NO180568B - Fremgangsmåte for å isolere en hovedsakelig ren anti-inflammatorisk faktor fra melk - Google Patents
Fremgangsmåte for å isolere en hovedsakelig ren anti-inflammatorisk faktor fra melk Download PDFInfo
- Publication number
- NO180568B NO180568B NO894784A NO894784A NO180568B NO 180568 B NO180568 B NO 180568B NO 894784 A NO894784 A NO 894784A NO 894784 A NO894784 A NO 894784A NO 180568 B NO180568 B NO 180568B
- Authority
- NO
- Norway
- Prior art keywords
- milk
- stated
- carbohydrate
- inflammatory
- maif
- Prior art date
Links
- 235000013336 milk Nutrition 0.000 title claims abstract description 101
- 239000008267 milk Substances 0.000 title claims abstract description 101
- 210000004080 milk Anatomy 0.000 title claims abstract description 101
- 230000003110 anti-inflammatory effect Effects 0.000 title claims abstract description 44
- 238000000034 method Methods 0.000 title claims description 50
- 241001465754 Metazoa Species 0.000 claims abstract description 37
- 241000283690 Bos taurus Species 0.000 claims description 25
- 150000001720 carbohydrates Chemical class 0.000 claims description 12
- 230000008569 process Effects 0.000 claims description 12
- 235000020183 skimmed milk Nutrition 0.000 claims description 9
- 239000005862 Whey Substances 0.000 claims description 8
- 102000007544 Whey Proteins Human genes 0.000 claims description 8
- 108010046377 Whey Proteins Proteins 0.000 claims description 8
- 238000004587 chromatography analysis Methods 0.000 claims description 6
- 239000002808 molecular sieve Substances 0.000 claims description 6
- URGAHOPLAPQHLN-UHFFFAOYSA-N sodium aluminosilicate Chemical compound [Na+].[Al+3].[O-][Si]([O-])=O.[O-][Si]([O-])=O URGAHOPLAPQHLN-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 6
- 239000005018 casein Substances 0.000 claims description 5
- BECPQYXYKAMYBN-UHFFFAOYSA-N casein, tech. Chemical compound NCCCCC(C(O)=O)N=C(O)C(CC(O)=O)N=C(O)C(CCC(O)=N)N=C(O)C(CC(C)C)N=C(O)C(CCC(O)=O)N=C(O)C(CC(O)=O)N=C(O)C(CCC(O)=O)N=C(O)C(C(C)O)N=C(O)C(CCC(O)=N)N=C(O)C(CCC(O)=N)N=C(O)C(CCC(O)=N)N=C(O)C(CCC(O)=O)N=C(O)C(CCC(O)=O)N=C(O)C(COP(O)(O)=O)N=C(O)C(CCC(O)=N)N=C(O)C(N)CC1=CC=CC=C1 BECPQYXYKAMYBN-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 5
- 235000021240 caseins Nutrition 0.000 claims description 5
- 238000010828 elution Methods 0.000 claims description 5
- 230000007935 neutral effect Effects 0.000 claims description 5
- 238000005571 anion exchange chromatography Methods 0.000 claims description 3
- 150000002632 lipids Chemical class 0.000 claims description 3
- -1 phosphorus compound Chemical class 0.000 claims description 3
- 239000012266 salt solution Substances 0.000 claims description 3
- 238000005349 anion exchange Methods 0.000 claims description 2
- 125000002915 carbonyl group Chemical group [*:2]C([*:1])=O 0.000 claims description 2
- QJGQUHMNIGDVPM-UHFFFAOYSA-N nitrogen group Chemical group [N] QJGQUHMNIGDVPM-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 2
- 230000003647 oxidation Effects 0.000 claims description 2
- 238000007254 oxidation reaction Methods 0.000 claims description 2
- 229910052698 phosphorus Inorganic materials 0.000 claims description 2
- BHPQYMZQTOCNFJ-UHFFFAOYSA-N Calcium cation Chemical compound [Ca+2] BHPQYMZQTOCNFJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims 1
- 125000001931 aliphatic group Chemical group 0.000 claims 1
- 229910001424 calcium ion Inorganic materials 0.000 claims 1
- 230000021523 carboxylation Effects 0.000 claims 1
- 238000006473 carboxylation reaction Methods 0.000 claims 1
- 239000011574 phosphorus Substances 0.000 claims 1
- 150000003464 sulfur compounds Chemical class 0.000 claims 1
- 239000000427 antigen Substances 0.000 description 36
- 102000036639 antigens Human genes 0.000 description 36
- 108091007433 antigens Proteins 0.000 description 36
- 230000000521 hyperimmunizing effect Effects 0.000 description 24
- 230000004054 inflammatory process Effects 0.000 description 22
- 230000001580 bacterial effect Effects 0.000 description 19
- 206010061218 Inflammation Diseases 0.000 description 18
- 241000700159 Rattus Species 0.000 description 16
- 230000000694 effects Effects 0.000 description 16
- 238000012360 testing method Methods 0.000 description 14
- 229960005486 vaccine Drugs 0.000 description 13
- 239000000047 product Substances 0.000 description 12
- 239000000126 substance Substances 0.000 description 11
- 150000003839 salts Chemical class 0.000 description 10
- 230000003053 immunization Effects 0.000 description 9
- 238000002955 isolation Methods 0.000 description 9
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 description 9
- 241000894006 Bacteria Species 0.000 description 8
- 239000003795 chemical substances by application Substances 0.000 description 8
- 238000002649 immunization Methods 0.000 description 8
- FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M Sodium chloride Chemical compound [Na+].[Cl-] FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 7
- 150000001875 compounds Chemical class 0.000 description 7
- 208000037265 diseases, disorders, signs and symptoms Diseases 0.000 description 7
- 239000000463 material Substances 0.000 description 7
- 239000011859 microparticle Substances 0.000 description 7
- 230000001225 therapeutic effect Effects 0.000 description 7
- 210000001519 tissue Anatomy 0.000 description 7
- 229940121363 anti-inflammatory agent Drugs 0.000 description 6
- 239000002260 anti-inflammatory agent Substances 0.000 description 6
- 229940124599 anti-inflammatory drug Drugs 0.000 description 6
- 230000006378 damage Effects 0.000 description 6
- 239000012154 double-distilled water Substances 0.000 description 6
- 210000002683 foot Anatomy 0.000 description 6
- 238000000746 purification Methods 0.000 description 6
- 150000003873 salicylate salts Chemical class 0.000 description 6
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Substances O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- 210000004027 cell Anatomy 0.000 description 5
- 239000003246 corticosteroid Substances 0.000 description 5
- 235000020247 cow milk Nutrition 0.000 description 5
- 239000007924 injection Substances 0.000 description 5
- 238000002347 injection Methods 0.000 description 5
- 210000000265 leukocyte Anatomy 0.000 description 5
- 239000007788 liquid Substances 0.000 description 5
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 description 5
- 239000000203 mixture Substances 0.000 description 5
- 229940094443 oxytocics prostaglandins Drugs 0.000 description 5
- 150000003180 prostaglandins Chemical class 0.000 description 5
- 239000011780 sodium chloride Substances 0.000 description 5
- 239000000725 suspension Substances 0.000 description 5
- IJGRMHOSHXDMSA-UHFFFAOYSA-N Atomic nitrogen Chemical compound N#N IJGRMHOSHXDMSA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 241000282817 Bovidae Species 0.000 description 4
- OYPRJOBELJOOCE-UHFFFAOYSA-N Calcium Chemical compound [Ca] OYPRJOBELJOOCE-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 206010015150 Erythema Diseases 0.000 description 4
- 206010030113 Oedema Diseases 0.000 description 4
- 230000001154 acute effect Effects 0.000 description 4
- 230000002776 aggregation Effects 0.000 description 4
- 238000004220 aggregation Methods 0.000 description 4
- 238000003556 assay Methods 0.000 description 4
- 230000004071 biological effect Effects 0.000 description 4
- 239000011575 calcium Substances 0.000 description 4
- 229910052791 calcium Inorganic materials 0.000 description 4
- 239000000679 carrageenan Substances 0.000 description 4
- 235000010418 carrageenan Nutrition 0.000 description 4
- 229920001525 carrageenan Polymers 0.000 description 4
- 229940113118 carrageenan Drugs 0.000 description 4
- 201000010099 disease Diseases 0.000 description 4
- 239000000706 filtrate Substances 0.000 description 4
- 230000028709 inflammatory response Effects 0.000 description 4
- 229920002521 macromolecule Polymers 0.000 description 4
- 230000003287 optical effect Effects 0.000 description 4
- 230000004044 response Effects 0.000 description 4
- 229960001860 salicylate Drugs 0.000 description 4
- YGSDEFSMJLZEOE-UHFFFAOYSA-M salicylate Chemical compound OC1=CC=CC=C1C([O-])=O YGSDEFSMJLZEOE-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 4
- 238000001228 spectrum Methods 0.000 description 4
- 208000024891 symptom Diseases 0.000 description 4
- 238000000108 ultra-filtration Methods 0.000 description 4
- UHVMMEOXYDMDKI-JKYCWFKZSA-L zinc;1-(5-cyanopyridin-2-yl)-3-[(1s,2s)-2-(6-fluoro-2-hydroxy-3-propanoylphenyl)cyclopropyl]urea;diacetate Chemical compound [Zn+2].CC([O-])=O.CC([O-])=O.CCC(=O)C1=CC=C(F)C([C@H]2[C@H](C2)NC(=O)NC=2N=CC(=CC=2)C#N)=C1O UHVMMEOXYDMDKI-JKYCWFKZSA-L 0.000 description 4
- WFIYPADYPQQLNN-UHFFFAOYSA-N 2-[2-(4-bromopyrazol-1-yl)ethyl]isoindole-1,3-dione Chemical compound C1=C(Br)C=NN1CCN1C(=O)C2=CC=CC=C2C1=O WFIYPADYPQQLNN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- GUBGYTABKSRVRQ-WFVLMXAXSA-N DEAE-cellulose Chemical compound OC1C(O)C(O)C(CO)O[C@H]1O[C@@H]1C(CO)OC(O)C(O)C1O GUBGYTABKSRVRQ-WFVLMXAXSA-N 0.000 description 3
- 102000004190 Enzymes Human genes 0.000 description 3
- 108090000790 Enzymes Proteins 0.000 description 3
- PEDCQBHIVMGVHV-UHFFFAOYSA-N Glycerine Chemical compound OCC(O)CO PEDCQBHIVMGVHV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- OKKJLVBELUTLKV-UHFFFAOYSA-N Methanol Chemical group OC OKKJLVBELUTLKV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 208000002193 Pain Diseases 0.000 description 3
- 230000006937 anti-inflammatory bioactivity Effects 0.000 description 3
- 230000008901 benefit Effects 0.000 description 3
- 238000004166 bioassay Methods 0.000 description 3
- 235000014633 carbohydrates Nutrition 0.000 description 3
- 229960001334 corticosteroids Drugs 0.000 description 3
- 239000006071 cream Substances 0.000 description 3
- 235000013365 dairy product Nutrition 0.000 description 3
- 208000035475 disorder Diseases 0.000 description 3
- 239000003814 drug Substances 0.000 description 3
- 229940088598 enzyme Drugs 0.000 description 3
- 231100000321 erythema Toxicity 0.000 description 3
- 239000011521 glass Substances 0.000 description 3
- 230000003054 hormonal effect Effects 0.000 description 3
- 230000006698 induction Effects 0.000 description 3
- 230000002757 inflammatory effect Effects 0.000 description 3
- 238000011835 investigation Methods 0.000 description 3
- 238000004255 ion exchange chromatography Methods 0.000 description 3
- 239000011159 matrix material Substances 0.000 description 3
- 239000012528 membrane Substances 0.000 description 3
- 230000005012 migration Effects 0.000 description 3
- 238000013508 migration Methods 0.000 description 3
- 229910052757 nitrogen Inorganic materials 0.000 description 3
- 231100000572 poisoning Toxicity 0.000 description 3
- 230000000607 poisoning effect Effects 0.000 description 3
- 230000003389 potentiating effect Effects 0.000 description 3
- 238000012545 processing Methods 0.000 description 3
- 230000035945 sensitivity Effects 0.000 description 3
- NWUYHJFMYQTDRP-UHFFFAOYSA-N 1,2-bis(ethenyl)benzene;1-ethenyl-2-ethylbenzene;styrene Chemical compound C=CC1=CC=CC=C1.CCC1=CC=CC=C1C=C.C=CC1=CC=CC=C1C=C NWUYHJFMYQTDRP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- BFSVOASYOCHEOV-UHFFFAOYSA-N 2-diethylaminoethanol Chemical compound CCN(CC)CCO BFSVOASYOCHEOV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- BSYNRYMUTXBXSQ-UHFFFAOYSA-N Aspirin Chemical compound CC(=O)OC1=CC=CC=C1C(O)=O BSYNRYMUTXBXSQ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- VEXZGXHMUGYJMC-UHFFFAOYSA-M Chloride anion Chemical compound [Cl-] VEXZGXHMUGYJMC-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 2
- 229920002271 DEAE-Sepharose Polymers 0.000 description 2
- LYCAIKOWRPUZTN-UHFFFAOYSA-N Ethylene glycol Chemical compound OCCO LYCAIKOWRPUZTN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- AEMRFAOFKBGASW-UHFFFAOYSA-N Glycolic acid Chemical compound OCC(O)=O AEMRFAOFKBGASW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- NTYJJOPFIAHURM-UHFFFAOYSA-N Histamine Chemical compound NCCC1=CN=CN1 NTYJJOPFIAHURM-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 238000004566 IR spectroscopy Methods 0.000 description 2
- 206010067125 Liver injury Diseases 0.000 description 2
- 101100134025 Rattus norvegicus Lat2 gene Proteins 0.000 description 2
- 206010070834 Sensitisation Diseases 0.000 description 2
- 241000194019 Streptococcus mutans Species 0.000 description 2
- 208000027418 Wounds and injury Diseases 0.000 description 2
- 229960001138 acetylsalicylic acid Drugs 0.000 description 2
- 239000002221 antipyretic Substances 0.000 description 2
- YZXBAPSDXZZRGB-DOFZRALJSA-N arachidonic acid Chemical compound CCCCC\C=C/C\C=C/C\C=C/C\C=C/CCCC(O)=O YZXBAPSDXZZRGB-DOFZRALJSA-N 0.000 description 2
- 230000009286 beneficial effect Effects 0.000 description 2
- 150000007942 carboxylates Chemical group 0.000 description 2
- 230000001413 cellular effect Effects 0.000 description 2
- 238000006243 chemical reaction Methods 0.000 description 2
- 239000005482 chemotactic factor Substances 0.000 description 2
- 230000000295 complement effect Effects 0.000 description 2
- 229920001577 copolymer Polymers 0.000 description 2
- 235000014113 dietary fatty acids Nutrition 0.000 description 2
- 235000019197 fats Nutrition 0.000 description 2
- 239000000194 fatty acid Substances 0.000 description 2
- 229930195729 fatty acid Natural products 0.000 description 2
- 239000012530 fluid Substances 0.000 description 2
- 238000005194 fractionation Methods 0.000 description 2
- 230000006870 function Effects 0.000 description 2
- 231100000234 hepatic damage Toxicity 0.000 description 2
- 229940088597 hormone Drugs 0.000 description 2
- 239000005556 hormone Substances 0.000 description 2
- 208000015181 infectious disease Diseases 0.000 description 2
- 230000004968 inflammatory condition Effects 0.000 description 2
- 208000027866 inflammatory disease Diseases 0.000 description 2
- 208000014674 injury Diseases 0.000 description 2
- NOESYZHRGYRDHS-UHFFFAOYSA-N insulin Chemical compound N1C(=O)C(NC(=O)C(CCC(N)=O)NC(=O)C(CCC(O)=O)NC(=O)C(C(C)C)NC(=O)C(NC(=O)CN)C(C)CC)CSSCC(C(NC(CO)C(=O)NC(CC(C)C)C(=O)NC(CC=2C=CC(O)=CC=2)C(=O)NC(CCC(N)=O)C(=O)NC(CC(C)C)C(=O)NC(CCC(O)=O)C(=O)NC(CC(N)=O)C(=O)NC(CC=2C=CC(O)=CC=2)C(=O)NC(CSSCC(NC(=O)C(C(C)C)NC(=O)C(CC(C)C)NC(=O)C(CC=2C=CC(O)=CC=2)NC(=O)C(CC(C)C)NC(=O)C(C)NC(=O)C(CCC(O)=O)NC(=O)C(C(C)C)NC(=O)C(CC(C)C)NC(=O)C(CC=2NC=NC=2)NC(=O)C(CO)NC(=O)CNC2=O)C(=O)NCC(=O)NC(CCC(O)=O)C(=O)NC(CCCNC(N)=N)C(=O)NCC(=O)NC(CC=3C=CC=CC=3)C(=O)NC(CC=3C=CC=CC=3)C(=O)NC(CC=3C=CC(O)=CC=3)C(=O)NC(C(C)O)C(=O)N3C(CCC3)C(=O)NC(CCCCN)C(=O)NC(C)C(O)=O)C(=O)NC(CC(N)=O)C(O)=O)=O)NC(=O)C(C(C)CC)NC(=O)C(CO)NC(=O)C(C(C)O)NC(=O)C1CSSCC2NC(=O)C(CC(C)C)NC(=O)C(NC(=O)C(CCC(N)=O)NC(=O)C(CC(N)=O)NC(=O)C(NC(=O)C(N)CC=1C=CC=CC=1)C(C)C)CC1=CN=CN1 NOESYZHRGYRDHS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 238000010255 intramuscular injection Methods 0.000 description 2
- 239000007927 intramuscular injection Substances 0.000 description 2
- 239000007928 intraperitoneal injection Substances 0.000 description 2
- 238000005342 ion exchange Methods 0.000 description 2
- 239000003456 ion exchange resin Substances 0.000 description 2
- 229920003303 ion-exchange polymer Polymers 0.000 description 2
- 238000009533 lab test Methods 0.000 description 2
- JVTAAEKCZFNVCJ-UHFFFAOYSA-N lactic acid Chemical compound CC(O)C(O)=O JVTAAEKCZFNVCJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 150000002617 leukotrienes Chemical class 0.000 description 2
- 230000008818 liver damage Effects 0.000 description 2
- 230000002132 lysosomal effect Effects 0.000 description 2
- 238000002844 melting Methods 0.000 description 2
- 230000008018 melting Effects 0.000 description 2
- 229940031348 multivalent vaccine Drugs 0.000 description 2
- 230000031990 negative regulation of inflammatory response Effects 0.000 description 2
- 239000008188 pellet Substances 0.000 description 2
- 239000012466 permeate Substances 0.000 description 2
- 238000005191 phase separation Methods 0.000 description 2
- 229920000642 polymer Polymers 0.000 description 2
- 239000000843 powder Substances 0.000 description 2
- 230000001681 protective effect Effects 0.000 description 2
- 230000008313 sensitization Effects 0.000 description 2
- QZAYGJVTTNCVMB-UHFFFAOYSA-N serotonin Chemical compound C1=C(O)C=C2C(CCN)=CNC2=C1 QZAYGJVTTNCVMB-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 210000002966 serum Anatomy 0.000 description 2
- 239000000243 solution Substances 0.000 description 2
- 241000894007 species Species 0.000 description 2
- 230000008961 swelling Effects 0.000 description 2
- 230000001960 triggered effect Effects 0.000 description 2
- 210000003462 vein Anatomy 0.000 description 2
- 239000011800 void material Substances 0.000 description 2
- 235000008939 whole milk Nutrition 0.000 description 2
- SFLSHLFXELFNJZ-QMMMGPOBSA-N (-)-norepinephrine Chemical compound NC[C@H](O)C1=CC=C(O)C(O)=C1 SFLSHLFXELFNJZ-QMMMGPOBSA-N 0.000 description 1
- BSYNRYMUTXBXSQ-FOQJRBATSA-N 59096-14-9 Chemical compound CC(=O)OC1=CC=CC=C1[14C](O)=O BSYNRYMUTXBXSQ-FOQJRBATSA-N 0.000 description 1
- 108010064733 Angiotensins Proteins 0.000 description 1
- 102000015427 Angiotensins Human genes 0.000 description 1
- 206010002556 Ankylosing Spondylitis Diseases 0.000 description 1
- 208000032116 Autoimmune Experimental Encephalomyelitis Diseases 0.000 description 1
- 206010004485 Berylliosis Diseases 0.000 description 1
- 108010017384 Blood Proteins Proteins 0.000 description 1
- 102000004506 Blood Proteins Human genes 0.000 description 1
- 208000031872 Body Remains Diseases 0.000 description 1
- 241000283725 Bos Species 0.000 description 1
- 101800004538 Bradykinin Proteins 0.000 description 1
- 238000009631 Broth culture Methods 0.000 description 1
- UXVMQQNJUSDDNG-UHFFFAOYSA-L Calcium chloride Chemical compound [Cl-].[Cl-].[Ca+2] UXVMQQNJUSDDNG-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 1
- 241000283707 Capra Species 0.000 description 1
- 229920002134 Carboxymethyl cellulose Polymers 0.000 description 1
- 208000023355 Chronic beryllium disease Diseases 0.000 description 1
- 206010009192 Circulatory collapse Diseases 0.000 description 1
- 102000008186 Collagen Human genes 0.000 description 1
- 108010035532 Collagen Proteins 0.000 description 1
- 206010010744 Conjunctivitis allergic Diseases 0.000 description 1
- 201000004624 Dermatitis Diseases 0.000 description 1
- 206010012441 Dermatitis bullous Diseases 0.000 description 1
- 206010012442 Dermatitis contact Diseases 0.000 description 1
- 206010012455 Dermatitis exfoliative Diseases 0.000 description 1
- 238000002965 ELISA Methods 0.000 description 1
- 208000009386 Experimental Arthritis Diseases 0.000 description 1
- 206010016334 Feeling hot Diseases 0.000 description 1
- 206010016654 Fibrosis Diseases 0.000 description 1
- 206010016807 Fluid retention Diseases 0.000 description 1
- 206010017788 Gastric haemorrhage Diseases 0.000 description 1
- 108010044091 Globulins Proteins 0.000 description 1
- 102000006395 Globulins Human genes 0.000 description 1
- 201000005569 Gout Diseases 0.000 description 1
- 206010018634 Gouty Arthritis Diseases 0.000 description 1
- QXZGBUJJYSLZLT-UHFFFAOYSA-N H-Arg-Pro-Pro-Gly-Phe-Ser-Pro-Phe-Arg-OH Natural products NC(N)=NCCCC(N)C(=O)N1CCCC1C(=O)N1C(C(=O)NCC(=O)NC(CC=2C=CC=CC=2)C(=O)NC(CO)C(=O)N2C(CCC2)C(=O)NC(CC=2C=CC=CC=2)C(=O)NC(CCCN=C(N)N)C(O)=O)CCC1 QXZGBUJJYSLZLT-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 208000031220 Hemophilia Diseases 0.000 description 1
- 208000009292 Hemophilia A Diseases 0.000 description 1
- 208000032843 Hemorrhage Diseases 0.000 description 1
- 208000007514 Herpes zoster Diseases 0.000 description 1
- 208000004454 Hyperalgesia Diseases 0.000 description 1
- 208000035154 Hyperesthesia Diseases 0.000 description 1
- 208000029422 Hypernatremia Diseases 0.000 description 1
- 206010020772 Hypertension Diseases 0.000 description 1
- 208000007646 Hypoprothrombinemias Diseases 0.000 description 1
- 235000003332 Ilex aquifolium Nutrition 0.000 description 1
- 241000209027 Ilex aquifolium Species 0.000 description 1
- DGAQECJNVWCQMB-PUAWFVPOSA-M Ilexoside XXIX Chemical compound C[C@@H]1CC[C@@]2(CC[C@@]3(C(=CC[C@H]4[C@]3(CC[C@@H]5[C@@]4(CC[C@@H](C5(C)C)OS(=O)(=O)[O-])C)C)[C@@H]2[C@]1(C)O)C)C(=O)O[C@H]6[C@@H]([C@H]([C@@H]([C@H](O6)CO)O)O)O.[Na+] DGAQECJNVWCQMB-PUAWFVPOSA-M 0.000 description 1
- 102000004877 Insulin Human genes 0.000 description 1
- 108090001061 Insulin Proteins 0.000 description 1
- 102100035792 Kininogen-1 Human genes 0.000 description 1
- 201000009324 Loeffler syndrome Diseases 0.000 description 1
- 241000124008 Mammalia Species 0.000 description 1
- 208000010315 Mastoiditis Diseases 0.000 description 1
- 208000003435 Optic Neuritis Diseases 0.000 description 1
- 241001494479 Pecora Species 0.000 description 1
- 241000721454 Pemphigus Species 0.000 description 1
- 208000008469 Peptic Ulcer Diseases 0.000 description 1
- 102000035195 Peptidases Human genes 0.000 description 1
- 108091005804 Peptidases Proteins 0.000 description 1
- 229920000954 Polyglycolide Polymers 0.000 description 1
- 229920001213 Polysorbate 20 Polymers 0.000 description 1
- ZLMJMSJWJFRBEC-UHFFFAOYSA-N Potassium Chemical compound [K] ZLMJMSJWJFRBEC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 201000001263 Psoriatic Arthritis Diseases 0.000 description 1
- 208000036824 Psoriatic arthropathy Diseases 0.000 description 1
- 208000028017 Psychotic disease Diseases 0.000 description 1
- 208000010476 Respiratory Paralysis Diseases 0.000 description 1
- 206010039094 Rhinitis perennial Diseases 0.000 description 1
- 206010042674 Swelling Diseases 0.000 description 1
- 206010042742 Sympathetic ophthalmia Diseases 0.000 description 1
- 208000000491 Tendinopathy Diseases 0.000 description 1
- 206010043255 Tendonitis Diseases 0.000 description 1
- 208000028070 Vascular pulmonary disease Diseases 0.000 description 1
- 201000000839 Vitamin K Deficiency Bleeding Diseases 0.000 description 1
- 206010047634 Vitamin K deficiency Diseases 0.000 description 1
- 206010047700 Vomiting Diseases 0.000 description 1
- 238000002441 X-ray diffraction Methods 0.000 description 1
- 238000002835 absorbance Methods 0.000 description 1
- 230000009102 absorption Effects 0.000 description 1
- 238000010521 absorption reaction Methods 0.000 description 1
- 210000004404 adrenal cortex Anatomy 0.000 description 1
- 230000004523 agglutinating effect Effects 0.000 description 1
- 150000001299 aldehydes Chemical class 0.000 description 1
- 208000002205 allergic conjunctivitis Diseases 0.000 description 1
- 238000004458 analytical method Methods 0.000 description 1
- 235000020244 animal milk Nutrition 0.000 description 1
- 239000000730 antalgic agent Substances 0.000 description 1
- 230000000890 antigenic effect Effects 0.000 description 1
- 229940125716 antipyretic agent Drugs 0.000 description 1
- 229940114079 arachidonic acid Drugs 0.000 description 1
- 235000021342 arachidonic acid Nutrition 0.000 description 1
- 210000002565 arteriole Anatomy 0.000 description 1
- 208000006673 asthma Diseases 0.000 description 1
- 208000024998 atopic conjunctivitis Diseases 0.000 description 1
- 239000000560 biocompatible material Substances 0.000 description 1
- 230000015572 biosynthetic process Effects 0.000 description 1
- 230000000740 bleeding effect Effects 0.000 description 1
- 210000004369 blood Anatomy 0.000 description 1
- 239000008280 blood Substances 0.000 description 1
- 230000017531 blood circulation Effects 0.000 description 1
- QXZGBUJJYSLZLT-FDISYFBBSA-N bradykinin Chemical compound NC(=N)NCCC[C@H](N)C(=O)N1CCC[C@H]1C(=O)N1[C@H](C(=O)NCC(=O)N[C@@H](CC=2C=CC=CC=2)C(=O)N[C@@H](CO)C(=O)N2[C@@H](CCC2)C(=O)N[C@@H](CC=2C=CC=CC=2)C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(O)=O)CCC1 QXZGBUJJYSLZLT-FDISYFBBSA-N 0.000 description 1
- 239000001110 calcium chloride Substances 0.000 description 1
- 235000011148 calcium chloride Nutrition 0.000 description 1
- 229910001628 calcium chloride Inorganic materials 0.000 description 1
- 229910052799 carbon Inorganic materials 0.000 description 1
- 125000004432 carbon atom Chemical group C* 0.000 description 1
- 125000003178 carboxy group Chemical group [H]OC(*)=O 0.000 description 1
- 239000001768 carboxy methyl cellulose Substances 0.000 description 1
- 235000010948 carboxy methyl cellulose Nutrition 0.000 description 1
- 239000008112 carboxymethyl-cellulose Substances 0.000 description 1
- 210000000845 cartilage Anatomy 0.000 description 1
- 229920002678 cellulose Polymers 0.000 description 1
- 238000005119 centrifugation Methods 0.000 description 1
- 238000012512 characterization method Methods 0.000 description 1
- 239000013043 chemical agent Substances 0.000 description 1
- 238000007705 chemical test Methods 0.000 description 1
- 230000003399 chemotactic effect Effects 0.000 description 1
- 230000035605 chemotaxis Effects 0.000 description 1
- 230000007882 cirrhosis Effects 0.000 description 1
- 208000019425 cirrhosis of liver Diseases 0.000 description 1
- CLOMYZFHNHFSIQ-UHFFFAOYSA-N clonixin Chemical compound CC1=C(Cl)C=CC=C1NC1=NC=CC=C1C(O)=O CLOMYZFHNHFSIQ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229960001209 clonixin Drugs 0.000 description 1
- 229920001436 collagen Polymers 0.000 description 1
- 238000004440 column chromatography Methods 0.000 description 1
- 208000010247 contact dermatitis Diseases 0.000 description 1
- 238000013270 controlled release Methods 0.000 description 1
- 238000007796 conventional method Methods 0.000 description 1
- 208000002925 dental caries Diseases 0.000 description 1
- 201000001981 dermatomyositis Diseases 0.000 description 1
- 206010012601 diabetes mellitus Diseases 0.000 description 1
- 238000011026 diafiltration Methods 0.000 description 1
- 230000010339 dilation Effects 0.000 description 1
- 238000010790 dilution Methods 0.000 description 1
- 239000012895 dilution Substances 0.000 description 1
- 238000009826 distribution Methods 0.000 description 1
- 231100000673 dose–response relationship Toxicity 0.000 description 1
- 229940079593 drug Drugs 0.000 description 1
- 238000005538 encapsulation Methods 0.000 description 1
- 230000029142 excretion Effects 0.000 description 1
- 208000004526 exfoliative dermatitis Diseases 0.000 description 1
- 238000002474 experimental method Methods 0.000 description 1
- 235000013861 fat-free Nutrition 0.000 description 1
- 150000004665 fatty acids Chemical class 0.000 description 1
- 239000012467 final product Substances 0.000 description 1
- 235000013305 food Nutrition 0.000 description 1
- 230000037406 food intake Effects 0.000 description 1
- 230000002538 fungal effect Effects 0.000 description 1
- 108010074605 gamma-Globulins Proteins 0.000 description 1
- 230000002496 gastric effect Effects 0.000 description 1
- 238000001641 gel filtration chromatography Methods 0.000 description 1
- 238000002523 gelfiltration Methods 0.000 description 1
- 150000002337 glycosamines Chemical class 0.000 description 1
- 208000007475 hemolytic anemia Diseases 0.000 description 1
- 230000023597 hemostasis Effects 0.000 description 1
- 244000144980 herd Species 0.000 description 1
- 239000013628 high molecular weight specie Substances 0.000 description 1
- 238000004128 high performance liquid chromatography Methods 0.000 description 1
- 229960001340 histamine Drugs 0.000 description 1
- 239000012510 hollow fiber Substances 0.000 description 1
- 229910052739 hydrogen Inorganic materials 0.000 description 1
- WGCNASOHLSPBMP-UHFFFAOYSA-N hydroxyacetaldehyde Natural products OCC=O WGCNASOHLSPBMP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 208000013403 hyperactivity Diseases 0.000 description 1
- 230000008105 immune reaction Effects 0.000 description 1
- 210000000987 immune system Anatomy 0.000 description 1
- 230000006058 immune tolerance Effects 0.000 description 1
- 230000002458 infectious effect Effects 0.000 description 1
- 208000030603 inherited susceptibility to asthma Diseases 0.000 description 1
- 230000002401 inhibitory effect Effects 0.000 description 1
- 230000005764 inhibitory process Effects 0.000 description 1
- 238000011081 inoculation Methods 0.000 description 1
- 239000002054 inoculum Substances 0.000 description 1
- 229940125396 insulin Drugs 0.000 description 1
- 238000010253 intravenous injection Methods 0.000 description 1
- 201000004614 iritis Diseases 0.000 description 1
- 206010023332 keratitis Diseases 0.000 description 1
- 150000002576 ketones Chemical class 0.000 description 1
- 235000014655 lactic acid Nutrition 0.000 description 1
- 239000004310 lactic acid Substances 0.000 description 1
- 210000004185 liver Anatomy 0.000 description 1
- 230000008338 local blood flow Effects 0.000 description 1
- 230000005923 long-lasting effect Effects 0.000 description 1
- 230000007774 longterm Effects 0.000 description 1
- 235000010335 lysozyme Nutrition 0.000 description 1
- 230000002101 lytic effect Effects 0.000 description 1
- 238000012423 maintenance Methods 0.000 description 1
- 238000001819 mass spectrum Methods 0.000 description 1
- 208000004396 mastitis Diseases 0.000 description 1
- 230000001404 mediated effect Effects 0.000 description 1
- 230000004060 metabolic process Effects 0.000 description 1
- 244000005700 microbiome Species 0.000 description 1
- 239000004005 microsphere Substances 0.000 description 1
- 230000003472 neutralizing effect Effects 0.000 description 1
- 239000000041 non-steroidal anti-inflammatory agent Substances 0.000 description 1
- 229940021182 non-steroidal anti-inflammatory drug Drugs 0.000 description 1
- 229960002748 norepinephrine Drugs 0.000 description 1
- SFLSHLFXELFNJZ-UHFFFAOYSA-N norepinephrine Natural products NCC(O)C1=CC=C(O)C(O)=C1 SFLSHLFXELFNJZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000001473 noxious effect Effects 0.000 description 1
- 229910052760 oxygen Inorganic materials 0.000 description 1
- 238000007911 parenteral administration Methods 0.000 description 1
- 230000001717 pathogenic effect Effects 0.000 description 1
- 230000000737 periodic effect Effects 0.000 description 1
- 230000035699 permeability Effects 0.000 description 1
- 210000001539 phagocyte Anatomy 0.000 description 1
- 239000002831 pharmacologic agent Substances 0.000 description 1
- 230000000144 pharmacologic effect Effects 0.000 description 1
- 238000000053 physical method Methods 0.000 description 1
- 239000002504 physiological saline solution Substances 0.000 description 1
- 229920000747 poly(lactic acid) Polymers 0.000 description 1
- 239000004633 polyglycolic acid Substances 0.000 description 1
- 239000004626 polylactic acid Substances 0.000 description 1
- 239000000256 polyoxyethylene sorbitan monolaurate Substances 0.000 description 1
- 235000010486 polyoxyethylene sorbitan monolaurate Nutrition 0.000 description 1
- 239000011591 potassium Substances 0.000 description 1
- 229910052700 potassium Inorganic materials 0.000 description 1
- 159000000001 potassium salts Chemical class 0.000 description 1
- 108090000765 processed proteins & peptides Proteins 0.000 description 1
- 230000000069 prophylactic effect Effects 0.000 description 1
- 235000018102 proteins Nutrition 0.000 description 1
- 102000004169 proteins and genes Human genes 0.000 description 1
- 108090000623 proteins and genes Proteins 0.000 description 1
- 229940024999 proteolytic enzymes for treatment of wounds and ulcers Drugs 0.000 description 1
- 230000005855 radiation Effects 0.000 description 1
- 239000006215 rectal suppository Substances 0.000 description 1
- 229940100618 rectal suppository Drugs 0.000 description 1
- 230000009467 reduction Effects 0.000 description 1
- 238000011160 research Methods 0.000 description 1
- 239000011347 resin Substances 0.000 description 1
- 229920005989 resin Polymers 0.000 description 1
- 230000029058 respiratory gaseous exchange Effects 0.000 description 1
- 230000000717 retained effect Effects 0.000 description 1
- 201000007529 rheumatic myocarditis Diseases 0.000 description 1
- 206010039073 rheumatoid arthritis Diseases 0.000 description 1
- 201000000306 sarcoidosis Diseases 0.000 description 1
- 230000001932 seasonal effect Effects 0.000 description 1
- 230000028327 secretion Effects 0.000 description 1
- 238000000926 separation method Methods 0.000 description 1
- 206010040400 serum sickness Diseases 0.000 description 1
- 206010040560 shock Diseases 0.000 description 1
- 230000000391 smoking effect Effects 0.000 description 1
- 239000011734 sodium Substances 0.000 description 1
- 229910052708 sodium Inorganic materials 0.000 description 1
- 238000004611 spectroscopical analysis Methods 0.000 description 1
- 238000012289 standard assay Methods 0.000 description 1
- 239000002294 steroidal antiinflammatory agent Substances 0.000 description 1
- 230000003637 steroidlike Effects 0.000 description 1
- 150000003431 steroids Chemical class 0.000 description 1
- 238000003860 storage Methods 0.000 description 1
- 208000023924 subacute bursitis Diseases 0.000 description 1
- 235000000346 sugar Nutrition 0.000 description 1
- 150000008163 sugars Chemical class 0.000 description 1
- 230000009885 systemic effect Effects 0.000 description 1
- 201000000596 systemic lupus erythematosus Diseases 0.000 description 1
- 201000004415 tendinitis Diseases 0.000 description 1
- 229940124597 therapeutic agent Drugs 0.000 description 1
- 231100000331 toxic Toxicity 0.000 description 1
- 231100000816 toxic dose Toxicity 0.000 description 1
- 230000002588 toxic effect Effects 0.000 description 1
- 230000002792 vascular Effects 0.000 description 1
- 208000019553 vascular disease Diseases 0.000 description 1
- 230000008728 vascular permeability Effects 0.000 description 1
- 239000005526 vasoconstrictor agent Substances 0.000 description 1
- 229940124549 vasodilator Drugs 0.000 description 1
- 239000003071 vasodilator agent Substances 0.000 description 1
- 230000001457 vasomotor Effects 0.000 description 1
- 239000003981 vehicle Substances 0.000 description 1
- 230000035899 viability Effects 0.000 description 1
- 230000003612 virological effect Effects 0.000 description 1
- 208000016794 vitamin K deficiency hemorrhagic disease Diseases 0.000 description 1
Classifications
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
- A61K31/70—Carbohydrates; Sugars; Derivatives thereof
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A23—FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
- A23C—DAIRY PRODUCTS, e.g. MILK, BUTTER OR CHEESE; MILK OR CHEESE SUBSTITUTES; MAKING THEREOF
- A23C9/00—Milk preparations; Milk powder or milk powder preparations
- A23C9/20—Dietetic milk products not covered by groups A23C9/12 - A23C9/18
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A24—TOBACCO; CIGARS; CIGARETTES; SIMULATED SMOKING DEVICES; SMOKERS' REQUISITES
- A24B—MANUFACTURE OR PREPARATION OF TOBACCO FOR SMOKING OR CHEWING; TOBACCO; SNUFF
- A24B15/00—Chemical features or treatment of tobacco; Tobacco substitutes, e.g. in liquid form
- A24B15/18—Treatment of tobacco products or tobacco substitutes
- A24B15/28—Treatment of tobacco products or tobacco substitutes by chemical substances
- A24B15/30—Treatment of tobacco products or tobacco substitutes by chemical substances by organic substances
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K35/00—Medicinal preparations containing materials or reaction products thereof with undetermined constitution
- A61K35/12—Materials from mammals; Compositions comprising non-specified tissues or cells; Compositions comprising non-embryonic stem cells; Genetically modified cells
- A61K35/20—Milk; Whey; Colostrum
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
- A61K39/395—Antibodies; Immunoglobulins; Immune serum, e.g. antilymphocytic serum
- A61K39/39508—Antibodies; Immunoglobulins; Immune serum, e.g. antilymphocytic serum from milk, i.e. lactoglobulins
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P1/00—Drugs for disorders of the alimentary tract or the digestive system
- A61P1/16—Drugs for disorders of the alimentary tract or the digestive system for liver or gallbladder disorders, e.g. hepatoprotective agents, cholagogues, litholytics
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P11/00—Drugs for disorders of the respiratory system
- A61P11/08—Bronchodilators
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P17/00—Drugs for dermatological disorders
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P27/00—Drugs for disorders of the senses
- A61P27/02—Ophthalmic agents
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P29/00—Non-central analgesic, antipyretic or antiinflammatory agents, e.g. antirheumatic agents; Non-steroidal antiinflammatory drugs [NSAID]
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P7/00—Drugs for disorders of the blood or the extracellular fluid
- A61P7/06—Antianaemics
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K2317/00—Immunoglobulins specific features
- C07K2317/10—Immunoglobulins specific features characterized by their source of isolation or production
- C07K2317/11—Immunoglobulins specific features characterized by their source of isolation or production isolated from eggs
Landscapes
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- Public Health (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Pharmacology & Pharmacy (AREA)
- Veterinary Medicine (AREA)
- Animal Behavior & Ethology (AREA)
- Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
- General Chemical & Material Sciences (AREA)
- Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- Epidemiology (AREA)
- Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
- Immunology (AREA)
- Zoology (AREA)
- Biotechnology (AREA)
- Cell Biology (AREA)
- Developmental Biology & Embryology (AREA)
- Virology (AREA)
- Biomedical Technology (AREA)
- Food Science & Technology (AREA)
- Toxicology (AREA)
- Polymers & Plastics (AREA)
- Microbiology (AREA)
- Mycology (AREA)
- Nutrition Science (AREA)
- Dermatology (AREA)
- Gastroenterology & Hepatology (AREA)
- Pulmonology (AREA)
- Molecular Biology (AREA)
- Ophthalmology & Optometry (AREA)
- Pain & Pain Management (AREA)
- Rheumatology (AREA)
- Diabetes (AREA)
- Hematology (AREA)
- Medicines Containing Material From Animals Or Micro-Organisms (AREA)
- Medicines That Contain Protein Lipid Enzymes And Other Medicines (AREA)
Description
Den foreliggende oppfinnelse vedrører en fremgangsmåte for å isolere en hovedsakelig ren anti-inflammatorisk faktor fra melk, som er kjennetegnet ved: (i) fett fjernes fra melken fra et melkeproduserende dyr for fremstilling av skummet melk, (ii) kasein fjernes fra den nevnte skummede melk for fremstilling av myse, (iii) fra mysen fjernes makromolekyler med molekylvekt over 10.000 dalton, idet fjernelse av de nevnte makromolekyler med molekylvekt over 10.000 dalton omfatter ultrafiltrering gjennom en molekylsiktmembran som tilbakeholder molekyler større enn 10.000 dalton, (iv) lavmolekylvektproduktet fra det foregående trinn fraksjoneres ved hjelp av anionbytterkromatografi, idet eluering av produktet fra anionbytterkolonnen utføres med en saltløsning ved nøytral pH, (v) den antiinflammatoriske faktor fra det foregående trinn renses ytterligere ved hjelp av molekylsiktkromatografi, og
(vi) den antiinflammatoriske faktor isoleres.
Disse og andre trekk fremgår av de etterfølgende patentkrav.
Den anti-inflammatoriske faktor (AF)som fremstilles i hovedsakelig ren form ved fremgangsmåten i samsvar med den foreliggende oppfinnelse kan anvendes ved behandling av inflammasjon.
Inflammasjon, som definert i Dorland's Medical Dictionary, er "en lokalisert beskyttende respons utløst av skade eller ødeleggelse av vev som tjener til å ødelegge, fortynne eller avgrense både det skadelige middel og det skadede vev". Den er karakterisert ved åpning av mikrovaskulaturen, lekkasje av blodelementene inn i vevhulrommene og vandring av leukocytter inn i det inflammerte vev. I makroskopisk henseende følges dette vanligvis av de vanlige kliniske tegn som erytem, ødem, ømhet (hyperalgesi) og smerte. Under denne kompliserte respons blir kjemiske mediatorer som histamin, 5-hydroksytryp-tamin, forskjellige kjemotaktiske faktorer, bradykinin, leukotriener og prostaglandiner frigitt lokalt. Fagocyttiske celler vandrer inn i området og cellulære lysosomale membraner kan brytes og frigir lytiske enzymer. Alle disse forhold kan bidra til den inflammatoriske respons.
Inflammasjon i pasienter med revmatoid artritt involverer antagelig kombinasjonen av et antigen (gammaglobulin) med et antistoff (revmatoid faktor) og komplement som bevirker den lokale frigivelse av kjemotaktiske faktorer som tiltrekker leukocytter. Leukocyttene fagocytoserer kompleksene av antigen-antistoff og komplement og frigir også de mange enzymer som er inneholdt i deres lysosymer. Disse lysosomale enzymer bevirker så skade på brusk og annet vev og dette fremmer inflammasjonsgraden ytterligere. Celle-medierte immunreaksjoner kan også være involvert. Prostaglandiner frigis også under denne prosess.
Prostaglandiner, som gjerne vil bli utviklet ved inflammasjon, bevirker erytem og øker lokal blodstrøm. To viktige vaskulære virkninger av prostaglandiner deles vanligvis ikke av andre mediatorer ved inflammasjon - nemlig en langvarig vasodilator-virkning og en evne til å motvirke vasokonstriktor-virkningene av substanser som f.eks. norepinefrin og angiotensin.
Et antall mediatorer ved inflammasjon øker vaskulær permeabilitet (lekkasje) i de post-kapillære og samlende små vener. I tillegg er vandring av leukocytter inn i et inflammert område et viktig aspekt ved den inflammatoriske prosess. Mens prostaglandiner ikke gjerne vil være direkte involvert i den kjemotaktiske respons, er et annet produkt av metabolismen av arachidonsyre, leukotrien, en meget potent kjemotaktisk substans.
Den anti-inflammatoriske respons er en hvilken som helst respons karakterisert ved inflammasjon som definert i det foregående. Det er vel kjent for de medisinsk sakkyndige at den inflammatoriske respons bevirker mye av det fysiske ubehag, dvs. smerte og tap av funksjon som er blitt assosiert med de forskjellige sykdommer og skader. Det er følgelig vanlig medisinsk praksis å tilføre farmakologiske midler som har til virkning å nøytralisere den inflammatoriske respons. Midler med disse egenskaper er klassifisert som anti-inflammatoriske medikamenter. Anti-inflammatoriske medikamenter anvendes for behandling av et bredt spektrum av forstyrrelser, og de samme medikamenter anvendes ofte for behandling av forskjellige sykdommer. Behandling med anti-inflammatoriske medikamenter er ikke for sykdommen, men oftest for symptomet, dvs. inflammasjonen.
De anti-inflammatoriske, analgetiske og anti-pyretiske medikamenter er en heterogen gruppe av forbindelser, ofte kjemisk
ikke-beslektet, men som ikke desto mindre deler visse terapeutiske virkninger og bivirkninger. Kortikosteroider representerer den mest anvendte klasse av forbindelser for behandling av den anti-inflammatoriske respons. Proteolytiske enzymer representerer en ytterligere klasse av forbindelser som påstås å ha anti-inflammatoriske virkninger. Hormoner som direkte eller indirekte bevirker at den adrenale kortex produserer og utskiller steroider representerer en ytterligere klasse av anti-inflammatoriske forbindelser. Et antall ikke-hormonale •anti-inflammatoriske midler er blitt beskrevet. Blant disse er de mest anvendte salicylatene. Acetyl-salicylsyre, eller aspirin, er det mest hyppig forskrevne analgetisk-antipyre-tiske og anti-inflammatoriske middel. Eksempler på steroidale og ikke-steroidale anti-inflammatoriske midler er oppført i "Physician's Desk Reference", 1987 (se s. 207 og 208 for en oversikt over slike preparater).
De naturlige og syntetiske kortikosteroid-preparater bevirker et antall alvorlige bivirkninger, inkluderende økning av blodtrykket, salt- og vannretensjon, og øket utskilling av kalium og kalsium. Videre kan kortikosteroider maskere tegn på infeksjon og øke spredning av smittsomme mikroorganismer. Disse hormoner ansees ikke som sikre for bruk i gravide kvinner, og langtids kortikosteroid-behandling er blitt forbundet med gastrisk hyperaktivitet og/eller mavesår. Behandling med disse forbindelser kan også forverre diabetes mellitus som nødvendiggjør høyere doser av insulin, og kan frembringe psykotiske forstyrrelser. Hormonale anti-inf lammatoriske midler som indirekte øker produksjonen av endogene kortikosteroider har samme potensial for skadelige bivirkninger.
De ikke-hormonale anti-inflammatoriske midler er syntetiske biokjemiske forbindelser som kan være giftige ved høye doser med et bredt spektrum av uønskede bivirkninger. F.eks. bidrar salicylater til de alvorlige syre-base likevekts-forstyrrelser som karakteriserer forgiftning av denne klasse av forbindelser. Salicylater stimulerer respirasjonen direkte og indirekte. Giftige doser av salicylater bevirker sentral respirasjonsparalyse såvel som sirkulasjonskollaps sekundært til vasomotorisk depresjon. Inntagning av salicylat kan resultere i epigastriske forstyrrelser, kvalme og oppkast. Salicylat-indusert gastrisk blødning er velkjent. Salicylater kan frembringe leverskade og føre til en forlengelse av levringstiden. Aspirin bør derfor unngås i pasienter med alvorlig leverskade, hypoprotrombinemi, vitamin K mangel eller hemofili, på grunn av at inhibering av blodplate-hemostase av salicylater kan resultere i blødning. Salicylat-forgiftning er vanlig og over 10.000 tilfeller av salicylat-forgiftning sees i USA hvert år, idet noen av dem er dødelige, og mange forekommer i barn. Se Goodman og Gilman's "The Pharmaco-logical Basis of Therapeutics", 7. utgave 1985. Til tross for det store antall av anti-inflammatoriske midler som nå er tilgjengelige foreligger det følgelig fremdeles et behov for et sikkert, effektivt anti-inflammatorisk produkt som er fritt for bivirkninger og skadelige reaksjoner.
Hvis et naturlig næringsmiddel-produkt, slik som et som er avledet fra f.eks. melk, kunne oppnås med anti-inflammatoriske virkninger, ville dette da være et lett administrerbart, lett tilgjengelig, sikkert terapeutisk preparat.
Det er tidligere kjent å fremstille melk med en rekke forskjellige terapeutiske virkninger. Således har f.eks. Beck åpenbaret en melk inneholdende antistoff til Streptococcus mutans som har en dental karies-inhiberende virkning (US patentskrift nr. 4.324.782). Melken oppnås ved immunisering av en ku med S. mutans antigen i to trinn og oppnåelse av den terapeutiske melk derfra.
Stolle et al. har åpenbaret en fremgangsmåte for behandling av vaskulære forstyrrelser eller pulmonale forstyrrelser assosiert med røking i et dyr som omfatter at dyret tilføres melk samlet fra en ku som opprettholdes i en hyperimmun tilstand (US patentskrift nr. 4.636.384). Beck har åpenbaret en fremgangsmåte for behandling av inflammasjon i et dyr omfattende tilførsel til dyret av en anti-inflammatorisk effektiv mengde av melk samlet fra en ku opprettholdt i en anti-inflammatorisk faktor-produserende tilstand (US patentskrift nr. 4.284.623). Heinbach har i US patentskrift nr. 3.128.230 beskrevet melk inneholdende globuliner av alfa-, beta- og gamma-komponenter ved inokulering av en ku med antigene blandinger. Peterson et al. (US patentskrift nr. 3.376.198), Holm (US publisert patentsøknad med løpenr. 628.987), Tunnah et al. (britisk patentskrift nr. 1.211.876) og Biokema S.A.
(britisk patentskrift nr. 1.442.283) har også beskrevet antistoff-holdig melk.
Ingen av de ovennevnte referanser åpenbarer imidlertid identiteten av den eller de komponenter i terapeutisk melk som frembringer de ønskede terapeutiske virkninger. I f.eks. Beck, US patentskrift nr. 4.284.623, består melkeproduktene anvendt som et terapeutisk middel av enten flytende helmelk, flytende fettfri "myse", eller helmelkpulvere. Selv om hvert av disse melkeprodukter har anti-inflammatoriske egenskaper er den eller de faktorer som faktisk tilveiebringer de terapeutiske fordeler ennå ikke blitt isolert eller identifisert.
Den foreliggende oppfinnelse er basert på oppfinnernes betraktninger' om at et isolert og renset anti-inflammatorisk melkeprodukt ville være meget nyttig for behandling av anti-inf lammatoriske forstyrrelser i et dyr.
Med tanke på dette har oppfinnerne isolert og delvis renset og karakterisert en anti-inflammatorisk faktor fra hyperimmun bovid melk, i det følgende benevnt melk-anti-inflammatorisk faktor (MAIF).
Ytterligere undersøkelser viste at dette melkeprodukt for-hindret eller opphevet de kliniske symptomer ved inflammasjon. I den foreliggende oppfinnelses sammenheng er det følgelig funnet at anti-inflammatorisk faktor, isolert fra melk fra melkeproduserende dyr som på forhånd er hyperimmunisert mot spesielle polivalente antigener, er effektiv mot inflammatoriske tilstander når den nevnte isolerte og rensede anti-inf lammatoriske faktor tilføres i en mengde og under forhold tilstrekkelig til å frembringe anti-inflammatoriske virkninger. Denne erkjennelse er særlig overraskende med henblikk på det faktum at en polyvalent antigen-vaksine i seg selv ikke inneholder MAIF. Isolasjonen av den aktive faktor fra melk fra hyperimmuniserte kuer førte til det uventede funn at MAIF forekommer i små mengder i melken fra vanlige kuer. Denne erkjennelse er blitt skjult på grunn av det faktum at konsentrasjonen av MAIF i normal kumelk er for lav til å meddele påviselige anti-inflammatoriske egenskaper til melken. MAIF i normal melk kan imidlertid konsentreres ved hjelp av isolerings-fremgangsmåten i henhold til den foreliggende oppfinnelse og kan deretter anvendes effektivt for å behandle inflammasj on.
En mer fullstendig anerkjennelse av oppfinnelsen og mange av de fordeler som følger av denne vil lettere oppnås når oppfinnelsen blir bedre belyst gjennom den etterfølgende detaljerte fremstilling når denne sees i forbindelse med de vedføyde tegninger, hvori: FIGUR 1 viser isolering av MAIF ved ionebytter-kromatografering på en kolonne av DEAE-cellulose, i trinn 2 av prosessen beskrevet i det etterfølgende. FIGUR 2 viser fraksjonering av MAIF-toppen (den andre topp) fra DEAE-cellulose-kromatografering (fig. 1) på en Sephadex G-10 molekylsiktkolonne, i trinn 3 av prosessen beskrevet i det etterfølgende.
Oppfinnelsen omfatter isolering og rensing av MAIF. Den nevnte MAIF kan tilføres til et dyr for å behandle anti-inflammatoriske forstyrrelser.
Med betegnelsen "melk-anti-inflammatorisk faktor (MAIF)" menes en faktor oppnådd fra enten hyperimmun melk eller vanlig kumelk. Med betegnelsen "hovedsakelig ren MAIF" menes for oppfinnelsens formål en anti-inflammatorisk faktor som eluerer som en enkel vesentlig symmetrisk topp ved HPLC-kromatografering, etter fjernelse av høymolekylvekt-substanser (>10.000 dalton) og isolering av de negativt ladete typer med lav molekylvekt ved hjelp av ionebytter-kromatografering. Både vanlig melk og hyperimmun melk kan behandles ved hjelp av metodene beskrevet heri for oppnåelse av MAIF.
Med betegnelsen "hyperimmun melk" menes for oppfinnelsens formål melk oppnådd fra melkeproduserende dyr opprettholdt i hyperimmun tilstand, idet detaljene ved hyperimmunisering er beskrevet mer detaljert i det følgende.
Med betegnelsen "skummet melk " menes for oppfinnelsens formål melk hvorfra fløte er blitt fjernet.
Med betegnelsen "myse" menes for oppfinnelsens formål, melk hvorfra fløte og kaseinholdig material er blitt fjernet.
Med betegnelsen "vanlig melk" menes for oppfinnelsens formål melk oppnådd fra melkeproduserende dyr ved hjelp av konvensjonelle midler og vanlig meieripraksis.
Med betegnelsen "melkeproduserende dyr" menes for oppfinnelsens formål, pattedyr som produserer melk i kommersielle mengder, foretrukket kuer, sauer og geiter, mer foretrukket melkekuer av slekten Bos (bovid), særlig de raser som gir de høyeste melkeutbytter, som f.eks. Holstein-rasen.
Med betegnelsen "bakterielt antigen" menes for oppfinnelsens formål et frysetørket preparat av varmedrepte bakterieceller.
Med betegnelsen "mikroinnkapslet form" menes for oppfinnelsens formål polymere mikropartikler som innkapsler ett eller flere bakterielle antigener for tilførsel til de melkeproduserende dyr.
Med betegnelsen "inflammasjon" menes for oppfinnelsens formål en lokalisert beskyttende respons utløst ved skade eller ødeleggelse av vev som tjener til å ødelegge, fortynne eller avgrense både det skadelige middel og det skadete vev, karakterisert i den akutte form av den klassiske sekvens med smerte, varmefølelse, rødhet, svelling og funksjonstap, og involverer histologisk en komplisert rekkefølge av begiven-heter, inkluderende dilatering av arteriolene, kapillarene og småvenene med økt permeabilitet og blodstrøm, utskilling av fluider inkluderende plasmaproteiner, og leukocytt-vandring inn i det inflammatoriske fokus.
Med betegnelsen "behandling" menes for oppfinnelsens formål at symptomene for forstyrrelsen og/eller den patogene opprinnelse av forstyrrelsen skal avhjelpes eller fullstendig fjernes.
Med betegnelsen "tilførsel" menes for oppfinnelsens formål en hvilken som helst metode for behandling av et individ med en substans, enten oralt, intranasalt, parenteralt (intravenøst, intramuskulært eller subkutant) eller rektalt.
Med betegnelsen "dyr" menes for oppfinnelsens formål en hvilken som helst levende skapning som er utsatt for inflammasjon, inkluderende mennesker, oppdrettsdyr, husdyr, eller dyr i zoologisk hage.
Eksempler på inflammatoriske tilstander som kan behandles med det isolerte og rensede melkeprodukt fremstilt ved fremgangsmåten i samsvar med oppfinnelsen er tilstander valgt fra gruppen bestående av akutt og subakutt bursitt, akutt ikke-spesifikk tendinitt, systemisk lupus erythematosus, systemisk dermatomyositt, akutt revmatisk karditt, pemphigus, bulløs dermatitt, herpetiform, alvorlig erytem, multiform eksfoliativ dermatitt, cirrhose, sesongmessig flerårig rhinitt, bronkial astma, ektopisk dermatitt, serum-syke, keratitt, oftalmisk iritt, diffus ureitt, choriditt, optikusneuritt, sympatisk oftalmi, symptomatisk sarkoidose, Loeffler's syndrom, beryl-liose, hemolytisk anemi, mastitt, mastoiditt, kontakt-dermatitt, allergisk konjuktivitt, psoriatisk artritt, ankylo-serende spondylitt, akutt giktisk artritt og herpes zoster. Videre kan det isolerte og rensede melkeprodukt anvendes for å behandle individer som er utsatt for potensielle inflammatoriske midler.
Oppfinnelsen er delvis basert på det funn at når et melkeproduserende dyr som f.eks. et bovid bringes til en spesifikk tilstand med hyperimmunisering, vil dyret produsere melk som har supranormale innhold av det meget gunstige MAIF, idet det nevnte MAIF ikke bare undertrykker symptomene på inflammasjon i mennesker og andre dyr, men er også et profylaktisk middel i forventning av nærvær av inflammatoriske midler i resipienten. Med betegnelsen "supranormale innhold" menes innhold ut over dem som finnes i melk fra ikke-hyperimmuniserte dyr. Induk-sjonen av immunsensitivitet alene er utilstrekkelig til å bevirke tilsynekomst av supranormale innhold av MAIF i melk, som vist ved det faktum at vanlig kumelk ikke inneholder disse supranormale innhold, selv om kuene er blitt sensitivisert mot forskjellige antigener under normal immunisering mot ku-sykdommer og under normal eksponering for omgivelsene. Det er bare i spesifikke hyperimmune tilstander at melken har de ønskede supranormale innhold.
Denne spesielle tilstand kan oppnås ved etablering av en initial immunisering, etterfulgt av periodiske boostere med tilstrekkelig høye doser av spesifikke antigener. Den foretrukne booster-dosering bør være lik eller større enn 50 % av den dose som er nødvendig for å etablere primær immunisering av bovidet. Der er således en terskel-booster-dosering under hvilken egenskapene ikke frembringes i melken, selv om kua er i det som normalt ville betegnes som en immuntilstand. For å oppnå den nødvendige hyperimmun-tilstand er det avgjørende at den hyperimmune melk testes etter en første serie av booster-tilførsler. Hvis de gunstige faktorer ikke er tilstede i melken, tilføres ytterligere boostere med høy dosering inntil egenskapene kommer tilsyne i melken.
Prosessen med å fremstille den hyperimmune melk inneholdende
supranormale nivåer av MAIF er omhandlet i US patentsøknad med løpenr. 069.139, inngitt 2. juli 1977 og i US patentsøknad med løpenr. 910.297, inngitt 17. september 1986, som er en direkte fortsettelse av US patentsøknad med løpenr. 576.001, inngitt 1. februar 19 83, som det her refereres til. Oppsummert omfatter en prosess for fremstilling av den hyperimmune melk inneholde supranormale nivåer av MAIF følgende trinn: (1) antigen-seleksjon; (2) primær immunisering av bovidet; (3) testing av serum for å bekrefte sensitivitetsinduksjon; (4) hyperimmunisering med boostere av passende dosering; og eventuelt (5) testing av melken for anti-inflammatoriske egenskaper; (6) samling av melken fra det hyperimmune bovid, og (7) behandling av melken for å isolere MAIF.
Trinn 1: Hvilke som helst antigener eller kombinasjoner av antigener kan anvendes. Antigenene kan være bakterielle, virale, av protozoa-typen, fungale, cellulære eller hvilke som helst andre substanser overfor hvilke immun-systemet i det melkeproduserende dyr vil respondere. Det kritiske punkt i dette trinn er at antigenet eller antigenene må være i stand til ikke bare å indusere immun- og hyperimmun-tilstander i det melkeproduserende dyr, men også være i stand til å etablere supranormale innhold av MAIF i melken. Et hvilket som helst antigen kan anvendes for fremstilling av supranormale innhold av MAIF. En foretrukket vaksine er en blanding av polyvalente bakterielle antigener, benevnt som vaksine Series 100, beskrevet detaljert i eksempel IA i det følgende.
Trinn 2: Antigenet eller antigenene kan tilføres ved en hvilken som helst metode som bevirker sensitivisering. Ved en metode tilføres en vaksine sammensatt av antigen avledet fra lxlO<6> til lxlO<20>, foretrukket IO<8> til 10<10>, mest foretrukket 2xl0<8>, varme-drepte bakterier ved intramuskulær injeksjon. Andre metoder som f.eks. intravenøs injeksjon, intraperitoneal injeksjon, rektal stikkpille, eller oral tilførsel kan anvendes .
Trinn 3: Det er nødvendig å bestemme hvorvidt det melkeproduserende dyr er blitt sensitivt overfor antigenet. Der er et antall metoder kjent for den fagkyndige på området immuno-logi for testing for sensitivitet (Methods in Immunology and Immunochemistry, William, CA. og Chase, W.M. , Academic Press, New York, vol 1-5 (1975)). Den foretrukne metode er å anvende en polyvalent vaksine omfattende multiple bakterietyper som antigenet og teste for nærvær av agglutinerende antistoffer i serum av dyret før og etter eksponering for vaksinen. Tilsynekomst av melke-antistoffer etter immunisering med vaksinen indikerer sensitivitet. Ved dette punkt er det mulig å fortsette til trinn 4.
Trinn 4: Dette trinn involverer induksjon og opprettholdelse av den hyperimmune tilstand i den sensitiviserte dyr. Dette oppnås ved gjentatt booster-tilførsel ved bestemte tidsinter-valler av den samme polyvalente vaksine som ble anvendt for å oppnå den primære sensitivisering. Et 2 ukers booster-inter-vall er optimalt for flerverdige bakterielle antigener. Det er imidlertid nødvendig å sikre at dyret ikke passerer fra en hyperimmun tilstand til en tilstand med immuntolerans overfor antigenet.
Ved en foretrukket utførelsesform kan hyperimmunisering av bovider oppnås ved hjelp av en enkel tilførsel av mikroinnkapslet vaksine, fremstilt som beskrevet detaljert i eksempel IB i det følgende. Fordelen med den styrte frigivelsesform for hyperimmuniseringen er at den konstante eksponering for antigenet sikrer at dyret forblir i den hyperimmune tilstand.
Som en alternativ utførelsesform er det også mulig å kombinere forskjellige immuniseringsprosedyrer, f.eks. samtidig til-førsel av mikroinnkapslet og flytende antigen, eller intramuskulær injeksjon for primær immunisering og booster-doser ved oral tilførsel eller parenteral tilførsel ved hjelp av mik-roinnkapslingsmidler. Mange forskjellige kombinasjoner av primær immunisering og hyperimmunisering er kjent for den fagkyndige på området.
Trinn 5: Det er nødvendig å teste melken for anti-inflammatoriske aktivitets-nivåer. Dette kan utføres ved hjelp av en hvilken som helst forsknings-teknikk som tester virkningene av enten den hyperimmune melk eller produkter avledet derfra på inflammasjon. Kjemikalie-indusert inflammasjon i rotte-labber er en standard assay for anti-inflammatoriske midler.
Trinn 6: Dette involverer samling og behandling av melken. Melken kan samles ved hjelp av konvensjonelle metoder. Behandling av melken for å isolere MAIF er beskrevet i det følgende.
Den enkleste prosess for isolering, rensing og testing av MAIF omfatter de følgende trinn: 1. avfetting av den hyperimmune melk for å fremstille skummet melk, 2. fjernelse av kasein fra den skummede melk for å fremstille myse, 3. fjernelse fra mysen av makromolekyler med molekylvekt over 10.000 dalton ved ultrafiltrering, 4. fraksjonering av produktet fra trinn 3 under anvendelse av en ionebytterharpiks-kolonne for å isolere en negativt ladet MAIF type med molekylvekt mindre enn 10.000 dalton, 5. separering av den negativt ladete type fra trinn 4 ved hjelp av molekylsiktkromatografering, og
6. biologisk assay av MAIF fra trinn 5,
7. den anti-inflammatoriske virkning av melkefaktoren testes på ødem bevirket ved injeksjon av en oppløsning av karragenin inn i labbene på rotter. Rottelabb-testen er den standard dyretest for anti-inflammatoriske medikamenter. Winter, C.A., Risley, G.A., Nuss, A.W., "Carrageenin-Induced Edema in the Hind Paw of the Rat as an Assay for Anti-inflammatory Drugs", Proe. Soc. Exper. Biol. Med. 3:544 (1967). En rekke andre tester kan anvendes. Wetnick, A.S. og Sabin, C, "The Effects of Clonixin and Bethaurethasone on Adjuvant-Induced Arthritis and Experimental Allergic Encephalomyelitis in Rats", Jap. J. Pharm. 22:741 (1972). Rottelabb-testen er imidlertid den enkleste og mest direkte test som er tilgjengelig og er blitt vist å være tilfredsstillende for alle anti-inflammatoriske medikamenter. Denne test er beskrevet detaljert i Beck, U.S. patentskrift nr. 4.284.623 som det her vises til i den ut-strekning at den beskriver rottelabb-testen. Kort sagt
involverer testen injeksjon av en liten mengde karragenin inn i fotputen av voksne hvite rotter. Dette er kjent å indusere en inflammatorisk respons. Den resulterende grad av svelling kan kvantifiseres. Prøver inneholdende et AF tilføres rotter på en passende måte, foretrukket ved intraperitoneal injeksjon, og blokkade eller forbedring av den inflammatoriske prosess kvantifiseres ved hjelp av enten volumetriske eller gravimetriske metoder.
Oppsummert kan man isolere den anti-inflammatoriske faktor fra hyperimmunisert melk ved å følge en fremgangsmåte med avfetting av melken, fjernelse av kasein, fjernelse av makromolekyler på mer enn 10.000 dalton, og fortsette med ione-byttings- og molekylsikt-kromatografering. Den biologiske aktivitet av passende preparater av anti-inflammatorisk faktor kan testes ved å foreta et dose-respons-forsøk med rotter som beskrevet heri.
Oppfinnelsen er delvis basert på det uventede funn at en MAIF kan isoleres og renses og er effektiv for behandling av en rekke forskjellige inflammatoriske prosesser i mennesker og dyr. Ved en foretrukket utførelsesform produseres MAIF av melk fra melkeproduserende dyr som er hyperimmunisert mot en bakteriell antigen-vaksine. Vaksinen anvendt for hyperimmunisering av dyrene inneholder ikke anti-inflammatorisk aktivitet. Det er derfor overraskende at behandlingen med en isolert og renset faktor, oppnådd fra dyr immunisert mot en blandet bakteriell antigen-vaksine, er effektiv ved avhjelping eller fjernelse av inflammatoriske prosesser.
Oppfinnelsen skal ytterligere beskrives med henvisning til spesifikke eksempler som er anordnet heri i illustrerende hensikt.
FREMSTILLING AV MELKETYPER
Eksempel IA
Fremstilling av S- 100 vaksine
En bakterie-kultur inneholdende det spektrum av bakterier som er vist i tabell 1 i det følgende som oppnådd fra American Type Culture Collection ble rekonstituert med 15 ml media og inkubert over natten ved 37°C. Etter at god vekst var oppnådd ble omtrent halvparten av bakterie-suspensjonen anvendt for inokulering av 1 1 dyrkingsvæske, idet inokulatet ble inkubert ved 37°C. Den resterende suspensjon ble overført til sterile glykolrør og lagret ved -2 0°C i opptil 6 mndr.
Etter at god vekst var synlig i kulturen ble bakterie-cellene høstet ved sentrifugering av suspensjonen i 20 min. for å fjerne media. Bakterie-pelleten som oppnådd ble resuspendert i steril saltløsning og bakterieprøven ble sentrifugert tre ganger for å vaske media fra cellene. Etter den tredje sterile saltløsningsvasking ble bakterie-pelleten oppnådd ved sentrifugering resuspendert i en liten mengde dobbelt-destillert vann.
Den media-fri bakterie-suspensjon ble varme-drept ved å anbringe suspensjonen i en glasskolbe i et 80°C vannbad over natten. Levedyktigheten av dyrkingsvæske-kulturen ble testet med en liten mengde varme-drepte bakterier. Dyrkingsvæske ble inokulert med varme-drepte bakterier, inkubert ved 3 7°C i 5 døgn og kontrollert daglig med hensikt på vekst, ettersom bakteriene må være drept for anvendelse i vaksinen.
De varme-drepte bakterier ble frysetørket til tørr tilstand. De tørre bakterier ble så blandet med steril saltoppløsning til en konsentrasjon på 2,2 x IO<8> bakterie-celler/ml saltløsn-ing (1,0 optisk densitet-avlesning ved 660 nm).
Kuer ble daglig tilført injeksjoner av 5 ml prøver av den polyvalente flytende vaksine. Antistoff (IgG) titer-innhold for det injiserte kveg ble bestemt periodisk ved å anvende en enzym-forbundet immunoassay for bovint antistoff mot det polyvalente antigen.
Eksempel IB
Varme-drepte bakterier ble fremstilt på den måte som er beskrevet i det foregående. Den polyvalente antigen-prøve (S-100) som var oppnådd ble mikroinnkapslet ved hjelp av en konvensjonell faseseparerings-prosess for å fremstille et polyvalent antigenholdig mikropartikkel-produkt. Generelt tildannes de antigenholdige formede matriks-materialer fra polymerer av bioforlikelig material, foretrukket bio-nedbrytbare eller bioeroderbare materialer, foretrukket polymelkesyre, polyglykolsyre, kopolymerer av melkesyre og glykolsyre, polykaptolakton, kopolyoksalater, proteiner som kollagen, fettsyreestere av glyserol, og celluloseestere. Disse polymerer er velkjent på området og er beskrevet f.eks. i US patentskrifter nr. 3.773.919, 3.887.699, 4.118.470 og 4.076.798 som det alle her vises til. Det anvendte polymere matriksmaterial var en bionedbrytbar laktid-glykolid-ko-polymer.
Varme-drepte bakterielle antigener innkapsles i disse matriks-materialer, foretrukket som mikrokuler med diameter mellom 1 og 500 (im, og foretrukket 10 - 250 |i.m. Innkapslingsprosessene er konvensjonelle og omfatter fasesepareringsmetoder, grense-flate-reaksjoner og fysikalske metoder. Mange kombinasjoner av matrikser og mange konsentrasjoner av forskjellige antigener kan anvendes for å tilveiebringe de optimale hastigheter for frigivelse av bakterielle antigener til vertskroppen fra mikropartiklene. Disse kombinasjoner kan bestemmes av de fagkyndige på området uten unødvendig eksperimentering.
Mikropartiklene i eksemplet hadde diametre mindre enn 2 50 (lm. Omtrent 750 mg av mikropartiklene inneholdende 22 % (16,5 mg) av polyvalent antigen ble så suspendert i omtrent 3 ml av en bærer (1 vekt% Tween 20 og 2 vekt% karboksymetylcellulose i vann).
En liten gruppe kveg ble selektert fra en større kvegbestand. Fem av dette tilfeldig valgte kveg ble selektert som kontrol-ler. Fire av kveget ble injisert intramuskulært med mikropartikler inneholdende polyvalent antigen. Mikropartikkel-prøver ble sterilisert med 0,2 mRad gammastråling. Antistoff (IgG) titer-nivåer ble bestemt periodevis fra prøver av kumelk oppnådd fra de inokulerte kuer, såvel som fra kontrol1-kuene.
Eksempel 2
Isolering av MAIF faktor fra hyperimmunisert melk.
Trinn 1: Melkefiltrat- fremstilling
2 0 1 frisk melk fra hyperimmuniserte kuer ble kjørt gjennom en fløteseparator (DeLaval Model 102) for å fjerne fettet.
De resulterende 16 1 skummet melk ble ultrafiltrert for å fjerne typer med høy molekylvekt (over 10.000 dalton) under anvendelse av en hulfiber-diafiltrering/konsentrator (Amicon DL-10L). Konsentratoren er utstyrt med to 10.000 dalton molekylvekt-fjerningspatroner (Amicon <H>5<P>10_43). Den skummede melk ble kjørt med pumpehastighet 80 på måleren og innløps-trykk og utløpstrykk på henhv. 207 og 172 kN/m<2>. 12 1 av filtratet (<10.000 dalton) som kom ut fra patronene med strømningshastighet 4 1 pr. time ble frosset eller fryse-tørket for lagring og for ytterligere rensing.
Trinn 2: Ionebytter- kromatografering
Melk-anti-inflammatorisk faktor, MAIF, i filtratet ble først isolert ved hjelp av en anionbytter-kromatograferingskolonne.
Ved denne prosedyre ble DEAE-Sepharose CL-6B gel (Pharmacia) anvendt for fylling av en 5x10 cm glasskolonne som var ekvilibrert med sterilt dobbelt-destillert vann, pH 7,0. 1 1 filtrat (<10.000) ble tilført til kolonnen og eluert med sterilt dobbelt-destillert vann, pH 7,0 med strømnings-hastighet 160 ml pr. time. 10 ml fraksjoner ble samlet og overvåket ved 2 80 nm i et LKB Uvicord 4700 absorpsjonsmeter med en optisk densitet skrevet ut på en tilkoblet opptager (Pharmacia REC-482).
Andre substanser enn MAIF med positive og nøytrale ladninger bindes ikke til DEAE-Sepharose-gelen. De elueres ved gjennom-falls-toppen (den første topp). MAIF som bærer en negativ ladning tilbakeholdes av gelen.
For å frigi MAIF blir kolonnen eluert med en trinnvis gradient under anvendelse av en steril fysiologisk saltløsning, pH 7,0. En typisk profil er vist i fig. 1. Bioassay av de enkelte fraksjoner viste at den andre topp inneholder MAIF. Fraksjoner omfattende den andre topp og dens skulder anvendes for ytterligere rensing. Utbytte-undersøkelser viser at 8,8 g tørket pulver ble oppnådd ved denne prosess.
Trinn 3: Gelfiltrerings- kromatografering
Den andre topp oppnådd fra trinn 2 inneholder MAIF og andre negativt ladete molekyler. Et ytterligere rensetrinn var derfor nødvendig. For å oppnå ytterligere rensing er det fordelaktig å anvende en gelfiltreringskolonne for å separere forskjellige komponenter på basis av molekylvekt.
Ved denne prosess ble Sephadex G-10 harpiks (Pharmacia) fylt inn i en 2,5x80 cm glasskolonne og ekvilibrert med sterilt dobbelt-destillert vann, pH 7,0. 2 g av den andre fraksjon fra trinn 2 ble oppløst på nytt i sterilt dobbelt-destillert vann og tilført til toppen av kolonnen. Kolonnen ble eluert med strømningshastighet 30 ml pr. time. Fraksjoner (3,3 ml) ble samlet og overvåket ved 254 nm og 280 nm (Pharmacia Duo Optical Unit) med optisk densitet skrevet ut på en tilkoblet opptager (Pharmacia REC-482).
Typisk var der 3 topper vist i elueringsprofilen som il-lustrert i fig. 2. Første og andre topp inneholdt MAIF-aktivitet.
Den første topp er et aggregat som dannes på G-10 kolonnen og som inneholder den aktive MAIF. Den andre topp inneholder den ikke-aggregerte form av MAIF. Både aggregatformen (topp 1) og den ikke-aggregerte form (topp 2) er biologisk aktiv ved rotte-bioassay.
KARAKTERISERING AV MELK- ANTI- INFLAMMATORISK FAKTOR
Molekylvekten av den ikke-aggregerte form av MAIF fremstilt ved metoden beskrevet i det foregående ble funnet å være mindre enn 10.000 dalton. Dette ble utledet fra det faktum at det første trinn ved isoleringen av MAIF fra myse var ved ultrafiltrering under anvendelse av en membran som ikke tillater passering av molekylvekt-typer >10.000 dalton.
MAIF har en negativ ladning. Dette ble bestemt ved å tilføre melk-ultrafiltrat til en DEAE cellulose-ionebytterkolonne. MAIF eluerte ikke fra kolonnen med vann. Endring av elue-ringsmedia til natriumklorid (0,9 % pH) bevirket eluering av flere topper (fig. 1). Nøytrale og positivt ladete typer fik-seres ikke til ionebytter-harpiksen og negativt ladete typer elueres ved økende saltkonsentrasjon. Når det <10.000 dalton molekylvekt-permeat ble tilført til DEAE-kolonnen eluerte nøy-trale salter og sukkere med vann (topp 1, fig. 1). Tre tydelige topper eluerte når bufferen ble endret til salt-løsning (topper 2-4). Den andre topp og dens skulder inneholdt MAIF biologisk aktivitet ved rotteassay. Det konkluderes derfor at MAIF har en negativ ladning.
En ytterligere kjemisk egenskap av MAIF er at den danner et aggregat under prosessen med å fjerne salt. Denne egenskap blir tydelig når <10.000 dalton molekylvekt-permeat ble ført over en Sephadex G-10 kolonne, ekvilibrert med dobbelt-destillert vann og eluert med vann med en pH 7 (fig. 2). Tre topper eluerte fra G-10 kolonnen. Den første topp eluerte med tomvolumet og antydet en molekylvekt lik eller over 10.000 dalton. Dette var uventet på grunn av at molekyler på mer enn 10.000 dalton tidligere var blitt fjernet fra denne prøve ved ultrafiltrering. Den andre topp eluerte i posisjonen for-ventet for den anti-inflammatoriske faktor. Både den første og andre topp fremviste anti-inflammatorisk biologisk aktivitet ved rottelabb-assay, mens den tredje topp manglet aktivitet. Det var overraskende å finne at både den første og andre topp hadde anti-inflammatorisk biologisk aktivitet. Materialet isolert fra den første topp fra G-10 kolonnen (trinn 3) ble frysetørket og tilført til en G-100 kolonne. En eneste topp ble eluert med tomvolumet og antydet en molekylvekt på 10.000 dalton eller mer. Trinn 3 G-10 kolonnen fjerner salt samtidig som den separerer de forskjellige molekylvekt-typer. Det konkluderes derfor at under passe-ringen over G-10 kolonnen og med den resulterende fjernelse av salt dannet den anti-inflammatoriske faktor et aggregat med høy molekylvekt. Aggregasjonsgraden varierte med saltkonsentrasjonen.
Aggregasjons-egenskapen antyder den mulighet at et bredt spektrum av forskjellige molekylvekt-typer kan dannes med anti-inflammatorisk biologisk aktivitet som skyldes nærvær av den anti-inflammatoriske faktor. Oppdagelsen av denne egenskap antyder muligheten av å fremstille melk-anti-inflammatoriske faktorer med et bredt spektrum av forskjellige biokjemiske egenskaper avhengig av aggregasjonsgraden av sluttproduktet. Preparater med lengre eller kortere biologiske halveringstider kan f.eks. fremstilles ved å anvende aggregater med større eller mindre molekylvekt, idet molekylvekt-fordelingen styres av saltkonsentrasjonen under behandlingen. Kolonne-kromatograferingsmetoden beskrevet heri resulterer i oppnåelse av typen med den minste molekylvekt og som har biologisk aktivitet (dvs. topp 2 fra trinn 3 G-10 kolonnen). Denne iakttagelse antyder også anvendelse av andre metoder for å danne aggregatene. F.eks. bevirker fortynning i vann at aggregasjon opptrer. Kjemiske midler som binder salter, særlig kalsium, kan bevirke dannelse av aggregatet. Etter å ha gjort denne oppdagelse vil andre metoder for å danne aggregatet og separere MAIF være nærliggende for de fagkyndige på området.
Eksempel 3
Biologisk aktivitets-assay
Den anti-inflammatoriske virkning av MAIF ble testet på ødem bevirket ved injeksjon av en oppløsning av karragenin inn i fotputene på rotter. En frysetørket prøve av MAIF ble oppløst i passende bærer og tilført forsøksrotter intraperitonealt. Karrageninet ble så tilført rottene i en mengde på 0,1 ml av en 1 % saltoppløsning i hver venstre fotpute. Fotputene ble målt før injeksjonene ble gitt og 2,5 timer etter injeksjonene, under anvendelse av en tykkelses-måler. Resultatene er vist i tabellene 2 og 3.
Den ikke-aggregerte form av MAIF (topp 2 fra G-10 kolonnen) fra kontrollmelk og hyperimmun melk bevirket reduksjon i inflammasjon av rottelabben ved doser mellom 1 mg og 0,25 mg (tabell 2). Både den hyperimmune melk og den vanlige melk fremviste aktivitet. Det hyperimmune material var imidlertid mer potent. Det ble fra dette konkludert at MAIF opptrer i større konsentrasjon i melken fra hyperimmune kuer.
Den andre topp fra DEAE-kolonnen fremviste aktivitet etter isolering fra hyperimmun melk eller vanlig melk. Aktiviteten er vesentlige større i den hyperimmune melk (tabell 3).
Den første topp fra G-10 kolonnen, som er den aggregerte form av MAIF, fremviste aktivitet ved rottelabb-testene (tabell 2). Den aggregerte form er imidlertid ikke så potent som den ikke-aggregerte form på lik vektbasis.
Det konkluderes fra disse undersøkelser at MAIF-faktoren forekommer naturlig i kumelk. Hyperimmunisering av kuene bevirker høyere konsentrasjon av MAIF i melken. MAIF er et lite, negativt ladet molekyl som kan separeres fra melken ved hjelp av en rekke forskjellige metoder. MAIF-faktoren kan danne aggregater med høy molekylvekt og som ikke forekommer naturlig i melk, men dannes under behandlingen.
KJEMISK ANALYSE AV ANTI- INFLAMMATORISK FAKTOR
Anti-inflammatorisk faktor-prøver ble analysert kjemisk. MAIF er ikke krystallinsk i struktur, som bestemt ved hjelp av røntgendiffraksjons-undersøkelser. MAIF-preparater ga ele-mentær-analyser i samsvar med karbohydrat-sammensetning. De forholdsvise mengder av C, H og 0 var i samsvar med et poly-mert eller oligomert material hvor noen karbinol-grupper var oksydert til karboksyl. Det lille overskudd av kalsium-ekvivalenter over klorid-ioner kan delvis skyldes karboksylatsalter. Resten kan være natrium- eller kalium-salter. Smelteegenskapene, eller snarere ikke-smelte-egenskapene, antydet imidlertid saltlignende sammensetninger og/eller sammensetninger med høyere molekylvekt. Materialet i den foreliggende renhetstilstand inneholder øyensynlig en variabel mengde salter av kalsium og klorid, sannsynligvis CaCl2.
Ikke noe preparat inneholdt en betydelig mengde nitrogen, noe som utelukker enhver peptid-komponent i sammensetningen. Likeledes kan fraværet av nitrogen utelukke nærvær av amino-sukkerarter og andre nitrogenholdige materialer som forskjellige komplekse lipider som hovedkomponent eller -komponenter.
Pyrolytiske massespektra viste tydelige spor av fettsyrer med 18 karbonatomer. Dette forhold, tatt sammen med spor av N og P, antyder nærvær av et komplekst lipid i faktoren.
Infrarød spektroskopi viser absorbsjoner i samsvar med karbinol- og karboksylat-funksjonaliteter. Ultrafiolett, synlig og fluorescerende spektroskopi åpenbarte ikke noen tydelig mengde kromoforer utover dem som er indikert ved infrarød spektroskopi. De kjemiske tester er i samsvar med et oligomert karbohydrat, hvori karbonylfunksjonen (aldehyd eller keton) er bundet til subenhet-leddene. Det oligomere karbohydrat inneholder også noe sidekjedeoksydasjon til karboksylat.
MAIF-preparatet er hovedsakelig, men ikke fullstendig, rent.
Claims (14)
1. Fremgangsmåte for å isolere en hovedsakelig ren anti-inflammatorisk faktor fra melk, karakterisert ved: (i) fett fjernes fra melken fra et melkeproduserende dyr for fremstilling av skummet melk, (ii) kasein fjernes fra den nevnte skummede melk for fremstilling av myse, (iii) fra mysen fjernes makromolekyler med molekylvekt over 10.000 dalton, idet fjernelse av de nevnte makromolekyler med molekylvekt over 10.000 dalton omfatter ultrafiltrering gjennom en molekylsiktmembran som tilbakeholder molekyler større enn 10.000 dalton, (iv) lavmolekylvektproduktet fra det foregående trinn fraksjoneres ved hjelp av anionbytterkromatografi, idet eluering av produktet fra anionbytterkolonnen utføres med en saltløsning ved nøytral pH, (v) den antiinflammatoriske faktor fra det foregående trinn renses ytterligere ved hjelp av molekylsiktkromatografi, og (vi) den antiinflammatoriske faktor isoleres.
2. Fremgangsmåte som angitt i krav 1, karakterisert ved at det melkeproduserende dyr er et bovint dyr.
3. Fremgangsmåte som angitt i krav 1, karakterisert ved at det melkeproduserende dyr er et ovint dyr.
4. Fremgangsmåte som angitt i krav 1, karakterisert ved at faktoren har en relativ molekylvekt under 10.000 dalton.
5. Fremgangsmåte som angitt i krav 1, karakterisert ved at det melkeproduserende dyr er i en hyperimmunisert tilstand.
6. Fremgangsmåte som angitt i krav 1, karakterisert ved at faktoren omfatter et oligomert karbohydrat.
7. Fremgangsmåte som angitt i krav 6, karakterisert ved at karbonyl-funksjonen i karbohydratet er bundet i subenhetsledd.
8. Fremgangsmåte som angitt i krav 6, karakterisert ved at karbohydratet inneholder sidekjedeoksydasjon til karboksylationer.
9. Fremgangsmåte som angitt i krav 6, karakterisert ved at karbohydratet er kom-pleksdannet til kalsiumioner.
10. Fremgangsmåte som angitt i krav 6, karakterisert ved at karbohydratet er kom-pleksdannet med alifatiske syrer.
11. Fremgangsmåte som angitt i krav 6, karakterisert ved at karbohydratet er assosiert med nitrogenholdige forbindelser.
12. Fremgangsmåte som angitt i krav 6, karakterisert ved at karbohydratet er assosiert med en fosforforbindelse.
13. Fremgangsmåte som angitt i krav 6, karakterisert ved at karbohydratet er assosiert med komplekst lipid.
14. Fremgangsmåte som angitt i krav 6, karakterisert ved at karbohydratet hovedsakelig er uten innhold av svovelforbindelse.
Applications Claiming Priority (2)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
US07/177,223 US4956349A (en) | 1983-10-27 | 1988-04-04 | Anti-inflammatory factor, method of isolation, and use |
PCT/US1989/001122 WO1989009602A1 (en) | 1988-04-04 | 1989-03-20 | An anti-inflammatory factor, method of isolation, and use |
Publications (4)
Publication Number | Publication Date |
---|---|
NO894784D0 NO894784D0 (no) | 1989-11-30 |
NO894784L NO894784L (no) | 1990-02-01 |
NO180568B true NO180568B (no) | 1997-02-03 |
NO180568C NO180568C (no) | 1997-05-14 |
Family
ID=22647713
Family Applications (1)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
NO894784A NO180568C (no) | 1988-04-04 | 1989-11-30 | Fremgangsmåte for å isolere en hovedsakelig ren anti-inflammatorisk faktor fra melk |
Country Status (20)
Country | Link |
---|---|
US (1) | US4956349A (no) |
EP (1) | EP0336694B1 (no) |
JP (1) | JP2834244B2 (no) |
KR (1) | KR0131014B1 (no) |
AT (1) | ATE124628T1 (no) |
AU (1) | AU620289B2 (no) |
CA (1) | CA1339724C (no) |
DE (1) | DE68923310T2 (no) |
DK (1) | DK175473B1 (no) |
ES (1) | ES2073434T3 (no) |
FI (1) | FI98269C (no) |
GR (1) | GR3017509T3 (no) |
HK (1) | HK1007511A1 (no) |
IE (1) | IE69395B1 (no) |
IL (1) | IL89741A (no) |
MX (1) | MX165968B (no) |
NO (1) | NO180568C (no) |
NZ (1) | NZ228587A (no) |
PH (1) | PH27076A (no) |
WO (1) | WO1989009602A1 (no) |
Families Citing this family (20)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
US5863561A (en) * | 1982-06-03 | 1999-01-26 | Stolle Research & Development Corporation | Immune suppressive product |
US5242691A (en) * | 1982-06-03 | 1993-09-07 | Stolle Research & Development Corporation | Anti-inflammatory factor, method of isolation, and use |
US5352462A (en) * | 1982-06-03 | 1994-10-04 | Stolle Research & Development Corporation | Anti-inflammatory factor, method of isolation, and use |
US5194255A (en) * | 1982-06-03 | 1993-03-16 | Stolle Research & Development Corporation | Antihypertensive hyperimmune milk, production, composition, and use |
US5932250A (en) * | 1982-06-03 | 1999-08-03 | Dcv, Inc. | Anti-cholesterolemic egg, vaccine and method for production, and use |
US5650175A (en) * | 1982-06-03 | 1997-07-22 | Stolle Research & Development Corporation | Anti-inflammatory factor, method of isolation, and use |
US4879110A (en) * | 1983-10-27 | 1989-11-07 | Stolle Research And Development Corporation | Antihypertensive hyperimmune milk, production, composition, and use |
US6054124A (en) * | 1982-06-03 | 2000-04-25 | Stolle Milk Biologics, Inc. | Immune suppressive product |
DE3829552A1 (de) * | 1988-08-31 | 1990-03-01 | Gauri Kailash Kumar | Milchbestandteile, verfahren zu ihrer herstellung und mittel, die diese bestandteile enthalten |
CA2086101C (en) * | 1990-07-05 | 2002-11-19 | Lee R. Beck | Immune suppressive product from milk |
US5219578A (en) * | 1991-02-25 | 1993-06-15 | Innovet, Inc. | Composition and method for immunostimulation in mammals |
US5453444A (en) * | 1992-10-13 | 1995-09-26 | Otsuka Pharmaceutical Co., Ltd. | Method to mitigate or eliminate weight loss |
US5980953A (en) * | 1994-10-03 | 1999-11-09 | Stolle Milk Biologics, Inc. | Anti-inflammatory factor, method of isolation, and use |
EP0743060B1 (en) * | 1995-04-28 | 2002-11-13 | Sara Lee/DE N.V. | Use of dental-care products comprising bovine colostrum |
FI955389A0 (fi) * | 1995-11-09 | 1995-11-09 | Antti Sakari Aaltonen | Tandskyddande profylaktisk preparat och administreringsmedlen emot mellanoerpatogener |
AUPP494798A0 (en) | 1998-07-29 | 1998-08-20 | Pacific Biolink Pty Limited | Protective protein formulation |
US6468534B1 (en) * | 2000-09-21 | 2002-10-22 | 4Life Research, Lc | Methods for obtaining transfer factor from avian sources, compositions including avian-generated transfer factor, and methods of use |
US6770280B1 (en) | 2001-11-15 | 2004-08-03 | Humanetics Corporation | Treatment of menorrhagia, hypermenorrhea, dysmenorrhea and menstrual migraines by the administration of an antibacterial milk product |
US20080026983A1 (en) * | 2006-07-28 | 2008-01-31 | Gardiner Paul T | Compositions and methods for alleviating joint pain and improving joint flexibility |
TWI454268B (zh) * | 2008-07-04 | 2014-10-01 | Stolle Internat Co Ltd | 乳汁萃取物做為降低過敏反應的用途 |
Family Cites Families (15)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
US3128230A (en) * | 1961-04-04 | 1964-04-07 | Sunbury Milk Products Co | Milk having antibodies therein and process for producing same |
US3376198A (en) * | 1965-07-21 | 1968-04-02 | Collins Products Inc | Method of producing antibodies in milk |
GB1211876A (en) * | 1967-11-23 | 1970-11-11 | Twyford Lab Ltd | Improvements in and relating to prophylactic and therapeutic preparations |
NL7413874A (nl) * | 1973-10-26 | 1975-04-29 | Nat Res Dev | Werkwijze voor het bereiden van stoffen tegen ontstekingen. |
CH590064A5 (no) * | 1973-11-28 | 1977-07-29 | Biokema Sa | |
US4324782A (en) * | 1974-01-28 | 1982-04-13 | Beck Lee R | Dental caries inhibiting product of immunized cow's milk having antibodies specific to killed Streptococcus mutans cells |
JPS6043333B2 (ja) * | 1976-08-20 | 1985-09-27 | 三共株式会社 | 抗炎症活性物質の製法 |
US4732757A (en) * | 1978-02-06 | 1988-03-22 | Stolle Research And Development Corporation | Prevention and treatment of rheumatoid arthritis |
US4284623A (en) * | 1979-11-09 | 1981-08-18 | Beck Lee R | Method of treating inflammation using bovine milk |
US4402938A (en) * | 1980-05-29 | 1983-09-06 | Impro Products, Inc. | Food and the method of extracting the same from colostrum and milk |
ATE16349T1 (de) * | 1981-04-28 | 1985-11-15 | Stolle Res & Dev | Verfahren zur herstellung einer entzuendungshemmenden rindermilch. |
JP2561234B2 (ja) * | 1981-05-12 | 1996-12-04 | スト−ル・リサ−チ・アンド・デイベロップメント・コ−ポレ−ション | 抗炎症剤 |
US4879110A (en) * | 1983-10-27 | 1989-11-07 | Stolle Research And Development Corporation | Antihypertensive hyperimmune milk, production, composition, and use |
US4636384A (en) * | 1982-06-03 | 1987-01-13 | Stolle Research & Development Corporation | Method for treating disorders of the vascular and pulmonary systems |
EP0300102B1 (en) * | 1987-07-21 | 1993-03-24 | The Stolle Research And Development Corporation | Improved method of obtaining immune regulatory factors by mammal immunization |
-
1988
- 1988-04-04 US US07/177,223 patent/US4956349A/en not_active Expired - Lifetime
-
1989
- 1989-03-20 JP JP1503683A patent/JP2834244B2/ja not_active Expired - Lifetime
- 1989-03-20 KR KR1019890702252A patent/KR0131014B1/ko not_active IP Right Cessation
- 1989-03-20 WO PCT/US1989/001122 patent/WO1989009602A1/en active IP Right Grant
- 1989-03-20 AU AU33437/89A patent/AU620289B2/en not_active Expired
- 1989-03-24 IL IL8974189A patent/IL89741A/en not_active IP Right Cessation
- 1989-03-28 CA CA000594817A patent/CA1339724C/en not_active Expired - Lifetime
- 1989-04-03 NZ NZ228587A patent/NZ228587A/en active IP Right Revival
- 1989-04-03 IE IE105689A patent/IE69395B1/en not_active IP Right Cessation
- 1989-04-04 AT AT89303294T patent/ATE124628T1/de not_active IP Right Cessation
- 1989-04-04 EP EP89303294A patent/EP0336694B1/en not_active Expired - Lifetime
- 1989-04-04 MX MX015523A patent/MX165968B/es unknown
- 1989-04-04 ES ES89303294T patent/ES2073434T3/es not_active Expired - Lifetime
- 1989-04-04 PH PH38435A patent/PH27076A/en unknown
- 1989-04-04 DE DE68923310T patent/DE68923310T2/de not_active Expired - Lifetime
- 1989-11-30 NO NO894784A patent/NO180568C/no unknown
- 1989-12-01 FI FI895751A patent/FI98269C/fi not_active IP Right Cessation
- 1989-12-04 DK DK198906103A patent/DK175473B1/da not_active IP Right Cessation
-
1995
- 1995-09-21 GR GR950402626T patent/GR3017509T3/el unknown
-
1998
- 1998-06-25 HK HK98106823A patent/HK1007511A1/xx not_active IP Right Cessation
Also Published As
Publication number | Publication date |
---|---|
KR900700111A (ko) | 1990-08-11 |
FI895751A0 (fi) | 1989-12-01 |
ATE124628T1 (de) | 1995-07-15 |
IL89741A0 (en) | 1989-09-28 |
IE69395B1 (en) | 1996-09-18 |
JPH02503802A (ja) | 1990-11-08 |
HK1007511A1 (en) | 1999-04-16 |
MX165968B (es) | 1992-12-14 |
DK175473B1 (da) | 2004-11-08 |
DK610389D0 (da) | 1989-12-04 |
KR0131014B1 (ko) | 1998-04-17 |
PH27076A (en) | 1993-02-01 |
ES2073434T3 (es) | 1995-08-16 |
EP0336694B1 (en) | 1995-07-05 |
AU3343789A (en) | 1989-11-03 |
AU620289B2 (en) | 1992-02-13 |
JP2834244B2 (ja) | 1998-12-09 |
DK610389A (da) | 1989-12-04 |
IL89741A (en) | 1994-07-31 |
FI98269C (fi) | 1997-05-26 |
FI98269B (fi) | 1997-02-14 |
NO180568C (no) | 1997-05-14 |
GR3017509T3 (en) | 1995-12-31 |
EP0336694A3 (en) | 1990-05-16 |
DE68923310D1 (de) | 1995-08-10 |
CA1339724C (en) | 1998-03-17 |
NZ228587A (en) | 1991-12-23 |
NO894784D0 (no) | 1989-11-30 |
WO1989009602A1 (en) | 1989-10-19 |
IE891056L (en) | 1989-10-04 |
EP0336694A2 (en) | 1989-10-11 |
NO894784L (no) | 1990-02-01 |
DE68923310T2 (de) | 1996-01-11 |
US4956349A (en) | 1990-09-11 |
Similar Documents
Publication | Publication Date | Title |
---|---|---|
NO180568B (no) | Fremgangsmåte for å isolere en hovedsakelig ren anti-inflammatorisk faktor fra melk | |
JP2008074861A (ja) | 抗炎症因子、単離法および使用 | |
CA2090011C (en) | Anti-inflammatory factor, method of isolation, and use | |
US4879110A (en) | Antihypertensive hyperimmune milk, production, composition, and use | |
EP0787007B1 (en) | Anti-inflammatory factor, method of isolation, and use | |
US5980953A (en) | Anti-inflammatory factor, method of isolation, and use | |
JP2561234B2 (ja) | 抗炎症剤 | |
NZ505177A (en) | Use of milk anti-Inflammatory factor (MAIF) to reduce tissue damage from inflammation |