MXPA04009228A

MXPA04009228A - Compuestos inmunosupresores, metodos y usos relacionados con los mismos.

Info

Publication number: MXPA04009228A
Application number: MXPA04009228A
Authority: MX
Inventors: Brandstetter Tilmann
Original assignee: Gpc Biotech Ag
Priority date: 2002-03-22
Filing date: 2003-03-24
Publication date: 2005-08-16
Also published as: ZA200407547B; EP1494701A4; US20060004077A1; BR0308654A; JP2005533753A; US7629318B2; CN1652810A; CA2479939A1; AU2003218401A1; WO2003082197A3; RU2004131200A; AU2003218401B2; KR20040106291A; RU2334760C2; NZ535315A; EP1494701A2; PL373738A1; WO2003082197A2

Abstract

La presente invencion se refiere a composiciones y metodos para suprimir una repuesta inmune, por ejemplo, inhibiendo la activacion de las celulas T transmitida por el MHC clase II. Los compuestos asunto materia y los metodos pueden ser usados para tratar o prevenir enfermedades tales como artritis reumatoide y/o esclerosis multiple.

Description

COMPUESTOS INMUNOSUPRESORES, MÉTODOS Y USOS RELACIONADOS CON LOS MISMOS Campo de la Invención Moléculas de MHC existen en dos formas, clase I y clase II, ambas codificadas dentro de un complejo de gen simple. Los genes de MHC son altamente polimórficos: la mayoría de sitios tienen hasta aproximadamente 100 alelos en la población humana (Hansen, T.H., et al. 1993 En "Fundamental Immunology" Ed. Paul, W.E., RavenPress, New York, NY, p. 577). Antecedentes de la Invención La moléculas de MHC clase I son glicoproteínas de transmembrana de 45 kD, no covalentemente asociadas con otra glicoproteína, la microglobulina beta-2 de 12 kD. Lo último no está insertado en la membrana celular, y se codifica fuera del MHC. Las moléculas clase I humanas son de tres isotipos diferentes, HLA-A, -B, y -C calificados, codificados en sitios separados. La expresión tisular de moléculas clase I es ubicua y codominante. La estructura tridimensional de varias moléculas clase 1 de humanos y murinos ha sido resuelta (Bjorkman, P.J., et al. (1987) Nature, 329, 506; Garrett, T.P.J., et al. (1989) Nature, 342, 692; Madden, D.R., et al. (1991) Nature, 353. 321; Fremont, D.H., et al. (1992) Science, 257, 919). Sus primeros y segundos dominios extracelulares cruzan en un sitio de enlace que consiste de una hoja de fondo plegada ß bordeada por dos partes helicoidales a paralelas. El sitio de enlace presenta 7-9 aminoácidos a lo largo de los péptidos antigénicos a linfocitos T (Te) de efector citotóxico (Madden et al. y Fremont et al., anterior). Muchos de estos péptidos surgen de la parte interior de las proteínas sintetizadas del antígeno que presenta la célula (APC), por ejemplo, a partir de las proteínas de virus u otros parásitos intracelulares, o a partir de proteínas iguales desdobladas. Los tres isotipos clase I, así como sus formas alélicas, tienen diferentes especificidades de enlace peptídico, dependiendo de los residuos polimórficos dentro del sitio de enlace (Falk, K., et al. (1991) Nature, 351, 290; Falk, K., et al. (1992) -Eur. J. Immunol., 22,277). Existe un sitio de enlace adicional en el tercer dominio clase I que interactúa con moléculas CD8 expresadas selectivamente en células T. La etapa inicial en la activación de la célula Te es la interacción simultánea de su receptor antígeno (TCR) con el péptido presentado y CD8 con su sitio aceptor en la misma molécula clase I. Las moléculas MHC clase II son heterodímeros no covalentemente asociadas de dos glicoproteínas transmembrana, la cadena a de 35 kD y la cadena ß de 28 kD. En seres humanos, las moléculas clase II ocurren con tres isotipos diferentes, HLA-DP, -DQ y -DR calificados. El polimorfismo en DR es restringido a la cadena ß, mientras que ambas cadenas son polimórficas en los isotipos DP y DQ. Las moléculas clase II están expresadas codominantemente, pero en contraste a la clase I, presentan una distribución tisular restringida: están solamente presentes en la superficie de las células del sistema inmune (expresión constitutiva en linfocitos B y células dendríticas, y la expresión capaz de ser inducida en células T y monocitos). La estructura tridimensional de tres diferentes moléculas DR se ha determinado (Brown, J.H., et al. (1993), Nature, 364, 33; Stern, L.J., et al. (1994) Nature, 388, 215; Ghosh, P., et al. (1995) Nature, 378, 457; Dessen, A., et al. (1997) Immunity, 7, 473). Por lo general, su estructura es muy similar a aquellas moléculas clase I. El sitio de enlace peptídico está compuesto de los primeros dominios de la cadena y ß, que en contraste a la clase I, está abierta en ambos lados, permitiendo el enlace de péptidos más tiempo (12-24 residuos largos) (Chicz, R.M., et al. (1992) Nature, 358, 764). Un sitio de enlace adicional en el segundo dominio de las cadenas ß interactúa con la molécula CD4, expresada selectivamente en células ayudantes T (Th). Esta molécula tiene una función co-receptora para células Th, análogas a aquella de CD8 para células Te. Durante su biosíntesis y transporte intracelular, los heterodímeros clase II son chaperonadas por una tercera, proteína de 31 kD codificada sin MHC no polimórfica, cadena (li) invariante terminada (Cresswell, P. (1994) Annu. Rev. Immunol., 12, 259). La cadena l¡ protege el sitio de enlace peptídico de las moléculas clase II durante su transporte en el citosol, hasta que alcanza un compartimiento endosomal ácido, donde es disociado por proteasas, dejando solamente un péptido del mismo, CLIP calificado, en el sitio de enlace. El intercambio de CLIP con péptidos antigénicos se cataliza por otra molécula codificada con MHC, HLA-DM terminada, en el endosoma (Vogt, A.B., et al. (1996) Proc. Nati. Acad. Sci. USA. 93, 9724). Los péptidos antigénicos derivan principalmente de las proteínas externas endocitosadas (Germain, R.N. (1994) Cell, 76, 287). La naturaleza de la interacción entre moléculas DR y péptidos es ampliamente entendida. Existe una bolsa mayor en el sitio de enlace que es crítica para la interacción con un residuo del péptido de ancla hidrofóbica, y la bolsa menor que contiene residuos de cadena ß polimórficos, que confieren un grado de alotipo-especificidad para enlace peptídico (Stern et al., anterior; Hammer, J., et al. (1993) J. Exp. Med., 176, 1007; Hammer, J., et al. (1994) Cell. 74, 197; Hammer, J., et al. (1994) Proc. Nati. Acad. Sci., USA 91, 4456; Hammer, J., et al. (1995) J. Exp. Med., 180, 2353). La cadena principal de péptido también forma enlaces de hidrógeno importantes con cadenas laterales de ciertos residuos conservados en el sitio de enlace, que determina la conformación total y la orientación de la cadena lateral del péptido unido (Stern et al., anterior). Un cuerpo grande de manifiesto ha demostrado que la susceptibilidad a muchas enfermedades, en particular enfermedades autoinmunológicas, está ampliamente asociado con alelos específicos del complejo de hisocompatibilidad principal (revisada en Tiwari, J., and Terasaki, P. (1985), asociación de HLA y enfermedad (New York; Springer Verlag)). Aunque existen algunas enfermedades asociadas con la clase I, la mayoría de condiciones autoinmunes han sido encontradas que están asociadas con los alelos clase II. Por ejemplo, los alelos clase- II DRB1*0101, 0401, 0404 y 0405 ocurren en frecuencia aumentada entre pacientes con artritis reumatoide (RA) (McMichael , S.J., et al. (1977) Arthritis Rheum., 20, 1037; Stasny, P. (1978) N. Engl. J. Med., 298, 869; Ohta, N., et al. (1982) Hum. Immunol., 5, 123; Schiff, B., et al. (1982) Ann. Rheum. Dis., 41, 403), mientras que DRB1 501 está asociado con la esclerosis múltiple (MS), y la combinación de alelo DQ DQA1 *0301/B1*0302 con diabetes mellitus dependiente de insulina (IDDM). En RA, en suma >94% de pacientes positivos del factor reumatoide portan uno de los alelos de susceptibilidad (Nepom, G.T., et al. (1989) Arthritis, Rheum., 32, 15). El efecto de los alelos DRB1 en RA se manifiesta en diferentes formas: primero, la asociación de la enfermedad muestra un ascenso dependiente étnico para uno o el otro alelo (Ohta et al., y Schiff et al., anterior), segundo, DRB1*0401 está asociado con más formas severas de la enfermedad que los otros alelos (Lanchbury, J.S., et al. (1991) Hum. Immunol., 32, 56), y tercero, un afecto de dosificación del gen puede observarse, en que la homozigosidad para un alelo de susceptibilidad o combinaciones de dos alellos de susceptibilidad confieren más formas crónicas, severas o comienzos inmaduros de RA (Wordworth, P., et al. (1992) Am. J. Hum. Genet., 51, 585; Nepom, B.S. (1993) Clin. Immunol. Immunopathol., 6·7, 850). El último descubrimiento indica que el locus DRB1 puede controlar tanto la iniciación como la progresión de la enfermedad. Las cadenas DRB codificadas por alelos DRB1 unidos a RA presentan diferencias polimórficas, pero todo parte de una extensión de secuencias de aminoácidos idéntica, o casi idéntica en las posiciones 67-74, conocidas como el "epítope compartido" (Nepom et al., (1989) anterior; Gregersen, P.K., et al. (1987) Arthritis Rheum. 30, 1205). Residuos en la región del epítope compartido contribuyen a la formación de la hélice en un lado del surco de enlace peptídico (Brown et al., Stern et al., y Dessen et al., anteriores), y son esperados de esta forma para influenciar el enlace peptídico.

Efectivamente, el residuo básico Lys o Arg en la posición (p)71 de alotipos DR asociados con RA imparte selectividad en el enlace peptídico mediante una carga negativa que favorece y positiva que no favorece en el residuo p4 del péptido exhibido, mientras el alotipo no unido a RA DRB1*0402 con residuos ácidos Asp y Glu en p70 y 71 muestra el ascenso de carga opuesta en el residuo p4 del péptido exhibido (Hammer, J., et al. (1995) J. Exp. Med., 181, 1847). Aunque los autoantígenos que inducen RA permanecen no conocidos, varias proteínas del cartílago articular tienen secuencias peptídicas que pueden enlazarse selectivamente a moléculas DR asociadas con RA debido a un residuo ácido en p4 (Dessen et al., Hammer et al., (1995) anterior). Estas proteínas pueden ser de esta forma antígenos candidatos para una respuesta autoinmune provocando patología de RA (Rosloniec, E.F., et al. (1997) J. Exp. Med. 185, 1113). El ascenso de carga opuesta (positiva) de DRB1-0402 ha demostrado conferir presentación selectiva de péptidos con un residuo básico en p4, derivado de desmogleína 3, un autoantígeno implicado en la enfermedad autoinmune asociada con 0402, pénfigo vulgar (Wucherpfennig, K.W., et al. (1995) Proc. Nati. Acad. Sci. USA, 92, 11935). Estos datos soportan ampliamente la hipótesis que la presentación selectiva de péptidos autoantigénicos por alotipos de MHC enlazados a la enfermedad podría ser el mecanismo fundamental de la asociación genética entre alelos DRB1 y enfermedades autoinmunes (Todd, J.A., et al. (1988) Science, 240, 1003). El proceso de la enfermedad misma está dirigida por células Th que reconocen tales péptidos. Las células Th autorreacti vas activadas secretan diferentes citocinas pro-inflamatorias, que a su vez atraen otras células inflamatorias al sitio, y provocan una inflamación crónica en el órgano afectado. De las dos clases de moléculas MHC, la clase II es el objetivo primario para la intervención inmunosupresora por las siguientes razones: Primero, las moléculas MHC-II activan las células - ayudantes T (Th) que son centrales a inmunorregulación, y son responsables de la mayor parte de la inmunopatología en enfermedades inflamatorias. Segundo, la mayoría de enfermedades autoinmunes están asociadas genéticamente con los alelos clase II. Tercero, bajo condiciones normales fisicológicas o no patológicas, las moléculas MHC-II están expresadas selectivamente en células del sistema inmunológico, mientras las MHC-1 están presentes en la mayoría de células somáticas. El enlace peptídico a moléculas clase II (por ejemplo, DR) requiere la presencia de cadenas laterales definidas en "posiciones de ancla" llamadas así del péptido exhibido, que forman todos juntos un motivo de enlace particular; sin embargo, en las posiciones sin ancla, es permitida una variación de cadenas laterales sin influencia en el enlace (Hammer et al., (1993, 1994, y 1995), anteriores). Este mecanismo de enlace permite la presentación de muchos péptidos diferentes por un alotipo dado. Las cadenas laterales en las posiciones en ancla interactúan con bolsas específicas dentro del sitio de enlace, mientras que aquellas en las posiciones sin ancla apuntan fuera, y están disponibles para reconocimiento por la TCR o células Th. Es por lo tanto concebible que el reemplazo de péptidos autoantigénicos presentados por moléculas MHC asociadas con la enfermedad autoinmune por un compuesto que tiene el mismo motivo de enlace pero que es diferente en las posiciones sin ancla podrían prevenir la activación de células T autoinmunes, y de esta forma interrumpen el proceso de la enfermedad. El mecanismo con lo cual tal compuesto podría ejercer su efecto, es un antagonismo competitivo para el sitio que presenta el antígeno. Los compuestos que enlazan selectivamente a moléculas clase II implicadas en una enfermedad autoinmune particular son por lo tanto esperados para interferir específicamente con esa enfermedad. Péptidos adicionales que enlazan a moléculas MHC e inhiben la activación de la célula T han sido descritos en, por ejemplo, las Solicitudes de Patente Internacionales WO 92/02543, WO 93/05011 y WO 95/07707. Unas moléculas MHC clase II que se dirigen al agente farmacéutico podrían ofrecer varias ventajas sobre la mayoría de drogas inmunosupresoras disponibles. Primero, podría representar una intervención basada en el mecanismos de la enfermedad, que es esperada para interrumpir el evento inicial en la cascada patogénica. Segundo, puede designarse para ser selectiva de únicamente unos pocos alotipos clase II, es decir, que se enlaza con la afinidad mejorada para aquellos alotipos asociados con la enfermedad, dejando el resto del sistema que presenta el antígeno disponible para respuestas protectoras contra patógenos, y por lo tanto provoca pocos efectos secundarios inmunocomprometedores que la mayoría de drogas inmunosupresoras. Tercero, los métodos y compuestos podrían aplicarse sin ningún conocimiento específico de los antígenos actuales provocando la enfermedad. Finalmente, podría ser ventajoso si tal agente farmacéutico mostrara estabilidad superior en ciertos ambientes biológicos. Por ejemplo, alta estabilidad de la droga en plasmas de mamíferos tales como plasma de rata, ratón o humano, podría ser deseable dado que muchas células del sistema inmune se encuentran en la sangre junto con potentes enzimas que degradan el péptido. La alta estabilidad de la droga en el plasma del roedor, especialmente plasma de rata, es particularmente ventajoso ya que la mayoría de terapéuticos están probando inicialmente para eficacia, toxicidad y/o farmacocinéticos en modelos o sistemas de roedores. La estabilidad de la droga contra la degradación de Catepsina es igualmente deseable ya que la intervención terapéutica basada en el mecanismo requiere que las moléculas MHC clase II que se dirigen a los agentes farmacéuticos pueda ser endocitosado y transportado dentro de la célula utilizando endosomas que contienen Catepsina antes de la presentación de la molécula MHC II. Sumario de la Invención La presente invención se relaciona con compuestos, composiciones farmacéuticas y métodos para suprimir una respuesta inmune, por ejemplo, inhibiendo la activación de células T mediada por MHC clase II. Los compuestos descritos más adelante, que incluyen un substituto de arginina no natural en los compuestos de Fórmula II, pueden presentar estabilidad aumentada en plasma sanguíneo (por ejemplo, plasma en ratones y ratas) y afinidad de enlace aumentada a moléculas MHC clase II de interés (0401, 0101 y 0404) por tanto como un factor de 1.25-3, comparado con compuestos correspondientes que contienen Arg en la posición del aminoácido substituto. Otros compuestos descritos más adelante comprenden un grupo terminante en los compuestos de Fórmula I. Tales compuestos de Fórmulas I o II pueden mostrar también inhibición in vivo aumentada de la respuesta de la célula T por tanto como un factor de 1.25-3. Tales compuestos pueden mostrar inmunosupresión efectiva en modelos de ratón de ciertos trastornos inmunes. Los compuestos y métodos objeto pueden utilizarse para tratar trastornos tales como artritis reumatoide y/o esclerosis múltiple. En ciertas modalidades, los compuestos objeto son utilizados para la preparación de una composición farmacéutica para el tratamiento de un animal, tal como un ser humano, por ejemplo, para tratar o prevenir una condición caracterizada por la activación de células T mediadas con MHC clase II, por la expresión de la proteína MHC clase II en un sitio patológico de inflamación, tal como una enfermedad autoinmune. Los compuestos y/o composiciones objeto pueden utilizarse en el tratamiento o prevención de tales enfermedades, incluyendo aquellas enumeradas específicamente más adelante. Breve Descripción de las Figuras Figura 1 Enlace mejorado de un compuesto heptámero que contiene Gpg (guanilpiperidil glicina) de la invención (P53) a la proteína 0401 de MHC clase II comparado con el equivalente que contiene Arg (P51). Un péptido conducido publicado (P3; Falcioni et al 1999; Nature Biotech 17, 562-567) se utiliza como un control positivo. Utilizando software estadístico estándar, se ajustaron las curvas de regresión logística no lineales para puntos de datos copiados generados de acuerdo con el Ejemplo 14. Los valores IC50 fueron estimados a partir de las curvas ajustadas y son representados por líneas verticales del tipo de línea apropiada (línea sólida P53, línea de trazos P51, línea de puntos P3) para el compuesto correspondiente. Figura 2 Enlace mejorado de un compuesto tetrámero que contiene Gpg de la invención (P74) a la proteína 0401 de MHC clase II comparado con el equivalente que contiene Arg (P71). Un péptido conducido publicado (P3; Falcioni et al 1999) se utiliza como un control positivo. Utilizando software estadístico estándar, se ajustaron las curvas de regresión logística no lineales para puntos de datos copiados generados de acuerdo con el Ejemplo 14. Los valores IC50 fueron estimados a partir de las curvas ajustadas y son representados por líneas verticales del tipo de línea apropiada (línea sólida P74, línea de trazos P71, línea de puntos P3) para el compuesto correspondiente. Figura 3 Enlace mejorado de un compuesto tetrámero que contiene Gpg (guanHpiperidil glicina) preferido de la invención. (P69) a la proteína 0101 de MHC clase II comparado con el equivalente que contiene Arg (P82). Utilizando software estadístico estándar, se ajustaron las curvas de regresión logística no lineales para puntos de datos copiados generados de acuerdo con el Ejemplo 14. Los valores IC50 fueron estimados a partir de las curvas ajustadas y son representados por líneas verticales del tipo de línea apropiada (línea sólida P69, línea de trazos P82) para el compuesto correspondiente. Figura 4 Enlace mejorado de un compuesto tetrámero que contiene Gpg (guanilpiperidil glicina) preferido de la invención (P74) a la proteína 0401 de MHC clase II comparado con el equivalente que contiene Arg (P71). Utilizando software estadístico estándar, se ajustaron las curvas de regresión logística no lineales para puntos de datos copiados generados de acuerdo con el Ejemplo 14. Los valores IC50 fueron estimados a partir de las curvas ajustadas y son representados por líneas verticales del tipo de línea apropiada (línea sólida P74, línea de trazos P71) para el compuesto correspondiente. Figura 5 Enlace mejorado de un compuesto tetrámero que contiene Gpg (guanilpiperidil glicina) preferido de la invención (P101) a la proteína 0401 de MHC clase II comparado con el equivalente que contiene Arg (P98). Utilizando software estadístico estándar, se ajustaron las curvas de regresión logística no lineales para puntos de datos copiados generados de acuerdo con el Ejemplo 14. Los valores IC50 fueron estimados a partir de las curvas ajustadas y son representados por líneas verticales del tipo de línea apropiada (línea sólida P101, línea de trazos P98) para el compuesto correspondiente. Figura 6 Enlace mejorado de un compuesto heptámero que contiene Gpg de la invención (P47) a la proteína de MHC clase II expresada en la superficie de las células LG2 comparado con el equivalente que contiene Arg (P43). Utilizando software estadístico estándar, se ajustaron las curvas de regresión logística no lineales para puntos de datos copiados generados de acuerdo con el Ejemplo 15. Los valores IC50 fueron estimados a partir de las curvas ajustadas y son representados por líneas verticales del tipo de línea apropiada (línea sólida P47, línea de trazos P43) para el compuesto correspondiente. Figura 7 Enlace mejorado de un compuesto tetrámero que contiene Gpg de la invención (P74) a la proteína de MHC clase II expresada en la superficie de las células Priess comparado con el equivalente que contiene Arg (P71). Utilizando software estadístico estándar, se ajustaron las curvas de regresión logística no lineales para puntos de datos copiados generados de acuerdo con el Ejemplo 15. Los valores IC50 fueron estimados a partir de las curvas ajustadas y son representados por líneas verticales del tipo de línea apropiada (línea sólida P74, línea de trazos P71) para el compuesto correspondiente. Figura 8 Estabilidad mejorada (unidades arbitrarias) de un compuestos heptámero y tetrámero que contiene Gpg de la invención en plasma de ratas después de 24 horas comparado con el equivalente que contiene Arg. Los datos para los compuestos correspondientes Gpg/Arg se muestran como barras adyacentes. Figura 9 Una curva de respuesta de dosis que demuestra propiedades inmunosupresoras mejoradas medidas por un ensayo de activación de la célula T de P53 (que contiene Gpg) un compuesto heptámero preferido de la invención, comparado con el péptido que contiene Arg (P51). Utilizando software estadístico estándar, se ajustaron las curvas de regresión logística no lineales para puntos de datos copiados generados de acuerdo con el Ejemplo 19. Los valores IC50 fueron estimados a partir de' las curvas ajustadas y son representados por líneas verticales del tipo de línea apropiada (línea sólida P53, línea de trazos P51) para el compuesto correspondiente. Figura 10 Curvas de respuesta de dosis que demuestran propiedades inmunosupresoras medidas por un ensayo de activación de la célula T de compuestos preferidos de la invención (a) P69, (b) P101, (c) P74 y (d) P53. Figura 11 Una curva de respuesta de dosis que demuestra las propiedades inmunosupresoras mejoradas medida por la secreción de IL-2 de P41-1 (que contiene Gpg) (cuadros y línea de trazos), un compuesto heptámero de la invención, comparado con el péptido que contiene Arg (P40-1)(rombos y línea sólida). Figura 12 Una curva de respuesta de dosis que demuestra las propiedades inmunosupresoras mejoradas medida por la secreción de IL-2 de P69 (que contiene Gpg/ un compuesto tetrámero preferido de la invención, comparado con el péptido que contiene Arg (P82). Utilizando software estadístico estándar, se ajustaron las curvas de regresión logística no lineales para puntos de datos copiados generados de acuerdo con el Ejemplo 20. Los valores IC50 fueron estimados a partir de las curvas ajustadas y son representados por líneas verticales del tipo de línea apropiada (línea sólida P69, línea de trazos P82) para el compuesto correspondiente. Figura 13 Las propiedades inmunosupresoras de P53 (que contiene Gpg) medidas por la secreción de IL-2 (cuadros y línea sólida), un compuesto heptámero preferido de la invención, comparado con un control de DMSO (rombos y línea de trazos). Figura 14 Propiedades inmunosupresoras ¡n vivo superiores de P69 (que contienen Gpg) un compuésto tetrámero preferido de la invención después de co-inmunización con antígeno medido por la proliferación de la célula T, comparado con el equivalente que contiene Arg (P82). Figura 15 Propiedades inmunosupresoras in vivo de compuestos tetrámero y heptámero preferidos de la invención después de la co-inmunización con antígeno medido por la proliferación de la célula T. Figura 16 Eficacia de compuestos tetrámero y heptámero preferidos de la invención (P69, P53 y P74) en el modelo de ratón CIA para artritis reumatoide comparado con solvente como control. Figura 17 Eficacia de compuestos tetrámero y heptámero preferidos de la invención (P69, P53 y P74) en el modelo de ratón EAE para la prevención de esclerosis múltiple comparado con solvente como control. Figura 18 Eficacia de compuestos tetrámero y heptámero preferidos de la invención (P69 y P53) en el modelo de ratón EAE para el tratamiento de la esclerosis múltiple comparado con solvente como control. Figura 19 Eficacia superior de un compuesto que contiene Gpc preferido de la invención (P69) comparado con el compuesto que contiene Arg equivalente (P82) en el modelo de ratón EAE de esclerosis múltiple. Descripción Detallada de la Invención /. Introducción La presente invención se relaciona con compuestos, tales como compuestos peptidomiméticos, que pueden utilizarse para suprimir una actividad inmune indeseada, por ejemplo, al inhibir la activación de la célula T mediada por MHC clase II, tal como en el tratamiento o prevención de trastornos autoinmunes. En ciertas modalidades, estos compuestos se caracterizan al enlazar a moléculas clase II, su capacidad para prevenir el enlace de antígenos idénticos o para desplazar antígenos idénticos ya unidos a las moléculas clase II y/o su capacidad para inhibir la activación de la célula T al modular una respuesta inmune restringida de MHC clase II por un modo alternado de acción. En tales modalidades, los compuestos de la invención pueden ser "inhibidores", "agentes inhibidores", "inhibidores objeto", "peptidomiméticos" (incluyendo los compuestos "heptámero" y "tetrámero"), "compuestos de la invención" o "inhibidores de la invención" calificados. En ciertas modalidades, las moléculas clase II preferidas son isotipos DR. En modalidades preferidas, un inhibidor es una molécula pequeña, por ejemplo, un compuesto que tiene un peso molecular de menos de 2000 amu, de preferencia menos de 1000 amu, aún de mayor preferencia menos de 700 amu. Los compuestos de la invención que inhiben la actividad de MHC clase II tienen valores terapéuticos en la prevención o tratamiento de varias enfermedades o trastornos relacionadas con la MHC clase II. Los compuestos de la invención pueden administrarse a un paciente para tratamiento de un trastorno inmune, por ejemplo, que implica actividad inmune inapropiada o indeseable, o puede utilizarse para preparar un medicamento terapéutico. En particular, una dosis efectiva de un inhibidor de la invención puede aplicarse terapéuticamente para mejorar o para prevenir la diabetes dependiente de insulina, esclerosis múltiple, artritis reumatoide, etc. Una dosis efectiva de un compuesto de la invención para el tratamiento de una enfermedad que implica una actividad de MHC indeseable o inapropiada, tal como un trastorno autoinmune, puede determinarse por medios estándar conocidos en la técnica tomando en cuenta Jos estudios de seguridad habituales, estudios de toxicidad, estudios de concentración de dosis y método de suministro, por ejemplo, bolo, continuo o repetido. En una modalidad particular, puede administrarse una dosis de aproximadamente 0.01 a aproximadamente 500 mg/kg. //. Definiciones Como se utiliza en la presente, el término "actividad de MHC" se refiere a la capacidad de una molécula de MHC para estimular una respuesta inmune, por ejemplo, activando las células T. Un inhibidor de actividad de MHC es capaz de suprimir esta actividad, y de esta forma inhibe la activación de células T por MHC. En modalidades preferidas, un inhibidor objeto inhibe selectivamente la activación por un isotipo o alotipo de MHC clase II particular. Tales inhibidores pueden ser capaces de suprimir una actividad de MHC indeseable particular sin interferir con toda la actividad de MHC en un organismo, tratando selectivamente de ese modo una respuesta inmune indeseable en un animal, tal como un mamífero, de preferencia un ser humano, sin comprometer la respuesta inmune del animal en general. Tal respuesta inmune indeseable puede ser una asociada con una enfermedad particular tal como artritis reumatoide o esclerosis múltiple. El término "prodroga o profármaco" está destinado para abarcar los compuestos que, bajo condiciones fisiológicas, se convierten en los agentes inhibidores de la presente invención. Un método común para hacer una prodroga es seleccionar partes que sean hidrolizadas bajo condiciones fisiológicas para proporcionar la droga biológicamente activa deseada. En otras modalidades, la prodroga se convierte por una actividad enzimática del paciente o alternativamente un patógeno objetivo. "Tratar", como se utiliza en la presente significa al menos disminuir la severidad o mejorar los efectos de, por ejemplo, uno o más síntomas, de un trastorno o condición. "Hidrofóbico", como se utiliza en la presente cuando pertenece a una especie molecular, significa que en un experimento de partición, la mayoría de las moléculas de la especie molecular bajo investigación se retiene en el orgánico más bien que en la capa acuosa. De preferencia, más de aproximadamente 55%, 75%, 85%, o arriba de aproximadamente 95% de la molécula es retenida en la capa orgánica. Los solventes orgánicos adecuados para tal experimento de partición será conocido para un experto en la técnica pero incluye, sin limitación, octanol, dietiléter, diclorometano y cloroformo. Cuando pertenecen a un grupo o residuo funcional, hidrofóbico se refiere a la propiedad del grupo o residuo funcional para aumentar la hidrofobicidad de una especie molecular cuando se agrega a ésta estructural mente. "Prevenir", como se utiliza en la presente, significa retardar o evitar el comienzo de, por ejemplo, uno o más síntomas de un trastorno o condición. El término "IC50" significa la concentración de una droga que inhibe una actividad o propiedad por el 50%, por ejemplo, al reducir la frecuencia de una condición, tal como muerte celular, por el 50%, al reducir el enlace de un péptido competidor a la proteína MHC II por el 50% o al reducir el nivel de una actividad, tal como proliferación de la célula T o secreción de IL2, por el 50%. El término "ED50" significa la dosis de una droga que produce 50% del máximo de una respuesta o efecto dado. Alternativamente, puede referirse a la dosis que produce una respuesta predeterminada en 50% de sujetos o preparaciones de prueba. El término "LD50" significa la dosis de una droga que es mortal en 50% de sujetos de prueba. El término "índice terapéutico" se refiere al índice terapéutico de una droga definida como LD50/ED5o. El término "paciente" se refiere a un animal, de preferencia a un mamífero, incluyendo seres humanos así como ganado y otros sujetos de veterinaria. El término "actividad relacionada con la estructura" o "SAR" se refiere a la forma en la cual alterando la estructura molecular de drogas altera su interacción con un receptor, enzima, etc. "Molécula pequeña" se refiere a una molécula que tiene un peso molecular de menos de aproximadamente 2000 amu, o menos de aproximadamente 1000 amu, y aún menos de aproximadamente 700 amu. El término "alifático" se refiere a un alcano, alqueno o alquino lineal, ramificado o cíclico. En ciertas modalidades, grupos alifáticos en la presente invención son lineales o ramificados y tienen de 1 a aproximadamente 20 átomos de carbono. El término "alquilo" se refiere al radical de un grupo alifático saturado, incluyendo grupos alquilo de cadena lineal, grupo alquilo de cadena ramificada, grupos cicloalquilo (alicíclicos), grupos cicloalquilo sustituidos con alquilo, y grupos alquilo sustituidos con cicloalquilo. En ciertas modalidades, un alquilo de cadena lineal o de cadena ramificada tiene aproximadamente 30 o menos átomos de carbono en su estructura (por ejemplo, C†-C30 para cadena lineal, C3-C30 para cadena ramificada), y de manera alternativa, aproximadamente 20 o menos. Del mismo modo, los cicloalquilos tienen de aproximadamente 3 a aproximadamente 10 átomos de carbono en su estructura de anillo, y de manera alternativa aproximadamente 5, 6 ó 7 carbonos en la estructura de anillo. Además, el término "alquilo" (o "alquilo inferior") incluye tanto los "alquilos insustituidos" como los "alquilos sustituidos", el último del cual se refiere a porciones de alquilo que tienen sustituyentes que reemplazan un hidrógeno o uno o más carbonos de la estructura de hidrocarburo. Tales sustituyentes pueden incluir, por ejemplo, un halógeno, un hidroxilo, un carbonilo (tal como un carboxilo, un alcoxicarbonilo, un formilo, o un acilo), un tiocarbonilo (tal como un tioéster, un tioacetato, o un tioformato), un alcoxilo, un fosforilo, un fosfonato, un fosfinato, un amino, un amido, una amidina, una ¡mina, un ciano, un nitro, un azido, un sulfidrilo, un alquiltio, un sulfato, un sulfonato, un sulfamilo, un sulfonamido, un sulfonilo, un heterociclilo, un aralquilo, o una porción aromática o heteroaromática. Será entendido por aquellos expertos en la técnica que las porciones sustituidas en la cadena de hidrocarburo pueden ellas mismas sustituirse, si es apropiado. Por ejemplo, los sustituyentes de un alquilo sustituido puede incluir formas sustituidas o insustituidas de grupos amino, azido, ¡mino, amido, fosforilo (incluyendo fosfonato y fosfinato), sulfonilo (incluyendo sulfato, sulfonamido, sulfamoilo y sulfonato), y sililo, así como éteres, alquiltios, carbonilos (incluyendo cetonas, aldehidos, carboxilatos y ésteres), -CF3, -CN y similares. Se describen más adelante alquilos sustituidos ejemplares. Los cicloalquilos pueden ser además sustituidos con alquilos, alquenilos, alcoxilos, alquiltios, aminoalquilos, alquilos sustituidos con carbonilo, -CF3, -CN, y similares. "alquilo de Ci" es una cadena alquilo que tiene i átomos en el miembro. Por ejemplo, alquilos de C4 contiene cuatro átomos en el miembro. Alquilos de C4 que contienen enlaces pueden ser saturados o insaturados con uno o dos dobles enlaces (cis o trans) o un triple enlace. Los alquilos de C4 son saturados. El alquilo de C4 insaturado preferido tiene un doble enlace. El alquilo de C4 puede ser insüstituido o sustituido con uno o dos sustituyentes. Los sustituyentes preferidos incluyen alquilo inferior, heteroalquilo inferior, ciano, halo, y haloalquilo. "Heteroalquilo" es una cadena saturada o insaturada de átomos de carbono y al menos un heteroátomo, en donde ninguno de dos heteroátomos están adyacentes. Las cadenas de heteroalquilo contienen de 1 a 18 átomos en el miembro (carbono y heteroátomos) en la cadena, de preferencia 1 a 12, de más preferencia 1 a 6, todavía de mayor preferencia 1 a 4. Las cadenas de heteroalquilo pueden ser lineales o ramificadas. El heteroalquilo ramificado preferido tiene una o dos ramificaciones, de preferencia una ramificación. Los heteroalquilos preferidos son saturados. El heteroalquilo insaturado tiene uno o más dobles enlaces y/o uno o más triples enlaces. El heteroalquilo insaturado preferido tiene uno o dos dobles enlaces o un triple enlace, de mayor preferencia un doble enlace. Las cadenas de heteroalquilo pueden ser insustituidas o sustituidas con 1 a aproximadamente 4 sustituyentes a menos que se especifique de otra manera. Los heteroalquilo preferidos son insustituidos. Los sustituyentes de heteroalquilo preferidos incluyen halo, arilo (por ejemplo, fenilo, tolilo, alcoxifenilo, alcoxicarbonilfenilo, halofenilo), heterociclilo, heteroarilo. Por ejemplo, cadenas de alquilo sustituidas con los siguientes sustituyentes son heteroalquilo: alcoxi (por ejemplo, metoxi, etoxi, butoxi, pentoxi), ariloxi (por ejemplo, fenoxi, clorofenoxi, toliloxi, metoxifenoxi, benciloxi, alcoxicarbonilfenoxi, aciloxifenoxi), aciloxi (por ejemplo, propioniloxi, benciloxi, acetoxi), carbamoiloxi, carboxi, mercapto, alquiltio, aciltio, ariltio (por ejemplo, feniltio, clorofeniltio, alquilfeniltio, alcoxifeniltio, benciltio, alcoxicarbonilfeniltio), amino (por ejemplo, mono- y di-alquilamino de C1-C3, metilfenilamino, metilbencilamino, alquilamido de C1-C3, carbamamido, ureido, guanidino). "Heteroalquilo de Mi" es una cadena de heteroalquilo que tiene i átomos en el miembro. Por ejemplo, M4 heteroalquilos contienen uno o dos átomos en el miembro heteroátomo no adyacente. M4 heteroalquilos que contienen 1 átomo en el miembro heteroátomo puede ser saturado o insaturado con un doble enlace (cis o trans) o un triple enlace. El heteroalquilo M4 preferido que contiene 2 átomos en el miembro heteroátomo son saturados. El heteroalquilo M4 insaturado preferido tiene un doble enlace. El heteroalquilo M4 puede ser insustituido o sustituido con uno o dos sustituyéntes. Los sustituyentes preferidos incluyen alquilo inferior, heteroalquilo inferior, ciano, halo, y haloalquilo. El término "aralquilo" se refiere a un grupo alquilo sustituido con un grupo arilo (por ejemplo, un grupo aromático o heteroaromático). Los términos "alquenilo" y "alquinilo" se refiere a grupos alifáticos insaturados análogos en longitud y posible sustitución a los alquilos descritos anteriormente, pero que contienen al menos un doble o triple enlace, respectivamente. A menos que se especifique de otra manera el número de carbonos, "alquilo inferior" se refiere a un grupo alquilo, como se definió anteriormente, pero que tiene de uno a diez carbonos, alternativamente de uno a aproximadamente seis átomos de carbono en su estructura principal. Del mismo modo, "alquenilo inferior" y "alquinilo inferior" tienen longitudes de cadena similares. El término "heteroátomo" se refiere a un átomo de cualquier elemento distinto del carbono o hidrógeno. Heteroátomos ilustrativos incluyen boro, nitrógeno, oxígeno, fósforos, azufre y selenio, y alternativamente oxígeno, nitrógeno o azufre. El término "aminoácido" se refiere a un compuesto orgánico que lleva tanto un grupo ácido carboxílico como un grupo amino, de preferencia unido al mismo átomo de carbono o a átomos de carbono adyacentes, de mayor preferencia al mismo átomo de carbono. Aminoácidos ejemplares son aquellos encontrados en la naturaleza, tales como aminoácidos que son utilizados para sintetizar proteínas en células, aunque aminoácidos no naturales, tales como aquellos utilizados en la Ejemplificacion o conocidos de otra manera en la técnica también están contemplados. Un "residuo aminoácido" se refiere a un derivado de un aminoácido en donde cualquiera o ambos de los grupos amino y ácido carboxílico han sido unidos a otra porción, por ejemplo, para formar una amida, tioamida, sulfonamida, etc. El término "análogo aminoácido" incluye moléculas como aminoácidos, o residuos de los mismos, en donde el carbonilo del grupo ácido carboxílico es reemplazado con otra porción electrofílica, tal como un grupo tiocarbonilo o sulfonilo. El término también incluye análogos de dipéptidos, tales como las porciones [ß????ß?)!.] y [8?(??t^)?_] discutidas más adelante, así como análogos de dipéptidos en donde el enlace de amida interno es reemplazado por un alqueno. Otros análogos de aminoácido adecuados para uso en la presente invención son bien conocidos para aquellos expertos en la técnica. Los compuestos, tales como inhibidores de la invención, que comprenden uno o más análogos de aminoácidos son con frecuencia compuestos "peptidomiméticos" o "miméticos" calificados. El término "arilo" incluye grupos aromáticos en anillo simple de 5, 6 y 7 miembros que pueden incluir de cero a cuatro heteroátomos, por ejemplo, benceno, pirrol, furano, tiofeno, imidazol, oxazol, tiazol, triazol, pirazol, piridina, pirazina, piridazina y pirimidina, y similares. Aquellos grupos arilo que tienen heteroátomos en la estructura del anillo pueden también referirse como "arilheterociclos" o "heteroaromáticos". El anillo aromático puede ser sustituido a uno o más posiciones en el anillo con tales sustituyentes como se describe anteriormente, por ejemplo, halógeno, azida, alquilo, aralquilo, alquenilo, alquinilo, cicloalquilo, hidroxilo, alcoxilp, amino, nitro, sulf id rilo , imino, amido, fosfonato, fosfinato, carbonilo, carboxilo, sililo, éter, alquiltio, sulfonilo, sulfonamido, cetona, aldehido, éster, heterociclilo, porciones aromáticas o heteroaromáticas, -CF3, -CN, o similares. El término "arilo" también incluye sistemas de anillo policíclico que tienen dos o más anillos cíclicos en donde dos o más carbones son comunes a dos anillos adyacentes (los anillos son "anillos fusionados") en donde al menos uno de los anillos es aromático, por ejemplo, los otros anillos cíclicos pueden ser cicloalquilos, cicloalquenilos, cicloalquinilos, arilos y/o heterociclilos. Los términos orto, meta y para aplicados a 1,2-, 1,3- y 1,4 bencenos disustituidos, respectivamente. Por ejemplo, los nombres 1 ,2-dimetilbenceno y o rto-dimetil benceno son sinónimos. Los términos "heterociclilo" o "grupo heterocíclico" se refieren a estructuras en el anillo de 3 a aproximadamente 10 miembros, alternativamente anillo de 3 a aproximadamente 7 miembros, cuyas estructuras en el anillo incluyen uno a cuatro heteroátomos. Los heterociclos pueden también ser policiclos. Los grupos heterociclilo incluyen, por ejemplo, tiofeno, tiantreno, furano, pirano, isobenzofurano, cromeno, xanteno, fenoxatiina, pirrol, imidazol, pirazol, isotiazol, isoxazol, piridina, pirazina, pirimidina, piridazina, indolizina, isoindol, indol, indazol, purina, quinolizina, isoquinolina, quinolina, ftalazina, naftiridina, quinoxalina, quinazolina, cinolina, pteridina, carbazol, carbolina, fenantridina, acridina, pirimidina, fenantrolina, fenazina, fenarsazina, fenotiazina, furazan, fenoxazina, pirrolidina, oxolano, tiolano, oxazol, piperidina, piperazina, morfolina, lactonas, lactamas como azetidinonas y pirrolidinonas, sultamas, sultones, y similares. El anillo heterocíclico puede ser sustituido en una o más posiciones con tales sustituyentes como se describe anteriormente, como por ejemplo, halógeno, alquilo, aralquilo, alquenilo, alquinilo, cicloalquilo, hidroxilo, amino, nitro, sulfidrilo, ¡mino, amido, fosfonato, fosfinato, carbonilo, carboxilo, sililo, éter, alquiltio, sulfonilo, cetona, aldehido, éster, un heterociclilo, una porción aromática o heteroaromática, -CF3, -CN, o similares. Los términos " p o I i ci el i I o " o "grupo policíclico" se refieren a dos o más anillos (por ejemplo, cicloalquilos, cicloalquenilos, cicloalquinilos, arilos y/o heterociclilos) en donde dos o más carbonos son comunes a dos anillos adyacentes, por ejemplo, los anillos son "anillos fusionados". Los anillos que están unidos a través de átomos no adyacentes son anillo "ponteados" calificados. Cada uno de los anillos del policiclo puede ser sustituido con tales sustituyentes como se describe anteriormente, como por ejemplo, halógeno, alquilo, aralquilo, alquenilo, alquinilo, cicloalquilo, hidroxilo, amino, nitro, sulfidrilo, imino, amido, fosfonato, fosfinato, carbonilo, carboxilo, sililo, éter, alquiltio, sulfonilo, cetona, aldehido, éster, un heterociclilo, una porción aromática o heteroaromática, -CF3, -CN, o similares. El término "carbociclo" se refiere a un anillo aromático o no aromático en donde cada átomo del anillo es carbono.

El término "nitro" significa -N02; el término "halógeno" designa -F, -Cl, -Br o -I; el término "sulfidrilo" significa -SH; el término "hidroxilo" significa -OH; y el término "sulfonilo" significa -S02". Los términos "amina" y "amino" son reconocidos en la técnica y se refieren a tanto las aminas insustituidas como las sustituidas, por ejemplo, una porción que puede estar presentada por las fórmulas generales: en donde R50) R51 y R52 cada uno representa independientemente un hidrógeno, un alquilo, un alquenilo, -(CH2)m-R6i , o R5o y R51. tomados junto con el átomo de N al cual están unidos completan un heterociclo que tiene de 4 a 8 átomos en la estructura del anillo; R6i representa un arilo, un cicloalquilo, un cicloalquenilo, un heterociclo o un policiclo; y m es cero o un número entero en el intervalo de 1 a 8. En ciertas modalidades, sólo uno de R50 o R5 puede ser un carbonilo, por ejemplo, R50, R51 y el nitrógeno juntos no forman una imida. En otras modalidades, R50 y R51 (y opcionalmente R52) cada uno representa independientemente un hidrógeno, un alquilo, un alquenilo, o -(CH2)m-R6i ¦ De esta forma, el término "alquilamina" incluye un grupo amina, como se define anteriormente, que tiene un alquilo sustituido o no sustituido unido al mismo, es decir, al menos uno de R50 y R51 es un grupo alquilo. El término "acilamino" es reconocido en la técnica y se refiere a una porción que puede estar representada por la fórmula general en donde R5o es como se define anteriormente, y R5 representa un hidrógeno, un alquilo, un alquenilo o -(CH2)m-R6i, en donde m y R6i son como se definen anteriormente. El término "amido" es reconocido en la técnica como un carbonilo sustituido con amino e incluye una porción que puede estar representada por la fórmula general: en donde R50 y R51 son como se definen anteriormente. Ciertas modalidades de la amida en la presente invención no incluirán imidas que pueden ser inestables.

El término "alquiltio" se refiere a un grupo alquilo, como se define anteriormente, que tiene un radical de azufre unido al mismo. En ciertas modalidades, la porción "alquiltio" está representada por uno de -S-alquilo, -S-alquenilo, -S-alquinilo, y -S-(CH2)m-R6i , en donde m y R6i son como se definen anteriormente. Grupos alquiltio representativos incluyen metiltio, etiltio y similares. El término "carbonilo" es reconocido en la técnica e incluye tales porciones como pueden estar representadas por las fórmulas generales: en donde X50 es un enlace o representa un óxido o un azufre, y R55 representa un hidrógeno, un alquilo, un alquenilo, -(CH2)m-R6i o una sal farmacéuticamente aceptable, R56 representa un hidrógeno, un alquilo, un alquenilo o -(CH2)m-R.61 , en donde m y R6i son definidos anteriormente. Donde X50 es un óxido y R55 o R56 no es hidrógeno, la fórmula representa un "éster". Donde X50 es un oxígeno, y R56 es como se define anteriormente, la porción se refiere en la presente como un grupo carboxilo, y particularmente cuando R56 es un hidrógeno, la fórmula representa un "ácido carboxílico". Donde X50 es un oxígeno, y R55 es hidrógeno, la fórmula representa un "formato". En general, donde el átomo de oxígeno de la fórmula anterior es reemplazado por azufre, la fórmula representa un grupo "tiocarbonilo". Donde X50 es un azufre y R55 o R56 no es hidrógeno, la fórmula representa un "tioéster". Donde X5o es un azufre y R56 es hidrógeno, la fórmula representa un "ácido tiocarboxílico". Donde X 50 es un azufre y R55 es hidrógeno, la fórmula representa un "tioformato". Por otro lado, donde X50 es un enlace, y R55 no es hidrógeno, la fórmula anterior representa un grupo "cetona". Donde X5o es un enlace, y R55 es hidrógeno, la fórmula anterior representa un grupo "aldehido". Los términos "alcoxilo" o "alcoxi" se refieren a un grupo alquilo, como se define anteriormente, que tienen un radical de oxígeno unido al mismo. Grupos alcoxilo representativos incluyen metoxi, etoxi, propiloxi, ter-butoxi y similares. Un "éter" es dos hidrocarburos covalentemente unidos por un oxígeno. Por consiguiente, el sustituyente de un alquilo que representa aquel alquilo un éter es o asemeja un alcoxilo, tal como puede estar representado por uno de -O-alquilo, -O-alquenilo, -0-(CH2)m-R6i , donde m y R6i se describen anteriormente. El término "sulfonato" es reconocido en la técnica e incluye una porción que puede estar representada por la fórmula general: en donde R57 es un par de electrones, hidrógeno, alquilo, cicloalquilo o arilo. El término "sulfato" es reconocido en la técnica e incluye una porción que puede estar representada por la fórmula general: en donde R57 es como se define anteriormente. El término "sulfonamido" es reconocido en la técnica e incluye una porción que puede estar representada por la fórmula general: en donde R50 y R56 son como se definen anteriormente. El término "sulfamoilo" es reconocido en la técnica e incluye una porción que puede estar representada por la fórmula general : en donde R50 y R51 son como se definen anteriormente. El término "sulfonilo" se refiere a una porción que puede estar representada por la fórmula general: en donde R58 es uno de los siguientes: hidrógeno, alquilo, alquenilo, alquinilo, cicloalquilo, heterociclilo, arilo o heteroarilo. El término "sulfóxido" se refiere a una porción que puede estar representada por la fórmula general: en donde R58 es como se define anteriormente. Pueden hacerse sustituciones análogas a grupos alquenilo y alquinilo para producir, por ejemplo, aminoalquenilos, aminoalquinilos, amidoalquenilos, amidoalquinilos, iminoalquenilos, iminoalquinilos, tioalquenilos, tioalquinilos, alquenilos o alquinilos sustituidos con carbonilo. La definición de cada expresión, por ejemplo, alquilo, m, n, p, etc., cuando ocurren más de una vez en cualquier estructura, se destinan para ser independientes de su definición en otra parte en la misma estructura. Un "selenoalquilo" se refiere a un grupo alquilo que tiene un grupo seleno sustituido unido al mismo. "Selenoéteres" ejemplares que pueden estar sustituidos en el alquilo se seleccionan de uno de -Se-alquilo, -Se-alquenilo, -Se-alquinilo, y -Se-(CH2) m-R6i> TI y R 61 están definidos anteriormente. Los términos triflilo, tosilo, mesilo y nonaflilo son reconocidos en la técnica y se refieren a los grupos trifluorometansulfonilo, p-toluensulfonilo, metansulfonilo y nonafluorobutansulfonilo, respectivamente. Los términos triflato, tosilato, mesilato, y nonaflato son reconocidos en la técnica y se refieren a grupos funcionales de éster de trifluorometansulfonato, éster de p-toluensulfonato, éster de metansulfonato y éster de nonafluorobutansulfonato y moléculas que contienen los grupos, respectivamente. Las abreviaciones Me, Et, Ph, Tf, Nf, Ts y Ms representan metilo, etilo, fenilo, trifluorometansulfonilo, nonafluorobutansulfonilo, p-toluensulfonilo y metansulfonilo, respectivamente. Una lista más comprehensiva de las abreviaciones utilizadas por químicos orgánicos de habilidad ordinaria en la técnica aparece en la primera emisión de cada volumen de la Journal of Organic Chemistry; esta lista está presentada típicamente en una tabla intitulada Lista Estándar de Abreviaciones. Ciertas subunidades monoméricas de la presente invención pueden existir en formas particulares geométricas o estereoisoméricas. Además, los oligómeros de la presente invención pueden también ser ópticamente activos. La presente invención contempla todos los compuestos, incluyendo los cis- y trans-isómeros, R- y S-enantiómeros, diastereómeros, (D)-isómeros, (L)-isómeros, las mezclas racémicas de los mismos, y otras mezclas de los mismos, a medida que caen dentro del alcance de la invención. Pueden estar presentes átomos de carbono asimétricos adicionales en un sustituyente tal como un grupo alquilo. Todos los isómeros, así como mezclas de los mismos, están destinados para ser incluidos en esta invención. Si, por ejemplo, un enantiómero particular de un compuesto de la presente invención se desea, puede prepararse por síntesis asimétrica, o por derivación con un auxiliar quiral, donde la mezcla diastereomérica resultante es separada y el grupo auxiliar disociado para proporcionar los enantiómeros deseados puros. Alternativamente, donde la molécula contiene un grupo funcional básico, tal como amino, o un grupo funcional ácido, tal como carboxilo, se forman sales diastereoméricas con un ácido o base apropiados ópticamente activos, seguido por resolución de los diastereómeros formados de esta forma por medios de cristalización fraccional o cromatográf icos bien conocidos en la técnica, y recuperación posterior de los enantiómeros puros. Se entenderá que la "substitución" o "substituido con" incluye la condición implícita de que tal sustitución está de acuerdo con la valencia permitida del átomo sustituido y el sustituyente, y que la substitución resulta en un compuesto estable, por ejemplo, que no sufre transformación espontáneamente tal como por redisposición, ciclización, eliminación u otra reacción. El término "sustituido" también se contempla para incluir todos los sustituyentes permisibles de compuestos orgánicos. En un amplio aspecto, los sustituyentes permisibles incluyen sustituyentes acíclicos y cíclicos, ramificados y no ramificados, carbocíclicos y heterocíclicos, aromáticos y no aromáticos de compuestos orgánicos. Los sustituyentes ilustrativos incluyen, por ejemplo, aquellos descritos en la presente anteriormente. Los sustituyentes permisibles pueden ser uno o más y los mismos o diferentes para compuestos orgánicos apropiados. Para propósitos de esta invención, los heteroátomos tales como nitrógeno pueden tener sustituyentes de hidrógeno y/o . cualquiera de los sustituyentes permisibles de compuestos orgánicos descritos en la presente que satisfacen las valencias de los heteroátomos. Esta invención no está destinada para ser limitada en cualquier forma por los sustituyentes permisibles de compuestos orgánicos. Para propósitos de esta invención, los elementos químicos son identificados de acuerdo con la Tabla Periódica de los Elementos, versión CAS, Handbook of Chemistry and Physics, 67th Ed., 1986-87, cubierta interior. También para propósitos de esta invención, el término "hidrocarburo" es contemplado para incluir todos los compuestos permisibles que tengan al menos un hidrógeno y un átomo de carbono. En un aspecto amplio, los hidrocarburos permisibles incluyen compuestos orgánicos acíclicos y cíclicos, ramificados y no ramificados, carbocíclicos y heterocíclicos, aromáticos y no aromáticos que pueden estar sustituidos o no sustituidos. La frase "grupo protector" incluye sustituyentes temporales que protegen un grupo funcional potencialmente reactivo a partir de transformaciones químicas indeseadas. Ejemplos de tales grupos protectores incluyen ésteres de ácidos carboxílicos, sililéteres de alcoholes, y acétales y cetales de aldehidos y cetonas, respectivamente. El campo de la química del grupo protector ha sido revisado. Greene et al., Protective Groups in Orqanic Svnthesis 2nd ed., Wiley, New York, (1991). El término "grupo que separa los electrones" es reconocido en la técnica, y significa la tendencia de un sustituyente para atraer los electrones de valencia de los átomos cercanos, es decir, el sustituyente es electronegativo con respecto a los átomos cercanos. Una cuantificación del nivel de capacidad que separa los electrones se da en muchas referencias, por ejemplo, March, Advanced Orqanic Chemistry 251-59, McGraw Hill Book Company, New York, (1977). Los valores constantes de Hammett son generalmente negativos para los grupos que donan electrones (s(?) = - 0.66 para NH2) y positivos para los grupos que separan electrones (s(?) = 0.78 para un grupo nitro), (s(?) que indican para-sustitución. Grupos que separan electrones ejemplares incluyen nitro, acilo, formilo, sulfonilo, trif luorometilo, ciano, cloruro y similares. Grupos que donan electrones ejemplares incluyen amino, metoxi y similares. Equivalentes contemplados de los oligómeros, subunidades y otras composiciones descritas anteriormente incluyen tales materiales que corresponden de otra manera a los mismos, y que tienen las mismas propiedades generales de los mismos (por ejemplo, biocompatible, antineoplásico), en donde se hacen una o más variaciones simples de sustituyentes que no afectan adversamente la eficacia de tal molécula para lograr su propósito destinado. En general, los compuestos de la presente invención pueden prepararse por los métodos ilustrados en los esquemas de reacción generales como, por ejemplo, descritos más adelante, o por modificaciones de los mismos, utilizando materiales de partida fácilmente disponibles, reactivos y procedimientos de síntesis convencional. En estas reacciones, también es posible hacer uso de variantes que son en sí mismos conocidos, pero no se mencionan aquí. ///; Compuestos de la Presente Invención La presente invención proporciona compuestos peptidomiméticos que pueden suprimir una respuesta inmune, por ejemplo, al inhibir la activación de las células T mediadas con MHC clase II. Por ejemplo, peptidomiméticos adecuados incluyen compuestos que tienen la estructura de Fórmula I: Fórmula I en donde, se permite como valencia y estabilidad, A está ausente o representa una secuencia desde uno a cuatro aminoácidos o residuos análogos de aminoácidos, de preferencia está ausente; B representa una secuencia desde dos a ocho aminoácidos o residuos análogos de aminoácidos, de preferencia de dos a seis aminoácidos o residuos análogos de aminoácidos; X está ausente o representa O, S o NR; W representa un grupo terminante, tal como OR7 o NR8R9; V, independientemente para cada caso, representa C = 0, C = S, o SOz; R, independientemente para cada caso, representa H o alquilo inferior, de preferencia H; R-, representa una porción alquilo, heteroalquilo, alquenilo, alquinilo, arilo, aralquilo, heteroarilo, heteroaralquilo, cicloalquilo, cicloalquilalquilo, heterociclilo, o heterociclilalquilo sustituida o no sustituida, de preferencia una porción hidrofóbica, de mayor preferencia comprende de 1 a 8 átomos de carbono; R2 representa una porción alquilo, heteroalquilo, alquenilo, alquinilo, arilo, aralquilo, heteroarilo, heteroaralquilo, cicloalquilo, cicloalquilalquilo, heterociclilo, o heterociclilalquilo sustituida o no sustituida, de preferencia una porción hidrofóbica, o R2 y R, tomados juntos, forman un anillo que tiene de 5 a 7 miembros, opcionalmente está sustituidos con 1 a 5 sustituyentes y/o está formando una estructura policíclica con uno o más anillos distintos, tales como anillos arilo, heterociclilo o carbociclilo, por ejemplo biciclo fusionado; representa una porción alquilo, heteroalquilo, alquenilo, alquinilo, arilo, aralquilo, heteroarilo, heteroaral uilo, cicloalquilo, cicloalquilalquilo, heterociclilo, o heterociclilalquilo sustituida o no sustituida, de preferencia incluyendo un átomo de nitrógeno básico (por ejemplo que está protonado bajo condiciones fisiológicas y/o su ácido conjugado tiene un pKa en solución acuosa entre 6 y 12, de preferencia entre 7 y 10); y R8 y Rs representan independientemente sustituyentes seleccionados de H y alquilo, heteroalquilo, arilo, aralquilo, heteroaralquilo, heteroarilo, cicloalquilo, cicloalquilalquilo, heterociclilo, y heterociclilalquilo sustituidos o no sustituidos, o donde R8 y Rg, tomados juntos, forman un anillo que tiene de 5 a 7 miembros, opcionalmente está sustituido con 1 a 5 sustituyentes y/o está formado de una estructura policíclica con uno o más anillo distintos, tales como anillos arilo, heterociclilo, o carbociclilo. La presente invención proporciona compuestos peptidomiméticos que pueden suprimir una respuesta inmune, por ejemplo, al inhibir la activación de las células T mediadas con MHC clase II. Por ejemplo, peptidomiméticos adecuados incluyen compuestos que tienen una estructura de Fórmula II: Fórmula II en donde, permite como valencia y estabilidad, A está ausente o representa una secuencia desde uno a cuatro aminoácidos o residuos análogos de aminoácidos, de preferencia está ausente; B representa una secuencia desde dos a ocho aminoácidos o residuos análogos de aminoácidos, de preferencia de dos a seis aminoácidos o residuos análogos de aminoácidos; X está ausente o representa O, S o NR; W representa OR7 o NR8R9; V, independientemente para cada caso, representa C = 0, C = S, o so2; R, independientemente para cada caso, representa H o alquilo inferior, de preferencia H; representa una porción alquilo, heteroalquilo, alquenilo, alquinilo, arilo, aralquilo, heteroarilo, heteroaralquilo, cicloalquilo, cicloalquilalquilo, heterociclilo, o heterociclilalquilo sustituida o no sustituida, de preferencia una porción hidrofóbica, de mayor preferencia comprende de 1 a 8 átomos de carbono; R2 representa una porción alquilo, heteroalquilo, alquenilo, alquinilo, arilo, aralquilo, heteroarilo, heteroaralquilo, cicloalquilo, cicloalquilalquilo, heterociclilo, o heterociclilalquilo sustituida o no sustituida, de preferencia una porción hidrofóbica, o R2 y R, tomados juntos, forman un anillo que tiene de 5 a 7 miembros, opcionalmente está sustituidos con 1 a 5 sustituyentes y/o está formando una estructura policíclica con uno o más anillos distintos, tales como anillos arilo, heterociclilo o carbociclilo, por ejemplo biciclo fusionado; i representa un número entero de 0-1, de preferencia 0; j representa un número entero de 1-2, de preferencia 1; k representa un número entero de 1-3, de preferencia 2; R6 está ausente o representa de 1-4 sustituyentes en el anillo que contiene nitrógeno al cual está unido, seleccionado de alquilo inferior sustituido o no sustituido, haloalquilo, halógeno, hidroxilo, y a mino; y R7, R8 y R9 representan independientemente sustituyentes seleccionados de H y alquilo, heteroalquilo, arilo, aralquilo, heteroaralquilo, heteroarilo, cicloalquilo, cicloalquilalquilo, heterociclilo, y heterociclilalquilo sustituidos o no sustituidos, o donde Re y R9, tomados juntos, forman un anillo que tiene de 5 a 7 miembros, opcionalmente está sustituido con 1 a 5 sustituyentes y/o está formado de una estructura policíclica con uno o más anillo distintos, tales como anillos arilo, heterociclilo, o carbociclilo. En ciertas modalidades de Fórmula I, R3 representa una cadena lateral de arginina o lisina o una cadena lateral que tiene la estructura de en donde i, j, k, y R6 se definen cómo se describe para la Fórmula II. En ciertas modalidades de Fórmula I, R3 incluye una porción de guanidina o guanidinio, por ejemplo, incluidas en o unidas a un anillo o incluidas en o en los términos de una cadena. En ciertas modalidades de Fórmula I, R3 representa un grupo cicloalquilo, alquilo o aminoalquilo, tal como una cadena lateral de alo-isoleucina, ciclohexilglicina, citrulina, Usina u ornitina, incluyendo N-metilo y N,N-dimetilo variantes de lisina, citrulina y ornitina. En ciertas modalidades de Fórmula I, B representa dos aminoácidos o residuos análogos de aminoácidos y W incluye un grupo terminante como se describe en mayor detalle más adelante. De preferencia, el aminoácido o residuos análogos están unidos a través de enlaces de amida secundaria (es decir, en donde los nitrógenos llevan un sustituyente de hidrógeno). En ciertas modalidades de Fórmula II, R6 está ausente, y en otras modalidades, R6 incluye un sustituyente alquilo i nferior. En ciertas modalidades de Fórmulas I y II, R2 representa cicloalquilo, cicloalquilalquilo, arilo, aralquilo sustituido o no sustituido. En ciertas modalidades de Fórmulas I y II, el primer residuo de B (el aminoácido o residuo análogo unido a V) tiene una cadena lateral que es H o, de preferencia, un alquilo de C1-C8 o heteroalquilo de M1-M8 (incluyendo, por ejemplo, alanina, Acm-cisteína, Prm-cisteína, acetilo, cisteína, y Nva, por ejemplo, alquilo de C1-C6 o heteroalquilo de M1-M6), o un arilo, aralquilo, heteroarilo o heteroalquilo sustituido o no sustituido (por ejemplo, metilfenilo o fenilmetilo) o el primer residuo de B es un análogo de aminoácidos que comprende un anillo heterociclilo que contiene nitrógeno de 5-8 miembros que-lleva un grupo C = 0, C = S, o S02, opcionalmente fusionado con un anillo benceno (por ejemplo, Tic, azaTic, Disc, Thiq, etc.). Residuos preferidos en esta posición incluyen Tic y Disc, aunque cualquier residuo empleado en esta posición en los ejemplos de las Tablas 1-3 puede esta presente en esta posición. En ciertas modalidades de Fórmulas I y II, el segundo residuo de B (el aminoácido o residuo análogo unido a V que es el primero) tiene una cadena lateral que es H o, de preferencia, un alquilo de C1-C6, heteroalquilo de M1-M6, o cicloalquilo, aún de más preferencia alquilo de C3-C5 o heteroalquilo de M3-M5, ya sea ramificado o no ramificado, o cicloalquilo. Residuos ejemplares incluyen glicina, isoleucina, Nle, Chg, Met(O) (metionina oxidada), y ácido alfa-aminoisobutírico. En ciertas modalidades, el segundo residuo de B es un residuo que es sustancialmente isométrico con un dipéptido, tal como un residuo de Odapdc o Haic (como se define anteriormente). Residuos preferidos en esta posición incluyen Met y Nle, aunque cualquier residuo empleado en esta posición en los ejemplos de las Tablas 1-3 puede esta presente en esta posición. En ciertas modalidades de Fórmulas I y II, R y R2 no se toman juntos para formar un anillo. En las modalidades en donde R y R2 se toman juntos para formar un anillo, el anillo es de preferencia un anillo de 6 ó 7 miembros, o es un anillo sustituido de 5 miembros (por ejemplo, bicíclico). En ciertas modalidades de Fórmulas I y II, RiXV, tomados juntos, representan un grupo alcanoilo, alquenoilo, arilcarbonilo o un aminoalcanoilo. En ciertas de tales modalidades, el grupo acilo es un grupo benzoilo, un grupo alcanoilo inferior o un grupo aminoalcanoilo inferior, tal como un grupo acetilo, propanoilo, aminopropanoilo o aminobutanoilo. En ciertas modalidades de Fórmulas I y II, B representa de 2 a 6 aminácidos o residuos análogos de aminoácidos, de preferencia de 2 a 5 aminoácidos o residuos análogos de aminoácidos. En ciertas modalidades, particularmente en donde B representa cuatro o menos aminoácidos o residuos análogos de aminoácidos, de preferencia tres o menos, W representa un grupo terminante. Grupos terminantes ejemplares están representados en la Tabla 1 (a, b y c), e incluyen átomos de nitrógeno (por ejemplo, formando una amida con un carboxilo terminal de B) llevando sustituyentes seleccionados entre H, alquilo, arilo, aralquilo, heteroaralquilo, heteroarilo, cicloalquilo, cicloalquilalquilo, heterociclilo y heterociclilalquilo sustituidos y no sustituidos, de preferencia entre H, alquilo, arilo, aralquilo, cicloalquilo y cicloalquilalquilo sustituidos o no sustituidos. Sustituyentes adecuados incluyen sustituyentes de hidroxilo, éter y amino. De preferencia, un grupo terminante incluye al menos seis átomos sin hidrógeno incluyendo el nitrógeno unido a B, de preferencia al menos ocho átomos sin nitrógeno. De preferencia, un grupo terminante W incluye un nitrógeno sustituido con un sustituyente aralquilo o heteroaralquilo, tal como un sustituyente bencilo o fenetilo. En ciertas de tales modalidades, el nitrógeno lleva un segundo sustituyente seleccionado entre H, alquilo inferior, hidroxi-alquilo inferior, e hidroxi-alquilo inferior-O-alquilo inferior. En ciertas modalidades, un grupo terminante W es un sustituyente heterociclilo que contiene nitrógeno, de preferencia fusionado con un anillo arilo o heteroarilo, unido a B a través del átomo de nitrógeno del anillo. Tales grupos terminantes incluyen tetrahidroisoquinolina, indolina, isoindolina, morfolina, piperidina, etc. Ciertas modalidades de Fórmulas I y II, tales como por selección apropiada de o W, de preferencia R7, R8 o R9, puede proporcionar una prodroga que se convierte a un compuesto activo de la invención bajo condiciones fisiológicas. Por ejemplo, donde W es parte de un éster, el éster puede disociarse bajo condiciones fisiológicas. En ciertas modalidades de Fórmulas I y II, al menos uno de Ri, R7, R8 o R9 es un residuo hidrofóbico, de preferencia R8 o Rg. En otras modalidades, la hidrofobicidad del compuesto, por ejemplo como se estima utilizando el método de Meyan et al, 1995 (J. Pharm Sci. 84:83-92), está entre un cLogP de aproximadamente 2.0 a aproximadamente 6.0, de preferencia entre aproximadamente 3.0 a aproximadamente 6.0, de mayor preferencia entre aproximadamente 4.0 a aproximadamente de 5.5. Sin embargo, compuestos que poseen un valor cLogP estimado de fuera de este intervalo, son contemplados por esta invención, por ejemplo compuestos que tienen un cLogP de aproximadamente 3.0 a aproximadamente 4.0. En ciertas modalidades de Fórmulas I y II, A y B juntos incluyen entre 2 y 8, por ejemplo, entre 3 y 6 aminoácidos o residuos análogos de aminoácidos. De preferencia, A y B juntos incluyen aproximadamente 2 o aproximadamente 5 aminoácidos o residuos análogos de aminoácidos. La porción de Fórmulas I y II flanqueadas por (pero no incluyendo) B y (VCHR2) se refiere en la presente como un residuo "como arginina". En las modalidades en donde i representa 0, j representa 1 y k representa 2, el residuo como arginina se refiere en la presente como un residuo Gpg (guanilpiperidil glicina). Tales residuos son conocidos en la técnica, y se describen en la publicación del PCT WO 00/78796 y referencias citadas en la presente. En modalidades preferidas, el residuo como arginina está enriquecido para una configuración S en el estereocentro alfa del aminoácido, por ejemplo, de preferencia es al menos 60%, 75%, 85%, 90% o aún 95% o más enriquecido para el enantiómero S de este residuo. En ciertas modalidades, inhibidores objeto presentan estabilidad aumentada, por ejemplo tienen un período medio de plasma de al menos 1.25, 1.5 o de preferencia 3 veces más largo, de preferencia en al menos cinco veces más largo, y afinidad de enlace aumentada con una molécula de HC Clase II (por ejemplo, 0401, 0101 , ó 0404), por ejemplo, enlazado con una afinidad de al menos 1.25, 1.5 o de preferencia 3 veces tan grande, como un compuesto de peptidilo análogo en donde el residuo como arginina es reemplazado por arginina.

Otras referencias que describen los residuos como arginina útiles en la presente incluyen las Solicitudes Internacionales Nos. WO 99/61476 y WO 01/27141, Jones et al., Bioorg. Med. Chem. Lett. 1999, 9, 2109-2114; Cunningham et al., Bioorg. Med. Chem. Lett. 1997, 7, 19-24; Hanson et al., Bioorg. Med. Chem. Lett. 1996, 6, 1931-1936; Jones et al., Bioorg. Med. Chem. Lett. 1999, 9, 2115-2118, Tamura et al., Bioorg. Med. Chem. Lett. 2000, 10, 745-49, Falcioni et al., 1999, Nature Biotech 17, 562-567, y Schmidt et al., Proc. Am. Pept. Symp., 16,h (2000), Meeting Date 1999, 634-635. En ciertas modalidades de Fórmula I y Fórmula II, los aminoácidos de A y/o B incluyen una secuencia de polipéptido transcelular, tal como se describen en la Patente de los Estados Unidos No. 6,495,526. La secuencia de polipéptido transcelular puede ser un péptido internalizante o que se incorpora, tal como puede derivarse de un polipéptido seleccionado de la proteína antepennepedia, proteína transactivadora de VIH (TAT), mastoparan, melittin, bombolittin, hemolisina delta, pardaxin, exotoxina A de Pseudomonas, clathrin, toxina de Difteria y proteína de complemento C9, o un fragmento de los mismos. En una modalidad, el péptido que se incorpora se deriva de la proteína antepennepedia drosófila, u homólogos de la misma. El homeodominio tan grande de 60 aminoácidos de la homeo-proteína antepennepedia se ha demostrado que se desplaza a través de las membranas biológicas y puede facilitar el desplazamiento de polipéptidos heterólogos al cual están acoplados. Véase por ejemplo Derossi et al. (1994) J Biol Chem 269:10444-10450; y Pérez et al. (1992) J. Cell Sci 102:717-722. Recientemente, se ha demostrado que fragmentos tan pequeños como 16 aminoácidos largos de esta proteína son suficientes para conducir la incorporación. Véase Derossi et al. (1996) J Biol Chem 271-18188.18193. La presente invención contempla acoplar al menos una porción de la proteína antepennepedia (u homólogo de la misma) a un péptido o peptidomimético de Fórmula I o II para aumentar el transporte transmembrana del compuesto, con relación al compuesto único, por una cantidad estadísticamente significativa. Otro ejemplo de un péptido que se incorpora es la proteína transactivadora de VIH (TAT). Esta proteína parece que se divide en-cuatro dominios (Kuppuswamy et al. (1989) Nucí. Acids Res. 17:3551-3561). La proteína TAT purificada es recogida por células en el cultivo tisular (Frankel and Pabo, (1989) Cell 55:1189-1193), y péptidos,. tales como el fragmento correspondiente a los residuos 37-62 de TAT, son recogidos rápidamente por la célula in vitro (Green and Loewenstein, (1989) Cell 55:1179-1188). La región altamente básica media la incorporación y dirección de la porción que incorpora a los núcleos (Rubén et al., (1989) J. Virol. 63:1-8). Los péptidos o análogos que incluyen una secuencia presente en la región altamente básica, tal como CFITKALGISYGRKKRRQRRRPPQGS, o una sub-secuencia de la misma tal como YGRRKKRRQRRR, puede ser conjugada a compuestos de Fórmula I o II para ayudar en la incorporación y dirección de esos compuestos al medio intracelular En ciertas de tales modalidades, la secuencia de aminoácidos A o B es más larga que se define con respecto a la Fórmula I o II para permitir la unión de una secuencia de aminoácidos de longitud suficiente para promover la incorporación del compuesto. Compuestos particularmente preferidos de la invención se establecen más adelante como P53, P74, P101, P102 y P69, de mayor preferencia P69 (véase Tabla 1a). Los compuestos de la invención pueden servir también como compuestos principales para el desarrollo de compuestos análogos. Los análogos deben tener una configuración electrónica estabilizada y conformación molecular que permite a grupos funcionales clave ser presentados por ejemplo a la proteína de MHC clase II en sustancialmente la misma forma como el compuesto principal. En particular, los compuestos análogos tienen propiedades electrónicas espaciales que son comparables con la región de enlace, pero pueden ser moléculas más grandes o más pequeñas que el compuesto principal. La identificación de compuestos análogos pueden realizarse a través del uso de técnicas tales como análisis de campo de coherencia intrínseca (SCF), análisis de interacción de configuración (Cl) y análisis dinámicos de modo normal. De esta forma, los compuestos de la presente invención pueden ser además modificados como un compuesto principal para obtener (h) sitio modificado de acción, espectro de actividad, especificidad del órgano, y/o (i) potencia mejorada, y/o (j) toxicidad disminuida (índice terapéutico mejorado), y/o (k) efectos secundarios disminuidos, y/o (I) comienzo modificado de acción terapéutica, durante del efecto, y/o (m) parámetros farmacinéticos modificados (resorción, distribución, metabolismo y excreción), y/o (n) parámetros físico-químicos modificados (solubilidad, higroscopicidad , color, gusto, olor, estabilidad, estado), y/o (o) especificidad general mejorada, especificidad del órgano/tejido, y/o (p) forma y vía de aplicación optimizada por (q) esterificación de grupos carboxilo, o (r) esterificación de grupos hidroxilo con ácidos de carbono, o (s) esterificación de grupos hidroxilo para, por ejemplo, fosfatos, pirofosfatos o sulfatos o hemi- succinatos, o (t) formación de sales farmacéuticamente aceptables, o (u) formación de complejos farmacéuticamente aceptables, o (v) síntesis de polímeros farmacológicamente activos, o (w) introducción de porciones hidrof ílicas, o (x) introducción/intercambio de sustituyentes o aromatos o cadenas laterales, cambio del modelo sustituyente, o (y) modificación por introducción de porciones isostéricas o bioisostéricas, o (z) síntesis de compuestos homólogos, o (aa) introducción de cadenas laterales ramificadas, o (bb) conversión de sustituyentes alquilo a análogos cíclicos, o (ce) derivatización del grupo hidroxilo a cetales, acétales, o (dd) N-acetilación a amidas, fenilcarbamatos, o (ee) síntesis de bases de Mannich, ¡minas, o (ff) transformación de cetonas o aldehidos a bases de Schiff, oximas, acétales, cetales, enolésteres, oxazolidinas, tiozolidinas o combinaciones de cualquiera de uno de los mismos. Las diversas etapas citadas anteriormente son generalmente conocidas en la técnica. Por ejemplo, programas de computadora para ¡mplementar esas técnicas están disponibles; por ejemplo, Rein, Computer-Assited Modeling of Receptor-Ligand Interactions (Alan Liss, New York, 1989). Métodos para la preparación de derivados químicos y análogos son bien conocidos para aquellos expertos en la técnica y están descritos en, por ejemplo, Beilstein, Handbook of Organic Chemistry, Springer edition New York Inc., 175 Fifth Avenue, New York, N.Y. 10010 U.S. A. y Organic Synthesis, Wiley, New York, USA. Además, los péptidos miméticos y/o diseño asistido por computadora de derivados apropiados y análogos pueden utilizarse, por ejemplo, de acuerdo con los métodos descritos anteriormente. Los métodos para la generación principal en el descubrimiento de la droga también incluyen proteínas y métodos de detección tales como espectrometría de masas (Cheng et al. J. Am. Chem. Soc. 117 (1995), 8859-8860) y algunos métodos de resonancia magnética nuclear (RMN) (Fejzo et al., Chem. Biol. 6 (1999), 755-769; Lin et al., J. Org. Chem. 62 (1997), 8930-8931). También pueden incluirse o depender de los análisis relacionados con la acción de estructura cuantitativa (QSAR) (Kubinyi, J. Med. Chem. 41 (1993), 2553-2564, Kubinyi, Pharm. Unserer Zeit 23 (1994), 281-290) la bioquímica combinatoria, química clásica y otros (véase, por ejemplo, Holzgrabe and Bechtold, Pharm. Acta Helv. 74 (2000), 149-155). La presente invención se relaciona además con preparaciones terapéuticas que comprenden un compuesto objeto y un excipiente, tal como un excipiente farmacéuticamente aceptable o estéril. La invención además se relaciona con un método para el tratamiento o prevención de una condición caracterizada por la activación de células T mediadas por MHC-II, que comprende administrar a un animal, tales como un ser humano, una composición que comprende un compuesto como se establece anteriormente. La invención se relaciona además a usos de un compuesto objeto para la preparación de una composición farmacéutica. Tal composición farmacéutica puede ser adecuada para el tratamiento o prevención de una condición caracterizada por la activación de células T mediadas por MHC-II. En ciertas modalidades, la condición es un trastorno autoinmune, por ejemplo, artritis reumatoide o esclerosis múltiple. En ciertas modalidades, un inhibidor objeto es selectivo para un isotipo o alotipo terapéutico,* tal como HLA-DR o DRB1*0101, sobre un segundo isotipo o alotipo, o sobre la mayor parte de otros isotipos o alotipos. De esta forma, el inhibidor objeto puede tener un ED50 al menos 5 ó 10 minutos más bajo para un isotipo o alotipo, de preferencia al menos 100 veces más bajo, aún de mayor preferencia al menos 1000 veces más bajo, sobre uno o más isotipos o alotipos HLA distintos. De manera similar, un inhibidor objeto puede tener un IC50 al menos 5 ó 10 veces más bajo para un isotipo o alotipo, de preferencia al menos 100 veces más bajo, aún de más preferencia al menos 1000 veces más bajo, sobre uno o más isotipos o alotipos HLA distintos. En ciertas modalidades, la invención proporciona un método para conducir una profesión farmacéutica al seleccionar uno o más compuestos como se describen en la presente para su capacidad de enlazar a la proteína de MHC clase II, conducir el perfil terapéutico del compuesto para eficacia y toxicidad en animales, preparar un inserto integral describiendo el uso del compuesto para suprimir una respuesta inmune, y mercadeo de la composición multivalente para suprimir una respuesta inmune. La invención también proporciona un conjunto que comprende un compuesto como se describe en la presente e instrucciones para administrar el compuesto para suprimir una respuesta inmune. En otra modalidad, la invención proporciona un método para conducir una profesión de ciencia de vida al seleccionar uno o más compuestos como se describe en la presente por su capacidad para enlazar a la proteína de MHC clase II, y licenciar, desarrollar conjuntamente, o vender a una tercera parte, los derechos de fabricación, mercadeo, venta o utilizar el compuesto para suprimir una respuesta inmune. IV. Aplicaciones Terapéuticas Los compuestos objeto pueden utilizarse por un amplio intervalo de tratamiento médicos. Por ejemplo, los compuestos objeto pueden emplearse en conjunción con trasplantes de órganos sólidos. De preferencia, el órgano se selecciona del grupo que consiste de corazón, hígado, riñon, corteza adrenal, pulmón, intestino, páncreas, córnea y piel. De mayor preferencia, el órgano objetivo se selecciona del grupo que consiste de corazón, riñon, hígado, córnea y piel. Por ejemplo, un paciente puede ser tratado con un compuesto objeto antes o después de recibir un trasplante o aloinjerto para prevenir o mejorar reacciones inmunes que puedan llevar al rechazo del trasplante o injerto vs. enfermedad hospedante. También están contempladas liberaciones prolongadas de los compuestos objeto, por ejemplo, de un implante polimérico biodegradable, o de micropartículas o nanopartículas poliméricas biodegradables. Los compuestos de la invención también son útiles en el tratamiento de enfermedades del sistema inmune caracterizado por activación indeseada, disfuncional o atípica de células T por polipéptidos de MHC clase II. Tales enfermedades inmunes incluyen, pero no están limitadas a, artritis reumatoide, artritis juvenil, esclerosis múltiple, enfermedad de Grave's, diabetes dependiente de insulina, narcolepsia, psoriasis, lupus eritematoso sistémico, espondilitis anquilosante, rechazo del aloinjerto, enfermedad de Hashimoto, miastenia gravis, pénfigo vulgar, tiroiditis, glomerulonefritis, insulitis, enfermedad irritable del intestino, pancreatitis, y cirrosis biliar primario. Otros trastornos para los cuales los compuestos de la invención pueden emplearse para mitigar los síntomas de, tratar o prevenir la ocurrencia o recurrencia de, incluye, por ejemplo, síndrome de Sjogren, esclerodermia, polimiositis, dermatomiositis, penfigoide bullosa, síndrome de Goodpasture, anemia hemolítica autoinmune, anemia perniciosa, púrpura trombocitopénica idiopática, y enfermedad de Addison, y similares. Para tales tratamientos, los compuestos descritos en la presente pueden administrarse en una cantidad suficiente para inhibir la activación de la célula T mediada por MHC-II mediante una cantidad terapéutica mente aceptable. Las disfunciones autoinmunes específicas son con frecuencia correlacionadas con tipos de MHC específicos. Los halotipos DQ/DR en humanos y sus asociaciones con enfermedades autoinmunes son bien conocidos, como se describe en la Patente de los Estados Unidos No. 6,045,796. En ciertas modalidades, puede ser ventajoso determinar el genotipo y/o fenotipo de un paciente a ser tratado con un inhibidor objeto, por ejemplo, para seleccionar una droga adecuada para tratar una enfermedad o condición asociada con el haplotipo del paciente, o para determinar un genotipo y/o fenotipo del paciente, como sea apropiado, para la selección y/o prescripción de una droga particular. En una modalidad preferida, la asociación entre una enfermedad y tipos de MHC específicos es tan fuerte que determinar el genotipo y/o fenotipo de un paciente puede no ser requerido. Métodos para determinar el haplotipo de un animal, tal como un ser humano, son bien conocidos en la técnica, y cualquier técnica adecuada puede utilizarse para hacer tal determinación, por ejemplo, al analizar el polimorfismo de longitud del fragmento de restricción del ADN (RFLP) utilizando pruebas de ADN que son específicas para el sitio de MHC que es examinado. Métodos para preparar pruebas para los sitios son conocidos para aquellos expertos en la técnica. Véase, por ejemplo, Gregersen et al., (1986), Proc. Nati. Acad. Sci. U.S. A. 79:5966, que se incorpora en la presente como referencia. El haplotipo del paciente puede compararse luego con haplotipos con asociaciones de enfermedades conocidas. Como un ejemplo, arriba del 90% de pacientes con artritis reumatoide tienen un haplotipo de DR4(Dw4), DR4(Dw14) o DR1. En particular, la artritis reumatoide juvenil (por ejemplo, artritis reumatoide juvenil pauciarticular) está asociada con HLA-DPB2.1 (Begovich et al., 1989, PNAS 86:9489-9493). Aproximadamente el 70% de pacientes con diabetes mellitus dependiente de insulina expresa HLA-DQ3.2B, DQA1 o DQB1, y la susceptibilidad a la enfermedad dermatológica autoinmune pénfigo vulgar está enlazada a la expresión de HLA-DQB1.3 (Scharf et al., 1989, PNAS 86:6215-6219). Las reacciones alérgicas para ambrosía son conocidas por estar asociadas con alelos DR2. Marsh et al., (1989) Cold Spring Harb Symp Quant Biol 54:459-70, que se incorporan en la presente como referencia. Métodos de prueba in vitro La actividad biológica del inhibidor, por ejemplo, la capacidad para inhibir la activación de la célula T específica del antígeno, puede ensayarse en una variedad de sistemas. En un método, se incorporan moléculas de MHC clase II purificadas en vesículas de fosfolípidos por diálisis detergente. Las vesículas resultantes de dejan luego fusionar con deslizamientos de cubierta de vidrio trasparente en cada una de las moléculas de MHC que contienen dos capas de lípidos planos (Brian and McConnell, Proc. Nati. Acad. Sci. USA (1984) 81: 6159). Los inhibidores que son probados están marcados detectablemente y se incuban luego en placas con proteínas de MHC purificadas que han sido formuladas en dos capas de membrana de lípidos. Son identificados inhibidores que enlazan a las moléculas de MHC al detectar la marca unido a la placa.

En un segundo protocolo ejemplar, se incuba un exceso de inhibidor con una célula que presenta antígeno que expresa un alotipo MHC de interés, (por ejemplo, un DR de interés) y un clon de célula T que reconoce un péptido seleccionado (por ejemplo, toxina tetánica 830-843) y molécula MHC (por ejemplo, el DR de interés), y el péptido antigénico mismo. El cultivo de ensayo se incubó durante un tiempo suficiente utilizando procedimientos estándares, tal como pulsar con timidina tritiada durante las últimas 18 horas de incubación. Se calcula luego el por ciento de inhibición, comparado con los controles que no reciben inhibidor. Un tercer protocolo se describe en la Patente de los Estados Unidos No. 5,736,507. En esa descripción, los estudios de enlace del péptido se realizan utilizando una versión mejorada de un ensayo de enlace semi-cuantitativo descrito previamente (Joosten et al., Int. Immunol. 6:751, 1994). Moléculas de MHC purificadas, adaptadas para la presente invención (0.5-500 nM) pueden incubarse a un pH = 5.0 con un péptido indicador biotinilado 50 nM y puede emplearse un intervalo de concentración de inhibidor en un volumen final de 25 µ? de amortiguador de enlace (por ejemplo, PBS, 1 mM de AEBSF, 1 mM de maleimida de N-etilo, 8 mM de EDTA, 10 µ? de pepstatina A, 0.01% de NaN3, 0.05% de NP-40 y 5% de DMSO). Después de aproximadamente 45 horas de incubación a temperatura ambiente, pueden estar separados péptidos indicadores unidos y no unidos ya sea por SDS-PAGE en combinación con tinción en un filtro de nitrocelulosa (BioRad) o por tinción de DOT vacío utilizando un filtro de nitrocelulosa (BioRad) y 96 cavidades de un equipo Hybry Dot (BRL. Las tinciones pueden bloquearse con un reactivo bloqueador de ADN al 0.5% (Boehringer Mannheim, Alemania) en ácido maleico 0.1 M de pH = 7.5, NaCI 150 mM. Después de 1/2 hora, se lavaron las tinciones en PBS, 0.02% de Tween 20 (Sigma, St. Louis, USA) y se incubaron con Streptavidina-HRPO (Southern Biotechnology) en una dilución de 1:40,000 ó 1:5,000 respectivamente. Se detectó el péptido indicador biotinilado unido a DR por quimioluminescencia aumentada utilizando un equipo de ECL Western Blot (Electroinmunotransferencia) (Amersham, Reino Unido) de acuerdo con las instrucciones del fabricante. Películas preinstantáneas (hyperfilm-ECL. Amersham, Reino Unido) están expuestas durante 10 minutos. La afinidad de enlace relativa de un péptido dado se relaciona con la competición con el péptido indicador. Esta afinidad relativa se define como la concentración inhibidora en la cual se reduce la señal a 50% (RIC50)- Un protocolo similar, detallado en la Ejemplificación más adelante, se basa en el protocolo descrito por Siklodi et al., Human Immunology, 59 (1998) 463-471, y emplea enlaces competitivos de inhibidores objeto. Cualquier alotipo de HC-II adecuado puede emplearse en tales ensayos, y, como se describe más adelante, el método es adecuado para bibliotecas de protección de compuestos para su capacidad para enlazar moléculas de MHC-II. Otros métodos adecuados para determinar la actividad biológica in vitro de un inhibidor puede tomarse a partir de los ejemplos a continuación. Sistemas Modelo para pruebas in vivo La capacidad de los compuestos para inhibir presentación de antígeno en un ensayo in vitro se ha correlacionado con la capacidad de los compuestos para inhibir una respuesta inmune in vivo. La actividad in vivo puede determinarse en modelos animal, por ejemplo, al administrar un antígeno conocido que se restringe a la molécula MHC particular «de interés, junto con un inhibidor de prueba de la presente invención. Los linfocitos T son posteriormente separados del animal y se cultivan con un intervalo de dosificación de antígeno. La inhibición de la estimulación se mide por medios convencionales, por ejemplo, pulsando con 3H-timidina, y comparando con controles apropiados. De preferencia, como se describe en la Ejemplificación más adelante, un modelo animal será modificado genéticamente para expresar un alotipo humano MHC clase II de interés en lugar de moléculas endógenas de MHC clase II. Ciertos detalles experimentales serán por supuesto aparentes al artesano experto. Véase también, Adormí, et al., Nature 334:623-625 (1988), e Ito et al. (1996) J. Exp. Med. 183:2635-2644, ambos incorporados en la presente como referencia. Los siguientes son sistemas modelos ejemplares de enfermedades del sistema inmune, que pueden utilizarse para evaluar los efectos de los compuestos de la invención en estas condiciones. Un artesano experto debería ser capaz, con no más de una experimentación o búsqueda de rutina, para identificar otros modelos adecuados para los compuestos de prueba de la invención contra estas y otras enfermedades del sistema inmune. La encefalomielitis autoinmune experimental (EAE) es un modelo de esclerosis múltiple (MS) que se induce por inmunización con una proteína mielina, por ejemplo, proteína básica de mielina (MBP), proteina protelípida (PP) o gl ¡coproteína de oligodendrocito de ratón (MOG), en ratones transgénicos para un alotipo humano clase II asociado con MS y deficiencia de moléculas clase II en ratones como está descrito por Ito et al. (1996). La artritis inducida por colágeno (CIA) es un modelo de artritis reumatoide (RA), inducida por inmunización con colágeno tipo II en ratones transgénicos para una molécula humana clase II asociada con RA (Rosloniec et al., J. Exp.

Med. 185:1113 (1997), & J. Immunol. 160:2573-2578, (1998)). V. Composiciones Farmacéuticas En otra aspecto, la presente invención proporciona composiciones farmacéuticamente aceptables que comprenden una cantidad terapéuticamente efectiva de uno o más compuestos de la invención objeto, tal como se describió anteriormente, formuladas junto con uno o más portadores farmacéuticamente aceptables (aditivos) y/o diluyentes para uso en el tratamiento de la activación de la célula T atípica o una enfermedad autoinmune, por ejemplo, artritis reumatoide o esclerosis múltiple. Como se describe en detalle más adelante, las composiciones farmacéuticas de la presente invención pueden formularse especialmente para la administración en forma sólida o líquida, incluyendo aquellas adaptadas para lo siguiente: (1) administración oral, por ejemplo, purgas (soluciones o suspensiones acuosas o no acuosas), tabletas, cápsulas, pildoras, polvos, gránulos, pastas para aplicación en la lengua; (2) administración parenteral, por ejemplo, por inyección subcutánea, intramuscular o intravenosa como, por ejemplo, una solución o suspensión estéril; (3) aplicación tópica, por ejemplo, como una crema, ungüento o rocío aplicado a la piel; o (4) en forma vaginal o rectal, por ejemplo, como un pesario, crema, espuma, o supositorio. En ciertas modalidades, las preparaciones farmacéuticas pueden no ser pirogénicas, es decir no elevan la temperatura del cuerpo de un paciente. La frase "cantidad terapéuticamente efectiva" como se utiliza en la presente significa esa cantidad de un compuesto, material o composición que comprende un inhibidor de la invención objeto que es efectiva para producir algún efecto terapéutico deseado. Tal efecto terapéutico puede resultar de, por ejemplo, la inhibición de la activación de la célula T no deseada. La frase "farmacéuticamente aceptable" se emplea en la presente para referirse a aquellos compuestos, materiales, composiciones y/o formas de dosis que están, dentro del alcance del juicio o criterio acertado del médico, adecuado para uso en contacto con los tejidos de seres humanos y animales sin toxicidad excesiva, irritación, respuesta alérgica, u otro problema o complicación, en proporción con una proporción de beneficio/riesgo razonable. La frase "portador farmacéuticamente aceptable" como se utiliza en la presente significa un material, composición o vehículo farmacéuticamente aceptable, tal como un agente de relleno líquido o sólido, excipiente, solvente o material de encapsulación, implicados en conducir o transportar los compuestos objeto de un órgano, o parte del cuerpo, a otro órgano, o parte del cuerpo. Cada portador debe ser "aceptable" en el sentido de que sea compatible con los otros ingredientes de la formulación y no dañar al paciente.

Algunos ejemplos de materiales que pueden servir como portadores farmacéuticamente aceptables incluyen: (1) azúcares, como lactosa, glucosa y sucrosa; (2) almidones, como almidón de maíz y almidón de papa; (3) celulosa, y sus derivados, como carboximetilcelulosa de sodio, etilcelulosa y acetato de celulosa; (4) tragacanto en polvo; (5) malta; (6) gelatina; (7) talco; (8) excipientes, como manteca de cacao y ceras de supositorio; (9) aceites, como aceite de cacahuete, aceite de semilla de algodón, aceite de girasol, aceite de sésamo, aceite de olivo, aceite de maíz y aceite de soja; (10) glicoles, como propilenglicol; (11) polioles, como glicerina, sorbitol, manitol y polietilenglicol; (12) ésteres, como oleato de etilo y laurato, de etilo; (13) agar; (14) agentes amortiguadores, como hidróxido de magnesio e hidróxido de aluminio; (15) ácido algínico; (16) agua libre de pirógeno; (17) solución salina isotónica; (18) solución de Ringer; (19) alcohol etílico; (20) soluciones tampón fosfato; y (21) otras substancias compatibles no tóxicas empleadas en formulaciones farmacéuticas. Como se establece anteriormente, ciertas modalidades de los compuestos objeto presentes pueden contener un grupo funcional básico, tal como amino o alquilamino, y son, de esta forma, capaces de formar sales farmacéuticamente aceptables con ácidos farmacéuticamente aceptables. El término "sales farmacéuticamente aceptables" a este respecto, se refiere a las sales de adición de ácido inorgánicas y orgánicas, relativamente no tóxicas de tales inhibidores de la actividad de MHC. Estas sales pueden prepararse in situ durante el aislamiento y purificación finales de los compuestos de la presente invención, o haciendo reaccionar separadamente un compuesto purificado de la invención en su base libre con un ácido orgánico o inorgánico adecuado, y aislar la sal formada así. Las sales representativas incluyen las sales bromhidrato, clorhidrato, sulfato, bisulfato, fosfato, nitrato, acetato, valerato, oleato, palmitato, estearato, laurato, benzoato, lactato, fosfato, tosilato, citrato, maleato, fumarato, succinato, tartrato, naptilato, mesilato, glucoheptonato y laurilsulfonato y similares. (Véase, por ejemplo, Berger et al. (1977) "Sales Farmacéuticas", J. Pharm. Sci. 66:1-19). En otros casos, los compuestos de la presente invención pueden contener uno o más grupos funcionales ácidos y, de esta forma, son capaces de formar sales farmacéuticamente aceptables con bases farmacéuticamente aceptables. El término "sales farmacéuticamente aceptables" en estos casos se refiere a las sales de adición de base inorgánicas y orgánicas, relativamente no tóxicas de un inhibidor de una actividad de MHC tal como la activación de la célula T. Estas sales pueden igualmente prepararse in situ durante el aislamiento y purificación finales de los compuestos de la presente invención, o haciendo reaccionar separadamente el compuesto purificado en su forma de ácido libre con una base adecuada, tal como el hidróxido, carbonato o bicarbonato de un catión de metal farmacéuticamente aceptable, con amoníaco, o con una amina primaria, secundaria o terciaria orgánica farmacéuticamente aceptable. Las sales alcalinotérreas o alcalinas representativas incluyen las sales de litio, sodio, potasio, calcio, magnesio y aluminio y similares. Aminas orgánicas representativas útiles para la formación de sales de adición de base incluyen etilamina, dietilamina, etilendiamina, etanolamina, dietanolamina, piperazina y similares. (Véase, por ejemplo, Berge et al., supra). Pueden estar presentes en las composiciones agentes humectantes, emulsionantes y lubricantes, como laurilsulfato de sodio y estearato de magnesio, así como agentes colorantes, agentes de liberación, agentes de revestimiento, edulcorantes, saborizantes y agentes aromatizantes, preservativos y antioxidantes. Ejemplos de antioxidantes farmacéuticamente aceptables incluyen: (1) antioxidantes solubles en agua, como ácido ascórbico, clorhidrato de cisteína, bisulfato de sodio, metabisulfito de sodio, sulfito de sodio y similares; (2) antioxidantes solubles en aceite, como palmitato de ascorbilo, hidroxianisol butilado (BHA), hidroxitolueno butilado (BHT), lecitina, propilgalato, alfa-tocoferol , y similares; y (3) agentes quelantes metálicos, como ácido cítrico, ácido etilendiamina-tetraacético (EDTA), sorbitol, ácido tartárico, ácido fosfórico y similares. Formulaciones de la presente invención incluyen aquellas adecuadas para la administración oral, nasal, tópica (incluyendo bucal y sublingual), rectal, vaginal, y/o parenteral. Las formulaciones pueden presentarse convenientemente en forma de dosis unitarias y pueden prepararse por cualesquier métodos bien conocidos en la técnica de la farmacia. La cantidad de ingrediente activo que puede combinarse con un material portador para producir una forma de dosis simple variará dependiendo del hospedante que está siendo tratado, el modo particular de administración. La cantidad de ingrediente activo que puede combinarse con un material portador para producir una forma de dosis simple generalmente será esa cantidad de inhibidor que produce un efecto terapéutico. Generalmente, fuera de un cien por ciento, esta cantidad variará de aproximadamente 1 por ciento a aproximadamente noventa y nueve por ciento de ingrediente activo, de preferencia de aproximadamente 5 por ciento a aproximadamente 70 por ciento, de mayor preferencia de aproximadamente 10 por ciento a aproximadamente 30 por ciento. Métodos para la preparación de estas formulaciones o composiciones incluyen la etapa de conducir en asociación un compuesto de la presente invención con el portador y, opcionalmente, uno o más ingredientes secundarios. En general, las formulaciones son preparadas al conducir uniformemente o íntimamente en asociación un inhibidor de la presente invención con portadores líquidos, o portadores sólidos finamente divididos, o ambos, y luego, si es necesario, conformando el producto. Formulaciones de la invención adecuadas para administración oral pueden estar en forma de cápsulas, sellos, pildoras, tabletas, pastillas (utilizando bases de sabor, normalmente sucrosa y acacia o tragacanto), polvos, gránulos, o como una solución o una suspensión en un líquido acuoso o no acuoso, o como una emulsión líquida aceite en agua o agua en aceite, o como un elíxir o jarabe, o como pastillas (utilizando una base inerte, tal como gelatina y glicerina, o sucrosa y acacia) y/o como lavados bucales y similares, cada una conteniendo una cantidad predeterminada de un compuesto de la presente invención como un ingrediente activo. Un inhibidor de la presente invención puede también administrarse como un bolo, electuario o pasta. En formas de dosis sólidas de la invención para administración oral (cápsulas, tabletas, pildoras, grageas, polvos, gránulos y similares), el ingrediente activo se mezcla con uno o más portadores farmacéuticamente aceptables, tales como citrato de sodio o fosfato dicálcico, y/o cualquiera de los siguientes: (1) agentes de relleno o extensores, tales como almidones, lactosa, sucrosa, glucosa, manitol y/o ácido silícico; (2) agentes aglutinantes, tales como, por ejemplo, carboximetilcelulosa, alginatos, gelatina, polivinilpirrolidona, sucrosa y/o acacia; (3) humectantes, como glicerol; (4) agentes desintegrantes, como agar-agar, carbonato de calcio, almidón de papa o tapioca, ácido algínico, ciertos silicatos, y carbonato de sodio; (5) agentes retardantes de la solución, como parafina; (6) aceleradores de la absorción, como compuestos de amonio cuaternario; (7) agentes humectantes, tales como, por ejemplo, alcohol cetílico y monoestearato de glicerol; (8) absorbentes, tales como caolín y arcilla de bentonita; (9) lubricantes, como un talco, estearato de calcio, estearato de magnesio, polietilenglicoles sólidos, laurilsulfato de sodio, y mezclas de los mismos; y (10) agentes colorantes. En el caso de cápsulas, tabletas y pildoras, las composiciones farmacéuticas puede comprender también agentes amortiguadores. También pueden emplearse composiciones sólidas de un tipo similar como agentes de relleno en cápsulas rellenadas de gelatina blanda y dura utilizando tales excipientes como lactosa o azúcares de leche, así como polietilenglicoles de alto peso molecular y similares.

Una tableta puede hacerse por compresión o moldeo, opcionalmente con uno o más ingredientes secundarios. Tabletas comprimidas pueden prepararse utilizando aglutinantes (por ejemplo, gelatina o hidroxipropilmetilcelulosa), lubricante, diluyente inerte, preservativo, desintegrante (por ejemplo, glicolato de almidón sódico o carboximetilcelulosa de sodio reticulado), agente tensioactivo o dispersante. Pueden hacerse tabletas moldeadas al moldear en una máquina adecuada una mezcla del inhibidor en polvo humedecido con un diluyente líquido inerte. Las tabletas, y otras formas de dosificación sólidas de las composiciones farmacéuticas de la presente invención, tales como grageas, cápsulas, pildoras y gránulos, pueden opcionalmente registrarse o prepararse con revestimientos y capas, tales como revestimientos entéricos y otros revestimientos bien conocidos en la técnica de la formulación farmacéutica. También pueden ser en la presente formulaciones para proporcionar liberación lenta o controlada del ingrediente activo utilizando, por ejemplo, hidroxipropilmetilcelulosa en proporciones que varían para proporcionar el perfil de liberación deseado, otras matrices poliméricas, liposomas y/o microesferas. Pueden estar esterilizados por, por ejemplo, filtración a través de un filtro que retiene las bacterias, o incorporando agentes esterilizantes en la forma de composiciones sólidas estériles que pueden disolverse en agua estéril, o algún medio inyectable estéril distinto inmediatamente antes de utilizarse. Estas composiciones pueden opcionalmente también contener agentes opacif icadores y pueden ser de una composición que libera los ingredientes activos sola, o de preferencia, en una cierta porción del tracto gastrointestinal tal como los intestinos delgado y grueso, opcionalmente, en una manera retardada. Ejemplos de composiciones embebidas que pueden utilizarse incluyen substancias poliméricas y ceras. El ingrediente activo puede también estar en forma de micro-encapsulado, si es apropiado, con uno o más excipientes descritos anteriormente. Las formas de dosis líquidas para administración oral de los compuestos de la invención incluyen emulsiones farmacéuticamente aceptables, microemulsiones, soluciones, suspensiones, jarabes y elíxires. Además del ingrediente activo, las formas de dosis líquidas pueden contener diluyentes inertes comúnmente utilizados en la técnica, tales como, por ejemplo, agua u otros solventes, agentes solubilizantes y emulsionantes, tales como alcohol etílico, alcohol isopropílico, carbonato de etilo, acetato de etilo, alcohol bencílico, benzoato de bencilo, propilenglicol , 1,3-butilenglicol, aceites (en particular, aceites de semilla de algodón, cacahuate, maíz, germen, oliva, y sésamo), glicerol, alcohol tetrahidrofurílico, polietilenglicoles y ésteres de ácido grasos de sorbitano, y mezclas de los mismos. Además de diluyentes inertes, las composiciones orales pueden incluir también adyuvantes tales como agentes humectantes, emulsionantes y agentes dispersantes, agentes de endulzamiento, saborizantes, colorantes, aromatizantes o preservativos. Suspensiones, además de los inhibidores activos de la presente invención, pueden contener agentes de dispersantes como, por ejemplo, alcoholes isoestearílicos etoxilados, polioxietilensorbitol y ésteres de sorbitano, celulosa microcristalina, metahidróxido de aluminio, bentonita, agar-agar y tragacanto, y mezclas de los mismos. Formulaciones de composiciones farmacéuticas de la invención para administración rectal o vaginal pueden presentarse como un supositorio, que puede prepararse al mezclar uno o más compuestos de la invención con uno o más excipientes no irritantes adecuados o portadores que comprenden, por ejemplo, manteca de cacao, polietilenglicol , una cera de supositorio o un salicilato, y que es sólido a temperatura ambiente, pero líquido a temperatura corporal y, por lo tanto, se fusionará en el recto o cavidad vaginal y libera el inhibidor activo. Formulaciones de la presente invención que son adecuadas para la administración vaginal también incluyen pesarios, tampones, cremas, geles, pastas, espumas o formulaciones pulverizadoras que contienen tales portadores son bien conocidos en la técnica por ser apropiados. Formas de dosis para la administración tópica o transdérmica de un compuesto de esta invención incluyen polvos, pulverizadores, ungüentos, pastas, cremas, lociones, geles, soluciones, parches e inhalantes. El compuesto activo puede mezclarse bajo condiciones estériles con un portador farmacéuticamente aceptable, y con cualesquiera preservativos, amortiguadores, o propelentes que puedan ser requeridos. Los ungüentos, pastas, cremas y geles pueden contener, además de un inhibidor activo, excipientes, tales como grasas animal y vegetal, aceites, ceras, parafinas, almidón, tragacanto, derivados de celulosa, polietilenglicoles, siliconas, bentonitas, ácido silícico, talco y óxido de zinc, o mezclas de los mismos. Los polvos y pulverizadores pueden contener, además de un compuesto de esta invención, excipientes tales como lactosa, talco, ácido silícico, hidróxido de aluminio, silicatos de calcio y polvo de poliamida, o mezclas de estas substancias. Pulverizadores pueden contener adicionalmente propelentes habituales, tales como clorofluoro-hidrocarburos e hidrocarburos volátiles no sustituidos, tales como butano y pro paño.

Parches transdérmicos tienen la ventaja adicionada de proporcionar suministro controlado de un compuesto de la presente invención al cuerpo. Tales formas de dosificación pueden hacerse al disolver o dispersar el inhibidor de la presente invención en el medio apropiado. I ntensificadores de la absorción también pueden utilizarse para aumentar el flujo de la droga a través de la piel. La velocidad de flujo puede controlarse al proporcionar ya sea una membrana que controla la velocidad o dispersar el compuesto de la presente invención en una matriz polimérica o gel. Formulaciones oftálmicas, ungüentos para los ojos, polvos, soluciones y similares, también se contemplan cuando están dentro del alcance de esta invención. Composiciones farmacéuticas de esta invención adecuadas para la administración parenteral comprenden uno o más inhibidores de la invención en combinación con una o más soluciones, dispersiones, suspensiones o emulsiones estériles isotónicas acuosas o no acuosas farmacéuticamente aceptables, o polvos estériles que pueden reconstituirse en soluciones inyectables estériles o dispersiones justo antes de utilizarse, que pueden contener antioxidantes, amortiguadores, bacteriostatos, solutos, que proporcionan la formulación isotónica con la sangre del receptor destinado o agentes de suspensión o espesantes. Ejemplos de portadores adecuados acuosos y no acuosos que pueden emplearse en las composiciones farmacéuticas de la invención incluyen agua, etanol, polioles (tales como glicerol, propilenglicol, polietilengl icol , y similares), y mezclas adecuadas de los mismos, aceites vegetales, tales como aceite de oliva, y esteres orgánicos inyectables, tales como oleato de etilo. Puede mantenerse una fluidez propia, por ejemplo, por el uso de materiales de revestimiento, tales como lecitina, por el mantenimiento del tamaño de partícula requerido en el caso de dispersiones, y por el uso de surfactantes. Estas composiciones pueden contener también adyuvantes tales como preservativos, agentes humectantes, agentes emulsionantes y agentes dispersantes. La prevención de la acción de microorganismos puede asegurarse por la inclusión de varios agentes antibacterianos y otros antifungales , por ejemplo, parabeno, clorobutanol, fenol ácido sórbico y similares. También puede ser deseable incluir agentes isotónicos, tales como azúcares, cloruro de sodio, y similares en las composiciones. Además, la absorción prolongada de la forma farmacéutica inyectable puede originarse por la inclusión de agentes que retardan la absorción tales como monoestearato de aluminio y gelatina. En algunos casos, para prolongar el efecto terapéutico de un inhibidor, es deseable alentar la absorción del inhibidor de la inyección subcutánea o intramuscular. Esto puede realizarse por el uso de una suspensión líquida de material cristalino o amorfo que tiene solubilidad de agua inadecuada. La velocidad de absorción del inhibidor depende luego de su velocidad de disolución que, a su vez, puede depender del tamaño de cristal y forma cristalina. Alternativamente, la absorción retardada de una forma de inhibidor parenteralmente administrada se realiza al disolver o suspender el inhibidor en un vehículo de aceite. Se hacen formas de depósito inyectables al formar matrices microencapsuladas de los inhibidores objeto en polímeros biodegradables tales como poliláctido-poliglicólido. Dependiendo de la relación de la droga con el polímero, y la naturaleza del polímero particular empleado, la velocidad de liberación de la droga puede ser controlada. Ejemplos de polímeros biodegradables incluyen poli(ortoésteres) y poli(anhídridos). Las formulaciones de depósito inyectables también se preparan al atrapar la droga en liposomas o microemulsiones que son compatibles con el tejido corporal. En ciertas modalidades, un compuesto como se describe en la presente, se administra conjuntamente con otro agente terapéutico, por ejemplo, otro agente inmunosupresor, un agente o substancia que disparan una respuesta inmune indeseada (por ejemplo, células trasplantadas), o un agente que actúa con el inmunosupresor para lograr un efecto terapéutico deseado, tal como un agente antiinflamatorio. Por ejemplo, el compuesto y el agente o substancia pueden administrarse en una composición simple tal como una tableta, en composiciones separadas simultáneamente, o en composiciones separadas en tiempos diferentes como parte de un régimen terapéutico, etc. Cuando los compuestos de la presente invención se administran como farmacéuticos, a seres humanos o animales, pueden darse per se o como una composición farmacéutica que contiene, por ejemplo, 0.1 a 99.5% (de más preferencia, 0.5 a 90%) de ingrediente activo en combinación con un portador farmacéuticamente aceptable. Las preparaciones de la presente invención pueden darse de manera oral, parenteral, tópica o rectamente, Se dan por supuesto por formas adecuadas para cada vía de administración. Por ejemplo, se administran en forma de tabletas o cápsulas, por inyección, inhalación, loción para ojos, ungüento, supositorio, etc., administración por inyección, infusión o inhalación; tópica por loción o ungüento; y rectal por supositorios. Se prefiere la administración oral. Las frases "administración parenteral" y "parenteralmente administrada" como se utiliza en la presente significa modos de administración distintos de la administración enteral y tópica, normalmente por inyección, e incluye, sin limitación, la inyección e infusión intravenosa, intramusclar, intraaerterial , intratecal, intracapsular, intraorbital, intracardíaca, ¡ntradérmica, intraperitoneal , transtraqueal, subcutánea, subcuticular, intraarticular, subcapsular, subaraquinoide, intraespinal e intraesternal. Las frases "administración sistémica", "sistemáticamente administrada", "administración periférica" y "periféricamente administrada" como se utiliza en la presente significa la administración de un compuesto, droga u otro material distinto que directamente dentro del sistema nervioso central, de tal manera que entra al sistema del paciente y, de esta forma, se somete a metabolismo y otros procesos similares, por ejemplo, administración subcutánea. A pesar de la vía de administración seleccionada, los inhibidores útiles en el método objeto pueden utilizarse en una forma hidratada adecuada, y/o las composiciones farmacéuticas de la presente invención, son formuladas en formas de dosificación farmacéuticamente aceptables por métodos convencionales conocidos para aquellos expertos en la técnica. Los niveles de dosificación actuales de los ingredientes activos en las composiciones farmacéuticas de esta invención pueden ser variados con el fin de obtener una cantidad del ingrediente activo que sea efectiva para lograr la respuesta terapéutica deseada, por ejemplo, mitigación de los síntomas de artritis reumatoide o esclerosis múltiple, para un paciente particular, composición, y modo de administración, sin que sea tóxico para el paciente. El nivel de dosis seleccionado dependerá de una variedad de factores incluyendo la actividad del inhibidor particular empleado, o el éster, sal o derivado del mismo, la vía de administración, el tiempo de administración, la velocidad de excreción del compuesto particular que es empleado, la duración del tratamiento, otras drogas, compuestos y/o materiales utilizados en combinación con el inhibidor particular empleado, la edad, sexo, peso, condición, salud general y la historia médica anterior del paciente a ser tratada, y factores similares bien conocidos en las técnicas médicas. Un médico o veterinario que tienen habilidad ordinaria en la técnica pueden determinar fácilmente y prescribir la cantidad efectiva de la composición farmacéutica requerida. Por ejemplo, el médico o veterinario podrían iniciar dosis de los compuestos de la invención empleados en la composición farmacéutica a niveles Inferiores que aquella requerida para lograr el efecto terapéutico deseado y gradualmente aumentar la dosis hasta que se logre el efecto deseado. En general, una dosis diaria adecuada de un inhibidor potente, por ejemplo, que tiene un EC50 en el intervalo de 1 m a sub-nanomolar, sería que la cantidad del compuesto que es la dosis más baja para producir un efecto terapéutico. Tal dosis efectiva dependerá generalmente de los factores descritos anteriormente. En general, dosis intravenosas, intracerebroventriculares y subcutáneas de los compuestos de esta invención para un paciente, cuando se utiliza para los efectos indicados, variará de aproximadamente 0.0001 a aproximadamente 10000 mg por kilogramo de peso corporal por día, aunque de preferencia de 0.5 a 300 mg por kilogramo. Si se desea, la dosis diaria efectiva del inhibidor activo puede administrarse como dos, tres, cuatro, cinco, seis o más sub-dosis administradas por separado en intervalos apropiados en todo el día, opcionalmente, en formas de dosis unitarias. En una modalidad preferida, el agente inhibidor se formula para la administración oral, como por ejemplo en la forma de una tableta sólida, pildora, cápsula, depósito o similares (colectivamente de aquí en adelante "tableta") o una solución o suspensión acuosa. En una modalidad preferida de la forma de tableta del agente inhibidor, las tabletas están de preferencia formuladas de tal manera que la cantidad de agente inhibidor (o agentes inhibidores) proporcionadas en 20 tabletas, si se toman juntas, proporcionaría una dosis de al menos la dosis efectiva media (ED50), por ejemplo, la dosis en la cual al menos 50% de individuos presentan un efecto terapéutico. Por ejemplo, para un agente inhibidor, el efecto terapéutico podría ser un efecto cuántico de inhibición de la activación de la célula T mediada por la molécula MHC clase II (por ejemplo, una reducción estadísticamente significativa en la inflamación). De más preferencia, las tabletas se formulan de tal manera que la cantidad total del agente inhibidor proporcionada (o agentes inhibidores) en 10, 5, 2 ó 1 tabletas proporcionaría al menos una dosis ED50 a un paciente (mamífero humano o no humano). En otras modalidades, la cantidad del agente inhibidor (o agentes inhibidores) proporcionada en 20, 10, 5 ó 2 tabletas tomadas en un período de tiempo de 24 horas proporcionaría un régimen de dosificación proporcionando, en promedio, un nivel de plasma medio del agente o agentes inhibidores de al menos la concentración de ED50 (la concentración para el 50% de efecto máximo de, por ejemplo, inhibición de una actividad de MHC), aunque de preferencia menos de 100 veces la concentración de ED5o, y aún de mayor preferencia menos de 10 ó 15 veces la concentración de ED5o. En modalidades preferidas, una dosis simple de tabletas (1-20 tabletas) proporciona aproximadamente 0.25 mg a 1250 mg de un agente o agentes inhibidores. Además, los agentes inhibidores pueden formularse para la administración parenteral, como por ejemplo, para inyección subcutánea, intramuscular o intravenosa, por ejemplo, el agente inhibidor puede proporcionarse en una solución o suspensión estéril (colectivamente de aquí en adelante "solución inyectable"). La solución inyectable está de preferencia formulada de tal manera que la cantidad de agente inhibidor (o agentes) proporcionada en una inyección de bolo de 200 ce proporcionaría una dosis de al menos la dosis efectiva media, aunque de preferencia menos de 100 veces la concentración de ED50, y aún de mayor preferencia menos de 10 ó 5 veces la concentración de ED50. De más preferencia, la solución inyectable se formula de tal manera que la cantidad total del agente inhibidor (o agentes) proporcionada en inyecciones de 100, 50, 25, 10, 5, 2.5 ó 1 ce proporcionaría una dosis de ED50 a un paciente, y de preferencia menos de 100 veces la concentración de ED50, y aún de más preferencia menos de 10 ó 5 veces la concentración de ED50. En otras modalidades, la cantidad de agente inhibidor (o agentes inhibidores) proporcionada en un volumen total de 100, 50, 25, 5 ó 2 ce para ser inyectado al menos dos veces en un período de tiempo de 24 horas proporcionaría un régimen de dosificación proporcionando, en promedio, un nivel de plasma medio del agente o agentes inhibidores de al menos la concentración de ED50, aunque de preferencia menos de 100 veces la concentración de ED50, y aún de más preferencia menos de 10 ó 5 veces la concentración de ED50. En modalidades preferidas, una inyección de dosis simple proporciona aproximadamente 0.25 mg a 1250 mg del agente inhibidor.

. Para infusión intravenosa continua, por ejemplo, goteo o impulso, el agente inhibidor puede proporcionarse en una solución o suspensión diluida estéril (colectivamente de aquí en adelante "solución inyectable i.v."). La solución inyectable i.v. se formula de preferencia de tal manera que la cantidad del agente inhibidor (o agentes inhibidores) proporcionada en una solución de 1 L proporcionaría una dosis, si se administra durante 15 minutos o menos, de al menos la dosis efectiva media, aunque de preferencia menos de 100 veces la concentración de ED50, y aún de más preferencia menos de 10 ó 5 veces la concentración de ED50. De más preferencia, la solución inyectable i.v. se formula de tal manera que la cantidad del agente inhibidor (o agentes inhibidores) proporcionada en solución de 1 L administrada durante 60, 90, 120 ó 240 minutos proporcionaría una dosis de ED50 a un paciente, aunque de preferencia menos de 100 veces la dosis de ED50, y aún de más preferencia menos de 10 ó 5 veces la dosis de ED50. En modalidades preferidas, una "bolsa" de i.v. simple proporciona aproximadamente 0.25 mg a 5000 mg del agente inhibidor por litro de solución i.v., de más preferencia de 0.25 mg a 2500 mg, y aún de más preferencia de 0.25 mg a 1250 mg. Una dosis de ED50, para un humano, se basa en un peso corporal desde 2 Kg a 125 Kg, aunque de más preferencia para un adulto en el intervalo de 50 a 125 Kg.

Pueden valorarse inhibidores potenciales para valores ED50 para cualquier inhibición incluyendo, por ejemplo, actividad terapéutica con respecto a la artritis reumatoide o esclerosis múltiple, utilizando cualquiera de una variedad de técnicas bien conocidas en la técnica, tales como aquellas descritas anteriormente. VI. Síntesis Combinatoria de Inhibidores Objeto Los compuestos de \a presente invención, particularmente bibliotecas de variantes que tienen varias clases de sustituyentes representativas, son receptivos a la química combinatoria y otros esquemas de síntesis paralelos (véase, por ejemplo, PCT WO .94/08051 ). El resultado es que bibliotecas grandes de compuestos relacionados, por ejemplo una biblioteca abigarrada o variada de compuestos representados por la fórmula I o II anteriores, pueden explorarse rápidamente en ensayos de alto rendimiento para identificar compuestos principales potenciales, así como para refinar el perfil de la especificidad, toxicidad y/o cinética citotóxica de un compuesto principal, por ejemplo, utilizando uno de los ensayos descritos en la presente. Simplemente para ilustración, una biblioteca combinatoria para los propósitos de la presente invención es una mezcla de compuestos químicamente relacionados que pueden explorarse juntos para una propiedad deseada. La preparación de muchos compuestos relacionados en una reacción simple reduce mucho y simplifica el número de procesos de exploración que necesitan ser llevados a cabo. La exploración para las propiedades físicas apropiadas puede hacerse por métodos convencionales. La diversidad en la biblioteca puede crearse en una variedad de diferentes niveles. Por ejemplo, el substrato de grupos arilo utilizados en las reacciones combinatorias pueden variarse en términos del núcleo de la porción arilo, por ejemplo, una variedad en términos de la estructura anular, y/o pueden variarse con respecto a los otros sustituyentes. Una variedad de técnicas están disponibles en la técnica para generar bibliotecas combinatorias de pequeñas moléculas orgánicas tal como los inhibidores objeto. Véase, por ejemplo, Blondelle et al. (1995) Trends Anal. Chem. 14:83; la Patente de los Estados Unidos 5,359,115 y 5,362,899 de Affymax: la Patente de los Estados Unidos 5,288,514 de Ellman: la Publicación del PCT WO 94/08051 de Still et al.; Chen et al. (1994) JACS 116:2661: Kerr et al. (1993) JACS 115:252; publicaciones del PCT WO92/10092, WO93/09668 y WO91/07087; y la publicación del PCT WO93/20242 de Lerner et al.). Por consiguiente, puede sintetizarse una variedad de bibliotecas en el orden de aproximadamente 100 a 1,000,000 o más diversómeros del inhibidor objeto y explorados para una actividad o propiedad particular. A) Caracterización Directa Una tendencia de crecimiento en el campo de la química combinatoria es explotar la sensibilidad de las técnicas tales como espectrometría de masas (MS), por ejemplo, que puedan utilizarse para caracterizar cantidades sub-femtomolares de un compuesto, y para determinar directamente la constitución química de un compuesto seleccionado de una biblioteca combinatoria. Por ejemplo, cuando la biblioteca es proporcionada en una matriz de soporte insoluble, poblaciones discretas de compuestos pueden liberarse primero del soporte y caracterizarse por MS. En otras modalidades, como parte de la técnica de preparación de la muestra por MS, tales técnicas de MS como MALDI pueden utilizarse para liberar un compuesto de la matriz, particularmente cuando un enlace lábil es utilizado originalmente para atar el compuesto a la matriz. Por ejemplo, una perla o glóbulo seleccionado de una biblioteca puede irradiarse en una etapa de MALDI para liberar el diversómero de la matriz, y ionizar el diversómero para análisis por MS. B) Síntesis de Mu Iticlavija Las bibliotecas del método objeto pueden tomar el formato de biblioteca multiclavija. Brevemente, Geysen y co-trabajadores (Geysen et al. (1998) PNAS 81:3998-4002) introducen un método para generar bibliotecas compuestas por una síntesis paralela en sujetadores de polietileno tamizado con ácido poliacrílico colocados en el formato de placa microtituladora. La técnica de Geysen puede utilizarse para sintetizar y explorar miles de compuestos por semana utilizando el método multiclavija, y los compuestos atados pueden reutilizarse en muchos ensayos. Porciones enlazadoras apropiadas pueden también anexarse a las clavijas de manera que los compuestos puedan disociarse de los soportes después de la síntesis para valoración de pureza y otra evaluación (c.f. Bray et al. (1990) Tetrahedron Lett 31:5811-5814; Valerio et al. (1991) Anal Biochem 197:168-177; Bray et al. (1991) Tetrahedron Lett 32:6163-6166). C) Dividir-Acoplar-Recombinar En todavía otra modalidad, un biblioteca variada de compuestos pueden proporcionarse en un conjunto de glóbulos utilizando la estrategia de dividir-acoplar-recombinar (véase, por ejemplo, Houghten (1985) PNAS 82:5131-5135; y las Patentes de los Estados Unidos Nos. 4,631,211; 5,440,016; 5,480,971). Brevemente, como el nombre implica, en cada etapa de síntesis donde la degeneración es introducida en la biblioteca, los glóbulos se dividen en grupos separados iguales al número de diferentes sustituyentes que son agregados a una posición particular en la biblioteca, los diferentes sustituyentes acoplados en reacciones separadas, y los glóbulos recombinados en un fondo común para la siguiente iteración. En una modalidad, la estrategia dividir-acoplar-recombinar puede llevarse a cabo utilizando un análogo próximo al llamado primer método de "bolsita de té" desarrollado por Houghten, donde la síntesis del compuesto ocurre sobre resina sellada dentro de bolsas de polipropileno porosas (Houghten et al. (1986) PNAS 82:5131-5135). Los sustituyentes son acoplados a las resinas que llevan al compuesto al colorar las bolsas en soluciones de reacción apropiadas, mientras que todas las etapas comunes tales como lavado y desprotección de resinas se realizan simultáneamente en un recipiente de reacción. Al final de la síntesis, cada bolsa contiene un compuesto simple. D) Síntesis Química Paralela Dirigible Espacialmente Un esquema de síntesis combinatoria en la cual la identidad de un compuesto se da por sus ubicaciones en un substrato de síntesis es calificada una síntesis dirigible espacialmente. En una modalidad, el proceso combinatorio se lleva a cabo al controlar la adición de un reactivo químico en ubicaciones específicas sobre un soporte sólido. Por ejemplo, un método preferido para la síntesis combinatoria de compuestos de la invención, por ejemplo, análogos de aquellos mostrados en las Tablas 1 y 2, es la tecnología de SPOT descrita en EP0651762 con mejoramientos y aplicaciones descritos en la WO 00/12575, WO 01/18545 y einebe et al 2001 (Opiniones Actuales en Biotech 12: 59-64). Otro método preferido es proporcionado por el uso de microcanales para crear arreglos combinatorios de compuestos candidatos o variantes, por ejemplo como se describe en WO 99/67024 y WO 99/56878. Alternativamente, bibliotecas combinatorias en una forma dirigible espacialmente pueden generarse por síntesis de luz dirigida (Dower et al. (1991) Annu Rep Med. Chem 26:271-280; Fodor, S.P.A. (1991) Science 251:767; Patene de los Estados Unidos No. 5,143,854 de Pirrung et al. (1992); Jacobs et al. (1994) Trends Biotechnol 12:19-26). La resolución espacial de fotolitografía produce miniaturización. Esta técnica puede llevarse a cabo a través del uso de reacciones de protección/desprotección con grupos protectores fotolábiles. Los puntos clave de esta tecnología se ilustran en Gallop et al. (1994) J Med Chem 37:1233-1251. Un substrato de síntesis se prepara para acoplamiento a través de la unión covalente de enlazadores de amino protegidos con nitroveratriloxicarbonilo (NVOC) fotolábiles u otros enlazadores fotolábiles. Se utiliza luz para activar selectivamente una región especificada del soporte de síntesis para acoplamiento. La eliminación de grupos protectores fotolábiles por luz (desprotección) resulta en una activación de áreas seleccionadas. Después de la activación, el primero de un conjunto de análogos de aminoácidos, cada uno llevando un grupo protector fotolábil en los términos de amino, está expuesto en la superficie entera. El acoplamiento solamente ocurre en regiones que fueron dirigidas por luz en la etapa precedente. La reacción se Interrumpe, las placas se lavan, y el substrato se ilumina nuevamente a través de una segunda máscara, activando una región diferente para la reacción con un segundo bloque de estructuración protegido. El diseño de máscaras y la secuencia de reactivos define los productos y sus ubicaciones. Ya que este proceso utiliza técnicas de fotolitografía, el número de compuestos que pueden sintetizarse es limitado solamente por el número de sitios de síntesis que pueden dirigirse con resolución apropiada. La posición de cada compuesto es precisamente conocida; por lo tanto, sus interacciones con otras moléculas pueden valorarse directamente. En una síntesis química dirigida por luz, los productos dependen del diseño de iluminación y en el orden de adición de reactivos. Variando los diseños litográficos, muchos conjuntos diferentes de compuestos de prueba pueden sintetizarse simultáneamente; esta característica conduce a la generación de muchas estrategias de enmascaramiento diferentes. E) Bibliotecas Combinatorias Codificadas En todavía otra modalidad, el método objeto utiliza una biblioteca compuesta proporcionada con un sistema de marcación codificado. Un mejoramiento reciente en la identificación de compuestos activos a partir de bibliotecas combinatorias emplea sistemas de señalamiento o de índice de la química utilizando marcas que codifican originalmente las etapas de reacción, un glóbulo dado tiene que ser sometido y, por inferencia, la estructura se transporta. Conceptualmente, esta aproximación simula las bibliotecas que exhiben el fago, donde la actividad deriva de péptidos expresados, pero las estructuras de los péptidos activos se reducen a partir de la secuencia de ADN genómica correspondiente. La primera codificación de bibliotecas combinatorias sintéticas emplean ADN como el código. Se ha reportado una variedad de otras formas de codificación, incluyendo codificación con bio-oligómeros secuenciables (por ejemplo, oligonucleótidos y péptidos), y codificación binaria con marcas no secuenciables adicionales. 1) Marcación con bio-oligómeros secuenciables La causa de utilizar oligonucleótidos para codificar bibliotecas sintéticas combinatorias se describió en 1992 (Brenner et al. (1992) PNAS 89:5381-5383), y un ejemplo de tal biblioteca aparece en los siguientes años (Neddies et al. (1993) PENAS 90:10700- 0704). Un biblioteca combinatoria de nominalmente 77 (= 823,543) péptidos compuestos de todas las combinaciones de Arg, Gln, Phe, Lys, Val, D-Val y Thr (código de tres últimos aminoácidos), cada uno de los cuales se codifica por un dinucleótido específico (TA, TC, CT, AT, TT, CA y AC, respectivamente), se preparó por una serie de rondas alternantes de síntesis de péptido y oligonucleótido en un soporte sólido. En este trabajo, la funcionalidad que enlaza la amina en el glóbulo se diferenció específicamente con respecto a la síntesis de péptido u oligonucleótido al preincubar simultáneamente los glóbulos con reactivos que generan grupos OH protegidos para síntesis de oligonucleótido y grupos NH2 protegidos para síntesis de péptido (aquí, en una relación de 1:20). Cuando se completó, las marcas cada una consistía de 69-mers, 14 unidades de las cuales llevaron el código. La biblioteca unida al glóbulo se incubó con un anticuerpo marcado fluorescentemente, y los glóbulos que contienen anticuerpo ligado que son fluorescentes fuertemente se cosecharon por clasificación de la célula activada por fluorescencia (FACS). Las marcas de ADN se amplificaron por PCR y se secuenciaron, y los péptidos predispuestos se sintetizaron. Después de tales técnicas, pueden derivarse bibliotecas compuestas para uso en el método objeto, donde la secuencia de oligonucleótido de la marca identifica las reacciones combinatorias secuenciales que un glóbulo particular sometido, y por lo tanto proporciona la identidad del compuesto sobre el glóbulo. El uso de marcas de oligonucleótidos permite el análisis de marca exquisitamente sensible. Aún de esta forma, el método requiere elegir con cuidado de conjuntos ortogonales de grupos protectores requeridos para alterar la co-síntesis de la marca y el miembro de biblioteca. Además, la capacidad química de la marca, particularmente los enlaces anoméricos de fosfato y azúcar, pueden limitar la elección de reactivos y condiciones que pueden emplearse para la síntesis de bibliotecas no oligoméricas. En modalidades preferidas, las bibliotecas emplean enlazadores que permiten separación selectiva del miembro de biblioteca del compuesto de prueba para ensayo. Los péptidos que se han empleado como moléculas de marcación para bibliotecas combinatorias. Dos aproximaciones ejemplares se describen en la técnica, ambas de las cuales emplean enlazadores ramificados a la fase sólida con las cuales las hebras de codificación y ligantes son elaboradas alternativamente. En el primer enfoque (Kerr et al. (1993) JACS 115:2529-2531), la ortogonalidad en la síntesis se lleva a cabo al emplear una protección ácida-lábil para la hebra de codificación y protección lábil de base para la hebra compuesta. En una enfoque alternativo (Nikolaiev et al. (1993) Pept Res 6:161-170), se emplean enlazadores ramificados de tal manera que la unidad de codificación y el compuesto de prueba pueden ambos estar unidos al mismo grupo funcional en la resina. En una modalidad, un enlazador disociable puede colocarse entre el punto de ramificación y el glóbulo de maneta tal que la disociación libera una molécula que contiene tanto el código como el compuesto (Ptek et al. (1991) Tetrahedron Lett 32:3891-3894). En otra modalidad, el enlazador disociable puede colocarse de modo que el compuesto de prueba pueda separarse selectivamente del glóbulo, dejando el código detrás. Este último constructor es particularmente valioso debido a que permite la exploración del compuesto de prueba sin interferencia potencial de los grupos de codificación. Ejemplos en la técnica de disociación independiente y secuenciación de miembros de biblioteca del péptido y sus marcas correspondientes ha confirmado que las marcas pueden predecir exactamente la estructura del péptido. 2) Marcación no Secuenciable: Codificación Binaria Una forma alternativa de codificar la biblioteca del compuesto de prueba emplea un conjunto de moléculas de marcación electrofórica no secuenciales que se utilizan como un código binario (Ohlmeyer et al. (1993) PNAS 90:10922-10926). Marcas ejemplares son éteres alquílicos haloaromáticos que son detectables como sus éteres trimetilsilílicos a menores que los niveles femtomolares por cromatografía de gases de captura de electrones (ECGC). Las variaciones en la longitud de la cadena alquilo, así como la naturaleza y posición de los sustituyentes de haluro aromáticos, permite la síntesis de al menos 40 de tales marcas, que en principio puede codificar 240 (por ejemplo hacia arriba de 1012) moléculas diferentes. En el reporte original (Ohlmeyer et al. supra) las marcas se unen a aproximadamente 1% de los grupos amina disponibles de una biblioteca de péptido vía un enlazador de o-nitrobencilo fotodisociable. Este enfoque es conveniente cuando se preparan bibliotecas combinatorias de moléculas como péptido u otras moléculas que contienen amina. Sin embargo, se ha desarrollado un sistema más versátil que permite la codificación de esencialmente cualquier biblioteca combinatoria. Aquí, el compuesto podría unirse al soporte sólido vía el enlazador fotodisociable y la marca se une a través de un enlazador de éter de catecol vía la inserción de carbeno en la matriz del glóbulo (Nestler et al. (1994) J Org Chem 59:4723-4724). Esta estrategia de unión ortogonal permite la separación de miembros de biblioteca para ensayo en solución y decodificación posterior por ECGC después de la separación oxidativa de los conjuntos de marca. Aunque diversas bibliotecas de enlace de amida en la técnica emplean codificación binaria con las marcas electrofórlcas unidas a grupos amino, la unión de estas marcas directamente a la matriz del glóbulo proporciona mucho mayor versatilidad en las estructuras que pueden prepararse en bibliotecas combinatorias codificadas. Unidas en esta forma, las marcas y su enlazador son casi tan no reactivas como la matriz de glóbulo misma. Dos bibliotecas combinatorias codificadas binarias han sido reportadas cuando las marcas electrofóricas están unidas directamente a la fase sólida (Ohlmeyer et al. (1995) PNAS 92:6027-6031) y proporcionan dirección para generar la biblioteca de compuesto objeto. Ambas bibliotecas fueron construidas utilizando una estrategia de unión ortogonal en donde el miembro de biblioteca fue enlazado al soporte sólido por un enlazador fotolábil y las marcas fueron unidas a través de un enlazador disociable solamente por oxidación vigorosa. Debido a que los miembros de biblioteca pueden parcialmente fotoeluirse de manera repetitiva del soporte sólido, los miembros de biblioteca pueden utilizarse en ensayos múltiples. La fotoelución sucesiva también permite una estrategia de exploración iterativa de rendimiento muy alto: Primero, glóbulos múltiples se colocaron en placas microtituladoras de 96 cavidades; segundo, los compuestos son parcialmente separados y transferidos a placas de ensayo; tercero, un ensayo de enlace metálico identifica las cavidades activas; cuarto, los glóbulos correspondientes son redispuestos individualmente en nuevas placas microtituladoras; quinto, los compuestos activos simples son identificados; y sexto, las estructuras son decodificadas. Los compuestos peptidomiméticos de la presente invención pueden sintetizarse utilizando técnicas tales como aquellas descritas anteriormente para proporcionar una biblioteca grande, altamente diversa de inhibidores candidatos, debido a que los compuestos de la invención pueden prepararse fácilmente al formar sucesivamente una serie de enlaces carbono-heteroátomo, tal como enlaces de amida o urea, bajo condiciones ligeras. De esta forma, a partir de un conjunto discreto de subunidades tales como aminoácidos y subunidades que incorporan una subunidad de aril-1 ,2-diazaciclohexano bicíclica, un amplio intervalo de combinaciones y permutaciones de estas subunidades pueden sinterizarse fácil y rápidamente y probadas para la actividad biológica . Eiemplif icación La presente invención será ahora ilustrada por referencia a los siguientes ejemplos, los cuales establecen modalidades particularmente ventajosas. Sin embargo, debe observarse que estas modalidades son ilustrativas y no son para construirse como restringentes de la invención en ninguna forma. Ejemplo 1: Preparación de compuestos peptidomiméticos Se prepararon compuestos peptidomiméticos por montaje de boques de estructuración utilizando la química de péptido en fase sólida estándar (R.B. Merrifield, J. Am. Chem. Soc. 85, 2149-2154 (1963), G. Barany, R.B. Merrifield en The Peptides, Vol. 2 (eds. E. Gross, J. Meienhofer) 1-284 (Academic, New York; 1980)) en un sintetizador de péptido (ACT90, Advanced ChemTech) y purificados por cromatografía líquida de alto rendimiento (HPLC). La HPLC se condujo en un Cromatógrafo Vision (PerSeptive Biosystems). Se realizó HPLC analítica en modo de fase inversa utilizando columnas de C18 Bondapak en µ de Waters (0.46 x 25 cm, 5 µ o 0.39 x 30 cm, 10 µ) o columnas de Cíe Nucleosil (0.46 x 25 cm, 5 µ o 0.4 x 30 cm, 10 µ) a partir del Servicio de Cromatografía CS, Langerwehe, Alemania. Se realizó HPLC preparativa en modo de fase inversa utilizando columnas de C18 Bondapak en µ de Waters (1.9 x 30 cm, 10 µ) o columnas de C18 Nucleosil (2.0 x 30 cm, 10 µ) a partir del Servicio Cromatográfico CS. La cromatografía instantánea se realizó en Merck Keselgel 60 (0.063-0.200 mm, Art. No. 1.07734) obtenida de Merck Darmstadt, Alemania. Se realizó la cromatografía de capa fina (T.L.C.) en hojas de aluminio Silica gel 60 F254 (Art. No. 1.05554) obtenida de Merck Darmstadt, Alemania. Se determinaron los Espectros de RMN-1H a 200 MHz utilizando tetrametilsilano como estándar interno, y se expresaron como valores (d) de sustitución químicos en partes por millón con relación a tetrametilsilano y se asignaron utilizando s = singulete; m = multiplete; d = doblete; t = triplete; q = cuartete, sp = septena, br = amplio. Las siguientes abreviaturas son utilizadas: Boc = ter-butoxicarbonil, Fmoc = 9-fluorenilmetoxicarbonilo, Acm = acetamidometilo, Prm = propilamidometilo, DCM = diclorometano; DMF = N , N-d i metilformam ida , DMAP = 4-dimetilaminopiridina, HOBt = 1 -hidroxibenzotriazol; DIC = diisopropilcarbodiimida, TBTU = tetrafluoroborato de 2-(1-H-benzotriazol-1 -il)-1 , 1 ,3, 3-tetrametiluronio, TFH = tetrahidrofurano, DIPEA = diisopropiletilamina, TFA = ácido trifluoroacético, Me = metilo, Ac = acetilo, tBu = ter-butilo, Bn = bencilo, Ph = fenilo, h = hora(s), min = minuto(s), aq. = acuoso, r.t. = temperatura ambiente (18-26°C), Pmc = 2,2,5,7,8-pentametilcromano-6-sulfonilo, PyBOP = hexafluorofosfato de benzotriazol-1 -il-oxi-tris-pirrolidino-fosfonio, Z = benciloxicarbonilo, EDCI = 1 -etil-3 (3'-dimetilaminopropil)carbodi¡mida, DBU = 1,8-diazabiciclo[5.4.0]undec-7-eno, Cit = (L) citru I i n i I o , Cha = (L)-ciclohexilalaninilo, Gpg = (L)-N-amidino-4-piperidinilglicinilo, pPhPro = 2-(S)-3-(R)-3-fenilprolinilo, Tic = (L)-tetrahidroisoquinolina-3-carbonilo, azaTic = 3,4-dihidro-1 H-ftalazina-2-carbonilo, Disc = (D,L) 1 ,2-dihidro-2H-isoindolcarbonilo, Thiq = (L)-tetrahidroisoquinolina-l -carbonilo, Hbc = (D,L)-2,3,4,5-tetrahidro-1 H-benzo[d]azepina- 2-carbonilo, Haic = (2S, 5S)-5-amino-1 ,2,3,4,5,6,7-hexahidro-azepino[3,2, 1 -h,i]indol-4-ona-2-carbonilo, Odapdc = (1S, 9S)-9-aminooctahidro-6,10-dioxo-6H-piridazino-[1,2-a][1 ,2]diazepina-1-carbonilo, [ST (oxaz)L] = oxazol mimético de S-L, [S (imid)L] = imidazol mimético de S-L, A = Ala = (L)-alaninilo, R = Arg = (L)-argininilo, C = Cys = (L)-cisteinilo, F = Phe = (L)-fenilalaninilo, V = Val = (L)-valinilo, Met = (L)-metioninilo, Nle = (L)-norleucinilo, S = Ser = (L)-serinilo, L = Leu = (L)-leucinilo, alie = (L)-aloisoleucinilo, Nva = (L)-norvalinilo, Pya = (L)-piridilalaninilo, Orn = (L)-ornitinilo, Chg = (L)-ciclohexilglicinilo, Hfe = (L)-homofenilalaninilo, Thi = (L)-2-tienilalaninilo, Coa = (L)-ciclooctilalaninilo, Nba = (L)-norbornilalaninilo. Se preparó N-(2-feniletil)etanolamina a partir de cloruro de 2-feniletilo y etanolamina de acuerdo con el procedimiento de la literatura (J. Barbiere, Bu II . Soc. Chim. Fr. 5, 7, 1940, 621). Fueron adquiridos aminoácidos Fmoc comercialmente disponibles, HOBt, TBTU y PyBOP de Advanced ChemTech, Novabiochem, Bachem, Neosystems o RSP Amino Acid Analogues. Todos los distintos químicos y solventes se adquirieron de Merck Darmstadt o Sigma-Aldrich-Fluka y se utilizaron sin otra purificación. Se secó DMF sobre tamices moleculares 4 A durante al menos 4 semanas, se agitó sobre óxido de aluminio ácido durante 20 minutos para eliminar los indicios de aminas, y se filtró a través de un filtro de 0.2 µ?t? antes de utilizarse. La Tabla 1 (a, b y c) lista ciertos compuestos de acuerdo con las Fórmulas I y II que son ejemplares de esta invención. La Tabla 2 lista otros compuestos examinados por sus propiedades inmunomoduladores y otras, utilizando los ensayos descritos en la presente. Como será aparente para una persona experta en la técnica después de considerar esta descripción, los peptidomiméticos más cortos que los heptámeros establecidos en la Tabla 1 son útiles para ciertas aplicaciones. Como tal, los peptidomiméticos más cortos también forman parte de esta invención. Longitudes preferidas de estos péptidos más cortos son tetra- o pentámeros. Ejemplo 2: Preparación de Ac-Cha-Gpg-Tic-Nle-fiPhPro- SVioxazjLJNMez (P53) 2.1 Preparación de Fmoc-pPhPro-OH Se disolvieron 44.61 g de N-Acetil-trans-3(R)-fenil-(S) prolina-1 -(S)-feniletilamida (J. Y. L. Chung, J. T. Wasicak, W A. Arnold, C. S. May, A. N. Nadzan, M. W. Holladay, J. Org Chem. 1990, 55, 270-275) en 730 mi de HCI 8N y 360 mi de ácido acético. La solución resultante se calentó a 140°C durante 16 horas. Después de enfriar a temperatura ambiente, la solución se evaporó hasta sequedad. El residuo se recogió en 1000 mi de agua. La solución acuosa se lavó con acetato de etilo (3 x 200 mi) y se concentró bajo presión reducida a un volumen final de 300 mi. Se agregaron 400 mi de una solución de Na2C03 acuoso al 10% y la capa acuosa se lavó con acetato de etilo (4 x 200 mi). Se agregaron 200 mi de una solución de Na2CÜ3 acuoso al 10% y la solución se enfrió a 0°C. Se agregó en gotas una solución de 51.22 g de FmocCI en 300 mi de dioxano durante 1.5 horas y la suspensión resultante se agitó a temperatura ambiente durante 18 horas. El precipitado se eliminó por decantación. La solución acuosa se lavó con éter dietílico (1 x 200 mi) se acidificó con HCI 1 N a pH 3 y se extrajo con DC (2 x 300 mi). Se disolvió el precipitado en acetato de etilo. La solución resultante se extrajo con una solución de NaHC03 acuoso, saturado. La capa acuosa se acidificó con HCI concentrado a pH 3 y se extrajo con DCM. Las capas de DCM combinadas se secaron sobre Na2S04, se filtraron y evaporaron hasta sequedad. El residuo se preabsorbió en sílice y se purificó por cromatografía instantánea utilizando acetato de etilo / hexano / ácido acético 150:50:1 como eluyente. Las fracciones que contenían el producto deseado (verificadas por T.L.C.) se combinaron y evaporaron. El residuo resultante se recristalizó a partir de CHCI3 / hexano 1:2 para dar un rendimiento total de 24.92 g (55%). RMN-1 H ( C D C 13 ) : 1.95-2.15 (m, 1 H,- FmocNCH2CHH), 2.24-2.47 (m, 1 H, FmocNCH2CH_H), 3.43-3.85 (m, 3H), 4.06-4.58 (m, 4H), 6.2 (s amplio, 1H, COOH), 7.11-7.82 (m, 13 H, Hs arom.). 2.2 Preparación de ?[5(????)?(??3?)?] N Me2 2.2.1 Preparación de Dipéptido I: .0 g de N-(difenilmetilen)glicinato de metilo (M.J. O'Donnell, R. L. Polt, J. Org. Chem. 1982, 47, 2663-2666) se agregaron a una solución de 4.87 g de KOtBu en 100 mi de THF seco a -5°C y la solución resultante se agitó a 0°C durante 15 minutos. Esta solución se agregó sobre 3.5 horas a una solución de 7.1 mi de cloruro de ácido isobutírico en 300 mi de THF seco a -78°C. Después que se completó la adición, la mezcla de reacción color anaranjado de dejó alcanzar la temperatura ambiente. La solución color amarillo resultante se trató con 200 mi de HCI 1 N y la mezcla se agitó a temperatura ambiente durante 15 minutos. El solvente orgánico se evaporó bajo presión reducida. La capa acuosa se lavó con acetato de etilo (4 x 100 mi) y se evaporó hasta sequedad para dar 10.2 g de residuo. 11.66 g de Z-Ser(tBu)OH se disolvieron en 200 mi de THF seco bajo una atmósfera de Ar y la solución se enfrió a -18°C. Se agregaron 5.48 mi de trietilamina seguido por 5.2 mi de cloroformato de isobutilo. La suspensión se agitó a -18°C durante 15 minutos. El residuo anterior se agregó y se agregó en gotas una solución de 5.48 mi de trietilamina en 80 mi de THF seco durante 1 hora. Después que se completó la adición, la suspensión se agitó a -18°C durante 1.5 horas adicionales y luego se dejó alcanzar a la temperatura ambiente. Se agregó una solución de NaCI acuoso, saturado (200 mi) y la mezcla se agitó durante 15 minutos. La capa acuosa se separó y se extrajo con éter dietílico (3 x 100 mi). Las capas orgánicas combinadas se lavaron con amortiguador de fosfato de pH 7 (1 x 50 mi), se secaron sobre Na2S04, se filtraron y evaporaron hasta sequedad. El residuo se purificó por cromatografía instantánea utilizando acetato de etilo / hexano (1:3 ? 1:2) como eluyente para dar 14.4 g (84%) del compuesto deseado como una mezcla de diastereómeros. RMN- H (CDC ): 1.09-1.28 (m 15 H, CH e?. tBu), 3.05 (sp. 1 H, Cj±Me2), 3.38-3.45 (m, 1 H, CHJPtBu), 3.78. 3.79 (2 s, 3 H, OMe), 3.75-3.88 (s amplio, 1 H, CHHOtBu), 5.05-5.18 (m, 2 H, ChbPh), 5.38 (d, J = 6.8 Hz, 1 H, COCHCO), 5.70 (s amplio, 1 H, carbamato-NH), 7.25-7.42 (m, 5 H, Ph), 7.95 (s amplio, 1 H , amida-NH). 2.2.2 Preparación de Z[S(OtBu) * (oxaz)L]OMe 55.0 g de óxido de trifenilfosf ina y 31.3 mi de DBU se agregaron a una solución de 30.5 g del dipéptido I en 38 mi de tetracloruro de carbono seco, 38 mi de acetonitrilo seco y 38 mi de piridina seca a 0°C. La mezcla resultante se agitó a temperatura ambiente durante 20 horas. Los solventes se eliminaron bajo presión reducida y el residuo se coevaporó con tolueno (4 x 150 mi). El residuo resultante se disolvió en 900 mi de DCM. La solución se lavó con una solución de KHS04 acuoso (5 x 200 mi) y amortiguador de fosfato de pH 7 (2 x 150 mi), se secó sobre Na2S04> se filtró y evaporó hasta sequedad. El residuo se recogió en 450 mi de acetato de etilo y la suspensión se sonificó y se filtró. El filtrado se concentró a un volumen final de 100 mi. Se agregaron 300 mi de hexano y la suspensión resultante se sonificó nuevamente y se filtró.

El filtrado se evaporó hasta sequedad y el residuo se purificó por cromatografía instantánea utilizando acetato de etilo / hexano (1:3) como eluyente para dar 24.7 g (85%) del compuesto del título como un aceite color ligeramente amarillo. RMN-1 H (CDCI3): 1 07 (s, 9 H, tBu), 1.23-1.28 (m, 6 H, CHMea), 3.64 (dd, J = 1 H, 4.0, 9.2 Hz, 1 H, CHHOtBu), 3.68-3.85 (m, 2 H, CHMe¿, CHHOtBu), 3.90 (s, 3 H, OMe), 5.00-5.11 (m amplio, 1 H, CHNHCO), 5.13 (s, 2 H, CH2Ph), 5.79 (d amplio, J = 7.4 Hz, 1 H, NH), 7.25-7.41 (m, 5 H, Ph). 2.2.3 Preparación de Z[S(OtBu) (oxaz)L]NMe2 24.71 g de ZfSÍOtBu^oxazJLJO e se disolvieron en 200 mi de metanol y la solución se enfrió a 0°C. Se agregó en gotas una solución de 1.84 g de LiOH en 80 mi de agua durante 35 minutos. La mezcla se agitó a 0°C durante 1.5 horas y a temperatura ambiente durante 16 horas. La solución se neutralizó con HCI 1 N y metanol, se evaporó bajo presión reducida. La solución acuosa resultante se acidificó a pH 4 con HCI 1 N y se extrajo con DCM (4 x 100 mi). Las capas orgánicas combinadas se secaron sobre Na2S04, se filtraron y evaporaron. El residuo se disolvió en 250 mi de DMF seco y la solución se enfrió a 0°C. Después de la adición de 11.3 g de HOBt, la mezcla de 14.1 g de EDCI, 7.6 mi de trietiíamina, 13.8 g de clorhidrato de dimetilamina y otros 15.7 mi de trietiíamina se agitó durante 17 horas a temperatura ambiente. La solución se evaporó bajo presión reducida y el residuo resultante se coevaporó con tolueno (1 x 100 mi). El residuo se recogió en 400 mi de acetato de etilo, la suspensión resultante se filtró y el filtrado se lavó con una solución de KHS04 acuoso (3 x 100 mi), solución de NaHC03 saturado acuoso (2 x 100 mi) y amortiguador de fosfato a pH 7 (2 x 100 mi). La capa orgánica se secó sobre Na2S04, se filtró y evaporó. El residuo se purificó por cromatografía instantánea utilizando acetato de etilo / hexano (2:3) como eluyente para dar 23.3 g (92%) del compuesto del título como un aceite. R M N - 1 H (CDCI3): 1.07 (s, 9 H, tBu), 1.22-1.26 (m, 6 H, CHMe_2), 3.03, 3.18 (2 s, 2 x 3 H, NMe2), 3.51 (sp, J = 7.0 Hz, 1 H, CH_Me2), 3.65 (dd, J = 4.0, 8.8 Hz, 1 H, CHHOtBu), 3.78 (m amplio, 1 H, CHHOtBu), 4.98-5.09 (m amplio, 1 H, CHNHCO), 5.10-5.21 (m, 2 H, CtbPh), 5.70 (d amplio, J = 7.3 Hz, 1 H, NH), 7.21-7.45 (m, 5 H, Ph). 2.2.4 Preparación de H[S(OtBu) W(oxaz)L]NMe2 Una solución de 23.3 g de ?[8(????)?(??3?)?_] ?ß2 en 100 mi de etanol se agregó a una suspensión de 2.35 g de pd/C (10%) bajo una atmósfera de hidrógeno y la mezcla se agitó a temperatura ambiente durante 18 horas. La suspensión se filtró a través de Celite y el filtrado se evaporó hasta sequedad para dar 14.5 g (90%) del compuesto del título. RMN- H (CDCI3): 1.15 (s, 9 H, tBu), 1.27 (d, J = 7.0 Hz, 6 H, CHMJ32), 2.04 (s, 2 H, NH2), 3.04, 3.23 (2, s, 2 x 3 H, NMe2), 3.50 (sp, J = 7.0 Hz, 1 H, CHMe¿),_3.60 (dd, J = 6.5, 8.8 Hz, 1 H, CHHOtBu), 3.69 (dd, J = 4.4, 8.8 Hz, 1 H, CHHOtBu), 4.14 (dd, J = 4.4, 6.5, 1 H, CHNH2). 2.3 Preparación de resina de HpPhPro-2-clorotritilo Una solución de 7.4 g de Fmoc-pPhPro-OH en 120 mi de DC seco se agregó a 12.0 g de una resina de cloruro de 2-clorotritilo (0.83 mmol/g, Novabiochem). Se agregó DIPEA (3.0 mi) y la mezcla se agitó durante 10 minutos. Se agregaron 4.5 mi adicionales de DIPEA y la agitación se continuó durante 145 minutos. Se agregó metanol (10 mi), la mezcla se agitó otros 25 minutos. La resina se separó por filtración, se lavó con DCM (5 x 100 mi), metanol (2 x 100 mi) y DCM (4 x 100 mi). Se secó cuidadosamente una muestra pequeña y se desprotegió con DCM / piperidina (1:1) durante 30 minutos. La determinación fotométrica del aducto Fmoc-piperidina resultante (absorción a 301 mm) dio una carga de resina de 0.54 mmol/g. La resina restante se trató con 100 mi de DCM y 80 mi de piperidina a temperatura ambiente durante 160 minutos, se lavó con DCM (10 x 100 mi) y éter dietílico (4 x 80 mi) y se secó in vacuo para dar 14.37 g de resina de HpPhPro-2-clorotritilo. 2.4 Preparación de Ac-Cha-Gpg-Tic-Nle-pPhPro- [S (oxaz)L]NM2 (P53) Se preparó el peptidomimético por síntesis de fase sólida Fmoc comenzando con resina de cloruro de HpPhPro-2-clorotritilo (2416 mg, 1.3 mmol) en una recipiente de reacción de 50 mi ajustado con una frita en la parte inferior (Advanced ChemTech ACT90). Se llevó a cabo el aumento de volumen (hinchamiento) de la resina con DMF (4x1 minutos). La resina se desprotegió utilizando una solución de piperidina al 20% en DMF (1x3 minutos, 1x7 minutos, 20 mi cada una) y posteriormente se lavó con DMF (10x20 mi). Se llevó a cabo la acilación por la adición de FmocNleOH (1380 mg, 3.9 mmol), DMF (8.2 mi), HOBt (600 mg, 3.9 mmol), y DIC (0.61 mi, 3.9 mmol). El acoplamiento se dejó durante 18 horas, se lavó con DMF (7x20 mi), Se verificó una porción pequeña para terminación de la acilación utilizando la prueba de Chloranil (J. Blake, C.H. Li, Int. J. Peptide Protein Res., 1975, 7, 495). La resina se coronó utilizando una solución de anhídrido acético (2 M) y DMAP (0.1 M) en DMF (20 mi, 1x10 minutos) y posteriormente se lavó con DMF (12x20 mi). La resina se desprotegió, se lavó, se coronó y se lavó como en lo anterior y se acopló con FmocTicOH (1.56 g, 3.9 mmol), TBTU (1.26 g, 3.9 mmol) y DIPEA (0.71 mi, 4.16 mmol) en 8 mi de DMF durante 75 minutos. La resina se desprotegió, lavó, coronó y lavó como en lo anterior y se acopló con FmocGpg(Pmc)OH (1.35 g, 1.95 mmol), HOBt (0.3 g, 1.95 mmol) y DIC (0.305 mi, 1.95 mmol) en 7 mi de DMF durante 16 horas. La resina se desprotegió, lavó, coronó y lavó como en lo anterior y se acopló con FmocChaOH (1.54 g, 3.9 mmol), HOBt (0.6 g, 3.9 mmol) y DIC (0.61 mi, 3.9 mmol) en 8 mi de DMF durante 3 horas. Se llevó a cabo la desprotección y lavado como anteriormente y la coronación se realizó por tratamiento con anhídrido acético (2 M) y DMAP (0.1 M) en 20 mi de DMF durante 3 x 20 minutos. La resina se lavó con DMF (12x20 mi), MeOH (3x50 mi), Et20 (3x40 mi) y se secó in vacuo. La resina se trató con 33 mi de DCM / trifluoroetanol /ácido acético (8:1:1) a temperatura ambiente durante 45 minutos, se filtró y lavó con 65 mi de DCM / trifluoroetanol / ácido acético (8:1:1) y 100 mi de DCM. Se agregaron 250 mi de n-Hexano al filtrado, la suspensión resultante se evaporó hasta sequedad y el residuo se coevaporó con n-hexano (3 x 100 mi) para dar 1.188 g de Ac-Cha-Gpg(Pmc)-Tic-Nle- PhPro-OH crudo. El residuo se disolvió en 5 mi de DMF seco y se enfrió a 0°C. Después de la adición de 332 mg de HOBt, 642 mg de ?[3(????)?(??3?)?_]??ß2 y 415 mg de EDCI, la solución se agitó durante 1.5 horas a 0°C y otras 16 horas a temperatura ambiente. El solvente se eliminó bajo presión reducida y el residuo se disolvió en 80 mi de acetato de etilo. La solución se lavó con una solución de KHSO4 acuoso al 5% (1 x 40 mi), solución de NaHC03 acuoso, saturado y amortiguador de fosfato a pH 7, se secó sobre Na2S04, se filtró y se evaporó hasta sequedad. El residuo se trató con 20 mi de TFA / agua / tioanisol / 1 ,2-etanoditiol / trietilsilano 85.5:5:5:2.5:2 durante 3.7 horas a temperatura ambiente. El producto se precipitó al agregar 550 mi de éter dietíJico enfriado a la solución. La suspensión se centrifugó a 3300 rpm durante 10 minutos, el sobrenadante se desechó, el precipitado se resuspendió en éter enfriado, se centrifugó nuevamente y el sobrenadante se desechó nuevamente una vez. El precipitado se disolvió en acetonitrilo y TFA acuoso al 1%. Los solventes orgánicos se evaporaron bajo presión reducida y la solución acuosa se liofilizó. El producto crudo (931 mg) se purificó por HPLC utilizando un gradiente de acetonitrilo en TFA acuoso al 0.1% para producir 584 mg de Ac-Cha-Gpg-Tic-Nle-pPhPro-[SF(oxaz)L]N e2 puro x TFA. El producto se caracterizó por espectrometría de masas, MALDI-TOF EM: M/Z = 1064.57, (MH + ), 1102.53 (MK + ). Ejemplo 3: Preparación de Ac-Cha-Arg-Tic-Nle-fiPhPro-[SrioxazfLJNMez (P51) Se preparó este peptidomimético utilizando la metodología similar a aquella descrita para el Ejemplo 2.4 pero en una escala más pequeña utilizando menos resina, un recipiente de reacción de 25 mi y porciones de solvente de 7 mi para hinchamiento, lavado, coronación, desprotección y acoplamiento durante la síntesis de fase sólida. Se realizó el acoplamiento en pPhPro utilizando FmocNleOH, HOBt, DIC (3 equivalentes cada uno) durante 16 horas, se hizo el acoplamiento en Nle utilizando FmocTicOH (3 eq.), TBTU (3 eq.) y DIPEA (3.2 eq.) durante 1.5 horas, se hizo el acoplamiento en Tic utilizando FmocArg(Pmc)OH , HOBt, DIC (3 eq. cada uno) durante 16 horas, se hizo el acoplamiento en Arg utilizando FmocChaOH, HOBt, DIC (3 eq. cada uno) durante 3 horas. La solución de acoplamiento se llevó a cabo utilizando H[S(OtBu^(oxaz)L]N e2 (2 eq.), PyBOP (2 eq.) y 4-metilmorfolina (4 eq.) en DMF a 0°C durante 1 hora a temperatura ambiente durante 16 horas. La mezcla resultante se evaporó hasta sequedad y el residuo se trató con TFA / agua / tioanisol / 1 ,2-etanod¡tiol / trietilsilano 85.5:5:5:2.5:2 durante 3.5 horas a temperatura ambiente. El producto se precipitó al agregar 200 mi de éter dietílico enfriado. La suspensión se mantuvo a 0°C durante 1 hora y que se trató como se describió en el ejemplo 2.4. El producto crudo se purificó por HPLC utilizando un gradiente de acetonitrilo en TFA acuoso al 1%. MALDI-TOF EM: M/Z = 1038.70 (MH + ), 1060.36 (MNa + ), 1076.61 ( K+). Ejemplo 4: Preparación de Ac-Cha-Arg-Tic-Met-fiPhPro-[S* (oxaz)L]NMe2 (P33) & Ac-Cha-Gpg-Tic-Met-fiPhPro-[5?(??3?)?.]??ß2 (P60) Se preparó el peptidomimético P33 (Arg) como se describió en el Ejemplo 3, excepto que la resina se acopló en la etapa 1 de acoplamiento con FmocMetOH en lugar de FmocNleOH. MALDI-TOF EM: M/Z = 1057.00 (MH + ), 1079.01 (MNa + ), 1094.98 (MK + ). Se preparó el peptidomimético P60 (Gpg) como se describió en el Ejemplo 3, excepto que la resina se acopló en la etapa 1 de acoplamiento con FmocMetOH en lugar de FmocNleOH, y en la etapa 3 de acoplamiento con FmocGpg(Pmc)OH, HOBt, DIC (1.5 eq. cada uno) en lugar de FmocArg(Pmc)OH, HOBt y DIC (3 eq. cada uno). MALDI-TOF EM: M/Z = 1082.54 (MH + ), 1120.51 (MK+). Ejemplo 5: Preparación de Ac-Cha-Arg-Tic-Met(Q)-fiPhPro- [S*F(oxaz)L]NMe2 (P43) & Ac-Cha-Gpg-Tic-Met(O)-fiPhPro-[S (oxaz)L]NMe2 (P47) Se preparó el peptidomimético P43 (Arg) como se describió en el Ejemplo 3, excepto que la resina se acopló en la etapa 1 de acoplamiento con FmocMet(0)OH en lugar de FmocNleOH. MALDI-TOF EM: M/Z = 1072.57 (MH + ). Se preparó el peptidomimético P47 (Gpg) como se describió en el Ejemplo 3, excepto que la resina se acopló en la etapa 1 de acoplamiento con FmocMet(0)OH en lugar de FmocNleOH, y en la etapa 3 de acoplamiento con FmocGpg(Pmc)OH , HOBt, DIC (1.5 eq. cada uno) en lugar de FmocArg(Pmc)OH, HOBt y DIC (3 eq. cada uno). MALDI-TOF EM: M/Z = 1098.73 (MH + ), 1120.70 (MNa + ), 1136.68 (MK+). Ejemplo 6: Preparación de Ac-Cha-Arg-Disc-Met-fiPhPro-[S (oxaz)L]NMe2 (P40) & Ac-Cha-G pg- Disc-Met- ß?? Pro- [S* (oxaz)L]NMe2 (P41) Se hizo el peptidomimético P40 (Arg) como P33 en el Ejemplo 4 excepto que la resina se acopló en la etapa 2 de acoplamiento con FmocDisOH racémico en lugar deFmocTicOH. Los dos diastereómeros resultantes se separaron en la etapa final de HPLC utilizando un gradiente de acetonitrilo en TFA acuoso al 0.1%. Se aisló cada estereoisómero y se denotó como cualquier fracción "rápida" (se añadió como sufijo -1 en los nombres del compuesto) o la fracción "lenta" (se añadió como sufijo -2 en los nombres del compuesto), y se probó por separado en los ensayos biológicos posteriores. MALDI-TOF EM (P40-1): M/Z = 1042.67 (MH + ), 1058.66 (MNa + ), 1080.63 (MK+). MALDI-TOF EM (P40-2): M/Z = 1042.69 (MH + ), 1058.66 (MNa + ), 1080.62 (MK + ). Se preparó el peptidomimético P41 (Gpg) como P60 en el Ejemplo 4 excepto que la resina se acopló en la etapa 2 de acoplamiento con FmocDisOH racémico en lugar deFmocTicOH. Los dos diastereómeros resultantes se separaron en la etapa final de HPLC utilizando un gradiente de acetonitrilo en TFA acuoso al 0.1%. Se aisló cada estereoisómero y se denotó como cualquier fracción "rápida" (se añadió como sufijo -1 en los nombres del compuesto) o la fracción "lenta" (se añadió como sufijo -2 en los nombres del compuesto), y se probó por separado en los ensayos biológicos posteriores. MALDI-TOF EM (P41-1): M/Z = 1068.43 (MH + ), 1106.38 (MK + ). MALDI-TOF EM (P41-2): M/Z = 1068.42 (MH + ), 1106.36 (MK + ). Ejemplo 7: Preparación de Ac-Cha-Gpg-Tic-Nle-NHCH2CH2Ph (P69) & Ac-Cha-Arg-Tic-Nle-NHCH2CH2Ph (P82) 7.1 Preparación de resina de HNIe-2-clorotritilo Se preparó la resina utilizando la metodología similar a aquella descrita en el Ejemplo 2 etapa 2.3 de FmocNleOH (4.37 g) y resina de cloruro de 2-clorotritilo (7.45 g, 0.83 mmol/g, Novabiochem) para producir 7.77 g de resina de H le-2-clorotritilo (carga: 0.50 mmol/g). 7.2- Preparación de Ac-Cha-Gpg(Pmc)-Tic-N le-OH Se prepararon los peptidomiméticos utilizando la metodología similar a aquella descrita para el Ejemplo 1.4 mediante la desprotección y acoplamiento utilizando resina de HNIe-2-clorotritilo (2.52 g). Se realizó el acoplamiento en Nle utilizando TBTU (1.09 g, 1.35 mmol), DI PEA (0.62 mi, 1.44 mmol) y FmocTicOH (1.36 g, 1.35 mmol) eh 7 mi de DMF con un tiempo de acoplamiento de 2.5 horas. Se llevó a cabo el acoplamiento de Tic utilizando FmocGpg(Pmc)OH (1.17 g, 0.68 mmol), HOBt (0.26 g, 0.68 mmol) y DIC (0.27 mi, 0.68 mmol) en 6 mi de DMF durante 17 horas y se hizo el acoplamiento en Gpg con FmocChaOH (1.34 g, 1.35 mmol), HOBt (0.52 g, 1.35 mmol) y DIC (0.53 mi, 1.35 mmol) en 6 mi de DMF durante 2.5 horas. La terminación del acoplamiento se verificó por la prueba de Kaiser o la prueba de Chloroanil, respectivamente (E. Kaiser, et al. (1970) Anal. Biochem. 34, 595; J. Blake, C.H. Li, Int. J. Peptide Protein Res., 1975, 7, 495). Después de la acetilación final, se aisló la disociación y evaporación de la resina (análogo al ejemplo 1.4) 1.59 g de Ac-Cha-Gpg(Pmc)-Tic-N le-OH crudo. 7.3 Preparación de Ac-Cha-Gpg-Tic-Nle-NHCH2CH2Ph (P69) Una solución de Ac-Cha-Gpg(Pmc)-Tic-Nle-OH (730 mg, 0.78 mmol) en 5 mi de DMF seco se trató con HOBt (239 mg, 1.56 mmol), PyBOP (812 mg, 1.56 mmol) y 2-Feniletilamina (0.45 mi, 3.65 mmol) a 0°C. La reacción se agitó a 0°C durante 1.5 horas y a temperatura ambiente durante 13 horas. El solvente se evaporó bajo presión reducida y el residuo se trató con 10 mi de TFA / agua / tioanisol / 1 ,2-etanoditiol / trietilsilano 85.5:5:5:2.5:2 durante 4 horas a temperatura ambiente. El producto se precipitó al agregar 500 mi de éter dietílico enfriado a la solución. La suspensión se centrifugó a 3300 rpm durante 10 minutos, el sobrenadante se desechó, el precipitado se resuspendió en éter enfriado, se centrifugó nuevamente y el sobrenadante se desechó nuevamente una vez. El precipitado se disolvió en acetonitrilo y TFA acuoso al 0.1%. Los solventes orgánicos se evaporaron bajo presión reducida y la solución acuosa se liofilizó. El producto crudo (767 mg) se purificó por HPLC utilizando un gradiente de acetonitrilo en TFA acuoso al 0.1% para producir 256 mg de Ac-Cha-Gpg-Tic-Nle-NHCH2CH2Ph puro. El producto se caracteriza por espectroscopia de masas, MALDI-TOF EM: M/Z = 771.310 (MH + ), 793.286 (MNa + ), 809.257 (MK + ). Se preparó el peptidomimético P82 utilizando la metodología similar a aquella descrita en el Ejemplo 3 pero utilizando resina de HNIe-2-clorotritilo (Ejemplo 7.1) en lugar de resina de cloruro de HpPhPro-2-clorotritilo. Se hizo el acoplamiento en Nle utilizando FmocTicOH (3 eq.), TBTU (3 eq.) y D I PEA (3.2 eq.) durante 1.5 horas, se hizo el acoplamiento en Tic utilizando FmocArg(Pmc)OH, HOBt, DIC (3 eq. cada uno) durante 14 horas, se hizo el acoplamiento en Arg utilizando FmocChaOH, HOBt, DIC (3 eq. cada uno) durante 3 horas. Se llevó a cabo el acoplamiento de la solución utilizando N-(2-Feniletil)amina (4 eq ), HOBt (2 eq.) y PyBOP (2 eq.) en DMF a 0°C durante 1 hora y a temperatura ambiente durante 15 horas. La mezcla resultante se trató como se describió en el Ejemplo 3. El producto crudo se purificó por HPLC utilizando un gradiente de acetonitrilo en TFA acuoso al 0.1%. MALDI-TOF EM: M/Z = 745.61 (MH + ), 767.56 (MNa + ). Ejemplo 8: Preparación de Ac-Cha-Arg-Tic-Nle-N(Me)Bn (P71) & Ac-Cha-Gpg-Tic-Nle-N(Me)Bn (P74) Se preparó el peptidomimético P71 (Gpg) como P82 en el Ejemplo 7, excepto que se hizo reaccionar Ac-Cha-Arg(Pmc)-Tic-Nle-OH crudo con N-metilbencilamina (4 eq.) en lugar de N-(2-feniletil)amina. La HPLC utilizando un gradiente de acetonitrilo en TFA acuoso al 0.1% produjo el producto deseado. MALDI-TOF EM: M/Z = 745.56 (MH + ), 783.49 (MK + ).

Se preparó el peptidomimético P74 (Gpg) como P69 en el Ejemplo 7, excepto que se hizo reaccionar Ac-Cha-Arg(Pmc)-T¡c-Nle-OH crudo con N-metilbencilamina (4 eq.) en lugar de 2-feniletilamina. La HPLC utilizando un gradiente de acetonitrilo en TFA acuoso al 0.1% produjo el producto deseado. MALDI-TOF EM (P41): M/Z = 771.63 (MH + ), 793.63 (MNa + ). Ejemplo 9: Preparación de Ac-Cha-Arg-Disc-Nle-N(Me)Bn (P72) & Ac-Cha-Gpg-Disc-Nle-N(Me)Bn (P76) Se preparó el peptidomimético P72 utilizando la metodología similar a aquella descrita para P71 en el Ejemplo 8, excepto que utilizando FmocDiscOH racémico en lugar de FmocTicOH en la etapa 1 de acoplamiento. Los dos diastereómeros resultantes se separaron en la etapa final de HPLC utilizando un gradiente de acetonitrilo en TFA acuoso al 0.1% y se denotó como se describió en el Ejemplo 6. MALDI-TOF EM (P72-1): M/Z = 731.57 (MH + ), 753.55 (MNa + ), 769.52 (MK + ). MALDI-TOF EM (P72-2): M/Z = 731.56 (MH + ), 753.55 (M Na + ), 769.52 (MK + ). Se preparó el peptidomimético P76 utilizando la metodología similar a aquella descrita para P72 en el Ejemplo 9, excepto que utilizando FmocGpg(Pmc)OH , HOBt, DIC (1.5 eq. cada uno) en lugar de FmocArg(Pmc)OH, HOBt, DIC (3 eq. cada uno) en la etapa 2 de acoplamiento. Los dos diastereómeros resultantes se separaron en la etapa final de HPLC utilizando un gradiente de acetonitrilo en TFA acuoso al 0.1% y se denotó como se describió en el Ejemplo 6.1. MALDI-TOF EM (P76-1): M/Z = 757.31 (MH + ), 779.27 (MNa + ), 795.24 (MK + ). MALDI-TOF EM (P76-2): M/Z = 757.37 (MH + ), 779.34 (MNa + ), 795.31 ( K + ). Ejemplo 109: Preparación de Ac-Cha-Arg-Tic-Met-NH2 (P1) & Ac-Cha-Gpg-Tic-Met-NH2 (P67) 10.1 Preparación de resina de FmocMet-Rinkamida Se preparó resina de FmocMet-Rinkamida por síntesis de fase sólida Fmoc iniciando con 3.65 g de resinas de Fmoc-Rinkamida (0.59 mmol/g, Novabiochem) en un recipiente de reacción de 50 mi ajustado con una frita en la parte inferior (Advanced ChemTech ACT90). Se llevó a cabo el aumento de volumen (hinchamiento) de la resina por tratamiento de la resina con DMF (4x1 minutos). La resina se desprotegió utilizando una solución de piperidina al 20% en DMF (1x3 minutos, 1x7 minutos, 20 mi cada una) y posteriormente se lavó con DMF (10x20 mi). Se llevó a cabo la acilación por la adición de FmocMetOH (2.4 g, 3 eq.), DMF (10 mi), HOBt (990 mg, 3 eq.), y DIC (1.01 mi, 3 eq.) y DMAP (260 mg, 0.1 eq.). El acoplamiento se dejó durante 4 horas y la resina se lavó con DMF (7x20 mi). Una muestra pequeña se secó cuidadosamente y se desprotegió con DCM / piperidina (1:1) durante 30 minutos. La determinación fotométrica del aducto Fmoc-piperidina resultante (absorción a 301 nm) dio una carga de resina de 0.43 mmol/g. La resina restante se coronó utilizando una solución de anhídrido acético (2 M) y DMAP (0.1 M) en DMF (20 mi, 1x10 minutos) y se lavó posteriormente con DMF (12x20 mi), metanol (3 x 40 mi) y éter dietílico (3 x 40 mi), y se secó ¡n vacuo para producir 3.9 g de resina de FmocMet-Rinkamida. 10.2 Preparación de Ac-Cha-Arg-Tic-Met-NH2 (P1) & Ac-Cha-Gpg-Tic-Met-NH2 (P67) Se preparó el peptidomimético P1 utilizando síntesis de fase sólida Fmoc iniciando con la resina de Fmoc et-Rinkamida utilizando el mismo protocolo como se describió para P51 en el Ejemplo 3, pero iniciando con una etapa de desprotección. Se realizó el acoplamiento en Met utilizando FmocTicOH (3 eq.), TBTU (3 eq.) y DIPEA (3.2 eq.) durante 1.5 horas, se hizo el acoplamiento en Tic utilizando FmocArg(Pmc)OH, HOBt, DIC (3 eq. cada uno) durante 16 horas, Se hizo el acoplamiento en Arg utilizando FmocChaOH, HOBt, DIC (3 eq. cada uno) durante 3 horas. Después de la acetilación final de Cha se lavó la resina con DMF (12x7 mi), MeOH (3x20 mi), 1 ,2-etanoditiol / trietilsilano 85.5:5:5.2.5:2 durante 3.5 horas a temperatura ambiente. La resina se separó por filtración, se lavó con TFA y el producto se precipitó del filtrado al agregar 200 mi de éter dietílico enfriado. La suspensión se mantuvo a 0°C durante 1 hora y se trató luego como se describió en el ejemplo 2.4. El producto crudo se purificó por HPLC utilizando un gradiente de acetonitrilo en TFA acuoso al 0.1%. MALDI-TOF E : M/Z = 659 (MH + ), 681 (MNa + ), 697 (MK + ).

Se preparó el peptidomimético P67 como P1 en el Ejemplo 10 excepto que se acopló la resina en la etapa 2 de acoplamiento con FmocGpg(Pmc)OH, HOBt, DIC (1.5 eq. cada uno) en lugar de FmocArg(Pmc)OH , HOBt, DIC (3 eq. cada uno). MALDI-TOF EM: M/Z = 685.29 (MH + ), 707.23 (MNa+), 723.23 (MK+). Ejemplo 11: Preparación de Ac-Cha-Arg-Disc-Met-NH2 (P12) & Ac-Cha-Gpg-Disc-Met-NH2 (P66) Se preparó el peptidomimético P12 como se describió para P1 en el Ejemplo 10, excepto para utilizar FmocDiscOH racémico en lugar de FmocTicOH en la etapa 1 de acoplamiento. Los dos diastereómeros resultantes se separaron en la etapa final de HPLC utilizando un gradiente de acetonitrilo en TFA acuoso al 0.1% y se denotó como se describió en el Ejemplo 6. MALDI-TOF EM (P12-1): M/Z = 645 (MH + ), 667 (MNa + ). MALDI-TOF EM (P12-2): M/Z = 645 (MH + ), 667 (MNa + ). Se preparó el peptidomimético P66 como se describió para P1 en el Ejemplo 10, excepto para utilizar FmocDiscOH, en lugar de FmocTicOH en la etapa 1 de acoplamiento y utilizar FmocGpg(Pmc)OH, HOBt, DIC (1.5 eq. cada uno) en lugar de FmocArg(Pmc)OH, HOBt, DIC (3 eq. cada uno) en la etapa 2 de acoplamiento. Los dos diastereómeros resultantes se separaron en la etapa final de HPLC utilizando un gradiente de acetonitrilo en TFA acuoso al 0.1% y se denotó como se describió en el Ejemplo 6. ALDI-TOF EM (P66-1): M/Z = 671.25 (MH + ). MALDI-TOF EM (P66-2): M/Z = 671.29 (MH + ). Ejemplo 12: Preparación de Ac-Cha-Arg-Tic-Met-fiPhPro-NH2 (P31) & Ac-Cha-Gpg-Tic-Met'fiPhProNH2 (P80) 12.1 Preparación de resina de FmocpPhPro-Rinkamida Se preparó la resina FmocpPhPro-Rinkamida por síntesis en fase sólida Fmoc como se describió para la resina FmocMet-Rinkamida en el Ejemplo 10.1 excepto para utilizar FmocpPhProOH en lugar de FmocMetOH en la etapa 1 de acoplamiento. 12.2. Preparación de Ac-Cha-Arg-Tic-Met- PhPro-NH2 (P31) & Ac-Cha-Gpg-Tic-Met- PhProNHz (P80) Se preparó el peptidomimético P31 utilizando síntesis de fase sólida Fmoc iniciando con resina de Fmoc-ß?? Pro-Rinkamida utilizando el mismo protocolo como se describió para P51 en el Ejemplo 3, pero iniciando con una etapa de desprotección. Se hizo el acoplamiento en pPhPro utilizando FmocMetOH, HOBt, DIC (3 eq. cada uno) durante 14 horas, se realizó el acoplamiento en Met utilizando FmocTicOH (3 eq.), TBTU (3 eq.) y DIPEA (3.2 eq.) durante 1.5 horas, se hizo el acoplamiento en Tic utilizando FmocArg(Pmc)OH, HOBt, DIC (3 eq. cada uno) durante 16 horas, se hizo el acoplamiento en Arg utilizando FmocChaOH, HOBt, DIC (3 eq. cada uno) durante 3 horas. Después de la acetilación final de Cha se trató la resina como se describió en el Ejemplo 10.2. El producto crudo se purificó por HPLC utilizando un gradiente de acetonitrilo en TFA acuoso al 0.1%, MALDI-TOF EM: M/Z = 832.64 (MH + ). Se preparó el peptidomimético P80 como P31 excepto para utilizar FmocGpg(Pmc)OH, HOBt, DIC (1.5 eq. cada uno) en lugar de FmocArg(Pmc)OH, HOBt, DIC (3 eq. cada uno) en la etapa 3 de acoplamiento. MALDI-TOF EM: M/Z = 859.19 (MH + ), 896.14 (MK + ). Ejemplo 13: Preparación de Ac-Cha-Arg-Tic-Nle-N(Bn)CH2CH20CH2CH20H (P98) & Ac-Cha-Gpg-Tic-Nle-N(Bn)CH2CH20CH2CH20H (P101) 13.1 : Preparación de 9H-fluoren-9-ilmetiléster de ácido 2-(2-bencil-[2-(2-hidroxi-etoxi)etil]-carbámico 2-(2-Aminoetoxi)-etanol (10 mi, 100 mmol) se disolvió en THF seco (80 mi). Se agregó benzaldehído (10.5 mi, 103 mmol) seguido por MS 4Á y la mezcla se agitó a temperatura ambiente durante 3.5 horas. La solución resultante se filtró y concentró bajo presión reducida para producir 17.41 g de un residuo aceitoso (89 mmol). Este residuo se disolvió en THF seco (180 mi) y la solución se enfrió a 0°C. Se agregó NaBH4 (98 mmol) y la mezcla se agitó a temperatura ambiente durante 3 horas. La reacción se enfrió rápidamente por la adición de HCI acuoso 5 N (70 mi). Se ajustó el pH a 11 por la adición de Na2C03 y la mezcla se extrajo con CH2CI2 (4 x). Los extractos orgánicos combinados se secaron sobre K2C03, se filtraron y concentraron bajo presión reducida para producir 15.3 g de 2-(2-Bencilaminoetoxi)-etanol, bastante puro para otra reacción. 2-(2-Bencilaminoetoxi)-etanol crudo (5.27 g, 27.0 mmol) se disolvió en dioxano (25 mi). Se agregó Na2C03 (100% en agua, 35 mi) y la mezcla se enfrió a 0°C. Después de la adición de FmocCI (7.81 g; 30.2 mmol) la mezcla se agitó durante 3.25 horas. La mezcla se concentró bajo presión reducida para eliminar el dioxano. La mezcla acuosa resultante se extrajo con CH2CI2 (3 x 75 mi). Los extractos orgánicos combinados se secaron sobre Na2S04, se filtraron y concentraron bajo presión reducida. El residuo se purificó por cromatografía instantánea utilizando acetato de etilo / hexano (1:1) como eluyente para dar 9.1 g del compuesto del título como un aceite. RMN-1 H (CDCI3): 3.05-3.35 (m, 3 H), 3.45-3.75 (m, 5 H), 4.20-4.30 (m, 1 H), 4.45-4.55 (m, 3 H), 4.69-4.68 (m, 1 H), 7.00-7.45 (m, 10H), 7.55-7.80 (m, 3 H). 13.2: Preparación de resina de FmocN(Bn)CH2CH2OCH2CH20-2-clorotritilo Se agregó THF (15 mi) a una resina de cloruro de 2-Clorotritilo (4.0 g, 1.2 mmol/g) y la mezcla se agitó durante 25 minutos. Se agregó FmocN(Bn)CH2CH20CH2CH20H (6.1 g, 14.7 mmol) en THF (25 mi) seguido por piridina (850 µ?, 10.5 mmol) y la mezcla se calentó a 65°C durante 15 horas. Se agregó MeOH (5 mi) y se continuó el calentamiento durante 35 minutos. La resina se filtró, se lavó con DMF (3 x), CH2CI2 (3 x), MeOH (3 x) y Et20 (3 x) para dar 5.0 g. Se secó cuidadosamente una muestra pequeña y se desprotegió con DCM / piperidina (1 :1) durante 30 minutos. La determinación fotométrica del aducto de Fmoc-piperidina resultante (absorción a 301 nm) dio una carga de resina de 0.45 mmol/g.

Se preparó el peptidomimético P98 utilizando la metodología similar a aquella descrita para el Ejemplo 24 mediante la desprotección y acoplamiento utilizando la resina de FmocN(Bn)CH2CH20CH2CH20-2-clorotritilo (4.93 g, 2.2 mmol), iniciando con una etapa de desprotección. Se realizó el acoplamiento en la resina de HN(Bn)CH2CH2OCH2CH20-2-clorotritilo utilizando HOBt (2.5 eq.), DIC (2.5 eq.) y FmocNleOH (2.5 eq.) durante 21 horas. Se realizó el acoplamiento en Nle utilizando TBTU (3 eq.), DI PEA (3.2 eq.) y FmocTicOH (3 eq.) en 12 mi de DMF con un tiempo de acoplamiento de 1.5 horas. Se llevó a cabo el acoplamiento en Tic utilizando FmocArg(Pmc)OH (3 eq.), HOBt (3 eq.) y DIC (3 eq.) en 15 mi de DMF durante 20 horas y se hizo el acoplamiento en Arg con FmocChaOH (3 eq.), TBTU (3 eq.) y DI PEA (3.2 eq.) en 15 mi de DMF durante 1.5 horas. Después de la acetilacion final, se lavó la resina con DMF (3 x), MeOH (3 x) y Et20 (3 x) para dar 6.67 g. Se trató la resina con 50 mi de TFA / agua / tioanisol / ,2-etanoditiol / trietilsilano 85.5:5:5:2.5:2 durante 3.5 horas a temperatura ambiente. La resina se separó por filtración, se lavó con TFA y el filtrado se concentró bajo presión reducida. El producto se precipitó al agregar 450 mi de éter dietílico enfriado al residuo. La suspensión se centrifugó a 3300 rpm durante 10 minutos, el sobrenadante se desechó, el precipitado se resuspendió en éter enfriado, se centrifugó nuevamente y el sobrenadante se desechó nuevamente una vez. El precipitado se disolvió en acetonitrilo y TFA acuoso al 0.1%. Los solventes orgánicos se evaporaron bajo presión reducida y la solución acuosa se liofilizó para dar 1.38 g de producto crudo. De este producto se purificaron 300 mg por HPLC utilizando un gradiente de acetonitrilo en TFA acuoso al 0.1% para producir 209 mg de P98 puro. MALDI-TOF EM: M/Z = 819.19 (MH + ). Se preparó el peptidomimético P101 como P98 excepto para utilizar FmocGpg(Pmc)OH, HOBt, DIC (1.5 eq. cada uno) en lugar de FmocArg(Pmc)OH; HOBt, DIC (3 eq. cada uno) en la etapa 3 de acoplamiento. MALDI-TOF' EM: M/Z = 845.39 (MH + ), 867.38 (MNa + ), 883.36 (MK + ). Ejemplo 14. Enlace competitivo de compuestos a proteínas de MHC-IÍ DR4Dw4 y DR1 Se probó el enlace competitivo de los compuestos peptidomiméticos (1 nM - 100 µ?) en DR4Dw4 (DRA1*0101 DRB1*0401), DR1 (DRA1*0101 DRB1*0101) y DR4Dw14 (DRA1*0101 DRB1*0404) utilizando 6-(biotinamido)-hexanoil-YAAFRAAASAKAAA-NH2 como péptido indicador siguiendo el protocolo general por Ito et al. (Exp. Med. 1996; 183: 2635-2644), y Siklodi et al. (Human Immunology 1998; 59: 463-471) con algunas modificaciones. Una serie de 10 veces de dilución de compuestos (4 nM - 400 µ?) en 25% (v/v) de DMSO/fosfato de sodio 50 mM, cloruro de sodio 150 mM, pH 7.5 (PBS) se preparó en una placa de polipropileno de 96 cavidades bloqueada con BSA/PBS al 1% durante 1 hora a temperatura ambiente. Las mezclas de interacción del compuesto de MHC se prepararon en una placa de polipropileno de 96 cavidades similarmente bloqueada como sigue; a 40 µ? de amortiguador 2x (PBS, 50 mM, pH 7.5, 2% (p/v) NP-40, 3.2 mM EDTA, 6.25% de cóctel inhibidor de proteasa: 0.32 g/l de Quimiostatina, Antidolor, Pepstatina A, inhibidor de tripsina de soya y Leupeptina cada uno) se dieron 10 µ? 0.8 µ? de péptido indicador, 20 µ? de solución del compuesto de la dilución apropiada y 10 µ? de MHC-II DRA1*0101 DRB1*0401 (0.6 g/l), DRA1*0101 DRB1*0101 (0.03 g/l) o DRA1*0101 DRB1*0404 (0.015 g/l) en 0.5% (p/v) de NP-40/PBS. Las mezclas de interacción carentes del compuesto peptidomimético y tanto el compuesto peptidomimético y MHC-II se utilizaron como controles positivo y negativo, respectivamente. Todas las mezclas de interacción se establecen por duplicado y se incubaron durante 16 horas a temperatura ambiente. Placas FIA negras de alta capacidad de unión (Greiner, placas de captura) se revistieron previamente con 100 µ?/cavidad de mAb LB3.1 (0.01 g/l) en PBS durante la noche a 4°C, y bloqueada posteriormente con 200 µ?/cavidad de BSA/PBS al 1% (p/v) durante 1 hora a temperatura ambiente. Después de lavado con PBS, se transfirieron 60 µ? de las mezclas de interacción del compuesto de MHC-II de la placa de interacción a las cavidades apropiadas de la placa de captura y se incubaron durante 2 horas a 4°C. Las cavidades se lavaron seis veces con 200 µ?/cavidad de lavado DELFIA 1x enfriado (4 a 8°C) (Wallac-ADL-GmbH, Freiburg), incubado con 100 µ? de conjugado de Europio-estreptavidina enfriado (Wallac-ADL-GmbH, Freiburg; diluido 1/1000 con amortiguador de ensayo DELFIA) durante 30 minutos a 4°C, lavado nuevamente seis veces con lavado DELFIA 1x enfriado y, finalmente, incubado con 200 µ? de solución con aumento DELFIA enfriada (Wallac-ADL-GmbH, Freiburg) durante una hora a temperatura ambiente antes de leer la fluorescencia de europio de tiempo resuelto en ?ß* E3+: 340 nm y kem Eu3+: 613 (615) nm (Wallac Víctor2 1420 Multilabel Counter, Wallac- ADL-GmbH , Freiburg). La Tabla 3a muestra (en negritas) la afinidad mejorada de compuestos que contienen Gpg de la invención para ciertas proteínas MHCII medido por IC50 de acuerdo con este ejemplo. La Tabla 3b muestra las afinidades de los compuestos de acuerdo con la Fórmula I con las mismas proteínas de MHCII. La Figura 1 muestra el IC50 mejorado de P53 (que contiene Gpg) contra MHCII 0401 , un compuesto heptámero preferido de la invención, comparado con el péptido que contiene Arg (P51), y la Figura muestra el IC50 mejorado de P74 (que contiene Gpg) contra MHCII 0101 , un compuesto tetrámero preferido de la invención, comparado con el péptido que contiene Arg (P71). La Figura 3 muestra el IC50 mejorado de P69 (que contiene Gpg), un compuesto tetrámero preferido de la invención, comparado con el péptido que contiene Arg (P82). La Figura 4 muestra el IC5o mejorado de P74 (que contiene Gpg) contra 0401 , un compuesto tetrámero preferido de la invención, comparado con el péptido que contiene Arg (P71). La Figura 5 muestra el IC50 mejorado de P101 (que contiene Gpg), un compuesto tetrámero preferido de la invención, comparado con el péptido que contiene Arg (P98). Ejemplo 15: Enlace competitivo de compuestos a proteínas de MHC II expresados en células PRIESS y LG2 Enlace competitivo de los compuestos peptidomiméticos (4 nM - 400 µ?) se probaron en células Priess (DR4Dw4: DRA1*0101 DRB1*0401) y LG2 (DR1: DRAT0101 DRB1*0101) utilizando 6-(biot¡namido)-hexanoil-Cha-Arg-Tic-Met-NH2 como péptido indicador. Las células se incubaron en un medio RPMI 1640 (1x Gibco 42401-042), complementado con 10% de FCS inactivado con calor (Biowhittaker), 2 mM de L-Glutamina, 1% de solución madre de aminácidos no esenciales (Gibco 11140-035; 100x MEM), piruvato de sodio 1 mM, 0.1 mg/ml de Canamicina y 3.4 ppm de ß-mercaptoetanol. Para uso en el ensayo de enlace las células se resuspendieron en un medio que contiene FCA al 1% a una densidad de 2.5x106 células/ml. Se realizó el ensayo en placas microtituladoras de poliestireno de 96 cavidades estériles. Una serie de 10 veces de dilución de compuestos (16 nM - 1615 µ?) en FCS al 1% se prepararon soluciones madre del compuesto de 5 ó 10 mM en DMSO/agua al 10%. Se agregaron 50 µ? de cada dilución del compuesto por duplicado a 50 µ? de una solución de péptido indicador 16 µ? en FCS al 1%. Se inició el enlace de la célula al agregar 100 µ? de 2.5x106 células/ml de FCS al 1% para cada cavidad. Se incluyeron controles que contenían una concentración de DMSO presente en la solución con una concentración de compuesto más alta. Las células se incubaron a 37°C, C02 al 6%. Después de 4 horas se lavaron las células con 200 µ? de PBS y se Usaron en 200 µ? de amortiguador lisis (fosfato de sodio 50 mM, cloruro de sodio 150 mM* 1% (p/v) NP-40, yodoacetamida 25 mM, PMSF 1 mM, 3.1% de cóctel de inhibidor de proteasa al 3.1%: 0.32 g/l de Quimiostatina, Antidolor, Pepstatina A, inhibidor de tripsina de soya y Leupeptina cada uno, de pH 7.5) durante 10 minutos. Placas FIA negras de alta capacidad de unión (Greiner, placas de captura) se revistieron previamente durante la noche a 4°C con 100 µ?/cavidad de mAb LB3.1 (0.01 g/l) en fosfato de sodio 50 mM, cloruro de sodio 150 mM, pH 7.5 (PBS), y bloqueada posteriormente con 200 µ?/cavidad de BSA/PBS al 1% (p/v) durante 1 hora a temperatura ambiente. Después de lavado con PBS, se transfirieron 190 µ? del lisato celular a las cavidades apropiadas de la placa de captura y se incubaron durante 2 horas a 4°C. Las cavidades se lavaron seis veces con 200 µ?/cavidad de lavado DELFIA 1x enfriado (4 a 8°C) (Wallac-ADL-GmbH, Freiburg), incubado con 100 µ? de conjugado de Europio-estreptavidina enfriado (Wallac-ADL-GmbH, Freiburg; diluido 1/1000 con amortiguador de ensayo DELFIA) durante 30 minutos a 4°C, lavado nuevamente seis veces con lavado DELFIA 1x enfriado y, finalmente, incubado con 200 µ? de solución con aumento DELFIA enfriada (Wallac-ADL-GmbH, Freiburg) durante una hora a temperatura ambiente antes de leer la fluorescencia de europio de tiempo resuelto en Xex E3 + : 340 nm y em Eu3+: 613 (615) nm (Wallac Víctor2 1420 Multilabel Counter, Wallac-ADL-GmbH, Freiburg). La Tabla 3a muestra la afinidad mejorada de compuestos que contienen Gpg de la invención para ciertas proteínas MHCII expresadas en la superficie de las células medidas por IC50 de acuerdo con este ejemplo. La Tabla 3b muestra la afinidad de los compuestos de acuerdo con la Fórmula I con respecto a las mismas proteínas expresadas en las células. La Figura 6 muestra el IC50 mejorado para inhibición del enlace del péptido a la proteína MHC expresada en células LG2 de P47 (que contiene Gpg), un compuesto heptámero preferido de la invención, comparado con el péptido que contiene Arg (P43). La Figura 7 muestra el IC50 mejorado para inhibición del enlace de péptido a la proteína MHC expresada en células de Priess de P74 (que contiene Gpg), un compuesto tetrámero preferido de la invención, comparado con el péptido que contiene Arg (P71). Ejemplo 16. Estabilidad de compuestos en plasma sanguíneo Se determinó la estabilidad de los compuestos peptidomiméticos en ratas (Charles River Laboratories, Sulzfeld), ratones (Charles River Laboratories, Sulzfeld) y seres humanos (Bayerisches Rotes Kreuz, München) plasma sanguíneo (E.R. Garrett y M.R. Gardner, J Pharmaceutical Sciences 71 (1982) 14-25).

La Tabla 3a muestra (en negritas) la estabilidad mejorada de compuestos que contienen Gpg de la invención en el plasma sanguíneo, y la Figura 8 exhibe estabilidad mejorada (unidades arbitrarias) de: un compuesto heptámetro que contiene Gpg de la invención (P53) en plasma de ratas después de 24 horas comparadas con el equivalente que contiene Arg (P51); un compuesto tetrámero que contiene Gpg de la invención (P66-1) comparado con el equivalente que contiene Arg (P12-1); un compuesto tetrámero que contiene Gpg de la invención (P69) comparado con el equivalente que contiene Arg (P82); otros compuestos preferidos de la invención comparados con su equivalente que contiene Arg. La Tabla 3b muestra (en negritas) la estabilidad mejorada de los compuestos de acuerdo con la Fórmula I comparada con los compuestos con un grupo terminante NH2.

Se diluyeron soluciones madre del compuesto en plasma sanguíneo para dar una concentración de compuesto final de 5 µ? y las mezclas se incubaron a 37°C. A 0, 6 y 24 horas muestras de 1 mi se tiran y las proteínas del plasma se precipitaron por la adición de 3 mi de acetonitrilo p.a. y mezclado giratorio. El precipitado se forma en pelotitas por centrifugación a 2000 g durante 5 minutos. El sobrenadante se evaporó hasta sequedad y el residuo se reconstituyó en 400 µ? de acetonitrilo al 50%, TFA al 0.1% en agua. Después de la filtración (0.2 µ?-?) se analizaron 200 µ? de las soluciones por HPLC de fase inversa (PerSeptive Biosystems; Nucleosil 100-5 C18, 12.5 x 0.46 cm; 20-50% de acetonitrilo en TFA acuoso al 0.1% en 30 minutos), y la cantidad del compuesto restante se estimó por integración del pico apropiado. Se prepararon los controles de PBS para compuestos inestables por consiguiente. Ejemplo 17: Estabilidad de compuestos con respecto a la degradación por Catepsina B1 y D La estabilidad de los compuestos peptidomiméticos con respecto a la degradación lisosomal se examinó por incubación con Catepsina B1 (EC 3.4.22.1 de bazo de bovino; Sigma-Aldrich , Taufkirchen; disuelto en 10000 U/l en ddH20) y D (EC 3.4.23.5 de bazo de bovino; Sigma-Aldrich, Taufkirchen; disuelto en 10000 U/l en ddH20) durante cuatro horas a 37°C utilizando una concentración del compuesto de 50 µ? y una relación enzima/substrato de 0.4 U/pmol. Las muestras que contenían 25 ppm de alcohol 4-isopropilbencílico (IPBA; Sigma-Aldrich, Taufkirchen) como el estándar interno. Se preparó un amortiguador de ensayo al agregar 35 µ de IPBA al 1% en solució de DIVISO y 28 µ? de una solución madre de 10000 U/l de Catepsina B1 o Catepsina D a 14 mi de acetato de sodio 100 mM, EDTA 1 mM, DTT 1 mM, pH 5.00 o acetato de sodio 100 mM, pH 4.50, respectivamente. Se colocaron 8.8 µ? de una solución madre del compuesto 5 mM (O 4.4 µ? de un 10 mM) (en DMSO/agua al 10%) en un tubo Eppendorf de 1.5 mi. La reacción se inició al agregar 875 µ? de amortiguador de ensayo completamente complementado a cada tubo, mezclado giratorio e incubación a 37°C. En 0 y 4 horas se recogieron muestras de 400 µ? y la enzima se inactivo por la adición de TFA acuosa de 40 µ? al 50%. Las muestras se mantuvieron heladas a -20°C hasta que hubo un análisis por RP-HPLC (200 µ? de volumen de inyección; Nucleosil 100-5 C18, 12.5 x 4.6 cm; Gradiente: 20-50% de acetonitrilo en 30 minutos). La actividad de la enzima de Catepsina B1 y Catepsina D se controló por incubación de Ac-Cha-RAMSASL-NH2 y QYIKANSLFIGITELK, respectivamente, donde ambas se degradaron completamente en el transcurso de 4 horas. Compuestos co-eluyentes con el estándar interno durante el análisis de RP-HPLC se probaron sin el estándar como en Ejemplo 16. La Tabla 3 (a, b y c) muestra la estabilidad de los compuestos de la invención contra ciertas enzimas de Catepsina. Ejemplo 18: Inhibición in vivo de la activación de la célula T de ratones MHCII quiméricos 0401(DR4) y 0404(DR14) por co-inm unización Cepas de ratón DR4 y DR14 portan transgenes de MHC-II quiméricos que codifican los dominios de N-terminal de las moléculas DR respectivas (formando el sitio de enlace de péptido) y el resto (2nd dominios extracelulares, dominios de transmembrana e intracitoplásmicos) de la molécula lEd clase II murina. Estas cepas son deficientes- de otra clase II de murino, y de esta forma, todas las respuestas de la célula T ayudante son disparadas por péptidos presentados en el sitio de enlace de MHC-II humano respectivo. Como una prueba inicial in vivo de inhibidores objeto designados para unir a DR, Los ratones transgénicos DR se co-inmunizaron con una dosis pre-def inida. En esta estructura, tanto el antigeno como el compuesto son emulsionados juntos en un adyuvante de Freund completo (CFA), y de esta forma, se probó una terminación directa entre los dos componentes para la presentación por DR. La presentación del ensayo es la activación específica del antígeno ex vivo de células T del ganglio linfático regional explantado 9 días después de la coinmunización. En un experimento típico, la respuesta de dosificación de antígeno se investigó, y las curvas de ratones inmunizados con antígeno se compararon con aquellos a partir de ratones co-inmunizados con el comuesto de antígeno. Las curvas de respuesta de dosificación se generaron utilizando células del ganglio linfático combinadas en igual números de 2-3 ratones por grupo experimental. El sistema experimental también permite la valoración de la antigenicidad inherente del compuesto antagonista. Esto se hace por fijación de un estudio de respuesta de dosis de la misma cé|ula recolectada utilizando diferentes concentraciones del compuesto bajo investigación en lugar del antígeno. Como una control de especificidad, la respuesta para el Derivado de Proteína Purificada (PPD), el componente de proteína principal de CFA, se probó en la misma célula recolectada. La Figura 14 muestra el efecto inhibitorio in vivo mejorado de un compuesto tetrámero preferido de la invención (P69) comparado con el equivalente que contiene Arg (P82). La Figura 15 muestra el efecto inhibitorio in vivo de los compuestos tetrámero y heptámero preferidos de la invención. Un estimado del potencial inhibitorio total para un compuesto bajo investigación se tomó al calcular el medio % de inhibición del control sobre 3 concentraciones de antígeno; 6, 7, 20 y 60 ug. La Tabla 4 muestra estos estimados de potencial inhibitorio total de ciertos compuestos de la invención, junto con ciertos equivalentes que contienen Arg. Todos los compuestos que contienen Gpg tienen propiedades inmunosupresoras significativas en uno o ambos de los modelos in vivo. Los compuestos que contienen Gpg también muestran actividad mejorada o especificidad mejorada sobre el equivalente que contiene Arg. Además, los compuestos de acuerdo con la Fórmula I muestran actividad en este ensayo. 18.1 Preparación de compuestos para co-inmunización Se inyectaron compuestos de la invención como una Emulsión preparada utilizando CFA (Bacto Adyuvant Complete H37 Ra, Difco, Order-No. 3113-60); proteínas de 10 mg/ml en PBS, inhibidores de 5 µ en DMSO al 10%, Se colocaron CFA, PBS, antígeno e inhibidor en el barril de una jeringa de 5 mi (volumen total de no más de 1 ml_). La mezcla se sonificó a una amplitud de menos del 40% (30-35%) para durante dos períodos de 15 segundos. La emulsión parece que está dura y no líquida en este punto. Una gota de emulsión colocada sobre la superficie de agua no debe fundirse. La emulsión resultante se impulsa a través de la aguja en una jeringa de 1 mi con una aguja (Gr. 18, 26G x 1"), y son eliminadas las burbujas de aire. Se co-inmunizaron ratones con 50 pg de proteína y 210 nM del compuesto antagonista en una emulsión final de 100 µ? en la base de la cola. Antígeno + Compuesto y CFA se mezclan 1:1 vol/vol. Los mejores resultados son obtenidos utilizando ratones DR 4 inmunizados con HEL y ratones DR 14 inmunizados con OVA. 18.2 Inmunización de ratones Se inyectaron ratones en la base de la cola como sigue: Se sostuvo la cola de un ratón con el dedo pulgar y cordial, el dedo índice se colocó bajo la base de la cola del ratón. La aguja de la jeringa se insertó aproximadamente 1.5 cm de la base de la cola (extremo del pelo) bajo la piel y se impulsó aproximadamente 1 cm en la cola. Se inyectaron 100 µ? de emulsión en el ratón. Después de 9 días, se les dio muerte a los ratones y se eliminó el ganglio linfático. 18.3 Ensayo de proliferación de la célula T después de la co-inmunización El efecto inhibitorio de los compuestos candidato en la activación de la célula T se probó utilizando células T y células que presentan el antígeno aislados del ganglio linfático y ratones transgénicos DR4-IE quiméricos (Taconic, USA) previamente co-inmunizados con un compuesto más lisozima de huevo de gallina, o ratones transgénicos DR14-IE co-inmunizados con un compuesto más ovalbúmina de acuerdo con los procedimientos estándar (Adorini et al., 1988, Mueller et al., 1990; Current Protocols in Immunology, Vol. 2, 7.21 ; Ito et al., 1996). Aproximadamente 9 días (por ejemplo 8-10 días) después de la inmunización, se les dio muerte a los ratones y se eliminó el ganglio linfático, se realizó un ensayo de proliferación de la célula T de acuerdo con el Ejemplo 19.1, utilizando cantidades que incrementan el antígeno en células del ganglio linfático de ratones que han sido co-inmunizados con proteína de antígeno y compuesto antagonista. La línea de control se inmunizó sin compuesto. Se prepararon diluciones de antígeno y se distribuyeron en un MTP de 96 Cavidades en forma de U de acuerdo con el plan del ensayo a continuación. El PPD sirve como un control positivo para la proliferación de la célula T. Medio (control negativo) HL-1 de 100 µ? Células de 100 µ? (2.5 x 105 células) PPD (control positivo) Solución de PPD de 100 µ? (100 pg/ml)) Células de 100 µ? (2.5 x 105 células) Control inhibitorio Solución del compuesto de 100 µ? (100-3.125 µ?) Células de 100 µ? (2.5 x 1 O5 células) Antígeno-Titulación Solución del antígeno de 100 µ? Células de 100 µ? (2.5 x 105 células) Medio de lavado 97.5% de RPMI 1.5% de FCS 1% de Kanamicina (Solución madre 10 mg/ml ? final 0.1 mg/ml) Medio de HL-1 98% del Medio HL-1 (BioWittaker Europe Orden no. 77201) 1% de L-Glutamina (Solución madre 200 mM ?· final 2 mM) 1% de Kanamicina (Solución madre 10 mg/ml ? final 0.1 mg/ml) sin suero Soluciones madre HEL (Lisozima Grado III: De Clara de Huevo de Gallina; Sigma L-7011) 10 mg/ml de PBS OVA (Albúmina, Huevo de Gallina; Sigma A-2512) 4 mg/ml de PBS PPD (PPD de Tuberculina; Statens Serum Instituí; Orden no. 2391 ) 1 mg/ml (preparado para utilizarse) Soluciones para utilizarse HEL: Solución madre diluida 1:83 con medio HL-1 (120 µg/ml) ?· concentración final en cavidad de 30 Mg/ml. OVA: Solución madre diluida 1:48 con medio HL-1 (84 g/ml) ? final 21 µ?/ml. PPD: Solución madre diluida 1:10 con medio HL-1 (100 g/ml) ? final 25 g/ml. Ejemplo 19: Inhibición in vitro de la activación de la célula T por compuestos de la invención Se probaron propiedades inmunomoduladoras de compuestos bajo investigación utilizando un ensayo que mide la proliferación de la célula T. La Tabla 3 (a y b) muestran el IC50 (uM) y (%) de inhibición máximo de ciertos compuestos. La Figura 9 exhibe una curva de respuesta a la dosis que demuestra propiedades inmunosupresoras mejoradas medidas por un ensayo de activación de la célula T de P53 (que contiene Gpg), un compuesto heptámero preferido de la invención, comparado con el péptido que contiene Arg (P51). También se muestra una curva de respuesta a la dosis de otro compuesto de la invención (P41-1). La Figura 10 exhibe las curvas de respuesta a la dosis que demuestran las propiedades inmunosupresoras medidas por un ensayo de activación de la célula T de varios compuestos preferidos de la invención; P69, P74, P101 y P53. Los compuestos se probaron como sigue para inhibir la respuesta de la célula T proliferativa de células del ganglio linfático cebadas con antígeno de ratones que transportan un transgene clase II de ratón-humano químico con un sitio de enlace de péptido asociado con RA, y carece de moléculas clase II murinas (Muller et al., 1990; Woods et al., 1994; Protocolos Actuales en la Inmunología, Vol. 2, 7.21; Ito et al., 1996). Aquí, la inmunización se lleva a cabo in vivo, pero la inhibición y presentación son ex vivo. Se obtuvieron comercialmente ratones transgénicos que expresan moléculas MHC clase II con sitios de enlace de la molécula asociada con RA, DRB*0401. Estos ratones carecen de MHC clase II murina, y de esta forma, todas las respuestas Th son canalizadas a través de una molécula MHC clase II asociada con RA humana simple (Ito et al. 1996). Estos ratones transgénicos representan un modelo para probar antagonistas clase II humanos. 19.1 Ensayo de proliferación de la célula T El efecto inhibidor de los compuestos bajo investigación se probaron en la proliferación de la célula T medida utilizando células T quiméricas y células que presentan antígeno aisladas del ganglio linfático de ratones transgénicos 0401-IE quiméricos (Taconic, USA) previamente inmunizados con ovalbúmina de huevo de gallina (Ito et al. 1996) de acuerdo con procedimientos estándar. Se incubaron 1.5x105 células en 0.2 mi de cavidades de placas de cultivo tisular de 96 cavidades en presencia de ovalbúmina 30 ig por cavidad - concentración estimuladora máxima media) y una serie de dilución del compuesto bajo prueba (de aproximadamente 0.1 a 200 uM) en un medio HL-1 libre de suero que contiene 2 mM de L-glutamina y 0.1 g de Kanamicina durante tres días. La proliferación específica de antígeno se mide por la incorporación de 3H-metil-timidina (1 Ci/cavidad) durante las últimas 16 horas de cultivo (Falcioni et al., 1999). Se cosecharon células, y se midió la incorporación de 3H utilizando un contador de centelleo (TopCount, Wallac Finland). La inhibición de la proliferación de la célula T en el tratamiento con el compuesto puede observarse por comparación con las cavidades control que contiene el antígeno. Ejemplo 20: Inhibición de la secreción de IL-2 a partir de las células hibridomas de la célula T por compuestos de la invención. Los compuestos que contienen Gpg de la invención exhiben propiedades inmunomoduladoras sustanciales dentro de un ensayo que mide la secreción de IL-2 de las células T inmortalizadas. La Tabla 3a muestra el IC50 (uM) y (%) de inhibición máximo de los compuestos Gpg en este ensayo. La Tabla 3 b muestra actividad mejorada (en negritas) de compuestos tetrámeros de acuerdo con la Fórmula I comparado con aquellos que contienen un grupo terminante NH2. La Figura 11 exhibe una curva de respuesta a la dosis que demuestra las propiedades inmunosupresoras mejoradas medidas por la secreción de IL-2 de P41-1 (que contiene Gpg), un compuesto heptámero de la invención, comparado con el péptido que contiene Arg (P40-1), y la Figura 12 exhibe una curva de respuesta a la dosis que demuestra las propiedades inmunosupresoras mejoradas medidas por la secreción de IL-2 de P69 (que contiene Gpg), un compuesto tetrámero de la invención, comparado con el péptido que contiene Arg (P82). La Figura 13 muestra las propiedades inmunosupresoras de P53 (que contiene Gpg), un compuesto heptámero preferido de la invención comparado con un control de DMSO. Las propiedades inmunomoduladoras de los compuestos bajo investigación se investigaron por medición de la secreción de IL-2 de la línea celular hibridoma T-Hyb 1 estimulada utilizando células que presentan antígeno DR-transgénico (APC) bajo condiciones de estimulación de antígeno máximo medio. Se detectó secreción de IL-2 y se midió utilizando un método ELISA estándar proporcionado por el equipo IL-2 de ratón OptiEIA de Pharmingen Torrey Pine, CA, USA). Se aislaron las APC del bazo de ratones transgénicos 0401-IE quiméricos no inmunizados (Ito et al. 1996) de acuerdo con los procedimientos estándar. Se agregaron 1.5x105 APCs a 0.2 mi de cavidades de 96 cavidades en un medio RPMI que contiene los siguientes aditivos (todos de Gibco BRL y PAA): FCS al 10%, 2 mM de L-glutamina, 1% de aminoácidos no esenciales, 1 mM de piruvato de sodio y 0.1 g/l de kanamicina. Se agregó ovalbúmina de huevo de gallina a una concentración final de 200 pg/ml en un volumen final de 100 µ? del medio anterior, las células incubadas con este antígeno durante 30 minutos a 37°C bajo C02 al 6%. Se agregaron compuestos a cada cavidad en varias concentraciones (típicamente en un intervalo de 0.1 a 200 µ?), la placa incubada durante 1 hora a 37°C/C02 al 6% y 2x105 células T-Hyb agregadas para dar un volumen final de 200 µ? en el medio anterior. Después de la incubación durante 24 horas, se transfirió 100 µ? de sobrenadante a una placa ELISA (Nunc-lmmuno Píate MaxiSorp surface, Nunc, Roskilde, DK) previamente recubiertos con un Anticuerpo de Captura IL-2 <BD Pharmingen, Torrey Pine, CA, USA), la cantidad de 11-2 fue cuantificada de acuerdo con las direcciones del fabricante utilizando el equipo IL-2 de Ratón OptiEIA y la placa se lee utilizando un lector Víctor V (Wallac, Finlandia). Se calibró IL-2 secretada en pg/ml utilizando los estándares IL-2 proporcionados en el equipo. La línea hibridoma de la célula T T-Hyb1 se estabilizó por fusión de una variante negativa del receptor de la célula T de la línea timoma BW 5147 (ATCC) y células del ganglio linfático de ratones transgénicos 0401-IE quiméricos previamente inmunizados con ovalbúmina de huevo de gallina (Ito et al. 1996). Se seleccionó el clone T-Hyb1 para el ensayo ya que responde a la estimulación específica del antígeno con la secreción alta de IL-2. Ejemplo 21: Actividad ¡nmunomoduladora de compuestos de la invención dentro de modelos de enfermedad de ratón Son probados compuestos que muestran el mejor perfil (enlace, afinidad, estabilidad de proteasa, inhibición de la célula T in vitro e in vivo) para su potencial terapéutico en modelos de ratón transgénico de MHC-II de enfermedades autoinmunes, a saber, artritis inducida por colágeno (CIA) -un modelo para la artritis reumatoíde; y encefalomielitis autoinmune experimental (EAE) - un modelo para la esclerosis múltiple.

La CIA es inducida por inmunización con colágeno tipo II en ratones transgénicos HLA-DR1 como se describe por Rosloniec et al (J. Exp. Med. 1997; 185: 113). Después de comenzar la enfermedad, se trataron ratones con compuestos en la dosis tolerada máxima s.c. durante dos semanas, y el desarrollo de la enfermedad comparada con aquella en los ratones tratados con solvente únicamente como sigue: Día Tratamiento 1 Inmunización (C-II + CFA bovino) 19-40 Compuesto inyectado s.c. iniciando en el comienzo de la enfermedad 5x por semana durante 3 semanas Registro de la severidad de la enfermedad 1. Eritema e hinchazón media confinado a los tarsos o articulaciones de los tobillos 2. Eritema e hinchazón media que se extiende del tobillo a los tarsos 3. Eritema e hinchazón moderada que se extiende del tobillo a las articulaciones metatarsianas 4. Eritema e hinchazón severa que abarca el tobillo, piel, y dedos La Figura 16 muestra la eficacia de compuestos preferidos de la invención (P96, P53 y P74) en el modelo ratón CIA para artritis reumatoide comparado con el solvente como control. La EAE es inducida en ratones transgénicos DR4 por inyección de glicoproteína de oligodendrocito de mielina (MOG) como se describe por Ito et al. (1996). Después que comienza la enfermedad, se tratan los ratones con compuestos y se estudian como sigue a continuación: Día Tratamiento 0 Inmunización (MOG + CFA) 14-36 Compuesto inyectado s.c. iniciando en la inducción o comienzo de la enfermedad 5x por semana Registro de la enfermedad 1. Atonía de la cola 2. Debilidad del miembro trasero 3. Parálisis del miembro trasero 4. Parálisis del miembro trasero y debilidad del miembro delantero o parálisis 5. Moribundo La Figura 17 muestra la eficacia de compuestos preferidos de la invención (P69, P53 y P74) en el modelo de ratón EAE para prevención de esclerosis múltiple comparado con el solvente como control. La Figura 18 muestra la eficacia de compuestos preferidos de la invención (P69 y P53) en el modelo de ratón EAE para tratamiento de esclerosis múltiple comparado con el solvente como control. La Figura 19 muestra la eficacia de un compuesto que contiene Gpc preferido de la invención (P69) comparado con * el compuesto equivalente que contiene Arg (P82) en el modelo de ratón EAE de esclerosis múltiple. La eficacia del compuesto Gpg es superior en términos de tratamiento de la enfermedad que el compuesto Arg, no obstante es tratada en concentración media (125 nM) del compuesto Arg (250 nM). Ejemplo 22: Composiciones farmacéuticas Para seleccionar el compuesto más apropiado de la invención para entrar en otros experimentos y para valorar su adaptabilidad para uso en una composición terapéutica para el tratamiento de enfermedades del sistema inmune, se recolectaron datos adicionales. Tales datos para cada compuesto puede incluir la afinidad, reactividad, especificidad, valores IC50, para la inhibición de la secreción de IL-2 y de la proliferación de la célula T, como se estima in vitro, y modelos transgénicos DR de artritis reumatoide y esclerosis múltiple. La actividad de los compuestos de la invención pueden compararse contra terapias o terapéuticos previamente aceptados para un trastorno dado. Por ejemplo, un compuesto particular de la invención puede compararse contra un I nterferon-beta, una terapia aceptada para esclerosis múltiple. El compuesto que muestra afinidad apropiada, mejor especificidad y/o mayor inhibición de la proliferación de la célula T o secreción de IL-2, y alta eficacia en inhibir la artritis reumatoide y la esclerosis múltiple en modelos apropiados, debe elegirse para entrar en otros experimentos. Tales experimentos pueden incluyen, por ejemplo, perfil terapéutico y toxicología en animales y pruebas clínicas de fase I en seres humanos. Los compuestos de la invención pueden administrarse para uso terapéutico o profiláctico para animales de sangre caliente tales como seres humanos en la forma de composiciones farmacéuticas convencionales, un ejemplo tópico de los cuales incluyen los siguientes: Solución Inyectable: 0.01 a 100 mg de ingrediente activo se disolvió en hasta 2 mi de un vehículo de inyección acuosa para dar una concentración de ingrediente activo entre 0.01 y 100 mg/ml. El vehículo de inyección acuosa es amortiguado a un pH entre 5 y 8, a medida que sea necesario, utilizando un amortiguador farmacéuticamente aceptable (por ejemplo, fosfato o acetato) y contiene un agente que ajusta la tonicidad farmacéuticamente aceptable (por ejemplo, NaCI o dextrosa) agregado a la isotonicidad lograda. El vehículo puede opcionalmente contener también otros excipientes farmacéuticamente aceptables tales como agentes solubilizantes (por ejemplo, DMSO, etanol, propilenglicol , polietilenglicol, etc.) preservativos, y antioxidantes. El ingrediente activo puede típicamente ser un compuesto descrito anteriormente y puede convenientemente estar presente como una sal farmacéuticamente aceptable. El compuesto de la invención puede ser administrado junto con uno o más de otros ingredientes activos. Tales composiciones pueden ser un envase simple, una pildora, o una aplicación que contiene varios de tales ingredientes activos, o tal administración puede comprender administraciones secuenciales o repetidos de los ingredientes activos separados que incluyen un compuesto de la invención. Equivalentes Aquellos expertos en la técnica reconocerán, o son capaces de averiguar no más rutinas de experimentación, numerosos equivalentes para los compuestos y métodos de uso de los mismos descritos en la presente. Tales equivalentes son considerados para estar dentro del alcance de esta invención y son cubiertos por las siguientes reivindicaciones. Todas las patentes, solicitudes de patente publicadas y publicaciones citadas en la presente se incorporan por referencia como se establece totalmente en la presente.

Tabla 1. Compuestos que contienen Gpg de la invención a. Compuestos que contienen Gpg preferidos de invención.

# Pos.2 Secuencia P41-1 Gpg Ac-Cha-Gpg-Disc-Met-SPhPro-[S(oxaz)L]-NMe2 P41-2 Gpg Ac-Cha-Gpg-Disc-Met-BPhPro-[S(oxaz)L]-NMe2 P45-1 Gpg Ac-Cha-Gpg-Disc-Met-BPhPro-OH P45-2 Gpg Ac-Cha-Gpg-D¡sc-Met-BPhPro-OH P47 Gpg Ac-Cha-Gpg-T¡c-Met(0)-BPhPro-[S(oxaz)L]-N e2 P52 Gpg Ac-Phe-Gpg-Tic-Met(0)-BPhPro-[S(oxaz)L]-NMe2 P53 Gpg Ac-Cha-Gpg-Tic-Nle-BPhPro-[S(oxaz)L]-N e2 P54 Gpg Ac-Cha-Gpg-Tic-Nle-SPhPro-N(Me)CH2CH20H P55 Gpg Ac-Phe-Gpg-Tic-Nle-BPhPro-[S(oxaz)L]-N e2 P56 Gpg Ac-Phe-Gpg-Tic- e^PhPro-N( e)CH2CH20H P57 Gpg Ac-Hfe-Gpg-Tic-Nle-(iP Pro-[S(oxaz)L]-NMe2 P58 Gpg Ac-Thi-Gpg-T¡c-Nle-BPhPro-[S(oxaz)L]-NMe2 P59 Gpg Ac-Cha-Gpg-Tiolle-GPhPro-lS(oxaz)L]-NMe2 P60 Gpg Ac-Cha-Gpg-Tic-Met-fiPhPro-[S(oxaz)L]-NMe2 P61-1 Gpg Ac-Cha-Gpg-Disc-Nle-BPhPro-[S(oxaz)L]-N e2 P61-2 Gpg Ac-Cha-Gpg-Disc-Nle^PhPro-[S(oxaz)L]-NMe2 P62-1 Gpg Ac-Phe-Gpg-D¡sc-Met-fiPhPro-[S(oxaz)L]-NMe2 P62-2 Gpg Ac-Phe-Gpg-Disc-Met-BPhPro-[S(oxaz)L]-N e2 P63-1 Gpg Ac-Thi-Gpg-Disc- et-BPhPro-[S(oxaz)L]-N e2 P63-2 Gpg Ac-Thi-Gpg-Disc- et-BPhPro-[S(oxaz)L]-N e2 P64 Gpg Ac-Cha-Gpg-Disc-Met(0)-BPhPro-[S(oxaz)L]-NMe2 P65 Gpg Ac-Thi-Gpg-Disc-Met(0}-BPhPro{S(oxaz)L]-NMe2 P66-1 Gpg Ac-Cha-Gpg-Disc- et-NH2 P66-2 Gpg Ac-Cha-Gpg-D¡sc-Met-NH2 P67 Gpg Ac-Cha-Gpg-Tic-Met-NH2 P68 Gpg Ac-C a-Gpg-Tic-Nle-N(H)Bn P69 . Gpg Ac-Cha-Gpg-Tic-Nle-N<H)CH2CH2Ph P70 Gpg Ac-Cha-Gpg-Tic-Nie-N(H)CH2CH2OCH2CH20H P74 Gpg Ac-Cha-Gpg-Tic-Nle-N( e)Bn P76-1 Gpg Ac-Cha-Gpg-D¡sc-Nle-N(Me)Bn P76-2 Gpg Ac-Cha-Gpg-Disc-Nle-N( e)Bn P77 Gpg Ac-Cha-Gpg-Tic-Nle-tetra ydroisoquinoline P78 Gpg Ac-Cha-Gpg-Tic-Nle-N(Bn)CH2CH20H P80 Gpg Ac-Cha-Gpg-Tic- et-RP ProNH2 P101 Gpg Ac-Cha-Gpg-Tic-Nle-N(Bn)CH2CH20CH2CH20H P102 Gpg Ac-Cha-Gpg-Tic-Met-N(Bn)CH2CH20CH2CH20H > Tabla 1 (continuación) Compuestos que contienen Gpq de la invención b. Sustituyentes miméticos preferidos del péptido natural líder (Falcioni et al; 1999) de acuerdo con la Fórmula Péptido líder Ac (Cha) -NH, en Cha Gpg Ala Met Ala Ser Leu c Ac -NH, 4-aminobutírilo Nba C{Acm) Nle ß-PhPro tLeu o 3-aminopropilo 4-MeCha C(Prm) o' Chg •N(H)CH(CH2OH)2~-~ Coa MePhg Haic- N(CH3)CH2CH2OH f Hfe C(Ac) Odapdc-- — N(H)CH2CH2OH Phe Nva et(O) [S-T(oxaz)-L]-N(CH3)2 — ? Tic lie [S^(imid)-L]-N(CH3)2 Disc N(H)CH2tBu Thiq D-Leu-ol azaTic D-Pro-ol N(H)Bn N(CH3)Bn N(H)CH2CH2Ph N(CH3)CH2CH2Ph N(CH3)CH2CH20H N(Bn)CH2CH20H N(CH2CH2Ph)CH2CH20H N(H)CH2CH20CH2CH20H N(Bn)CH2CH20CH2CH20H N(CH2CH2Ph)CH2CH20CH2CH20H- tetrahidroisoquinolína isoindolina Tabla 2 Otros compuestos investigados con los ensayos descritos en la presente 1* Pos. 2 Secuencia l# Pos. 2 Secuencia Arg Ac-Cha-Arg-Tic-Halc-[S(oxaz)L]-N(CH3)2 P38-2 Arg Ac-Cha-Arg-(Et2)-Oisc-Met-NH2 Arg Ac-Cha-Arg-Tio-Ha¡c-NH2 P39 Orn Ac-Cha-Orn-Tlc-Met-(SPhPro-tS(oxaz)L]NMe2 Arg Ac-Cha-Arg-Tic-Haic-Sér-MeLeu-NH2 P40-1 Arg Ac-Cha-Arg-Disc-Met-BPhPro-[S(oxaz)L]^yq¾.fNo: GPCG-PWO-130 Arg Ac-C a-Arg-T¡c-Met-BPhPro-Se Leu-NH2 P40-2 Arg Ac-Cha-Arg-Disc- et-liPhPro-[S(oxaz)L]-NMe2 P1 Arg Ac-Cha-Arg-T¡c- et-NH2 P42 Arg H-Cha-Arg-Tic-Met-NH2 P3 Arg Ac-Cha-RA ASL-NH2 P43 Arg Ac-Cha-Arg-Tlc-Mel(0)-IJPhPro-tS(oxaz)L]-N e2 P6 Arg Ac-Cha-Arg-Thiq- et-NH2 P44-1 Arg Ac-Cha-Arg-Dlsc Met-6PhPro-N(Me)CH2CH20H P8 Orn Ac-Cha-Om-T¡oMet-NH2 P44-2 Arg Ac-Cha-Arg-D¡sc- et-dPhPro-N( e)CH2CH20H P9 Om Ac-Cha-Om-Th¡q- et-NH2 P48 WA O,O'-Bls-(CH2-CH2-NH-CO-Cha-Arg-Tic-Met-NH2)-PEG 3400 P10 Val Ao-Cha-Val-Tle-Met-NH2 P49 Arg Ao-Phe-Arg-Tlc-Met-NH2 P11 Val Ac-C a-Val-Thiq-Met-NH2 P50 Arg Ac-Cha-Arg-Tic-lle-NH2 P12-1 Arg Ac-Cha-Arg-D¡se-Met-NH2 P51 Arg Ac-C a-Arg-Tic-Nle-(lPhPro-[S(oxaz)L]-N e2 P12-2 Arg Ac-Cha-Arg-D¡sc-Met-NH2 P71 Arg Ac^C a-Arg-Tic-Nle- ( e)Bn P13 alie Ao-C a-aile-Tic- el-NH2 P72-1 Arg Ac-Cha-Arg-D¡sc-Nte-N( e)Bn P14 alio Ac-Cha-alle-Th¡q- et-NH2 P72-2 Arg Ac-Cha-Arg-D¡sc-Nle-M( e)Bn P1S-1 Val Ac-Cha-Val-Dlsc-Met-NH2 P73 Arg H-Cha-Arg-Tic-Nle-NMe2 P15-2 Val OS Ac-Cha-Val-Disc-Met-NH2 P75-1 Arg Ac-Cha-Arg-Hbc-Nle-N(Me)Bn P16-1 Orn Ac-Cha-Orn-Disc- et-NH2 P75-2 Arg Ac-Cha-Arg-Hbc-Nle-N(Me)Bn P16-2 Om Ao-Cha-Om-Disc-Met-NH2 P79 Arg Ac-Cha-Ang-Phe-Nle-N(Me)Bn P17-1 alie . Ac-Cha-alle-Disc- et-NH2 P81 Arg Ac-C a-Arg-Tic-Nle-N(CH2CH20H)CH2CH2Ph P17-2 alie Ac-Cha-alle-Dlsc-M-t-NH2 P82 Arg Ac-Cha-Arg-Tlc-Nle-N(H)CH2CH2Ph P18-1 Orn Ac-Cha-Orn-azaTic-Met(0)-NH2 P83 Arg Ac-Cha-Arg-T1c-Nte-N(Me)CH2CH2Ph 18-2 Orn Ac-Cha-Orn-azaTÍc- et-NH2 P84 Arg Ac-Cha-Arg-Tlc-Met-N(Me)CH2CH2Ph P20 Arg Ao-Cha-Arg-azaTic- et-NH2 P85 Arg Ac-Cha-Arg-T¡c- et-N(CH2CH20H)CH2CH2Ph P21 Arg Ac-Cha-Arg-D-Tic- et-NH2 P86 Arg AoCha-Arg-T¡oNle-N(CH2CH2Ph)CH2CH20CH2CH20H P22 Clt Ao-Cha-Cit-Disc-Met-NH2 P89 Arg Ao-Cha-Arg-Tic-NBu2 P24 Cit Ac-Cha-Clt-D-Tlc-Met-NH2 P90 Arg Ac-Cha-Arg-Tic-Gly-N( e)Bn P25 Cit Ao-Cha-Cil-Tic-Met-NH2 P91 Arg Ac-Cha-Arg-Tlc-Aib-N(Me)Bn P26 Orn Ao-Cha-Om-D-Tlc-Met-NH2 P92 Arg Ac-Cha-Arg-Tic-Nle-N(Me)CK2CH20H P28 "Arg" Ao-YGRKKRRQRRR-(ACS)Cha-R-Tlc-M-NH2 P93 Arg Z-Cha-Arg-N(Me)Bn P30 Arg Ac-Cha-Arg-TIc- et-BPhPro-OH P94 Arg Ac-Cha-Arg-Tic-Alb-N(Bn)CH2CH20H P31 Arg Ac-Cha-Arg-Tic- et-UPhPra- H2 P95 Arg Ac-Cha-Arg-Tic-Gly-NCBn)CH2CH20H P32 3Pya Ac-Cha-3Pya-T¡c- et- H2 P96 Arg Ac-Cha-Arg-Tic-Met-N(CH2CH2Ph)CH2CH20CH2CH20H P33 Arg Ac-C a-Arg-Tic-Mel-BPhPro-tS(oxaz)L]-NMe2 P97 Arg Ac-Cha-Arg-Tic- (H)Bu P34 4Pya Ao-Cha-4Pya-T¡c-Met-NH2 P98 Ang Ac-C a-Arg-Tic-Nle-N(Bn)CH2CH20CH2CH20H P35-1 a eOrn Ac-Cha- MeOrn-Tic-Mel-NH2 P99 Arg Ac-Cha-Arg-Tic-Met-N(Bn)CH2CH20CH2CH20H P35-2 a eOrn Ac-Cha-a eOrn-T¡c-Met-NH2 P100 Arg Ac-Cha-Arg-Tic-NH(C5H11) P36 Arg Ac-Cha-Arg-(N, N'-EI2)-Tic- et-NH2 O Tabla 3 a. Propiedades biológicas de ciertos compuestos de la invención con referencia a la Fórmula II Gpg -llo !iiailLI 230 190 2.1 1.5 134 124 120 111 95 98 108 ß?¾ 410 340 180 32 101 25 99 114 108 -Gpe 180 330 580 4.6 116 103 140 126 111 100 200 3.8 47 83 103 115 104 103 3,600 690 4,500 19 101 42 42 93 115 85 too Gpa 290 290 590 6 120 20 138 81 103 87 115 112 102 2,300 550 1,400 4.6 64 106 80 84 107 100 104 -Gpg 410 120 1,060 4.5 4.5 115 33 34 97 100 16 113 3,400 360 2,200 9.2 6.1 47 103 91 71 114 125 146 97 105 104 eso sao 470 2.7 2.7 13 100 102 39 139 134 106 123 tot ^WH 1,500 500 650 66 100 46 100 57 88 73 81 107 94 106 Gpg 1,700 110 60 73 100 81 76 131 121 110 116 105 101 116 120 Tabla 4. Inhibición in vivo por co-inmunización de la activación de la célula T de ciertos compuestos de la invención y ciertos de sus equivalentes que contienen Ara

Claims

REIVINDICACIONES 1. Un Compuesto que tiene la estructura de Fórmula
Fórmula II caracterizado porque, permite como valencia y estabilidad, A está ausente o representa una secuencia desde uno a cuatro aminoácidos o residuos análogos de aminoácidos; B representa una secuencia desde dos a ocho aminoácidos o residuos análogos de aminoácidos; W representa OR7 o NR8R9; V, independientemente para cada caso, representa C = 0,
C = S, o so2; X está ausente o representa O, S o NR; R, independientemente para cada caso, representa H o alquilo inferior;
R1 representa una porción alquilo, heteroalquilo, alquenilo, alquinilo, arilo, aralquilo, heteroarilo, heteroaralquilo, cicloalquilo, cicloalquilalquilo, heterociclilo, o heterociclilalquilo sustituida o no sustituida; 2 representa una porción alquilo, heteroalquilo, alquenilo, alquinilo, arilo, aralquilo, heteroarilo, heteroaralquilo, cicloalquilo, cicloalquilalquilo, heterociclilo, o heterociclilalquilo sustituida o no sustituida, de preferencia una porción hidrofóbica, o R2 y R, tomados juntos, forman un anillo que tiene de 5 a 7 miembros, opcionalmente está sustituidos con 1 a 5 sustituyentes y/o está formando una estructura policíclica con uno o más anillos distintos, tales como anillos arilo, heterociclilo o carbociclilo; i representa un número entero de 0-1; j representa un número entero de 1-2; k representa un número entero de 1-3; Re está ausente o representa de 1-4 sustituyentes en el anillo que contiene nitrógeno al cual está unido, seleccionado de alquilo inferior sustituido o no sustituido, haloalquilo, halógeno, hidroxilo, y amino; R7, R8 y Rg representan independientemente sustituyentes seleccionados de H y alquilo, heteroalquilo, arilo, aralquilo, heteroaralquilo, heteroarilo, cicloalqu ¡lo, cicloalquilalquilo, heterociclilo, y heterociclilalquilo sustituidos o no sustituidos, o donde R8 y R9, tomados juntos, forman un anillo que tiene de 5 a 7 miembros, opcionalmente está sustituido con 1 a 5 sustituyentes y/o está formado de una estructura policíclica con uno o más anillo distintos, tales como anillos arilo, heterociclilo, o carbociclilo. 2. Un compuesto tal y como se describe en la reivindicación 1, caracterizado porque R6 está ausente. 3. Un compuesto tal y como se describe en la reivindicación 1, caracterizado porque al menos uno de R,, R7 , a, y g es un residuo hidrofóbico. 4. Un compuesto tal y como se describe en la reivindicación 1, caracterizado porque A representa 0 ó 1 aminoácido o residuos análogos de aminoácidos.
5. Un compuesto tal y como se describe en la reivindicación 1, caracterizado porque B representa de 2 a 6 aminoácidos o residuos análogos de aminoácidos.
6. Un compuesto tal y como se describe en la reivindicación 1, caracterizado porque B representa de 2 a 4 aminoácidos o residuos análogos de aminoácidos.
7. Un compuesto tal y como se describe en la reivindicación 1, caracterizado porque el compuesto tiene una actividad inmunosupresora.
8. Un compuesto tal y como se describe en la reivindicación 1, caracterizado porque el compuesto inhibe la activación de las células T mediadas por MHC.
9. Un compuesto tal y como se describe en la reivindicación 1, caracterizado porque los residuos de aminoácidos son residuos de alfa-aminoácidos.
10. Un compuesto tal y como se describe en la reivindicación 1, caracterizado porque R-iXV, tomados juntos, representan un grupo acilo.
11. Un compuesto tal y como se describe en la reivindicación 10, caracterizado porque el grupo acilo es un grupo alquilcarbonilo, un grupo arilcarbonilo o un grupo aminoalquil-carbonilo.
12. Un compuesto tal y como se describe en la reivindicación 10, caracterizado porque el grupo acilo es un grupo benzoilo, un grupo alcanoilo inferior, o un grupo aminoalcanoilo inferior.
13. Un compuesto tal y como se describe en la reivindicación 10, caracterizado porque el grupo acilo es un grupo acetilo.
14. Un compuesto tal y como se describe en la reivindicación 1, caracterizado porque tiene una estructura seleccionada de las estructuras dadas en la Tabla 1a o construida de las subunidades preferidas contenidas de Gpg de la Tabla 1 b.
15. Un compuesto tal y como se describe en la reivindicación 1, caracterizado porque el compuesto se selecciona de P60, P53, P47, P41-1, P69, P66-1, P76-1, P67, P74, P70, P101 y P102.
16. Un compuesto tal y como se describe en la reivindicación 1, caracterizado porque el compuesto enlaza a la proteína MHC clase II.
17. Un compuesto tal y como se describe en la reivindicación 16, caracterizado porque la proteína MHC clase II es una molécula DR.
18. Un compuesto tal y como se describe en la reivindicación 16, caracterizado porque la proteína MHC clase II se selecciona de 0401, 0101 y 0404.
19. Un compuesto tal y como se describe en la reivindicación 16, caracterizado porque el compuesto enlaza a la proteína MHC clase II con un IC50 mejor que uno seleccionado de 4 µ?, 2 µ?, 1 µ?, 500 nM, y 200 nM.
20. Un compuesto tal y como se describe en la reivindicación 1, caracterizado porque el compuesto muestra la estabilidad en suero de ratón después de 24 horas de más que al menos uno del 50%, 60%, 70%, 80% y 90%.
21. Un compuesto tal y como se describe en la reivindicación 1, caracterizado porque el compuesto muestra la estabilidad en suero de rata después de 24 horas de más que al menos uno del 10%, 20%, 40%, 50%, 60%, 70%, 80% y 90%.
22. Una composición farmacéutica, caracterizada porque comprende un compuesto tal y como se describe en la reivindicación 1 y un excipientes farmacéuticamente aceptables.
23. Un uso del compuesto tal y como se describe en la reivindicación 1 en la preparación de una composición farmacéutica.
24. El uso tal y como se describe en la reivindicación 23, caracterizado porque la composición farmacéutica es para tratar o prevenir una condición caracterizada por la activación de las células T mediadas por MHC clase II o la expresión de una proteina MHC clase II en un sitio patológico de inflamación .
25. El uso tal y como se describe en la reivindicación 24, caracterizado porque la condición se selecciona entre artritis reumatoide, artritis juvenil, esclerosis múltiple, enfermedad de Grave's, diabetes dependiente de insulina, narcolepsia, psoriasis, lupus eritematoso sistémico, espondilitis anquilosante, rechazo del aloinjerto, rechazo al trasplante, injerto vs. enfermedad hospedante, enfermedad de Hashimoto, miastenia gravis, pénfigo vulgar, tiroiditis, glomerulonefritis, pancreatitis, cirrosis biliar primario, síndrome de Sjogren, esclerodermia, polimiositis, dermatomiositis, penfigoide bullosa, síndrome de Goodpasture, anemia hemolítica autoinmune, anemia perniciosa, púrpura trombocitopén ica idiopática, insulitis, enfermedad irritable del intestino y enfermedad de Addison.
26. El uso tal y como se describe en la reivindicación 24, caracterizado porque la condición se selecciona entre artritis reumatoide y esclerosis múltiple.
27. Un método para suprimir una respuesta inmune, caracterizado porque comprende administrar a un animal el compuesto tal y como se describe en la revindicación 1.
28. Un compuesto que tienen la estructura de Fórmula I: Fórmula I caracterizado porque, se permite como valencia y estabilidad, A está ausente o representa una secuencia desde uno a cuatro aminoácidos o residuos análogos de aminoácidos; B representa una secuencia desde dos a ocho aminoácidos o residuos análogos de aminoácidos; X está ausente o representa O, S o NR; W representa OR7 o NR8Rg; V, independientemente para cada caso, representa C = 0, C = S, o S02; R, independientemente para cada caso, representa H o alquilo inferior; R-i representa una porción alquilo, heteroalquilo, alquenilo, alquinilo, arilo, aralquilo, heteroarilo, heteroaralq ui lo, cicloalquilo, cicloalquilalquilo, heterociclilo, o heterociclilalquilo sustituida o no sustituida; R2 representa una porción alquilo, heteroalquilo, alquenilo, alquinilo, arilo, aralquilo, heteroarilo, heteroaralquilo, cicloalquilo, cicloalquilalquilo, heterociclilo, o heterociclilalquilo sustituida o no sustituida, o R2 y R, tomados juntos, forman un anillo que tiene de 5 a 7 miembros, opcionalmente está sustituidos con 1 a 5 sustituyentes y/o está formando una estructura policíclica con uno o más anillos distintos; R3 representa una porción alquilo, heteroalquilo, alquenilo, alquinilo, arilo, aralquilo, heteroarilo, heteroaralquilo, cicloalquilo, cicloalquilalquilo, heterociclilo, o heterociclilalquilo sustituida o no sustituida; y R7, R8 y R9 representan independientemente sustituyentes seleccionados de H y alquilo, heteroalquilo, arilo, aralquilo, heteroaralquilo, heteroarilo, cicloalquilo, cicloalquilalquilo, heterociclilo, y heterociclilalquilo sustituidos o no sustituidos, o donde R8 y R9, tomados juntos, forman un anillo que tiene de 5 a 7 miembros, opcionalmente está sustituido con 1 a 5 sustituyentes y/o está formado de una estructura policíclica con uno o más anillo distintos, en donde W incluye al menos 6 átomos sin hidrógeno.
29. Un compuesto tal y como se describe en la reivindicación 30, caracterizado porque al menos uno de R8 y R9 se selecciona entre bencilo, fenetilo, 2-hidroxietilo y -CH2CH2OCH2CH2OH.