EtOAc (200 ml, deretter 2 x 75 ml). De organiske ekstrakter ble samlet, vasket med saltløsning (30 ml), tørket (MgS04), filtrert og konsentrert i vakuum. Etter at den resulterende oljen hadde stått, stivnet noen paraformaldehyd-relaterte produkter; disse ble fjernet ved oppløsning av blandingen i et minimalt volum av EtOAc og filtrering. Påfølgende konsentrasjon ga benzyl-(S)-1-((1S,2R,4R)-4-(isopropyl(metyl)amino)-2-(isopropylsulfonylmetyl)cykloheksyl)-2-oksopyrrolidin-3-ylkarbamat. MS funnet: (M + H)<+>= 508.
Eksempel 10b, Trinn 3: Alt benzyl-(S)-1-((1S,2R,4R)-4-(isopropyl(metyl)amino)-2-(isopropylsulfonylmetyl)cykloheksyl)-2-oksopyrrolidin-3-ylkarbamat fremstilt i Trinn 2 (250 mg, 0,5 mmol) ble tilsatt 30% HBr/AcOH (5 ml). Reaksjonskaret oppvarmes og en kraftig gassutvikling skjer. Blandingen ble omrørt i 25 min ved romtemperatur og deretter ble kolben plassert i et avkjølt vannbad før tilsetning av 20 ml Et20. Det resulterende faste stoffet ble oppsamlet, vasket med Et20 to ganger og konsentrert i vakuum, hvilket ga (S)-3-amino-1-((1S,2R,4R)-4-(isopropyl(metyl)amino)-2-(isopropylsulfonylmetyl)cykloheksyl)pyrrolidin-2-on (240 mg, 91% utbytte). MS funnet: (M + H)<+>= 374.
Eksempel 10b, Trinn 4: Til en løsning av (S)-3-amino-1-((1S,2R,4R)-4-(isopropyl(metyl)amino)-2-(isopropylsulfonylmetyl)cykloheksyl)pyrrolidin-2-on (75 mg, 0,14 mmol) i EtOH (2 ml) ble satt trietylamin (0,12 ml, 0,84 mmol) og 4-klor-6-(trifluormetyl)kinazolin (39 mg, 0,16 mmol). Blandingen ble oppvarmet ved 80°C i 14 timer og deretter konsentrert i vakuum. Residuet ble renset ved HPLC for å gi tittelforbindelsen, (S)-1-((1S,2R,4R)-4-(isopropyl(metyl)amino)-2-(isopropylsulfonylmetyl)cykloheksyl)-3-(6-(trifluormetyl)kinazolin-4-ylamino)pyrrolidin-2-on (35 mg, 44% utbytte). MS funnet: (M + H)<+>= 570.
Eksempel 10c: Syntese av 3-tert-butyl-N-((S)-1-((1S,2R,4R)-4-(isopropyl(metyl)amino)-2-(isopropylsulfonylmetyl)cykloheksyl)-2-oksopyrrolidin-3-yl)-1 -metyl-1 H-pyrazol-5-karboksamid
Eksempel 10c, Trinn 1: Til en løsning av (S)-3-amino-1-((1S,2R,4R)-4-(isopropyl(metyl)amino)-2-(isopropylsulfonylmetyl)cykloheksyl)pyrrolidin-2-on (40 mg, 0,08 mmol) i DMF (2 ml) ble satt diisopropyletylamin (0,1 ml, 0,6 mmol), 3-tert-butyl-1-metyl-1H-pyrazol-5-karboksylsyre (18 mg, 0,1 mmol) og HATU (38 mg, 0,1 mmol). Reaksjonsblandingen ble omrørt ved romtemperatur i 14 timer, delvis konsentrert og renset ved RP-HPLC for å gi 20 mg av tittelforbindelsen. MS funnet: (M + H)<+>= 538.
Eksempler 11a - 11e
Eksempel 11a: Syntese av N-((S)-1-((1S,2R,4R)-2-(etylsulfonylmetyl)-4-(isopropyl(metyl)amino)cykloheksyl)-2-oksopyrrolidin-3-yl)-3-(trifluormetyl)benzamid
Eksempel 11a, Trinn 1: Til en løsning av benzyloksykarbonyl-tert-butyl-(1R,3R,4S)-4-amino-3-(hydroksymetyl)cykloheksylkarbamat (5,60 g, 14,7 mmol) i CH2CI2(32 ml) ved 0°C ble satt NEfe (4,73 g, 44,2 mmol) og metansulfonylklorid (1,71 ml, 22,1 mmol). Reaksjonsblandingen ble omrørt ved romtemperatur i 2 timer under nitrogen-atmosfære, deretter avkjølt til 0°C og behandlet med mettet NH4CI (200 ml). Det organiske laget ble vasket med mettet NaHC03(250 ml) og saltløsning (100 ml), tørket (Na2S04) og konsentrert i vakuum, hvilket ga mellomproduktet som et gult skum og anvendt uten ytterligere rensning for neste trinn:<1>H NMR (300 MHz, CDCI3) 8 7,40-7,31 (m, 5H), 5,25 (s, 2H), 4,85-4,83 (m, 2H), 4,39 (s, 1H), 4,17-3,96 (m, 3H), 3,70-3,35 (m, 1H), 3,30-3,20 (m, 1H), 2,96 (s, 3H), 2,10-0,94 (m, 7H), 1,44 (s, 9H); ESI MS m/ z 457 [C21H34N2O7S + H]<+.>
En løsning av etantiol (908 uL, 12,3 mmol) og vannfri DMF (31 ml) ble avkjølt til 0°C under nitrogen-atmosfære, deretter ble natriumhydrid (60% dispersjon i mineralolje; 491 mg, 12,3 mmol) tilsatt. Til denne blandingen ble en løsning av mellomproduktet nettopp fremstilt ovenfor (2,80 g, 6,1 mmol) i vannfri DMF (30 ml) tilsatt ved 0°C. Reaksjonsblandingen ble oppvarmet til romtemperatur, omrørt i 12 timer, avkjølt tilbake til 0°C og behandlet med mettet NH4CI (200 ml). Blandingen ble ekstrahert med EtOAc (500 ml) og det organiske laget ble vasket med 5% LiCI (2 * 250 ml), tørket (Na2S04) og konsentrert, hvilket ga benzyloksykarbonyl-tert-butyl-(1 R,3R,4S)-4-amino-3-(etyltiometyl)cykloheksylkarbamat (3,00 g).<1>H NMR (300 MHz, CDCI3) 8 7,61-7,20 (m, 5H), 5,10 (s, 2H), 4,45-4,30 (m, 1H), 4,12-4,02 (m, 2H), 3,52-3,35 (m, 1H) 2,78-2,41 (m, 4H), 2,40-2,25 (m, 1H), 2,20-0,72 (m, 9H), 1,44 (s, 9H); ESI MS m/ z 423 [C22H34N2O4S<+>H]<+.>
Eksempel 11a, Trinn 2: Til en løsning av benzyloksykarbonyl-tert-butyl-(1R,3R,4S)-4-amino-3-(etyltiometyl)cykloheksylkarbamat (3,00 g, 6,13 mmol) i 2-PrOH (16 ml) ved 0°C ble satt en suspensjon av Oxone<®>(23,0 g, 36,8 mmol) i vann (30 ml). Reaksjonsblandingen ble omrørt ved romtemperatur i 12 timer, deretter fortynnet med vann (200 ml) og ekstrahert med EtOAc (3 x 250 ml). Det organiske laget ble vasket med saltløsning (50 ml), tørket (Na2S04) og konsentrert i vakuum. Rensning av residuet ved kolonnekromatografi (silikagel, 50 g, EtOAc) ga benzyloksykarbonyl-tert-butyl-(1R,3R,4S)-4-amino-3-(etylsulfonylmetyl)cykloheksylkarbamat (1,89 g, 68%) som et hvitt, fast stoff: Sm.p. 54-58°C;<1>H NMR (300 MHz, CDCI3) 8 7,60-7,32 (m, 5H), 5,10 (s, 2H), 4,90-4,87 (m, 1H), 4,41-4,30 (m, 1H), 4,07-3,98 (m, 1H), 3,58-3,35 (m, 1H), 3,28-3,10 (m, 1H), 3,08-2,88 (m, 2H), 2,72-2,65 (m, 1H), 2,50-2,18 (m, 2H), 2,08-0,80 (m, 8H), 1,43 (s, 9H); ESI MS m/ z 455 [C22H34N2O6S + H]<+>; HPLC 95,7% (område prosent), tR= 3,76 min.
Eksempel 11a, Trinn 3: En porsjon av benzyloksykarbonyl-tert-butyl-(1R,3R,4S)-4-amino-3-(etylsulfonylmetyl)cykloheksylkarbamat (1,7 g) i MeOH (30 ml) ble tilsatt 10% Pd/C, Degussa (300 mg). Reaksjonskolben ble evakuert og deretter fylt opp med hydrogen; dette ble gjentatt tre ganger til. Reaksjonsblandingen ble omrørt under 1 atm H2i 4 timer og deretter filtrert og konsentrert i vakuum, hvilket ga tert-butyl-(1R,3R,4S)-4-amino-3-(etylsulfonylmetyl)cykloheksylkarbamat (1,1 g). MS funnet: (M + H)<+>= 321.
Eksempel 11a, Trinn 4: En prøve av tert-butyl-(1 R,3R,4S)-4-amino-3-(etylsulfonylmetyl)cykloheksylkarbamat (1,1 g, 3,4 mmol) ble oppløst i DMF (20 ml) og den resulterende løsningen ble tilsatt N-Cbz-metionin (1,15 g, 4,08 mmol), N,N-dietylisopropylamin (0,7 ml, 4,08 mmol) og HATU (1,55 g, 4,08 mmol). Reaksjonsblandingen ble omrørt i 12 timer ved romtemperatur og deretter fordelt mellom EtOAc og mettet NaHC03; den vandige fasen ble tilbakeekstrahert med EtOAc (1 x). De organiske fasene ble samlet, vasket med saltløsning, tørket (Na2S04), filtrert og konsentrert i vakuum. Residuet ble renset ved "flash" kromatografi, hvilket ga benzyloksykarbonyl-tert-butyl-
(1R,3R,4S)-4-((S)-2-amino-4-(metyltio)butanamido)-3-(etylsulfonylmetyl)cykloheksylkarbamat (2,2 g). MS funnet: (M + H)<+>= 586.
Eksempel 11a, Trinn 5: Forbindelsen benzyloksykarbonyl-tert-butyl-(1R,3R,4S)-4-((S)-2-amino-4-(metyltio)butanamido)-3-(etylsulfonylmetyl)cykloheksylkarbamat (3,4 mmol) ble "fuktet" med EtOAc og deretter ble mesteparten av EtOAc fjernet under nitrogenstrøm. Residuet ble oppløst i jodmetan (20 ml) og den resulterende løsningen ble omrørt ved romtemperatur i 48 timer før den ble konsentrert i vakuum. Residuet ble oppløst i metylenklorid og den resulterende løsningen ble konsentrert; dette ble gjentatt, hvilket ga saltet. MS funnet: (M + H)<+>= 602. Dette materialet ble oppløst i DMF (20 ml) og løsningen ble tilsatt CS2CO3(3,3 g, 10,2 mmol) og omrørt i 12 timer ved romtemperatur før den ble fordelt mellom EtOAc og saltløsning. Den organiske fasen ble tørket (Na2S04), filtrert og konsentrert i vakuum. Residuet ble renset ved "flash" kromatografi, hvilket ga benzyloksykarbonyl-tert-butyl-(1R,3R,4S)-4-((S)-3-amino-2-oksopyrrolidin-1-yl)-3-(etylsulfonylmetyl)cykloheksylkarbamat (1 g). MS funnet: (M + H)<+>= 538.
Eksempel 11a, Trinn 6: En løsning av benzyloksykarbonyl-tert-butyl-(1R,3R,4S)-4-((S)-3-amino-2-oksopyrrolidin-1-yl)-3-(etylsulfonylmetyl)-cykloheksylkarbamat (1 g) i MeOH (20 ml) ble tilsatt 10% Pd/C, Degussa (250 mg). Reaksjonskolben ble evakuert og deretter fylt opp med hydrogen; dette ble gjentatt tre ganger til. Reaksjonsblandingen ble omrørt under 1 atm H2i 12 timer og deretter filtrert og konsentrert i vakuum, hvilket ga tert-butyl-(1R,3R,4S)-4-((S)-3-amino-2-oksopyrrolidin-1-yl)-3-(isopropylsulfonylmetyl)-cykloheksylkarbamat. MS funnet: (M + H)<+>= 404.
Eksempel 11a. Trinn 7: En prøve av tert-butyl-(1 R,3R,4S)-4-((S)-3-amino-2-oksopyrrolidin-1-yl)-3-(etylsulfonylmetyl)cykloheksylkarbamat (100 mg, 0,25 mmol) i DMF (10 ml) ble tilsatt 3-(trifluormetyl)benzosyre (57 mg, 0,29 mmol), N,N-dietylisopropylamin (0,05 ml, 0,29 mmol) og HATU (114 mg, 0,29 mmol). Reaksjonsblandingen ble omrørt i 48 timer ved romtemperatur og deretter fordelt mellom EtOAc og mettet NaHC03; den vandige fasen ble tilbakeekstrahert med EtOAc (1 x). De organiske fasene ble samlet, vasket med saltløsning, tørket (Na2S04), filtrert og konsentrert i vakuum, hvilket ga tert-butyl-(1R,3R,4S)-3-(etylsulfonylmetyl)-4-((S)-2-okso-3-(3-(trifluormetyl)benzamido)pyrrolidin-1-yl)cykloheksylkarbamat. MS funnet: (M + H)<+>= 578.
Eksempel 11a, Trinn 8: En løsning av tert-butyl-(1 R,3R,4S)-3-(etylsulfonylmetyl)-4-((S)-2-okso-3-(3-(trifluormetyl)benzamido)pyrrolidin-1-yl)cykloheksylkarbamat (0,25 mmol) i CH2CI2(10 ml) ble behandlet med trifluoreddiksyre (4 ml). Etter 1 time ble reaksjonsblandingen konsentrert i vakuum og det resulterende residuet ble fordelt mellom EtOAc og mettet NaHC03. Den organiske fasen ble vasket med saltløsning, tørket (Na2S04),
filtrert og konsentrert i vakuum, hvilket ga aminet. MS funnet: (M + H)<+>= 476. Aminet (0,25 mmol) ble oppløst i CH2CI2(10 ml) og tilsatt aceton (~2 ml); blandingen ble omrørt i 5 min før den ble tilsatt NaCNBH3(1 mmol). Reaksjonsblandingen ble omrørt i 4 timer ved romtemperatur og deretter tilsatt formaldehyd (2 ml av en 30% vandig løsning). Blandingen ble omrørt i 1,5 timer, behandlet med mettet NaHC03og ekstrahert med EtOAc (2 x). De organiske ekstrakter ble samlet, vasket med saltløsning, tørket (Na2S04), filtrert og konsentrert i vakuum. Residuet ble renset ved revers fase HPLC, hvilket ga TFA-saltet av tittelforbindelsen, N-((S)-1-((1S,2R,4R)-4-(isopropyl(metyl)amino)-2-(etylsulfonylmetyl)cykloheksyl)-2-oksopyrrolidin-3-yl)-3-(trifluormetyl)benzamid, som et hvitt pulver (42 mg) etter lyofilisering. MS funnet: (M + H)<+>= 532.
Eksempel 11b: Syntese av (S)-1-((1S,2R,4R)-4-(isopropyl(metyl)amino)-2-(etylsulfonylmetyl)cykloheksyl)-3-(6-(trifluormetyl)kinazolin-4-ylamino)pyrrolidin-2-on
Eksempel 11b, Trinn 1: Til en løsning av benzyloksykarbonyl-tert-butyl-
(1 R,3R,4S)-4-((S)-3-amino-2-oksopyrrolidin-1 -yl)-3-(etylsulfonylmetyl)cykloheksylkarbamat (1 g) i CH2CI2(30 ml) ble satt TFA (6 ml) ved romtemperatur. Reaksjonsblandingen ble omrørt i 5 timer og konsentrert i vakuum. Residuet ble fordelt mellom 1N NaOH (100 ml) og EtOAc (150 ml). Det vandige laget ble ekstrahert med EtOAc (2 x 50 ml) og de organiske fasene ble samlet, vasket med saltløsning (25 ml), tørket (Na2S04), filtrert og konsentrert i vakuum, hvilket ga benzyl-(S)-1-((1S,2R,4R)-4-amino-2-(etylsulfonylmetyl)cykloheksyl)-2-oksopyrrolidin-3-ylkarbamat. MS funnet: (M + H)<+>= 438.
Eksempel 11b, Trinn 2: Alt benzyl-(S)-1 -((1 S,2R,4R)-4-amino-2-(etylsulfonylmetyl)cykloheksyl)-2-oksopyrrolidin-3-ylkarbamat fremstilt i Trinn 1 (1 ekv) ble oppløst i CH2CI2(20 ml). Den resulterende løsningen ble tilsatt aceton (10 ekv) og omrørt ved romtemperatur i 10 min før natriumcyanoborhydrid (2 ekv) ble tilsatt i én porsjon. Reaksjonsblandingen ble omrørt ved romtemperatur i 10 timer og deretter suksessivt tilsatt formaldehyd (10 ekv i 37 vekt% vandig løsning) og natriumcyanoborhydrid (2 ekv). Reaksjonsblandingen ble omrørt i ytterligere 9 timer ved romtemperatur og deretter behandlet med mettet NaHC03. Den vandige blandingen ble ekstrahert med EtOAc (200 ml, deretter 2 x 75 ml). De organiske ekstrakter ble samlet, vasket med saltløsning (30 ml), tørket (MgS04), filtrert og konsentrert i vakuum. Etter at den resulterende olje hadde stått, stivnet noen paraformaldehyd-relaterte produkter; disse ble fjernet ved oppløsning av blandingen i et minimalt volum av EtOAc og filtering. Påfølgende konsentrasjon ga benzyl-(S)-1-((1S,2R,4R)-4-(isopropyl(metyl)amino)-2-(etylsulfonylmetyl)cykloheksyl)-2-oksopyrrolidin-3-ylkarbamat. MS funnet: (M + H)<+>= 494.
Eksempel 11b. Trinn 3: Alt benzyl-(S)-1-((1S,2R,4R)-4-(isopropyl(metyl)amino)-2-(etylsulfonylmetyl)cykloheksyl)-2-oksopyrrolidin-3-ylkarbamat fremstilt i Trinn 2 (250 mg) ble tilsatt 30% HBr/AcOH (5 ml). Reaksjonskaret oppvarmes og en kraftig gassutvikling skjer. Blandingen ble omrørt i 25 min ved romtemperatur og deretter ble kolben plassert i et avkjølt vannbad før tilsetning av 20 ml Et20. Det resulterende faste stoffet ble oppsamlet, vasket med Et20 to ganger og konsentrert i vakuum, hvilket ga (S)-3-amino-1 -((1 S,2R,4R)-4-(isopropyl(metyl)amino)-2-(etylsulfonylmetyl)cykloheksyl)pyrrolidin-2-on (150 mg). MS funnet: (M + H)<+>= 360.
Eksempel 11b, Trinn 4: Til en løsning av (S)-3-amino-1-((1S,2R,4R)-4-(isopropyl(metyl)amino)-2-(etylsulfonylmetyl)cykloheksyl)pyrrolidin-2-on (50 mg, 0,1 mmol) i EtOH (2 ml) ble satt trietylamin (0,1 ml, 0,6 mmol) og 4-klor-6-(trifluormetyl)kinazolin (27 mg, 0,11 mmol). Blandingen ble oppvarmet ved 80<*>^ i 14 timer og deretter konsentrert i vakuum. Residuet ble renset ved HPLC for å gi tittelforbindelsen, (S)-1-((1S,2R,4R)-4-(isopropyl(metyl)amino)-2-(etylsulfonylmetyl)cykloheksyl)-3-(6-(trifluormetyl)kinazolin-4-ylamino)pyrrolidin-2-on (35 mg). MS funnet: (M + H)<+>= 556.
Eksempler 12a - 12bh
Eksempel 12a: Syntese av (1R,2S,5R)-metyl 5-(isopropyl(metyl)amino)-2-((S)-2-okso-3-(3-(trifluormetyl)benzamido)pyrrolidin-1-yl)cykloheksankarboksylat
Eksempel 12a, Trinn 1: En løsning av (1R,2S,5R)-tert-butyl-2-(benzyloksykarbonyl-amino)-7-okso-6-aza-bicyklo[3.2.1]oktan-6-karboksylat (9,6 g, 0,025 mmol) i metanol ble behandlet med 2,5 g 10%Pd/C og hydrogenert ved 3,85 kg/cm<2>H2i en Parr-shaker natten over. Blandingen ble filtrert og filtratet ble konsentrert i vakuum, hvilket ga en olje bestående av en blanding av (1R,2S,5R)-metyl 2-amino-5-(tert-butoksy-karbonylamino)-cykloheksankarboksylat og (1R,2S,5R)-tert-butyl 2-amino-7-okso-6-aza-bicyklo[3.2.1]oktan-6-karboksylat. Denne ble anvendt uten ytterligere rensning. LCMS fant to topper: (M + H)<+>= 273 og (M + H - BOC)<+>=141. Eksempel 12a, Trinn 2: En løsning av rått amin fra trinn 1 ovenfor i CH2CI2ble behandlet med CBZ-L-Met (8,49 g, 0,03 mol), EDCI (5,7 g, 0,03 mol), HOBT (4,1 g, 0,03 mol), Et3N (3,0 g 0,03 mol) og den resulterende reaksjonsløsning ble omrørt natten over ved romtemperatur. Løsningen ble vasket med vann, saltløsning, tørket (MgSCv), filtrert og konsentrert i vakuum og residuet ble kromatografert på silikagel (50- 70% etylacetat/heksan), hvilket ga 5,5 gram (40% utbytte) av (1R,2S,5R)-metyl 2-((R)-2-(benzyloksy-karbonylamino)-3-(metyltio)propanamido)-5-(tert-butoksykarbonyl-amino)cykloheksankarboksylat som et fast stoff. MS funnet: (M + H)<+>= 538.
Eksempel 12a, Trinn 3: En løsning av (1R,2S,5R)-metyl-2-((R)-2-(benzyloksykarbonylamino)-3-(metyltio)propanamido)-5-(tert-butoksykarbonylamino)-cykloheksankarboksylat i Mel (og minimal mengde av CH2CI2) ble omrørt 24 timer ved romtemperatur før den ble konsentrert i vakuum. Residuet ble utgnidd med heksan og den resulterende suspensjonen ble konsentrert; dette ble gjentatt flere ganger, hvilket ga 7 g av saltet som et hvitt, fast stoff. MS funnet: (M + H)<+>= 552,2. Dette materialet ble oppløst i DMF (75 ml) og løsningen ble tilsatt CS2CO3(6,6 g, 20 mmol) og omrørt ved romtemperatur i 20 timer. Reaksjonsblandingen ble hellet i en blanding av is/1 N HCI under omrøring og ble deretter ytterligere fortynnet med vann (total volum 1 L). Det faste stoffet som utfelte ble filtrert og lufttørket, hvilket ga 1,6 g (30% utbytte) av (1R,2S,5R)-metyl 2-((S)-3-(benzyloksykarbonylamino)-2-oksopyrrolidin-1-yl)-5-(tert-butoksy-karbonylamino)-cykloheksankarboksylat som ble anvendt uten ytterligere rensning. MS funnet: (M + H)<+>= 490,3.
Eksempel 12a, Trinn 4: En løsning av (1R,2S,5R)-metyl-2-((S)-3-(benzyloksykarbonylamino)-2-oksopyrrolidin-1-yl)-5-(tert-butoksykarbonylamino)-cykloheksankarboksylat i CH2CI2(10 ml) ble behandlet med TFA (15 ml) og omrørt ved romtemperatur i 2 timer. Reaksjonsblandingen ble konsentrert i vakuum og residuet oppløst i CH2CI2og vasket med NaHC03(Vandig), saltløsning og tørket over MgSCv Løsningen ble filtrert og konsentrert i vakuum, hvilket ga 0,75 g (59%) av (1 R,2S,5R)-metyl- 5-amino-2-((S)-3-(benzyloksykarbonylamino)-2-oksopyrrolidin-1-yl)cykloheksankarboksylat som et hvitt, fast stoff. MS funnet: (M + H)<+>= 390,3.
Eksempel 12a, Trinn 5: En løsning av (1R,2S,5R)-metyl 5-amino-2-((S)-3-(benzyloksykarbonylamino)-2-oksopyrrolidin-1-yl)cykloheksankarboksylat fra trinn 4 (0,75 g, 1,9 mmol) i CH2CI2(10 ml) ble behandlet med aceton (1 ml) og NaBH(OAc)3(0,85 g, 4 mmol) og omrørt ved romtemperatur i 6 timer. En løsning av 37% vandig formaldehyd (2 ml) ble tilsatt og omrørt ved romtemperatur natten over. Løsningen ble fortynnet med CH2CI2(50 ml) og vasket med 1N NaOH, vann, saltløsning, konsentrert i vakuum og residuet kromatografert (1:9:90 NH4OH:MeOH:CH2CI2), hvilket ga 0,4 g (50%) av (1 R,2S,5R)-metyl 2-((S)-3-(benzyloksykarbonylamino)-2-oksopyrrolidin-1 -yl)-5-(isopropyl(metyl)amino)-cykloheksankarboksylat som et hvitt skum. MS funnet: (M + H)<+>= 446,3.
Eksempel 12a, Trinn 6: En løsning av (1R,2S,5R)-metyl-2-((S)-3-(benzyloksykarbonylamino)-2-oksopyrrolidin-1-yl)-5-(isopropyl(metyl)amino)-cykloheksankarboksylat (0,6 g, 1,3 mmol) i metanol ble behandlet med 150 mg 10% Pd/C og hydrogenert ved 3,85 kg/cm<2>H2i en Parr-shaker natten over. Katalysatoren ble filtrert og filtratet konsentrert i vakuum, hvilket ga 0,4 g (1 R,2S,5R)-metyl-2-((S)-3-amino-2-oksopyrrolidin-1 -yl)-5-(isopropyl(metyl)amino)cykloheksankarboksylat som et hvitt, fast stoff. Dette ble anvendt uten ytterligere rensning. MS funnet: (M + H)<+>= 312,3.
Eksempel 12a. Trinn 7: En løsning av (1R,2S,5R)-metyl-2-((S)-3-amino-2-oksopyrrolidin-1-yl)-5-(isopropyl(metyl)amino)-cykloheksankarboksylat (50 mg, 0,16 mmol), 3-(trifluormetyl)benzosyre (38 mg, 0,20 mol), EDCI (38 mg, 0,20 mmol), HOBT (27 mg, 0,20 mmol) og Et3N (20 mg 0,20 mmol) i CH2CI2ble omrørt natten over ved romtemperatur. Løsningen ble vasket med vann og saltløsning, konsentrert i vakuum og residuet kromatografert på silikagel
(3%-5%-10% (NH4OH/MeOH)/ CH2CI2), hvilket ga 30 mg av tittelproduktet som et hvitt, fast stoff. MS funnet: (M + H)<+>= 484,25
Eksempel 12b: Syntese av (1 R,2S,5R)-metyl 5-(tert-butylamino)-2-((S)-2-okso-3-(3-(trifluormetyl)benzamido)pyrrolidin-1-yl)cykloheksankarboksylat
Eksempel 12b, Trinn 1: En løsning av benzyl-(1R,2S,5R)-7-okso-6-oksa-bicyklo[3.2.1]oktan-2-ylkarbamat (20 g, 72,6 mmol) i etylacetat (125 ml) ble behandlet med 1,3 g 10%Pd/C og hydrogenert natten over ved 3,85 kg/cm<2>H2i en Parr-shaker natten over. Katalysatoren ble filtrert og filtratet konsentrert i vakuum, hvilket ga 10,2 g (100%) av (1 R,2S,5R)-2-amino-6-oksa-bicyklo[3.2.1]oktan-7-on som en olje. Denne ble anvendt uten ytterligere rensning. MS funnet: (M + H)<+>= 142,06.
Eksempel 12b, Trinn 2: En løsning av (1R,2S,5R)-2-amino-6-oksa-bicyklo-[3.2.1]oktan-7-on (10,2 g, 72,6 mmol) fra trinn 1 ovenfor i CH2CI2ble behandlet med CBZ-L-Met (22,7 g, 80 mmol), EDCI (15,3 g, 80 mmol), HOBT (10,8 g, 80 mmol), Et3N (8,1 g 80 mmol) og den resulterende reaksjonsløsning ble omrørt natten over ved romtemperatur. Løsningen ble vasket med vann, saltløsning, tørket (MgS04), filtrert og konsentrert i vakuum, hvilket ga 29,5 gram (100% utbytte) benzyl-(R)-3-(metyltio)-1-okso-1-((1R,2S,5R)-7-okso-6-oksa-bicyklo[3.2.1]oktan-2-ylamino)propan-2-ylkarbamat som et fast stoff. Dette ble anvendt uten ytterligere rensning.
MS funnet: (M + H)<+>= 407,3.
Eksempel 12b. Trinn 3: En løsning av benzyl-(R)-3-(metyltio)-1-okso-1-((1R,2S,5R)-7-okso-6-oksa-bicyklo[3.2.1]oktan-2-ylamino)propan-2-ylkarbamat (29,5 g, 72,6 mmol) i Mel (80 ml og minimal mengde av CH2CI2) ble omrørt 24 timer ved romtemperatur før den ble fortynnet med CH2CI2 og deretter konsentrert i vakuum. Residuet ble utgnidd med heksan og den resulterende suspensjonen ble konsentrert; dette ble gjentatt flere ganger, hvilket ga 40 g av saltet som et hvitt, fast stoff. MS funnet: (M + H)<+>= 421,22. Dette materialet ble oppløst i DMF (150 ml) og løsningen ble tilsatt CS2CO3(47,19 g, 145 mmol) og omrørt ved romtemperatur i 25 timer. Reaksjonsblandingen ble hellet i en blanding av is/1 N HCI under omrøring og deretter ytterligere fortynnet med vann (totalt volum 1 L). Det faste stoffet som ble utfelt ble ekstrahert inn i CH2CI2og vasket med vann og saltløsning. Løsningsmidlet ble fjernet i vakuum og det resulterende faste stoffet omkrystallisert fra etylacetat, hvilket ga 11,3 g (43%) benzyl-(S)-2-okso-1 -
((1R,2S,5R)-7-okso-6-oksa-bicyklo[3.2.1]oktan-2-yl)pyrrolidin-3-ylkarbamat som et lysegult, fast stoff. Moderluten ble konsentrert i vakuum og det resulterende residuet kromatografert, hvilket ga ytterligere 4,5 g (61 % totalt utbytte). MS funnet: (M + H)<+>= 359,24
Eksempel 12b. Trinn 4: En løsning av benzyl-(S)-2-okso-1-((1R,2S,5R)-7-okso-6-oksa-bicyklo[3.2.1]oktan-2-yl)pyrrolidin-3-ylkarbamat (11,3 g, 31,5 mol) i metanol ble behandlet med fast NaHCC>3(4,0 g, 47,6 mol) og omrørt ved romtemperatur i 2 timer. Vann (100 ml) ble tilsatt og blandingen ble ekstrahert inn i CH2CI2. Ekstrakten ble vasket med vann, saltløsning og konsentrert, hvilket ga 12,3 g av en tilsynelatende likevekt-blanding av lakton og ønsket alkoholester (i 40:60 forhold). Denne blandingen ble anvendt uten ytterligere rensning. MS funnet: (M + H)<+>= 391,29.
Eksempel 12b, Trinn 5: En løsning av blandingen av lakton og alkoholester fra trinn 4 ovenfor (12,3 g, 31,5 mol) i aceton ble behandlet med Jones reagens (35 ml) under omrøring ved romtemperatur. Overskudd av reagens ble behandlet med isopropylalkohol og blandingen nøytralisert med mettet NaHC03. Den resulterende blandingen ble fordelt mellom vann og etylacetat og det organiske laget ble vasket med vann og saltløsning. Løsningsmidlet ble fjernet under vakuum og residuet omkrystallisert fra etylacetat hvilket ga, i to porsjoner, 6,6 g (54 %) av (1 R,2S)-metyl 2-((S)-3-(benzyloksykarbonylamino)-2-oksopyrrolidin-1-yl)-5-oksocykloheksankarboksylat. MS funnet: (M + H)<+>= 389,17
Moderluten består hovedsakelig av laktonet, benzyl-(S)-2-okso-1-((1R,2S,5R)-7-okso-6-oksa-bicyklo[3.2.1]oktan-2-yl)pyrrolidin-3-ylkarbamat, som ble resirkulert i trinn 4.
Eksempel 12b. Trinn 6: En løsning av (1 R,2S)-metyl-2-((S)-3-(benzyloksy-karbonylamino)-2-oksopyrrolidin-1-yl)-5-oksocyklo-heksankarboksylat (3,1 g, 8 mmol) i DMSO (7 ml) ble behandlet med t-butylamin (1,75 g, 24 mol) og omrørt i 10 minutter før Ti(i-OPr)4(6,8 g, 24 mol) ble tilsatt og den resulterende blandingen ble omrørt ved romtemperatur i 2,5 timer. Deretter ble NaBH4(0,3 g, 8 mol) tilsatt og omrørt i 1,5 timer før langsom fortynning med metanol (gassutvikling), og den resulterende løsningen ble omrørt ytterligere 1 time. Under kraftig omrøring ble en mettet løsning av NaHC03tilsatt og den resulterende suspensjonen ble filtrert gjennom Celite. Filterkaken ble vasket grundig med CH2CI2mange ganger og de samlede vaskinger ble overført til en separasjonstrakt. Det organiske laget ble separert og vasket med vann og saltløsning, konsentrert og residuet kromatografert på silikagel (5% MeOH/CH2CI2- 8% NH4OH/MeOH/CH2CI2), hvilket ga 3,0 g (80%) av (1R,2S,5R)-metyl 2-((S)-3-(benzyloksykarbonylamino)-2-oksopyrrolidin-1-yl)-5-(tert-butylamino)cykloheksan-karboksylat. MS funnet: (M + H)<+>= 446,30. Også oppnådd ble 400 mg av det isomere (1 R,2S,5S)-metyl-2-((S)-3-(benzyloksykarbonylamino)-2-oksopyrrolidin-1-yl)-5-(tert-butylamino)cykloheksankarboksylat. MS funnet: (M + H)<+>= 446,3.
Eksempel 12b, Trinn 7: En løsning av (1 R,2S,5R)-metyl 2-((S)-3-(benzyloksykarbonylamino)-2-oksopyrrolidin-1-yl)-5-(tert-butylamino)-cykloheksankarboksylat (2,42 g, 5,43 mmol) i metanol ble behandlet med 600 mg 10% Pd/C og hydrogenert ved 3,85 kg/cm<2>H2i en Parr-shaker natten over. Katalysatoren ble filtrert og filtratet konsentrert i vakuum, hvilket ga 1,64 g (1 R,2S,5R)-metyl-2-((S)-3-amino-2-oksopyrrolidin-1-yl)-5-( tert-butylamino)-cykloheksankarboksylat som et hvitt, fast stoff. Dette ble anvendt uten ytterligere rensning.
MS funnet: (M + H)<+>= 312,32.
Eksempel 12b, Trinn 8: En løsning av (1R,2S,5R)-metyl-2-((S)-3-amino-2-oksopyrrolidin-1-yl)-5-(tert-butylamino)-cykloheksankarboksylat (56 mg, 0,18 mmol), 3-(trifluormetyl)benzosyre (42 mg, 0,22 mol), EDCI (42 mg, 0,22 mmol), HOBT (30 mg, 0,22 mmol) og Et3N (22 mg 0,20 mmol) i CH2CI2ble omrørt natten over ved romtemperatur. Løsningen ble vasket med vann og saltløsning, konsentrert i vakuum og residuet kromatografert på silikagel (3%-5%-10% (NH4OH/MeOH)/ CH2CI2), hvilket ga 34 mg av tittelproduktet, (1R,2S,5R)-metyl-5-(tert-butylamino)-2-((S)-2-okso-3-(3-(trifluormetyl)-benzamido)pyrrolidin-1-yl)cykloheksankarboksylat, som et hvitt, fast stoff. MS funnet: (M + H)<+>= 484,24.
Eksempel 12c: Syntese av (1R,2S,5R)-metyl-5-(tert-butyl(metyl)amino)-2-((S)-2-okso-3-(3-(trifluormetyl)-benzamido)pyrrolidin-1-yl)cykloheksankarboksylat
Eksempel 12c, Trinn 1: En løsning av (1R,2S,5R)-metyl-2-((S)-3-(benzyloksykarbonylamino)-2-oksopyrrolidin-1-yl)-5-(tert-butylamino)cykloheksankarboksylat (460 mg, 1,0 mol) (fra Eksempel 12b, Trinn 6 ovenfor) i CH2CI2ble behandlet med en løsning av 37% vandig formaldehyd (1 ml) og NaBH(OAc)3(436 mg, 2,0 mol) og omrørt ved romtemperatur natten over. Løsningen ble fortynnet med CH2CI2(50 ml) og vasket med 1N NaOH, vann, saltløsning, konsentrert i vakuum og residuet kromatografert (1:9:90 NH4OH:MeOH:CH2CI2), hvilket ga 330 mg (70%) av (1R,2S,5R)-metyl-2-((S)-3-(benzyloksykarbonylamino)-2-oksopyrrolidin-1-yl)-5-(tert-butyl(metyl)amino)-cykloheksankarboksylat.
MS funnet: (M + H)<+>= 460,49
Eksempel 12c, Trinn 2: En løsning av (1R,2S,5R)-metyl-2-((S)-3-(benzyloksykarbonylamino)-2-oksopyrrolidin-1-yl)-5-(tert-butyl(metyl)amino)cykloheksankarboksylat (330 mg, 0,65 mmol) i metanol ble behandlet med 100 mg 10% Pd/C og hydrogenert ved 3,85 kg/cm<2>H2i en Parr-shaker natten over. Katalysatoren ble filtrert og filtratet konsentrert i vakuum, hvilket ga 200 mg (1R,2S,5R)-metyl-2-((S)-3-amino-2-oksopyrrolidin-1-yl)-5-(tert-butyl(metyl)amino)-cykloheksankarboksylat som et hvitt, fast stoff. Dette ble anvendt uten ytterligere rensning. MS funnet: (M + H)<+>= 326,50
Eksempel 12c, Trinn 3: En løsning av (1R,2S,5R)-metyl-2-((S)-3-amino-2-oksopyrrolidin-1 -yl)-5-(tert-butyl(metyl)amino)-cykloheksankarboksylat (58 mg, 0,18 mmol), 3-(trifluormetyl)benzosyre (42 mg, 0,22 mol), EDCI (30 mg, 0,21 mmol), HOBT (30 mg, 0,21 mmol) og Et3N (21 mg 0,21 mmol) i CH2CI2ble omrørt natten over ved romtemperatur. Løsningen ble vasket med vann og saltløsning, konsentrert i vakuum og residuet kromatografert på silikagel (3%-5%-10% (NH4OH/MeOH)/ CH2CI2), hvilket ga 34 mg av tittelproduktet, (1 R,2S,5R)-metyl 5-(tert-butyl(metyl)amino)-2-((S)-2-okso-3-(3-(trifluormetyl)-benzamido)pyrrolidin-1-yl)cykloheksankarboksylat, som et hvitt, fast stoff. MS funnet: (M + H)<+>= 498,40.
Eksempel 12d: Syntese av (1 R,2S,5R)-metyl 5-(isopropyl(metyl)amino)-2-((S)-2-okso-3-(6-(trifluormetyl)kinazolin-4-ylamino)pyrrolidin-1-yl)cykloheksankarboksylat
Eksempel 12d. Trinn 1: En løsning av (1R,2S,5R)-metyl-2-((S)-3-amino-2-oksopyrrolidin-1-yl)-5-(isopropyl(metyl)amino)-cykloheksankarboksylat (50 mg, 0,16 mol), 4-klor-6-(trifluormetyl)kinazolin (48 mg, 0,20 mol) og Et3N (100 mg, 1,0 mol) i EtOH (2 ml) ble satt til et mikrobølge-reaksjonsrør, lukket og oppvarmet i en mikrobølgeovn ved 100°C i 60 minutter. Reaksjonsblandingen ble konsentrert i vakuum og residuet kromatografert på silikagel (3%-5%
(NH4OH/MeOH)/CH2CI2), hvilket ga 25 mg av tittelproduktet, (1R,2S,5R)-metyl-5-(isopropyl(metyl)amino)-2-((S)-2-okso-3-(6-(trifluormetyl)kinazolin-4-ylamino)pyrrolidin-1-yl)cykloheksankarboksylat, som et hvitt, fast stoff. MS funnet: (M + H)<+>= 508,24.
Eksempel 12bh: Syntese av (1 R,2S,5S)-metyl 5-(tert-butylamino)-2-((S)-2-okso-3-(3-(trifluormetyl)-benzamido)pyrrolidin-1-yl)cykloheksankarboksylat
Eksempel 12bh, Trinn 1: En løsning av (1R,2S,5S)-metyl-2-((S)-3-(benzyloksykarbonylamino)-2-oksopyrrolidin-1-yl)-5-(tert-butylamino)cykloheksankarboksylat (200 mg, 0,4 mmol, oppnådd i Eksempel 12b, Trinn 6 ovenfor), i metanol ble behandlet med 60 mg 10% Pd/C og hydrogenert ved 3,85 kg/cm<2>H2i en Parr-shaker natten over. Katalysatoren ble filtrert og filtratet konsentrert i vakuum, hvilket ga 130 mg av (1R,2S,5S)-metyl-2-((S)-3-amino-2-oksopyrrolidin-1-yl)-5-(tert-butylamino)-cykloheksankarboksylat som et hvitt, fast stoff. Dette ble anvendt uten ytterligere rensning. MS funnet: (M + H)<+>= 312,3.
Eksempel 12bh. Trinn 2: En prøve av (1R,2S,5S)-metyl 2-((S)-3-amino-2-oksopyrrolidin-1-yl)-5-( tert-butylamino)-cykloheksankarboksylat fikk gjennomgå prosessen beskrevet i Eksempel 12b, Trinn 8 for å gi tittelforbindelsen, (1R,2S,5S)-metyl-5-(tert-butylamino)-2-((S)-2-okso-3-(3-(trifluormetyl)-benzamido)pyrrolidin-1-yl)cykloheksankarboksylat, som et hvitt, fast stoff etter "flash" kromatografi. MS funnet: (M + H)<+>= 484,2.
Eksempler 13a - 13f
Eksempel 13a: Syntese av (1S,2S,5R)-metyl-5-(isopropyl(metyl)amino)-2-((S)-2-okso-3-(3-(trifluormetyl)benzamido)pyrrolidin-1-yl)cykloheksankarboksylat
Eksempel 13a, Trinn 1 ( Isomerisering av cis- ester til den tilsvarende trans-ester): Til en løsning av (1R,2S,5R)-metyl-2-((S)-3-(benzyloksykarbonylamino)-2-oksopyrrolidin-1-yl)-5-(tert-butoksykarbonylamino)-cykloheksankarboksylat (281 mg, 0,573 mmol, se Eksempel 12a, Trinn 3) i vannfri DMF ble satt cesiumkarbonat (747 mg, 2,29 mmol) og blandingen ble omrørt i 16 timer ved romtemperatur. Ved slutten av omrøringen ble blandingen hellet i vann og ekstrahert med EtOAc (3x). De samlede ekstrakter ble vasket med vann, tørket (Na2S04), filtrert og konsentrert i vakuum. Residuet ble renset ved "flash" kromatografi på silikagel med eluering med EtOAc, hvilket ga ren trans-isomer, (1S,2S,5R)-metyl-2-((S)-3-(benzyloksykarbonyl)amino-2-oksopyrrolidin-1-yl)-5-(tert-butoksykarbonyl)amino-cykloheksankarboksylat (214 mg) som en olje.
Eksempel 13a. Trinn 2: Til en løsning av (1S,2S,5R)-metyl-2-((S)-3-(benzyloksykarbonyl)amino-2-oksopyrrolidin-1-yl)-5-(tert-butoksykarbonyl)amino-cykloheksankarboksylat (677 mg, 1,383 mmol) i CH2CI2(7 ml) ble satt trifluoreddiksyre (1,07 ml, 13,83 mmol) og blandingen ble omrørt i 75 min ved romtemperatur. Syre og løsningsmiddel ble avdampet og residuet ble tørket under vakuum, hvilket ga trifluoreddiksyresaltet av (1 S,2S,5R)-metyl 5-amino-2-((S)-3-(benzyloksykarbonyl)amino-2-oksopyrrolidin-1-yl)cykloheksankarboksylat som en olje.
Eksempel 13a, Trinn 3: En løsning av råproduktet i Trinn 2 og aceton (0,96 ml, 13,1 mmol) i MeOH (8 ml) ble omrørt i 20 min ved romtemperatur og ble tilsatt natrium-triacetoksyborhydrid (880 mg, 4,15 mmol). Etter omrøring i 2,5 timer ved romtemperatur ble tilsatt 37% vandig HCHO (1 ml) og blandingen ble omrørt i 1 time. Deretter ble ytterligere natrium-triacetoksyborhydrid (440 mg, 2,07 mmol) tilsatt og blandingen ble videre omrørt i ytterligere 3 timer. Reaksjonen ble stanset med mettet Na2C03og produktet ble ekstrahert med EtOAc (3x). De samlede ekstrakter ble vasket med saltløsning, tørket (Na2S04), filtrert og konsentrert i vakuum. Massespektrum av råproduktet viste at produktet hovedsakelig var en blanding av (1S,2S,5R)-metyl-2-((S)-3-(benzyloksykarbonyl)amino-2-oksopyrrolidin-1-yl)-5-(isopropylamino)cykloheksankarboksylat og (1 S,2S,5R)-metyl-2-((S)-3-(benzyloksykarbonyl)amino-2-oksopyrrolidin-1-yl)-5-(dimetylamino)cykloheksankarboksylat. Produktet ble gjenoppløst i CH2CI2(8 ml) og ble tilsatt 37% vandig HCHO (1 ml). Blandingen ble omrørt i 30 min og ble tilsatt natrium-triacetoksyborhydrid (660 mg, 3,1 mmol). Deretter ble den fortsatt omrørt i 16 timer og ble opparbeidet som ovenfor. Residuet etter konsentrasjon ble renset ved "flash" kromatografi på silikagel med eluering med 0,5:4,5:95 cNH40H-MeOH-CH2Cl2fulgt av 0,7:6,3:93 cNh^OH-MeOH-CH2CI2for å gi (1S,2S,5R)-metyl-2-((S)-3-(benzyloksykarbonyl)-2-oksopyrrolidin-1-yl)amino-5-(isopropyl(metyl)amino)cykloheksankarboksylat (224,4 mg), MS funnet: (M+H)<+>= 446,2 og (1S,2S,5R)-metyl-2-((S)-3-(benzyloksykarbonyl)amino-2-oksopyrrolidin-1-yl)-5-(dimetylamino)cykloheksankarboksylat (238 mg), MS funnet: (M+H)<+>= 418,2.
Eksempel 13a, Trinn 4: Ved metodene beskrevet i Eksempel 6a, Trinn 5, ble (1S,2S,5R)-metyl-2-((S)-3-(benzyloksykarbonyl)-2-oksopyrrolidin-1-yl)amino-5-(isopropyl(metyl)amino)cykloheksankarboksylat (224 mg) omdannet til (1S,2S,5R)-metyl 2-((S)-3-amino-2-oksopyrrolidin-1-yl)-5-(isopropyl(metyl)amino)cykloheksankarboksylat (134 mg).
Eksempel 13a, Trinn 5: Ved metodene beskrevet i Eksempel 6c, ble (1S,2S,5R)-metyl 2-((S)-3-amino-2-oksopyrrolidin-1-yl)-5-(isopropyl(metyl)amino)cykloheksankarboksylat (33,5 mg) omdannet til tittelforbindelsen (1S,2S,5R)-metyl-5-(isopropyl(metyl)amino)-2-((S)-2-okso-3-
(3-(trifluormetyl)benzamido)pyrrolidin-1-yl)cykloheksankarboksylat (19,3 mg). MS funnet: (M+H)<+>= 484,4.
Eksempel 13d: Syntese av (1S,2S,5R)-etyl-2-((S)-3-(2-(4-klorfenyl)furan-5-karboksamido)-2-oksopyrrolidin-1-yl)-5-(isopropyl(metyl)amlno)cykloheksankarboksylat
Eksempel 13d, Trinn 1: En løsning av (1R,2S,5R)-tert-butyl-2-((S)-3-(benzyloksykarbonylamino)-2-oksopyrrolidin-1-yl)-7-okso-6-aza-bicyklo[3.2.1]oktan-6-karboksylat (0,80 g, 1,75 mol) i EtOH ble behandlet med NaH (84 mg, 2,1 mol) porsjonsvis under omrøring ved romtemperatur. Etter 10 minutters omrøring ble reaksjonsblandingen fortynnet med vann og ekstrahert inn i CH2CI2. Ekstraktene ble vasket med vann og saltløsning, konsentrert og residuet kromatografert på silikagel, hvilket ga 810 mg isomerisert ester (1 S,2S,5R)-etyl-2-((S)-3-(benzyloksykarbonylamino)-2-oksopyrrolidin-1-yl)-5-(tert-butoksykarbonylamino)cykloheksankarboksylat. MS funnet: (M + H)<+>= 504,46; (M + H - BOC)<+>= 404,46.
Eksempel 13d, Trinn 2: En løsning av (1S,2S,5R)-etyl-2-((S)-3-(benzyloksykarbonylamino)-2-oksopyrrolidin-1-yl)-5-(tert-butoksykarbonylamino)cykloheksankarboksylat (810 mg, 1,61 mol) i CH2CI2(10 ml) ble behandlet med TFA (15 ml) og omrørt ved romtemperatur i 2 timer. Reaksjonsblandingen ble konsentrert i vakuum og residuet oppløst i CH2CI2. Løsningen ble konsentrert i vakuum og dette ble gjentatt mange ganger. Den endelige rå (1S,2S,5R)-etyl-5-amino-2-((S)-3-(benzyloksykarbonylamino)-2-oksopyrrolidin-1-yl)cykloheksankarboksylat ble anvendt med ytterligere rensing.
Eksempel 13d, Trinn 3: En løsning av (1S,2S,5R)-etyl-5-amino-2-((S)-3-(benzyloksykarbonylamino)-2-oksopyrrolidin-1-yl)cykloheksankarboksylat fra trinn 2 i CH2CI2(10 ml) ble behandlet med aceton (1 ml) og NaBH(OAc)3(1,7 g, 8 mmol) og omrørt ved romtemperatur natten over. En løsning av 37% vandig formaldehyd (2 ml) ble tilsatt og omrørt ved romtemperatur i 1 time. Løsningen ble fortynnet med CH2CI2(50 ml) og vasket med 1N NaOH, vann, saltløsning, konsentrert i vakuum og residuet kromatografert (4% NH4OH:MeOH:CH2CI2), hvilket ga 540 mg (73%) av (1S,2S,5R)-etyl-2-((S)-3-(benzyloksykarbonylamino)-2-oksopyrrolidin-1-yl)-5-(isopropyl(metyl)amino)-cykloheksankarboksylat som et hvitt skum. MS funnet: (M + H)<+>= 460,51
Eksempel 13d, Trinn 4: En løsning av (1S,2S,5R)-etyl-2-((S)-3-(benzyloksykarbonylamino)-2-oksopyrrolidin-1-yl)-5-(isopropyl(metyl)amino)-cykloheksankarboksylat (530 mg, 1,1 mmol) i metanol ble behandlet med 150 mg 10% Pd/C og hydrogenert ved 3,85 kg/cm<2>H2i en Parr-shaker natten over. Katalysatoren ble filtrert og filtratet konsentrert i vakuum, hvilket ga 360 mg (1S,2S,5R)-etyl-2-((S)-3-amino-2-oksopyrrolidin-1-yl)-5-(isopropyl(metyl)amino)cykloheksankarboksylat. Dette ble anvendt uten ytterligere rensning.
MS funnet: (M + H)<+>= 326,3
Eksempel 13d, Trinn 5: Ved anvendelse av metodene beskrevet i Eksempel 12a, Trinn 7 (og anvendelse av 5-(4-klorfenyl)furan-2-karboksylsyre), ble en prøve av (1S,2S,5R)-etyl-2-((S)-3-amino-2-oksopyrrolidin-1-yl)-5-(isopropyl(metyl)amino)cykloheksankarboksylat omdannet til tittelforbindelsen, (1S,2S,5R)-etyl-2-((S)-3-(2-(4-klorfenyl)furan-5-karboksamido)-2-oksopyrrolidin-1-yl)-5-(isopropyl(metyl)amino)cykloheksankarboksylat. MS funnet: (M + H)+ = 530,4.
Eksempel 13e: Syntese av etyl-3-((1S,2S,5R)-5-(isopropyl(metyl)amino)-2-((S)-2-okso-3-(3-(trifluormetyl)benzamido)pyrrolidin-1-yl)cykloheksyl)propanoat
Eksempel 13e, Trinn 1: En løsning av oksalylklorid (2,0 M i diklormetan, 370 \ xL, 735 \ xmo\) i diklormetan (1,6 ml) ble omrørt ved -78°C. Dimetylsulfoksyd (108 \ xL, 1,51 mmol) ble tilsatt dråpevis over ca. 2 min og blandingen ble omrørt i 35 min. En løsning av tert-butyl-(1R,3R,4S)-4-((S)-3-benzyloksykarbonylamino-2-oksopyrrolidin-1-yl)-3-(hydroksymetyl)cykloheksylkarbamat (219 mg, 475 jimol, Se Eksempel 4a, Trinn 1) i diklormetan (1,5 ml) ble tilsatt og løsningen ble omrørt ved -78^ i 65 min. Trietylamin (215 |xL, 1,54 mmol) ble tilsatt og etter 10 min ble blandingen oppvarmet til 0°C og omrørt i 2 timer. Blandingen ble fortynnet med diklormetan, vasket med mettet vandig ammoniumklorid, deretter med vann og ble tørket over natriumsulfat og konsentrert under vakuum for å gi tert-butyl-(1R,4S)-4-((S)-3-benzyloksykarbonylamino-2-oksopyrrolidin-1-yl)-3-formylcykloheksylkarbamat som et gyldenbrunt glassaktig skum (220 mg). MS funnet: (M+Na)<+>= 482,37.
Eksempel 13e, Trinn 2: Natriumhydrid (60% i mineralolje, 67 mg, 1,66 mmol) ble suspendert i tetrahydrofuran (1 ml) og behandlet dråpevis med trietylfosfonoacetat (330 nL, 1,66 mmol). Etter omrøring i 20 min ble blandingen avkjølt til 0°C og behandlet med en løsning av tert-butyl-(1R,4S)-4-((S)-3-benzyloksykarbonylamino-2-oksopyrrolidin-1-yl)-3-formylcykloheksylkarbamat (220 mg, 475 jimol) i tetrahydrofuran (2 ml). Blandingen ble omrørt ved romtemperatur i 21 timer, og deretter behandlet ved tilsetning av mettet vandig ammoniumklorid. Blandingen ble ekstrahert tre ganger med etylacetat og de samlede organiske faser ble tørket over natriumsulfat og konsentrert. Residuet ble renset ved "flash" kolonnekromatografi på silikagel, under eluering med 3:7 heksan-etylacetat, for å gi en blanding av (E)-etyl-3-((2S,5R)-2-((S)-3-benzyloksykarbonylamino-2-oksopyrrolidin-1-yl)-5-(tert-butoksykarbonyl)cykloheksyl)akrylat og (1 R,2S,5R,7R)-tert-butyl 2-((S)-3-(benzyloksykarbonyl)-2-oksopyrrolidin-1 -yl)-7-(2-etoksy-2-oksoetyl)-6-aza-bicyklo[3.2.1]oktan-6-karboksylat (56 mg) som et hvitt, glassaktig skum. MS funnet: (M+H)<+>= 530,48.
Eksempel 13e, Trinn 3: Ved å følge metoden i eksempel 5a, Trinn 3, ble blandingen av (E)-etyl-3-((2S,5R)-2-((S)-3-benzyloksykarbonylamino-2-oksopyrrolidin-1-yl)-5-(tert-butoksykarbonyl)cykloheksyl)akrylat og
(1 R,2S,5R,7R)-tert-butyl 2-((S)-3-(benzyloksykarbonyl)-2-oksopyrrolidin-1 -yl)-7-(2-etoksy-2-oksoetyl)-6-aza-bicyklo[3.2.1 ]oktan-6-karboksylat fremstilt ovenfor i trinn 2, omdannet til en blanding av etyl-3-((2S,5R)-2-((S)-3-amino-2-oksopyrrolidin-1-yl)-5-(tert-butoksykarbonylamino)cykloheksyl)propanoat og (1R,2S,5R,7R)-tert-butyl-2-((S)-3-amino-2-oksopyrrolidin-1-yl)-7-(2-etoksy-2-oksoetyl)-6-aza-bicyklo[3.2.1]oktan-6-karboksylat (48 mg) som et gråhvitt, fast stoff. MS funnet: (M+H)+ = 398,36, 396,36.
Eksempel 13e, Trinn 4: Ved å følge metodene beskrevet i Eksempel 2a, Trinn 6 og 7, ble blandingen av etyl-3-((2S,5R)-2-((S)-3-amino-2-oksopyrrolidin-1-yl)-5-(tert-butoksykarbonylamino)cykloheksyl)propanoat og (1 R,2S,5R,7R)-tert-butyl 2-((S)-3-amino-2-oksopyrrolidin-1 -yl)-7-(2-etoksy-2-oksoetyl)-6-aza-bicyklo[3.2.1]oktan-6-karboksylat fremstilt i trinn 3 ovenfor (48 mg) omdannet, etter revers fase HPLC og lyofilisering, til TFA-saltet av tittelproduktet, etyl-3-((1S,2S,5R)-5-(isopropyl(metyl)amino)-2-((S)-2-okso-3-(3-(trifluormetyl)benzamido)pyrrolidin-1-yl)cykloheksyl)propanoat, som et hvitt pulver (12 mg). MS funnet: (M+H)<+>= 526,37.
Eksempel 13f: Syntese av 3-((1S,2S,5R)-5-(isopropyl(metyl)amino)-2-((S)-2-okso-3-(3-(trifluormetyl)benzamido)pyrrolidin-1-yl)cykloheksyl)propansyre
Eksempel 13f. Trinn 1: En løsning av etyl-3-((2S,5R)-5-(isopropyl(metyl)amino)-2-((S)-2-okso-3-(3-(trifluormetyl)benzamido)pyrrolidin-1- yl)-cykloheksyl)propanoat-trifluoreddiksyresalt (10 mg, 15 jimol) i tetrahydrofuran (0,5 ml) ble behandlet med en løsning av litiumhydroksyd i vann (1,0 M, 0,5 ml, 0,5 mmol) og blandingen ble omrørt i 18 timer ved romtemperatur. Blandingen ble behandlet med 1,0N HCI (0,5 ml) og konsentrert under vakuum. Residuet ble renset ved revers fase HPLC for å gi TFA-saltet av tittelproduktet, 3-((1S,2S,5R)-5-(isopropyl(metyl)amino)-2-((S)-2- okso-3-(3-(trifluormetyl)benzamido)pyrrolidin-1-yl)cykloheksyl)propansyre, som et hvitt pulver etter lyofilisering (7 mg). MS funnet: (M+H)<+>= 498,41.
Eksempler 15a - 15h
Eksempler 18a og 18b
Eksempel 18a: Syntese av (S)-1-((1R,2S,4S)-4-(isopropyl(metyl)amino)-2-metoksycykloheksyl)-3-(6-(trifluormetyl)kinazolin-4-ylamino)pyrrolidin-2-on
Eksempel 18a, Trinn 1: En løsning av racemisk 4-cis-(benzyloksy)-2-trans-metoksycykloheksanol (3,24 g, se J. Org. Chem. 1990, 55, 4265) og trietylamin (5,73 ml) i diklormetan (35 ml) ble omrørt på et isbad og behandlet dråpevis over ca. 1 min med metansulfonylklorid. Blandingen ble omrørt på et isbad i 2 timer, og deretter behandlet med mettet vandig NH4CI. Lagene ble separert, det organiske laget ble vasket med mettet vandig NaHC03, deretter med saltløsning og ble deretter tørket over Na2S04og konsentrert under vakuum for å gi racemisk 4-cis-(benzyloksy)-2-trans-metoksycykloheksyl metansulfonat som en oransje gummi (4,36 g), anvendt uten ytterligere rensning. MS funnet: (M + H)<+>= 315,1.
Eksempel 18a, Trinn 2: En løsning av racemisk 4-cis-(benzyloksy)-2-trans-metoksycykloheksyl metansulfonat (1,0 g) i dimetylsulfoksyd (12 ml) ble behandlet med natriumazid (1,03 g) og oppvarmet ved 60°C i 16 timer, deretter ved 80°C i 4,5 dager. Blandingen ble avkjølt til romtemperatur, fortynnet med etylacetat og vasket fem ganger med vann og én gang med saltløsning. Løsningen ble tørket over Na2S04og konsentrert under vakuum for å gi racemisk 1-((4-trans-azido-3-trans-metoksycykloheksyloksy)metyl)benzen som en brun olje (756 mg), anvendt uten ytterligere rensning. MS funnet: (M + Na)<+>= 284,5.
Eksempel 18a, Trinn 3: En løsning av racemisk 1-((4-trans-azido-3-trans-metoksycykloheksyloksy)metyl)benzen (750 mg) i etanol (20 ml) ble behandlet med Pearlman's katalysator (20% Pd(OH)2på trekull, 150 mg) og omrørt under en atmosfære av hydrogen (holdt av en hydrogen-fylt ballong) i 2,5 timer. Blandingen ble filtrert gjennom Celite og de faste stoffene ble skyllet med etanol. De samlede filtrater ble konsentrert under vakuum for å gi racemisk 4-trans-(benzyloksy)-2-cis-metoksycykloheksanamin som en olje (678 mg), anvendt uten ytterligere rensning. MS funnet: (M + H)<+>= 236,1.
Eksempel 18a, Trinn 4: En løsning av racemisk 4-trans-(benzyloksy)-2-cis-metoksycykloheksanamin (675 mg) og (S)-2-(tert-butoksykarbonyl)-4-(metyltio)smørsyre (787 mg) i diklormetan (15 ml) ble behandlet med diisopropyletylamin (1,1 ml) og TBTU (1,01 g). Blandingen ble omrørt ved romtemperatur i 3,5 timer, og deretter fortynnet med diklormetan. Blandingen ble vasket med 1,0 M vandig HCI, mettet vandig NaHCC>3og vann, ble deretter tørket over Na2S04og konsentrert under vakuum. Residuet ble renset ved "flash" kolonnekromatografi på silikagel, under eluering med 6:4 volum/volum heksan-etylacetat, for å gi en blanding av tert-butyl-(S)-1-((1S,2R,4S)-4-(benzyloksy)-2-metoksycykloheksylamino)-4-(metyltio)-1-oksobutan-2-ylkarbamat og tert-butyl-(S)-1-((1 R,2S,4R)-4-(benzyloksy)-2-metoksycykloheksylamino)-4-(metyltio)-1 -oksobutan-2-ylkarbamat som et klebrig hvitt fast stoff (893 mg). MS funnet: (M + H)<+>= 467,4.
Eksempel 18a, Trinn 5: En løsning av blandingen av tert-butyl-(S)-1-((1S,2R,4S)-4-(benzyloksy)-2-metoksycykloheksylamino)-4-(metyltio)-1-oksobutan-2-ylkarbamat og tert-butyl-(S)-1-((1 R,2S,4R)-4-(benzyloksy)-2-metoksycykloheksylamino)-4-(metyltio)-1-oksobutan-2-ylkarbamat fra Eksempel 18a, Trinn 4 (870 mg) i diklormetan (2 ml) ble behandlet med jodmetan (20 ml) og løsningen ble omrørt ved romtemperatur i 24 timer. Blandingen ble konsentrert under vakuum, og ble deretter oppløst i frisk diklormetan og konsentrert under vakuum. Oppløsning i diklormetan og konsentrasjon ble gjentatt fire ganger til for å gi en blanding av (S)-4-((1S,2R,4S)-4-(benzyloksy)-2-metoksycykloheksylamino)-3-(tert-butoksykarbonylamino)-4-oksobutan-1 -dimetylsulfoniumjodid og (S)-4-((1R,2S,4R)-4-(benzyloksy)-2-metoksycykloheksylamino)-3-(tert- butoksykarbonylamino)-4-oksobutan-1-dimetylsulfoniumjodid som et blekt gulaktig pulver (1,019 g). MS funnet: (M - Me2S)<+>= 419,4.
Eksempel 18a, Trinn 6: En løsning av blandingen av (S)-4-((1S,2R,4S)-4-(benzyloksy)-2-metoksycykloheksylamino)-3-(tert-butoksykarbonylamino)-4-oksobutan-1-dimetylsulfoniumjodid og (S)-4-((1 R,2S,4R)-4-(benzyloksy)-2-metoksycykloheksylamino)-3-(tert-butoksykarbonylamino)-4-oksobutan-1-dimetylsulfoniumjodid fra Eksempel 18a, Trinn 5 (1,013 g) i tetrahydrofuran (10 ml) ble omrørt på et isbad og behandlet med NaH (60% i mineralolje, 266 mg). Etter 30 min ble badet fjernet og blandingen ble omrørt ved romtemperatur. Etter 22 timer ble blandingen fortynnet med vann og etylacetat. Lagene ble separert og det vandige laget ble ekstrahert tre ganger med etylacetat. De samlede organiske lag ble tørket over Na2SC>4 og konsentrert under vakuum. Residuet ble renset ved "flash" kolonnekromatografi på silikagel, under eluering med 35:65 volum/volum heksan-etylacetat, for å gi en blanding av tert-butyl-(S)-1-((1S,2R,4S)-4-(benzyloksy)-2-metoksycykloheksyl)-2-oksopyrrolidin-3-ylkarbamat og tert-butyl-(S)-1-((1R,2S,4R)-4-(benzyloksy)-2-metoksycykloheksyl)-2-oksopyrrolidin-3-ylkarbamat som et hvitt glassaktig skum (386 mg). MS funnet: (M + H)<+>= 419,4.
Eksempel 18a, Trinn 7: Ved å følge metoden i eksempel 18a, Trinn 3, ble blandingen av tert-butyl-(S)-1-((1S,2R,4S)-4-(benzyloksy)-2-metoksycykloheksyl)-2-oksopyrrolidin-3-ylkarbamat og tert-butyl (S)-1-((1R,2S,4R)-4-(benzyloksy)-2-metoksycykloheksyl)-2-oksopyrrolidin-3-ylkarbamat fra Eksempel 18a, Trinn 6 (374 mg) omdannet, i to porsjoner, til en blanding av tert-butyl-(S)-1-((1S,2R,4S)-4-hydroksy-2-metoksycykloheksyl)-2-oksopyrrolidin-3-ylkarbamat og tert-butyl-(S)-1-((1R,2S,4R)-4-hydroksy-2-metoksycykloheksyl)-2-oksopyrrolidin-3-ylkarbamat som et hvitt glassaktig skum (293 mg). MS funnet: (M + H)<+>= 329,2. Eksempel 18a, Trinn 8: Ved å følge metoden i eksempel 18a, Trinn 1, ble blandingen av tert-butyl-(S)-1-((1 S,2R,4S)-4-hydroksy-2-metoksycykloheksyl)-2-oksopyrrolidin-3-ylkarbamat og tert-butyl-(S)-1-((1 R,2S,4R)-4-hydroksy-2-metoksycykloheksyl)-2-oksopyrrolidin-3-ylkarbamat fra Eksempel 18a, Trinn 7 (165 mg) omdannet til en blanding av (1S,3R,4S)-4-((S)-3-(tert-butoksykarbonylamino)-2-oksopyrrolidin-1-yl)-3-metoksycykloheksyl-metansulfonat og (1 R,3S,4R)-4-((S)-3-(tert-butoksykarbonylamino)-2-oksopyrrolidin-1-yl)-3-metoksycykloheksyl-metansulfonat som et lyst gyldenbrunt-oransje glassaktig skum (198 mg). MS funnet: (M + H)<+>= 407,1.
Eksempel 18a, Trinn 9: Ved å følge metoden i eksempel 18a, Trinn 2, ble blandingen av (1 S,3R,4S)-4-((S)-3-(tert-butoksykarbonyl)-2-oksopyrrolidin-1-yl)-3-metoksycykloheksyl-metansulfonat og (1 R,3S,4R)-4-((S)-3-(tert-butoksykarbonyl)-2-oksopyrrolidin-1-yl)-3-metoksycykloheksyl-metansulfonat fra Eksempel 18a, Trinn 8 (193 mg) omdannet til en blanding av tert-butyl-(S)-1-((1S,2R,4R)-4-azido-2-metoksycykloheksyl)-2-oksopyrrolidin-3-ylkarbamat og tert-butyl-(S)-1-((1 R,2S,4S)-4-azido-2-metoksycykloheksyl)-2-oksopyrrolidin-3-ylkarbamat som et fast stoff (145 mg). MS funnet: (M + Na)<+>= 376,4.
Eksempel 18a, Trinn 10: Ved å følge metoden i eksempel 18a, Trinn 3, ble blandingen av tert-butyl-(S)-1-((1 S,2R,4R)-4-azido-2-metoksycykloheksyl)-2-oksopyrrolidin-3-ylkarbamat og tert-butyl-(S)-1-((1 R,2S,4S)-4-azido-2-metoksycykloheksyl)-2-oksopyrrolidin-3-ylkarbamat fra Eksempel 18a, Trinn 9 (145 mg) omdannet til en blanding av tert-butyl-(S)-1-((1S,2R,4R)-4-amino-2-metoksycykloheksyl)-2-oksopyrrolidin-3-ylkarbamat og tert-butyl-(S)-1-((1R,2S,4S)-4-amino-2-metoksycykloheksyl)-2-oksopyrrolidin-3-ylkarbamat som et mørkebrunt glass (145 mg) anvendt uten ytterligere rensning. MS funnet: (M + H)<+>= 328,2.
Eksempel 18a, Trinn 11: En løsning av blandingen av tert-butyl-(S)-1-((1S,2R,4R)-4-amino-2-metoksycykloheksyl)-2-oksopyrrolidin-3-ylkarbamat og tert-butyl-(S)-1-((1R,2S,4S)-4-amino-2-metoksycykloheksyl)-2-oksopyrrolidin 3-ylkarbamat fra Eksempel 18a, Trinn 10 (145 mg) i 1,2-dikloretan (2 ml) ble behandlet sekvensielt med aceton (90 \ iL), eddiksyre (117 \ iL) og natrium-triacetoksyborhydrid (348 mg). Blandingen ble omrørt ved romtemperatur i 5 timer, og ble deretter behandlet med 37% vandig formaldehyd (153 \ iL) og omrørt videre ved romtemperatur. Etter 17 timer ble blandingen behandlet med mettet vandig NaHCOa, omrørt i 10 min og ekstrahert fem ganger med etylacetat. De samlede organiske lag ble tørket over Na2SC>4og konsentrert. Residuet ble oppløst i diklormetan, filtrert gjennom Celite og konsentrert for å gi en rå blanding av tert-butyl-(S)-1-((1S,2R,4R)-4-(isopropyl(metyl)amino)-2-metoksycykloheksyl)-2-oksopyrrolidin-3-ylkarbamat og tert-butyl-(S)-1-((1R,2S,4S)-4-(isopropyl(metyl)amino)-2-metoksycykloheksyl)-2-oksopyrrolidin-3-ylkarbamat (67 mg), anvendt uten ytterligere rensning. MS funnet: (M + H)<+>= 384,5.
Eksempel 18a, Trinn 12: En løsning av blandingen av tert-butyl-(S)-1-((1S,2R,4R)-4-(isopropyl(metyl)amino)-2-metoksycykloheksyl)-2-oksopyrrolidin-3-ylkarbamat og tert-butyl-(S)-1-((1R,2S,4S)-4-(isopropyl(metyl)amino)-2-metoksycykloheksyl)-2-oksopyrrolidin-3-ylkarbamat fra Eksempel 18a, Trinn 11 (67 mg) i diklormetan (2 ml) ble behandlet med trifluoreddiksyre (2 ml). Etter å ha stått i 1 time ved romtemperatur, ble blandingen konsentrert under vakuum, tatt opp i toluen og konsentrert igjen under vakuum. Residuet ble oppløst i vann og lyofilisert for å gi en blanding av bis-trifluoreddiksyresaltet av (S)-3-amino-1-((1S,2R,4R)-4-(isopropyl(metyl)amino)-2-metoksycykloheksyl)pyrrolidin-2-on og bis-trifluoreddiksyresaltet av (S)-3-amino-1-((1R,2S,4S)-4-(isopropyl(metyl)amino)-2-metoksycykloheksyl)pyrrolidin-2-on som et pulveraktig glass (94 mg), anvendt uten ytterligere rensning. MS funnet: (M + H)<+>= 284,3.
Eksempel 18a, Trinn 13: En løsning av blandingen av bis-trifluoreddiksyresaltet av (S)-3-amino-1-((1S,2R,4R)-4-
(isopropyl(metyl)amino)-2-metoksycykloheksyl)pyrrolidin-2-on og bis-trifluoreddiksyresaltet av (S)-3-amino-1-((1R,2S,4S)-4-(isopropyl(metyl)amino)-2-metoksycykloheksyl)pyrrolidin-2-on fra eksempel 18a, Trinn 12 (94 mg), 4-klor-6-trifluormetylkinazolin (81 mg), trietylamin (97 \ iL) og etanol (1 ml) ble oppvarmet ved tilbakeløp i 2,5 timer, og ble deretter avkjølt til romtemperatur og konsentrert under vakuum. Residuet ble renset ved revers fase HPLC. Materialet i det først eluerte av de to produkt-topper ble isolert ved lyofilisering for å gi forbindelsen betegnet som bis-trifluoreddiksyresaltet av tittel-forbindelsen, (S)-1-((1R,2S,4S)-4-(isopropyl(metyl)amino)-2-metoksycykloheksyl)-3-(6-(trifluormetyl)kinazolin-4-ylamino)pyrrolidin-2-on, som et hvitt pulver (15 mg). MS funnet: (M + H)<+>= 480,4.
Eksempel 18b: Syntese av (S)-1-((1S,2R,4R)-4-(isopropyl(metyl)amino)-2-metoksycykloheksyl)-3-(6-(trifluormetyl)kinazolin-4-ylamino)pyrrolidin-2-on
Fra revers fase HPLC rensning av Eksempel 18a, Trinn 13, ble materialet i den andre eluerte av de to produkt-topper isolert ved lyofilisering for å gi en forbindelse betegnet som bis-trifluoreddiksyresaltet av tittelforbindelsen, som et hvitt pulver (9 mg). MS funnet: (M + H)<+>= 480,4.
NYTTE
Forbindelser med formel I er vist å være modulatorer av kjemokinreseptor-aktivitet ved anvendelse av forsøk kjent av fagfolk på området. I dette avsnittet beskrives disse forsøk og deres litteratur-referanse angis. Ved å oppvise aktivitet i disse forsøk for MCP-1 antagonisme, er forbindelser med formel I forventet å være anvendelige ved behandling av humane sykdommer forbundet med kjemokiner og deres kognate reseptorer. Definisjonen av aktivitet i disse forsøk er en forbindelse som demonstrerer en IC50på 30 uM eller lavere konsentrasjon når målt i et spesielt forsøk.
Antagonisme av MCP- 1 binding til human PBMC
(Yoshimura et al., J. Immunol. 1990, 745, 292)
Forbindelser ifølge foreliggende oppfinnelse har aktivitet ved antagonisme av MCP-1-binding til human PBMC (humant perifert blod mononukleære celler) beskrevet her.
Millipore filterplater (#MABVN1250) behandles med 100 ul av bindingsbuffer (0,5% bovint serumalbumin, 20 mM HEPES buffer og 5 mM magnesiumklorid i RPMI 1640 media) i tretti minutter ved romtemperatur. For å måle binding blir 50 ul bindingsbuffer, med eller uten kjent konsentrasjon av forbindelse, kombinert med 50 ul av<12>^-| merket human MCP-1 (hvilket gir en endelig konsentrasjon på 150 pM radioligand) og 50 ul av bindingsbuffer inneholdende 5x10^ celler. Celler anvendt for slike bindingsforsøk kan omfatte humant perifert blod mononukleære celler isolert ved Ficoll-Hypaque gradient-sentrifugering, humane monocytter (Weiner et al., J. Immunol. Methods. 1980, 36, 89) eller THP-1 cellelinje som uttrykker den endogene reseptor. Blandingen av forbindelse, celler og radioligand blir inkubert ved romtemperatur i tretti minutter. Plater blir plassert på en vakuum-manifold, påført vakuum og platene vasket tre ganger med bindingsbuffer inneholdende 0,5M NaCI. Plastskjørtet blir fjernet fra platen, platen får lufttørke, brønnene banket ut og tellet. Prosent hemning av binding blir beregnet ved anvendelse av de totale tellinger oppnådd i fravær av noen konkurrerende forbindelse og bakgrunnsbinding bestemt ved tilsetning av 100 nM MCP-1 istedenfor testforbindelsen.
Antagonisme av MCP- 1- fremkalt kalsium- influks
(Sullivan, et al. Methods Mol. Biol., 114, 125-133 (1999)
Forbindelser ifølge foreliggende oppfinnelse har aktivitet ved antagonisme av MCP-1-fremkalt kalsium-influks-forsøk beskrevet her.
Kalsium-mobilisering blir målt ved anvendelse av den fluorescerende Ca<2+>indikatorfarge, Fluo-3. Celler blir inkubert med 8x10^ celler/ml i fosfat-bufret saltløsning inneholdende 0,1% bovint serumalbumin, 20 mM HEPES buffer, 5 mM glukose, 1 % føtalt bovint serum, 4 uM Fluo-3 AM og 2,5 mM probenecid i 60 minutter ved 37°C. Celler anvendt for slike kalsiumforsøk kan omfatte humane monocytter isolert som beskrevet av Weiner et al., J. Immunol. Methods, 36, 89-97 (1980) eller cellelinjer som uttrykker den endogene CCR2-reseptor så som THP-1 og MonoMac-6. Cellene blir deretter vasket tre ganger i fosfat-bufret saltløsning inneholdende 0,1% bovint serumalbumin, 20 mM HEPES, 5 mM glukose og 2,5 mM probenecid. Cellene blir resuspendert i fosfat-bufret saltløsning inneholdende 0,5% bovint serumalbumin, 20 mM HEPES og 2,5 mM probenecid i en endelig konsentrasjon på 2-4 x 10^ celler/ml. Celler blir platet ut i 96-brønn, mikroplater med sorte vegger (100 ul/brønn) og platene sentrifugert ved 200 x g i 5 minutter. Forskjellige konsentrasjoner av forbindelse blir satt til brønnene (50 ul/brønn) og etter 5 minutter blir 50 ul/brønn av MCP-1 tilsatt, hvilket gir en endelig konsentrasjon på 10 nM. Kalsiummobilisering blir detektert ved anvendelse av en fluorescerende bildeplateleser. Cellemonolaget blir eksitert med en argonlaser (488 nM) og celle-assosiert fluorescens målt i 3 minutter, (hvert sekund de første 90 sekunder og hver 10 sekunder de neste 90 sekunder). Data blir dannet som arbitrære fluorescens-enheter og forandring i fluorescens for hver brønn bestemt som maksimum-minimum differensial. Forbindelse-avhengig hemning blir beregnet i forhold til responsen på MCP-1 alene.
Antagonisme av MCP- 1- fremkalt human PBMC kiemotaksi
(Bacon et al., Brit. J. Pharmacol. 1988, 95, 966)
Forbindelser ifølge foreliggende oppfinnelse har aktivitet ved antagonisme av MCP-1-fremkalt human PBMC kjemotaksi-forsøk beskrevet her.
Neuroprobe MBA96-96-brønn kjemotaksi-kammer, Polyfiltronics MPC 96-brønn plate og Neuroprobe polyvinylpyrrolidon-fri polykarbonat PFD5 8-mikron filtere blir oppvarmet i en 37^ inkubator. Humane perifert blod mononukleære celler (PBMCs) (Boyum et al., Scand. J. Clin. Lab Invest. Suppl. 1968, 97, 31), ny-isolert ved standard ficoll densitet-separerings-metode, blir suspendert i DMEM ved 1 x 10 7 c/ml og oppvarmet ved 37°C. En 60nM løsning av human MCP-1 blir også oppvarmet ved 37°C. Fortynninger av testforbindelser blir laget ved 2x konsentrasjonen nødvendig i DMEM. PBMC-suspensjon og 60nm MCP-1-løsning blir blandet 1:1 i polypropylenrør med forvarmet DMEM med eller uten fortynning av testforbindelsene. Disse blandinger blir oppvarmet i en 37°C rørvarmer. For å starte forsøket, tilsettes MCP-1/forbindelse-blanding til brønnene i Polyfiltronics MPC 96-brønn-platen som er plassert i bunndelen av Neuroprobe kjemotaksi-kammeret. Det omtrentlige volum er 400 ul til hver brønn og det skal være en positiv menisk etter tilsetningen. 8 mikron-filteret blir plassert forsiktig på toppen av 96-brønn-platen, en gummipakning blir festet til bunnen av det øvre kammer og kammeret satt sammen. Et 200 ul volum av cellesuspensjon/forbindelse-blandingen blir satt til de passende brønner av det øvre kammer. Det øvre kammer blir dekket med en plate-forsegler og den sammensatte enhet blir plassert i en 37^ inkubator i 45 minutter. Etter inkubering blir plateforsegleren fjernet og all den gjenværende cellesuspensjon blir aspirert fra. Kammeret blir tatt fra hverandre og filteret forsiktig fjernet. Mens filteret holdes i en 90 grader vinkel, blir ikke-migrerte celler vasket vekk ved anvendelse av en svak strøm av fosfatbufret saltløsning og toppen av filteret tørket med tuppen av en gumminal. Vasken gjentas to ganger til. Filteret blir lufttørket og deretter nedsenket fullstendig i Wright Geimsa stain i 45 sekunder. Filteret blir deretter vasket ved bløting i destillert vann i 7 minutter og deretter 15 sekunder ytterligere vask i friskt destillert vann. Filteret blir igjen lufttørket. Migrerte celler på filteret blir kvantifisert ved visuell mikroskopi.
Pattedyr-kjemokinreseptorer gir et mål for påvirkning eller fremming av immuncelle-funksjon hos et pattedyr, så som et menneske. Forbindelser som hemmer eller fremmer kjemokinreseptor-funksjon er spesielt anvendelige for å modulere immuncelle-funksjon for terapeutiske formål. Følgelig angår foreliggende oppfinnelse forbindelser som er anvendelige for forebygging og/eller behandling av en rekke inflammatoriske, infeksiøse og immunoregulerende lidelser og sykdommer, omfattende astma og allergiske sykdommer, infeksjon av patogene mikrober (som, pr. definisjon, omfatter virus), så vel som autoimmune patologier så som revmatoid artritt og aterosklerose.
For eksempel kan en foreliggende forbindelse som hemmer én eller flere funksjoner til en pattedyr-kjemokinreseptor (f.eks. en human kjemokinreseptor) administreres for å hemme (dvs. redusere eller forhindre) inflammasjon eller infeksiøs sykdom. Som et resultat blir én eller flere inflammatoriske prosesser, så som leukocytt-emigrering, adhesjon, kjemotaksi, exocytose (f.eks. av enzymer, histamin) eller inflammatorisk mediator-frigjøring, hemmet.
Tilsvarende kan en forbindelse som fremmer én eller flere funksjoner til pattedyr-kjemokinreseptor (f.eks. et humant kjemokin) som blir administrert for å stimulere (fremkalle eller forbedre) en immun- eller inflammatorisk respons, så som leukocytt-emigrering, adhesjon, kjemotaksi, exocytose (f.eks. av enzymer, histamin) eller inflammatorisk mediator-frigjøring, resultere i fordelaktig stimulering av inflammatoriske prosesser. For eksempel kan eosinofiler rekrutteres for å bekjempe parasittiske infeksjoner. I tillegg kan behandling av ovennevnte inflammatoriske, allergiske og autoimmune sykdommer også være aktuelt for en foreliggende forbindelse som fremmer én eller flere funksjoner til pattedyr-kjemokinreseptor hvis man antar levering av tilstrekkelig forbindelse til å forårsake tap av reseptor-ekspresjon på celler gjennom induksjon av kjemokinreseptor-internalisering eller levering av forbindelse på en måte som resulterer i feildirigering av migrering av celler.
I tillegg til primater, så som mennesker, kan en rekke andre pattedyr behandles i henhold til metoden ifølge foreliggende oppfinnelse. For eksempel kan pattedyr, omfattende kuer, sauer, geiter, hester, hunder, katter, marsvin, rotter eller andre kveg-, saue-, heste-, hunde-, katte-, gnager- eller muse-arter behandles. Imidlertid kan metoden også praktiseres for andre arter, så som fuglearter. Individet behandlet ved metodene ovenfor er et pattedyr, hann eller hunn, hos hvilket modulering av kjemokinreseptor-aktivitet er ønsket. "Modulering" som anvendt her skal omfatte antagonisme, agonisme, partiell antagonisme og/eller partiell agonisme.
CCR5-binding og funksjonelle forsøk
Celleopprinnelse og cellekultur: En samling av HT1080 celler som stabilt uttrykker endogen CC kjemokinreseptor 5 (CCR5) ble utviklet ved anvendelse av metodene beskrevet av Harrington, Sherf og Rundlett (se US-patenter US 6,361,972 og US 6,410,266). De høyest-uttrykkende kloner ble isolert ved anvendelse av repetitiv strømningscytometri, fulgt av subkloning. Disse celler ble deretter dyrket i 6-brønn skåler med 3 x 105 celler/brønn og transfektert med en DNA-vektor inneholdende kimært HA-merket G-protein Gqi5 (Molecular Devices; 5 mikrogram av linearisert vektor DNA i 15 mikroL av Ex-Gen fra Fermentes ble anvendt for transfeksjonen). To dager etter transfeksjon ble brønnene samlet og platet ut i P100 plater. Syv dager etter plating ble kolonier valgt, ekspandert og analysert for Gqi5-innhold ved Western blot. En klon (betegnet som 3559.1.6) som har høy ekspresjon av Gqi5 (fra transfeksjon) og av CCR5 (endogen) ble valgt og anvendt for forsøkene beskrevet nedenfor. HT1080 celler (klon 3559.1.6) ble dyrket med alfa-MEM supplert med 10% dialysert føtalt bovint serum, 2% penicillin/streptomycin/glutamin og 500 mikrogram/ml hygromycin B (endelig konsentrasjon) ved 37°C med 5% C02i en fuktet atmosfære.
Membranpreparering: En celle-pellet inneholdende 1 x 108 HT1080 celler (klon 3559.1.6) ble resuspendert i 5 ml iskald Membrane Prep Buffer (50 mM HEPES, 5 mM MgCl2, 1 mM CaCl2) og homogenisert ved høy hastighet på en Polytron homogenisator i 20 sek. på is. Homogenatet ble fortynnet med ytterligere 25 ml Membrane Prep Buffer og sentrifugert i 12 min (48,000 x g ved 4°C). Cellepelleten ble resuspendert i 5 ml Membrane Prep Buffer før den ble rehomogenisert som beskrevet tidligere. Homogenatet ble fortynnet med 5 ml Membrane Prep Buffer og undersøkt for CCR5-proteinkonsentrasjon.
Bindingsforsøk: Ny-fremstilt homogenat fra membranfremstillingen beskrevet ovenfor ble fortynnet i bindingsbuffer (50 mM HEPES, 5 mM MgCl2, 1 mM CaCl2, 0,1% BSA; én fullstendig proteaseinhibitor-tablett ble tilsatt før forsøk) for å oppnå en endelig proteinkonsentrasjon på 10 mikrogram/brønn (faste hvite 96-brønn plater fra Corning, Inc.). Dette membranpreparat ble blandet med WGA-SPA-kuler (Amerhsam; forhåndsbløtet i bindingsbuffer), hvilket ga en konsentrasjon på 200 mikrogram/brønn. Membran/SPA kule-blandingen (100 mikroliter/brønn) ble deretter satt til en plate som var forhåndsflekket med 2 mikroliter DMSO inneholdende forskjellige konsentrasjoner av testforbindelser (ren DMSO for negativ kontroll; forskjellige konsentrasjoner av eksempler ifølge foreliggende oppfinnelse for testforbindelser; 500 nM MIP-1 beta som en positiv kontroll). Bindingsforsøket ble initiert ved tilsetning av 50 mikroliter [<125>I]-MIP-1 beta (Perkin Eimer; materialet var fortynnet i bindingsbuffer slik at tilsetning av 50 mikroliter/brønn gir en endelig konsentrasjon på 0,1 nM [<125>I]-MIP-1 beta). Platen ble lukket og fikk stå ved romtemperatur i 4 - 6 timer før den ble tellet på en Packard TopCount. Prosentdelen bundet for testforbindelsen ble beregnet ved anvendelse av negative og positive kontroller for å definere vinduet for hvert forsøk.
Fluorometrisk bildeplateleser ( FLIPR)- basert funksjonelt forsøk: HT1080 celler (klon 3559.1.6) ble platet med 10.000 celler/brønn (30 mikroliter) i 384-brønn plater (sorte/klar bunn Biocoat PDL, Beckton Dickinson) og tilsatt 30 mikroliter/brønn av Fluro-4 AM fluorescerende farge (fremstilt ved oppløsning av 1 mg Fluro-4 AM i 440 mikroliter DMSO og fortynning med 100 mikroliter pluronic-løsning før ytterligere fortynning med 10 ml Hanks buffer). Cellene ble inkubert ved 37^ med 5% CO2i 30 min før de ble vasket tre ganger og suspendert i forsøksbuffer (20 mM HEPES, 1,2 mM CaCl2, 5 mM MgCl2, 2,5 mM Probenecid, 0,5% BSA, 1x Hanks). Testforbindelsene ble serielt fortynnet i DMSO og deretter fortynnet 1:10 med forsøksbuffer før de ble satt til cellene (10 mikroliter/brønn). Ved anvendelse av FLIPR ble platene lest (10-70 sek.) for induksjon av fluks (dvs. agonist-aktivitet). Cellene ble deretter videre tilsatt agonist-løsning (30 mikroliter/brønn; fremstilt ved fortynning av 30 mikroliter 100 mikromolar MIP-1 beta i 100 ml forsøksbuffer; denne protokollen gir en endelig konsentrasjon på 5 nM MIP-1 beta i forsøket) og platene ble lest ved anvendelse av FLIPR i ett minutt. Antagonist-aktivitet til testforbindelsene ble bestemt i forhold til 0,4% DMSO/Buffer negativ kontroll.
Forbindelsene ifølge foreliggende oppfinnelse er inhibitorer av både CCR2 og CCR5 og kan anvendes for å behandle sykdommer forbundet med hvert kjemokin. Forbindelsene ifølge foreliggende oppfinnelse er betraktet som duale antagonister.
Sykdommer eller lidelser hos humane eller andre arter som kan behandles med inhibitorer av kjemokinreseptor-funksjon, omfatter: inflammatoriske eller allergiske sykdommer og lidelser, omfattende respiratoriske allergiske sykdommer så som astma, allergisk rhinitt, hypersensitivitet lungesykdommer, hypersensitivitet pneumonitt, eosinofil cellulitt (f.eks. WelTs syndrom), eosinofile lungebetennelser (f.eks. Loeffler's syndrom, kronisk eosinofil lungebetennelse), eosinofil fasciitt (f.eks. Shulman's syndrom), forsinket-type hypersensitivitet, interstitielle lungesykdommer (ILD) (f.eks. idiopatisk pulmonal fibrose eller ILD forbundet med revmatoid artritt, systemisk lupus erythematosus, ankyloserende spondylitt, systemisk sklerose, Sjogren's syndrom, polymyositt eller dermatomyositt); systemisk anafylaksi eller hypersensitivitet-responser, medikament-allergier (f.eks. mot penicillin, cefalosporiner), eosinofil-myalgi-syndrom på grunn av inntak av forurenset tryptofan, insektstikk-allergier; autoimmune sykdommer, så som revmatoid artritt, psoriatisk artritt, multippel sklerose, systemisk lupus erythematosus, myasthenia gravis, ungdoms-begynnende diabetes; glomerulonefritt, autoimmun thyreoiditt, Behcefs sykdom; transplantatawisning (f.eks. ved transplantasjon), omfattende allotransplantatavvisning eller graft-versus-host sykdom; inflammatoriske tarmsykdommer, så som CrohrVs sykdom og ulcerativ kolitt; spondyloartropatier; sklerodermi; psoriasis (omfattende T-celle-mediert psoriasis) og inflammatoriske dermatoser så som en dermatitt, eksem, atopisk dermatitt, allergisk kontakt-dermatitt, urtikaria; vaskulitt (f.eks. nekrotiserende, hud- og hypersensitivitet-vaskulitt); eosinofil myositt, eosinofil fasciitt; kreft med leukocytt-infiltrering i hud eller organer. Andre sykdommer eller lidelser hvor uønskede inflammatoriske responser skal hemmes, som kan behandles, omfatter reperfusjonsskade, aterosklerose, visse hematologiske ondartede sykdommer, cytokin-fremkalt toksisitet (f.eks. septisk sjokk, endotoksisk sjokk), polymyositt, dermatomyositt. Infeksiøse sykdommer eller lidelser hos humane eller andre arter som kan behandles med inhibitorer av kjemokinreseptor funksjon, omfatter HIV.
Sykdommer eller lidelser hos mennesker eller andre arter som kan behandles med promotere av kjemokinreseptor-funksjon, omfatter: immunoundertrykkelse, så som den hos individer med immundefekt-syndromer så som AIDS eller andre virale infeksjoner, individer som gjennomgår strålingsterapi, kjemoterapi, terapi for autoimmun sykdom eller medikament-terapi (f.eks. kortikosteroid-terapi), som forårsaker immunoundertrykkelse; immunoundertrykkelse på grunn av medfødt mangel på reseptorfunksjon eller andre årsaker; og infeksjonssykdommer, så som parasitt-sykdommer, omfattende helmint-infeksjoner, så som nematoder (rundorm); (Trichuriasis, Enterobiasis, Ascariasis, Hookworm, Strongyloidiasis, Trichinosis, filariasis); trematoder (ikter) (Schistosomiasis, Clonorchiasis), cestoder (bendelorm) (Echinococcosis, Taeniasis saginata, Cysticercosis); innvollsorm, visceral larva migraines (f.eks. Toxocara), eosinofil gastroenteritt (f.eks. Anisaki sp., Phocanema sp.), hud-larva migraines (Ancylostona braziliense, Ancylostoma caninum). Forbindelsene ifølge foreliggende oppfinnelse er følgelig anvendelige for forebygging og behandling av en rekke inflammatoriske, infeksiøse og immunoregulerende lidelser og sykdommer.
I tillegg kan behandling av ovennevnte inflammatoriske, allergiske og autoimmune sykdommer også antas å være promotere av kjemokinreseptor- funksjon hvis man antar levering av tilstrekkelig forbindelse til å forårsake tap av reseptor-ekspresjon på celler gjennom induksjon av kjemokinreseptor-internalisering eller levering av forbindelse på en måte som resulterer i feildirigering av migrering av celler.
I et annet aspekt kan foreliggende oppfinnelse anvendes for å bedømme de antatte spesifikke agonister eller antagonister av en G-protein-koblet reseptor. Foreliggende oppfinnelse angår anvendelse av disse forbindelser ved preparering og utføring av screeningsforsøk for forbindelser som modulerer aktiviteten til kjemokinreseptorer. Videre er forbindelsene ifølge foreliggende oppfinnelse anvendelige for etablering eller bestemmelse av bindingssetet for andre forbindelser til kjemokinreseptorer, f.eks. ved kompetitiv hemning eller som referanse i et forsøk for å sammenligne den kjente aktivitet med en forbindelse med en ukjent aktivitet. Ved utvikling av nye forsøk eller protokoller, kan forbindelser ifølge foreliggende oppfinnelse anvendes for å teste deres effektivitet. Spesifikt kan slike forbindelser leveres i et kommersielt sett, for eksempel for anvendelse i farmasøytisk forskning som involverer ovennevnte sykdommer. Forbindelsene ifølge foreliggende oppfinnelse er også anvendelige for evaluering av antatt spesifikke modulatorer av kjemokin-reseptorer. I tillegg kan forbindelser ifølge foreliggende oppfinnelse anvendes for å undersøke spesifisiteten av G-protein-koblede reseptorer som ikke er antatt å være kjemokinreseptorer, enten ved å tjene som eksempler på forbindelser som ikke binder eller som strukturelle varianter av forbindelser aktive ved disse reseptorer, som kan hjelpe til å definere spesifikke seter av interaksjon.
Forbindelsene ifølge foreliggende oppfinnelse blir anvendt for å behandle eller forhindre lidelser valgt fra revmatoid artritt, osteoartritt, septisk sjokk, aterosklerose, aneurisme, feber, kardiovaskulære effekter, hemodynamisk sjokk, sepsis-syndrom, post-ischemisk reperfusjonsskade, malaria, Crohn's sykdom, inflammatoriske tarmsykdommer, mycobakterieinfeksjon, meningitt, psoriasis, kongestiv hjertesvikt, fibrotiske sykdommer, kakeksi, transplantatawisning, autoimmune sykdommer, hud-inflammatoriske sykdommer, multippel sklerose, strålingsskade, hyperoksisk alveolær skade, HIV, HIV demens, ikke-insulinavhengig diabetes melitus, astma, allergisk rhinitt, atopisk dermatitt, idiopatisk pulmonal fibrose, bulløs pemfigoid, helmintiske parasittiske infeksjoner, allergisk kolitt, eksem, konjunktivitt, transplantasjon, familiær eosinofili, eosinofil cellulitt, eosinofile lungebetennelser, eosinofil fasciitt, eosinofil gastroenteritt, medikament-fremkalt eosinofili, cystisk fibrose, Churg-Strauss syndrom, lymfom, Hodgkin's sykdom, kolon-karsinom, Felty's syndrom, sarkoidose, uveitt, Alzheimer, glomerulonefritt og systemisk lupus erythematosus.
I et annet aspekt blir forbindelsene anvendt for å behandle eller forhindre inflammatoriske lidelser valgt fra fra revmatoid artritt, osteoartritt, aterosklerose, aneurisme, feber, kardiovaskulære effekter, Crohn's sykdom, inflammatoriske tarmsykdommer, psoriasis, kongestiv hjertesvikt, multippel sklerose, autoimmune sykdommer, hud-inflammatoriske sykdommer.
I et annet aspekt blir forbindelsene anvendt for å behandle eller forhindre inflammatoriske lidelser valgt fra revmatoid artritt, osteoartritt, aterosklerose, Crohn's sykdom, inflammatoriske tarmsykdommer og multippel sklerose.
Kombinert terapi for å forhindre og behandle inflammatoriske, infeksiøse og immunoregulerende lidelser og sykdommer, omfattende astma og allergiske sykdommer, så vel som autoimmune patologier så som revmatoid artritt og aterosklerose og patologiene angitt ovenfor er illustrert ved kombinasjon av forbindelsene ifølge foreliggende oppfinnelse og andre forbindelser som er kjent for slike anvendelser. For eksempel for behandling eller forebygging av inflammasjon, kan foreliggende forbindelser anvendes sammen med et anti-inflammatorisk eller analgetisk middel så som en opiat-agonist, en lipoksygenase-inhibitor, en cyklooksygenase-2-inhibitor, en interleukin-inhibitor, så som en interleukin-1-inhibitor, en tumornekrosefaktor-inhibitor, en NMDA-antagonist, en inhibitor for nitrogenoksyd eller en inhibitor for syntese av nitrogenoksyd, et ikke-steroid anti-inflammatorisk middel, en fosfodiesterase-inhibitor eller et cytokin-undertrykkende anti-inflammatorisk middel, for eksempel en forbindelse så som acetaminofen, aspirin, codein, fentaynl, ibuprofen, indometacin, ketorolac, morfin, naproxen, fenacetin, piroxicam, et steroid analgetisk middel, sufentanyl, sunlindac, interferon alfa og lignende. Tilsvarende kan foreliggende forbindelser administreres med en smertelindrer; en potentiator så som koffein, en H2-antagonist, simethicon, aluminium- eller magnesiumhydroksyd; en dekongestant så som fenylefrin, fenylpropanolamin, pseudofedrin, oksymetazolin, epinefrin, naphazolin, xylometazolin, propylheksedrin eller levodesoksy-efedrin; og et antitussivt middel så som codein, hydrocodon, caramifen, karbetapentan eller dekstramethorphan; et diuretisk middel; og et sederende eller ikke-sederende antihistamin. Likeledes kan forbindelser ifølge foreliggende oppfinnelse anvendes i kombinasjon med andre medikamenter som blir anvendt for behandling/forebygging/undertrykkelse eller forbedring av sykdommene eller lidelsene for hvilke forbindelser ifølge foreliggende oppfinnelse er anvendelige. Slike andre medikamenter kan administreres, ved en rute og i en mengde vanlig anvendt, samtidig eller sekvensielt med en forbindelse ifølge foreliggende oppfinnelse. Når en forbindelse ifølge foreliggende oppfinnelse blir anvendt samtidig med ett eller flere andre medikamenter, kan et farmasøytisk preparat inneholdende slike andre medikamenter i tillegg til forbindelsen ifølge foreliggende oppfinnelse anvendes. Følgelig omfatter de farmasøytiske preparater ifølge foreliggende oppfinnelse de som også inneholder én eller flere andre aktive bestanddeler, i tillegg til en forbindelse ifølge foreliggende oppfinnelse.
Eksempler på andre aktive bestanddeler som kan kombineres med en forbindelse ifølge foreliggende oppfinnelse, enten administrert separat eller i samme farmasøytiske preparater, omfatter: (a) integrin-antagonister så som de for selektiner, ICAM og VLA-4; (b) steroider så som beclomethason, metylprednisolon, betamethason, prednison, dexamethason og hydrocortison; (c) immunoundertrykkende midler så som cyklosporin, tacrolimus, rapamycin og andre FK-506 type immunoundertrykkende midler; (d) antihistaminer (H1-histamin-antagonister) så som bromfeniramin, chlorfeniramin, dexchlorfeniramin, triprolidin, clemastin, difenhydramin, difenylpyralin, tripelennamin, hydroksyzin, methdilazin, promethazin, trimeprazin, azatadin, cyproheptadin, antazolin, feniramin pyrilamin, astemizol, terfenadin, loratadin, cetirizin, fexofenadin, deskarboetoksyloratadin og lignende; (e) ikke-steroide anti-astmatiske midler så som b2-agonister (terbutalin, metaproterenol, fenoterol, isoetharin, albuteral, bitolterol og pirbuterol), teofyllin, cromolyn-natrium, atropin, ipratropiumbromid, leukotrien-antagonister (zafirlukast, montelukast, pranlukast, iralukast, pobilukast, SKB-102,203), leukotrien-biosyntese-inhibitorer (zileuton, BAY-1005); (f) ikke-steroide antiinflammatoriske midler (NSAID) så som propionsyrederivater (alminoprofen, benxaprofen, bucloxinsyre, carprofen, fenbufen, fenoprofen, fluprofen, flurbiprofen, ibuprofen, indoprofen, ketoprofen, miroprofen, naproxen, oxaprozin, pirprofen, pranoprofen, suprofen, tiaprofensyre og tioksaprofen), eddiksyrederivater (indometacin, acemetacin, alclofenac, clidanac, diclofenac, fenclofenac, fenclozic syre, fentiazac, furofenac, ibufenac, isoxepac, oxpinac, sulindac, tiopinac, tolmetin, zidometacin og zomepirac), fenaminsyrederivater (flufenaminsyre, meclofenaminsyre, mefenaminsyre, nifluminsyre og tolfenaminsyre), bifenylkarboksylsyrederivater (diflunisal og flufenisal), oxicamer (isoxicam, piroxicam, sudoxicam og tenoxican), salicylater (acetyl- salicylsyre, sulfasalazin) og pyrazoloner (apazon, bezpiperylon, feprazon, mofebutazon, oksyfenbutazon, fenylbutazon); (g) cyklooksygenase-2 (COX-2) inhibitorer; (h) inhibitorer av fosfodiesterase type IV (PDE-IV); (I) andre antagonister for kjemokin-reseptorer; (j) kolesterol-nedsettende midler så som HMG-COA reduktase-inhibitorer (lovastatin, simvastatin og pravastatin, fluvastatin, atorvsatatin og andre statiner), sekvestranter (cholestyramin og colestipol), nicotonsyre, fenofibrinsyrederivater (gemfibrozil, clofibrat, fenofibrat og benzafibrat) og probucol; (k) anti-diabetiske midler så som insulin, sulfonylurinstoffer, biguanider (metformin), a-glukosidase-inhibitorer (akarbose) og glitazoner (troglitazon og pioglitazon); (I) preparater av interferoner (interferon alfa-2a, interferon-2B, interferon alfa-N3, interferon beta-1a, interferon beta-1b, interferon gamma-1b); (m) antivirale forbindelser så som efavirenz, nevirapin, indinavir, ganciclovir, lamivudin, famciclovir og zalcitabin; (o) andre forbindelser så som 5-aminosalicylsyre, et prodrug derav, antimetabolitter så som azatioprin og 6-merkaptopurin og cytotoksiske kreft- kjemoterapeutiske midler. Vektforholdet av forbindelsen ifølge foreliggende oppfinnelse og den andre aktive bestanddel kan varieres og vil avhenge av de effektive dosene av hver bestanddel.
Generelt vil en effektiv dose av hver anvendes. Således, når for eksempel en forbindelse ifølge foreliggende oppfinnelse blir kombinert med en NSAID vil vektforholdet av forbindelsen ifølge foreliggende oppfinnelse til NSAID generelt være i området fra ca. 1000:1 til ca. 1:1000 eller alternativt fra ca. 200:1 til ca. 1:200. Kombinasjoner av en forbindelse ifølge foreliggende oppfinnelse og andre aktive bestanddeler vil generelt også være innen ovennevnte område, men i hvert tilfelle må en effektiv dose av hver aktiv bestanddel anvendes.
Forbindelsene blir administrert til et pattedyr i en terapeutisk effektiv mengde. Med "terapeutisk effektiv mengde" menes en mengde av en forbindelse med formel I som, når administrert alene eller i kombinasjon med et ytterligere terapeutisk middel til et pattedyr, er effektiv til å forhindre eller forbedre den tromboemboliske sykdomstilstand eller progresjon av sykdommen.
Dose og formulering
Forbindelsene ifølge foreliggende oppfinnelse kan administreres i slike orale doseformer som tabletter, kapsler (som hver omfatter formuleringer med forlenget frigjøring eller timet frigjøring), piller, pulvere, granuler, eliksirer, tinkturer, suspensjoner, siruper og emulsjoner. De kan også administreres i intravenøs (bolus eller infusjon), intraperitoneal, subkutan eller intramuskulær form, alle ved anvendelse av doseformer velkjent for fagfolk på det farmasøytiske området. De kan administreres alene, men vil generelt administreres med en farmasøytisk bærer valgt på basis av den valgte administreringsvei og standard farmasøytisk praksis.
Doseregimet for forbindelsene ifølge foreliggende oppfinnelse vil selvfølgelig variere avhengig av kjente faktorer, så som de farmakodynamiske karakteristika av det spesielle middel og dets modus og administreringsvei; art, alder, kjønn, helse, medisinsk tilstand og vekt til mottageren; naturen og omfanget av symptomene; typen samtidig behandling; behandlingshyppighet; administreringsvei, den renale og hepatiske funksjon til pasienten,og effekten ønsket. En lege eller veterinær kan bestemme og ordinere den effektive mengde av medikamentet nødvendig for å forhindre, motvirke eller stanse utvikling av den tromboemboliske lidelse.
Som generelle retningslinjer vil den daglige orale dose av hver aktiv bestanddel, når anvendt for de angitte effekter, være i området mellom ca. 0,001 til 1000 mg/kg kroppsvekt eller mellom ca. 0,01 til 100 mg/kg kroppsvekt pr. dag eller alternativt, mellom ca. 1,0 til 20 mg/kg/dag. Intravenøst vil dosene være i området fra ca. 1 til ca. 10 mg/kg/minutt ved en infusjon med konstant hastighet. Forbindelser ifølge foreliggende oppfinnelse kan administreres i en enkel daglig dose eller den totale daglige dose kan administreres i oppdelte doser på to, tre eller fire ganger daglig.
Forbindelser ifølge foreliggende oppfinnelse kan administreres i intranasal form via topisk anvendelse av egnede intranasale konstituenter eller via transdermale ruter, ved anvendelse av transdermale hudplastere. Når administrert i form av et transdermalt leveringssystem, vil dose-administreringen selvfølgelig være kontinuerlig heller enn periodisk gjennom hele doseregimet.
Forbindelsene blir typisk administrert i blanding med egnede farmasøytiske fortynningsmidler, tilsetningsmidler eller bærere (kollektivt referert til her som farmasøytiske bærere) hensiktsmessig valgt med hensyn til den tilsiktede administreringsform, dvs. orale tabletter, kapsler, eliksirer, siruper og lignende og i overensstemmelse med konvensjonell farmasøytisk praksis.
For eksempel for oral administrering i form av en tablett eller kapsel, kan den aktive medikament-komponent kombineres med en oral, ikke-toksisk, farmasøytisk akseptabel, inert bærer så som laktose, stivelse, sukrose, glukose, metyl-cellulose, magnesiumstearat, dikalsiumfosfat, kalsiumsulfat, mannitol, sorbitol og lignende; for oral administrering i væskeform, kan de orale medikament-komponenter kombineres med hvilken som helst oral, ikke-toksisk, farmasøytisk akseptabel inert bærer så som etanol, glycerol, vann og lignende. Videre, når ønsket eller nødvendig kan egnede bindemidler, glattemidler, desintegreringsmidler og fargemidler også innføres i blandingen. Egnede bindemidler omfatter stivelse, gelatin, naturlige sukkere så som glukose eller beta-laktose, mais-søtningsmidler, naturlige og syntetiske gummier så som akasie, tragant eller natriumalginat, karboksymetylcellulose, polyetylenglykol, vokser og lignende. Glattemidler anvendt i disse doseformer omfatter natriumoleat, natriumstearat, magnesiumstearat, natriumbenzoat, natriumacetat, natriumklorid og lignende. Desintegreringsmidler omfatter, uten begrensning, stivelse, metylcellulose, agar, bentonitt, xantan-gummi og lignende.
Forbindelsene ifølge foreliggende oppfinnelse kan også administreres i form av liposom-leveringssystemer, så som små unilamellære vesikler, store unilamellære vesikler og multilamellære vesikler. Liposomer kan dannes fra en rekke fosfolipider, så som kolesterol, stearylamin eller fosfatidylcholiner.
Forbindelser ifølge foreliggende oppfinnelse kan også være koblet med oppløselige polymerer som målrettbare medikament-bærere. Slike polymerer kan omfatte polyvinylpyrrolidon, pyran-kopolymer, polyhydroksypropylmetakrylamid-fenol, polyhydroksyetylaspartamidfenol eller polyetylenoksyd-polylysin substituert med palmitoyl-rester. Videre kan forbindelsene ifølge foreliggende oppfinnelse kobles til en klasse av bionedbrytbare polymerer anvendelige for å oppnå kontrollert frigjøring av et medikament, for eksempel polymelkesyre, polyglykolsyre, kopolymerer av polymelkesyre og polyglykolsyre, polyepsilon-kaprolakton, polyhydroksy-smørsyre, polyortoestere, polyacetaler, polydihydropyraner, polycyanoacylater og kryssbundede eller amfipatiske blokk-kopolymerer av hydrogeler. Doseformer (farmasøytiske preparater) egnet for administrering kan inneholde fra ca. 1 milligram til ca. 100 milligram av aktiv bestanddel pr. doseenhet. I disse farmasøytiske preparater vil den aktive bestanddel vanligvis være til stede i en mengde på ca. 0,5-95 vekt% basert på den totale vekt av preparatet.
Gelatinkapsler kan inneholde den aktive bestanddel og pulveriserte bærere, så som laktose, stivelse, cellulosederivater, magnesiumstearat, stearinsyre og lignende. Lignende fortynningsmidler kan anvendes for å fremstille sammenpressede tabletter. Både tabletter og kapsler kan fremstilles som produkter med forlenget frigjøring for å gi kontinuerlig frigjøring av medisinering over et tidsromr. Sammenpressede tabletter kan være sukkerbelagt eller filmbelagt for å maskere eventuell ubehagelig smak og beskytte tabletten fra atmosfæren eller enterisk belagt for selektiv desintegrering i mage-tarm-kanalen. Flytende doseformer for oral administrering kan inneholde fargestoff og smaksstoff for å øke pasientaksept. Generelt er vann, en egnet olje, saltløsning, vandig dekstrose (glukose) og relaterte sukkerløsninger og glykoler så som propylenglykol eller polyetylenglykoler, egnede bærere for parenterale løsninger. Løsninger for parenteral administrering kan inneholde et vannoppløselig salt av den aktive bestanddel, egnede stabiliserende midler og hvis nødvendig, buffer-substanser. Antioksydasjonsmidler så som natriumbisulfitt, natriumsulfitt eller askorbinsyre, enten alene eller kombinert, er egnede stabiliserende midler. Også anvendt er sitronsyre og dens salter og natrium EDTA. I tillegg kan parenterale løsninger inneholde konserveringsmidler, så som benzalkoniumklorid, metyl- eller propyl-paraben og klorbutanol.
Egnede farmasøytiske bærere er beskrevet i Remington' s Pharmaceutical Sciences, Mack Publishing Company, en standard referansetekst på dette området.
Representative anvendelige farmasøytiske doseformer for administrering av forbindelsene ifølge foreliggende oppfinnelse kan illustreres som følger: Kapsler
Et stort antall av enhetskapsler kan fremstilles ved fylling av standard to-stykke harde gelatinkapsler hver med 100 milligram av pulverisert aktiv bestanddel, 150 milligram laktose, 50 milligram cellulose og 6 milligram magnesiumstearat.
Myke gelatinkapsler
En blanding av aktiv bestanddel i en fordøybar olje så som soyabønneolje, bomullsfrøolje eller olivenolje kan fremstilles og injiseres ved hjelp av en positiv fortrengningspumpe i gelatin for å danne myke gelatinkapsler inneholdende 100 milligram av den aktive bestanddel. Kapslene må være vasket og tørket.
Tabletter
Tabletter kan fremstilles ved konvensjonelle prosedyrer slik at doseenheten blir 100 milligram av aktiv bestanddel, 0,2 milligram av kolloidal silisiumdioksyd, 5 milligram av magnesiumstearat, 275 milligram av mikrokrystallinsk cellulose, 11 milligram av stivelse og 98,8 milligram av laktose. Passende belegg kan anvendes for å øke aksepterbarhet eller forsinke absorpsjon.
Iniiserbart preparat
Et parenteralt preparat egnet for administrering ved injeksjon kan fremstilles ved omrøring av 1,5 vekt% av aktiv bestanddel i 10% etter volum av propylenglykol og vann. Løsningen må være gjort isotonisk med natriumklorid og sterilisert.
Suspensjon
En vandig suspensjon kan fremstilles for oral administrering slik at hver 5 ml inneholder 100 mg findelt aktiv bestanddel, 200 mg natriumkarboksymetylcellulose, 5 mg natriumbenzoat, 1,0 g sorbitol-løsning, U.S.P. og 0,025 ml vanillin.
Når forbindelsene ifølge foreliggende oppfinnelse kombineres med andre antikoagulerende midler, kan for eksempel en daglig dose være ca. 0,1 til 100 milligram av forbindelsen med formel I og ca. 1 til 7,5 milligram av det andre antikoagulerende midlet pr. kg. av pasientens kroppsvekt. For en tablett-doseform kan forbindelsene ifølge foreliggende oppfinnelse generelt være til stede i en mengde på ca. 5 til 10 milligram pr. doseenhet og det andre antikoagulerende middel i en mengde på ca. 1 til 5 milligram pr. doseenhet.
Når to eller flere av foregående andre terapeutiske midler blir administrert med forbindelsen med formel I, kan generelt mengden av hver komponent i en typisk daglig dose og typisk doseform reduseres i forhold til den vanlige dose av midlet når administrert alene, i betraktning av additiv eller synergistisk effekt av de terapeutiske midler når administrert i kombinasjon.
Spesielt når gitt som en enkel doseenhet eksisterer potensiale for en kjemisk interaksjon mellom de samlede aktive bestanddeler. Av denne grunn, når forbindelsen med formel I og et andre terapeutisk middel kombineres i en enkel doseenhet blir de formulert slik at selv om de aktive bestanddelene samles i en enkel doseenhet, blir den fysiske kontakt mellom de aktive bestanddelene minimalisert (dvs. redusert). For eksempel kan én aktiv bestanddel være enterisk belagt. Med enterisk belegg av én av de aktive bestanddelene, er det mulig ikke bare å minimalisere kontakten mellom de samlede aktive bestanddeler, men det er også mulig å kontrollere frigjøringen av én av disse komponenter i mage-tarm-kanalen slik at én av disse komponenter ikke blir frigjort i magen men heller blir frigjort i tarmene. Én av de aktive bestanddelene kan også belegges med et materiale som bevirker en forlenget frigjøring gjennom hele mage-tarm-kanalen og også tjener til å minimalisere fysisk kontakt mellom de samlede aktive bestanddeler. Videre kan komponenten med forlenget frigjøring i tillegg være enterisk belagt slik at frigjøring av denne komponent bare skjer i tarmen. Enda en annen metode ville involvere formulering av et kombinasjonsprodukt hvor én komponent er belagt med en polymer som gir forlenget og/eller enterisk frigjøring og den andre komponent også er belagt med en polymer så som en lav-viskositet kvalitet av hydroksypropyl-metylcellulose (HPMC) eller andre passende materialer som kjent på området, for ytterligere å separere de aktive komponenter. Polymerbelegget tjener til å danne en ytterligere barriere for interaksjon med den andre komponenten.
Disse så vel som andre metoder for å minimalisere kontakt mellom komponentene i kombinasjonsprodukter ifølge foreliggende oppfinnelse, hvorvidt administrert i en enkel doseform eller administrert i separate former men samtidig ved samme metode, vil lett være klart for fagfolk på området ved hjelp av foreliggende beskrivelse.
Selvfølgelig er en rekke modifikasjoner og variasjoner av foreliggende oppfinnelse mulige i lys av beskrivelsen ovenfor. Det skal derfor forstås at innenfor omfanget av de følgende krav, kan oppfinnelsen utføres på annen måte enn som spesifikt beskrevet her.

Claims (16)

1. Forbindelse med formel (la):
eller en stereoisomer eller et farmasøytisk akseptabelt salt derav, hvor: Z er valgt fra -NR<8>c(0)- og -NR<9->; R<1>er valgt fra H, R<6>, Ci_6alkyl substituert med 0-3 R<6>, C2-6alkenyl substituert med 0-3 R<6>, C2-6alkynyl substituert med 0-3 R<6>, C6-10arylgruppe substituert med 0-5 R^ og et 5-10 leddet heteroarylsystem inneholdende 1-4 heteroatomer valgt fra N, O og S, substituert med 0-3R6; R<2>er valgt fra en C6-10arylgruppe substituert med 0-5 R<7>og et 5-10 leddet heteroarylsystem inneholdende 1-4 heteroatomer valgt fra N, O og S, substituert med 0-3 R<7>; R5 er-NR5aR5a; R5ajved hver forekomst, er uavhengig valgt fra H, metyl, C1-6alkyl substituert med 0-2 R$ e hvor alkylgruppen er valgt fra etyl, propyl, i-propyl, butyl, i-butyl, pentyl, heksyl; allyl substituert med 0-1 R$ e; propynyl substituert med 0-1 R$ e; og en (CH2)r-C3-4karbocyklisk rest substituert med 0-5 R^<e>, hvor den karbocykliske resten er valgt fra cyklopropyl og cyklobutyl; R<5e>, ved hver forekomst, er valgt fra C1-6alkyl, C2-8alkenyl, C2-8alkynyl, C3-6cykloalkyl, Cl, F, Br, I, CN, NO2, (CF2)rCF3, (CH2)rOCi-5alkyl, OH, SH, (CH2)rSCi-5alkyl, (CH2)rNR5fR5<f>og (CH2)r<f>enyl; R5f ved hver forekomst, er valgt fra H, C1-6alkyl og C3-6cykloalkyl; R<6>, ved hver forekomst, er valgt fra C1-8alkyl, (CH2)rC3-6cykloalkyl, Cl, Br, I, F, NO2, CN, (C^R^rNR<ea>RSa, (CR^rOH, (CR^^rO^R^^rR^, (CR'R')rSH, (CR'R')rC(0)H, (CR^^rS^R^^rR^, (CR'R,)rSC(0)(CR,R,)rR<6b>, (CR'R')rC(0)OH, (CR'R,)rC(0)(CR,R,)rR6b,(CR,R,)rC(0)NR6aR6aj(CR,R,)rNR<6f>C(0)(CR,R,)rR<6b>, (CR,R,)rC(0)0(CR,R,)rR<6d>, (CR,R,)rOC(0)(CR,R,)rR6b, (CR,R,)rOC(0)NR6a(CR'R')rR<6d>r(CR,R,)rNR<6>ac(0)NR6a(CR,R,)rR6d, (CR,R,)rNR6ac(S)NR<6a>(CR,R,)rR6<d>, (CR^NRe^C-pCCR^')^, (CR'R')rC(=NR6f)NR6aR6aj (CR'R')rNHC(=NR6f)NR6fR6f (CR^^O^CR'^^, (CR'R')rS(0)2NR<6a>R6aj(CR'R')rNR<6f>S(0)2NR6aR6aj(CR,R,)rNR<6f>S(0)2(CR,R<,>)rR6b, C1-6 halogenalkyl, C2-8alkenyl substituert med 0-3 R', C2-8alkynyl substituert med 0-3 R', (CR'R')rfenyl substituert med 0-3 R<6e>og et (CH2)r-5-6 leddet heterocyklisk system inneholdende 1-2 heteroatomer valgt fra N, O og S, substituert med 0-2 R<6>e; alternativt kan to R<§>på nabostilte atomer på R^ kombineres for å danne et cyklisk acetal; R& a, ved hver forekomst, er valgt fra H, metyl substituert med 0-1 R^9, C2-6alkyl substituert med 0-2 R<6e>, C3-8alkenyl substituert med 0-2 R<6e>og C3-8alkynyl substituert med 0-2 R6e; R<6b>, ved hver forekomst, er valgt fra H, C1-6alkyl substituert med 0-2 R^<e>, C3-8alkenyl substituert med 0-2 R^<e>og C3.8alkynyl substituert med 0-2R6e;R<6d>fved hver forekomst, er valgt fra C3-8alkenyl substituert med 0-2 R^<e>, C3-8alkynyl substituert med 0-2 R<6e>, metyl, CF3, C2-6alkyl substituert med 0-3 R<6e>og C2-4halogenalkyl; R^<e>, ved hver forekomst, er valgt fra C1-6alkyl, C2-8alkenyl, C2-8alkynyl, (CH2)rC3-6cykloalkyl, Cl, F, Br, I, CN, NO2, (CF2)rCF3, (CH2)rOCi-5alkyl, OH, SH, (CH2)rSCi-5 alkyl, (CH2)rNR6fR6f og (CH2)rfenyl; R6f ved hver forekomst, er valgt fra H, C1-5alkyl og C3-6cykloalkyl og fenyl; R<6g>er uavhengig valgt fra -C(0)R<6>b, -C(0)OR6d, -C(0)NR6fR6f0g (CH2)r<f>enyl; R<7>, ved hver forekomst, er valgt fra C1-8alkyl, (CH2)rC3-6cykloalkyl, Cl, Br, I, F, NO2, CN, (CR^JrNR^R^, (CR^rOH, (CRK^rCKCR^hR™, (CR'R')rSH, (CR'R')rC(0)H, (CR^^CR^R70", (C^R^rC^pH, (CR'R,)rC(0)(CR,R,)rR7b,(CR,R,)rC(0)NR7aR7aj(CR,R,)rNR7fC(0)(CR,R,)rR7b, (CR,R,)rC(0)0(CR,R,)rR<7d>, (CR,R,)rOC(0)(CR,R,)rR7b, (CR^VOCCCONR^CR^^R73, (CR,R,)rNR7aC(0)NR7<a>(CR,R,)rR7<a>, (CRK0rNR7fC(O)O(CR*R0rR7d, (CR'R,)rC(=NR<7f>)NR7aR7a, (CR'R,)rNHC(=NR7f)NR7fR<7f>, (CR^JrSfOJpfCRTCJrR™ (CR,R,)rS(0)2NR<7a>R7a, (CR'R,)rNR7<a>S(0)2NR7aR7a, (CR,R,)rNR<7f>S(0)2(CR,R,)rR7b, C1-6 halogenalkyl, C2-8alkenyl substituert med 0-3 R', C2-8alkynyl substituert med 0-3 R' og (CR'R')rfenyl substituert med 0-3 R<7e>; alternativt kan to R<7>på nabostilte atomer på R<2>kombineres for å danne et cyklisk acetal; R<7a>, ved hver forekomst er uavhengig valgt fra H, metyl substituert med 0-1 R<7>9, C2-6alkyl substituert med 0-2 R<7e>, C3-8alkenyl substituert med 0-2 R<7e>, C3-8alkynyl substituert med 0-2 R<7e>, en (CH2)r-C3-io karbocyklisk rest substituert med 0-5 R<7e>og et (CH2)r5-10 leddet heterocyklisk system inneholdende 1-4 heteroatomer valgt fra N, O og S, substituert med 0-2 R7e; R<7b>, ved hver forekomst, er valgt fra C1-6alkyl substituert med 0-2 R<7e>, C3-8 alkenyl substituert med 0-2 R<7e>, C3-8alkynyl substituert med 0-2 R<7e>, en (CH2)rC3-6karbocyklisk rest substituert med 0-3 R<7e>og et (CH2)r5-6 leddet heterocyklisk system inneholdende 1-4 heteroatomer valgt fra N, O og S, substituert med 0-2 R<7>e; R<7d>, ved hver forekomst, er valgt fra C3-8alkenyl substituert med 0-2 R<7e>, C3-8alkynyl substituert med 0-2 R<7e>, metyl, CF3, C2-4halogenalkyl, C2-6alkyl substituert med 0-3 R<7e>, en (CH2)r-C3-l0karbocyklisk rest substituert med 0-3 R<7e>og et (CH2)r-5-6 leddet heterocyklisk system inneholdende 1-4 heteroatomer valgt fra N, O og S, substituert med 0-3R7e;R<7>e, ved hver forekomst, er valgt fra C1-6alkyl, C2-8alkenyl, C2-8alkynyl, (CH2)rC3-6cykloalkyl, Cl, F, Br, I, CN, NO2, (CF2)rCF3, (CH2)rOCi-5alkyl, OH, SH, C(0)OCi-5alkyl, (CH2)rSCi-5alkyl, (CH2)rNR7fR7f og (CH2)r<f>enyl; R<7*>, ved hver forekomst, er valgt fra H, C1-5alkyl og C3-6cykloalkyl og fenyl; R<7>9 er uavhengig valgt fra -C(0)R<7b>, -C(0)OR<7>d, -C(0)NR7fR7f og (CH2)r<f>enyl; R', ved hver forekomst, er valgt fra H, C1-6alkyl substituert med R<®e>, C2-8 alkenyl, C2-8alkynyl, (CH2)rC3-6cykloalkyl; R8 er valgt fra H, C1.4alkyl og C3.4cykloalkyl; R<9>er valgt fra H, C1.4alkyl, C3.4cykloalkyl, -C(0)H og -C(0)-Ci_4alkyl; p, ved hver forekomst, er uavhengig valgt fra 0, 1 og 2; og r, ved hver forekomst, er uavhengig valgt fra 0, 1, 2, 3 og 4.
2. Forbindelse ifølge krav 1, hvor: R<5a>jved hver forekomst, er uavhengig valgt fra H, metyl, etyl, propyl, i-propyl, butyl, i-butyl, pentyl, heksyl, cyklopropyl og cyklobutyl; og r, ved hver forekomst, er valgt fra 0,1 og 2.
3. Forbindelse ifølge krav 2, hvor: R<1>er valgt fra H, R<6>, Ci_6alkyl substituert med 0-3 R<6>, C2-6alkenyl substituert med 0-3 R<6>, C2-6alkynyl substituert med 0-3 R<6>, C6-10arylgruppe substituert med 0-5 R<6>, hvor arylgruppen er valgt fra fenyl og naftyl og et 5-10 leddet heteroarylsystem inneholdende 1-4 heteroatomer valgt fra N, O og S, substituert med 0-3 R<6>, hvor heteroarylgruppen er valgt fra indolyl, benzimidazolyl, benzofuranyl, benzotiofuranyl, benzoksazolyl, benztiazolyl, benztriazolyl, benztetrazolyl, benzisoksazolyl, benzisotiazolyl, benzimidazalonyl, cinnolinyl, furanyl, imidazolyl, indazolyl, indolyl, isonikotinyl, isokinolinyl isotiazolyl, isoksazolinyl, isoksazolyl, oksazolyl, ftalazinyl, pikolinyl, pyrazinyl, pyrazolyl, pyridazinyl, pyridyl, pyridinyl, pyrimidinyl, pyrrolyl, kinazolinyl, kinolinyl, tiazolyl, tienyl, triazinyl og tetrazolyl; R<2>er valgt fra fenyl substituert med 0-2 R<7>og et 5-10 leddet heteroarylsystem inneholdende 1-4 heteroatomer valgt fra N, O og S, substituert med 0-3 R<7>hvor heteroarylgruppen er valgt fra indolyl, benzimidazolyl, benzofuranyl, benzotiofuranyl, benzoksazolyl, benztiazolyl, benztriazolyl, benztetrazolyl, benzisoksazolyl, benzisotiazolyl, benzimidazalonyl, cinnolinyl, furanyl, imidazolyl, indazolyl, indolyl, isokinolinyl isotiazolyl, isoksazolyl, oksazolyl, ftalazinyl, pyrazinyl, pyrazolyl, pyridazinyl, pyridyl, pyridinyl, pyrimidinyl, pyrrolyl, pyrrolotriazinyl, kinazolinyl, kinolinyl, tiazolyl, tienyl og tetrazolyl; og R<8>er valgt fra H, metyl, etyl, propyl, i-propyl og cyklopropyl.
4. Forbindelse ifølge krav 2 eller 3, hvor: R<6>, ved hver forekomst, er valgt fra C1-8alkyl, C2-8alkenyl, C2-8alkynyl, (CH2)rC3-6 cykloalkyl, Cl, Br, I, F, NO2, CN, (CH2)rNR6a,R6a', (CH2)rOH, (CH2)rO(CH2)rR6d, (CH2)rSH, (CH2)rC(0)H, (CH2)rS(CH2)rR6d,(CH2)rC(0)OH, (CH2)rC(0)(CH2)rR<6b>, (CH2)rC(0)NR6aR6aj(CH2)r<N>R<6f>C(0)R6b', (CH2)rC(0)0(CH2)rR<6d>, (CH2)rNR6aC(0)NR6a,R6d,j (CH2)rNR6aC(S)NR6aR6aj (CH2)rOC(0)(CH2)rR6b, (CH2)rS(0)pR6b', (CH2)rS(0)2NR<6a>R6aj(CH2)rNR6fS(0)2(CH2)rR<6>b, (CH2)rNR6fS(0)2NR6aR6ajq^ q halogenalkyl og (CH2)rfenyl substituert med 0-3 R<6e>og et (CH2)r5-6 leddet heterocyklisk system inneholdende 1-2 heteroatomer valgt fra N, O og S, substituert med 0-2 R^<e>, hvor det heterocykliske systemet er valgt fra aziridinyl, azetidinyl, pyrrolyl, piperidinyl og morfolinyl; R<6a>, ved hver forekomst, er uavhengig valgt fra H, metyl, etyl, propyl, i-propyl, butyl, i-butyl, t-butyl, pentyl og heksyl; R^a', ved hver forekomst, er valgt fra H, C1-6alkyl og C$. q cykloalkyl; R6b vecj hver forekomst, er valgt fra H, metyl, etyl, propyl, i-propyl, butyl, i- butyl, t-butyl, pentyl og heksyl; rGd', ved hver forekomst, er valgt fra H, C1-6alkyl og C3.6cykloalkyl; R^<d>, ved hver forekomst, er valgt fra metyl, CF3, etyl, propyl, i-propyl, butyl, i- butyl, t-butyl, pentyl og heksyl; rGc<T>, ved hver forekomst, er valgt fra H, CF3og C1-6alkyl og C3.6 cykloalkyl; R<6e>, ved hver forekomst, er valgt fra C1-6alkyl, C2-8alkenyl, C2-8alkynyl, (CH2)rC3-6cykloalkyl, Cl, F, Br, I, CN, NO2, (CF2)rCF3, (CH2)rOCi-5alkyl, OH, SH, (CH2)rSCi-5alkyl, (CH2)rNR<6f>R6f C(0)OCi-5alkyl, og (CH2)r<f>enyl; R6f ved hver forekomst, er valgt fra H, metyl, etyl, propyl, i-propyl, butyl, i- butyl, t-butyl, pentyl, heksyl, cyklopropyl og fenyl; R<7>er valgt fra metyl, etyl, propyl, i-propyl, butyl, i-butyl, s- butyl, t-butyl, pentyl, heksyl, (CH2)rC3-6cykloalkyl, Cl, Br, I, F, NO2, CN, (CH2)rNR7aR7a, (CH2)r<O>H, (CH2)rO(CH2)rR7d, (CH2)rSH, (CH2)rC(0)H, (CH2)rS(CH2)rR7d, (CH2)rC(0)OH, (CH2)rC(0)(CH2)rR7b, (CH2)rC(0)NR7aR7a, (CH2)rNR7fC(0)(CH2)rR7b, (CH2)rC(0)0(CH2)r<R7d>, (CH2)rOC(0)(CH2)rR7b,(CH2)rOC(0)NR7aR7a, (CH2)rNR<7a>C(0)NR7aR<7a>, (C<H>2)rNR<7a>C(0)0(CH2)rR<7d>, (CH2)rS(0)p(CH2)rR7b, (CH2)rS(0)2NR7aR7a, (CH2)rNR7fS(0)2(CH2)rR7<b>, Ci_6halogenalkyl og (CH2)rfenyl substituert med 0-3 R<7e>og et (CH2)r-5-6 leddet heterocyklisk system inneholdende 1-4 heteroatomer valgt fra N, O og S, substituert med 0-3 R<7e>, hvor det heterocykliske systemet er valgt fra tienyl, pyridinyl, benzotiazolyl og tetrazolyl; R<7a>, ved hver forekomst, er valgt fra H, metyl, etyl, propyl, i-propyl, butyl, i- butyl, t-butyl, pentyl, heksyl, prop-2-enyl, 2-metyl-2-propenyl, cyklopropyl, cyklobutyl, cyklopentyl, cykloheksyl, CH2cyklopropyl og benzyl; R<7b>, ved hver forekomst, er valgt fra metyl, etyl, propyl, i-propyl, butyl, i-butyl, t-butyl, pentyl, heksyl, cyklopropyl, cyklopentyl, CH2-cyklopentyl, cykloheksyl, CH2-cykloheksyl, CF3, pyrrolidinyl, morfolinyl, piperizenyl substituert med 0-1 R<7e>og azetidinyl; R<7>d, ved hver forekomst, er valgt fra metyl, CF3, CF2CF3, CHF2, CH2F, etyl, propyl, i-propyl, butyl, i-butyl, t-butyl, pentyl, heksyl og cyklopropyl; R<7>e, ved hver forekomst, er valgt fra C1-6alkyl, C2-8alkenyl, C2-8alkynyl, (CH2)rC3-6cykloalkyl, Cl, F, Br, I, CN, N02, (CF2)rCF3, (CH2)rOCi-5alkyl, OH, SH, C(0)OCi-5alkyl, (CH2)rSCi-5alkyl, (CH2)rNR7fR7f og (CH2)r<f>enyl; R<7f>, ved hver forekomst, er valgt fra H, metyl, etyl, propyl, i-propyl, butyl, i- butyl, t-butyl, pentyl, heksyl, cyklopropyl og fenyl; og r er 0 eller 1.
5. Forbindelse ifølge kravene 1-4, hvor: R<7>, ved hver forekomst, er valgt fra metyl, etyl, propyl, i-propyl, butyl, i-butyl, s- butyl, t-butyl, pentyl, heksyl, (CH2)rC3-6cykloalkyl, Cl, Br, I, F, NO2, CN, (CH2)rNR7aR7a, (CH2)r<O>H, (CH2)rOR<7>d, (CH2)rSH, (CH2)rC(0)H, (CH2)rSR<7>d, (CH2)rC(0)OH, (CH2)rC(0)R7b, (CH2)rC(0)NR7aR7a, (CH2)r<N>R<7f>C(0)R7b, (CH2)rC(0)OR7d, (CH2)rOC(0)R7b,(CH2)rOC(0)NR7aR7a,(CH2)rNR<7a>C(0)NR7aR7a, (CH2)rNR<7f>C(0)OR<7d>, (CH2)rS(0)pR7b, (CH2)rS(0)2NR<7a>R7a, (CH2)rNR7aS(0)2NR7aR7a, (CH2)r<N>R7fS(0)2R7b,Ci-2halogenalkyl,(CH2)rfenyl substituert med 0-3 R<7e>.
6. Forbindelse ifølge kravene 1-4, hvor Z er valgt fra -NHC(O)- og -NH-; R<1>er valgt fra Ci_6alkyl substituert fra 0-1 R<6>og -C(0)0-Ci_6alkyl; og R<2>er valgt fra fenyl substituert med 0-2 R<7>og et 5-10 leddet heteroaryl system inneholdende 1-4 heteroatomer valgt fra N, O og S, substituert med 0-3 R<7>hvor heteroarylsystemet er valgt fra kinazolinyl, triazinyl, pyrimidinyl, pikolinyl, isonikotinyl, furanyl, indolyl, pyridinyl, pyrazolyl, pyrazinyl, tiazolyl, tiofenyl og isoksazolyl.
7. Forbindelse ifølge kravene 1-4, hvor R<1>er valgt fra H, C<\_ q alkyl substituert med 0-1 R<6>og -C(0)0-Ci_6alkyl.
8. Forbindelse ifølge krav 1 som har strukturen:
eller et farmasøytisk akseptabelt salt derav.
9. Forbindelse ifølge krav 1 som har strukturen:
eller et farmasøytisk akseptabelt salt derav.
10. Forbindelse ifølge krav 1 som har strukturen:
eller et farmasøytisk akseptabelt salt derav.
11. Forbindelse ifølge krav 1 som har strukturen C/'s-(3S)-1-(4-(fert-butylamino)cykloheksyl)-3-(6-(trifluormetyl)kinazolin-4-ylamino)pyrrolidin-2-on, frans-(3S)-1-(4-(fert-butylamino)cykloheksyl)-3-(6-(trifluormetyl)kinazolin-4-ylamino)pyrrolidin-2-on, C/s-(3S)-1-(4-(fefr-butylamino)cykloheksyl)-3-(6-feAt-butylpyrrolo[1,2-f][1,2,4]triazin-4-ylamino)pyrrolidin-2-on, frans-(3S)-1-(4-(fert-butylamino)cykloheksyl)-3-(6-ferf-butylpyrrolo[1,2-fJ[1,2,4]triazin-4-ylamino)pyrrolidin-2-on, c/'s-(3S)-3-feAt-butyl-N-(1-(4-(fert-butylamino)cykloheksyl)-2-oksopyrrolidin-3-yl)-4-hydroksybenzamid, frans-(3S)-3-feAf-butyl-N-(1-(4-(feAt-butylamino)cykloheksyl)-2-oksopyrrolidin-3-yl)-4-hydroksybenzamid, Cis- og fra/7s-(3S)-4-fe/t-butyl-N-(1 -(4-(fert-butylamino)cykloheksyl)-2-oksopyrrolidin-3-yl)-1H-pyrrol-2-karboksamid, Cis- og fra/7s-(3S)-4-fetr-butyl-N-(1 -(4-(ferf-butylamino)cykloheksyl)-2-oksopyrrolidin-3-yl)-1 -metyl-1 H-pyrrol-2-karboksamid, N-{(3S)-1-[(1S, 2R, 4R)-4-(isopropyl-metyl-amino)-2-propyl-cykloheksyl]-2-okso-pyrrolidin-3-yl}-2-(3-isopropyl-ureido)-5-trifluormetyl-benzamid, 1-{2-[((S)-1-((1S,2R,4R)-4-(isopropyl(metyl)amino)-2-propylcykloheksyl)-2-oksopyrrolidin-3-yl)karbamoyl]-4-(trifluormetyl)fenyl}-3-etylurea, 1- (2-(((S)-1-((1S,2R,4R)-4-(isopropyl(metyl)amino)-2-propylcykloheksyl)-2-oksopyrrolidin-3-yl)karbamoyl)-4-(trifluormetyl)fenyl)-3-cyklopropylurea, N-((S)-1-((1S,2R,4R)-4-(isopropyl(metyl)amino)-2-propylcykloheksyl)-2-oksopyrrolidin-3-yl)-3-(trifluormetyl)benzamid, 3-tert-butyl-N-((S)-1 -((1 S,2R,4R)-4-(isopropyl(metyl)amino)-2-propylcykloheksyl)-2-oksopyrrolidin-3-yl)benzamid, 2- tert-butyl-N-((S)-1 -((1 S,2R,4R)-4-(isopropyl(metyl)amino)-2-propylcykloheksyl)-2-oksopyrrolidin-3-yl)pyrimidin-4-karboksamid, 3- tert-butyl-4-hydroksy-N-((S)-1 -((1 S,2R,4R)-4-(isopropyl(metyl)amino)-2-propylcykloheksyl)-2-oksopyrrolidin-3-yl)benzamid, 6-tert-butyl-N-((S)-1 -((1 S,2R,4R)-4-(isopropyl(metyl)amino)-2-propylcykloheksyl)-2-oksopyrrolidin-3-yl)pikolinamid, 2-tert-butyl-N-((S)-1 -((1 S,2R,4R)-4-(isopropyl(metyl)amino)-2-propylcykloheksyl)-2-oksopyrrolidin-3-yl)isonikotinamid, (S)-1-[(1S,2R,4R)-4-(isopropyl(metyl)amino)-2-propylcykloheksyl]-3-(6-(trifluormetyl)kinazolin-4-ylamino)pyrrolidin-2-on, (S)-1-((1S,2R,4R)-4-(isopropyl(metyl)amino)-2-propylcykloheksyl)-3-(6-(trifluormetoksy)kinazolin-4-ylamino)pyrrolidin-2-on, (S)-3-(6-klorkinazolin-4-ylamino)-1 -((1 S,2R,4R)-4-(isopropyl(metyl)amino)-2-propylcykloheksyl)pyrrolidin-2-on, (S)-3-(6-fluorkinazolin-4-ylamino)-1 -((1 S,2R,4R)-4-(isopropyl(metyl)amino)-2-propylcykloheksyl)pyrrolidin-2-on, (S)-3-(6-tert-butylpyrimido[5,4-d]pyrimidin-4-ylamino)-1-((1S,2R,4R)-4-(isopropyl(metyl)amino)-2-propylcykloheksyl)pyrrolidin-2-on, (S)-1-((1S,2R,4R)-4-(isopropyl(metyl)amino)-2-propylcykloheksyl)-3-(6-(2-metoksyfenyl)kinazolin-4-ylamino)pyrrolidin-2-on, 3-(4-((S)-1 -((1 S,2R,4R)-4-(isopropyl(metyl)amino)-2-propylcykloheksyl)-2-oksopyrrolidin-3-ylamino)kinazolin-6-yl)benzonitril, (S)-3-(6-klorkinazolin-4-ylamino)-1-((1S,2R,4R)-4-(isopropylamino)-2-propylcykloheksyl)pyrrolidin-2-on, (S)-3-(6-klorkinazolin-4-ylamino)-1 -((1 S,2R,4S)-4-(etyl(isopropyl)amino)-2-propylcykloheksyl)pyrrolidin-2-on, (S)-1-((1S,2R,4R)-4-(tert-butylamino)-2-propylcykloheksyl)-3-(6-(trifluormetyl)kinazolin-4-ylamino)pyrrolidin-2-on, (S)-1-((1S,2R,4S)-4-(tert-butylamino)-2-propylcykloheksyl)-3-(6-(trifluormetyl)kinazolin-4-ylamino)pyrrolidin-2-on, (S)-1 -((1 S,2R,4R)-4-(dimetylamino)-2-propylcykloheksyl)-3-(6-(trifluormetyl)kinazolin-4-ylamino)pyrrolidin-2-on, (S)-1 -((1 S,2R,4R)-4-(dimetylamino)-2-propylcykloheksyl)-3-(6-(trifluormetoksy)kinazolin-4-ylamino)pyrrolidin-2-on, 3-tert-butyl-N-((S)-1 -((1 S,2R,4R)-4-(dimetylamino)-2-propylcykloheksyl)-2-oksopyrrolidin-3-yl)-4-hydroksybenzamid, N-((S)-1 -((1 S,2R,4R)-4-(dimetylamino)-2-propylcykloheksyl)-2-oksopyrrolidin-3-yl)-3-(trifluormetyl)benzamid, N-((S)-1 -((1 S,2R,4R)-4-(dimetylamino)-2-propylcykloheksyl)-2-oksopyrrolidin-3-yl)-2-(trifluormetyl)pyrimidin-4-karboksamid, (S)-1-((1S,2R,4R)-4-(dimetylamino)-2-propylcykloheksyl)-3-(6-(2-metoksyfenyl)kinazolin-4-ylamino)pyrrolidin-2-on, 6-tert-butyl-N-((S)-1 -((1 S,2R,4R)-4-(dimetylamino)-2-propylcykloheksyl)-2-oksopyrrolidin-3-yl)pikolinamid, 5-(4-klorfenyl)-N-((S)-1-((1S,2R,4R)-4-(dimetylamino)-2-propylcykloheksyl)-2-oksopyrrolidin-3-yl)furan-2-karboksamid, (S)-3-(6-tert-butylpyrimido[5,4-d]pyrimidin-4-ylamino)-1-((1S,2R,4R)-4-(dimetylamino)-2-propylcykloheksyl)pyrrolidin-2-on, (S)-1 -((1 S,2R,4R)-4-(dietylamino)-2-propylcykloheksyl)-3-(6-(trifluormetyl)kinazolin-4-ylamino)pyrrolidin-2-on, (S)-1 -((1 S,2R,4R)-4-(dietylamino)-2-propylcykloheksyl)-3-(6-(trifluormetoksy)kinazolin-4-ylamino)pyrrolidin-2-on, N-((S)-1 -((1 S,2R,4R)-4-(dietylamino)-2-propylcykloheksyl)-2-oksopyrrol idin-3-yl )-3-(trif I uormetyl )be nza mid, 2-tert-butyl-N-((S)-1 -((1 S,2R,4R)-4-(dietylamino)-2-propylcykloheksyl)-2-oksopyrrolidin-3-yl)pyrimidin-4-karboksamid, (S)-1-((1S,2R,4R)-4-(isopropyl(metyl)amino)-2-propylcykloheksyl)-3-(6-(trifluormetyl)kinolin-4-ylamino)pyrrolidin-2-on, (R)-1-((1S,2R,4R)-4-(isopropyl(metyl)amino)-2-propylcykloheksyl)-3-(6-(trifluormetyl)kinolin-4-ylamino)pyrrolidin-2-on, 4- hydroksy-N-((S)-1 -((1 S,2R,4R)-4-(isopropyl(metyl)amino)-2-propylcykloheksyl)-2-oksopyrrolidin-3-yl)-3-fenyl-benzamid, N-((S)-1-((1S,2R,4R)-4-(isopropyl(metyl)amino)-2-propylcykloheksyl)-2-oksopyrrolidin-3-yl)-3-fenyl-benzamid, N-((S)-1-((1S,2R,4R)-4-(isopropyl(metyl)amino)-2-propylcykloheksyl)-2-oksopyrrolidin-3-yl)-2-fenyl-isonikotinamid N-oksid, N-((S)-1-((1S,2R,4R)-4-(isopropyl(metyl)amino)-2-propylcykloheksyl)-2-oksopyrrolidin-3-yl)-1 -metyl-1 H-indol-3-karboksamid, N-((S)-1-((1S,2R,4R)-4-(isopropyl(metyl)amino)-2-propylcykloheksyl)-2-oksopyrrolidin-3-yl)-1 -metyl-1 H-indol-2-karboksamid, N-((S)-1-((1S,2R,4R)-4-(isopropyl(metyl)amino)-2-propylcykloheksyl)-2-oksopyrrolidin-3-yl)-2-(metylsulfonamido)-5-(trifluormetyl)benzamid, N-((S)-1-((1S,2R,4R)-4-(isopropyl(metyl)amino)-2-propylcykloheksyl)-2-oksopyrrolidin-3-yl)-5-(trifluormetyl)-2-(trifluormetylsulfonamido)benzamid, 5- isopropyl-N-((S)-1 -((1 S,2R,4R)-4-(isopropyl(metyl)amino)-2-propylcykloheksyl)-2-oksopyrrolidin-3-yl)-2-(trifluormetylsulfonamido)benzamid, 2- klor-N-((S)-1 -((1 S,2R,4R)-4-(isopropyl(metyl)amino)-2-propylcykloheksyl)-2-oksopyrrolidin-3-yl)-5-(trifluormetyl)benzamid, metyl 3-(((S)-1 -((1 S,2R,4R)-4-(isopropyl(metyl)amino)-2-propylcykloheksyl)-2-oksopyrrolidin-3-yl)karbamoyl)-5-tert-butylbenzoat, 3- (((S)-1-((1S,2R,4R)-4-(isopropyl(metyl)amino)-2-propylcykloheksyl)-
2- oksopyrrolidin-3-yl)karbamoyl)-5-tert-butylbenzosyre, 2-tert-butyl-1-okso-N-((S)-1-((1S,2R,4R)-4-(isopropyl(metyl)amino)-2-propylcykloheksyl)-2-oksopyrrolidin-3-yl)pyrimidin-4-karboksamid, (S)-1-((1S,2S,4R)-2-isopropyl-4-(isopropyl(metyl)amino)cykloheksyl)-3- (6-(trifluormetyl)kinazolin-4-ylamino)pyrrolidin-2-on, (S)-1-((1S,2S,4S)-2-isopropyl-4-(isopropyl(metyl)amino)cykloheksyl)-3-(6-(trifluormetyl)kinazolin-4-ylamino)pyrrolidin-2-on, (S)-1-((1S,2S,4R)-2-isopropyl-4-(isopropyl(metyl)amino)cykloheksyl)-3-(6-(trifluormetoksy)kinazolin-4-ylamino)pyrrolidin-2-on, (S)-3-(6-klorkinazolin-4-ylamino)-1-((1S,2S,4R)-2-isopropyl-4-(isopropyl(metyl)amino)cykloheksyl)pyrrolidin-2-on, 6-tert-butyl-N-((S)-1 -((1 S,2S,4R)-2-isopropyl-4-(isopropyl(metyl)amino)cykloheksyl)-2-oksopyrrolidin-3-yl)pikolinamid, N-((S)-1-((1S,2R,4R)-4-(isopropyl(metyl)amino)-2-metylcykloheksyl)-2-oksopyrrolidin-3-yl)-3-(trifluormetyl)benzamid, (S)-1-((1S,2R,4R)-4-(isopropyl(metyl)amino)-2-metylcykloheksyl)-3-(6-(trifluormetyl)kinazolin-4-ylamino)pyrrolidin-2-on, (S)-1-((1S,2R,4R)-4-(isopropyl(metyl)amino)-2-metylcykloheksyl)-3-(6-(trifluormetoksy)kinazolin-4-ylamino)pyrrolidin-2-on, (S)-1-((1S,2R,4R)-2-etyl-4-(isopropyl(metyl)amino)-cykloheksyl)-3-(6-(trifluormetyl)kinazolin-4-ylamino)pyrrolidin-2-on, N-((S)-1 -((1 S,2R,4R)-4-(isopropyl(metyl)amino)-2-(metoksymetyl)cykloheksyl)-2-oksopyrrolidin-3-yl)-3-(trifluormetyl)benzamid, 1-(2-(((S)-1-((1S,2R,4R)-4-(isopropyl(metyl)amino)-2-(metoksymetyl)cykloheksyl)-2-oksopyrrolidin-3-yl)karbamoyl)-4-(trif I u ormety I )f e ny I )-3-ety I u rea, (S)-1 -((1 S,2R,4R)-4-(isopropyl(metyl)amino)-2- (metoksymetyl)cykloheksyl)-3-(6-(trifluormetyl)kinazolin-4-ylamino)pyrrolidin-2-on, (S)-3-(6-klorkinazolin-4-ylamino)-1 -((1 S,2R,4R)-4-(isopropyl(metyl)amino)-2-(metoksymetyl)cykloheksyl)pyrrolidin-2-on, (S)-1 -((1 S,2R,4R)-4-(isopropyl(metyl)amino)-2-(metoksymetyl)cykloheksyl)-3-(6-(trifluormetoksy)kinazolin-4-ylamino)pyrrolidin-2-on, (S)-1 -((1 S,2R,4R)-4-(isopropyl(metyl)amino)-2-(metoksymetyl)cykloheksyl)-3-(6-(2-metoksyfenyl)kinazolin-4-ylamino)pyrrolidin-2-on, N-((S)-1 -((1 S,2R,4R)-2-(etoksymetyl)-4- (isopropyl(metyl)amino)cykloheksyl)-2-oksopyrrolidin-3-yl)-3-(trifluormetyl)benzamid, (S)-1 -((1 S,2R,4R)-2-(etoksymetyl)-4- (isopropyl(metyl)amino)cykloheksyl)-3-(6-(trifluormetyl)kinazolin-4-ylamino)pyrrolidin-2-on, 1-(2-(((S)-1-((1S,2R,4R)-2-(etoksymetyl)-4- (isopropyl(metyl)amino)cykloheksyl)-2-oksopyrrolidin-3-yl)karbamoyl)-4-(trif I u ormety I )f e ny I )-3-ety I u rea, N-((S)-1 -((1 S,2S,4R)-4-(isopropyl(metyl)amino)-2-(2-metoksyetyl)cykloheksyl)-2-oksopyrrolidin-3-yl)-3-(trifluormetyl)benzamid, (S)-1 -((1 S,2S,4R)-4-(isopropyl(metyl)amino)-2-(2-metoksyetyl)cykloheksyl)-3-(6-(trifluormetyl)kinazolin-4-ylamino)pyrrolidin-2-on, 1-(2-(((S)-1-((1S,2S,4R)-4-(isopropyl(metyl)amino)-2-(2-metoksyetyl)cykloheksyl)-2-oksopyrrolidin-3-yl)karbamoyl)-4-(trif I u ormety I )f e ny I )-3-ety I u rea, 1-((1S,2R,4R)-2-(1-hydroksypropyl)-4- (isopropyl(metyl)amino)cykloheksyl)-3-(6-(trifluormetyl)kinazolin-4-ylamino)pyrrolidin-2-on, 1-((1S,2R,4R)-2-(1-hydroksypropyl)-4- (isopropyl(metyl)amino)cykloheksyl)-3-(6-(trifluormetyl)kinazolin-4-ylamino)pyrrolidin-2-on, N-(1-((1S,2R,4R)-2-(1-hydroksypropyl)-4- (isopropyl(metyl)amino)cykloheksyl)-2-oksopyrrolidin-3-yl)-3-(trifluormetyl)benzamid, N-(1-((1S,2R,4R)-2-(1-hydroksypropyl)-4- (isopropyl(metyl)amino)cykloheksyl)-2-oksopyrrolidin-3-yl)-2-(tert-butyl)pyrimidin-4-karboksamid, 5- (4-klorfenyl)-N-(1-((1S,2R,4R)-2-(1-hydroksypropyl)-4-(isopropyl(metyl)amino)cykloheksyl)-2-oksopyrrolidin-3-yl)furan-2-karboksamid, 1 -((1 S,2R,4R)-2-(1 -hydroksyetyl)-4- (isopropyl(metyl)amino)cykloheksyl)-3-(6-(trifluormetyl)kinazolin-4-ylamino)pyrrolidin-2-on, N-(1-((1S,2R,4R)-2-(1-hydroksyetyl)-4- (isopropyl(metyl)amino)cykloheksyl)-2-oksopyrrolidin-3-yl)-3-(trifluormetyl)benzamid, 1 -((1 S,2R,4R)-2-(hydroksymetyl)-4- (isopropyl(metyl)amino)cyklohek^ ylamino)pyrrolidin-2-on, 1 -((1 S,2R,4R)-2-(2-hydroksypropan-2-yl)-4- (isopropyl(metyl)amino)cykloheksyl)-3-(6-(trifluormetyl)kinazolin-4-ylamino)pyrrolidin-2-on, N-((S)-1 -((1 S,2R,4R)-2-(2-hydroksypropan-2-yl)-4-(isopropyl(metyl)amino)cykloheksyl)-2-oksopyrrolidin-3-yl)-3-(trifluormetyl)benzamid, 6- tert-butyl-N-((S)-1 -((1 S,2R,4R)-2-(2-hydroksypropan-2-yl)-4-(isopropyl(metyl)amino)cykloheksyl)-2-oksopyrrolidin-3-yl)pikolinamid, ((1R,2S,5R)-5-(isopropyl(metyl)amino)-2-(2-okso-3-(6-(trifluormetyl)kinazolin-4-ylamino)pyrrolidin-1-yl)cykloheksyl)metyl isobutyrat, ((1R,2S,5R)-5-(isopropyl(metyl)amino)-2-(2-okso-3-(3-(trifluormetyl)benzamido)pyrrolidin-1-yl)cykloheksyl)metyl isobutyrat, ((1R,2S,5R)-2-(3-(3-tert-butyl-1 -metyl-1 H-pyrazol-5-karboksamido)-2-oksopyrrolidin-1-yl)-5-(isopropyl(metyl)amino)cykloheksyl)metyl isobutyrat, ((1R,2S,5R)-5-(dimetylamino)-2-(2-okso-3-(6-(trifluormetyl)kinazolin-4-karboksamido)pyrrolidin-1 -yl)cykloheksyl)metyl isobutyrat, ((1R,2S,5R)-5-(dimetylamino)-2-(2-okso-3-(3-(trifluormetyl)benzamido)pyrrolidin-1-yl)cykloheksyl)metyl isobutyrat, ((1R,2S,5R)-2-(3-(3-tert-butyl-1-metyl-1 H-pyrazol-5-karboksamido)-2-oksopyrrolidin-1-yl)-5-(dimetylamino)cykloheksyl)metyl isobutyrat, N-((S)-1 -((1 S,2R,4R)-4-(isopropyl(metyl)amino)-2-(metylsulfonylmetyl)cykloheksyl)-2-oksopyrrolidin-3-yl)-3-(trifluormetyl)benzamid, 2- amino-N-((S)-1 -((1 S,2R,4R)-4-(isopropyl(metyl)amino)-2-(metylsu lfonyl metyl )cyklohe ksyl )-2-oksopyrrol id in-3-yl )-5-(trifluormetoksy)benzamid, 3- tert-butyl-N-((S)-1 -((1 S,2R,4R)-4-(isopropyl(metyl)amino)-2-(metylsulfonylmetyl)cykloheksyl)-2-oksopyrrolidin-3-yl)-1-metyl-1 H-pyrazol-5-karboksamid, 6-tert-butyl-N-((S)-1 -((1 S,2R,4R)-4-(isopropyl(metyl)amino)-2-(metylsulfonylmetyl)cykloheksyl)-2-oksopyrrolidin-3-yl)pikolinamid, N-((S)-1 -((1 S,2R,4R)-4-(isopropyl(metyl)amino)-2-(metylsu lf onyl metyl )cyklohe ksyl )-2-oksopyrrol id in-3-yl )-6-(trifluormetyl)pikolinamid, N-((S)-1 -((1 S,2R,4R)-4-(isopropyl(metyl)amino)-2-(metylsulfonylmetyl)cykloheksyl)-2-oksopyrrolidin-3-yl)-6-fenylpikolinamid, N-((S)-1 -((1 S,2R,4R)-4-(etyl(isopropyl)amino)-2-(metylsu lf onyl metyl )cyklohe ksyl )-2-oksopyrrol id in-3-yl )-3-(trifluormetyl)benzamid, N-((S)-1 -((1 S,2R,4R)-2-(metylsulfonylmetyl)-4-(neopentylamino)cykloheksyl)-2-oksopyrrolidin-3-yl)-3-(trifluormetyl)benzamid, N-((S)-1 -((1 S,2R,4R)-4-(isopropyl(metyl)amino)-2-(metylsulfonylmetyl)cykloheksyl)-2-oksopyrrolidin-3-yl)-4-metyl-3-(trifluormetyl)benzamid, 4- klor-N-((S)-1 -((1 S,2R,4R)-4-(isopropyl(metyl)amino)-2-(metylsu lf onyl metyl )cyklohe ksyl )-2-oksopyrrol id in-3-yl )-3-(trifluormetyl)benzamid, 3-tert-butyl-N-((S)-1 -((1 S,2R,4R)-4-(isopropyl(metyl)amino)-2-(metylsulfonylmetyl)cykloheksyl)-2-oksopyrrolidin-3-yl)benzamid, 3-fenyl-N-((S)-1 -((1 S,2R,4R)-4-(isopropyl(metyl)amino)-2-(metylsulfonylmetyl)cykloheksyl)-2-oksopyrrolidin-3-yl)benzamid, N-((S)-1 -((1 S,2R,4R)-4-(isopropyl(metyl)amino)-2-(metylsulfonylmetyl)cykloheksyl)-2-oksopyrrolidin-3-yl)-6-fenylpyrazin-2-karboksamid, 3-fluor-N-((S)-1-((1Sr2R,4R)-4-(isopropyl(metyl)amino)-2-(metylsulfonylmetyl)cykloheksyl)-2-oksopyrrolidin-3-yl)-5-(trifluormetyl)benzamid, N-((S)-1 -((1 S,2R,4R)-4-(isopropyl(metyl)amino)-2-(metylsu lf onyl metyl )cyklohe ksyl )-2-oksopyrrol id in-3-yl )-3-(trifluormetoksy)benzamid, (S)-1 -((1 S,2R,4R)-4-(isopropyl(metyl)amino)-2-(metylsulfonylmetyl)cykloheksyl)-3-(6-(trifluormetyl)kinazolin-4-ylamino)pyrrolidin-2-on, (S)-3-(6-klorkinazolin-4-ylamino)-1 -((1 S,2R,4R)-4-(isopropyl(metyl)amino)-2-(metylsulfonylmetyl)cykloheksyl)pyrrolidin-2-on, N-((S)-1 -((1 S,2R,4R)-4-(isopropyl(metyl)amino)-2-(metylsulfonylmetyl)cykloheksyl)-2-oksopyrrolidin-3-yl)-3,5-bis(trifluormetyl)benzamid, 3,5-diklor-N-((S)-1 -((1 S,2R,4R)-4-(isopropyl(metyl)amino)-2-(metylsulfonylmetyl)cykloheksyl)-2-oksopyrrolidin-3-yl)benzamid, N-((S)-1 -((1 S,2R,4R)-2-(tert-butylsulfonylmetyl)-4-(isopropyl(metyl)amino)cykloheksyl)-2-oksopyrrolidin-3-yl)-4-fluor-3-(trifluormetyl)benzamid, N-((S)-1 -((1 S,2R,4R)-2-(tert-butylsulfonylmetyl)-4-(isopropyl(metyl)amino)cykloheksyl)-2-oksopyrrolidin-3-yl)-6-(trifluormetyl)pikolinamid, N-((S)-1 -((1 S,2R,4R)-2-(tert-butylsulfonylmetyl)-4-(isopropyl(metyl)amino)cykloheksyl)-2-oksopyrrolidin-3-yl)-3-(trifluormetyl)benzamid, 6-tert-butyl-N-((S)-1 -((1 S,2R,4R)-2-(tert-butylsulfonylmetyl)-4-(isopropyl(metyl)amino)cykloheksyl)-2-oksopyrrolidin-3-yl)pikolinamid, N-((S)-1 -((1 S,2R,4R)-2-(tert-butylsulfonylmetyl)-4-(isopropyl(metyl)amino)cykloheksyl)-2-oksopyrrolidin-3-yl)-3-(trifluormetoksy)benzamid, N-((S)-1 -((1 S,2R,4R)-2-(tert-butylsulfonylmetyl)-4-(isopropyl(metyl)amino)cykloheksyl)-2-oksopyrrolidin-3-yl)-3-fluor-5-(trifluormetyl)benzamid, 2- amino-N-((S)-1 -((1 S,2R,4R)-2-(tert-butylsulfonylmetyl)-4-(isopropyl(metyl)amino)cykloheksyl)-2-oksopyrrolidin-3-yl)-5-(trifluormetoksy)benzamid, 3- amino-N-((S)-1 -((1 S,2R,4R)-2-(tert-butylsulfonylmetyl)-4-(isopropyl(metyl)amino)cykloheksyl)-2-oksopyrrolidin-3-yl)-5-(trifluormetyl)benzamid, N-((S)-1 -((1 S,2R,4R)-2-(tert-butylsulfonylmetyl)-4-(isopropyl(metyl)amino)cykloheksyl)-2-oksopyrrolidin-3-yl)-5-fenylnikotinamid N-oksid, (S)-1 -((1 S,2R,4R)-2-(tert-butylsulfonylmetyl)-4-(isopropyl(metyl)amino)cykloheksyl)-3-(6-(trifluormetyl)kinazolin-4-ylamino)pyrrolidin-2-on, (S)-1 -((1 S,2R,4R)-2-(tert-butylsulfonylmetyl)-4-(isopropyl(metyl)amino)cykloheksyl)-3-(6-klorkinazolin-4-ylamino)pyrrolidin-2-on, 3-tert-butyl-N-((S)-1-((1S,2R,4R)-2-(tert-butylsulfonylmetyl)-4-(isopropyl(metyl)amino)cykloheksyl)-2-oksopyrrolidin-3-yl)-4-hydroksybenzamid, N-((S)-1 -((1 S,2R,4R)-2-(tert-butylsulfonylmetyl)-4-(isopropyl(metyl)amino)cykloheksyl)-2-oksopyrrolidin-3-yl)-5-fenylnikotinamid, N-((S)-1 -((1 S,2R,4R)-4-(isopropyl(metyl)amino)-2-(isopropylsulfonylmetyl)cykloheksyl)-2-oksopyrrolidin-3-yl)-3-(trifluormetyl)benzamid, (S)-1 -((1 S,2R,4R)-4-(isopropyl(metyl)amino)-2-(isopropylsulfonylmetyl)cykloheksyl)-3-(6-(trifluormetyl)kinazolin-4-ylamino)pyrrolidin-2-on, 3-tert-butyl-N-((S)-1-((1S,2R,4R)-4-(isopropyl(metyl)amino)-2-(isopropylsulfonylmetyl) cykloheksyl)-2-oksopyrrolidin-3-yl)-1-metyl-1 H-pyrazol-5-karboksamid, 3-tert-butyl-N-((S)-1 -((1 S,2R,4R)-4-(isopropyl(metyl)amino)-2-(isopropylsulfonylmetyl)cykloheksyl)-2-oksopyrrolidin-3-yl)benzamid, (S)-1 -((1 S,2R,4R)-4-(etyl(isopropyl)amino)-2- (isopropylsulfonylmetyl)cykloheksyl)-3-(6-(trifluormetyl)kinazolin-4-ylamino)pyrrolidin-2-on, 3-tert-butyl-N-((S)-1 -((1 S,2R,4R)-4-(etyl(isopropyl)amino)-2-(isopropylsulfonylmetyl)cykloheksyl)-2-oksopyrrolidin-3-yl)benzamid, 3-tert-butyl-N-((S)-1-((1S,2R,4R)-4-(isopropyl(propyl)amino)-2-(isopropylsulfonylmetyl)cykloheksyl)-2-oksopyrrolidin-3-yl)benzamid, (S)-1 -((1 S,2R,4R)-4-(isopropyl(metyl)amino)-2-(isopropylsulfonylmetyl)cykloheksyl)-3-(6-(trifluormetoksy)kinazolin-4-ylamino)pyrrolidin-2-on, (S)-1 -((1 S,2R,4R)-4-(etyl(isopropyl)amino)-2- (isopropylsulfonylmetyl)cykloheksyl)-3-(6-(trifluormetoksy)kinazolin-4-ylamino)pyrrolidin-2-on, (S)-1 -((1 S,2R,4R)-4-(etyl(isopropyl)amino)-2- (isopropylsulfonylmetyl)cykloheksyl)-3-(6-(trifluormetyl)kinazolin-4-ylamino)pyrrolidin-2-on, N-((S)-1 -((1 S,2R,4R)-4-(isopropyl(metyl)amino)-2-(isopropylsulfonylmetyl)cykloheksyl)-2-oksopyrrolidin-3-yl)-1-metyl-1 H-indol-2-karboksamid, N-((S)-1 -((1 S,2R,4R)-2-(etylsulfonylmetyl)-4- (isopropyl(metyl)amino)cykloheksyl)-2-oksopyrrolidin-3-yl)-3-(trifluormetyl)benzamid, (S)-1 -((1 S,2R,4R)-2-(etylsulfonylmetyl)-4- (isopropyl(metyl)amino)cykloheksyl)-3-(6-(trifluormetyl)kinazolin-4-ylamino)pyrrolidin-2-on, N-((S)-1 -((1 S,2R,4R)-2-(etylsulfonylmetyl)-4- (isopropyl(metyl)amino)cykloheksyl)-2-oksopyrrolidin-3-yl)-3-(fenyl)benzamid, 3-(((S)-1 -((1 S,2R,4R)-2-(etylsulfonylmetyl)-4- (isopropyl(metyl)amino)cykloheksyl)-2-oksopyrrolidin-3-yl)karbamoyl)-5-tert-butylbenzosyre, (1 R,2S,5R)-metyl 5-(isopropyl(metyl)amino)-2-((S)-2-okso-3-(3-(trifluormetyl)benzamido)pyrrolidin-1-yl)cykloheksanekarboksylat, (1 R,2S,5R)-metyl 5-(tert-butylamino)-2-((S)-2-okso-3-(3-(trifluormetyl)benzamido)pyrrolidin-1-yl)cykloheksanekarboksylat, (1 R,2S,5R)-metyl 5-(tert-butyl(metyl)amino)-2-((S)-2-okso-3-(3-(trifluormetyl)benzamido)pyrrolidin-1-yl)cykloheksanekarboksylat, (1 R,2S,5R)-metyl 5-(isopropyl(metyl)amino)-2-((S)-2-okso-3-(6-(trifluormetyl)kinazolin-4-ylamino)pyrrolidin-1-yl)cykloheksanekarboksylat, (1 R,2S,5R)-metyl 5-(isopropyl(metyl)amino)-2-((S)-2-okso-3-(6-(trifluormetoksy)kinazolin-4-ylamino)pyrrolidin-1-yl)cykloheksanekarboksylat, (1 R,2S,5R)-metyl 2-((S)-3-(3-tert-butyl-4-hydroksybenzamido)-2-oksopyrrolidin-1-yl)-5-(isopropyl(metyl)amino)-cykloheksanekarboksylat, (1R,2S,5R)-metyl 2-((S)-3-(3-fluor-5-(trifluormetyl)benzamido)-2-oksopyrrolidin-1-yl)-5-(isopropyl(metyl)amino)-cykloheksanekarboksylat, (1 R,2S,5R)-metyl 2-((S)-3-(2-tert-butylpikolinamido)-2-oksopyrrolidin-1-yl)-5-(isopropyl(metyl)amino)-cykloheksanekarboksylat, (1 R,2S,5R)-metyl 2-((S)-3-(3-tert-butyl-4-hydroksybenzamido)-2-oksopyrrolidin-1-yl)-5-(tert-butylamino)cykloheksanekarboksylat, (1R,2S,5R)-metyl 2-((S)-3-(3-tert-butylbenzamido)-2-oksopyrrolidin-1-yl)-5-(tert-butylamino)cykloheksanekarboksylat, (1R,2S,5R)-metyl 5-(tert-butylamino)-2-((S)-3-(2-tert-butylpyrimidin-4-karboksamido)-2-oksopyrrolidin-1-yl)cykloheksanekarboksylat, (1 R,2S,5R)-metyl 5-(tert-butylamino)-2-((S)-3-(2-tert-butylpikolinamido)-2-oksopyrrolidin-1-yl)cykloheksanekarboksylat, (1R,2S,5R)-metyl 5-(tert-butylamino)-2-((S)-3-(3-fenylbenzamido)-2-oksopyrrolidin-1-yl)cykloheksanekarboksylat, (1 R,2S,5R)-metyl 5-(tert-butylamino)-2-((S)-2-okso-3-(2-fenylpyrazin-6-karboksamido)pyrrolidin-1-yl)cykloheksanekarboksylat, (1 R,2S,5R)-metyl 5-(tert-butylamino)-2-((S)-3-(4-fluor-3-(trifluormetyl)-benzamido)-2-oksopyrrolidin-1-yl)cykloheksanekarboksylat, (1 R,2S,5R)-metyl 5-(tert-butyl(metyl)amino)-2-((S)-3-(2-(4-klorfenyl)furan-5-karboksamido)-2-oksopyrrolidin-1-yl)cykloheksanekarboksylat, (1 R,2S,5R)-metyl 5-(tert-butyl(metyl)amino)-2-((S)-2-okso-3-(6-(trifluormetoksy)kinazolin-4-ylamino)pyrrolidin-1-yl)cykloheksanekarboksylat, (1 R,2S,5R)-metyl 5-(tert-butyl(metyl)amino)-2-((S)-2-okso-3-(6-(trifluormetyl)kinazolin-4-ylamino)pyrrolidin-1-yl)cykloheksanekarboksylat, (1 R,2S,5R)-metyl 5-(tert-butylamino)-2-((S)-2-okso-3-(4-(perfluoretyl)tiazol-2-karboksamido)pyrrolidin-1-yl)cykloheksanekarboksylat, (1R,2S,5R)-metyl 5-(tert-butylamino)-2-((S)-3-(4-tert-butyltiazol-2-karboksamido)-2-oksopyrrolidin-1-yl)cykloheksanekarboksylat, (1 R,2S,5R)-metyl 5-(tert-butylamino)-2-((S)-2-okso-3-(4-(3-(trifluormetyl)-fenyl)tiazol-2-karboksamido)pyrrolidin-1-yl)cykloheksanekarboksylat, (1R,2S,5R)-metyl 5-(tert-butylamino)-2-((S)-2-okso-3-(4-fenyltiazol-2-karboksamido)pyrrolidin-1-yl)cykloheksanekarboksylat, (1R,2S,5R)-metyl 5-(tert-butylamino)-2-((S)-3-(4-(4-klorfenyl)tiazol-2-karboksamido)-2-oksopyrrolidin-1-yl)cykloheksanekarboksylat, (1R,2S,5R)-metyl 5-(tert-butylamino)-2-((S)-2-okso-3-(2-fenyltiazol-4-karboksamido)pyrrolidin-1-yl)cykloheksanekarboksylat, (1R,2S,5R)-metyl 5-(tert-butylamino)-2-((S)-3-(2-(4-klorfenyl)tiazol-4-karboksamido)-2-oksopyrrolidin-1-yl)cykloheksanekarboksylat, (1 R,2S,5R)-metyl 2-((S)-3-(2-tert-butyl-5-metylfuran-4-karboksamido)-2-oksopyrrolidin-1-yl)-5-(tert-butylamino)cykloheksankarboksylat, (1 R,2S,5R)-metyl 5-(tert-butylamino)-2-((S)-2-okso-3-(2-(trifluormetyl)furan-5-karboksamido)pyrrolidin-1-yl)cykloheksanekarboksylat, (1R,2S,5R)-metyl 5-(tert-butylamino)-2-((S)-3-(2-(4-klorfenyl)furan-5-karboksamido)-2-oksopyrrolidin-1-yl)cykloheksanekarboksylat, (1 R,2S,5R)-metyl 5-(tert-butylamino)-2-((S)-2-okso-3-(2-(3-(trifluormetyl)fenyl)furan-5-karboksamido)pyrrolidin-1-yl)cykloheksanekarboksylat, (1 R,2S,5R)-metyl 5-(tert-butylamino)-2-((S)-3-(2-(2-klor-5-(trifluormetyl)fenyl)furan-5-karboksamido)-2-oksopyrrolidin-1-yl)cykloheksanekarboksylat, (1 R,2S,5R)-metyl 5-(tert-butylamino)-2-((S)-3-(2-(2,5-diklorfenyl)furan-5-karboksamido)-2-oksopyrrolidin-1-yl)cykloheksanekarboksylat, (1 R,2S,5R)-metyl 5-(tert-butylamino)-2-((S)-3-(2-(4-isopropylfenyl)furan-5-karboksamido)-2-oksopyrrolidin-1-yl)cykloheksanekarboksylat, (1R,2S,5R)-metyl 5-(tert-butylamino)-2-((S)-3-(2-(4-fluorfenyl)furan-5-karboksamido)-2-oksopyrrolidin-1-yl)cykloheksanekarboksylat, (1R,2S,5R)-metyl 5-(tert-butylamino)-2-((S)-2-okso-3-(2-fenylfuran-5-karboksamido)pyrrolidin-1-yl)cykloheksanekarboksylat, (1R,2S,5R)-metyl 5-(tert-butylamino)-2-((S)-3-(2-(3-fluorfenyl)furan-5-karboksamido)-2-oksopyrrolidin-1-yl)cykloheksanekarboksylat, (1 R,2S,5R)-metyl 5-(tert-butylamino)-2-((S)-3-(2-(3-cyanofenyl)furan-5-karboksamido)-2-oksopyrrolidin-1-yl)cykloheksanekarboksylat, (1 R,2S,5R)-metyl 5-(tert-butylamino)-2-((S)-3-(2-(3-metoksyfeny I )f u ra n-5-karboksa mido)-2-oksopyrrol id in-1 - yl)cykloheksanekarboksylat, (1 R,2S,5R)-metyl 5-(tert-butylamino)-2-((S)-3-(2-(4-cyanofenyl)furan-5-karboksamido)-2-oksopyrrolidin-1-yl)cykloheksanekarboksylat, (1 R,2S,5R)-metyl 5-(tert-butylamino)-2-((S)-3-(2-(3,4-difluorfenyl)furan-5-karboksamido)-2-oksopyrrolidin-1-yl)cykloheksanekarboksylat, (1 R,2S,5R)-metyl 5-(tert-butylamino)-2-((S)-2-okso-3-(2-(4-(trifluormetyl)fenyl)furan-5-karboksamido)pyrrolidin-1-yl)cykloheksanekarboksylat, (1 R,2S,5R)-metyl 5-(tert-butylamino)-2-((S)-3-(3-(4-metoksyfenyl)furan-5-karboksamido)-2-oksopyrrolidin-1-yl)cykloheksanekarboksylat, (1 R,2S,5R)-metyl 5-(tert-butylamino)-2-((S)-2-okso-3-(3-(4-(trifluormetyl)fenyl)furan-5-karboksamido)pyrrolidin-1-yl)cykloheksanekarboksylat, (1R,2S,5R)-metyl 5-(tert-butylamino)-2-((S)-2-okso-3-(3-fenylfuran-5-karboksamido)pyrrolidin-1-yl)cykloheksanekarboksylat, (1R,2S,5R)-metyl 5-(tert-butylamino)-2-((S)-2-okso-3-(3-fenyltiofen-5-karboksamido)pyrrolidin-1-yl)cykloheksanekarboksylat, (1R,2S,5R)-metyl 5-(tert-butylamino)-2-((S)-2-okso-3-(2-fenyltiofen-5-karboksamido)pyrrolidin-1-yl)cykloheksanekarboksylat, (1 R,2S,5R)-metyl 5-(tert-butylamino)-2-((S)-3-(2-(4-metoksyfenyl)tiofen-5-karboksamido)-2-oksopyrrolidin-1-yl)cykloheksanekarboksylat, (1 R,2S,5R)-metyl 5-(tert-butylamino)-2-((S)-3-(1-metyl-3-fenyl-1 H-pyrazol-5-karboksamido)-2-oksopyrrolidin-1-yl)cykloheksanekarboksylat, (1 R,2S,5R)-metyl 5-(tert-butylamino)-2-((S)-2-okso-3-(3-fenylisoksazol-5-karboksamido)pyrrolidin-1-yl)cykloheksanekarboksylat, (1 R,2S,5R)-metyl 5-(tert-butylamino)-2-((S)-2-okso-3-(6-(trifluormetyl)kinazolin-4-ylamino)pyrrolidin-1-yl)cykloheksanekarboksylat, (1 R,2S,5R)-metyl 5-(tert-butylamino)-2-((S)-3-(6-tert-butylpyrimido[5,4-d]pyrimidin-4-ylamino)-2-oksopyrrolidin-1-yl)cykloheksanekarboksylat, (1R,2S,5R)-metyl 5-(tert-butylamino)-2-((S)-3-(6-klorkinazolin-4-ylamino)-2-oksopyrrolidin-1-yl)cykloheksanekarboksylat, (1 R,2S,5R)-metyl 5-(tert-butylamino)-2-((S)-2-okso-3-(6-(trifluormetoksy)-kinazolin-4-ylamino)pyrrolidin-1-yl)cykloheksanekarboksylat, (1 R,2S,5S)-metyl 5-(tert-butylamino)-2-((S)-2-okso-3-(3-(trifluormetyl)-benzamido)pyrrolidin-1-yl)cykloheksanekarboksylat, (1 S,2S,5R)-metyl 5-(isopropyl(metyl)amino)-2-((S)-2-okso-3-(3-(trifluormetyl)benzamido)pyrrolidin-1-yl)cykloheksanekarboksylat, (1S,2S,5R)-metyl 2-((S)-3-(2-(4-klorfenyl)furan-5-karboksamido)-2-oksopyrrolidin-1-yl)-5-(isopropyl(metyl)amino)cykloheksanekarboksylat, (1 S,2S,5R)-metyl 2-((S)-3-(3-tert-butyl-4-hydroksybenzamido)-2-oksopyrrolidin-1-yl)-5-(isopropyl(metyl)amino)cykloheksanekarboksylat, (1S,2S,5R)-etyl 2-((S)-3-(2-(4-klorfenyl)furan-5-karboksamido)-2-oksopyrrolidin-1-yl)-5-(isopropyl(metyl)amino)cykloheksanekarboksylat, etyl 3-((1S,2S,5R)-5-(isopropyl(metyl)amino)-2-((S)-2-okso-3-(3-(trifluormetyl)benzamido)pyrrolidin-1-yl)cykloheksyl)propanoat, 3-((1S,2S,5R)-5-(isopropyl(metyl)amino)-2-((S)-2-okso-3-(3-(trifluormetyl)benzamido)pyrrolidin-1-yl)cykloheksyl)propansyre, (S)-1-((1R,2S,4S)-4-(isopropyl(metyl)amino)-2-metoksycykloheksyl)-3-(6-(trifluormetyl)kinazolin-4-ylamino)pyrrolidin-2-on, eller (S)-1-((1S,2R,4R)-4-(isopropyl(metyl)amino)-2-metoksycykloheksyl)-3-(6-(trifluormetyl)kinazolin-4-ylamino)pyrrolidin-2-on.
12. Forbindelse ifølge hvilket som helst av kravene 1-11, for anvendelse i terapi.
13. Farmasøytisk preparat, omfattende en farmasøytisk akseptabel bærer og en terapeutisk effektiv mengde av en forbindelse ifølge kravene 1-11.
14. Forbindelse ifølge hvilket som helst av kravene 1-11 for anvendelse i behandling av en lidelse valgt fra osteoartritt, aneurisme, feber, kardiovaskulære effekter, Crohn's sykdom, kongestiv hjertesvikt, autoimmune sykdommer, HIV-infeksjon, HIV-assosiert demens, psoriasis, idiopatisk pulmonal fibrose, transplantat arteriosklerose, fysisk- eller kjemisk-fremkalt hjerne traume, inflammatorisk tarmsykdom, alveoleritt, kolitt, systemisk lupus erythematosus, nefrotokisk serum nefritt, glomerulærnefritt, astma, multippel sklerose, artherosklerose, revmatoid artritt, restinose, organ transplantasjon og kreft.
15. Forbindelse ifølge hvilket som helst av kravene 1-11, for anvendelse i behandling av en lidelse valgt fra alveolertis, kolitt, systemisk lupus erythematosus, nefrotoksisk serum nefritt, glomerulærnefritt, astma, multippel sklerose, artherosklerose, revmatoid, artritt restinose, organ transplantasjon og kreft.
16. Forbindelse ifølge hvilket som helst av kravene 1-11, for anvendelse i behandling av en lidelse valgt fra astma, multippel sklerose, artherosklerose og revmatoid artritt.
NO20060717A 2003-08-21 2006-02-14 Cykliske derivater, farmasøytiske preparater omfattende slike, slike forbindelser for anvendelse i terapi samt slike forbindelser for behandling av sykdommer NO335946B1 (no)

Applications Claiming Priority (3)

Application Number Priority Date Filing Date Title
US49694703P 2003-08-21 2003-08-21
US10/923,619 US7163937B2 (en) 2003-08-21 2004-08-19 Cyclic derivatives as modulators of chemokine receptor activity
PCT/US2004/027196 WO2005021500A1 (en) 2003-08-21 2004-08-20 Cyclic derivatives as modulators of chemokine receptor activity

Publications (2)

Publication Number Publication Date
NO20060717L NO20060717L (no) 2006-05-16
NO335946B1 true NO335946B1 (no) 2015-03-30

Family

ID=34228609

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
NO20060717A NO335946B1 (no) 2003-08-21 2006-02-14 Cykliske derivater, farmasøytiske preparater omfattende slike, slike forbindelser for anvendelse i terapi samt slike forbindelser for behandling av sykdommer

Country Status (22)

Country Link
US (3) US7163937B2 (no)
EP (1) EP1656345B1 (no)
JP (1) JP4795238B2 (no)
KR (1) KR101120338B1 (no)
AU (1) AU2004268968B2 (no)
BR (1) BRPI0413713A (no)
CA (1) CA2536384C (no)
DK (1) DK1656345T3 (no)
ES (1) ES2437104T3 (no)
HK (1) HK1087712A1 (no)
HR (1) HRP20131048T1 (no)
IL (2) IL173824A (no)
IS (1) IS8313A (no)
MX (1) MXPA06001819A (no)
NO (1) NO335946B1 (no)
NZ (1) NZ545317A (no)
PL (1) PL1656345T3 (no)
PT (1) PT1656345E (no)
RS (1) RS20060116A (no)
RU (1) RU2006108867A (no)
SI (1) SI1656345T1 (no)
WO (1) WO2005021500A1 (no)

Families Citing this family (46)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
AR035773A1 (es) 2000-12-20 2004-07-14 Bristol Myers Squibb Pharma Co Compuestos diamino ciclico, composicion farmaceutica y su uso en la fabricacion de un medicamento util para modular la actividad de una quimioquina
AU2002241724A1 (en) 2000-12-20 2002-07-01 Bristol-Myers Squibb Company Diamines as modulators of chemokine receptor activity
US7087604B2 (en) * 2002-03-08 2006-08-08 Bristol-Myers Squibb Company Cyclic derivatives as modulators of chemokine receptor activity
US7291615B2 (en) 2003-05-01 2007-11-06 Bristol-Myers Squibb Company Cyclic derivatives as modulators of chemokine receptor activity
US7317019B2 (en) * 2003-08-21 2008-01-08 Bristol Myers Squibb Co. N-alkylated diaminopropane derivatives as modulators of chemokine receptor activity
US7163937B2 (en) * 2003-08-21 2007-01-16 Bristol-Myers Squibb Company Cyclic derivatives as modulators of chemokine receptor activity
US7825244B2 (en) 2005-06-10 2010-11-02 Janssen Pharmaceutica Nv Intermediates useful in the synthesis of alkylquinoline and alkylquinazoline kinase modulators, and related methods of synthesis
US8071768B2 (en) 2005-06-10 2011-12-06 Janssen Pharmaceutica, N.V. Alkylquinoline and alkylquinazoline kinase modulators
JP2009503107A (ja) * 2005-08-04 2009-01-29 アポジー・バイオテクノロジー・コーポレイション スフィンゴシンキナーゼ阻害剤およびそれらの使用方法
US20100016289A1 (en) * 2005-11-01 2010-01-21 Kevin Sprott Compounds Useful as Antagonists of CCR2
WO2007053498A1 (en) * 2005-11-01 2007-05-10 Millennium Pharmaceuticals, Inc. Compounds useful as antagonists of ccr2
US8067415B2 (en) * 2005-11-01 2011-11-29 Millennium Pharmaceuticals, Inc. Compounds useful as antagonists of CCR2
GB0524786D0 (en) * 2005-12-05 2006-01-11 Glaxo Group Ltd Compounds
US7601844B2 (en) 2006-01-27 2009-10-13 Bristol-Myers Squibb Company Piperidinyl derivatives as modulators of chemokine receptor activity
US7687508B2 (en) * 2006-07-28 2010-03-30 Bristol-Myers Squibb Company Cyclic derivatives as modulators of chemokine receptor activity
US7629351B2 (en) * 2006-07-28 2009-12-08 Bristol-Myers Squibb Company N-((1R,2S,5R)-5-(tert-butylamino)-2-((S)-2-oxo-3-(6-(trifluoromethyl)quinazolin-4-ylamino) pyrrolidin-1-yl)cyclohexyl)acetamide and other modulators of chemokine receptor activity, crystalline forms and process
US7671062B2 (en) * 2006-07-28 2010-03-02 Bristol-Myers Squibb Company Modulators of chemokine receptor activity, crystalline forms and process
US20080076120A1 (en) * 2006-09-14 2008-03-27 Millennium Pharmaceuticals, Inc. Methods for the identification, evaluation and treatment of patients having CC-Chemokine receptor 2 (CCR-2) mediated disorders
EP2120928A2 (en) * 2007-02-15 2009-11-25 Pfizer Limited Pharmaceutical compositions and methods for ccr5 antagonists
US10745701B2 (en) 2007-06-28 2020-08-18 The Trustees Of Princeton University Methods of identifying and treating poor-prognosis cancers
US20090324596A1 (en) 2008-06-30 2009-12-31 The Trustees Of Princeton University Methods of identifying and treating poor-prognosis cancers
MX2010002904A (es) 2007-09-17 2010-06-02 Abbott Lab N-fenil-dioxo-hidropirimidinas utiles como inhibidores de virus de hepatitis c (hcv).
ATE519746T1 (de) 2007-09-17 2011-08-15 Abbott Lab Antiinfektiöse pyrimidine und anwendungen davon
SG183733A1 (en) 2007-09-17 2012-09-27 Abbott Lab Uracil or thymine derivative for treating hepatitis c
EP2203051A4 (en) * 2007-09-25 2011-09-07 Abbott Lab OCTAHYDROPENTAL COMPOUNDS AS CHEMOKIN RECEPTOR ANTAGONISTS
EP2376491B1 (en) 2008-12-19 2015-03-04 Cephalon, Inc. Pyrrolotriazines as alk and jak2 inhibitors
US8383812B2 (en) 2009-10-13 2013-02-26 Bristol-Myers Squibb Company N-((1R,2S,5R)-5-(tert-butylamino)-2-((S)-3-(7-tert-butylpyrazolo[1,5-A][1,3,5]triazin-4-ylamino)-2-oxopyrrolidin-1-yl)cyclohexyl)acetamide, a dual modulator of chemokine receptor activity, crystalline forms and processes
US8470820B2 (en) 2010-01-22 2013-06-25 Hoffman-La Roche Inc. Nitrogen-containing heteroaryl derivatives
EP2534158B1 (en) * 2010-02-09 2014-01-08 Bristol-Myers Squibb Company Benzylpyrrolidinone derivatives as modulators of chemokine receptor activity
US9216952B2 (en) 2010-03-23 2015-12-22 Abbvie Inc. Process for preparing antiviral compound
US8703768B2 (en) 2010-06-09 2014-04-22 Hoffmann-La Roche Inc. Nitrogen containing heteroaryl compounds
BR112013001138A2 (pt) 2010-07-16 2016-07-05 Abbvie Inc ligantes de fosfina para reações catalíticas
US9255074B2 (en) 2010-07-16 2016-02-09 Abbvie Inc. Process for preparing antiviral compounds
US8975443B2 (en) 2010-07-16 2015-03-10 Abbvie Inc. Phosphine ligands for catalytic reactions
KR101893751B1 (ko) 2010-07-16 2018-09-03 애브비 아일랜드 언리미티드 컴퍼니 항바이러스성 화합물의 제조 방법
EA023171B1 (ru) * 2011-09-19 2016-04-29 Сигма-Тау Индустрие Фармасьютике Риуните С.П.А. Тиопроизводные лактамов в качестве высокоактивных ингибиторов hdac и их применение в качестве лекарственных средств
WO2013149376A1 (en) 2012-04-02 2013-10-10 Abbott Laboratories Chemokine receptor antagonists
CN116059196A (zh) * 2013-03-15 2023-05-05 斯克利普斯研究所 用于诱导软骨形成的化合物和方法
WO2017004134A1 (en) * 2015-06-29 2017-01-05 Nimbus Iris, Inc. Irak inhibitors and uses thereof
SG11201809172WA (en) 2016-04-29 2018-11-29 Bayer Pharma AG Crystalline forms of n-[2-(3-hydroxy-3-methylbutyl)-6-(2-hydroxypropan-2-yl)-2h-indazol-5-yl]-6-(trifluoromethyl)pyridine-2-carboxamide
RS62112B1 (sr) 2016-04-29 2021-08-31 Bayer Pharma AG Sinteza indazola
EA202091751A1 (ru) 2018-01-22 2020-11-06 Бристол-Маерс Сквибб Компани Композиции и способы лечения рака
PE20210046A1 (es) * 2018-03-05 2021-01-08 Bristol Myers Squibb Co Agonistas de fenilpirrolidinona del receptor 2 de formil peptido
EP4192495A1 (en) 2020-08-07 2023-06-14 Bristol-Myers Squibb Company Fgf21 combined with ccr2/5 antagonists for the treatment of fibrosis
CN112778109B (zh) * 2021-01-15 2022-09-06 台州臻挚生物科技有限公司 1-[3-氯-5-(三氟甲基)苯基]-2,2,2-三氟乙酮及其衍生物的制备方法
WO2023049796A1 (en) * 2021-09-22 2023-03-30 Drexel University RelA/RSH INHIBITORS FOR THE TREATMENT OR PREVENTION OF MEDICAL BIOFILMS

Family Cites Families (35)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
DE812551C (de) * 1949-05-13 1951-09-03 Basf Ag Verfahren zur Herstellung von Pyrrolidon-Derivaten
JPS6383082A (ja) 1986-09-26 1988-04-13 Takeda Chem Ind Ltd テトラヒドロフランカルボン酸誘導体の製造法
CA2084800A1 (en) 1991-12-16 1993-06-17 Joseph P. Vacca Hiv protease inhibitors with an internal lactam ring
GB9515411D0 (en) 1995-07-27 1995-09-27 Pharmacia Spa N-(4-substituted-benzyl)-2-aminolactam derivatives
US5827875A (en) 1996-05-10 1998-10-27 Bristol-Myers Squibb Company Inhibitors of microsomal triglyceride transfer protein and method
UA51716C2 (uk) 1996-07-08 2002-12-16 Авентіс Фармасьютікалз Продактс Інк. Сполуки, що мають гіпотензивну, кардіопротекторну, анти-ішемічну та антиліполітичну властивості, фармацевтична композиція та способи лікування
US6054579A (en) 1997-06-26 2000-04-25 Leukosite, Inc. Synthesis of substituted lactams
GB9716656D0 (en) 1997-08-07 1997-10-15 Zeneca Ltd Chemical compounds
ZA99607B (en) 1998-01-27 1999-07-27 Rhone Poulenc Rorer Pharma Substituted oxoazaheterocyclyl factor xa inhibitors.
WO1999038844A1 (en) 1998-01-29 1999-08-05 Aventis Pharmaceuticals Products Inc. Method for preparing an n-[(aliphatic or aromatic)carbonyl]-2-aminoacetamide compound and a cyclyzed compound
US6492553B1 (en) 1998-01-29 2002-12-10 Aventis Pharamaceuticals Inc. Methods for preparing N-[(aliphatic or aromatic)carbonyl)]-2-aminoaetamide compounds and for cyclizing such compounds
GB9803228D0 (en) 1998-02-17 1998-04-08 Zeneca Ltd Chemical compounds
AU4143300A (en) * 1999-04-28 2000-11-17 Takeda Chemical Industries Ltd. Cyclic amide compounds, process for the preparation of the same and uses thereof
AU7354900A (en) 1999-09-09 2001-04-10 Merck & Co., Inc. Inhibitors of prenyl-protein transferase
AU2001253108A1 (en) 2000-04-03 2001-10-15 Bristol-Myers Squibb Pharma Company Cyclic lactams as inhibitors of a-beta protein production
IL151576A0 (en) 2000-04-03 2003-04-10 Bristol Myers Squibb Pharma Co Cyclic lactams as inhibitors of a-beta protein production
MXPA02012712A (es) 2000-06-30 2003-04-25 Bristol Myers Squibb Pharma Co N-ureidoheterocicloalquil-piperidinas como moduladores de la actividad del receptor de quimiocinas.
US6620823B2 (en) 2000-07-11 2003-09-16 Bristol-Myers Squibb Pharme Company Lactam metalloprotease inhibitors
AR035773A1 (es) 2000-12-20 2004-07-14 Bristol Myers Squibb Pharma Co Compuestos diamino ciclico, composicion farmaceutica y su uso en la fabricacion de un medicamento util para modular la actividad de una quimioquina
AU2002241724A1 (en) 2000-12-20 2002-07-01 Bristol-Myers Squibb Company Diamines as modulators of chemokine receptor activity
AU2002249103A1 (en) 2001-03-29 2002-10-15 Topo Target Aps Succinimide and maleimide derivatives and their use as topoisomerase ii catalytic inhibitors
GB0114867D0 (en) 2001-06-18 2001-08-08 Merck Sharp & Dohme Therapeutic agents
DE10135043A1 (de) 2001-07-11 2003-01-30 Bayer Cropscience Gmbh Substituierte 3-Heteroaryl(amino- oder oxy)-pyrrolidin-2-one, Verfahren zu deren Herstellung und Verwendung als Herbizide oder als Pflanzenwachstumsregulatoren
EP1471715B1 (en) * 2002-01-31 2010-01-13 Kyocera Corporation Cellular telephone
US7087604B2 (en) 2002-03-08 2006-08-08 Bristol-Myers Squibb Company Cyclic derivatives as modulators of chemokine receptor activity
TW200307667A (en) 2002-05-06 2003-12-16 Bristol Myers Squibb Co Sulfonylaminovalerolactams and derivatives thereof as factor Xa inhibitors
AU2003263393A1 (en) 2002-09-04 2004-03-29 Glenmark Pharmaceuticals Limited New heterocyclic amide compounds useful for the treatment of inflammatory and allergic disorders: process for their preparation and pharmaceutical compositions containing them
WO2004071449A2 (en) 2003-02-12 2004-08-26 Bristol-Myers Squibb Company Lactams as modulators of chemokine receptor activity
TW200508224A (en) 2003-02-12 2005-03-01 Bristol Myers Squibb Co Cyclic derivatives as modulators of chemokine receptor activity
US7291615B2 (en) 2003-05-01 2007-11-06 Bristol-Myers Squibb Company Cyclic derivatives as modulators of chemokine receptor activity
US7230133B2 (en) 2003-05-01 2007-06-12 Bristol-Myers Squibb Company Malonamides and malonamide derivatives as modulators of chemokine receptor activity
US7163937B2 (en) * 2003-08-21 2007-01-16 Bristol-Myers Squibb Company Cyclic derivatives as modulators of chemokine receptor activity
US7317019B2 (en) 2003-08-21 2008-01-08 Bristol Myers Squibb Co. N-alkylated diaminopropane derivatives as modulators of chemokine receptor activity
US20050043392A1 (en) 2003-08-21 2005-02-24 Carter Percy H. Lactams of alkylated acyclic diamine derivatives as modulators of chemokine receptor activity
US7378409B2 (en) 2003-08-21 2008-05-27 Bristol-Myers Squibb Company Substituted cycloalkylamine derivatives as modulators of chemokine receptor activity

Also Published As

Publication number Publication date
CA2536384A1 (en) 2005-03-10
BRPI0413713A (pt) 2006-10-17
DK1656345T3 (da) 2014-01-06
US20070032526A1 (en) 2007-02-08
RU2006108867A (ru) 2007-09-27
IS8313A (is) 2006-02-20
KR20060117903A (ko) 2006-11-17
IL173824A0 (en) 2006-07-05
CA2536384C (en) 2011-01-11
AU2004268968A1 (en) 2005-03-10
KR101120338B1 (ko) 2012-04-12
JP2007502843A (ja) 2007-02-15
NZ545317A (en) 2009-03-31
US7482335B2 (en) 2009-01-27
WO2005021500A1 (en) 2005-03-10
HK1087712A1 (en) 2006-10-20
US20050054627A1 (en) 2005-03-10
MXPA06001819A (es) 2006-05-04
IL228794A0 (en) 2013-12-31
US7829571B2 (en) 2010-11-09
EP1656345A1 (en) 2006-05-17
PL1656345T3 (pl) 2014-03-31
EP1656345B1 (en) 2013-10-16
SI1656345T1 (sl) 2014-01-31
JP4795238B2 (ja) 2011-10-19
RS20060116A (en) 2008-04-04
US20090124668A1 (en) 2009-05-14
HRP20131048T1 (hr) 2013-12-06
AU2004268968B2 (en) 2011-11-10
IL173824A (en) 2013-10-31
PT1656345E (pt) 2013-12-27
US7163937B2 (en) 2007-01-16
NO20060717L (no) 2006-05-16
ES2437104T3 (es) 2014-01-08

Similar Documents

Publication Publication Date Title
EP1656345B1 (en) Cyclic derivatives as modulators of chemokine receptor activity
US7378409B2 (en) Substituted cycloalkylamine derivatives as modulators of chemokine receptor activity
EP1606255B1 (en) Cyclic derivatives as modulators of chemokine receptor activity
KR101348491B1 (ko) 케모킨 수용체 활성의 조절인자로서의 피페리디닐 유도체
US7288563B2 (en) Substituted bicycloalkylamine derivatives as modulators of chemokine receptor activity
US7381738B2 (en) Substituted bicycloalkylamine derivatives as modulators of chemokine receptor activity
EP1620391A2 (en) Cyclic derivatives as modulators of chemokine receptor activity
EP1667966A1 (en) N-alkylated diaminopropane derivatives as modulators of chemokine receptor activity

Legal Events

Date Code Title Description
MM1K Lapsed by not paying the annual fees