NO138451B - Fremgangsmaate for fremstilling av rensede enzymloesninger - Google Patents
Fremgangsmaate for fremstilling av rensede enzymloesninger Download PDFInfo
- Publication number
- NO138451B NO138451B NO272773A NO272773A NO138451B NO 138451 B NO138451 B NO 138451B NO 272773 A NO272773 A NO 272773A NO 272773 A NO272773 A NO 272773A NO 138451 B NO138451 B NO 138451B
- Authority
- NO
- Norway
- Prior art keywords
- proteins
- cells
- centrifugation
- enzyme
- enzyme solutions
- Prior art date
Links
- 102000004190 Enzymes Human genes 0.000 title claims description 19
- 108090000790 Enzymes Proteins 0.000 title claims description 19
- 238000000034 method Methods 0.000 title claims description 17
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 title description 2
- 230000000694 effects Effects 0.000 claims description 14
- 102000004169 proteins and genes Human genes 0.000 claims description 12
- 108090000623 proteins and genes Proteins 0.000 claims description 12
- 238000005119 centrifugation Methods 0.000 claims description 7
- 150000003242 quaternary ammonium salts Chemical class 0.000 claims description 6
- 238000001556 precipitation Methods 0.000 claims description 5
- 238000000746 purification Methods 0.000 claims description 5
- 230000015556 catabolic process Effects 0.000 claims description 4
- 238000001914 filtration Methods 0.000 claims description 4
- 239000002244 precipitate Substances 0.000 claims description 4
- 102000011931 Nucleoproteins Human genes 0.000 claims description 3
- 108010061100 Nucleoproteins Proteins 0.000 claims description 3
- 230000000813 microbial effect Effects 0.000 claims description 3
- 102000039446 nucleic acids Human genes 0.000 claims description 3
- 108020004707 nucleic acids Proteins 0.000 claims description 3
- 150000007523 nucleic acids Chemical class 0.000 claims description 3
- 239000002904 solvent Substances 0.000 claims description 3
- 238000004090 dissolution Methods 0.000 claims description 2
- 239000012634 fragment Substances 0.000 claims description 2
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 claims description 2
- 238000010338 mechanical breakdown Methods 0.000 claims description 2
- 229940088598 enzyme Drugs 0.000 description 17
- 238000004140 cleaning Methods 0.000 description 7
- 239000004094 surface-active agent Substances 0.000 description 7
- YMKDRGPMQRFJGP-UHFFFAOYSA-M cetylpyridinium chloride Chemical compound [Cl-].CCCCCCCCCCCCCCCC[N+]1=CC=CC=C1 YMKDRGPMQRFJGP-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 6
- 108010073038 Penicillin Amidase Proteins 0.000 description 4
- 239000000047 product Substances 0.000 description 4
- 239000004382 Amylase Substances 0.000 description 3
- 102000013142 Amylases Human genes 0.000 description 3
- 108010065511 Amylases Proteins 0.000 description 3
- 235000019418 amylase Nutrition 0.000 description 3
- 238000003756 stirring Methods 0.000 description 3
- 241000588724 Escherichia coli Species 0.000 description 2
- JGSARLDLIJGVTE-MBNYWOFBSA-N Penicillin G Chemical compound N([C@H]1[C@H]2SC([C@@H](N2C1=O)C(O)=O)(C)C)C(=O)CC1=CC=CC=C1 JGSARLDLIJGVTE-MBNYWOFBSA-N 0.000 description 2
- BFNBIHQBYMNNAN-UHFFFAOYSA-N ammonium sulfate Chemical compound N.N.OS(O)(=O)=O BFNBIHQBYMNNAN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 229910052921 ammonium sulfate Inorganic materials 0.000 description 2
- 235000011130 ammonium sulphate Nutrition 0.000 description 2
- 102000005936 beta-Galactosidase Human genes 0.000 description 2
- 108010005774 beta-Galactosidase Proteins 0.000 description 2
- 239000000872 buffer Substances 0.000 description 2
- DKPFZGUDAPQIHT-UHFFFAOYSA-N butyl acetate Chemical compound CCCCOC(C)=O DKPFZGUDAPQIHT-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 238000000855 fermentation Methods 0.000 description 2
- 230000004151 fermentation Effects 0.000 description 2
- 239000000203 mixture Substances 0.000 description 2
- 239000000725 suspension Substances 0.000 description 2
- QKNYBSVHEMOAJP-UHFFFAOYSA-N 2-amino-2-(hydroxymethyl)propane-1,3-diol;hydron;chloride Chemical compound Cl.OCC(N)(CO)CO QKNYBSVHEMOAJP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- NLXLAEXVIDQMFP-UHFFFAOYSA-N Ammonium chloride Substances [NH4+].[Cl-] NLXLAEXVIDQMFP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- VEXZGXHMUGYJMC-UHFFFAOYSA-M Chloride anion Chemical compound [Cl-] VEXZGXHMUGYJMC-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- KCXVZYZYPLLWCC-UHFFFAOYSA-N EDTA Chemical compound OC(=O)CN(CC(O)=O)CCN(CC(O)=O)CC(O)=O KCXVZYZYPLLWCC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000002253 acid Substances 0.000 description 1
- 230000002378 acidificating effect Effects 0.000 description 1
- 230000009286 beneficial effect Effects 0.000 description 1
- 125000002091 cationic group Chemical group 0.000 description 1
- 239000003093 cationic surfactant Substances 0.000 description 1
- 238000001311 chemical methods and process Methods 0.000 description 1
- 238000006243 chemical reaction Methods 0.000 description 1
- 239000007809 chemical reaction catalyst Substances 0.000 description 1
- 239000007795 chemical reaction product Substances 0.000 description 1
- 150000001875 compounds Chemical class 0.000 description 1
- 229940079919 digestives enzyme preparation Drugs 0.000 description 1
- 239000006185 dispersion Substances 0.000 description 1
- 238000006911 enzymatic reaction Methods 0.000 description 1
- 238000007429 general method Methods 0.000 description 1
- 239000001963 growth medium Substances 0.000 description 1
- 238000010438 heat treatment Methods 0.000 description 1
- 244000005700 microbiome Species 0.000 description 1
- 229940056360 penicillin g Drugs 0.000 description 1
- 239000008363 phosphate buffer Substances 0.000 description 1
- 229940070891 pyridium Drugs 0.000 description 1
- 238000011084 recovery Methods 0.000 description 1
- 150000003839 salts Chemical class 0.000 description 1
- 239000006228 supernatant Substances 0.000 description 1
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Substances O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
Classifications
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N9/00—Enzymes; Proenzymes; Compositions thereof; Processes for preparing, activating, inhibiting, separating or purifying enzymes
- C12N9/14—Hydrolases (3)
- C12N9/78—Hydrolases (3) acting on carbon to nitrogen bonds other than peptide bonds (3.5)
- C12N9/80—Hydrolases (3) acting on carbon to nitrogen bonds other than peptide bonds (3.5) acting on amide bonds in linear amides (3.5.1)
- C12N9/84—Penicillin amidase (3.5.1.11)
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N1/00—Microorganisms, e.g. protozoa; Compositions thereof; Processes of propagating, maintaining or preserving microorganisms or compositions thereof; Processes of preparing or isolating a composition containing a microorganism; Culture media therefor
- C12N1/38—Chemical stimulation of growth or activity by addition of chemical compounds which are not essential growth factors; Stimulation of growth by removal of a chemical compound
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N9/00—Enzymes; Proenzymes; Compositions thereof; Processes for preparing, activating, inhibiting, separating or purifying enzymes
Landscapes
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Wood Science & Technology (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- Zoology (AREA)
- Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
- Genetics & Genomics (AREA)
- Biotechnology (AREA)
- Biomedical Technology (AREA)
- Microbiology (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- Biochemistry (AREA)
- General Engineering & Computer Science (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Molecular Biology (AREA)
- Mycology (AREA)
- General Chemical & Material Sciences (AREA)
- Tropical Medicine & Parasitology (AREA)
- Virology (AREA)
- Enzymes And Modification Thereof (AREA)
- Preparation Of Compounds By Using Micro-Organisms (AREA)
- Medicines Containing Plant Substances (AREA)
Description
Den foreliggende oppfinnelse angår en fremgangsmåte for å rense enzymer som er ekstrahert fra mikro-organismer. Enzymer og spesielt slike som er dannet ved gjæring har fått en stor betydning og benyttes i mange kjemiske prosesser som reak-sjonskatalysatorer.
Selv om det i enkelte tilfeller er mulig å benytte en urenset enzymekstrakt er det blitt stadig mer nodvendig å benytte rensede enzympreparater, og bruk av rene enzymer kan gi mange fordeler både med hensyn til gjenvinning og rensing av reaksjon sprodukter og med hensyn til hoyere aktivitet og selektivitet for enzymreaksjonene.
Det er kjent at det er vanskelig å rense et enzym i industriell målestokk. Antall rensetrinn er alltid meget hoyt og gjennom-føringen er av og til vanskelig. Foruten de tekniske vanskelig-heter er en noyaktig rensing av et enzym alltid meget kostbart.
Det er fra U.S patentskrift 3.272.717 kjent en fremgangsmåte for anrikning av amylase, hvor en opplbsning som inneholder amylase blandes med et kationisk overflateaktivt middel ved pH 6,0-6,5
og utfelte forurensende proteiner filtreres fra selve opplosningen. Som kationisk overflateaktive midler er kvartære amoniumssalter angitt som foretrukket, og ved en nevnte fremgangsmåte dannes et kompleks som innbefatter amylase og det overflateaktive middel. Dette er i motsetning til ved en foreliggende oppfinnelse som vedrbrer en generell metode for å oppnå en ekstrem rensing av
enzymopplosninger ved at nen ved et spesielt punkt i den totale prosess tilsetter de angitte overflateaktive kvartære ammoriium-salter som virker til å separere selve enzymet fra de bvrige komponenter i dyrkningsmediet og uten at det dannes noen kompieks-forbindelse ved noen reaksjon.
Det er et formål for den foreliggende oppfinnelse å fremskaffe en fremgangsmåte for rensing av enzymer som eliminerer de fleste ulemper ved de konvensjonelle prosesser ved å forenkle sentrifugering- og filtreringsprosedyrene og ved å gjore det mulig å oppnå en hoy spesifikk aktivitet (spesifikk aktivitet= aktivitet pr. mg. protein).
Oppfinnelsen vedrdrer således en fremgangsmåte for fremstilling av rensede enzymlosninger ved
a) mekanisk nedbrytning av mikrobecellene eller opplosning av disse, idet cellefragmenter etter nedbrytningen av cellene
eventuelt fjernes ved sentrifugering,
b) utfelling av proteinene, nukleoproteinene og nukleinsyrene, og c) fjernelse av de derved dannede utfellinger ved sentrifugering
eller filtrering,
og det særegne ved fremgangsmåten i henhold til oppfinnelsen er at utfellingen i trinn b) foretas ved hjelp av et overflateaktivt kvartært ammoniumsalt eller ved hjelp av et overflateaktivt kvartært ammoniumsalt og et delvis med vann blandbart løsningsmiddel.
De nevnte overflateaktive midler, som i andre prosesser har blitt benyttet for å fremme nedbrytningen av mikrobeceller, har vist seg å være meget effektive for utfelling av nukleinsyrer, nukleo-proteiner og proteiner. Virkningen av disse overflateaktive midler kan ytterligere forbedres ved å kombineres enten med varme-behandling eller sur og basisk behandling, hvorved hovedsakelig de uinteressante proteiner nedbrytes. Bruk av et overflate-akti vt middel sammen med et losningsmiddel som er delvis blandbart med vann har også vist seg gunstig, for eksempel n-butyl-acetat.
De kvartære ammoniumsalter som anvendes ved den foreliggende oppfinnelse er lett tilgjengelig i handelen,vog meget gode resultater er for eksempel oppnådd med heksadecylpyridinium-klorid.
Egnede konsentrasjoner av disse overflateaktive midler varierer mellom 0,1% og 0,01%, og pH-verdien kan variere mellom 3,5 og 8,5, fortrinnsvis i det sure pH-området.
I mange tilfeller er det mulig å unngå sentrifugering etter ned-brytingen av cellene og direkte utfore en behandling med det overflateaktive middel, med derav folgende vesentlig forenkling av fremgangsmåten.
De folgende eksempler illustrerer oppfinnelsen nærmere.
Eksempel 1
En stamme av Excherichia Coli ble dyrket for å fremstille celler som var rike på penicillin-amidase, etter en kjent gjærings-prosess.
1 kg av en cellepasta som inneholder 2,200 enheter pr. gram
(1 enhet penicillin-amidase er en mengde av enzym som hydrolyserer 1 ,uM penicillin G i lopet av en time ved 37°C) ble suspendert i to liter tris-HCl buffer 0,01 M ved pH 8,5. Den homogene suspensjon ble sendt to ganger gjennom et homogeniseringsapparat "Manto Gaulin" ved 700 kg/cm<2>. Produktet ble sentrifugert ved 20.000 omdreininger pr. minutt i 30 minutter og bunnfallet ble kastet.
Det ovre produktsjikt inneholdt 420 enheter/ml og 27 mg protein/ml og ble tilsatt heksadecyl-pyridium-klorid opp til en sluttkonsentrasjon på 0,2%. På samme tid ble pH justert til 4,5 under samtidig.forsiktig omroring av blandingen i to timer ved 37°C.
Etter filtrering og sentrifugering ble den uloselige rest fjernet. Fra det klare, ovre lag ble enzymet utfelt med ammoniumsulfat ved 70%, og med 59% utbytte. Enzymet viste en spesifikk aktivitet på 50,3 enheter pr. mg protein, og det betyr en renseeffekt på 3,3 ganger.
Eksempel 2
Det ble benyttet saume metode som i eksempel 1, men behandlingen ble utfort med heksadecyl-pyridinium-klorid ved pH 5,0. Det ble oppnådd en renseeffekt på 2,5 ganger med 63% utbytte.
Eksempel 3
Det ble benyttet samme metode som i eksempel 1, men ved behandling med heksadecyl-pyridinium-klorid ved pH 6,0. Det ble oppnådd en renseeffekt på 2 ganger og med et utbytte på 67%.
Eksempel 4
Det ble benyttet samme metode som i eksempel 1, men behandlingen med heksadecyl-pyridinium-klorid ble utfort ved pH 7,0. Det ble oppnådd en renseeffekt på 2,2 ganger og utbyttet var 66%.
Eksempel 5
Det ble benyttet samme metode som i eksempel 1, men ved å benytte benzyl-dimetyl-alkyl (Ciø-Cl8)-ammonium-kl or id ved PH 4»5 °<3 med konsentrasjon 0,2%. Det ble oppnådd et enzympreparat med 2,5 ganger storre renhet og med et utbytte på 68%.
Eksempel 6
4,8 kg.E. Coli celler som inneholdt penicillin-amidase dispergeres under omroring i 10 liter tris-44 buffer 0,01 M, ved pH 8,5. Suspensjon sendes to ganger ved 700 kg/cm 2 gjennom et "Manton Gaulin" homogeniseringsapparat.
Losningen sentrifugeres i 30 minutter ved 20.000 omdreininger
pr. minutt og 11,7 liter av det overst flytende produkt ble oppsamlet, og det inneholdt 11 x IO<6> enheter penicillin-amidase og 545 g proteiner. Heksadecyl-pyridinium-klorid tilsettes opptil en sluttkonsentrasjon på 0,4% og pH instilles til 4,5. Hele blandingen holdes under omroring i 3 timer ved 37°C og sentrifugeres ved hjelp av en "Alfa Laval" sentrifuge av typen LAB 102-2 5. 14 liter av en klar losning som var fri for enzymer ble gjenvunnet og den inneholdt 8,5 x 10^ enheter og 126 g protein. Utbyttet var 77% og renseeffekten var 3,3 ganger.
Eksempel 7
1 kg E. Coli celler som var rike på P-galaktosidase dispergeres i 2 liter fosfat-buffer 0,1 M, pH 7,2, og som inneholder Mg SO^
(2 x 10~<3>M) og EDTA (10~<3>M).
Dispersjonen sendes gjennom et homogeniseringsapparat av typen "Manton Gaulin" ved 750 kg/cm 2 og ble deretter sentrifugert og bunnfallet fjernet. 2,7 liter av det overste produkt ble oppnådd og det inneholdt 29,7 g proteiner ved 900.000 enheter |3-galaktosidase (1 enhet = enzym som hydrolyserer ett p. Mol o-nitrofenylgalaktoside i lopet av 1 minutt ved 25°C). Losningen ble behandlet med 0,2% heksadecyl-pyridinium-klorid ved pH 7,0 i 1,5 timer og deretter sentrifugert. Fra det overste produkt, ved metning til 35% med ammonium-sulfat, ble enzymet gjenvunnet med et utbytte på 90% og med en spesifikk aktivitet på 130 enheter og det tilsvarte en renseeffekt på 4,3 ganger.
Claims (1)
- Eksempel 8 Det ble benyttet samme metode som i eksempel 7, men ved å gå ut fra 1 kg Saccharomyses lactis celler som var rike på (3-galaktosidase. Den spesifikke aktivitet, som ved begynnelsen var 17 enheter pr. mg proteiner, var ved avsluttet rensing lik 40. Utbyttet var 71%. PATEN TKRAV Fremgangsmåte for fremstilling av rensede enzymlosninger ved a) mekanisk nedbrytning av mikrobecellene eller opplosning av disse, idet cellefragmenter etter nedbrytningen av cellene eventuelt fjernes ved sentrifugering b) utfelling av proteinene, nukleoproteinene og nukleinsyrene, og c) fjernelse av de derved dannede utfellinger ved sentrifugering eller filtrering,karakterisert ved at utfellingen i trinn b) foretas ved hjelp av et overflateaktivt kvartært ammoniumsalt eller ved hjelp av et overflateaktivt kvartært ammoniumsalt og et delvis med vann blandbart losningsmiddel.
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| IT2673372 | 1972-07-07 |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| NO138451B true NO138451B (no) | 1978-05-29 |
| NO138451C NO138451C (no) | 1978-09-06 |
Family
ID=11220129
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| NO272773A NO138451C (no) | 1972-07-07 | 1973-07-03 | Fremgangsmaate for fremstilling av rensede enzymloesninger |
Country Status (9)
| Country | Link |
|---|---|
| BE (1) | BE801351A (no) |
| DE (2) | DE2334521C3 (no) |
| DK (1) | DK133952B (no) |
| FR (1) | FR2192114B1 (no) |
| GB (1) | GB1411503A (no) |
| IE (1) | IE38174B1 (no) |
| LU (1) | LU67902A1 (no) |
| NL (1) | NL7309439A (no) |
| NO (1) | NO138451C (no) |
Families Citing this family (3)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| US4055469A (en) * | 1976-12-10 | 1977-10-25 | Eastman Kodak Company | Purification of microbial enzyme extracts using synthetic polyelectrolytes |
| JPS56109586A (en) * | 1980-02-05 | 1981-08-31 | Cpc International Inc | Production of fixed glucoseisomerase |
| US5622822A (en) * | 1994-09-13 | 1997-04-22 | Johnson & Johnson Clinical Diagnostics, Inc. | Methods for capture and selective release of nucleic acids using polyethyleneimine and an anionic phosphate ester surfactant and amplification of same |
Family Cites Families (2)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| FR1482569A (fr) * | 1966-06-07 | 1967-05-26 | Mobil Oil Corp | Procédé d'oxydation enzymatique de dérivés hydrocarbonés |
| FR1505666A (fr) * | 1966-12-01 | 1967-12-15 | Bristol Myers Co | Procédé de production de l'acide 6-aminopénicillanique par la dégradation enzymatique d'une pénicilline |
-
1973
- 1973-06-18 IE IE100473A patent/IE38174B1/xx unknown
- 1973-06-19 GB GB2913173A patent/GB1411503A/en not_active Expired
- 1973-06-21 FR FR7322608A patent/FR2192114B1/fr not_active Expired
- 1973-06-22 BE BE1005183A patent/BE801351A/xx not_active IP Right Cessation
- 1973-06-29 LU LU67902D patent/LU67902A1/xx unknown
- 1973-07-03 NO NO272773A patent/NO138451C/no unknown
- 1973-07-05 DK DK374273A patent/DK133952B/da not_active IP Right Cessation
- 1973-07-05 NL NL7309439A patent/NL7309439A/xx not_active Application Discontinuation
- 1973-07-06 DE DE19732334521 patent/DE2334521C3/de not_active Expired
- 1973-07-06 DE DE19732366417 patent/DE2366417C/de not_active Expired
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| FR2192114B1 (no) | 1979-01-12 |
| DE2334521C3 (de) | 1981-11-19 |
| DK133952B (da) | 1976-08-16 |
| BE801351A (fr) | 1973-10-15 |
| DE2366417C (no) | 1982-07-08 |
| DE2334521A1 (de) | 1974-01-24 |
| IE38174B1 (en) | 1978-01-18 |
| LU67902A1 (no) | 1973-08-31 |
| DK133952C (no) | 1977-01-24 |
| NO138451C (no) | 1978-09-06 |
| DE2334521B2 (de) | 1976-12-23 |
| FR2192114A1 (no) | 1974-02-08 |
| GB1411503A (en) | 1975-10-29 |
| NL7309439A (no) | 1974-01-09 |
| IE38174L (en) | 1974-01-07 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| US3806416A (en) | Creatine amidohydrolase and process for its preparation | |
| JP3542601B2 (ja) | タンパク質の分離 | |
| US4144130A (en) | Process for the separation of enzymes | |
| US2821501A (en) | Recovery of starch | |
| NO138451B (no) | Fremgangsmaate for fremstilling av rensede enzymloesninger | |
| CA2361507C (en) | Method for rapidly obtaining crystals with desirable morphologies | |
| US6207437B1 (en) | Crystalline protease and method for producing same | |
| CN110819672A (zh) | 一种固定化酶法制备三磷酸胞苷的方法 | |
| NO167024B (no) | Fremgangsmaate for rensing av karnitin. | |
| DK144277B (da) | Femgangsmaade til fremstilling af 6-aminopenicillansyre | |
| JP2804004B2 (ja) | Ｌ−アスパラギン酸の製造方法 | |
| US3206506A (en) | Separation of acetylglutamine | |
| JPH0833493A (ja) | Ｌ−アスパラギン酸の製造方法 | |
| JP2639803B2 (ja) | 耐熱性イソクエン酸脱水素酵素の製法 | |
| GB2108128A (en) | Production of aspartase | |
| CN110777180A (zh) | 一种固定化酶法制备三磷酸腺苷的方法 | |
| SU1730148A1 (ru) | Способ получени иммобилизованного коммерческого пепсина | |
| CN117106844A (zh) | 发酵法合成苯氧乙酰胺基青霉素钾盐的方法 | |
| JPH01104194A (ja) | Ｄ−（−）−酒石酸の製造法 | |
| JPS61135584A (ja) | プロテア−ゼの製造方法 | |
| JPS6128672B2 (no) | ||
| JPH03240487A (ja) | 酸素の生産方法 | |
| JPS5914796A (ja) | Ｌ−フエニルアラニンの製造法 | |
| JPS61219393A (ja) | 高分子有機物の酵素による加水分解方法 | |
| JPS63141597A (ja) | Ｌ−乳酸の製法 |