NO155240B

NO155240B - Analogifremgangsmaate for fremstilling av terapeutisk aktive aroyl (propionyl- eller butyryl)-l-prolinderivater.

Info

Publication number: NO155240B
Application number: NO792849A
Authority: NO
Inventors: Francis Joseph Mcevoy; Jay Donald Albright
Original assignee: American Cyanamid Co
Priority date: 1978-09-05
Filing date: 1979-09-04
Publication date: 1986-11-24
Also published as: ZA793536B; IL57802A0; DE2934592C2; DD147236A5; NZ190995A; DE2934592A1; DK161198C; IL57802A; NO155240C; PT70025A; IE791682L; DK369079A; AR230624A1; ES483846A1; FI75152C; AR229953A1; GR73190B; DK161198B; EP0010347A1; NO792849L

Description

Denne oppfinnelse vedrører analogifremgangsmåte for fremstilling av nye substituerte w-aroyl(propionyl- eller butyryl)-L-proliner og estere derav som kan representeres ved den følgende generelle formel:

hvor prolingruppen er i L-konfigurasjon; n er null eller en;

R 3 er merkapto, benzoyltio, alkanoyltio med fra 2 til 4 karbonatomer eller grupper med formlene:

hvor R_ er hydrogen, fenyl eller C-^^alkyl, Rg er fenyl; R4 er hydrogen eller er fenyl eller C-^^alkyl i S-konfigurasjon; R(. er hydrogen eller alkyl med fra 1 til 4 karbonatomer; og ARYL er valgt fra gruppen bestående av 1-naftyl, 2-naftyl, 4-klor-l-naftyl, 4-metoksy-l-naftyl, 4-bifenyl, 5-indanyl, 4-indanyl og grupper med formelen

hvor Rg er valgt fra gruppen bestående av hydrogen, fluor,

klor, brom, trifluormetyl, fenoksy, halogenfenoksy, alkyl med fra 1 til 4 karbonatomer; alkoksy med fra 1 til 4 karbonatomer; R? er klor, fluor, brom, alkyl med opptil 4 karbonatomer eller alkoksy med opptil 4 karbonatomer; og m er 0, 1 eller

2. Egnede alkyl- og alkoksy-grupper er for eksempel metyl,

etyl, n-propyl, isobutyl, metoksy, etoksy, isopropoksy, sek.-

butoksy, etc, mens eksempler på halogen er fluor, klor og brom og eksempler på alkanoyltio er acetyltio, propionyltio, butyryltio og isobutyryltio. De nye forbindelsene fremstilt i henhold til foreliggende oppfinnelse har asymmetriske karbonatomer (som er vist med stjerner) og foreligger således i diastereoisomere former.

De nye substituerte w-aroyl(propionyl- eller butyryl)-L-proliner og estere derav er vanligvis oppnåelige som hvite

til gule krystallinske materialer som har karakteristiske smeltepunkter og absorpsjonsspektra, eller de er oppnåelig som hvite eller gule glass med karakteristiske absorpsjonsspektra. De er vanligvis løselige i mange organiske løsnings-midler så som lavere alkanoler, tetrahydrofuran , dioksan, kloroform og ligner.de.

Angiotensin II er et kraftig vasokonstriktorisk middel

som har vært delaktig som det hovedforårsakende middel ved etio-logien for renovaskulær hypertensjon. Angiotensin II blir dannet fra angiotensin I ved innvirkning av angiotensin-omdannende enzym. Angiotensin I er et biologisk inert dekapeptid spaltet fra blod-protein-angiotensinogenet ved innvirkning av enzymet renin [Oparil et al. New England J. of Med., 291, 389-457 (1974)]. Angiotensinogen og renin er også biologisk inerte. Angiotensinogen-omdannende enzym er også ansvarlig for inaktiveringen av bra-dykinin, et vasodilatorisk middel som har vært delaktig ved regu-lering av renal-funksjon (Erdos, Circulation Research 36, 24 7

(1975)). Midler som inhiberer angiotensin-omdannende enzym kan

derfor motvirke press-virkningen av angiotensin I siden den bare skyldes omdannelsen til angiotensin II. Disse midler kan anvendes terapeutisk ved behandling av former av renovaskulær og malig-nant hypertensjon og også andre former av angiotensin-avhengig hypertensjon [Gavras et al., New England J. of Med. 291, 817 (1974

(1974)].

De nye forbindelser som fremstilles i henhold til denne oppfinnelse inhiberer angiotensin-omdannende enzym og inhiberer således omdannelsen av angiotensin I til angiotensin II og er derfor nyttig ved redusering av hypertensjon, spesielt angiotensin-avledet hypertensjon hos forskjellige pattedyr-arter. Aktiviteten til de nye forbindelsene i henhold til denne oppfinnelse som hypo-tensive midler ble fastslått i to systemer som måler deres evne som inhibitor for angiotensin-omdannende enzym, nemlig en spekto-fotometrisk prøve av forbindelsene in vitro og ved måling av den blodtrykk-nedsettende virkning av forbindelsene i hypertensive rotter med renalt sammenpresset aorta.

Spekt ofotometrisk prøve for inhibitorer for angiotensin- omdannende enzym.

Aktiviteten in vitro for inhibering av det angiotensin-omdannende enzym (ACE) ble målt ved metoden til Cushman, D.W. og Cheung, H.S., Biochem. Pharmacol. 2£, 1637-1648 (1971), ved anvendelse av benzoyl-glycyl-histidyl-leucin som substrat. Reak-sjonsblandingen bestod av 50 ml kaliumfosfat (500 mM. , pH 10,2), 30 ml natriumklorid (2500 mM.), 25 ml med substrat (50 mM.), 30 til 50 ml av det urensede ekstrakt av ACE, 10 ml av test-forbindelsen (2,5 mM.) eller hjelpevæske og en egnet mengde med destil-lert vann for å gi et totalt volum på 250 ml. Denne reaksjons-blanding ble inkubert i 30 minutter ved 37°C og omsetningen ble så avsluttet ved tilsetning av 250 ml med IN saltsyre. Hippuri-syren ble så ekstrahert med 1,5 ml etylacetat ved hvirvel-blanding i 15 sekunder. Etter sentrifugering ble 1 ml av etylacetat-sjiktet pipettert inn i et nytt rør og inndampet til tørrhet.

Den ekstraherte hippurisyre ble så oppløst i 1 ml vann og mengden av denne syre ble så målt ved dens absorbering ved 228 nm. ACE ble ekstrahert fra kaninlunge-acetan-pulver (Pel-Freez, Biol. Inc.) ved å blande 5 g av pulveret i 50 ml fosfat-puffer (50 mM., pH 8,3) og det ble så sentrifugert ved 40.000 g i 30 minutter. Den over-flytende væske ble holdt ved 5°C og anvendt som enzymkilde. Aktiviteten til ACE-inhibitoren ble beregnet som prosent inhibering av ACE-aktivitet sammenlignet med kontroll-verdien for den spesi-elle prøve. En fulldose-respons-inhiberingskurve ble så oppført for å bestemme IC^^-verdien som kan defineres som den molare konsentrasjon av en forbindelse som vil inhibere ACE-aktiviteten 50%. Representative forbindelser i henhold til foreliggende oppfinnelse og deres IC,-Q-verdier, så som bestemt ved prosessen ovenfor, er angitt i tabell I nedenfor.

Måling av arterielt blodtrykk i hypertensive

rotter med renalt sammenpresset aorta.

Sprague-Dawley normotensive rotter av hankjønn og med en vekt på 300-325 g (Charles River Breeding Lab. Inc., Wilmington, Mass.) ble holdt på Purina Laboratory Chow og springvann etter ønske i 1-7 dager før anvendelse. Det ble indusert hypertensjon ved fullstendig ligatur-binding mellom aorta og utspringet for de renale arterier, i henhold til metoden til Rojo-Ortega, J. M. og Genest, J., A Method for Production of Experimental Hypertension in Rats, i Can. J. Physiol. Pharmacol. £6, 883-885 (1968), med modifikasjoner av de kirurgiske prosesser. Rottene ble således bedøvet med metoheksitolnatrium med 66 mg/kg kroppsvekt på intra-perinoneal måte, og ble lagt på deres høyre side. Det ble tatt et innsnitt like under ribbenene på deres venstre side. Med en mopp med bomullsende ble fettet skjøvet forsiktig tilbake for å frilegge den venstre nyre. Nyren ble holdt forsiktig mellom tom-melen og pekefingeren utenfor kropps-hulrommet. Det ble foretatt en fullstendig ligatur-binding mellom aorta og utspringet for de renale arterier med en silke-sutur No. -000. Det ble passet på

å unngå tilstopping av den høyre renale arterie. Såret ble så lukket med to sjikt ved anvendelse av en 4-0 polyglykolsyre-sutur på muskelen og sårklemmer på huden. Såret ble så påsprøytet time-rosal aerosol No. 3. Etter operasjonen ble rottene ført tilbake

til deres bur og forsynt med Purina Laboratory Chow og vann etter behag. Seks dager etter operasjonen ble de bevisste rotter fast-holdt på rotte-bord med elastisk tape. Hals-området ble lokal-bedøvet ved subkutan innsiving av 2%-ig lidocain. Etter at luft-rørene var kanyle-behandlet og rottene pustet spontant, ble den carotide arterie isolert og kanyle-behandlet med et nylon-kateter (innvendig diameter 0,381 mm, utvendig diameter 0,762 mm) som ble forbundet med et Statham P2 3Gb trykk-transdukter - Gold Brush registreringsapparat (Model 2400) for overvåking av blodtrykk. Test-forbindelsen ble oppløst i en liten mengde etanol og så for-tynnet til den ønskede konsentrasjon med saltløsning. Både løs-ningen av test-forbindelsen og hjelpevæsken alene ble. administrert oralt og disse ble kjørt parallelt ved hvert forsøk. Representative forbindelser fremstilt i henhold til foreliggende oppfinnelse ble ansett som aktive når de ble testet ved denne prosess.

De nye forbindelser fremstilt i henhold til foreliggende oppfinnelse er således funnet å være meget nyttige for nedsettelse av høyt blodtrykk hos pattedyr når de administreres i mengder som varierer fra ca. 1 mg til ca. 1000 mg pr. kg kroppsvekt pr. dag. En foretrukket dose-kur for optimale resultater vil være fra ca. 10 mg til ca. 300 mg pr. kg kroppsvekt pr. dag. Dose-kuren kan justeres for å tilveiebringe den optimale terapeutiske respons. Flere delte doser kan for eksempel administreres daglig eller dosen kan reduseres proporsjonalt etter behovet ved den terapeutiske situasjon. De aktive forbindelser blir fortrinnsvis administrert oralt, men de kan administreres på hvilken som helst be-kvem måte, så som ved intravenøs, intramuskulær eller subkutan administrasjon.

De nye forbindelser med formel (I) kan fremstilles i

samsvar med det følgende reaksjonsskjerna:

hvor n, R^, R^, R^ og ARYL er som tidligere angitt; X er klor, brom, jod, -S-R eller -OSC^R; hvor R er alkyl med 1 til 4 karbonatomer, fenyl, p-tolyl, benzyl, p-metoksybenzyl og lignende; og Y er en karbonyl-aktiverende rest av et peptid-koblingsreagens, klor, brom eller en gruppe med formel:

hvor R<1> er hydrogen, alkyl med opptil 4 karbonatomer, fenyl, p-tolyl, p-metoksybenzyl, 2 , 4 , 6-trimetylbenzyl, trimetylsilyl eller 2-tri-

metylsilyletyl, og R5 er som foran angitt, og prolingrupper er

i L-konfigurasjon.

I samsvar med reaksjonsskjemaet ovenfor blir karbonyl-gruppen til en passende substituert u-aroylalkansyre (IV) omdannet til et karbonyl-aktivert derivat (V) eller, i samsvar med re-aks jonssk jemaet , blir derivatene (II) (Y=OH) og (III) (Y=OH) omdannet til karbonyl-aktiverte derivater. De karbonyl-aktive derivater i (V), (II) og (III) blir fremstilt ved omsetning av de frie syrer under vanlige reaksjonsforhold for aktivering av karbonylgruppene i N-beskyttedé aminosyrer. For eksempel blir blandede anhydrider fremstilt in situ ved behandling av de frie syrer med baser så som trialkylaminer (trietylamin og lignende), N-metylmorfolin, pyridin, N-metylpiperidin og lignende for å oppnå amin-saltene som blir omdannet med lavere alkylklorformiater så som etylklorformiat, t-butyl-klorformiat, isobutylklorformiat, benzylklorformiat, trityl-klorformiat og lignende. Alternativt blir de frie syrer omsatt med N,N<1->karbonyldiimidazol eller be-slektede peptid-koblingsreagenser så som N,N'-karbonyl-1,2,4-triazol for å danne aktiverte karbonyl-derivater. Derivater hvor Y er O-hydroksysuccinimid eller O-hydroksyftalimid blir fremstilt ved omsetning av de frie syrer med N-hydroksysuccinimid eller N-hydroksyftalimid i nærvær av et karbodiimid så som N,N-dicykloheksylkarbodiimid. Derivater hvor Y er en rest av et peptid-koblingsreagens eller en aktivert ester blir omsatt med L-prolin eller L-prolin-derivater under konvensjonelle koblingsforhold.

Amidene blir oppnådd ved omsetning av et syrehalogenid av (IV) eller fortrinnsvis et karbonyl-aktivert derivat (V) med L-prolin eller en ester av L-prolin så som en alkyl(C^-C^)ester, benzylester, 2,4,6-trimetylbenzylester og andre L-prolin-derivater med en beskyttet syre-funksjon som blir fjernet i et senere trinn. Reaksjonsforholdene for dannelsen av de karboksyl-aktive^te derivater og forholdene for kobling til L-prolin eller L-prolin-derivatene, så som tid, temperatur, løsningsmidler, etc. er velkjent i industrien. Vanligvis blir omsetningene utført ved 0°C til 50°C i løsningsmidler så som tetrahydrofuran, dioksan, N,N-di-metylformamid, dimetylsulfoksyd, toluen og lignende i 1 til 24 timer.

Ytterligere klargjøring av betydningen av de uttrykk som er anvendt her blir gitt i den følgende tabell hvor typiske peptid-koblingsreagenser er oppført i den venstre kolonne og de tilsvarende karbonyl-aktiverende rester er oppført i den høyre kolonne :

Tallrike andre peptid-koblingsreagenser er tilgjengelig og velkjent i industrien, så som umettede etere, a-klorvinyletyl-eter, etoksyacetylen, keteniminer og ketener, ynaminer, acyloksy-fosfonium-ioner, EEDQ, silisiumtetraklorid, 1,2-oksazolium-salter og lignende. Alle disse tilveiebringer en karbonyl-aktiverende rest (-Y) og kan lett anvendes for omdannelse av (IV) til (V) når Y skal være "en karbonyl-aktiverende rest av et peptid-koblingsreagens". Reaksjonsforholdene for slike omdannelser er velkjent i industrien og kan lett finnes-i slik litteratur som SYNTHESIS, sept. 1972, s. 453-463 av Klausner & Bodansky.

Omdannelsen av mellomproduktene (V) til de tilsvarende 3-(X-substituert)-propion eller 4-(X-substituert)-smørsyrederi-vater (II) hvor X består av de ovenfor definerte fjernbare grupper, oppnås lett ved konvensjonelle metoder som er velkjent i industrien. For eksempel kan klor-, brom- og jod-derivatene fremstilles ved å behandle en forbindelse med formel (V) med et halo-generingsmiddel så som klor, brom, N-jodsuccinimid og lignende i et løsningsmiddel så som kloroform, karbontetraklorid, eddiksyre eller dioksan ved 25-75°C i 12-24 timer. Disse forbindelser hvor X er -S-R kan oppnås fra halogen-derivatene ved behandling med et alkalimetallmerkaptid under vanlige forhold. De tilsvarende derivater hvor X=S02R kan oppnås ved oksydasjon av de tilsvarende merkapto-derivater med oksydasjonsmidler så som meta-perjodsyre og

lignende i et inert løsningsmiddel ved 10-100°C i 1-24 timer. Om ønskes kan u-aroylalkansyrene (IV) kobles til et L-prolin-derivat

for å gi mellomprodukter (V) som så omdannes til produkter (I) over mellomproduktene (II) og (III). Alternativt kan mellomproduktene (V) hvor Y er en karboksyl-beskyttende gruppe omdannes til mellomproduktene (II) eller (III) ved hvilket punkt den beskyttende gruppe kan fjernes og mellomproduktene (II) eller (III)

(Y=OH) kobles til L-prolin eller L-prolin-derivater.

oi-arolylalkansyrene (IV) hvor R4 er forskjellig fra hydrogen, har ett asymmetrisk karbonatom og D- og L-isomerene kan fremstilles ved spalting av den racemiske blanding. - Aktivering

av karboksylgruppen i de spaltede isomerer gir så forbindelser med struktur (V) hvori karbonatomet som bærer R4~gruppen har en-ten D- eller L-konfigurasjon. Omdannelsen av de spaltede forbindelser med struktur (V) til de reaktive mellomprodukter (VI') gir forbindelser som er diastereoisomerer. Hver diastereoisomer kan så omdannes til forbindelser med struktur (III) så som vist i re-aks jonssk jemaet . Alternativt kan racemiske forbindelser med struktur (IV) hvor R4 er lavere alkyl kobles til L-prolin eller L-prolin-derivater for å gi forbindelser med struktur (V) som foreligger som diastereoisomere former og kan separeres på kon-vensjonell måte. For eksempel kan de diastereoisomere former av 1-(3-benzoyl-2-metylpropionyl)-L-prolin separeres ved preferen-siell krystallisering av én diastereoisomer og isolering av den andre diastereoisomer fra mor-væskene. De reaktive mellomprodukter 0

ii

(II) blir omsatt med anionet av en tiosyre med formel Rg-C-SH

hvor Rg er fenyl, alkyl med opptil 3 karbonatomer eller andre tiolerende reagenser (H-R^). Egnede anioner av tiosyrer og tiolerende reagenser som er nyttige ved forskyvningsreaksjoner, er slike fra alkalimetaller (K<+>, Na<+>), jordalkalimetaller så som kalsium og magnesium, og organiske baser så som ammoniakk, trialkylaminer og lignende. Fjerning av acylgruppen ved omsetning med hydroksylamin, ammoniumhydroksyd eller fortynnede uorganiske baser gir forbindelser med struktur (I) hvor R^ er merkapto.

Under passende forhold kan mellomprodukter (II) og (III) hvor X

er -S-R og Y er

omdannes direkte til produkter (I) hvor R^ er -SH ved fjerning av en tio-beskyttende gruppe. For eksempel kan derivater hvor R er en tio-beskyttende gruppe så som t-butyl, p-metoksybenzyl, PhCH202CS- og lignende, deblokkeres under sure forhold [HBr-HOAc, CF-^C^H, (CF-^C^) 2H9 °9 lignende] som er kjent i industrien. Derivater (III) hvor Y er

og R^ er som tid-

ligere angitt og R' er en karboksyl-beskyttende gruppe, kan omdannes til produkter (I) (R,_=H) ved fjerning av den karboksyl-beskyttende gruppe under konvensjonelle forhold. Generelt fore-trekkes karboksyl-beskyttende grupper som blir fjernet under sure forhold. For eksempel blir t-butylestere spaltet ved behandling med trifluoreddiksyre eller vandig trifluoreddiksyre ved 0 til 50°C i 1 til 24 timer. Trimetylsilyl og 2-trimetylsilyletyl blir fjernet under konvensjonelle forhold som er kjent i industrien. Omsetningene illustrert- i reaksjonsskjemaet kan utføres med estere (R,-= lavere alkyl) for å gi produkter (I) hvor R,, er lavere alkyl. I produktene (I) (hvor R,, er tert-butyl) kan estergruppen fjernes i nærvær av trifluoreddiksyre for å gi de frie syre-derivater i (I) .

Oppfinnelsen vil bli beskrevet mer detaljert i forbindelse med de følgende spesifikke eksempler.

Eksempel 1 (utgangsstoff) 2- metyl- 3-( m- trifluormetylbenzoyl) proplonsyre Til en løsning av 60,0 g med a-(m-trifluormetylfenyl)-4-morfolinacetonitril i 200 ml tetrahydrofuran blir det satt 10 ml av 30%-ig kaliumhydroksyd i etanol, fulgt av rask tilsetning av 22,0 ml metakrylnitril (eksotermisk). Blandingen blir rørt ved romtemperatur natten over og løsningsmidlet blir fjernet. Til residuet blir det satt 200 ml eddiksyre og 20 ml vann og denne blanding blir tilbakeløpsbehandlet i 2 timer. Løsningsmidlet blir fjernet i vakuum og 200 ml 6N saltsyre settes til residuet. Denne blanding blir tilbakeløpsbehandlet i 18 timer, avkjøles og ekstraheres med diklormetan. Diklormetan-ekstraktet føres gjennom en kolonne med vannholdig magnesiumsilikat. Eluatet konsentreres i vakuum og krystalliseres fra diklormetan-heksan og dette gir 55 g med krystaller med annenklasses hvitfarve. Disse krystaller oppløses i diklormetan og ekstraheres med mettet natriumbikarbonat-løsning. Det vandige ekstrakt surgjøres med saltsyre og ekstraheres med diklormetan. Det organiske ekstrakt føres gjennom vannholdig magnesiumsilikat og eluatet konsentreres. Residuet krystalliserers fra diklormetan-heksan, og dette gir 39 g av det ønskede produkt som krystaller av annenklasses hvitfarve med sm. p. 90-91°C.

Eksempel 2 (utgangsstoff) 3- ( m- fluorbenzoyl)-2- metylpropionsyre

En løsning av 48,0 g med a-(m-fluorfenyl)-4-morfolinace-tonitril i 200 ml tetrahydrofuran blir omsatt som beskrevet i eksempel 1, og dette gir 34 g av det ønskede produkt som krystaller av annenklasses hvit farve med sm.p. 192-194°C.

Eksempel 3 (utgangsstoff) 1- ( 3- benzoylpropionyl)- L- prolin- metylester En blanding av 3,56 g 3-benzoylpropionsyre og 3,24 g N,N-karbonyldiimidazol i 30 ml tetrahydrofuran blir omrørt ved romtemperatur i 30 minutter. En porsjon på 3,32 g med L-prolin-metylester-hydroklorid tilsettes og blandingen røres ved romtemperatur ± 2 h dager. Løsningsmidlet fjernes i vakuum. Vann og diklormetan settes til residuet og det organiske sjikt separeres, vaskes med vann, så med 0,1 N saltsyre og tørkes over magnesiumsulfat. Løsningsmidlet fjernes i vakuum, og dette gir 5,0 g av det ønskede produkt som krystaller av annenklasses hvitfarve, sm. p. 66-70°C.

Eksempel 4 (utgangsstoff) 3- brom- 3-( p- fluorbenzoyl) propionsyre

Til en løsning av 19,62 g med 3-(p<->fluorbenzoyl)propionsyre i 100 ml eddiksyre settes det 16 g brom. Blandingen røres i 18 timer og så fjernes løsningsmidlet. Is og vann settes til residuet og blandingen filtreres. Det faste stoff vaskes med vann og oppløses så i 80 ml aceton. Løsningen fortynnes med 400 ml heksan og gis anledning til å inndampes, ved romtemperatur,

til et volum på 125 ml. En porsjon på 100 ml med heksan tilsettes og blandingen filtreres, og dette gir 24,6 g av det ønskede produkt som lysebrune krystaller, sm. p. 131-135°C..

Eksempel 5 (utgangsstoff) 2- metyl- 3-( benzoyl) propionsyre

Til en løsning av 40,4 g med a-(fenyl)-4-morfolinaceto-nitril i 400 ml tetrahydrofuran settes det 10 ml mec 30%-ig kaliumhydroksyd i etanol. En porsjon på 21 ml med metakrylnitril tilsettes dråpevis (eksotermisk) og blandingen røres i 18 timer. Løsningsmidlet fjernes i vakuum og residuet oppløses i eter-aceton og filtreres. Filtratet konsentreres og residuet finfordeles med heksan, bråkjøles og filtreres, og dette gir 51,1 g med 4-metyl-2-morfolin-2-(fenyl)glutaronitril som hvite krystaller, sm. p. 93-98°C.

En blanding av 5,0 g med 4-metyl-2-morfolin-2-(fenyl)-glutaronitril, 26 ml eddiksyre og 2,9 ml vann tilbakeløpsbehand-les i 1 time. Løsningsmidlet fjernes i vakuum og den gjenværende gummi fordeles mellom vann og diklormetan. Diklormetanet separeres, vaskes med vann, tørkes over magnesiumsulfat og løsningsmidlet fjernes, og dette gir 2-metyl-3-(benzoyl)propionitril som en gummi. En porsjon på 30 ml med konsentrert saltsyre settes til denne gummi, blandingen tilbakeløpsbehandles i 1 time, avkjøles, filtreres og det faste stoff vaskes med vann, og dette gir det ønskede produkt som hvite krystaller, sm. p. 143-145°C.

Eksempel 6 (utgangsstoff) 2- metyl- 3-( p- trifluormetylbenzoyl) propionsyre Til en løsning av 54,0 g med a-(p-trifluormetylfenyl)-4-morfolinacetonitril i 400 ml tetrahydrofuran settes 10 ml med 10 %-ig kaliumhydroksyd i etanol. En porsjon på 28 ml med metakrylnitril tilsettes dråpevis (eksotermisk) og blandingen røres ved romtemperatur i 18 timer. Løsningsmidlet fjernes. Den gjenværende olje oppløses i eter og løsningen vaskes med vann, natriumklorid-løsning og tørkes over magnesiumsulfat. Løsningsmidlet fjernes og residuet krystalliseres fra heksan inneholdende en liten mengde eter. Det gummiaktige gule faste stoff oppløses i aceton, oppvarmes til koking og heksan tilsettes inntil krystaller utsepareres. Disse krystaller utvinnes ved bråkjøling og filtrering og omkrystallisering to ganger fra aceton-heksan, og dette gir 16,1 g med 4-metyl-2-morfolino-2-(p-trifluormetylfenyl)glutaro-nitril som hvite krystaller, sm. p. 156-159°C.

En blanding av 35 g med 4-metyl-2-morfolino-2-(p-tri-fluormetylfenyl)glutaronitril i 170 ml eddiksyre og 17,5 ml vann tilbakeløpsbehandles i 2 timer. Løsningsmidlet fjernes og residuet finfordeles med heksan-eter, og dette gir et oransje fast stoff. Dette faste stoff omkrystalliseres fra aceton-heksan, hvilket gir 17,7 g med 2-metyl-3-(p-trifluormetylbenzoyl)propio-nitril som gule krystaller, sm. p. 94-96°C.

En blanding av 13,0 g med 2-metyl-3-(p-trifluormetylbenzoyl) propionitril i 130 ml konsentrert saltsyre tilbakeløpsbehand-les i 5 timer, bråkjøles så og filtreres. Det faste stoff vaskes med vann og dette gir 13,7 g av et ønskede produkt som krystaller av annenklasses hvitfarve, sm. p. 116-119°C.

Eksempel 7 (utgangsstoff) 2- metyl- 3- ( benzoyl) propionsyre- hydroksysuccinimid- ester Til en blanding av 12,86 g med 2-metyl-3-(benzoyl)propionsyre (eksempel 5) og 7,71 g med N-hydroksysiccinimid i 70 ml dioksan settes en løsning av 13,8 g dicykloheksylkarbodiimid i 50 ml dioksan. Blandingen røres ved romtemperatur i 18 timer, filtreres og filtratet konsentreres i vakuum til en olje. Denne olje krystalliseres med heksan inneholdende en liten mengde eter. Det faste stoff omkrystalliseres fra diklormetan, og dette gir 12,0 g av det ønskede produkt som hvite krystaller, sm. p.112-115°C.

Eksempel 8 (utgangsstoff) 1-( 3- benzoyl- 2- metylpropionyl)- L- propin Til en løsning av 4,8 g med L-prolin og 6,9 7 g natriumbikarbonat i 170 ml vann settes en oppslemning av 12,0 g med 2-metyl-3-(benzoyl)propionsyre-hydroksysuccinimid-ester (eksempel 7) og blandingen røres ved romtemperatur i 18 timer. Volumet reduseres 50% i vakuum og surgjøres, under avkjøling, med saltsyre. Blandingen ekstraheres med diklormetan. Det organiske ekstrakt vaskes med natriumklorid-løsning, tørkes over magnesiumsulfat og løsningsmidlet fjernes i vakuum, og dette gir en gummi. Denne gummi oppløses i 60 ml varm eddiksyre, det tilsettes 5 ml konsentrert saltsyre og mens det avkjøles tilsettes vann inntil løsning-en er uklar. Bråkjøling og filtrering gir et fast stoff som omkrystalliseres fra aceton-diklormetan, og dette gir det ønskede produkt som hvite krystaller, sm. p. 218-220°C (betegnet isomer

A) .

Morvæsken hvorfra isomer A krystalliseres konsentreres til et glass. Glasset renses ved kromatografi for å gi et glass (betegnet isomer B). Disse to isomerene betegnet A og B er de to diastéreoisomerer i hvilke karbonatomet som bærer 2-metyl-gruppen er i R- eller S-konfigurasjonen.

Eksempel 9 (utgangsstoff) 3- acetyltio- 3-( 4- fluorbenzoyl) propionsyre En blanding av 2,75 g med 3-brom-3-(p-fluorbenzoyl)-propionsyre (eksempel 4), 2,3 g kaliumtioacetat og 40 ml acetonitril blir rørt ved romtemperatur i 6 timer. Blandingen filtreres og filtratet konsentreres i vakuum. Residuet blandes med vann og ekstraheres med diklormetan. Det organiske ekstrakt vasked med vann, tørkes over magnesiumsulfat og løsningsmidlet fjernes i vakuum, og dette gir det ønskede produkt som en gummi.

Eksempel 10 (utgangsstoff) 1-( 3- benzoyl- 3- brom- 2- metylpropionyl)- L- prolin Til en blanding av 1,25 g med 1-(3-benzoyl-2-metylpropionyl)-L-prolin (isomer A fra eksempel 8) i 30 ml eddiksyre settes det 0,7 g brom i 10 ml eddiksyre. Blandingen røres ved romtemperatur i 18 timer, løsningsmidlet konsentreres i vakuum til halvt volum og blandingen helles inn i is og vann. Denne blanding ekstraheres med diklormetan. Det organiske ekstrakt vaskes med vann, så med natriumklorid-løsning, tørkes over magnesiumsulfat og løsningsmidlet fjernes i vakuum, og dette gir en gummi. Denne gummi oppløses i diklormetan, heksan tilsettes og løsnings-midlet fjernes ved romtemperatur, og dette gir et hvitt glass. Dette glass kromatograferes på en silikagelkolonne med etylacetat-heksan-eddiksyre (75:25:2), hvilket gir 1,25 g av det ønskede produkt som et hvitt glass (3-brom-derivat av isomer A).

På lignende måte omsettes 1-(3-benzoyl-2-metylpro<p>ionyl)-L-prolin (isomer B fra eksempel 8) med brom i eddiksyre, hvilket gir et glass (3-brom-derivat av isomer B).

Eksempel H

1- ( 3- acetyltio- 3- benzoyl- 2-( S) - metylpropionyl) - L- prolin Til en suspensjon av 0,47 g kaliumtioacetat i 10 ml etanol settes 1,25 g med 1-(3-benzoyl-3-brom-2-(S)-metylpropionyl)-L-prolin (eksempel 10 - 3-brom-derivat av isomer A). Blandingen rø-res i 18 timer, løsningsmidlet fjernes i vakuum og residuet fordeles mellom diklormetan og vann. Det organiske sjikt vaskes med vann, så med natriumklorid-løsning og tørkes over magnesiumsulfat, Løsningsmidlet fjernes i vakuum, hvilket gir et gult glass som oppløses i 10 ml etanol. En <p>orsjon på 0,47 g med kaliumtioacetat tilsettes og ovennevnte fremgangsmåte gjentas og dette gir et gult glass. Dette glass renses ved kromatografi på en silikagel-kolonne med etylacetat-heksan-eddiksyre (75:25:2), hvilket gir 0,2 8 g av det ønskede produkt som et gult glass.

På lignende måte omsettes 1-(3-benzoyl-3-brom-2-(S)-metylpropionyl) -L-prolin (eksempel 11, 3-brom-derivat av isomer B) med kaliumtioacetat, hvilket gir et glass.

Eksempel <12> (utgangsstoff) 3-( p- klorbenzoyl) propionsyre- hydroksysuccinj" id- ester Til en blanding av 10,7 g med 3-(p-klorbenzoyl)propionsyre og 5,75 g N-hydroksysuccinimid i 100 ml dioksan settes 10,3

g dicykloheksylkarbodiimid. Blandingen røres ved romtemperatur i 3 timer og kjøles så i 18 timer. Filtrering og inndampiiig av filtratet gir et residuum som gnis med petroleter (k.p. 30-60°C), hvilket gir et gummiaktig lysebrunt fast stoff. Dette faste stoff oppløses i 50 ml diklormetan. En porsjon på 50 ml med petroleter (k.p. 30-60°C) tilsettes og dette frembringer uklarhet. Denne

blanding avkjøles og det ønskede produkt utvinnes ved filtrering som hvite krystaller, sm. p. 121-123°C.

Eksempel 13 (utgangsstoff) 3-( p- fluorbenzoyl) propionsyre- hydroksysuccinimid- ester Til en løsning av 25,0 g med 3-(p-fluorbenzoyl)propionsyre og 14,7 g N-hydroksysuccinimid i 14 0 ml dioksan settes en løsning av 26,4 g dicykloheksylkarbodiimid i 100 ml dioksan. Blandingen røres ved romtemperatur i 18 timer, filtreres og filtratet inndampes til tørrhet i vakuum, og det blir tilbake en rød olje. Denne olje utgnis med heksan og dette gir et rødt fast stoff. Dette faste stoff oppløses i 200 ml diklormetan og 200 ml heksan tilsettes og dette frembringer uklarhet. Blandingen av-kjøles i et is-bad i 2 timer, og dette gir det ønskede produkt som hvite krystaller, sm. p. 130-132°C.

Eksempel 14 (utgangsstoff) 3- benzoylpropionsyre- hydroksysuccinimid- ester Til en partiell løsning av 5 3,4 g 3-benzoylpropionsyre og 34,5 g N-hydroksysuccinimid i 32 5 ml dioksan settes en løsning av 61,8 g dicykloheksylkarbodiimid i 225 ml dioksan. Blandingen røres ved romtemperatur i 18 timer, filtreres og filtratet inndampes til tørrhet i vakuum. Residuet utgnis med heksan og filtreres, hvilket gir et fast stoff som oppløses i 700 ml diklormetan og filtreres. En porsjon på 700 ml heksan tilsettes til filtratet og dette frembringer uklarhet. Avkjøling frembringer et fast stoff som utvinnes ved filtrering og vaskes med 250 ml diklormetan-heksan (1:1), hvilket gir det ønskede produkt som hvite krystaller, sm. p. 130-132°C.

Eksempel 15 (utgangsstoff) 1-( 3- benzoylpropionyl)- L- prolin

Til en løsning av 25,5 g L-prolin og 37,3 g natriumbikarbonat i 800 ml vann settes en oppslemning av 61,0 g 3-benzoylpropionsyre-hydroksysuccinimidester (eksempel 14) i 800 ml etanol. Blandingen konsentreres til halvparten av dens volum, avkjøles og surgjøres med konsentrert saltsyre. Blandingen ekstraheres med diklormetan og ekstraktet vaskes med vann, mettet natriumklorid og tørkes over magnesiumsulfat. Løsningsmidlet fjernes under vakuum og dette gir en oransje gummi som utgnis til et fast stoff med eter inneholdende litt diklormetan. Dette faste stoff omkrystalliseres fra 250 ml aceton ved forskyvning med heksan. Avkjøl-ing i 2 timer gir 32,6 g av det ønskede produkt som hvite krystaller, sm. p. 95-97°C.

Eksempel 16 (utgangsstoff) l-[ 3- ( 4- fluorbenzoyl) propionyl]- L- prolin Til en løsning av 10,6 g L-prolin og 15,5 g natriumbikarbonat i 370 ml vann settes en oppslemning av 26,9 g 3-(p-fluorbenzoyl ) propionsyre-hydroksysuccinimid-ester (eksempel 13) i 370 ml etanol. Blandingen behandles som beskrevet i eksempel 15, hvilket gir 13,1 g av det ønskede produkt som hvite krystaller, sm. p. 127-129°C.

Eksempel 17 (utgangsstoff) 1-[ 3- ( 4- klorbenzoyl) propionyl]- L- prolin Til en løsning av 2,30 g L-prolin og 3,36 g natriumbikarbonat i 50 ml vann settes en partiell løsning av 5,96 g 3-(p-klorbenzoyl)propionsyre-hydroksysuccinimid-ester (eksempel 12) i 60 ml etanol. Fremgangsmåten fra eksempel 15 følges, og dette gir 3,37 g av det ønskede produkt, sm. p. 137-138°C.

Eksempel 18 (utgangsstoff) 1-[ 3- brom- 3-( 4- fluorbenzoyl) propionyl]- L- prolin Til en løsning av 10,26 g 1-[3-(4-fluorbenzoyl)propion-yl] -L-prolin (eksempel 16) i 100 ml eddiksyre settes 3 dråper med 30 %-ig hydrogenbromid i eddiksyre. En løsning av 5,6 g brom i

20 ml eddiksyre tilsettes så dråpevis og blandingen røres ved romtemperatur natten over. Blandingen inndampes til 1/3 av dens volum, helles inn i is og vann og ekstraheres med diklormetan. Det organiske ekstrakt vaskes to ganger med vann og så med saltløsning, tørkes over magnesiumsulfat og inndampes til tørrhet i vakuum ved moderat oppvarming, hvilket gir et hvitt glass. Dette glass opp-skrapes fra kolben og dette gir 12,2 g med hvitt pulver. Dette pulver oppløses i etylacetat-heksan-eddiksyre (75:25:2), anbringes på en silikagel-kolonne av størrelse 38,1 mm x 508 mm og elueres med det samme løsningsmiddel-system, og det tas ut kutt på 100 ml etter forhåndsuttak på 300 ml og det holdes tilbake et volum på 400 ml. Kutt 2, 5 og 6 kombineres og kolonne-behandles på nytt på samme måte. Kutt 2 gir det ønskede produkt som 2,0 g av

et hvitt glass.

Eksempel 19 (utgangsstoff) 1-( 3- brom- 3- benzoylpropionyl)- L- prolin Til en løsning av 8,25 g 1-(3-benzoylpropionyl)-L-prolin (eksempel 15) i 80 ml eddiksyre settes 5 dråper med 30 %-ig hydrogenbromid i eddiksyre, fulgt av 4,80 g brom i 20 ml eddiksyre. Blandingen røres ved romtemperatur i 18 timer, inndampes til 1/3 av dens volum, helles inn i is og vann og ekstraheres med diklormetan. Det organiske ekstrakt vaskes med vann og saltløsning, tørkes over magnesiumsulfat og inndampes til tørrhet, hvilket gir det ønskede produkt som 10,3 g med et hvitt glass.

Eksempel 2 0

1-( 3- acetyltio- 3- benzoylpropionyl)- L- prolin Til en rørt blanding av 1,25 g kaliumtioacetat i 20 ml etanol settes en løsning av 3,54 g 1-(3-brom-3-benzoylpropionyl)-L-prolin (eksempel 19) i 20 ml etanol. Blandingen røres ved romtemperatur i 2 timer. Blandingen konsentreres til tørrhet under vakuum og residuet fordeles mellom diklormetan og vann. Diklormetan-sjiktet vaskes med mettet natriumklorid-løsning og tørkes over magnesiumsulfat. Løsningsmidlet fjernes under vakuum, hvilket gir 2,9 g av produktet som et glass. En prøve på 2,3 g kromatograferes over silikagel med løsningsmiddel-systemet etylacetat-heksan-eddiksyre (75:25:2), og dette gir 1,0 7 g med produkt som et lysegult glass.

Eksempel 21

1-( 3- benzoyltio- 3- benzoylpropionyl)- L- prolin Til 440 g natriumhydrid i olje-dispersjon (vasket to ganger med heksan) settes en løsning av 1,60 g tiobenzosyre i 25 ml etanol. Blandingen røres i 30 minutter og så tilsettes 3,54 g 1-(3-brom-3-benzoylpropionyl)-L-prolin og blandingen røres ved romtemperatur i 18 timer. Fremgangsmåten fra eksempel n følges, og dette gir det ønskede produkt som et glass.

Eksempel 22

1-[ 3- acetyltio- 3-( 4- fluorbenzoyl) propionyl]- L- prolin Til en løsning av 3,7 g 1-[3-brom-3-(4-fluorbenzoyl)-propionyl]-L-prolin (eksempel 18) i 37 ml etanol settes 1,37 g kaliumtioacetat. Fremgangsmåten fra eksempel n følges, og dette

gir det ønskede produkt som 1,02 g av et glass.

Eksempel 2 3

1-[ 3- benzoyltio- 3-( 4- fluorbenzoyl) propionyl]- L- prolin Til 440 mg natriumhydrid i olje-dispersjon (vasket to ganger med heksan) settes dråpevis en løsning av 1,60 g tiobenzosyre i 25 ml etanol. Blandingen røres ved romtemperatur i 1 time og 3,7 g 1-[3-brom-3-(4-fluorbenzoyl)propionyl]-L-prolin (eksempel 18) tilsettes. Fremgangsmåten fra eksempel 11 følges, og dette gir det ønskede produkt som 3,81 g av et hvitt glass.

Eksempel <2>4 (utgangsstoff) 1-[ 3-( 4- brombenzoyl) propionyl]- L- prolin- tert.- butyl- ester En løsning av 1,285 g p-brombenzoylpropionsyre og 0,50 ml trietylamin i 25 ml tetrahydrofuran røres i et is-salt-bad ved

-8°C. En løsning av 0,4 8 ml etylklorkarbonat i 5 ml tetrahydrofuran tilsettes dråpevis og blandingen røres ved -5°C i 30 minutter. En løsning av 855 mg t-butylprolin i 10 ml tetrahydrofuran

tilsettes dråpevis, løsningen røres i is-salt-badet i 30 minutter og hensettes så ved romtemperatur i 30 minutter. Blandingen helles inn i is og. vann, ekstraheres med diklormetan og det organiske ekstrakt vaskes med mettet vandig natriumbikarbonat, vann, så IN saltsyre og tørkes over magnesiumsulfat og inndampes i vakuum til. tørrhet, hvilket etterlater en olje. Denne olje krystalliseres fra heksan inneholdende en liten mengde eter, og dette gir et fast stoff med annenklasses hvitfarve som omkrystalliseres fra aceton-heksan for å gi det ønskede produkt som 505 mg med hvite krystaller, sm. p. 70-71°C.

Eksempel 2<5> (utgangsstoff) 1-[ 3- ( 4- brombenzoyl) propionyl]- L- prolin- metylester En løsning av 5,14 g p-brombenzoylpropions^re og 2,78 ml trietylamin i 50 ml tetrahydrofuran røres og avkjøles' til -15°C i et metanol-is-salt-bad. En løsning av 1,9 ml etylklorkarbonat i 10 ml tetrahydrofuran tilsettes dråpevis og blandingen røres ved -10°C i 30 minutter.

En løsning av 3,32 g metylprolin-hydroklorid i 50 ml metylenklorid behandles med 2,78 ml trietylamin i 15 minutter og filtreres så. Filtratet settes dråpevis til løsningen ovenfor, idet temperaturen holdes under -5°C. Blandingen røres i badet i 30 minutter og hensettes så for å oppnå romtemperatur i 1 time. Blandingen helles inn i 300 ml vann og ekstraheres med diklormetan. Det organiske ekstrakt vaskes med mettet vandig natriumbikarbonat, vann, så med IN saltsyre, tørkes over magnesiumsulfat og inndampes til en olje. Denne olje utgnis til et fast stoff med petroleter (k.p. 30-60°C) og omkrystalliseres så fra aceton-heksan, og dette gir det ønskede produkt som 2,09 g med hvite krystaller, sm. p. 84-86°C.

Eksempel 2- 6 (utgangsstof f) 3-( 4- brombenzoyl) propionsyre- hydroksysuccinimid- ester En løsning av 41,2 g dicykloheksylkarbodiimid i 150 ml dioksan settes til en partiell løsning av 51,4 g p-brombenzoylpropionsyre og 2 3,0 g N-hydroksysuccinimid i 250 ml dioksan. Blandingen røres ved romtemperatur i 18 timer, røres så i et is-bad og filtreres, og filtratet inndampes i vakuum til et residuum. Dette residuum findeles i heksan og utgnis til et fast stoff. Dette faste stoff oppløses i 130 ml diklormetan, og 120 ml petroleter (k.p. 30-60°C) tilsettes og gir uklarhet. Avkjøling i et is-bad gir det ønskede produkt som 31,1 g med hvite krystaller, sm.

p 127-129°C.

Eksempel 2 7 (utgangsstoff) 1[ 3-( 4- brombenzoyl) propionyl]- L- prolin- metylester Til en løsning av 3,54 g 3-(4-brombenzoyl)propionsyre-hydroksysuccinimid-ester (eksempel 26) 0<3 1/66 g metylprolin-hydroklorid i 10 ml acetonitril settes 1,75 ml diisopropyletylamin. Blandingen røres ved romtemperatur i 18 timer og inndampes i vakuum til et residuum. Dette residuum oppløses i diklormetan, vaskes med IN saltsyre, tørkes over magnesiumsulfat og inndampes i vakuum til en gummi. Denne gummi utgnis til et fast stoff med heksan og omkrystalliseres så fra aceton-heksan, og dette gir det ønskede produkt som 2,01 g av et hvitt fast stoff, sm. p. 78-82°C.

Eksempel <2>8 (utgangsstoff) 1-[ 3-( 4- brombenzoyl) propionyl]- L- prolin- metyl ester Fremgangsmåten fra eksempel 27 gjentas ved anvendelse av 21,8 ml trietylenamin i stedet for diisopropyletylenaminet og ved anvendelse av 2 7,3 g med 3-(4-brombenzoyl)propionsyre, hydroksysuccinimid-ester, 13,0 g av metylprolin-hydroklorid og 150 ml acetonitril. Det ønskede produkt utvinnes som 16,6 g med hvite krystaller, sm. p. 83-85°C.

Eksempel 29 (utgangsstoff) 1- [ 3-( 4- brombenzoyl)- 3- brompropionyl]- L- prolin- metylester Til en løsning av 3,52 g 1-[3-(4-brombenzoyl)propionyl]-L-prolin-metylester (eksempel 28 ) i 50 ml karbontetraklorid settes dråpevis en løsning av 0,51 ml brom i 20 ml karbontetraklorid. Etter 30 minutter tilsettes 2 dråper med 30 %-ig hydrobromsyre i eddiksyre, og blandingen røres ved romtemperatur i 2 dager. Løs-ningsmidlet dekanteres fra den resulterende gummi. Gummien opp-løses i diklormetan, vaskes to ganger med vann, én gang med natriumklorid-løsning, tørkes over magnesiumsulfat og gjøres klar med trekull. Filtratet inndampes til tørrhet i vakuum, og dette gir det ønskede produkt som 3,87 g av en gummi.

Eksempel 30 (utgangsstof f) 2- [ g-[( 2-k arboksy- l- pyrrolylkarboksyl) metyl] fenacyltio]-1- metylpyridinium- bromid, metylester

Til en løsning av 7,5 g 1-[3-(4-brombenzoyl)-3-brompro-pionyl ] -L-prolin i 50 ml acetonitril settes en løsning av 2,1 g l-metyl-2-(1H)-pyridinetion i 30 ml acetonitril. Blandingen røres ved romtemperatur i 18 timer og løsningsmidlet fjernes under vakuum for å gi et hvitt glass. Glasset findeles med eter, filtreres og det faste stoff vaskes med eter og petroleter (k. p. 30-60° C), og dette gir 8,9 g av produktet som et kremfarvet pulver.

Eksempel 31

1- 3-( 4- brombenzoyl)- 3- tiopropionyl - L- prolin En porsjon på 5,2 g med 2-[a-t(2-karboksy-l-pyrrolyl-karboksy)metyl]fenacyltio]-1-metylpyridinium-bromid, metylester (eksempel 30) blir oppslemmet med 50 ml vann og ekstrahert med kloroform. Ekstraktet inndampes til en gummi som kombineres med 50 ml IN natriumhydroksyd og røres ved romtemperatur i 3 timer. Blandingen vaskes, med kloroform og alkali-løsningen gjøres sur med saltsyre og ekstraheres med kloroform. Dette ekstrakt tørkes <p>g inndampes så til tørrhet i vakuum, hvilket gir et glass. Glasset utgnis til et fast stoff med heksan og dette gir et lysebrunt amorft fast stoff. Dette faste stoff fordeles kromatografisk på celitt ved anvendelse av et heptan-etylacetat-metanol-vann-system

(55:45:15:1). Kutt nr. 3 gir det ønskede produkt som 539 mg av et lysebrunt glass.

Eksempel 32

1-[ 3- acetylt io- 3-( 4- brombenzoyl) propionyl]- L- prolin-metylester

Til en løsning av 5,28 g 1-[3-(4-brombenzoyl)-3-brompro-pionyl]-L-prolin-metylester (eksempel 29) i 35 ml acetonitril settes 1,48 g kaliumtioacetat. Blandingen røres ved romtemperatur i 2 timer, filtreres og filtratet inndampes til tørrhet i vakuum, og det blir tilbake en lysegul gummi. Denne oppløses i eter og kromatograferes på en silikagel-kolonne med dimensjonene 2,54 cm x 40 ,64 cm, elueres med eter og opptas i 100 ml<1>s kutt. Kutt nr.

3 gir det ønskede produkt (1,64 g) som et glass.

Eksempel 3 3

1-[ 3- benzoyl- 3- tiopropionyl)- L- prolin

Til en løsning av 65 mg hydroksylamin-hydroklorid i 10 ml metanol settes en løsning av 0,35 g 1-(3-benzoyltio-3-benzoyl-propionyl)-L-prolin i 10 ml metanol. Til blandingen settes det 164 mg natriumacetat og blandingen røres i 2 timer. Løsningsmid-let fjernes og residuet fordeles mellom vann og diklormetan. Det organiske sjikt vaskes med vann, mettet natriumklorid-løsning og tørkes over magnesiumsulfat. Løsningsmidlet fjernes under vakuum for å gi 174 mg med gummi. Kromatografering over silikagel med løsningsmidlet etylacetat:heksan:eddiksyre (75:25:2) gir produktet for eksemplet som et glass.

Eksempel 3 4 (utgangsstoff) 1-[ 3-( 4- brombenzoyl) propionyl]- L- prolin En blanding av 2,64 g 1-[3-(4-brombenzoyl)propionyl]-L-prolin-metylester (eksempel 25) og 26 ml IN natriumhydroksyd rør-es ved romtemperatur. Det faste stoff oppsamles ved dekantering, oppløses i tetrahydrofuran og tilbakeføres til den alkaliske løs-ning som røres ytterligere ved romtemperatur. Denne alkaliske løsning vaskes med etylacetat og helles inn i iset saltsyre. Denne blanding ekstraheres med diklormetan. Det organiske ekstrakt tørkes over magnesiumsulfat og inndampes til tørrhet i vakuum, og det blir tilbake en gummi. Denne gummi finfordeles med eter og dette gir hvite krystaller som omkrystalliseres fra aceton-heksan, hvilket gir det ønskede produkt som 1,35 g med hvite krystaller, sm. p. 138-139°C.

Eksempel ^ 5 (utgangsstoff) 1-[ 3- ( 4- brombenzoyl) propionyl]- L- prolin Til en løsning av 12,65 g prolin og 18,5 g natriumbikarbonat i 390 ml vann settes en oppslemning av 39,0 g l-(3-p-brombenzoyl)propionsyre-hydroksysuccinimid-ester (eksempel 26) i 390 ml etanol. Blandingen røres ved romtemperatur i 18 timer, inndampes til halvparten av dens volum og surgjøres med konsentrert saltsyre, og det dannes en olje. Denne olje krystalliseres, med gnidning, til et fast stoff som omkrystalliseres fra aceton-heksan, hvilket gir det ønskede produkt som 26,3 g med lysebrune nåler, sm. p. 143-144°C.

Eksempel 36 (utgangsstoff) 1-[ 3- ( 4- brombenzoyl)- 3- brompropionyl1- L- prolin Til en løsning av 17,7 g 1-[3-(4-brombenzoyl)propionyl]-L-prolin (eksempel 35 ) i 150 ml eddiksyre settes det dråpevis en løsning av 9,0 g brom i 20 ml eddiksyre fulgt av 5 dråper hydrobromsyre i eddiksyre. Blandingen røres i 18 timer, inndampes til halvparten av dens volum, helles inn i 300 ml is og vann ekstraheres med metylenklorid. Det organiske ekstrakt vaskes to ganger med vann, én gang med mettet natriumklorid-løsning, tørkes over magnesiumsulfat, klargjøres med trekull og inndampes til tørrhet i vakuum. Det ønskede produkt utvinnes som 20,5 g med et hvitt amorft fast stoff.

Eksempel 3 7

1-[ 3- acetyltio- 3-( 4- brombenzolyl) propionyl]- L- prolin Til en omrørt suspensjon av 469 mg kaliumtioacetat i 10 ml etanol settes 1,76 g 1-[3-(4-brombenzoyl)-S-bromp^opionyl]-L-prolin (eksempel 37). Blandingen røres ved romtemperatur i 18 timer, filtreres og filtratet inndampes til tørrhet. Residuet oppløses i diklormetan, vaskes med vann og mettet natriumklorid-løsning, tørkes over magnesiumsulfat og inndampes til tørrhet i vakuum, hvilket gir det ønskede produkt som 1,6 8 g av et hvitt glass.

Eksempel 3 8

1-[ 3-( 4- brombenzoyl)- 3- benzoyltiopropionyl]- L- prolin Til 440 mg natriumhydrid i oljedispersjon blir det satt en løsning av 1,60 g tiobenzosyre i 25 ml etanol. Blandingen rø-res i 30 minutter og så tilsettes 4,33 g med 1-[3-(4-brombenzoyl)-3-brompropionyl]-L-prolin (eksempel 35 ) og blandingen røres ved romtemperatur i 18 timer, og løsningsmidlet fjernes i vakuum og residuet fordeles mellom diklormetan og vann. Det organiske sjikt vaskes med vann, så med natriumklorid-løsning, tørkes over magnesiumsulfat og inndampes til tørrhet i vakuum, og det etterlates et fersken-farvet glass. En porsjon på 2,8 g av dette glass opp-løses i etylacetat-heksan-eddiksyre (75:25:2) og anbringes på en silikagelkolonne med dimensjonene 2,54 cm x 38,10 cm. Kolonnen elueres med det samme løsningsmiddel-system (100 ml tilbakeholdt volum) idet det tas kutt på 50 ml. Det ønskede produkt utvinnes i kutt nr. 2 som et glass.

Eksempel 39 (utgangsstoff) 4- benzoylsmørsyre- hydroksysuccinimid- ester Til en partiell løsning av 25 g 4-benzoylsmørsyre i 200 ml dioksan settes 14,45 g N-hydroksysuccinimid. Blandingen røres og en løsning av 26,8 g dicykloheksylkarbodiimid i 100 ml dioksan tilsettes dråpevis. Blandingen røres i 18 timer, filtreres og filtratet inndampes til en olje. Denne olje utgnis til et fast stoff med heksan. Det faste stoff omkrystalliseres fra diklormetan-heksan ved bråkjøling, hvilket gir det ønskede produkt som 24,6 g med hvite krystaller, sm. p. 117-120°C.

Eksempel <4>0 (utgangsstoff) 1- ( 4- benzoylbutyryl)- L- prolin

Til en rørt løsning av 9,78 g prolin og 14,3 g natriumbikarbonat i 340 ml vann settes en partiell løsning av 24,6 g 4-benzoylsmørsyre-hydroksysuccinimid-ester (eksempel 39) i 340 ml etanol. Blandingen røres i 18 timer, inndampes til halvt volum og surgjøres med konsentrert saltsyre i et isbad. Blandingen ekstraheres med diklormetan. Det organiske ekstrakt vaskes med vann og saltløsning, tørkes over magnesiumsulfat og inndampes i vakuum til en gummi. Gummien utgnis til et fast stoff med heksan inneholdende litt diklormetan. Det faste stoff oppløses i 100 ml varm aceton, filtreres og 150 ml heksan tilsettes. Blandingen røres i et isbad, og dette gir det ønskede produkt som 14,9 g med hvite krystaller, sm. p. 102-105°C.

Eksempel <4>1 (utgangsstoff) 1-( 4- brom- 4- benzoylbutyryl)- L- prolin

Til en løsning av 11,5 g 1-(4-benzoylbutyryl)-L-prolin (eksempel 40) i 115 ml eddiksyre tilsettes dråpevis en løsning av 6,4 g brom i 25 ml eddiksyre. Blandingen røres i 18 timer, reduseres til 1/3 av dens volum, helles inn i is og vann og ekstraheres med diklormetan. Det organiske ekstrakt vaskes med vann og saltløsning, tørkes over magnesiumsulfat og inndampes i vakuum til en gul gummi. Denne gummi oppløses i diklormetan, anbringes på en silikagel-kolonne med dimensjonene 3,81 cm x 60,96 cm som er fuktet med diklormetan, og elueres med etylacetat:eddiksyre (1:1) og det tas 100 ml<1>s kutt. Kutt nr. 7 gir 2,lg med fast stoff som oppløses i diklormetan, filtreres gjennom celitt og inndampes til tørrhet, og dette gir det ønskede produkt som 2,0 g av en oransje gummi.

Eksempel

1- ( 4- acetyltio- 4- benzoylbutyryl)- L- prolin Til en løsning av 2,0 g 1-(4-brom-4-benzoylbutyryl)-L-prolin (eksempel 41) i 20 ml etanol settes 752 mg kaliumtioacetat. Blandingen røres ved romtemperatur i 18 timer, inndampes til tørr-het og residuet fordeles mellom diklormetan og vann. Diklormetan-sjiktet separeres, vaskes med saltløsning, tørkes over magnesium-sulf at, behandles med trekull og inndampes til en gummi. Denne

gummi oppløses i etylacetat-heksan-eddiksyre (75:25:2) og kromatograf eres på en silikagel-kolonne med dimensjonene 2,54 cm x 38,10 cm (100 ml tilbakeholdt volum) og det tas 50 ml<1>s kutt. Kuttene 3-6 kombineres for å gi det ønskede produkt.

Eksempel 4<3> (utgangsstoff) 1-[ 3-( 3- fluorbenzoyl)- 2-( S)- metylpropionyl]- L- prolin-metylester .

Til en løsning av 2,10 g 3-(4-fluorbenzoyl)-2-(S)-metylpropionsyre (eksempel 2) i 20 ml tetrahydrofuran tilsettes 1,62 g 1,1'-karbonyldiimidazol. Blandingen røres ved romtemperatur i 1 time, så tilsettes 1,66 g L-prolin-metylester og det fortsettes med røring i 18 timer. Blandingen inndampes til tørrhet i vakuum og residuet fordeles mellom diklormetan og vann. Det organiske sjikt separeres og vaskes suksessivt med IN saltsyre, vann, natriumbikarbonat-løsning og saltløsning, tørkes over magnesiumsulfat og inndampes til tørrhet i vakuum, og dette gir det ønskede produkt som 1,9 8 g av en gummi.

Eksempel <44> (utgangsstoff) 1-[ 3-( 3- fluorbenzoyl)- 2-( S) - metylpropionyl]- L- prolin En porsjon på 1,98 g av 1-[3-(3-fluorbenzoyl)-2-(S)-metylpropionyl ] -L-prolin-metylester (eksempel 43) oppløses i 2 ml tet-rahydrof uran og 20 ml IN natriumhydroksyd tilsettes. Blandingen røres ved romtemperatur i 4 timer, avkjøles i et isbad, surgjøres med konsentrert saltsyre og ekstraheres med diklormetan. Det organiske ekstrakt vaskes med natriumklorid-løsning, tørkes over magnesiumsulfat og inndampes i vakuum til en gummi. Denne gummi findeles med eter, og dette gir det ønskede produkt som 500 mg av et hvitt fast stoff.

Eksempel <4>5 (utgangsstoff) 3- ( 3- klorbenzoyl)- 2- metylpropionsyre

Til en løsning av 11,8 g a-(3-klorfenyl)-4-morfolinace-tonitril i 50 ml tetrahydrofuran tilsettes 60 dråper av en 30 %-ig løsning av kaliumhydroksyd i metanol. Til løsningen settes 4,62 ml metakrylnitril. Etter røring i 1 time konsentreres blandingen til tørrhet og residuet oppløses i diklormetan. Løsningen føres gjennom en kort kolonne med vannholdig magnesiumsilikat og elueringsmidlet konsentreres for å gi 15,5 g av en gul olje. Oljen oppvarmes på et dampbad med en blanding av 75 ml eddiksyre og 5

ml vann i 1 time. Løsningsmidlet fjernes under vakuum og det settes vann til residuet. Filtrering gir 11,2 g av 3-(3-klorbenzoyl)-2-metylpropionitril som krystaller, sm. p. 72-75°C.

En blanding av den foregående forbindelse (7,9 g) og 75 ml konsentrert saltsyre tilbakeløpsbehandles i én time. Blandingen avkjøles og filtreres, og dette gir 8,5 g av eksempelproduktet som krystaller, sm. p. 102-105°C.

Eksempel 4 6 (utgangsstoff)

3- ( 4- klorbenzoyl)- 2- metylpropionsyre Til en blanding av 152,2 g p-toluensulfonsyre og 148,1 g morfolin i 700 ml tetrahydrofuran settes 102 g 4-klorbenzaldehyd i 200 ml tetrahydrofuran. Blandingen tilbakeløpsbehandles i 6 timer, avkjøles og 65,1 g kaliumcyanid i 100 ml vann tilsettes.

Blandingen tilbakeløpsbehandles i 18 timer og løsningsmidlet fjernes under vakuum. Residuet oppløses i diklormetan og løsningen vaskes med natriumbisulfitt-løsning og føres gjennom en kolonne med vannholdig magnesiumsilikat. Filtratet konsentreres til nær tørrhet og heksan tilsettes. Filtrering gir 87,5 g med a-(4-klor-fenyl)-4-morfolinacetonitril som hvite krystaller, sm. p. 70°C. Til den foregående forbindelse (87,5 g) i 500 ml tetrahydrofuran settes 25 ml av en 30 %-ig løsning av kaliumhydroksyd i etanol. Til blandingen settes 33,5 ml metakrylnitril. Blandingen røres i 50 timer ved romtemperatur og løsningsmidlet fjernes under vakuum. Residuet oppløses i diklormetan og føres gjennom en kolonne med vannholdig magnesiumsilikat. Eluatet konsentreres og fortynnes med heksan, og dette gir 50 g med hvite krystaller, sm. p. 158-160°C.

En blanding av den foregående forbindelse (50 g) i 400 ml eddiksyre og 100 ml vann tilbakeløpsbehandles i 18 timer. Løs-ningsmidlet fjernes og residuet oppløses i diklormetan. Løsning-en føres gjennom en;kolonne med vannholdig magnesiumsilikat og eluatet konsentreres for å gi en gul olje. Krystallisering fra heksan gir 57 g med 3-(4-klorbenzoyl)-2-metylpropionitril som krystaller, sm. p. 80-82°C.

Den foregående forbindelse tilbakeløpsbehandles med konsentrert saltsyre for å gi eksempel-produktet, sm. p. 125-129°C.

Eksempel <47> (utgangsstoff) 1-[ 3- acetyltio- 3-( 1- naftoyl)- 2-( S)- metylpropionyl]- L- prolin Til en blanding av 133,2 g p-toluensulfonsyre og 130,7 g morfolin i 500 ml tetrahydrofuran settes 98,0 g 1-naftaldehyd og blandingen tilbakeløpsbehandles i 6 timer. Til den avkjølte blanding settes 48,8 g kaliumcyanid i 100 ml vann og blandingen tilbakeløpsbehandles i 18 timer. Løsningsmidlet fjernes og residuet fordeles mellom diklormetan og vann. Det organiske sjikt separeres og det vandige sjikt ekstraheres med diklormetan. Det organiske sjikt og ekstraktene kombineres, vaskes med mettet natriumbisulfitt-løsning og føres gjennom en kolonne av vannholdig magnesiumsilikat. Elueringsmidlet konsentreres, fortynnes med heksan og filtreres, og dette gir 123 g med a-(1-naftyl)-4-mor-folinacetonitril som krystaller, sm. p. 88-89°C.

Til den foregående forbindelsee (120 g) i 500 ml tetrahydrofuran settes 35 ml av en 30 %-ig løsning av kaliumhydroksyd i etanol og 4 3,6 ml metakrylnitril. Blandingen røres ved romtemperatur i 24 timer og løsningsmidlet fjernes. Til residuet set-

tes 600 ml 6N saltsyre og blandingen tilbakeløpsbehandles i 18 timer. Blandingen ekstraheres med diklormetan og det organiske ekstrakt ekstraheres med natriumbikarbonat-løsning. Det vandige sjikt surgjøres med saltsyre og ekstraheres med diklormetan. Diklormetan-ekstraktet vaskes med mettet natriumklorid-løsning og tørkes over magnesiumsulfat. Løsningsmidlet fjernes og residuet findeles med heksan, hvilket gir 19,2 g av 3-(1-naftoyl)-2-(S)-metylpropionsyre som krystaller, sm. p. 111-114°C.

Den foregående forbindelse (12,0 g) oppløses i 100 ml dioksan og 5,70 g N-hydroksysuccinimid tilsettes. Til blandingen settes 10,2 g N,N-dicyklo-heksylkarbodiimid i 100 ml dioksan i løpet av 15 minutter. Blandingen røres natten over, filtreres og filterkaken vaskes med dioksan. Filtratet konsentreres, heksan tilsettes og det filtreres. Det faste stoff omkrystalliseres fra diklormetan-heksan, hvilket gir 3-(1-naftoyl)-2-metylpropionsyre, hydroksysuccinimid-ester som hvite krystaller, sm. p. 170°C.

Den foregående forbindelse (3,4 g) oppslemmes i 40 ml etanol og settes til en løsning av 2,30 g L-prolin og 1,68 g nat-riumkarbonat i 40 ml vann. Blandingen røres ved romtemperatur i én uke. Blandingen konsentreres til halvt volum, bråkjøles og surgjøres med konsentrert saltsyre. Blandingen ekstraheres med diklormetan og ekstraktet vaskes med mettet natriumklorid-løsning og tørkes over magnesiumsulfat. Løsningsmidlet fjernes, og det oppnås 1-[3-(1-naftoyl)-2-(S)-metylpropionyl]-L-prolin.

Den foregående forbindelse skilles i diastereoisomerer

A og B, og hver omsettes med brom som i eksempel 18, og dette gir 1-[3-brom-3-(1-naftoyl)-2-(S)-metylpropionyl]-L-prolin.som et glass (bromert isomer A og bromert isomer B). De foregående forbindelser omsettes med kaliumtioacetat, som i eksempel 20' for oppnå-

else av eksempel-produktene.

Eksempel 48

1-[ 3- acetyltio- 3-( 3- klorbenzoyl) propionyl]- L- prolin Til en kald løsning av 76 g p-toluensulfonsyre i 500 ml tetrahydrofuran settes 87 g morfolin og 50,6 g m-klorbenzaldehyd. Blandingen tilbakeløpsbehandles i 2 \ timer og 100 ml tetrahydrofuran fradestilleres. Blandingen avkjøles og en løsning av 28,6

g kaliumcyanid i 100 ml vann tilsettes. Blandingen tilbakeløps-behandles i 5 timer og konsentreres til tørrhet under vakuum. Residuet oppløses i diklormetan og løsningen vaskes med vann, natriumbisulfitt-løsning, mettet natriumklorid-løsning og tørkes over magnesiumsulfat. Løsningen føres gjennom en kort kolonne med vannholdig magnesiumsilikat. Elueringsmidlet tilbakeløpsbe-handles mens heksan tilsettes inntil krystaller utskilles. Av-kjøling og filtrering gir 78 g av a-(3-klorfenyl)-4-morfolinace-tonitril som krystaller, sm. p. 72-73°C.

Til den foregående forbindelse (23,6 g) i 100 ml tetrahydrofuran settes 120 dråper av en 30 %-ig løsning av kaliumhydroksyd i metanol. Til blandingen settes 4,1 ml akrylnitril. Etter røring i 1 time, konsentreres blandingen til tørrhet under vakuum. Residuet oppløses i diklormetan og føres gjennom en kort kolonne med vannholdig magnesiumsilikat. Elueringsmidlet konsentreres under vakuum, og dette gir 36,6 g av en gul olje.' Oljen oppvarmes på et dampbad sammen med en blanding av 150 ml eddiksyre og 10 ml vann i én time. Løsningsmidlet fjernes under vakuum og residuet behandles med vann. Blandingen filtreres og det oppnås 18,8 g av 3-(3-klorbenzoyl)propionitril som krystaller, sm. p. 49-51°C.

En blanding av den foregående forbindelse (8,1 g) og

80 ml konsentrert saltsyre tilbakeløpsbehandles i 7 timer. Av-kjøling gir en olje som krystalliseres for å gi 8,8 g av 3-(3-klorbenzoyl)propionsyre som krystaller, sm. p. 105-107°C.

Den foregående forbindelse omdannes til 3-[3-klorbenzoyl) propionsyre, hydroksysuccinimid-ester som beskrevet i eksempel 15, og kobles med L-prolin som beskrevet i eksempel 15 for å gi 1-[3-(3-klorbenzoyl)propionyl]-L-prolin. Den foregående forbindelse omsettes med brom i eddiksyre som beskrevet i eksempel 20 for å gi 1-[3-brom-3-(3-klorbenzoyl)propionyl]-L-prolin. Den foregående forbindelse i en blanding av etanol-vann (1:1) omsettes med kaliumtioacetat som i eksempel 20 f°r ^ 9i eksempel-

produktet som et glass.

Eksempel 4 9

l-[3-acetyltio-3- (4-tert.-butylbenzoyl)propionyl]-L-prolin

Til en rørt blanding av 17,0 g p-tert.butyl-benzen og 13,0 g ravsyreanhydrid i 340 ml 1 ,1 ,-2 ,2-tetrakloretan settes 36 g aluminiumklorid. Blandingen røres ved romtemperatur i 3 timer. Blandingen helles inn i 170 ml iskald 6N saltsyre. Blandingen inndampes ved romtemperatur natten over og gjenværende sørpe røres sammen med 300 ml kokende vann, avkjøles og filtreres. Det faste stoff oppløses i 1,5 liter kokende vann inneholdende 20g natrium-karbonat. Den varme blanding filtreres og filtratet surgjøres med 100 ml 6N saltsyre. Bråkjøling og filtrering gir et lysebrunt fast stoff som omkrystalliseres fra etanol-vann for å gi 28 g med produkt, sm.p. 85-89°c. Omkrystallisering fra benzen-petroleter gir 17,0 g med 3-(4-tert.butylbenzoyl)-propionsyre som lysegule krystaller, sm.p. 119-121°C.

Den foregående forbindelse omdannes til 3-(4-tert. butylbenzoyl)propionsyre-hydroksysuccinimid-ester som beskrevet i eksempel 14 , som blir koblet med L-prolin for å gi l-[3-(4-tert. butylbenzoyl)propionyl]-L-prolin.

Den foregående forbindelse omsettes med brom i eddiksyre for å gi 1-[3-brom-3-(4-tert.butylbenzoyl)propionyl]-L-prolin som beskrevet i eksempel 19.

Den foregående forbindelse i en blanding av etanol-vann (1:1) omsettes med kaliumtioacetat som i eksempel 20 for å gi eksempel-produktet som et glass.

Eksempel 50

l-[3-acetyltio-3- (3-trifluormetylbenzoyl)propionyl ] -L-prolin

Til en løsning av 5,0 g o?-3-(trif luormetyl) f enyl ]-4-morfolinacetonitril i 200 ml tetrahydrofuran som røres ved romtemperatur, settes det 30 dråper med 30 %-ig kaliumhydroksyd i etanol. Til blandingen settes 10 ml etylakrylat. Etter én time tilsettes ytterligere 30 dråper med 30 %-ig kaliumhydroksyd i etanol og 10 ml etylakrylat. Blandingen røres i 2 timer og løs-ningsmidlet fjernes under vakuum. Toluen tilsettes flere ganger og løsningsmidlet fjernes. Residuet røres med eter, filtreres og løsningsmidlet inndampes for å gi etyl-a-cyano-a-[3-(trifluormetyl) fenyl]-4-morfolinbutanoat (5,6 g) som en olje. Oljen oppvarmes sammen med 70% iseddik i 2 timer og løsningsmidlet fjernes. Residuet oppløses i diklormetan og vaskes med vann. Det organiske sjikt tørkes (Na2S0^) og løsningsmidlet fjernes for å gi en olje. En blanding av oljen og 300 ml 6N saltsyre tilbakeløpsbehandles

i 5 timer, avkjøles og ekstraheres med diklormetan. Det organiske sjikt ekstraheres med natriumbikarbonat. Det vandige sjikt sur-gjøres med konsentrert saltsyre og ekstraheres med diklormetan. Ekstraktet tørkes (Na2S0^) og løsningsmidlet fjernes. Residuet krystalliseres fra heksan for å gi 3-[3-trifluormetylbenzoly)-propionsyre som krystaller, sm.p. 80-82°C.

Som beskrevet i eksempel 14 , fremstilles 3- (3-trifluormetylbenzoyl) propionsyre , hydroksysuccinimid-ester, og kobles til L-prolin som i eksempel 15. I eddiksyre omsettes l-[3-(3-trifluormetylbenzoyl)propionyl]-L-prolinet med brom, som i eksempel 20, for å gi l-[3-brom-3-(3-trifluormetylbenzoyl)-propionyl]-L-prolin. Den foregående forbindelse omsettes med kaliumtioacetat i etanol-vann (1:1), som i eksempel 20/ f°r å gi eksempel-produktet som et glass.

Eksempel ^ 1 l-[ 3- acetyltio- 3- ( 3 , 4- diklorbenzoyl) propionyl]- L- prolin Til en blanding av 122 ml morfolin og 124 g p-toluen-sulf onsyre i 150 ml tetrahydrofuran settes 106,3 g 3,4-diklor-benzaldehyd i 50 ml tetrahydrofuran. Blandingen oppvarmes på et dampbad i 2 timer. Til blandingen settes en oppslemning av 45 g kaliumcyanid i 30 ml vann. Blandingen tilbakeløpsbehandles i 2 timer og løsningsmidlet fjernes under vakuum. Til residuet settes en løsning av natriumbisulfitt og blandingen ekstraheres med diklormetan. Ekstraktet vaskes med natriumbisulfitt-løsning og tørkes over magnesiumsulfat. Løsningsmidlet fjernes under vakuum. Residuet oppløses i benzen og fortynnes med petroleter for å gi 122 g med a-(3,4-diklorfenyl)-4-morfolinacetonitril som krystaller, sm.p. 59-60°C.

Den foregående forbindelse (11,6 g) oppløses i 125 ml tetrahydrofuran og 60 dråper av en løsning av 30 %-ig kaliumhydroksyd i etanol tilsettes. Til blandingen settes dråpevis 6,8 ml etylakrylat i 50 ml tetrahydrofuran i løpet av 10 minutter. Etter 1 1/2 time ved romtemperatur fjernes løsningsmidlet under vakuum. Toluen tilsettes og løsningsmidlet fjernes. En blanding av petroleter-eter tilsettes og blandingen filtreres. Filtratet konsentreres til å gi 12,9 g av en gul olje. Oljen oppvarmes sammen med 70% eddiksyre på et dampbad i 2 timer. Løsningsmidlet fjernes, og dette gir etyl-3-(3,4-diklorbenzoyl)propionat.

Den foregående forbindelse oppvarmes med 6N saltsyre

for å gi 3-(3 ,4-diklorbenzoyl)propionsyre. Som beskrevet i eksempel .14, fremstilles 3-(3,4-diklorbenzoyl)propionsyre, hydroksysuccinimid-ester, og kobles til L-prolin som i eksempel ^5.

I eddiksyre omsettes 1-[3-(3,4-diklorbenzoyl)propionyl]-L-prolinet med brom, som i eksempel 19, for å gi l-[3-brom-3-(3,4-diklorbenzoyl )propionyl]-L-prolin.

Den foregående forbindelse omsettes med kaliumtioacetat

i etanol-vann (1:1) , som i eksempel 20 ' ^or ^ 9*- eksempelproduktet som et glass.

Eksempel ^ 2

l-[3-acetyltio-3- (4-klor-3-trifluormetylbenzoyl)-propionyl]- L- prolin

En prøve på 48,9 g med 5-amino-2-klorbenzotrifluorid omdannes til 4-klor-3-trifluormetylbenzaldehyd i henhold til fremgangsmåten beskrevet i Organic Synthesis Coll., Vol 5, s. 139,

for å gi 13,9 g av en olje.

Den foregående forbindelse (13,9 g) settes til en blanding av 14,3 g p-toluensulfonsyre og 13,0 g morfolin i 150 ml tetrahydrofuran. Blandingen tilbakeløpsbehandles i 3 timer og 4,9 g kaliumcyanid i 25 ml vann tilsettes. Blandingen tilbake-løpsbehandles i 18 timer og løsningsmidlet fjernes i vakuum. Residuet fortynnes med vann og ekstraheres med diklormetan. Ekstraktet vaskes med mettet natriumbisulfitt-løsning og mettet salt-løsning og føres gjennom en kolonne med vannholdig magnesiumsilikat. Filtratet konsentreres under vakuum og residuet krystalliseres fra diklormetan-heksan for å gi 14 g med a-(4-klor-3-tri-fluormetylfenyl)-4-morfolinacetonitril som krystaller, sm.p. 73-74°C.

Til den foregående forbindelse (14 g) i 150 ml tetrahydrofuran settes én ml av en løsning av °30 %-ig kaliumhydroksyd i metanol. Til blandingen settes 10 ml metylmetakrylat og blandingen hensettes ved romtemperatur natten over. Løsningsmidlet fjernes under vakuum og residuet strippes med toluen flere ganger. Tesiduet oppløses i diklormetan og føres gjennom en kolonne med vannholdig magnesiumsilikat. Filtratet konsentreres for å gi en olje. Oljen oppvarmes sammen med 70 % eddiksyre på et dampbad og

hydrolyseres med 6N saltsyre, som beskrevet i eksempel 50, for å

gi 3-(4-klor-3-trifluormetylbenzoyl)propionsyre som beskrevet i eksempel 14.

Den foregående forbindelse omdannes til 3-(4-klor-3-trifluormetylbenzoyl)propionsyre, hydroksysuccinimid-ester, og kobles til L-prolin som i eksempel 15. l-[3-(4-klor-3-trifluormetylbenzoyl) propionyl]-L-prolinet bromeres som i eksempel 19 r og produktet omsettes med kaliumtioacetat i etanol-vann (1:1) , som i eksempel 20, for å gi eksempel-produktet som et glass.

Eksempel 53

l-[3-acetyltio-3-(3-fluor-4-metoksybenzoyl)propionyl]-L- prolin

Som beskrevet i eksempel 51, omdannes 3-fluor-4-metoksybenzaldehyd til 3-(3-fluor-4-metoksybenzoyl)propionsyre,

sm.p. 169-171°C.

Som beskrevet i eksempel 14, omdannes den foregående forbindelse til 3-(3-fluor-4-metoksybenzoyl)propionsyre, hydroksysuccinimid-ester, og kobles til L-prolin som i eksempel ^5. l-[3-(3-fluor-4-metoksybenzoyl)propionyl]-L-prolinet, sm.p. 180-182°c, bromeres som i eksempel ^9, og produktet omsettes med kaliumtioacetat i etanol-vann, som i eksempel 20 f°r å 9*- eksempel-produktet som et glass.

Eksempel 54

l-[3-acetyltio-3- (3-fluorbenzoyl)-2-(S)-metylpropionyl]-L- prolin

Til en løsning av 6,21 g prolin og 9,07 g natriumbikarbonat i 220 ml vann settes en oppslemning av 16,6 g l-[3-brom-3-(3-fluorbenzoyl)-2-(S)-metylpropionyl)-L-prolin i 220 ml etanol. Blandingen røres ved romtemperatur i 18 timer og filtreres. Filtratet konsentreres under vakuum til halvt volum, avkjøles i et isbad, filtreres og surgjøres med konsentrert saltsyre (tilnærmet pH 4). Blandingen ekstraheres med diklormetan og ekstraktet vaskes med vann, mettet natriumklorid-løsning og tørkes over magnesiumsulfat. Løsningsmidlet fjernes for å gi 11,8 g av en hvit gummi. Gummien oppløses i én ml etylacetat, 10 ml heksan og 0,2 ml eddiksyre. Bråkjøling og filtrering gir 3,18 g med hvite krystaller, sm.p. 176-180°C (merket isomer A). Filtratet kromatograferes to ganger over silikagel med løsningsmiddel etylacetat-heksan-eddiksyre (25:25:1) for å gi 3,2 g av en gummi (merket isomer B).

Isomer A omsettes med N,N-dicykloheksylamin i aceton

for å gi dicykloheksylamin-saltet av isomer A, sm.p. 164-166°C.

Isomer B omsettes med N,N-dicykloheksylamin i aceton

for å gi dicykloheksylamin-saltet av isomer B, sm.p. 98-lOO°C.

En prøve på 6,8 g av isomer B som dens dicykloheksylamin-salt oppløses i 50 ml vann, bråkjøles og surgjøres med konsentrert saltsyre. Blandingen ekstraheres med etylacetat og ekstraktet konsentreres for å gi 4,3 g av en gummi. Gummien oppløses i 20 ml metanol og 20 ml vann, og 4 ml IN natriumhydroksyd tilsettes. Denne løsning føres gjennom 50 g med IR-120 harpiks (på forhånd vasket med IN saltsyre og så med vann). Kuttene inneholdende fast stoff kombineres og det faste stoff fordeles mellom diklormetan og vann. Diklormetan-sjiktet vaskes med vann, mettet natriumklorid-løsning og tørkes over magnesiumsulfat. Løsnings-midlet fjernes for å gi 3,3 g av en gummi som krystalliseres fra heksan og en spormengde med eter for å gi 3,07 g med hvite krystaller, sm.p. 100-103°C. Omkrystallisering fra etylacetat-heksan gir 1,5 g med krystaller, sm.p. 107-108°C (ren isomer B).

Til en løsning av 4,0 g av isomer A (sm.p. 184-186 oC)

i 90 ml eddiksyre settes 2,08 g brom i 10 ml eddiksyre. Etter 18 timer ved romtemperatur konsentreres løsningen til 1/3 av dens volum og helles inn i is og vann. Blandingen ekstraheres med diklormetan og ekstraktet konsentreres til tørrhet , og dette gir 4,78 g av l-[3-brom-3-(3-fluorbenzoyl)-2-(S)-metylpropionyl]-L-prolin som et glass (brom-derivat av isomer A).

Til en løsning av 2,32 g av dette brom-derivat av

isomer A i 25' ml etanol settes 0,82 g kaliumtioacetat, og blandingen røres ved romtemperatur i 42 timer. Løsningsmidlet fjernes og residuet fordeles mellom vann og diklormetan. Det organiske sjikt vaskes med vann og mettet natriumklorid-løsning og tørkes over magnesiumsulfat. Løsningsmidlet fjernes for å gi 2,06 g av et fast stoff. Rensing ved kromatografering på silikagel med løsningsmidlet etylacetat-heksan-eddiksyre (25:25:1) gir 0,52 g med fast stoff. Krystallisering fra etylacetat-heksan gir 0,3 g med produkt som krystaller, sm.p. 113-115°C.

Eksempel 55

l-[3-acetyltio-3-(4-metoksy-l-naftoyl)propionyl]-L-prolin

3-(4-metoksyl-l-naftoyl)propionsyre kobles til L-prolin som beskrevet i eksemplene 14 og 15 for å gi l-[3-(4-metoksy-l-naftoyl)propionyl]-L-prolin. Den foregående forbindelse omsettes med brom i eddiksyre, som i eksempel 25, og produktet omsettes med kaliumtioacetat i etanol for å gi eksempel-produktet som et glass.

Eksempel 56

l-[3-acetyltio-3- (3,4,5-trimetoksybenzoyl)propionyl]-L- prolin

Som beskrevet i eksempel 51 omdannes 3,4,5-trimetoksy-benzaldehyd til 3-(3,4,5-trimetoksybenzoyl)propionsyre. Den foregående forbindelse omdannes til hydroksysuccinimid-esteren som beskrevet i eksempel 14, og kobles til L-prolin som beskrevet i eksempel 15 . l-[3-(3,4,5-trimetoksybenzoyl)propionyl]-L-prolinet omsettes med brom i eddiksyre, som i eksempel 19, for å gi l-[3-brom-3-(3,4,5-trimetoksybenzoyl)propionyl]-L-prolin. Den foregående forbindelse omsettes med kaliumtioacetat i etanol-vann, som i eksempel 20, for å gi eksempel-produktet som et glass.

Eksempel 57

l-[3-acetyltio-3-(3-bifenylylkarbonyl)propionyl]-L-prolin

En blanding av 50,0 g 3-bifenylylkarbonyl)propionsyre, 23,0 g N-hydroksysuccinimid, 41,3 g N,N-dicykloheksylkarbodiimid og 400 ml dioksan røres ved romtemperatur. Blandingen filtreres og filtratet konsentreres til en olje som krystalliseres fra kloroform-heksan for å gi 38 g med krystaller, sm.p. 160-163°C. 0m-krystallisering fra kloroform-etanol gir 32 g med kremfargede krystaller, sm.p. 163-164°c. En blanding av den foregående forbindelse (20 g), 9,9 g L-prolin, 14,3 natriumbikarbonat og 170 ml vann og 200 ml etanol røres ved romtemperatur og konsentreres til halvt volum. Blandingen surgjøres med konsentrert HCl og filtreres, og dette gir 24,0 g av et fast stoff med annenklasses hvitfarge. Det faste stoff oppløses i diklormetan og ekstraheres med vandig natriumbikarbonat. Den vandige fase surgjøres med konsentrert HCl, filtreres og det faste stoff vaskes med vann, og dette gir 10 g med krystaller med annenklasses hvitfarge, sm.p. 128-131°C. Omkrystallisering fra CH2Cl2-heksan gir hvite krystaller, sm.p. 131-133 C. Den foregående forbindelse (7,0 g) bromeres, som beskrevet i eksempel 19 , for å gi l-[3-brom- (4-bifenylylkar-bonyl) propionylJ-L-prolin, sm.p. 135-138°C (2,0 g). Den foregående forbindelse (0,50 g) omsettes med natriumtioacetat i 5 ml etanol for å gi eksempel-produktet som hvite krystaller, sm.p. 173-176°C.

Eksempel 5 8

l-{3-acetyltio-3-[4- (4-klorfenoksyl)benzoyl]-propionyl]

- L- prolin

En blanding av 9,8 g 3-(3-fluorbenzoyl)proiponsyre, 6,5 g p-klorfenol, 13,8 g kaliumkarbonat og 120 ml N,N-dimetyl-acetamid oppvarmes under argon ved 135°C i 16 timer. Blandingen avkjøles og helles inn i 1 liter vann. Blandingen filtreres gjennom celitt og filtratet surgjøres med konsentrert saltsyre. Blandingen fortynnes til 2 liter, filtreres og det faste stoff omkrystalliseres fra etanol-vann (1:1) for å gi 12,2 g med fargeløse nåler, sm.p. 148-150°C. Den foregående forbindelse omdannes til 3-[4 - (4-klorfenoksy)benzoyl]propionsyre-hydroksysuccinimid-ester, som beskrevet i eksempel 15, hvilken kobles til L-prolin for å gi-l-{_3-[4-(klorfenoksy)benzoyl] propionyl} -L-prolin. Den foregående forbindelse omsettes med brom i eddiksyre for å gi 1- 3-brom-3-[4-(4-klorfenoksyl)benzoyl]propionyl -L-prolin, som beskrevet i eksempel 20. Den foregående forbindelse omsettes i en blanding av etanol-vann med kaliumtioacetat, som i eksempel 21, for å gi eksempel-produktet som et glass.

Eksempel 59

l-[3-acetyltio-3-(4-klorbenzoyl)-2-(S)-metylpropionyl]-L-prolin

En løsning av 14,3 g 3-(4-klorbenzoyl)-2-(S)-metylpropionsyre (eksempel 46), 7,26 g N-hydroksysuccinimid og 13 g dicykloheksylkarbodiimid i 150 ml dioksan røres ved romtemperatur natten over og filtreres så. Filtratet konsentreres ved redusert trykk og tas opp i 100 ml vann inneholdende 7,25 g L-prolin og 10,58 g natriumbikarbonat. Blandingen røres ved 25-35°C natten over og filtreres gjennom celitt. Filtratet konsentreres for å fjerne etanolen. Konsentrert saltsyre tilsettes og blandingen ekstraheres flere ganger med diklormetan. Ekstraktene vaskes med vann og tørkes (Na^O^) . inndamping av løsningsmidlet gir en lysegul gummi som oppløses i etylacetat. Heksan tilsettes, og dette bringer hvite krystaller til å utskilles. Omkrystallisering fra etylacetat gir fargeløse nåler, sm.p. 177,5-179,5°C, merket isomer A. Den foregående forbindelse bromeres, som i eksempel 19, og produktet omsettes med kaliumtioacetat i etanol-vann, som i eksempel 21, for å gi eksempel-produktet som et glass.

Eksempel 60

l-[ 3- acetyltio- 3- ( 3- fluorbenzoyl) propionyl]- L- prolin 3-(3-fluorbenzoyl)propionsyre fremstilles fra 3-fluorbenzoldehyd, som i eksempel 46, for å gi gule nåler, sm.p. 97-99°C. Til en blanding av den foregående forbindelse (9,8 g)

og 5,75 g N-hydroksysuccinimid i 80 ml dioksan settes en løsning av 10,3 g N,N-dicykloheksylkarbodiimid i 40 ml dioksan. Blandingen røres ved romtemperatur i 18 timer, filtreres og løsningsmidlet fjernes under vakuum. Residuet findeles med heksan for å gi 13,7 g med krystaller av annenklasses hvitfarge, sm.p. 115-122°c. 0m-krystallisering fra CH2Cl2-heksan gir 11 g med hvite krystaller, sm.p. 130-133°C. Den foregående forbindelse (11 g) som en oppslemning i 210 ml etanol settes til en løsning av 9,24 g natriumbikarbonat og 6,33 g L-prolin i 210 ml vann. Etter røring i 18 timer ved romtemperatur konsentreres løsningen til halvt volum under vakuum, bråkjøles og surgjøres med konsentrert saltsyre. Blandingen ekstraheres med diklormetan og ekstraktene vaskes med vann og saltløsning og tørkes (MgSO^). Løsningsmidlet fjernes under vakuum for å gi 10,8 g av en gummi. Findeling med heksan inneholdende spor av eter gir 8,6 g med hvite krystaller, sm.p. 84-89°C. Den foregående forbindelse (6,42 g) bromeres, som i eksempel 20, for å gi l-[3-fluorbenzoyl)propionyl]-L-prolin som et hvitt glass (7,9 g). Den foregående forbindelse (3,72 g) omsettes med 1,48 g kaliumtioacetat i 35 ml etanol i 18 timer for å gi 3,4 g av en gummi. Gummien kromatograferes over silikagel med etylacetatheksan-eddiksyre (75:25:2) som løsningsmiddel, og dette gir 2,6 g av eksempel-produktet som et lysebrunt glass.

Eksempel 61 l-[ 3- acetyltio- 3- ( 2- naftoyl) propionyl]- L- prolin Til en løsning av 46,8 g 2-naftaldehyd og 57,5 g p-toluensulfonsyre i 300 ml tetrahydrofuran settes 52,5 ml morfolin. Blandingen tilbakeløpsbehandles i 1 time, avkjøles og en oppslemning av 19,5 g kaliumcyanid i 15 ml vann tilsettes. Blandingen røres og tilbakeløpsbehandles i 1 time, avkjøles og helles inn i 600 ml med 10 %-ig kaliumkarbonat-løsning. Blandingen ekstraheres med diklormetan og ekstraktet vaskes med vann, natriumhydrogensulfitt og saltløsninger. Løsningsmidlet fjernes under vakuum og residuet findeles med heksan for å gi 61 g av et gult fast stoff. Den foregående forbindelse (61 g) i 400 ml tetra-hydrof uran tilsettes 15 ml med 30 %-ig K0H i etanol-løsning. Til blandingen settes 24 ml akrylnitril i 150 ml tetrahydrofuran. Etter røring i 24 timer fjernes løsningsmidlet. Residuet oppløses i CI^C^ og vaskes med vann og løsningen tørkes (MgSO^) . Løsnings-midlet fjernes under vakuum for å gi 65 g av en mørk gummi. Den foregående forbindelse (65 g) tilsettes 230 ml eddiksyre og 38 ml vann. Blandingen tilbakeløpsbehandles i 1 1/2 timer og løsnings-midlet fjernes. Residuet oppløses i CI^C^ og vaskes' med vann og saltløsning og tørkes (MgSO^). Løsningsmidlet fjernes for å

gi 60 g av en mørk gummi. En blanding av den foregående forbindelse (60 g) og 200 ml 6N saltsyre tilbakeløpsbehandles i 1 1/2 time. Blandingen bråkjøles , filtreres og det faste stoff vaskes med vann for å gi 49,6 g med 3-(2-naftoyl)propionsyre , sm.p. 147-155°C. Omskrystallisering gir krystaller, sm.p. 168-170°C. Til en oppslemning av den foregående forbindelse (9,12 g) i 60 ml dioksan settes en løsning av 8,24 g N,N-dicykloheksylkarbodiimid i 40 ml dioksan og 4,6 g N-hydroksysuccinimid. Blandingen røres ved romtemperatur i 18 timer og filtreres. Filtratet konsentreres under vakuum. Residuet findeles med heksan-eter for å gi 13,0 g med fast stoff, sm.p. 153-160°C. Det faste stoff oppløses i 150 ml CH2Cl2 og heksan tilsettes (160 ml). Filtrering gir 9,8 g med hvite krystaller, sm.p. 162-165°C. Den foregående forbindelse

(9,8 g) som en oppslemning i 160 ml etanol settes til en løsning av 5,18 g L-prolin og 7,58 g NaCO^ i 160 ml vann. Blandingen røres ved romtemperatur i 18 timer og løsningen konsentreres til halvt volum. Løsningen ekstraheres med etylacetat og bråkjøles så og surgjøres med konsentrert HCl. Blandingen ekstraheres med Cf^C^ og ekstraktet vaskes med H20 og saltløsning og tørkes (MgSO^). Løsningsmidlet fjernes for å gi 9,5 g med gummi som kromatograferes over silikagel med løsningsmidlet etylacetat-heksan-eddiksyre , og dette gir 5,5 g med krystaller, sm.p. 115-118°C. Den foregående forbindelse, 3-(2-naftoyl)propionyl-L-prolin, (3,24 g) bromeres,

som i eksempel 20, for å fi 1-[3-brom-3- (2-naftoyl)propionyl]-L-prolin som et glass (2,55 g). Den foregående forbindelse (2,55 g) i 30 ml etanol omsettes med natriumtioacetat i 18 timer for å gi eksempel-produktet som et hvitt glass.

Eksempel 62

l-[ 3- acetyltio- 3- ( 4- klorbenzoyl) propionyl]- L- prolin Til en løsning av 34 g 1-[3-(4-klorbenzoyl)propionyl]-L-prolin (eksempel 17) i 300 ml eddiksyre settes 17,5 g brom. Blandingen røres i 24 timer og løsningsmidlet fjernes under vakuum. Residuet fordeles mellom diklormetan og vandig natriumbikarbonat-løsning. Det vandige sjikt separeres og settes dråpevis til en blanding av is og konsentrert saltsyre. Blandingen ekstraheres med diklormetan og ekstraktet tørkes (Na2S0^). Løsningsmidlet fjernes for å gi 44 g av et gult glass. Til en blanding av 0,54 g natriummetoksyd og 1,14 g tioeddiksyre i 15 ml etanol settes 2,0 g av den foregående forbindelse, og blandingen røres i 2 timer. Blandingen helles ned på knust is og ekstraheres med diklormetan. Ekstraktet tørkes (Na2S0^) og løsningsmidlet fjernes under vakuum for å gi 1,5 g av eksempel-produktet som et gult glass. Eksempel 63 l-[ 3- benzoyltio- 3- ( 3- fluorbenzoyl) propionyl]- L- prolin En prøve på 2,44 g med natriumhydrid (60 %-ig olje-dispersjon) vaskes med heksan. Til hydridet settes 1,6 g tiobenzosyre i 25 ml etanol. Til blandingen settes 3,7 g l-[3-brom-3-(3-fluorbenzoyl)propionyl]-L-prolin og blandingen røres i 18 timer. Løsningsmidlet fjernes under vakuum og residuet fordeles mellom diklormetan og vann. Det organiske sjikt separeres, vaskes med vann og saltløsning og tørkes (MgSO^). Løsningsmidlet fjernes for å gi 4,5 g av en gummi. Gummien kromatograferes over silikagel med etylacetat-heksan-eddiksyre som løsningsmiddel for å gi 2,5 g av produktet som et glass.

Eksempel 64

l-[ 3- ( acetyltio)- 3- ( 2- naftoyl) propionyl]- L- prolin Til en løsning av 46,8 g 2-naftaldehyd og 57,5 g p-toluensulfonsyre i 300 ml tetrahydrofuran settes 52,5 ml morfolin. Blandingen tilbakeløpsbehandles i én time, avkjøles og en oppslemning av 19,5 g kaliumcyanid i 15 ml vann tilsettes. Blandingen tilbakeløpsbehandles i én time, avkjøles og helles inn i 600 ml med 10 %-ig kaliumkarbonat-løsning. Blandingen ekstraheres med diklormetan og ekstraktene vaskes med vann, 600 ml med 10 %-ig natriumhydrogensulfitt og saltløsning. Ekstraktet tørkes (MgS04) og løsningsmidlet fjernes. Residuet findeles med heksan for å gi 61,7 g med a-(2-naftyl)-4-morfolin-acetonitril som et fult fast stoff.

Det foregående faste stoff (61,7 g) i 400 ml tetrahydrc-furan tilsettes 15 ml med 30 %-ig KOH i etanol. Til blandingen settes 24 ml akrylnitril i 150 ml tetrahydrofuran (eksotermisk 20°C—>38°C). Blandingen røres i 18 timver ved romtemperatur og løsningsmidlet fjernes. Residuet oppløses i diklormetan og vaskes med vann. Løsningsmidlet fjernes for å gi 65 g av en mørk gummi. En blanding av den foregående forbindelse (65 g), 230 ml eddiksyre og 38 ml vann tilbakeløpsbehandles i 1 1/2 time. Løsningsmidlet fjernes og residuet oppløses i CI^Cl^ Ekstraktet vaskes med vann saltløsning og tørkes (MgS04) , og løsningsmidlet fjernes for å gi 60 g av en gummi. En blanding av den foregående forbindelse og 200 ml 6N HCl tilbakeløpsbehandles i 1 1/2 time. Blandingen av-kjøles og filtreres for å gi 49,6 g med urenset 3-(2-naftoyl)-propionsyre som et lysebrunt fast stoff, sm.p. 147-155°C. Det faste stoff ekstraheres med 500 ml varm etylacetat. Fra etylacetat-ekstraktet oppnås 24,3 g med krystaller i to omganger. Omkrystallisering fra (2 ganger) etylacetat gir 10,5 g med lysebrune krystaller, sm.p. 168-170°C.

Til en oppslemning av 9,12 g 3-(2-naftoyl)propionsyre og 4,6 g N-hydroksysuccinimid settes 8,24 g N ^-dicykloheksylkarbodiimid i 40 ml dioksan. Blandingen røres ved romtemperatur i 18 timer og filtreres. Filtratet konsentreres til tørrhet og residuet findeles ned heksan-eter for å gi 13,0 g med fast stoff. Det faste stoff oppløses i 150 ml diklormetan og heksan (160 ml) tilsettes. Filtrering gir 9,8 g, sm.p. 162-165°C, med N-hydroksysuccinimid-ester av 3-(2-naftoyl)propionsyre.

Den foregående forbindelse (9,77 g) som en oppslemning i 160 ml etanol settes til en løsning av 5,18 g L-prolin og 7,58 g natriumbikarbonat i 160 ml vann. Blandingen røres ved romtemperatur i 18 timer og blandingen konsentreres under vakuum til halvt volum. Blandingen ekstraheres med etylacetat og blandingen bråkjøles i et isbad og surgjøres med konsentrert saltsyre. Den surgjorte blanding ekstraheres med diklormetan og ekstraktene vaskes med vann, saltløsning og tørkes (MgSO^). Løsningsmidlet fjernes for å gi 9,5 g l-[3-(2-naftoyl)propionyl]-L-prolin som en gummi. Kromatografering av gummien på en silikagel-kolonne med dimensjonene 3,81 cm x 45,72 cm (60-200 mesh) med etylacetat-heksan-eddiksyre (1:1:0,4) som løsningsmiddel gir 5,5 g med krystaller som omkrystalliseres fra diklormetan-heksan for å gi 4,9 g med hvite krystaller, sm.p. 116-118°C.

Til 3,24 g av den foregående forbindelse i 35 ml eddiksyre settes 1,6 g brom i 10 ml eddiksyre. Blandingen røres ved romtemperatur i 18 timer, konsentreres til halvt volum under vakuum og helles inn i is og vann. Blandingen ekstraheres med diklormetan og ekstraktene vaskes med vann, saltløsning og tørkes (MgS04). Løsningsmidlet fjernes under vakuum for å gi 4,0 g av

en gummi. Gummien kromatograferes over silikagel med etylacetat-heksan-eddiksyre (1:1:0,4) som løsningsmiddel. Konsentrering av kolonnefraks joner gir 2,6 g med l-[3-brom-3-(2-naftoyl)propionyl]-L-prolin som et hvitt amorft fast stoff, sm.p. 50-80°C.

Til 30 ml etanol, avkjølt i et isbad, settes 380 mg natriumhydrid (60 %-ig dispersjon i olje) og 0,67 ml tioleddiksyre. Etter røring i 30 minutter tilsettes 2,55 g med l-[3-brom-3-(2-naftoyl)propionyl]-L-prolin og blandingen røres i 18 timer. Løs-ningsmidlet fjernes under vakuum. Residuet kromatograferes på en silikagel-kolonne med etylacetat-heksan-eddiksyre (7,5:2,5:0,2)

om løsningsmiddel, og dette gir 1,2 g av eksempel-produktet som et hvitt glass, [a]D-36(c, 0,96 etanol).

Eksempel 6 5

[S_- (R* ,S*) ] -1- (3-acetyltio-3-benzoyl-2-metylpropionyl) - L- prolin og [S_-(R ,R )]-1-(3-acetyltio-3-benzoyl-2-metylpropionyl)- L- prolin

Som beskrevet i eksempel 10 bromeres 22,6 g med (S_) - 1- (3-benzoyl-2-metylpropionyl)-L-prolin (isomer A), sm.p. 216-219°c, i 400 ml eddiksyre med 12,5 g brom ved tilsetning av hydrogenbromid-gass som en katalysator. Etter 2 timer konsentreres løsningsmidlet til 1/3 av dets volum og helles ned på is og vann. Blandingen ekstraheres med diklormetan og ekstraktene vaskes med vann, saltløsning og tørkes (MgS04) . Konsentrering av ekstraktet gir et hvitt glass [blanding av [S_- (R* ,S*) ] -1-(3-brom-3-benzoyl-2- metylpropionyl) -L-prolin og [S_-(R*,R ) ]-1-(3-brom-3-benzoyl-2-metylpropionyl)-L-prolin].

Som beskrevet i eksempel 11, omsettes 23,9 g av de foregående forbindelser (blanding av diastereomerer) med natrium-

tioacetat [fremstilt fra 9,0 ml tioleddiksyre og 2,92 g NaH (60

%-ig dispersjon i olje)] i 2,2 liter acetonitril. Blandingen røres i 18 timer ved romtemperatur og 90 ml eddiksyre tilsettes Løsningsmidlet fjernes under vakuum og residuet fordeles mellom diklormetan og vann. Det organiske sjikt fraskilles, tørkes

(MgSO^) og løsningsmidlet fjernes under vakuum for å gi 23 g av

en gummi. Gummien oppløses i varm etylacetat og løsningen brå-kjøles og filtreres (2,7 g med fast stoff). Til filtratet settes 70 ml heksan og løsningsmidlet dekanteres fra det gummiaktige materiale. Den dekanterte løsning konsentreres for å gi 19,1 g av en gummi som kromatograferes på en silikagel-kolonne med dimensjonene 5,08 cm x 63,50 cm (60-200 mesh) med etylacetat-heksan-eddiksyre (5:5:0,2). Fra de første kutt ble det oppnådd 4,53 g av et fast stoff som krystalliseres fra etylacetat-heksan for å

gi 3,14 g med hvite krystaller, sm.p. 123-125°C. Omkrystallisering fra aceton-heksan gir 3,0 g med hvite krystaller, sm.p. 160-161°C, av [S-(R<*>.S<*>)]-1-(3-acetyltio-3-benzoyl-2-metylpropionyl)-L-prolin; [a]D 2 3 + 275 + 1 (c, 0,956 etanol). De fraksjoner fra kolonnen som fremviste en blanding av diastereomerer ved tynn-sjiktkroroatografering, blir kromatigrafert på nytt. De senere fraksjoner som fremviser en komponent, kombineres for å gi 4,1 g med [S_- (R* ,R*) ] -1- (3-acetyltio-3-benzoyl-2-metylpropionyl) -L-

prolin som et hvitt glass, [ a]^ - 91 +1 { c, 1,08 etanol).

Eksempel 66

[S_- (R ,S_ ) ] -l-[ 3-acetyltio-3- (3-f luorbenzoyl) -2-metylpropionylj - L-prolin og [S-(R<*>,R<*>)]-l-[3-acetyltio-3-(3-fluorbenzoyl)-2-metylpropionyl]- L- prolin

Som beskrevet i eksempel 54, blir 4 ,0 g med (SJ-1-[3-(3-fluorbenzoyl)-2-metylpropionyl]-L-prolin (isomer A), sm.p. 182-185°C , bromert for å gi brom-derivater av isomer A [blanding av [S_- (R*,S*) -l-[ 3-brom-3- (3-fluorbenzoyl) -2-metylpropionyl] -L-prolin og [ S_- (R* ,R*) ] -l-[ 3-brom-3- (3-f luorbenzoyl) -2-metylpropionyl] - L-prolin]. Separering av blandingen ved kromatografering av en preparert LC/500 kolonne med heksan-etylacetat-eddiksyre (75:25:2) som løsningsmiddel gir 1,68 g av ren diastereoisomer merket x og 0,74 g med rem diastereomer merket Y. Omsetning av diastereomer merket X med kaliumtioacetat i etanol i 4 dager gir eksempel-produktene (blanding av diastereomerer). Omsetning av diastereomer merket Y med kaliumtioacetat i etanol i 4 dager gir eksempel-produktene (blanding av diastereomerer). Kromatografering av blandingen på en silikagel-kolonne med etylacetat-heksan-eddiksyre (5:5:0,2) separerer diastereomeren, og det oppnåas [S_-(R ,S_ ) ] -1-[3-acetyltio-3- (3-fluorbenzoyl)-2-metylpropionyl]-L-prolin, sm.p. 158-159°C, [o!]D + 252° + 3 (c, 0,318 etanol) og [ S_- (R* , R*) ] -1-[3 - acetyltio-3-(3-fluorbenzoyl)-2-metylpropionyl]-L-prolin som et hvitt glass, [ a] -147° + 1 (c, 0,834 etanol).

Eksempel 67

[S-(R<*>, S<*>)]-l-[3-acetyltio-3-(4-brombenzoyl)-2-metylpropionyl]-L-prolin og [S_-(R+,R+) ]-l-[ 3-acetyltio-3-(4-brombenzoyl)-2-metylpropionyl]- L- prolin

Til en løsning av 100 g 4-brombenzaldehyd i 400 ml tetrahydrofuran settes 104 g p-toluensulfonsyre-monohydrat. Til løsningen settes dråpevis en løsning av 94,5 ml morfolin i 100 ml tetrahydrofuran. Blandingen tilbakeløpsbehandles i én time, av-kjøles og en oppslemning av 35,2 g kaliumcyanid i 27 ml vann tilsettes. Blandingen tilbakeløpsbehandles i 18 timer, avkjøles og helles inn i 1 liter med 10 %-ig kaliumkarbonat. Blandingen ekstraheres med diklormetan og ekstraktet vaskes med vann, 10

%-ig natriumbisulfitt, saltløsning og tørkes (MgS04). Løsnings-midlet fjernes under vakuum og residuet finfordeles med heksan og filtreres for å gi 136,2 g med hvite krystaller, sm.p. 88-90°C.

Til det foregående a-(4-bromfenyl)-4-morfolinacetonitril (136,2 g)

i 800 ml tetrahydrofuran settes 25 ml med 30 %-ig kaliumhydroksyd i etanol. Til den rørte blanding settes sakte 42,5 ml metakrylnitril i 200 ml tetrahydrofuran (eksotermisk 17° - 34°C). Blandingen røres ved romtemperatur i 18 timer, filtreres og filtratet konsentreres til 200 ml. Tilsetning av 100 ml eter, bråkjøling og filtrering gir 113,7 g med hvite krystaller, sm.p. 170-175°C.

En blanding av den foregående forbindelse, 500 ml eddiksyre og 58 ml vann tilbakeløpsbehandles i én time og løsningsmidlet fjernes. Residuet oppløses i diklormetan og vaskes med vann, saltløsning

og tørkes (MgSO^). Løsningsmidlet fjernes for å gi 83 g med 2-metyl-3-(4-brombenzoyl)propionitril, sm.p. 101-103 C. En blanding av den foregående forbindelse (83 g) og 400 ml 6N HCl tilbakeløps-behandles i 18 timer. Blandingen bråkjøles i et isbad og filtreres.

Det faste stoff vaskes med vann og oppløses i 400 ml diklormetan. Diklormetanet tørkes (MgSO^) og konsentreres på et dampbad mens heksan tilsettes. Bråkjøling og filtrering gir 72,0 g med hvite krystaller av 3-(4-brombenzoyl)-2-metylpropionsyre, sm.p. 124-125°C.

Den foregående forbindelse (72 g) omdannes til N-hydroksysuccinimid-ester, sm.p. 99-l04°c, som i eksempel 7, og

den aktiverte ester (94,6 g) kobles, som i eksempel 9, med 44,9 g L-prolin for å gi 70,7 g med l-[3-(4-brombenzoyl)-L-prolin som en gummi (blanding av diastereomerer). Gummien oppløses i varm etylacetat (200 ml) og heksan (250 ml) tilsettes. Bråkjøling gir 19,3 g med fast stoff som omkrystalliseres fra etylacetat for å gi 10,3 g med (S_) -l-[ 3-(4-brombenzoyl) -2-metylpropionyl] -L-prolin , sm.p.

165-167°C (isomer A). Fra de andre mor-væsker oppnås ytterligere med isomer A, og den renses ved kromatografering på silikagel. Fra kolonnen oppnås (R)-l-[3-(4-brombenzoyl)-2-metylpropionyl]-L-prolin (isomer B). Til en blanding av 10,2 g med isomer A i 125 ml eddiksyre settes 4,43 g brom i 20 ml eddiksyre. Vannfritt hydrogenbromid tilsettes og blandingen røres i 3 timer. Blandingen konsentreres til 1/3 av volumet og helles ned på is og vann. Blandingen ekstraheres med diklormetan og ekstraktet vaskes med vann, saltløsning og tørkes (MgSO^). Løsningsmidlet fjernes under vakuum for å gi 12,7 g av et glass (blanding av diastereomerer). En blanding av 10,5 g av det foregående glass i 150 ml acetonitril settes dråpevis til en blanding av natriumtioacetat (fremstilt fra 2,9 ml tioleddiksyre og 1,4 g NaH (60 %-ig olje-dispersjon) i 150 ml acetonitril). Blandingen røres ved romtemperatur i 18 timer, 30 ml eddiksyre tilsettes og løsningsmidlet fjernes under vakuum. Residuet fordeles mellom diklormetan og vann. Diklormetan-sjiktet fraskilles, vaskes med vann, saltløs-ning og tørkes (MgSO^). Løsningsmidlet fjernes og residuet kromatograferes på en silikagel-kolonne med etylacetat-heksan-eddiksyre (5:5:0,2) som løsningsmiddel. De tidlige fraksjoner inneholdende hovedsaklig én komponent kombineres og kromatograferes på silikagel for å gi 5,1 g med fast stoff. Krystallisering fra etylacetat-heksan gir 3,5 g med [S-(R<*>,S<*>)]-l-[3-acetyltio-3-(4-

brombenzoyl)-2-metylpropionyl]-L-prolin som hvite krystaller, sm.p. 136-138°C, [a]D + 211° + 1(c, 0,971, etanol). De siste fraksjoner fra kolonne-kromatograferingen som inneholder én komponent ved tynnsjiktkromatografi, kombineres for å gi 1,2 g med [§_-(R ,R ) ]-l-[3-acetyltio-3- (4-brombenzoyl)-2-metylpropionyl]-L-prolin som et hvitt glass, [ a]^ -69+1 (c, 0,983 etanol).

Eksempel 6 8

l-[ 3- acetyltio- 3- ( 2- naftoyl)- 2-( S)- metylpropionyl]- L- prolin

Som i eksempel 47 omdannes 2-naftaldehyd til 3-(2-naftoyl)-2-metylpropionsyre og kobles til L-prolin. l-[3-(2-naftoyl)-2-metylpropionyl]-L-prolinet skilles i isomeren A og B. Isomer A, (S_) -l-[ 3-(2-naftoyl) -2-(S) -metylpropionyl]-L-prolin, omsettes med brom i eddiksyre og produktet omsettes med natriumtioacetat i acetonitril, som i eksempel 67, for å gi eksempel-produktet som et glass (blanding av diastereomerer).

Eksempel 69

l-[ 3- benzoyl- 2-( S)- metyl- 3-( 2- pyrimidinyltio) propionyl]- L- prolin

En prøve av (S_)-1-(3-benzoyl-2- (S)-metylpropionyl)-L-prolin omsettes med brom i eddiksyre for å gi 1,84 g med 1-(3-brom-3-benzoyl-2-metylpropionyl)-L-prolin (blanding av diastereomerer) . En løsning av den foregående forbindelse i 20 ml acetonitril settes til en blanding av natriumsaltet av 2-tiopyrimidin (fremstilt fra 0,20 g NaH (60 %- ig olje-dispersjon) og 0,56 g 2-tiopyrimidin) i 30 ml acetonitril. Blandingen røres i 18 timer og 0,4 ml eddiksyre tilsettes. Blandingen filtreres og filtratet konsentreres under vakuum. Residuet oppløses i diklormetan og vaskes med vann, saltløsning og tørkes (MgS04). Løsningsmidlet fjernes og residuet (2,0 g) kromatograferes på en kolonne av silikagel med etylacetat-heksan-eddiksyre (75:25:2) som løsnings-middel for å gi 0,32 g med [ S-(R* ,S*) ] -l-[ 3-benzoyl-2-( S) -metyl-3- (2-pyrimidinyltio)propionyl]-L-prolin (etter utfelling fra eter-

heksan) som hvitt glass, [ a] + 233° + 2 (c, 0,489 etanol) og [S-(R ,R. ) ] -l-[ 3-benzoyl-2-(S) -metyl-3- (2-pyrimidinyltio) propionyl]-L-prolin som et glass.

Eksempel 7 0

l-[ 3- acetyltio- 3- benzoyl- 2-( S)- fenylpropionyll- L- prolin

En prøve på 0,01 mol med 3-benzoyl-2-(fenyl)propionsyre oppløses i tetrahydrofuran Og 0,01 mol N,N-karbonyldiimidazol tilsettes. Etter røring i 3 timer ved romtemperatur tilsettes 0,01 mol L-prolin-t-butyl-ester. Etter 24 timer fjernes løsnings-midlet og l-[3-benzoyl-2-(fenyl)propionyl]-L-prolin-t-butyl-ester isoleres. Den foregående forbindelse omsettes med trifluoreddiksyre for å fjerne t-butyl-gruppen. Separering av isomerene A og B utføres som beskrevet for eksempel 65. Omsetning av isomerene

med brom i eddiksyre og omsetning av l-[3-brom-3-benzoyl-2-(S)-fenyl-propionyl]-L-prolin-isomerene med natriumtioacetat i acetonitril,

som i eksempel 65 gir eksempel-produktene. produktetfra isomer A separeres ved kromatograf i for å gi [ S_-(R* ,R*) ] - og [ S_-(R* ,S*) ]-l-[3-acetyltio-3-benzoyl-2-S-fenylpropionyl]-L-prolin.

Eksempel 71

l-[ 3- acetyltio- 3- ( 4- klorbenzoyl)- 2-( S)- metylpropionyl]- L- prolin

Til en oppslemning av 14,3 g 3-(4-klorbenzoyl)-2-metylpropionsyre og 7,26 g N-hydroksysuccinimid i 150 ml dioksan settes 13 g N ,N-dicykloheksylkarbodiimid. Etter røring natten over filtreres blandingen og det faste stoff vaskes med eter. Det kombinerte filtrat og vaskevæsker konsentreres under vakuum for å

gi 20,1 g av en olje. Oljen settes til en løsning av 7,25 g L-prolin og 10,58 g natriumbikarbonat i 200 ml med 50 %-ig etanol. Blandingen røres natten over og filtreres gjennom diatoméjord. Filtratet surgjøres med konsentrert saltsyre og ekstraheres med diklormetan. Ekstraktet vaskes med vann, tørkes (MgS04) og løs-ningsmidlet fjernes under vakuum, og dette gir en rav-gul gummi. Gummien oppløses i etylacetat-heksan og blandingen hensettes i

flere dager. Filtrering gir 3,23 g med krystaller, sm.p. 170-179°C.

Omkrystallisering fra etylacetat-heksan gir 2,81 g av (S)-l-[3-(4-klorbenzoyl)-2-(S)-metylpropionyl]-L-prolin som fargeløse nåler, sm.p. 177 ,5-179 ,5°c. Den foregående forbindelse oppløses i 50 ml eddiksyre og 1,27 g brom tilsettes. Blandingen røres natten over og blandingen konsentreres under vakuum og heller inn i is og vann. Blandingen ekstraheres med diklormetan og ekstraktet vaskes med vann og tørkes (MgSO^). Løsningsmidlet fjernes for å gi 3,15 g av et hvitt glass.

Til en løsning av 0,454 g med natriummetoksyd i 40 ml metanol settes 0,684 g tioleddiksyre. Til løsningen settes 3,07

g av det foregående glass og blandingen røres i 3 dager. Blandingen helles inn i is og vann og ekstraheres med diklormetan. Ekstraktet konsentreres for å gi 2,85 g med produkt (blanding av diastereomerer) som et hvitt glass.

Eksempel 7 2 (utgangsstoff) l-[ 3- ( 4- tert- butylbenzoyl) propionyl]- L- prolin

Som i eksempel 85 omsettes 14 g med 3-(4-tert-butylbenzoyl)propionsyre med 6,9 g N-hydroksysuccinimid i nærvær av 12,36 g N,N-dicykloheksylkarbodiimid for å gi 15,5 g med 3-(4-tert-butylbenzoyl)propionsyre, N-hydroksysuccinimid-ester, sm.p. 135-138°C. Den foregående forbindelse settes til en løsning av 8,05 g L-prolin og 11,76 g natriumbikarbonat i 400 ml etanol-vann (1:1). Blandingen røres natten over, filtreres og filtratet konsentreres under vakuum. Blandingen surgjøres med konsentrert saltsyre og ekstraheres med diklormetan. Løsningsmidlet fjernes for å gi en ravgul gummi som kromatograferes på 150 g ml silikagel med heksan-etylacetat (1:1) inneholdende 2 % eddiksyre som løs-ningsmiddel. Fra kolonnen oppnås 12,4 g glass. Til en løsning av 9,8 g av det foregående glass i 150 ml eddiksyre settes 4,8 g brom. Blandingen røres natten over, konsentreres og helles inn i is og vann. Blandingen ekstraheres med diklormetan og ekstraktet konsentreres for å gi 12,1 g av et glass. Det foregående glass settes til en løsning av 1,94 g natriummetoksyd og 4,56 g tioleddiksyre i 50 ml etanol. Etter røring i 2 timer, tilsettes 1 ml eddiksyre og blandingen fortynnes med vann. Blandingen ekstraheres med diklormetan, ekstraktet vaskes med vann, tørkes (MgSO^) og løsningsmidlet fjernes for å gi 12 g med produkt som et gult glass.

Eksempel 7 3

l-[3-(5-benzoyl-2-pyrimidinyltio)-3-(4-klorbenzoyl)propionyl]-L-■ prolin

Til en løsning av 0,54 g natriummetoksyd i 50 ml metanol settes 2,16 g 5-benzoyl-2-merkaptopyrimidin. Til blandingen settes 3,88 g med l-[3-brom-3-(4-klorbenzoyl)propionyl]-L-prolin som et gult fast stoff som separeres. Mettet natriumbikarbonat tilsettes (fast stoff oppløses) og blandingen røres i 5 minutter. Eddiksyre (1 ml) tilsettes og blandingen røres natten over. Blandingen fortynnes med vann og filtreres. Det faste stoff oppløses i diklormetan og løsningen vaskes med vann og tørkes. Løsningsmidlet fjernes for å gi 3,83 g med produkt som et gult glass.

Eksempel 7 4

l-[ 3- acetyltio- 3- ( 5- indanylkarbonyl) propionyl]- L- prolin

Som i eksempel 85 omsettes 21,8 g med 3-(5-indanylkarbonyl) propionsyre med 11,5 g med N-hydroksysuccinimid og 20,6

g NiN-dicykloheksylkarbodiimid i dioksan, og dette gir 27,6 g med N-hydroksysuccinimid-ester som gule krystaller, sm.p. 112-117°c. Den foregående forbindelse settes til en løsning av 12,25 g L-prolin og 17,8 g natriumbikarbonat i 600 ml etanolvann (1:1). Blandingen røres natten over, filtreres og filtratet konsentreres

og surgjøres til pH 4 med konsentrert saltsyre. Blandingen ekstraheres med diklormetan og ekstraktet konsentreres for å gi 24 g av en olje. Ved henstand utskilles krystaller, og etylacetat-eter tilsettes. Filtrering gir 15,5 g med l-[3-(5-indanylkarbonyl)-propionyl]-L-prolin som hvite krystaller, sm.p. 89-91°C.

Til en løsning av 13,9 g av den foregående forbindelse

i 200 ml eddiksyre settes 7,06 g brom. Blandingen røres natten over og konsentreres under vakuum til en olje. Oljen kromatograferes på en silikagel-kolonne med heksan-etylacetat (1:1) inneholdende 2 % eddiksyre som løsningsmiddel, og dette gir 14,9 g av en lysegul olje. Oljen settes til en løsning av 2,55 g natriummetoksyd og 5,78 g tioleddiksyre i 75 ml metanol og blandingen røres natten over. Opparbeiding med surgjøring , fortynning med vann og ekstrahering med diklormetan gir 13 g med produkt som et lysegult glass.

Claims

Analogifremgangsmåte for fremstilling av terapeutisk aktive forbindelser med formelen:

hvor prolingruppen er i L-konfigurasjon; n er null eller en;

R., er merkapto, benzoyltio, alkanoyltio med fra 2 til 4

karbonatomer eller grupper med

hvor R2 er hydrogen, fenyl eller alkyl med opptil 3 karbon

atomer; Rg er fenyl; R^ er hydrogen eller er fenyl eller C^_^

alkyl i S-konf iguras jon; R,, er hydrogen eller alkyl med opptil 4 karbonatomer; og ARYL er 1-naftyl, 2-naftyl, 4-klor-l-naftyl,

4-metoksy-l-naftyl, 4-bifenylyl, 5-indanyl, 4-indanyl eller en

brom, trifluormetyl, fenoksy, halogenfenoksy, alkyl med opptil 4 karbonatomer eller alkoksy med opptil 4 karbonatomer;

R7 er klor, fluor, brom, alkyl med opptil 4 karbonatomer eller

alkoksy med opptil 4 karbonatomer; og m er null, én eller to;

innbefattet de stereoisomere former, karakterisert

ved å kondensere en forbindelse med formelen:

hvor n, R^ og ARYL er som angitt ovenfor; X er klor, brom, jod, -SR eller -OS02R hvor R er alkyl med opptil 4 karbonatomer,

fenyl, p-tolyl, benzyl eller p-metoksybenzyl; og Y er en karbo

nyl-aktiverende rest av et peptid-koblingsreagens, klor, brom

eller en gruppe fra formlene:

opptil 4 karbonatomer, fenyl, p-tolyl, p-metoksybenzyl, 2,4,6-trimetylbenzyl, trimetylsilyl, 2-trimetylsilyletyl og R,, er som angitt ovenfor; og prolingruppen er i L-konfigurasjon; med et anion av et tiolerende reagens med formelen H-R3 hvor R^ er som angitt ovenfor, for å gi et produkt med formelen:

hvor n, R^, R^, ARYL og Y er som angitt ovenfor, og, om ønsket, fjerne den tiobeskyttende gruppe for å få en merkaptogruppe; og, om ønsket, omdanne Y til klor, brom eller jod når Y er hydroksy; og, om ønsket, kondensere et mellomprodukt med formelen:

hvor Z er klor, brom eller en karbonyl-aktiverende rest av et peptid-koblingsreagens, med L-prolin eller en L-prolin-alkyl (C,-C.)-ester eller et L-prolin-derivat med formelen:

hvor R' er som angitt ovenfor, og fjerne R<1->gruppen;

og, om ønskes, fremstille de ønskede stereoisomere former ved anvendelse av optisk aktive utgangsmaterialer og/eller ved separering av produktene.