JP2001158799A - プレニル化ピロリン酸消費酵素の新規な阻害剤 - Google Patents

Abstract

(57)【要約】 【課題】食品が汚染されていることを表示する。 【解決手段】プレニルピロリン酸消費酵素の阻害剤であ
るペプチド類似体であって、以下の式（１）又は式
（２）で表される化合物、あるいはその塩又はエステ
ル。 Ａ−Ｂ−Ｄ （１） 又は、 Ａ−Ｂ−Ｂ’−Ｄ （２） （式中、Ａは、Ａｐ−（ＣＨ₂）_0-3−Ｚ¹−（ＣＨ₂）
_0-3−（ＣＨＲ¹）_0-1−Ｙ−であり、Ｂ及びＢ’は、独
立に、−ＮＲ²−（ＣＨ₂）_0-3−Ｚ²−（ＣＨ₂）_0-3−Ｃ
ＨＲ ³−Ｙ−、又は以下の式（３） 【化１】 であって、Ｂ及びＢ’のうち少なくとも一つが少なくと
も４個の原子の鎖を含み、すなわち、Ｚ²が直接結合で
あるときには、Ｂ及び／又はＢ’は、少なくとも１個の
ＣＨ₂基を含み、 Ｄは、−ＮＨ−ＣＨ（ＣＯＸ）−Ｒ⁴ である。）

Description

【発明の詳細な説明】

【０００１】

【発明の属する技術分野】この発明は、プレニル化ピロ
リン酸消費酵素を阻害するペプチド類似体に関する。プ
レニル化ピロリン酸消費酵素は、タンパク質：ファルネ
シル転移酵素、タンパク質：ゲラニルゲラニル転移酵
素、及び、ファルネシルピロリン酸合成酵素、スクアレ
ン合成酵素、ゲラニルゲラニルピロリン酸合成酵素など
のその他のテルペン類の生合成に関与する酵素を含んで
いるものと理解される。

【０００２】

【従来の技術】プレニル化ピロリン酸、例えば、全トラ
ンス−ファルネシルピロリン酸（ＦＰＰ）及び全トラン
ス−ゲラニルゲラニルピロリン酸（ＧＧＰＰ）は、各種
の酵素の基質である。タンパク質：ファルネシル転移酵
素タンパク質（ＰＥＴ）は、あるタンパク質のＣ末端近
くのシステイン残基をファルネシル化することを触媒す
る酵素であり、基質としてＦＰＰを使用する。ゲラニル
ゲラニルピロリン酸合成酵素（ＧＧＰＰＳ）は、ゲラニ
ルゲラニルピロリン酸（ＧＧＰＰ）の合成において基質
としてＦＰＰを使用する。ＧＧＰＰは、次いで、タンパ
ク質：ゲラニルゲラニル転移酵素１及び２（ＰＧＧＴ−
１及び−２）酵素タンパク質によって触媒されるゲラニ
ルゲラニル化タンパク質の合成に使用される。

【０００３】これらのいくつかのプレニル化（例えば、
ファルネシル化及び／又はゲラニルゲラニル化）タンパ
ク質は、核ラミン、ｒａｓ発ガン遺伝子タンパク質や三
量体Ｇタンパク質のγ−サブユニットなどの低分子量Ｇ
ＴＰ結合タンパク質（Ｇタンパク質）のような関連する
タンパク質のグループに属するとされている（Ｓｃｈａ
ｆｅｒ ｅｔ ａｌ．，Ｓｃｉｅｎｃｅ ２４５（１９８
９）３７９−３８５）。ラミンとｐ２１^rasタンパク質
は、１８８又は１８９個のアミノ酸のタンパク質であっ
て、コンセンサスＣａａＸモチーフ（Ｃはシステインで
あり、ａは脂肪族側鎖を有するアミノ酸であり、Ｘは、
メチオニン、セリン、グルタミン又はアラニンであ
る。）を有しており、これらのタンパク質は、ファルネ
シル化される。Ｒｈｏのような、コンセンサスＣａａＬ
モチーフ（Ｌはロイシンである。）を有する他の低分子
Ｇタンパク質、Ｃ末端ＣＣ／ＣＸＣモチーフを有するｒ
ａｂタンパク質のいくつかや、さらに、ヘテロトリメト
リック（三量体）Ｇタンパク質のγ−サブユニットはゲ
ラニルゲラニル化される。

【０００４】Ｇタンパク質は、プラズマ膜を超える、例
えば成長調節信号のような信号の受容体依存伝達系に関
連しており、まだ同定されてはいないが、その他のプレ
ニル化タンパク質は、細胞周期過程における機能を有し
うる。これらのタンパク質のプレニル化は、これらのタ
ンパク質が膜や核膜に会合するのに役割を果たしている
ように見える。膜や核膜では、タンパク質はさらに処理
が施され、及び／又は、その機能を発揮する。このこと
は、一例として、ＨＭＧ−ＣｏＡ還元酵素阻害剤による
メバロン酸合成の阻害に示され（Ｂｅｃｋ ｅｔ ａ
ｌ．，Ｊ．Ｃｅｌｌ．Ｂｉｏｌ．１１０（１９９０）１
４８９−１４９９）、また、他の研究では、非−プレニ
ル化ｐ２１^ras前駆体の蓄積と発ガン遺伝子のｒａｓタ
ンパク質の変換活性の喪失に帰結された。哺乳類細胞で
のイソプレノイドによるタンパク質の翻訳後修飾に関す
るレヴュウが、Ｍａｌｔｅｓｅ Ｗ．Ａ．によって、Ｆ
ＡＳＥＢ Ｊ．４ ３３１９−３３２９（１９９０）に提
供されている。後者の観察によって、細胞内におけるｐ
２１^rasの作用を抑制するためにｐ２１^rasのファルネシ
ル化の特異的阻害剤の研究が始まった。このタンパク質
の過剰な発現は、大腸ガンなどのガンを発症させる。

【０００５】我々は、ＦＰＰの類似体、それは、ＰＦＴ
及び／又はＰＧＧＴ−１のインビトロでの阻害剤である
が、細胞培養中でヒト動脈平滑筋細胞の増殖を阻害でき
（Ｃｏｈｅｎ ｅｔ ａｌ．Ｂｉｏｃｈｅｍ．Ｐｈａｒ
ｍ．５７（１９９９）３６５−３７３）、そして、それ
ゆえに、これらが経皮経管冠状動脈血管形成術後の再狭
窄プロセスの阻害剤である可能性があることを示した。
この再狭窄プロセスにおいては、平滑筋細胞の増殖が主
たる役割を演じている。

【０００６】非常に最近、特定の骨細胞（破骨細胞）に
おける細胞性ＧＧＰＰ合成が阻害されることが、抗骨粗
鬆症の薬剤の作用メカニズムである可能性があることが
示された（Ｖａｎ Ｂｅｅｋ，Ｅ．Ｂｉｏｃｈｅｍ．Ｂ
ｉｏｐｈｙｓ．Ｒｅｓ．Ｃｏｍｍｕｎ．２５５，（１９
９９），４９１−４９４及びＶＡＮ Ｂｅｅｋ，Ｅ．
Ｊ．Ｂｏｎｅ ａｎｄ Ｍｉｎ．Ｒｅｓ．１４（１９９
９），７２２−７２９）。そして、ＧＧＰＰＳ及び／又
はＰＧＧＴ−１及び／又は−２の阻害剤も同様に、抗骨
粗しょう症剤としての活性を有する可能性がある。

【０００７】さらに、ｒａｂ−ファミリーのＧタンパク
質は、細胞内のタンパク質の輸送と分泌の調節に関連す
る。加えて、プレニル化タンパク質は、イソプレンや引
き続くコレステロールの生合成の律速酵素である、ＨＭ
Ｇ−ＣｏＡ還元酵素の転写制御において役割があるよう
である。スクワレン合成酵素（ＳＳ）は、コレステロー
ルの生合成における第１の経路特異的酵素である。この
酵素は、スクワレンを合成するためにＦＰＰ分子の還元
的二量体化を触媒する。心臓血管疾患の危険因子の一つ
とされるコレステロールのプラズマレベルの増大、を低
下させるため、多くの関心がＳＳの阻害剤の開発に注が
れている。

【０００８】ＥＰ−Ａ−５４０７８２は、プレニルピロ
リン酸類似体に基づく、タンパク質：ファルネシル転移
酵素の阻害剤について記載している。タンパク質：ファ
ルネシル転移酵素とその阻害剤に基づく、新規な治療方
法のレヴュウが、Ｊ．Ｍｅｄ．Ｃｈｅｍ．４０（１９９
７），２９７１−２９９０にＬｅｏｎａｒｄらによって
記載されている。さらに、我々は、最近、タンパク質：
プレニル転移酵素の阻害剤について、当該酵素が関連す
るＣａａＸポケットにおける結合性に基づいて説明して
いる（Ｏｖｅｒｋｌｅｅｆｔ ｅｔ ａｌ．，Ｔｅｔｒａ
ｈｅｄｒｏｎ．Ｌｅｔ．４０（１９９９）４１０３−４
１０７）。

【０００９】

【課題を解決するための手段】新規なプレニルピロリン
酸の類似体は、この発明に基づいて見出されたものであ
り、プレニルピロリン酸消費酵素（例えば、ＰＦＴ、Ｐ
ＧＧＴ−１及び−２、ＧＧＰＰＳ、及びＳＳ）の阻害剤
である。阻害活性は、ＦＰＰポケットにおける結合によ
るものと推測される。

【００１０】すなわち、本発明の類似体は、プレニルピ
ロリン酸消費酵素の阻害剤であるペプチド類似体であっ
て、以下の式（１）又は式（２）で表される化合物、あ
るいはその塩又はエステルである。 Ａ−Ｂ−Ｄ （１） 又は、 Ａ−Ｂ−Ｂ’−Ｄ （２） （式中、Ａは、Ａｐ−（ＣＨ₂）_0-3−Ｚ¹−（ＣＨ₂）
_0-3−（ＣＨＲ¹）_0-1−Ｙ−であり、Ｂ及びＢ’は、独
立に、−ＮＲ²−（ＣＨ₂）_0-3−Ｚ²−（ＣＨ₂）_0-3−Ｃ
ＨＲ ³−Ｙ−、又は以下の式（３）

【化３】 であって、Ｂ及びＢ’のうち少なくとも一つが少なくと
も４個の原子の鎖を含み、すなわち、Ｚ²が直接結合で
あるときには、Ｂ及び／又はＢ’は、少なくとも１個の
ＣＨ₂基を含み、 Ｄは、−ＮＨ−ＣＨ（ＣＯＸ）−Ｒ⁴ であって、Ａｐは、少なくとも５個の炭素原子を含む、
非極性の炭化水素基であり、炭素数１〜４のアルキル
基、炭素数１〜４のアルコキシ基、メチレンジオキシ
基、アリール基あるいはアリールオキシ基で置換されて
いてもよく、Ｒ¹は、水素、あるいは炭素数１〜４のア
ルキル基であって、当該アルキル基は、アリール基ある
いはヘテロアリール基で置換されていてもよく、Ｒ
²は、水素、あるいは炭素数１〜４のアルキル基であっ
て、当該アルキル基は、アリール基あるいはヘテロアリ
ール基で置換されていてもよく、Ｒ³は、水素、あるい
は炭素数１〜４のアルキル基であって、当該アルキル基
は、アリール基、ヘテロアリール基あるいはアミノ基で
置換されていてもよく、Ｒ⁴は、カルボキシル基、ホス
ホ基（ＰＯ₃Ｈ₂）、ホスフェート基（ＯＰＯ₃Ｈ ₂）、ス
ルホ基（ＳＯ₃Ｈ）、サルフェート基（ＯＳＯ₃Ｈ）、カ
ルボキシフェニル基、スルホフェニル基（Ｃ₆Ｈ₄ＳＯ₃
Ｈ₂）、ホスホノフェニル基（Ｃ₆Ｈ₄ＰＯ ₃Ｈ₂）、及び
ホスホオキシフェニル基（Ｃ₆Ｈ₄ＯＰＯ₃Ｈ₂）からなる
群から選択される少なくとも１の基で置換された炭素数
１〜４のアルキル基であり、Ｘは、ＯＨ、ＯＭ（Ｍはア
ルカリ金属である）、Ｏ−（炭素数１〜４のアルキル
基）、ＮＨ−ペプチジル、あるいは、ＮＨ−ＣＨＲ⁵−
ＣＴ−ＮＨ−Ｗ−ＣＴ−ＮＨ−ＣＨ（ＣＯＯＲ⁶）−Ｃ
（Ｒ⁷Ｒ⁸）Ｒ⁹であり、この式において、Ｒ⁵は、水素、
炭素数１〜３のアルキル基、メルカプトメチル基あるい
は保護されたメルカプトメチル基であり、Ｒ⁶は、水素
あるいは炭素数１〜４のアルキル基であり、Ｒ⁷及びＲ⁸
は、独立に、水素あるいは炭素数１〜４のアルキル基で
あり、Ｒ⁹は、水素、あるいは炭素数１〜６のアルキル
基であって、当該アルキル基は水酸基、フェニル基、ヒ
ドロキシフェニル基、インドリル基、イミダゾリル基、
メルカプト基、メチルチオ基、アミノ基、カルボキシル
基、カルバモイル基、ウイレド基、アミジノ基あるいは
グアニジノ基で置換されていてもよく、Ｔは、オキソ基
あるいは２個の水素であり、Ｗは、糖アミノ酸（ｓｕｇ
ａｒａｍｉｎｏ ａｃｉｄ）類似体であり、各Ｙは、独
立に、カルボニル基あるいはメチレン基であり、Ｚ
¹は、−ＣＨ₂−ＣＨＲ¹⁰−、−ＣＨ＝ＣＲ¹⁰−（Ｒ¹⁰は
水素あるいは炭素数１〜４のアルキル基である）、−Ｃ
≡Ｃ−、１，２−、１，３−、あるいは１，４−シクロ
へキシレンあるいは−フェニレン、−ＣＯ−、−ＣＯ−
ＮＨ−、あるいは−Ｏ−、あるいは直接結合であり；Ｚ
²は、−ＣＨ₂−ＣＨＲ¹⁰−、−ＣＨ＝ＣＲ¹⁰−、−Ｃ≡
Ｃ−、１，２−、１，３−、あるいは１，４−シクロへ
キシレンあるいは−フェニレン、−Ｏ−、−Ｓ−、−Ｎ
Ｈ−、あるいは直接結合である。）

【００１１】また、前記糖アミノ酸類似体が、以下の式
（４）

【化４】 （式中、Ｒ¹¹及びＲ¹²は、独立に、水素あるいは炭素数
１〜４のアルキル基であり、Ａは、直接結合あるいは飽
和又は不飽和の炭素数１〜４のアルキレン鎖であって、
１個またはそれ以上の酸素原子、イオウ原子、あるいは
窒素原子が介在されていてもよく、また、水酸基、オキ
ソ基、炭素数１〜４のアルキル基、炭素数１〜４のアル
キリデン基、炭素数１〜４のアルコキシ基、アリールオ
キシ基、ベンジルオキシ基、炭素数１〜８のアシルオキ
シ基、炭素数１〜３のアルキレンジオキシ（アルキリデ
ンジオキシ）基、アミノ基、炭素数１〜４のアルキルア
ミノ基、あるいは炭素数１〜４のヒドロキシアルキル基
で置換されていてもよく；（Ｈ）は、Ａが飽和のときに
は水素であり、Ａが不飽和のときには存在しないことを
示し；ｍは０、１又は２であり；ｎは０又は１であ
る。）で表される、請求項１記載のペプチド類似体も提
供される。

【００１２】また、さらに、式（１）において、以下の
定義：Ａｐは、置換されていてもよいアリール基、特
に、フェニル基、トルイル基、あるいはメトキシフェニ
ル基である；Ｒ¹は、水素、メチル基、あるいはイミダ
ゾリルメチル基である；Ｒ²及びＲ³の少なくとも一つ
が、水素である；Ｚ¹及びＺ²の少なくとも一つが直接結
合である；Ｒ⁴はメチル基、エチル基あるいはベンジル
基であって、一つあるいは二以上のＣＯＯＨあるいはＯ
ＰＯ₃Ｈ₂で置換されている；Ｘは、水酸基である；Ｙは
カルボニルである、のうち１又はそれ以上が適用され
る、上記したいずれかのペプチド類似体も提供する。

【００１３】さらに、本発明は、Ｂ’は、−ＮＨ−（Ｃ
Ｈ₂）_0-4−ＣＨＲ³−ＣＯ−あるいはＢ’が存在しな
い、上記したいずれかのペプチド類似体も提供する。

【００１４】また、Ａが、Ａｒ（アリール基）−（ＣＨ
₂）_1-4−（Ｏ）_0-1−ＣＯ−である、上記第１のペプチ
ド類似体も提供し、Ａが、ベンゾイル、フェニルアセチ
ル、ベンジルオキシカルボニル、３−フェニルプロパノ
イル、４−フェニルブタノイル、あるいは２−（ベンジ
ルオキシカルバモイル）−３−（２−イミダゾリル）−
プロパノイルであり；Ｂ−Ｂ’は、６−イミノ−ヘキサ
ノイル、あるいはＮ−（４−イミノブチリル）グリシル
である、上記第１のペプチド類似体も提供する。なお、
Ａｒ（アリール基）は、置換されていてもよい。

【００１５】さらに、上記したいずれかの類似体を使用
して、タンパク質：プレニル転移酵素あるいは他のプレ
ニルピロリン酸消費酵素を阻害するのに好適な薬剤を、
製造する方法も提供する。この薬剤は、骨粗しょう症、
動脈硬化症、再狭窄症、あるいはガンの治療剤として用
いることができる。また、上記したいずれかのペプチド
類似体と、製剤学上許容されるキャリアとを含有する、
薬剤組成物も提供する。さらに、上記したいずれかのペ
プチド類似体を使用して、生物試料中のタンパク質：プ
レニル転移酵素あるいは他のプレニルピロリン酸消費酵
素の活性を測定する方法も提供する。

【００１６】この新規なプレニル化ピロリン酸系阻害剤
は、酵素による分解に対して非感受性である天然でない
アミノ酸を含んでいることが好ましい。これらの新規な
阻害剤は、アミノ酸誘導体を構成部分として有し、コン
ビナトリアルアプローチによって化合物のライブラリー
を構築するのに理想的に適している。また、これらのペ
プチド様構造は、二基質性の類似体を指向した利用を容
易とし、クレームに記載されるように、新規なＦＰＰ類
似体が、Ｃａａボックス類似体に結合される。

【００１７】本発明のペプチド様ＦＰＰ類似体の重要な
特徴は、疎水性領域（部位Ａ）、一または二の天然（非
天然）のアミノ酸を含むスペーサー部分（部位Ｂ及び
Ｂ’）、及び最も好ましくは、Ｃ末端において負に荷電
したアミノ酸残基（部位Ｄ）を備えていることである。
疎水性領域は、少なくとも６個の炭素原子を含み、アル
キル基、アルケニル基、シクロアルキル基、シクロアル
ケニル基、あるいはアリール基を有しており、また、ヘ
テロ原子を含んでいてもよい。これらの基は、置換基を
有していてもよく、好ましくは、非極性の置換基であ
り、例えば、Ｃ₁−Ｃ₄アルキル基、Ｃ₁−Ｃ₄アルコキシ
基等である。非芳香族性部位の例としては、例えば、へ
キシル、イソオクチル、デシル、ドデシル、シクロペン
テニル、シクロへキシル、メチルシクロへキシル、テト
ラヒドロピラニル及び、これらを延長したものとして、
シクロへキシルメチルカルボニル、シクロへキシルエチ
ル、ラウリル等がある。アリール基及び特にアラルキル
基が好ましい。芳香族性部位の例としては、フェニル、
トルイル、メトキシフェニル、イソプロポキシフェニ
ル、メチレンジオキシフェニル、テトラヒドロナフチ
ル、ピリジル、フリル、イミダゾイル、チアゾイル、ナ
フチル、フェノキシフェニル、インドリル、アンスリ
ル、及び対応するベンゾイル、フェニルエチル、シンナ
ミル及びより長いアラルキル（アラルケニル）誘導体で
ある。Ａ部位の例としては、さらに、フェニル−（Ｃ₁
−Ｃ₆）アルカノイル、ベンゾイルアミノアセチル、フ
ロイルアミノアセチル、β−（ベンゾイルアミノ）−ア
クリロイル、Ｎ−（ベンジルオキシカルボニル）−ヒス
チジノイル、及び３−ナフトイル−プロパノイルであ
る。

【００１８】スペーサー（部位Ｂ及びＢ’）の全長は、
ＰＦＴ阻害剤には、好ましくは６〜１２原子であり、Ｐ
ＧＧＴ−１あるいは−２阻害剤には、より長いことが好
ましく、６〜１８原子であることが好ましく、より好ま
しくは１３〜１８原子である。スペーサーは、複数のア
ミド／アミン結合の他、ヘテロ原子（例えば、ＳやＯ
等）を含めることもできる。さらに、スペーサーは、可
動性でも立体的に制限されたものであってもよい。好ま
しくは、Ｂ及び／又はＢ’は、β−、γ−、δ−等の脂
肪族アミノ酸のような非天然アミノ酸である。発明に係
るペプチド類似体のカルボキシ末端の残基（Ｄ）は、生
理的条件下で脱プロトン化されうる（例えば、負に荷電
した）一またはそれ以上の官能基を有している。負に荷
電される基は、好ましくは、カルボン酸であり、ホスフ
ェート（リン酸）であり、ホスホネート（ホスホン
酸）、スルホン酸、及び／又は硫酸であり、最も好まし
くはカルボン酸あるいはリン酸である。

【００１９】好ましいペプチド類似体は、それらの全体
の長さの機能として、ファルネシル化あるいはゲラニル
ゲラニル化の阻害に特異的であることが期待される類似
体である。ＳＳあるいはＧＧＰＰＳ特異阻害剤は、これ
らの酵素がＦＰＰを転換するその異なるメカニズムによ
って、化合物のライブラリーのスクリーニングから得ら
れるものと考えられる。

【００２０】この発明のペプチド類似体は、この分野の
当業者において知られる方法によって調製されうる。例
えば、以下の式：Ｒ²ＮＨ−（ＣＨ₂）_0-3−Ｚ²−（ＣＨ
₂）_0-3−ＣＨＲ³−ＣＯＯＨで表される、適切に保護さ
れた構築ブロックを出発原料として用いることにより調
製される。そして、このユニットを、端部ユニット： Ａｒ−（ＣＨ₂）_0-3−Ｚ¹−（ＣＨ₂）_0-3−（ＣＨＲ¹）
_0-1ＣＯＯＨ、及びＮＨ₂−ＣＨ（ＣＯＯＸ）−Ｒ⁴ に結合させる。Ｙが、カルボニル基であるよりもむしろ
ＣＨ₂である化合物は、当業者に知られる方法によっ
て、還元あるいは還元的なアミノ化によって得られる。
例えば、これらの類似体は、好ましくは、以下の式：Ｒ
²ＮＨ−（ＣＨ₂）_0-3−Ｚ²−（ＣＨ₂）_0-3−ＣＨＲ³Ｃ
ＨＯを備える適切に保護された中央ユニットを用いて出
発することにより得られる。そして、このユニットを還
元的条件下で、式： Ａｒ−（ＣＨ₂）_0-3−Ｚ¹−（ＣＨ₂）_0-3−（ＣＨＲ¹）
_0-1ＣＨＯ、及びＮＨ₂−ＣＨ（ＣＯＯＸ）−Ｒ⁴ の端部ユニットと反応させる。

【００２１】この発明のペプチド類似体は、タンパク質
−ファルネシル化及び／又はゲラニルゲラニル化プロセ
スを阻害できることが見出された。その合成の容易さか
ら、コンビナトリアルケミストリーを介して様々な阻害
剤が容易に合成されうる。これらの新規な阻害剤の生物
学的利用性、酵素的分解に対する安定性、及び阻害活性
は、従前報告されている化合物に対して優れている。

【００２２】前記ペプチド様ＦＰＰ類似体は、タンパク
質のプレニル化あるいはコレステロールの生合成阻害を
意図する薬剤組成物における有効成分として有用であ
る。また、発ガンや他の好ましくない細胞増殖、例え
ば、再狭窄症、動脈硬化症のような各種プロセスにおけ
る阻害剤、さらには、異常性高シグナル伝達の抑制剤と
して有用である。また、これらの類似体は、抗骨粗しょ
う症剤及び増加したコレステロールのプラズマレベルの
低減のための薬剤として用いられる。

【００２３】本発明の類似体を含む薬剤組成物は、通常
の方法、例えば、適切な固体あるいは液体のキャリア
と、必要に応じてアジュバントあるいは他の活性成分が
伴われることにより、製剤化されうる。組成物は、経口
投与（カプセル、ピル、タブレット、ゲル、パウダー、
サシェ、シロップ、液剤、分散剤等）に好適であり、注
射用液剤あるいは他の投与形態であってもよい。本組成
物は、ヒトを含む哺乳類に投与されることができ、投与
の特定の目的及び当業者に周知のその他の条件によって
決定される投与量で投与される。好ましい投与量は、例
えば、１ｍｇ／ｋｇ体重以上５００ｍｇ／ｋｇ体重以下
であり、特に、１０ｍｇ／ｋｇ体重以上２００ｍｇ／ｋ
ｇ体重であることが好ましい。投与量は、単回で投与さ
れてもよく、また日に複数回で投与されてもよい。

【００２４】

【実施例】（実施例１）タンパク質：ファルネシル及び
／又はゲラニルゲラニル転移酵素阻害剤の合成本実施例
の合成スキームを図１に示す。６−アミノカプロン酸１
（アルドリッチ）が、ジオキサン中で、塩としてＮａＨ
ＣＯ₃とともに、９−フルオレニルメトキシカルボニル
クロライド（ＦｍｏｃＣｌ）で処理されて、シリカゲル
カラムクロマトグラフィー後に８５％の収率で化合物２
が合成された。Ｆｍｏｃ−Ａｓｐ（Ｏ−ｔ−Ｂｕ）−ｗ
ａｎｇレジン３（０．６ｍｍｏｌ／ｇ，Ｎｏｖａｂｉｏ
ｃｈｅｍ）が、２０％のピペリジンのジメチルスルホア
ミド（ＤＭＦ）溶液とともに処理されて、次いで、標準
的な固相ペプチド合成プロトコール（Ａｔｈｅｒｔｈｏ
ｒｎ ｅｔ ａｌ．Ｓｏｌｉｄ Ｐｈａｓｅ Ｓｙｎｔｈｅ
ｓｉｓ：Ａ Ｐｒａｃｔｉｃａｌ Ａｐｐｒｏａｃｈ，Ｉ
ＲＬ Ｐｒｅｓｓ：Ｏｘｆｏｒｄ，１９８９）に従って
化合物２（５当量）と結合された。すなわち、Ｎ−メチ
ルピロリドン（ＮＭＰ）中、ベンゾトリアゾール−１−
イル−オキシ−トリス（ジメチルアミノ）ホスホニウム
ヘキサフルオロホスフェート（ＢＯＰ）、１−ヒドロ
キシベンゾトリアゾール（ＨＯＢｔ）、ジイソプロピル
エチルアミン（ＤｉＰＥＡ）を用いた。得られた化合物
４は、次いで、ＤＭＦ中、２０％のピペリジンで処理さ
れ、上記と同一の試薬を用いて、４−フェニルブチル酸
（アルドリッチ）と結合され、（ＴＦＡ）／トリイソプ
ロピルシラン９９．５／０．５（ ｖ／ｖ％）を用いて
固相担体から分離された。得られた化合物５は、調製的
ＨＰＬＣ（Ｌｉｃｈｒｏｓｐｈｅｒｅ １００ ＲＰ１８
ｅｎｄ−ｃａｐｐｅｄ（５μ）、１０×２５０ｍｍ，
溶離液：８０％アセトニトリル／水／０．１％ＴＦＡの
リニアグラジエント）で精製され、分光分析技術により
同定された。

【００２５】（実施例２）タンパク質：ファルネシル転
移酵素及びタンパク質：ゲラニルゲラニル転移酵素１の
アッセイＰＦＴ活性は、既に記載された（Ｃｏｈｅｎ
ｅｔ ａｌ．Ｂｉｏｃｈｅｍ．Ｐｈａｒｍｃｏｌ．６７
（１９９９），３６５−３７３）ように、セファロース
ビーズに基質として結合されたプレｐ２１^N-rasのＣ末
端ペプチド（ｐｅｐＡｓｅｐ）を用いて行われた。実験
条件（２５μｌの反応溶液）は、以下の通りとした。８
０ｐｍｏｌ／２５μｌのセファロース結合ペプチド、
０．７μＭの[³Ｈ]−ＦＰＰ（Ａｍｅｒｉｃａｎ Ｒａｄ
ｉｏｌａｂｅｌｅ Ｃｈｅｍｉｃａｌｓ Ｉｎｃ．，；特
異的放射活性１５Ｃｉ／ｍｍｏｌ）、及び１３μｌのラ
ット脳酵素調製液を使用した。インキュベーションは、
３７℃で３０分間であった。ＦＰＰ類似体のＩＣ₅₀の決
定には、アッセイは、化合物５を異なる濃度で、かつ各
濃度における試料数を二重として、３回実施された。

【００２６】ＰＧＧＴ−１活性の決定は、ＰＦＴ活性の
測定と同様の方法で行われ、また、既に記載もされてい
る（Ｃｏｈｅｎ ｅｔ ａｌ．Ｂｉｏｃｈｅｍ．Ｐｈａｒ
ｍｃｏｌ．６７（１９９９），３６５−３７３）。Ｃ末
端のメチオニンがロイシンで置換されている以外は同じ
Ｃ末端ペプチド（ｐｅｐＣｓｅｐ）が使用され、実験条
件は、以下の通りとした。２．５μｌ（１ｎｍｏｌ）の
ｐｅｐＣｓｅｐを含む２５μｌの反応溶液、１μＭの[³
Ｈ]−ＧＧＰＰ（Ａｍｅｒｉｃａｎ Ｒａｄｉｏｌａｂｅ
ｌｅ Ｃｈｅｍｉｃａｌｓ Ｉｎｃ．，；特異的放射活性
１５Ｃｉ／ｍｍｏｌ）、３μｌのウシ脳酵素調製液、５
０μＭのＺｎＣｌ₂、０．５ｍＭ ＭｇＣｌ₂、１ｍＭ ジ
チオトレイトール、０．００４％ Ｔｒｉｔｏｎ Ｘ−１
００、５０ｍＭ Ｔｒｉｓ−ＨＣｌ（ｐＨ７．４）。を
使用した。インキュベーションは、３７℃で４０分間で
あり、連続的に振とうした。ＧＧＰＰ類似体のＩＣ₅₀の
決定には、アッセイは、化合物５を少なくとも５種の異
なる濃度で、かつ各濃度における試料数を二重として、
３回実施された。

【００２７】（実施例３）実施例１で説明した方法によ
れば、下式に示す、具体的な化合物が調製された。各化
合物には、併せてＰＦＴのＩＣ₅₀も示す。

【化５】

【図面の簡単な説明】

【図１】実施例１における合成スキームを示す図であ
る。

───────────────────────────────────────────────────── フロントページの続き (51)Int.Cl.⁷ 識別記号 ＦＩ テーマコート゛(参考） Ａ６１Ｐ 43/00 １１１ Ｃ０７Ｋ 5/023 Ｃ０７Ｋ 5/023 5/027 5/027 5/033 5/033 5/062 5/062 Ｃ１２Ｎ 9/99 Ｃ１２Ｎ 9/99 Ｃ１２Ｑ 1/48 Ｚ Ｃ１２Ｑ 1/48 Ａ６１Ｋ 37/02 (72)発明者 バーム，ブリジット・エリザ・アンナ オランダ ＮＬ−3705 ＴＤ ザイスト, イゲリングラーン 26 (72)発明者 ヴォスクイル，ニコレット オランダ ＮＬ−2324 ＬＶ レイデン, クリクスパンウェグ 80 (72)発明者 ヴァン デン エルスト，ハンス オランダ ＮＬ−2182 ＴＶ ヒレゴン, マガララーン 41 (72)発明者 ピーターマン，エルスベット・ジャンチン オランダ ＮＬ−2312 ＫＭ レイデン, ホーイグラシェ １Ｅ (72)発明者 コーヘン，ルイス・ハートログ オランダ ＮＬ−3621 ＨＲ ブリューケ レン，ヴーツウィッグ 10 (72)発明者 オーバーハンド，マーク オランダ ＮＬ−2312 ＳＺ レイデン, ヴェステストラート 112 (72)発明者 ヴァンデル マーレル，ジスバート・アリ オランダ ＮＬ−2318 ＭＤ レイデン, ブロンフォレル 13 (72)発明者 ヴァン ブーム，ジャコブス・ハベルタス オランダ ＮＬ−2343 ＣＲ オエグスト ゲースト，ペー・デ・ホーグラーン 14

Claims (9)

【特許請求の範囲】
1. 【請求項１】プレニルピロリン酸消費酵素の阻害剤であ
   るペプチド類似体であって、以下の式（１）又は式
   （２）で表される化合物、あるいはその塩又はエステ
   ル。 Ａ−Ｂ−Ｄ （１） 又は、 Ａ−Ｂ−Ｂ’−Ｄ （２） （式中、Ａは、Ａｐ−（ＣＨ₂）_0-3−Ｚ¹−（ＣＨ₂）
   _0-3−（ＣＨＲ¹）_0-1−Ｙ−であり、Ｂ及びＢ’は、独
   立に、−ＮＲ²−（ＣＨ₂）_0-3−Ｚ²−（ＣＨ₂）_0-3−Ｃ
   ＨＲ ³−Ｙ−、又は以下の式（３） 【化１】 であって、Ｂ及びＢ’のうち少なくとも一つが少なくと
   も４個の原子の鎖を含み、すなわち、Ｚ²が直接結合で
   あるときには、Ｂ及び／又はＢ’は、少なくとも１個の
   ＣＨ₂基を含み、 Ｄは、−ＮＨ−ＣＨ（ＣＯＸ）−Ｒ⁴であって、 Ａｐは、少なくとも５個の炭素原子を含む、非極性の炭
   化水素基であり、炭素数１〜４のアルキル基、炭素数１
   〜４のアルコキシ基、メチレンジオキシ基、アリール基
   あるいはアリールオキシ基で置換されていてもよく、 Ｒ¹は、水素、あるいは炭素数１〜４のアルキル基であ
   って、当該アルキル基は、アリール基あるいはヘテロア
   リール基で置換されていてもよく、 Ｒ²は、水素、あるいは炭素数１〜４のアルキル基であ
   って、当該アルキル基は、アリール基あるいはヘテロア
   リール基で置換されていてもよく、 Ｒ³は、水素、あるいは炭素数１〜４のアルキル基であ
   って、当該アルキル基は、アリール基、ヘテロアリール
   基あるいはアミノ基で置換されていてもよく、 Ｒ⁴は、カルボキシル基、ホスホ基（ＰＯ₃Ｈ₂）、ホス
   フェート基（ＯＰＯ₃Ｈ ₂）、スルホ基（ＳＯ₃Ｈ）、サ
   ルフェート基（ＯＳＯ₃Ｈ）、カルボキシフェニル基、
   スルホフェニル基（Ｃ₆Ｈ₄ＳＯ₃Ｈ₂）、ホスホノフェニ
   ル基（Ｃ₆Ｈ₄ＰＯ ₃Ｈ₂）、及びホスホオキシフェニル基
   （Ｃ₆Ｈ₄ＯＰＯ₃Ｈ₂）からなる群から選択される少なく
   とも１の基で置換された炭素数１〜４のアルキル基であ
   り、 Ｘは、ＯＨ、ＯＭ（Ｍはアルカリ金属である）、Ｏ−
   （炭素数１〜４のアルキル基）、ＮＨ−ペプチジル、あ
   るいは、 ＮＨ−ＣＨＲ⁵−ＣＴ−ＮＨ−Ｗ−ＣＴ−ＮＨ−ＣＨ
   （ＣＯＯＲ⁶）−Ｃ（Ｒ⁷Ｒ⁸）Ｒ⁹であり、この式におい
   て、Ｒ⁵は、水素、炭素数１〜３のアルキル基、メルカ
   プトメチル基あるいは保護されたメルカプトメチル基で
   あり、Ｒ⁶は、水素あるいは炭素数１〜４のアルキル基
   であり、Ｒ⁷及びＲ⁸は、独立に、水素あるいは炭素数１
   〜４のアルキル基であり、Ｒ⁹は、水素、あるいは炭素
   数１〜６のアルキル基であって、当該アルキル基は水酸
   基、フェニル基、ヒドロキシフェニル基、インドリル
   基、イミダゾリル基、メルカプト基、メチルチオ基、ア
   ミノ基、カルボキシル基、カルバモイル基、ウイレド
   基、アミジノ基あるいはグアニジノ基で置換されていて
   もよく、 Ｔは、オキソ基あるいは２個の水素であり、Ｗは、糖ア
   ミノ酸（ｓｕｇａｒａｍｉｎｏ ａｃｉｄ）類似体であ
   り、 各Ｙは、独立に、カルボニル基あるいはメチレン基であ
   り、 Ｚ¹は、−ＣＨ₂−ＣＨＲ¹⁰−、−ＣＨ＝ＣＲ¹⁰−（Ｒ¹⁰
   は水素あるいは炭素数１〜４のアルキル基である）、−
   Ｃ≡Ｃ−、１，２−、１，３−、あるいは１，４−シク
   ロへキシレンあるいは−フェニレン、−ＣＯ−、−ＣＯ
   −ＮＨ−、あるいは−Ｏ−、あるいは直接結合であり；
   Ｚ²は、−ＣＨ₂−ＣＨＲ¹⁰−、−ＣＨ＝ＣＲ¹⁰−、−Ｃ
   ≡Ｃ−、１，２−、１，３−、あるいは１，４−シクロ
   へキシレンあるいは−フェニレン、−Ｏ−、−Ｓ−、−
   ＮＨ−、あるいは直接結合である。）
2. 【請求項２】前記糖アミノ酸類似体が、以下の式（４） 【化２】 （式中、Ｒ¹¹及びＲ¹²は、独立に、水素あるいは炭素数
   １〜４のアルキル基であり、 Ａは、直接結合、あるいは飽和又は不飽和の炭素数１〜
   ４のアルキレン鎖であって、１個またはそれ以上の酸素
   原子、イオウ原子、あるいは窒素原子が介在されていて
   もよく、また、水酸基、オキソ基、炭素数１〜４のアル
   キル基、炭素数１〜４のアルキリデン基、炭素数１〜４
   のアルコキシ基、アリールオキシ基、ベンジルオキシ
   基、炭素数１〜８のアシルオキシ基、炭素数１〜３のア
   ルキレンジオキシ（アルキリデンジオキシ）基、アミノ
   基、炭素数１〜４のアルキルアミノ基、あるいは炭素数
   １〜４のヒドロキシアルキル基で置換されていてもよ
   く；（Ｈ）は、Ａが飽和のときには水素であり、Ａが不
   飽和のときには存在しないことを示し；ｍは０、１又は
   ２であり；ｎは０又は１である。）で表される、請求項
   １記載のペプチド類似体。
3. 【請求項３】前記式（１）において、以下の定義：Ａｐ
   は、置換されていてもよいアリール基、特に、フェニル
   基、トルイル基、あるいはメトキシフェニル基である；
   Ｒ¹は、水素、メチル基、あるいはイミダゾリルメチル
   基である；Ｒ²及びＲ³の少なくとも一つが、水素であ
   る；Ｚ¹及びＺ²の少なくとも一つが直接結合である；Ｒ
   ⁴はメチル基、エチル基あるいはベンジル基であって、
   一つあるいは二以上のＣＯＯＨあるいはＯＰＯ₃Ｈ₂で置
   換されている；Ｘは、水酸基である；Ｙはカルボニルで
   ある、のうち１又はそれ以上が適用される、請求項１又
   は２に記載のペプチド類似体。
4. 【請求項４】前記Ｂ’は、−ＮＨ−（ＣＨ₂）_0-4−ＣＨ
   Ｒ³−ＣＯ−であるか、あるいはＢ’が存在しない、請
   求項１〜３のいずれかに記載のペプチド類似体。
5. 【請求項５】前記ＡがＡｒ−（ＣＨ₂）_1-4−（Ｏ）_0-1
   −ＣＯ−である、請求項１記載のペプチド類似体。
6. 【請求項６】前記Ａが、ベンゾイル、フェニルアセチ
   ル、ベンジルオキシカルボニル、３−フェニルプロパノ
   イル、４−フェニルブタノイル、あるいは２−（ベンジ
   ルオキシカルバモイル）−３−（２−イミダゾリル）−
   プロパノイルであり；前記Ｂ−Ｂ’は、６−イミノ−ヘ
   キサノイル、あるいはＮ−（４−イミノブチリル）グリ
   シルである、請求項１記載のペプチド類似体。
7. 【請求項７】請求項１から６のいずれかに記載のペプチ
   ド類似体を使用して、タンパク質：プレニル転移酵素あ
   るいは他のプレニルピロリン酸消費酵素を阻害するのに
   好適な薬剤を、製造する方法。
8. 【請求項８】請求項１〜４のいずれかに記載のペプチド
   類似体と、製剤学上許容されるキャリアとを含有する、
   薬剤組成物。
9. 【請求項９】請求項１〜４のいずれかに記載のペプチド
   類似体を使用して、生物試料中のタンパク質：プレニル
   転移酵素あるいは他のプレニルピロリン酸消費酵素の活
   性を測定する方法。