MXPA04000968A - Derivados de quinolina y uso de los mismos como agentes antitumor. - Google Patents

Abstract

La invencion proporciona compuestos de la formula (I): en donde Y es F, CI, Br, metilo o metoxi; y sales farmaceuticamente aceptables de los mismos. Los compuestos son agentes antitumor efectivos. La invencion tambien proporciona composiciones farmaceuticas que comprenden un compuesto de la formula (I) o una sal del mismo, intermedios utiles para preparar un compuesto de la formula (l), y metodos terapeuticos que comprenden administrar un compuesto de la formula (I) o una sal del mismo a un mamifero en necesidad del mismo.

Description

DERIVADOS DE QU1NOLINA Y USO DE LOS MIS MOS COMO AGENTES ANTITUWIOR PRIORIDAD DE LA INVENCIÓN Esta solicitud reclama prioridad de la invención bajo 35 U .S.C. §1 1 9(e) de la Solicitud Provisional de E.U . Número 60/309, 144, presentada el 31 de Julio de 2001 .

FONDOS GUBERNAMENTALES La invención descrita en la presente se hace en parte con soporte gubernamental bajo el Número de Concesión NCI-NIH CA82341 concedido por el Instituto Nacional del Cáncer. El Gobierno de los Estados Unidos tiene ciertos derechos en la invención.

ANTECEDENTES DE LA INVENCIÓN La Patente de E.U. No. 4,629,493 describe compuestos herbicidas de la siguiente fórmula: en donde A es -CH- o -N-; X es un halógeno; n es 0, 1 o 2; R1 es hidrógeno o un grupo alquilo inferior; y R2 es -OH, entre otros valores. Uno de estos compuestos se vende actualmente comercialmente para el control de maleza de hierba perenne y anual en cultivos de hoja ancha. - 2 - Este com puesto tiene la sig uiente fórmula : Corbett et al., I nvestigation New Drugs, 1 6 1 29-1 39 (1 998) evaluaron una serie de compuestos de quinoxalina para actividad contra tumores sólidos en ratones. Se reporta que el siguiente compuesto (referido como XK469) tiene una amplia actividad contra tumores de ratón transplantables.

También se reporta que el compuesto tiene u n potencia relativamente baja, y que produce varios efectos secundarios indeseables, incluyendo toxicidad in vivo, por ejemplo íleo paralítico, daño epitelial Gl, toxicidad de la médula, toxicidad neuromuscular y pérdida de peso . Existe una necesidad actual de agentes antitumor adicionales.

BREVE DESCRIPCIÓN DE LA INVENCIÓN La presente invención proporciona compuestos que son agentes antitumor efectivos. De acuerdo con lo anterior, se proporciona un compuesto de la invención que es un compuesto de la fórmula I: - 3 - (I) en donde Y es F, Cl, Br, metilo o metoxi; o una sal farmacéuticamente aceptable de los mismos. La invención también proporciona un método terapéutico para inhibir el crecimiento de la célula tumoral en un mamífero, que comprende administrar a un mamífero en necesidad de tal terapia, una cantidad eficaz de un compuesto de la invención. La invención también proporciona un método terapéutico para tratar cáncer en un mamífero, que comprende administrar a un mamífero en necesidad de tal terapia, una cantidad eficaz de un compuesto de la invención. La invención también proporciona el uso de un compuesto de la invención en terapia médica. La invención también proporciona el uso de un compuesto de la invención para fabricar un medicamento para el tratamiento de cáncer en un mamífero.

BREVE DESCRIPCIÓN DE LAS FIGURAS La figura 1 muestra separaciones HPLC del compuesto racémico 21 b (Esquema II) y el enantiómero R del compuesto 21 b utilizando Chírobiotico T250 X 4.6 mm, 65% H20, 35% CH3OH, 20 mM NH4NO3 a 1 mL/min con detección a 250 nm. - 4 - DESCRIPCIÓN DETALLADA DE LA INVENCIÓN Se apreciará por aquellos expertos en la materia que los compuestos de la invención que tienen un centro quirai pueden existi r en y aislarse en formas racémicas y ópticamente activas. Algunos de los compuestos pueden mostrar polimorfismo. Debe entenderse q ue la presente invención comprende cualq uier forma racémica , ópticamente activa , polimórfica , o estereoisomérica, o mezclas de las mismas, de u n compuesto de la invención , que poseen las propiedades útiles descritas en la presente, es bien conocido en la materia como preparar formas ópticamente activas (por ejemplo, por resolución de la forma racémica por técnicas de recristalización , por síntesis de materiales in iciales ópticamente activos, por síntesis q u iral, o por separación cromatográfica utilizando una fase estacionaria quiral) y como determinar actividad antitumor utilizando las pruebas estándar descritas en la presente, o utilizando otras pruebas similares que se conocen bien en la materia. Un valor específico para Y es flúor. Otro valor específico para Y es cloro. Otro valor específico para Y es bromo. Otro valor especifico para Y es metoxi (-OMe) Un grupo específico de compuestos de la Fórmula I son compuestos en donde el carbono que lleva el grupo metilo se encuentra en la configuración (S). Un grupo preferido de compuestos de la Fórmula I son compuestos en donde el carbono que lleva el grupo metilo se encuentra en la configuración (R). - 5 - Los compuestos preferidos de la invención son ácido 2-[4-(7-cloroquinolin-2-iloxi)fenoxi]propanóico (compuesto 21 b); 2-[4-(7-bromoquinolin-2-iloxi)fenox¡]propanóico (compuesto 21 c); 2-[4-(7-fluoroquinoiin-2-iloxi)fenoxí]propanóico (compuesto 21 a); y las sales farmacéuticamente aceptables de los mismos (por ejemplo, compuestos 22a, 22b y 22c). Más preferentemente, los compuestos de la invención son (R) 2-[4-(7-cloroquinolin-2-iloxi)fenoxi]propanóico (compuesto 21 b); o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo (por ejemplo, compuesto 22b), y (R) 2-[4-(7-bromoquinolin-2-iloxi)fenoxi]propanóico (compuesto 21 c); o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo (por ejemplo, compuesto 22c). En casos en donde los compuestos son suficientemente básicos o ácidos para formar sales base o ácido no tóxico estable, la administración de los compuestos como sales puede ser apropiada. Ejemplos de sales farmacéuticamente aceptables son sales de adición de ácido orgánico formadas con ácidos que forman un anión fisiológico aceptable, por ejemplo, tosilato, metanosulfonato, acetato, citrato, malonato, tartarato, succinato, benzoato, ascorbato, -quetoglutarato, y a-glicerofosfato. Las sales inorgánicas adecuadas también pueden formarse, incluyendo sales de hidrocloruro, sulfato, nitrato, bicarbonato y carbonato. Las sales farmacéuticamente aceptables pueden obtenerse utilizando procedimientos estándar bien conocidos en la materia, por ejemplo al reaccionar un compuesto suficientemente básico tal como una amina con un ácido adecuado que proporciona un anión fisiológicamente aceptable. Sales de metal álcali (por ejemplo, sodio, potasio o litio) o metal de tierra alcalina (por ejemplo, calcio) de ácidos carboxílicos también pueden hacerse. Los compuestos de la fórmula I pueden formularse como composiciones farmacéuticas y administrarse a un huésped mamífero, tal como un paciente humano en una variedad de formas adaptadas a la vía de administración elegida, es decir, oralmente o parenteralmente, por vía intravenosa, intramuscular, tópica o subcutánea. De esta manera, los presentes compuestos pueden administrarse sistémicamente, por ejemplo, oralmente, en combinación con un vehículo farmacéuticamente aceptable tal como un diluyente inerte o un veh ículo comestible asimilable. Pueden encerrarse en cápsulas de gelatina de cubierta suave o dura, pueden comprimirse en tabletas, o pueden incorporarse directamente con el alimento de la dieta del paciente. Para administración terapéutica oral, el compuesto activo puede combinarse con uno o más excipientes y utilizarse en la forma de tabletas ingeribles, tabletas bucales, pastillas, cápsulas, elixires, suspensiones, jarabes, hostias y lo similar. Tales composiciones y preparaciones deben contener al menos 0.1 % de compuesto activo. El porcentaje de las composiciones y preparaciones puede, por supuesto, variarse y puede convenientemente encontrarse entre aproximadamente 2 a aproximadamente 60% del peso de una forma de dosificación unitaria dada. La cantidad de compuesto activo en tales composiciones terapéuticamente útiles es tal que se obtendrá un nivel de dosificación eficaz. - 7 - Las tabletas, pastillas, pildoras, cápsulas, y lo similar pueden también contener lo siguiente: aglutinantes tales como goma tragacanto, acacia , almidón de maíz o gelatina; excipientes tales como fosfato de dicalcio; un agente desintegrante tal como almidón de maíz, almidón de papa, ácido algínico y lo similar; un lubricante tal como estearato de magnesio, y un agente endulzante tal como sucrosa, fructosa, lactosa o aspartamo o un agente saborizante tal como menta, aceite de piróla, o saborizante de cereza pueden agregarse. Cuando la forma de dosificación unitaria es una cápsula, puede contener, además de materiales del tipo anterior, un vehículo líquido, tal como un aceite vegetal o un glicol de polietileno. Varios otros materiales pueden estar presentes como revestimientos o de otra manera modificar la forma física de la forma de dosificación unitaria sólida. Por ejemplo, las tabletas, pildoras, o cápsulas pueden revestirse con gelatina, cera, laca o azúcar y lo similar. Un jarabe o elixir puede contener el compuesto activo, sucrosa o fructosa como un agente endulzante, metilo y propilparabenos como preservativos, un tinte y saborizante tal como sabor naranja o cereza. Por supuesto, cualquier material utilizado para preparar cualquier forma de dosificación unitaria deb ser farmacéuticamente aceptable y substanciaimente no tóxica en las cantidades empleadas. Además, el compuesto activo puede incorporarse en dispositivos y preparaciones de liberación sostenida. El compuesto activo también puede administrarse intravenosamente o intraperitonealmente por infusión o inyección. Las soluciones del compuesto activo o sus sales pueden prepararse en agua, mezclarse opcionalmente con un surfactante no tóxico. Las dispersiones - 8 -también pueden prepararse en glicerol, glicoles de polietileno líquidos, triacetina, y mezclas de los mismos y en aceites. Bajo condiciones ordinarias de almacenamiento y uso, estas preparaciones contienen un preservativo para prevenir el crecimiento de microorganismos. Las formas de dosificación farmacéuticas adecuadas para la inyección o infusión pueden incluir dispersiones o soluciones acuosas estériles o polvos estériles que comprenden el ingrediente activo que se adaptan para la preparación extemporánea de dispersiones o soluciones infusibles o inyectables estériles, opcionalmente encapsuladas en liposomas. En todos los casos, la última forma de dosificación debe ser estéril, fluida y estable bajo las condiciones de fabricación y almacenamiento. El portador o vehículo líquido puede ser un medio de dispersión de líquidos o solvente que comprende, por ejemplo, agua, etanol, un poliol (por ejemplo, glicerol, glicol de propileno, glicoles de polietileno líquidos, y lo similar), aceites vegetales, ásteres de glicerilo no tóxicos, y mezclas adecuadas de los mismos. La fluidez apropiada puede mantenerse, por ejemplo, por la formación de liposomas, por el mantenimiento del tamaño de partícula requerido en el caso de dispersiones o por el uso de surfactantes. La prevención de la acción de microorganismos puede originarse por varios agéntes antifungales y antibacteriales, por ejemplo, parabenos, clorobutanol, fenol, ácido sórbico, tiomersal, y lo similar. En muchos casos, será preferible incluir agentes isotónicos, por ejemplo, azúcares, reguladores o cloruro de sodio. La absorción prolongada de las composiciones inyectables puede originarse por el uso en las composiciones de agentes que retrasan la absorción, por - 9 -ejemplo, monoestearato de gelatina y gelatina. Las soluciones inyectables estériles se preparan al incorporar el compuesto activo en la cantidad requerida en el solvente apropiado con varios de los otros ingredientes enumerados arriba, según se requiera, seguido por la esterilización del filtro. En el caso de polvos estériles para la preparación de soluciones inyectables estériles, los métodos preferidos de preparación son técnicas de liofilización y secado al vacío, que producen un polvo del ingrediente activo más cualquier ingrediente deseado adicional presente en las soluciones previamente filtradas-estériles. Para administración tópica, los presentes compuestos pueden aplicarse en forma pura, es decir, cuando son líquidos. Sin embargo, generalmente será deseable administrarlos a la piel como composiciones o formulaciones, en combinación con un vehículo dermatológicamente aceptable, que puede ser un sólido o un líquido. Los vehículos sólidos útiles incluyen sólidos finamente divididos tales como talco, arcilla, celulosa microcristalina, sílice, alúmina y lo similar. Los vehículos líquidos útiles incluyen agua, sulfóxido de dimetilo (DMSO), alcoholes o glicoles o mezclas de agua-alcohol/glicol, en las cuales los presentes compuestos pueden disolverse o dispersarse a niveles eficaces, opcionalmente con la ayuda de surfactantes no tóxicos. Los adyuvantes tales como fragancias y agentes antimicrobianos adicionales pueden agregarse para optimizar las propiedades para un uso dado. Las composiciones líquidas resultantes pueden aplicarse de cojinetes absorbentes, utilizados para impregnar vendajes y otras hilas, o rociarse en el área afectada utilizando rociadores en aerosol o tipo bomba. Los espesadores tales como polímeros sintéticos, ácidos grasos, sales de ácido graso y ésteres , alcoholes g rasos, celu losas modificadas o materiales minerales modificados también pueden emplearse con veh ículos líquidos pa ra formar pastas, geles, pomadas, jabones untables y lo similar, para su aplicación de manera directa a la piel del usuario. Ejemplos de composiciones dermatológicas útiles q ue pueden utilizarse para suministrar los compuestos de la fórmula I a la piel se conocen en la materia; por ejemplo, ver Jacquet et al. (Pat. de E. U. No. 4,608,392), Geria (Pat. de E. U . 4,992,478) , Smith et al., (Pat. de E. U . No. 4, 559, 1 57) y Wortzman (Pat. de E. U . No . 4, 820 , 508) . Las dosificaciones útiles de los compuestos de la fórmula I pueden determinarse al comparar su actividad in vitro, y actividad in vivo en modelos animales. Los métodos para la extrapolación de dosificaciones eficaces en ratones, y otros animales, y humanos se conocen en la materia; por ejemplo, ver Pat. de E. U. No. 4, 938, 949. La cantidad del compuesto, o una sal activa o derivado de la misma , requerida para utilizarse en el tratamiento variará no solamente con la sal particular seleccionada pero también con la vía de administración , la naturaleza de la condición que se trata y la edad y condición del paciente y por último será en la discreción del médico clínico o médico que atiende. El compuesto se administra convenientemente en forma de dosificación unitaria; por ejemplo, conteniendo 5 a 1 ,000 mg/m2, - 1 1 -convenientemente 10 a 750 mg/m2, más convenientemente, 50 a 500 mg/m2 de ingrediente activo por forma de dosificación unitaria. La dosis deseada puede presentarse convenientemente en una dosis única o como dosis divididas administradas a intervalos apropiados, por ejemplo, como dos, tres, cuatro o más sub-dosis por día . La sub-dosis por sí misma puede dividirse además, por ejemplo, en un número de administraciones libremente separadas, discretas. Los compuestos de la invención son agentes anti-tumor eficaces y tienen potencia más elevada y/o toxicidad reducida en comparación con XK469. Preferentemente, los compuestos de la invención son más potentes y menos tóxicos que (R) XK469, y/o evitan un sitio potencial de metabolismo catabólico encontrado con XK469, es decir, tienen un perfil metabólico diferente a XK469. La presente invención proporciona métodos terapéuticos para tratar cáncer en un mamífero, que incluye administrar a un mamífero que tiene cáncer una cantidad eficaz de un compuesto o una composición de la invención. Un mamífero incluye un primate, humano, roedor, canino, felino, bovino, ovino, equino, cerdo, caprino, bovino y lo similar. El cáncer se refiere a cualquier tipo de neoplasma maligno, por ejemplo, cáncer de colón, cáncer de mama, meiahoma y leucemia, y en general se caracteriza por una proliferación celular indeseable, por ejemplo, crecimiento no regulado, falta de diferenciación, invasión de tejido local y metástasis. La habilidad de un compuesto de la invención para tratar cáncer puede determinarse al utilizar análisis bien conocidos en la materia. Por ejemplo, el diseño de los procedimientos de tratamiento, - 12 -evaluación de toxicidad, análisis de datos, cuantificación de muerte de la célula tumorai, y el significado biológico del uso de pantallas de tumores transplantables se documentan . Además, la habilidad de un compuesto para tratar cáncer puede determinarse utilizando las Pruebas como se describe abajo. En las Pruebas A-H las siguientes metodologías generales se emplean: Mantenimiento de animal y tumor El adenocarcinoma ductal pancreático-03, B16-melanoma, adenocarcinoma mamario-1 6/C/Adr, adenocarcinoma mamario-17/Adr, adenocarcinoma de colón-26, y adenocarcinoma mamario-16/C se utilizan en los estudios. Los tumores se mantienen en la cepa de ratón de origen C57B1 /6 (para Panc03, B16), Balb/c (para Colón 26) y C3H (para los tumores mamarios). Los tumores se transplantan en el híbrido F-t apropiado (BDF1 = C57B1 /6 hembra X DBA/2 macho) o la cepa de origen para las pruebas de quimioterapia. Los peso corporales del ratón individual para cada experimento fueron dentro de 5 gramos, y todos los ratones fueron arriba de 17 gramos al inicio de la terapia. Se suministra comida y agua ad libitum a los ratones. Quimioterapia de tumores sólidos Los animales se agruparon, implantaron subcutáneamente con 30 a 60 mg de fragmentos de tumor por un trocar de calibre 12 el día 0, y de nuevo se agruparon antes de la distribución no selectiva a los diversos - 1 3 -grupos de control y tratamiento. Para tratamiento en etapa temprana, la q uimioterapia se inició dentro de 1 a 3 d ías después de la implantación del tumor mientras que el n ú mero de célu las fue relativamente pequeño ( 1 07 a 1 08 células). Para pruebas clasificadas avanzadas o supraclasificadas, los tumores se dejaron desarrollar por cinco o más días antes de que se inicie el tratamiento . Los tumores se miden con un calibrador dos veces a la semana. Los ratones se sacrifican cuando sus tumores alcanzaron 1 500 mg. Los pesos del tumor se estiman de mediciones bi-dimensíonales. Peso del tumor (en mg) = (a x b2)/2 , en donde a y b son la longitud del tumor y ancho (en mm), respectivamente. Puntos finales para valorar la actividad antitumor para tumores sólidos Los siguientes puntos finales cuantitativos se utilizan para valorar actividad antitu mor. a) Retraso de crecimiento del tumor (valor T-C), en donde T es el tiempo medio (en días) requerido para que los tumores del grupo de tratamiento alcancen un tamaño predeterminado (por ejemplo , 1000 mg), y C es el tiempo medio (en días) para que los tumores del grupo de control alcancen el mismo tamaño. Los sobrevivientes libres de tumor se excluyen de estos cálculos (curas se tabulan por separado). Este valor es un criterio importante de efectividad antitumor debido a que permite la cuantificación de la muerte de la célula tumoral. b) Cálculo de la muerte de la célula tumoral para tumores que crecen subcutáneamente (SC), la muerte de la célula log10 se calcula de la siguiente fórmula: - 14 - Muerte de célula logw total (bruta) = valor T-C en días (3.32) (Td) en donde T-C es el retraso de crecimiento del tumor como se describe arriba y Td es el tiempo doble de volumen de tumor (en días), estimado a partir de la mejor línea recta de ajuste del d iagrama de crecimiento de log-lineal de los tumores del grupo de control en crecimiento exponencial (rango de 1 00 a 800 mg) . La conversión de los valores T-C a muerte de la célula log1 0 es posible debido a que Td de los tu mores que se vuelven a desarrollar después del tratamiento (Rx) se aproximan a los valores Td de los tumores en ratones de control sin tratar. El tema de la conversión del retraso del crecimiento de tumor (valor T-C) a muerte de la célula tumoral log se justifica en esta serie debido al gran número de curas obtenidas con 5 de los agentes estudiados. Las curas son una clara indicación de la muerte de la célula de tumor (en lugar de estasis de replicación de la célula tumoral). En casos seleccionados, tanto los datos de evaluación in vivo histórica así como también los datos presentados en la presente, es de valor comparar los números de muerte log de las pruebas de programas de prueba marcadamente diferentes. Para este propósito, una tabla de actividad se crea, y se presenta abajo. Debe observarse que una clasificación de actividad de +++ a ++++ se necesita para efectuar la regresión parcial (PR) o regresión completa (CR) de masas de tamaño de 100 a 300 mg de la mayoría de los tumores sólidos de ratón transplantados. De esta manera, una clasificación de actividad de + o +++ no se calificaría como activa por el criterio clínico usual. PR es una reducción en masa de tumor de menos del 50% de tamaño de pretratamiento. CR es una reducción en la masa de tumor para disminuir el tamaño palpable (es decir, reducción a cero de la masa detectable).

Conversión de la muerte de la célula tumoral log10 para una clasificación de actividad Actividad antitumor Duración de Rx 5 a 20 días muerte logio (bruta) Altamente activa ++++ >2.8 +++ 2.0-2.8 ++ 1 .3-1 .9 + 0.7-1 .2 - <0.7 Los grupos d e control y tratamiento se miden cuando los tumores del grupo de control alcanzan aproximadamente 700 a 1200 de mg en tamaño (medio de grupo). El valor T/C en por ciento es una indicación de efectividad antitumor: Un T/C = 0% significa sin crecimiento de tumor. Un T/C = 100% significa sin actividad antitumor, es decir, los tumores de control y tratados se desarrollan por igual. Un T/C igual a o menor a 42% se considera actividad antitumor significativa por la Rama de Evaluación de Medicamentos de la División del Tratamiento de Cáncer (NCI). Un valor T/C <10% se considera indicar actividad antitumor altamente significativa, y es el nivel utilizado por NCI para justificar una prueba clínica si la toxicidad, formulación y ciertos otros requerimientos se satisfacen (denominada actividad de nivel DN-2). Una nadir de pérdida de peso corporal (promedio de grupo) de más del 20% o mayor a 20% de las muertes por el medicamento se considera indicar una dosificación excesivamente tóxica en la mayoría de las pruebas de curso único.

Preparación del medicamento para inyecciones en rajones El compuesto 22b (sal de sodio) en las Pruebas A-H se prepara en una solución de bicarbonato de sodio al 1 %, dH20 o salina regulada de fosfato (PBS), con pH ajustado a 7.0 a 7.5 con HCI, y administrado intravenosamente (IV) u oralmente (PO), a volúmenes de inyección de 0.2 mi por inyección. Prueba A Evaluación Contra Adenocarcinoma 03 Ductal Pancreático en Etapa Temprana El tumor de adenocarcinoma 03 ductal pancreático es altamente sensible a taxol (clasificación de actividad ++++). Es sensible a adriamicina (clasificación de actividad +++), moderadamente sensible a VP-1 6, citoxan, y CisDDPt (clasificación de actividad ++), y modestamente sensible a 5-FÜ (actividad +). Los ratones BDF1 hembra (obtenidos de NCI-Raleigh) (fecha de nacimiento (de aquí en adelante D.O.B.) 27 de Marzo de 2000; fecha de llegada (de aquí en adelante D.O.A) 19 de Abril de 2000) se implantan (fecha de implantación del tumor (de aquí en adelante D.O.T) el 17 de Marzo de 2000) con tumor de adenocarcinoma 03 ductal pancreático, dividen en grupos de control y tratamiento. Al grupo de tratamiento se administra el compuesto 22b cada día los días 3-9 IV. Los resultados de la Prueba A se resumen en la Tabla 1 . Prueba B Evaluación Contra Melanoma B16 en Etapa Temprana Melanoma B16 es un tumor muy insensible al medicamento cuando se implanta subcutáneamente (SC). No es responsivo a VP-16, viblastina, y Ara-C (clasificación de actividad negativa (-), marginalmente responsiva a taxol, adriamicina y canfotecina (clasificación de actividad + o +/-), modestamente responsiva a 5-FU , citoxan, y CisDDPt (clasificación de actividad ++). Solamente BCNU y otras nitrosuoureas son altamente activas (clasificación de actividad ++++). Los ratones hembra BDF1 (obtenidos de NCI-CRL-Ral) (D.O. B. 24 de Enero de 2000, D. O.A. 29 de Febrero de 2000). El peso promedio de los ratones fue 2.1 .6 gm. Los ratones se implantaron con células de melanoma B16, número de paso 138 (D.O.T. 17 de Abril de 2000). Td (tiempo doble de volumen de tumor) fue 1 día. Los ratones se dividen en un grupo de control y tres grupos experimentales. El grupo de control (Jaula #1 ) no recibió tratamiento. La Jaula #1 alcanzó 1000 mg en 7 días (Td 1 .0 día) y el crecimiento del tumor fue como se esperaba. En la Jaula #2, el compuesto 22b (racemíco) se administra IV a 40 mg/kg/inyección, una vez por día los días 1 -4. Un total de 320 mg/kg se administra. Esta dosis fue tóxica, produciendo 1 /5 muertes por medicamento (ocurriendo el día 7). La causa de muerte fue toxicidad de médula, como se evidencia por un tamaño de bazo pequeño. La examinación del tracto gastrointestinal reveló que estaba vacío, indicando que no se tomaron alimentos antes de la muerte. Esta dosis produjo pérdida de peso severa (-20.8%; nadir ocurrió el día 7 con recuperación total el día 1 1 ). Una pérdida de peso corporal de -20% se considera excesivamente tóxica por los estándares N.C. I. Aquí, la administración del compuesto 22b (racémico) se asocia con un retraso de la conducción del nervio en los ratones. En dosis de 50 mg/kg, la toxicidad fue suave, pero duró 20 minutos el día 1 , y 8 minutos el día 4. En dosis más elevadas, por ejemplo, 80 mg/kg, el agente produjo una toxicidad neuromuscular después de la inyección substancial que dura 20 minutos pero resuelve por dos horas. Esto incluyo una parálisis distintiva de las patas traseras, indicando que la toxicidad se relaciona con la velocidad de conducción, ya que mientras más largos sean los nervios, se afectará más función. Como se tratar posteriormente, este retraso de conducción del nervio ocurre con el enantiómero S y racémico de esta serie. - En todos los casos, se encuentra ausente en las formas enatioméricas R. En la Jaula #3, el compuesto 22b se administra IV en 50 mg/kg/inyección diariamente los días 1 -5. Un total de 250 mg/kg se administran. En esta dosis, el porcentaje de la pérdida de peso corporal fue -1 3% (nadir ocurrió el día 7, recuperación completa el día 1 , por un tiempo de recuperación del huésped de cuatro días). Esta dosis fue activa (T/C = 0, 2.6 muerte log, clasificación de actividad +++). En ia Jaula #4, el compuesto 22b se administra IV, en 30 mg/kg/inyección diariamente los días 1 -6 para una administración total de 180 mg/kg. Esta dosis produjo una pérdida de peso corporal de 7.4% (nadir ocurrió el día 5, con una recuperación completa el día 9). Esta dosis fue activa (T/C = 15.6%, 1.8 muerte log, clasificación de actividad ++)· Los resultados de la Prueba B se resumen en la Tabla 2. Prueba C Evaluación Contra Adenocarcinoma-16/C/Adr Mamario en Etapa Temprana El adenocarcinoma-1 6/C/Adr mamario en etapa temprana es u n tu mor resistente a mú ltiples medicamentos negativo de p-glicoproteína . Los ratones hembra C3 H se obtienen de NC I-Klingsto n-CRL (D. O . B 3 de Abril de 2000; D. O.A. 1 6 de Mayo de 2000). El peso promedio de los ratones fue 26.3 gm. Los ratones se implantan con adenocarcinoma- 1 6/C/Adr mamario en etapa temprana número de paso 1 83 y dividen en u n gru po de control (Jaula #1 ) y dos grupos experimentales (Jaula #2 y Jaula #3) (D. O.T. 22 de Junio de 2000). Los animales de control (Jaula #1 ) no recibieron tratamiento. La forma racémíca del compuesto 22b (análogo de cloro) se administra a los grupos experimentales como sigue: Jaula #1 alcanzó 1 000 mg en 16 días (Td 1 .2 día) y el crecimiento del tumor fue como se esperaba. En la Jaula #2, una administración total de 504 mg/kg de compuesto 22b se administra por IV. Este tratamiento produjo una perturbación del paso neuromuscular modesta que dura por aproximadamente diez minutos después de la inyección . La toxicidad fue más evidente los primeros dos días, volviéndose menos evidente con inyecciones subsecuentes. Esta dosis produjo una pérdida de peso corporal -15% (nadir ocurrió el día 7, y la recuperación total ocurrió el día 12). De manera interesante, los ratones ganaron peso durante el segundo - 20 -curso de tratamiento (días 1 1 -1 3). El agente fue activo en esta dosis (TIC = 0% , 2.0 muerte log, clasificación de actividad +++). En la J aula #3, un total de 324 mg/kg de com puesto 22b se administra . Esta dosis prod ujo una perturbación del paso insignificante, y una pérdida -1 .1 % de peso corporal en los animales de la Jaula #3 (nadir ocurrió el día 7 , y la recuperación completa ocu rrió el d ía 8). El agente fue inactivo en este programa de dosis (T/C = 53% , 0.6 muerte log). Los resultados de la Prueba C se resumen en la Tabla 3. Prueba D Evaluación del Compuesto 22c Racémico Contra Adenocarcinoma- 17/Adr Mamario en Etapa Temprana Una mezcla racémica del compuesto 22c (análogo bromo) se evalúa contra un tumor mamario resistente a múltiples medicamentos (Mam-1 7/Adr). Los ratones hembra C3H/HeN (MTV-neg) se obtienen de N.C. l .

Frederick (D.O. B 9 de Octubre de 2000; D. O.A. 14 de Noviembre de 2000). Los ratones pesaron un promedio de 29.3 gm. Los ratones se implantaron con Mam-17/Adr/paso-220 (un tumor resistente a múltiples medicamentos positivo de p-glicoproteína (D.O.T. 2 de Enero de 2001 ; Td = 1 .0 días). El compuesto 22c (racémico) se prepara para administración al suspender en 5% de etanol, 1 % de POE-80, y 1 % de bicarbonato de sodio para efectuar la solución. Después, P. B.S. se agrega, y el pH se ajusta a 7 con HCI. 0.2 mi por inyección se administran IV. Los animales de la Jaula #1 no recibieron tratamiento. El crecimiento del tumor fue como se espero, alcanzando 1000 mg el día 7 (rango 7-9) (Td = 1 .0 días) . A los animales en la jaula #3 se les administra la preparación racémica del compuesto 22c por IV en 50 mg/kg/inyección el día 1 ; 62.5 mg/kg el día 2; y 60 mg/kg/inyección los días 3, 6, 7, 8 para un total de 352.5 mg/kg. Esta dosis produjo una pérdida modesta de peso corporal de -5.5%. Este agente causó una reducción modesta de conducción del nervio, que dura aproximadamente 1 0 minutos en la dosis de 60 a 62.5 mg/kg. Los síntomas fueron una perturbación del paso suave. Esta dosis tuvo actividad antitumor impresiva (T/C=0, muerte log 4.2, clasificación de actividad ++++). Los tumores alcanzaron 1000 mg el día 21 (rango 19-42). Ningún agente antitumor, estándar o investigación ha excedido este grado de actividad contra este tumor. A los animales de la Jaula #4 se les da la preparación racémica del compuesto 22c por IV en 30 mg/kg el día 1 ; 37.5 mg/kg el día 2; y 36 mg/kg/inyección los días 3, 6, 7, 8 para un total de 2 1 .5 mg/kg. No hubo perturbación del paso en esta dosis. Esta dosis también fue altamente activa (muerte log 3.0). Los tumores alcanzaron 1000 mg el día 17 (rango 14-21 ). La preparación racémica del compuesto 22c se encontró que tiene el mismo tipo de toxicidad neuromuscular observada en la prueba de una preparación racémica del compuesto 22b, pero fue menos severa (ver Prueba B). Los resultados se presentan en la Tabla 4. Prueba E Evaluación del Enantiómero R del Compuesto 22b v Compuesto 22a - 22 - Contra Adenocarcinoma-17/Adr Mamífero en Etapa Temprana La actividad del enantiómero R del compuesto 22b y compuesto 22a (análogo de flúor) se evalúa para actividad contra Mam-17/Adr de tumor mamario, que es un tumor resistente a múltiples medicamentos positivo de p-glicoproteína. Ratones hembra C3H/HeN (MTV-neg) se obtienen de N. C. I-Frederick (D.O. B. 20 de Noviembre de 2000; D.O.A. 2 de Enero de 2001 ). El peso promedio de los ratones fue 25.9 gm. Los ratones se implantaron con am-17/Adr/pasaje-223 (D.O.T. 12 de Febrero 2001 ; Td fue 1 .2 días) y dividen en un grupo de tratamiento y control. Una preparación racémica del compuesto 22a se suspende en 3% de etanol, 1 % de POE-80, y 0.25% de bicarbonato de sodio para efectuar la solución. Después, P. B.S. se agrega y el pH se ajusta a 7 con HCI. Un volumen de 0.2 mi por inyección se administra a animales de manera intravenosa. El enantiómero R del compuesto 22b se suspende en 3% de etanol, 1 % de POE-80 y 0.5% de bicarbonato de sodio para efectuar la solución. Después, se agrega P.B.S. y el pH se ajusta a 7 con HCI. Un volumen de 0.2 mi por inyección se administra a animales intravenosamente. La Jaula #1 , el grupo de control, no recibió tratamiento, y alcanzó 1000 mg en 9.0 días (8.5-10), (Td 1 .2 día). El crecimiento del tumor fue como se esperaba. A la Jaula #3 se le administran 36 mg/kg de compuesto racémico 22a por IV el día 1 , y 48 mg/kg/inyección qd-2-7 para un total de 324 mg/kg. Las dosificaciones individuales más elevadas no podrían darse debido a la toxicidad neuromuscular severa (reducción en la conducción del nervio que resulta en movimientos disfuncionales de la pata, tanto frontales como posteriores). La disfunción duró 15 minutos para las patas frontales y más para las patas posteriores. Esta dosis fue activa (T/C = 14%, muerte log 1 .5, clasificación de actividad ++). Aunque activa, esta no es claramente una mejora arriba del compuesto 22b o compuesto 22c. Las Jaulas #4 y #5 recibieron dosis inferiores de la preparación de compuesto racémico 22a que la Jaula #3. Estas fueron inactivas. A la Jaula #6 se le administra un enantímero R del compuesto 22b y la toxicidad neuromuscular no se produce. En la Prueba B, la forma racémica del compuesto 22b produjo una reducción en la conducción del nervio. Este resultado implicó que el enantiómero S es responsable de la toxicidad neuromuscular del compuesto 22b. La forma enantiomérica S se sintetiza después e inyecta en 80 mg/kg/inyección y también en 50 mg/kg/inyeccíón, IV, ambas produciendo toxicidad neuromuscular marcada. En la Jaula #6, el enantiómero R del compuesto 22b se inyecta IV en 83 mg/kg/inyección, qd-1 -4 para un total de 332 mg/kg. Esta dosis fue tóxica, matando a los 5 ratones (los días 7,7,8,9, 10). La causa de muerte fue escara epitelia Gl que produce daño epitelial Gl resultando en diarrea. Tres de los ratones tuvieron estómagos llenos de comida ligeramente alargados, indicando gastroparesis o íleo paralítico. Los tamaños del bazo de todos los ratones fueron casi normales, indicando que el agente no produce mucho toxicidad de médula en los ratones. - 24 - A la Jaula #7 se le administra el enantiómero R del compuesto 22b por IV en 55 mg/kg/inyecc¡ón, qd-1 -4 para una dosis total de 220 mg/kg. Esta dosis fue de alguna manera tóxica, produciendo 1 /5 muertes por medicamento y una gran pérdida de peso corporal (nadir -23.4% día 9 y recuperación completa día 14). La única muerte fue a partir del daño epitelial Gl (diarrea) complicado con toxicidad de médula (bazo pequeño). Esta dosis fue, sin embargo , altamente activa (T/C = 0 , muerte log 3.3, clasificación de actividad ++++). Los tumores alcanzaron 1000 mg el día 22 (1 8-23). La Jaula #8 contuvo solamente un ratón, que se utiliza para un control de toxicidad inicial para evaluar la toxicidad neuromuscular. Se inyección con una dosis de bolo unitaria del enantiómero R de la preparación del compuesto 22b en 124.5 mg/kg el día 1 solamente. No hubo toxicidad neuromuscular. La dosis fue modestamente activa y no tóxica (T/C = 35%, muerte log 0.8, clasificación de actividad +). De esta manera, los datos indicaron que el compuesto 22a fue activo (Jaula #2). El enantiómero R del compuesto 22b falto de la toxicidad neuromuscular que ocurre con la forma racémica del agente. El enantiómero S se hace y prueba y se encuentra que es responsable de toxicidad intramuscular. Los resultados se presentan en la Tabla 5. Prueba F Evaluación del Enantiómero R del Compuesto 22b v el Enantiómero R del Compuesto 22c Contra Adenocarcinoma-16/C Mamario en Etapa Temprana - 25 - En esta prueba , los ena ntiómeros R de tanto el compuesto 22c como el compuesto 22b se comparan . Cada compuesto fue com pletamente falto de toxicid ad neuromuscu la r. Las toxicidades que limitan la dosis letal son similares (daño epitelial Gl). Los ratones hembra C3H se obtienen de N .C. I. (D. O. B 22 de Enero de 2001 ; D.O.A. 27 de Enero de 2001 ). Los ratones pesaron un promedio de 19.2 gm . Los ratones se implantaron SC con adenocarcinoma-1 6/C mamario pasaje-170, un tumor altamente metastático, altamente invasivo que crece rápido (D. O.T. 1 8 de Marzo de 2001 ; Td fue 1 .2 días). Los enantiómeros R de tanto el compuesto 22c como el compuesto 22b se suspenden cada uno en 3% de etanol, 1 % de POE-80, 0.5% de bicarbonato de sodio (por volumen) para efectuar la solución, P. B.S . se agrega entonces y el pH se ajusta a 7 con HCI. Adriamicina (ADRIA; número de lote 20338c) se suspende en dH20 para efectuar la solución y el pH se ajusta a 6.0. Los ratones se administran 0.2 mi por inyección IV. La Jaula #1 no recibió tratamiento, y el crecimiento del tumor fue como se esperaba. Los tumores alcanzaron 1 000 mg el día 9.5 (rango 7-12) (Td = 1 .0 días). A los ratones de la Jaula #2 se les administra el enantiómero R del compuesto 22c por IV en 65 mg/kg/iny qd-1 -4 por un total de 260 mg/kg: Ninguna toxicidad neuromuscular ocurrió después de las inyecciones. Todos los ratones murieron 2-3 días después del último tratamiento de daño epitelial Gl . A los ratones de la Jaula #3 se les administra el enantiómero R del compuesto 22c por IV en 65 mg/kg/inyección cada otro día (una vez los d ías 1 , 3, 5, 7) para un total de 260 mg/kg . Para mantener con un tiempo de recuperación del huésped m uy rápido para esta serie análoga, no h ubo muertes. Los ratones encontraron una pérdida de peso corporal de -8.3% (nadir día 9 con recuperación completa el día 1 2), indicando que la dosis total de este programa intermitente fue adecuada , pero no excesiva. De nuevo no hubo toxicidad neuromuscular con este programa de dosis. Esta dosis fue activa (T7C = 4%, muerte log 1 .7; clasificación de actividad ++). A los ratones de la Jaula #4 se les administra el enantiómero R del compuesto 22c por IV en 40 mg/kg/inyección en el mismo programa como en la Jaula #3 (es decir, los días 1 , 3, 5, 7) para un total de 1 60 mg/kg. No hubo toxicidad y los ratones ganaron peso durante el tratamiento (ganancia de peso corporal de +6.4%). Esta dosis fue también activa (T/C = 9%, muerte log 1 .4, y 1 /5 curas; clasificación de actividad ++ si la cura no se considera). El ratón libre de tumor se reimplanta con tumor Mam16/C el día 1 55. El implante creció exitosamente, indicando que los factores inmunogénicos no se incluyen en la cura original. A los ratones de la Jaula #5 se les administra el enantiómero R del compuesto 22b por IV en 50 mg/kg/iny qd-1 -5 para un total de 250 mg/kg . No ocurrió toxicidad neuromuscular después de las inyecciones. Esta dosis causó una pérdida de peso excesiva, pero no muertes. Los ratones ganaron todos los pesos dentro de 5 días (pérdida de peso corporal de -22.9% el día 8, con recuperación completa el día 13, indicando que alguna de la pérdida de peso fue por deshidratación). Esta dosis fue altamente activa (T/C = 0%; muerte log 2.1 ; clasificación de actividad +++). A los ratones de la Jaula #6 se les administra el enantiómero R del compuesto 22b por IV en 50 mg/kg/inyección los días 1 , 3, 5, 7 para un total de 200 mg/kg. Esta dosis se tolera bien, y no causa pérdida de peso. Fue activa (T/C = 5%; muerte log 1 .7; clasificación de actividad ++). Es probable que una dosis más elevada podría darse en este programa, considerando la falta de pérdida de peso. A los ratones de la Jaula #7 se les administra el enantiómero R del compuesto 22b por IV en 30 mg/kg/inyeccíón en el mismo programa que en la Jaula 6 para un total de 120 mg/kg. Los ratones ganaron peso. Esta dosis fue modestamente activa (T/C = 32%; muerte log 0.8; clasificación de actividad +). A los ratones de la Jaula # 1 se les administra adriamicina como un control positivo. Históricamente, la adriamicina es uno de los agentes más activos contra este tumor. 7.5 mg/kg/inyección se administra por IV los días 1 y 5, para un total de 15 mg/kg. Aunque ninguna pérdida de peso se observa, los ratones no comenzaron a obtener peso hasta el día 1 1 , y después solamente de manera modesta. No hubo una muerta retrasada por medicamento en este grupo. Como se espera, este agente fue altamente activo (T/C = 0%; muerte log 3.6; clasificación de actividad ++++, aunque en una dosis tóxica). En dosis qué produjeron menos del 1 0% de pérdida de peso corporal, el enantiómero R del compuesto 22b y el enantiómero R del compuesto 22c fueron igualmente activos, cada uno con una muerte log - 28 - 1 .7 (ver Jaulas 3 y 6). En dosis activas iguales, el enantiómero R del compuesto 22b tuvo un requerimiento de dosis ligeramente inferior (200 mg/kg - ver Jaula 6) que el enantiómero R del compuesto 22c (260 mg/kg - ver Jaula 4). Los resultados se presentan en la Tabla 6. Prueba G Evaluación de los enantíómeros R de los Compuestos 22c y 22b contra Adenocarcinoma-03 Ductal Pancreático en Supra-clasificado En esta prueba, los enantíómeros R del Compuesto 22c y 22b se comparan. Los ratones hembra BDF1 se obtienen de N .C. I. , CRL-Ral (D.O.B. 26 de Febrero de 2001 ; D. O.A. 1 0 de Marzo de 2001 ). Los ratones pesaron un promedio de 22.5 gm. Los ratones se implantaron SC con adenocarcinoma-03 ductal pancreático pasaje 143, (D.O.T. 29 de Mayo de 2001 ; Td fue 2.3 días). El enantiómero R del compuesto 22c se suspende en 3% de etanol, 1 % de POE-80, 0.25% de bicarbonato de sodio (en volumen) para efectuar la solución. dH20 se agrega entonces, y el pH se ajusta a 7 con HCi. Los ratones se administran 0.2 mi por inyección IV. El enantiómero R del compuesto 22b se suspende en 3% de etanol, 1 % de POE-80, 0.5% de bicarbonato de sodio (en volumen) para efectuar la solución, después, dH20 se agrega, y el pH se ajusta a 7.5 con HCI. Los ratones se inyectaron con 0.2 mi por inyección IV o PO. Adriamicina (fuente ADRIA; lote 2033BC) se suspende en dH20 para efectuar la solución, y el pH fue 6.0. A los ratones se les administraron 0.2 mi por inyección IV. - 29 - El tratamiento comenzó seis días después del implante, tiempo en el cual los tumores fueron de tamaño palpable (126 mg media). La duración del tratamiento se prolongó (18 día) con objeto de obtener una clara separación en eficacia entre los compuestos. La Jaula #1 no recibió tratamiento, y el crecimiento del tumor fue como se esperaba. Los tumores alcanzaron 1000 mg el día 16.5 (rango 15-21; Td = 2.3 días). A los ratones de la Jaula #2 se Ies administró el compuesto 22b (enantiómero R) por IV en 80 mg/kg/inyección en un programa intermitente (1x/día los días 6,9,12,15,18,21,24 para un total de 560 mg/kg. El régimen se tolera bien sin muertes o pérdida de peso. Los ratones se agitaron después de la inyección IV, pero la conducta duró solamente unos pocos minutos. No existe toxicidad neuromuscular con el enantiómero R. Esta dosis fue activa (muerte log 2.3, 2/7 PR's, clasificación de actividad +++). Este programa de dosis fue claramente inferior al compuesto 22c (enantiómero R). A los ratones de la Jaula #3 se les administro el compuesto 22b (enantiómero R) por IV en 50 mg/kg/iny en un programa intermitente (1x/día los días 6,9,12,15,18,21,24) para un total de 350 mg/kg. El régimen se tolera bien muertes o pérdida de peso. Esta dosis fue activa (muerte log 1.5, 1/6 CR's, clasificación de actividad ++). A los ratones de la Jaula #4 se les administro el compuesto 22b (enantiómero R) por IV en 31 mg/kg/iny en un programa intermitente (1x/día los días 6,9,12,15,18,21,24) para un total de 217 mg/kg. El régimen se tolera bien con ganancia substancial de peso. Esta dosis no - 30 -fue activa (muerte log 0.5, clasificación de actividad -). A los ratones de la Jaula #5 se les administra el compuesto 22b (enantiómero R) SC en 31 .2 mg/kg/iny en un programa diario (qd 6-24) para un total de 592.8 mg/kg. El régimen se tolera bien con solamente pérdida de peso menor y ninguna muerte. Los ratones no se agitaron después de la inyección SC. Esta dosis fue solamente activa de manera modesta (muerte log 0.9, 1 /5 CR's, clasificación de actividad +) . Un ratón libre de tumor se reimplanta con 30mg de fragmentos de tumor de P03 el día 157. El implante creció, indicando que los factores inmunes no se incluyen en la cura original. Este programa diario SC fue claramente inferior al programa intermitente IV (comparar con la jaula #2). A los ratones de la Jaula #6 se les administra el compuesto 22b (enantiómero R) SC en 19.5 mg/kg/iny en un programa diario (qd 6-24) para un total de 370.5 mg/kg. El régimen se tolera bien sin pérdida de peso y sin muertes. Los ratones no se agitan después de la inyección SC. Esta dosis no fue activa (muerte iog 0.4, clasificación de actividad -). Este programa diario SC fue claramente inferior al programa intermitente IV (comparar con la jaula #3). A los ratones de la Jaula #1 2 se les administra el compuesto 22c (enantiómero R). Solamente el suministro de medicamento limitado estuvo disponible, de esta manera solamente un nivel de dosis IV se prueba, y solamente 4 ratones por grupo podrían utilizarse. El compuesto 22c se administra IV en 80 mg/kg/iny en un programa intermitente (1 x/día los días 6,9, 12, 15, 18,21 ) para un total de 480 mg/kg. La inyección el día 24 se omite debido a que el suministro de medicamento se agota. El régimen se tolera bien sin pérdida de peso y sin muertes. Los ratones se agitaron después de la inyección IV, pero la conducta duró solamente unos pocos minutos. Hubo ligeramente más agitación con este compuesto análogo que con el compuesto 22b. No existe toxicidad neuromuscular con el enantiómero R. Esta dosis fue altamente activa (muerte log 3.1 , 3/4 regresiones completas, clasificación de actividad ++++). Este programa de dosis con el compuesto 22c fue marcadamente superior al compuesto 22b contra este adenocarcinoma ductal pancreático. A los ratones de la Jaula #13 se les administra adriamicina como un control positivo. Históricamente, la adriamicina es un agente altamente activo contra este tumor. Una dosificación de 7.5 mg/kg/inyección se da IV los días 614 para un total de 15 mg/kg (la dosis tolerada máxima aproximada). Esta se tolera bien en esta prueba, sin pérdida de peso y sin muertes. Como se espera, este agente fue activo, (muerte log 2.3m 1 /5 CR's, clasificación de actividad +++). El enantiómero R del compuesto 22c fue marcadamente superior al compuesto 22b en un programa de dosis intermitente dado IV. Este programa intermitente IV fue claramente superior al programa oral diario. Los resultados se presentan en la Tabla 7. Prueba H Evaluación de los enantiómeros R de XK-469, Compuesto 22b, v Compuesto 22c Contra Carcinoma 26 de Colón en Etapa Avanzada en Ratones Balb/c Hembra En esta prueba los enantiómeros R de XK-469, compuesto - 32 - 22c, y compuesto 22b se comparan contra el carcinoma de colón 26 en etapa avanzada en ratones Balb/c hembra. El compuesto 22c fue marcadamente más activo que el compuesto 22b o compuesto XK469 contra este carcinoma de colón . La Jau la #2 fue 22b en 400 mg/kg y la Jaula 4 fue 22c en 400 mg/kg. Ambas fueron tóxicas y se omiten de esta tabla. E! asterisco "*" indica que el tumor es altamente metastático y tóxico , causando pérdida de peso corporal substancial. En los grupos tratados, la pérdida de peso se determina en un tiempo antes de que el tumor tenga un impacto substancial. Las dosis de compuesto XK469-R, 22b y 22c se preparan igual , utilizando 3% de etanol, 1 % de POE-80, y 0.5% de bicarbonato de sodio. El volumen de inyección fue 0.2 mL/ratón IV. Citoxan se prepara en dH20 e inyecta IV en un volumen de 0.2 mL por ratón . Los ratones fueron ratones hembra Balb/c: DOB 2/1 2/01 ; DOA 3/27/01 ; DOT 8/8/01 , con un peso corporal promedio de 24.7 gramos al inicio de la administración de Rx. El tumor fue Carcinoma-26 de Colón pasaje 141 ; fecha de implante 8/8/01 , e implanta en fragmentos de 30 a 60 mg bilateralmente SC. Todos los tumores fueron 63 a 1 71 mg el día 5, el día de Rx primero. Jaula #1 : Control: crecimiento como se esperaba, Td día 1 .7. Jaula #3: 22b: 50 mg/kg/inyección se dan IV los días 6,8, 10, 1 3 y 1 5 para un otal de 250 mg/kg. Esto produjo 1 /6 de regresiones completas y una muerte log 1 .4 (clasificación de actividad ++). Jaula #5: 22c: 50 mg/kg/jnyección se dan IV los días 6,8, 10, 1 3 y 1 5 para un total de 250 mg/kg. Esto produjo 3/6 de regresiones completas, y 3/6 de sobrevivientes libres de tumor el día 55. Estos ratones permanecieron en excelente condición, ganando peso y tamaño esqueletal. Se implantan con fragmentos de 30 mg de Colón-26 el día 1 56. Los implantes crecieron exitosamente, indicando que los factores inmunes no se incluyen en las curas originales (clasificación de actividad ++++). Jaula #6: XK469-R: 80 mg/kg/inyección se dan IV los días 6,8, 1 0,14 y 16 para un total de 400 mg/kg. ( TD histórico se encuentra en el rango de 400 a 450 mg/kg). No hubo regresiones. Esta dosificación produjo muerte log 0.9 (clasificación de actividad +). Jaula #7: XK469-R: 50 mg/kg/inyección se dan IV los días 6, 8, 1 0, 13 y 1 5 para un total de 250 mg/kg. Esta dosis fue inactiva. Jaula #8: Citoxan se inyecta IV en 1 1 0 mg/kg por inyección los días 6 y 10 para un total de 220 mg/kg. No existe actividad significativa. Históricamente el citoxan es activo contra este tumor si el tratamiento se inicia el día 1 (el día después del implante). Los resultados se presentan en la Tabla 8. La invención se ilustrará ahora por los siguientes ejemplos no limitantes. Ejemplo 1 Síntesis de ácidos r4-r(2-quinolinil-substituida-7)oxi1fenox¡1- propiónicos (Esquemas l-lll) Como se muestra en el Esquema 1 , una preparación de un recipiente de fra/7s-3-etoxiacr¡loildoruro (4) por reacción de éter de vinil - 34 -éter (2) y cloruro de oxalilo (3), con decarboxilación subsecuente, se ha descrito por Tietze ef al., Synt esis, 1 079-1080 (1 993). La amidación de las anilinas meía-substituidas (5a-e) con 4, es decir, la conversión a 6a-e , se modela después del procedimiento descrito por Campbell y Roberts (Número de Patente de E. U . 4, 71 0 ,507) para la preparación de trans- -(4-bromo-3-metilfenil)-3-etoxipropenamida . La ciclización de la última en u na mezcla de 5-(8a-3) y qu inolin-2-oles-su bstituidos-7 (7a-e) fue efectiva en ya sea ácido hidrociórico o sulfúrico concentrado (Campbell y Roberts). La mezcla, a su vez, se transforma en los derivados de 2-cloroquinolina correspondientes (9a-e) y (1 0a-e), en el reflujo con oxicloruro fosforoso (Campbell y Roberts). La mayoría de los derivados 7-substituidos (9a-e) separados del regioisómero (1 0a-e) en cristalización fraccional. El residuo produjo 9a-c adicional, siguiendo la cromatografía de columna sobre gel de sílice. - 35 - ácido 5a,X = F 6a,X=F b, X=Cl b, X = Cl c, X=Br c, X = Br d, X=CH3 d, X=CH3 e, X=CH30 ,X = CH3O 7a-e 8a-e 9a-e lOa-e Esquema 1 22a-e M = Na, K, Li, Rb, Cs, 1/2 Ca, 1/2 Mg Esquema II Como se ilustra en el Esquema II, 2-cloroqionolinas 9a-e se acoplan con ácido 2-(4-hidroxifenoxi)propiónico (20) utilizando ya sea NaH o K2C03 en reflujo DMF ségüido por acidificación para dar los áóidos (21a- - 36 -e). Estos ácidos también pueden convertirse en sus sales metálicas (22a-e) al reaccionar con hidróxidos de metal. XK469, que posee un centro esterogénico único en C-2 de la porción de ácido propiónico, se prepara generalmente en la forma de una mezcla racémica. Las formas -(+) de 21 b y 21 c se preparan por eterificación de ácido R-(+)-2-(4-hidroxifenoxi)propiónico disponible con 9b y c. HPLC quiral de la forma R de 21 b y c, indicaron que se han obtenido en >99% ee (ver Figura 2). Las separaciones HPLC de racémico y R 21 b se llevan a cabo utilizando ASTEC Chirobiotic T 250 x 4.6 mm, 65% H20, 35% CH3OH, 20 mM NH4N03 en 1 mL/min con detección en 250 nm. Procedimientos Experimentales Generales A una solución de la 2-quinolina-substituida-7 y ácido 2-(4-hidroxifenoxi)propiónico (1 eq) disuelta en DMF (5 mL/mmol), 60% NaH (3 eq) se agrega en porciones y la mezcla se calienta en reflujo gentil por 2 horas. Después de enfriar se concentra para dar un sólido al cual se agrega agua y la solución se filtra a través de Celite, después se enjuaga con agua. El filtrado se extrae con éter y la capa acuosa se acidifica con 1 M HCI a pH 3-4. Después de énfriar, el sólido se recolecta, seca, disuelve en AcOEt y filtra a través de gel de sílice. El filtrado se concentra a un volumen pequeño, el sólido se recolecta y recristaliza de AcOEt-heptano. La reacción también se lleva a cabo utilizando K2C03 (2.5 eq) en lugar de NaH pero los tiempos de reacción necesitan incrementarse hasta aproximadamente 12 horas. Ácido 2-r4-r(7-Fluoro-2-quinolinil)oxi1fenoxnpropiónico 21 a - 37 - (0.14 g, 43% utilizando NaH) como cristales amarillo claro, mp 135-137°C; H NMR (400 MHz, DMSO-cí6) d 13.08 (bs, 1H), 8.38 (d, =8.8 Hz, 1H), 7.99 (dd, II = 8.8, 6.4 Hz, 1H), 7.40-7.32 (m, 2H), 7.18 (d, J=8.8 Hz, 1H), 7.17-7.12 (m, 2H), 6.94-6.89 (m, 2H), 4.82 (q, J=6.8 z, 1H), 1.51 (d, J=6.4 z, 1H). 13C NMR (75 MHz, DMSO-c/6) d 173.9, 163.6 (d, J=245.5 Hz), 163.2, 155.2, 147.6 (d, J=12.7 Hz), 147.3, 141.0, 130.8 (d, J=10.4 Hz), 123.4, 123.2, 116.1, 115.1, (d, =24.5 Hz), 112.71, 111.7 (d, J=20.8 Hz), 72.5, 19.0. 19F NMR (376 MHz, DMSO-c6) d 76.33 (m). MS (El) m/z (%) 327 (M+, 59), 282 (15), 268 (15), 254 (67), 238 (8), 226 (4), 209 (4), 198 (3), 151 (5), 146 (100), 126 (12), 119 (7), 91 (7). HRMS (El) m/z 327.0910 (M+, Cale para C18H14NF04327.0907). Ácido 2-f4-f(7-Cloro-2-quinolin¡l)oxilfenoxilpropiónico 21b (84% utilizando K2C03) como cristales blancos, mp 149-150°C; 1H NMR (400 MHz, DMSO-c/6) d 13.05 (bs, 1H), 8.40 (d, J=8.8 Hz, 1H), 7.96 (d, J=8.4 Hz, 1H), 7.66 (d, J=2.8 Hz, 1H), 7.48 (dd, J=8.8, 2.4 Hz, 1H), 7.24 (d, J=8.0 Hz, 1H), 7.18-7.13 (m, 2H), 6.94-6.89 (m, 2H), 4.82 (q, J=6.4 Hz, 1H), 1.51 (d, J=7.2 Hz, 3H). 13C NMR (75 MHz, DMSO-d6) d 173.6, 162.8, 155.0, 147.1, 146.6, 140.6, 135.0, 129.9, 126.1, 125.6, 124.3, 123.0, 116.0, 113.5, 72.4, 18.7, MS (El) m/z (%) 343 (M+,46), 298 (15), 284 (16), 270 (71), 254 (8), 236 (6), 167 (19), 162 (100), 155 (8), 127 (22), 114 (10), 97 (11), 91 (24), 83 (16), 81 (12), 73 (19), 71 (14), 69 (23), 67 (12), 63 (12), 60 (17), 57 (27), 55 (35), 45 (18). HRMS (El) m/z 343.0609 (M+, Cale para Ci8H14NCI0 343.0611). Anal. Cale para d8H14NCI04: C, 62.89; H, 4.10; N, 4.08. Encontrado: C, 63.00; H, 4.18; N, 4.12. Ácido R-(+)-2-f4-r(7-Cloro-2-qu¡nol¡n¡noxi1fenox¡lpropiónico se - 38 -prepara de ácido R-(+)-2-(4-hidrox¡fenoxi)propión¡co comercialmente disponible. El producto fue idéntico en todos los aspectos con el producto racémico, y mostró una rotación óptica de [cc]25+19° C 0.5, 0.1N NaOH). Ácido 2-f4-r(7-Bromo-2-qu¡nolininoxi1fenoxilpropiónico 21c (0.69 g, 70% utilizando NaH) como cristales blancos, mp 160-161°C; H NMR (400 MHz, DMSO-d6) d 13.09 (bs, 1H), 8.39 (d, J=8.8 Hz, 1H), 7.88 (d, J=9.2 Hz, 1H), 7.80 (d, J=1.6 Hz, 1H), 7.60 (dd, J=9.2, 1.6 Hz, 1H), 7.25 (d, J=8.8 Hz, 1H), 7.18-7.13 (m, 2H), 6.94-6.89 (m, 2H), 4.82 (q, J=6.8 Hz, 1H), 1.51 (d, J=7.2 Hz, 3H). 13C NMR (75 MHz, DMSO-/6) d 173.9, 163.0, 155.3, 147.2, 147.1, 141.0, 130.3, 129.6, 128.5, 124.9, 124.0, 123.3, 116.1, 114.0, 72.5, 19.1. MS (El) m/z (%) 387 (M+,42), 342 (10), 328 (10), 314 (31), 300 (6), 285 (7), 256 (22), 236 (13), 206 (53), 199 (18), 185 (10), 171 (8), 157 (8), 127 (44), 115 (15), 111 (13), 97 (27), 91 (28), 83 (33), 73 (57), 69 (45), 60 (58), 57 (56), 55 (69), 43 (100), 41 (66). HRMS (El) m/z 387.0107 (M+, Cale para C18H14NBr04 387.0106). Anal. Cale para Ci8H 4NBr04: C, 55.69; H, 3.63; N, 3.61. Encontrado: C, 55.52; H, 3.89; N, 3.56. Ácido R-(+)-2-r4-r(7-Bromo-2-quinolinil)oxilfenoxil ropi0nico se prepara de ácido R-(+)-2-(4-hidroxifenoxi)propiónico comercialmente disponible. El producto fue idéntico en todos los aspectos con el producto racémico, y mostró una rotación óptica de [a]25+22.0° C 0.5, 0.1N NaOH). Ácido 2-r4-r(7-Metil-2-quinoliníl)oxi1fenoxi1propíónico 21 d (32% producción de NaH) como cristales amarillo claro, mp 183-185°C; H NMR (400 MHz, DMSO-d6) d 13.03 (bs, 1H), 8.29 (d, J=8.8 Hz, 1H), 7.78 (d, J=8.0 Hz, 1H), 7.43 (s, 1H), 7.28 (d, J=BA Hz, 1H), 7.16-7.10 (m, 3H), - 39 - 6.93-6.89 (m, 2H), 4.82 (q, J=6.4 Hz, 1H), 2.41 (s, 3H), 1.51 (d, J=6.4 Hz, 3H). 13C NMR (100 MHz, DMSO-d6) d 173.9, 162.4, 155.1, 147.6, 146.6, 140.6 (2C), 128.0, 127.4, 127.0, 124.0, 123.4, 116.1, 112.3, 72.5, 21.9, 19.1. MS (El) m/z (%) 323 (M+,57), 305 (6), 278 (9), 276 (7), 264 (13), 250 (60), 236 (10), 234 (6), 222 (5), 142 (100), 115 (17), 105 (6), 77 (6). HRMS (El) m/z 323.1164 (M+, Cale para C19H17N04323.1158). Ácido 2-f4-r(7- etoxi-2-auinolinil)oxilfenoxilpropiónico 21e (66% producción de K2C03) como cristales amarillo claro, mp 164-166C; H NMR (400 MHz, DMSO-d6) d 13.06 (bs, 1H), 8.25 (d, J=8.8 Hz, 1H), 7.78 (d, J=8.8 Hz, 1H), 7.16-7.10 (m, 2H), 7.06 (dd, J=8.8, 2.4 Hz, 1H), 7.02 (d, J=8.0 Hz, 1H), 6.99 (d, J=2.4 Hz, 1H), 6.94-6.88 (m, 2H), 4.82 (q, J=6.4 Hz, 1H), 3.81 (s, 3H), 1.51 (d, J=7.2 Hz, 3H). 3C NMR (100 MHz, DMSO-d6) d 174.0, 162.9, 161.5, 155.1, 148.3, 147.7, 140.5, 129.5, 123.4, 120.9 117.5, 116.1, 110.5, 107.0, 72.5, 56.1, 19.1. MS (El) m/z (%) 339 (M+,62), 323 (10), 294 (8), 280 (13), 266 (35), 250 (13), 175 (7), 158 (100), 142 (18), 115 (10), 77 (6). HRMS (El) m/z 339.110 (M+, Cale para C19H17N05 339.1107). Ejemplo 2 Lo siguiente ilustra formas de dosificación farmacéuticas representativas que contienen un compuesto de la fórmula I ('Compuesto X') para uso terapéutico o profiláctico en humanos. - 40 - (i) Tableta 1 mg/tableta 'Compuesto X' 1 00.0 Lactosa 77.5 Povidona 15.0 Sodio de Croscarmelosa 1 2.0 Celulosa microcristalina 92.5 Estearato de magnesio 3.0 300.0 (ii) Tableta 2 mg/tableta 'Compuesto X' 20.0 Celulosa microcristalina 41 0.0 Almidón 50.0 Glicolato de almidón de sodio 15.0 Estearato de magnesio 5.0 500.0 (ii¡) Cápsula mg/cápsula 'Compuesto X' 10.0 Dioxido de silicona coloidal 1 .5 Lactosa 465.5 Almidón pregelatinizado 120.0 Estearato de magnesio 3.0 600.0 (iv) Invección 1 (1 mg/ml) mg/ml 'Compuesto X' (forma de ácido libre 1 .0 Fosfato de sodio dibásico 12.0 Fosfato de sodio monobásico 0.7 Cloruro de Sodio 4.5 Solución de hidróxido de sodio 1 .0 N (ajuste de pH a 7.0-7.5) q.s. Agua para inyección q.s. ad (v) Invección 2 (10 mg/ml) mg/ml 'Compuesto X' (forma de ácido libre 10.0 Fosfato de sodio monobásico 0.3 Fosfato de sodio dibásico 1 .1 Glicol de polietileno 400 200.0 Solución de hidróxido de sodio 1 .0 N (ajuste de pH a 7.0-7.5) q.s. Agua para inyección q.s. ad - 41 - (vi) Aerosol mg/lata 'Compuesto X' 20.0 Ácido oléico 10.0 Tricloromonofluorometano 5,000.0 Diclorodifluorometano 1 0, 000.0 Diclorotetrafluoroetano 5,000 0 Las formulaciones de arriba pueden obtenerse por procedimientos convencionales conocidos en la materia farmacéutica. Todas las publicaciones, patentes y documentos de patente se incorporan para referencia en la presente, según se enseña al incorporarlos para referencia. La invención se ha descrito con referencia a diversas técnicas y modalidades preferidas y específicas. Sin embargo, debe entenderse que muchas variaciones y modificaciones pueden hacerse mientras se permanece dentro el espíritu y alcance de la invención.

TABLA 1 TABLA 2 TABLA 3 TABLA 4 TABLA 5 TABLA 6 TABLA 7 I i TABLA 8

Claims (1)

- 50 - REIVINDICACIONES 1 . Un compuesto de ia fórmula I: en donóle Y es F, Cl, Br, metilo o metoxi; o una sal farmacéuticamente aceptable de los mismos. 2. El compuesto según la reivindicación 1 , caracterizado porque Y es F. 3. El compuesto según la reivindicación 1 , caracterizado porque Y es Cl. 4. El compuesto según la reivindicación 1 , caracterizado porque Y es Br. 5. El compuesto según la reivindicación 1 , caracterizado porque Y es -OMe. 6. El compuesto según la reivindicación 1 , caracterizado porque Y es metilo. 7. El compuesto según cualquiera de las reivindicaciones 1 -6, caracterizado porque el carbono que lleva el grupo metilo se encuentra en la configuración (R). 8. El compuesto según cualquiera de las reivindicaciones 1 -6, caracterizado porque el carbono que lleva el grupo metilo se encuentra en la configuración (S). 9. Un compuesto según la reivindicación 1 , caracterizado - 51 -porque es ácido 2-[4-(7-cloroquinolin-2-iloxi)fenoxi]propanóico. 1 0. Un compuesto según la reivindicación 1 , caracterizado porque es (R) ácido 2-[4-(7-cloroquinolin-2-iloxi)fenoxi]propanóico. 1 1 . Una composición que comprende un compuesto según cualquiera de las reivindicaciones 1 -10, en combinación con un vehículo o diluyente farmacéuticamente aceptable. 12. Un compuesto según cualquiera de las reivindicaciones 1 -1 0 para utilizarse en terapia médica. 13. Ei uso de un compuesto según cualquiera de las reivindicaciones 1 -1 0 para la fabricación de un medicamento para el tratamiento de cáncer en un mamífero. 14. Un método terapéutico para tratar cáncer en un mamífero, que comprende administrar a un mamífero en necesidad de tal terapia una cantidad eficaz de un compuesto de cualquiera de las reivindicaciones

1 -10.