NO135145B - - Google Patents

Description

Foreliggende oppfinnelse angår fremstilling av 6,7-dihydro-17-hydroksy-3-okso-3'H-cyklopropa(6,7)-17a-pregn-4-en-21-karboksylsyrer og deres salter med formelen:

hvor R er hydrogen, et alkali- eller jordalkalimetall-atom eller et ammoniumradikal, mens de bølgede linjer indikerer tilstedeværelsen av a- eller 3-isomeren.

Forbindelser fremstilt ifølge foreliggende oppfinnelse er verdifulle på grunn av sine farmakologiske egenskaper. De er således f.eks. uventet sterke og selektive diuretika, bemerkelses-verdig godt tilpasset for å reversere effekten av aldosteron på nyere elektrolyttforhold uten å frembringe den progestationale bivirkning som karakteriserer tidligere kjente midler for samme * formål. ;Ifølge oppfinnelsen fremstilles forbindelsene med formel I ved at en forbindelse med den generelle formel: ;hvor de bølgede linjer har den ovenfor angitte betydning, omsettes med en alkali- eller jordalkalimetallbase, eventuelt fulgt av behandling med en sterk syre når det ønskes forbindelser med formel I hvor R er et hydrogenatom, ;og .om ønsket, omdannelse av en erholdt forbindelse til et terapeutisk akseptabelt salt derav. ;Den sterke diuretiske effekt til forbindelsene med formel I fremgår fra resultatene av en prøve på deres kapasitet til å redusere den natriumtilbakeholdende effekt av d-aldosteron i hunder, hvorved man reverserer det nyere elektrolytiske- forhold. En gruppe bestående av 6 bastarder av hunkjønn med en kroppsvekt på mellom 15 og 22 kg ble brukt i denne prøve, og forbindelsene ble prøvet på 2 dosenivåer i hvert dyr, foruten at man prøvet en referansestandard, nemlig spironolakton. Kontroll-prøvene ble utført ved at hvert dyr to ganger ble underkastet selve.prøveprosedyren uten at man tilførte hverken forbindelsen eller standardforbindelsen. Videre kontrollprøver ble utført ved å gjenta forsøket uten hverken å tilføre forbindelsen,, standarden eller aldosteron. Prøvene ble utført i vilkårlig rekkefølge på de'6 prøvedyrene, og selve prøvene ble gjort med minst 1 ukes mellomrom for at dyrene skulle komme seg igjen fra effekten av det tidligere tilførte aldosteron. Spironolakton-dosene var 2 og 8 mg/kg kroppsvekt. Dosene av de prøvede forbindelser var av en slik type som man på basis av en fore-løpig prøve i rotter (slik det f.eks. er beskrevet i US-patent 3.^22.096) skulle forvente å frembringe et utslag som ialt vesentlig tilsvarte det som ble frembragt av standardprøven. Hvis den prøvede dose var utilstrekkelig til å redusere effekten av aldosteronet, så ble prøven gjentatt med en passende større dose. Hundene ble satt på en regelmessig diet med et måltid kl. 4.00 om ettermiddagen dagen før hver prøve og fikk i det etterfølgende bare vanlig drikkevannn inntil prøven var ferdig. ;Prøven begynte med en intramuskulær injeksjon i bakfoten med 0,2 ;ml sesamolje hvori det var oppløst 10 ug d-aldosteron hvis denne forbindelse skulle tilføres. Et kateter ble satt inn i urin- ;blæren 30 min. senere, og så ble blæren renset med 40 ml destillert vann, hvoretter forbindelsen eller standarden hvis noen av disse skulle tilføres, ble tilført oralt i en gelatin- ;kapsel og 10 ml/kg kroppsvekt med vanlig drikkevann ble så umiddelbart tilført via et magerør. All urin som ble utskilt i løpet av den neste 2\ time ble oppsamlet og slått sammen med den urin som man kunne oppsamle etter dette tidspunkt etter en til- ;førsel av 5 ml vann pr. kg kroppsvekt, og den samlede urin ble fjernet fra urinblæren véd hjelp av nevnte kateter. Utskilt urin ble igjen oppsamlet i 2\ time etter dette og slått sammen med urin fjernet fra blæren ved hjelp av nevnte kateter. De to urinprøver fra hvert dyr ble analysert for natrium og kalium, og den totale mengde ble uttrykt som mikroekvivalenter pr. kg. Sammenligning av de midlere logaritmiske forhold (Na x 10/K) ;95% tillitsgrenser bestemt fra disse totalprøver tjener som en indeks på anti-aldosteron-virkningen i denne prøve. Når kalium 6a,7ot-dihydro-17-hydroksy-3-okso-3'H-cyklopropa(6,7)-17a-pregn-4-en-21-karboksylat, den representative forbindelse fra eksempel 1 heretter betegnet som forbindelse A, ble bedømt ved foran- ;nevnte fremgangsmåte, så fikk man de resultater som er vist i tabell I. ;;Det fremgår fra tabellen at anti-aldosteronutslaget for produktet som i eksempel 1 er 304 % i forhold til spironolakton i den beskrevne prøve, idet referansegrensen er 233 til 434 %. Reverseringen av aldosteroneffekten er statisk signifi-kant for forbindelsen og standard (P < 0,05 ved gruppert t-prøve idet man anvendte hver hund som sin egen kontroll). ;Prøver på progestational aktivitet kan utføres slik det er beskrevet av Clauberg i C. Zentr. Gynakol, 54, 2757 (1930) modifisert på følgende måte: hvert prøvedyr i. en gruppe av 3-4 ikke kjønnsmodne hunkaniner som veide ca. 1 kg. og som på forhånd var preparert med 17É-estradiol ved subkutan injeksjon bestående av 5 ug pr. dyr i 6 suksessive døgn, ble tilført prøveforbindel-sen oppløst eller suspendert i maisolje, og tilførselen skjedde enten subkutant eller bukalt på hver av de 5 etterfølgende dager som begynte dagen etter siste preparerende injeksjon. Den første begynnende dose var vanligvis 1 mg av forbindelsen i 0,1 ml maisolje tilført subkutant. Andre dyr ble på lignende måte tilført ren maisolje som kontrollprøver. På den 6. dag etter siste preparerende injeksjon- ble dyrene obdusert og et segment av hver av livmorene ble tatt ut for histologisk undersøkelse, hvoretter graden av armorisering av de endometriske kjertler ble bedømt etter en fremgangsmåte tilsvarende den som er beskrevet av McPhail i J. Physiol., 83, 145, (1934). Et +1 utslag representerer effekten av estrogenet alene og indikeres ved et fravær av knoppdannelse på kjertlene. Et +2 utslag induseres i de" estrogen-preparerte dyrene ved ca. 0,05 mg progesteron til-ført subkutant og anses å representere en minimal progestational aktivitet. Utslag i området fra +3 til +4 reflekterer en virksom progestational effekt som er typisk for det' som frembringes av store doser (tilsvarende 0,1 mg) av subkutant tilført progesteron. Hvis den midlere bedømmelse av prøvedyrene er mindre enn +2 ved et dosenivå på 1 mg, så anses forbindelsen å være inaktiv Hvis den midlere bedømmelse ved denne dose er større enn +2, så gjentar man prøven slik at forbindelsen tilføres med avtagende 'mengder etter forholdet 0,5, 0,2, 0,1, 0,05, 0,02, 0,01 etc. mg ;inntil man kan få bestemt en dose som er utilstrekkelig til å '"frembringe et midlere utslag på +2. Forbindelsens virkning i % i forhold til progesteron ble så beregnet ved å dividere den neste høyere dose med 0,05 og multiplisere med 100. Resultater av slike prøver med produktet fra eksempel 1, dvs. forbindelse A, er angitt i tabell II. Forbindelsen ble tilført subkutant i maisolj e. ;;Disse resultater viser at forbindelser fremstilt ifølge foreliggende oppfinnelse slik disse er representert ved produktet fra eksempel 1, ikke frembringer den progestationale bivirkning i den beskrevne prøve. ;De med erfaring på området vil innse at observasjo-nene med hensyn til aktivitet i standardiserte prøver på visse biologiske effekter er fundamentale for å kunne utvikle nye verdifulle produkter både for mennesker og dyr. ;Salter av forbindelser med formel I kan fremstilles ved å oppvarme alkoholiske oppløsninger av 6,7-dihydro-17~ hydroksy-3-okso-3'H-cyklopropa(6,7)-17a-pregn-4-en-21-karboksyl-syre-y-lakton med passende baser, f.eks. litiumhydroksyd, natriumhydroksyd, kaliumhydroksyd, bariumhydroksyd, strontium-hydroksyd, kalsiumhydroksyd eller lignende. Syrene kan fremstilles ved at man utfeller vandige oppløsninger av .saltene med et overskudd av saltsyre. Som et unntak til forannevnte frem-gangsmåter for fremstilling av salter kan det nevnes at de tilsvarende ammoniumsalter kan fremstilles ved forlenget kontakt mellom syrene og en mettet alkoholoppløsning av ammoniakk. ;Pø-lgende eksempler illustrerer oppfinnelsen. De relative mengder er i vektdeler hvis intet annet er angitt. ;Eksempel 1 ;En blanding av 100 deler 6a,7a-dihydro-17~hydroksy-3~okso-3'H-cyklopropa(6,7)-17a-pregn-4-en-21-karboksylsyr e- y~ lakton og 960 deler 2-propanol ble tilsatt en oppløsning av 15 deler kaliumhydroksyd i 100 deler vann. Den resulterende blanding ble oppvarmet til kokepunktet under tilbakeløp i en nitro-genatmosfære i 1 time, hvorved de faste stoffer ble oppløst. Oppløsningsmidlet ble så avdestillert ved vakuumdestillasjon og resten avkjølt og utrørt med etylacetat. De krystallinske stoff som kunne isoleres fra suspensjonen ved filtrering var kalium-6a,7a-dihydro-17-hydroksy-3_okso-3'H-cyklopropa(6,7)-17a-pregn-4-en-21-karboksylat som etter tørking i luft smelter ved 248 - 250°C med dekomponering. ;Eksempel 2 ;En anvendelse av 100 deler 66,7B-dihydro-17-hydroksy-3-okso-3'H-cyklopropa(6,7)-17a-pregn-4-en-21-karboksylsyre-y-lakton i stedetfor 6a,7a-epimerer som er nevnt i eksempel 1, gir ved den fremgangsmåte som er beskrevet ovenfor kalium-63,78--dihydro-17-hydroksy-3-okso-3'H-cyklopropa(6,7)-17a-pregn-4-en-21-karboksylat, sm.p. 177-179°C (dekomp.) ;Eksempel 3 ;En blanding av 100 d.eler 6a ,7a-dihydro-17~hydroksy-3-okso-3'H-cyklopropa(6,7)-17a-pregn-4-en-21-karboksylsyre-y-lakton og 960 deler 2-propanol ble tilsatt en oppløsning av 11 deler natriumhydroksyd i 100 deler vann. Den resulterende blanding ble oppvarmet til kokepunktet under tilbakeløp i en nitro-genatmosfære i løpet av 1 time, hvoretter oppløsningsmidlet ble avdestillert ved vakuumdestillasjon. Resten ble avkjølt og utrørt med etylacetat. Det uoppløselige krystallinske produkt som ble isolert ved filtrering var natrium-6a,7a-dihydro-17~ hydroksy-3-okso-3'H-cyklopropa(6,7-17a-pregn-4-en-21-karboksylat, sm.p. 235-240°C (dekomp.). ;Eksempel 4 ;En blanding av 10 deler 6a,7a-dihydro-17-hydroksy-3_ okso-3'H-cyklopropa(6,7)-17a-pregn-4-en-21-karboksylsyre-y-lakton, 2 deler kalsiumhydroksyd og 400 deler 2-propanol ble utrørt og oppvarmet ved kokepunktet under tilbakeløp i en nitro-genatmosfære i 4 timer. Den resulterende blanding ble vakuum-destillert for fjerning av oppløsningsmidlet og resten ble utrørt med etylacetat. Suspensjonen ble filtrert og det krystallinske produkt som derved kunne isoleres var kalsium-6a,7a-dihydro-17-hydroksy-3~okso-3'H-cyklopropa(6,7)-17a-pregn-4-en-21-karboksylat, sm.p. >300°C (dekomp.). ;Eksempel 5 ;En oppløsning av 10 deler kalium-6a,7a-dihydro-17~ hydroksy-3~okso-3 *H-cyklopropa(6,7)-17a-pregn-4-en-21-karboksylat i 1000 deler vann ble tilsatt 18 deler 5% saltsyre. Det fargeløse bunnfall ble filtrert fra, vasket med vann og tørket i luft. Det således isolerte produkt var 6a,7a-dihydro-17-hydroksy-3~okso-3'H-cyklopropa(6,7)-17a-pregn-4-en-21-karboksyl-syre, .sm.p. 100°C, størkner og smelter på nytt ved 172-174°C.

Eksempel 6

20 deler 2-propanol mettet med ammoniakk ble tilsatt 1 del 6a,7a-dihydro-17-hydroksy-3-okso-3'H-cyklopropa(6,7)-17a-pregn-4-en-21-karboksylsyre. Den resulterende blanding ble hensatt ved romtemperatur i 24 timer, hvoretter oppløsningsmidlet ble fjernet ved vakuumdestillasjon. Resten ble vasket med etylacetat og tørket i luft. Det således isolerte produkt var ammonium-6a,7a-dihydro-17-hydroksy-3-okso-3'H-cyklopropa(6,7)-17a-pregn-4-en-21-karboksylat, som sublimerer.

Claims (2)

1. Analogifremgangsmåte til fremstilling av diuretisk virksomme 6,7~dihydro-17-hydroksy-3-okso-3'H-cyklopropa(6,7)-17a-pregn-4-en-21-karboksylsyrer og salter derav med den generelle formel: hvor R er et hydrogenatom, et alkali- eller jordalkalimetall-atom eller et ammoniumradikal, og hvor de bølgede linjer indikerer tilstedeværelsen av a- eller B-isomeren, karakter i-, sert ved at en forbindelse med den generelle formel: hvor de bølgede linjer har den ovenfor angitte betydning, omsettes med en alkali- eller jordalkalimetallbase, eventuelt fulgt av behandling med en sterk syre når det ønskes forbindelser med formel (I) hvor R er et hydrogenatom, og om ønsket, omdannelse av en erholdt forbindelse til et terapeutisk akseptabelt salt derav.

2. Analogifremgangsmåte ifølge' krav-1, til fremstilling av kalium-6a,7a-dihydro-17-hydroksy-3~okso-3'H-cyklopropa(6, 7) - 17a-pregn-4-en-21-karboksylat, karakterisert ved at 6a,7a-dihydro-17-hydroksy-3-okso-3'H-cyklopropa(6,7)-17a-pregn-4-en-21-karboksylsyre-Y~lakton omsettes med kaliumhydroksyd.