JPH05262693A - ファルネシルタンパク質トランスフェラーゼの阻害剤 - Google Patents

Abstract

(57)【要約】 【目的】 ファルネシルタンパク質トランスフェラーゼ
（ＦＴアーゼ）を阻害し腫瘍遺伝子タンパク質Ｒａｓの
ファルネシル化を防止する化合物の提供。 【構成】 式（Ｉ）： 【化１】 ［式中、Ｒ¹及びＲ²は各々独立して ａ）Ｈ、 ｂ）Ｃ_1-5アルキル、 ｃ）ｉ）フェニル及びｉｉ）メチル、メトキシ、ハロゲ
ン（Ｃｌ，Ｂｒ，Ｆ，Ｉ）又はヒドロキシで置換された
フェニルから構成される群の一員で置換されたＣ_1-5ア
ルキルから選択される］又は式（ＩＩ）： 【化２】 ［式中、Ｒ¹及びＲ²は前記に同じ］を有する化合物、或
いはＲ¹及びＲ²の少なくとも一方が水素である式（Ｉ）
又は（ＩＩ）の化合物の医薬上許容可能な塩。

Description

【発明の詳細な説明】

【０００１】

【産業上の利用分野】本発明は、ファルネシルタンパク
質トランスフェラーゼの阻害剤に係る。

【０００２】

【従来の技術及び発明が解決しようとする課題】Ｒａｓ
遺伝子は結腸直腸癌、外分泌膵癌及び骨髄性白血病を含
む多数のヒト癌で活性化されることが知られている。Ｒ
ａｓ作用の生物学的及び生化学的研究によると、Ｒａｓ
は細胞を形質転換させるためには血漿膜中に局在し、Ｇ
調節タンパク質（ＧＴＰ）と結合しなければならないの
で、ＲａｓはＧＴＰと同様に機能することが示されてい
る（Ｇｉｂｂｓ，Ｊ．ｅｔ ａｌ．， Ｍｉｃｒｏｂｉ
ｏｌ．Ｒｅｖ．５３：１７１−２８６ （１９８
９））。癌細胞中のＲａｓの形態は、正常細胞中のＲａ
ｓとタンパク質として区別されるような突然変異を有す
る。

【０００３】少なくとも３個の翻訳後修飾がＲａｓ膜局
在に関与し、この３個の修飾はすべてＲａｓのＣ末端で
行われる。ＲａｓＣ末端は“ＣＡＡＸ”即ち“Ｃｙｓ−
Ａａａ¹−Ａａａ²−Ｘａａ”ボックスと呼称される配列
モチーフを含む（Ａａａは脂肪族アミノ酸であり、Ｘａ
ａは任意のアミノ酸である）（Ｗｉｌｌｕｍｓｅｎｅｔ
ａｌ．， Ｎａｔｕｒｅ ３１０：５８３−５８６
（１９８４））。このモチーフを有する他のタンパク質
には、Ｒｈｏ、真菌交配因子のようなＲａｓ関連ＧＴＰ
結合タンパク質、核層（ｎｕｃｌｅａｒ ｌａｍｉｎ
ｓ）及びトランスデューシンのγサブユニットを含む。

【０００４】イソプレノイドファルネシルピロリン酸
（ＦＰＰ）によるＲａｓのファルネシル化はＣｙｓでｉ
ｎ ｖｉｖｏに行われ、チオエーテル結合を形成する
（Ｈａｎｃｏｃｋ ｅｔ ａｌ．， Ｃｅｌｌ ５７：
１１６７（１９８９）； Ｃａｓｅｙ ｅｔ ａｌ．，
Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．ＵＳＡ ８
６：８３２３ （１９８９））。更に、Ｈａ−Ｒａｓ及
びＮ−ＲａｓはＣ末端Ｃｙｓファルネシルアクセプター
の近傍のＣｙｓ残基上のチオエステルの形成によりパル
ミトイル化される（Ｇｕｔｉｅｒｒｅｚ ｅｔ ａ
ｌ．， ＥＭ ＢＯ Ｊ．８：１０９３−１０９８（１９
８９）； Ｈａｎｃｏｃｋ ｅｔ ａｌ．， Ｃｅｌｌ
５７：１１６７−１１７７（１９８９））。Ｋｉ−Ｒ
ａｓはパルミチン酸アクセプターＣｙｓを欠失する。Ｒ
ａｓＣ末端の最後の３個のアミノ酸はタンパク質分解に
より除去され、新しいＣ末端でメチルエステル化が行わ
れる（Ｈａｎｃｏｃｋ ｅｔ ａｌ．，前出）。真菌交
配因子及び哺乳動物核層は同様の修飾段階を受ける（Ａ
ｎｄｅｒｅｇｇ ｅｔ ａｌ．， Ｊ．Ｂｉｏｌ．Ｃｈ
ｅｍ． ２６３：１８２３６ （１９８８）； Ｆａｒ
ｎｓｗｏｒｔｈ ｅｔ ａｌ．， Ｊ．Ｂｉｏｌ．Ｃｈ
ｅｍ． ２６４：２０４２２（１９８９））。

【０００５】Ｒａｓファルネシル化のｉｎ ｖｉｖｏ阻
害は、ロバスタチン（Ｍｅｒｃｋ＆ Ｃｏ．， Ｒａｈ
ｗａｙ，ＮＪ）及びコンパクチン（Ｈａｎｃｏｃｋ ｅ
ｔａｌ．， 前出； Ｃａｓｅｙ ｅｔ ａｌ．， 前
出； Ｓｃｈａｆｅｒｅｔ ａｌ．， Ｓｃｉｅｎｃｅ
２４５：３７９（１９８９））で立証されている。こ
れらの薬剤は、ポリイソプレノイド及びファルネシルピ
ロリン酸前駆物質の産生のための律速酵素であるＨＭＧ
−ＣｏＡレダクターゼを阻害する。前駆物質としてファ
ルネシルピロリン酸を使用するファルネシルタンパク質
トランスフェラーゼはＲａｓファルネシル化に関与する
ことが示されている（Ｒｅｉｓｓｅｔ ａｌ．， Ｃｅ
ｌｌ， ６２：８１−８８ （１９９０）； Ｓｃｈａ
ｂｅｒ ｅｔ ａｌ．， Ｊ．Ｂｉｏｌ．Ｃｈｅｍ．，
２６５：１４７０１−１４７０４（１９９０）； Ｓ
ｃｈａｆｅｒ ｅｔ ａｌ．， Ｓｃ ｉｅｎｃｅ， ２
４９： １１３３−１１３９（１９９０）； Ｍａｎｎ
ｅ ｅｔ ａｌ．， Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ ．Ａｃａｄ．
Ｓｃｉ ＵＳＡ， ８７： ７５４１−７５４５ （１
９９０））。

【０００６】ファルネシルタンパク質トランスフェラー
ゼ、従ってＲａｓタンパク質のファルネシル化の阻害
は、Ｒａｓが正常細胞を癌細胞に形質転換する能力を妨
害する。本発明の化合物はＲａｓファルネシル化を阻害
し、後述するようにＲａｓ機能の主要な負の阻害剤とし
て機能し得る可溶性Ｒａｓを生成する。癌細胞中で可溶
性のＲａｓは主要な負の阻害剤になり得るが、正常細胞
中の可溶性Ｒａｓは阻害剤にはならない。

【０００７】Ｒａｓのシトソール局在（Ｃｙｓ−Ａａａ
¹−Ａａａ²−Ｘａａボックス膜ドメイン不在）及び活性
化（ＧＴＰアーゼ活性減損、ＧＴＰに結合している）形
態は膜結合Ｒａｓの主要な負のＲａｓ阻害剤として機能
する（Ｇｉｂｂｓ ｅｔ ａｌ．， Ｐｒｏｃ．Ｎａｔ
ｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．ＵＳＡ ８６：６６３０−６６
３４（１９８９））。正常ＧＴＰアーゼ活性を有するＲ
ａｓのシトソール局在形態は阻害剤として機能しない。
Ｇｉｂｂｓ ｅｔ ａｌ．，前出の文献はＸｅ ｎｏｐｕ
ｓ卵母細胞及び哺乳動物細胞中でこの効果を示した。

【０００８】Ｒａｓファルネシル化を妨害する本発明の
化合物を投与すると、膜中のＲａｓの量を減少させるの
みならず、Ｒａｓのシトソールプールを生成する。活性
化Ｒａｓを有する腫瘍細胞においてシトソールプールは
膜結合Ｒａｓ機能の別のアンタゴニストとして作用す
る。正常Ｒａｓを有する正常細胞中ではＲａｓのシトソ
ールプールはアンタゴニストとして作用しない。ファル
ネシル化の完全な阻害の不在下では、他のファルネシル
化タンパク質はその機能を維持することができる。

【０００９】ファルネシルタンパク質トランスフェラー
ゼ活性は、化合物配合量を調節することにより低下又は
完全に阻害され得る。化合物配合量を調節することによ
りファルネシルタンパク質トランスフェラーゼ酵素活性
を低下できることは、酵素を使用する他の代謝プロセス
の妨害のような予想される望ましくない副作用を避ける
ために有用である。

【００１０】これらの化合物及びその類似体はファルネ
シルタンパク質トランスフェラーゼの阻害剤である。フ
ァルネシルタンパク質トランスフェラーゼは、Ｒａｓ
ＣＡＡＸボックスのＣｙｓチオール基をファルネシル基
で共有的に修飾するためにファルネシルピロリン酸を使
用する。ＨＭＧ−ＣｏＡレダクターゼを阻害することに
よりファルネシルピロリン酸生合成を阻害すると、Ｒａ
ｓ膜局在をｉｎ ｖｉｖｏで阻止し、Ｒａｓ機能を阻害
する。ファルネシルタンパク質トランスフェラーゼの阻
害はより特異的であり、イソプレン生合成の一般的な阻
害剤の場合よりも副作用が少ない。

【００１１】ＣＡＡＸ配列を有するテトラペプチドはＲ
ａｓファルネシル化を阻害することが既に立証されてい
る（Ｓｃｈａｂｅｒ ｅｔ ａｌ．， 前出； Ｒｅｉ
ｓｓｅｔ ａｌ．，前出， ＰＮＡＳ， ８８：７３２
−７３６ （１９９１））。しかしながら、報告されて
いるファルネシル−トランスフェラーゼの阻害剤は細胞
中で代謝的に不安定又は非活性である。

【００１２】Ｐｉｐｔｏｐｏｒｏｕｓ ａｕｓｔｒａｌ
ｉｅｎｓｉｓからの新規シトラコン酸無水物誘導体の構
造が分光法及び化学的方法により３−［（７Ｚ）−ヘキ
サデセニル］−４−メチルフラン−２，５−ジオンとし
て同定されたことも文献中に報告されている（Ｍ．Ｇｉ
ｌｌ．， Ｐｈｙｔｏｃｈｅｍｉｓｔｒｙ，２１：１７
８６−１７８８ （１９８２））。

【００１３】従って、本発明の目的はファルネシルタン
パク質トランスフェラーゼ及び腫瘍遺伝子タンパク質Ｒ
ａｓのファルネシル化を阻害する化合物を開発すること
である。本発明の別の目的は、本発明の化合物を含有す
る化学療法用組成物及び本発明の化合物の製造方法を開
発することである。

【００１４】

【課題を解決するための手段】本発明は、ファルネシル
タンパク質トランスフェラーゼを阻害し、もって腫瘍遺
伝子タンパク質Ｒａｓのファルネシル化を防止する化合
物、本発明の化合物を含有する化学療法用組成物並びに
本発明の化合物の製造方法を包含する。

【００１５】本発明の化合物は式：

【００１６】

【化５】

【００１７】及び

【００１８】

【化６】

【００１９】により表される。

【００２０】本発明の化合物はファルネシルタンパク質
トランスフェラーゼの阻害及び腫瘍遺伝子タンパク質Ｒ
ａｓのファルネシル化の防止に有用である。本発明の第
１の態様によると、化合物は式（Ｉ）：

【００２１】

【化７】

【００２２】［式中、Ｒ¹及びＲ²は各々独立して ａ）Ｈ、 ｂ）Ｃ_1-5アルキル、 ｃ）ｉ）フェニル及びｉｉ）メチル、メトキシ、ハロゲ
ン（Ｃｌ，Ｂｒ，Ｆ，Ｉ）又はヒドロキシで置換された
フェニルから構成される群の一員で置換されたＣ_1-5ア
ルキルから選択される］の化合物、或いはＲ¹及びＲ²の
少なくとも一方が水素である式（Ｉ）の化合物の医薬上
許容可能な塩である。Ｒ¹、Ｒ²がＨ以外のものであると
き、これらの化合物はファルネシルタンパク質トランス
フェラーゼの阻害剤でなくプロドラッグとして作用し得
る。

【００２３】本発明の第２の態様によると、化合物は式
（ＩＩ）：

【００２４】

【化８】

【００２５】［式中、Ｒ¹及びＲ²は各々独立して ａ）Ｈ、 ｂ）Ｃ_1-5アルキル、 ｃ）ｉ）フェニル及びｉｉ）メチル、メトキシ、ハロゲ
ン（Ｃｌ，Ｂｒ，Ｆ，Ｉ）又はヒドロキシで置換された
フェニルから構成される群の一員で置換されたＣ_1-5ア
ルキルから選択される］の化合物、或いはＲ¹及びＲ²の
少なくとも一方が水素である式（ＩＩ）の化合物の医薬
上許容可能な塩である。Ｒ¹、Ｒ²がＨ以外のものである
とき、これらの化合物はファルネシルタンパク質トラン
スフェラーゼの阻害剤でなくプロドラッグとして作用し
得る。

【００２６】本発明の好適化合物（１２）は、式：

【００２７】

【化９】

【００２８】により表される。

【００２９】本発明の好適化合物（１０）は、式：

【００３０】

【化１０】

【００３１】により表される。

【００３２】酸形態の本発明の化合物の医薬上許容可能
な塩は、本発明の化合物の酸を適量の塩基で処理するよ
うな従来の方法により容易に製造され、このような塩基
は例えばアルカリもしくはアルカリ土類金属水酸化物
（例えば水酸化ナトリウム、水酸化カリウム、水酸化リ
チウム、水酸化カルシウム又は水酸化マグネシウム）で
もよいし、又はアミン（例えばジベンジルエチレンジア
ミン、トリメチルアミン、ピペリジン、ピロリジン、ベ
ンジルアミン等）もしくは水酸化第４アンモニウム（例
えば水酸化テトラメチルアンモニウム等）のような有機
塩基でもよい。

【００３３】本発明の化合物は以下の反応図式：

【００３４】

【化１１】

【００３５】

【化１２】

【００３６】に従って製造される。

【００３７】本発明の化合物の医薬組成物は、ファルネ
シルタンパク質トランスフェラーゼを阻害し、もって腫
瘍遺伝子タンパク質Ｒａｓのファルネシル化を防止する
ために使用され得る。これらの化合物は哺乳動物、特に
ヒトの薬剤として有用である。これらの化合物は癌の治
療用として患者に投与することができる。本発明の化合
物で治療可能な癌の種類の例を非限定的に挙げると、結
腸直腸癌、外分泌膵癌及び骨髄性白血病である。

【００３８】本発明の化合物は哺乳動物、好ましくはヒ
トに投与され得、単独で投与してもよいが、好ましくは
標準製薬プラクティスに従って場合によりミョウバンの
ような既知のアジュバントと共に医薬上許容可能なキャ
リヤー又は希釈剤と組み合わせて医薬組成物中で使用し
てもよい。化合物は経口投与してもよいし、静脈内、筋
肉内、腹腔内、皮下及び局所投与を含む非経口経路で投
与してもよい。

【００３９】本発明の化学療法用化合物を経口使用する
場合、選択された化合物を例えばタブレットもしくはカ
プセルとして投与してもよいし、水溶液もしくは懸濁液
として投与してもよい。経口用タブレットの場合、一般
に使用されるキャリヤーはラクトース及びコーンスター
チであり、ステアリン酸マグネシウムのような潤滑剤が
一般に使用される。カプセル状で経口投与する場合、有
用な希釈剤はラクトース及び乾燥コーンスターチであ
る。経口用に水性懸濁液が必要な場合、有効成分を乳化
及び懸濁剤と組み合わせる。必要に応じて所定の甘味及
び／又は香味剤を添加してもよい。筋肉内、腹腔内、皮
下及び静脈内に投与する場合には、通常は有効成分の無
菌溶液を調製し、溶液のｐＨを適宜調節及び緩衝すべき
である。静脈内投与する場合には、調製物を等張にする
ように溶質の合計濃度を調節すべきである。

【００４０】本発明は更に、治療薬として有効な量の本
発明の化合物を医薬上許容可能なキャリヤー又は希釈剤
の存在下又は不在下で投与する、癌の治療に有用な医薬
組成物にも係る。本発明の適切な組成物は、本発明の化
合物の水溶液と有用なｐＨ値（例えばｐＨ７．４）の医
薬上許容可能なキャリヤー（例えば食塩水）とを含む。
溶液は局所同時注射により患者の筋肉内血液流中に導入
され得る。

【００４１】本発明の化合物を人体に投与する場合、１
日の投与量は、一般に個体患者の年齢、体重及び応答並
びに患者の症状の重度に応じて処方医師により決定され
る。

【００４２】１適用例によると、適量の化合物を癌治療
中の患者に投与する。投与量は１日に哺乳動物体重当た
り約０．１ｍｇ／ｋｇ〜約２０ｍｇ／ｋｇ、好ましくは
０．５ｍｇ／ｋｇ〜約１０ｍｇ／ｋｇ／日である。

【００４３】

【実施例】以下、実施例により本発明を更に詳しく説明
する。使用される特定の材料、種類及び条件は本発明を
詳しく説明することを目的とし、発明の妥当な範囲を制
限するものではない。

【００４４】実施例１ 合成による化合物（１０），（１１）及び（１２）の調
製 ステップ１ ： パルミチン酸メチル及びピルビン酸メチ
ルのア ルドール縮合（（２）及び（３ ）の調製） ジイソプロピルアミン（２．２ｍＬ，１５ｍｍｏｌ）を
ＴＨＦ（１０ｍＬ）に溶解してなる冷却（−７８℃）溶
液にｎ−ブチルリチウム（ヘキサン中１．６Ｍ，６．６
ｍＬ，１０．５ｍｍｏｌ）を加えた。溶液をＮ₂雰囲気
下で−７８℃で１０分間、次いで０℃で１０分間撹拌し
た。ＬＤＡ溶液を−７８℃に冷却後、パルミチン酸メチ
ル（１）（２．７ｇ，１０ｍｍｏｌ）のＴＨＦ（２０ｍ
Ｌ）溶液を注射器により１０分間かけて加え、１０分間
撹拌し続けた。反応混合物をゆっくりと０℃まで昇温さ
せ、３０分間撹拌した（薄黄色）。反応混合物を−４０
℃に再冷却後、ピルビン酸メチル（０．９０ｍＬ，１０
ｍｍｏｌ）を注射器で加え、室温までゆっくりと昇温さ
せながら溶液を１時間撹拌した。反応の進行をＴＬＣ
（ヘキサン−ＥｔＯＡｃ，４：１）上で監視した。２種
の極性生成物が形成された。多少の未反応パルミチン酸
メチルが残存していた。混合物を−７８℃において水で
反応停止し、室温まで昇温させ、クエン酸水溶液（１０
０ｍＬ）で希釈し、酢酸エチル（３×１００ｍＬ）で抽
出した。ＥｔＯＡｃ抽出物を水洗（１００ｍＬ）し、脱
水（Ｎａ₂ＳＯ₄）し、減圧下に蒸発させ、油状物質を得
た。これをヘキサン中に充填したフラッシュシリカゲル
（２００ｃｃ）カラム上でクロマトグラフィーにかけ
た。カラムをヘキサン中５％ＥｔＯＡｃで溶離させ、第
１のジアステレオマー（２）又は（３）３００ｍｇ［Ｈ
ＰＬＣ保持時間７．０分、Ｗｈａｔｍａｎ ＯＤＳ−
３，Ｃ−１８（４．６×２５０ｍｍ）、ＣＨ₃ＯＨ−Ｈ₂
Ｏ（９２：８）、流量１．５ｍｌ／分］、混合物７００
ｍｇ及び第２のジアステレオマー（３）又は（２）３０
０ｍｇ（保持時間６．４分）を得た。どちらの化合物も
固体として得た。ジアステレオマー（２）及び（３）の
立体特異性は決定しなかった。

【００４５】ＣＤＣｌ₃中¹Ｈ ＮＭＲスペクトル（２）
又は（３）（保持時間７．０分を有するジアステレオマ
ー）： ３．７５（３Ｈ，ｓ）， ３．６７（３Ｈ，
ｓ），２．７６（１Ｈ，ｄｄ，Ｊ＝１０．５，３．９Ｈ
ｚ）， １．６８（２Ｈ，ｍ）， １．４１（３Ｈ，
ｓ）， １．２５（２４Ｈ，ｂｒｍ）， ０．８７（３
Ｈ，ｔ，Ｊ＝６．３Ｈｚ）。

【００４６】ＣＤＣｌ₃中¹Ｈ ＮＭＲスペクトル（３）
又は（２）（保持時間６．４分を有するジアステレオマ
ー）： ３．７９（３Ｈ，ｓ）， ３．７１（３Ｈ，
ｓ），２．７５（１Ｈ，ｄｄ，Ｊ＝１１．７，３．３Ｈ
ｚ）， １．８３（２Ｈ，ｍ）， １．４２（３Ｈ，
ｓ）， １．２３（２４Ｈ，ｍ）， ０．８７（３Ｈ，
ｔ，Ｊ＝６．３Ｈｚ）。

【００４７】ステップ２： アルドール産物のβ脱離反
応（化合物（６ ）、（７）及び（８）の調製） 上記ステップ１で得られたＨＰＬＣ保持時間７．０分を
有するジアステレオマー（２）又は（３）１６０ｍｇ
（０．４３ｍｍｏｌ）のＣＨ₂Ｃｌ₂（１．５ｍＬ）及び
ピリジン（１０ｍＬ）溶液に２，６−ジ−ｔｅｒｔ−ブ
チル−４−メチルピリジン（２００ｍｇ，０．９７ｍｍ
ｏｌ）、次いで無水ｐ−トルエンスルホン酸（５７０ｍ
ｇ，１．７４ｍｍｏｌ）を加え、溶液をＮ₂雰囲気下に
５０℃で一晩加熱した。反応の進行をＴＬＣ（ヘキサン
−ＥｔＯＡｃ，８５：１５）上で監視した。トシレート
＊＊は出発時のアルコールよりも低極性であった。ＤＢ
Ｕ（０．５ｍＬ）を加え、反応混合物を１３０〜１４０
℃に３時間加熱し、シトラコン酸ジエステル（保持時間
＊８．８分、〜５０％）、イタコン酸ジエステル類似体
（保持時間＊９．４分、４０％）及びメサコン酸ジエス
テル類似体（保持時間＊９．８分、〜１０％）を得た。

【００４８】同様に、（３）又は（２）（保持時間６．
４分を有するジアステレオマー）（９０ｍｇ，０．２６
ｍｍｏｌ）をＣＨ₂Ｃｌ₂（１．５ｍＬ）及びピリジン
（１ｍＬ）中で、２，６−ジ−ｔｅｒｔ−ブチル−４−
メチルピリジン（１００ｍｇ）及び無水ｐ−トルエンス
ルホン酸（２７０ｍｇ）と５０℃で反応させた後、ＤＢ
Ｕを加えて２０分間加熱し、メサコン酸ジエステル、シ
トラコン酸ジメチルエステル及びイタコン酸ジメチルエ
ステルを得た。

【００４９】両方の反応混合物を室温まで冷却し、混練
し、ＥｔＯＡｃ（２００ｍＬ）上に注ぎ、４Ｎ ＨＣｌ
水溶液（３×５０ｍＬ）、水、１０％ＮａＨＣＯ₃水溶
液（３×５０ｍＬ）次いで水で順次洗った。酢酸エチル
抽出物を脱水（Ｎａ₂Ｏ₄）し、減圧下に蒸発させた。ヘ
キサン中に充填したフラッシュシリカゲルカラム（１０
０ｃｃ）上で粗生成物をクロマトグラフィーにかけ、ま
ず最初に２％、次いで３％のＥｔＯＡｃで溶離させ、シ
トラコン酸類似体（６）（８０ｍｇ）、（７）８８ｍｇ
及び（８）（２５ｍｇ）を得た。合計収率８１％。

【００５０】２〜５％ＥｔＯＡｃのヘキサン溶液を使用
してシリカゲルカラム上でトシレートを精製した。特に
問題なくアルドール産物の混合物を脱離反応に使用し
た。

【００５１】＊＊¹Ｈ ＮＭＲスペクトル（４）又は
（５）ＣＤＣｌ₃： ７．７６（２Ｈ，ｄ，Ｊ＝８．４
Ｈｚ）， ７．３２（２Ｈ，ｄ，Ｊ＝８．４Ｈｚ），
３．８３（３Ｈ，ｓ）， ３．６７（３Ｈ，ｓ），２．
９５（１Ｈ，ｄｄ，Ｊ＝１１．７，３．０Ｈｚ），
２．４４（３Ｈ，ｓ）， １．８１（３Ｈ，ｓ），
１．６０（２Ｈ，ｍ）， １．２４（２４Ｈ，ｍ），
０．８８（３Ｈ，ｔ，Ｊ＝６．０Ｈｚ）。

【００５２】¹Ｈ ＮＭＲスペクトル（６）ＣＤＣｌ₃：
３．７５（３Ｈ，ｓ）， ３．７４（３Ｈ，ｓ），
２．３２（２Ｈ，ｔ，Ｊ＝７．２Ｈｚ）， １．９４
（３Ｈ，ｂｒｓ）， １．４３（２Ｈ，ｍ）， １．２
４（２２Ｈ，ｍ）， ０．８６（３Ｈ，ｔ，Ｊ＝６．６
Ｈｚ）。

【００５３】¹Ｈ ＮＭＲスペクトル（８）ＣＤＣｌ₃：
３．７８（３Ｈ，ｓ）， ３．７７（３Ｈ，ｓ），
２．４３（２Ｈ，ｔ，Ｊ＝８．５Ｈｚ）， １．９９
（３Ｈ，ｂｒｓ）， １．４０（２Ｈ，ｍ）， １．２
４（２２Ｈ，ｍ）， ０．８７（３Ｈ，ｔ，Ｊ＝６．８
Ｈｚ）。

【００５４】¹Ｈ ＮＭＲスペクトル（７）ＣＤＣｌ₃：
６．３５（１Ｈ，ｓ）， ５．７４（１Ｈ，ｓ），
３．７６（３Ｈ，ｓ）， ３．６７（３Ｈ，ｓ），
３．４９（１Ｈ，ｔ，Ｊ＝７．２Ｈｚ）， １．８６
（１Ｈ，ｍ）， １．６５（１Ｈ，ｍ）， １．２４
（２４Ｈ，ｍ）， ０．８７（３Ｈ，ｔ，Ｊ＝６．３Ｈ
ｚ）。

【００５５】＊ＨＰＬＣ条件： Ｗｈａｔｍａｎ ＯＤ
Ｓ−３（Ｃ−１８），４．６×２５０ｍｍ，ＣＨ₃ＯＨ
−Ｈ₂Ｏ（９２：８），流量１．５ｍｌ／分。

【００５６】ステップ３： シトラコン酸ジメチルエス
テル類似体の加 水分解（化合物（９）の調製） シトラコン酸ジメチルエステル類似体（６）（４０ｍ
ｇ）のＴＨＦ（１ｍＬ）、メタノール（１ｍＬ）、水
（１ｍＬ）及び４Ｎ ＮａＯＨ（０．５ｍＬ）溶液を還
流下に一晩加熱し、反応の進行をＨＰＬＣ＊上で監視し
た。反応の終了後、溶液を０℃に冷却し、４Ｎ ＨＣｌ
でｐＨ２に酸性化した。生成物をジクロロメタン（２×
２５ｍＬ）で抽出した。ＣＨ₂Ｃｌ₂溶液を水洗し、脱水
し（Ｎａ₂ＳＯ₄）、蒸発させ、無色無水生成物（保持時
間＊８．９分）を得、この生成物は冷却すると凝固し
た。

【００５７】＊分析ＨＰＬＣ条件： Ｗｈａｔｍａｎ
Ｃ−１８，４．６×２５０ｍｍ，ＣＨ₃ＣＮ−Ｈ₂Ｏ（９
０：１０）（０．２％ＴＦＡ含有），流量１．５ｍｌ／
分。

【００５８】ステップ４： メサコン酸ジメチルエステ
ル類似体（８） の加水分解（化合物（１１）及 び（１
２）の調製） 上記条件を使用してメサコン酸類似体（８）を３０分間
加水分解し、モノメチルエステル（１１）（保持時間＊
１２．２分）と微量の二酸（１２）（保持時間５．８
分）を得た。反応混合物を一晩還流させると、二酸が定
量的に得られた。モノメチルエステルを分取ＨＰＬＣカ
ラム（Ｗｈａｔｍａｎ Ｃ−１８， ２２×２５０ｍ
ｍ，流量１０ｍｌ／分，ＣＨ₃ＣＮ（６５％），Ｈ₂Ｏ
（０．８％ＴＦＡを含有する３５％）で精製した。ＬＲ
¹Ｈ−¹³Ｃ ＣＯＳＹ実験を使用してＮＭＲにより
（１１）中のメチルエステル基の位置を確認した。

【００５９】¹Ｈ ＮＭＲスペクトル（１１）ＣＤＣ
ｌ₃： ３．８１（３Ｈ，ｓ）， ２．５８（２Ｈ，
ｔ，Ｊ＝７．５Ｈｚ）， ２．００（３Ｈ，ｓ），
１．４３（２Ｈ，ｍ）， １．２４（２２Ｈ，ｍ），
０．８８（３Ｈ，ｔ，Ｊ＝６．７Ｈｚ）。

【００６０】¹Ｈ ＮＭＲスペクトル（１２）ＣＤＣ
ｌ₃： ２．５８（２Ｈ，ｔ，Ｊ＝７．８Ｈｚ），
２．１４（３Ｈ，ｍ）， １．５２（２Ｈ，ｍ），
１．２６（２２Ｈ，ｍ）， ０．８９（３Ｈ，ｔ，Ｊ＝
６．６Ｈｚ）。

【００６１】＊分析ＨＰＬＣ条件： Ｗｈａｔｍａｎ
Ｃ−１８，４．６×２５０ｍｍ，ＣＨ₃ＣＮ（８０
％）：Ｈ₂Ｏ（２０％）（０．８％ＴＦＡ含有），流量
１．５ｍｌ／分。

【００６２】ステップ５： イタコン酸ジメチルエステ
ル類似体（７） の加水分解（化合物（１０）の 調製） シトラコン酸について記載した条件に従ってイタコン酸
ジエステル（７）（５０ｍｇ）を加水分解した。予想通
り、加水分解の結果、イタコン酸類似体（１０）（保持
時間＊７．７分、７２％、粉末）、無水シトラコン酸類
似体（９）（保持時間＊１２．９分、〜２０％）及びメ
サコン酸類似体（１２）（保持時間＊５．９分、８％、
粉末）の混合物を得た。合計収率〜８０％。これらの酸
を分取ＨＰＬＣカラム［Ｗｈａｔｍａｎ Ｃ−１８，２
２×２５０ｍｍ，ＣＨ₃ＣＮ−Ｈ₂Ｏ（１％ＴＦＡ含有）
６５：３５〜７５：２５で６０分間、次いで９０：１０
のグラジエント溶離，流量１０ｍｌ／分］で精製した。

【００６３】ＣＤＣｌ₃中¹Ｈ ＮＭＲスペクトル（１
０）： ６．５２（１Ｈ，ｓ）， ５．８２（１Ｈ，
ｓ）， ３．３７（１Ｈ，ｔ，Ｊ＝７Ｈｚ）， １．９
３（１Ｈ，ｍ）， １．７３（１Ｈ，ｍ）， １．２５
（２４Ｈ，ｍ）， ０．８３（３Ｈ，ｔ，Ｊ＝６．６Ｈ
ｚ）。

【００６４】＊分析ＨＰＬＣ条件： Ｗｈａｔｍａｎ
Ｃ−１８，４．６×２５０ｍｍ，ＣＨ₃ＣＮ（８０
％）：Ｈ₂Ｏ（２０％）（０．８％ＴＦＡ含有），流量
１．５ｍｌ／分。

【００６５】実施例２ Ｒａｓファルネシルトランスフェラーゼのｉｎ ｖｉｔ
ｒｏ阻害 ウシ大脳からのファルネシルタンパク質トランスフェラ
ーゼ（ＦＴアーゼ）を、ＤＥＡＥ−Ｓｅｐｈａｃｅｌ
（Ｐｈａｒｍａｃｉａ， ０〜０．８Ｍ ＮａＣｌグラ
ジエント溶離）、Ｎ−オクチルアガロース（Ｓｉｇｍ
ａ， ０〜０．６ＭＮａＣｌグラジエント溶離）及びｍ
ｏｎｏ Ｑ ＨＰＬＣカラム（Ｐｈａｒｍａｃｉａ，
０〜０．３Ｍ ＮａＣｌグラジエント）上でクロマトグ
ラフィーにかけた。３．５μＭ Ｒａｓ−ＣＶＬＳ、
０．２５μＭ［3Ｈ］ＦＰＰ及び被験化合物をこの部分
的に精製した酵素調製物と共にインキュベートした。以
下に示すＦＴアーゼ阻害データは、被験化合物がＲａｓ
ファルネシル化をｉｎ ｖｉｔｒｏで阻害する能力の測
定結果である。なお、表中のＩＣ₅₀は、記載のアッセイ
条件下で５０％のＦＴアーゼ阻害を与える化合物の濃度
である。

【００６６】

【表１】

【００６７】実施例３ 本発明の化合物の経口組成物の一例として、２０ｍｇの
化合物（１０）、（１１）又は（１２）を合計量５８０
〜５９０ｍｇとするのに十分な微粉砕ラクトースと調合
し、サイズ０の硬質ゼラチンカプセルに充填した。

【００６８】実施例４ アンモニウム塩の調製 化合物（１１）又は（１２）の遊離酸の０．１ｍｍｏｌ
サンプルを酢酸エチル１０ｍｌに溶解させた。得られた
溶液をアンモニアで飽和させ、蒸発させ、アンモニア塩
を得た。

【００６９】実施例５ カリウム塩の調製 化合物（１０）、（１１）又は（１２）の遊離酸０．１
ｍｍｏｌを６：４メタノール／水１０ｍｌに溶解してな
る溶液を、０．１又は０．２ｍｍｏｌの水酸化カリウム
を含有する水性又はメタノール性溶液で処理した。溶媒
を蒸発させ、対応するカリウム塩を得た。０．１〜０．
２ｍｍｏｌの間の水酸化カリウムを加えると、同様に水
酸化カリウムの厳密な添加量に依存する組成を有する一
カリウム塩と二カリウム塩との混合物を得た。同様に、
ナトリウム及びリチウム塩を形成することができる。

【００７０】実施例６ カルシウム塩の調製 化合物（１０）の遊離酸０．１ｍｍｏｌを６：４メタノ
ール／水２０ｍｌに溶解してなる溶液を、０．１ｍｍｏ
ｌ水酸化カルシウム水溶液で処理した。溶媒を蒸発さ
せ、対応するカルシウム塩を得た。

【００７１】実施例７ エチレンジアミン塩の調製 化合物（１０）、（１１）又は（１２）０．１ｍｍｏｌ
を６：４メタノール／水１０ｍｌに溶解してなる溶液
を、０．１ｍｍｏｌのエチレンジアミンで処理した。溶
媒を蒸発させ、エチレンジアミン塩を得た。同様の手順
をＮ，Ｎ’−ジベンジルエチレンジアミン塩の調製にも
適用できる。

【００７２】実施例８ トリス（ヒドロキシメチル）アミノメタン塩の調製 化合物（１０）、（１１）又は（１２）０．１ｍｍｏｌ
を６：４メタノール／水１０ｍｌに溶解してなる溶液
に、０．１〜０．２ｍｍｏｌのトリス（ヒドロキシメチ
ル）アミノメタンをメタノール１０ｍｌに溶解してなる
溶液を加えた。溶媒を蒸発させ、アミンの添加モル比に
より決定される厳密な組成を有する化合物（１０）、
（１１）又は（１２）の対応する塩形態を得た。同様の
手順で、Ｌ−オルニチン、Ｌ−リシン及びＮ−メチルグ
ルカミンの塩を調製した。

【００７３】実施例９ Ｌ−アルギニン塩の調製 化合物（１０）、（１１）又は（１２）の遊離酸０．１
ｍｍｏｌを６：４メタノール／水１０ｍｌに溶解してな
る溶液を、０．１〜０．２ｍｍｏｌのＬ−アルギニン水
溶液で処理した。溶媒を蒸発させ、アミノ酸と使用され
る化合物（１０）、（１１）又は（１２）の遊離酸との
モル比により決定される厳密な組成を有する標記塩を得
た。同様の手順で、Ｌ−オルニチン、Ｌ−リシン及びＮ
−メチルグルアカミンの塩を調製した。

───────────────────────────────────────────────────── フロントページの続き (51)Int.Cl.⁵ 識別記号 庁内整理番号 ＦＩ 技術表示箇所 // Ｃ１２Ｎ 9/99

Claims (10)

【特許請求の範囲】
1. 【請求項１】 式（Ｉ）: 【化１】 ［式中、Ｒ¹及びＲ²は各々独立して ａ）Ｈ、 ｂ）Ｃ_1-5アルキル、 ｃ）ｉ）フェニル及びｉｉ）メチル、メトキシ、ハロゲ
   ン（Ｃｌ，Ｂｒ，Ｆ，Ｉ）又はヒドロキシで置換された
   フェニルから構成される群の一員で置換されたＣ_1-5ア
   ルキルから選択される］を有するファルネシルタンパク
   質トランスフェラーゼを阻害するか、ないしはファルネ
   シルタンパク質トランスフェラーゼの阻害剤のためのプ
   ロドラッグとして作用する化合物、或いはＲ¹及びＲ²の
   少なくとも一方が水素である式（Ｉ）の化合物の医薬上
   許容可能な塩。
2. 【請求項２】 式（ＩＩ）: 【化２】 ［式中、Ｒ¹及びＲ²は各々独立して ａ）Ｈ、 ｂ）Ｃ_1-5アルキル、 ｃ）ｉ）フェニル及びｉｉ）メチル、メトキシ、ハロゲ
   ン（Ｃｌ，Ｂｒ，Ｆ，Ｉ）又はヒドロキシで置換された
   フェニルから構成される群の一員で置換されたＣ_1-5ア
   ルキルから選択される］を有するファルネシルタンパク
   質トランスフェラーゼを阻害するか、ないしはファルネ
   シルタンパク質トランスフェラーゼの阻害剤のためのプ
   ロドラッグとして作用する化合物、或いはＲ¹及びＲ²の
   少なくとも一方が水素である式（ＩＩ）の化合物の医薬
   上許容可能な塩。
3. 【請求項３】 式： 【化３】 により表されることを特徴とする請求項１に記載の化合
   物。
4. 【請求項４】 式： 【化４】 により表されることを特徴とする請求項２に記載の化合
   物。
5. 【請求項５】 医薬キャリヤーと、該キャリヤー中に分
   散された治療薬として有効な量の請求項１に記載の化合
   物とを含有する化学療法用組成物。
6. 【請求項６】 医薬キャリヤーと、該キャリヤー中に分
   散された治療薬として有効な量の請求項２に記載の化合
   物とを含有する化学療法用組成物。
7. 【請求項７】 患者におけるＲａｓタンパク質のファル
   ネシル化を阻害するのに有用な請求項１に記載の化合物
   の投与に適した薬剤調製のための、請求項１に記載の化
   合物の治療上有効量の使用。
8. 【請求項８】 患者におけるＲａｓタンパク質のファル
   ネシル化を阻害するのに有用な請求項２に記載の化合物
   の投与に適した薬剤調製のための、請求項２に記載の化
   合物の治療上有効量の使用。
9. 【請求項９】 患者における癌の治療に有用な請求項１
   に記載の化合物の投与に適した薬剤調製のための、請求
   項１に記載の化合物の治療上有効量の使用。
10. 【請求項１０】 患者における癌の治療に有用な請求項
    ２に記載の化合物の投与に適した薬剤調製のための、請
    求項２に記載の化合物の治療上有効量の使用。