NO315427B1

NO315427B1 - Histidin- og homohistidin-derivater som inhibitorer for protein-farnesyltransferase, anvendelse derav, farmasöytisk preparat, opplösnings-syntesemetode samt fastfase-syntesemetode

Info

Publication number: NO315427B1
Application number: NO19965604A
Authority: NO
Inventors: Gary Louis Bolton; John Cooke Hodges; Michael William Wilson
Original assignee: Warner Lambert Co
Priority date: 1994-06-30
Filing date: 1996-12-27
Publication date: 2003-09-01
Also published as: AU2650495A; DK0767800T3; NZ287696A; PT767800E; WO1996000736A1; JPH10502078A; AU699629B2; ES2158115T3; GR3035936T3; NO965604D0; DE69520499T2; ZA955411B; MX9605945A; ATE200085T1; EP0767800A1; US5571792A; CA2190977A1; NO965604L; EP0767800B1; HRP950337A2

Description

Område for oppfinnelsen

Foreliggende oppfinnelse angår en rekke forbindelser som kan anvendes innen medisinen for å behandle, eventuelt profylaktisk, ukontrollert eller abnorm rask formering av humant vev. Mer spesielt angår foreliggende oppfinnelse en rekke forbindelser som hemmer farnesylgransferase-enzymet som er funnet å aktivere ras-proteiner som på sin side aktiverer celledeling og inngår ved kreft og restenose.

Oppfinnelsen vedrører følgelig histidin- og homohistidinderivater som inhibitorer for protein-farnesyltransferase, anvendelse derav, farmasøytisk preparat, oppløsnings-syntesemetode samt fastfase-syntesemetode.

Bakgrunn for oppfinnelsen

Ras-protein (eller p21) er grundig undersøkt fordi mutant-former er funnet i 20% av de fleste typer kreft hos mennesker og mer enn 50% av tykktarm- og pankreas-carcinom (Gibbs J. B., Cell, 65:1 (1991), Cartwright T. et al., Chimica. Oggi., 10:26 (1992)). Disse mutante ras-proteinene har svekket evne til "feedback"-regulering som er til stede hos nativt ras, og denne svekkelsen er forbundet med deres onkogene virkning, ettersom evnen til å stimulere normal celledeling ikke kan kontrolleres av de normale endogene regulerings- kofaktorene. Den nye oppdagelsen at den omdannende aktiviteten til mutant ras er kritisk avhengig av posttranslasjonelle modifikasjoner (Gibbs, J. et al. Microbiol. Rev. 53:171 (1989)) har avdekket et viktig aspekt ved ras-funksjon og gitt nye muligheter for kreftterapi.

I tillegg til kreft finnes andre tilstander av ukontrollert rask celleformering som kan være forbundet med overdreven ekspresjon og/eller funksjon til native ras-proteiner. Post-operativ vaskulær restenose er en slik tilstand. Anvendelsen av forskjellige kirurgiske revaskulariseringsteknikker så som saphena-vene bypass implantering, endarterektomi og transluminal koronar angioplasti følges ofte av komplikasjoner som skyldes ukontrollert vekst av neointimalt vev, kjent som restenose. De biokjemiske årsakene til restenose er lite forstått og en rekke vekst-faktorer og protoonkogener har vært implisert (Naftilan A. J. et al., Hypertension, 13:706 (1989) og J. Clin. Invest., 83:1419; Gibbons G. H. et al., Hypertension, 14:358 (1989); Satoh T. et al., Mollec. Cell. Biol., 13:3706 (1993)). Det faktum at ras-proteiner er kjent å være involvert i celledelingsprosesser, gjør dem aktuelle for inngrep i mange situasjoner hvor celler deles ukontrollerbart. Direkte analogt med hemning av mutant ras-relatert kreft, har blokkade av ras-avhengige prosesser potensiale til å redusere eller eliminere den uheldige raske vevsformering knyttet til restenose, spesielt i de tilfeller hvor normal ras-ekspresjon og/eller -funksjon blir overdrevet av vekst-stimulerende faktorer.

Ras-funksjon er avhengig av modifikasjon av proteiner for å festes til den indre

overflaten av plasmamembraner. I motsetning til andre membranassosierte proteiner, mangler ras-proteiner konvensjonelle transmembrane eller hydrofobe sekvenser og blir først syntetisert i en cytosol-oppløselig form. Ras-protein membranassosiering settes i gang ved en serie post-translasjonelle prosess-trinn som signaliseres av en karboksylterminal-aminosyre konsensus-sekvens som gjenkjennes av protein-farnesyltransferase (PFT). Denne konsensussekvensen består av en cysteinrest lokalisert fire aminosyrer fra karboksyl-terminalen, fulgt av to lipofile aminosyrer og den C-terminale resten. Sulfhydryl-gruppen i cysteinresten alkyleres av farnesylpyrofosfat i en reaksjon som katalyseres av protein-farnesyltransferase. Etter prenylering spaltes de C-terminale tre aminosyrene av en endoprotease og den nyeksponerte alfakarboksylgruppen i det prenylerte cystein metyleres av metyltransferase. Den enzymatiske prosessering av ras-proteiner som begynner med farnesylering, gjør proteinet i stand til å assosiere med cellemembranen. Mutasjonell analyse av onkogene ras-proteiner indikerer at disse post-translasjonelle modifikasjonene er essensielle for transformeringsaktivitet. Erstatning av konsensus sekvens cysteinresten med andre aminosyrer gir et ras-protein som ikke lenger er farnesylert, ikke kan migrere til cellemembranen, og mangler evnen til å stimulere rask celleformering (Hancock J. F. et al., Cell, 57:1617 (1989), Schafer W. R. et al., Science, 245-379 (1989), Casey P. J. Proe. Nati. Acad. Sei. USA, 86:8323 (1989)).

Nylig er protein farnesyltransferaser (PFT, også betegnet farnesyl-proteintransferaser (FPT) blitt identifisert og en spesifikk PFT fra rottehjeme ble renset til homogenitet (Reiss Y. et al., Bioch. Soc. Trans., 20:487-88 (1992)). Enzymet ble karakterisert som en heterodimer sammensatt av én alfa-subenhet (49 kDa) og én beta-subenhet (46 kDa), som begge er nødvendige for katalytisk aktivitet. Høynivå-ekspresjon av pattedyr PFT i et baclovirus-system og rensning av det rekombinante enzymet i aktiv form er også oppnådd (Chen W.-J. et al., J. Biol. Chem., 268-9675 (1993)).

EP 0 523 873 Al (Gibbs et al.) beskriver farnesylproteintransferase-inhiberende forbindelse med formel Cys-Xaa<1->Xaa<2->Xaa<3>, hvor Cys er en cystein-aminosyre, Xaa<1> er en hvilken som helst aminosyre, Xaa<2> er aminosyren fenylalanin eller p-flyorfenylalanin, og Xaa er en hvilken som helst aminosyre.

Artikkelen Peptide Based P21<RAS> Farnesyl Transferase Inhibitors: Systematic Modification of the Tetrapeptide CA1A2X Motif, Leftheris et al., Bioorg. Chem. Med. Chem. Ltrs., Vol. 4, sider 887-892,1994, beskriver en systematisk studie av CVFM, en CAAX-avledet famesyltransferaseinhibitor, inkludert modifikasjoner av sidekjedefunksjonelle grupper på molekylets peptidskjelett. Artikkelen beskriver videre et antall peptidbaserte inhibitorer av famesyltransferase, inkludert Cys-Val-Phe-Met, Cys-Ala-Phe-Met, Cys-Aib-Phe-Met, Cys-Ac6c-Phe-Met, Cys-Val-dPhe-Met, Cys-Val-Phe-Nle, Cys-Val-Phe-Phe, osv.

I lys av det ovenstående, tilveiebringer oppdagelsen at funksjonen av onkogene ras-proteiner er kritisk avhengig av deres post-translasjonelle prosessering, metoder for kreft kjemoterapi ved hemning av de prosesserende enzymene. Identifisering og isolering av en protein-farnesyltransferase som katalyserer tilsetning av en farnesylgruppe til ras-proteiner gir et lovende mål for slikt inngrep. Nylig er det funnet at prototypiske inhibitorer for PFT kan hemme ras-prosessering og reversere kreftøs morfologi i tumorcellemodeller (Kohl N.E. et al., Science, 260:1934 (1993), James G.L. et al., Science, 260:1937 (1993), Garcia A. M. et al., J. Biol. Chem. 268:18415 (1993)). Det er således mulig å hindre eller forsinke begynnelse av rask cellulær formering ved kreft som har mutante ras-proteiner ved blokkering av PFT. Ved en analog logikk, ville hemning av PFT gi et potensiale for kontroll av rask cellulær formering forbundet med restenose, særlig i de tilfeller hvor ekspresjon og/eller funksjon av nativ ras er overstimulert.

PCT-søknad WO91/16340 beskriver cystein-inneholdende tetrapeptid-inhibitorer for PFT med formelen CAAX.

Europeisk patentsøknad 0461869 beskriver cystein-inneholdende tetrapeptid-inhibitorer for PFT med formelen Cys-Aaa'-Aaa<2->Xaa.

Europeisk patentsøknad 0520823 beskriver cystein-inneholdende tetrapeptid-inhibitorer for PFT med formelen Cys-Xaa'-dXaa<2->Xaa<3>.

Europeisk patentsøknad 0523873 beskriver cystein-inneholdende tetrapeptid-inhibitorer for PFT med formelen Cys-Xaa'-Xaa<2->Xaa<3>.

Europeisk patentsøknad 0528486 beskriver cystein-inneholdende tetrapeptid-amid-inhibitorer for PFT med formelen Cys-Xaa<1->Xaa<2>-Xaa<3->NRR<1>.

Europeisk patentsøknad 0535730 beskriver pseudotetrapeptid-inhibitorer for PFT med de følgende to formler

Forbindelsene beskrevet i ovennevnte referanser beskriver eller foreslår ikke en ny kombinasjon av de strukturelle variasjonene angitt i foreliggende oppfinnelse beskrevet nedenfor.

Oppsummering av oppfinnelsen

Foreliggende oppfinnelse angår en inhibitor for protein-farnesyltransferase, kjennetegnet ved at den er et histidin- eller homohistidin-derivat med formel I

hvor

n er 1 eller 2;

A er COR2, COOR2, CONHR<2>, CSR<2>, C(S)OR<2>, C(S)NHR2 eller SOOR<2> idet R<2> er som

definert nedenfor;

R er uavhengig H eller Me;

R er Ci-Ce-alkyl, (CH2)m-C3-C7-cykIoalkyl, (CH2)m-aryl, hvor aryl er definer som en aromatisk ring som er en fenyl, 5-fluorenyl, 1-naftylgruppe, usubstituert eller substituert med til 3 substituenter valgt fra Ci-C6-alkyl, O-Q-Ce-alkyl, og S-C1-C6-alkyl, OH, SH, F, Cl, Br. I, CF3, N02, NH2, NHCH3, N(CH3)2, NHCO-CrC6-alkyl, (CH2)pC02H, (CH2)pC02-C,-C6-alkyl, (CH2)pS03H, (CH2)pP03H2, (CH2)pP03-(Ci-C6-alkyl)2, (CH2)P, (CH2)pS02NH2, og (CH2)pS02NH-C,-C6-alkyl hvor p = 0,1,2 eller 3, (CH2)m-heteroaryl hvor heteroaryl er definert som en heteroaromatisk ring som er en 2-eller 3-tienyl, 2- eller 3-furanyl, 2- eller 3-pyrrolyl, 2-, 3- eller 4-pyridyl, 2-, 3-, 4-, 5-, 6- eller 7-indonylgruppe, substituert eller usubstituert med en eller to substituenter fra gruppen av substituenter beskrevet ovenfor for aryl hvor m = 0,1, 2 eller 3;

R3 og R4 er uavhengig

eller (CH2)nCONH-R<6>, hvor y er 1- 5 og n er som definert ovenfor og hvor R<5> og R<6> er som definert nedenfor, eller R<3> og R<4> danner sammen en ring av den følgende type:

hvor R og R er som definert nedenfor, eller (CH2)X-R , hvor x er 2-5 og R er som

definert nedenfor;

R<5> er R2, OR2 eller SR<2> hvor R<2> er som definert ovenfor;

R<6> er (CH2)„R<5>, (CH2)nCOOR2} (CH2)nCONHR<2>, (CH2)nCONH(CH2)n+,R<5>J

CH(COR<8>)(CH2)nR<5>, hvor n, R<2> og R<5> er som angitt ovenfor og R<8> er som definert

nedenfor,

R<7> er (CH2)m-C3-C7-cykloalkyl, (CH2)m-aryl, (CH2)m-heteroaryl, 0(CH2)m-C3-C7-cykloalkyl, 0(CH2)m-aryl, 0(CH2)m-heteroaryl hvor m er 0,1,2 eller 3, hvor aryl og

heteroaryl har ovennevnte betydning;

R<8> er OH, 0-C,-C-6-alkyl, NH2 eller NH-alkyl; og

X er H, Me, (CH2)nCOOR9 eller (CH2)„P(0)(OR<9>)2 hvor R<9> er H eller Ci-C6-alkyl;

eller et farmasøytisk godtagbart salt derav.

Foreliggende oppfinnelse angår også anvendelse av en terapeutisk effektiv mengde av en forbindelse ifølge kravene 1 til 12, for fremstilling av et farmasøytisk preparat for behandling av vevs-proliferative sykdommer.

Et ytterligere trekk ved foreliggende oppfinnelse omfatter anvendelse av en terapeutisk effektiv mengde av en forbindelse ifølge kravene 1 til 12, for fremstilling av et farmasøytisk preparat for behandling av kreft.

Et ytterligere trekk ved foreliggende oppfinnelse omfatter anvendelse av en forbindelse ifølge kravene 1 til 12, for fremstilling av et farmasøytisk preparat for behandling av restenose.

En ytterligere utførelsesform av foreliggende oppfinnelse er et farmasøytisk preparat for administrering som et anti-proliferativt middel, kjennetegnet ved at det omfatter en terapeutisk effektiv mengde av en forbindelse ifølge kravene 1 til 12 i en blanding med et farmasøytisk akseptabelt tilsetningsmiddel, fortynningsmiddel eller bæremiddel.

En ytterligere utførelsesform av foreliggende oppfinnelse omfatter et farmasøytisk preparat for administrering som et restenosehemmende middel, kjennetegnet ved at det omfatter en terapeutisk effektiv mengde av en forbindelse ifølge kravene 1 til 12, sammen med et farmasøytisk akseptabelt tilsetningsmiddel, fortynningsmiddel eller bærer.

Det er videre beskrevet en oppløsnings- syntesemetode for fremstilling av en forbindelse ifølge kravene 1 til 12, eller et farmasøytisk akseptabelt salt derav, som omfatter fremstilling av sekundære aminer og N-substituerte aminosyrer ved hydridreduksjon av et imin dannet fra et aldehyd og et amin eller en aminosyre, fulgt av omsetning med et N-substituert histidin- eller homohistidin-derivat, et karbodiimid og 1-hydroksy-benzotriazol.

Det er også beskrevet fastfase-syntesemetode for fremstilling av en forbindelse ifølge kravene 1 til 12, eller et farmasøytisk akseptabelt salt derav, som omfatter simultan syntese av en rekke forbindelser med formel I i et Diversomer® apparat, ved anvendelse av et D- eller L-hisitidinderivat som er immobilisert på en harpiks via binding gjennom imidazolringen med sekvensiell avbeskyttelse og acylering av N-terminalen med en rekke isocyanater, aktiverte estere, syreklorider og lignende, fulgt av sekvensiell avbeskyttelse av karboksyteiminalen, karboksylaktivering og kondensering med en rekke aminer og aminosyrer, fulgt av spaltning fra den faste bæreren.

Detaljert beskrivelse av foretrukne utførelsesformer

I forbindelsene med formel I betyr "alkyl" en lineær eller forgrenet hydrokarbon-rest med fra 1 til 6 karbonatomer og omfatter f.eks. metyl, etyl, n-propyl, isopropyl, n-butyl, sek-butyl, isobutyl, tert-butyl, n-pentyl, n-heksyl og lignende.

"Cykloalkyl" betyr en mettet hydrokarbonring som inneholder fra 3 til 7 karbonatomer, f.eks. cyklopropyl, cyklobutyl, cyklopentyl, cykloheksyl, adamantyl og lignende.

"Aryl" betyr en aromatisk ring som er en fenyl-, 5-fluorenyl-, 1-naftyl- eller 2-naftylgruppe, usubstituert eller substituert med 1 til 3 substituenter valgt fra alkyl, O-alkyl og S-alkyl, OH, SH, F, Cl, Br, I, CF3, N02, NH2, NHCH3, N(CH3)2, NHCO-alkyl, (CH2)mCOOH, (CH2)mCOO-alkyl, (CH2)mS03H, (CH2)mP03H2, (CH2)mP03(alkyl)2, (CH2)mS02NH2 og (CH2)mS02NH-alkyI, hvor alkyl er som ovenfor definert og m er 0,1,2 eller 3.

"Heteroaryl" betyr en heteroaromatisk ring som er en 2- eller 3-tienyl-, 2- eller 3-furanyl-, 2- eller 3-pyrrolyl-, 2-, 3- eller 4-pyridyl-, 2-, 3-, 4-, 5-, 6- eller 7-indolyl-gruppe,

usubstituert eller substituert med 1 eller 2 substituenter fra gruppen substituenter angitt ovenfor for aryl.

Den følgende tabellen gir en liste av forkortelser og definisjoner av disse anvendt for foreliggende oppfinnelse

Foretrukne forbindelser ifølge oppfinnelsen er de med formlene II og III hvor i formel

II

A er begrenset til COOR<2>, CONHR<2>, C(S)OR<2> eller C(S)NHR2 hvor R2 er som

definert nedenfor;

Rer H eller Me;

R2 er begrenset til CrC6-alkyl, (CH2)m-C3-C7-cykloalkyl, (CH2)m-aryl, (CH2)m-heteroaryl hvor m er 0,1,2 eller 3;

R<5> er begrenset til (CH2)m-aryl, 0-(CH2)m-aryl eller 0-(CH2)m-heteroaryl hvor m er

som angitt ovenfor;

R<6> er begrenset til CH2-R<5>, CH2COOR2, CH2CONHR2 hvor n er 1 eller 2 og hvor R<5>

og R er som definert ovenfor; og

X er begrenset til H eller Me, hvor aryl og heteroaryl og m har ovennevnte betydning;

eller et farmasøytisk godtagbart salt derav.

De mest foretrukne forbindelser ifølge oppfinnelsen er de med formel III hvor:

hvor

A er begrenset til COOR<2>, CONHR<2>, C(S)OR2 eller C(S)NHR<2> hvor R2 er som

definert nedenfor;

R er H eller Me;

R2 er begrenset til C]-C6-alkyl, (CH2)m-C3-C7-cykloalkyl, (CH2)m-aryl, (CH2)m-heteroaryl hvor m er 0, 1,2 eller 3;

som angitt ovenfor;

R6 er begrenset til CH2-R<5>, CH2COOR<2>, CH2CONHR<2> hvor n er 1 eller 2 og hvor R<5>

og R<2> er som definert ovenfor; og

X er begrenset til H eller Me, og aryl og heteroaryl har ovennevnte betydning;

eller et farmasøytisk godtagbart salt derav.

Generelle metoder for fremstilling, evaluering og anvendelse av forbindelser med formel I

Forbindelsene med formel I kan fremstilles i henhold til syntese-strategien beskrevet i Skjema I. De sekundære amin-derivatene kan fremstilles ved reduktiv aminering av et passende aldehyd med et passende amin i nærvær av et reduksjonsmiddel så som natrium-triacetoksyborhydrid. Det sekundære aminet kan deretter kobles i nærvær av et aktiverende middel så som DCC og HOBT, til et histidin-derivat hensiktsmessig funksjonalisert ved N-terminalen.

Videre kan forbindelsene med formel I fremstilles ved samtidig multippel fast fase syntese ved anvendelse av Diversomer® apparatet beskrevet av DeWitt S. H. et al., Proe. Nati. Acad. Sei. USA, 90:6909 (1993). F.eks. (Skjema II nedenfor) bindes Fmoc-His-OMe til 2-Cl-Tr-harpiks ved anvendelse av et sterisk hindret amin så som DIEA som HCl-renser, Fmoc-beskyttelsesgruppen fjernes med piperidin, den resulterende frie aminoterminalen acyleres med en serie isocyanater, aktiverte estere, syreklorider og lignende, esteren forsåpes, den resulterende karboksylsyren aktiveres med et karbodiimidreagens så som EDAC, DCC eller DIC, den aktiverte karboksylgrupen omsettes med alkoholer så som HOBT, NHOS eller pentaklorfenol for å gi en aktivert ester, den aktiverte esteren omsettes med en serie aminer og den resulterende rekke forbindelser med formel I spaltes fra harpiksen med varm HOAc eller ved behandling med TFA i DCM ved romtemperatur. En alternativ Diversomer® metode

(Skjema III) anvender N(l)- eller N(3)-karboksymetyl-Fmoc-His-OMe som er bundet til enten Wang-harpiks eller 2-Cl-Tr-harpiks. Resten av syntesen er tilsvarende den som er beskrevet i Skjema II.

For alle de tre syntesemetodene beskrevet ovenfor tas passende hensyn til beskyttelse og avbeskyttelse av reaktive funksjonelle grupper og sekvensen av syntese-trinnene. Kjennskap til anvendelse av vanlige beskyttelsesgrupper og strategier for sammensetning av

komplekse organiske molekyler er innenfor ekspertisen til fagfolk på området organisk kjemi (se f.eks. Greene T.W. og Wuts P.G.M., Protective Groups in Organic Chemistry, John Wiley and Sons (1991); Corey E. J. og Cheng X.-M., The Logic of Chemical Synthesis, John Wiley and Sons (1989)).

Homogeniteten og sammensetnigen av de resulterende forbindelsene verifiseres ved HPLC, kapillar elektroforese, tynnskiktskromatografi (TLC), proton-kjernernagnetisk resonans-spektrometri (NMR), hurtig atombombardement masse-spektrometri (FAB-MS) og elektrospray masse-spektrometri (ES-MS).

Som beskrevet ovenfor kan forbindelsene med formlene I-III videre danne både farmasøytisk godtagbare syreaddisjons- og/eller base-salter. Alle disse formene omfattes av omfanget av foreliggende oppfinnelse.

Farmasøytisk godtagbare syreaddisjonssalter av forbindelsene med formlene I-III omfatter salter avledet fra ikke-toksiske uorganiske syrer så som saltsyre, salpetersyre, fosforsyre, svovelsyre, bromhydrogensyre, jodhydrogensyre, fluorhydrogensyre, fosfor-syrling og lignende, så vel som salter avledet fra ikke-toksiske organiske syrer, så som alifatiske mono- og dikarboksylsyrer, fenyl-substituerte alkansyrer, hydroksyalkansyrer, alkandisyrer, aromatiske syrer, alifatiske og aromatiske sulfonsyrer, etc. Slike salter omfatter således sulfat, pyrosulfat, bisulfat, sulfitt, bisulfitt, nitrat, fosfat, monohydrogen-fosfat, dihydrogenfosfat, metafosfat, pyrofosfat, klorid, bromid, jodid, acetat, trifluoracetat, propionat, kaprylat, isobutyrat, oksalat, malonat, succinat, suberat, sebakat, fumarat, maleat, mandelat, benzoat, klorbenzoat, metylbenzoat, dinitrobenzoat, ftalat, benzensulfonat, toluensulfonat, fenylacetat, citrat, Iaktat, maleat, tartrat, metansulfonat og lignende. Mulige er også salter av aminosyrer så som arginat og lignende og glukonat, galakturonat og n-metylglukamin (se f.eks. Berge S.M. et al., "Pharmaceutical salts", Journal of Pharmaceutical Science, 66:1-19 (1977)).

Syreaddisjonssaltene av de nevnte basiske forbindelsene fremstilles ved å bringe den frie baseformen i kontakt med en tilstrekkelig mengde av den ønskede syre for å fremstille saltet på vanlig måte. En forbindelse med formlene I-UJ kan fortrinnsvis omdannes til et surt salt ved behandling med en vandig oppløsning av den ønskede syren, slik at den resulterende pH blir mindre enn 4. Oppløsningen kan passeres gjennom en Cl8 patron for å absorbere forbindelsen, vaskes med rikelige mengder vann; forbindelsen elueres med et polart, organisk oppløsningsmiddel så som f.eks. metanol, acetonitril og lignende, og isoleres ved konsentrering under redusert trykk fulgt av lyofilisering. Den frie baseformen kan regenereres ved å bringe saltformen i kontakt med en base og isolere den frie basen på vanlig måte eller som ovenfor. De frie baseformene adskiller seg noe fra de respektive saltformene i visse fysiske egenskaper så som oppløselighet i polare oppløsningsmidler, men saltene er ellers ekvivalente med de respektive frie basene for formålet med fore-liggende oppfinnelse.

Farmasøytisk godtagbare baseaddisjonssalter dannes med metaller eller aminer, så som alkali- og jordalkalimetaller eller organiske aminer. Eksempler på metaller anvendt som kationer er natrium, kalium, magnesium, kalsium og lignende. Eksempler på egnede aminer er N^-dibenzyletylendiamin, klorprokain, cholin, dietanolamin, dicykloheksylamin, etylendiamin, N-metylglukamin og prokain (se f.eks. Berge S.M. et al, "Pharmaceutical Salts", Journal of Pharmaceutical Science, 66:1-19 (1977)).

Baseaddisjonssaltene av nevnte sure forbindelser fremstilles ved å bringe den frie syreform i kontakt med en tilstrekkelig mengde av den ønskede base for å produsere saltet på vanlig måte. En forbindelse med formel I-III kan fortrinnsvis omdannes til et basesalt ved behandling med en vandig oppløsning av den ønskede basen, slik at den resulterende pH blir større enn 9. Oppløsningen kan passeres gjennom en Cl8 patron for å absorbere forbindelsen, vaskes med rikelige mengder vann, forbindelsen elueres med et polart, organisk oppløsnings-middel så som f.eks. metanol, acetonitril og lignende og isoleres ved konsentrering under redusert trykk fulgt av lyofilisering. Den frie syren kan regenereres ved å bringe saltformen i kontakt med en syre og isolere den frie syren på vanlig måte eller som ovenfor. Den frie syren adskiller seg noe fra den respektive saltformen i visse fysiske egenskaper så som oppløselighet i polare oppløsningsmidler, men saltene er ellers ekvivalente med de respektive frie syrene for formålet med foreliggende oppfinnelse.

Visse av forbindelsene ifølge oppfinnelsen kan eksistere i usolvaterte former såvel som solvaterte former, innbefattet hydratiserte former. Generelt er de solvaterte formene, innbefattet de hydratiserte formene, ekvivalente med usolvaterte fonner og omfattes av omfanget av foreliggende oppfinnelse. Noen av forbindelsene ifølge oppfinnelsen har ett eller flere chirale sentere og hvert senter kan eksistere i R(D)- eller S(L)-konfigurasjon. Foreliggende oppfinnelse omfatter alle enantiomere og epimere former så vel som passende blandinger derav.

Den PFT-hemmende aktiviteten til forbindelsene med formlene I-III ble undersøkt i 30 raM kaliumfosfat-buffer, pH 7,4, inneholdende 7 mM DTT, 1,2 mM MgCl2, 0,1 mM leupeptin, 0,1 mM pepstatin og 0,2 mM fenylmetylsulfonyl-fluorid. Forsøkene ble utført i

96 brønn plater (Wallec) og det ble anvendt oppløsninger bestående av forskjellige konsen-trasjoner av en forbindelse med formel I i 100% DMSO. Etter tilsetning av substrater, radiomerket farnesyl-pyrofosfat ([1-<3>H], spesifikk aktivitet 15-30 Ci/mmol, endelig konsentrasjon 0,12 uM) og (biotinyl)-Ahe-Tyr-Lys-Cys-Val-He-Met-peptid (endelig konsentrasjon 0,1 uM) ble enzym-reaksjonen satt igang ved tilsetning av 40 ganger renset rottehjerne-famesyl-protein-transferase. Etter inkubering ved 37°C i 30 minutter ble reaksjonen avsluttet ved fortynning 2,5 ganger med stopp-buffer inneholdende 1,5M magnesiumacetat, 0,2M H3PO4, 0,5% BSA og strepavidin-kuler (Amersham) i en konsentrasjon på 1,3 mg/ml. Etter at platen hadde fått stå i 30 minutter ved romtemperatur ble radioaktiviteten kvantifisert på en microBeta teller (Model 1450, Wallec). Forbindelsene med formlene I-III oppviser ICso-verdier på 0,5 til 1000 nM i dette forsøket og er således verdifulle inhibitorer for protein:farnesyltransferase enzym som kan anvendes for medisinsk behandling av vev-proliferative sykdommer, innbefattet cancr og restenose.

Forbindelsene ifølge foreliggende oppfinnelse kan fremstilles og administreres i en rekke forskjellige orale, rektale og parenterale doseformer. Forbindelsene ifølge foreliggende oppfinnelse kan således administreres ved injeksjon, dvs. intravenøst, intramuskulært, intrakutant, subkutant, intraduodenalt eller intraperitonealt. Forbindelsene ifølge foreliggende oppfinnelse kan også administreres ved inhalering, f.eks. intranasalt. Forbindelsene ifølge oppfinnelsen kan videre administreres transdermalt. Det vil være klart for fagfolk på området at de følgende doseformene kan omfatte som aktiv bestanddel enten en forbindelse med formel I-HI eller et tilsvarende farmasøytisk godtagbart salt av en forbindelse med formel I-HI.

For fremstilling av farmasøytiske preparater med forbindelsene ifølge foreliggende oppfinnelse kan farmasøytisk godtagbare bærere være enten faste eller flytende Faste preparater omfatter pulvere, tabletter, piller, kapsler, pulverkapsler, suppositorier og dispergerbare granuler. En fast bærer kan være én eller flere stoffer som også kan virke som fortynningsmidler, smaksstoffer, bindemidler, konserveringsmidler, tablett-desintegrerings-midler eller et innkapslende materiale.

I pulvere er bæreren et findelt fast stoff som er blandet med den findelte aktive bestanddelen.

I tabletter er den aktive bestanddelen blandet med en bærer som har de nødvendige bindingsegenskaper i passende forhold, og presset i den ønskede form og størrelse.

Pulvere og tabletter inneholder fortrinnsvis fra 5 eller 10 til ca. 70% aktiv forbindelse. Egnede bærere er magnesiumkarbonat, magnesiumstearat, talk, sukker, laktose, pektin, dekstrin, stivelse, gelatin, tragakant, metylcellulose, natriumkarboksymetylcellulose, en lavtsmeltende voks, kakaosmør og lignende. Betegnelsen "preparat" skal omfatte formuleringen av den aktive forbindelse med et innkapslende materiale som bærer, hvilket gir en kapsel hvor den aktive bestanddel, med eller uten andre bærere, er omgitt av en bærer, som således er i forbindelse med den. Tilsvarende omfattes pulverkapsler og pastiller. Tabletter, pulvere, kapsler, piller, pulverkapsler og pastiller kan anvendes som faste doseformer egnet for oral administrering.

For fremstilling av suppositorier smeltes først en lavtsmeltende voks, så som en blanding av fettsyreglycerider eller kakaosmør, og den aktive bestanddelen dispergeres homogent deri, f.eks. ved omrøring. Den smeltede, homogene blanding helles deretter i former med passende størrelse, får avkjøles og stivner således.

Preparater i flytende form omfatter oppløsninger, suspensjoner og emulsjoner, f.eks vann- eller vann-propylenglykol-oppløsninger. Flytende preparater for parenteral injeksjon kan formuleres i oppløsning i en vandig polyetylenglykoloppløsning.

Vandige oppløsninger egnet for oral anvendelse kan fremstilles ved å oppløse den aktive komponenten i vann og tilsette egnede farvestoffer, smaksstoffer, stabiliseringsmidler og tykningsmidler etter ønske.

Vandige suspensjoner egnet for oral anvendelse kan fremstilles ved å dispergere den findelte aktive komponent i vann med et viskøst materiale, så som naturlige eller syntetiske gummier, harpikser, metylcellulose, natriumkarboksymetylcellulose og andre velkjente suspenderingsmidler.

Faste preparater som kort før bruk skal omdannes til flytende preparater for oral administrering er også omfattet. Slike flytende former omfatter oppløsninger, suspensjoner og emulsjoner. Dise preparatene kan i tillegg til den aktive bestanddel også inneholde farvestoffer, smaksstoffer, stabiliseirngsmidler, buffere, kunstige og naturlige søtningsstoffer, dispergeringsmidler, tykningsmidler, solubiliseirngsmidler og lignende.

Det farmasøytiske preparatet er fortrinnsvis i enhetsdoseform. I en slik form underoppdeles preparatet i enhetsoser inneholdende passende mengder av den aktive bestanddel. Enhetsdoseformen kan være et pakket preparat, idet pakken inneholder adskilte mengder preparat, så som pakkede tabletter, kapsler og pulvere i medisinglass eller ampuller. Enhetdoseformen kan også være en kapsel, tablett, pulverkapsel eller pastill selv, eller den kan være et passende antall av disse i pakket form.

Mengden av aktiv bestanddel i et enhetsdosepreparat kan varieres eller justeres fra 0,1 mg til 100 mg, fortrinnsvis 0,5 mg til 100 mg avhengig av den spesielle anvendelsen og styrken til den aktive bestanddelen. Preparatet kan om ønsket også inneholde andre kompatible, terapeutiske midler.

For terapeutisk anvendelse som inhibitorer for PFT, administreres forbindelsene anvendt ved de farmasøytiske metodene ifølge oppfinnelsen, i en innledende dose på ca. 0,01 mg til ca. 20 mg pr. kg daglig. Et daglig doseområde på ca. 0,01 mg til ca. 10 mg pr. kg er foretrukket. Dosene kan imidlertid varieres avhengig av behovet til pasienten, alvorlighets-graden av tilstanden som behandles og forbindelsen som anvendes. Bestemmelse av den passende dosen for et spesielt tilfelle ligger innenfor fagområdet. Generelt innledes behandlingen med lavere doser som er mindre enn den optimale dosen av forbindelsen. Deretter økes dosen med små økninger inntil optimal effekt under forholdene oppnås. Av bekvemmelighetshensyn kan den totale daglige dosen om ønskes oppdeles og administreres i porsjoner i løpet av dagen.

De følgende eksemplene illustrerer oppfinnernes foretrukne metoder for fremstilling av forbindelsene ifølge oppfinnelsen.

EKSEMPEL 1

N-[(fenylmetoksy)karbonyl]-L-histidyl-N-[2-(fenylmetoksy)etyl]-N<2->[[4-(fenyl-metoksy)fenyl]metyl]-glycinamid

Trinn 1: (4-benzyloksybenzylamino)-eddiksyre-metylester

Til en blanding av glycin-metylester-hydroklorid (2,07 g, 16,5 mmol) og 4-benzyloksybenzaldehyd (3,18 g, 15,0 mmol) i CH2C12 (50 ml) ved 0°C ble satt natriumtiracetoksy-borhydrid (3,81 g, 18,0 mmol). Blandingen fikk oppvarmes til romtemperatur og ble omrørt i 4 timer. Vandig NaHCC>3 ble tilsatt, og blandingen ble omrørt i 30 minutter. Det vandige laget ble ekstrahert 3 ganger med CH2C12. De samlede organiske ekstrakter ble vasket med salt-oppløsning, tørret over MgSCv og konsentrert. "Flash"-kromatografi (75% EtOAc/heksan) ga 1,98 g (46%) av tittelforbindelsen som et hvitt, fast stoff, sm.p. 57-58°C.

Trinn 2: N-[N-[(fenylmetoksy)karbonyl]-L-histidyl]-N-[[4-(fenylmetoksy)fenyl]-metyl]-glycin-metylester

Til en suspensjon av CBZ-histidin (1,22 g, 4,21 mmol) i DMF (10 ml) ble satt HOBT-hydrat (0,77 g, 5,05 mmol) og DCC (1,04 g, 5,05 mmol). Aminet fra Trinn 1 ovenfor (1,20 g, 4,21 mmol) ble deretter tilsatt, og blandingen ble omrørt ved romtemperatur natten over. Blandingen ble filtrert og filtratet ble fortynnet med CHCI3, vasket to ganger med mettet NaHC03, saltoppløsning, tørret over MgSC>4 og konsentrert. "Flash"-kromatografi ga 1,68 g (72%) av tittelforbindelsen som et hvitt skum; ES-MS 557 (m+1).

Trinn 3: N-[N-[(fenyImetoksy)karbonyl]-L-histidyl]-N-[[4-(fenylmetoksy)fenyl]-nietyll-glycin

Til en oppløsning av esteren fra Trinn 2 (1,53 g, 2,75 mmol) i THF (15 ml) og H2O (5 ml) ved 0°C ble satt LiOH-hydrat (0,14 g, 3,30 mmol) og oppløsningen ble omrørt i 5 timer ved 0°C. Oppløsningen ble konsentrert, residuet ble tatt opp i H2O og pH ble regulert til 4-5 med IN HC1. Den resulterende blandingen ble konsentrert og tørret i vakuum, hvilket ga 1,65 g av tittelforbindelsen som et hvitt, fast stoff; FAB-MS 543 (m+1).

Analyse for C30H3oN406.1,2LiC1.2,OH20:

Beregnet: C 57,24; H 5,44; N 8,90

Funnet: C 57,35; H 5,32; N 8,62.

Trinn 4: N-[(fenylmetoksy)karbonyl]-L-histidyl-N-[2-(fenylmetoksy)etylJ-N2-[[4-(fenyl-metoksy)fenyl] metyljglycinamid

Til en oppløsning av syren fra Trinn 3 (2,9 g, 5,33 mmol) i DMF (15 ml) ble satt HOBT-hydrat (0,98 g, 6,39 mmol) og DCC (1,32 g, 6,39 mmol), fulgt av 2-benzyloksy-etylamin-hydroklorid (1,0 g, 5,33 mmol). Et3N (0,82 ml, 5,86 mmol) ble tilsatt, og blandingen ble omrørt natten over ved romtemperatur. Blandingen ble filtrert og filtratet ble fortynnet med CHCI3, vasket to ganger med mettet NaHC03, saltoppløsning, tørret over MgS04 og konsentrert. "Flash"-kromatografi (2-5% MeOH/CHCl3) ga 2,25 g (63%) av tittelforbindelsen som et hvitt skum; ES-MS 676 (m+1).

EKSEMPEL 2

N-[(fenylmetoksy)karbonyl]-L-histidyl-N-[2-(lH-indol-3-yl)etyI-N<2->[[4-(fenylmetoksy)-fenyl]metyl]-glycinamid

I henhold til Eksempel 1, Trinn 4, ble ved å erstatte 2-benzyloksyetylamin-hydrokloridet med tryptamin-hydroklorid, tittelforbindelsen oppnådd som et hvitt skum; ES-MS 685 (m+1).

EKSEMPEL 3

N-[N-[N-[(fenylmetoksy)karbonyl)-L-histidyl]-N-[[4-(fenylmetoksy)fenyl]metyl]-glycyljglycin-fenylmetylester

I henhold til Eksempel 1, Trinn 4, ble ved å erstatte 2-benzyloksyetylamin-hydroklorid med glycin-benzylesterhydroklorid, tittelforbindelsen oppnådd som et hvitt pulver;

ES-MS 690 (m+1).

EKSEMPEL 4

N-Kfenylmetoksy)karbonyl]-L-histidyl-N-(4-fenylbutyl)-N<2->[[4-(fenylmetoksy)-fenyl]-metyl]-glycinamid

I henhold til Eksempel 1, Trinn 4, ble ved å erstatte 2-benzyloksyetylamin-hydroklorid med 4-fenylbutylamin og utelate Et3N, tittelforbindelsen oppnådd som et hvitt skum,

sm.p. 58-61X; ES-MS 674 (m+1).

EKSEMPEL 5

N-[N-[N-[(fenylmetoksy)karbonyl]-L-histidyI-N-[[4-(fenylmetoksy)fenyllmetyI]-glycyl]-glycin-metylester

I henhold til Eksempel 1, Trinn 4, ble ved å erstatte 2-benzyloksyetylamin-hydroklorid med glycin-metylesterhydroklorid, tittelforbindelsen oppnådd som et hvitt skum;

ES-MS 614 (m+1).

EKSEMPEL 6

N-[(fenylmetoksy)karbonyl]-L-histidyl-N-[[4-(fenylmetoksy)fenyl]metyl]glycyl-N-fenylmetylglycinamid

I henhold til Eksempel 1, Trinn 4, ble ved å erstatte 2-benzyloksyetylamin-hydroklorid med N-fenylmetylglycinamid-trifluoreddiksyresalt, tittelforbindelsen oppnådd som et hvitt pulver; ES-MS 689 (m+1).

EKSEMPEL 7

N-[N-[N-[(fenylmetoksy)karbonyI]-L-histidyl]-N-[[4-(fenylmetoksy)fenyl|metyl]-glycyl]-P-alanin-fenylmetylester

I henhold til Eksempel 1, Trinn 4, ble ved å erstatte 2-benzyloksyetylamin-hydroklorid med p-alanin-benzylester-hydroklorid, tittelforbindelsen oppnådd som et hvitt skum,

ES-MS 704 (m+1).

EKSEMPEL 8

N-[N-[(4-metoksyfenyl)metyl]-N-[N-[(fenylmetoksy)karbonyl]-L-histidyl)-glycyl]-glycin-fenylmetylester

Trinn 1: N-(4-metoksybenzylamino)-eddik$yre-etylester

Til en blanding av glycin-etylester-hydroklorid (1,03 g, 7,38 mmol) og 4-metoksybenzaldehyd (0,71 g, 5,21 mmol) i CH2C12 (25 ml) ble satt KO Ac (0,51 g, 5,21 mmol) fulgt av natrium-triacetoksyborhydrid (1,44 g, 6,78 mmol). Blandingen ble omrørt ved romtemperatur i 4 timer. Vandig NaHC03 ble tilsatt, og blandingen ble omrørt i 30 minutter. Det vandige laget ble ekstrahert tre ganger med CH2C12. De samlede organiske ekstraktene ble vasket med saltoppløsning, tørret over MgS04 og konsentrert. "Flash"-kromatografi (60% EtOAc/heksan) ga 1,0 g (86%) av tittelforbindelsen som en farveløs olje; CI-MS 224 (m+1).

Trinn 2: N-[(4-metoksyfenyl)metyl]-N-[N-[(fenyImetoksy)karbonyl]-L-histidyI]-glycin-etylester

I henhold til Eksempel 1, Trinn 2, ble ved å erstatte N-[[4-fenylmetoksy)fenyl]-metyl]-glycin-metylester med forbindelsen fra Trinn 1 ovenfor, tittelforbindelsen oppnådd som et hvitt skum; ES-MS 495 (m+1).

Trinn 3: N-[(4-metoksyfenyl)metyl]-N-[N-[(fenylmetoksy)karbonyl]-L-histidyl]glycin

I henhold til Eksempel 1, Trinn 3, ble ved å erstatte N-[N-[(fenylmetoksy)-karbonyl]-L-histidyl]-N-[[4-(fenylmetoksy)-fenyl]metyl]glycin-metylester med forbindelsen fra Trinn 2 ovenfor, tittelforbindelsen oppnådd som et hvitt, fast stoff.

Trinn 4: N-[(4-metoksyfenyl)metyl]-N-[N-[(fenylmetoksy)karbony]]-L-histidyl]-glycin-fenylmetylester

Til en oppløsning av syren fra Trinn 3 (0,41 g, 0,88 mmol) i DMF (5 ml) ble satt HOBT-hydrat (0,16 g, 1,05 mmol) og DCC (0,22 g, 1,05 mmol) fulgt av glycin-benzylesterhydroklorid (0,18 g, 0,88 mmol). Et3N (0,12 ml, 0,88 mmol) ble tilsatt og blandingen ble omrørt natten over ved romtemperatur. Blandingen ble filtrert, og filtratet ble fortynnet med CHCI3, vasket to ganger med mettet NAHCO3, saltoppløsning, tørret over MgS04 og konsentrert. "Flash"-kromatografi (2-5% MeOH/CHCl3) ga 0,29 g (54%) av tittelforbindelsen som et hvitt skum; ES-MS 614 (m+1).

EKSEMPEL 9

N-[(4-metoksyfenyl)metyl]-N-[N-[(fenylmetoksy)karbonyl]-L-histidyl]glycin-fenylmetylester

I henhold til Eksempel 8, Trinn 4, ble ved å erstatte glycin-benzylester-hydrokloridet med benzylalkohol og utelate Et3N, tittelforbindelsen oppnådd som et hvitt skum;

ES-MS 557 (m+1).

EKSEMPEL 10

N-[(fenylmetoksy)karbonyl]-I>-histidyl-N-[2-(fcnylmctoksy)etyl]-N2-ll4-{fenyl-metoksy)fenyl]metyl]glycinamid

Trinn 1: N-BOC-N-[2-(fenylmetoksy)etyl]glycinamid

Til en oppløsning av BOC-glycin (0,47 g, 2,69 mmol) i EtOAc (10 ml) ble satt HOBT-hydrat (0,49 g, 3,22 mmol) fulgt av DCC (0,66 g, 3,22 mmol). Etter 30 minutter ble en oppløsning av benzyloksyetylamin (0,41 g, 2,69 mmol) i EtOAc (5 ml) tilsatt, og blandingen ble omrørt natten over ved romtemperatur. Blandingen ble filtrert og filtratet ble fortynnet med EtOAc, vasket med mettet, vandig NaHC03, saltoppløsning, tørret over MgS04 og konsentrert. "Flash"-kromatografi (EtOAc) ga 0,72 g (87%) av tittelforbindelsen som en lysegul olje som stivnet langsomt; CI-MS 309 (m+1).

Analyse for C16H24N2O4:

Beregnet: C 62,32; H 7,84; N 9,08.

Funnet: C 61,94; H 7,83; N 9,12.

Trinn 2: N-[2-fenylmetoksy)etyl]glycinamid-trifluoreddiksyresalt

Til en oppløsning av forbindelsen fra Trinn 1 ovenfor (0,67 g, 2,17 mmol) i CH2C12 (10 ml) ble satt TFA (1 ml). Oppløsningen ble omrørt ved romtemperatur i 4 timer og deretter konsentrert. Residuet ble to ganger tatt opp i CH2C12 og igjen konsentrert. Det ble oppnådd 0,78 g av en lysegul gummi som ble anvendt i Trinn 3 uten ytterligere rensning;

CI-MS 209 (m+1).

Trinn 3: N-[2-(fenyImetoksy)etyl]-Nz<->[[4-(fenylmetoksy)fenyt]metyI]glycinamid

Til en oppløsning av forbindelsen fra Trinn 2 ovenfor (0,69 g, 2,14 mmol) i CH2CI2 (10 ml) ved 0°C ble satt 4-benzyloksybenzaldehyd (0,45 g, 2,14 mmol) fulgt av natriumtiracetoksy-borhydrid (0,59 g, 2,78 mmol). Blandingen fikk oppvarmes til romtemperatur og ble omrørt i 6 timer. Mettet, vandig NaHC03 ble tilsatt, og blandingen ble omrørt i 30 minutter. Det vandige laget ble ekstrahert tre ganger med CH2CI2. De samlede organiske ekstraktene ble vasket med saltoppløsning, tørret over MgSC«4 og konsentrert. "Flash"-kromatografi (2-5% MeOH/CHCl3) ga 0,46 g (53%) av tittelforbindelsen som en farveløs olje; CI-MS 405 (m+1).

Trinn 4: N-[(fenylmetoksy)karbonyI]-D-histidyI-N-[2-(fenylmetoksy)etyl]-N<2->[[4-(fenylmetoksy)feny 1] metyl] gly ein amid

Til en suspensjon av CBZ-D-histidin (0,093 g, 0,32 mmol) i DMF (2 ml) ble satt HOBT-hydrat (0,059g, 0,39 mmol) fulgt av DCC (0,080 g, 0,39 mmol). En oppløsning av forbindelsen fra Trinn 3 ovenfor (0,13 g, 0,32 mmol) i DMF (2 ml) ble tilsatt og blandingen ble omrørt natten over ved romtemperatur. Blandingen ble filtrert, og filtratet ble fortynnet med CHCI3, vasket to ganger med mettet, vandig NaHC03 og saltoppløsning, tørret over MgS04 og konsentrert. MFlash"-kromatografi (2-5% MeOH/CHCl3) ga 0,10 g (45%) av tittelforbindelsen som et hvitt pulver; ES-MS 676 (m+1).

Analyse for C39H4iN5O6.0,5H2O:

Beregnet: C 68,39; H 6,18; N 10,22

Funnet: C 68,56; H 6,28; N 9,83.

EKSEMPEL 11

N-Kfenylmetoksy)karbony]]-L-histidyl-Nz<->[(l,l,-bifenyl)-4-ylmetyl]-N-[2-(fenyl-metoksy)etyl]glycinamid

Trinn 1: N2-[(l,l '-bifenyl)-4-ylmeryl]-N-[2-fenylmetoksy)etyI]glycinamid

I henhold til Eksempel 10, Trinn 3 ble ved å erstatte 4-benzyloksybenzaldehydet med 4-bifenylkarboksaldehyd, tittelforbindelsen oppnådd som en farveløs olje som stivnet langsomt; <!>H NMR (300 MHz, CDCI3): 8 7,65-7,27 (m, 15H), 4,55 (s, 2H), 3,82 (s, 2H), 3,62-3,50 (m, 4H), 3,35 (s, 2H).

Trinn 2: N-[(fenylmetoksy)karbonyl]-L-histidyl-N2-[(l,1 '-bifenyl)-4-ylnietyI]-N-[2-(fenylmetoksy)etyl]glycinamid 1 henhold til Eksempel 10, Trinn 4, ble ved å erstatte N-[2-(fenylmetoksy)etyl]-N<2->[[4-(fenylmetoksy)fenyl]metyl]glycinamid med forbindelsen fra Trinn 1 ovenfor og CBZ-D-histidin med CBZ-histidin, tittelforbindelsen oppnådd som et hvitt skum; ES-MS 646 (m+1).

EKSEMPEL 12

N-[(fenylmetoksy)karbonyl]-L-histidyl-N<2->[4-(fenylmetoksy)butyl]-N-[2-(fenyl-metoksy)etyI]glycinamid

Trinn 1: N<2->[4-(fenylmetoksy)butyl]-N-[2-(fenylmetok$y)etyl]glycinamid

I henhold til Eksempel 10, Trinn 3 ble ved å erstatte 4-benzyloksybenzaldehydet med 4-benzyloksybutyraldehyd, tittelforbindelsen oppnådd som en farveløs olje;

^H NMR (300 MHz, CDC13): 5 7,58 (br m, 1H), 7,38-7,25 (m, 10H), 4,53 (s, 2H), 4,50 (s, 2H), 3,60-3,42 (m, 6H), 3,25 (s, 2H), 2,61 (m, 2H), 1,71-1,50 (m, 5H).

Trinn 2: N-[(fenyImetoksy)karbonyl]-L-histidyl-Nz<->[4-(fenylmetoksy)butyl]-N-[2-(fenyImetoksy)etyl]glycinamid

I henhold til Eksempel 10, Trinn 4, ble ved å erstatte N-[2-(fenylmetoksy)etyl]-N<2->[[4-(fenylmetoksy)fenyl]metyl]-glycinamidet med forbindelsen fra Trinn 1 ovenfor og CBZ-D-histidin med CBZ-histidin, tittelforbindelsen oppnådd som et hvitt skum;

ES-MS 642 (m+1).

EKSEMPEL 13

N-[(fenylmetoksy)karbonyl]-L-histidyl-N-(3-fenoksypropyI)-N<2->[[4-(fenylmetoksy)fenyl]metyl]gIycinamid

Trinn 1: N-(3-fenoksypropyl)-N -[[4-(fenylmetoksy)fenyl]metyl]glycinamid

I henhold til Eksempel 10, Trinn 3 ble, ved å erstatte N-[2-(fenylmetoksy)etyl]-glycinamid-trifluoreddiksyresaltet med N-(3-fenoksypropyl)glycinamid-hydroklorid, tittelforbindelsen oppnådd som en farveløs olje som stivnet langsomt,

sm.p. 55-56°C; CI-MS 405 (m+1).

Trinn 2: N-[(fenylmetoksy)karbonyl]-L-histidyl-N-(3-fenoksypropyl)-N<2->[[4-(fenylmetoksy)fenyl] metyl] glycinamid

ES-MS 676 (m+1).

EKSEMPEL 14

N-[N-[N-[(fenyImetoksy)karbonyl]-L-histidyl]-N-[[3-(fenylrnetoksy)fenyl]rneryl]-glycyl]glycinfenylmetylester

Trinn 1: N-BOC-glycylglycin-benzylester

I henhold til eksempel 10, trinn 1, ble ved å erstatte benzyloksyetylamin med glycin-benzylester-hydroklorid og tilsette 1 ekv. Et3N, tittelforbindelsen oppnådd som en farveløs olje; CI-MS 323 (m+1).

Trinn 2: Glycylglycin-benzylester-trifluoreddiksyre-salt

I henhold til eksempel 10, trinn 2, ble ved å erstatte N-BOC-N-[2-(fenylmetoksy)-etyl]glycinamid med forbindelsen fra trinn 1 ovenfor, tittelforbindelsen oppnådd som et hvitt, fast stoff; CI-MS 223 (m+1).

Analyse for CHH14N2O3.CF3CO2H:

Beregnet: C 46,43; H 4,61; N 8,33

Funnet: C 46,43; H4,50; N8,33

Trinn 3: N-[2-(fenyImetoksy)eryl]-N-[[3-(fenylmetoksy)fenyl]metyl]-glycin-benzyIester I henhold til eksempel 10, trinn 3, men ved å erstatte 4-benzyloksybenzaldehydet med 3-benzyloksybenzaldehyd og N-[2-fenylmetoksy)etyl]glycinamid-trifluoreddiksyresaltet med forbindelsen fra Trinn 2 ovenfor, ble tittelforbindelsen oppnådd som en farveløs olje;

'HNMR (300 MHz, CDCI3): 8 7,74 (br. m, 1H), 7,48-7,21 (m, 11H), 6,98 (s, 1H), 6,91 (m, 2H), 5,20 (s, 2H), 5,09 (s, 2H), 4,13 (d, J = 6Hz, 2H), 3,78 (s, 2H), 3,36 (s, 2H).

Trinn 4: N-[N-[N-[(fenylmetoksy)karbonyl]-L-histidyl]-N-[[3-(fenyImetoksy)-

fenyl] metyl]glycyl] glycin-fenylmetylester

I henhold til Eksempel 10, trinn 4, ved å erstatte N-[2-(fenylmetoksy)etyl]-N<2->[[4-(fenylmetoksy)fenyl]metyl]glycinamid med forbindelsen fra trinn 3 ovenfor og CBZ-D-histidin med CBZ-histidin, ble tittelforbindelsen oppnådd som et hvitt skum; ES-MS 690 (m+1).

EKSEMPEL 15

(SMl-(lH-iimdazo]-3-ylmetyl)-2-ok^ fenyl]meryI]amino]etyl]karbaminsyre-fenylmetylester

Trinn 1: [[2-(fenylmetoksy)etyl]-[4-(fenylmetoksy)fenyl]metyl]amin

Til en oppløsning av benzyloksyetylamin (0,75 g, 4,96 mmol) i CH2C12_ (20 ml) ved 0°C ble satt 4-benzyloksybenzaldehyd (0,96 g, 4,51 mmol). Natrium-triacetoksy-borhydrid (1,24 g, 5,86 mmol) ble tilsatt, fulgt av AcOH (0,26 ml, 4,51 mmol). Blandingen fikk oppvarmes til romtemperatur og ble omrørt i 4 timer. Mettet, vandig NaHC03 ble tilsatt, og blandingen ble omrørt i 30 minutter. Det vandige laget ble ekstrahert tre ganger med CH2CI2. De samlede organiske ekstraktene ble vasket med saltoppløsning, tørret over MgSCU og konsentrert. "Flash" kromatografi (2% MeOH/CHCl3) ga 1,04 g (66%) av tittelforbindelsen som en farveløs olje; CI-MS 348 (m+1).

Trinn 2: (S)-[l-(lH-imidazol-3-ylmetyl)-2-okso-2-[[2-(fenylmetoksy)etyl]-[4-(fenylmetoksy)fenyl]metyl]amino]etyl]karbaminsyre-fenylmetylester I henhold til eksempel 10, trinn 4, men ved å erstatte N-[2-(fenyImetoksy)etyl]-N<2->[[4-(fenylmetoksy)fenyl]metyl]-glycinamid med forbindelsen fra trinn 1 ovenfor og CBZ-D-histidin med CBZ-histidin, ble tittelforbindelsen oppnådd som et hvitt skum; ES-MS 619 (m+1).

Analyse for C37H38N4O5:

Beregnet: C 71,83; H6.19; N9,05

Funnet: C 71,44, H 6,19; N 8,99.

EKSEMPEL 16

(S)-(l-(lH-imidazol-3-ylmetyl)-2-okso-2-[bis[[4-(fenylmetoksy)fenyl]-meryl]amino]etyl]karbaminsyre-fenylmety]ester

Trinn 1: Bis-[[4-(fenylmetoksy)fenyl]metyl]amin

I henhold til eksempel 8, trinn 1, men ved å erstatte glycinetylester-hydroklorid med 4-benzyloksybenzylamin-hydroklorid og 4-metoksybenzaldehyd med 4-benzyloksybenzaldeyd, ble tittelforbindelsen oppnådd som et hvitt, fast stoff; CI-MS 410 (m+1).

Trinn 2: (S)-[l-(lH-imidazo]-3-ylmer\l)-2-okso-2-[bis-[[4-(fenylmetoksy)fenyl]-mety]l-amino]eryl]-karbaminsyre-fenylmetylester

I henhold til eksempel 10, trinn 4, men ved å erstatte N-[2-(fenylmetoksy)etyl]-N<2->[[4-(fenylmetoksy)fenyl]metyl]-glycinamid med forbindelsen fra trinn 1 og CBZ-D-histidin med CBZ-histidin, ble tittelforbindelsen oppnådd som et hvitt skum;

ES-MS 681 (m+1).

Analyse for C42H40N4O5:

Beregnet: C 74,10; H 5,92; N 8,23

Funnet: C 73,87; H6,00; N8,15.

EKSEMPEL 17

0-(fenylmetyl)-N-[l,2,3,4-tetrahydro-2-[N-I(fenylmetoksy)karbonyll-L-hi$tidyl]~7-(fenylmetoksy)-L-3-isokinolinkarbonyl]-L-serin-metylester

Trinn 1: N-[N-BOC-[l,2,3,4-tetrahydro-7-(fenylmetoksy)-L-3-isokinoIin-karbonyl|]-L-serin-metylester

Til en oppløsning av N-BOC-7-(fenylmetoksy)-L-3-isokinolin-karboksylsyre (0,50 g, 1,30 mmol) i EtOAc (10 ml) ble satt HOBT (0,24 g, 1,56 mmol) fulgt av DCC (0,32 g, 1,56

mmol). Serin-metylester-hydroklorid (0,32 g, 1,30 mmol) ble tilsatt, fulgt av Et3N (0,22 ml, 1,56 mmol), og blandingen ble omrørt natten over ved romtemperatur. Blandingen ble filtrert og filtratet fortynnet med EtOAc, vasket med mettet, vandig NaHC03 og salt-oppløsning og tørret over MgS04 og konsentrert. "Flash" kromatografi (40% EtOAc/ heksan) ga 0,67 g (89%) av tittelforbindelsen som et klebrig skum; CI-MS 575 (m+1).

Analyse for C33H38N207:

Beregnet: C 68,97; H 6,67; N 4,87

Funnet: C 68,57; H6,79; N4,99.

Trinn 2: N-[l,2,3,4-tetrahydro-7-(fenylmetoksy)-L-3-isokinoIinkarbonyl]-L-serin-metylester-trifluoreddiksyresalt

I henhold til eksempel 10, trinn 2, men ved å erstatte N-BOC-N-[2-(fenylmetoksy)-etyl]glycinamid med forbindelsen fra trinn 2 ovenfor, ble tittelforbindelsen oppnådd som et hvitt, fast stoff, CI-MS 475 (m+1).

Trinn 3: 0-(fenylmetyl)-N-[l^,3,4-tetrahydro-2-[N-[(fenylnietoksy)karbonyl]-L-bistidyl]-7-(fenylmetoksy)-L-3-isokinolinkarbonyl]-L-serin-metyIester I henhold til eksempel 10, trinn 4, med ved å erstatte N-[2-(fenylmetoksy)-etyl]-N -[[4-(fenylmetoksy)fenyl]metyl]glycinamid med forbindelsen fra trinn 2 ovenfor og CBZ-D-histidin med CBZ-histidin, ble tittelforbindelsen oppnådd som et hvitt, fast stoff, sm.p. 82-88°C; ES-MS 746 (m+1).

EKSEMPEL 18

[l-(lH-imidazol-4-ylmetyl)-2-okso-2-[l,2,3,4-tetrahydro-7-(fenylmetoksy)-3-[[2-(fenylmetoksy)etyl]amino]karbonyl]-2-i$okinolinyl]etyl]karbaminsyre-fenylmetylester

Trinn 1: N-[BOC-l,2,3,4-tetrahydro-7-(fenylmetoksy)-L-3-isokinolinyl|-N,-[2-(fenylmetoksy)etyl]-karboksamid

I henhold til eksempel 17, trinn 1, med ved å erstatte serin-metylester-hydrokloridet med benzyloksyetylamin og utelate Et3N, ble tittelforbindelsen oppnådd som en farveløs olje; CI-MS 517 (m+1).

Trinn 2: N-[l,2^3,4-tetrahydro-7-(fenylmetoksy)-L-3-isokinolinyl]-N'-[2-(fenylmetoksy)etyl]karboksamid

I henhold til eksempel 17, trinn 2, men ved å erstatte N-[ 1,2,3,4-tetrahydro-7-(fenyl-metoksy)-L-3-isokinolinkarbonyl]-L-serin-metylester-trifluoreddiksyresaltet med forbindelsen fra trinn 1 ovenfor, ble tittelforbindelsen oppnådd som en lysegul olje; CI-MS 417 (m+1).

Trinn 3: [1 -(1 H-imidazol-4-ylmetyl)-2-okso-2-[l,2,3,4-tetrahydro-7-(fenylmetoksy)-3-[[2-(fenylmetoksy)etyl]amino]karbonyl]-2-isokinoIinyl]ety]]karbaniinsyre-fenylmetyl-ester I henhold til eksempel 10, trinn 4, men ved å erstatte N-[2-(fenylmetoksy)-etyl]-N -[[4-(fenylmetoksy)fenyl]metyl]glycinamid med forbindelsen fra trinn 2 ovenfor, ble tittelforbindelsen oppnådd som en blanding av separerbare diastereomerer, diastereomer A: ES-MS 688 (m+1); diastereomer B: ES-MS 688 (m+1).

EKSEMPEL 19

l-(2-metoksy-2-oksoetyl)-N-[(fenylmetoksy)karbonyIl-L-histidyI-N-[2-(fenylmetoksy)-etyl]-Nz<->[[4-(fenylmetoksy)fenyl]metyI]glycinamid

Til en oppløsning av N-[(fenylmetoksy)karbonyl]-L-histidyl-N-[2-(fenylmetoksy)-etyl]-N'-[[4-(fenylmetoksy)fenyl]metyl]glycinamid (eksempel 1) (1,00 g, 1,48 mmol) i CH2Cl2_ (10 ml) ble satt (iPr)2NEt (0,28 ml, 1,63 mmol) fulgt av metylbromacetat (0,14 ml, 1,48 mmol). Oppløsningen ble omrørt i 2 dager ved romtemperatur. Etter konsentrasjon og "flash" kromatografi (1-2% MeOH/CHCh), ble 0,91 g (82%) av tittelforbindelsen oppnådd som et hvitt skum,

ES-MS 748 (m+1).

Analyse for C^tLisNsO<g>:

Beregnet: C 67,46; H 6,07; N 9,36

Funnet: C 67,09; H 5,91; N 9,12.

EKSEMPEL 20

l-(karboksymetyl)-N-[(fenylmetoksy)karbonyl]-L-histidyl-N<2->[[4-(fenoksymetyl)-feny]]metyl]-N-[2-(fenylmetoksy)etyl]g)ycinamid

I henhold til eksempel 1, trinn 3, men ved å erstatte N-[N-[(fenylmetoksy)-karbonyl]-L-histidyl]-N-[[4-(fenylmetoksy)fenyl]metyl]glycin-metylester med forbindelsen fra eksempel 19, ble tittelforbindelsen oppnådd som et hvitt pulver;

ES-MS 734 (m+1), 740 (m + Li).

EKSEMPEL 21

N-[N-(9H-fluoren-9-ylmetoksy)karbonyl-histidyl]-metylester {Fmoc-D-His-(2-Cl-Tr-harpiks)-C02Me} på fast bærer

Til en suspensjon av Fmoc-His-C02Me (1,0 mmol) i CCI3H (10 ml) ble satt 2-klortrityl-kloridharpiks (Novabiochem) (1,0 g) fulgt av DIEA (1,1 mmol). Den resulterende blandingen ble underkastet en kort sonikering for å dispergere harpiksen, og deretter ristet på en rister i 2,5 timer. Den modifiserte harpiksen ble oppsamlet ved filtrering, vasket med CHCI3 (5x10 ml) og tørret i vakuum i 18 timer, hvilket ga den ladede harpiksen.

EKSEMPEL 22

Meryl-{(4-benzyloksy-benzyl)-[2-(3-benzyI-ureido)-3-(3H-imidazol-4-yl)-propionyl]-amino}eddiksyreester

Fmoc-His(2-Cl-Tr-harpiks)-C02Me (fra eksempel 21 ovenfor, 0,15 mmol) ble suspendert i 20% piperidin i DMF (volum/volum, 4 ml). Den resulterende suspensjonen ble underkastet sonikering i 10 minutter og ble deretter agitert ved risting i 30 minutter. Harpiksen ble fra-filtrert og vasket med DMF tre ganger. Harpiksen ble igjen underkastet de samme reaksjons-betingelsene i ytterligere 20 minutter. Harpiksen ble filtrert fra og vasket med DMF fire ganger, CHCI3 tre ganger, hvilket ga His(2-Cl-Tr-harpiks)-C02Me som ble suspendert i DCM (10 ml), agitert i 10 minutter ved risting, behandlet med benzylisocyanat (0,6 mmol) og agitert i ytterligere 30 minutter. Harpiksen ble filtrert, vasket med DCM tre ganger, resuspendert i DCM og benzylisocyanat-behandlingen ble gjentatt. Harpiksen ble filtrert og vasket med DMF to ganger og CHC13 fem ganger, hvilket ga BnNHCO-His(2-Cl-Tr-harpiks)-C02Me som deretter ble suspendert i en 3:1 blanding av dioksan/MeOH (3 ml) og behandlet med vandig 1,0N NaOH (0,6 mmol). Suspensjonen ble agitert ved risting i 18 timer, filtrert, vasket sekvensielt med en 2:1 blanding av dioksan og 10% vandig sitronsyre (3 x 10 ml), dioksan/ MeOH (3x10 ml) og CHC13 (3x10 ml), hvilket ga BnNHCO-His(2-Cl-Tr-harpiks)-COOH. BnNHCO-His(-2-Cl-Tr-harpiks)-COOH ble suspendert i DMF (4 ml) og behandlet med et karbodiimid-koblingsreagens så som DIC (0,6 mmol) og HOBT (0,6 mmol). Den resulterende blandingen ble omrørt i 30 minutter og (4-benzyloksybenzylamino)eddiksyremetylester (0,6 mmol) ble tilsatt. Den resulterende blandingen ble ristet i 18 timer før filtrering av harpiksen og vasking tre ganger med DMF og tre ganger med CHC13. Harpiksen ble suspendert i DMF (10 ml), og karbodiimid/BT/4-benzyloksybenzyl-aminoeddiksyremetyIester-koblings-reaksjonen ble gjentatt. Etter 18 timer ble harpiksen filtrert og vasket med 10 ml hver av MeOH to ganger, DCM tre ganger, DMF to ganger, MeOH to ganger og CHCI3 to ganger, hvilket ga BnNHCO-His(2-Cl-Tr-harpiks)-CON(CH2C02Me)CH2-(4-BnO-Ph). Det substituerte dipeptidet ble spaltet fra harpiksen ved behandling med 70% TFA i DCM og risting i l time ved romtemperatur. Den overliggende væsken inneholdende det frie dipeptid ble filtrert vekk fra harpiksen, og harpiksen ble vasket med DCM tre ganger. Samlet supernatant og vaskevæsker ble konsentrert i vakuum, hvilket ga BnNHCO-His-CON(CH2C02Me)CH2-(4-BnO-Ph).TFA. Produktet ble fordelt mellom vann og DCM, og begge lagene ble dråpevis behandlet med mettet, vandig NaHC03 inntil det vandige laget forble basisk. Lagene ble separert, og den organiske fasen ble vasket med mettet, vandig NaCl og tørret (MgSCU). Filtrering og konsentrering ga BruNHCO-His-CON(CH2C02Me)CH2-(4-BnO-Ph).

EKSEMPEL 23

Multippel, simultan fast-fase syntese

Metoden beskrevet i eksempel 22 kan anvendes ved simultane multiple synteser ved

anvendelse av apparatet beskrevet av DeWitt S.H., et al, Proe. Nati. Acad. Sei. USA, 90:6909

(1993). Fmoc-His(2-Cl-tr-harpiks)-C02Me fremstilt i henhold til eksempel 21 (100-200 mg) plasseres i hvert av 40 gass-dispersjons-rør og rørene plasseres i multippel-syntese-apparatet. De sekvensielle avbeskyttelses- og koblings-reaksjonene beskrevet i eksempel 22 følges, ved anvendelse av de følgende acyleringsmidler og aminer i alle mulige kombinasjoner:

Acyleringsmidler

1) benzylisocyanat

2) benzyloksykarbonyl-NHOS-ester

3) fenylisocyanat

4) 3-pyridylmetyl-isocyanat

5) fenetyl-isocyanat

6) butylisocyanat

7) fenylacetylklorid

8) 1-naftyl-isocyanat

Aminer

1) HN(CH2C02Me)CH2(4-BnO-Ph)

2) HN(CH2CONHCH2OBn)CH2(4-BnO-Ph)

3) HN(CH2CONHCH2CH2SBn)CH2(4-BnO-Ph)

4) HN(CH2CONHCH2CH2OBn)CH2(4-EtO-Ph)

5)

Etter avspaltning fra harpiksen og opparbeidelse som beskrevet i eksempel 22, isoleres de følgende 40 substituerte analogene med formel I:

Claims

1. Inhibitor for protein-farnesyltransferase, karakterisert ved at den er et histidin- eller homohistidin-derivat med formel I hvor n er 1 eller 2; A er COR<2>, COOR<2>, CONHR<2>, CSR<2>, C(S)OR<2>, C(S)NHR<2> eller SOOR2 idet R<2> er som definert nedenfor; R er uavhengig H eller Me; R<2> er Ci-C6-alkyl, (CH2)m-C3-C7-cykloalkyl, (CH2)m-aryl, hvor aryl er definer som en aromatisk ring som er en fenyl, 5-fluorenyl, 1-naftylgruppe, usubstituert eller substituert med til 3 substituenter valgt fra Ci-Cg-alkyl, O-CpCe-alkyl, og S-Cp C6-alkyl, OH, SH, F, Cl, Br. I, CF3) N02, NH2, NHCH3, N(CH3)2, NHCO-d-C6-alkyl, (CH2)pC02H, (CH2)pC02-CrC6-alkyl, (CH2)pS03H, (CH2)pP03H2, (CH2)pP03-(C,-C6-alkyl)2, (CH2)P, (CH2)pS02NH2, og (CH2)pS02NH-CrC6-alkyl hvor p = 0, 1,2 eller 3, (CH2)m-heteroaryl hvor heteroaryl er definert som en heteroaromatisk ring som er en 2- eller 3-tienyl, 2- eller 3-furanyl, 2- eller 3-pyrrolyl, 2-, 3- eller 4-pyridyl, 2-, 3-, 4-, 5-, 6- eller 7-indonylgruppe, substituert eller usubstituert med en eller to substituenter fra gruppen av substituenter beskrevet ovenfor for aryl hvor m = 0, 1,2 eller 3; R<3> og R<4> er uavhengig eller (CH2)nC0NH-R<6>, hvor y er 1- 5 og n er som definert ovenfor og hvor R<5 >og R<6> er som definert nedenfor, eller R3 og R<4> danner sammen en ring av den følgende type: hvor R<5> og R6 er som definert nedenfor, eller (CH2)X-R<7>, hvor x er 2-5 og R7 er som definert nedenfor; R<5> er R2, OR2 eller SR<2> hvor R2 er som definert ovenfor; R<6> er (CH2)nR<5>, (CH2)nCOOR<2>, (CH2)nCONHR<2>, (CH2)„CONH(CH2)^.1R<5>, CH(COR<8>)(CH2)„R<5>, hvor n, R<2> og R<5> er som angitt ovenfor og R<8> er som definert nedenfor, R7 er (CH2)m-C3-C7-cykloalkyl, (CH2)m-aryl, (CH2)m-heteroaryl, 0(CH2)m-C3-C7- cykloalkyl, 0(CH2)m-aryl, 0(CH2)m-heteroaryl hvor m er 0, 1, 2 eller 3, hvor aryl og heteroaryl har ovennevnte betydning; R<8> er OH, 0-C,-C-6-alkyl, NH2 eller NH-alkyl; og X er H, Me, (CH2)nCOOR<9> eller (CH2)nP(0)(OR<9>)2 hvor R<9> er H eller C,-C6-alkyl; eller et farmasøytisk godtagbart salt derav.

2. Forbindelse ifølge krav 1, karakterisert ved at den er en forbindelse med formel II: hvor A er begrenset til COOR<2>, CONHR<2>, C(S)OR2 eller C(S)NHR<2> hvor R<2> er som definert nedenfor; R er H eller Me; R<2> er begrenset til C,-C6-alkyl, (CH2)m-C3-C7-cykloalkyl, (CH2)m-aryl, (CH2)m-hetero aryl hvor m er 0,1, 2 eller 3; R<5> er begrenset til (Ct^m-arvl, 0-(CH2)m-aryl eller 0-(CH2)m-heteroaryl hvor m er som angitt ovenfor; R6 er begrenset til CH2-R<5>, CH2COOR<2>, CH2CONHR2 hvor n er 1 eller 2 og hvor R<5 > og R2 er som definert ovenfor; og X er begrenset til H eller Me, hvor aryl og heteroaryl og m har ovennevnte betydning; eller et farmasøytisk godtagbart salt derav.

3. Forbindelse ifølge krav 1, karakterisert ved at den er en forbindelse med formel III: hvor A er begrenset til COOR<2>, CONHR<2>, C(S)OR<2> eller C(S)NHR2 hvor R2 er som definert nedenfor; R er H eller Me; R<2> er begrenset til CrC6-alkyl, (CH2)m-C3-C7-cykloalkyl, (CH2)m-aryl, (CH2)m-hetero aryl hvor m er 0, 1,2 eller 3; R<5> er begrenset til (CH2)m-aryl, 0-(CH2)ra-aryl eller 0-(CH2)m-heteroaryl hvor m er som angitt ovenfor; R<6> er begrenset til CH2-R<5>, CH2COOR<2>, CH2CONHR<2> hvor n er 1 eller 2 og hvor R<5 > og R<2> er som definert ovenfor; og X er begrenset til H eller Me, og aryl og heteroaryl har ovennevnte betydning; eller et farmasøytisk godtagbart salt derav.

4. Forbindelse ifølge krav 1, karakterisert ved at den er en forbindelse med formel II: hvor: A er ytterligere begrenset til COOR<2> eller CONHR2 hvor R2 er som definert nedenfor; R er begrenset til H; R er ytterligere begrenset til CrC6-alkyl eller (CH2)m-aryl hvor m er 0, 1,2 eller 3; R5 er ytterligere begrenset til (CH2)m-aryl eller 0-(CH2)m-aryl hvor m er som definert ovenfor; R6 er begrenset til CH2-R<5> eller CH2CONHR<2>, hvor n er 1 eller 2 og hvor R<5> og R<2> er som definert ovenfor; og X er begrenset til H eller Me, og aryl og heteroaryl har ovennevnte betydning; eller et farmasøytisk godtagbart salt derav.

5. Forbindelse ifølge krav 1, karakterisert ved at den er en forbindelse med formel III: hvor: A er ytterligere begrenset til COOR<2> eller CONHR<2> hvor R<2> er som definert nedenfor; R er begrenset til H; R<2> er ytterligere begrenset til CrC6-alkyl eller (CH2)m-aryl hvor m er 0, 1,2 eller 3; R<5> er ytterligere begrenset til (CH2)m-aryl eller 0-(CH2)m-aryl hvor m er som definert ovenfor; R<6> er begrenset til CH2-R<5> eller CH2CONHR<2>, hvor n er 1 eller 2 og hvor R<5> og R<2> er som definert ovenfor; og X er begrenset til H eller Me, og aryl og heteroaryl har ovennevnte betydning; eller et farmasøytisk godtagbart salt derav.

6. Forbindelse ifølge krav 1, karakterisert ved at den er N- [(fenylmetoksy)karbonyl] -L-histidyl-N- [2-(fenylmetoksy)etyl] -N2- [ [4-(fenyl-metoksy)-fenyl]metyl]glycinamid.

7. Forbindelse ifølge krav 1, karakterisert ved at den er N-[(fenylmetoksy)karbonyl]-L-histidyl-N2-[( 1,1 '-bifenyl)-4-ylmetyl]-N-[2-(fenyl-metoksy)etyl]glycinamid.

8. Forbindelse ifølge krav 1, karakterisert ved at den er N-P^-|l^-[(fenylmetoksy)karbonyl]-L-histidyl]-N-[[4~(fenylmetoksy)fenyl]metyl] glycyl]-glycin-fenylmetylester.

9. Forbindelse ifølge krav 1, karakterisert ved at den er N-[(fenylmetoksy)karbonyl]-L-histidyl-N-(4-fenylbutyl)-N<2->[[4-(fenylmetoksy)-fenyl]-metyl]-glycinamid.

10. Forbindelse ifølge krav 1, karakterisert ved at den er N-[(fenylmetoksy)karbonyl]-L-histidyl-N-(3-fenoksypropyl)-N<2->[[4-(fenylmetoksy)-fenyl]metyl]glycinamid.

11. Forbindelse ifølge krav 1, karakterisert ved at den er (S)-[l-(lH-imidazol-3-ylmetyl)-2-okso-2-[[2-(fenylmetoksy)etyl][4-(fenylmetoksy)-fenyl]metyl]ammo]etyl]karbaminsyre-fenylmetylester.

12. Forbindelse ifølge krav 1, karakterisert ved at den er [1-(1H-imidazol-4-ylmetyl)-2-okso-2-[l,253,4-tetrahydro-7-(fenylmetoksy metoksy)etyl]amino]karbonyl]-2-isokinolinyl]etyl]karbaminsyrefenylrnetylester.

13. Anvendelse av en terapeutisk effektiv mengde av en forbindelse ifølge kravene 1 til 12, for fremstilling av et farmasøytisk preparat for behandling av vevs-proliferative sykdommer.

14. Farmasøytisk preparat for administrering som et anti-proliferativt middel, karakterisert ved at det omfatter en terapeutisk effektiv mengde av en forbindelse ifølge kravene 1 til 12, i en blanding med et farmasøytisk akseptabelt tilsetningsmiddel, fortynningsmiddel eller bæremiddel.

15. Anvendelse av en terapeutisk effektiv mengde av en forbindelse ifølge kravene 1 til 12, for fremstilling av et farmasøytisk preparat for behandling av kreft.

16. Farmasøytisk preparat for administrering som et antikreftmiddel, karakterisert ved at det omfatter en terapeutisk effektiv mengde av en forbindelse ifølge kravene 1 til 12, sammen med et farmasøytisk akseptabelt tilsetningsmiddel, fortynningsmiddel eller bæremiddel.

17. Anvendelse av en terapeutisk effektiv mengde av en forbindelse ifølge kravene 1 til 12, for fremstilling av et farmasøytisk preparat for behandling av restenose.

18. Farmasøytisk preparat for administrering som et restenosehemmende middel, k arakterisert ved at det omfatter en terapeutisk effektiv mengde av en forbindelse ifølge kravene 1 til 12, sammen med et farmasøytisk akseptabelt tilsetningsmiddel, fortynningsmiddel eller bærer.

19. Oppløsnings-syntesemetode for fremstilling av en forbindelse ifølge kravene 1 til 12, eller et farmasøytisk akseptabelt salt derav, som omfatter fremstilling av sekundære aminer og N-substituerte aminosyrer ved hydridreduksjon av et imin dannet fra et aldehyd og et amin eller en aminosyre, fulgt av omsetning med et N-substituert histidin- eller homohistidin-derivat, et karbodiimid og 1-hydroksy-benzotriazol.

20. Fast-fase-syntesemetode for fremstilling av en forbindelse ifølge kravene 1 til 12, eller et farmasøytisk akseptabelt salt derav, som omfatter simultan syntese av en rekke forbindelser med formel I i et Diversomer® apparat, ved anvendelse av et D-eller L-hisitidinderivat som er immobilisert på en harpiks via binding gjennom imidazolringen med sekvensiell avbeskyttelse og acylering av N-terminalen med en rekke isocyanater, aktiverte estere, syreklorider og lignende, fulgt av sekvensiell avbeskyttelse av karboksyterminalen, karboksylaktivering og kondensering med en rekke aminer og aminosyrer, fulgt av spaltning fra den faste bæreren.