NL8801640A

NL8801640A - Polypeptiden en werkwijzen voor het bereiden en toepassen van deze polypeptiden.

Info

Publication number: NL8801640A
Application number: NL8801640A
Authority: NL
Original assignee: Sandoz Ag
Priority date: 1987-06-29
Filing date: 1988-06-28
Publication date: 1989-01-16
Also published as: BE1002663A4; GB8815257D0; FR2617171A1; IT8848133A0; SE8802413L; DK353788D0; LU87262A1; CH679045A5; SE8802413D0; DK353788A; NZ225188A; AU1840988A; GB2206352B; IL86876A0; ES2010283A6; FR2617171B1; KR890000520A; JPS6426599A; IT1221065B; GB2206352A

Description

► - Polypeptiden en werkwijzen voor het bereiden en toepassen van deze polypeptiden -

De onderhavige uitvinding heeft betrekking op somatostatinederivaten,werkwijzen voor hun bereiding, farmaceutische preparaten die ze bevatten en hun toepassing als farmaceutica.

5 Meer in het bijzonder verschaft de onderhavige uitvinding verbindingen met formule I , waarin A een groep met formule (oc^) of 0^) is, waarin R een alkyleengroep met 1—11 koolstofatomen 10 of een alkenyleengroep met 2-11 koolstofatomen, © Z een -OH, -NR^, -NR^R^Rg, -NH0H, of guanidino_of ureidogroep, R.| een alkyleengroep met 1-5 koolstofatomen, R0 een waterstofatoom of een -C0-NHo, -C = NH -2 2 , 15 NH2 groep of een suikerrest, R^ een waterstofatoom of een suikerrest, een waterstofatoom, een alkylgroep met 1-3 koolstofatomen of een suikerrest, 20 R^ een waterstofatoom of een alkylgroep met 1-3 koolstofatomen en

Rg een alkylgroep met 1-3 koolstofatomen voorstellen, >N-CH(Z.|)-C0- weergeeft 25 i) een (L)- of (D)-fenylalaninerest , waarvan de ring desgewenst gesubstitueerd is door halogeen, N02, NH2, OH, alkyl met 1-3 koolstofatomen en/of alkoxy met 1-3 koolstofatomen, of ii) de rest van een natuurlijk ^-aminozuur die 30 anders is dan gedefinieerd onder i) hiervoor of van een overeenkom stig (D)-aminozuur, Z.j in ^-N-CH-(Z|)-C0- de rest van dit residu .8801640 - 2.- i- i) of ii) is , A’ een waterstofatoom of een alkylgroep met 1-3 koolstofatomen weergeeft, Y.| en Y2 tezamen een direkte binding 5 vormen, of waarin elk van de substituenten Y^ en Y2» onafhanke lijk van elkaar , een waterstofatoom of een groep met formule 1-5 is, waarin R de methyl- of ethylgroep, ct een waterstofatoom, de methyl- of ethyl- 10 groep, m een geheel getal van 1-4 , n een geheel getal van 1-5,

Rc een alkylgroep met 1-6 koolstofatomen, R^ de substituent gehecht aan het ^-koolstofatoom 15 van een natuurlijk ot-aminozuur ( waaronder waterstof) , R^ een alkylgroep met 1-5 koolstofatomen,

Ra' en Rb', onafhankelijk van elkaar, een waterstofatoom, de methyl- of ethylgroep , R en R_ , onafhankelijk van elkaar, waterstof, o y 20 halogeen, alkyl met 1-3 koolstofatomen of alkoxy met 1-3 koolstof atomen, p 0 of 1 , q 0 of 1, en r 0, 1 of 2 weergeven, 25 B voorstelt -Phe- , waarvan de ring desgewenst gesubstitueerd is door halogeen, NC^» N^, OH, alkyl met 1-3 koolstofatomen en/of alkoxy met 1-3 koolstofatomen, of naftylAla, C weergeeft (L)-Trp- of (D)-Trp-, desgewenst ge 06 -N-methyleerd en waarvan de benzeenring desgewenst gesubstitu- 30 eerd is door halogeen, OH, alkyl met 1-3 koolstofatomen en/of alkoxy met 1-3 koolstofatomen , D is Lys-, ThiaLys, YF-Lys, ÓF-Lys of Om, desgewenst geCC -N-methyleerd , of een 4-aminocyclohexylAlagroep of 4-aminocyclohexyIGly rest, 35 D Thr, Ser, Val , Phe , Ile of een aminoiso- boterzuurrest voorstelt , .8801640 % - 3 - F weergeeft een groep met formule -COOR^, -CH2QR.|q, een groep met formule 6 of 7 , waarin Ry een waterstofatoom of een alkylgroep met 1-3 koolstofatomen , R^q een waterstofatoom of de rest van een 5 fysiologisch aanvaardbare, fysiologisch hydrolyseerbare ester, R.jj een waterstofatoom, een alkylgroep met 1-3 koolstof atomen , een fenylgroep of een C^^fenyl-alkylgroep, R^ 2 een waterstofatoom, een alkylgroep met 1-3 koolstofatomen of een groep met formule -CH(R^)-X^, 10 R13 een'CH20H, -(CH2)2-OH, -(CH2)3_OH, of -CH(CH3)OH of de substituent gehecht aan het βς -koolstofatoom van een natuurlijk ^-aminozuur (waaronder waterstof) en X.j een groep met formule -COOR^, -CH2OR^q ^ of met formule 8 voorstellen, waarin

Ry en RiQ de hiervoor gedefinieerde betekenissen hebben, R^ een waterstofatoom of een alkylgroep met 1-3 koolstofatomen is en 20 R^3 een waterstofatoom, een alkylgroep met 1-3 koolstofatomen, een fenylgroep of een fenylalkylgroep weer geeft en R^g een waterstofatoom of de hydroxylgroep is , onder de voorwaarde dat indien R 2 een -CH(Rl3)-X^ groep ^ voorstelt, R^ een waterstofatoom of de methylgroep is, waarbij de B, D en E resten de L-configuratie bezitten en de resten op de 2- en 7-plaats en eventuele resten 4) en Y2 4) elk , onafhankelijk van elkaar, de (L)- of (D)-configuratie hebben, in vrije vorm, de zoutvorm of een complexvorm.

on # ...

In de onderhavige beschrijving en conclusies wordt met halogeen fluor, chloor en broom bedoeld. Volgens de gebruikelijke praktijk hebben aminozuurresten die zijn aangeduid door een afkorting, bijvoorbeeld -Phe-, -Cys- enz. , de (L)-configuratie, tenzij anders is aangegeven . De uitdrukking ''natuurlijk aminozuur" duidt op aminozuren afgeleid van natuurlijke bronnen of op een andere wijze verkregen, bijvoorbeeld door synthese .8801640 ï - 4 - of via een celcultuur.

en/of R,. stellen bij voorkeur waterstof of de methylgroep voor. Het· verdient aanbeveling dat R^ de methylgroep is.

5 A’ is bij voorkeur een waterstofatoom of de methylgroep, in het bijzonder een waterstofatoom.

Indien A een groep met formule is, is dit bij voorkeur -aminohexanoy1, dat desgewenst een suikerrest bevat.

10 Indien A een groep met formule (j^) voorstelt, is dit bij voorkeur een rest zoals afgeleid van lysine, ornithine, arginine of citrulline.

Een bijzonder aanbevolen betekenis voor A is o)-aminohexanoy 1.

15 Indien >N-CH(Z1)-C0- de betekenis i) heeft, is dit bij voorkeur (L)- of (D)-fenylalanine, pentafluorfenylalanine of (L)- of (D)-tyrosinerest ( waarin Z^ benzyl of p-hydroxybenzyl is), vooral een (D)-fenylalaninerest.

Heeft >N-CH(Z^)-C0- de betekenis ii) , dan 2o is de gedefinieerde rest bij voorkeur lipofiel. Aanbevolen resten ii) zijn die waarin Z^ een alkylgroep met 3, bij voorkeur 4 of meer koolstofatomen, of een groep, waarin A2 naftyl of pyridyl is , voorstelt.

Het verdient vooral aanbeveling dat7-N-CH(Z^)-C0- 25 een onder i) gegeven betekenis heeft.

Bij voorkeur vormen en Y2 tezamen een direkte binding of is elk van de substituenten en Y^, onafhankelijk van elkaar , een waterstofatoom of een groep met formule 1 of 3.Meer aanbeveling verdient het dat Y^ en Y2 3Q tezamen een direkte binding vormen.

In de verbindingen met formule I worden verder de volgende betekenissen of combinaties daarvan aanbevolen: B = Phe of Tyr.

C is -(D) Trp of 5-halogeen-(D)Trp, in het 35 bijzonder D-Trp.

D stelt Lys of 4-aminOcyclohexylAla voor.

.3801640 <b - 5 - E geeft Thr, Ser of Val , vooral Thr of Valt weer.

F is een groep met formule 6 , in het bijzonder met formule 9, waarin R^ een waterstofatoom voorstelt,

Rj2 een hiervoor gegeven betekenis heeft, R13 CH2OH, CH(CH3)0H, i-butyl, i-propyl, C^C^OH, (CH^OH of een rest afgeleid van Trp , 5-fluor-Trp, φ-Nal, Ala, MeAla of Gly, vooral CH2OH of CH(CH3)0H , in het bijzonder CH(CH3)OH, is.

X. een groep met formule 8 of 10 . 1 CH20R^q, m het bijzonder CE^OR,^ voorstelt.

R10 een waterstofatoom voorstelt.

R10 als esterrest is bij voorkeur formyl, C2_12alkylcarbonyl, Cg_^2fenylalkylcarbonyl of benzoyl , en/of de -CHCR.-J-X, groep heeft bij voorkeur de L-configuratie.

15 1

Het verdient aanbeveling dat de resten op de 2- en7-plaatsen de L-configuratie bezitten.

Onder geschikte suikerresten ( aangeduid als X) als R2 en/of R3 en/of R^ vallen de volgende resten: a) X is de deoxyrest van een ketose met 20 ...

formule a, waarbij de rest via de CH2~groep met de NH-groep van de verbinding met formule I is verbonden.

b) X is de deoxyrest van een aldose met formule b , waarbij de rest via de vrije binding met de NH-groep van de verbinding met formule I is verbonden.

25 . . , Λ c) X is de rest met formule c , waarin G3C0 de rest van een uronzuur of van een polyhydroxymono- of di-carbonzuur is , en

Ry een waterstofatoom, een alkylgroep met 1-5 koolstofatomen of een alkanoylgroep met 1—4 koolstofatomen 30 voorstelt.

d) X is een rest met formule d, e, f of g, waarin

Ry een waterstofatoom, een alkylgroep met 1-5 koolstofatomen of een alkanoylgroep met 1-4 koolstofatomen 35 voorstelt en .8801640 i - 6 - Q» Q'> Q" en Q''' groepen zijn die de peptiderest aan de suikerrest koppelen, of e) X is een rest met formule h, i of j, waarin Y = H2 of H, OH en 5 c = 2, 3 of 4 en elk van de vrije hydroxylgroepen in het polyolgedeelte van formule h, i of j desgewenst op een glycosylachtige wijze is verbonden met een reducerend mono-, di- of oligosaccharide of aminosuiker.

10 In alle hiervoor genoemde formules a-g is slechts één suikerrest per residu aangegeven.Onder de uitvinding vallen echter eveneens suikerresten die 1-3 monosaccharide-resten bevatten, die samen tot een disaccharide of trisaccharide kunnen zijn verbonden.

15 In alle hiervoor genoemde resten geeft de lijn «W aan dat.de binding op de o(,- of p~plaats aanwezig kan zijn.

In de formules is a bij voorkeur i) een rest met formule a^ , waarin 20 één van de groepen Ga en Gb een waterstofatoom voorstelt en de andere de hydroxylgroep is één van de groepen G£ en G^ een waterstofatoom voorstelt en de andere OH of 0-glycosyl is , waarin de glycosylrest kan worden afgeleid van een reducerend 25 mono-, di- of oligosaccharide, één van de groepen G en G,. een waterstof-w e r atoom voorstelt en de andere de hydroxylgroep is, één van de groepen G^ en G^ een waterstofatoom weergeeft en de andere een waterstofatoom of de C^OH groep 30 is } bijvoorbeeld waarin de groepen G -G, zodanig worden gekozen dat de rest met formule a^ overeenkomt met een groep die verkregen kan worden door een Amadori herschikking van een natuurlijk of synthetisch verkrijgbaar mono-, di- of oligosaccharide.

De volgende resten kunnen als voorbeelden 35 van suikerresten met formule a^ worden genoemd: .8801640 -7- deoxyfructosyl, deoxytagatosyl, deoxysorbosyl,W-glucosyl-(1-4)-deoxyfructosyl, Dd -glucosyl(1-4)-°£-glucosyl-(1-4)-deoxyfructosyl.

ii) Een rest met formule a^, waarin 5 één van de substituenten G en G, een water- a b stofatoom voorstelt en de andere de hydroxylgroep is, één van de substituenten G en G, een water- c d stofatoom weergeeft en de andere OH of O-glycosyl is , waarin de glycosylgroep kan worden afgeleid van een reducerend 10 mono-, di- of oligosaccharide , één van de groepen Gg en G^ een waterstofatoom voor stelt en de andere waterstof, COOH, C^OH, CH^-O-P (0) - (OH) ^ of CH20-glycosyl is , waarin de glycosylgroep kan worden afgeleid van een reducerend mono-, di- of oligosaccharide, bijvoorbeeld 15 waarin de substituenten Ga~G^ zodanig worden gekozen , dat de groep met formule a2 overeenkomt met een groep die verkregen kan worden met behulp van een Amadori herschikking uit een natuurlijk of synthetisch verkrijgbaar mono-, di- of oligosaccharide.

De resten met formule kunnen bijvoorbeeld 20 worden verkregen met behulp van een Amadori herschikking uit sacchariden, zoals gentiobiose , melibiose , ribose, xylose of uit uronzuren, zoals glucuronzuur of galacturonzuur.

Formule b is bij voorkeur i) een rest met formule b^ , waarin 25 één van de substituenten G of G, een water-

a D

stofatoom voorstelt en de andere een vrije-binding is, één van de substituenten G of G, een waterstof- c d atoom weergeeft en de andere de hydroxylgroep is, één van de groepen G& of G^ een waterstofatoom 30 voorstelt en de andere de hydroxylgroep of 0-glycosylgroep is, waarbij de glycosylgroep kan worden afgeleid van een reducerend mono-, di- of oligosaccharide, één van de substituenten G en G. een waterstof- g h atoom weergeeft en de andere de C^OH of C^-O-glycosylgroep is, 35 waarin de glycosylgroep kan worden afgeleidiaieaireducerend mono-, .8801640 ¥ - 8 - di- of oligosaccharide, bijvoorbeeld waarin de substituenten G “G zodanig worden gekozen , dat de groep met formule b1 over-

Si tl 1 eenkomt met een groep die verkregen kan worden door een

Heyns herarrangering van een natuurlijk of synthetisch verkrijg- 5 baar mono-, di- of oligoketose, ii) een rest met formule b2> waarin één van de substituenten G en G, een waterstof- a b atoom is en de andere een vrije binding voorstelt, één van de groepen G en g, een waterstofatoom c 'd 10 weergeeft en de andere de hydroxylgroep is, één van de substituenten G en Gr een waterstof- e f atoom weergeeft en de andere de CH20H of CBLj-O-glycosylgroep is , waarin de glycosylgroep afgeleid kan worden van een reducerend, mono-, di- of oligosaccharide, bijvoorbeeld waarin de substituenten 15 Gg-Gf zodanig worden gekozen dat de groep met formule b2 overeenkomt met een groep die verkregen kan worden via een Heyns herschikking

J

van een natuurlijk of een synthetisch verkrijgbaar mono-, di-of oligoketose.

De resten met formule b^ of b2 kunnen bijvoorbeeld 20 worden verkregen met behulp van een Heyns herschikking van een suiker zoals D-fructose, lactulose, L-sorbose , D-tagatose of D-ribulóse.

In formule c bevat het polyhydroxymono- of di-carbonzuur bijvoorbeeld tenminste drie hydroxylgroepen en kan 25 eveneens verdere substituenten ., bijvoorbeeld amino- of acetylamino-groepen^ bevatten,

Voorbeelden van dergelijke polyhydroxycarbonzuren zijn: de "on-zuren" afgeleid van een suiker, zoals 30 gluconzuur, of "arinezuren" , zoals glucarinezuur, verder chinine-zuur, acetylmuraanzuur, acetylneutaminezuur of D-glucosaminezuur.

Voorbeelden van uronzuren zijn glucuronzuur en galacturonzuur.

In de resten met formule d-g hebben G^,G^'5 G^" 35 en G^MT de hiervoor voor of G2 gegeven definities.

De Q of Q’ groep verbindt de -NH-groep van de verbinding met formule I met een NH2 of HO-groep van de suiker- .8801640 - 9 - rest en is bijvoorbeeld de rest van een dicarbonzuur of bij voorkeur een -C^H^^-CO-groep waarin b= 0-6. De groep kan vertakt zijn. Q1 is bijvoorbeeld een groep met formule 10 of in het bijzonder een -C^I^k-CO-groep (bijv. b = 1-6). Q is bijvoorbeeld een -Cl^-CO-groep. Q is in het bijzonder -CO- of -CS-.

-NH-Q"- en -NH-Q''’ geven groepen aan die de -NH-groep van de verbinding met formule I verbinden met de suikerrest, in het bijzonder resten van ίώ-aminocarbonzuren. Ze kunnen bijvoorbeeld een -NB-C^I^-CO-groep weergeven.

^ In het geval van een rest met formule h, i of j worden die met formule h aanbevolen , in het bijzonder waarin c = 3 .

De verbindingen met formule I kunnen bijvoorbeeld in vrije vorm, in zoutvorm of in de vorm van 15 complexen ervan voorkomen. Zuuradditiezouten kunnen worden gevormd met bijvoorbeeld organische zuren, polymere zuren en anorganische zuren. Onder dergelijke zuuradditiezoutvormen vallen bijvoorbeeld de hydrochloriden en acetaten .Complexen worden uit verbindingen met formule I gevormd bij toevoeging van anorganische materialen, 20 bijvoorbeeld anorganische zouten of hydroxyden , zoals calcium-en zink-zouten en/of bij toevoeging van polymere organische materialen.

Een ander aspect van de onderhavige uitvinding heeft betrekking op een werkwijze voor het bereiden van 25 .

verbindingen met formule I. Deze verbindingen kunnen volgens uit de stand der techniek van de peptidechemie bekende methoden of volgens voor de hand liggende chemische equivalenten daarvan, worden bereid , bijvoorbeeld volgens een werkwijze die i) het verwijderen van de beschermaide groep 30 .

of groepen van een beschermd polypeptide metde m formule I

aangegeven volgorde, ii) het aan elkaar koppelen via een amidebin- ding van twee peptidefragmenten, waarvan elk tenminste één aminozuur- of aminoalkoholrest in een beschermde of onbeschermde 35 vorm bevat en een peptidefragment een rest A bevat, waarbij de p ep t ide f ragmen ten zodanig zijn gekozen, dat een al of niet beschermd polypeptide met de in formule I weergegeven volgorde t 880 m 0 i' ft - 10 - wordt verkregen, en , indien nodig, de werkwijze van stap i) wordt uitgevoerd, iii) het omzetten van de groep F van een al of niet beschermd polypeptide met de in formule I weergegeven 5 volgorde in een andere groep F , en , indien nodig, uitvoering van werkwijzestap i) , iv) het invoeren van tenminste één desgewenst beschermde rest in een al of niet beschermd peptide en, indien nodig , uitvoering van werkwijzestap i) , of v) het oxyderen van een verbinding met formule I, waarin de mercaptogroepen van de Cys-resten in vrije vorm aanwezig zijn ter verschaffing van een polypeptide, waarin Y.j en Y2 tezamen een direkte binding zijn en winning van de aldus verkregen verbinding met formule I in vrije vorm , in zout-15 vorm of in de vorm van een complex , omvat.

De hiervoor beschreven werkwijze kan bijvoorbeeld analoog aan de werkwijzen beschreven in de hierna volgende voorbeelden worden uitgevoerd.

Aminozuren of peptidefragmenten die als 20 uitgangsmaterialen worden toegepast en die aan het °i-N-atoom een groep met formule CL^ of $ bevatten kunnen op een gebruikelijke wijze worden bereid door reactie van de overeenkomstige aminozuren of peptiden die geen groep met formule tX. ^ of β^ bevatten, bijvoorbeeld onder toepassing van een overeenkom-25 stig zuur of reactief zuurderivaat, bijvoorbeeld een zuur met formule Z-R-C00H of een reactief zuurderivaat daarvan , zoals een actieve ester, of een aminozuur met formule 11, waarin een beschermende groep ®· R^g een hydroxylgroep of een carboxylgroep activerende groep voorstellen. Voorbeelden van 50 actieve estergroepen of carboxylgroep activerende groepen zijn bijvoorbeeld: 4-nitrofenyl, pentachloorfenyl, pentafluorfenyl, succinimidyl of 1-hydroxy-benzotriazolyl.

Het invoeren van Y^ en Y2 groepen in de Cys-groepen van de Cys-resten op de 2- en 7-plaats kan op een gebrui-55 kelijke wijze voor acyleringsreacties worden uitgevoerd, bijvoorbeeld door reactie van een polypeptide dat een vrije SH- .8801840 - 11 - groep bevat met een reactief zuurderivaat, in het bijzonder een zuurhalogenide, ter invoering van de resten 1), 2) en 5) (waarin ρ=0)5zoals hiervoor voor en Y2 is gedefinieerd of met een isocyanaat ter invoering van de 5 resten 3) , 4) en 5) (waarin p=1) zoals hiervoor voor en Y2 is gedefinieerd. Verbindingen waarin Y^ en Y£ de betekenis 4) hebben kunnen worden verkregen door toepassing van isocyanaten van aminozuren, die op een bekende wijze kunnen worden verkregen, bijvoorbeeld door reactie van een aminozuur ÏO met fosgeen en verwijdering van waterstofehloride .

De peptidefragmenten die als uitgangsmateriaal worden toegepast of verbindingen met formule I met een suikerrest met formule a kunnen worden bereid door reactie van een beschermd peptide met een vrije aminogroep in 15 een lichtzuurmedium met een reducerend mono-, di- of oligo saccharide of een overeenkomstig uronzuur of ester daarvan (Amadori-herschikking) en vervolgens desgewenst verwijdering van de beschermende groep.

Deze reactie vindt op een gebruikelijke wijze 20 voor het uitvoeren van de Amadori-herschikking plaats. Het toegevoegde zuur kan bijvoorbeeld ijsazijn zijn. Bij reactie met uronzuur kan van een extra zuur worden afgezien. Het verdient aanbeveling een overmaat koolhydraat te gebruiken, bijvoorbeeld 10 equivalenten per equivalent peptideverbinding. De reactie 25 kan in een polair oplosmiddel, zoals methanol^ bij voorkeur bij een temperatuur van ongeveer 50 tot 70°C, worden uitgevoerd.

Een peptidefragment of verbinding met formule I met een suikerrest met formule b kan worden verkregen door reactie van een beschermd peptide met een vrije aminogroep 30 in een lichtzuur medium met een ketose (herschikking volgens

Heyns ). De reactie kan onder dezelfde omstandigheden als voor de Amadori-herschikking (zie hiervoor) worden uitgevoerd.

Een peptidefragment of verbinding met formule I met een suikerrest met formule c kan worden bereid door reactie van 35 een beschermd peptide met een vrije aminogroep met een zuur met formule G^-COOH of een reactief derivaat van een dergelijk zuur en daarna desgewenst verwijdering van de beschermende groep(en).

.8801640 -12 - *

Dit kan een gebruikelijke amideringsreactie zijn, die op een gebruikelijke wijze kan worden uitgevoerd. De amiden kunnen bijvoorbeeld bij voorkeur worden verkregen met de vrije zuren, in aanwezigheid van hydroxybenzotriazool of di-cyclohexylcarbodiimide.

Een peptidefragment of verbinding met formule I met een suikerrest met formule d,e, f of g kan worden verkregen door a) het peptide eerst te laten reageren met 10 het bruglid en het produkt te laten reageren met de suiker, of b) de suiker eerst te laten reageren met het bruglid en daarna het geglyceerde bruglid te laten reageren met het peptide. Deze reacties kunnen op een gebruikelijke wijze worden uitgevoerd.

Een peptidefragment of peptide met formule I met een suikerrest met formule d waarin Q is -CO- of -CS-kan bijvoorbeeld worden bereid door koppeling van het overeenkomstige glycosylisocyanaat of glycosylisothiocyanaat met 20 formule 12 , waarin L = zuurstof of zwavel en een hiervoor gedefinieerde betekenis heeft en waarin de aanwezige vrije hydroxylgroepen in G^ beschermd zijn, bijvoorbeeld door acylering, met een beschermd peptide met een vrije aminogroep en vervolgens afsplitsing van de beschermende groepen.

25

Deze reactie kan op een gebruikelijke wijze voor het bereiden van ureumderivaten worden uitgevoerd.

Een peptidefragment of verbinding met formule I met een suikerrest met formule f of g kan worden verkregen met behulp van bijvoorbeeld een Amadori of Heyns-30 . .

herschikking, zoals bijvoorbeeld hiervoor voor de bereiding van verbindingen met een suikerrest met formule a of b is beschreven.

Een peptidefragment of verbinding met formule I met een suikerrest met formule h, i of j kan bijvoorbeeld worden verkregen door .8 8 O 1 SA 0 -13- a') reductieve aminering van een aldose, deoxyaldose of ketose met het peptide met een vrije aminogroep, b’) reductie van de hemi-acetaalgroep in een verbinding met een suikerrest met formule a of b , c’) reactie van een lineair suikeramino-carbonzuur met het peptide, waarbij desgewenst elk reagens tijdelijk beschermd kan zijn.

De reductieve aminering en reductie kunnen op een gebruikelijke wijze worden uitgevoerd. De reductieve ^ aminering kan bijvoorbeeld worden uitgevoerd met NaBH^CN.

De aanbevolen pH is 7 . De reductie van de hemi-acetaalgroep kan worden uitgevoerd met boriumhydriden, bijvoorbeeld met natrium- boriumhydride. De aanbevolen pH is ongeveer 6.

Voor zover het bereiden van een uitgangs-^ materiaal hierin niet in het bijzonder is beschreven, is dit bekend of kan op een gebruikelijke wijze worden bereid en gezuiverd, bijvoorbeeld onder toepassing van methoden die in de literatuur zijn beschreven of hierin voor analoge verbindingen zijn vermeld, zoals bijvoorbeeld in de hierna volgende 20 voorbeelden.

In de volgende voorbeelden zijn de Onwaarden ongecorrigeerd . De volgende afkortingen zijn toegepast: Boe = tert.butyloxycarbonyl DMF = dimethylformamide 25

Fmoc = 9-fluorenylmethoxycarbonyl

AcOH = azijnzuur

MeOH = methanol

Thr-ol = threoninolgroep = CHg-CHOH-CH (CH20H)-NH- TFA = trifluorazijnzuur 30

Alle peptiden worden verkregen als poly-acetaten-polyhydraten met een peptidegehalte van 70-90%.

Uit HPLC-analyse blijkt dat de polypeptiden minder dan 5% andere peptiden bevatten.

35 De factor "F" vermeld in de hierna volgende voorbeelden geeft het peptidegehalte in de verkregen produkten aan (F=1 komt overeen met 100% peptide). Het verschil tot .8801640 s - 14 - 100% /~(1-F)x100/ bestaat uit azijnzuur en water.

Voorbeeld 1; H^N-(CH2)5-C0-DPhe-Cys-Phe-DTrp-

Lys-Thr-Cys-Thr-ol 5 a. Men loste 0,56 g H-DPhe-CyS-Phe-DTrp-Lys(BOC)- "| c

Thr-Cys-Thr-ol, 0,5 mmol Fmoc-c -aminocapronzuur en 115 mg hydroxybenzotriazool op in 10 ml dimethylformamide en koelde deze oplossing af tot -30°C. Daarna voegde men aan deze oplossing 10 een oplossing van 115 mg dicyclohexylcarbodiimide in 5 ml dimethylformamide toe (afgekoeld tot -10°C).

Na een reactietijd van 24 uren, ^durende welke tijd het mengsel opwarmt tot kamertemperatuur, werd het verkregen dieyclohexylureurn afgefiltreerd en het filtraat werd verdund met water tot 10 malen het volume ervan. Het neergeslagen reactieprodukt werd afgefiltreerd, gewassen en gedroogd boven fosforpentoxyde. Het ruwe produkt werd zonder verdere zuivering bij de volgende stap gebruikt.

20 b. Fmoc-splitsing.

Men behandelde 0,5 gvai het ruwe produkt van koppelingsreactie a) gedurende 10 min bij kamertemperatuur met 5 ml dimethylformamide-piperidine (4:1, vol./vol.) (heldere ^ oplossing) en mengde daarna met 100 ml diisopropylether . Het reactieprodukt dat aldus neersloeg werd afgefiltreerd,gewassen en gedroogd. Dit ruwe produkt werd zonder verdere zuivering bij de volgende stap toegepast.

c. BOC-Splitsing 50 tyen behandelde 300 mg van het ruwe produkt, verkregen bij (1 .b) 5 min bij kamertemperatuur met 5 ml 100%-ige a TFA (volledig opgelost)en mengde daarna met 50 ml diisopropylether. Na toevoeging van 2 ml van een oplossing van waterstof-chloride in diethylether werd het verkregen neerslag afgefiltreerd, 55 gewassen en onder hoog.vacuum gedroogd.

^ 880164P

- 15 -

Het eindprodukt werd gezuiverd door chromatogra- feren over silicagel( een mengsel van chloroform, methanol, water en azijnzuur 7:3:0,5:0,5), met vervolgens ontzouten over Dulolite (gradient: ^O/AcOH 95/5)—► ^O/dioxan/AcOH 45:50:5).

5 De in de titel genoemde verbinding werd verkregen als acetaat ( wit lyofilisaat).

20 IKJ. - -32° (c=0,5 95% AcOH) F = 0,79.

d

Voorbeeld 2: H^N-(CH2)^-CO-DPhe-Cys-Phe-DTrp-Lys-Thr-Cys-Thr-o1.

De inde titel genoemde verbinding werd als een wit lyofilisaat verkregen op analoge wijze als beschreven in voorbeeld 1(a en c) door reactie met B0C-NH-(CH2)^C00H in 15 plaats van Fmoc-NH-(CH9),--C00H.

£*Jd a —34,0° ( c= 0,5 in 95% AcOH) F- 0,93

Voorbeeld 3: H2N-(CH2)10-CO-DPhe-Cys-Phe-(D)Trp-Lys-Thr-Cys-Thr-o1.

20 . . . '

De m de titel genoemde verbinding werd volgens de werkwijze van voorbeeld 2 verkregen , echter onder toepassing van B0C-NH-(CH J n-C00H.

20 1 'U

= -37,2° (c= 0,5 in 95% AcOH) F= 0,89.

25

Voorbeeld 4: H-Lys-DPhe-Cys-Phe-DTrp-Lys-Thr-Cys-Thr-o1.

a. Men loste 0,56 g H-DPhe-Cys-Phe-DTrp-Lys(BOC)-Thr-Cys-Thr-ol en 0,5 mmol Fmoc-Lys(BOC)-OH en 115 mg hydroxybenzo-2q triazool op in 10 ml dimethylformamide en koelde deze oplossing af tot -30°C. Daarna voegde men aan deze oplossing een oplossing van 115 mg dicyclohexylcarboxiimide in 5 ml dimethylformamide (afgekoeld tot -10°C) toe.

Na een reactietijd van 24 uren , gedurende 25 welke tijd het mengsel opwarmde tot kamertemperatuur, werd het verkregen dicyclohexylureum afgefiltreerd en het filtraat verdund .8801640 - 16 - met water, tot 10 malen het volume ervan . Het neergeslagen reactieprodukt werd afgefiltreerd, gewassen en boven fosfor-pentoxyde gedroogd. Het ruwe produkt werd zonder verdere zuivering bij de volgende stap toegepast.

5 b. Fmoc-splitsmg

Men behandelde 0,5 g van het ruwe produkt van koppelingsreactie (a) 10 min bij kamertemperatuur met 5 ml van een mengsel van dimethylformamide en piperidine ( 4:1, q vol,/vol. ) (heldere oplossing) en mengde daarna met 100 ml diisopropylether. Het reactieprodukt dat aldus neersloeg werd afgefiltreerd, gewassen en gedroogd. Het ruwe produkt werd zonder verdere zuivering bij de volgende stap gebruikt.

c. BOC-splitsing 15

Men behandelde 300 mg van het ruwe produkt verkregen bij (1.b) 5 min bij kamertemperatuur met 5 ml 100%-ige TFA (volledig opgelost) en mengde vervolgens met 50 ml diisopropylether. Na toevoeging van 2 ml van een oplossing van waterstofchloride in dimethylether filtreerde men het 20 verkregen neerslag af, waste en droogde onder hoog-vacuum.

Het eindprodukt werd gezuiverd door chromato- graferen over silicagel onder toepassing van een mengsel van chloroform, methanol, water en azijnzuur ( 7:3:0,5:0,5) als elutiemiddel, gevolgd door ontzouten over Duolite (gradient: 25 H20/AcOH 95:5 —* H^/dioxan/AcOH 45:50:50).

De in de titel genoemde verbinding werd als een wit lyofilisaat verkregen.

20

Coil " = -23,8° (c- 0,63 in 95% AcOH) F= 0,86 30 Voorbeeld 5: H-DLys-DPhe-Cys-Phe-DTrp-Lys-Thr-Cys-Thr-ol.

De in de titel genoemde verbinding werd als een wit lyofilisaat verkregen volgens de methode van voorbeeld 4, r oc echter*onder toepassing van Fmoc-DLys(B0C)-0H.

/XT"' = -26,4° (c= 0,54 in 95% AcOH) F= 0,81 .8801640

Voorbeeld 6: - 17 - H-Arg-DPhe-Cys-Phe-DTrp-Lys-Thr-Cys-Thr-o1#

De in de titel genoemde verbinding werd verkregen volgens de methode van voorbeeld 2, echter onder toepassing 5 van Boc-Arg-OH,HC1 2Π ΓΚit = -18,0° (c= 1, in 95% AcOH) F = 0,84 .

Voorbeeld 7: NH 0 10 H2N-C-NH-(CH2)5~c!-DPhe-Cys-Phe-DTrp-Lys-Thr-Cys-Thr-olt

De in cfe titel genoemde verbinding werd volgens de methode van voorbeeld 2 verkregen , echter onder toepassing

Van NH

H2N-C-NH-(CH2)5-C00H,HC1 15 Λί7?°= -25,2° (c- 1, in 95 % AcOH) F= 0,87.

d

Voorbeeld 8: 0 0 H2N-i!-NH- (CH2 ) 5-t!-DPhe-Cy s -Phe-DTrp -Ly s -Thr-Cy s-Thr-o 1 „ 20

De m de titel genoemde verbinding werd verkregen volgens de methode van voorbeeld 2 , echter onder toepassing

Van H2N-C-NH-(CH2)5-C00H

20 /Öc= -40,3 ° (c= 1, in 95% AcOH) F = 0,85 — - d 25

Voorbeeld 9: I --——i N -Desoxy-D-fructosyl-Lys-DPhe-Cys-Phe-DTrp-Lys-Thr-Cys-Thr-ol.

Men loste 250 mg H-Lys(Boc)-DPhe-Eys-Phê-30 DTrp-Lys(Boe)-Thr-tys-Thr-o1 verkregen volgens voorbeeld 4b op in 25 ml van een mengsel van methanol en azijnzuur (9:1 (vol./vol.) en voegde 250 mg D(+)-glucose toe.Het reactiemengsel. werd 6 uren verhit op 65°C en daarna werd het oplosmiddel door verdampen onder verminderde druk verwijderd. Na snel uitgevoerde chromato-35 grafie over silicagel, werd het verkregen N-Boc beschermde produkt .8801640 - 18 - bij de volgende stap, zonder verdere karakterisering, toegepast. Splitsing van de Boc-groep werd op een gebruikelijke wijze uitgevoerd ( voorbeeld 1c of voorbeeld 4c) en leidde tot de in de titel genoemde verbinding.

20 5 ZX7d = “21 ,β° (c- 0,95 in 95% AcOH) F = 0,92.

Voorbeeld 10: 0 II f..... .f N tj( -De s oxy-D-f ruc to sy 1-NH- (-C-DPhe-Cy s -Phe-DTrp-Ly s -Thr-Cy s -Thr-°1· 10

De in de titel genoemde verbinding werd volgens de methode van voorbeeld 9 verkregen, echter onder toepassing van H0N- (CH0) -C-DPhe-fcys-Phe-DTpr-Lys (BocJ-Thr-kys-Thr-ol

« B

als uitgangsmateriaal.

- -20 LPLJ™* -44,4° (c= 0,8 in 95% AcOH) F= 0,87.

De verbindingen met formule I, in vrije 20 vorm of in de vorm van farmaceutisch aanvaardbare zouten en complexen (hierna cfe verbindingen volgens de uitvinding genoemd) vertonen waardevolle farmacologische eigenschappen^zoals blijkt uit proeven op dieren en zijn daardoor geïndiceerd voor therapeutische toepassing. Ze vertonen in het bijzonder 25 .....

een GH-secretie remmende activiteit, zoals bijvoorbeeld blijkt uit daling van serum GH-spiegels bij ratten.

Deze proef wordt uitgevoerd onder toepassing van mannetjesratten . De te onderzoeken verbinding wordt toegediend in variërende, logarithmisch verschillende,doses, onder toepassing 30 van tenminste 5 ratten per dosis. Eén uur na het subcutaan toedienen van de te onderzoeken verbinding werd bloed afgenomen.

Het bepalen van de bloedserum GH-spiegel werd uitgevoerd door radioimmunoassay. De verbindingen met formule I zijn bij deze proef actief indien ze worden toegediend in een 35 dosis tussen 0,01 en 100, bijvoorbeeld tot 1, jig/kg s.c.

.1801640 - 19 -

Verder werd de GH-verlagende werking van de verbindingen volgens de uitvinding eveneens onderzocht na orale toediening aan mannetjesratten met oestradiol-implantaties. Deze proef werd als volgt uitgevoerd: 5 Onder anesthesie met ether werd een lus (lengte 50 mm 0 3-mm) van silastic met 50 mg oestradiol geïmplanteerd onder de huid van de rug van mannelijke OFA ratten met een gewicht van ongeveer 300 g. Op verschillende tijdstippen (1-6 maanden later) werden deze dieren, nadat 10 ze hadden gevast, herhaaldelijk gebruikt voor proeven.

De te onderzoeken verbinding werd oraal in een dosis van 30 tot 5000 jig/kg toegediend.

De GH-spiegel in het bloedserum werd 1 en 2 uren na orale toediening bepaald met radioimmunoassay.

15 De verbindingen volgens de uitvinding zijn dientengevolge geïndiceerd voor toepassing bij de behandeling van aandoeningen met een etiologie die omvat of gepaard gaat met overmatige GH-secretie, bijvoorbeeld ter behandeling van acromegalie , evenals van diabetes mellitus, in het bijzonder 20 vasculaire complicaties daarvan, bijvoorbeeld angiopatie, proliferatie retinopatie, "dawn" fenomeen en nefropatie.

De verbindingen volgens de uitvinding remmen eveneens de secretie van de maag en de pancreas, bijvoorbeeld exocrine en endocrine pancreatis , zoals geïndiceerd 25 bij standaardproeven onder toepassing van ratten met fistels in de maag en pancreas, waarbij de verbindingen oraal actief zijn in een dosis van 0,1 tot 10 mg/kg.

De verbindingen volgens de uitvinding zijn bovendien dus geïndiceerd voor toepassing bij de behandeling 30 van maag-darmaandoeningen, bijvoorbeeld ter behandeling van maagzweren, fistels in de pancreas , het syndroom van gevoelige darmen, dumpingsyndroom, acute pancreatitis en maag-darmhormoon-secretietumoren ( bijv. vipoma's, glucagonama's, insulinoma's, carcinoiden enz.) , alsmede bloedingen in de ingewanden. De 35 verbindingen volgens de uitvinding zijn dus eveneens doeltreffend

.880164P

i - 20 - bij het remmen van de vermeerdering en/of keratinisering van epider-male cellen en zijn dus geïndiceerd voor toepassing bij de behandeling van huidziekten, waaronder een door ziekte veroorzaakte vermeerdering en/of keratinisering van epidermale cellen , in het bijzonder bij de behandeling van psoriasis.

Bovendien zijn cb verbindingen volgens de uitvinding geïndiceerd voor toepassing bij de behandeling van degeneratieve seniele dementie , eveneens bekend als seniele dementie van het Alzheimer type (SDAT), evenals van clusterhoofd- 10 pijn.

De verbindingen volgens de uitvinding zijn dus doeltreffend voor het behandelen van verschillende soorten tumoren, in het bijzonder de somatostatine receptor positieve tumoren, bijvoorbeeld meningiomen.

15

Voor alle hiervoor genoemde toepassingen ligt een geïndiceerde, dagelijkse dosis in het traject van ongeveer 2 ^pg tot ongeveer 20 mg, bijvoorbeeld ongeveer 10 tot ongeveer 5000 jig s.c. en van ongeveer 300 tot 5000 jxg p.o. van de verbinding, geschikt toegediend in gescheiden doses tot 20 4 malen daags in een eenheidsdoseringsvorm, die bijvoorbeeld ongeveer 0,5 jig tot ongeveer 10 mg van de verbinding bevat , of in een vorm met langzame afgifte .

De verbinding van voorbeeld 1 is de aanbevolen verbinding .

25 ...

De GH-secretieremmende werking is de aanbevolen toepassing.

De verbindingen met formule I kunnen in vrije vorm, in de vorm van een farmaceutisch aanvaardbaar zout of als complex worden toegediend. Dergelijke zouten en complexen 30 .....

kunnen op een gebruikelijke wijze worden bereid en vertonen dezelfde mate van werking als de vrije verbindingen. De onderhavige uitvinding verschaft eveneens een farmaceutisch preparaat dat één of een aantal verbindingen met formule I, in vrije basevorm, in de vorm van een farmaceutisch aanvaardbaar zout en/of in 35 de vorm van een complex, desgewenst tezamen met een farmaceutisch aanvaardbaar verdunningsmiddel en/of drager, bevat. Dergelijke preparaten kunnen op een gebruikelijke wijze worden geformuleerd.

. 88 0 1 64 1) - 21 -

De verbindingen kunnen volgens elke geschikte weg , in het bijzonder bij voorkeur parenteraal, bijvoorbeeld in de vorm van injecteerbare oplossingen of suspensies, of in een vorm bestemd voor de neus of als zetpil, worden toegediend.

5 Volgens het voorgaande verschaft de onderhavige uitvinding verder: 1) een methode voor het behandelen van aandoeningen met een etiologie die omvat of gepaard gaat met eenovennaat vaa. groeihormoon-secretie(zoals acromegalie, diabetes 10 mellitus en angiopatie), het behandelen van maag-darmaandoeningen (zoals maagzweren, acute pancreatitis , fistels in de pancreas, syndroom van gevoelige ingewanden, het dumpingssyndroom, maag-darmhormoonsecretietumoren en bloeden in het spijsverterings-stelsel van het remmen van de vermeerdering en/of keratinisering 15 van epidermale cellen ( zoals psoriasis), van het behandelen van degeneratieve seniele dementie of clusterhoofdpijn, evenals van het behandelen van verschillende soorten tumoren (zoals meningiomen) bij een patient die een dergelijke behandeling behoeft, welke methode omvat het toedienen van een 20 doeltreffende hoeveelheid van één of een aantal verbindingen met formule I , van een farmaceutisch aanvaardbaar zout en/of een complex daarvan, aan een dergelijke patient, en 2) farmaceutische preparaten die één of een aantal verbindingen met formule I , een farmaceutisch 25 aanvaardbaar zout en/of complex daarvan, desgewenst tezamen met een farmaceutisch aanvaardbaar verdunningsmiddel of drager daarvoor, bevatten.

In een groep verbindingen met formule I stelt A de rest van een o)-aminocarbonzuur met 3-12 koolstofatomen 30 voor, is>N-CH(Zt)-C0 i) een (L)- of (D)-fenylalaninegroep die desgewenst gesubstitueerd is door halogeen, ΝΟ^,ΝΗ^, OH, alkyl met 1-3 koolstofatomen en/of alkoxy met 1-3 koolstofatomen , of 35 ii) de rest van een natuurlijk b(-aminozuur dat anders is dan gedefinieerd onder i) hiervoor of van een overeen- .8801640 - 22 - komstig (D)-aminozuur , geeft A’ een waterstofatoom of een alkylgroep met 1-3 koolstofatomen weer , stellen en tezamen een direkte binding voor of is elk van de substituenten Y.| en Y£, onafhankelijk van elkaar, een waterstofatoom of een 5 groep met formule 1-5, zoals hiervoor is aangegeven, stelt B Phe voor, waarvan de ring desgewenst gesubstitueerd is door halogeen, NC^, N^, OH, alkyl met 1-3 koolstofatomen en/of alkoxy met 1-3 koolstofatomen , heeft C een hiervoor gedefinieerde betekenis , geeft D weer Lys , dat desgewenst geoó-N-methyleerd 10 is, stelt E voor Thr, Ser, Val , is F -COOR^, -CH2OR.1Q, een groep met formule 6 of 13 , waarin R^, R q, R^ , R.J2 en de hiervoor gedefinieerde betekenissen hebben, waarbij de resten B, D en E de L-configuratie bezitten en de resten op de 2- en 7-plaats en eventueel rest Y^ 4) en Y2 4) , 15 elk onafhankelijk van elkaar, de (L)- of (D) -configuratie bezitten, in vrije vorm, zoutvorm of complexvorm.

In een andere groep verbindingen met formule I stelt A Η-Lys- of H-(D)Lys- voor , is >N-CH(Z 1 )-C0- 20 i) een (L) of (D)-fenylanalinegroep , die desgewenst gesubstitueerd is door halogeen, NC^, ,ΟΗ, C^" alkyl en/of alkoxy , of ii) de rest van een natuurlijk °C-aminozuur dat verschilt van die gedefinieerd onder i) hiervoor of van een 25 overeenkomstig (D)-aminozuur , geeft A' een waterstofatoom of een alkylgroep met 1-3 koolstofatomen weer , stellen Y.| en Y2 tezamen een direkte binding voor of is elk van de substituenten Y^ en onafhankelijk van elkaar, 30 een waterstofatoom of een groep met de formules 1-5, zoals hiervoor gedefinieerd, geeft B een -Phe-groep weer, waarvan de ring desgewenst gesubstitueerd is door halogeen, NC^j NH^, OH, C^^alkyl en/of C^_^alkoxy, .heeft 35 C een hiervoor gedefinieerde betekenis, is D Lys , desgewenst ge0(.-N-methyleerd, stelt .8801640 4 - 23 - E Thr, Ser, Val voor en geeft F -GOOR-,, -CI^OR , een groep met formule 6 of 13 weer, waarin R7> R^, R^, R12 en de hiervoor gedefinieerde betekenissen hebben, waarin de resten B, D en E de 5 L-configuratie bezitten en de resten op de 2- en 7-plaats en elke rest 4) en 4) , elk onafhankelijk van elkaar, de (L)- of (D)-configuratie hebben, in vrije vorm, zoutvorm of complexvorm.

- 88 0 1 64 0

Claims

1. Een verbinding met formule I,waarin A een groep met formule ^ of /2^ voorstelt, waarin R een alkyleengroep met 1-11 koolstofatomen of 5 een alkenyleengroep met 2-11 koolstofatomen voorstelt , Z een -OH, -NR.Rc, -NR.R..R,, -NHOH of ’ 45’ 456 guanidino_of ureido-groep weergeeft, R^ een alkyleengroep met 1-5 koolstofatomen is,

2. Een verbinding volgens conclusie 1, waarin 25. de rest van een ώ-aminocarbonzuur met 3-12 koolstofatomen voorstelt, >N-CR(Z^)-C0 weergeeft, i) een (L)- of (D)-fenylalaninerest, die desgewenst gesubstitueerd is door halogeen, N02, Nik,, OH, C 3 30 alkyl en/of C^_3 alkoxy, of ii) de rest van een natuurlijk ΰί-aminozuur die verschilt van die gedefinieerd onder i) hiervoor , of van een overeenkomstig (D)-aminozuur, A' een waterstofatoom of een alkylgroep met 35 1-3 koolstofatomen weergeeft, Y.| en Y2 tezamen een direkte binding vormen of „ 8 8 0 1 64 P * - 27 - waarin elk van de substituenten en Y2 , onafhankelijk van elkaar, een waterstofatoom of een groep met formules 1-5, zoals gedefinieerd in conclusie 1, voorstellen, B = Phe , waarvan de ring desgewenst 5 gesubstitueerd is door halogeen, N02, NH2, OH, alkyl met 1-3 koolstofatomen en/of alkoxy met 1-3 koolstofatomen, C een in conclusie 1 gedefinieerde betekenis heeft, D = Lys, desgewenst geöi-N-methyleerd,

3. Een verbinding volgens conclusie 1, waarin 20. een Η-Lys- of H-(D)Lys groep voorstelt, > N-CH(Z^)-C0- voorstelt i) een (L)- of (D)-fenylanalinegroep, die desgewenst gesubstitueerd is door halogeen, N02, NH2, OH, alkyl en/of X.j_2 alkoxy, of 25 ii) de rest van een natuurlijk ^-aminozuur die verschilt van die gedefinieerd onder i) hiervoor of van een overeenkomstig (D)-aminozuur, Ar een waterstofatoom of een alkylgroep met 1-3 koolstofatomen weergeeft,

30 Y,| en Y2 tezamen een direkte binding vormen of waarin elk van dê substituenten Y^ en Y2» onafhankelijk van elkaar, een waterstofatoom of een groep met formules 1 tot 5, zoals gedefinieerd in conclusie 1, weergeven, B = Phe , waarvan de ring desgewenst 35 gesubstitueerd is door halogeen, NC>2, NH2, OH, alkyl met 1-3 koolstofatomen en/of alkoxy met 1-3 koolstofatomen , C een in conclusie 1 gedefinieerde betekenis heeft, „8801640 - 28 - D = Lys, desgewenst ge^V -N-methyleerd, E = Thr, Ser, Val, F een -COORy, -C^OR^q groep of een groep met formule 6 of 13 voorstelt, waarin ^ Ry, R1q , R^, R^ en de in conclusie 1 ge definieerde betekenissen hebben, waarin de resten B , D en E de L-configuratie bezitten en de resten op de 2- en 7-plaats en eventuele resten Y^4) en Y2 4) , elk onafhankelijk van elkaar, de (L)- of (D)-configuratie bezitten, in vrije vorm, zoutvorm of 10 complexvorm.

4. Een verbinding volgens conclusie 1, waarin A frl-aminohexanoyl, Lys, Orn, Arg of een citrullinerest voorstelt, die elk desgewenst een suikerrest kunnen bevatten.

5 H2N-(CH2)5-CO-DPhe-Cys-Phe-DTrp-Lys-Thr-Cys-Thr-o1 in vrije vorm, zoutvorm of complexvorm,is.

5. Een verbinding volgens één der conclusies ' 15 1-4 , waarin >-N-CH(Z^)-CO- is DPhe,

6. Een verbinding volgens één der conclusies 1-5, waarin Y^ en Y2 tezamen een direkte binding vormen.

7. Een verbinding volgens één der conclusies 1-6, waarin 20. is Phe of Tyr C is -(D) Trp , D is Lys E is Thr, Ser of Val en F een groep met formule 9 is , waarin 25 R ^ een waterstofatoom voorstelt, R13 CH20H, CH(CH3)OH, i-butyl, i-propyl, CK^CILjOH, (CI^^OH of een rest afgeleid van Trp, 5-fluor-Trp, weergeeft, X,| een groep met formule 8 of CI^OR,^ 30 voorstelt, R.rt een waterstofatoom is en 10 R ^ als een esterrest formyl, ^2-)2 alkyl-carbonyl, Cg_^2_fenylalkylcarbonyl of benzoyl voorstelt en de -CH(R.|3)-X.| de L-conf iguratie bezit.

8. Een verbinding volgens één der conclusies .8881640 - 29 - 1 en 4-7, waarin de suikerrest wordt gekozen uit a) een deoxyrest van een ketose met formule a, waarbij de rest via de (^“groep aan de NH-groep van de verbinding met formule I is gebonden, 5 b) een deoxyrest van een aldose met formule b, waarbij de rest via de vrije binding met de NH groep van de verbinding met formule I is verbonden, c) een rest met formule c, waarin GgCO de rest van een uronzuur of van 10 een polyhydroxymono- of dicarbonzuur is en Ry een waterstofatoom, een alkylgroep met 1-5 koolstofatomen of een alkanoylgroep met 1-4 koolstofatomen voorstelt, d) een rest met formule d, e, f of g, waarin 15. een waterstofatoom, een alkylgroep met 1-5 koolstofatomen of een alkanoylgroep met 1-4 koolstofatomen voorstelt en Q, Q’> Q" en Q*1' groepen zijn die de peptide- rest aan de suikerrest koppelen, of 20 e) een rest met formule h, i of j , waarin Y = H2 of H, OH en c - 2 , 3 of 4 en elk van de vrije hydroxyIgroepen in het polyolgedeelte met formule h , i of j desgewenst op een glycosidische wijze gebonden is aan een 25 reducerend mono-, di- of oligosaccharide of aminosuiker.

9. Een verbinding volgens conclusie 8, waarin formule a voorstelt i) een rest met formule a^, waarin één van de substituenten G en G, een water- a b 30 stofatoom voorstelt en de andere de hydroxylgroep is, één van de substituenten G en G, een water- c d stofatoom weergeeft en de andere de hydroxylgroep of 0-glycosylgroep is, waarbij de glycosylgroep kan worden afgeleid van een reducerend mono-, di- of oligosaccharide, 35 één van de substituenten G en G, een e r .8801640 - 30 - waterstofatoom voorstelt en de andere de hydroxylgroep is, één van de substituenten G en G, een g h waterstofatoom weergeeft en de andere de hydroxylgroep^of Cl^OH-groep is, 5 ii) een rest met formule , waarin één van de substituenten G en G, een water- a b stofatoom voorstelt en de andere de hydroxylgroep is, één van de substituenten G en G, een waterstof- c d atoom weergeeft en de andere de hydroxylgroep of O-glycosylgroep 10 is, waarin de glycosylgroep kan worden afgeleid van een reducerend mono-, di- of oligosaccharide, één van de substituenten G en G^ een e f waterstofatoom voorstelt en de andere een waterstofatoom, CQOH, C^OH, CH2“0-P(0)-(0H)2 of Cl^O-glycosyl is, waarin de glycosyl-15 groep kan worden afgeleid van reducerend mono-,di- of oligosaccharide , formule b weergeeft i) een rest met formule b^, waarin één van de substituenten G en G, een waterstof- a b 20 atoom voorstelt en de andere een vrije binding is, één van de substituenten G of G, een waterstof- c d atoom weergeeft en de andere de hydroxylgroep is, één van de substituenten G of Gj. een water- e f stofatoom voorstelt en de andere de hydroxylgroep of 0-glycosyl- 25 groep is, waarin de glycosylgroep kan worden afgeleid van een reducerend mono-, di- of oligosaccharide, één van de substituenten G en G, een waterstof- g h atoom weergeeft en de andere de -Cl^OH of C^-O-glycosylgroep is, waarin de glycosylgroep kan worden afgeleid van een reducerend 30 mono-, di- of oligosaccharide, ii) een rest met formule b2 Λ waarin één van de substituenten G en G, een waterstof- a b atoom voorstelt en de andere een vrije binding is, één van de substituenten G en G, een waterstof- c d 35 atoom weergeeft en de andere de hydroxylgroep is, één van de substituenten G en G, een waterstof- e t .8801640 - 31 - atoom voorstelt en de andere de CI^OH of CH^-O-glycosylgroep is, waarin de glycosylgroep kan worden afgeleid van een reducerend mono-, di- of oligosaccharide.

10. Een verbinding volgens conclusie 1 die

10 E - Thr, Ser, Val, F een -C00R7, -CH20R^ groep voorstelt of een groep met formule 6 of 13 is , waarin R^, R1q , , R^2 en de in conclusie 1 gedefinieerde beteke nissen hebben, waarin de resten B, D en E de L-configuratie 15 bezitten en de resten op de 2- en 7-plaats en eventuele rest Y^ 4) en Y2 4), elk onafhankelijk van elkaar, de (L)- of (D)-configuratie bezitten, in vrije vorm#zoutvorm of complexvorm.

10 R^j de substituent gehecht aan het 04-koolstof- atoom van een natuurlijk Pt-aminozuur (waaronder waterstof) , Re een alkylgroep met 1-5 koolstofatomen, Ra' en Y onafhankelijk van elkaar , een waterstofatoom, de methyl- of ethylgroep,

10 R„ een waterstofatoom, een -C0-NH„, -C=NH 2 l | nh2 groep of een suikerrest voorstelt, R^ een waterstofatoom of een suikerrest weergeeft, R^ een waterstofatoom^een alkylgroep met 1-3 koolstofatomen of een suikerrest is , R,. een waterstofatoom of een alkylgroep met 1-3 koolstofatomen voorstelt, en Rg een alkylgroep met 1-3 koolstofatomen is, 20 >N-CH(Z1 )-co- i) een (L)- of (D)-fenylalaninerest, waarvan de ring desgewenst gesubstitueerd is door halogeen,N02, NH2, OH, alkyl met 1-3 koolstofatomen en/of alkoxy met 1-3 koolstofatomen, ii) de rest van een ander, natuurlijk X-aminozuur 25 dan gedefinieerd onder i) hiervoor of van een overeenkomstig (D)-aminozuur voorstelt , >Z.j in^1 N-CH-(Z ^)-CO- de rest van dit residu i) of ii) is, A' een waterstofatoom of een alkylgroep met 1-3 koolstofatomen voorstelt, Y.| en Y2 tezamen een direkte binding vormen, of „8801640 - 25 - waarin elk van de substituenten en Y^ » onafhankelijk van elkaar, een waterstofatoom of een groep met formule 1 , 2 , 3 , 4 of 5 is, waarin R de methyl- of ethylgroep, Q. 5 een waterstofatoom, de methyl- of ethyl groep, m een geheel getal van 1-4 , n een geheel getal van 1-5 , Rc een alkylgroep met 1-6 koolstofatomen ,

11. Een verbinding volgens conclusie 1, die I-f H-Lys-DPhe-Cys-Phe-DTrp-Lys-Thr-Cys-Thr-ol , xn vrije vorm, jq zoutvorm of complexvorm , is.

12. Een verbinding volgens conclusie 1, die H-DLys-DPhe-Cys-Phe-DTrp-Lys-Thr-Cys-Thr-ol in vrije vorm, zoutvorm of complexvorm,is.

13. Een verbinding volgens conclusie 1, die ^ -Desoxy-D-fructosyl-Lys-DPhe-Cys-Phe-DTrp-Lys-Thr-èys-Thr-ol, in vrije, vorm, zoutvorm of complexvorm, is.

14. Een verbinding volgens conclusie 1, die ^ 0 ,_ | N -Desoxy-D-fructosyl-NH-(CH2)^-C-DPhe-Gys-Phe-DTrp-Lys-Thr-Cys-Thr-2Q ol, in vrije vorm, zoutvorm of complexvorm, is.

15. Een verbinding volgens één der conclusies 1-14, in vrije vorm , in een farmaceutisch aanvaardbare zoutvorm of in een complexvorm , voor toepassing als farmaceuticum.

15 Rg en Rg , onafhankelijk van elkaar , een waterstof- of halogeenatoom, een alkylgroep met 1-3 koolstofatomen of een alkoxygroep met 1-3 koolstofatomen, p = 0 of 1, q 0 of 1, en 20 r 0 , 1 of 2 voorstellen , B = -Phe- , waarvan de ring desgewenst gesubstitueerd is door halogeen, NO^, NH^, OH, C^alkyl en/of 0.^-alkoxy, of naftylalanine, C een (L)-Trp- of (D)-Trp-groep, desgewenst 25 geC£-N-methyleerd en waarvan de benzeenring desgewenst gesub stitueerd is door halogeen, NO^, NH^, OH, ^alkyl met 1-3 koolstofatomen en/of alkoxy met 1-3 koolstofatomen, voorstelt, D = -Lys-, ThiaLys, YF-Lys, 5F-Lys of Orn , desgewenst ge*X,-N-methyleerd, of een 4-aminocyclohexylAla of 4-30 aminocyclohexylGly rest, E Thr, Ser, Val, Phe, Ile of een amino-isoboterzuurresidu weergeeft, F een groep met formule -COORy, -CH^OR^, een groep met formule 6 of 7 voorstelt, waarin 35 Ry een waterstofatoom of een alkylgroep met 1-3 koolstofatomen , Rjq een waterstofatoom of de rest van een „ § 8 0 1 6 4 0 - 26 - fysiologisch aanvaardbare, fysiologisch hydrolyseerbare, ester, R1 ^ een waterstofatoom, een alkylgroep met 1-3 koolstofatomen, een fenylgroep of een fenyl-alkylgroep, R^I2 een waterstofatoom, een alkylgroep met 1-3 5 koolstofatomen of een groep met formule -CH(R,j3)-X.| , r13 ch2oh, -(ch2)2-oh, -(ch2)3-oh, of CH(CH3)0H of de substituent gehecht aan het koolstofatoom van een natuurlijk °(/-aminozuur ( waar onder wat er stof) en een groep met formule -COORy, CH2OR^q of 10 met formule 8 voorstellen, waarin Ry en RiQ de hiervoor gegeven betekenissen hebben, R^ een waterstofatoom of een alkylgroep met 1-3 koolstofatomen is en 15 een waterstofatoom, een alkylgroep met 1-3 koolstofatomen , een fenylgroep of een C^gfenylalkylgroep en R^ een waterstofatoom of de hydroxylgroep voorstellen, onder de voorwaarde dat indien R^ een -CH(R^3)-X^ groep is , R^ een waterstofatoom of de methylgroep voorstelt, 20 waarin de resten B, D en E de L-configuratie bezitten en de resten op de 2- en7-plaats en eventuele resten Y. 4) en Y* 4) \ λ L * elk onafhankelijk^ de (L)- of (D)-configuratie bezitten, in vrije vorm, zoutvorm of complexvorm.

16. Een verbinding volgens één der conclusies 22 1-14 in vrije vorm, in een farmaceutisch aanvaardbare zoutvorm of in complexvorm, voor toepassing bij de behandeling van aandoeningen met een etiologie die omvat of gepaard gaat met een overmatige groe ihormoonaf scheiding.

17. Een verbinding volgens één der conclusies 2Q 1-14, in vrije vorm, in een farmaceutisch aanvaardbare zoutvorm of in een complexvorm, voor toepassing bij de behandeling van maag-darms toorn i s sen.

18. Een verbinding volgens één der conclusies 1-14, in vrije vorm, in een farmaceutisch aanvaardbare zoutvorm 22 of in een complexvorm, voor toepassing bij de behandeling van dermatologische ziekten, waaronder een ziekelijke vermeerdering en/of keratinisering van epidermale cellen. .8801640 .t I - 32 -

19. Een verbinding volgens één der conclusies 1-14 , in vrije vorm, in een farmaceutisch aanvaardbare zoutvorm of complexvorm, voor toepassing bij de behandeling van degeneratieve seniele dementie en van clusterhoofdpijn.

20. Een verbinding volgens één der conclusies 1-14 in vrije vorm, in een farmaceutisch aanvaardbare zoutvorm of in een complexvorm, voor toepassing bij de behandeling van tumoren.

21. Farmaceutisch preparaat dat één of een 10 aantal verbindingen volgens één der conclusies 1-14 , in vrije vorm, in een farmaceutisch aanvaardbare zoutvorm en/of in een complexvorm , desgewenst tezamen met een farmaceutische drager en/of verdunningsmiddel , bevat*

22. Verbindingen, in hoofdzaak zoals hiervoor 15 beschreven in één van de voorbeelden 1-10 .

23. Werkwijzen als beschreven in de beschrijving en/of voorbeelden. -o-o-o- 4*801640