JPS63141597A - Ｌ−乳酸の製法 - Google Patents

Abstract

(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるた
め要約のデータは記録されません。

Description

【発明の詳細な説明】 （産業上の利用分野） 本発明は微生物のＤ乳酸資化性を利用した光学純度の高
いＬ−乳酸の製法に関する （従来の技術） 従来、Ｌ−乳酸の製造は糖質を原料とする発震法による
製法、あるいはプロノぐンジオール、２−る固定化微生
物の技＃ｅＬ−乳酸製造に応用する例も知られている。

（特開昭５８−１６６８８号。

特開昭４９−１０９５８３号、特開昭５９−３１６９０
号、特開昭５７−１４４９８５号） （発明が解決しようとする問題点） しかしながら得られるＬ−乳酸の光学純度に関する知見
は乏しくこの光学純度を決定する最も大きい因子はＬ−
乳酸生産菌の特性に基づいている。

糖質を原料とする場合にはＬ−乳酸生成蓄積は細胞の膜
透過性に依存していると考えられておシ、菌体内にはＬ
−乳酸とＤ−乳酸が混在している。

このため溶菌現象がおこれば画体内のＤ−乳酸が放出さ
れその結果り一乳酸の光学純度が低下することが予想さ
れる。このように光学純度の低下したＬ−乳酸に対して
、光学純度を向上させる方法に関しては従来全く知られ
ていなかった。本発明者らは微生物の乳酸資化性につい
て鋭意検討した結果、Ｄ−乳酸資化性を有する微生物と
ラセミ乳酸あるいはラセミ乳酸と光学活性乳酸の混合物
を接触させれば高い光学純度を有するし一乳酸が得られ
る事を見い出し本発明に到った。

（問題点を解決するための手段） 本発明は乳酸のラセミ体あるいはラセミ体と光学活性体
との混合物をＤ−乳酸資化性を有する微生物と共に培養
するか又は培養した微生物と接触させることを特徴とす
るＬ−乳酸の製法である。

本発明に用いられる出発物質は乳酸のラセミ体やラセミ
体と光学活性体（Ｄ一体、Ｌ一体）の混合物であり光学
純度の低いし一乳酸やＤ−乳酸なども使用出来る。

本発明で用いられる微生物としてはＤ−乳酸資化性を有
し、しかもＤ−乳酸資化速度がＬ−乳酸資化速度よりも
早い微生物であればいかなる微生物でも使用可能である
。このような性質を有する具体的な微生物としてはアセ
トバクテリウムウツディ（Ａｃｅｔｏｂａｃｔｅｒｉｕ
ｍ　ｗｏｏｄｉｉ　　）　ＤＳＭ　２３９６ｔ−あげる
ことができる。

本発明を実施するには上記微生物を出発物質を加えた適
宜の培地にて静置又は態とう培養を行うことによシ実施
することが出来る。培養方法としては出発物質である乳
酸のラセミ体あるいはラセミ体と光学活性体の混合物を
炭素源とし、硫酸アンモニウム、尿素、各種アミノ酸々
どの窒素源。

リン酸カリウム、硫酸マグネシウムなどの無機塩を加え
、必要に応じて酵母エキス、コーンステイープリカーな
どの増殖促進因子を添加してもよい。

培養の条件としては使用する微生物によシ最適な条件は
異なるものの一般的な条件としてはｐＨ３〜１０、温度
２０〜６０℃の範囲で数時間ないし数日の培養を実施す
ればよい。微生物の酸素に対する影響を考慮して空気、
酸素、不活性ガス等を供給する必要もある。

更にまた、上記培養方法以外にも使用する微生物が利用
可能な炭素源を使用して培養し、遠心分離等の手段によ
シ集菌した微生物菌体を出発物質である乳酸のラセミ体
あるいはラセミ体と光学活性体との混合物と接触させて
実施することも出来る。接触時の条件として微生物の種
類にもよるが、Ｐ）（３〜１０、温度２０〜６０℃の範
囲で数時間ないし数日の接触させることによシ実施出来
る。このようにして得られた高い光学純度を有するＬ−
乳酸の精製は公知の方法を用いる事が可能である。

つまシ反応液から微生物菌体を除去し、濃縮操作を加え
た後、イオン交換法、溶剤抽出法、あるいは乳酸エステ
ルとし蒸留精製後、加水分解する方法によ、９Ｌ−乳酸
の回収、精製が可能である。

（発明の効果） 本発明によシラセミ乳酸あるいはラセミ乳酸と光学活性
乳酸の混合物のような光学純度の低いＬ−乳酸をＤ−乳
酸資化性菌と接触させる事によシ高い光学純度を有する
Ｌ−乳酸の創造が可能となった。

（実施例） 以下実施例をもって説明する。

（実施例１） 直径１８ｍｍ、長さ１８０ｍの試験管に表１に示した液
体培地５−を分注し、予め酸素を除去した窒素６７チ、
二酸化炭素３３チの混合ガスで嫌気状態とし、ブチルゴ
ム栓で密封した後、１２０℃１５分間加圧滅菌した。こ
れに同様の方法で作成した培地で３０℃３日間前培養し
たアセトバクテリウム、ウツディＤＳＭ　２３９６の培
養物を、０．１−無菌的かつ嫌気的に接種し、３０℃で
５日間培養した。

培養中の菌体濃度は分光光度計（スペクトロニック２０
ポジ・ロム裂）に直接培養中の試験管を挿入し、６００
　ｎｍの波長で測定した。

乳酸量は、乳酸脱水素酵素を用いる酵素法により、Ｌ−
乳酸とＤ−乳酸量を各々定量した。Ｌ−乳酸ハ、ベーリ
ンガー・マニノ・イム山之内（株）製Ｆ−キッ）Ｌ−乳
ｄｔ用い定量し、Ｄ−乳酸は同キットのし一乳酸脱水素
酵素を°Ｄ−乳酸脱水素酵素〔ペーリンガー・マニ／・
イム山之内（株）裂〕に替えて定量した。

ＤＬ−乳酸を含む培地でアセトバクテリウム。

ウツディＤＳＭ２３９６を５日間培養した結果、菌体の
生育は、６００　ｎｍでの濁度が０．４７であった。

残存する乳酸量は、Ｌ−乳酸は２．２　ｇ／Ｌ、Ｄ−乳
酸は０であり、Ｄ−乳酸は完全に除去された。

第１表　液体培地成分組成 続く

Claims (1)

【特許請求の範囲】
1. 乳酸のラセミ体あるいはラセミ体と光学活性体との混合
   物をＤ−乳酸資化性を有する微生物と共に培養するか又
   は培養した微生物と接触させることを特徴とするＬ−乳
   酸の製法