NO176022B - Analogifremgangsmåte til fremstilling av små peptider som hindrer binding til T4-reseptorer og virker som immunorganer - Google Patents
Analogifremgangsmåte til fremstilling av små peptider som hindrer binding til T4-reseptorer og virker som immunorganer Download PDFInfo
- Publication number
- NO176022B NO176022B NO880479A NO880479A NO176022B NO 176022 B NO176022 B NO 176022B NO 880479 A NO880479 A NO 880479A NO 880479 A NO880479 A NO 880479A NO 176022 B NO176022 B NO 176022B
- Authority
- NO
- Norway
- Prior art keywords
- thr
- peptide
- ser
- absent
- terminal residue
- Prior art date
Links
- 108090000765 processed proteins & peptides Proteins 0.000 title claims description 57
- 238000000034 method Methods 0.000 title claims description 21
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 title claims description 5
- 102000004196 processed proteins & peptides Human genes 0.000 title description 26
- 230000027455 binding Effects 0.000 title description 22
- 210000000056 organ Anatomy 0.000 title 1
- 102000004217 thyroid hormone receptors Human genes 0.000 title 1
- 108090000721 thyroid hormone receptors Proteins 0.000 title 1
- 150000001413 amino acids Chemical class 0.000 claims description 13
- 229920005989 resin Polymers 0.000 claims description 9
- 239000011347 resin Substances 0.000 claims description 9
- 125000003178 carboxy group Chemical group [H]OC(*)=O 0.000 claims description 8
- 125000000729 N-terminal amino-acid group Chemical group 0.000 claims description 7
- -1 Thr amide Chemical class 0.000 claims description 6
- 125000003275 alpha amino acid group Chemical group 0.000 claims description 5
- QNAYBMKLOCPYGJ-UWTATZPHSA-N D-alanine Chemical compound C[C@@H](N)C(O)=O QNAYBMKLOCPYGJ-UWTATZPHSA-N 0.000 claims description 4
- 239000003153 chemical reaction reagent Substances 0.000 claims description 3
- 150000003839 salts Chemical class 0.000 claims description 3
- DEFJQIDDEAULHB-IMJSIDKUSA-N L-alanyl-L-alanine Chemical compound C[C@H](N)C(=O)N[C@@H](C)C(O)=O DEFJQIDDEAULHB-IMJSIDKUSA-N 0.000 claims description 2
- 125000003277 amino group Chemical group 0.000 claims description 2
- 239000011324 bead Substances 0.000 claims 2
- QOSSAOTZNIDXMA-UHFFFAOYSA-N Dicylcohexylcarbodiimide Chemical compound C1CCCCC1N=C=NC1CCCCC1 QOSSAOTZNIDXMA-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims 1
- 239000004793 Polystyrene Substances 0.000 claims 1
- 229920002223 polystyrene Polymers 0.000 claims 1
- 238000005406 washing Methods 0.000 claims 1
- 241000725303 Human immunodeficiency virus Species 0.000 description 30
- 210000004556 brain Anatomy 0.000 description 30
- 108020003175 receptors Proteins 0.000 description 25
- 102000005962 receptors Human genes 0.000 description 25
- 239000012528 membrane Substances 0.000 description 22
- 210000004027 cell Anatomy 0.000 description 21
- 241000282414 Homo sapiens Species 0.000 description 16
- 210000001744 T-lymphocyte Anatomy 0.000 description 16
- 239000000427 antigen Substances 0.000 description 15
- 108091007433 antigens Proteins 0.000 description 15
- 102000036639 antigens Human genes 0.000 description 15
- 235000001014 amino acid Nutrition 0.000 description 14
- 108010071384 Peptide T Proteins 0.000 description 13
- 241000700159 Rattus Species 0.000 description 13
- 208000030507 AIDS Diseases 0.000 description 12
- AYFVYJQAPQTCCC-GBXIJSLDSA-N L-threonine Chemical compound C[C@@H](O)[C@H](N)C(O)=O AYFVYJQAPQTCCC-GBXIJSLDSA-N 0.000 description 12
- 241000282693 Cercopithecidae Species 0.000 description 11
- MTCFGRXMJLQNBG-REOHCLBHSA-N (2S)-2-Amino-3-hydroxypropansäure Chemical compound OC[C@H](N)C(O)=O MTCFGRXMJLQNBG-REOHCLBHSA-N 0.000 description 10
- 241000700605 Viruses Species 0.000 description 9
- 238000011534 incubation Methods 0.000 description 8
- 108090000623 proteins and genes Proteins 0.000 description 8
- 239000000203 mixture Substances 0.000 description 7
- 235000018102 proteins Nutrition 0.000 description 7
- 102000004169 proteins and genes Human genes 0.000 description 7
- 108090000288 Glycoproteins Proteins 0.000 description 6
- 102000003886 Glycoproteins Human genes 0.000 description 6
- 238000002474 experimental method Methods 0.000 description 6
- 210000000987 immune system Anatomy 0.000 description 6
- 150000001875 compounds Chemical class 0.000 description 5
- 238000001114 immunoprecipitation Methods 0.000 description 5
- 241000282412 Homo Species 0.000 description 4
- AYFVYJQAPQTCCC-UHFFFAOYSA-N Threonine Natural products CC(O)C(N)C(O)=O AYFVYJQAPQTCCC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 239000004473 Threonine Substances 0.000 description 4
- 210000001320 hippocampus Anatomy 0.000 description 4
- 208000015181 infectious disease Diseases 0.000 description 4
- 239000007790 solid phase Substances 0.000 description 4
- 239000000126 substance Substances 0.000 description 4
- 238000012360 testing method Methods 0.000 description 4
- 229960005486 vaccine Drugs 0.000 description 4
- 230000003612 virological effect Effects 0.000 description 4
- 241000283707 Capra Species 0.000 description 3
- 108090000189 Neuropeptides Proteins 0.000 description 3
- 241000282695 Saimiri Species 0.000 description 3
- 230000000903 blocking effect Effects 0.000 description 3
- 210000004369 blood Anatomy 0.000 description 3
- 239000008280 blood Substances 0.000 description 3
- 210000004899 c-terminal region Anatomy 0.000 description 3
- 239000002775 capsule Substances 0.000 description 3
- 210000003169 central nervous system Anatomy 0.000 description 3
- 210000003710 cerebral cortex Anatomy 0.000 description 3
- LOKCTEFSRHRXRJ-UHFFFAOYSA-I dipotassium trisodium dihydrogen phosphate hydrogen phosphate dichloride Chemical compound P(=O)(O)(O)[O-].[K+].P(=O)(O)([O-])[O-].[Na+].[Na+].[Cl-].[K+].[Cl-].[Na+] LOKCTEFSRHRXRJ-UHFFFAOYSA-I 0.000 description 3
- 238000009826 distribution Methods 0.000 description 3
- 238000002347 injection Methods 0.000 description 3
- 239000007924 injection Substances 0.000 description 3
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 description 3
- 239000000463 material Substances 0.000 description 3
- 239000002953 phosphate buffered saline Substances 0.000 description 3
- 125000002924 primary amino group Chemical group [H]N([H])* 0.000 description 3
- 238000006467 substitution reaction Methods 0.000 description 3
- 239000000758 substrate Substances 0.000 description 3
- 230000009385 viral infection Effects 0.000 description 3
- JKMHFZQWWAIEOD-UHFFFAOYSA-N 2-[4-(2-hydroxyethyl)piperazin-1-yl]ethanesulfonic acid Chemical compound OCC[NH+]1CCN(CCS([O-])(=O)=O)CC1 JKMHFZQWWAIEOD-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 238000002965 ELISA Methods 0.000 description 2
- 102000004190 Enzymes Human genes 0.000 description 2
- 108090000790 Enzymes Proteins 0.000 description 2
- KRHYYFGTRYWZRS-UHFFFAOYSA-N Fluorane Chemical compound F KRHYYFGTRYWZRS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- DHMQDGOQFOQNFH-UHFFFAOYSA-N Glycine Chemical compound NCC(O)=O DHMQDGOQFOQNFH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 102100034349 Integrase Human genes 0.000 description 2
- 102000000588 Interleukin-2 Human genes 0.000 description 2
- 108010002350 Interleukin-2 Proteins 0.000 description 2
- ODKSFYDXXFIFQN-BYPYZUCNSA-N L-arginine Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CCCN=C(N)N ODKSFYDXXFIFQN-BYPYZUCNSA-N 0.000 description 2
- 102000003797 Neuropeptides Human genes 0.000 description 2
- MTCFGRXMJLQNBG-UHFFFAOYSA-N Serine Natural products OCC(N)C(O)=O MTCFGRXMJLQNBG-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 210000000662 T-lymphocyte subset Anatomy 0.000 description 2
- 208000036142 Viral infection Diseases 0.000 description 2
- 239000004480 active ingredient Substances 0.000 description 2
- 125000003295 alanine group Chemical group N[C@@H](C)C(=O)* 0.000 description 2
- 238000004458 analytical method Methods 0.000 description 2
- 238000003556 assay Methods 0.000 description 2
- 238000003149 assay kit Methods 0.000 description 2
- 230000015572 biosynthetic process Effects 0.000 description 2
- 239000000872 buffer Substances 0.000 description 2
- 239000000969 carrier Substances 0.000 description 2
- 210000000170 cell membrane Anatomy 0.000 description 2
- 239000003795 chemical substances by application Substances 0.000 description 2
- 230000001054 cortical effect Effects 0.000 description 2
- 238000004132 cross linking Methods 0.000 description 2
- 238000000326 densiometry Methods 0.000 description 2
- 238000011161 development Methods 0.000 description 2
- 239000003814 drug Substances 0.000 description 2
- 230000000694 effects Effects 0.000 description 2
- 239000000839 emulsion Substances 0.000 description 2
- 229940088598 enzyme Drugs 0.000 description 2
- 150000002148 esters Chemical class 0.000 description 2
- 230000006870 function Effects 0.000 description 2
- 230000000971 hippocampal effect Effects 0.000 description 2
- 230000002163 immunogen Effects 0.000 description 2
- 239000012133 immunoprecipitate Substances 0.000 description 2
- 238000001802 infusion Methods 0.000 description 2
- 238000011835 investigation Methods 0.000 description 2
- 210000005171 mammalian brain Anatomy 0.000 description 2
- 230000001404 mediated effect Effects 0.000 description 2
- BQJCRHHNABKAKU-KBQPJGBKSA-N morphine Chemical compound O([C@H]1[C@H](C=C[C@H]23)O)C4=C5[C@@]12CCN(C)[C@@H]3CC5=CC=C4O BQJCRHHNABKAKU-KBQPJGBKSA-N 0.000 description 2
- 230000001537 neural effect Effects 0.000 description 2
- 210000004179 neuropil Anatomy 0.000 description 2
- 238000010647 peptide synthesis reaction Methods 0.000 description 2
- 239000000546 pharmaceutical excipient Substances 0.000 description 2
- 239000003755 preservative agent Substances 0.000 description 2
- 238000000159 protein binding assay Methods 0.000 description 2
- 239000007787 solid Substances 0.000 description 2
- 230000009870 specific binding Effects 0.000 description 2
- 208000024891 symptom Diseases 0.000 description 2
- 238000003786 synthesis reaction Methods 0.000 description 2
- OUYCCCASQSFEME-UHFFFAOYSA-N tyrosine Natural products OC(=O)C(N)CC1=CC=C(O)C=C1 OUYCCCASQSFEME-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 239000003981 vehicle Substances 0.000 description 2
- 238000012800 visualization Methods 0.000 description 2
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Substances O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- YFGBQHOOROIVKG-BHDDXSALSA-N (2R)-2-[[(2R)-2-[[2-[[2-[[(2S)-2-amino-3-(4-hydroxyphenyl)propanoyl]amino]acetyl]amino]acetyl]amino]-3-phenylpropanoyl]amino]-4-methylsulfanylbutanoic acid Chemical compound C([C@H](C(=O)N[C@H](CCSC)C(O)=O)NC(=O)CNC(=O)CNC(=O)[C@@H](N)CC=1C=CC(O)=CC=1)C1=CC=CC=C1 YFGBQHOOROIVKG-BHDDXSALSA-N 0.000 description 1
- QDZOEBFLNHCSSF-PFFBOGFISA-N (2S)-2-[[(2R)-2-[[(2S)-1-[(2S)-6-amino-2-[[(2S)-1-[(2R)-2-amino-5-carbamimidamidopentanoyl]pyrrolidine-2-carbonyl]amino]hexanoyl]pyrrolidine-2-carbonyl]amino]-3-(1H-indol-3-yl)propanoyl]amino]-N-[(2R)-1-[[(2S)-1-[[(2R)-1-[[(2S)-1-[[(2S)-1-amino-4-methyl-1-oxopentan-2-yl]amino]-4-methyl-1-oxopentan-2-yl]amino]-3-(1H-indol-3-yl)-1-oxopropan-2-yl]amino]-1-oxo-3-phenylpropan-2-yl]amino]-3-(1H-indol-3-yl)-1-oxopropan-2-yl]pentanediamide Chemical compound C([C@@H](C(=O)N[C@H](CC=1C2=CC=CC=C2NC=1)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(N)=O)NC(=O)[C@@H](CC=1C2=CC=CC=C2NC=1)NC(=O)[C@H](CCC(N)=O)NC(=O)[C@@H](CC=1C2=CC=CC=C2NC=1)NC(=O)[C@H]1N(CCC1)C(=O)[C@H](CCCCN)NC(=O)[C@H]1N(CCC1)C(=O)[C@H](N)CCCNC(N)=N)C1=CC=CC=C1 QDZOEBFLNHCSSF-PFFBOGFISA-N 0.000 description 1
- PZUOEYPTQJILHP-STHAYSLISA-N (2r,3s)-2-amino-3-hydroxybutanamide Chemical group C[C@H](O)[C@@H](N)C(N)=O PZUOEYPTQJILHP-STHAYSLISA-N 0.000 description 1
- MRXDGVXSWIXTQL-HYHFHBMOSA-N (2s)-2-[[(1s)-1-(2-amino-1,4,5,6-tetrahydropyrimidin-6-yl)-2-[[(2s)-4-methyl-1-oxo-1-[[(2s)-1-oxo-3-phenylpropan-2-yl]amino]pentan-2-yl]amino]-2-oxoethyl]carbamoylamino]-3-phenylpropanoic acid Chemical compound C([C@H](NC(=O)N[C@H](C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](CC=1C=CC=CC=1)C=O)C1NC(N)=NCC1)C(O)=O)C1=CC=CC=C1 MRXDGVXSWIXTQL-HYHFHBMOSA-N 0.000 description 1
- KVPFYRAFNZKJSD-CPXLMRBJSA-N (2s,3r)-2-[[(2s)-2-[[(2s)-4-amino-2-[[(2s,3r)-2-[[(2s,3r)-2-amino-3-hydroxybutanoyl]amino]-3-hydroxybutanoyl]amino]-4-oxobutanoyl]amino]-3-(4-hydroxyphenyl)propanoyl]amino]-3-hydroxybutanoic acid Chemical compound C[C@@H](O)[C@H](N)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)O)C(=O)N[C@@H](CC(N)=O)C(=O)N[C@H](C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)O)C(O)=O)CC1=CC=C(O)C=C1 KVPFYRAFNZKJSD-CPXLMRBJSA-N 0.000 description 1
- UHPQFNXOFFPHJW-UHFFFAOYSA-N (4-methylphenyl)-phenylmethanamine Chemical compound C1=CC(C)=CC=C1C(N)C1=CC=CC=C1 UHPQFNXOFFPHJW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- PVPBBTJXIKFICP-UHFFFAOYSA-N (7-aminophenothiazin-3-ylidene)azanium;chloride Chemical compound [Cl-].C1=CC(=[NH2+])C=C2SC3=CC(N)=CC=C3N=C21 PVPBBTJXIKFICP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- CHRJZRDFSQHIFI-UHFFFAOYSA-N 1,2-bis(ethenyl)benzene;styrene Chemical class C=CC1=CC=CC=C1.C=CC1=CC=CC=C1C=C CHRJZRDFSQHIFI-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 102000006306 Antigen Receptors Human genes 0.000 description 1
- 108010083359 Antigen Receptors Proteins 0.000 description 1
- 108010039627 Aprotinin Proteins 0.000 description 1
- 108010001478 Bacitracin Proteins 0.000 description 1
- 108091003079 Bovine Serum Albumin Proteins 0.000 description 1
- 108010041397 CD4 Antigens Proteins 0.000 description 1
- 210000004366 CD4-positive T-lymphocyte Anatomy 0.000 description 1
- 210000001266 CD8-positive T-lymphocyte Anatomy 0.000 description 1
- OLVPQBGMUGIKIW-UHFFFAOYSA-N Chymostatin Natural products C=1C=CC=CC=1CC(C=O)NC(=O)C(C(C)CC)NC(=O)C(C1NC(N)=NCC1)NC(=O)NC(C(O)=O)CC1=CC=CC=C1 OLVPQBGMUGIKIW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 241000700626 Cowpox virus Species 0.000 description 1
- 125000000030 D-alanine group Chemical group [H]N([H])[C@](C([H])([H])[H])(C(=O)[*])[H] 0.000 description 1
- AYFVYJQAPQTCCC-STHAYSLISA-N D-threonine Chemical compound C[C@H](O)[C@@H](N)C(O)=O AYFVYJQAPQTCCC-STHAYSLISA-N 0.000 description 1
- 108010016626 Dipeptides Proteins 0.000 description 1
- 101710091045 Envelope protein Proteins 0.000 description 1
- 108010010803 Gelatin Proteins 0.000 description 1
- 108010015776 Glucose oxidase Proteins 0.000 description 1
- 239000004366 Glucose oxidase Substances 0.000 description 1
- 208000031886 HIV Infections Diseases 0.000 description 1
- 108010083930 HIV Receptors Proteins 0.000 description 1
- 102000006481 HIV Receptors Human genes 0.000 description 1
- 208000031957 HIV carrier Diseases 0.000 description 1
- 208000037357 HIV infectious disease Diseases 0.000 description 1
- 108091006905 Human Serum Albumin Proteins 0.000 description 1
- 102000008100 Human Serum Albumin Human genes 0.000 description 1
- 241000701044 Human gammaherpesvirus 4 Species 0.000 description 1
- 206010061598 Immunodeficiency Diseases 0.000 description 1
- 208000029462 Immunodeficiency disease Diseases 0.000 description 1
- 108060003951 Immunoglobulin Proteins 0.000 description 1
- QNAYBMKLOCPYGJ-REOHCLBHSA-N L-alanine Chemical compound C[C@H](N)C(O)=O QNAYBMKLOCPYGJ-REOHCLBHSA-N 0.000 description 1
- DCXYFEDJOCDNAF-REOHCLBHSA-N L-asparagine Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CC(N)=O DCXYFEDJOCDNAF-REOHCLBHSA-N 0.000 description 1
- OUYCCCASQSFEME-QMMMGPOBSA-N L-tyrosine Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CC1=CC=C(O)C=C1 OUYCCCASQSFEME-QMMMGPOBSA-N 0.000 description 1
- 102100038609 Lactoperoxidase Human genes 0.000 description 1
- 108010023244 Lactoperoxidase Proteins 0.000 description 1
- 102400000243 Leu-enkephalin Human genes 0.000 description 1
- 108010022337 Leucine Enkephalin Proteins 0.000 description 1
- GDBQQVLCIARPGH-UHFFFAOYSA-N Leupeptin Natural products CC(C)CC(NC(C)=O)C(=O)NC(CC(C)C)C(=O)NC(C=O)CCCN=C(N)N GDBQQVLCIARPGH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 102400000988 Met-enkephalin Human genes 0.000 description 1
- 241001465754 Metazoa Species 0.000 description 1
- 108010042237 Methionine Enkephalin Proteins 0.000 description 1
- 206010067482 No adverse event Diseases 0.000 description 1
- 108010093625 Opioid Peptides Proteins 0.000 description 1
- 102000001490 Opioid Peptides Human genes 0.000 description 1
- 102000035195 Peptidases Human genes 0.000 description 1
- 108091005804 Peptidases Proteins 0.000 description 1
- 108010047620 Phytohemagglutinins Proteins 0.000 description 1
- 241000288906 Primates Species 0.000 description 1
- 101710188315 Protein X Proteins 0.000 description 1
- 108010092799 RNA-directed DNA polymerase Proteins 0.000 description 1
- 239000012979 RPMI medium Substances 0.000 description 1
- 239000006146 Roswell Park Memorial Institute medium Substances 0.000 description 1
- FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M Sodium chloride Chemical compound [Na+].[Cl-] FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- 102400000096 Substance P Human genes 0.000 description 1
- 101800003906 Substance P Proteins 0.000 description 1
- 102100036011 T-cell surface glycoprotein CD4 Human genes 0.000 description 1
- 108010076830 Thionins Proteins 0.000 description 1
- 229920004890 Triton X-100 Polymers 0.000 description 1
- 239000013504 Triton X-100 Substances 0.000 description 1
- 108070000030 Viral receptors Proteins 0.000 description 1
- 108010066342 Virus Receptors Proteins 0.000 description 1
- 102000018265 Virus Receptors Human genes 0.000 description 1
- 230000021736 acetylation Effects 0.000 description 1
- 238000006640 acetylation reaction Methods 0.000 description 1
- 239000011149 active material Substances 0.000 description 1
- 230000001464 adherent effect Effects 0.000 description 1
- 230000002411 adverse Effects 0.000 description 1
- 239000000556 agonist Substances 0.000 description 1
- 125000000266 alpha-aminoacyl group Chemical group 0.000 description 1
- 229940024546 aluminum hydroxide gel Drugs 0.000 description 1
- SMYKVLBUSSNXMV-UHFFFAOYSA-K aluminum;trihydroxide;hydrate Chemical compound O.[OH-].[OH-].[OH-].[Al+3] SMYKVLBUSSNXMV-UHFFFAOYSA-K 0.000 description 1
- 230000009435 amidation Effects 0.000 description 1
- 238000007112 amidation reaction Methods 0.000 description 1
- 150000001408 amides Chemical class 0.000 description 1
- 230000000890 antigenic effect Effects 0.000 description 1
- 239000004599 antimicrobial Substances 0.000 description 1
- 239000003443 antiviral agent Substances 0.000 description 1
- 229960004405 aprotinin Drugs 0.000 description 1
- 239000008135 aqueous vehicle Substances 0.000 description 1
- 210000003050 axon Anatomy 0.000 description 1
- 229960003071 bacitracin Drugs 0.000 description 1
- 229930184125 bacitracin Natural products 0.000 description 1
- CLKOFPXJLQSYAH-ABRJDSQDSA-N bacitracin A Chemical compound C1SC([C@@H](N)[C@@H](C)CC)=N[C@@H]1C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@H](CCC(O)=O)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)CC)C(=O)N[C@@H]1C(=O)N[C@H](CCCN)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)CC)C(=O)N[C@H](CC=2C=CC=CC=2)C(=O)N[C@@H](CC=2N=CNC=2)C(=O)N[C@H](CC(O)=O)C(=O)N[C@@H](CC(N)=O)C(=O)NCCCC1 CLKOFPXJLQSYAH-ABRJDSQDSA-N 0.000 description 1
- 230000004888 barrier function Effects 0.000 description 1
- 230000000975 bioactive effect Effects 0.000 description 1
- 230000037396 body weight Effects 0.000 description 1
- 229940098773 bovine serum albumin Drugs 0.000 description 1
- 230000003925 brain function Effects 0.000 description 1
- 210000000133 brain stem Anatomy 0.000 description 1
- 239000007975 buffered saline Substances 0.000 description 1
- 210000000234 capsid Anatomy 0.000 description 1
- 150000001718 carbodiimides Chemical class 0.000 description 1
- 230000005101 cell tropism Effects 0.000 description 1
- 238000005119 centrifugation Methods 0.000 description 1
- 238000006243 chemical reaction Methods 0.000 description 1
- VDQQXEISLMTGAB-UHFFFAOYSA-N chloramine T Chemical compound [Na+].CC1=CC=C(S(=O)(=O)[N-]Cl)C=C1 VDQQXEISLMTGAB-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 125000004218 chloromethyl group Chemical group [H]C([H])(Cl)* 0.000 description 1
- 238000004587 chromatography analysis Methods 0.000 description 1
- 108010086192 chymostatin Proteins 0.000 description 1
- 229920006026 co-polymeric resin Polymers 0.000 description 1
- 238000009833 condensation Methods 0.000 description 1
- 230000005494 condensation Effects 0.000 description 1
- 238000011109 contamination Methods 0.000 description 1
- 238000007796 conventional method Methods 0.000 description 1
- 229920001577 copolymer Polymers 0.000 description 1
- 230000002596 correlated effect Effects 0.000 description 1
- 235000018417 cysteine Nutrition 0.000 description 1
- 125000000151 cysteine group Chemical class N[C@@H](CS)C(=O)* 0.000 description 1
- 238000002784 cytotoxicity assay Methods 0.000 description 1
- 231100000263 cytotoxicity test Toxicity 0.000 description 1
- 238000001446 dark-field microscopy Methods 0.000 description 1
- 230000007547 defect Effects 0.000 description 1
- 210000001787 dendrite Anatomy 0.000 description 1
- 210000001947 dentate gyrus Anatomy 0.000 description 1
- 230000001419 dependent effect Effects 0.000 description 1
- 238000001514 detection method Methods 0.000 description 1
- 239000000032 diagnostic agent Substances 0.000 description 1
- 229940039227 diagnostic agent Drugs 0.000 description 1
- 239000003085 diluting agent Substances 0.000 description 1
- 239000002270 dispersing agent Substances 0.000 description 1
- 238000006073 displacement reaction Methods 0.000 description 1
- 239000003937 drug carrier Substances 0.000 description 1
- 238000000684 flow cytometry Methods 0.000 description 1
- 239000012634 fragment Substances 0.000 description 1
- 239000000499 gel Substances 0.000 description 1
- 239000008273 gelatin Substances 0.000 description 1
- 229920000159 gelatin Polymers 0.000 description 1
- 235000019322 gelatine Nutrition 0.000 description 1
- 235000011852 gelatine desserts Nutrition 0.000 description 1
- 229940116332 glucose oxidase Drugs 0.000 description 1
- 235000019420 glucose oxidase Nutrition 0.000 description 1
- 210000002443 helper t lymphocyte Anatomy 0.000 description 1
- 210000005260 human cell Anatomy 0.000 description 1
- 208000033519 human immunodeficiency virus infectious disease Diseases 0.000 description 1
- 230000001900 immune effect Effects 0.000 description 1
- 230000036737 immune function Effects 0.000 description 1
- 230000007813 immunodeficiency Effects 0.000 description 1
- 102000018358 immunoglobulin Human genes 0.000 description 1
- 230000016784 immunoglobulin production Effects 0.000 description 1
- 230000002401 inhibitory effect Effects 0.000 description 1
- 230000005764 inhibitory process Effects 0.000 description 1
- ZPNFWUPYTFPOJU-LPYSRVMUSA-N iniprol Chemical compound C([C@H]1C(=O)NCC(=O)NCC(=O)N[C@H]2CSSC[C@H]3C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(=O)N[C@@H](C)C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)N[C@H](C(N[C@H](C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)N[C@@H](CC=4C=CC(O)=CC=4)C(=O)N[C@@H](CC=4C=CC=CC=4)C(=O)N[C@@H](CC=4C=CC(O)=CC=4)C(=O)N[C@@H](CC(N)=O)C(=O)N[C@@H](C)C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(=O)N[C@@H](C)C(=O)NCC(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](CSSC[C@H](NC(=O)[C@H](CC(O)=O)NC(=O)[C@H](CCC(O)=O)NC(=O)[C@H](C)NC(=O)[C@H](CO)NC(=O)[C@H](CCCCN)NC(=O)[C@H](CC=4C=CC=CC=4)NC(=O)[C@H](CC(N)=O)NC(=O)[C@H](CC(N)=O)NC(=O)[C@H](CCCNC(N)=N)NC(=O)[C@H](CCCCN)NC(=O)[C@H](C)NC(=O)[C@H](CCCNC(N)=N)NC2=O)C(=O)N[C@@H](CCSC)C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)O)C(=O)N[C@@H](CSSC[C@H](NC(=O)[C@H](CC=2C=CC=CC=2)NC(=O)[C@H](CC(O)=O)NC(=O)[C@H]2N(CCC2)C(=O)[C@@H](N)CCCNC(N)=N)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(=O)N2[C@@H](CCC2)C(=O)N2[C@@H](CCC2)C(=O)N[C@@H](CC=2C=CC(O)=CC=2)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)O)C(=O)NCC(=O)N2[C@@H](CCC2)C(=O)N3)C(=O)NCC(=O)NCC(=O)N[C@@H](C)C(O)=O)C(=O)N[C@@H](CCC(N)=O)C(=O)N[C@H](C(=O)N[C@@H](CC=2C=CC=CC=2)C(=O)N[C@H](C(=O)N1)C(C)C)[C@@H](C)O)[C@@H](C)CC)=O)[C@@H](C)CC)C1=CC=C(O)C=C1 ZPNFWUPYTFPOJU-LPYSRVMUSA-N 0.000 description 1
- 230000035992 intercellular communication Effects 0.000 description 1
- 238000002372 labelling Methods 0.000 description 1
- 229940057428 lactoperoxidase Drugs 0.000 description 1
- URLZCHNOLZSCCA-UHFFFAOYSA-N leu-enkephalin Chemical compound C=1C=C(O)C=CC=1CC(N)C(=O)NCC(=O)NCC(=O)NC(C(=O)NC(CC(C)C)C(O)=O)CC1=CC=CC=C1 URLZCHNOLZSCCA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- GDBQQVLCIARPGH-ULQDDVLXSA-N leupeptin Chemical compound CC(C)C[C@H](NC(C)=O)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@H](C=O)CCCN=C(N)N GDBQQVLCIARPGH-ULQDDVLXSA-N 0.000 description 1
- 108010052968 leupeptin Proteins 0.000 description 1
- 230000000670 limiting effect Effects 0.000 description 1
- 239000007791 liquid phase Substances 0.000 description 1
- 210000004698 lymphocyte Anatomy 0.000 description 1
- 210000002540 macrophage Anatomy 0.000 description 1
- 239000003550 marker Substances 0.000 description 1
- 108020004084 membrane receptors Proteins 0.000 description 1
- 102000006240 membrane receptors Human genes 0.000 description 1
- 238000012986 modification Methods 0.000 description 1
- 230000004048 modification Effects 0.000 description 1
- 229960005181 morphine Drugs 0.000 description 1
- 210000002569 neuron Anatomy 0.000 description 1
- 239000002773 nucleotide Substances 0.000 description 1
- 125000003729 nucleotide group Chemical group 0.000 description 1
- 239000003399 opiate peptide Substances 0.000 description 1
- 239000000137 peptide hydrolase inhibitor Substances 0.000 description 1
- IWHCAJPPWOMXNW-LYKMMFCUSA-N peptide t Chemical compound C[C@H](N)C(=O)N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)O)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)O)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)O)C(=O)N[C@@H](CC(N)=O)C(=O)N[C@H](C(=O)N[C@@H]([C@H](O)C)C(O)=O)CC1=CC=C(O)C=C1 IWHCAJPPWOMXNW-LYKMMFCUSA-N 0.000 description 1
- 210000005259 peripheral blood Anatomy 0.000 description 1
- 239000011886 peripheral blood Substances 0.000 description 1
- 230000001885 phytohemagglutinin Effects 0.000 description 1
- 229920003023 plastic Polymers 0.000 description 1
- 239000004033 plastic Substances 0.000 description 1
- 230000003389 potentiating effect Effects 0.000 description 1
- 239000000843 powder Substances 0.000 description 1
- 230000002335 preservative effect Effects 0.000 description 1
- 230000008569 process Effects 0.000 description 1
- 239000000047 product Substances 0.000 description 1
- 230000001737 promoting effect Effects 0.000 description 1
- 230000000644 propagated effect Effects 0.000 description 1
- 235000019833 protease Nutrition 0.000 description 1
- 238000000163 radioactive labelling Methods 0.000 description 1
- 230000009257 reactivity Effects 0.000 description 1
- 210000003370 receptor cell Anatomy 0.000 description 1
- 230000002829 reductive effect Effects 0.000 description 1
- 238000000926 separation method Methods 0.000 description 1
- 210000002966 serum Anatomy 0.000 description 1
- 239000011780 sodium chloride Substances 0.000 description 1
- 238000010532 solid phase synthesis reaction Methods 0.000 description 1
- 239000000243 solution Substances 0.000 description 1
- 239000003381 stabilizer Substances 0.000 description 1
- 238000010186 staining Methods 0.000 description 1
- 239000008223 sterile water Substances 0.000 description 1
- 210000003523 substantia nigra Anatomy 0.000 description 1
- 239000000375 suspending agent Substances 0.000 description 1
- 239000000725 suspension Substances 0.000 description 1
- 208000011580 syndromic disease Diseases 0.000 description 1
- 229940124597 therapeutic agent Drugs 0.000 description 1
- 125000000341 threoninyl group Chemical group [H]OC([H])(C([H])([H])[H])C([H])(N([H])[H])C(*)=O 0.000 description 1
- 230000005100 tissue tropism Effects 0.000 description 1
- 230000000699 topical effect Effects 0.000 description 1
- 229960001479 tosylchloramide sodium Drugs 0.000 description 1
- 238000012546 transfer Methods 0.000 description 1
- 230000010415 tropism Effects 0.000 description 1
- 125000001493 tyrosinyl group Chemical group [H]OC1=C([H])C([H])=C(C([H])=C1[H])C([H])([H])C([H])(N([H])[H])C(*)=O 0.000 description 1
Classifications
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K5/00—Peptides containing up to four amino acids in a fully defined sequence; Derivatives thereof
- C07K5/04—Peptides containing up to four amino acids in a fully defined sequence; Derivatives thereof containing only normal peptide links
- C07K5/10—Tetrapeptides
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K14/00—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof
- C07K14/005—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from viruses
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P31/00—Antiinfectives, i.e. antibiotics, antiseptics, chemotherapeutics
- A61P31/12—Antivirals
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K14/00—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof
- C07K14/435—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from animals; from humans
- C07K14/705—Receptors; Cell surface antigens; Cell surface determinants
- C07K14/70503—Immunoglobulin superfamily
- C07K14/70514—CD4
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K16/00—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies
- C07K16/08—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from viruses
- C07K16/10—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from viruses from RNA viruses
- C07K16/1036—Retroviridae, e.g. leukemia viruses
- C07K16/1045—Lentiviridae, e.g. HIV, FIV, SIV
- C07K16/1063—Lentiviridae, e.g. HIV, FIV, SIV env, e.g. gp41, gp110/120, gp160, V3, PND, CD4 binding site
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K38/00—Medicinal preparations containing peptides
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N2740/00—Reverse transcribing RNA viruses
- C12N2740/00011—Details
- C12N2740/10011—Retroviridae
- C12N2740/16011—Human Immunodeficiency Virus, HIV
- C12N2740/16111—Human Immunodeficiency Virus, HIV concerning HIV env
- C12N2740/16122—New viral proteins or individual genes, new structural or functional aspects of known viral proteins or genes
Landscapes
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Immunology (AREA)
- Virology (AREA)
- Proteomics, Peptides & Aminoacids (AREA)
- Molecular Biology (AREA)
- Genetics & Genomics (AREA)
- Biophysics (AREA)
- Biochemistry (AREA)
- Gastroenterology & Hepatology (AREA)
- Oncology (AREA)
- Communicable Diseases (AREA)
- Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
- AIDS & HIV (AREA)
- Hematology (AREA)
- Public Health (AREA)
- General Chemical & Material Sciences (AREA)
- Animal Behavior & Ethology (AREA)
- Pharmacology & Pharmacy (AREA)
- Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
- Veterinary Medicine (AREA)
- Cell Biology (AREA)
- Toxicology (AREA)
- Zoology (AREA)
- Peptides Or Proteins (AREA)
- Medicines That Contain Protein Lipid Enzymes And Other Medicines (AREA)
- Medicines Containing Antibodies Or Antigens For Use As Internal Diagnostic Agents (AREA)
- Preparation Of Compounds By Using Micro-Organisms (AREA)
Description
Oppfinnelsen angår en analogifremgangsmåte til fremstilling av et terapeutisk aktivt peptid med formelen
R<1> - R2 - R3 - R4 - R5 - R6 - R7 - Tyr - R<8> - R9 (I) hvor R<1> er en aminoterminalrest Cys eller er fraværende,
R<2> er Ala eller D-Ala eller en aminoterminalrest Ala eller
D-Ala eller fraværende,
R3 er Ser eller fraværende,
R<4> er Thr eller en aminoterminalrest Cys eller fraværende, R<5> er Thr, Ser, Asn eller aminoterminalrest Thr, Ser, Asn, R<6> er Thr eller Ser,
R7 er Thr, Ser, Arg eller Asn,
R<8> er en Thr, Arg, Gly eller Ser eller karboksyterminalrest
Thr, Arg, Gly, Ser eller Thr-amid eller fraværende,
R<9> er en karboksyterminalrest Cys eller fraværende, eller et fysiologisk akseptabelt salt derav.
Syntetisk produserte korte peptidsekvenser hindrer binding av HTLV-III/LAV (heretter betegnet som HIV) til humane celler ved blokkering av reseptorsetene på celleflaten for således å hindre viral infektivitet av human T-celle. Peptidene, skjønt de hindrer infektivitet, induserer også antistoffproduksjon mot HIV-virusets kapselprotein (envelope protein). Følgelig har disse peptider også anvendelse som vaksiner for å hindre utvikling av Acquired Immune Deficiency Syndrome (AIDS). Monoklonale antistoffer for peptidene kan også anvendes som diagno-semidler for å identifisere HIV-viruset. Følgelig har peptider og antistoffer for peptidene anvendelse i fremstilling av testpakker for identifisering av HIV-bærere eller personer som lider av AIDS.
Den fullstendige nukleotidsekvens for AIDS (HIV)-virus er blitt rapportert av flere forskere. (Se Lee Råtner et al., Nature 313, p. 277, januar 1985; Muesing et al., Nature, 313, p. 450, februar 1985; og Wain-Habson et al., Cell 40, pp. 9-17, januar 1985). Kapselgenet er blitt særlig forbundet med antigenisitet og infektivitet. Man vet imidlertid at kapselpartiet også har områder som er meget forskjellige. HIV-virus kapsel-glykoprotein er vist å feste seg kovalent til hjernemembranene hos mennesker, rotter og aper og til celler i immunsystemet.
Den forståelse at vira kan utøve celle- og vevstropisme ved festing til meget spesifikke seter på cellemembranreseptorer har oppmuntret forskere til å lete etter midler som binder seg på reseptorsetene for viruset i cellemembraner og således hindrer binding av det spesielle virus til disse celler. En demonstra-sjon på at spesifikk reseptorformidlet infektivitet av kukoppe-virus blokkeres av syntetiske peptider er tidligere blitt gitt (Epstein et al., Nature 318, pp. 663-667).
HIV-viruset er blitt vist å binde seg til et overflatemolekyl kjent som CD4- eller T4-regionen som foreligger på forskjellige celler som er mottagelige for HIV-infeksjon, innbefattet T-lymfocytter og makrofager. (Se Shaw et al., Science 226, pp. 1165-1171 for en drøftelse av tropisme av HTLV-III).
Foruten de symptomer som oppstår fra immunsvikt, oppviser pasienter med AIDS neurofysiologiske defekter. Sentralnerve- og immunsystemene har felles et stort antall spesifikke celleoverflate-gjenkjennelsesmolekyler som tjener som reseptorer for neuropeptid-formidlet intercellulær kommunikasjon. Neuropep-tidene og deres reseptorer oppviser utstrakt evolusjonær stabilitet, idet de er godt bevart i stort sett uforandret form i encellede organismer såvel som i høyerestående dyr. Videre oppviser sentralnerve- og immunsystemene felles DC4 (T4) celleoverflate-gjenkjennelsesmolekyler som tjener som reseptorer for bindingen av HIV-kapselglykoprotein (gp 120). Da de samme godt bevarte neuropeptid-informasjonssubstanser integrerer immun- og hjernefunksjonen gjennom reseptorer som er bemerkel-sesverdig like dem for HIV, har oppfinnerne postulert at en meget lik aminosyresekvens mellom HIV-glykoproteinet gp 120 og et kort peptid tidligere identifisert i en annen sammenheng fra kapselregionen av Epstein-Barr-viruset kan indikere det kjerne-peptid som er essensielt for viral reseptorbinding. Det ble postulert at et slikt peptid kunne være nyttig for å hindre infeksjon av celler med HIV ved binding med reseptorceller og blokkering av bindingen av HIV gp 120, at slike peptider som binder seg til reseptorsetene ville gi opphav til produksjonen av antistoffer rettet på peptidsekvensen, og at disse peptider kan benyttes til å skaffe immunologisk basis for prevensjon av
AIDS.
Det er en hensikt med den foreliggende oppfinnelse å skaffe en analogifremgangsmåte til fremstilling av peptider som vil tjene til å mildne symptomer på AIDS ved å hindre binding av HIV (AIDS-virus) til reseptorseter i celler av hjernemembraner og immunsystemet.
Det er også en hensikt med oppfinnelsen å skaffe, ved analogifremgangsmåten, peptider til bruk som vaksiner som kan benyttes til å gi opphav til antistoffer som vil beskytte mot utviklingen av AIDS i personer som kan bli utsatt for HIV (AIDS-virus).
Det er ytterligere en hensikt med oppfinnelsen å skaffe, på samme måte, diagnostiske midler til identifisering av nærværet av antistoffer for HIV- eller HIV-kapselprotein.
Disse hensikter oppnås ved en analogifremgangsmåte som angitt i patentkravet.
Detaljert beskrivelse av oppfinnelsen.
Et oktapeptid i HIV-kapselglykoproteinet (gp 120) ble identifisert ved datamaskinassistert analyse. Dette peptid, kalt "peptid T" på grunn av sitt høye threonin-innhold, er vist å hindre binding av gp 120 til hjernemembranene. Peptidet har sekvensen Ala-Ser-Thr-Thr-Thr-Asn-Tyr-Thr. Senere analyse avdekket en klasse beslektede pentapeptider med lignende bindingsegenskaper.
I henhold til en første side ved den foreliggende oppfinnelse er der skaffet et peptid med formelen (I): hvor Ra er en aminoterminalrest Ala- eller D-Ala og R<b> er en karboksyterminalrest -Thr eller -Thr-amid eller et derivat derav med en ytterligere Cys-rest ved én eller begge amino- og karboksyterminalene, eller et peptid med formelen (II):
hvor R"<1> er en aminoterminalrest Thr-, Ser- eller Asn-,
R2 er Thr eller Ser,
R3 er Thr, Ser, Asn eller Arg,
R<4> er Tyr,
og R<5> er fortrinnsvis en karboksyterminalrest -Thr, -Arg eller - Gly eller et Thr-amid. Skjønt de foretrukne aminosyrer ved R5 • begge er angitt, er det kjent at aminosyren i denne posisjon kan variere meget. Det er faktisk mulig å avslutte peptidet med R<4 >(tyrosin) som karboksyterminal-aminosyren, idet R<5> er fraværende. Slike peptider beholder bindingsegenskapene av de grupper som her er omtalt. Serin og threonin synes å være ut-skiftbare for de biologiske formål som her er omtalt. De aktive forbindelser ifølge oppfinnelsen kan eksistere som fysiologisk akseptable salter av peptidene.
De mest foretrukne peptider, såvel som peptid T ovenfor, er de følgende oktapeptider med formelen (I):
og og de følgende'pentapeptider med formelen (II):
eventuelt med et amidderivat ved karboksyterminalen.
Forbindelsene fremstilt ved analogifremgangsmåten ifølge oppfinnelsen kan fordelaktig modifiseres ved de fremgangsmåter som er kjent for å fremme passasje av molekyler gjennom blod/hjerne-barrieren. Acetylering har vist seg å være spesielt nyttig for å fremme bindingsaktiviteten av peptidet. De terminale amino- og karboksyseter er særlig foretrukne seter for modifikasjon.
Peptidene kan også modifiseres i en begrensende struktur som skaffer øket stabilitet og oral tilgjengelighet.
De følgende forkortelser er heretter brukt:
Med mindre noe annet er angitt, foreligger aminosyrene selvsagt i den naturlige form av L-stereoisomerer.
En sammenligning av aminosyresekvenser for 12 pentapeptider er vist i tabell 1. Skjønt den opprinnelige datamaskinundersøkelse historisk viste at peptid T (inneholdes i ARV-isolatet) var den relevante molekyldel, ble det etter hvert som ytterligere virussekvenser ble tilgjengelige klart at den relevante bio-aktive sekvens kunne være et kortere pentapeptid omfattende, nominelt, peptid T t4-8] eller sekvensen TTNYT. I isolater som ble sammenlignet (tabell 1), ble betydelige homologier oppdaget bare i denne kortere region. Mesteparten av forandringene er interomsetninger av serin (S) og threonin (T), to nært beslektede aminosyrer. Tyrosinet i posisjon 7 på peptid T er et invariant trekk i alle disse konstruerte stykker som indikerer at det kan være obligatorisk for bioaktivitet. Substitusjoner som finner sted ved posisjon 5 omfatter T, G, R eller S. Posisjon 4 og 6 ble først begrenset (med ett unntak) til S, T og N, som alle er aminosyrer inneholdende uladede polare grupper med nært beslektede steriske egenskaper. En vurdering av generell sekvensoverensstemmelse blant 5 forskjellige AIDS-virusisolater viser at regionen rundt og omfattende peptid-T-sekvensen er et meget variabelt område. Slik variabili-tet kan antyde spesialisering gjennom sterk selektiv variasjon av den eller de funksjoner som kan defineres ved dette locus. På samme måte som opiatpeptidene synes disse peptid-T-analoger å eksistere i multiple former som minner om met- og leu-enkefalin. Disse pentapeptidsekvenser representert i disse forskjellige AIDS-virusisolater er biologisk aktive og i stand til å inter-reagere som agonister av CD4-reseptoren - tidligere kjent stort sett som en overflate-"markør" av T-hjelpeceller.
Peptidet med syv aminosyrer Cys-Thr-Thr-Asn-Tyr-Thr-Cys er også aktivt. Tilsetning av cysteiner til en kjerne virker ikke ugunstig inn på aktivitet.
Peptidene ble syntetisert på bestilling (custom synthesized) av
Peninsula Laboratories under en konfidensiell avtale mellom oppfinnerne og produsenten. Merrifields metode for fastfase-peptidsyntese ble benyttet. (Se US-PS 3.531.258 her innlemmet som referanse.) De syntetiserte peptider er særlig foretrukket. Skjønt peptid T og pentapeptidet som er en del derav kunne isoleres fra viruset, var de peptider som ble fremstilt i henhold til Merrifields metode frie for virus- og celleavfall. Følgelig finner der ikke sted noen uheldige reaksjoner med forurensende materialer når de syntetiserte peptider benyttes.
Peptidene ifølge oppfinnelsen kan fremstilles ved vanlige fremgangsmåter for peptidsyntese. Både fastfase- og væskefase-metoder kan benyttes. Det er funnet at Merrifields fastfase-metode er særlig passende. I denne fremgangsmåte blir peptidet syntetisert på en trinnvis måte mens karboksyenden av kjeden er kovalent festet til den uoppløselige bærer. Under de mellomlig-gende syntetiske trinn forblir peptidet i den faste fase og kan derfor lett manipuleres. Den faste bærer er en klormetylert styrendivinylbenzen-kopolymer.
En N-beskyttet form av karboksyterminalaminosyren, f.eks. en t-butoksykarbonyl-beskyttet (Boe-) aminosyre omsettes med klor-metylresten av den klormetylerte styrendivinylbenzen-kopolymer-harpiks for å produsere et beskyttet aminoacyl-derivat av harpiksen, hvor aminosyren er koblet til harpiks-benzylesteren. Denne blir de-beskyttet og omsatt med en beskyttet form av den neste ønskede aminosyre, for således å produsere et beskyttet dipeptid som er festet til harpiksen. Aminosyren vil generelt benyttes i aktivert form, f.eks. ved bruk av et karbodiimid eller aktiv ester. Denne sekvens gjentas og peptidkjeden vokser med en rest ad gangen ved kondensasjon ved aminoenden med de ønskede N-beskyttede aminosyrer til det ønskede peptid er blitt bygget opp på harpiksen. Peptidharpiksen behandles deretter med en vannfri hydrofluorsyre for å kløyve esteren som binder det oppbygde peptid til harpiksen for å frigjøre det ønskede peptid. Funksjonelle sidekjedegrupper av aminosyrer som må blokkeres under den syntetiske fremgangsmåte ved bruk av vanlige metoder kan også fjernes på samme tid. Syntese av et peptid med en aminogruppe på dets karboksyterminal kan utføres på vanlig måte
ved bruk av en 4-metylbenzhydrylamin-harpiks.
Forbindelsene ifølge oppfinnelsen ble funnet å effektivt blokkere cellers reseptorseter og å hindre celleinfektivitet med HIV (AIDS-virus) i ape, rotte og humane hjernemembraner og celler i immunsystemet.
Forbindelsene fremstilt ved analogifremgangsmåten ifølge oppfinnelsen kan f.eks. anvendes i en farmasøytisk blanding som omfatter en slik forbindelse i tilslutning til en farmasøytisk aksep-tabel bærer eller eksipiens tilpasset til bruk i human eller veterinær medisin. Slike blandinger kan frembys for bruk på vanlig måte i blanding med én eller flere fysiologisk akseptable bærere eller eksipienser. Blandingene kan valgfritt videre inneholde ett eller flere andre terapeutiske midler som om ønskelig kan være et forskjellig antivirusmiddel.
Peptidene i henhold til oppfinnelsen kan således formuleres for oral tilførsel, tilførsel via kinn eller hulrom (buccal), parenteral, topisk eller rektal tilførsel.
Nærmere bestemt kan peptidene fremstilt ved analogifremgangsmåten i henhold til oppfinnelsen formuleres for injisering eller infusjon og kan gis i enhetdoseform i ampuller eller i multi-dose-beholdere med et tilsatt preservativ. Blandingene kan anta slike former som suspensjoner, oppløsninger eller emulsjoner i oljeholdige eller vandige vehikler, og kan inneholde formu-leringsmidler såsom suspensjonsmidler, stabiliseringsmidler og/eller dispergeringsmidler. Alternativt kan den aktive ingre-diens foreligge i pulverform for sammensetning med en egnet vehikel, f.eks. sterilt, pyrogenfritt vann før bruk.
Slike farmasøytiske blandinger kan også inneholde andre aktive ingredienser såsom antimikrobielle midler eller preservativer.
Blandingene kan inneholde 0,001-99% av det aktive materiale.
For tilførsel ved injeksjon eller infusjon, vil den daglige dose som anvendes for behandling av et voksent menneske på ca. 70 kg kroppsvekt ligge i området fra 0,2 mg til 10 mg, fortrinnsvis fra 0,5 til 5 mg, som kan gis i 1-4 doser, f.eks., avhengig av tilførselsveien og pasientens tilstand.
Det ble postulert at affinitetskonstantene ligner på dem for morfin. På grunnlag av denne affinitet, ble doseringer på 0,33-0,0003 mg/kg pr. dag foreslått. Dette har vist seg å være effektivt. En blodkonsentrasjon på 10~*> - 10"^ molar blodkonsentrasjon er foreslått. Hos aper oppnår man ved 3 mg/kg pr. dag en serumkonsentrasjon på 150 x 10"^ M. Denne konsentrasjon er 15 ganger større enn nødvendig for oppnåelse av en konsentrasjon på 10-<8> M. Primater krever generelt 10 ganger så stor dose som den som benyttes i mennesker.
Vaksinepreparater inneholdende et peptid i henhold til oppfinnelsen skaffer beskyttelse mot infeksjon av AIDS-virus. Vaksinen vil inneholde en virksom immunogen mengde peptid, f.eks. lug-20 mg/kg regnet på vertens vekt, eventuelt konjugert til et protein såsom humanserumalbumin, i en passende vehikel, f.eks. sterilt vann, saline eller buffret saline. Hjelpmidler kan anvendes, f.eks. aluminiumhydroksid-gel. Tilførselen kan være ved injeksjon, f.eks. intramuskulært, intreperitonealt, subkutanøst eller intravenøst. Tilførselen kan finne sted en gang eller ved en rekke forskjellige tidspunkter, f.eks. ved 1-4 ukers mellomrom.
Antigensekvenser fra krabbe samt proteiner fra andre virvelløse dyr kan også settes til peptidene fremstilt ved analogifremgangsmåten ifølge oppfinnelsen for å fremme antigenisitet.
Nok en anvendelse av peptidet angår testpakker for påvisning av AIDS-viruset og antistoffer for AIDS-viruset inneholdende et peptid fremstilt i henhold til oppfinnelsen som en kilde til antigen, eller et monoklonalt antistoff frembragt ved et peptid fremstilt i henhold til oppfinnelsen. F.eks. kan et slikt peptid benyttes i en testpakke for å påvise AIDS-infeksjon og diagnos-tisere AIDS og pre-AIDS-betingelser ved bruk av det som test-reagensen i en enzymkoblet immunosorbent-analyse (ELISA) , eller en enzym-immunpunktsanalyse (enzyme immunodot assay). Slike testpakker kan innbefatte en uoppløselig porøs overflate
eller fast substrat, til hvilket det antigene peptid eller monoklonale antistoff er blitt forabsorbert eller kovalent bundet, idet en slik overflate eller et substrat fortrinnsvis er i form av mikrotiterplater eller -brønner, testsera, heteroanti-sera som spesielt binder seg til og metter det antigen eller antistoff som absorberes på overflaten eller bæreren, forskjellige fortynningsmidler og buffere, merkede konjugater for påvisning av spesielt bundne antistoffer eller andre signalgene-rerende reagenser såsom enzymsubstrater, kofaktorer og kromo-gener.
Peptidet kan benyttes som et immunogen for å frembringe monoklonale antistoffer som spesielt binder seg til det aktuelle parti av kapselsekvensen i AIDS-viruset ved bruk av vanlige teknikker.
EKSPERIMENTELLE METODER OG DATA
Radioaktiv merking av gp 120, preparering av hjernemembraner, binding og tverrbinding av gp 120 til reseptor og immunoutfelling av T4- antigen
HTLV-IIIb av HIV ble formert i H9-celler, og gp 120 ble isolert ved immunoaffinitetskromatografi og preparativ NaDodSO^PAGE.
125
Renset gp 120 ble merket med I ved kloramin-T-metoden.
Frisk hippokampus fra menneske, ape og rotte ble hurtig homoge-nisert (Polytron, Brinkmann Instruments) i 100 volumer iskald 50 mM Hepes (pH 7,4). Membranene som ble samlet opp ved sentri-fugering (15 000 x g) ble vasket i det opprinnelige buffervolum og ble brukt friske eller lagret ved -70°C. Før bruk ble hjernemembranene og meget høyt rensede T-celler (ref. 16; gave fra Larry Wahl) preinkubert i 15-30 minutter i fosfatbuffret saline (PBS). Membraner som ble oppnådd fra 20 mg (opprinnelig våtvekt) hjerne (ca. 100 ug protein) ble inkubert med 28 000 cpm av <125>I-gp 120 i 1 time ved 37°C i 200 1 (endelig volum) av 50 mM Hepes inneholdende 0,1% bovinserumalbumin og peptidaseinhibito-rene bacitracin (0,005%), aprotinin (0,005%), leupeptin (0,001%) og chymostatin (0,001%). Inkubasjonene ble hurtig vakuumfiltrert og tellet for å bestemme det reseptorbundne materiale.
Immunoutfelling
Immunoutfellinger ble fremstilt ved inkubasjon (over natten ved 4°C) av 0,5% Triton X-100/PBS oppløseliggjort, laktoperoksidase-/glukoseoksidase/l-joderte hjernemembraner eller intakte T-celler som indikerte mAbs ved 10 jig pr. reaksjon. En fastfase-immunoabsorbant (immunoperler, Bio-Rad) ble brukt til å utfelle immunkomplekser før deres reoppløsning ved NaDodS04/PAGE. Kontrollinkubasjoner inneholdt ikke noe primært mAb eller en underklassekontroll mAb (OKT8).
Kjemisk neuroanatomi og datamaskinassistert densitometri Kryostatkuttede 25-jjm seksjoner av nylig frosset human-, ape- og rottehjerne ble tinet-montert og tørket på gelatinbelagte objektglass, og reseptorer ble synliggjort som beskrevet (18). Inkubasjoner med eller uten antistoffer (10 ug/ml) mot T4, T4A, T8 og T11 ble utført over natten ved 0°C i RPMI-medium, tverrbundet på o deres antigener og synliggjort, med <125>I-merket geit-antimus-antistoff. Inkubasjoner av på-objektglassmonterte vevseksjoner for å o merke antigenreseptoren med <125>I-gp 120 ble utført i 5 ml's objektglassbærere med (1 *iM) eller uten umerket gp 120 eller mAb OKT4A (10 ug/ml) (Ortho Diagnostics).
Separasjon av T- lymfocytt- subsett
Subsett av T-celler ble oppnådd ved behandling av Percoll densitetsrensede perifere blod T-celler med spesielle monoklonale antistoffer (T4 eller T8) ved 10 ug/ml. De behandlede celler ble deretter helt ut (21) på en Petri-skål av plast som var belagt med geit-antimus-immunoglobulin [F(ab')2^ (Sero Lab, Eastbury, MA) i 30 minutter ved 4°C. De ikke-vedheftende celler ble deretter fjernet, vasket og analysert for reaktivitet ved strømningscytometri. De separerte T4- og T8-cellepopulasjoner har <5% forurensning av andre T-cellesubsett. Celler ble deretter dyrket med fytohemagglutinin (1 ug/ml) i 72 timer og utsatt for HIV som beskrevet nedenunder. Infiserte celler ble fenotypisk karakterisert når cytotoksisitetsanalyser ble utført.
Virusinfeksi on
Det HTLV-lll-virus som ble benyttet til infeksjon ble isolert fra en interleukin 2 (IL-2)-avhengig dyrket T-cellelinje etablert fra nytt materiale fra AIDS-pasienter og ført inn i HuT 78, en ettergivende (permissive) IL-2-uavhengig cellelinje.
Beskrivelse av tegningen
1 25
Fig. 1A viser en tverrbinding av I-gp 120 til hjernemembraner og T-celler (a) <125>I-gp 120 kun; (b) ape; (c) rotte; (d) human hjerne og (e) humane T-celler. Fig. 1B og 1C viser immunoutf elling av 1 ^Si^e^e^e henholdsvis ape-hjernemembraner og humane T-celler; (f,i) ingen primær antistoffkontroll; (g,j) OKT4 Mab; (h,k) 0KT8 Mab. Fig. 2a viser en fortrengning av spesifikk <125>j_gp 120-binding til friske hippokampale membraner fra rotte. Hver bestemmelse ble utført i triplikat; resultatene av et eksperiment som ble utført tre ganger med lignende resultater er vist. Spesifikk binding fortrengbar med 10 ug/ml OKT4 og 4A lå i området 27-85% av den samlede binding som var 2201 ± 74 cpm i det forsøk som er vist. Fig. 2b viser at den virale infektivitet blokkeres ved peptid T og dets syntetiske analoger. Hver bestemmelse ble utført i duplikat. Resultatene representerer et enkelt eksperiment som ble gjentatt tre ganger med lignende resultater.
Eksempel 1
Et enkelt radioaktivt merket tverrbundet produkt på ca. 180 Kd fås etter spesifikk binding av <125>j_gp 120 til membraner fra enten ekornape, rotte eller humane hjernemembraner som ikke kan skjeldnes fra dem hos humane T-celler (fig. 1A). Dette resultat antyder at gp 120 kan kobles til et protein på ca. 60 Kd; ureagert ^<25>j_gp 120 løper ved siden av ikke-membrankontrollen (bane a).
Immunoutfelling av radiojoderte humane hjernemembraner med 0KT4 og OKT8 (10 jig/ml) (fig. 1B) viser at hj ernemembraner inneholder et T4-antigen på ca. 60 Kd som ikke kan skjeldnes fra det som identifiseres på humane T-lymfocytter (fig. 1C); i motsetning til dette immunoutfeller 0KT8 et protein med lav molekylvekt (ca. 30 Kd) fra T-lymfocytter (fig. 1C) som er fraværende i hjernemembraner (fig. 1B), hvilket tyder på at hjerne-T4 ikke fås fra lymfocytter som finnes på stedet. Lignende resultater observeres hos ape og rotte (ikke vist) hippokampale membraner. Disse resultater viser at T4-antigenet tjener som virusresepto-ren og er et godt bevart 60 Kd molekyl som deles med immun- og sentralnervesystemene.
Den oppdagelse at Epstein-Barr og HTLV-III/LAV deler en nesten identisk oktapeptidsekvens forårsaket syntesen og undersøkelsen av "peptid T". Fig. 2 viser at den høye affinitet (0,1 nM-området) og saturabilitet (fig. 2a) av <125>I-gp 120-bindingen til nylig preparerte rotte-hjernemembraner. Spesifisitet (fig. 2b) er vist ved blokkade med OKT4 og OKT4A, men ikke 0KT3 (0,1 )Ag/ml). Peptid T og to av dets syntetiske analoger (men ikke den irrelevante oktapeptid-substans P [1-8]) hindret i betydelig grad <1>2<5>I-gp 120-binding i 0,1 nM-området (fig. 2c). Substitu-sjon av et D-threoninamid i posisjon 8 førte til minst et 100 ganger større tap av reseptorbindingaktivitet. Den klassiske [D-Ala]-substitusjon for [L-Ala ] resulterer i en konsekvent mer virkningsfull, øyensynlig mer peptidaseresistent analog enn peptid T; amidering av C-terminalthreoninet gir også konsekvent en noe større virkningsgrad (fig. 3).
Når de syntetiske peptider ble testet for deres evne til å blokkere virusinfeksjon på humane T-celler, kjente ikke eksperi-mentatorene til resultatene av bindingsanalysene. Ved 10"<7>M kan de tre peptider som er aktive i bindingsanalysen redusere påvi-selige nivåer av revers transkriptase-aktivitet med nesten 9 ganger. Den mindre aktive bindingsfortrenger [D-Thr]-peptid T oppviste på samme måte sterkt redusert blokkering av virusinfeksjon og krevde konsentrasjoner 100 ganger høyere for å oppnå betydelig inhibering. Således er ikke bare rangordningen for virkningsfullhet av de fire peptider (D- [Ala] j-peptid T-amid > D-[Ala] j-peptid T > peptid T > D-[Thr] 8-peptid T-amid) , men også deres absolutte konsentrasjoner med hensyn til å inhi-bere reseptorbinding og virusinfektivitet nøye korrelert (fig. 3) .
Eksempel 2
Et protein på tilnærmet 60 Kd som er likt om ikke identisk med humane T-celler T4-antigen forelå i øyensynlig bevart molekylær form på membraner fremstilt fra human hjerne; videre kan det radioaktivt merkede HIV-kapselglykoprotein (^<2>^I-gp 120) være kovalent tverrbundet til et molekyl som foreligger i tre pattedyrhjerner, hvis størrelse og immunoutfellingsegenskaper ikke kunne skjeldnes fra T4-antigenets. Ved bruk av en fremgangsmåte for synliggjøring av antistoffbundne reseptorer på skiver av hjerne, ble det neuroanatomiske fordelingsmønster for hjerne-T4 som er tettest over den kortikale neuropil og analogt organisert i alle tre pattedyrhjerner presentert. Videre antydet igjen radioaktivt merket HIV-viruskapsel-glykoprotein bundet i et identisk mønster på tilgrensende hjerneseksjoner at T4 var HIV-reseptoren.
Eksempel 3
Kjemisk neuroanatomi, datamaskinassistert densitometri. Kryostat-kuttede 25 mikrometer seksjoner av nylig frosset human-, ape- og rottehjerne ble tine-montert og tørket på gelbelagte objektglass og reseptorer synliggjort som beskrevet av Herkenham og Pert, J. Neurosci., 2, pp. 1129-1149 (1982). Inkubasjoner med eller uten antistoffer (10 *ig/ml) mot T4, T4Ak T8 og T11 ble utført over natten ved 0 °C i RPMI, tverrbundet på deres antigener og synliggjort med <125>j_geit-antimus-antistoff. Inkubasjoner av på-objektglass monterte vevsseksjoner for å merke antigen/reseptoren med 12^I_9P 120 ble utført i 5 ml's objektglassbeholdere med (10"<*> M) eller uten umerket gp 120 eller Mab OKT4A (10 ug/ml) (Ortho Diagnostics) som beskrevet ovenfor for membraner.
Datamaskinassistert overføring av autoradiografisk filmopasitet til kvantitative fargebilder ble utført. Ko-eksponering av standard kjente økninger av radioaktivitet med seksjoner av apehjernen genererte et lineært plott ( 4 = > 0,99) av log O.D. som funksjon av cpm, hvorfra den relative konsentrasjon av radioaktivitet kan ekstrapoleres på meningsfull måte. Celle-farging av hjerneseksjoner med thionin ble utført ved klassiske metoder og synliggjøring av reseptorer som lå oppå farget vev.
Eksempel 4
Eksperimenter ble utført for å bestemme fordelingen av T4-antigen på en rostral til caudal serie eller koronale seksjoner av ekornape-hjerne. Disse eksperimenter viser at der er påvise-lige nivåer av T4-monoklonalt antistoff-binding til cytoarkitek-tonisk meningsfulle områder i hjernestammen (f.eks. substantia nigra), men det slående mønster av kortikal anrikning er tydelig på hvert nivå i neuroaksen. 0KT8, et T-lymfocytt-styrt monoklonalt antistoff fra den samme underklasse som 0KT4, oppviser intet observerbart mønster. Generelt inneholder de superfisielle lagene inne i hjernebarken de tetteste konsentrasjoner av T4-antigenet; den frontale og perilimbiske hjernebark som ligger oppå amydala er spesielt reseptorrik gjennom alle de dype lag. Den hippokampale formasjon har den tetteste konsentrasjon av reseptorer i hjernen hos ape, rotte og menneske. Mørkfeltmikro-skopi av ekornape-seksjoner dyppet i fotografisk emulsjon avslørte at båndet med den tetteste reseptormerking ligger inne i de molekylære lag av den takkede gyrus og hippokampus proper (som inneholder meget få neuroner). Således synes reseptorene å være riktig fordelt over neuropilet (de neuronale forlengelser av dendritter og aksoner) eller de kan være lokalisert til et spesifikt subsett av ikke-fargede astrogliale celler.
Bevis for spesifisiteten av den kjemiske neuroanatomi og resultater som viser at T4 og viruskapsel-gjenkjennelsesmoleky-let ikke kan skjeldnes fra hverandre er blitt bestemt. Koronale seksjoner av rottehjerne viste et meget likt hjernebark/hippokampus-rikt mønster for reseptorfordeling, hva enten 0KT4 eller <125>j_gp 120 ble brukt for synliggjøring. Videre var dette mønster ikke åpenbart når inkubasjon fant sted i nærvær av umerket gp 120 (1 m), OKT4A (10 ug/ml) eller OKT4 (10 ^g/ml). Andre muse-Mabs rettet mot andre humane T-celleoverflateanti-gener innbefattet OKT8 og 0KT11 ga intet påviselig mønster på rottehjerne når det ble synliggjort ved <125>i-geit-antimus-IgG sekundært antistoff, på samme måte som der ikke var noen reproduserbar påviselig antigen/reseptor med sekundært antistoff alene.
Claims (1)
- Analogifremgangsmåte til fremstilling av et terapeutisk aktivt peptid med formelenhvor R<1> er en aminoterminalrest Cys eller er fraværende, R<2> er Ala eller D-Ala eller en aminoterminalrest Ala eller D- Ala eller fraværende, R<3> er Ser eller fraværende, R<4> er Thr eller en aminoterminalrest Cys eller fraværende, R<5> er Thr, Ser, Asn eller en aminoterminalrest Thr, Ser, Asn, R<6> er Thr eller Ser, R<7> er Thr, Ser, Arg eller Asn, R<8> er en Thr, Arg, Gly eller Ser eller karboksyterminalrest Thr, Arg, Gly, Ser eller Thr-amid eller fraværende, R<9> er en karboksyterminalrest Cys eller fraværende, eller et fysiologisk akseptabelt salt derav, karakterisert ved at a) den N-beskyttede form av karboksyterminalaminosyren festes til en harpiks på overflaten av polystyrenkuler; b) aminogruppen avbeskyttes; c) tilsetting av den neste aminosyre i beskyttet form og dicyklo-heksylkarbodiimid; d) repetisjon av trinn b) og c) for hver tilsatte aminosyre; e) vasking av kulene for å fjerne overskuddsreagens og uønskede produkter etter hvert trinn; og f) frigjøring av det fullførte peptid fra harpiksen.
Applications Claiming Priority (4)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| US86991986A | 1986-06-03 | 1986-06-03 | |
| US87858686A | 1986-06-26 | 1986-06-26 | |
| US4814887A | 1987-05-11 | 1987-05-11 | |
| PCT/US1987/001270 WO1987007613A1 (en) | 1986-06-03 | 1987-05-27 | Small peptides which inhibit binding to t-4 receptors and act as immunogens |
Publications (4)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| NO880479L NO880479L (no) | 1988-02-03 |
| NO880479D0 NO880479D0 (no) | 1988-02-03 |
| NO176022B true NO176022B (no) | 1994-10-10 |
| NO176022C NO176022C (no) | 1995-01-18 |
Family
ID=27367286
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| NO880479A NO176022C (no) | 1986-06-03 | 1988-02-03 | Analogifremgangsmåte til fremstilling av små peptider som hindrer binding til T4-reseptorer og virker som immunorganer |
Country Status (16)
| Country | Link |
|---|---|
| JP (1) | JP2680011B2 (no) |
| KR (1) | KR930008448B1 (no) |
| AU (1) | AU604719B2 (no) |
| CA (1) | CA1341066C (no) |
| DE (1) | DE3787927T2 (no) |
| DK (1) | DK173667B1 (no) |
| ES (1) | ES2061497T3 (no) |
| FI (1) | FI94352C (no) |
| HU (1) | HUT48907A (no) |
| IE (1) | IE61725B1 (no) |
| IL (1) | IL82719A (no) |
| MX (1) | MX172337B (no) |
| NO (1) | NO176022C (no) |
| NZ (1) | NZ220485A (no) |
| PT (1) | PT84992B (no) |
| WO (1) | WO1987007613A1 (no) |
Families Citing this family (2)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| AU2006261133B2 (en) * | 2005-06-23 | 2012-04-05 | Rapid Pharmaceuticals Ag | Therapeutic peptides and vaccines |
| CN101088557A (zh) | 2006-06-12 | 2007-12-19 | 天津市扶素生物技术有限公司 | 用于预防或治疗hiv感染的药用组合物及其应用 |
-
1987
- 1987-05-27 AU AU75408/87A patent/AU604719B2/en not_active Ceased
- 1987-05-27 KR KR1019880700115A patent/KR930008448B1/ko not_active IP Right Cessation
- 1987-05-27 HU HU873289A patent/HUT48907A/hu unknown
- 1987-05-27 CA CA000538202A patent/CA1341066C/en not_active Expired - Fee Related
- 1987-05-27 JP JP62503520A patent/JP2680011B2/ja not_active Expired - Fee Related
- 1987-05-27 WO PCT/US1987/001270 patent/WO1987007613A1/en active IP Right Grant
- 1987-05-28 NZ NZ220485A patent/NZ220485A/xx unknown
- 1987-05-28 IE IE138887A patent/IE61725B1/en not_active IP Right Cessation
- 1987-05-29 IL IL82719A patent/IL82719A/xx not_active IP Right Cessation
- 1987-06-02 PT PT84992A patent/PT84992B/pt unknown
- 1987-06-03 MX MX006751A patent/MX172337B/es unknown
- 1987-06-03 ES ES87304939T patent/ES2061497T3/es not_active Expired - Lifetime
- 1987-06-03 DE DE87304939T patent/DE3787927T2/de not_active Expired - Fee Related
-
1988
- 1988-02-02 DK DK198800532A patent/DK173667B1/da active IP Right Grant
- 1988-02-03 NO NO880479A patent/NO176022C/no unknown
- 1988-12-02 FI FI885630A patent/FI94352C/fi not_active IP Right Cessation
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| ES2061497T3 (es) | 1994-12-16 |
| NO880479L (no) | 1988-02-03 |
| CA1341066C (en) | 2000-08-01 |
| FI94352B (fi) | 1995-05-15 |
| JPH01502659A (ja) | 1989-09-14 |
| PT84992B (pt) | 1990-03-08 |
| DE3787927D1 (de) | 1993-12-02 |
| DK173667B1 (da) | 2001-05-28 |
| HUT48907A (en) | 1989-07-28 |
| NZ220485A (en) | 1989-08-29 |
| IL82719A (en) | 1992-11-15 |
| DE3787927T2 (de) | 1994-03-03 |
| NO880479D0 (no) | 1988-02-03 |
| FI885630A (fi) | 1988-12-02 |
| FI94352C (fi) | 1995-08-25 |
| IE871388L (en) | 1987-12-03 |
| JP2680011B2 (ja) | 1997-11-19 |
| AU604719B2 (en) | 1991-01-03 |
| IL82719A0 (en) | 1987-11-30 |
| DK53288A (da) | 1988-02-02 |
| KR880701247A (ko) | 1988-07-26 |
| FI885630A0 (fi) | 1988-12-02 |
| WO1987007613A1 (en) | 1987-12-17 |
| AU7540887A (en) | 1988-01-11 |
| PT84992A (en) | 1987-07-01 |
| IE61725B1 (en) | 1994-11-30 |
| KR930008448B1 (ko) | 1993-09-04 |
| NO176022C (no) | 1995-01-18 |
| DK53288D0 (da) | 1988-02-02 |
| MX172337B (es) | 1993-12-14 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| Pert et al. | Octapeptides deduced from the neuropeptide receptor-like pattern of antigen T4 in brain potently inhibit human immunodeficiency virus receptor binding and T-cell infectivity. | |
| US5834429A (en) | Small peptides which inhibit binding to T-4 receptors and act as immunogens | |
| US5589175A (en) | Peptides for induction of neutralizing antibodies against human immunodeficiency virus | |
| HU214439B (hu) | Eljárás HIV-fertőzések kezelésére alkalmas monoklonális antitestek és peptidek, valamint ezeket tartalmazó gyógyászati készítmények és vakcinák előállítására | |
| EP0249390A2 (en) | Synthetic peptides related to the HIV glycoprotein gp 120 | |
| US7541036B2 (en) | Human immunodeficiency virus type 1 (HIV-1) matrix (MA or p17) polypeptide capable of inducing anti-p17 antibodies that neutralize the proinflammatory activities of the MA protein | |
| JPS6327498A (ja) | Ｈｔｌｖ−ｉｉｉ／ｌａｖウイルス関連ペプチド | |
| AU1684495A (en) | Peptomers with enhanced immunogenicity | |
| EP0249394B1 (en) | Small peptides which inhibit binding to T-4 receptors and act as immunogens | |
| US5346989A (en) | Peptides for use in induction of T cell activation against HIV-1 | |
| AU733234B2 (en) | Conjugated peptides, immunological reagent containing same and use thereof for treatment of immunological disorders | |
| NO176022B (no) | Analogifremgangsmåte til fremstilling av små peptider som hindrer binding til T4-reseptorer og virker som immunorganer | |
| EP0594638A1 (en) | Peptides for use in induction of t cell activation against hiv-1 | |
| AP96A (en) | Small peptides which inhibit binding to T-4 receptors and act as immunogens. | |
| Palker et al. | Purification of envelope glycoproteins of human T cell lymphotropic virus type I (HTLV-I) by affinity chromatography | |
| JPH09500096A (ja) | ヒト免疫不全ウイルスに対する予防接種および中和抗体誘発に用いられるペプチド | |
| NO880446L (no) | Smaa peptider som inhiberer binding til t-4-reseptorer. | |
| FI99115C (fi) | T-4 reseptoreihin sitoutuvaa antigeeniä kohtaan suunnattujen vasta-aineiden kanssa reagoivia peptidejä ja niiden diagnostinen käyttö | |
| Syennerholm et al. | Vahlne et al. | |
| AU2004208648A1 (en) | Compositions and methods for treating infections |